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Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid (MYTH) System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions

The fundamental biological and clinical importance of integral membrane proteins prompted the development of a yeast-based system for the high-throughput ...

University of Toronto

(Ado) &#x817A;&#x82F7;&#x6FC0;&#x9176; (ADK &#xFF1B;EC 2.7.1.20 ATP:Ado 5&#39; &#x78F7;&#x9178;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;) &#x50AC;&#x5316;&#x6253;&#x635E;&#x817A;&#x560C;&#x5464;&#x82F7;&#x4ECE; Ado &#x548C; ATP &#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x3001; ADK &#x88AB;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x83DC;&#x82B1;&#x5206;&#x4EAB; 89%&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x5E76;&#x5728;&#x53F6;&#x3001; &#x830E;&#x3001; &#x6839;&#x3001; &#x82B1;&#x4E00;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684; ADK &#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x884C;&#x6B64;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x5DF2;&#x521B;&#x5EFA;&#x7684;&#x610F;&#x8BC6;&#x548C;&#x53CD;&#x4E49; ADK1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;ADK &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x884C;&#x8303;&#x56F4;&#x4ECE; 7%&#x5230; 70%&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;50%&#x6216;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x6709;&#x5F62;&#x6001;&#x6B63;&#x5E38;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x53CD;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x690D;&#x7269;&#x5C0F;&#x4E8E; 10 %adk &#x6D3B;&#x52A8;&#x8F83;&#x5C0F;&#x4E0E;&#x5706;&#x89D2;&#x3001; &#x6CE2;&#x6D6A;&#x6811;&#x53F6;&#x548C;&#x7D27;&#x51D1;&#x3001; &#x6D53;&#x5BC6;&#x7684;&#x5916;&#x89C2;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4E3B;&#x830E;&#x7684;&#x4F38;&#x957F;&#xFF0C;&#x957F;&#x4ECE;&#x73AB;&#x7470;&#x6269;&#x5C55;&#x7FA4;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3002;&#x751F;&#x80B2;&#x7387;&#x964D;&#x4F4E;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x96C4;&#x854A;&#x7684;&#x82B1;&#x4E1D;&#x600E;&#x4E48;&#x4E0D;&#x5EF6;&#x957F;&#x6B63;&#x5E38; &#xFF1B;&#x4E0B;&#x80DA;&#x8F74;&#x548C;&#x6839;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x4E5F;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x3002;S-&#x817A;&#x82F7;-L-&#x667A;&#x4EBA;-&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178; (&#x86DB;&#x7F51;) &#x6C34;&#x89E3;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; S-&#x817A;&#x82F7;-L-&#x86CB;&#x6C28;&#x9178; (SAM)-&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x7684; Ado &#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;Ado &#x6253;&#x635E; ADK &#x7F3A;&#x884C;&#x4E2D;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x86DB;&#x7F51;&#x6C34;&#x5E73;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; SAM transmethylation &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7531;&#x67D3;&#x8272;&#x948C;&#x7EA2;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x6216;&#x76F4;&#x63A5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x76D1;&#x6D4B;&#x662F;&#x679C;&#x80F6;&#x7684; ADK &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E0E; methylesterified &#x4E2D;&#x79CD;&#x5B50;&#x7C98;&#x6DB2;&#xFF0C;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;Ado &#x5FC5;&#x987B;&#x7A33;&#x6B65;&#x5E26;&#x8D70; ADK&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62; SAH &#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x7684;&#x53CD;&#x9988;&#x6291;&#x5236;&#x53CA;&#x4FDD;&#x6301; SAM &#x5229;&#x7528;&#x548C;&#x518D;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;

&#x817A;&#x82F7;&#x6FC0;&#x9176;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x75C7;&#x662F;&#x4E0E;&#x53D1;&#x80B2;&#x5F02;&#x5E38;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684; transmethylation &#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

