Name: تقنية فعالة لشخص واحد لأخذ عينات الحليب من فئران المختبر (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:45:00.000+00:00
Duration: 4 min 56 s
Description: تعلم تقنية فعالة لأخذ عينات الحليب من فئران المختبر باستخدام جهاز شفط مفرغ. تتيح الطريقة لشخص واحد جمع 0.1–0.5 مل في أقل من 10 دقائق، مما يحسّن دقة أبحاث الرضاعة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

اتبعت جميع إجراءات رعاية والتجارب الإرشادات الفيدرالية وحصلت على موافقة من لجنة رعاية المؤسسية بجامعة روتجرز واستخدامها. تزاوجت إناث الفئران (خلفية C57BL / 6) في عمر 8 أسابيع. تم إطعامهم مربي قياسي طعام إعلان حريص واحتفظوا به تحت دورة إضاءة: مظلمة منتظمة 12:12 ساعة. تم احتساب يوم التسليم على أنه يوم ما بعد الولادة 1 (PD1). في PD2 (الرضاعة المبكرة) و PD10 (ذروة الرضاعة) ، تم أخذ عينات من الحليب كما هو موضح أدناه.
1. تجميع جهاز الحلب 
<ol>
	<li>قم بتوصيل أحد طرفي أنبوب البولي فينيل كلوريد (PVC) ذو القطر الداخلي 5/32 بوصة بمضخة التفريغ واستخدم شريطا لتأمين المرفق (المسمى أ في الشكل 1 أ). ملاحظة: يمكن استبدال مضخة التفريغ بأي مضخة مناسبة أو فراغ مركزي (يسمى أحيانا "فراغ المنزل") متوفر في المختبر.</li>
	<li>قم بتوصيل الطرف الآخر من أنبوب PVC ID مقاس 5/32 بوصة بأنبوب PVC ID 1/8 بوصة عبر موصل مستقيم شائك.</li>
	<li>قم بتوصيل الطرف الآخر من أنبوب PVC ID 1/8 بوصة بإبرة تحت الجلد 18G عبر موصل (المسمى ب في الشكل 1 أ).</li>
	<li>قم بقص طرف طرف الماصة P200 ~ 0.2 سم لإنشاء فتحة أكبر. أدخل طرف الماصة P200 من خلال فتحة سدادة الحاجز بحيث يشير الطرف إلى الأعلى (الشكل 1 ب). ملاحظة: قم بتغيير أطراف الماصة بين.</li>
	<li>قم بتوصيل سدادة الحاجز بأنبوب تجميع معقم. قم بعمل ثقب من خلال سدادة الحاجز بإبرة تحت الجلد 18 جم.</li>
	<li>تحقق من ضغط الشفط عن طريق تشغيل مضخة التفريغ ووضع إصبع (مغطى بقفاز مختبر) على فتحة طرف الماصة. ملاحظة: يجب أن تشعر بشفط لطيف إذا تم تجميعه بشكل صحيح. يجب أن يكون أنبوب التجميع والإبرة تحت الجلد 18 جم وأطراف الماصة P200 معقمة.</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67669/67669fig1.jpg"> 
الشكل 1: جهاز الحلب. (أ) جهاز حلب بمضخة تفريغ متصلة بإبرة تحت الجلد 18 جم عبر أنابيب PVC. تمر الإبرة عبر سدادة الحاجز المتصلة بأنبوب تجميع أجهزة الطرد المركزي الدقيقة. يتم إدخال طرف ماصة P-200 المقلوب ، والذي يستخدم لسحب الحليب من الحلمة ، من خلال فتحة سدادة الحاجز. (ب) مخطط المقطع العرضي لجهاز الحلب. (ج) سد يتم حلب بالطريقة الموصوفة. (د) حصة تمثيلية (0.3 مل) من الحليب الذي تم جمعه من السد في ذروة الرضاعة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67669/67669fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
2. فصل السد عن الجراء
<ol>
	<li>في يوم الحلب ، افصل السد عن صغارها للسماح بتراكم الحليب في الغدد.</li>
	<li>حافظ على دفء الجراء في العش.</li>
	<li>اترك ساعتين من الفصل إذا تم جمع الحليب أثناء الرضاعة المبكرة (على سبيل المثال ، PD2 في هذه الدراسة).</li>
	<li>اترك 30-45 دقيقة من الانفصال إذا تم جمع الحليب خلال ذروة الرضاعة (على سبيل المثال ، PD10 في هذه الدراسة).</li>
</ol>
3. تخدير السد
<ol>
