Name: الصيانة المختبرية لذبابة الدبتيران السفلى براديسيا (Sciara) coprophila: كائن نموذجي جديد / قديم ناشئ (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-19T14:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 26 s
Description: تعلم بروتوكولات الصيانة المختبرية لذبابة Bradysia coprophila النموذجية في دراسات الوراثة والتطور. تُمكّن هذه الطرق الباحثين من فهم آليات الانقسام الخلوي وتكوين الأنسجة الحية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

شكر خاص لحفظة مخزون B. coprophila السابقين (جاكوب إي بليس ، بولا بونازينجا ، آن دبليو كيريبروك ، إنغريد إم ميرسر ، هايدي إس سميث) وموظفي البحث (خاصة روبرت بيرد ، مايكل س. فولك ، دونا كوباي ، جون إم أوربان ، يوتاكا ياماموتو) لضبط بروتوكولات التربية. تم تقديم التعليمات الأولية حول رعاية B. coprophila من قبل هيلين ف. كروس ، وناتاليا غابروسفيتش غارسيا ، وريبا إم جودمان ، وتشارلز دبليو ميتز ، وإلين راش. مع الامتنان ليوكيكو ياماشيتا وآن دبليو كيريبروك لتوليهما مركز أسهم Bradysia (Sciara). الكثير من التقدير للأشخاص التالية أسماؤهم لإعدادهم المفيد للشخصيات: بريان ويجمان (الشكل 1) ، جون إم أوربان (الشكل 4 اللوحة العلوية) ، لورا روس (الشكل 4 اللوحة السفلية) ، يوتاكا ياماموتو (الشكل 5 اللوحة اليسرى) ، ليو كادوتا (الشكل 7 والشكل 8). شكرا جزيلا لآفا فيليس ومختبر جامعة براون متعدد التخصصات لمساعدتهم في التصوير الفوتوغرافي والتصوير. شكرا لروبرت بيرد على تعليقاته على هذه المخطوطة. تم دعم أبحاثنا وصيانتها ل B. coprophila من قبل المعاهد الوطنية للصحة و NSF ، بما في ذلك أحدث دعم من GM121455 المعاهد الوطنية للصحة إلى SAG يتوفر مزيد من التفاصيل حول B. coprophila على مواقع مركز Bradysia (Sciara) Stock Center (https://sites.brown.edu/sciara/ و https://sciara.wi.mit.edu) التي يتم إنشاؤها حاليا.

