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Genetic Studies of Human DNA Repair Proteins Using Yeast as a Model System 

Understanding the roles of human DNA repair proteins in genetic pathways is a formidable challenge to many researchers.  Genetic studies in mammalian ...

National Institute on Aging, NIH

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&#x4E2D;&#x95F4;&#x7684;&#x7EB5;&#x9694;&#x5DE8;&#x5927;&#x56CA;&#x6027;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7BA1;&#x3002;

A middle-aged male presenting with complaint of progressively increasing dysphagia was found to have a large cystic mass lesion in the middle mediastinum on evaluation. A diagnosis of an endo-duplication cyst was considered after exploration, in view of infiltration of the muscular layer of the lower thoracic esophagus, presence of multiple hyperemic nodular lesions on its inner surface and its location in the middle mediastinum. However, the histopathology revealed the lesion to be a cystic lymphangioma.

Giant cystic lymphangioma of the middle mediastinum.

Un homme d&#39;&acirc;ge m&ucirc;r pr&eacute;sentant plainte d&#39;accro&icirc;tre progressivement la dysphagie s&#39;est av&eacute;r&eacute; pour avoir une grande l&eacute;sion kystique de masse dans le m&eacute;diastin moyen sur l&#39;&eacute;valuation. Un diagnostic d&#39;un kyste endo-duplication &eacute;tait consid&eacute;r&eacute; comme apr&egrave;s l&#39;exploration, en raison de l&#39;infiltration de la couche musculaire de l&#39;oesophage thoracique inf&eacute;rieure, pr&eacute;sence de multiples l&eacute;sions nodulaires hyper&eacute;mique sur sa face int&eacute;rieure et son emplacement dans le m&eacute;diastin moyen. Toutefois, l&#39;histopathologie a r&eacute;v&eacute;l&eacute; la l&eacute;sion &agrave; un Lymphangiome kystique.

Lymphangiome kystique g&eacute;ante du m&eacute;diastin moyen.

Riesen-zystische Lymphangiom des mittleren Mediastinum.

Una mezza et&agrave; maschile presentando denuncia di aumentare progressivamente la disfagia &egrave; stato trovato per avere una grande lesione cistica di massa nel mediastino medio sulla valutazione. Una diagnosi di una cisti endo-duplicazione era considerata dopo esplorazione, in considerazione di infiltrazione dello strato muscolare dell&#39;esofago toracico inferiore, presenza di multiple lesioni nodulari iperemiche sulla sua superficie interna e la sua posizione nel mediastino medio. Tuttavia, l&#39;esame istopatologico ha rivelato la lesione di un linfangioma cistico.

Linfangioma cistico gigantesca del mediastino medio.

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&#xC810;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; dysphagia&#xC758; &#xBD88;&#xB9CC; &#xC911; &#xB144; &#xB0A8;&#xC131; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC911;&#xAC04; mediastinum&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD070; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xB0AD; &#xC131; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC744; &#xB418;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1D;&#xD600;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC5D4;&#xB3C4; &#xC911;&#xBCF5; &#xB0AD;&#xC885;&#xC758; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xB0AE;&#xC740; &#xD749;&#xBD80; &#xC2DD;&#xB3C4;&#xC758; &#xADFC;&#xC721; &#xCE35;&#xC758; &#xCE68;&#xD22C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xCD94;&#xC5B4; &#xD0D0;&#xC0AC; &#xD6C4; &#xB0B4;&#xBD80; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC0F; &#xC911;&#xAC04; mediastinum&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; hyperemic &#xACB0; &#xC808; &#xC131; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC5EC;&#xACA8;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xB294; histopathology &#xB0AD; &#xC131; lymphangioma &#xD558; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC744; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;.

&#xC911;&#xAC04; mediastinum&#xC758; &#xAC70; &#xB300; &#xD55C; &#xB0AD; &#xC131; lymphangioma&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Un var&oacute;n de mediana edad que presenta con queja de aumentar progresivamente la disfagia fue encontrado para tener una lesi&oacute;n enquistada grande de la masa en el mediastino medio en evaluaci&oacute;n. Un diagn&oacute;stico de un quiste endo-duplicaci&oacute;n era considerado despu&eacute;s de la exploraci&oacute;n, debido a la infiltraci&oacute;n de la capa muscular del es&oacute;fago tor&aacute;cico inferior, presencia de m&uacute;ltiples lesiones nodulares hiper&eacute;mica en su superficie interna y su ubicaci&oacute;n en el mediastino medio. Sin embargo, la histopatolog&iacute;a revel&oacute; la lesi&oacute;n para ser un Linfangioma qu&iacute;stico.

Linfangioma qu&iacute;stico gigante del mediastino medio.

&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176; 3&#39;(2&#39;)&#xFF0C;5&#39;-&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E00; 3&#39;-phosphoadenosine-5&#39;-&#x78F7;&#x9178; (PAP) &#x8F6C;&#x6362;-&#x817A;&#x82F7;-5&#39;-&#x78F7;&#x9178; (AMP) &#x548C;&#x65E0;&#x673A;&#x78F7; &#xFF08;Pi&#xFF09; &#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x4ECE;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x9176;&#x662F;&#x94A0;&#x548C;&#x9502;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x4F53;&#x5185;&#x76D0;&#x6BD2;&#x6027;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; HAL2 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;DHAL2&#xFF0C;&#x4ECE;&#x8010;&#x76D0;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x672C; hansenii&#x3002;&#x6B64;&#x514B;&#x9686;&#x7684; DNA &#x6D4B;&#x5E8F;&#x63ED;&#x793A;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x7F16;&#x7801;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA; 420 1260 bp &#x5F00;&#x653E;&#x9605;&#x8BFB;&#x6846; (&#x53E3;&#x75AE;)&#x3002;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; DHAL2 &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x6362;&#x663E;&#x793A;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684; halotolerance&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x91CD;&#x7EC4; Dhal2p &#x53EF;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x5229;&#x7528; PAP (K (m) 17 microM&#xFF09; &#x548C;&#x5E15;&#x666E;&#x65AF; (K (m) 48 microM&#xFF09; &#x4F5C;&#x4E3A;&#x886C;&#x5E95;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x8BA4;&#x4E3A;&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5176;&#x4ED6;&#x4ECE;&#x9175;&#x6BCD;&#x7684;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;Dhal2p &#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x5927;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x963B;&#x529B;&#x5BF9;&#x9502;&#x548C;&#x94A0;&#x79BB;&#x5B50;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x5206;&#x5B50;&#x514B;&#x9686;&#x53CA; 3 &#39; (2&#39;)&#xFF0C;&#x4ECE;&#x57FA;&#x672C; hansenii &#x6838;&#x82F7;&#x9178; 5&#39;-&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x7279;&#x6027;&#x3002;

The enzyme 3'(2'),5'-bisphosphate nucleotidase catalyses a reaction that converts 3'-phosphoadenosine-5'-phosphate (PAP) to adenosine-5'-phosphate (AMP) and inorganic phosphate (Pi). The enzyme from Saccharomyces cerevisiae is highly sensitive to sodium and lithium and is thus considered to be the in vivo target of salt toxicity in yeast. In S. cerevisiae, the HAL2 gene encodes this enzyme. We have cloned a homologous gene, DHAL2, from the halotolerant yeast Debaryomyces hansenii. DNA sequencing of this clone revealed a 1260 bp open reading frame (ORF) that putatively encoded a protein of 420 amino acid residues. S. cerevisiae transformed with DHAL2 gene displayed higher halotolerance. Biochemical studies showed that recombinant Dhal2p could efficiently utilize PAP (K(m)17 microM) and PAPS (K(m)48 microM) as substrate. Moreover, we present evidence that, in comparison to other homologues from yeast, Dhal2p displays significantly higher resistance towards lithium and sodium ions.

Molecular cloning and biochemical characterization of a 3'(2'),5'-bisphosphate nucleotidase from Debaryomyces hansenii.

L&#39;enzyme 3&#39;(2&#39;), catalyse nucl&eacute;otidase (5&#39;-diphosphate une r&eacute;action qui convertit 3&#39;-phosphoad&eacute;nosine-5&#39;-phosphate (PAP) en ad&eacute;nosine-5&#39;-phosphate (AMP) et de phosphate inorganique (Pi). L&#39;enzyme de Saccharomyces cerevisiae est tr&egrave;s sensible au sodium et au lithium et est donc consid&eacute;r&eacute; comme la cible in vivo de la toxicit&eacute; du sel dans la levure. Chez S. cerevisiae, le g&egrave;ne HAL2 encode cette enzyme. Nous avons clon&eacute; un g&egrave;ne homologue, DHAL2, de la levure halotol&eacute;rants Debaryomyces hansenii. S&eacute;quen&ccedil;age de l&#39;ADN de ce clone a r&eacute;v&eacute;l&eacute; un cadre de lecture ouvert de bp de 1260 (ORF) putativement codant une prot&eacute;ine de 420 r&eacute;sidus d&#39;acides amin&eacute;s. S. cerevisiae, transform&eacute; avec le g&egrave;ne DHAL2 affich&eacute; halotol&eacute;rance sup&eacute;rieur. Des &eacute;tudes biochimiques ont montr&eacute; que Dhal2p recombinant pourrait utiliser efficacement les PAP (K (m) 17 microM) et Perez (K (m) 48 microM) comme substrat. Par ailleurs, nous pr&eacute;sentons des preuves que, en comparaison avec d&#39;autres homologues de levure, Dhal2p affiche une r&eacute;sistance significativement plus &eacute;lev&eacute;e vers les ions lithium et de sodium.

Clonage mol&eacute;culaire et caract&eacute;risation biochimique d&#39;une 3&#39;(2&#39;), 5&#39;-diphosphate nucl&eacute;otidase de Debaryomyces hansenii.

Molekulare Klonierung und biochemische Charakterisierung eines 3 &#x26;#39;(2&#x26;#39;), 5&#x26;#39;-bisphosphat Nucleotidase von Debaryomyces hansenii.

L&#39;enzima 3&#39;(2&#39;), 5 &#39;-bisfosfato catalizza nucleotidasi una reazione che converte il 3 &#39;-phosphoadenosine - 5&#39; - fosfato (PAP) di adenosina-5&#39;-fosfato (AMP) e fosfato inorganico (Pi). L&#39;enzima dal Saccharomyces cerevisiae &egrave; altamente sensibile al sodio e litio ed &egrave; quindi considerato di essere il bersaglio in vivo di tossicit&agrave; sale in lievito. In S. cerevisiae, il gene HAL2 codifica per questo enzima. Noi abbiamo clonato un gene omologo, DHAL2, dalla halotolerant lievito Debaryomyces hansenii. Sequenziamento del DNA di questo clone ha rivelato un 1260 bp open reading frame (ORF) che prevalentemente con codifica una proteina di 420 residui dell&#39;amminoacido. S. cerevisiae trasformate con il gene DHAL2 visualizzato halotolerance superiore. Studi biochimici hanno dimostrato che Dhal2p ricombinante potesse efficacemente utilizzare PAP (K (m) 17 microM) e Pat (K (m) 48 microM) come substrato. Inoltre, vi presentiamo la prova che, rispetto ad altri omologhi da lievito, Dhal2p Visualizza significativamente maggiore resistenza verso gli ioni di litio e sodio.

Clonazione molecolare e caratterizzazione biochimica di un 3&#39;(2&#39;), 5&#39;-nucleotidasi bisfosfato da Debaryomyces hansenii.

&#x9175;&#x7D20; 3&#39; &#xFF08;2&#39;), 5 &#39;-&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; 3 &#39;-phosphoadenosine - 5&#39; &#x5909;&#x63DB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x89E6;&#x5A92;&#x30D3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178; (PAP) &#x3092;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3; 5&#39;-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; (AMP) &#x3068;&#x7121;&#x6A5F;&#x30EA;&#x30F3; (Pi)&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x7531;&#x6765;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x3001;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x306B;&#x6A5F;&#x5BC6;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3042;&#x308A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x306E;&#x5869;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20; HAL2 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F8;&#x540C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;DHAL2&#x3001;&#x8010;&#x5869;&#x6027;&#x9175;&#x6BCD; 349 &#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E; DNA &#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x63A8;&#x5B9A; 420 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3001;1260 bp &#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0; (ORF) &#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD; DHAL2 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x8010;&#x5869;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; Dhal2p &#x304C; PAP &#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x6D3B;&#x7528;&#x51FA;&#x6765;&#x308B;&#x3053;&#x3068; (K (m) 17 microM&#xFF09; &#x3068; PAPS (K (m) 48 microM&#xFF09; &#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x62B5;&#x6297;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x53CA;&#x3073;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066; Dhal2p &#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5206;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306F; 3&#39; &#xFF08;2&#39;), 5&#39;-&#x4E8C;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; 349 &#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x304B;&#x3089;&#x3002;

&#xD6A8;&#xC18C; 3&#39;(&#39; 2), 5&#39;-bisphosphate nucleotidase catalyses &#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0;-5&#39;-&#xC778;&#xC0B0; (AMP)&#xACFC; &#xBB34;&#xAE30; &#xC778;&#xC0B0; (Pi) 3&#39;-phosphoadenosine-5&#39;-&#xC778;&#xC0B0; (PAP)&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xC751; &#xD55C;. Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968;&#xACFC; &#xB9AC;&#xD2AC;&#xC744; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC18C;&#xAE08; &#xB3C5;&#xC131;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. S. cerevisiae&#xC5D0;&#xC11C; HAL2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC885; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, DHAL2, halotolerant &#xD6A8; &#xBAA8; Debaryomyces hansenii&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD074;&#xB860;&#xC758; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD558;&#xAE30; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD560; 420 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (ORF) 1260 bp &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. S. cerevisiae DHAL2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB192;&#xC740; halotolerance. &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; Dhal2p PAP&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4; (K (m) 17 microM) &#xBC0F; PAPS (K (m) 48 microM) &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; homologues&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; Dhal2p &#xB9AC;&#xD2AC;&#xACFC; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xC774;&#xC628;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC;, &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xC2DC;.

&#xBD84;&#xC790; &#xD074;&#xB85C;&#xB2DD; &#xBC0F; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; 3&#39;(&#39; 2), 5&#39;-bisphosphate nucleotidase Debaryomyces hansenii&#xC5D0;&#xC11C;.

La enzima 3&#39;(2&#39;), catalizador de bifosfato de 5&#39;-nucleotidasa una reacci&oacute;n que convierte 3&#39;-Fosfoadenosina-5&#39;-fosfato (PAP)-5&#39;-fosfato de la adenosina (AMP) y fosfato inorg&aacute;nico (Pi). La enzima de Saccharomyces cerevisiae es altamente sensible a sodio y litio y se considera as&iacute; a ser el objetivo in vivo de toxicidad sal levadura. En S. cerevisiae, el gen HAL2 codifica esta enzima. Hemos clonado un gen hom&oacute;logo, DHAL2, de la halotolerant levadura Debaryomyces hansenii. Secuencia de la DNA de este clon revel&oacute; un marco de lectura abierto del bp 1260 (ORF) que supuestamente codificar una prote&iacute;na de 420 residuos de amino&aacute;cidos. S. cerevisiae transformada con el gen de la DHAL2 muestra o superior. Los estudios bioqu&iacute;micos demostraron que Dhal2p recombinante podr&iacute;a utilizar eficientemente PAP (K (m) 17 microM) y PAPS (K (m) 48 microM) como sustrato. Por otra parte, presentamos evidencia que, en comparaci&oacute;n con otros hom&oacute;logos de levadura, Dhal2p muestra significativamente mayor resistencia a los iones de litio y sodio.

Clonaci&oacute;n molecular y caracterizaci&oacute;n bioqu&iacute;mica de un 3&#39;(2&#39;), 5-bifosfato Nucleotidasa de Debaryomyces hansenii.

