تحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق للركبة في خنازير غينيا دانكن هارتلي القديمة بعد الحقن داخل المفصل

هشاشة العظام ، أو الزراعة العضوية ، هو مرض المفاصل التنكسية التي تؤثر على 32.5 مليون من البالغين في الولايات المتحدة. في كثير من الأحيان ، تظهر أعراض الزراعة العضوية فقط بعد أن يصبح المرض شديدا. ينبع نقص الأدوية المعدلة للمرض من سوء فهم الآليات التي تبدأ المرض وتقوده.

نتيجة لذلك ، هناك حاجة طبية حرجة ومستمرة لعوامل محسنة لعلاج هشاشة العظام. تعد خنازير غينيا Dunkin-Hartley نموذجا حيوانيا راسخا لالتهاب المفاصل ، حيث تتطور بشكل طبيعي إلى هذا المرض ، وتقدم نموذجا قويا للتحقيق في آثار العلاجات الجديدة التي تدار عن طريق الحقن داخل المفصل على تطور المرض. نظرا لأن العظام المعدنية لها تباين ممتاز في التصوير المقطعي المحوسب الدقيق ، يمكن استخدام هذه الطريقة لتقييم ميزات 3D وإجراء تحليلات كمية للتغيرات المرتبطة بالزراعة العضوية. هناك قياسان كميان مهمان بشكل خاص يشملان كثافة المعادن في العظام وسمك التربيق ، حيث يزداد كلاهما طوال تطور المرض. ستساعد المنهجية الموصوفة للحقن داخل المفصل في خنازير غينيا والتحليل اللاحق لبيانات التصوير المقطعي المحوسب الدقيق على تقليل تباين الدراسة وزيادة كفاءة تحليل البيانات.

حلق الركبة بشفرة كهربائية. تخدير وتأكيد عمق التخدير الكافي بسبب عدم استجابة قرصة إصبع القدم. ضع مادة تشحيم معقمة للعين في كلتا العينين لمنع الجفاف والإصابة.

نظف موقع الحقن ثلاث مرات باستخدام حركة دائرية وقم بالتناوب باستخدام المقشر المخفف ومحاليل الكحول. يجب استخدام قفازات معقمة. يتضمن هذا الفيديو استخدام قفازات الأوتوكلاف نيترو.

يجب استخدام تقنية التعقيم طوال العملية. ثني الركبة إلى 90 درجة ، وتحريك الإصبع البعيد إلى الرضفة لتحديد أخدود الجانب البعيد من مساحة المفصل عن طريق ثني وتمديد الطرف الخلفي. يمكن الشعور بالساق كبنية عظمية بعيدة عن الرضفة.

بمجرد تحديد موقع الساق والرضفة ، يكون المفصل بينهما. أدخل إبرة الأنسولين بعناية في خط الوسط البعيد إلى الرضفة داخل مساحة المفصل. يجب إدخال الإبرة من ملليمتر إلى ملليمترين تحت الجلد.

حقن الحجم ببطء. تدليك الركبة عن طريق ثني وتمديد المفصل عدة مرات لضمان التوزيع السليم للدواء. ضع العينات مع الفورمالين في حاوية متوافقة.

قم بمعايرة جهاز التصوير المقطعي المحوسب الدقيق للتعرض للمجال المظلم والمجال الخفيف ، وفقا لتوصيات الشركة المصنعة. مسح العينة باستخدام مرشح نحاسي من الألومنيوم عند 18 ميكرون. استخدم خطوة الدوران 0.7 درجة لزاوية 360 درجة مع كاميرا الإزاحة.

حدد شريحة واحدة من صور التصوير المقطعي المحوسب الدقيق. تحقق من تعويض اختلال المحاذاة. ضمن الإعدادات ، قم بتطبيق التنعيم ، وتصلب الشعاع ، ودوران CS ، وقطعة أثرية حلقية.

حدد ابدأ لبدء إعادة الإعمار. حدد VOI وقم بتوجيه العينة للمحاذاة عموديا لتسهيل التحليل لاحقا. احفظ VOI المحرر كمجلد جديد.

حدد نطاق الصور المراد تحليله ، بدءا من اللوحة تحت الغضروف. يوصى بتقسيم تحليل الصفيحة تحت الغضروف في العظم التربيقي لأن لها ميزات عظمية مختلفة. حدد المنطقة التي تهمك لكل صورة للتأكد من أنها تشمل العظم.

حدد التحديد الثنائي. اضبط الرسم البياني بحيث تكون الخلفية في العظم منفصلة تماما. حدد علامة التبويب كثافة المعادن في العظام.