Bradysia coprophila Lab Protocols and Chromosomal Research

<ol><li>Lewin, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Earth+BioGenome+project%3A+Sequencing+life+for+the+future+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Earth BioGenome project: Sequencing life for the future of life.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 115 (17), 4325-4333 (2018).</li>
<li>Wiegmann, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Episodic+radiations+in+the+fly+tree+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Episodic radiations in the fly tree of life.</a> Proc Nat Acad Sci USA. 108 (14), 5690-5695 (2011).</li>
<li>Yeates, D. K., Wiegmann, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogeny+of+Diptera%5BTitle%5D)+AND+%22Manual+of+Afrotropical+Diptera.Suricata%22%5BJournal%5D)">Phylogeny of Diptera.</a> Manual of Afrotropical Diptera.Suricata. 3, 149-161 (2017).</li>
<li>Vilkamaa, P., Burdíková, N., Ševčík, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genus+Spinopygina+gen.+nov.+%28Diptera%2C+Sciaridae%29+from+Western+North+America%3A+Preliminary+molecular+phylogeny+and+description+of+seven+new+species%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">The genus Spinopygina gen. nov. (Diptera, Sciaridae) from Western North America: Preliminary molecular phylogeny and description of seven new species.</a> Insects. 14 (2), 173(2023).</li>
<li>Metz, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromosome+behavior%2C+inheritance+and+sex+determination+in+Sciara%5BTitle%5D)+AND+%22Amer+Naturalist%22%5BJournal%5D)">Chromosome behavior, inheritance and sex determination in Sciara.</a> Amer Naturalist. 72 (743), 485-520 (1938).</li>
<li>Gerbi, S. A. Unusual chromosome movements in Sciarid flies. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGerbi%2C+SA+%22Results+and+Problems+in+Cell+Differentiation.+Vol+13+Germ+Line+-+Soma+Differentiation%22">Results and Problems in Cell Differentiation. Vol 13 Germ Line - Soma Differentiation</a>. Hennig, N. 13, Springer-Verlag. Berlin, Heidelberg. 71-104 (1986).</li>
<li>Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-random+chromosome+segregation+and+chromosome+eliminations+in+the+fly+Bradysia+%28Sciara%29%5BTitle%5D)+AND+%2234%3BNon-Mendelian+Inheritance+and+Meiotic+Drive.%26%2334%3B%2C+Chromosome+Research.%28special+issue%29%22%5BJournal%5D)">Non-random chromosome segregation and chromosome eliminations in the fly Bradysia (Sciara).</a> 34;Non-Mendelian Inheritance and Meiotic Drive.&#34;, Chromosome Research.(special issue). Larracuente, A., Hanlon, S. 30, 273-288 (2022).</li>
<li>Steffan, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+generic+revision+of+the+family+Sciaridae+%28Diptera%29+of+America+North+of+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22University+of+California+Publications+in+Entomology%22%5BJournal%5D)">A generic revision of the family Sciaridae (Diptera) of America North of Mexico.</a> University of California Publications in Entomology. 44, 1-77 (1966).</li>
<li>Shin, S., Jung, S., Menzel, F., Heller, K., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogeny+of+black+fungus+gnats+%28Diptera%3A+Sciaroidea%3A+Sciaridae%29+and+the+evolution+of+larval+habitats%5BTitle%5D)+AND+%22Molec+Phylogenetics+Evolution%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogeny of black fungus gnats (Diptera: Sciaroidea: Sciaridae) and the evolution of larval habitats.</a> Molec Phylogenetics Evolution. 66 (3), 833-846 (2013).</li>
<li>Mohrig, W., Heller, K., Hippa, H., Vilkamaa, P., Menzel, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revision+of+the+black+fungus+gnats+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+of+North+America%5BTitle%5D)+AND+%22Studia+Dipterologica%22%5BJournal%5D)">Revision of the black fungus gnats (Diptera: Sciaridae) of North America.</a> Studia Dipterologica. 19 (1-2), 141-286 (2013).</li>
<li>Ševčík, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogeny+of+the+megadiverse+insect+infraorder+Bibionomorpha+sensu+lato+%28Diptera%29%5BTitle%5D)+AND+%22PeerJ%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogeny of the megadiverse insect infraorder Bibionomorpha sensu lato (Diptera).</a> PeerJ. 4, e2563(2016).</li>
<li>Menzel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudolycoriella+hygida+%28Sauaia+and+Alves%29-An+overview+of+a+model+organism+in+genetics%2C+with+new+aspects+in+morphology+and+systematics%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Pseudolycoriella hygida (Sauaia and Alves)-An overview of a model organism in genetics, with new aspects in morphology and systematics.</a> Insects. 15 (2), 118(2024).</li>
<li>Meigen, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMeigen%2C+JW+%22Klassifikazion+und+Beschreibung+der+europ%C3%A4ischen+zweifl%C3%BCgligen+Insekten+%28Diptera+Linn%29%22">Klassifikazion und Beschreibung der europäischen zweiflügligen Insekten (Diptera Linn)</a>. 1 (1), Karl Reichard. Braunschweig. (1804).</li>
<li>Johannsen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fungus+gnats+of+North+America+part+I%5BTitle%5D)+AND+%22Maine+Agricultural+Experimental+Station+Bulletin%22%5BJournal%5D)">The fungus gnats of North America part I.</a> Maine Agricultural Experimental Station Bulletin. 172, 209-276 (1909).</li>
<li>Johannsen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycetophilidae+of+North+America%5BTitle%5D)+AND+%22Maine+Agricultural+Experimental+Station+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Mycetophilidae of North America.</a> Maine Agricultural Experimental Station Bulletin. 200, 57-146 (1912).</li>
<li>Urban, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bradysia+%28Sciara%29+coprophila+larvae+up-regulate+DNA+repair+pathways+and+down-regulate+developmental+regulators+in+response+to+ionizing+radiation%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Bradysia (Sciara) coprophila larvae up-regulate DNA repair pathways and down-regulate developmental regulators in response to ionizing radiation.</a> Genetics. (3), (2024).</li>
<li>Hodson, C. N., Jaron, K. S., Gerbi, S., Ross, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene-rich+germline-restricted+chromosomes+in+black-winged+fungus+gnats+evolved+through+hybridization%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biology%22%5BJournal%5D)">Gene-rich germline-restricted chromosomes in black-winged fungus gnats evolved through hybridization.</a> PLoS Biology. 20 (2), e3001559(2021).</li>
<li>Urban, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+contiguity+de+novo+genome+assembly+and+DNA+modification+analyses+for+the+fungus+fly%2C+Sciara+coprophila%2C+using+single-molecule+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">High contiguity de novo genome assembly and DNA modification analyses for the fungus fly, Sciara coprophila, using single-molecule sequencing.</a> BMC Genomics. 22, 643(2021).</li>
<li>Baird, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+evolution+of+a+maternally+acting+sex-determining+supergene+in+a+fly+with+single-sex+broods%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Evol%22%5BJournal%5D)">Recent evolution of a maternally acting sex-determining supergene in a fly with single-sex broods.</a> Mol Biol Evol. 40 (7), (2023).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+ends+meet%3A+targeted+integration+of+DNA+fragments+by+genome+editing%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Making ends meet: targeted integration of DNA fragments by genome editing.</a> Chromosoma. 127 (4), 405-420 (2018).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+transformation+for+genome+editing+of+an+emerging+model+organism%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Development of transformation for genome editing of an emerging model organism.</a> Genes. 13 (7), 1108-1124 (2022).</li>
<li>Metz, C. W., Smith, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+observation+on+the+nature+of+the+x-prime+%28X%27%29+chromosome+in+Sciara%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Further observation on the nature of the x-prime (X') chromosome in Sciara.</a> Proc Nat Acad Sci USA. 17 (4), 195-198 (1931).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X-ray+induced+sex-linked+recessive+lethals+and+visibles+in+Sciara+coprophila%5BTitle%5D)+AND+%22Amer+Naturalist%22%5BJournal%5D)">X-ray induced sex-linked recessive lethals and visibles in Sciara coprophila.</a> Amer Naturalist. 95 (880), 21-26 (1961).</li>