&#x732A;&#x901A;&#x8DEF;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; &#xFF08;MAPK&#xFF09; &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x9014;&#x5F84;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x8D85;&#x6E17;&#x900F;&#x80C1;&#x8FEB;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x3002;&#x6B64;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5FEB;&#x901F;&#x4F46;&#x77AC;&#x6001;&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; MAPK Hog1p&#x3002;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; Hog1p &#x8FC5;&#x901F;&#x8FD0;&#x5F80;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x80FD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x732A;&#x901A;&#x8DEF;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x3002;&#x5728;&#x57FA;&#x672C; hansenii&#xFF0C;&#x4E5F;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x732A;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7684; osmotolerant &#x548C;&#x8010;&#x76D0;&#x9175;&#x6BCD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x8FC7; D.hansenii &#x4E0D;&#x540C;&#x5E94;&#x529B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x732A;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8DEF;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x9AD8;&#x6E17;&#x900F;&#x538B;&#x3001; &#x6C27;&#x5316;&#x3001; &#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x5E94;&#x529B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x7531;&#x70ED;&#x5E94;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#xFF0C;&#x90A3; D.hansenii &#x4E25;&#x91CD;&#x6E17;&#x900F;&#x80C1;&#x8FEB;&#x4E0B;&#x751F;&#x957F;&#x65F6;&#x4FDD;&#x6301;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; Dhog1p&#x3002;

&#x57FA;&#x672C; hansenii&#xFF0C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x8010;&#x8010;&#x6027;&#x548C;&#x6655;&#x5305;&#x5BB9;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x4E25;&#x91CD;&#x6E17;&#x900F;&#x80C1;&#x8FEB;&#x4E0B;&#x751F;&#x957F;&#x65F6;&#x4FDD;&#x6301;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; Dhog1p &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x3002;

The HOG pathway is an important mitogen-activated protein kinase (MAPK) signal transduction pathway in Saccharomyces cerevisiae that mediates adaptation of cells to hyper-osmotic stress. Activation of this pathway causes rapid but transient, phosphorylation of the MAPK Hog1p. Phosphorylated Hog1p is rapidly transported to the nucleus that results in the transcription of target genes. The HOG pathway appears to be ubiquitous in yeast. Components of HOG pathway have also been identified in Debaryomyces hansenii, a highly osmotolerant and halotolerant yeast. We have studied activation of HOG pathway in D. hansenii under different stress conditions. Our experiments demonstrated that the pathway is activated by high osmolarity, oxidative and UV stress but not by heat stress. We have provided evidence, for the first time, that D. hansenii maintains phosphorylated Dhog1p in the cytoplasm during its growth under severe osmotic stress.

Debaryomyces hansenii, a highly osmo-tolerant and halo-tolerant yeast, maintains activated Dhog1p in the cytoplasm during its growth under severe osmotic stress.

La voie de porc est une voie de transduction signal important mitogen-activated protein kinases (MAPK) chez Saccharomyces cerevisiae qui m&eacute;die adaptation des cellules au stress osmotique-hyper. L&#39;activation de cette voie provoque la phosphorylation rapide mais transitoire, de la Hog1p de MAPK. Hog1p phosphoryl&eacute; est rapidement transport&eacute; vers le noyau qui en r&eacute;sulte dans la transcription de g&egrave;nes cibles. La voie de porc semble &ecirc;tre omnipr&eacute;sent dans la levure. Composants de voie de porc ont &eacute;galement &eacute;t&eacute; identifi&eacute;es dans Debaryomyces hansenii, une levure osmotol&eacute;rante et halotol&eacute;rantes hautement. Nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;activation de porc voie dans d. hansenii en conditions de stress diff&eacute;rentes. Nos exp&eacute;riences ont d&eacute;montr&eacute; que la voie est activ&eacute;e par l&#39;osmolarit&eacute; &eacute;lev&eacute;e, oxydative et le stress de l&#39;UV, mais pas de stress thermique. Nous avons fourni des &eacute;l&eacute;ments de preuve, pour la premi&egrave;re fois, que d. hansenii maintient Dhog1p phosphoryl&eacute;e dans le cytoplasme au cours de sa croissance, soumis &agrave; un stress osmotique.

Debaryomyces hansenii, une levure tr&egrave;s tol&eacute;rante osmo et halo-tol&eacute;rante, maintient Dhog1p activ&eacute;s dans le cytoplasme au cours de sa croissance, soumis &agrave; un stress osmotique.

Debaryomyces hansenii, ein hoch osmo-tolerant und Halo-toleranten Hefe, unterh&#xE4;lt aktiviert Dhog1p im Zytoplasma w&#xE4;hrend seines Wachstums unter extremen osmotischen Stress.

Il pathway HOG &egrave; un percorso di trasduzione segnale importante proteina mitogene-attivata della chinasi (MAPK) in Saccharomyces cerevisiae che media adattamento delle cellule allo stress osmotico-iper. Attivazione di questo pathway provoca rapida ma transitoria, fosforilazione dell&#39;Hog1p di MAPK. Hog1p fosforilato &egrave; rapidamente trasportati al nucleo che si traduce nella trascrizione dei geni bersaglio. Il pathway HOG sembra essere onnipresente in lievito. Componenti del pathway HOG sono state identificate anche in Debaryomyces hansenii, un lievito altamente osmotolerant e halotolerant. Abbiamo studiato attivazione di pathway HOG in d. hansenii in condizioni di stress diversi. Nostri esperimenti hanno dimostrato che il percorso viene attivato da alta osmolarit&agrave;, ossidativo e stress UV ma non di stress da calore. Abbiamo fornito prove, per la prima volta, che d. hansenii mantiene Dhog1p fosforilata nel citoplasma durante la sua crescita sotto grave stress osmotico.

Debaryomyces hansenii, un lievito altamente osmo-tollerante e halo-tollerante, mantiene attivato Dhog1p nel citoplasma durante la sua crescita sotto grave stress osmotico.

HOG &#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;MAPK&#xFF09; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6A5F;&#x69CB;&#x7D30;&#x80DE;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D1;&#x30FC;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; MAPK Hog1p &#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x904E;&#x6E21;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; Hog1p &#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6838;&#x306B;&#x904B;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x306B; HOG &#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HOG &#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3082; 349 &#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x8010;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x3068;&#x8010;&#x5869;&#x6027;&#x9175;&#x6BCD;&#x3002;D. &#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5FDC;&#x529B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067; HOG &#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x9AD8;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x3068; UV &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x304C;&#x71B1;&#x5FDC;&#x529B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E; D. &#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x4E0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; Dhog1p &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

349 &#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x9AD8;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x8010;&#x6027;&#x3068;&#x30D8;&#x30A4;&#x30ED;&#x30FC; &#x30C8;&#x30EC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C8;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x4E0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027; Dhog1p &#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB3FC;&#xC9C0; &#xD1B5;&#xB85C; Saccharomyces cerevisiae &#xC138;&#xD3EC; &#xC0BC; &#xD22C; &#xD558;&#xC774;&#xD37C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC758; &#xC801;&#xC751;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (MAPK) &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658; &#xD1B5;&#xB85C;&#xAC00; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; MAPK hog1p&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACFC;&#xB3C4;, &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xD575; phosphorylated Hog1p &#xC774;&#xC1A1; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3FC;&#xC9C0; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xBCF4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3FC;&#xC9C0; &#xACBD;&#xB85C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; Debaryomyces hansenii&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xD55C; &#xB192;&#xC740; osmotolerant &#xBC0F; halotolerant &#xD6A8;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB514; hansenii &#xB3FC;&#xC9C0; &#xACBD;&#xB85C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD1B5;&#xB85C;&#xAC00; &#xC5F4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB192;&#xC740; osmolarity, &#xC0B0;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8; &#xB514; hansenii &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; phosphorylated dhog1p&#xB97C; &#xC0BC; &#xD22C; &#xC2EC;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC9C0; &#xD55C;&#xB2E4;.

Debaryomyces hansenii, &#xB192;&#xC740; osmo &#xAD00;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xD5E4;&#xC77C;&#xB85C;-&#xAD00;&#xC6A9; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC0BC; &#xD22C; &#xC2EC;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; dhog1p&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El cerdo es una v&iacute;a de transducci&oacute;n de se&ntilde;al importante de prote&iacute;nas activadas por mit&oacute;genos quinasa (MAPK) en Saccharomyces cerevisiae que media la adaptaci&oacute;n de las c&eacute;lulas al estr&eacute;s osm&oacute;tico-hiper. La activaci&oacute;n de esta v&iacute;a causa fosforilaci&oacute;n r&aacute;pida pero transitoria, de la Hog1p de MAPK. Hog1p fosforilada es transportado r&aacute;pidamente al n&uacute;cleo que resulta en la transcripci&oacute;n de genes diana. La v&iacute;a de cerdo parece omnipresente en la levadura. Componentes del camino de cerdo tambi&eacute;n se han identificado en Debaryomyces hansenii, una levadura altamente osmotolerant y halotolerant. Hemos estudiado la activaci&oacute;n de la v&iacute;a HOG en D. hansenii bajo condiciones de estr&eacute;s diferentes. Nuestros experimentos demostraron que la v&iacute;a se activa por la elevada osmolaridad, oxidativo y estr&eacute;s UV pero no por insolaci&oacute;n. Hemos proporcionado evidencia, por primera vez, que D. hansenii mantiene Dhog1p fosforilada en el citoplasma durante su crecimiento bajo severo estr&eacute;s osm&oacute;tico.

Debaryomyces hansenii, una levadura altamente tolerante a halo y tolerante a osmo, mantiene activado Dhog1p en el citoplasma durante su crecimiento bajo severo estr&eacute;s osm&oacute;tico.

3&#39;&#xFF0C;5&#39;-&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x9176;&#x8F6C;&#x6362; 3&#39;-phosphoadenosine-5&#39;-&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;-5&#39;-&#x78F7;&#x9178;&#x548C;&#x65E0;&#x673A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x5230;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9176;&#x5BF9;&#x94A0;&#x548C;&#x9502;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6267;&#x884C;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x76D0;&#x80C1;&#x8FEB;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x901F;&#x7387;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5173;&#x952E;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x4ECE;&#x8010;&#x76D0;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x672C; hansenii &#x786E;&#x5B9A;&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x57FA;&#x56E0; (DHAL2)&#x3002;Dhal2p &#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x5B83;&#x5305;&#x542B; N &#x7EC8;&#x7AEF; 54-&#x6C28;&#x57FA;-&#x9178;-&#x6B8B;&#x7559;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x6269;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86; Dhal2p &#x5B58;&#x5728;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6E38;&#x79BB;&#x4EE5;&#x53CA;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7A97;&#x4F53;&#x548C;&#x76D0;&#x80C1;&#x8FEB;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x7684;&#x540E;&#x4E00;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x758F;&#x6C34;&#x533A;&#x57DF;&#x662F;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x770B;&#x6765;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x8D77;&#x59CB;&#x662F;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x5C55;&#x793A;&#x5176;&#x5E95;&#x7269;&#x4E13;&#x4E00;&#x6027;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E;&#x6E38;&#x79BB;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#xFF0C;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7A97;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x6781;&#x9AD8;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x808C;&#x9187;-1&#xFF0C;4-&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x9996;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x4E86;&#x591A;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x9176;&#x5728;&#x4EFB;&#x4F55;&#x4E00;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x758F;&#x6C34;&#x533A;&#x57DF;&#x8C03;&#x8282;&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4ECE;&#x57FA;&#x672C; hansenii &#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x53CA;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

3', 5'-Bisphosphate nucleotidase is a ubiquitous enzyme that converts 3'-phosphoadenosine-5'-phosphate to adenosine-5'-phosphate and inorganic phosphate. These enzymes are highly sensitive to sodium and lithium and, thus, perform a crucial rate-limiting metabolic step during salt stress in yeast. Recently, we have identified a bisphosphate nucleotidase gene (DHAL2) from the halotolerant yeast Debaryomyces hansenii. One of the unique features of Dhal2p is that it contains an N-terminal 54-amino-acid-residue hydrophobic extension. In this study, we have shown that Dhal2p exists as a cytosolic as well as a membrane-bound form and that salt stress markedly influences the accumulation of the latter form in the cell. We have demonstrated that the N-terminal hydrophobic region was necessary for the synthesis of the membrane-bound isoform. It appeared that an alternative translation initiation was the major mechanism for the synthesis of these two forms. Moreover, the two forms exhibit significant differences in their substrate specificity. Unlike the cytosolic form, the membrane-bound form showed very high activity against inositol-1,4-bisphosphate. Thus, the present study for the first time reports the existence of multiple forms of a bisphosphate nucleotidase in any organism.

Role of N-terminal hydrophobic region in modulating the subcellular localization and enzyme activity of the bisphosphate nucleotidase from Debaryomyces hansenii.

3&#39;, 5&#39;-Diphosphate nucl&eacute;otidase est une enzyme ubiquitaire qui convertit 3&#39;-phosphoad&eacute;nosine-5&#39;-phosphate en phosphate inorganique et de l&#39;ad&eacute;nosine-5&#39;-phosphate. Ces enzymes sont tr&egrave;s sensibles au sodium et au lithium et, donc, effectuent une &eacute;tape cruciale limitante m&eacute;tabolique pendant le stress salin chez la levure. R&eacute;cemment, nous avons identifi&eacute; un g&egrave;ne de nucl&eacute;otidase bisphosphate (DHAL2) de la levure halotol&eacute;rants Debaryomyces hansenii. Une des particularit&eacute;s du Dhal2p est qu&#39;il contient une extension hydrophobe 54-amino-acide-r&eacute;sidus de N-terminal. Dans cette &eacute;tude, nous avons montr&eacute; que Dhal2p existe un cytosolique aussi bien comme une forme de membrane-bondissent et que le stress salin influence nettement l&#39;accumulation de cette derni&egrave;re forme dans la cellule. Nous avons d&eacute;montr&eacute; que la r&eacute;gion hydrophobe N-terminal &eacute;tait n&eacute;cessaire pour la synth&egrave;se de l&#39;isoforme membranaires. Il est apparu qu&#39;une initiation de la traduction alternative &eacute;tait le m&eacute;canisme principal pour la synth&egrave;se de ces deux formes. En outre, les deux formes pr&eacute;sentent des diff&eacute;rences significatives dans leur sp&eacute;cificit&eacute; de substrat. Contrairement &agrave; la forme cytosolique, la forme li&eacute;e &agrave; la membrane a montr&eacute; une activit&eacute; tr&egrave;s &eacute;lev&eacute;e contre l&#39;inositol-1, 4-bisphosphate. Par cons&eacute;quent, la pr&eacute;sente &eacute;tude, pour la premi&egrave;re fois signale l&#39;existence de formes multiples d&#39;une nucl&eacute;otidase biphosphate dans n&#39;importe quel organisme.

R&ocirc;le de la r&eacute;gion hydrophobe N-terminale dans la modulation de l&#39;activit&eacute; enzymatique et de la localisation subcellulaire de la nucl&eacute;otidase biphosphate de Debaryomyces hansenii.

3&#39;, 5&#39;-Bisphosphat Nukleotidase ist eine allgegenw&auml;rtige Enzym, das 3&#39;-5&prime;-5&#39;-Phosphat zu Adenosin-5&#39;-Phosphat und anorganischen Phosphat umwandelt. Diese Enzyme sind sehr empfindlich auf Natrium und Lithium, und f&uuml;hren Sie daher einen entscheidenden Schritt der geschwindigkeitsbestimmende metabolischen bei Salz Stress in der Hefe. Vor kurzem haben wir ein bisphosphat Nukleotidase gen (DHAL2) aus dem Halotolerant Hefe Debaryomyces Hansenii identifiziert. Die einzigartigen Funktionen von Dhal2p geh&ouml;rt, dass es sich um eine N-terminale 54-amino-S&auml;ure-R&uuml;ckstand hydrophobe Erweiterung enth&auml;lt. In dieser Studie haben wir gezeigt, dass Dhal2p als ein Cytosolisches sowie ein membrangebundener Form vorhanden und Salz Stress deutlich die Anh&auml;ufung von letztere Form in der Zelle beeinflusst. Wir haben bewiesen, dass die N-terminalen hydrophobe Region notwendig f&uuml;r die Synthese von der Membrane-springen-Isoform war. Es zeigte sich, dass eine alternative &Uuml;bersetzung-Initiation der Hauptmechanismus f&uuml;r die Synthese dieser beiden Formen war. Dar&uuml;ber hinaus weisen die beiden Formulare signifikante Unterschiede in ihrer Substratspezifit&auml;t. Im Gegensatz zu den Zytosolische Form zeigte membrangebundener Form sehr hohen Aktivit&auml;t gegen Inosit-1,4-bisphosphat. So berichtet die vorliegende Studie zum ersten Mal die Existenz verschiedener ein bisphosphat-Nukleotidase in jedem Organismus.