Adenosine (Ado) kinase (ADK; ATP:Ado 5' phosphotransferase, EC 2.7.1.20) catalyzes the salvage synthesis of adenine monophosphate from Ado and ATP. In Arabidopsis, ADK is encoded by two cDNAs that share 89% nucleotide identity and are constitutively, yet differentially, expressed in leaves, stems, roots, and flowers. To investigate the role of ADK in plant metabolism, lines deficient in this enzyme activity have been created by sense and antisense expression of the ADK1 cDNA. The levels of ADK activity in these lines range from 7% to 70% of the activity found in wild-type Arabidopsis. Transgenic plants with 50% or more of the wild-type activity have a normal morphology. In contrast, plants with less than 10% ADK activity are small with rounded, wavy leaves and a compact, bushy appearance. Because of the lack of elongation of the primary shoot, the siliques extend in a cluster from the rosette. Fertility is decreased because the stamen filaments do not elongate normally; hypocotyl and root elongation are reduced also. The hydrolysis of S-adenosyl-L-homo-cysteine (SAH) produced from S-adenosyl-L-methionine (SAM)-dependent methylation reactions is a key source of Ado in plants. The lack of Ado salvage in the ADK-deficient lines leads to an increase in the SAH level and results in the inhibition of SAM-dependent transmethylation. There is a direct correlation between ADK activity and the level of methylesterified pectin in seed mucilage, as monitored by staining with ruthenium red, immunofluorescence labeling, or direct assay. These results indicate that Ado must be steadily removed by ADK to prevent feedback inhibition of SAH hydrolase and maintain SAM utilization and recycling.

Adenosine kinase deficiency is associated with developmental abnormalities and reduced transmethylation.

L&#39;ad&eacute;nosine (Ado) kinase (ADK ; ATP:ADO 5&#39; phosphotransf&eacute;rase, EC 2.7.1.20) catalyse la synth&egrave;se de la r&eacute;cup&eacute;ration de l&#39;ad&eacute;nine monophosphate d&#39;Ado et l&#39;ATP. Chez Arabidopsis, ADK est cod&eacute;e par deux ADNc partage identit&eacute; nucl&eacute;otidique de 89 % et est constitutivement, mais diff&eacute;remment, exprim&eacute;es dans les feuilles, les tiges, les racines et les fleurs. Afin d&#39;&eacute;tudier le r&ocirc;le de ADK dans le m&eacute;tabolisme de la plante, lignes de d&eacute;ficients en activit&eacute; de cette enzyme ont &eacute;t&eacute; cr&eacute;&eacute;s par les sens et antisense expression de l&#39;ADNc codant pour ADK1. Les niveaux d&#39;activit&eacute; ADK dans la gamme de ces lignes de 7 % &agrave; 70 % de l&#39;activit&eacute; dans Arabidopsis de type sauvage. Plantes transg&eacute;niques avec 50 % ou plus de l&#39;activit&eacute; de type sauvage ont une morphologie normale. En revanche, les plantes avec moins de 10 % l&#39;activit&eacute; ADK sont petites avec des feuilles arrondies, ondul&eacute;s et un aspect compact, buissonnant. En raison de l&#39;absence d&#39;&eacute;longation de la tige principale, les siliques s&#39;&eacute;tendent dans un cluster de la rosette. La fertilit&eacute; diminue parce que les filaments staminaux ne s&#39;allongent pas normalement ; &eacute;longation de l&#39;hypocotyle et des racines sont &eacute;galement r&eacute;duits. L&#39;hydrolyse de la S-ad&eacute;nosyl-L-homo-cyst&eacute;ine (SAH) produit &agrave; partir de S-ad&eacute;nosyl-L-m&eacute;thionine (SAM)-r&eacute;actions de m&eacute;thylation d&eacute;pendante est une source essentielle d&#39;Ado dans les plantes. L&#39;absence de r&eacute;cup&eacute;ration de Ado dans les lignes de d&eacute;ficients ADK entra&icirc;ne une augmentation du niveau de la SAH et entra&icirc;ne l&#39;inhibition de la transm&eacute;thylation SAM-d&eacute;pendante. Il y a une corr&eacute;lation directe entre l&#39;activit&eacute; de l&#39;ADK et le niveau de methylesterified de pectine dans le mucilage des graines, sous la supervision de la coloration au rouge de ruth&eacute;nium, immunofluorescence labeling ou dosage direct. Ces r&eacute;sultats indiquent que Ado doit &ecirc;tre progressivement &eacute;limin&eacute; par ADK pour emp&ecirc;cher la r&eacute;tro-inhibition de SAH hydrolase et maintenir l&#39;utilisation de SAM et de recyclage.

