مقايسة الهجرة في الوقت الحقيقي في المختبر لخلايا الفئران الأولية CD8 + T

يوفر هذا البروتوكول طريقة لعزل الخلايا التائية الأولية للفأر والفحص المجهري بفاصل زمني لهجرة الخلايا التائية في ظل ظروف بيئية محددة مع التحليل الكمي.

الهدف من بحثنا هو فهم أنماط هجرة الخلايا التائية في ظروف بيئية محددة للغاية لتمكين التجارب المختبرية المستنيرة وفك رموز التفاعلات الجزيئية التي تؤثر على الهجرة. يستخدم التصوير الحي ، مثل الفحص المجهري متعدد الفوتونات داخل الجسم الحي ، لفهم حركية الخلايا المناعية في الجسم الحي. لكن أجهزة الموائع الدقيقة هي أداة شائعة في المختبر توفر تحكما دقيقا في البيئة الدقيقة التي لا يمكن تحملها في عينة حية.

يسمح لنا بروتوكولنا بتحليل مسارات الإشارات المعقدة ويوفر فهما أفضل للتجارب المستهدفة في المختبر لمعالجة الأدوار البيولوجية للإشارات الفردية بطريقة محددة لنوع الخلية. طريقتنا بسيطة وقابلة للتكرار ويسهل الوصول إليها في مختبرات الأبحاث التي تحتوي على مجهر برايت فيلد يتميز بكاميرا رقمية مرفقة. لذلك ، يضمن نهجنا مجموعة موثوقة من الطرق لدراسة أحداث هجرة الخلايا الديناميكية.

سيركز مختبرنا على التحقيق في هجرة الخلايا المناعية ، بما في ذلك الخلايا التائية والعدلات في مجموعة متنوعة من إعدادات المرض ، مثل الأورام والعدوى ، وبالتالي فهم الآليات المهمة لتنظيم هجرة الخلايا المناعية. هذا سوف يساعد في تطوير الأساليب العلاجية للمساعدة في علاج الأمراض والوقاية منها.