Rolle der N-terminalen hydrophoben Region modulieren die subzellul&auml;re Lokalisierung und Enzym-Aktivit&auml;t der der bisphosphat-Nukleotidase aus Debaryomyces Hansenii.

3&#39;, 5&#39;--Nucleotidasi bisfosfato sono un enzima ubiquitario che converte 3 &#39;-phosphoadenosine - 5&#39; fosfato di adenosina-5&#39;-fosfato e fosfato inorganico. Questi enzimi sono altamente sensibili al sodio e litio e, quindi, eseguono un passo fondamentale limitazione della velocit&agrave; metabolico durante lo sforzo salato in lievito. Recentemente, abbiamo identificato un gene nucleotidasi bisfosfato (DHAL2) dall&#39;halotolerant lievito Debaryomyces hansenii. Una delle caratteristiche uniche di Dhal2p &egrave; che contiene un&#39;estensione di idrofobia 54-amino-acido-residuo N-terminale. In questo studio, abbiamo dimostrato che Dhal2p esiste come un citosolico cos&igrave; come una forma di membrana-limiti e che lo stress salato influenza notevolmente l&#39;accumulo di quest&#39;ultima forma nella cella. Abbiamo dimostrato che la regione N-terminale idrofobica era necessaria per la sintesi dell&#39;isoforma membrana-limiti. Sembrava che un&#39;iniziazione traduzione alternativa era il principale meccanismo per la sintesi di queste due forme. Inoltre, le due forme presentano differenze significative nella loro specificit&agrave; di substrato. A differenza della forma citosolica, la forma di membrana-limiti ha mostrato molto alta attivit&agrave; contro l&#39;inositolo-1,4-bisfosfato. Cos&igrave;, il presente studio per la prima volta segnala l&#39;esistenza di molteplici forme di un nucleotidasi bisfosfato in qualsiasi organismo.

Ruolo della regione N-terminale idrofobica modulando l&#39;attivit&agrave; enzimatica e localizzazione sottocellulare della nucleotidasi bisfosfato da Debaryomyces hansenii.

3&#39;, 5&#39;--&#x4E8C;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F; 3 &#39;-phosphoadenosine - 5&#39; &#x5909;&#x63DB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x9175;&#x7D20;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3; 5 &#39;-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3068;&#x7121;&#x6A5F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5869;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x3001;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x306B;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5869;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x4E2D;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5236;&#x9650;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x305F;&#x30D3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (DHAL2) &#x8010;&#x5869;&#x6027;&#x9175;&#x6BCD; 349 &#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x304B;&#x3089;&#x3002;1 &#x3064;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD; Dhal2p &#x306E; N &#x672B;&#x7AEF; 54 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x6E23;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x62E1;&#x5F35;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, Dhal2p &#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x819C;&#x9023;&#x7D50;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3001;&#x5869;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x5F62;&#x5F0F;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;N &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x9818;&#x57DF;&#x5236;&#x5FA1;&#x5408;&#x6210;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x578B;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4EE3;&#x66FF;&#x7FFB;&#x8A33;&#x958B;&#x59CB;&#x5408;&#x6210;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x57FA;&#x8CEA;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; &#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;-1, 4-&#x30D3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x30D3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x6709;&#x6A5F;&#x4F53;&#x306E;&#x4E2D;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x4E0B;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x30D3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; 349 &#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x306B; N &#x672B;&#x7AEF;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

3&#39; 5&#39;-Bisphosphate nucleotidase 3&#39;-phosphoadenosine-5&#39;-&#xC778;&#xC0B0; &#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0;-5&#39;-&#xC778;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xBB34;&#xAE30; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968;&#xACFC; &#xB9AC;&#xD2AC;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC18C;&#xAE08; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xD55C; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xC218;&#xD589;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; halotolerant &#xD6A8; &#xBAA8; Debaryomyces hansenii&#xC5D0;&#xC11C; bisphosphate nucleotidase &#xC720;&#xC804;&#xC790; (DHAL2)&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. Dhal2p&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; N &#xB2E8;&#xC790; 54 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC131; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xC18C;&#xC218; &#xD655;&#xC7A5; &#xD3EC;&#xD568;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; dhal2p&#xB294; cytosolic &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD3FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC18C;&#xAE08; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xC140;&#xC5D0; &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xC601;&#xD5A5; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC18C;&#xC218; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; isoform&#xC758; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xCCB4; &#xBC88;&#xC5ED; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xB294; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB4F1;&#xC7A5;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD615;&#xD0DC; &#xC804;&#xC2DC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xC9C8; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00;. Cytosolic &#xD615;&#xD0DC;&#xC640;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD3FC; inositol-1, 4-bisphosphate&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB192;&#xC740; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBCF4;&#xACE0; bisphosphate nucleotidase &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;.

&#xBCC0;&#xC870; bisphosphate nucleotidase Debaryomyces hansenii&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; subcellular &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

3&#39;, 5&#39;-Bifosfato Nucleotidasa es una enzima ubicua que convierte 3&#39;-Fosfoadenosina-5&#39;-fosfato a fosfato de adenosina-5&#39;-fosfato e inorg&aacute;nico. Estas enzimas son muy sensibles al sodio y litio y, as&iacute;, realizan un paso metab&oacute;lico tarifa-limitaci&oacute;n crucial durante estr&eacute;s salino en la levadura. Recientemente, hemos identificado un bifosfato Nucleotidasa gen (DHAL2) de la halotolerant levadura Debaryomyces hansenii. Una de las caracter&iacute;sticas &uacute;nicas de Dhal2p es que contiene una extensi&oacute;n hidrof&oacute;bica de 54-amino-&aacute;cido-residuos de N-terminal. En este estudio, hemos demostrado que Dhal2p existe una citos&oacute;lica as&iacute; como una forma de membrana-limitan y que estr&eacute;s salino influye notablemente en la acumulaci&oacute;n de la &uacute;ltima forma de la c&eacute;lula. Hemos demostrado que la regi&oacute;n hidrof&oacute;bica de N-terminal era necesaria para la s&iacute;ntesis de las isoformas de la membrana-limitan. Parec&iacute;a que una iniciaci&oacute;n de la traducci&oacute;n alternativa era el mecanismo principal para la s&iacute;ntesis de estas dos formas. Adem&aacute;s, las dos formas exhiben diferencias significativas en su especificidad de sustrato. A diferencia de la forma citos&oacute;lica, la forma de membrana-limitan demostr&oacute; actividad muy alta contra el inositol-1, 4-bifosfato. As&iacute;, el presente estudio por primera vez informa de la existencia de m&uacute;ltiples formas de un bifosfato Nucleotidasa en cualquier organismo.

Papel de la regi&oacute;n hidrof&oacute;bica de la N-terminal en la modulaci&oacute;n de la actividad de enzima y la localizaci&oacute;n subcelular de la bifosfato Nucleotidasa de Debaryomyces hansenii.

3&#39;(2&#39;)&#xFF0C;5&#39;-&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; (EC 3.1.3.7) (BPntase) &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x9176;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9176;&#x6709;&#x5F15;&#x8D77;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x6CE8;&#x610F;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x76D0;&#x6BD2;&#x6027;&#x6307;&#x6807;&#x4EE5;&#x53CA;&#x9502;&#x7528;&#x4E8E;&#x6CBB;&#x7597;&#x8E81;&#x72C2;&#x6291;&#x90C1;&#x75C7;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x9776;&#x70B9;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5C5E;&#x4E8E; Mg2 +-&#x4F9D;&#x8D56;&#x674E; +-&#x654F;&#x611F;&#x6A1F;&#x5B50;&#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#xFF0C;&#x9502;&#x3001; &#x94A0;&#x79BB;&#x5B50;&#x5BF9;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x7EC4;&#x7684;&#x5355;&#x4EF7;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x9176;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x7406;&#x5C1A;&#x672A;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x4ECE;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x8010;&#x76D0;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x672C; hansenii BPntase (Dhal2p)&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x8868;&#x5F81;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E9B;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5728; Dhal2p&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4E2A;&#x975E;&#x51E1;&#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86; Dhal2p &#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x5B50;&#x5EFA;&#x6A21;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5916;&#x8BF1;&#x53D8;&#x65B9;&#x6CD5;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x89E3;&#x91CA;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4FDD;&#x5B88;&#x4F46;&#x8FD8;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x5143;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x529F;&#x80FD;&#x5143;&#x7D20;&#x6240;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x9996;&#x6B21;&#x62C6;&#x6563;&#x74E3;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5FAA;&#x73AF;&#x533A;&#x57DF;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x4E2D;&#x73AF;&#x533A;, &#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9EBB;&#x6728;&#x5230;&#x76D0;&#x7684; BPntase &#x7684;&#x521B;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x3002;

&#x8BBE;&#x7ACB;&#x7684;&#x76D0;&#x4E0D;&#x533A;&#x5206; 3&#39;(2&#39;)&#xFF0C;5&#39;-&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7684;&#x5EFA;&#x6A21;&#x548C;&#x8BF1;&#x53D8;&#x80B2;&#x79CD;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

3'(2'),5'-Bisphosphate nucleotidase, (EC 3.1.3.7) (BPntase) is a ubiquitous enzyme. Recently, these enzymes have drawn considerable attention as in vivo targets of salt toxicity as well as therapeutic targets of lithium that is used for the treatment of manic-depressive disorders. They belong to the Mg2+-dependent Li+-sensitive phosphomonoesterase super-family and are highly sensitive to lithium and sodium ions. However, the molecular mechanism of inhibition of this group of enzymes by monovalent cations has not been completely understood. Previously we have identified a BPntase (Dhal2p) from a highly halotolerant yeast Debaryomyces hansenii. Molecular characterization revealed a number of unique features in Dhal2p, indicating this is an extraordinary member of the family. In this study, we have carried out the structure-function analysis of Dhal2p through the combination of molecular modeling and in vitro mutagenesis approach. We have not only provided the explanation for the role played by the functionally important elements that are conserved among the members of this family but also identified important, novel structural elements in this enzyme. Our study for the first time unraveled the role of a flap as well as a loop region in the functioning of this enzyme. Most importantly, mutations in the loop region resulted in the creation of a BPntase that was insensitive to salt.

Creation of salt-insensitive 3'(2'),5'-bisphosphate nucleotidase by modeling and mutagenesis approach.

3&#39;(2&#39;), 5&#39;-Diphosphate nucl&eacute;otidase, (EC 3.1.3.7) (BPntase) est une enzyme ubiquitaire. R&eacute;cemment, ces enzymes ont attir&eacute; une attention consid&eacute;rable comme cibles de vivo de la toxicit&eacute; du sel ainsi que des cibles th&eacute;rapeutiques de lithium qui est utilis&eacute; pour le traitement des troubles maniaco-d&eacute;pressifs. Ils appartiennent &agrave; la Mg2 +-d&eacute;pendante Li +-super-famille phosphomonoest&eacute;rase sensibles et sont tr&egrave;s sensible aux ions de lithium et de sodium. Toutefois, le m&eacute;canisme mol&eacute;culaire de l&#39;inhibition de ce groupe d&#39;enzymes par les cations monovalents n&#39;a pas &eacute;t&eacute; totalement compris. Pr&eacute;c&eacute;demment, nous avons identifi&eacute; un BPntase (Dhal2p) d&#39;un tr&egrave;s halotol&eacute;rants levure Debaryomyces hansenii. Caract&eacute;risation mol&eacute;culaire a r&eacute;v&eacute;l&eacute; un certain nombre de caract&eacute;ristiques uniques dans Dhal2p, indiquant que c&#39;est un extraordinaire membre de la famille. Dans cette &eacute;tude, nous avons effectu&eacute; l&#39;analyse de la structure-fonction des Dhal2p gr&acirc;ce &agrave; la combinaison de la mod&eacute;lisation mol&eacute;culaire et approche de mutagen&egrave;se in vitro. Nous n&#39;avons pas seulement fourni l&#39;explication du r&ocirc;le jou&eacute; par les &eacute;l&eacute;ments fonctionnellement importantes qui sont conserv&eacute;es parmi les membres de cette famille, mais a &eacute;galement identifi&eacute; des &eacute;l&eacute;ments structurels importants, roman dans cette enzyme. Notre &eacute;tude r&eacute;alis&eacute;e pour la premi&egrave;re fois &eacute;lucid&eacute; le r&ocirc;le d&#39;un rabat, mais aussi une r&eacute;gion de la boucle dans le fonctionnement de cette enzyme. Plus important encore, mutations dans la r&eacute;gion de la boucle a entra&icirc;n&eacute; la cr&eacute;ation d&#39;un BPntase qui est insensible au sel.

Cr&eacute;ation de sel insensible 3&#39;(2&#39;), 5&#39;-diphosphate nucl&eacute;otidase par approche de mod&eacute;lisation et de la mutagen&egrave;se.

3&#39;(2&#39;), 5&#39;-Bisphosphat Nukleotidase, (EG 3.1.3.7) (BPntase) ist ein Enzym, allgegenw&auml;rtig. Vor kurzem haben diese Enzyme erheblichen aufmerksam wie in Vivo Ziele von Salz Toxizit&auml;t sowie therapeutische Targets von Lithium, die f&uuml;r die Behandlung von manisch-depressiver Erkrankungen verwendet wird. Sie geh&ouml;ren zu der Mg2 +-abh&auml;ngigen Li +-empfindliche Phosphomonoesterase Gr&ouml;&szlig;envarianten und sind sehr empfindlich auf Lithium und Natrium-Ionen. Jedoch hat die molekulare Mechanismen der Hemmung dieser Gruppe von Enzymen durch monovalenten kationen nicht vollst&auml;ndig verstanden. Zuvor haben wir eine BPntase (Dhal2p) aus einem hoch Halotolerant Hefe Debaryomyces Hansenii identifiziert. Molekulare Charakterisierung ergab eine Reihe von einzigartigen Eigenschaften in Dhal2p, angibt, dass dies ist au&szlig;erordentliches Mitglied der Familie. In dieser Studie haben wir die Struktur-Funktions-Analyse der Dhal2p durch die Kombination der molekularen Modellierung und in-vitro-Mutagenese Ansatz durchgef&uuml;hrt. Wir haben nicht nur die Erkl&auml;rung f&uuml;r die Rolle der funktionell wichtige Elemente, die unter den Mitgliedern dieser Familie konserviert sind jedoch auch wichtig, Roman Strukturelemente in dieses Enzym identifiziert. Unsere Studie zum ersten Mal auseinander fielen, die Rolle der eine Klappe sowie eine Schleife-Region in der Funktionsweise dieses Enzyms. Mutationen in der Schleife-Region f&uuml;hrte vor allem die Schaffung einer BPntase, die unempfindlich gegen Salz war.

Erstellung von Salz-unempfindliche 3&#39;(2&#39;), 5&#39;-bisphosphat Nukleotidase durch Modellierung und Mutagenese Ansatz.

3&#39;(2&#39;), 5&#39;-Nucleotidasi bisfosfato, (EC 3.1.3.7) (BPntase) &egrave; un enzima ubiquitario. Recentemente, questi enzimi hanno attirato l&#39;attenzione considerevole come in vivo obiettivi di tossicit&agrave; sale cos&igrave; come bersagli terapeutici di litio che &egrave; utilizzato per il trattamento di disturbi maniaco-depressiva. Essi appartengono al Mg2 +-dipendente Li +-super-family phosphomonoesterase sensibili e sono molto sensibile agli ioni di litio e sodio. Tuttavia, il meccanismo molecolare di inibizione di questo gruppo di enzimi di cationi monovalenti non &egrave; stato completamente compreso. In precedenza abbiamo identificato un BPntase (Dhal2p) da un&#39;altamente halotolerant lievito Debaryomyces hansenii. Caratterizzazione molecolare ha rivelato una serie di caratteristiche uniche in Dhal2p, che indica che questo &egrave; un membro della famiglia straordinario. In questo studio, abbiamo effettuato l&#39;analisi di struttura-funzione di Dhal2p attraverso la combinazione di modellistica molecolare e approccio di mutagenesi in vitro. Non abbiamo solo fornito la spiegazione per il ruolo svolto dagli elementi funzionalmente importanti che sono conservati tra i membri di questa famiglia, ma anche identificato gli elementi strutturali importanti, romanzo di questo enzima. Il nostro studio per la prima volta svelati il ruolo di un lembo cos&igrave; come una regione del ciclo del funzionamento di questo enzima. Mutazioni nella regione del ciclo pi&ugrave; importante, ha portato alla creazione di un BPntase che era insensibile alle sale.

