استراتيجيات تقييم السلوكيات الشبيهة بالتوحد في الفئران

نماذج القوارض هي أدوات قيمة لدراسة السلوكيات الأساسية المتعلقة باضطراب طيف التوحد (ASD). في هذه المقالة ، نوضح اختبارين سلوكيين لنمذجة السمات الأساسية لاضطراب طيف التوحد في الفئران: الاستمالة الذاتية ، التي تقيم السلوك المتكرر ، واختبار التفاعل الاجتماعي المكون من ثلاث غرف ، والذي يوثق الإعاقات الاجتماعية.

يركز بحثنا على الفيزيولوجيا المرضية لاضطراب طيف التوحد ، ASD. وعلى وجه التحديد ، ننظر إلى الآليات الجزيئية التي ينطوي عليها اضطراب طيف التوحد وما الذي يسبب الإعاقات السلوكية. ستشمل هذه معا علاجات محددة تتعلق باضطراب طيف التوحد وستعمل على تحسين حياة الأفراد الذين يعانون من اضطراب طيف التوحد.

يتمثل أحد التحديات في بحثنا في تحسين البحث مع السلوك المرتبط باضطراب طيف التوحد والتواصل مع ذلك بين المختبرات المختلفة. هناك الكثير من الاختلاف بين المختبرات المختلفة ، وكيفية إجراء التقييمات السلوكية ، وهذه مشكلة كبيرة لتطوير العلاجات في هذا المجال. لذلك نأمل من خلال بروتوكولاتنا أن نساعد في هذه التطورات والتواصل بين المختبرات في جميع أنحاء العالم.

من خلال تحسين وتفصيل الاستمالة وبروتوكولات الاختبار المكونة من ثلاث غرف ، نؤسس إطارا متسقا يمكن للباحثين الاعتماد عليه للحصول على نتائج موثوقة وقابلة للتكرار من نماذج فأر ASD. سيسهل هذا التوحيد القياسي التعاون والتفسير الأفضل للنتائج من المختبرات المختلفة ، مما يؤدي إلى فهم أفضل لاضطراب طيف التوحد وتطوير العلاجات المحتملة. يهتم مختبرنا بشرح عملية الترجمة الخاصة بنوع الخلية في السلوك الشبيه بالتوحد.

بالإضافة إلى ذلك ، درسنا أيضا التطبيقات العلاجية المحتملة في نماذج فئران ASD ، مثل الميتفورمين. للبدء ، قم بتشغيل الأضواء الخافتة. نظف الطاولة وقم بإعداد الغرفة.

قم بإعداد كل قفص اختبار بطبقة رقيقة من الفراش الطازج. ضع قفصا أو قفصين على الطاولة ، مفصولين عن بعضهما البعض وعن بيئة الغرفة بواسطة غمات بلاستيكية بيضاء. بعد ذلك ، ضع كاميرا قبل كل قفص لالتقاط ماوس الاختبار.

قم بتغطية الأقفاص بورقة من القماش ، وانقل جميع الفئران إلى الغرفة لتجنب الإجهاد أثناء عملية النقل. بمجرد وضع الفئران في غرفة الاختبار ، قم بإزالة الورقة. قبل أن تبدأ التجربة ، اتركهم في الغرفة بأضواء خافتة لمدة 30 دقيقة على الأقل.

في بداية الاختبار ، قم بتدوين رقم تعريف الماوس ومعلومات الاختبار على السبورة البيضاء. ضع فأرة الاختبار في القفص مع الفراش الجديد. ابدأ التسجيل وضع ماوس الاختبار في قفص الاختبار.

اترك الغرفة أثناء جلسة التسجيل التي تستغرق 20 دقيقة. بعد 20 دقيقة ، عد إلى الغرفة. اعرض السبورة البيضاء على الكاميرا وأوقف التسجيل.

