dopamine-release-at-individual-presynaptic-terminals-visualized-with

Dopamine Release at Individual Presynaptic Terminals Visualized with FFNs

The nervous system transmits signals between neurons via neurotransmitter release during synaptic vesicle fusion. To observe neurotransmitter uptake and ...

Columbia University

Columbia College

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A key question in understanding mechanisms of neurotransmitter release is whether the fusion pore of a synaptic vesicle regulates the amount of transmitter released during exocytosis. We measured dopamine release from small synaptic vesicles of rat cultured ventral midbrain neurons using carbon fiber amperometry. Our data indicate that small synaptic vesicle fusion pores flicker either once or multiple times in rapid succession, with each flicker releasing approximately 25-30% of vesicular dopamine. The incidence of events with multiple flickers was reciprocally regulated by phorbol esters and staurosporine. Thus, dopamine neurons regulate the amount of neurotransmitter released by small synaptic vesicles by controlling the number of fusion pore flickers per exocytotic event. This mode of exocytosis is a potential mechanism whereby neurons can rapidly reuse vesicles without undergoing the comparatively slow process of recycling.

Dopamine neurons release transmitter via a flickering fusion pore.

Une question cl&eacute; dans la compr&eacute;hension des m&eacute;canismes de lib&eacute;ration des neurotransmetteurs est si le pore de fusion d&#39;une v&eacute;sicule synaptique r&eacute;gule la quantit&eacute; de transmetteur lib&eacute;r&eacute; au cours de l&#39;exocytose. Nous avons mesur&eacute; la lib&eacute;ration de dopamine, de petites v&eacute;sicules synaptiques des neurones m&eacute;senc&eacute;phalique ventral de rat mis en culture &agrave; l&#39;aide de fibre de carbone amp&eacute;rom&eacute;trie. Nos donn&eacute;es indiquent que les pores de fusion de petites v&eacute;sicules synaptiques clignotent deux fois ou plusieurs fois &agrave; intervalles rapproch&eacute;s, avec chacun scintillent lib&eacute;rer environ 25-30 % de la dopamine v&eacute;siculaire. L&#39;incidence d&#39;&eacute;v&eacute;nements avec plusieurs pics &eacute;tait mutuellement r&eacute;gul&eacute;e par la staurosporine et esters de phorbol. Ainsi, les neurones dopaminergiques r&eacute;glementent la quantit&eacute; de neurotransmetteur lib&eacute;r&eacute; de petites v&eacute;sicules synaptiques en contr&ocirc;lant le nombre de clignote de pore de fusion par &eacute;v&eacute;nement exocytotique. Ce mode d&#39;exocytose est un m&eacute;canisme potentiel par lequel les neurones peuvent r&eacute;utiliser rapidement v&eacute;sicules sans subir le processus relativement lent du recyclage.

Neurones dopaminergiques sortie &eacute;metteur par un pore de fusion vacillante.

Dopamin-Neuronen Freisetzung Sender &#xFC;ber ein Flackern Fusionspore.

Una domanda chiave nei meccanismi di comprensione del rilascio di neurotrasmettitore &egrave; se il poro di fusione di una Vescicola sinaptica regola la quantit&agrave; di trasmettitore liberato durante esocitosi. Abbiamo misurato il rilascio di dopamina da piccole vescicole sinaptiche dei neuroni mesencefalo ventrale ratto coltivato utilizzando fibra di carbonio amperometria. I nostri dati indicano che i pori di fusione piccola Vescicola sinaptica sfarfallano o una volta o pi&ugrave; volte in rapida successione, con ogni sfarfallano rilasciando circa 25-30% di dopamina vescicolare. L&#39;incidenza di eventi con pi&ugrave; sfarfalla reciprocamente era regolata da staurosporine ed esteri del forbolo. Cos&igrave;, i neuroni della dopamina regolano la quantit&agrave; di neurotrasmettitore rilasciato da piccole vescicole sinaptiche controllando il numero di fusione poro sfarfalla per questo evento. Questa modalit&agrave; di esocitosi &egrave; un potenziale meccanismo per cui i neuroni possono riutilizzare rapidamente le vescicole senza subire il relativamente lento processo di riciclaggio.

I neuroni della dopamina rilasciano trasmettitore tramite un poro di fusione tremolante.

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&#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xB274;&#xB7F0; &#xAE5C;&#xBC15;&#xAC70;&#xB9AC;&#xB294; &#xD4E8;&#xC804; &#xAE30; &#xACF5; &#xD1B5;&#xD574; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30;&#xB97C; &#xB193;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Una pregunta clave en los mecanismos de comprensi&oacute;n de la liberaci&oacute;n de neurotransmisores es si el poro de la fusi&oacute;n de una ves&iacute;cula sin&aacute;ptica regula la cantidad de transmisor liberado durante la exocitosis. Medimos la liberaci&oacute;n de dopamina de peque&ntilde;as ves&iacute;culas sin&aacute;pticas de las neuronas de mesenc&eacute;falo ventral rata cultivada mediante Amperometr&iacute;a de fibra de carbono. Nuestros datos indican que los poros de fusi&oacute;n de ves&iacute;culas sin&aacute;pticas peque&ntilde;as parpadean sea una vez o varias veces en r&aacute;pida sucesi&oacute;n, con cada parpadean liberando aproximadamente 25-30% de la dopamina vesicular. La incidencia de eventos con m&uacute;ltiples parpadea rec&iacute;procamente fue regulada por staurosporina y &eacute;steres de forbol. As&iacute;, las neuronas dopamin&eacute;rgicas regulan la cantidad de neurotransmisor liberado por peque&ntilde;as ves&iacute;culas sin&aacute;pticas controlando el n&uacute;mero de parpadeos de poro de fusi&oacute;n por evento exocit&oacute;tico. Este modo de exocitosis es un mecanismo potencial por el que las neuronas r&aacute;pidamente pueden reutilizar las ves&iacute;culas sin sufrir el comparativamente lento proceso de reciclaje.