<li>Metz, C. W., Ullian, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+identification+of+the+sex+chromosomes+in+Sciara+%28Diptera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Genetic identification of the sex chromosomes in Sciara (Diptera).</a> Proc Nat Acad Sci USA. 15 (2), 82-85 (1929).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X+heterochromatin+subdivision+and+cytogenetic+analysis+in+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29.+I.+Centromere+localization%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">X heterochromatin subdivision and cytogenetic analysis in Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae). I. Centromere localization.</a> Chromosoma. 63, 39-55 (1977).</li>
<li>Crouse, H. V., Gerbi, S. A., Liang, C. M., Magnus, L., Mercer, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+ribosomal+DNA+within+the+proximal+X+heterochromatin+of+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Localization of ribosomal DNA within the proximal X heterochromatin of Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae).</a> Chromosoma. 64 (4), 305-318 (1977).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X+heterochromatin+subdivision+and+cytogenetic+analysis+in+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29.+II.+The+controlling+element%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">X heterochromatin subdivision and cytogenetic analysis in Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae). II. The controlling element.</a> Chromosoma. 74, 219-239 (1979).</li>
<li>Mok, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+the+DNA+puff+expanded+state+is+independent+of+active+replication+and+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Maintenance of the DNA puff expanded state is independent of active replication and transcription.</a> Chromosoma. 110 (3), 186-196 (2001).</li>
<li>Smith-Stocking, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+studies+on+selective+segregation+of+chromosomes+in+Sciara+coprophila+Lintner%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic studies on selective segregation of chromosomes in Sciara coprophila Lintner.</a> Genetics. 21 (4), 421-443 (1936).</li>
<li>Gabrusewycz-Garcia, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytological+and+autoradiographic+studies+in+Sciara+coprophila+salivary+gland+chromosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Cytological and autoradiographic studies in Sciara coprophila salivary gland chromosomes.</a> Chromosoma. 15, 312-344 (1964).</li>
<li>Wu, N., Liang, C., DiBartolomeis, S. M., Smith, H. S., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+progression+of+DNA+puffs+in+Sciara+coprophila%3A+amplification+and+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Developmental progression of DNA puffs in Sciara coprophila: amplification and transcription.</a> Dev Biol. 160 (1), 73-84 (1993).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gustafson, E. A., Foulk, M. S., Smith, H. S., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+and+evolution+of+a+DNA+replication+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Anatomy and evolution of a DNA replication origin.</a> Chromosoma. 130 (2-3), 199-214 (2021).</li>
<li>Misof, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenomics+resolves+the+timing+and+pattern+of+insect+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Phylogenomics resolves the timing and pattern of insect evolution.</a> Science. 346 (6210), 763-767 (2014).</li>
<li>Bertone, M. A., Courtney, G. W., Wiegmann, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenetics+and+temporal+diversification+of+the+earliest+true+flies+%28Insecta%3A+Diptera%29+based+on+multiple+nuclear+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Syst+Entomol%22%5BJournal%5D)">Phylogenetics and temporal diversification of the earliest true flies (Insecta: Diptera) based on multiple nuclear genes.</a> Syst Entomol. 33, 668-687 (2008).</li>
<li>de Saint Phalle, B., Sullivan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incomplete+sister+chromatid+separation+is+the+mechanism+of+programmed+chromosome+elimination+during+early+Sciara+coprophila+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Incomplete sister chromatid separation is the mechanism of programmed chromosome elimination during early Sciara coprophila embryogenesis.</a> Development. 122 (12), 3775-3784 (1996).</li>
<li>de Saint Phalle, B., Oldenbourg, R., Kubai, D., Salmon, E. D., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paternal+chromosome+elimination+and+X+non-disjunction+on+asymmetric+spindles+in+Sciara+male+meiosis%5BTitle%5D)+AND+%22BioRxiv%22%5BJournal%5D)">Paternal chromosome elimination and X non-disjunction on asymmetric spindles in Sciara male meiosis.</a> BioRxiv. , (2021).</li>
<li>Bath, J. D., Sponsler, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+alternative+method+for+the+culture+of+Sciara+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">An alternative method for the culture of Sciara larvae.</a> Science. 109 (2828), 255(1949).</li>
<li>Forer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crane+fly+spermatocytes+and+spermatids%3A+A+system+for+studying+cytoskeletal+components%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Crane fly spermatocytes and spermatids: A system for studying cytoskeletal components.</a> Methods Cell Biol. 25, Pt B 227-252 (1982).</li>
<li>Gillespie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+rearing+method+for+fungus+gnats+Corynoptera+sp.+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+with+notes+on+life+history%5BTitle%5D)+AND+%22J+Entomol+Soc+Br+Colum%22%5BJournal%5D)">A simple rearing method for fungus gnats Corynoptera sp. (Diptera: Sciaridae) with notes on life history.</a> J Entomol Soc Br Colum. 83, 45-48 (1986).</li>
<li>Gardiner, R. B., Jarvis, W. R., Shipp, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ingestion+of+Pythium+spp.+by+larvae+of+the+fungus+gnat+Bradysia+impatiens+%28Diptera%3A+Sciaridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Appl+Biol%22%5BJournal%5D)">Ingestion of Pythium spp. by larvae of the fungus gnat Bradysia impatiens (Diptera: Sciaridae).</a> Ann Appl Biol. 116, 205-212 (1990).</li>
<li>Hungerford, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sciara+maggots+injurious+to+potted+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Econ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Sciara maggots injurious to potted plants.</a> J Econ Entomol. 9 (6), 538-549 (1916).</li>
<li>Thomas, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+rearing+mushroom+insects+and+mites%5BTitle%5D)+AND+%22Entomol+News%22%5BJournal%5D)">A method for rearing mushroom insects and mites.</a> Entomol News. 40, 222-225 (1929).</li>
<li>Austin, M. D., Pitcher, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+laboratory+method+for+rearing+Sciara+and+phorid+flies%5BTitle%5D)+AND+%22Entomol+Mon+Mag%22%5BJournal%5D)">A laboratory method for rearing Sciara and phorid flies.</a> Entomol Mon Mag. 72, No. 860 12-15 (1936).</li>
<li>Butt, F. H. Culture of Sciara. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aButt%2C+FH+%22Culture+methods+for+invertebrate+animals%22">Culture methods for invertebrate animals</a>. Galtsoff, P. S., Lutz, F. E., Welch, P. S., Needham, J. G. , Comstock Publ. Co. Ithaca. 400-401 (1937).</li>
<li>Hudson, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+greenhouse+sciarid+fly+populations+using+Tetradonema+plicans+%28Nematoda%3A+Mermithoidea%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invert+Pathol%22%5BJournal%5D)">Regulation of greenhouse sciarid fly populations using Tetradonema plicans (Nematoda: Mermithoidea).</a> J Invert Pathol. 23 (1), 85-91 (1974).</li>
<li>Wilkinson, J. D., Daughterty, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+development+of+Bradysia+impatiens+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+under+constant+and+variable+temperatures%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Entomol+Soc+Am%22%5BJournal%5D)">Comparative development of Bradysia impatiens (Diptera: Sciaridae) under constant and variable temperatures.</a> Ann Entomol Soc Am. 63 (4), 1079-1083 (1970).</li>
</ol>