	<li>عندما يكون السد جاهزا للحلب, إعطاء حقنة من الكيتامين / زيلازين محلول (داخل الصفاق ، i.p.) في جانب واحد من التجويف البريتوني بين 4و 5 زوج من الحلمات. ملاحظة: يتم حساب كمية محلول التخدير المراد إعطاؤه بوزن السد (80-100 مجم / كجم كيتامين ، 5-12 مجم / كجم زيلازين ، وفقا لبروتوكول IACUC بجامعة روتجرز). ستعمل هذه الجرعة على تخدير الفأر لمدة 45-60 دقيقة ، مما يوفر وقتا كافيا لجمع الحليب.</li>
	<li>تأكد من التخدير عن طريق الضغط على القدم بقوة ، ولكن دون إصابتها ، لاختبار إدراك للإحساس والألم. يشار إلى التخدير الكافي من خلال عدم وجود حركة من أي نوع.</li>
	<li>ضع مرهم العيون البيطري على عيون السد لمنع الجفاف أثناء التخدير.</li>
</ol>
4. جمع الحليب
<ol>
	<li>ضع السد المخدر على ظهرها على سطح عمل صلب. امسح منطقة الثدي برفق بمنديل معقم للكحول لتنظيف المنطقة قبل الحلب.</li>
	<li>قم بإعطاء 1-2 وحدة من الأوكسيتوسين (i.p.) بينالزوج 4 و 5 من الحلمات على جانب التجويف البريتوني الذي لم يتلق أي حقنة. ملاحظة: الأوكسيتوسين هو جزيء صغير يمكن امتصاصه بسرعة وله عمر نصف قصير 14،15. يجب أن يبدأ الحلب في غضون دقيقة بعد الحقن.</li>
	<li>أمسك السد عن طريق تجريف منطقة رقبتها برفق باليد غير المهيمنة.</li>
	<li>شفط الحليب يدويا من الحلمة عن طريق عصر الأنسجة الثديية من القاعدة إلى طرف الحلمة حتى تظهر حبة حليب.</li>
	<li>قم بتشغيل جهاز التفريغ عن طريق تشغيل زر الطاقة.</li>
	<li>ابدأ الحلب عن طريق وضع طرف الماصة P200 المقلوب برفق على الحلمة. استخدم حركة سحب لطيفة للمساعدة في سحب الحليب (الشكل 1 ج).</li>
	<li>كرر الخطوات 4.4-4.6 على جميع الحلمات حتى يتم جمع كمية كافية من الحليب. ملاحظة: أثناء الحلب ، يمكن سحب الحليب عن طريق الخطأ إلى إبرة تحت الجلد 18 جم أو أنبوب PVC لخط التفريغ. يمكن معالجة ذلك بسهولة عن طريق تغيير الإبرة أو أنبوب PVC قبل حلب التالي.</li>
</ol>
5. استعادة السد بعد جمع الحليب
<ol>
	<li>أعد السد المخدر إلى القفص مع صغارها واحتفظ بالدفء. راقب حتى يستعيد وعيه. ملاحظة: قد يرفض السد الرضاعة مرة أخرى إذا سمح لها بالاستيقاظ بمفردها في قفص منفصل قبل العودة إلى صغارها. يكون هذا أكثر شيوعا عندما يتم جمع الحليب أثناء الرضاعة المبكرة (PD2).</li>
	<li>دع السدود تبتعد عن صغارها لتتعافى تماما عندما تبدأ في الاستيقاظ. هذا سلوك طبيعي. ملاحظة: نلاحظ عودة السدود إلى صغارها بشكل دوري وتعود إلى الرضاعة بالكامل بعد بضع ساعات.</li>
</ol>
6. تحليل الحليب
<ol>
	<li>استخدم مجموعة فحص اللاكتوز التجارية (انظر جدول المواد) لقياس اللاكتوز الحليب. خفف الحليب 75 مرة بالماء المعقم وقم بإجراء الفحص وفقا لبروتوكول المجموعة.</li>
	<li>قم بقياس دهون الحليب باستخدام طريقة الكريماتوكريت الموضحة في منشورات أخرى16،17.</li>
	<li>قم بتقدير بروتين الحليب عن طريق إجراء اختبار بروتين برادفورد18 مع ألبومين مصل الأبقار باعتباره المعيار19. قبل إجراء الفحص ، قم بالطرد المركزي للحليب عند 4,000 × جم لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات مئوية. استخرج الأشعة تحت الحمراء عن طريق سحب العينة وتخفيفها إلى 1:10 بالماء المعقم قبل الفحص.</li>
	<li>إجراء الرحلان الكهربائي لهلام بولي أكريلاميد (PAGE) ؛ افصل 10 ميكروغرام من البروتين على جل مبيد مسبق الصب بنسبة 4٪ -12٪ وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. انقل البروتينات إلى أغشية فلوريد البولي فينيلدين (PVDF) ولطخها باستخدام Coomassie Blue R-250.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>طريقة الشخص الفردي المحسنة لجمع الحليب في دراسات الرضاعة للفئران