Las neuronas dopamin&eacute;rgicas liberan transmisor mediante un parpadeo poro de fusi&oacute;n.

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&Alpha;-synuclein &#x8FC7;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x6E38;&#x79BB;&#x513F;&#x8336;&#x915A;&#x80FA;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;

Dysregulation of dopamine homeostasis and elevation of the cytosolic level of the transmitter have been suggested to underlie the vulnerability of catecholaminergic neurons in Parkinson's disease. Because several known mutations in alpha-synuclein or overexpression of the wild-type (WT) protein causes familial forms of Parkinson's disease, we investigated possible links between alpha-synuclein pathogenesis and dopamine homeostasis. Chromaffin cells isolated from transgenic mice that overexpress A30P alpha-synuclein displayed significantly increased cytosolic catecholamine levels as measured by intracellular patch electrochemistry, whereas cells overexpressing the WT protein and those from knock-out animals were not different from controls. Likewise, catechol concentrations were higher in L-DOPA-treated PC12 cells overexpressing A30P or A53T compared with those expressing WT alpha-synuclein, although the ability of cells to maintain a low cytosolic dopamine level after L-DOPA challenge was markedly inhibited by either protein. We also found that incubation with low-micromolar concentrations of WT, A30P, or A53T alpha-synuclein inhibited ATP-dependent maintenance of pH gradients in isolated chromaffin vesicles and that the WT protein was significantly less potent in inducing the proton leakage. In summary, we demonstrate that overexpression of different types of alpha-synuclein disrupts vesicular pH and leads to a marked increase in the levels of cytosolic catechol species, an effect that may in turn trigger cellular oxyradical damage. Although multiple molecular mechanisms may be responsible for the perturbation of cytosolic catecholamine homeostasis, this study provides critical evidence about how alpha-synuclein might exert its cytotoxicity and selectively damage catecholaminergic cells.

Alpha-synuclein overexpression increases cytosolic catecholamine concentration.

Le d&eacute;r&egrave;glement de l&#39;hom&eacute;ostasie de la dopamine et l&#39;&eacute;l&eacute;vation du niveau cytosolique de l&#39;&eacute;metteur ont &eacute;t&eacute; sugg&eacute;r&eacute;s &agrave; la base de la vuln&eacute;rabilit&eacute; des neurones cat&eacute;cholaminergiques dans la maladie de Parkinson. Car plusieurs mutations connues en alpha-synucl&eacute;ine ou la surexpression de la prot&eacute;ine de type sauvage (WT) provoque des formes familiales de la maladie de Parkinson, nous avons &eacute;tudi&eacute; des liens possibles entre la pathogen&egrave;se de l&#39;alpha-synucl&eacute;ine et l&#39;hom&eacute;ostasie de la dopamine. Cellules chromaffines isol&eacute;es de souris transg&eacute;niques qui surexpriment A30P alpha-synucl&eacute;ine affiche nettement augment&eacute; les niveaux de cat&eacute;cholamines cytosolique mesur&eacute;e par &eacute;lectrochimie patch intracellulaire, alors que les cellules surexprimant la prot&eacute;ine WT et ceux de knock-out animaux n&#39;&eacute;tait pas diff&eacute;rents des t&eacute;moins. De m&ecirc;me, les concentrations de cat&eacute;chol &eacute;taient plus &eacute;lev&eacute;es dans les cellules PC12 trait&eacute;s par L-DOPA L sur-exprimant A30P ou A53T compar&eacute;es avec celles exprimant WT alpha-synucl&eacute;ine, bien que la capacit&eacute; des cellules &agrave; maintenir un niveau de dopamine cytosolique faible apr&egrave;s le d&eacute;fi de la L-DOPA est fortement inhib&eacute;e par une prot&eacute;ine. Nous avons &eacute;galement constat&eacute; que l&#39;incubation avec des concentrations micromolaires-basses de WT, A30P ou A53T alpha-synucl&eacute;ine inhib&eacute;e entretien ATP-d&eacute;pendante des gradients de pH dans des v&eacute;sicules chromaffines isol&eacute;es et que la prot&eacute;ine WT est beaucoup moins puissante en provoquant la fuite de protons. En r&eacute;sum&eacute;, nous d&eacute;montrons que la surexpression de diff&eacute;rents types d&#39;alpha-synucl&eacute;ine perturbe pH v&eacute;siculaire et conduit &agrave; une augmentation marqu&eacute;e dans les niveaux des esp&egrave;ces cytosolique cat&eacute;chol, un effet qui peut en tourne d&eacute;clencheur cellulaire oxyradicaux dommages. Bien que plusieurs m&eacute;canismes mol&eacute;culaires peuvent &ecirc;tre responsables de la perturbation de l&#39;hom&eacute;ostasie des cat&eacute;cholamines cytosolique, cette &eacute;tude fournit des preuves critiques sur alpha-synucl&eacute;ine pourrait exercer sa cytotoxicit&eacute; et endommager s&eacute;lectivement les cellules cat&eacute;cholaminergiques.

Surexpression de l&#39;alpha-synucl&eacute;ine augmente la concentration des cat&eacute;cholamines cytosolique.

