عزل وحفظ خلايا الدم البشرية أحادية النواة المحيطية عالية القابلية للحياة من الدم الكامل: دليل للمبتدئين

في هذا البروتوكول ، نهدف إلى توفير برنامج تعليمي سهل المتابعة خطوة بخطوة حول كيفية جمع وتخزين الدم المحيطي عالي الصلاحية والخلايا أحادية النواة ، أو PBMCs ، من الدم الكامل. تشمل PBMCs الخلايا الليمفاوية والخلايا المتغصنة والوحيدات. يمكن معالجة PBMCs السائبة لعزل أنواع الخلايا الفردية وتستخدم بشكل شائع في مجموعة متنوعة من التجارب والمقايسات ، بما في ذلك تسلسل الحمض النووي الريبي وقياس التدفق الخلوي.

بالإضافة إلى PBMCs ، نوضح أيضا كيفية جمع بلازما EDTA ومعطف بافي الكامل. قبل البدء في هذا البروتوكول ، يرجى إعداد المواد والكواشف المدرجة في الجدول 2. لاحظ أن هذا البروتوكول مصمم لجمع PBMCs من ستة أنابيب طرد مركزي متدرجة الكثافة ، ينتج كل منها ما يقرب من 12 مليون خلية.