<ol><li>Ericsson, A. C., Crim, M. J., Franklin, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+brief+history+of+animal+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Mo+Med%22%5BJournal%5D)">A brief history of animal modeling.</a> Mo Med. 110 (3), 201-205 (2013).</li>
<li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mighty+mouse%3A+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Mo+Med%22%5BJournal%5D)">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Mo Med. 110 (3), 207-211 (2013).</li>
<li>Watford, M., Erbelding, E. J., Smith, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamine+metabolism+in+rat+small+intestine%3A+Response+to+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Soc+Trans%22%5BJournal%5D)">Glutamine metabolism in rat small intestine: Response to lactation.</a> Biochem Soc Trans. 14 (6), 1058-1059 (1986).</li>
<li>Robinson, A. M., Williamson, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+glucose+metabolism+in+the+lactating+mammary+gland+of+the+rat+in+vivo+and+in+vitro.+Effects+of+starvation%2C+prolactin+or+insulin+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Comparison of glucose metabolism in the lactating mammary gland of the rat in vivo and in vitro. Effects of starvation, prolactin or insulin deficiency.</a> Biochem J. 164 (1), 153-159 (1977).</li>
<li>Kowalski, T. J., Wu, G., Watford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+adipose+tissue+amino+acid+metabolism+in+vivo+as+assessed+by+microdialysis+and+arteriovenous+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rat adipose tissue amino acid metabolism in vivo as assessed by microdialysis and arteriovenous techniques.</a> Am J Physiol. 273 (3 Pt 1), E613-E622 (1997).</li>
<li>Ashcroft, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+assess+arteriovenous+differences+across+the+liver+and+hindlimb+muscles+in+mice+following+treadmill+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to assess arteriovenous differences across the liver and hindlimb muscles in mice following treadmill exercise.</a> STAR Protoc. 4 (1), 101985(2023).</li>
<li>Hallemeesch, M. M., Ten Have, G. A., Deutz, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+flux+measurements+across+portal+drained+viscera%2C+liver%2C+kidney+and+hindquarter+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Metabolic flux measurements across portal drained viscera, liver, kidney and hindquarter in mice.</a> Lab Animal. 35 (1), 101-110 (2001).</li>
<li>Le, H., Nguyen, M., Manso, H. E. C., Wang, M. D., Watford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipocytes+are+the+only+site+of+glutamine+synthetase+expression+within+the+lactating+mouse+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Dev+Nutr%22%5BJournal%5D)">Adipocytes are the only site of glutamine synthetase expression within the lactating mouse mammary gland.</a> Curr Dev Nutr. 8 (6), 102168(2024).</li>
<li>Giordano, A., Smorlesi, A., Frontini, A., Barbatelli, G., Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((White%2C+brown+and+pink+adipocytes%3A+The+extraordinary+plasticity+of+the+adipose+organ%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">White, brown and pink adipocytes: The extraordinary plasticity of the adipose organ.</a> Eur J Endocrinol. 170 (5), R159-R171 (2014).</li>
<li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+yield+and+composition+in+mice%3A+Effects+of+litter+size+and+lactation+number%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Biochem+Physiol+A+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Milk yield and composition in mice: Effects of litter size and lactation number.</a> Comp Biochem Physiol A Comp Physiol. 84 (1), 127-133 (1986).</li>
<li>Willingham, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+collection+methods+for+mice+and+reeves%27+muntjac+deer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Milk collection methods for mice and reeves' muntjac deer.</a> J Vis Exp. (89), e51007(2014).</li>
<li>Muranishi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+collecting+mouse+milk+without+exogenous+oxytocin+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Method for collecting mouse milk without exogenous oxytocin stimulation.</a> Biotechniques. 60 (1), 47-49 (2016).</li>
<li>Gómez-Gallego, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+to+collect+high+volumes+of+milk+from+mice+%28mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anales+de+Veterinaria+de+Murcia%22%5BJournal%5D)">A method to collect high volumes of milk from mice (mus musculus).</a> Anales de Veterinaria de Murcia. 29, 55-61 (2014).</li>