Dysregulation der Dopamin-Hom&ouml;ostase und Erh&ouml;hung der zellul&auml;ren Ebene des Senders haben wurden vorgeschlagen, um die Verwundbarkeit der Catecholaminergic Neuronen bei Parkinson-Krankheit zugrunde liegen. Da mehrere bekannte Mutationen in Alpha-Synuclein oder eine &Uuml;berexpression des Wildtyp (WT) Proteins bewirkt famili&auml;re Formen der Parkinson-Krankheit, untersuchten wir m&ouml;gliche Verbindungen zwischen Alpha-Synuclein-Pathogenese und Dopamin-Hom&ouml;ostase. Chromaffin Zellen isoliert von transgenen M&auml;usen, die A30P Alpha-Synuclein deutlich angezeigt &uuml;berexprimiert h&ouml;here Zytosolischer Katecholamine intrazellul&auml;ren Patch Elektrochemie gemessen, w&auml;hrend Zellen &uuml;berexprimierenden das WT-Protein und die von Knock-out-Tiere waren nicht anders als Steuerelemente. Ebenso waren Brenzcatechin Konzentrationen h&ouml;her L-DOPA behandelten PC12-Zellen, die overexpressing A30P oder A53T mit jenen Ausdr&uuml;cken WT Alpha-Synuclein, verglichen, obwohl die F&auml;higkeit der Zellen, die eine niedrige Zytosolische Dopamin nach DOPA Challenge aufrechtzuerhalten durch entweder Protein deutlich gehemmt wurde. Wir fanden auch, dass Inkubation mit niedrig-micromolar Konzentrationen von WT, A30P oder A53T Alpha-Synuclein ATP-abh&auml;ngige Wartung pH-Gradienten in isolierten chromaffin Vesicles gehemmt und das WT-Protein wesentlich weniger potenten in induzierende Proton Leckage war. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen zeigen wir, dass eine &Uuml;berexpression von verschiedenen Arten von Alpha-Synuclein vesikul&auml;ren pH-Wert st&ouml;rt und f&uuml;hrt zu einem deutlichen Anstieg der Ebenen Zytosolische Brenzcatechin Arten, ein Effekt, der im Mai verwandeln Ausl&ouml;ser zellul&auml;ren Oxyradical Schaden. Obwohl mehrere Molekulare Mechanismen f&uuml;r die St&ouml;rung der Hom&ouml;ostase Zytosolischer Katecholamine verantwortlich sein k&ouml;nnen, bietet diese Studie kritische Beweise dar&uuml;ber, wie Alpha-Synuclein aus&uuml;ben, die Zytotoxizit&auml;t und selektiv Catecholaminergic Zellen besch&auml;digen k&ouml;nnte.

Alpha-Synuclein &Uuml;berexpression erh&ouml;ht Zytosolischer Katecholamine Konzentration.

Disregolazione dell&#39;omeostasi della dopamina e l&#39;elevazione del livello citosolico del trasmettitore sono stati suggeriti per sottendono la vulnerabilit&agrave; dei neuroni catecholaminergic nel morbo di Parkinson. Perch&eacute; diverse mutazioni conosciute in alfa-sinucleina o iperespressione della proteina wild-type (WT) provoca forme familiari del morbo di Parkinson, abbiamo studiato i possibili legami tra alfa-sinucleina patogenesi e l&#39;omeostasi della dopamina. Cellule cromaffini isolate da topi transgenici che iperesprimono A30P alfa-sinucleina visualizzato significativamente aumentati livelli di catecolamina citosolica come misurato da elettrochimica patch intracellulare, considerando che le cellule con sovraesprimono relativa proteina WT e quelli da knock-out gli animali non erano diversi dai controlli. Similarmente, catecolo concentrazioni erano superiori in cellule PC12 trattati con L-DOPA all A30P o A53T rispetto a quelli che esprimono WT alfa-sinucleina, sebbene la capacit&agrave; delle cellule di mantenere un livello di dopamina citosolico basso dopo la sfida di l-dopa era marcatamente inibita da una proteina. Abbiamo anche trovato che incubazione con concentrazioni micromolar bassa di WT, A30P o A53T alfa-sinucleina inibito manutenzione ATP-dipendente di gradienti di pH in vescicole cromaffini isolate e che la proteina WT era significativamente meno potente nell&#39;indurre la perdita del protone. In sintesi, ci dimostrano che sconvolge la sovraespressione di diversi tipi di alfa-sinucleina pH vescicolare e porta ad un marcato aumento dei livelli di specie citosolico catecolo, un effetto che pu&ograve; nel girare a danni cellulari oxyradical trigger. Anche se molteplici meccanismi molecolari possono essere responsabili della perturbazione dell&#39;omeostasi delle catecolamine citosolico, questo studio fornisce la prova critica circa come la alfa-sinucleina potrebbe esercitare la sua citotossicit&agrave; e danneggiare selettivamente le cellule catecholaminergic.

Sovraespressione di alfa-sinucleina aumenta la concentrazione citosolica delle catecolamine.