Creazione di sale-insensibile 3&#39;(2&#39;), 5&#39;-nucleotidasi bisfosfato dall&#39;approccio di modellazione e di mutagenesi.

3&#39; &#xFF08;2&#39;), 5&#39;-&#x4E8C;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; (EC 3.1.3.7) (BPntase) &#x3042;&#x308B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x9175;&#x7D20;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x5869;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E; in vivo &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8E81;&#x3046;&#x3064;&#x75C5;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6A19;&#x7684;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x6CE8;&#x76EE;&#x3092;&#x63CF;&#x753B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Mg 2 + &#x306B;&#x5C5E;&#x3059;&#x308B;-&#x4F9D;&#x5B58; Li +-&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E2;&#x30CE;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3068;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x53CA;&#x3073;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306B;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7FA4;&#x306E;&#x4E00;&#x4FA1;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306B;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x8010;&#x5869;&#x6027;&#x9175;&#x6BCD; 349 &#x9175;&#x6BCD;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x304B;&#x3089; BPntase (Dhal2p) &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306A;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x81E8;&#x6642;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3059; Dhal2p &#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; Dhal2p &#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x306E;&#x307F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x8981;&#x7D20;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x306F;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x89E3;&#x660E;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x5869;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F; BPntase &#x306E;&#x4F5C;&#x6210;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5275;&#x9020;&#x306E;&#x5869;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x306A;&#x3044; 3&#39; &#xFF08;2&#39;), 5&#39;-&#x4E8C;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3002;

3&#39;(&#39; 2), 5&#39;-Bisphosphate nucleotidase (EC 3.1.3.7) (BPntase)&#xB294; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xD6A8;&#xC18C;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C; manic-depressive &#xC7A5;&#xC560;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xB9AC;&#xD2AC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC18C;&#xAE08; &#xB3C5;&#xC131;&#xC758; &#xBE44;&#xBCF4; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC744; &#xADF8;&#xB824; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; Mg2 +&#xC5D0; &#xC18D;&#xD55C;&#xB2E4;-&#xC885;&#xC18D; Li +-&#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; phosphomonoesterase super-family&#xC640; &#xB9AC;&#xD2AC;&#xACFC; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xC774;&#xC628;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xADF8;&#xB8F9; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xCC28;&#xB840; &#xC591;&#xC774;&#xC628;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; halotolerant &#xD6A8; &#xBAA8; Debaryomyces hansenii&#xC5D0;&#xC11C; BPntase (Dhal2p)&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xC774;&#xAC83;&#xC774; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xD2B9;&#xBCC4; &#xD55C; &#xBA64;&#xBC84;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; Dhal2p, &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xBC88;&#xD638;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; mutagenesis &#xC811;&#xADFC;&#xC758; &#xC870;&#xD569; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; dhal2p&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;-&#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB9CC;&#xC774; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xBCF4;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;, &#xC18C;&#xC124;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAD6C;&#xC870; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; unraveled &#xD613;&#xBC14;&#xB2E5;&#xC774;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB8E8;&#xD504; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;. &#xAC00;&#xC7A5; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xB8E8;&#xD504; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC18C;&#xAE08;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; Bpntase&#xC758; &#xC0DD;&#xC131; &#xACB0;&#xACFC;.

&#xCC3D;&#xC870;&#xC758; &#xC18C;&#xAE08;&#xC744; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; 3&#39;(&#39; 2), &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xBC0F; mutagenesis &#xC811;&#xADFC; &#xD558; &#xC5EC; 5&#39;-bisphosphate nucleotidase.

3&#39;(2&#39;), 5-Bifosfato Nucleotidasa, (EC 3.1.3.7) (BPntase) es una enzima ubicua. Recientemente, estas enzimas han atra&iacute;do considerable atenci&oacute;n como en vivo metas de sal toxicidad como dianas terap&eacute;uticas de litio que se utiliza para el tratamiento de trastornos man&iacute;aco-depresivos. Pertenecen al Mg2 +-dependiente seringue-Superfamilia phosphomonoesterase sensibles y son altamente sensible a los iones de litio y sodio. Sin embargo, el mecanismo molecular de la inhibici&oacute;n de este grupo de enzimas por cationes monovalentes no ha sido totalmente entendido. Previamente hemos identificado un BPntase (Dhal2p) de un altamente halotolerant levadura Debaryomyces hansenii. Caracterizaci&oacute;n molecular revel&oacute; una serie de caracter&iacute;sticas &uacute;nicas en Dhal2p, indicando que se trata de un miembro extraordinario de la familia. En este estudio, hemos llevado a cabo el an&aacute;lisis de la estructura y funci&oacute;n de Dhal2p mediante la combinaci&oacute;n de modelado molecular y enfoque de mutag&eacute;nesis in vitro. No s&oacute;lo hemos incluido la explicaci&oacute;n por el papel desempe&ntilde;ado por los elementos funcionalmente importantes que se conservan entre los miembros de esta familia pero tambi&eacute;n identificaron elementos estructurales importantes, la novela de esta enzima. Nuestro estudio por primera vez desintegr&oacute; el papel de una aleta, as&iacute; como una regi&oacute;n de loop en el funcionamiento de esta enzima. Lo m&aacute;s importante, las mutaciones en la regi&oacute;n del loop resultaron en la creaci&oacute;n de un BPntase que era insensible a la sal.

Creaci&oacute;n de sal-insensible 3&#39;(2&#39;), 5-bifosfato Nucleotidasa por enfoque de modelado y mutag&eacute;nesis.

&#x6297;&#x764C;&#x7597;&#x6CD5;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x6218;&#x7565;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x91CD;&#x5927;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x529E;&#x6CD5;&#x4E00;&#x76F4;&#x662F;&#x6291;&#x5236;&#x7279;&#x5B9A; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x52A0;&#x5F3A;&#x7528;&#x6765;&#x6CBB;&#x7597;&#x764C;&#x75C7;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x5316;&#x7597;&#x548C;&#x653E;&#x5C04;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x5408;&#x6210;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7387;&#x8868;&#x793A;&#x5229;&#x7528;&#x5236;&#x5B9A;&#x8865;&#x507F;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x4FEE;&#x590D;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x67D0;&#x4E9B;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x9884;&#x5148;&#x5B58;&#x5728; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E; helicases &#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x79EF;&#x6781;&#x5730;&#x5206;&#x5272;&#x548C;&#x590D;&#x5236;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5728;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x4E0E;&#x8868;&#x5F81;&#x7684; DNA helicases &#x5408;&#x6210;&#x81F4;&#x547D;&#x5173;&#x7CFB;&#x5C06;&#x5236;&#x5B9A;&#x6539;&#x8FDB;&#x6297;&#x764C;&#x6CBB;&#x7597;&#x6218;&#x7565;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EF7;&#x503C;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BF4;&#x548C;&#x5F53;&#x524D;&#x8BC1;&#x636E;&#x5408;&#x6210;&#x81F4;&#x547D;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x771F;&#x6838; DNA helicases &#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x3002;

&#x6253;&#x725B;&#x773C;&#xFF1A; &#x5C0F;&#x8BF4;&#x9488;&#x5BF9;&#x764C;&#x75C7;&#x7597;&#x6CD5;&#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7387;&#x3002;

Designing strategies for anti-cancer therapy have posed a significant challenge. One approach has been to inhibit specific DNA repair proteins and their respective pathways to enhance chemotherapy and radiation therapy used to treat cancer patients. Synthetic lethality represents an approach that exploits pre-existing DNA repair deficiencies in certain tumors to develop inhibitors of DNA repair pathways that compensate for the tumor-associated repair deficiency. Since helicases play critical roles in the DNA damage response and DNA repair, particularly in actively dividing and replicating cells, it is proposed that the identification and characterization of synthetic lethal relationships of DNA helicases will be of value in developing improved anti-cancer treatment strategies. In this review, we discuss this hypothesis and current evidence for synthetic lethal interactions of eukaryotic DNA helicases in model systems.

Hitting the bull's eye: novel directed cancer therapy through helicase-targeted synthetic lethality.

Conception des strat&#xE9;gies pour th&#xE9;rapie anti-canc&#xE9;reuse ont pos&#xE9; un d&#xE9;fi de taille. Une approche a &#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;inhiber des prot&#xE9;ines sp&#xE9;cifiques de r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN et de leurs voies respectives pour am&#xE9;liorer la chimioth&#xE9;rapie et la radioth&#xE9;rapie utilis&#xE9;e pour traiter les patients canc&#xE9;reux. L&#xE9;talit&#xE9; synth&#xE9;tique repr&#xE9;sente une approche qui exploite les lacunes pr&#xE9;existantes r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN dans certaines tumeurs de d&#xE9;velopper des inhibiteurs des voies de r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN qui compensent le d&#xE9;ficit de r&#xE9;paration associ&#xE9; &#xE0; une tumeur. Depuis h&#xE9;licases jouent un r&#xF4;le crucial dans la r&#xE9;ponse aux dommages de l&#x26;#39;ADN et r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN, en particulier dans les divisant activement et reproduire des cellules, il est propos&#xE9; que l&#x26;#39;identification et la caract&#xE9;risation des relations synth&#xE9;tiques l&#xE9;tales des h&#xE9;licases ADN seront d&#x26;#39;une valeur dans l&#x26;#39;&#xE9;laboration de meilleures strat&#xE9;gies de traitement anti-canc&#xE9;reux. Dans cette revue, nous discutons de cette hypoth&#xE8;se et la preuve actuelle de synth&#xE8;se des interactions l&#xE9;tales des h&#xE9;licases ADN eucaryotes dans des syst&#xE8;mes mod&#xE8;les.

Frapper les yeux du taureau: Novel R&#xE9;alis&#xE9; Cancer Therapy Gr&#xE2;ce h&#xE9;licase cibl&#xE9;e l&#xE9;talit&#xE9; synth&#xE9;tique

Entwerfen von Strategien f&uuml;r die Anti-Krebs-Therapie haben eine erhebliche Herausforderung. Ein Ansatz war es, hemmen bestimmte DNA-Reparatur-Proteine und ihre jeweiligen Wege zu Chemotherapie und Bestrahlung Therapie zur Behandlung von Krebspatienten zu verbessern. Synthetischen Letalit&auml;t stellt einen Ansatz, der nutzt bereits vorhandene DNA Reparatur M&auml;ngel in bestimmten Tumoren Hemmer der DNA-Reparatur-Wege zu entwickeln, die den Tumor-assoziierte Reparatur-Mangel auszugleichen. Da Helikasen wichtige Rollen in der DNA-Schaden-Reaktion und DNA-Reparatur spielen, vor allem in aktiv teilen und Replizieren von Zellen, wird vorgeschlagen, dass die Identifizierung und Charakterisierung von synthetischen t&ouml;dliche Beziehungen der DNA-Helikasen in Entwicklung verbesserte Anti-Krebs-Behandlung von Strategien von Wert sein werden. In diesem Bericht besprechen wir diese Hypothese und aktuelle Hinweise f&uuml;r synthetische t&ouml;dliche Interaktionen der eukaryotischen DNA-Helikasen in Modellsystemen.

Treffen der Volltreffer: Roman aus dem Jahr Krebstherapie durch Helicase-bezogene synthetischen Letalit&auml;t.

Progettare strategie per la terapia anti-cancro hanno posato una sfida significativa. Un approccio &egrave; stato di inibire specifiche proteine di riparazione del DNA e loro rispettivi percorsi per migliorare la terapia chemioterapia e radiazioni, utilizzata per il trattamento di pazienti affetti da cancro. Letalit&agrave; sintetica rappresenta un approccio che sfrutta le carenze di riparazione del DNA preesistente in certi tumori di sviluppare inibitori delle vie di riparazione del DNA che compensare il deficit di riparazione tumore-associati. Poich&eacute; elicasi giocano un ruolo critico nella risposta di danni del DNA e riparazione del DNA, in particolare attivamente dividendo e replica delle cellule, si propone che l&#39;identificazione e la caratterizzazione delle relazioni sintetiche letale del DNA elicasi sar&agrave; di valore nelle strategie di sviluppo migliorato trattamento anticancro. In questa recensione, discutiamo questa ipotesi e prove corrente per interazioni letale sintetiche di eukaryotic DNA elicasi in sistemi modello.

Colpire l&#39;occhio di bue: romanzo diretto terapia contro il cancro attraverso la letalit&agrave; sintetica elicasi mirati.

&#x6297;&#x304C;&#x3093;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x6226;&#x7565;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8AB2;&#x984C;&#x3092;&#x63D0;&#x8D77;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x7642;&#x6CD5;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5408;&#x6210;&#x81F4;&#x6B7B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x6B20;&#x640D;&#x3092;&#x88DC;&#x3046;&#x305F;&#x3081;&#x306E;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x60AA;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x5206;&#x5272;&#x3057;&#x3066;&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3001;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;DNA&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x81F4;&#x6B7B;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7279;&#x6027;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x3001;&#x6297;&#x304C;&#x3093;&#x6CBB;&#x7642;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x4FA1;&#x5024;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3068;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;DNA&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x81F4;&#x6B7B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D6;&#x30EB;&#x306E;&#x76EE;&#x3092;&#x6253;&#x3064;&#xFF1A;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306F;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x5408;&#x6210;&#x81F4;&#x6B7B;&#x6027;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x304C;&#x3093;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x76E3;&#x7763;

&#xD56D; &#xC554; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xC804;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB3C4;&#xC804;&#xC744; &#xD589; &#xC138; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD55C; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xD2B9;&#xC815; DNA &#xC218;&#xB9AC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xC554; &#xD658;&#xC790;&#xB97C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD654;&#xD559; &#xC694;&#xBC95;&#xACFC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAC01; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xD569;&#xC131; &#xCE58; &#xC0AC; &#xC728; &#xD2B9;&#xC815; &#xC885;&#xC591; &#xC885;&#xC591; &#xAD00;&#xB828; &#xC218;&#xB9AC; &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC0C1; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC874; DNA &#xC218;&#xB9AC; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xC545;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Helicases DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xBC18;&#xC751; &#xBC0F; DNA &#xC218;&#xB9AC;, &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xB204;&#xACE0;, &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBBC0;&#xB85C; DNA helicases&#xC758; &#xD569;&#xC131; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xAD00;&#xACC4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD56D; &#xC554; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAC00;&#xCE58; &#xC788;&#xC744; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548;. &#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xACFC; &#xC9C4; &#xD575; DNA helicases&#xC758; &#xD569;&#xC131; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD604;&#xC7AC; &#xC99D;&#xAC70; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB17C;&#xC758;.

&#xD669;&#xC18C;&#xC758; &#xB208;&#xC744; &#xD0C0;&#xACA9; &#xC2DC; &#xC18C;&#xC124; &#xAC10;&#xB3C5; helicase &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xC131; &#xCE58; &#xC0AC; &#xC728;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC554; &#xCE58;&#xB8CC;.

Dise&#xF1;o de estrategias para la terapia contra el c&#xE1;ncer han supuesto un reto importante. Un enfoque ha sido para inhibir prote&#xED;nas espec&#xED;ficas de reparaci&#xF3;n del ADN y sus respectivos caminos para mejorar la quimioterapia y la radioterapia se usa para tratar pacientes con c&#xE1;ncer. Letalidad sint&#xE9;tica representa un enfoque que aprovecha las deficiencias preexistentes de reparaci&#xF3;n del ADN en ciertos tumores para desarrollar inhibidores de las v&#xED;as de reparaci&#xF3;n del ADN que compensan la deficiencia de la reparaci&#xF3;n asociada al tumor. Desde helicasas desempe&#xF1;an un papel cr&#xED;tico en la respuesta al da&#xF1;o del ADN y la reparaci&#xF3;n del ADN, en particular en divisi&#xF3;n activa y la reproducci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas, se propone que la identificaci&#xF3;n y caracterizaci&#xF3;n de las relaciones sint&#xE9;ticas letales de helicasas del ADN ser&#xE1; de gran valor en el desarrollo de la mejora de las estrategias contra el c&#xE1;ncer de tratamiento. En esta revisi&#xF3;n, se discuten estas pruebas de hip&#xF3;tesis y actual de las interacciones sint&#xE9;ticas letales de helicasas del ADN en eucariotas sistemas modelo.

