أبريل 4, 2025
تقدم هذه المخطوطة بروتوكولا موحدا لاستئصال الكلية 5/6 عن طريق استئصال ثنائي القطب الحاد عن طريق بضع البطن في خط الوسط في نموذج الفئران ، بهدف إحداث حالة من القصور الكلوي عن طريق تصغير الحمة الكلوية بدرجة كبيرة من الدقة المنهجية وانخفاض خطر الخطأ الفني.
يتمثل نطاق هذا المجال المحدد من بحثنا في توفير نماذج حيوانية موحدة للغاية وخاضعة للرقابة لحالات وأمراض معينة. باستخدام هذا البروتوكول لاستئصال الكلية الفرعية ، نقدم نموذجا موحدا للقصور الكلوي في الفئران. يوفر بروتوكولنا ميزة المحور داخل البطن للأعضاء الحشوية الأخرى.
هذا ذو قيمة خاصة إذا كانت الإجراءات المتزامنة على الأعضاء الأخرى مطلوبة للنموذج الحيواني المطلوب. التحدي التجريبي الحالي الأكثر صلة هو حقيقة أن التقليل الجراحي من الحمة الكلوية بكمية موحدة لا يؤدي بالضرورة إلى نفس الدرجة من القصور الكلوي. لذلك قد تكون هناك حاجة إلى مزيد من الشهادات بعد الجراحة من خلال الاختبارات المعملية.
للبدء ، قم بترتيب الأربطة متعددة الشعيرات ، وحلقات أوعية السيليكون ، ومشابك الإصلاح الحادة ، ومقص التحضير الدقيق ، والملقط ، والبقع المرقئ ، وجهاز التعرض ، ووسادة التسخين ، وخطافات التحضير الجراحي على طاولة العمليات. للفأر المخدر ، قم بإعطاء 100٪ أكسجين من خلال قناع الوجه لحديثي الولادة. احلق منطقة الوصول المطلوبة وقم بتطهير موقع الجراحة عن طريق وضع مسحات قطنية معقمة بحركة دائرية مع مقشرات متناوبة بنسبة 70٪ من الإيثانول واليود.
لإجراء شق البطن المصغر المتوسط ، قم بإجراء شق جلدي أولي يبلغ متوسط ثلاثة سنتيمترات تقريبا على البطن ، متبوعا بشق في اللفافة على طول الخط الربا. تحقيق التعرض الجراحي للكلية عن طريق وضع الكمادات الجراحية وخطافات التحضير. بعد ذلك ، المس الحمة الكلوية فقط بمسحات قطنية مرطبة.
كشف الكلية عن طريق الإمساك بالدهون حول الكلى المرتبطة بفافة الدروت. ضع الشد لرفع اللفافة عن الحمة الكلوية محليا. قم بشق اللفافة وتقويضها بنهاية حادة لحافة مقص واحدة واستمر في التشريح الطولي لفافة Gerota.
بعد ذلك ، قم بإجراء إزالة غير حادة من لفافة Gerota باستخدام مقص مغلق. قم بتقويض اللفافة حول الحمة تدريجيا وطي الكبسولة اللفافية وسطيا. حبال النقير الكلوي بحلقة وعاء سيليكون لتحسين التحكم في الأوعية الدموية.
ضع طرف الملقط في الفضاء خلف الصفاق لتثبيت الكلى لتجنب الهروب الظهري للكلية أثناء عملية القطع. ثم ، باستخدام المقص ، قم بإجراء استئصال القولون الكلوي الحاد بثلث القحمة في ضربة واحدة موجهة بدقة. تحقيق الإرقاء عن طريق تطبيق رقعة مرقئ أو استخدام الضغط اليدوي بأدوات غير حادة.
بدلا من ذلك ، ضع مشبك YASARGIL لتقليل تدفق الدم. إجراء استئصال القولون الكلوي الحاد بمقدار ثلث الذيلية بنفس طريقة استئصال القولون القحفي. استخدم مستوى تسلخ بزاوية للاحتفاظ بمزيد من الحمة الكلوية في الجانب النزيري وأقل على الجانب الجانبي لتجنب إصابة النقير وتقليل تسرب البول من نظام الحوض.
بعد تعبئة الكلى ، قم بحفر نقيق الكلى باستخدام مشابك إصلاح حادة ، وقم بحبال النقير الكلوي برباط متعدد الشعيرات. ضع عقدة منزلقة آمنة على المنهار الكلوي بالقرب من الأوعية البطنية لسد تدفق الدم الكلوي والحالب. قم بتشريح النقير بحدة باستخدام المقص وإزالة الكلى.
ثم ، تحكم في الإرقاء وقطع نهايات الرباط. ضع خياطة زاوية على اللفافة البطنية باستخدام خياطة متعددة الشعيرات. استمر في خياطة اللفافة البطنية بخياطة جارية ، مع الاستيلاء على ما يقرب من ملليمترين من الأنسجة لكل قضمة وتباعد بين كل لدغة أربعة ملليمترات.
خياطة الطبقة الجلدية بغرز مفردة ، مع الاستيلاء على ثلاثة ملليمترات من الأنسجة لكل لدغة وترك ستة ملليمترات بين كل غرزة. أظهرت القيم الفسيولوجية لحمة الكلى المتبقية مستويات أكسجة تبلغ حوالي 60٪ مما يشير إلى قابلية البقاء بعد الاستئصال. أظهرت الأنسجة الكلوية غير القابلة للذهر مستويات أكسجة أقل بكثير بنسبة 20.9٪ بما يتوافق مع الأنسجة غير القابلة للحياة.
أشارت قيم التروية إلى التروية الفسيولوجية في الكلى المتبقية ، مما يعزز صلاحية الأنسجة.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تقدم هذه المخطوطة بروتوكولاً معيارياً لإجراء عملية استئصال 5/6 من الكلية عبر الاستئصال الحاد لقطبين في نموذج جرذ. الهدف هو إحداث قصور كلوي بدقة وبأقل قدر من الخطأ التقني.
يوفر استئصال 5/6 من الكلية المعياري في الجرذان نموذجاً قبل سريري قوياً لمرض الكلى المزمن، مما يسمح بتقليل المخاطر الآلية وضمان الاستمرارية الترجمية في أبحاث الكلى. ويدعم هذا النموذج الدراسات الصيدلانية والجزيئية الحيوية من خلال توفير تعقيد بيولوجي قابل للتكرار وإمكانية الوصول إلى التحقق من التصوير أثناء العملية الجراحية. وتعد دقة هذا النموذج وقابليته للتكرار أمراً حاسماً لاتخاذ قرارات مسار التطوير والمواءمة بين الوظائف المختلفة في البحث والتطوير ضمن اكتشاف أدوية أمراض الكلى.
يتكامل هذا النموذج ضمن التسلسل الممتد من مرحلة الاكتشاف إلى المرحلة قبل السريرية، مما يدعم تحديد المركبات الواعدة، والدراسات الميكانيكية، والتحقق من المؤشرات الحيوية الترجمية في أبحاث الكلى.