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&#x306F; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x3068;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;A30P &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x30CE;&#x30B6;&#x30F3; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;WT &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x304B;&#x3089;&#x904E;&#x5270;&#x7D30;&#x80DE;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x6FC3;&#x5EA6; L-DOPA &#x30C1;&#x30E3;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x5F8C;&#x4F4E;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x904E;&#x5270;&#x306E; A30P &#x307E;&#x305F;&#x306F; A53T &#x3068; &alpha; &#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; WT &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x6BD4;&#x8F03; L DOPA &#x6271;&#x308F; PC12 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9AD8;&#x3044;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; WT&#x3001;A30P&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F; A53T &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4F4E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068; pH &#x52FE;&#x914D;&#x5206;&#x96E2;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E; ATP &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x7DAD;&#x6301;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068; WT &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x6F0F;&#x308C;&#x3060;&#x3063;&#x305F;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6C34;&#x75B1;&#x6027; pH &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x4E71;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC; &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30FC; oxyradical &#x640D;&#x50B7;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x7A2E;&#x3067;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0; &#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x3001;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x542B;&#x6709;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&Alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; Dysregulation &#xBC0F; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30;&#xC758; cytosolic &#xC218;&#xC900; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; catecholaminergic &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xCDE8;&#xC57D;&#xC810;&#xC744; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC54C;&#xD30C;-synuclein &#xB610;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; (WT) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; overexpression&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1;&#xC758; &#xAC00;&#xC871; &#xD615;&#xD0DC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC54C;&#xD30C; synuclein pathogenesis &#xBC0F; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD06C;&#xAC8C; &#xD45C;&#xC2DC; A30P &#xC54C;&#xD30C; synuclein overexpress &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xD06C;&#xB86C; &#xCE5C;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xAC00; cytosolic &#xCE74; &#xD14C; &#xCF5C; &#xC544;&#xBBFC; &#xC218;&#xC900; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD328;&#xCE58; &#xC804;&#xAE30; &#xD654;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C;, &#xBC18;&#xBA74; &#xC140; overexpressing WT &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xADF8; &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, catechol &#xB18D;&#xB3C4; &#xB192;&#xC740; L DOPA &#xCDE8;&#xAE09; PC12 &#xC138;&#xD3EC; L-DOPA &#xB3C4;&#xC804; &#xD6C4; &#xB0AE;&#xC740; cytosolic &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC140;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; &#xC911; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xC800;&#xD574;&#xB294; &#xBE44;&#xB85D; overexpressing A30P &#xB610;&#xB294; A53T WT &#xC54C;&#xD30C;-synuclein, &#xD45C;&#xD604; &#xADF8;&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; WT, A30P, &#xB610;&#xB294; A53T &#xC54C;&#xD30C;-synuclein&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; micromolar &#xB18D;&#xB3C4;&#xC640; &#xBD80; &#xD654; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xD06C;&#xB86C; &#xCE5C;&#xD654; &#xC18C;&#xD3EC;&#xC5D0; pH &#xAE30;&#xC6B8;&#xAE30;&#xC758; ATP &#xC885;&#xC18D; &#xC720;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; WT &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A4; &#xB204;&#xC124; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB35C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xC54C;&#xD30C;-synuclein&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC758; overexpression &#xBC29;&#xD574; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; pH &#xBC0F; cytosolic catechol &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xC124;&#xC815; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xC138;&#xD3EC; oxyradical &#xC190;&#xC0C1; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; cytosolic &#xCE74; &#xD14C; &#xCF5C; &#xC544;&#xBBFC; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;&#xC758; &#xC12D; &#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC774; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC29;&#xBC95; &#xC54C;&#xD30C; synuclein&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xBC1C;&#xD718; &#xD558; &#xACE0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; catecholaminergic &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC54C;&#xD30C; synuclein overexpression cytosolic &#xCE74; &#xD14C; &#xCF5C; &#xC544;&#xBBFC; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00;.

Desregulaci&oacute;n de la homeostasis de la dopamina y la elevaci&oacute;n del nivel del citosol del transmisor se han sugerido que subyacen a la vulnerabilidad de las neuronas catecolamin&eacute;rgicos en la enfermedad de Parkinson. Debido a que varias mutaciones conocidas en alfa-sinucle&iacute;na o sobreexpresi&oacute;n de la prote&iacute;na de tipo salvaje (WT) provoca formas familiares de la enfermedad de Parkinson, investigamos posibles v&iacute;nculos entre la patogenesia de la alfa-sinucle&iacute;na y la homeostasis de la dopamina. C&eacute;lulas cromafines aisladas de ratones transg&eacute;nicos que sobreexpresan A30P alfa-sinucle&iacute;na muestra significativamente incrementado los niveles de catecolamina citos&oacute;lica medida por electroqu&iacute;mica parche intracelular, mientras que las c&eacute;lulas overexpressing la prote&iacute;na WT y los de knock-out animales no difer&iacute;an de los controles. Asimismo, catecol concentraciones fueron m&aacute;s altas en c&eacute;lulas PC12 tratados con L-DOPA sobreexpresando A30P o A53T en comparaci&oacute;n con las que expresan WT alfa-sinucle&iacute;na, aunque la capacidad de las c&eacute;lulas para mantener un nivel de dopamina citos&oacute;lica baja despu&eacute;s del desaf&iacute;o de la l-dopa marcado fue inhibida por cualquier prote&iacute;na. Tambi&eacute;n encontramos que incubaci&oacute;n con concentraciones bajas-micromolar de alfa-sinucle&iacute;na WT, A30P o A53T hab&iacute;a inhibido mantenimiento dependiente de ATP de gradientes de pH en ves&iacute;culas cromafines aislados y que la prote&iacute;na de peso fue significativamente menos potente en la inducci&oacute;n de la salida de protones. En Resumen, demostramos que la sobreexpresi&oacute;n de diferentes tipos de alfa-sinucle&iacute;na interrumpe pH vesicular y conduce a un marcado aumento en los niveles de especies citos&oacute;lica catecol, un efecto que puede girar a la activaci&oacute;n celular oxyradical da&ntilde;o. Aunque m&uacute;ltiples mecanismos moleculares pueden ser responsables de la perturbaci&oacute;n de la homeostasis de la catecolamina citos&oacute;lica, este estudio proporciona evidencia cr&iacute;tica sobre c&oacute;mo alfa-sinucle&iacute;na podr&iacute;a ejercer su citotoxicidad y da&ntilde;ar selectivamente las c&eacute;lulas catecolamin&eacute;rgicos.

Sobreexpresi&oacute;n de alfa-sinucle&iacute;na aumenta la concentraci&oacute;n citos&oacute;lica de la catecolamina.