Golpear en el blanco: Nueva terapia contra el c&#xE1;ncer a trav&#xE9;s Dirigida helicasa orientada letalidad sint&#xE9;tica

&#x4E0E;&#x62D3;&#x6251;&#x5F02;&#x6784;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA4;&#x4E92;&#x65E9;&#x8870;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x57FA;&#x56E0;&#x8B66;&#x544A;&#x3002;

Premature aging syndrome gene WRN genetically interacts with a topoisomerase.

Pr&#xE9;matur&#xE9;e WRN syndrome de vieillissement Gene Interagit g&#xE9;n&#xE9;tiquement avec un topo-isom&#xE9;rase

Vorzeitiges Altern-Syndrom-gen WRN interagiert genetisch mit einer Topoisomerase.

Invecchiamento precoce sindrome gene WRN geneticamente interagisce con una topoisomerasi.

&#x65E9;&#x671F;&#x8001;&#x5316;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;WRN&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x30C8;&#x30DD;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;

&#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xC720;&#xC804;&#xC790; WRN &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; topoisomerase &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La eyaculaci&#xF3;n WRN S&#xED;ndrome Gene envejecimiento gen&#xE9;ticamente interact&#xFA;a con la topoisomerasa

Werner &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; &#xFF08;WS&#xFF09; &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8001;&#x5316;&#x75BE;&#x75C5;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;WS &#x4E2D;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x548C;&#x5916;&#x5207;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4E0E;&#x5377;&#x5165; DNA &#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x4E86;&#x89E3;&#x5176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8B66;&#x544A;&#x80FD;&#x591F;&#x62EF;&#x6551;&#x4E0E; sgs1&#xFF0C;&#x552F;&#x4E00;&#x7684; RecQ &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x8B66;&#x544A;&#x65E0;&#x6CD5;&#x6551;&#x63F4;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x4EBA;&#x6743;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x804C;&#x80FD;&#x7684; DNA &#x7834;&#x574F;&#x4EE3;&#x7406; methylmethane &#x78FA;&#x9178;&#x76D0;&#x6216;&#x590D;&#x5236;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7F9F;&#x57FA;&#x8132; sgs1 &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x548C;&#x9175;&#x6BCD; RecQ helicases&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x8B66;&#x544A;&#x751F;&#x7406;&#x8868;&#x8FBE; sgs1 top3 &#x6062;&#x590D; top3 &#x7F13;&#x6162;&#x589E;&#x957F;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x589E;&#x957F;&#x6307;&#x51FA;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x6216; sgs1 &#x682A;&#x3002;&#x4E0E;&#x5927;&#x82BD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5177;&#x6709;&#x5206;&#x5272;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x6307;&#x793A; top3 &#x665A; S/G2 &#x7279;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6062;&#x590D;&#x63D0;&#x5347;&#x4EBA;&#x53E3;&#x76F8;&#x5173;&#x8B66;&#x544A;&#x8F6C;&#x6362; sgs1 top3 &#x589E;&#x957F;&#x7F13;&#x6162;&#x3002;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5916;&#x5207;&#x6D3B;&#x52A8;&#x662F;&#x57FA;&#x56E0;&#x6240;&#x9700;&#x7684; top3 &#x589E;&#x957F;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5206;&#x79BB;&#x8B66;&#x544A;&#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x52A8;&#x529F;&#x80FD;&#x6062;&#x590D;&#x3002;&#x81EA;&#x7136;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5F02;&#x4E49;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x5728;&#x5E72;&#x6270;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x4E2D;&#x5E9F;&#x9664;&#x5176;&#x8FD8;&#x539F; top3 &#x7F13;&#x6162;&#x589E;&#x957F;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x62DF;&#x8BAE;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x9057;&#x4F20;&#x9014;&#x5F84;&#x6291;&#x5236;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x5728;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8001;&#x5316;&#x5B58;&#x5728;&#x7F3A;&#x9677;&#x969C;&#x788D;&#x7684; Werner &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0E;&#x62D3;&#x6251;&#x5F02;&#x6784;&#x9176; 3 &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06; sgs1 top3 top3 &#x7F13;&#x6162;&#x589E;&#x957F;&#x8868;&#x578B;&#x6062;&#x590D;&#x3002;

Werner syndrome (WS) is a premature aging disorder characterized by genomic instability. The WRN gene defective in WS encodes a protein with both helicase and exonuclease activities that interacts with proteins implicated in DNA metabolism. To understand its genetic functions, we examined the ability of human WRN to rescue phenotypes associated with sgs1, the sole RecQ helicase in Saccharomyces cerevisiae. WRN failed to rescue sgs1 sensitivity to the DNA damaging agent methylmethane sulfonate or replication inhibitor hydroxyurea, suggesting divergent functions of human and yeast RecQ helicases. However, physiological expression of WRN in sgs1 top3 restored top3 slow growth phenotype, whereas no effect on growth was observed with wild-type or sgs1 strains. Slow growth of WRN-transformed sgs1 top3 correlated with an elevated population of large-budded cells with undivided nuclei, indicating restoration of cell cycle delay in late S/G2 characteristic of top3. WRN helicase but not exonuclease activity was genetically required for restoration of top3 growth phenotype, demonstrating separation of function of WRN catalytic activities. A naturally occurring missense polymorphism in WRN that interferes with helicase activity abolished its ability to restore top3 slow growth phenotype. Proposed roles of WRN in genetic pathways important for the suppression of genomic instability are discussed.

WRN helicase defective in the premature aging disorder Werner syndrome genetically interacts with topoisomerase 3 and restores the top3 slow growth phenotype of sgs1 top3.

Syndrome de Werner (WS) est un trouble de vieillissement pr&eacute;matur&eacute;, caract&eacute;ris&eacute; par l&#39;instabilit&eacute; g&eacute;nomique. Le g&egrave;ne WRN d&eacute;fectueux dans WS code pour une prot&eacute;ine avec activit&eacute;s helicase tant exonucl&eacute;ase qui interagit avec les prot&eacute;ines impliqu&eacute;es dans le m&eacute;tabolisme de l&#39;ADN. Pour comprendre ses fonctions g&eacute;n&eacute;tiques, nous avons examin&eacute; la capacit&eacute; des humain AVT pour secourir les ph&eacute;notypes associ&eacute;s sgs1, l&#39;h&eacute;licase RecQ unique chez Saccharomyces cerevisiae. AVT n&#39;a pas pu sauver sgs1 sensibilit&eacute; &agrave; l&#39;ADN, endommageant agent m&eacute;thylm&eacute;thane sulfonate ou r&eacute;plication inhibiteur hydroxyur&eacute;e, sugg&eacute;rant des fonctions divergentes de l&#39;homme et de levure RecQ helicases. Cependant, une expression physiologique de WRN dans le top3 sgs1 restaur&eacute; top3 ph&eacute;notype de croissance lente, alors qu&#39;aucun effet sur la croissance a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e avec des souches de type sauvage ou sgs1. Croissance lente du top3 sgs1 AVT-transform&eacute; en corr&eacute;lation avec une population &eacute;lev&eacute;e de grand-greff&eacute;s des cellules avec des noyaux indivises, indiquant la restauration du retard du cycle cellulaire en fin S/G2 caract&eacute;ristique du top3. L&#39;activit&eacute; h&eacute;licase mais pas exonucl&eacute;ase AVT il fallait g&eacute;n&eacute;tiquement pour la restauration du ph&eacute;notype de croissance top3, montrant la s&eacute;paration de la fonction de l&#39;activit&eacute; catalytique de WRN. Un polymorphisme de faux-sens naturellement en nuisant &agrave; leur activit&eacute; h&eacute;licase WRN aboli sa capacit&eacute; &agrave; restaurer le ph&eacute;notype de croissance lente top3. R&ocirc;les propos&eacute;s de WRN dans les voies g&eacute;n&eacute;tiques importantes pour la r&eacute;pression de l&#39;instabilit&eacute; g&eacute;nomique sont discut&eacute;s.

Werner syndrome g&eacute;n&eacute;tique interagit avec la topoisom&eacute;rase 3 et restaure le ph&eacute;notype de croissance lente top3 de sgs1 top3 trouble d&#39;h&eacute;licase WRN d&eacute;fectueux dans le vieillissement pr&eacute;matur&eacute;.

Werner-Syndrom (WS) ist eine vorzeitige Alterung Erkrankung mit genomische Instabilit&auml;t. Das defekte im WS WRN-Gen kodiert f&uuml;r ein Protein mit Helicase und Exonuklease-Aktivit&auml;ten, die interagiert mit Proteinen, die in DNA Metabolismus verwickelt. Um seine genetischen Funktionen zu verstehen, haben wir die F&auml;higkeit der menschlichen WRN, Phenotypen zugeordneten sgs1, die alleinige RecQ-Helikase in Saccharomyces Cerevisiae zu retten. WRN Fehler beim sgs1 Empfindlichkeit an die DNA besch&auml;digen Agent Methylmethane sulfonat oder Replikation Inhibitor Hydroxyurea, was auf unterschiedliche Funktionen der menschlichen zu retten und Hefe RecQ Helikasen. Jedoch wiederhergestellt physiologischen Ausdruck des WRN in sgs1 top3 top3 langsames Wachstum Ph&auml;notypus, w&auml;hrend keine Auswirkungen auf Wachstum mit Wildtyp oder sgs1-St&auml;mme beobachtet wurde. Langsames Wachstum von WRN-transformierten sgs1 top3 korreliert mit einer erh&ouml;hten Bev&ouml;lkerung gro&szlig;e gekeimt Zellen mit ungeteilten Kernen, die Wiederherstellung des Zellzyklus Verz&ouml;gerung im sp&auml;ten S/G2-Merkmal der top3 angibt. WRN-Helicase aber nicht Exonuklease-Aktivit&auml;t war genetisch bei Wiederherstellung der top3 Wachstum Ph&auml;notyp, Trennung der Funktion WRN katalytische T&auml;tigkeit zu demonstrieren. Ein nat&uuml;rlich vorkommendes Missense-Polymorphismus in WRN die Helicase T&auml;tigkeit behindert abgeschafft seine F&auml;higkeit top3 langsames Wachstum Ph&auml;notyp wiederherstellen. Vorgeschlagene Rollen der WRN in genetischen Wege wichtig f&uuml;r die Unterdr&uuml;ckung der genomischen Instabilit&auml;t werden diskutiert.

WRN Helicase Defekt in die vorzeitige Hautalterung St&ouml;rung Werner Syndrom genetisch interagiert mit Topoisomerase 3 und stellt die top3-langsames Wachstum-Ph&auml;notyp des sgs1 top3.

Sindrome di Werner (WS) &egrave; un invecchiamento precoce caratterizzata da instabilit&agrave; genomica. Il gene WRN difettoso in WS codifica per una proteina con attivit&agrave; di helicase e di esonucleasi che interagisce con le proteine coinvolte nel metabolismo del DNA. Per capire le sue funzioni genetiche, abbiamo esaminato la capacit&agrave; di WRN umana per salvare i fenotipi associati sgs1, l&#39;unico RecQ elicasi in Saccharomyces cerevisiae. WRN non &egrave; riuscito a salvare sgs1 sensibilit&agrave; al DNA danneggiando l&#39;agente methylmethane sulfonato o replica inibitore idrossiurea, suggerendo funzioni divergenti di umani e lievito RecQ elicasi. Tuttavia, espressione fisiologica di WRN in top3 sgs1 restaurato top3 fenotipo di lenta crescita, considerando che &egrave; stato osservato alcun effetto sulla crescita con selvaggio-tipo o sgs1 ceppi. Crescita lenta del sgs1 trasformato WRN top3 correlata con un&#39;elevata popolazione di germogliato grandi cellule con nuclei indivisa, indicando il restauro del ciclo cellulare ritardo nel tardo S/G2 caratteristico della top3. WRN elicasi ma non exonuclease attivit&agrave; era geneticamente necessaria per il restauro del fenotipo di crescita top3, dimostrando la separazione della funzione di attivit&agrave; catalitica avv. Un polimorfismo missenso naturalmente WRN che interferisce con l&#39;attivit&agrave; di helicase abolita la capacit&agrave; di ripristinare la top3 lenta crescita fenotipo. Proposti ruoli di WRN nelle vie genetiche importanti per la soppressione dell&#39;instabilit&agrave; genomica sono discussi.

Elicasi WRN difettoso nell&#39;invecchiamento prematuro disordine Werner sindrome geneticamente interagisce con topoisomerasi 3 e ripristina il fenotipo di lenta crescita top3 di sgs1 top3.

&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30CA;&#x30FC;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4; (WS) &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x65E9;&#x671F;&#x8001;&#x5316;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;WRN &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; WS &#x3067;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x5BFE;&#x8A71;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3067;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; DNA &#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066; sgs1&#x3001;&#x552F;&#x4E00;&#x306E; RecQ &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8B66;&#x544A;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;WRN &#x306F;&#x3001;sgs1 &#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x767A;&#x6563;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; methylmethane &#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30F3;&#x9178;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8907;&#x88FD;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#x3001;&#x640D;&#x50B7; DNA &#x3092;&#x6551;&#x52A9;&#x3057;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E; RecQ &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x307E;&#x305F;&#x306F; sgs1 &#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x751F;&#x80B2;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x8B66;&#x544A;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x767A;&#x73FE; sgs1 3 &#x7D44; top3 &#x9045;&#x3044;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;WRN &#x5909;&#x63DB; sgs1 top3 &#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x6210;&#x9577;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x9045;&#x5EF6; top3 &#x306E; S/G2 &#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x5F8C;&#x534A;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x9AD8;&#x67B6;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5927;&#x82BD;&#x751F;&#x3048;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x6838;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x3002;WRN &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x5FA9;&#x5143; WRN &#x89E6;&#x5A92;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;3 &#x7D44;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;WRN &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x30DF;&#x30B9;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9; &#x30DD;&#x30EA;&#x30E2;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BA;&#x30E0; top3 &#x9045;&#x3044;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;WRN &#x907A;&#x4F1D;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x63D0;&#x6848;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

WRN &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3067;&#x6B20;&#x9665;&#x969C;&#x5BB3; Werner &#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30C8;&#x30DD;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; 3 &#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x3001;sgs1 top3 &#x306E; top3 &#x9045;&#x3044;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBCA0;&#xB974;&#xB108; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (WS) &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654; &#xC7A5;&#xC560; genomic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. WS&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; WRN &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; helicase&#xACFC; exonuclease &#xD65C;&#xB3D9; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; DNA &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; sgs1, Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; RecQ helicase&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xACBD;&#xACE0;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACBD;&#xACE0; sgs1 &#xAC10;&#xB3C4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBD84;&#xAE30; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; methylmethane &#xB41C; &#xB610;&#xB294; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; hydroxyurea, &#xC190;&#xC0C1; DNA &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8; &#xBAA8; RecQ helicases &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, sgs1 top3&#xC5D0; &#xACBD;&#xACE0;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC2DD; &#xBCF5;&#xC6D0; top3 &#xB290;&#xB9B0; &#xC131;&#xC7A5; &#xD615;, &#xBC18;&#xBA74; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB610;&#xB294; sgs1 &#xAE34;&#xC7A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. WRN &#xBCC0;&#xD615; sgs1 top3&#xC758; &#xB290;&#xB9B0; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; top3&#xC758; &#xD6C4;&#xBC18; S/g 2 &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xC804;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xD575; &#xC140; &#xD070; &#xC5B8;&#xC57D;&#xADA4;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC778;&#xAD6C;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xACBD;&#xACE0; helicase &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; exonuclease &#xD65C;&#xB3D9; WRN &#xCD09;&#xB9E4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; top3 &#xC131;&#xC7A5; &#xD615;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC88;&#xAC70;&#xB85C;&#xC6E0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Helicase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xACE0;&#xC5D0; &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; missense &#xB2E4;&#xD615;&#xC131; &#xD3D0;&#xC9C0; top3 &#xB290;&#xB9B0; &#xC131;&#xC7A5; &#xD615;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;. &#xC720;&#xC804; &#xACBD;&#xB85C; genomic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACBD;&#xACE0;&#xC758; &#xC81C;&#xC548; &#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACBD;&#xACE0; helicase &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC7A5;&#xC560; &#xBCA0;&#xB974;&#xB108; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xC720;&#xC804;&#xC790; topoisomerase 3&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; top3 &#xB290;&#xB9B0; &#xC131;&#xC7A5; &#xD615; sgs1 top3&#xC758; &#xBCF5;&#xC6D0;.