ليس لدى صاحب البلاغ أي تضارب في المصالح للإعلان.

ستكون البروتوكولات المقدمة هنا لتربية B. coprophila مفيدة للعلماء الذين يرغبون في رفع هذا الكائن الحي في مختبراتهم لإجراء تجارب للتعمق في خصائصه البيولوجية الفريدة. تم استخدام الوصف الأولي لطريقة التغذية باستخدام الخميرة ومسحوق الفطر المرشوش على قاعدة أجار للحفاظ على B. coprophila29 في مختبر ميتز لتربية 14 نوعا مختلفا من الذباب Sciarid5. في وقت لاحق ، لوحظ أن إضافة نبات القراص و / أو مسحوق السبانخ زاد من حيوية B. coprophila (Gabrusewycz-Garcia ، التواصل الشخصي). وقد نجحت هذه الطرق في الحفاظ على الأنواع ذات الصلة داخل عائلة Sciaridae ، بما في ذلك Bradysia impatiens و Lycoriella ingenua الموجودة حاليا في الاستزراع (روبرت بيرد ، التواصل الشخصي).
تمت تجربة طرق أخرى (مثل طرق التغذية البديلة الموضحة أدناه) لرفع B. coprophila ، ولكن تم تحسين البروتوكولات الموضحة هنا للحصول على أفضل نسبة من اليرقات لكل مساحة سطح من أجار للحصول على البالغين الأكثر خصوبة من الدهون وتقليل نمو العفن. لتوسيع النطاق ، يمكن إجراء التزاوج الجماعي في قوارير زجاجية كما هو موضح في البروتوكول 2 أعلاه. بدلا من ذلك ، يمكن وضع عدد قليل (2-4) من الإناث البالغات مع ضعف عدد الذكور البالغين في قارورة مثل تلك المستخدمة لرفع ذبابة الفاكهة (يمكن التخلص منها 6 أونصات = 177.4 مل زجاجة بولي بروبيلين ذبابة الفاكهة ذات القاع المربع). في كلتا الحالتين ، يجب أن يكون الباحث واثقا تماما من أن القارورة تحتوي فقط على جميع الإناث المنتجات أو جميع الأمهات المنتجات الذكور.
إطعام اليرقات فقط لأن الشرانق والبالغين لا يأكلون. لا تطعم القارورة إذا تحولت اليرقات إلى الشرانق (علامة على ذلك عندما تظهر أول ذباب بالغ مبكر الظهور). بمجرد إغلاق البالغين ، ضع القوارير في حاضنة أكثر برودة (على سبيل المثال ، 16 درجة مئوية) إذا كانت متوفرة لأن هذا سيسمح للبالغين بالعيش لفترة أطول. قم بالتغذية ثلاث مرات في الأسبوع (على سبيل المثال ، الاثنين والأربعاء والجمعة) ، مما يزيد من كمية الطعام المعطاة لكل قارورة مع تقدم اليرقات في السن. إطعام بسخاء ، وسوف تكافأ مع البالغين الدهون الخصبة. ومع ذلك ، إذا كنت تتغذى كثيرا ، فسيظهر العفن الأبيض وهذه علامة لتقليل كمية الطعام التي تودعها في قارورة. علاوة على ذلك ، إذا كنت تتغذى أكثر من اللازم ، فسوف تتطور وسادة سميكة من الطعام فوق الآجار وتجعل من الصعب على البالغين الظهور (يمكنك إزالة الوسادة بالملقط ، ولكن احرص على عدم إخراج اليرقات باستخدام الوسادة - من الأفضل عدم القيام بذلك على الإطلاق). تحتاج القوارير التي تحتوي على عدد قليل من اليرقات (التي تحمل علامة "قليلة") إلى طعام أقل. إذا كنت تتغذى قليلا جدا ، فإن اليرقات ستتسلق جدران القارورة بحثا عن الطعام. تؤدي اليرقات التي تعاني من نقص التغذية إلى بالغين صغار أقل خصوبة.
طرق التغذية البديلة تمت محاولة مجموعة متنوعة من الطرق لتغذية اليرقات مرة واحدة فقط خلال مرحلة اليرقات بدلا من 3 مرات في الأسبوع. لن تنمو B. coprophila على طعام نمط ذبابة الفاكهة . حاول جون أوربان (اتصال شخصي) خلط طعام B. coprophila مع الأجار ، لكن الكثير من العفن نما. وجد أن إضافة اثنين من مثبطات العفن (tegosept وحمض البروبيونيك) في تركيبة وبشكل منفصل ، وتجربة عدة تركيزات مختلفة ، كانت جميعها سامة ل B. coprophila عند مستويات تمنع العفن. يجب أن يكون الآجار درجة الحموضة 6-7 (محايد) حيث يمرض B. coprophila عند درجة الحموضة الحمضية (كما هو الحال مع حمض البروبيانيك). بدلا من ذلك ، لتجنب التغذية ثلاث مرات أسبوعيا ، حاول استخدام ملعقة أو حقنة بدون إبرة لتوزيع معجون خميرة سميك (خميرة ريد ستار الجافة النشطة الممزوجة بقليل من الماء المقطر لترطيبها) كدمية فوق الآجار في كل قارورة بعد أسبوع واحد من التزاوج (أي في الوقت الذي ستبدأ فيه اليرقات في الظهور).
هناك طريقة أخرى لتجنب التغذية الأسبوعية ثلاث مرات وهي إضافة ثقافة حية من الفطريات إلى كل قارورة. أفاد Bath and Sponsler37 أن سطح أجار مائل مع وسط Sabouraud يجب أن يكون مخططا بزراعة فطرية من أجناس Chaetoconidia (الأفضل) أو Baplosporangia أو Xllescheria. نمت الفطريات قبل عدة أيام إلى أسبوع واحد من إدخال B. coprophila . لم تكن هناك حاجة للتغذية بعد هذا. كما تم استخدام متغير من هذه الطريقة من قبل إلين راش (التواصل الشخصي). في أيدينا ، كانت القوارير مبللة جدا بهذه الطريقة وغرقت اليرقات ، ولكن يمكن تجربتها مرة أخرى لتحسين عدد اليرقات بالنسبة للقوارير مع الفطريات الحية.
حقق آرثر فورير (التواصل الشخصي) بعض النجاح في تربية B. coprophila بنفس الطريقة التي يطير بها طائر الكركي38. مع هذا النهج ، تم تربية الشرانق على الورق المعجن الرطب. بعد ذلك ، تم تزاوج البالغين وتم إيداع البيض على الورق المعجن الرطب الطازج. تم الاحتفاظ باليرقات الناتجة على الورق المعجن في أطباق بتري وتغذيتها بأوراق نبات القراص المسحوق مرتين في الأسبوع. تم وضع الشرانق في قفص لتكرار الدورة.
حاولت Yukiko Yamashita (التواصل الشخصي) دون نجاح تربية B. coprophila على التربة ، محاكيا الظروف التي توجد فيها في الطبيعة في أصص النباتات والدفيئات ذات الرطوبة العالية. ومع ذلك ، يمكن أن يصبح العفن مشكلة عند رفع مستوى الرطوبة. ومع ذلك ، فقد تم استخدام التربة الرطبة بنجاح لتربية يرقات Pseudolycoriella (Bradysia سابقا) hygida في صناديق بلاستيكية ذات تربة رطبة. يتم تغذيتها بأوراق Ilex paraguariensis المتحللة ، وتستكمل في أواخر حياة اليرقات بمستخلص الخميرة بنسبة 1.2٪ ، 1.4٪ نشا الذرة ، 0.8٪ دقيق الشوفان ، 1.2٪ أجار12. وبالمثل ، يمكن استبدال التربة الرطبة بطحلب الخث الرطب مع الفاصوليا المسحوقة لرفع الذباب Sciarid 39,40.
ومع ذلك ، تم استخدام طرق أخرى للحفاظ على المزارع المختبرية لبراديسيا: (أ) البطاطس المعقمة التي تضاف إليها الخميرة وسماد الدمالمجفف 41 ؛ (ii) السماد42،43،44 الذي يمكن إضافة الدم المجفف إليه45 ؛ (iii) حاويات بلاستيكية مع ضمادات قطنية ومناشف ورقية مبللة مع فول الصويا المطحون46.
العث يمكن نقل العث من ذبابة الفاكهة إلى B. coprophila. لتقليل ذلك ، من الأفضل الاحتفاظ ب B. coprophila في حاضنة أو غرفة منفصلة ، وليس بالقرب من مخزون ذبابة الفاكهة . علاوة على ذلك ، قم بأي أعمال صيانة B. coprophila في وقت مبكر من اليوم قبل التعامل مع ذبابة الفاكهة. يمكن أيضا نقل العث إلى B. coprophila من النباتات المنزلية ، لذلك لا تحتفظ بالنباتات في نفس الغرفة مثل B. coprophila. إذا غزت العث القوارير ، فيمكن رؤيتها ككائنات كروية بيضاء صغيرة تزحف على جسم B. coprophila. لا يمكن استخدام المعالجات الكيميائية التي تعمل على تدمير العث في ذبابة الفاكهة ل B. coprophila لأن المواد الكيميائية تقتل B. coprophila (B. coprophila حساسة أيضا للأبخرة العضوية مثل الفينول). العلاج الوحيد لتخليص مخزون B. coprophila من العث هو جمع الأجنة يدويا على صفيحة أجار ، وفحص كل منها لعدم وجود عث ، ثم نقلها إلى قوارير أجار طازجة باستخدام فرشاة طلاء دقيقة. تساعد سدادات الشاش المملوءة بالقطن وقشور رغوة أسيتات السليلوز (كما هو مستخدم في قوارير البولي بروبيلين ذبابة الفاكهة ) على منع دخول العث إلى القوارير.
فائدة بروتوكولات التربية ستمكن البروتوكولات الموصوفة هنا مجتمع العلماء المتنامي من تربية B. coprophila ككائن نموذجي جديد / قديم ناشئ لدراسة سماته البيولوجية الفريدة. يتم تشجيع مجموعات المختبرات الجديدة على الانضمام إلى المجتمع المتنامي للحفاظ على السمات البيولوجية الفريدة ل Bradysia (Sciara) والتحقيق فيها.

