isolation-mrnas-associated-with-yeast-mitochondria-to-study

Isolation of mRNAs Associated with Yeast Mitochondria to Study Mechanisms of Localized Translation

Most of mitochondrial proteins are encoded in the nucleus and need to be imported into the organelle. Import may occur while the protein is synthesized ...

Technion - Israel Institute of Technology

&#xB9CE;&#xC740; &#xD575; &#xBCC0;&#xD558;&#xAC8C; mRNAs &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xBC14;&#xAE65; &#xB9C9; &#xADFC;&#xCC98; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xC9C1; &#xD574;&#xACB0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; Mrnas&#xC758; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC120;&#xBB3C;&#xC774; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; Ssa1 &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0;. Ssa1 &#xACE0;&#xAC08;&#xC758; overexpression &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; mRNA &#xD611;&#xD68C;&#xB97C; &#xB0AE; &#xCDC4; &#xB2E4;. &#xAC8C;&#xB188; &#xB113;&#xC740; &#xBD84;&#xC11D; &#xD2B9;&#xC218; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; mRNAs &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xC0C1; &#xBAA9;&#xD45C; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; tom70&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD3D0;&#xC9C0; Ssa1 overexpression Tom70 &#xB300;&#xC0C1; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; Mrnas&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; &#xC5ED;&#xD560; ssa1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC7AC; &#xBBF8;&#xD1A0;, co-translational &#xC804;&#xC1A1; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;&#xB97C; &#xCD08;&#xAE30; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xBCF4;&#xC19C; mRNA &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; Ssa1 mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB97C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

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&#x86CB;&#x767D;&#x4F34;&#x4FA3; Ssa1 &#x5F71;&#x54CD; mRNA &#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x3002;

Many nuclear-transcribed mRNAs encoding mitochondrial proteins are localized near the mitochondrial outer membrane. A yet unresolved question is whether protein synthesis is important for transport of these mRNAs to their destination. Herein we present a connection between mRNA localization in yeast and the protein chaperone Ssa1. Ssa1 depletion lowered mRNA association with mitochondria while its overexpression increased it. A genome-wide analysis revealed that Ssa proteins preferentially affect mRNAs encoding hydrophobic proteins, which are expected targets for these protein chaperones. Importantly, deletion of the mitochondrial receptor Tom70 abolished the impact of Ssa1 overexpression on mRNAs encoding Tom70 targets. Taken together, our results suggest a role for Ssa1 in mediating localization of nascent peptide-ribosome-mRNA complexes to the mitochondria, consistent with a co-translational transport process.

The protein chaperone Ssa1 affects mRNA localization to the mitochondria.

Beaucoup nucl&eacute;aire-transcription de l&#39;ARNm codant pour des prot&eacute;ines mitochondriales est localis&eacute;es pr&egrave;s de la membrane externe mitochondriale. Une question non encore r&eacute;solue, c&#39;est que la synth&egrave;se des prot&eacute;ines est importante pour le transport de ces ARNm vers leur destination. Ici, nous pr&eacute;sentons un lien entre la localisation d&#39;ARNm dans la levure et l&#39;escorte de prot&eacute;ine Ssa1. Appauvrissement Ssa1 abaiss&eacute; association d&#39;ARNm avec les mitochondries tandis que sa surexpression a augment&eacute;. Une analyse du g&eacute;nome a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les prot&eacute;ines Ssa affectent pr&eacute;f&eacute;rentiellement ARNm codant pour des prot&eacute;ines hydrophobes, qui sont la cible pr&eacute;vue pour ces chaperons de prot&eacute;ine. Ce qui est important, suppression du r&eacute;cepteur mitochondrial Tom70 aboli l&#39;impact de la surexpression de Ssa1 sur l&#39;ARNm codant pour des objectifs de Tom70. Pris ensemble, nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent un r&ocirc;le pour Ssa1 dans la m&eacute;diation de la localisation des complexes de mRNA-ribosome-peptide naissants aux mitochondries, conform&eacute;ment &agrave; un processus de transfert de transport.

L&#39;escorte de prot&eacute;ine Ssa1 affecte la localisation d&#39;ARNm aux mitochondries.

