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Microvolume Protein Concentration Determination using the NanoDrop 2000c Spectrophotometer

Traditional spectrophotometry requires placing samples into cuvettes or capillaries. This is often impractical due to the limited sample volumes often ...

Thermo Scientific NanoDrop Products

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Microvolume &#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x6CD5;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;

Methods for determining protein concentration that use progressively smaller amounts of material are continually being developed. A new way of minimizing the amount of sample used for spectroscopic analysis is providing more opportunities for greater quality control. Traditional spectrophotometric and fluorometric methods for determination of protein concentrations have long required placing samples into containment devices such as cuvettes or capillaries. A microsample retention system is changing that paradigm by using natural surface tension properties to capture and hold microvolume samples in place during measurement without traditional containment devices. The advantage of such a system is to dramatically reduce the amount of sample required (1 to 2 microl) while greatly increasing the dynamic range of protein concentrations that can be measured. Modifications to classic protein concentration determination protocols are presented to provide a microvolume alternative to traditional cuvette-based methods.

Microvolume spectrophotometric and fluorometric determination of protein concentration.

M&#xE9;thodes de d&#xE9;termination de la concentration de prot&#xE9;ines qui utilisent des quantit&#xE9;s progressivement plus petites de mat&#xE9;riel sont continuellement en cours d&#x26;#39;&#xE9;laboration. Une nouvelle fa&#xE7;on de minimiser la quantit&#xE9; de l&#x26;#39;&#xE9;chantillon utilis&#xE9; pour l&#x26;#39;analyse spectroscopique offre plus de possibilit&#xE9;s pour un meilleur contr&#xF4;le de la qualit&#xE9;. Les m&#xE9;thodes traditionnelles de spectrophotom&#xE9;triques et fluorim&#xE9;trique pour la d&#xE9;termination des concentrations des prot&#xE9;ines sont depuis longtemps n&#xE9;cessaire de placer les &#xE9;chantillons dans des dispositifs de confinement tels que cuvettes ou des capillaires. Un syst&#xE8;me de r&#xE9;tention est micro&#xE9;chantillon changer ce paradigme en utilisant naturelles propri&#xE9;t&#xE9;s de tension superficielle pour capturer et retenir des &#xE9;chantillons microvolumes en place lors de la mesure, sans dispositifs de confinement traditionnels. L&#x26;#39;avantage d&#x26;#39;un tel syst&#xE8;me est de r&#xE9;duire consid&#xE9;rablement la quantit&#xE9; d&#x26;#39;&#xE9;chantillon n&#xE9;cessaire (1 &#xE0; 2 microl) tout en augmentant consid&#xE9;rablement la plage dynamique des concentrations des prot&#xE9;ines qui peuvent &#xEA;tre mesur&#xE9;s. Modifications apport&#xE9;es classiques protocoles de prot&#xE9;ines de concentration de d&#xE9;termination sont pr&#xE9;sent&#xE9;s afin de fournir une alternative aux traditionnels microvolume cuvette des m&#xE9;thodes bas&#xE9;es sur.

D&#xE9;termination spectrophotom&#xE9;trique et fluorim&#xE9;trique microvolume de la concentration prot&#xE9;ique

Methoden zur Bestimmung der Proteinkonzentration, mit denen schrittweise kleinere Mengen von Material werden st&auml;ndig entwickelt. Eine neue Art der Minimierung des Beispiels verwendet f&uuml;r spektroskopische Analyse verringert bietet mehr M&ouml;glichkeiten f&uuml;r gr&ouml;&szlig;ere Qualit&auml;tskontrolle. Traditionelle spektralphotometrische und fluorometrische Methoden zur Bestimmung der Protein-Konzentrationen haben lange ben&ouml;tigt, Proben in Eind&auml;mmung Ger&auml;te wie K&uuml;vetten oder Kapillaren platzieren. Einem Microsample-R&uuml;ckhaltesystem ist das Paradigma &auml;ndern, mithilfe von nat&uuml;rliche Oberfl&auml;chenspannung Eigenschaften erfassen und halten Microvolume Proben in Kraft w&auml;hrend der Messung ohne traditionelle Eind&auml;mmung Ger&auml;te. Der Vorteil eines solchen Systems ist drastisch reduzieren die Menge der Probe erforderlich (1-2 Microl) w&auml;hrend eine starke Erh&ouml;hung des dynamischen Bereichs der Protein-Konzentrationen, die gemessen werden kann. &Auml;nderungen an klassischen Protein-Konzentration-Bestimmung-Protokolle werden vorgestellt, um eine Microvolume alternative zu herk&ouml;mmlichen K&uuml;vette basierenden Methoden bereitzustellen.