<table><tbody><tr><td>أجار (جرثومي) الولايات</td> المتحدة <td>البيولوجية</td><td>A0930</td><td>https://www.usbio.net ؛ &nbsp;</td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff دواسة القدم</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-121</td><td></td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff Blowgun</td><td>Genesee Scientific</td><td>54-104</td><td></td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff UltimaterFlypad</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-172</td><td>https://www.geneseesci.com</td></tr><tr><td>Ether fume hood</td><td>Labconco&nbsp;</td><td>3955220</td><td>يجلس على قمة مقعد المختبر</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>استبدال الفلتر&nbsp; القط # 6961300</td></tr><tr><td>الطعام: بروير s الخميرة مسحوق</td><td>Solgar</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>احصل عليها من أمازون أو متجر الأطعمة الصحية</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>https://www.solgar.com.</td></tr><tr><td>الغذاء: مسحوق نبات القراص &nbsp; (خال من المبيدات)</td><td>Starwest Botanicals</td><td>209460-51</td><td></td></tr><tr><td>الغذاء: فطر شيتاكي (خالي من المبيدات)</td> <td>Starwest Botanicals</td><td>202127-5</td><td>https://www.starwest-botanicals.com ؛</td></tr><tr><td>الغذاء: مسحوق السبانخ (خالي من المبيدات)</td><td>Starwest Botanicals</td><td>209583-5</td><td></td></tr><tr><td>الطعام: قش (خالي من المبيدات الحشرية)</td> <td>Starwest Botanicals</td><td>209465-3</td><td></td></tr><tr><td>جرة: زجاج شفاف ، غطاء بولي بروبلين</td><td>فيشر العلمي:</td> <td>FB02911765</td><td>قطر 73 مم ، 89 مم HT (240 مل) https://www.fishersci.com ؛</td></tr><tr><td>مسبار إبرة ، مقبض خشبي</td><td>US Geo Supply Inc</td><td>SKU: 4190</td><td>مسبار طويل 5.75 بوصة ، إبرة من الفولاذ المقاوم للصدأ https://usgeosupply.com ؛ (970) -434-3708</td></tr><tr><td>قوارير: زجاج ، مفضل:</td> <td>قوارير</td> زجاجية Wilmad <td></td><td></td></tr><tr><td>LabGlass مخصصة</td><td>28-33 مم ضياء داخلي ، ضياء خارجي 33 مم ، 9.5 سم ht Wilmad: https://www.SP-WilmadLabglass.com</td>قوارير: زجاج (أرخص وموافق) & nbsp ؛<td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>فيشر ساينتفيك</td><td>03-339-26H</td><td>29 مم قطر خارجي ، 9.5 سم ارتفاع &nbsp ؛ https://www.fishersci.com. &nbsp;</td></tr><tr><td>القوارير: زجاج (ضيق قليلا) &nbsp;</td><td>جينيسي العلمية&nbsp;</td><td>32-201</td><td>24.5 مم قطر خارجي ، 9.5 سم ارتفاع thttps://www.geneseesci.com</td></tr><tr><td>قوارير: بولي بروبيلين &nbsp ؛</td><td>جينيسي Scientific</td><td>32-114</td><td>28.5 مم قطر خارجي ، 9.5 سم HT</td></tr><tr><td>قارورة سدادات</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>لفة من القطن غير الماص</td><td>فيشر Scientific</td><td>22-456881</td><td></td></tr><tr><td>القماش القطني</td><td>فيشر Scientific</td><td>22-055053</td><td>https://www.fishersci.com ؛</td></tr></tbody></table>

الصيانة المختبرية لذبابة الدبتيران السفلى براديسيا (sciara) coprophila: كائن نموذجي جديد / قديم ناشئ

Laboratory Maintenance of the Lower Dipteran Fly Bradysia (Sciara) coprophila: A New/Old Emerging Model Organism