<li>DePeters, E. J., Hovey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+collecting+milk+from+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mammary+Gland+Biol+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Methods for collecting milk from mice.</a> J Mammary Gland Biol Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).</li>
<li>Oxytocin- oxytocin injection. , 
 <a target="_blank" href="https://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/fda/fdaDrugXsl.cfm?setid=a9b62187-4141-487c-a9da-f42ad7f9b408&type=display">https://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/fda/fdaDrugXsl.cfm?setid=a9b62187-4141-487c-a9da-f42ad7f9b408&type=display</a> (2019).</li>
<li>Lucas, A., Gibbs, J. A., Lyster, R. L., Baum, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creamatocrit%3A+Simple+clinical+technique+for+estimating+fat+concentration+and+energy+value+of+human+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Br+Med+J%22%5BJournal%5D)">Creamatocrit: Simple clinical technique for estimating fat concentration and energy value of human milk.</a> Br Med J. 1 (6119), 1018-1020 (1978).</li>
<li>Paul, H. A., Hallam, M. C., Reimer, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+collection+in+the+rat+using+capillary+tubes+and+estimation+of+milk+fat+content+by+creamatocrit%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Milk collection in the rat using capillary tubes and estimation of milk fat content by creamatocrit.</a> J Vis Exp. (106), e53476(2015).</li>
<li>Ernst, O., Zor, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linearization+of+the+Bradford+protein+assay%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Linearization of the Bradford protein assay.</a> J Vis Exp. (38), e1918(1918).</li>
<li>Hueso, D., Fontecha, J., Gomez-Cortes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+the+most+commonly+used+methods+for+total+protein+determination+in+milk+of+different+species+and+their+ultrafiltration+products%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Nutr%22%5BJournal%5D)">Comparative study of the most commonly used methods for total protein determination in milk of different species and their ultrafiltration products.</a> Front Nutr. 9, 925565(2022).</li>
<li>Anderson, S. M., Rudolph, M. C., Mcmanaman, J. L., Neville, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+stages+in+mammary+gland+development.+Secretory+activation+in+the+mammary+gland%3A+It%27s+not+just+about+milk+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Key stages in mammary gland development. Secretory activation in the mammary gland: It's not just about milk protein synthesis.</a> Breast Cancer Res. 9 (1), 204(2007).</li>
<li>Meier, H., Hoag, W. G., Mcburney, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+characterization+of+inbred-strain+mouse+milk.+I.+Gross+composition+and+amino+acid+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr%22%5BJournal%5D)">Chemical characterization of inbred-strain mouse milk. I. Gross composition and amino acid analysis.</a> J Nutr. 85 (3), 305-308 (1965).</li>
<li>Hohlbaum, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severity+classification+of+repeated+isoflurane+anesthesia+in+c57bl%2F6jrj+mice-assessing+the+degree+of+distress%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Severity classification of repeated isoflurane anesthesia in c57bl/6jrj mice-assessing the degree of distress.</a> PLoS One. 12 (6), e0179588(2017).</li>
<li>Weaver, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+deficiency+rescues+lactation+on+day+1+in+mice+fed+a+high+fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Serotonin deficiency rescues lactation on day 1 in mice fed a high fat diet.</a> PLoS One. 11 (9), e0162432(2016).</li>
<li>Statement on resuming breastfeeding after anesthesia. , Committee on Obstetric Anesthesia. 
 <a target="_blank" href="https://www.asahq.org/standards-and-practice-parameters/statement-on-resuming-breastfeeding-after-anesthesia">https://www.asahq.org/standards-and-practice-parameters/statement-on-resuming-breastfeeding-after-anesthesia</a> (2009).</li>
<li>Lee, J. J., Rubin, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+feeding+and+anaesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Breast feeding and anaesthesia.</a> Anaesthesia. 48 (7), 616-625 (1993).</li>
<li>Reece-Stremtan, S., Campos, M., Kokajko, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Academy+of+Breastfeeding%2C+M.+Abm+clinical+protocol+%2315%3A+Analgesia+and+anesthesia+for+the+breastfeeding+mother%2C+revised+2017%5BTitle%5D)+AND+%22Breastfeed+Med%22%5BJournal%5D)">Academy of Breastfeeding, M. Abm clinical protocol #15: Analgesia and anesthesia for the breastfeeding mother, revised 2017.</a> Breastfeed Med. 12 (9), 500-506 (2017).</li>