&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C (PKC) &#x6D3B;&#x6027;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5374;&#x4E0D;&#x751A;&#x4E86;&#x89E3;&#x5230;&#x671F;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x81F3;&#x5C11; 12 PKC &#x4E9A;&#x578B;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x5B89;&#x57F9;&#x8BB0;&#x5F55;&#x55DC;&#x94EC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CF;&#x5B50;&#x513F;&#x8336;&#x915A;&#x80FA;&#x91CA;&#x653E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5E7F;&#x6CDB; PKC &#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x3001; rottlerin &#x4E00;&#x79CD;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53; PKC theta &#x548C; PKC &#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x91CF;&#x5B50;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x548C;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x523A;&#x6FC0;&#x6BCF;&#x6240;&#x8BB0;&#x5F55;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x6291;&#x5236;&#x975E;&#x5178;&#x578B;&#x548C;&#x5E38;&#x89C4;&#x7684; PKC &#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53C2;&#x6570;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x55DC;&#x94EC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709; PKC theta &#x548C;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7F3A; PKC theta&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E; PKC &#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x5C55;&#x51FA;&#x4F4E;&#x91CF;&#x5B50;&#x5927;&#x5C0F;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#xFF0C;&#x5BF9; rottlerin &#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236; PKC theta pseudosubstrate &#x5236;&#x4F5C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x7F3A;&#x4E4F; PKC theta &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; rottlerin &#x53CD;&#x5E94;&#x4E0D;&#x4E00;&#x79CD;&#x8865;&#x507F;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; rottlerin &#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BC1;&#x660E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5206;&#x6CCC;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x65B0;&#x578B; PKC &#x4E9A;&#x578B;&#xFF0C;PKC theta&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E94;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684; neurosecretion &#x6D3B;&#x52A8;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Theta PKC &#x6D3B;&#x6027;&#x4FDD;&#x6301;&#x6B63;&#x5E38;&#x91CF;&#x5B50;&#x5927;&#x5C0F;&#x5728;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x55DC;&#x94EC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Protein kinase C (PKC) activity mediates multiple neurosecretory processes, but these are poorly understood due in part to the existence of at least 12 PKC isoforms. Using amperometry to record quantal catecholamine release from chromaffin cells, we found that both broad spectrum PKC antagonists and rottlerin, a selective inhibitor of the novel isoforms PKC theta and PKC delta, decreased quantal size and the number of secretory events recorded per stimulus. In contrast, drugs that selectively inhibit the atypical and conventional PKC isoforms had no effect on these parameters. While both PKC theta and delta were expressed in chromaffin cells, mice deficient for PKC theta, but not for PKC delta, exhibited lower quantal size than wild-type and were insensitive to rottlerin. Finally, an inhibitory PKC theta pseudosubstrate produced rottlerin-like responses in wild-type mice, indicating that the lack of rottlerin response in the PKC theta mutants was not the result of a form of compensation. These findings demonstrate neurosecretory regulation by a novel PKC isoform, PKC theta, and should contribute to defining mechanisms of activity-dependent regulation of neurosecretion.

PKC theta activity maintains normal quantal size in chromaffin cells.

C (PKC) activit&eacute; de prot&eacute;ine kinase intervient dans plusieurs processus neuros&eacute;cr&eacute;trices, mais ceux-ci sont mal compris en partie &agrave; l&#39;existence d&#39;au moins 12 isoformes PKC. Utilisez amp&eacute;rom&eacute;trie d&#39;enregistrer la lib&eacute;ration de cat&eacute;cholamines quantique des cellules chromaffines, nous avons constat&eacute; que les deux antagonistes PKC large spectre et le rottlerin, un inhibiteur s&eacute;lectif de la nouvelles isoformes PKC theta et la delta PKC, a diminu&eacute; de taille quantique et le nombre de s&eacute;cr&eacute;tion &eacute;v&eacute;nements consign&eacute;s par stimulation. En revanche, les m&eacute;dicaments qui inhibent s&eacute;lectivement les isoformes PKC atypiques et conventionnelles a eu aucun effet sur ces param&egrave;tres. Tandis que les th&ecirc;ta PKC et delta ont &eacute;t&eacute; exprim&eacute;s dans les cellules chromaffines, deficient mice th&ecirc;ta PKC, mais pas pour le delta de la PKC, expos&eacute; plus faible dimension quantique que sauvage et sont insensible au rottlerin. Enfin, un inhibiteur Pseudo-substrat th&ecirc;ta PKC produit des r&eacute;actions semblables au rottlerin chez les souris de type sauvage, indiquant que l&#39;absence de r&eacute;ponse le rottlerin chez les mutants de th&ecirc;ta PKC n&#39;&eacute;tait pas le r&eacute;sultat d&#39;une forme de compensation. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent neuros&eacute;cr&eacute;trices r&egrave;glement par une nouvelle isoforme PKC, th&ecirc;ta PKC et devraient contribuer &agrave; d&eacute;finir les m&eacute;canismes de r&eacute;gulation de l&#39;activit&eacute; d&eacute;pendante de neuros&eacute;cr&eacute;tions.

Activit&eacute; th&ecirc;ta PKC conserve une taille normale quantique dans les cellules chromaffines.

Proteinkinase C (PKC) Aktivit&auml;t vermittelt mehrere neurosecretory Prozesse, aber diese sind schlecht aufgrund teilweise auf die Existenz von mindestens 12 PKC-Isoformen verstehen. Mit Amperometry quantal Katecholamin-Freisetzung aus chromaffin Zellen aufzeichnen, fanden wir, dass beide Breitspektrum-PKC-Antagonisten und Rottlerin, ein selektiver Inhibitor der Roman-Isoformen PKC-Theta und Delta PKC, verringerte quantal Gr&ouml;&szlig;e und die Anzahl der sekretorischen Ereignisse pro Impuls aufgenommen. Medikamente, die selektiv die konventionellen und atypischen PKC-Isoformen hemmt hatte dagegen keinen Einfluss auf diese Parameter. W&auml;hrend PKC-Theta und Delta in chromaffin Zellen ausgedr&uuml;ckt wurden, M&auml;use mangelhaft f&uuml;r PKC-Theta, aber nicht f&uuml;r PKC Delta, untere quantal Gr&ouml;&szlig;e als Wildtyp ausgestellt und unempfindlich gegen Rottlerin wurden. Schlie&szlig;lich erstellt eine hemmende PKC-Theta-Pseudosubstrate Rottlerin-&auml;hnliche Reaktionen in Wildtyp-M&auml;usen, die darauf hinweist, dass die mangelnde Rottlerin Antwort in die PKC-Theta-Mutanten nicht das Ergebnis eine Form der Entsch&auml;digung war. Diese Befunde demonstrieren neurosecretory Verordnung durch eine neuartige PKC-Isoform, PKC-Theta, und sollen dazu beitragen, die Mechanismen der leistungsabh&auml;ngige Regelung der Neurosecretion definieren.