تم الحفاظ على المخزونات المختبرية لذبابة dipteran السفلى ، Bradysia (Sciara) coprophila ، لأكثر من قرن. يتم عرض بروتوكولات الصيانة المختبرية ل B. coprophila هنا. وستكون هذه البروتوكولات مفيدة للعدد المتزايد بسرعة من المختبرات التي تدرس B. coprophila للاستفادة من سماتها البيولوجية الفريدة، والتي تشمل (1) مغزل أحادي القطب في الانقسام الاختزالي الذكري الأول؛ و (2) مغزل أحادي القطب في الانقسام الاختزالي الذكري الأول؛ و (2) مغزل أحادي القطب في الانقسام الاختزالي الذكري الأول؛ و (2) مغزل أحادي القطب في الانقسام الاختزالي الذكري الأول؛ و (2) مغزل أحادي القطب في الانقسام الاختزالي الذكري الأول؛ و (2) مغزل أحادي القطب في (2) عدم انفصال ثنائي X في الانقسام الاختزالي الذكري II ؛ (3) بصمة الكروموسوم لتمييز الأم عن المتماثلات الأبوية ؛ (4) كروموسومات محدودة الخط الجرثومي (L) ؛ (5) إزالة الكروموسومات (كروموسومات الأب في الانقسام الاختزالي الذكري الأول ؛ واحد إلى اثنين من الكروموسومات X في الأجنة المبكرة ؛ كروموسومات L من سوما في الأجنة المبكرة) ؛ (6) تحديد الجنس من قبل الأم (لا يوجد كروموسوم Y) ؛ و (7) تضخيم الحمض النووي المنظم تنمويا في مواقع نفخة الحمض النووي في كروموسومات بوليتين الغدد اللعابية اليرقية. 
أصبح من الممكن الآن استكشاف هذه الميزات الفريدة العديدة لميكانيكا الكروموسومات باستخدام التطورات الحديثة في تسلسل وتجميع جينوم B. coprophila وتطوير منهجية التحول للهندسة الجينومية. سيستفيد المجتمع العلمي المتنامي الذي يستخدم B. coprophila للبحث من البروتوكولات الموصوفة هنا لتزاوج الذباب (علامات النمط الظاهري للأمهات اللواتي سيكون لديهن أبناء فقط أو بنات فقط ؛ تفاصيل التزاوج الجماعي للتجارب الكيميائية الحيوية) ، وفحص فقس الجنين ، وتغذية اليرقات ، وغيرها من التعليقات على تربيتها.