ضع فأرة الاختبار مرة أخرى في قفص المنزل وكرر التجربة. بعد التجارب ، أعد الفئران إلى غرفة السكن الخاصة بهم. كشف اختبار الاستمالة الذاتية عن زيادة وقت الاستمالة في الفئران بالضربة القاضية Eif4ebp2 مقارنة بالفئران الضابطة.

أظهرت الفئران بالضربة القاضية Eif4ebp2 نوبات حلاقة أكثر بكثير من الفئران الضابطة. للبدء ، قم بتنظيف الطاولة ، وقم بتشغيل الأضواء الخافتة. ضع أداة زجاج شبكي ثلاثية الغرف على الطاولة محاطة بستائر الخصوصية.

ضع كاميرا واحدة في الأعلى، مع التأكد من أن جميع الغرف الثلاث موجودة في إطار تسجيل الكاميرا. بعد ذلك ، انقل الاختبار والفئران الغريبة إلى الغرفة ، وقم بتغطية الأقفاص بورقة من القماش أثناء عملية النقل. قم بإزالة الورقة بمجرد دخولها إلى الغرفة.

اترك الفئران في الغرفة لمدة 30 دقيقة على الأقل مع إضاءة خافتة قبل بدء التجربة. حافظ على الغرف الثلاث فارغة أثناء التعود. بعد تحديد ماوس الاختبار، اكتب رقم التعريف على السبورة البيضاء.

ضع ماوس الاختبار في المقصورة المركزية بينما تظل الأبواب المنزلقة مغلقة. افتح الأبواب وابدأ التسجيل للسماح لماوس الاختبار باستكشاف الغرف الثلاث الفارغة لمدة 10 دقائق. بعد 10 دقائق ، عد إلى الغرفة.

قم بتوجيه ماوس الاختبار برفق إلى المقصورة المركزية وأغلق الأبواب المنزلقة. اعرض السبورة البيضاء وأوقف الكاميرا. ضع قفصين سلكيين في الغرفتين اليمنى واليسرى قطريا مقابل بعضهما البعض في زوايا كل غرفة.

قم بقياس المسافة بين الأقفاص وجدران الغرفة. تأكد من أن الأقفاص لا تواجه أبواب الغرفة مباشرة. اختر فأرا غريبا وأدخله في أحد الأقفاص السلكية ، واترك القفص الآخر فارغا.

لبدء الاختبار ، اضغط على تسجيل وإزالة كلا البابين المنزلقين قبل مغادرة الغرفة. اسمح لماوس الاختبار باستكشاف قفص سلكي فارغ في إحدى الغرف وقفص يحتوي على فأر غريب في الغرفة الأخرى لمدة 10 دقائق. بعد 10 دقائق ، عد إلى الغرفة.

اعرض السبورة البيضاء على الكاميرا وقم بإنهاء التسجيل. أعد إدخال الماوس إلى المقصورة المركزية وأغلق الأبواب المترابطة. ضع فأرة جديدة لم تصادف أبدا في قفص سلكي فارغ سابقا.

ابدأ في التسجيل وافتح الأبواب المترابطة للسماح لماوس الاختبار باستكشاف الجهاز لمدة 10 دقائق قبل مغادرة الغرفة. سيستكشف ماوس الاختبار قفصين سلكيين ، أحدهما بماوس S1 الذي تمت مواجهته سابقا والآخر بماوس S2 الذي تم تقديمه حديثا ، لمدة 10 دقائق. بعد 10 دقائق ، عد إلى الغرفة.

اعرض السبورة البيضاء على الكاميرا واختتم التسجيل. أعد جميع الفئران إلى أقفاص منزلها. قم بتنظيف الغرف والأقفاص السلكية جيدا باستخدام مطهر خال من الرائحة ، وجفف الجهاز قبل التجربة التالية.

بعد الاختبار ، أعد الفئران إلى المنشأة السكنية. فضلت الفئران التفاعل مع S1 على كائن غير حي جديد. وبالمثل ، أظهرت الفئران C57BL / 6J اهتماما أكبر ب S2 الذي تم تقديمه حديثا أكثر من S1 المألوف.