Insuffisance de kinase de l&#39;ad&eacute;nosine est associ&eacute;e &agrave; des anomalies du d&eacute;veloppement et de la transm&eacute;thylation r&eacute;duite.

Adenosin-Kinase-Mangel ist mit Entwicklungsst&#xF6;rungen und reduzierte Transmethylierung assoziiert.

Chinasi di adenosina (Ado) (ADK; ATP:ADO 5&#39; fosfotransferasi, CE 2.7.1.20) catalizza la seguente sintesi salvataggio di adenina monofosfato da Ado e ATP. In Arabidopsis, ADK &egrave; codificato da due cDNAs che condividono identit&agrave; nucleotidica 89% e sono costitutivamente, eppure differenzialmente, espressi in foglie, steli, radici e fiori. Per indagare il ruolo di ADK nel metabolismo della pianta, linee carente in questa attivit&agrave; enzimatica sono stati creati da senso e antisenso espressione del cDNA ADK1. I livelli di attivit&agrave; ADK in questi range di linee dal 7% al 70% dell&#39;attivit&agrave; trovato in Arabidopsis wild-type. Piante transgeniche con 50% o pi&ugrave; del selvaggio-tipo attivit&agrave; hanno una morfologia normale. Al contrario, le piante con meno di 10% attivit&agrave; ADK sono di piccole dimensioni con foglie arrotondate, ondulate e un aspetto compatto e cespuglioso. A causa della mancanza di allungamento del tralcio primario, le silique si estendono in un cluster da Rosetta. Fertilit&agrave; &egrave; diminuita perch&eacute; i filamenti di stame non allungare normalmente; allungamento ipocotile e radice sono ridotti anche. L&#39;idrolisi di S-adenosil-L-homo-cisteina (SAH) prodotta dalla S-adenosil-L-metionina (SAM)-reazioni di metilazione dipendente &egrave; una fonte chiave di Ado in piante. La mancanza del salvataggio Ado nelle linee ADK-carenti conduce ad un aumento del livello di SAH e provoca l&#39;inibizione di SAM-dependent transmethylation. C&#39;&egrave; una correlazione diretta tra l&#39;attivit&agrave; ADK e il livello di methylesterified pectina in mucillagine di semi, come monitorate dalla colorazione con rosso di rutenio, immunofluorescenza etichettatura o dosaggio diretto. Questi risultati indicano che Ado deve essere costantemente rimosso da ADK per evitare feedback inibizione di SAH idrolasi e mantenere l&#39;utilizzo SAM e riciclaggio.

Deficit di adenosina chinasi &egrave; associato con anomalie dello sviluppo e ridotta transmethylation.