Viele nukleare transkribiert mRNAs Codierung mitochondriale Proteine sind in der N&auml;he der mitochondrialen Au&szlig;enmembran lokalisiert. Noch ungekl&auml;rt ist, ob die Proteinsynthese ist wichtig f&uuml;r den Transport dieser mRNAs an ihr Ziel. Hier pr&auml;sentieren wir eine Verbindung zwischen mRNA Lokalisierung in Hefe und das Protein Chaperone Ssa1. Ssa1 Ersch&ouml;pfung gesenkt mRNA Verband mit Mitochondrien, w&auml;hrend seine &Uuml;berexpression es erh&ouml;ht. Eine genomweiten Analyse ergab, dass Ssa Proteine betreffen vorzugsweise mRNAs Codierung hydrophobe Proteine, die erwarteten Ziele f&uuml;r diese Protein-Chaperone sind. L&ouml;schung der mitochondrialen Rezeptor Tom70 abgeschafft wichtiger ist, die Auswirkungen der Ssa1 &Uuml;berexpression auf mRNAs Codierung Tom70 Ziele. Zusammen genommen, weisen unsere Ergebnisse eine Rolle f&uuml;r Ssa1 bei der Vermittlung von Lokalisierung der entstehenden Peptid-Ribosom-mRNA-komplexe in den Mitochondrien, mit einem co-translational Transportprozess.

Das Protein-Chaperone Ssa1 betrifft mRNA Lokalisierung in den Mitochondrien.

Molti mRNA nucleare trascritti codificano per proteine mitocondriali &egrave; localizzati vicino alla membrana mitocondriale esterna. Una questione ancora irrisolta &egrave; sia la sintesi proteica sono importante per il trasporto di questi mRNAs alla loro destinazione. Qui vi presentiamo una connessione tra il chaperone proteina Ssa1 e localizzazione di mRNA in lievito. Ssa1 deplezione abbassato associazione mRNA con mitocondri mentre sua sovraespressione &egrave; aumentato. Un&#39;analisi genome-wide ha rivelato che le proteine Ssa colpiscono preferenzialmente mRNA codificano per proteine idrofobiche, che sono gli obiettivi previsti per queste proteine chaperoni. Soprattutto, eliminazione del recettore mitocondriale Tom70 abolito l&#39;impatto dell&#39;iperespressione Ssa1 su mRNAs encoding Tom70 obiettivi. Presi insieme, i nostri risultati suggeriscono un ruolo per Ssa1 nella mediazione della localizzazione dei complessi peptide-ribosoma-mRNA nascente ai mitocondri, coerenti con un processo di trasporto co-translational.

Il chaperone proteina Ssa1 influisce sulla localizzazione di mRNA per i mitocondri.

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&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; Ssa1 &#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; mRNA &#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Muchos los mRNAs transcripci&oacute;n nuclear que codifican las prote&iacute;nas mitocondriales se localizan cerca de la membrana mitocondrial externa. Una cuesti&oacute;n a&uacute;n sin resolver es si la s&iacute;ntesis de prote&iacute;nas es importante para el transporte de estos mRNAs a su destino. Aqu&iacute; presentamos una conexi&oacute;n entre la localizaci&oacute;n del mRNA en la levadura y el acompa&ntilde;ante de prote&iacute;na Ssa1. Ssa1 agotamiento baja asociaci&oacute;n mRNA con mitocondrias mientras que su sobreexpresi&oacute;n aument&oacute;. Un an&aacute;lisis del genoma revel&oacute; que las prote&iacute;nas de la Ssa afectan preferentemente mRNAs que codifican las prote&iacute;nas hidrof&oacute;bicas, que son objetivos previstos para estas prote&iacute;nas chaperonas. Lo importante, eliminaci&oacute;n del receptor mitocondrial Tom70 hab&iacute;a suprimido el impacto de la sobreexpresi&oacute;n de Ssa1 en mRNAs codificaci&oacute;n Tom70 objetivos. Tomados en conjunto, nuestros resultados sugieren un papel para Ssa1 en la mediaci&oacute;n de la localizaci&oacute;n de la nacientes complejos p&eacute;ptido-ribosoma-mRNA a la mitocondria, consistente con un proceso de transporte co-translational.

Chen Lesnik

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