Name: العد وتحديد صلاحية خلايا مثقف (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-06-23T15:41:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: تعلم تقنيات عد الخلايا المثقفة وتحديد حيويتها باستخدام الهيموسيتوميتر واختبار Trypan Blue. هذه الطريقة تساعد الباحثين على توحيد ظروف الزراعة وضمان دقة النتائج التجريبية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

بروتوكول النص الكامل لهذا النهج التجريبي هو متاح في <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract" target="_blank">البروتوكولات الحالية في بيولوجيا الخلية</a> .

ليس لدى المؤلفين أي تعارض مصالح للإفصاح عنه.

العد وتحديد صلاحية خلايا مثقف

Counting and Determining the Viability of Cultured Cells

تحديد عدد الخلايا في الثقافة هي مهمة في توحيد الشروط والثقافة في أداء التجارب الكميات دقيقة. A عدادة الكريات هي شريحة زجاجية سميكة مع المنطقة الوسطى التي صممت لتكون غرفة الفرز. يتم تطبيق نظام التعليق الخلية إلى منطقة محددة وعدها بذلك يمكن حساب كثافة الخلية.

تحديد عدد الخلايا في الثقافة هي مهمة في توحيد الشروط والثقافة في أداء التجارب الكميات دقيقة. في هذا الفيديو ، ونظهر كيف يتم عد الخلايا باستخدام عدادة الكريات.

يعد تحديد عدد الخلايا في المزرعة أمراً هاماً لتوحيد ظروف المزرعة وإجراء تجارب تقدير كمي دقيقة. ...

يعد تحديد عدد الخلايا والمزرعة أمراً هاماً في توحيد ظروف المزرعة وعند إجراء تجارب تتطلب أعداداً دقيقة من الخلايا. سنوضح لكم هنا كيفية عد الخلايا باستخدام مقياس كرات الدم (hemo cytometer)، وحساب تركيز الخلايا الموجودة في المعلق. كما سنوضح لكم كيفية تحديد عدد الخلايا الحية الموجودة في مزرعتكم باستخدام مقايسة حيوية صبغة Trypan Blue.مرحباً، أنا ريكي من مختبر Dr.LAN في شبكة مختبرات الباثولوجيا الجزيئية في شرق تينيسي. سأوضح لكم اليوم كيفية عد الخلايا في المعلق وكيفية تحديد حيويتها. ولتجهيز مقياس كرات الدم (hemo cytometer) لعد الخلايا، يجب أولاً تنظيف سطحه والغطاء الزجاجي المصاحب له باستخدام 70% ethanol.يجب أن تكون الشريحة والغطاء الزجاجي نظيفتين وجافتين وخاليتين من الوبر وبصمات الأصابع وعلامات الماء. بعد ذلك، بلل حواف مقياس كرات الدم (hemo cytometer) قليلاً بماء الصنبور واضغط الغطاء الزجاجي فوقه. يجب أن يستقر الغطاء الزجاجي بشكل متساوٍ فوق منطقة العد الفضية.نحن الآن مستعدون لتحضير معلق الخلايا من أجل عملية العد. أولاً، إذا كانت الخلايا قد نمت في مستنبتات أحادية الطبقة، فقم بفصل الخلايا عن سطح الطبق باستخدام التريبسين كما هو موضح في الفيديو الخاص بفصل الخلايا. وبمجرد انفصال الخلايا عن الطبق، قم بتخفيفها حسب الحاجة للحصول على معلق متجانس.تأكد من تشتيت أي تكتلات في المعلق عند استخدام مقياس

counting-and-determining-the-viability-of-cultured-cells

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

مطلوب معرفة العدد الدقيق للخلايا قابلة للحياة لكثير من التلاعب زراعة الأنسجة. هذا البروتوكول يصف كيفية التفريق بين الخلايا الحية والميتة وتحديد الخلايا باستخدام عدادة الكريات. على الرغم من أنه يصف العد الجذعية العصبية البشرية / السلائف الخلايا (hNSPCs) ، ويمكن استخدامه لأنواع الخلايا الأخرى.

عد الخلايا الجذعية العصبية البشرية

لجنة مكافحة خلية الصولجان هو جهاز محمول باليد الآلية التي يمكن استخدامها لحساب عدد الخلايا ، ورصد حجم الخلية وقطر ، كما يمكن استخدامها للتحقق من صحة ونوعية السكان الخلوية من ثقافة إلى أخرى.