PKC-Theta-Aktivit&auml;t unterh&auml;lt quantal Normalgr&ouml;&szlig;e in chromaffin Zellen.

Chinasi di proteina attivit&agrave; C (PKC) da intermediario pi&ugrave; processi neurosecretorie, ma queste sono scarsamente capite dovuta in parte all&#39;esistenza di almeno 12 isoforme PKC. Utilizzando amperometria per registrare quantal catecolamina release da cellule cromaffini, abbiamo riscontrato che entrambi gli antagonisti PKC ad ampio spettro e rottlerina, un inibitore selettivo del romanzo isoforme PKC theta e delta PKC, diminuito quantal dimensione e il numero di eventi secretivi registrato per stimolo. Al contrario, farmaci che inibiscono selettivamente le isoforme PKC atipica e convenzionale ha avuto alcun effetto su questi parametri. Mentre sia PKC theta e delta sono stati espressi nelle cellule cromaffini, deficient mice teta PKC, ma non per delta PKC, esposto inferiore dimensione quantal di wild-type ed erano insensibili al rottlerina. Infine, un&#39;inibitoria pseudosubstrate teta PKC prodotto rottlerina-come le risposte nei topi wild-type, che indica che la mancanza di risposta rottlerina i mutanti di teta PKC non era il risultato di una forma di compensazione. Questi risultati dimostrano neurosecretorie regolamento di un romanzo isoforma PKC, teta PKC e dovrebbero contribuire a definire meccanismi di regolazione di attivit&agrave;-dipendente della neurosecretion.

Attivit&agrave; PKC theta mantiene dimensioni normali quantal nelle cellule cromaffini.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; C (PKC) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5206;&#x6CCC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x539F;&#x56E0;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 12 &#x306E; PKC &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x96FB;&#x6D41;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x306F;&#x7D20;&#x91CF;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3; &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30AF;&#x30ED;&#x30E0;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8A18;&#x9332;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5E83;&#x3044;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; PKC &#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x3068; rottlerin&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; PKC &#x30B7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068; PKC &#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x6E1B;&#x5C11;&#x7D20;&#x91CF;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x523A;&#x6FC0;&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x8A18;&#x9332;&#x5206;&#x6CCC;&#x578B;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x975E;&#x5B9A;&#x578B;&#x3068;&#x5F93;&#x6765;&#x306E; PKC &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x85AC;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;PKC &#x30B7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; PKC &#x30B7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;PKC &#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x3044;&#x7D20;&#x91CF;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3001;rottlerin &#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6291;&#x5236;&#x306E; PKC &#x30B7;&#x30FC;&#x30BF; pseudosubstrate rottlerin &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54; PKC &#x30B7;&#x30FC;&#x30BF;&#x5909;&#x7570; rottlerin &#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x88DC;&#x511F;&#x306E;&#x5F62;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x751F;&#x7523;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6240;&#x898B;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x5206;&#x6CCC;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; PKC &#x5C0F;&#x8AAC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;PKC &#x30B7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x3001;&#x60F9;&#x304B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PKC &#x30B7;&#x30FC;&#x30BF;&#x6D3B;&#x52D5;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x901A;&#x5E38;&#x7D20;&#x91CF;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5EC;&#xB7EC; neurosecretory &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C (PKC) &#xD65C;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xC778;&#xD574; &#xC77C;&#xBD80; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 12 PKC isoforms &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;. Amperometry&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD06C;&#xB86C; &#xCE5C;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; quantal &#xCE74; &#xD14C; &#xCF5C; &#xC544;&#xBBFC; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xAE30;&#xB85D;, &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; PKC &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC640; rottlerin, &#xC18C;&#xC124; isoforms PKC theta &#xBC0F; PKC &#xB378;&#xD0C0;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; quantal &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xC790;&#xADF9; &#xB2F9; &#xAE30;&#xB85D; &#xBD84; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC218; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; &#xD558; &#xACE0; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; PKC isoforms&#xB97C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC57D;&#xBB3C; &#xD588;&#xB2E4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PKC &#xC138;&#xD0C0;&#xC640; &#xB378;&#xD0C0; &#xD06C;&#xB86C; &#xCE5C;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; PKC &#xC138;&#xD0C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; PKC &#xB378;&#xD0C0; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740; quantal &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; rottlerin&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xAE08;&#xC9C0; PKC &#xC138;&#xD0C0; pseudosubstrate &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, PKC &#xC138;&#xD0C0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; rottlerin &#xC751;&#xB2F5; &#xBD80;&#xC871; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC0C1;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; rottlerin &#xAC19;&#xC740; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC18C;&#xC124; PKC isoform PKC &#xC138;&#xD0C0; neurosecretory &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; neurosecretion&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