<li>Oosting, A., Verkade, H. J., Kegler, D., Van De Heijning, B. J., Van Der Beek, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+selective+manipulation+of+milk+fatty+acid+composition+in+mice+through+the+maternal+diet+during+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr+Sci%22%5BJournal%5D)">Rapid and selective manipulation of milk fatty acid composition in mice through the maternal diet during lactation.</a> J Nutr Sci. 4, e19(2015).</li>
<li>Silverman, J., Stone, D. W., Powers, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lipid+composition+of+milk+from+mice+fed+high+or+low+fat+diets%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">The lipid composition of milk from mice fed high or low fat diets.</a> Lab Animal. 26 (2), 127-131 (1992).</li>
<li>Rodgers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+aspects+of+milk+collection+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Practical aspects of milk collection in the rat.</a> Lab Animal. 29 (4), 450-455 (1995).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+high-fat+diet+on+secreted+milk+transcriptome+in+midlactation+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Effect of high-fat diet on secreted milk transcriptome in midlactation mice.</a> Physiol Genomics. 49 (12), 747-762 (2017).</li>
<li>Kucia, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-protein+diet+during+gestation+and+lactation+affects+mammary+gland+mrna+abundance%2C+milk+composition+and+pre-weaning+litter+growth+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">High-protein diet during gestation and lactation affects mammary gland mrna abundance, milk composition and pre-weaning litter growth in mice.</a> Animal. 5 (2), 268-277 (2011).</li>
<li>Ragueneau, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+development+in+mice.+Iv%3A+Quantity+and+gross+composition+of+milk+in+five+inbred+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Early development in mice. Iv: Quantity and gross composition of milk in five inbred strains.</a> Physiol Behav. 40 (4), 431-435 (1987).</li>
<li>Falconer, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+production+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Sci%22%5BJournal%5D)">Milk production in mice.</a> J Agric Sci. 37 (3), 224-235 (1947).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 مل قوارير مبردة</td><td>Corning</td><td>430658</td><td>مفضل لجمع الحليب المبكر</td></tr><tr><td>1 مل حقنة</td><td>Exel</td><td>26048</td><td></td></tr><tr><td>2 مل أنبوب تجميع أجهزة الطرد المركزي</td> الدقيقة <td>فيشر سينتيفيك</td><td>02-681-344</td><td>مفضل لجمع الحليب في الذروة والمتأخرة</td></tr><tr><td>18 جرام إبرة تحت الجلد</td><td>BD PrecisionGlide</td><td>305195</td><td></td></tr><tr><td>27 جرام إبرة تحت</td><td>الجلد BD PrecisionGlide</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>الكحول الإعدادية مسح</td><td>هانيويل</td><td>154818</td><td></td></tr><tr><td>Bio-Rad بروتين فحص صبغ كاشف الصبغة المركز</td><td>Bio-Rad</td><td>5000006</td><td></td></tr><tr><td>ألبومين مصل الأبقار</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A2153</td><td></td></tr><tr><td>Immobilon -P PVDF غشاء</td><td>Immobilon</td><td>IPVH00010</td><td></td></tr><tr><td>الكيتامين</td><td>Dechra</td><td>1000001250</td><td>تم شراؤها عبر المكتب الفيترناري &nbsp;</td></tr><tr><td>شريط وضع العلامات في المختبر</td><td>VWR International</td><td>89097</td><td></td></tr><tr><td>مجموعة فحص اللاكتوز</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MAK487</td><td></td></tr><tr><td>تركيبات البولي بروبيلين الشائكة الصغيرة</td><td>Cole-Parmer Instrument Company</td><td>6365-90</td><td></td></tr><tr><td>نظام غذائي ماوس</td><td>مختبر دايت</td><td>5015</td><td></td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-Tris جل البروتين الصغير ، 4 & ndash ؛ 12٪</td><td>Invitrogen</td><td>NP0335BOX</td><td></td></tr><tr><td>Optixcare Eye Lube</td><td>Aventix</td><td>N / A</td><td>تم شراؤها عبر Veternarian Office&nbsp;</td></tr>تم <tr><td>شراء الأوكسيتوسين</td><td>Bimeda</td><td>1OXY015</td><td>عبر المكتب النباتي &nbsp;</td></tr><tr><td>نصائح ماصة P200</td><td>أنابيب جيلسون</td><td>F1733001</td><td></td></tr><tr><td>PVC: 1/8 '' معرف</td><td>VWR International</td><td>MFLX07407-75 & nbsp ؛</td><td></td></tr><tr><td>الأنابيب البلاستيكية: 5/32 '' معرف</td><td>VWR الدولية</td><td>MFLX07407-77</td><td></td></tr><tr><td>سدادة الحاجز</td><td>Chemglass Life Sciences</td><td>CG-3022-91</td><td></td></tr><tr><td>مضخة فراغ</td><td>Drummond Scientific Co.</td><td>P-103635</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Akorn Animal Health</td><td>NDC 59399-110-20</td><td>تم شراؤها عبر المكتب النباتي &nbsp ؛</td></tr></tbody></table>