تحديد عدد الخلايا خلال زراعة الخلايا باستخدام خلية مكافحة الصولجان

وقد أنشئت انطباق مقايسة لتقييم جدوى مولد الرمع الإنجابية لأكثر من 50 عاما. نحن هنا لشرح اجراءات عامة لأداء مولد الرمع مقايسة مع خلايا ملتصقة.

مولد الرمع الفحص : خلايا منتسب

ى Moxi مصغر عداد خلية الآلي أداة الرواية التي تجمع بين مبدأ كولتر مع براءة اختراع تكنولوجيا الاستشعار الأغشية الرقيقة وخوارزمية البرمجيات الاحتكارية لأداء التحجيم والفرز من طائفة واسعة من حجم الجزيئات، وكذلك لتحديد الصحة العامة للmonodisperse الثقافات خلايا الثدييات. هذا البروتوكول ويصف استخدام هذه الأداة لحساب وتقييم الصحة للثقافات الخلية.

تحديد عدد خلايا الثدييات، وحجم الخلية والصحة الخلية باستخدام Z Moxi خلية الآلي البسيطة عداد

وغالبا ما يتم فحص المركبات العلاجية الأولى في المختبر مع المقايسات جدوى. عدد الخلايا أعمى من قبل المراقب الإنسان يمكن أن تكون حساسة للغاية للتغيرات صغيرة في عدد الخلايا ولكن لا تقييم وظيفة. المقايسات الجدوى المحوسبة، كما هو موضح هنا، يمكن تقييم كل من هيكل وظيفة بطريقة موضوعية.

فحوصات قابلية للخلايا في الثقافة

يصف هذا البروتوكول استخدام ثلاث طرق مختلفة لتحليل تكاثر الخلايا في خطوط خلايا سرطان الثدي. يتضمن ذلك استخدام عد الخلايا التقليدي ، وقابلية الخلايا القائمة على التلألؤ ، وعد الخلايا من خلال استخدام جهاز تصوير الخلايا. يوفر كل منها مزايا للقياس القابل للتكرار لتكاثر الخلايا.

مقارنة بين ثلاث طرق مختلفة لتحديد انتشار الخلايا في خطوط خلايا سرطان الثدي

تصف هذه الورقة القياس الكمي لمقياس الدم والصور المجهرية للهجرة / الغزو من خلال اثنين من المكونات الإضافية الجديدة مفتوحة المصدر ImageJ حاسبة تركيز الخلية وعداد مقايسة الهجرة.  علاوة على ذلك ، فإنه يصف بروتوكولات الحصول على الصور ومعايرتها بالإضافة إلى مناقشة متطلبات إدخال المكونات الإضافية بالتفصيل.

الآلي الكمي وتحليل إجراءات الفرز الخلية باستخدام يماغيج الإضافات

غالباً ما يكون من الضروري تقييم السمية الخلوية المحتملة لمجموعة من المركبات على الخلايا المستزرعة. هنا، ونحن نصف استراتيجية لفحص موثوق للمركبات السامة في شكل 96 جيدا.

استراتيجية لتحديد المركبات التي تؤثر على نمو الخلايا والبقاء على قيد الحياة في خلايا الثدييات المستزرعة في الإنتاجية المنخفضة إلى المتوسطة

يوفر هذا البروتوكول إرشادات شاملة للإعداد والمراقبة الكمية للمزارع المشتركة ، بما في ذلك البكتيريا الزرقاء التي تفرز السكر ذاتية التغذية ضوئيا والخمائر غير المتجانسة.

تجميع وقياس المزارع المشتركة التي تجمع بين الخميرة غير المتجانسة والبكتيريا الزرقاء التي تفرز السكر الضوئية

هنا ، نقدم بروتوكولا لتحديد البقاء على قيد الحياة بعد الإجهاد في عينات الخميرة. يستخدم الاختبار صبغتين فلوريتين ، SYTO 9 ويوديد البروبيديوم (PI) ، لتحديد سلامة غشاء البلازما. يستخدم قياس التدفق الخلوي لتوفير تقديرات كمية وقابلة للتكرار لكسور الخلايا الحية والميتة والتالفة لعينات ما بعد الإجهاد التأكسدي.

مقايسة LIVE / DEAD محسنة إلى جانب قياس التدفق الخلوي لقياس البقاء على قيد الحياة بعد الإجهاد في خلايا الخميرة

تعلم تقنيات عد الخلايا المثقفة وتحديد حيويتها باستخدام الهيموسيتوميتر واختبار Trypan Blue. هذه الطريقة تساعد الباحثين على توحيد ظروف الزراعة وضمان دقة النتائج التجريبية.

العد وتحديد صلاحية خلايا مثقف

استكشف المزيد من الفيديوهات