PKC &#xC138;&#xD0C0; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD06C;&#xB86C; &#xCE5C;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC815;&#xC0C1; quantal &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Prote&iacute;na quinasa actividad C (PKC) interviene en m&uacute;ltiples procesos neurosecretores, pero &eacute;stos son poco conocidos debido en parte a la existencia de al menos 12 isoformas PKC. Usando Amperometr&iacute;a para grabar la liberaci&oacute;n de catecolaminas cu&aacute;ntico de c&eacute;lulas cromafines, encontramos que ambos antagonistas PKC de amplio espectro y rottlerin, un inhibidor selectivo de la novela isoformas PKC theta y delta de la PKC, disminuci&oacute;n de tama&ntilde;o cu&aacute;ntico y el n&uacute;mero de eventos secretores registrados por est&iacute;mulo. Por el contrario, f&aacute;rmacos que inhiben selectivamente las isoformas PKC anormales y convencionales no tuvieron efecto sobre estos par&aacute;metros. Mientras tanto theta PKC y delta fueron expresadas en c&eacute;lulas cromafines, ratones deficientes theta de la PKC, pero no para el delta de la PKC, exhiben menor tama&ntilde;o cu&aacute;ntico de tipo salvaje y eran insensibles a rottlerin. Por &uacute;ltimo, un inhibidor pseudosubstrate theta PKC produjo respuestas de rottlerin-como en los ratones de tipo salvaje, indicando que la falta de respuesta de la rottlerin en los mutantes PKC theta no era el resultado de una forma de compensaci&oacute;n. Estos resultados demuestran la regulaci&oacute;n neurosecretores por una nueva isoforma de la PKC, theta de la PKC y deben contribuir a definir los mecanismos de regulaci&oacute;n de la actividad dependiente de neurosecretion.

PKC theta actividad mantiene tama&ntilde;o cu&aacute;ntico normal en c&eacute;lulas cromafines.

&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F20;&#x8F93;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x878D;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89C2;&#x5BDF;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x5438;&#x6536;&#x548C;&#x91CA;&#x653E;&#x4ECE;&#x5355;&#x4E2A;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x76F4;&#x63A5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E3A;&#x57FA;&#x677F;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x5355;&#x80FA;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x4F53;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x8367;&#x5149;&#x5047;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x91CA;&#x653E;&#xFF0C;&#x53D6;&#x5F97;&#x82E5;&#x5E72;&#x610F;&#x89C1;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x91CA;&#x653E;&#x6BCF;&#x523A;&#x6FC0;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x7684;&#x5206;&#x6570;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x523A;&#x6FC0;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x52A8;&#x529B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&quot;&#x4FDD;&#x7559;&quot;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x4EBA;&#x53E3;&#x662F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4E0D;&#x5230;&#x3002;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x975E;&#x5747;&#x8D28;&#x6027;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7801;&#x5934;&#x900F;&#x9732;&#x8FD9;&#x662F;&#x90E8;&#x5206;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; D2 &#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x9891;&#x7387;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x9009;&#x62E9;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x8367;&#x5149;&#x5047;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x91CA;&#x653E;&#x4ECE;&#x5355;&#x4E2A;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x3002;

The nervous system transmits signals between neurons via neurotransmitter release during synaptic vesicle fusion. In order to observe neurotransmitter uptake and release from individual presynaptic terminals directly, we designed fluorescent false neurotransmitters as substrates for the synaptic vesicle monoamine transporter. Using these probes to image dopamine release in the striatum, we made several observations pertinent to synaptic plasticity. We found that the fraction of synaptic vesicles releasing neurotransmitter per stimulus was dependent on the stimulus frequency. A kinetically distinct "reserve" synaptic vesicle population was not observed under these experimental conditions. A frequency-dependent heterogeneity of presynaptic terminals was revealed that was dependent in part on D2 dopamine receptors, indicating a mechanism for frequency-dependent coding of presynaptic selection.

Fluorescent false neurotransmitters visualize dopamine release from individual presynaptic terminals.

Le syst&#xE8;me nerveux transmet des signaux entre les neurones via la lib&#xE9;ration de neurotransmetteurs lors de la fusion des v&#xE9;sicules synaptiques. Afin d&#x26;#39;observer l&#x26;#39;absorption et la lib&#xE9;ration de neurotransmetteurs individuels terminaisons pr&#xE9;synaptiques directement, nous avons con&#xE7;u fluorescentes faux neurotransmetteurs comme substrats pour le transporteur de la v&#xE9;sicule synaptique monoamine. L&#x26;#39;utilisation de ces sondes pour la lib&#xE9;ration de dopamine dans le striatum l&#x26;#39;image, nous avons fait plusieurs observations pertinentes &#xE0; la plasticit&#xE9; synaptique. Nous avons constat&#xE9; que la fraction de v&#xE9;sicules synaptiques lib&#xE9;rant des neurotransmetteurs par stimulus &#xE9;tait d&#xE9;pendante de la fr&#xE9;quence du stimulus. Un cin&#xE9;tiquement distinctes &#xAB;r&#xE9;serve&#xBB; de la population des v&#xE9;sicules synaptiques n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9; dans ces conditions exp&#xE9;rimentales. Une h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE9;n&#xE9;it&#xE9; d&#xE9;pend de la fr&#xE9;quence des terminaisons pr&#xE9;synaptiques a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que d&#xE9;pendait en partie sur les r&#xE9;cepteurs dopaminergiques D2, indiquant un m&#xE9;canisme de codage d&#xE9;pendant de la fr&#xE9;quence de s&#xE9;lection pr&#xE9;synaptique.