Microvolume spektralphotometrischen und fluorometrische Bestimmung der Proteinkonzentration.

Metodi per la determinazione della concentrazione nella proteina che utilizzano progressivamente piccole quantit&agrave; di materiale sono continuamente in fase di sviluppo. Un nuovo modo di ridurre al minimo la quantit&agrave; di campione utilizzato per l&#39;analisi spettroscopica &egrave; fornire maggiori opportunit&agrave; per un maggiore controllo di qualit&agrave;. Tradizionali metodi spettrofotometrici e fluorometriche per la determinazione delle concentrazioni di proteina hanno a lungo necessaria immissione campioni in dispositivi di contenimento come le provette o capillari. Un sistema di ritenzione Microcampionamento sta cambiando quel paradigma utilizzando propriet&agrave; naturale tensione superficiale per catturare e tenere microvolume campioni in posizione durante la misurazione senza dispositivi di contenimento tradizionali. Il vantaggio di tale sistema &egrave; quello di ridurre drasticamente la quantit&agrave; di campione necessaria (1-2 microl) aumentando notevolmente la gamma dinamica delle concentrazioni di proteina che pu&ograve; essere misurata. Modifiche ai protocolli di determinazione di concentrazione di proteina classico sono presentate per fornire un microvolume alternativa ai tradizionali metodi basati su provetta.

Microvolume Determinazione spettrofotometrica e fluorometriche di concentrazione nella proteina.

&#x6750;&#x6599;&#x306E;&#x5F90;&#x3005;&#x306B;&#x5C11;&#x91CF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x91CF;&#x3092;&#x6700;&#x5C0F;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x54C1;&#x8CEA;&#x7BA1;&#x7406;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x8A08;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x3044;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3084;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5C01;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306B;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x7F6E;&#x304F;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x4FDD;&#x6301;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x5C01;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x306B;&#x5FAE;&#x91CF;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x81EA;&#x7136;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x5F35;&#x529B;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x3064;&#x3064;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x91CF;&#xFF08;1&#x301C;2 microl&#xFF09;&#x3092;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30E1;&#x200B;&#x200B;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x5FAE;&#x91CF;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; Microvolume spectrophotometric &#xBC0F; fluorometric &#xACB0;&#xC815;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los m&#xE9;todos para determinar la concentraci&#xF3;n de prote&#xED;nas que utilizan cantidades progresivamente m&#xE1;s peque&#xF1;as de material continuamente se desarrollan. Una nueva forma de minimizar la cantidad de muestra utilizada para el an&#xE1;lisis espectrosc&#xF3;pico est&#xE1; proporcionando m&#xE1;s oportunidades para el control de calidad superior. Los m&#xE9;todos tradicionales de espectrofotom&#xE9;tricos y fluorom&#xE9;trico para la determinaci&#xF3;n de las concentraciones de prote&#xED;na desde hace mucho tiempo se requiere la colocaci&#xF3;n de muestras en los dispositivos de contenci&#xF3;n tales como cubetas o capilares. Un sistema de retenci&#xF3;n micromuestra est&#xE1; cambiando ese paradigma mediante el uso de las propiedades naturales de la tensi&#xF3;n superficial para capturar y retener las muestras microvolumen en su lugar durante la medici&#xF3;n, sin dispositivos de contenci&#xF3;n tradicionales. La ventaja de este sistema es para reducir dr&#xE1;sticamente la cantidad de muestra necesaria (1 a 2 microlitros), mientras que aumentando enormemente el rango din&#xE1;mico de las concentraciones de prote&#xED;nas que pueden ser medidos. Modificaciones de los protocolos cl&#xE1;sicos de determinaci&#xF3;n de la concentraci&#xF3;n de prote&#xED;nas se presentan para ofrecer una alternativa a los tradicionales microvolumen cubeta de m&#xE9;todos basados &#x200B;&#x200B;en.

Joel B. Hansen

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