&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3; (Ado) &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;ADK;ATP:Ado 5&#39; &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;EC 2.7.1.20) &#x304B;&#x3089; Ado &#x3068; ATP &#x306E; amp &#x306E;&#x30B5;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B8;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; ADK 89 &#xFF05; &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; &#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3057;, &#x307E;&#x3060;&#x5DEE;&#x52D5;&#x3001;&#x8449;&#x3001;&#x830E;&#x3001;&#x6839;&#x3068;&#x82B1;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E; Cdna &#x3067;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; ADK &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; &#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x5F0F; ADK1 cDNA &#x306B;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ADK &#x6D3B;&#x52D5; 7% &#x304B;&#x3089;&#x767A;&#x898B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E; 70% &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x884C;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x690D;&#x7269;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E; 50 &#xFF05; &#x4EE5;&#x4E0A;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306F;&#x3001;10 &#xFF05; &#x672A;&#x6E80;&#x3067; ADK &#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x4E38;&#x307F;&#x3092;&#x5E2F;&#x3073;&#x305F;&#x3001;&#x6CE2;&#x72B6;&#x306E;&#x8449;&#x3068;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x3001;&#x3075;&#x3055;&#x3075;&#x3055;&#x3057;&#x305F;&#x5916;&#x89B3;&#x3068;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x306E;&#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;siliques &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5185;&#x30ED;&#x30BC;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E0D;&#x598A;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x96C4;&#x3057;&#x3079;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5EF6;&#x9577;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;;&#x80DA;&#x8EF8;&#x3068;&#x6839;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x3082;&#x524A;&#x6E1B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;S-&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30EB;-L-&#x30DB;&#x30E2;-&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; (SAH) &#x306E;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x53CD;&#x5FDC;&#x751F;&#x6210; S-&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30EB;-L-&#x30E1;&#x30C1;&#x30AA;&#x30CB;&#x30F3;&#x304B;&#x3089; (SAM)-&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F; Ado &#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x6E90;&#x690D;&#x7269;&#x3002;Ado &#x30B5;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B8; ADK &#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306F; SAH &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30B5;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x578B; transmethylation &#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x8D64;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x6C5A;&#x640D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x3066; ADK &#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x7A2E;&#x5B50;&#x7C98;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306E; methylesterified &#x306E;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x95A2;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Ado &#x304C;&#x7740;&#x5B9F;&#x306B;&#x30B5;&#x30E0;&#x5229;&#x7528;&#x3068;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057; SAH &#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x3001;ADK &#x3067;&#x524A;&#x9664;&#x3057;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x306A;&#x3089;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6B20;&#x4E4F;&#x75C7;&#x306F;&#x767A;&#x9054;&#x7570;&#x5E38;&#x3068;&#x524A;&#x6E1B; transmethylation &#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; (Ado) &#xB2C8; (ADK; ATP:Ado 5&#39; phosphotransferase, EC 2.7.1.20) Ado&#xC640; ATP&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xB370;&#xB2CC; monophosphate &#xAD6C;&#xC870; &#xD569;&#xC131; catalyzes. Arabidopsis, ADK 89% &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; constitutively, &#xC544;&#xC9C1; &#xCC28;&#xB3D9;, &#xC78E;, &#xC904;&#xAE30;, &#xBFCC;&#xB9AC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAF43;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; Cdnas&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD;&#xBB3C; &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0; ADK&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xC120; &#xACB0;&#xD54D;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xAC10;&#xAC01;&#xACFC; &#xC13C;&#xC2A4; ADK1 cDNA &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xAC83;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; Arabidopsis&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; 70%&#xB85C; 