Fluorescentes faux neurotransmetteurs Visualisez la lib&#xE9;ration de dopamine &#xE0; partir individuels terminaisons pr&#xE9;synaptiques

Das Nervensystem &uuml;bertr&auml;gt Signale zwischen Neuronen &uuml;ber Neurotransmitter-Freisetzung w&auml;hrend synaptische Vesikel Verschmelzung. Um Neurotransmitter Aufnahme zu beobachten und Pressemitteilung vom einzelnen pr&auml;synaptischen Klemmen direkt, gestalteten wir fluoreszierende falsche Neurotransmitter als Substrate f&uuml;r die synaptische Vesikel Monoamin-Transporter. Verwenden diese Pr&uuml;fpunkte auf Bild-Dopamin-Release im Striatum, haben wir mehrere Beobachtungen, die synaptische Plastizit&auml;t. Wir fanden, dass der Anteil der synaptische Vesikel, die Freigabe Neurotransmitter pro Impuls die Impuls-Frequenz abh&auml;ngig war. Kinetisch unterschiedliche &quot;Reservieren&quot; synaptische Vesikel Einwohner wurde unter diesen Versuchsbedingungen nicht beobachtet. Eine frequenzabh&auml;ngige Heterogenit&auml;t der pr&auml;synaptischen Terminals wurde aufgedeckt, dass D2-Dopamin-Rezeptoren, angibt, einen Mechanismus f&uuml;r die frequenzabh&auml;ngige Kodierung der pr&auml;synaptischen Auswahl teilweise abh&auml;ngig war.

Fluoreszierende falsche Neurotransmitter Dopamin-Freisetzung aus einzelnen pr&auml;synaptischen Klemmen zu visualisieren.

Il sistema nervoso trasmette segnali tra neuroni tramite rilascio di neurotrasmettitore durante la fusione della vescicola sinaptica. Al fine di osservare assorbimento del neurotrasmettitore e rilasciare direttamente dai singoli terminali presinaptiche, abbiamo progettato fluorescenti falsi neurotrasmettitori come substrati per il trasportatore di monoamine Vescicola sinaptica. Usando queste sonde a immagine rilascio di dopamina nello striato, abbiamo fatto diverse osservazioni pertinenti a sinaptico plasticit&agrave;. Abbiamo trovato che la frazione di vescicole sinaptiche rilasciando il neurotrasmettitore per stimolo era dipende la frequenza di stimolo. Una popolazione di Vescicola sinaptica cineticamente distinti &quot;riserva&quot; non &egrave; stata osservata in queste condizioni sperimentali. Un&#39;eterogeneit&agrave; dipendente dalla frequenza dei terminali presinaptiche &egrave; stata rivelata che era dipendente in parte su ricevitori della dopamina D2, che indica un meccanismo per la codifica di frequenza-dipendente della selezione presinaptica.

Fluorescenti falsi neurotrasmettitori visualizzare rilascio di dopamina dai singoli terminali presinaptiche.

&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x9001;&#x4FE1;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x76F4;&#x63A5;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7D42;&#x672B;&#x304B;&#x3089;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x30E2;&#x30CE;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x86CD;&#x5149;&#x507D;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7DDA;&#x6761;&#x4F53;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x3054;&#x3068;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x3092;&#x653E;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306F;&#x523A;&#x6FC0;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B; &#x26;quot;&#x4E88;&#x7D04;&#x26;quot;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7D42;&#x672B;&#x306E;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;D2&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x86CD;&#x5149;&#x507D;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7D42;&#x672B;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;

&#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xD4E8;&#xC804; &#xC911; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC804;&#xC1A1;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C1;&#xC811; &#xAC1C;&#xBCC4; presynaptic &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD9C;&#xC2DC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xBAA8;&#xB178; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xD615;&#xAD11; &#xC798;&#xBABB; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAD00;&#xCE21; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC5D0;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xAC00;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC790;&#xADF9; &#xB2F9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC758; &#xBD84;&#xC218;&#xB294; &#xC790;&#xADF9; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC9C0; &#xBCC4;&#xAC1C; &quot;&#xC608;&#xC57D;&quot; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Presynaptic &#xB2E8;&#xB9D0;&#xAE30;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC885;&#xC18D; &#xC774;&#xC885; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC885;&#xC18D; presynaptic &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xCF54;&#xB529;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; D2 &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD600;&#xC84C;&#xB2E4;.

&#xD615;&#xAD11; &#xC798;&#xBABB; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xBC29;&#xCD9C; &#xAC1C;&#xBCC4; presynaptic &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;.

El sistema nervioso transmite se&#xF1;ales entre las neuronas a trav&#xE9;s de la liberaci&#xF3;n de neurotransmisores durante la fusi&#xF3;n de ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas. Con el fin de observar la captaci&#xF3;n de neurotransmisores y liberaci&#xF3;n de terminales presin&#xE1;pticas individuales directamente, hemos dise&#xF1;ado fluorescentes falsos neurotransmisores como sustratos para el transportador de la ves&#xED;cula sin&#xE1;ptica monoamina. El uso de estas sondas a la liberaci&#xF3;n de la imagen de la dopamina en el estriado, que hizo varias observaciones pertinentes a la plasticidad sin&#xE1;ptica. Hemos encontrado que la fracci&#xF3;n de ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas liberaci&#xF3;n de neurotransmisores por est&#xED;mulo era dependiente de la frecuencia del est&#xED;mulo. Una cin&#xE9;tica distinta &#x26;quot;reserva&#x26;quot; de la poblaci&#xF3;n de ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas no se observ&#xF3; en estas condiciones experimentales. Una heterogeneidad dependiente de la frecuencia de los terminales presin&#xE1;pticos se revel&#xF3; que era dependiente en parte de los receptores de dopamina D2, lo que indica un mecanismo para dependientes de la frecuencia de codificaci&#xF3;n de selecci&#xF3;n presin&#xE1;ptica.

Article	Year
Dopamine neurons release transmitter via a flickering fusion pore. Nature neuroscience\| PubMed ID: 14990933	2004
Alpha-synuclein overexpression increases cytosolic catecholamine concentration. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience\| PubMed ID: 16957086	2006
PKC theta activity maintains normal quantal size in chromaffin cells. Journal of neurochemistry\| PubMed ID: 18248621	2008
Fluorescent false neurotransmitters visualize dopamine release from individual presynaptic terminals. Science (New York, N.Y.)\| PubMed ID: 19423778	2009

Roland G. W. Staal

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