احفظ هذه البيانات في مجلد بيانات تحليل جديد. حدد معالجة مخصصة. أولا ، قم بإجراء الحد الأدنى وحدد تلقائي ثم تشغيل.

ثم حدد إزالة البقع واختر إزالة البقع السوداء. كرر إزالة البقع البيضاء، واختر إزالة البقع البيضاء. اختر تحليل 3D وحدد القيم الأساسية والقيم الإضافية.

يظهر A ركبة تشريح مع وجود صبغة زرقاء الميثيلين داخل مساحة المفصل ، مما يدل على الحقن الصحيح. B عبارة عن حقنة ضحلة تؤدي إلى تكوين فقاعة في الفضاء تحت الجلد. يوضح C عدم وجود صبغة الميثيلين الزرقاء داخل مساحة المفصل ، مما يدل على الحقن غير الصحيح.

قد يكون من المفيد تقسيم تحليل الصفيحة تحت الغضروف ، والتي تظهر في A والعظم التربيقي ، الذي يظهر في B ، حيث يكون لهما أحيانا معلمات مختلفة لتحليل العظام المختلفة. بالنسبة لكثافة المعادن في العظام، نلاحظ أن هناك زيادة في متوسط خنازير غينيا البالغة من العمر 12 شهرا مقارنة بخنازير غينيا البالغة من العمر خمسة أشهر، وهذا صحيح في الصفيحة تحت الغضروف وكذلك العظم التربيقي، وهو ما يوضح أن كثافة المعادن في العظام تزداد بمرور الوقت. بالإضافة إلى سمك التربيق، نلاحظ أن هناك زيادة في السماكة بالمليمترات بين خنزير غينيا البالغ من العمر 12 شهرا وخنزير غينيا البالغ من العمر تسعة أشهر وخنزير غينيا البالغ من العمر خمسة أشهر، وهو ما يوضح أن سمك التربيق يزداد بمرور الوقت.

تزداد درجات مانكين المعدلة مع تقدم عمر خنازير غينيا ، كما هو موضح في الشكل أ ، تظهر الأشكال من B إلى D بقع التولويدين الزرقاء. B هو خنزير غينيا البالغ من العمر خمسة أشهر ، و C هو خنزير غينيا البالغ من العمر تسعة أشهر ، و D هو خنزير غينيا البالغ من العمر 12 شهرا. تظهر العلامة النجمية السوداء في الشكل C فقدان البروتيوغليكان ، بينما تظهر العلامة النجمية السوداء في الشكل D الشقوق ، وتظهر العلامة النجمية البيضاء في الشكل D نقص الخلايا.

حاليا العلاج الوحيد لهشاشة العظام الشديدة هو الاستبدال ، وهو مكلف وغازي ويمكن أن يؤدي إلى اعتلال المرضى ووفياتهم. نتيجة لذلك ، هناك حاجة ماسة لمواصلة البحث مع النماذج الحيوانية من الزراعة العضوية والتطوير المستدام على العلاجات الجديدة. على الرغم من أن الحقن داخل المفصل جزء لا يتجزأ من دراسات الزراعة العضوية لخنزير غينيا ، إلا أن هذا الإجراء لم يتم تفصيله بشكل منهجي بعد.

تعتبر إجراءات الحقن المناسبة أمرا بالغ الأهمية لضمان رعاية وتقليل أعداد الإجمالية ، خاصة بالنسبة للدراسات التي تتطلب حقنا متعددة على مدار عدة أشهر. لتقييم التغييرات المتعلقة بالزراعة العضوية بشكل منهجي ، نصف تحليلات التصوير المقطعي المحوسب الدقيق. يوفر التصوير المقطعي المحوسب الدقيق تقييما أكثر تعمقا لتغيرات هشاشة العظام من المراجعة النسيجية للمسح في عينة كاملة بدلا من قسم واحد أو عدد قليل من أقسام الأنسجة.

بينما توفر خنازير غينيا Dunkin-Hartley نموذجا قويا لدراسة تطور الزراعة العضوية وتأثيرات العلاجات الجديدة ، إلا أن هناك قيودا على هذا النموذج. تتطلب النماذج التلقائية عادة فترة دراسة أطول مقارنة بالتطور السريع للتغيرات بعد الزراعة العضوية الجراحية أو المستحثة كيميائيا. علاوة على ذلك ، قد يقلل الباحثون من تأثير التباين بين من خلال تطبيق العلاجات على طرف واحد في كل ، مما يسمح للطرف المقابل بالعمل كعنصر تحكم داخلي.