تقنية فعالة لشخص واحد لأخذ عينات الحليب من فئران المختبر

An Efficient Single-Person Technique for Milk Sampling from Laboratory Mice

باستخدام هذه التقنية ، نجحنا في أخذ عينات كافية من الحليب في أوقات مختلفة خلال الرضاعة لمدة 21 يوما. نعتبر أن يوم الولادة هو يوم ما بعد الولادة 1 (PD1) ، وفي هذا العمل ، أخذنا عينات من الحليب على PD2 (الرضاعة المبكرة) و PD10 (ذروة الرضاعة) ، ن = 4 لكل منهما. حصلنا بشكل مريح على 0.1-0.5 مل من الحليب من كل سد (الشكل 1 د). للتحقق من صحة هذه الطريقة ، قمنا بقياس التركيب الإجمالي للمغذيات الكبيرة لعينات الحليب هذه وقارنا الاختلافات بين الحليب الذي تم جمعه في وقت مبكر وذروة الرضاعة باستخدام اختبار Student's t.
وجدنا أن متوسط تركيز اللاكتوز في الحليب بلغ 12.3 ± 0.6 جم / لتر في PD2 و 12.0 ± 0.9 جم / لتر في PD10 (الجدول 1). كانت نسبة دهون الحليب 26.0 ± 1.0٪ و 33.4 ± 2.5٪ على PD2 و PD10 على التوالي. كان تركيز الدهون 174.4 ± 7.1 جم / لتر على PD2 وأعلى بكثير ، 224.4 ± 17.1 جم / لتر في PD10 (الجدول 1). كان متوسط محتويات البروتين 70.1 ± 5.2 جم / لتر على PD2 و 75.1 ± 2.6 جم / لتر في PD10 (الجدول 1). على الرغم من أن محتوى بروتين الحليب الكلي لم يكن مختلفا بين PD2 و PD10 ، إلا أن الوفرة النسبية لبروتين الحليب الفردي اختلفت. على وجه التحديد ، كان αS1-الكازين وبروتين مصل اللبن الحمضي أعلى في حليب PD10 منه في حليب PD2 (ص &lt; 0.05) ، بينما أظهر β-كازين (ص &lt; 0.05) وفرة أعلى في PD2 من PD10 (الشكل 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67669/67669fig2.jpg"> 
الشكل 2: تحليل بروتين الحليب. (أ) تحليل Coomassie Blue-stained PAGE للحليب الذي تم جمعه في PD2 و PD10. تم تحديد البروتين كما هو موضحسابقا 14. (ب) تم تحليل إشارات البروتين الفردية في ImageJ وتطبيعها إلى البروتين الكلي الملطخ. تم التعبير عن النتائج كمتوسط مع أشرطة الخطأ القياسية ونقاط البيانات الفردية كنقاط. تمت مقارنة متوسط وفرة كل بروتين في PD2 و PD10 باستخدام اختبار Student's T ثنائي الذيل. * ص &lt; 0.05 ، ن = 4. الاختصارات: PAGE = الرحلان الكهربائي لهلام بولي أكريلاميد ؛ PDn = يوم ما بعد التسليم n. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67669/67669fig1large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="2"></td>