S&iacute;ndrome de Werner (WS) es un desorden de envejecimiento prematuro caracterizado por la inestabilidad gen&oacute;mica. El gen WRN defectuoso en WS codifica una prote&iacute;na con actividades exonucleasa tanto helicasa que interact&uacute;a con prote&iacute;nas implicadas en el metabolismo del ADN. Para entender sus funciones gen&eacute;ticas, examinamos la capacidad de WRN humano para rescatar los fenotipos asociados a sgs1, el &uacute;nico helicase RecQ en Saccharomyces cerevisiae. AVS ha podido rescatar sgs1 sensibilidad al ADN da&ntilde;ando agente methylmethane sulfonato o replicaci&oacute;n inhibidor hidroxiurea, sugiriendo funciones divergentes de humanos y levadura helicasas RecQ. Sin embargo, la expresi&oacute;n fisiol&oacute;gica de WRN en sgs1 top3 restaurado top3 fenotipo de crecimiento lento, mientras que no se observ&oacute; ning&uacute;n efecto sobre el crecimiento con cepas de tipo salvaje o sgs1. Lento crecimiento de AVS-transformado sgs1 top3 correlacionada con una elevada poblaci&oacute;n de yemas grandes c&eacute;lulas con n&uacute;cleos indivisos, indicando la restauraci&oacute;n del ciclo celular demora en final S/G2 caracter&iacute;stica de top3. Actividad helicasa pero no exonucleasa WRN necesitaba gen&eacute;ticamente para la restauraci&oacute;n del fenotipo de crecimiento top3, demostrando la separaci&oacute;n de la funci&oacute;n de actividades catal&iacute;ticas de AVS. Un polimorfismo sin sentido que ocurren naturalmente en AVS que interfiere con la actividad helicasa suprimido su capacidad de hacer restore top3 fenotipo de crecimiento lento. Se discuten propuestas papeles de WRN en v&iacute;as gen&eacute;ticas importantes para la represi&oacute;n de inestabilidad gen&oacute;mica.

WRN helicase defectuoso en el envejecimiento prematuro desorden Werner s&iacute;ndrome gen&eacute;tico interact&uacute;a con la topoisomerasa 3 y restaura el fenotipo de crecimiento lento top3 de sgs1 top3.

Helicases &#x5728;&#x6838;&#x9178;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x7406;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x9176;&#x51FD;&#x6570;&#x6765;&#x6267;&#x884C;&#x5176;&#x5206;&#x5B50;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x89D2;&#x8272;&#x680F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x548C;&#x6218;&#x7565;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684; helicases &#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x5DF2;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76; DNA helicases &#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x7EF4;&#x6301;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x57FA;&#x56E0;&#x76F8;&#x8FDE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x91CD;&#x70B9;&#x8367;&#x5149;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x82AF;&#x7247;&#x4F4D;&#x79FB;&#x53CA;&#x7279;&#x70B9;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x5907;&#x7528; DNA &#x7ED3;&#x6784; &#xFF08;&#x4E09;&#x7F38;&#x548C;&#x78C1;&#x8DEF;&#xFF09; &#x6211;&#x4EEC;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x6240;&#x7528;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x8BF4;&#x660E;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x5206;&#x6B65;&#x7684;&#x7EC6;&#x8282;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x5BF9;&#x6838;&#x9178;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x9886;&#x57DF;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458;&#x80FD;&#x591F;&#x5C06;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;

DNA helicases &#x53C2;&#x4E0E; replicational &#x7684;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

The importance of helicases in nucleic acid metabolism and human disease has raised the bar for understanding how these unique enzymes function to perform their biological roles at the molecular level. Here we will describe experimental procedures and strategies to investigate the functions of helicases. These functional assays have been used to study DNA helicases important for the maintenance of genomic stability and genetically linked to age-related diseases and cancer. We will focus on the description of fluorometric helicase assays, protein displacement assays, and methods to characterize helicase activity on alternate DNA structures (triplex and quadruplex) used by our laboratory. The procedures to study these helicase functions are described in step-by-step detail to enable researchers interested in nucleic acid metabolism and related fields to apply these techniques to their own research questions.

Molecular analyses of DNA helicases involved in the replicational stress response.

L&#39;importance des h&eacute;licases dans le m&eacute;tabolisme des acides nucl&eacute;iques et la maladie humaine a soulev&eacute; la barre pour comprendre le fonctionnement de ces enzymes uniques pour effectuer leurs r&ocirc;les biologiques au niveau mol&eacute;culaire. Ici, nous allons d&eacute;crire des proc&eacute;dures exp&eacute;rimentales et des strat&eacute;gies pour &eacute;tudier les fonctions des h&eacute;licases. Ces essais fonctionnels ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour &eacute;tudier l&#39;ADN h&eacute;licases important pour le maintien de la stabilit&eacute; g&eacute;nomique et g&eacute;n&eacute;tiquement li&eacute;s au cancer et les maladies li&eacute;es au vieillissement. Nous nous concentrerons sur la description des essais helicase fluorim&eacute;trique, essais de d&eacute;placement de prot&eacute;ine et m&eacute;thodes pour caract&eacute;riser l&#39;activit&eacute; h&eacute;licase sur autres structures d&#39;ADN (triplex et quadruplex) utilis&eacute; par notre laboratoire. Les proc&eacute;dures pour &eacute;tudier ces fonctions helicase sont d&eacute;crites en d&eacute;tail &eacute;tape par &eacute;tape pour permettre aux chercheurs int&eacute;ress&eacute;s par le m&eacute;tabolisme des acides nucl&eacute;iques et les domaines connexes &agrave; appliquer ces techniques &agrave; leurs propres questions de recherche.

Analyses mol&eacute;culaires d&#39;ADN h&eacute;licases impliqu&eacute;es dans la r&eacute;ponse au stress replicational.

Die Bedeutung der Helikasen in Nukleins&auml;ure-Stoffwechsel und menschlicher Erkrankungen hat die Messlatte f&uuml;r das Verst&auml;ndnis, wie diese einzigartige Enzyme funktionieren, um ihren biologischen Rollen auf molekularer Ebene durchzuf&uuml;hren. Hier beschreiben wir experimentelle Verfahren und Strategien, die Funktionen der Helikasen zu untersuchen. Diese funktionalen Proben wurden verwendet, um DNA-Helikasen wichtig f&uuml;r die Aufrechterhaltung der genomischen Stabilit&auml;t zu studieren und genetisch verbunden mit altersbedingten Krankheiten und Krebs. Wir konzentrieren uns auf die Beschreibung der fluorometrischen Helicase-Assays, Protein Verschiebung Proben und Methoden charakterisieren Helicase T&auml;tigkeit auf Alternative DNA Strukturen (Triplex und Quadruplex) von unserem Labor verwendet. Die Verfahren diese Helicase-Funktionen zu studieren werden Schritt f&uuml;r Schritt genau Forscher Nukleins&auml;ure-Stoffwechsel und verwandten Bereichen interessiert, diese Techniken anwenden, um ihre eigene Forschungsfragen beschrieben.

Molekulare Analysen der DNA-Helikasen der replicational Stress-Reaktion beteiligt.

L&#39;importanza dell&#39;elicasi nel metabolismo dell&#39;acido nucleico e malattia umana ha sollevato la barra per capire come questi enzimi unici funzionano per eseguire i loro ruoli biologici a livello molecolare. Qui descriveremo le procedure sperimentali e strategie per indagare le funzioni dell&#39;elicasi. Questi dosaggi funzionali sono stati utilizzati per lo studio del DNA elicasi importanti per il mantenimento della stabilit&agrave; genomica e geneticamente collegati al cancro e malattie legate all&#39;et&agrave;. Ci si concentrer&agrave; sulla descrizione dei metodi per caratterizzare l&#39;attivit&agrave; di helicase sulle strutture del DNA alternative (triplex e quadruplex) usato dal nostro laboratorio, analisi di spostamento di proteina e helicase fluorometriche dosaggi. Le procedure per studiare queste funzioni elicasi sono descritti in dettaglio passo passo per consentire ai ricercatori interessati nel metabolismo dell&#39;acido nucleico e campi correlati ad applicare queste tecniche alle proprie domande di ricerca.

Analisi molecolare del DNA elicasi coinvolti nella risposta di sforzo di replicazione.

&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6838;&#x9178;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3072;&#x3068;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x9175;&#x7D20;&#x5206;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x8ABF;&#x9054;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5B9F;&#x9A13;&#x624B;&#x9806;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC; &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x7DAD;&#x6301;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5E74;&#x9F62;&#x95A2;&#x9023;&#x75BE;&#x60A3;&#x3084;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3051;&#x3044;&#x5149;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5909;&#x4F4D;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4EE3;&#x66FF;&#x306E; DNA &#x69CB;&#x9020; (&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3; 4 &#x91CD;&#x9396;) &#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x9178;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x95A2;&#x9023;&#x5206;&#x91CE;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x8CEA;&#x554F;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x624B;&#x9806;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Replicational &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x89E3;&#x6790;

&#xD575; &#xC0B0; &#xB300;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; helicases&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC774; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBD84;&#xC790; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218;&#xD589;&#xD560; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xBC14;&#xB97C; &#xC81C;&#xAE30; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC808;&#xCC28;&#xC640; &#xC804;&#xB7B5; &#xC870;&#xC0AC; helicases&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; DNA helicases &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xACFC; &#xC554;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; fluorometric helicase &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCC0;&#xC704; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC0F; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xB300;&#xCCB4; DNA &#xAD6C;&#xC870; (&#xC0BC;&#xBC15;&#xC790;&#xC640; quadruplex) &#xBCF8; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; helicase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; helicase &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xC808;&#xCC28;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC790; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xD575; &#xC0B0; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB2E8;&#xACC4;&#xBCC4; &#xC790;&#xC138;&#xD558;&#xAC8C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

DNA helicases replicational &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D;.

La importancia de helicasas en el metabolismo del &aacute;cido nucl&eacute;ico y enfermedad humana ha levantado la barra para entender el funcionan de estas enzimas &uacute;nicas para realizar sus funciones biol&oacute;gicas a nivel molecular. Aqu&iacute; describiremos procedimientos experimentales y estrategias para investigar las funciones de helicasas. Estos ensayos funcionales han sido utilizados para el estudio de ADN helicasas importante para el mantenimiento de la estabilidad gen&oacute;mica y gen&eacute;ticamente ligado al c&aacute;ncer y enfermedades relacionadas con la edad. Nos centraremos en la descripci&oacute;n de la helicasa fluorom&eacute;trico ensayos, ensayos de desplazamiento de prote&iacute;na y m&eacute;todos para caracterizar la actividad helicasa alternativo estructuras de ADN (tr&iacute;plex y cu&aacute;druplex) utilizado por nuestro laboratorio. Se describen los procedimientos para el estudio de estas funciones helicase detalladamente paso a paso para ayudar a los investigadores interesados en el metabolismo del &aacute;cido nucl&eacute;ico y afines aplicar estas t&eacute;cnicas a sus propias preguntas de investigaci&oacute;n.

An&aacute;lisis moleculares de ADN helicasas implicados en la respuesta de estr&eacute;s replicational.

&#x5728;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x788D; Werner &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x5B58;&#x5728;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;/&#x5916;&#x5207;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x62EF;&#x6551; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x9175;&#x6BCD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; Rad50 Mre11-Rad50-Xrs2 &#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x6838;&#x9178;&#x9176;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x4E2D;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x5377;&#x5165;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4FEE;&#x590D;&#x8B66;&#x544A;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x8B66;&#x544A;&#x64CD;&#x4F5C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; yEXO1 &#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x6765;&#x62EF;&#x6551; methylmethane &#x78FA;&#x9178; (MMS) rad50 &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x8B66;&#x544A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5916;&#x5207;&#xFF0C;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684; MMS &#x62B5;&#x6297;&#x3002;&#x5728;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6216; RecQ C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x57DF;&#x8B66;&#x544A;&#x9519;&#x4E49;&#x7A81;&#x53D8;&#x5E72;&#x6270;&#x6551;&#x63F4; rad50 MMS &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8B66;&#x544A;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x4E0D;&#x6551; rad50 &#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04; (IR) &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#xFF0C;&#x63D0;&#x51FA;&#x8B66;&#x544A;&#xFF0C;yEXO1&#xFF0C;&#x4E0E;&#x534F;&#x4F5C;&#x65E8;&#x5728;&#x51CF;&#x8F7B; replicational &#x5E94;&#x529B;&#x65BD;&#x52A0;&#x7684;&#x70F7;&#x57FA;&#x57FA;&#x635F;&#x5BB3;&#x3002;&#x8B66;&#x544A;&#x548C; yEXO1 &#x662F;&#x4F53;&#x5185;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x523A;&#x6FC0; hEXO1 &#x6838;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0E;&#x53C9;&#x5B50;&#x505C;&#x6EDE;&#x4E0D;&#x524D;&#x6216;&#x5012;&#x9000;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; DNA &#x886C;&#x5E95;&#x4E0A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; EXO1 &#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x5E2E;&#x52A9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58; replicational &#x538B;&#x529B;&#x4E2D;&#x3002;&#x4E0E;&#x8B66;&#x544A;&#xFF0C;&#x80CC;&#x5149;&#x6A21;&#x7EC4;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x5728;&#x5E03;&#x5362;&#x59C6;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x5B58;&#x5728;&#x7F3A;&#x9677;&#x672A;&#x80FD;&#x62EF;&#x6551; rad50 MMS &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x90E8;&#x5206;&#x8FD8;&#x539F;&#x7EA2;&#x5916;&#x7535;&#x963B;&#xFF0C;&#x7531;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684; RecQ helicases &#x6697;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x5DE5;&#x3002;

Replicational &#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E0E; EXO1 &#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5212;&#x5206;&#x3002;

The WRN gene defective in the premature aging disorder Werner syndrome encodes a helicase/exonuclease. We examined the ability of WRN to rescue DNA damage sensitivity of a yeast mutant defective in the Rad50 subunit of Mre11-Rad50-Xrs2 nuclease complex implicated in homologous recombination repair. Genetic studies revealed WRN operates in a yEXO1-dependent pathway to rescue rad50 sensitivity to methylmethane sulfonate (MMS). WRN helicase, but not exonuclease, is required for MMS resistance. WRN missense mutations in helicase or RecQ C-terminal domains interfered with the ability of WRN to rescue rad50 MMS sensitivity. WRN does not rescue rad50 ionizing radiation (IR) sensitivity, suggesting that WRN, in collaboration with yEXO1, is tailored to relieve replicational stress imposed by alkylated base damage. WRN and yEXO1 are associated with each other in vivo. Purified WRN stimulates hEXO1 nuclease activity on DNA substrates associated with a stalled or regressed replication fork. We propose WRN helicase operates in an EXO1-dependent pathway to help cells survive replicational stress. In contrast to WRN, BLM helicase defective in Bloom's syndrome failed to rescue rad50 MMS sensitivity, but partially restored IR resistance, suggesting a delineation of function by the human RecQ helicases.

Delineation of WRN helicase function with EXO1 in the replicational stress response.