7%&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB77C;&#xC778; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; ADK &#xD65C;&#xB3D9; &#xC218;&#xC900;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC911; 50% &#xC774;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC2DD;&#xBB3C; 10% &#xBBF8;&#xB9CC; ADK &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xC791;&#xC740; &#xBB3C;&#xACB0; &#xBAA8;&#xC591;, &#xC78E; &#xBC0F; &#xC18C;&#xD615;, &#xB365; &#xC218; &#xB8E9; &#xD55C; &#xBAA8;&#xC2B5;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xCD2C;&#xC601;&#xC758; &#xC5F0;&#xC2E0; &#xC728; &#xBD80;&#xC871; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; siliques &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0;&#xB294; &#xC7A5;&#xBBF8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xC7A5;. &#xBD88; &#xC784;&#xC740; &#xC624;&#xC2DC; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xB97C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; hypocotyl &#xBC0F; &#xB8E8;&#xD2B8; &#xC5F0;&#xC2E0; &#xC728;&#xB3C4; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. S-adenosyl-L-&#xD638;&#xBAA8;-&#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; (SAH)&#xC758; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; S-adenosyl-L-&#xBA54;&#xD2F0;&#xC624;&#xB2CC; (SAM)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC0B0;-&#xC885;&#xC18D; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBC18;&#xC751; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; Ado&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC6D0;&#xCC9C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. ADK &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; Ado &#xC778;&#xC591; &#xBD80;&#xC871; SAH &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC99D;&#xAC00;&#xB85C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5B4; &#xB0B8;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC0D8; &#xC885;&#xC18D; transmethylation&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC5D0;. &#xB8E8; &#xD14C; &#xB284; &#xB808;&#xB4DC;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xB77C;&#xBCA8; &#xB610;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC640; &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xC11C; ADK &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; &#xC528;&#xC557; &#xC810;&#xC561;&#xC5D0; methylesterified &#xD399; &#xD2F4;&#xC758; &#xC218;&#xC900; &#xC0AC;&#xC774; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; Ado ADK SAH &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31; &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC0D8; &#xD65C;&#xC6A9;&#xB3C4; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xC5EC; &#xAFB8;&#xC900;&#xD788; &#xC81C;&#xAC70; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC774;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; transmethylation&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Quinasa de la adenosina (Ado) (ADK; ATP:ADO 5&#39; fosfotransferasa, EC 2.7.1.20) cataliza la s&iacute;ntesis de salvamento de monofosfato de adenina de Ado y ATP. En Arabidopsis, ADK est&aacute; codificada por dos cDNAs que comparten la identidad del nucle&oacute;tido de 89% y expresan constitutivamente, aunque diferenciado, en hojas, tallos, ra&iacute;ces y flores. Para investigar el papel de ADK en el metabolismo vegetal, l&iacute;neas deficientes en esta actividad de la enzima han sido creadas por el sentido y antisentido expresi&oacute;n del cDNA ADK1. Los niveles de actividad ADK en comprenden l&iacute;neas de 7% a 70% de la actividad en Arabidopsis salvaje-tipo. Las plantas transg&eacute;nicas con 50% o m&aacute;s de la actividad de tipo salvaje tienen una morfolog&iacute;a normal. Por el contrario, las plantas con menos del 10% actividad ADK son peque&ntilde;as con hojas redondeadas, onduladas y un aspecto compacto y tupido. Debido a la falta del alargamiento de la sesi&oacute;n principal, las silicuas extienden en un cl&uacute;ster de la roseta. La fertilidad se reduce porque los filamentos de estambre no alargar normalmente; alargamiento del hipoc&oacute;tilo y la ra&iacute;z se reducen tambi&eacute;n. La hidr&oacute;lisis de la S-adenosil-L-homo-ciste&iacute;na (SAH) producido a partir de la S-adenosil-L-metionina (SAM)-reacciones dependientes de la metilaci&oacute;n es una fuente clave de Ado en plantas. La falta de salvamento de Ado en las l&iacute;neas de ADK-deficiente conduce a un aumento en el nivel SAH y da lugar a la inhibici&oacute;n de transmetilaci&oacute;n SAM-dependiente. Hay una correlaci&oacute;n directa entre la actividad ADK y el nivel de methylesterified pectina de muc&iacute;lago de la semilla, como seguimiento mediante tinci&oacute;n con rojo de rutenio, etiquetado de inmunofluorescencia o ensayo directo. Estos resultados indican que Ado debe eliminarse progresivamente por ADK para evitar la inhibici&oacute;n de la regeneraci&oacute;n de SAH hidrolasa y mantener SAM utilizaci&oacute;n y reciclaje.