			<td>متوسط</td>
			<td>التسويق عبر محرك البحث</td>
			<td>قيمة p</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">لاكتوز (غ/لتر)</td>
			<td>الرقم 2</td>
			<td>12.3</td>
			<td>0.6</td>
			<td rowspan="2">0.75</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>الرقم 10</td>
			<td>12.0</td>
			<td>0.9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">دهن (غ/لتر)</td>
			<td>الرقم 2</td>
			<td>174.4</td>
			<td>7.1</td>
			<td rowspan="2">0.04</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>الرقم 10</td>
			<td>224.4</td>
			<td>17.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">بروتين (غ/لتر)</td>
			<td>الرقم 2</td>
			<td>70.1</td>
			<td>5.2</td>
			<td rowspan="2">0.42</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>الرقم 10</td>
			<td>75.1</td>
			<td>2.6</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
الجدول 1: تكوين المغذيات الكبيرة للحليب الذي تم جمعه في PD2 و PD10. تم تحليل النتائج ، المعبرا عنها كمتوسط وخطأ معياري للمتوسط (SEM) ، لفحص آثار يوم الرضاعة على تكوين الحليب باستخدام اختبار t للطالب ثنائي الذيل ، n = 4.

Rodent models have been widely used in biology since the early 20th century to study basic physiology and biochemical mechanisms. In lactation and ...

an-efficient-single-person-technique-for-milk-sampling-from

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

هذه الطريقة توضح كيفية تشريح الثدي وتقييم وتطوير الغدة ظيفة من الفئران. ويتم تقييم الغدد الثديية رفعه لدرجة تطور استخدام جبل كامل بينما يتم تقييم قذف الحليب باستخدام الأوكسيتوسين المستندة إلى انكماش الخلية myoepithelial مقايسة.

تقييم التنمية وظيفة الغدة الثديية في نماذج الماوس

يسهل جمع الحليب من النماذج الحيوانية طرق البحث المختلفة: فهم المناعة السلبية ، وتحديد مسببات الأمراض المسؤولة عن الانتقال الرأسي ، ومن خلال استخدام الفئران المعدلة وراثيا ، حتى الإنتاج التجاري للبروتينات الموجودة في حليب الثدي البشري. نوضح هنا طريقة بسيطة لجمع الحليب في الفئران وغزلان ريفز مونتجاك.