أدت البروتوكولات الموصوفة هنا إلى نجاح مثبت في تربية B. coprophila. عندما يتم اختيار البالغين الدهنيين المغلقين مؤخرا للتزاوج (الشكل 4) ، يمكن أن يكون أكثر من 90٪ من الصلبان خصبا وينتج ذرية. يختلف نجاح الخصوبة باختلاف المخزونات (الجدول 2). كان المخزون 7298 (كروموسوم X مع علامة متموجة) هو الأكثر صحة بين الأسهم ولكنه مر بفترة من الانخفاض ، على ما يبدو بسبب تنشيط عناصر الحمض النووي المتنقلة التي أدت إلى إعادة ترتيب الجينوم32. يمثل مخزون HoLo2 سلالة صحية مشتقة من 7298 ، حيث يبدو أن إعادة ترتيب الجينوم قد استقرت ، وقد حلت محل مخزون الوالدين 7298 في مركز المخزون. مخزون HoLo2 هو الذي تم استخدامه لتسلسل جينوم B. coprophila وهو الأكثر استخداما على نطاق واسع من قبل مجموعات المختبرات المختلفة. في الآونة الأخيرة ، تم استخدام طفرات كريسبر لذباب HoLo2 لإنشاء مخزون W14 مع النمط الظاهري للعين البيضاء لاستخدامه في التحول باستخدام علامات العين الفلورية (Yamamoto و Gerbi ، البيانات غير معروضة). سلالة W14 قوية بشكل استثنائي. مخزون 6980 (الجناح المتموج وعلامات الوريد المنتفخة) أقل قوة إلى حد ما وسهم 91S (علامة الجناح الصغيرة) أقل قوة.
ينتج عن التهجين الناجح أجنة (الشكل 5). تخضع الأجنة للقضاء على كروموسومات X الأبوية المطبوعة في تقسيم الانقسام من7 إلى 9. بالإضافة إلى ذلك ، يتم التخلص من كروموسومات L المحدودة للخط الجرثومي من السلالة الجسدية في الأجنة فيقسم الانقسام من 5 إلى 6. تظهر الأجنة على شكل يرقات، والتي لا ينبغي الخلط بينها وبين العفن الذي قد يكون موجودا أيضا (الشكل 6). تظهر بقع العين (anlage لعيون البالغين) في النصف الثاني منالنجم اليرقي الرابع (الشكل 7). يوفر حجم بقع العين علامة مظهرية ملائمة لبداية وتطور تضخيم نفخة الحمض النووي ، وهو واحد من مثالين معروفين فقط لتضخيم الحمض النووي (الجين) داخل الكروموسومات المنظم بشكل طبيعي والخاص بالموقع. بعد ذلك ، تتطور الشرانق ، ويمكن أن تكون كمية الصبغة التي تملأ عيونهم بمثابة علامة تنموية للانقسام الميوزي الأول والثاني في تكوين المنوية (الشكل 8) بسلوكياتها الكروموسومية الفريدة في هذه الانقسامات.
<img alt="مقارنة تحديد جنس الحشرات. XwX أنثى ، XX أنثى ، XO ذكر ؛ مخطط الدراسة الجينية." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig04.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> الشكل 4: تزاوج ذباب B. coprophila البالغ. تظهر اللوحة العلوية الأنواع الثلاثة من الذباب البالغ في مخزون HoLo2: الأمهات المنتجات للإناث ذوات الأجنحة المتموجة (الإناث البالغات X'WX) ، والأمهات المنتجات للذكور بأجنحة مستقيمة (XX من الإناث البالغات) ، والذكور ذات الأجنحة المستقيمة (X0 من الذكور البالغين). لاحظ ovipositor مدبب في الطرف الخلفي من الذباب الإناث والمشبك على شكل خطاف في الطرف الخلفي من الذباب الذكر. تظهر اللوحة السفلية تزاوج ذكر وأنثى ، حيث أمسك المشبك الذكر ببيضة الأنثى. سيتم تخزين المنوية في المنوية للإناث وسوف تخصب البويضات عند تصريفها إلى الخارج. طول البالغين 2.0 ملم (ذكور) ، 2.5 ملم (إناث). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig04large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="ذبابة الفاكهة التطور الجنيني ، الفحص المجهري الفلوري ، الدورات الجنينية ، مخطط توقيت انقسام الخلايا." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig05v2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 5"> الشكل 5: ب. أجنة كوبروفيلا. اللوحة العلوية اليسرى هي منظر للأجنة باستخدام الضوء القياسي في مجهر تشريح. تظهر النوى في السيتوبلازم المخلوي كنقاط سوداء. تستخدم اللوحة الموجودة على اليمين الفحص المجهري الفلوري لتصور نوى الأجنة الملطخة بيوديد البروبيديوم. يبلغ متوسط طول الأجنة 200 ميكرون ومتوسط عرضها 150 ميكرون. تتجمع نوى الخلايا الجرثومية في القطب الخلفي للجنين كما يظهر في الدورات 6 (يميل الجنين للأمام) ، و 7-9 ، وبعد ذلك تتخللها نوى جسدية. يحدث التخلص من كروموسوم L في السلالة الجسدية في تقسيم الانقسام 5 أو 6 ؛ يحدث التخلص من كروموسوم X في السلالة الجسدية في تقسيم الانقسام7 أو 8 أو 9. يحدث النسيج الخلوي خلال الطور البيني للدورة 11. يوضح الجدول الموجود على اليسار متوسط المدة الزمنية لكل دورة تقسيم عند 22 درجة مئوية. تم تكييف الطاولة الموجودة على اليسار واللوحة الموجودة على اليمين بإذن من de Saint Phalle و Sullivan35. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig05large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="تفاعل الحشرات والفطريات. صورة الفحص المجهري نمو الفطريات دراسة الآفات الفطريات المسببة للحشرات." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig06.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 6"> الشكل 6: تظهر أجنة B. coprophila في صورة يرقات. تظهر مجموعة من الأجنة (سهم سميك أزرق) بالقرب من ovipositor للإناث البالغة التي ماتت بعد وضع البيض. بعد أسبوع من وضع البيض ، تصبح الأجنة يرقات شابة ، يشار إلى العديد منها بالأسهم السوداء. اليرقات الناشئة حديثا لها فك أسود في الطرف الأمامي وجسم شفاف. تتحرك فوق سطح أجار ويجب عدم الخلط بينها وبين العفن الذي لا يتحرك. يظهر الجزء الداخلي بعض العفن ، مع خيوط بيضاء (سهم أحمر) وبوغ أسود في طرفه (سهم أخضر) ، وهو أصغر قليلا جدا من اليرقات الناشئة حديثا. شريط المقياس = 1 مم. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig06large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
<img alt="مراحل تطور اليرقات ، وتكوين بقع العين المبكرة ، والصور المجهرية ، وتحليل النمو البيولوجي." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig07.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 7"> الشكل 7: مراحل بقعة العين ليرقات B. coprophila . تتشكل بقع العين في الجزء الأمامي من اليرقة ، خلف الفك مباشرة ، وتتكون من حبيبات صبغية يزداد عددها. بقع العين هي anlage للعين البالغة. تظهر اللوحة العلوية اليرقات التي تم تصورها باستخدام مجهر تشريح. اللوحة السفلية عبارة عن منظر مكبرة لبقع العين باستخدام مجهر تباين الطور لتصور يرقة على شريحة مجهرية مع قطرة من الماء المقطر وغطاء يطفو برفق في الأعلى. يتم تسمية مراحل بقعة العين وفقا ل Gabrusewycz-Garcia30 حيث يتم حساب عدد الحبيبات في أطول صف (على سبيل المثال ، 12) ويتم ملاحظة عدد الصفوف الإضافية باستثناء أطول صف (على سبيل المثال ، 6 لمرحلة بقعة العين 12x6). يبدأ بدء تضخيم الحمض النووي الخاص بالموقع في كروموسومات بوليتين الغدد اللعابية في مرحلة بقعة العين 10 × 5 ويكتمل عند 14 × 7 عندما يكون هناك انفجار في النسخ في موضع وتوسع نفث الحمض النووي31. في مرحلة الحافة اللاحقة / الفك المتساقط ، تبدأ حبيبات بقعة العين في الاندماج ، وتتحرك بشكل جانبي بعيدا عن خط الوسط. طول الجسم اليرقات يقصر. علاوة على ذلك ، تتكثف نفث الحمض النووي في هذه المرحلة. يستغرق الأمر حوالي يوم واحد عند 21 درجة مئوية لاجتياز كل مرحلة من مراحل بقعة العين. شريط المقياس = 1 مم. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig07large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
<img alt="مراحل تحول الحشرات. تطوير خادرة سلسلة الصور اليرقات لتحول الكبار." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig08.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 8"> الشكل 8: تطور الشرانق B. coprophila . أثناء التشرد ، تتحلل جميع أنسجة اليرقات باستثناء الجهاز العصبي ويتم استبدالها بأنسجة بالغة تنشأ عن طريق انقسامات الخلايا في الأقراص الوهمية. يتغير لون الجسم من الأبيض إلى الأسمر إلى البني إلى الأسود. الصباغ يملأ تدريجيا في العين العذراء. يحدث الانقسام الاختزالي الأول والثاني في ذكور الشرانق ذات العيون التي تمتلئ بالصباغ36. شريط المقياس = 1 مم. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig08large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>اسم السهم</td>
			<td>علامات</td>
			<td>معدل الخصوبة</td>
			<td>التعليقات</td>
		</tr><tr><td>7298</td>
			<td>الجناح المتموج (W)</td>
			<td>~ 75٪</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>هولو 2</td>
			<td>الجناح المتموج (W)</td>
			<td>~ 90٪</td>
			<td>مشتقة من 7298</td>
		</tr><tr><td>دبليو 14</td>
			<td>الجناح المتموج (W) ؛ عيون بيضاء</td>
			<td>~ 95٪</td>
			<td>مشتقة من HoLo2</td>
		</tr><tr><td>6980</td>
			<td>الجناح المتموج (W) ؛ تورم الأوردة (SW)</td>
			<td>~ 65٪</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>91 ثانية</td>
			<td>جناح متموج ضعيف (W) ؛ أجنحة صغيرة (P)</td>
			<td>~ 50٪</td>
			<td>تم تقديم علامة متموجة في صليب لإنقاذ 91S</td>
		</tr></tbody></table>الجدول 2: مخزونات براديسيا (Sciara) coprophila. يسرد الجدول 1 من Gerbi6 هذه العلامات وغيرها التي لم تعد موجودة. تم تلخيص خمسة عمليات نقل (T1 ، T23 ، T29 ، T32 ، T70) في نهاية السنترومير من X27 في الشكل 8 من Gerbi6 ولكنها لم تعد موجودة.
الملف التكميلي 1: الصلبان HoLo2 (و 7298 و W14) ، 91S عبر والإنقاذ ، 6980 تقاطع ، عبور النقل. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/Supplemental%20Materials.zip" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.</a>

توضح هذه الورقة الصيانة المختبرية (بما في ذلك التزاوج والتغذية) لذبابة الدبتيران السفلى Bradysia (Sciara) coprophila.