Deficiencia de adenosina se asocia con anormalidades de desarrollo y reducci&oacute;n de transmetilaci&oacute;n.

AAA + &#x4E09;&#x662F;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x8058;&#x8BF7;&#x4ECE; ATP &#x6C34;&#x89E3;&#x91CD;&#x5851;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3001; DNA &#x6216; RNA &#x4E2D;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x80FD;&#x91CF;&#x3002;MoxR &#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684; AAA + &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x904D;&#x5E03;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x53E4;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x800C;&#x662F;&#x57FA;&#x672C;&#x4E0A;&#x65E0;&#x3002;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x5DF2;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5206;&#x5B50;&#x4F34;&#x4FA3;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5927;&#x4F1A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x65E8;&#x5728;&#x786E;&#x5B9A;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x65B0;&#x578B; AAA + &#x4F34;&#x4FA3;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x52AA;&#x529B;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684; MoxR &#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x76D0;&#x4E1A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x91CD;&#x547D;&#x540D;&#x7684;&#x4EE3;&#x8868;&#x6210;&#x5458;&#x8868;&#x5F81;&#x62C9;&#x5A03; (&#x76D1;&#x7BA1; ATPase &#x53D8;&#x91CF; A)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x62C9;&#x5A03;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0A;&#x5B58;&#x5728;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5B50;&#x4E0E;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;YieM&#xFF0C;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x5305;&#x542B; Von &#x8840;&#x7BA1;&#x6027;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x56E0;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x57DF;&#x3002;&#x62C9;&#x5A03;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x662F; sigmaS &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5176;&#x6C34;&#x5E73;&#x589E;&#x52A0;&#x671D;&#x540E;&#x671F;&#x7684;&#x65E5;&#x5FD7;/&#x65E9;&#x671F;&#x56FA;&#x5B9A;&#x76F8;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x5176;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x4E00;&#x822C;&#x6027;&#x7684;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x62C9;&#x5A03; ATPase &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5F62;&#x6210;&#x516D;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x62C9;&#x5A03;&#x5F3A;&#x70C8;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4E0E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x8131;&#x7FA7;&#x9176; (LdcI &#x6216;&#x52A0;) &#x5F62;&#x6210;&#x5927;&#x578B;&#x7684;&#x7B3C;&#x72B6;&#x7ED3;&#x6784;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A; LdcI decamers &#x94FE;&#x63A5;&#x7684;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x62C9;&#x5A03;&#x4E94;&#x4E2A;&#x6700;&#x591A;&#x3002;&#x51FA;&#x4EBA;&#x610F;&#x6599;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;LdcI &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x53D7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x62C9;&#x5A03;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x4E2D;&#x62C9;&#x5A03; ATPase &#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x62C9;&#x5A03; LdcI &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x62C9;&#x5A03;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5BF9;&#x5176;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;

&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x8131;&#x7FA7;&#x9176;&#x548C;&#x65B0;&#x9896;&#x7684; AAA + ATPase &#x4E4B;&#x95F4;&#x6709;&#x7279;&#x8272;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;

AAA+ ATPases are ubiquitous proteins that employ the energy obtained from ATP hydrolysis to remodel proteins, DNA, or RNA. The MoxR family of AAA+ proteins is widespread throughout bacteria and archaea but is largely uncharacterized. Limited work with specific members has suggested a potential role as molecular chaperones involved in the assembly of protein complexes. As part of an effort aimed at determining the function of novel AAA+ chaperones in Escherichia coli, we report the characterization of a representative member of the MoxR family, YieN, which we have renamed RavA (regulatory ATPase variant A). We show that the ravA gene exists on an operon with another gene encoding a protein, YieM, of unknown function containing a Von Willebrand Factor Type A domain. RavA expression is under the control of the sigmaS transcription factor, and its levels increase toward late log/early stationary phase, consistent with its possible role as a general stress-response protein. RavA functions as an ATPase and forms hexameric oligomers. Importantly, we demonstrate that RavA interacts strongly with inducible lysine decarboxylase (LdcI or CadA) forming a large cage-like structure consisting of two LdcI decamers linked by a maximum of five RavA oligomers. Surprisingly, the activity of LdcI does not appear to be affected by binding to RavA in a number of in vitro and in vivo assays, however, complex formation results in the stimulation of RavA ATPase activity. Data obtained suggest that the RavA-LdcI interaction may be important for the regulation of RavA activity against its targets.

Formation of a distinctive complex between the inducible bacterial lysine decarboxylase and a novel AAA+ ATPase.