Le g&#xE8;ne WRN d&#xE9;fectueux dans le vieillissement pr&#xE9;matur&#xE9; de la maladie du syndrome de Werner code pour une h&#xE9;licase / exonucl&#xE9;ase. Nous avons examin&#xE9; la capacit&#xE9; de WRN pour sauver la sensibilit&#xE9; dommages &#xE0; l&#x26;#39;ADN d&#x26;#39;une levure mutante d&#xE9;fectueux dans la sous-unit&#xE9; de Rad50 Rad50-Mre11-Xrs2 complexe nucl&#xE9;ase impliqu&#xE9;s dans la r&#xE9;paration de recombinaison homologue. Des &#xE9;tudes g&#xE9;n&#xE9;tiques ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; WRN op&#xE8;re dans une voie d&#xE9;pendante de yEXO1 pour sauver RAD50 sensibilit&#xE9; &#xE0; sulfonate m&#xE9;thylm&#xE9;thane (MMS). WRN h&#xE9;licase, mais pas exonucl&#xE9;ase, est n&#xE9;cessaire pour la r&#xE9;sistance MMS. WRN mutations faux-sens dans h&#xE9;licase ou RecQ domaines C-terminaux nui &#xE0; la capacit&#xE9; de WRN pour sauver RAD50 sensibilit&#xE9; MMS. WRN ne sauve pas RAD50 rayonnements ionisants (RI) de sensibilit&#xE9;, ce qui sugg&#xE8;re que WRN, en collaboration avec yEXO1, est adapt&#xE9;e pour soulager le stress impos&#xE9; par replicational d&#xE9;g&#xE2;ts de base alkyl&#xE9;e. WRN et yEXO1 sont associ&#xE9;es entre elles in vivo. Purifi&#xE9;e stimule WRN hEXO1 nucl&#xE9;ase activit&#xE9; sur des substrats d&#x26;#39;ADN associ&#xE9;es &#xE0; une fourche de r&#xE9;plication bloqu&#xE9;e ou r&#xE9;gress&#xE9;. Nous proposons WRN h&#xE9;licase op&#xE8;re dans une voie d&#xE9;pendante de EXO1 pour aider les cellules &#xE0; survivre le stress replicational. Contrairement &#xE0; WRN, BLM d&#xE9;fectueux dans le syndrome de Bloom h&#xE9;licase pas pu faire sortir RAD50 sensibilit&#xE9; MMS, mais partiellement restaur&#xE9; la r&#xE9;sistance IR, ce qui sugg&#xE8;re une d&#xE9;limitation de la fonction par les h&#xE9;licases RecQ de l&#x26;#39;homme.

D&#xE9;limitation de la Fonction WRN h&#xE9;licase avec EXO1 dans la r&#xE9;ponse au stress Replicational

Das defekte in der vorzeitiger Alterung Unordnung Werner-Syndrom WRN-Gen kodiert eine Helicase/Exonuklease. Wir pr&uuml;fen die F&auml;higkeit des WRN DNA Sch&auml;den Sensibilit&auml;t der Hefe Mutanten Defekt in der Rad50-Untereinheit des Mre11-Rad50-Xrs2-Nuklease komplexe homologe Rekombination Reparatur in Verbindung gebracht zu retten. Genetische Studien ergab, dass WRN in yEXO1-abh&auml;ngigen Weg zur Rettung von rad50 Empfindlichkeit gegen&uuml;ber Methylmethane-sulfonat (MMS) t&auml;tig ist. WRN Helicase, aber nicht Exonuklease, ist f&uuml;r MMS Widerstand erforderlich. WRN Missense-Mutationen im Helicase oder RecQ C-terminalen Dom&auml;nen wurden behindert die F&auml;higkeit des WRN rad50 MMS Empfindlichkeit zu retten. WRN ist nicht zu retten rad50 ionisierende Strahlung (IR) Empfindlichkeit, darauf hindeutet, dass WRN, in Zusammenarbeit mit yEXO1, zugeschnitten ist, um replicational auferlegten alkyliert Grundschaden Stress abzubauen. WRN und yEXO1 sind in-vivo einander zugeordnet. Gereinigte WRN stimuliert hEXO1 Nuklease Aktivit&auml;t auf DNA-Substraten eine ins Stocken geratene oder Regression Wiederholunggabel zugeordnet. Wir vorschlagen, WRN Helicase betreibt in einem EXO1-abh&auml;ngigen Weg, Zellen, die replicational Stress &uuml;berleben zu helfen. Im Gegensatz zu WRN Fehler BLM Helicase Defekt in der Bloom-Syndrom, rad50 MMS Empfindlichkeit, aber teilweise wiederhergestellten IR-Widerstand, was eine Abgrenzung der Funktion durch die menschlichen RecQ-Helikasen zu retten.

Abgrenzung der WRN Helicase-Funktion mit EXO1 in der replicational Stress-Reaktion.

Il gene WRN difettoso nel disordine l&#39;invecchiamento precoce, sindrome di Werner codifica un helicase/exonuclease. Abbiamo esaminato la possibilit&agrave; di salvare la sensibilit&agrave; danni del DNA di un mutante di lievito difettoso nella subunit&agrave; Rad50 di Mre11-Rad50-Xrs2 nucleasi complessa implicati nella riparazione di ricombinazione omologa avv. Studi genetici hanno rivelato che WRN opera in un percorso di yEXO1-dipendente di salvataggio rad50 sensibilit&agrave; a methylmethane sulfonato (MMS). Elicasi WRN, ma non exonuclease, &egrave; necessaria per la resistenza di MMS. Mutazioni missenso WRN elicasi o domini RecQ C-terminale ha interferito con la possibilit&agrave; di salvare la sensibilit&agrave; MMS rad50 avv. WRN non salvataggio rad50 sensibilit&agrave; radiazioni ionizzanti (IR), suggerendo che WRN, in collaborazione con yEXO1, &egrave; adattato per alleviare lo stress replicazione imposto da alchilati danno base. WRN e yEXO1 sono associati con l&#39;altro in vivo. WRN purificato stimola l&#39;attivit&agrave; della nucleasi hEXO1 su substrati di DNA associato a una forcella di replicazione in stallo o regredito. Proponiamo elicasi WRN opera in un percorso EXO1-dipendente per aiutare le cellule sopravvivono replicazione dello stress. Contrariamente WRN, elicasi BLM difettoso nella sindrome di Bloom non &egrave; riuscito a salvare la sensibilit&agrave; MMS rad50, ma parzialmente restaurato IR resistenza, suggerendo una delineazione della funzione dall&#39;umana RecQ elicasi.

Delineazione della funzione di elicasi WRN con EXO1 nella risposta di sforzo di replicazione.

&#x65E9;&#x671F;&#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x5BB3;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30CA;&#x30FC;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6B20;&#x9665;WRN&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;/&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;MRE11-RAD50-Xrs2&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;RAD50&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x5909;&#x7570;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;WRN&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;WRN&#x306F;&#x3001;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30E1;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#xFF08;MMS&#xFF09;&#x306B;RAD50&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x305F;&#x3081;&#x306B;yEXO1&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;MMS&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;RecQ&#x307E;&#x305F;&#x306F;C&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;WRN&#x30DF;&#x30B9;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;RAD50 MMS&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;WRN&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002; WRN&#x306F;&#x3001;WRN&#x306F;&#x3001;yEXO1&#x3068;&#x5171;&#x540C;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AD;&#x30EB;&#x5316;&#x5869;&#x57FA;&#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8AB2;&#x305B;&#x3089;&#x308C;&#x305F;replicational&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3092;&#x548C;&#x3089;&#x3052;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;RAD50&#x96FB;&#x96E2;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#xFF08;IR&#xFF09;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; WRN&#x3068;yEXO1&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;WRN&#x304C;&#x505C;&#x6B62;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9000;&#x884C;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;DNA&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x306B;hEXO1&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;replicational&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;EXO1&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002; WRN&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;BLM&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;RAD50 MMS&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;IR&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;RecQ&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x7DDA;&#x5F15;&#x304D;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Replicational&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;EXO1&#x3068;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x63CF;&#x5199;

&#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654; &#xC9C8;&#xD658; &#xBCA0;&#xB974;&#xB108; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; WRN &#xC720;&#xC804;&#xC790; helicase/exonuclease &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xD558;&#xB294; Mre11-Rad50-Xrs2 nuclease &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; Rad50 &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xAC10;&#xB3C4; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xACE0;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5F0;&#xAD6C; WRN rad50 &#xAC10;&#xB3C4; methylmethane &#xB41C; (MMS)&#xB97C; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; yEXO1 &#xC885;&#xC18D; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACBD;&#xACE0; helicase, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; exonuclease MMS &#xC800;&#xD56D; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. Helicase &#xB610;&#xB294; RecQ C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; WRN missense &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; rad50 MM &#xAC10;&#xB3C4; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xACBD;&#xACE0;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBC29;&#xD574;. WRN &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; rad50 &#xC804;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; (IR) &#xAC10;&#xB3C4; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xACE0;, yEXO1, &#xD611;&#xB825;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xC5D0; &#xB9DE;&#xB294; alkylated &#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xACFC; &#xB41C; replicational &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD574;&#xC18C;. &#xACBD;&#xACE0; &#xBC0F; yEXO1 vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xD654; WRN &#xC2E4;&#xC18D; &#xB610;&#xB294; &#xC774;&#xC804; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xB418;&#xB3CC;&#xC544;&#xAC04; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; DNA &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; hEXO1 nuclease &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;. &#xACBD;&#xACE0; helicase &#xC140; replicational &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; EXO1 &#xC885;&#xC18D; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xACBD;&#xACE0;, &#xB2EC;&#xB9AC; BLM helicase &#xBE14; &#xB8F8;&#xC758; &#xC2E0;&#xB4DC;&#xB86C;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870; rad50 MM &#xAC10;&#xB3C4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xBB18;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; RecQ helicases&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xB41C; IR &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACBD;&#xACE0; helicase &#xD568;&#xC218; exo1&#xC640; replicational &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBB18;&#xC0AC;.

El gen defectuoso en el WRN envejecimiento prematuro de la enfermedad s&#xED;ndrome de Werner codifica una helicasa / exonucleasa. Hemos examinado la capacidad de WRN para rescatar a la sensibilidad da&#xF1;os en el ADN de una levadura mutante deficiente en la subunidad de la Mre11 Rad50-Rad50-XRS2 nucleasa compleja implicada en la reparaci&#xF3;n de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. Los estudios gen&#xE9;ticos revelaron WRN opera en una v&#xED;a dependiente de yEXO1 para rescatar a la sensibilidad a la RAD50 methylmethane sulfonato (MMS). WRN helicasa, pero no exonucleasa, se requiere para la resistencia MMS. WRN mutaciones sin sentido en helicasa o dominios RecQ C-terminal de interferir con la capacidad de WRN para rescatar a RAD50 sensibilidad de MMS. AVS no rescatar a RAD50 radiaciones ionizantes (RI) la sensibilidad, lo que sugiere que AVS, en colaboraci&#xF3;n con yEXO1, est&#xE1; dise&#xF1;ado para aliviar el estr&#xE9;s replicational impuesta por el da&#xF1;o base alquilado. WRN y yEXO1 est&#xE1;n asociados unos con otros en vivo. WRN purificada estimula hEXO1 actividad de nucleasa en sustratos de ADN asociados con un tenedor de replicaci&#xF3;n estancado o retrocedido. Proponemos helicasa WRN opera en una v&#xED;a dependiente de Exo1 para ayudar a las c&#xE9;lulas sobrevivir el estr&#xE9;s replicational. A diferencia de ABN, BLM defectuosa en el s&#xED;ndrome de Bloom helicasa fallido de rescatar a la sensibilidad RAD50 MMS, pero restaurado parcialmente la resistencia IR, lo que sugiere una delimitaci&#xF3;n de la funci&#xF3;n por los humanos RecQ helicases.

Delimitaci&#xF3;n de la funci&#xF3;n helicasa WRN con Exo1 en la Respuesta al Estr&#xE9;s Replicational

&#x9057;&#x4F20;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7167;&#x4EAE; RecQ helicases &#x7A00;&#x6709;&#x4FEE;&#x590D;&#x6216; replicational &#x7684;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Genetic mutants illuminate the roles of RecQ helicases in recombinational repair or response to replicational stress.

Mutants g&#xE9;n&#xE9;tiques &#xE9;clairer les r&#xF4;les des h&#xE9;licases RecQ en r&#xE9;paration par recombinaison ou de r&#xE9;ponse au stress Replicational

Genetische Mutanten beleuchten die Rolle der RecQ-Helikasen in recombinational Reparatur oder Antwort zu replicational Stress.

Mutanti genetici illuminano i ruoli delle RecQ elicasi nella risposta allo stress replicazione o recombinational riparazione.

&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Replicational&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;RecQ&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7167;&#x3089;&#x3059;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; recombinational &#xC218;&#xB9AC; &#xB610;&#xB294; replicational &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; RecQ helicases&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBC1D;&#xD788;&#xB294;.

Mutantes gen&#xE9;ticos Ilumine las funciones de RecQ helicases en la reparaci&#xF3;n de recombinaci&#xF3;n o la respuesta al estr&#xE9;s Replicational

&#x7531;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x5236;&#x5438;&#x5F15;&#x4E86;&#x6781;&#x5927;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x5C4F;&#x5E55;&#x7528;&#x6765;&#x6807;&#x8BC6;&#x8C03;&#x5236; Werner &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x7EF4;&#x5C14;&#x7EB3; &#xFF08;&#x8B66;&#x544A;&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x788D;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x6240;&#x5C55;&#x5F00;&#x7684; DNA &#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x4ECE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x764C;&#x75C7;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x96C6;&#x4E2D;&#x6307;&#x5B9A; NSC 19630 [1-(propoxymethyl)-&#x9A6C;&#x6765;&#x9170;&#x4E9A;&#x80FA;] &#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x5176;&#x4ED6; DNA helicases [&#x6C34;&#x534E;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; &#xFF08;&#x80CC;&#x5149;&#x6A21;&#x7EC4;&#xFF09;&#x3001; &#x8303;&#x53EF;&#x5C3C;&#x8D2B;&#x8840;&#x7EC4; J (FANCJ)&#x3001; RECQ1&#x3001; RecQ&#x3001; UvrD &#x6216; DnaB&#xFF09;&#x3002;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; NSC 19630 &#x5927;&#x5927;&#x53D7;&#x635F;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#x3001; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x51CB;&#x4EA1;&#x4E2D;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9020;&#x6210;&#x9AD8;&#x67B6;&#x7684; &gamma;-H2AX &#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x6297;&#x539F; (PCNA) &#x75AB;&#x6E90;&#x5730;&#x3002;NSC 19630 &#x66B4;&#x9732;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5EF6;&#x8FDF; S &#x9636;&#x6BB5;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x505C;&#x6EDE;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x548C; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x4E2D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x8B66;&#x544A;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; NSC 19630 &#x81F4;&#x654F;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; G-&#x78C1;&#x8DEF;&#x7ED3;&#x5408;&#x590D;&#x5408; telomestatin &#x6216; poly(ADP ribose) (&#x6CE2;&#x5170;) &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x4E9A;&#x81F4;&#x6B7B;&#x5242;&#x91CF; 19630 NSC &#x4E0E;&#x5316;&#x7597;&#x836F;&#x7269;&#x91D1;&#x559C;&#x91C7;&#x53D6;&#x534F;&#x540C;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5206;&#x5B50;&#x53EF;&#x80FD;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8B66;&#x544A; pathway(s) &#x91CD;&#x8981;&#x7684; dna &#x635F;&#x4F24;&#x4FEE;&#x590D;&#x4E0E; replicational &#x7684;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

&#x7531;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x524A;&#x5F31; Werner &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176; (&#x8B66;&#x544A;) &#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x53CA;&#x5BF9; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x6216;&#x590D;&#x5236;&#x80C1;&#x8FEB;&#x3002;

Modulation of DNA repair proteins by small molecules has attracted great interest. An in vitro helicase activity screen was used to identify molecules that modulate DNA unwinding by Werner syndrome helicase (WRN), mutated in the premature aging disorder Werner syndrome. A small molecule from the National Cancer Institute Diversity Set designated NSC 19630 [1-(propoxymethyl)-maleimide] was identified that inhibited WRN helicase activity but did not affect other DNA helicases [Bloom syndrome (BLM), Fanconi anemia group J (FANCJ), RECQ1, RecQ, UvrD, or DnaB). Exposure of human cells to NSC 19630 dramatically impaired growth and proliferation, induced apoptosis in a WRN-dependent manner, and resulted in elevated Î³-H2AX and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) foci. NSC 19630 exposure led to delayed S-phase progression, consistent with the accumulation of stalled replication forks, and to DNA damage in a WRN-dependent manner. Exposure to NSC 19630 sensitized cancer cells to the G-quadruplex-binding compound telomestatin or a poly(ADP ribose) polymerase (PARP) inhibitor. Sublethal dosage of NSC 19630 and the chemotherapy drug topotecan acted synergistically to inhibit cell proliferation and induce DNA damage. The use of this WRN helicase inhibitor molecule may provide insight into the importance of WRN-mediated pathway(s) important for DNA repair and the replicational stress response.

Inhibition of helicase activity by a small molecule impairs Werner syndrome helicase (WRN) function in the cellular response to DNA damage or replication stress.