الصيانة المختبرية لذبابة الدبتيران السفلى براديسيا (Sciara) coprophila: كائن نموذجي جديد / قديم ناشئ

Laboratory stocks of the lower dipteran fly, Bradysia (Sciara) coprophila, have been maintained for over a century. Protocols for laboratory upkeep of B. ...

نحافظ على ذبابة dipteran السفلية ، Bradysia ، والمعروفة أيضا باسم Sciara coprophila لدراسة بعض خصائصها البيولوجية الفريدة التي تشمل المغزل أحادي القطب وعدم انفصال x-dyad في الانقسام الاختزالي ، وبصمة الكروموسوم ، والكروموسومات الخاصة بالخط الجرثومي ، والقضاء على الكروموسوم ، وتحديد جنس الأم ، وتضخيم الحمض النووي في نفث الحمض النووي للكروموسوم الملوث. في مختبرنا ، طور يوتاكا ياماموتو منهجية للتحول الجيني لبراديسيا كوبروفيلا. علاوة على ذلك ، تم توفير نسخة هذا الكائن الحي ، وتم تسلسل جينومه وتجميعه بواسطة جون أوربان.تتيح هذه الاختراقات استكشاف البيولوجيا الفريدة ل Bradysia coprophila. نحن نشجعك على الانضمام إلى مجتمع العلماء المتنامي لمعالجة الخصائص الفريدة ل Bradysia coprophila. ستوضح نتائجك الآليات الجزيئية ذات الأهمية الأساسية لبيولوجيا الخلية والتطور.ستكون بروتوكولات التربية المعروضة هنا بمثابة برنامج تعليمي للحفاظ على Bradysia coprophila في مختبرك الخاص.

laboratory-maintenance-lower-dipteran-fly-bradysia-sciara-coprophila

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

اقترحنا نظام يستخدم غير مكلفة، موسع أجهزة الاستشعار البصرية الزائفة الصوتية تلقائيا وبدقة لكشف والعد، وتصنيف الحشرات الطائرة على أساس الصوت سفرهم.

تحلق كشف وتصنيف الحشرات مع مجسات رخيصة

ويرد إجراء لتربية الذباب مستقرة (Stomoxys calcitrans). يستخدم الإجراء المواد المتاحة محلياً لمكونات النظام الغذائي، والمعدات واللوازم.

مختبر تربية الذباب مستقرة وأخرى ديبتيرا موسكويد

توضح هذه الورقة الطرق الأساسية لتوحيد العوامل المهمة مثل الكثافة وتوافر الأعلاف ومصدر الترطيب والضوابط البيئية للتربية طويلة الأجل للمزارع المختبرية للكريكيت الصالح للأكل ، Gryllus bimaculatus.

الحفاظ على الثقافات المختبرية ل Gryllus bimaculatus ، وهو نموذج Orthopteran متعدد الاستخدامات لزراعة الحشرات وفسيولوجيا اللافقاريات

ضمة الكوليرا : النموذجي لدراسة الكائنات البكتيرية إمراض -- مقابلة

الميداكا الزرد ومكملة للتشريح وظائف الجينوم الوراثي للالفقاريات. هذا البروتوكول يسلط الضوء على النقاط الرئيسية للنجاح في microinjection الميداكا الأجنة ، وهي تقنية هامة لتحليل الجنينية والجينية باستخدام الميداكا والزرد في المختبر.

Microinjection الجنين الميداكا لاستخدامها بوصفها كائنا النموذجي الوراثية

هذا البروتوكول يحدد الصيانة الدورية والرعاية للحفاظ على الظروف المثلى لتربية اسماك الزرد. شريط الفيديو يوضح البروتوكول لصيانة النظام والإسكان العادية، والتغذية، والتربية، وتربية اليرقات الزرد.

العناية والصيانة العادية من اسماك الزرد (<em&gt; دانيو rerio</em&gt;) المختبر: مقدمة

ونحن يبرهن على وجود طريقة لجمع البكتيريا magnetotactic (MTB) التي يمكن تطبيقها على المياه الطبيعية. يمكن أن تكون معزولة وMTB المخصب من عينات الرواسب باستخدام الإعداد بسيطة نسبيا والتي يستفيد من المغناطيسية البكتيريا الطبيعية. ويمكن بعد ذلك أن تدرس معزولة MTB بالتفصيل باستخدام كل من الضوء والمجهر الإلكتروني.

جمع وعزل والإثراء التي تحدث بصورة طبيعية بكتيريا Magnetotactic من البيئة

لدراسة العلاقة بين توازن البروتين والإجهاد والشيخوخة ، راقبنا التغيرات في طي البروتين باتباع خلل البروتين ، وتوطين البروتين في الخلية واستقرار البروتين على مستويات الكائنات الحية والخلوية والبروتين ، باستخدام metazoan Caenorhabditis elegans القابل للتتبع وراثيا كنظام نموذجي.

استخدام Caenorhabditis elegans كنظام نموذجي لدراسة توازن البروتين في كائن حي متعدد الخلايا

ظهر مؤخرا  التكاثر الشبيه بالبريون لمجاميع البروتين على أنه متورط في العديد من الأمراض التنكسية العصبية. الهدف من هذا البروتوكول هو وصف كيفية استخدام الديدان الخيطية C. ايليجانس كنظام نموذجي لمراقبة انتشار البروتين والتحقيق في الظواهر الشبيهة بالبريون.

التحقيق في نشر وسمية البروتينات مثل بريون باستخدام Metazoan نموذج حي<em&gt; C. ايليجانس</em

تشير هذه المخطوطة إلى بروتوكول مفصل لزراعة ، على أساس منتظم ، مجموعة من ذبابة الفاكهة السوداء باستخدام قفص سكاني للذبابة.

صيانة<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; عدد السكان قفص

تعلم بروتوكولات الصيانة المختبرية لذبابة Bradysia coprophila النموذجية في دراسات الوراثة والتطور. تُمكّن هذه الطرق الباحثين من فهم آليات الانقسام الخلوي وتكوين الأنسجة الحية.

الصيانة المختبرية لذبابة الدبتيران السفلى براديسيا (Sciara) coprophila: كائن نموذجي جديد / قديم ناشئ

استكشف المزيد من الفيديوهات