طرق جمع الحليب لالفئران وريفز &#39;Muntjac الغزلان

الحليب هو مصدر أساسي لتغذية حديثي الولادة. قد يوفر تحليل مكونات الحليب نظرة ثاقبة لعوامل الأم التي تؤثر على صحة النسل. يصف هذا البروتوكول طريقة يدوية لجمع عينات الحليب من الفئران المرضعة ، والتي يمكن استخدامها بعد ذلك لمزيد من التحليل النهائي.

الحليب مجموعة في الفئران عن طريق أنابيب شعرية وتقدير من الحليب الدسم المحتوى من قبل Creamatocrit

مطلوب تميع السائل المنوي للحيوانات المنوية أن يتحرر من هلام المنوي. وتوفر هذه الدراسة إجراءات جمع السائل المنوي من الجماع بعد انتهاء الأنثى التناسلي، وقياس الوقت تميع السائل المنوي.

جمع بعد التزاوج السائل المنوي من الإناث المسالك التناسلية وقياس لتسييل المني في الفئران

Hypofunction الغدة اللعابية نتيجة متكررة للعلاج بالإشعاع وأمراض المناعة الذاتية. التقييم استنساخه من وظيفة الغدة اللعابية في نماذج الماوس لهذه الأمراض تحديا تقنيا. وهنا يتم وصف طريقة بسيطة لقياس دقيق واستنساخه لإنتاج اللعاب في الفئران.

طريقة لقياس وظيفة الغدة اللعابية في الفئران

نقدم هنا بروتوكول أخذ عينات دم الذيل-نصيحة لجمع العينات متكررة في الفئران غير المقيد. هذا الأسلوب مفيداً لتقييم أنماط من إفراز الهرمون نابض ويمكن تكييفه لتحليل للعوامل الأخرى المتداولة.

كثرة أخذ عينات الدم الذيل-نصيحة في الفئران للتقييم لإفراز الهرمون نابض

وتفيد هذه الدراسة أخذ عينات الدم من الوريد الذيل في الفئران باستخدام نظام أنبوب استخراج بالمحجم مع النظارات المكبر. لدينا طريقة سهلة للممارسة ويمكن استخدامها لأخذ عينات من الدم تكرار في الفئران.

جمع الدم معدلة من الأوردة ذيل الفئران غير تخديره بنظام جمع الدم فراغ والنظارات المكبر

هنا ، نصف إعطاء الأدوية الموجهة بالماصة الدقيقة (MDA) كطريقة بديلة للتزقيم الفموي الذي يحفز البحث على تناول العلاجات بسهولة بأقل قدر من التوتر وعدم الراحة.

استخدام إعطاء الأدوية الموجهة بالماصات الدقيقة كطريقة بديلة للتزقيم الفموي في نماذج القوارض

هنا ، نصف الهيكل وإجراءات التشغيل ، بما في ذلك تدابير الاحتواء الميكروبي لمنشأة "الفئران البرية" باستخدام أخذ عينات الدم للتنميط المناعي كمثال.

إجراءات التشغيل والاحتواء الحيوي لمنشأة لفئران المختبر ذات الميكروبيوم الطبيعي: إجراء التنميط المناعي

هنا ، نقدم بروتوكولا لتقنية جمع الدم المحسنة في الأشخاص الذين يخضعون للفئران من خلال بزل وريد الوجه باستخدام إبرة الوخز. نستخدم هذه التقنية جنبا إلى جنب مع تقييم قياس التدفق الخلوي لتوصيف الأنماط الظاهرية الخلوية للسلالات المعدلة وراثيا والوراثية والمراسلة. كما أنها مناسبة لتحليل السيتوكين في الدم ودراسات مرض السكري.

بزل وريد الوجه لجمع دم الفئران

تعلم تقنية فعالة لأخذ عينات الحليب من فئران المختبر باستخدام جهاز شفط مفرغ. تتيح الطريقة لشخص واحد جمع 0.1–0.5 مل في أقل من 10 دقائق، مما يحسّن دقة أبحاث الرضاعة.

تقنية فعالة لشخص واحد لأخذ عينات الحليب من فئران المختبر

استكشف المزيد من الفيديوهات