Modulation des prot&#xE9;ines de r&#xE9;paration d&#x26;#39;ADN par de petites mol&#xE9;cules a suscit&#xE9; un grand int&#xE9;r&#xEA;t. Un &#xE9;cran en activit&#xE9; h&#xE9;licase in vitro a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour identifier des mol&#xE9;cules qui modulent l&#x26;#39;ADN par d&#xE9;roulement du syndrome de Werner h&#xE9;licase (WRN), mut&#xE9; dans le syndrome de vieillissement pr&#xE9;matur&#xE9; des troubles Werner. Une petite mol&#xE9;cule de la diversit&#xE9; du National Cancer Institute ensemble d&#xE9;sign&#xE9; NSC 19630 [1 - (propoxym&#xE9;thyl)-mal&#xE9;imide] a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9; qui a inhib&#xE9; WRN activit&#xE9; h&#xE9;licase, mais n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;incidence sur d&#x26;#39;autres h&#xE9;licases &#xE0; ADN [le syndrome de Bloom (BLM), l&#x26;#39;an&#xE9;mie de Fanconi groupe J (FANCJ) , RECQ1, RecQ, UvrD, ou DnaB). L&#x26;#39;exposition de cellules humaines de NSC 19630 a grandement nui &#xE0; la croissance et la prolif&#xE9;ration, l&#x26;#39;apoptose induite par une mani&#xE8;re WRN-d&#xE9;pendante, et a abouti &#xE0; &#x3B3;-H2AX &#xE9;lev&#xE9;e et l&#x26;#39;antig&#xE8;ne nucl&#xE9;aire de prolif&#xE9;ration cellulaire (PCNA) des foyers. NSC 19630 exposition conduit &#xE0; retardement S-phase de progression, conforme &#xE0; l&#x26;#39;accumulation des fourches de r&#xE9;plication bloqu&#xE9;es, et dommages &#xE0; l&#x26;#39;ADN d&#x26;#39;une mani&#xE8;re d&#xE9;pendante de WRN. L&#x26;#39;exposition &#xE0; NSC 19630 cellules canc&#xE9;reuses sensibilis&#xE9;s &#xE0; la telomestatin compos&#xE9; G-quadruplexe contraignant ou un poly (ADP ribose) polym&#xE9;rase (PARP) inhibiteur. Dosage subl&#xE9;tale de NSC 19630 et le m&#xE9;dicament de chimioth&#xE9;rapie topot&#xE9;can a agi en synergie pour inhiber la prolif&#xE9;ration cellulaire et d&#x26;#39;induire dommages &#xE0; l&#x26;#39;ADN. L&#x26;#39;utilisation de cette mol&#xE9;cule WRN inhibiteur de l&#x26;#39;h&#xE9;licase peut donner un aper&#xE7;u de l&#x26;#39;importance de WRN-m&#xE9;di&#xE9;e voie (s) importante pour la r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN et la r&#xE9;ponse au stress replicational.

L&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;activit&#xE9; h&#xE9;licase par une petite mol&#xE9;cule &#xE0; porter atteinte syndrome de Werner h&#xE9;licase (WRN) Fonction dans la r&#xE9;ponse cellulaire aux dommages caus&#xE9;s par l&#x26;#39;ADN ou de stress de r&#xE9;plication

Modulation der DNA-Reparatur-Proteine durch kleine Molek&uuml;le hat gro&szlig;es Interesse erregt. Ein in-vitro-Helicase T&auml;tigkeit Bildschirm wurde verwendet, um Molek&uuml;le zu identifizieren, die DNA, die Entladung von Werner-Syndrom Helicase (WRN), mutiert in der Unordnung vorzeitiger Alterung Werner-Syndrom zu modulieren. Ein kleines Molek&uuml;l aus dem National Cancer Institute Vielfalt Set bezeichneten NSC 19630 [1-(Propoxymethyl)-Maleimide] wurde festgestellt, dass WRN Helicase Aktivit&auml;t gehemmt, aber hatte keine Auswirkungen auf andere DNA-Helikasen [Bloom-Syndrom (BLM), Fanconi An&auml;mie Gruppe J (FANCJ), RECQ1, RecQ, UvrD oder DnaB). Exposition menschlicher Zellen zu NSC 19630 drastisch beeintr&auml;chtigt, Wachstum und Vermehrung, induzierte Apoptose in gewissem Sinne WRN-abh&auml;ngige und f&uuml;hrte einer erh&ouml;hten &gamma;-H2AX und wuchernden Zelle Nukle&auml;res Antigen (PCNA) Herde. NSC 19630 Exposition zu versp&auml;teten S-Phase Fortschreiten, Einklang mit der Anh&auml;ufung von steckengebliebenen Replikation Gabeln, und zu DNA-Sch&auml;den in gewissem Sinne WRN-abh&auml;ngige gef&uuml;hrt. Gef&auml;hrdung durch NSC 19630 sensibilisierten Krebszellen die zusammengesetzte Telomestatin G-Quadruplex-Bindung oder ein Poly(ADP ribose)-Polymerase (PARP)-Hemmer. Subletale Dosis von NSC 19630 und der Chemotherapie Drogen Topotecan handelte synergistisch, um Zellproliferation hemmen und DNA-Sch&auml;den zu induzieren. Die Verwendung dieses WRN Helicase-Inhibitor-Molek&uuml;ls kann Einblick in die Bedeutung der WRN-vermittelte Pathway(s) wichtig f&uuml;r die DNA-Reparatur und die replicational Stressantwort vorsehen.

Hemmung der Helicase T&auml;tigkeit durch ein kleines Molek&uuml;l vom Werner-Syndrom Helicase (WRN) Funktion in der zellul&auml;ren Antwort auf DNA-Sch&auml;den oder Replikation Stress beeintr&auml;chtigt.

Modulazione delle proteine di riparazione del DNA da piccole molecole ha suscitato grande interesse. Una schermata attivit&agrave; di helicase in vitro &egrave; stata utilizzata per identificare le molecole che modulano DNA svolgimento da Werner sindrome elicasi (AVV), mutato nel disordine l&#39;invecchiamento precoce, sindrome di Werner. Una piccola molecola dal National Cancer Institute diversit&agrave; Set designato NSC 19630 [1-(propoxymethyl)-con] &egrave; stato identificato che inibisce l&#39;attivit&agrave; dell&#39;elicasi WRN ma non influisce sulle altre DNA elicasi [Bloom sindrome (BLM), Fanconi anemia gruppo J (FANCJ), RECQ1, RecQ, UvrD o DnaB). L&#39;esposizione di cellule umane di NSC 19630 drammaticamente compromessa la crescita e la proliferazione, induce apoptosi in modo WRN-dipendente e portato a &gamma;-H2AX elevati e foci di antigene nucleare (PCNA) delle cellule proliferanti. NSC 19630 esposizione ha portato alla progressione ritardata fase S, coerente con l&#39;accumulo di forcelle replica in stallo e a danni del DNA in modo WRN-dipendente. Esposizione alle cellule tumorali di sensibilizzate 19630 NSC per il G-quadruplex-associazione composti telomestatin o un inibitore di polimerasi (PARP) poly(ADP ribose). Dosaggio subletale di NSC 19630 e il chemioterapia droga topotecano ha agito in sinergia inibiscono la proliferazione cellulare e di indurre danni al DNA. L&#39;uso di questa molecola di inibitore elicasi WRN possa permettono di percepire l&#39;importanza delle vie biochimiche WRN-mediata da importanti per la riparazione del DNA e la risposta allo stress replicazione.

Inibizione dell&#39;attivit&agrave; di helicase da una piccola molecola altera la funzione di Werner sindrome elicasi (AVV) nella risposta cellulare allo stress danni o replica del DNA.

&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x3092;&#x96C6;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x753B;&#x9762;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x5BB3;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30CA;&#x30FC;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3067;&#x5909;&#x7570;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30CA;&#x30FC;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;WRN&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5DFB;&#x304D;DNA&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x56FD;&#x7ACB;&#x304C;&#x3093;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;NSC 19630 [1  - &#xFF08;&#x30D7;&#x30ED;&#x30DD;&#x30AD;&#x30B7;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#xFF09; - &#x30DE;&#x30EC;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C9;] WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;DNA&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;[&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;BLM&#xFF09;&#x3001;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x30B3;&#x30CB;&#x8CA7;&#x8840;&#x7FA4;J&#xFF08;FANCJ&#xFF09; &#x3001;RECQ1&#x3001;RecQ&#x3001;UvrD&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;DnaB&#xFF09;&#x3002; NSC 19630&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x3068;WRN&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x3001;&#x4E0A;&#x6607;&#x3001;&#x3B3;-H2AX&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5897;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x6297;&#x539F;&#xFF08;PCNA&#xFF09;&#x306E;&#x7126;&#x70B9;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; NSC 19630&#x9732;&#x51FA;&#x304C;&#x505C;&#x6B62;&#x3057;&#x305F;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3001;WRN&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;S&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x200B;&#x200B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002; G-&#x56DB;&#x91CD;&#x7D50;&#x5408;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;telomestatin&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;ADP&#x30EA;&#x30DC;&#x30FC;&#x30B9;&#xFF09;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PARP&#xFF09;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;NSC 19630&#x611F;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x3002; NSC 19630&#x3068;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x85AC;&#x306E;&#x30C8;&#x30DD;&#x30C6;&#x30AB;&#x30F3;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7528;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x76F8;&#x4E57;&#x7684;&#x306B;&#x884C;&#x52D5;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x3001;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3068;replicational&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;WRN&#x4EF2;&#x4ECB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#xFF08;s&#xFF09;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x3084;&#x8907;&#x88FD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30CA;&#x30FC;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;WRN&#xFF09;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;

&#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; DNA &#xC218;&#xB9AC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870; &#xD070; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC744; &#xBAA8;&#xC73C;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678; helicase &#xD65C;&#xB3D9; &#xD654;&#xBA74; &#xBCC0;&#xC870; &#xBCA0;&#xB974;&#xB108; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xBCA0;&#xB974;&#xB108; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; helicase (&#xACBD;&#xACE0;), &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xD574;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAD6D;&#xB9BD; &#xC554; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC18C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C0;&#xC815; NSC 19630 [1-(propoxymethyl)-maleimide] &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xACE0; helicase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB978; DNA helicases [&#xBE14; &#xB8F8; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (BLM), Fanconi &#xBE48; &#xD608; &#xADF8;&#xB8F9; J (FANCJ), RECQ1, RecQ, UvrD, &#xB610;&#xB294; DnaB)&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; NSC 19630 &#xB178;&#xCD9C; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xD655;&#xC0B0; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00;, &#xACBD;&#xACE0;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &gamma; H2AX &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC138;&#xD3EC; &#xD575; &#xD56D; &#xC6D0; (PCNA) foci&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC;. NSC 19630 &#xB178;&#xCD9C; &#xC8FC;&#xB3C4; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; S &#xB2E8;&#xACC4; &#xC9C4;&#xD589;, &#xC2E4;&#xC18D;&#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xACBD;&#xACE0;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; DNA &#xC190;&#xC0C1;. G quadruplex &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCEF4;&#xD30C;&#xC6B4;&#xB4DC; telomestatin&#xC5D0;&#xB294; poly(ADP ribose) (PARP) &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; NSC 19630 &#xBBFC;&#xAC10;&#xD558;&#xAC8C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;. NSC 19630 &#xBC0F; &#xD654;&#xD559; &#xC694;&#xBC95; &#xC57D;&#xBB3C; topotecan sublethal &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xD589;&#xB3D9; synergistically &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;. &#xC774; &#xACBD;&#xACE0; helicase &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; pathway(s) DNA &#xC218;&#xB9AC; &#xBC0F; replicational &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACBD;&#xACE0; &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; helicase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xC190;&#xC0C1; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC774; &#xB098; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCA0;&#xB974;&#xB108; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; helicase (&#xACBD;&#xACE0;) &#xAE30;&#xB2A5;.

La modulaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas de reparaci&#xF3;n del ADN por peque&#xF1;as mol&#xE9;culas ha despertado gran inter&#xE9;s. Una pantalla en la actividad in vitro helicasa se utiliz&#xF3; para identificar las mol&#xE9;culas que modulan la anulaci&#xF3;n de ADN por el s&#xED;ndrome de Werner helicasa (AVS), mutado en el s&#xED;ndrome de envejecimiento prematuro de trastorno de Werner. Una peque&#xF1;a mol&#xE9;cula del Instituto Nacional del C&#xE1;ncer Diversidad conjunto designado NSC 19630 [1 - (propoximetil)-maleimida] se identific&#xF3; que inhibe la actividad helicasa WRN, pero no afect&#xF3; otras helicasas del ADN [s&#xED;ndrome de Bloom (BLM), la anemia de Fanconi grupo J (FANCJ) , RecQ1, RecQ, UvrD o DnaB). La exposici&#xF3;n de las c&#xE9;lulas humanas a la NSC 19630 afectado profundamente el crecimiento y la proliferaci&#xF3;n, la apoptosis inducida de manera WRN-dependiente, y dio lugar a elevaci&#xF3;n de &#x3B3;-H2AX y el ant&#xED;geno nuclear de proliferaci&#xF3;n celular (PCNA) focos. NSC 19630 de la exposici&#xF3;n dio lugar a retraso en la progresi&#xF3;n de la fase S, en consonancia con la acumulaci&#xF3;n de las horquillas de replicaci&#xF3;n en punto muerto, y al da&#xF1;o del ADN en una forma dependiente de la AVS. La exposici&#xF3;n a la NSC 19630 c&#xE9;lulas cancerosas sensibles a la telomestatin compuesto G-cu&#xE1;druplex vinculante o un poli (ADP ribosa) polimerasa (PARP) inhibidor. Dosis subletal de NSC 19630 y el topotecan f&#xE1;rmaco de quimioterapia act&#xFA;an de forma sin&#xE9;rgica para inhibir la proliferaci&#xF3;n celular e inducir da&#xF1;o en el ADN. El uso de esta mol&#xE9;cula inhibidora WRN helicasa puede dar una idea de la importancia de la WRN mediada por la v&#xED;a (s) importante para la reparaci&#xF3;n del ADN y la respuesta al estr&#xE9;s replicational.

La inhibici&#xF3;n de la actividad helicasa por una peque&#xF1;a mol&#xE9;cula que afecte el S&#xED;ndrome de Werner helicasa (ABN) Funci&#xF3;n en la respuesta celular al da&#xF1;o del ADN o replicaci&#xF3;n de estr&#xE9;s

Article	Year
Giant cystic lymphangioma of the middle mediastinum. The Indian journal of chest diseases & allied sciences\| PubMed ID: 12715936	2003
Molecular cloning and biochemical characterization of a 3'(2'),5'-bisphosphate nucleotidase from Debaryomyces hansenii. Yeast (Chichester, England)\| PubMed ID: 15849794	2005
Debaryomyces hansenii, a highly osmo-tolerant and halo-tolerant yeast, maintains activated Dhog1p in the cytoplasm during its growth under severe osmotic stress. Current genetics\| PubMed ID: 16091960	2005
Role of N-terminal hydrophobic region in modulating the subcellular localization and enzyme activity of the bisphosphate nucleotidase from Debaryomyces hansenii. Eukaryotic cell\| PubMed ID: 16467467	2006
Creation of salt-insensitive 3'(2'),5'-bisphosphate nucleotidase by modeling and mutagenesis approach. Archives of biochemistry and biophysics\| PubMed ID: 17983588	2008
Hitting the bull's eye: novel directed cancer therapy through helicase-targeted synthetic lethality. Journal of cellular biochemistry\| PubMed ID: 19173305	2009
Premature aging syndrome gene WRN genetically interacts with a topoisomerase. Cell cycle (Georgetown, Tex.)\| PubMed ID: 19587535	2009
WRN helicase defective in the premature aging disorder Werner syndrome genetically interacts with topoisomerase 3 and restores the top3 slow growth phenotype of sgs1 top3. Aging\| PubMed ID: 20157511	2009
Molecular analyses of DNA helicases involved in the replicational stress response. Methods (San Diego, Calif.)\| PubMed ID: 20188837	2010
Delineation of WRN helicase function with EXO1 in the replicational stress response. DNA repair\| PubMed ID: 20447876	2010
Genetic mutants illuminate the roles of RecQ helicases in recombinational repair or response to replicational stress. Cell cycle (Georgetown, Tex.)\| PubMed ID: 20703073	2010
Inhibition of helicase activity by a small molecule impairs Werner syndrome helicase (WRN) function in the cellular response to DNA damage or replication stress. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 21220316	2011

Monika Aggarwal

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