AAA ATPases + sont des prot&#xE9;ines ubiquistes qui emploient l&#x26;#39;&#xE9;nergie obtenue &#xE0; partir de l&#x26;#39;hydrolyse d&#x26;#39;ATP aux prot&#xE9;ines remodeler, ADN ou ARN. La famille des AAA + MoxR prot&#xE9;ines est tr&#xE8;s r&#xE9;pandue dans les bact&#xE9;ries et les arch&#xE9;es, mais est largement caract&#xE9;ris&#xE9;e. Les travaux, avec les membres sp&#xE9;cifiques a sugg&#xE9;r&#xE9; un r&#xF4;le potentiel en tant que chaperons mol&#xE9;culaires impliqu&#xE9;s dans l&#x26;#39;assemblage des complexes prot&#xE9;iques. Dans le cadre d&#x26;#39;un effort visant &#xE0; d&#xE9;terminer la fonction du roman de AAA + de chaperons dans Escherichia coli, nous rapportons la caract&#xE9;risation d&#x26;#39;un membre de repr&#xE9;sentant de la famille MoxR, Yien, que nous avons rebaptis&#xE9;e Rava (variante r&#xE9;glementaire ATPase A). On montre que le g&#xE8;ne rava existe sur un op&#xE9;ron avec un autre g&#xE8;ne codant pour une prot&#xE9;ine, YieM, de fonction inconnue contenant un type de Von Willebrand Un domaine. Expression Rava est sous le contr&#xF4;le du facteur de transcription sigma, et ses niveaux augmenter vers la fin de journal / d&#xE9;but de la phase stationnaire, compatible avec son r&#xF4;le possible en tant que g&#xE9;n&#xE9;ral la r&#xE9;ponse au stress des prot&#xE9;ines. Fonctions Rava comme une ATPase et forme des oligom&#xE8;res hexam&#xE9;riques. Il est important, nous d&#xE9;montrons que Rava interagit fortement avec d&#xE9;carboxylase inductible lysine (LdcI ou CADA) formant une grande cage en forme de structure constitu&#xE9;e de deux d&#xE9;cam&#xE8;res LdcI li&#xE9;s par un maximum de cinq oligom&#xE8;res Rava. &#xC9;tonnamment, l&#x26;#39;activit&#xE9; de LdcI ne semble pas &#xEA;tre affect&#xE9;e par la liaison &#xE0; Rava dans un certain nombre d&#x26;#39;&#xE9;tudes in vitro et in vivo, cependant, les r&#xE9;sultats de formation des complexes dans la stimulation de Rava ATPase. Les donn&#xE9;es obtenues sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;interaction Rava-LdcI peut &#xEA;tre important pour la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;activit&#xE9; Rava rapport &#xE0; ses objectifs.

Formation d&#x26;#39;un complexe sp&#xE9;cifique entre l&#x26;#39;inductible lysine d&#xE9;carboxylase bact&#xE9;rienne et un roman AAA + ATPase

AAA + ATPases sind ubiquit&auml;re Proteine, die ATP-Hydrolyse, Proteine, DNA oder RNA umzugestalten gewonnenen Energie besch&auml;ftigen. Die MoxR-Familie von AAA + Proteine ist im ganzen Bakterien und Archaeen verbreitet aber weitgehend uncharakterisiertes. Begrenzte Arbeit mit bestimmten Mitgliedern schlug eine m&ouml;gliche Rolle als molekulare Chaperone die Assembly von Proteinkomplexen beteiligt. Wir berichten im Rahmen eines Versuchs, die darauf abzielen, bestimmen die Funktion des neuartigen AAA + Begleitpersonen in Escherichia coli, die Charakterisierung der repr&auml;sentativen Mitglied der MoxR Familie, YieN, die wir nicht umbenannt haben RavA (regulatorische ATPase Variante A). Wir zeigen, dass das RavA-gen auf einem Operon mit einem anderen gen f&uuml;r ein Protein, YieM, unbekannt-Funktion mit einem Von-Willebrand-Faktor-Typ eine Dom&auml;ne vorhanden ist. RavA Ausdruck unter der Kontrolle des Transkriptionsfaktors SigmaS und seine Richtung sp&auml;t Protokoll/fr&uuml;hen station&auml;re Phase, die mit ihrer m&ouml;glichen Rolle als allgemeine Stressantwort Protein erh&ouml;hen. RavA fungiert als eine ATPase und bildet Hexameric Oligomere. Wichtig ist, zeigen wir, dass RavA stark interagiert mit Induktion Lysin-Decarboxylase (LdcI oder CadA) bilden gro&szlig;e K&auml;fig-wie Struktur, bestehend aus zwei LdcI Decamers um h&ouml;chstens f&uuml;nf RavA Oligomere verbunden. &Uuml;berraschend, scheint die Aktivit&auml;t der LdcI nicht durch Bindung an RavA in einer Reihe von in-vitro- und in-vivo-Assays beeinflusst werden jedoch Komplexbildung f&uuml;hrt die Stimulation der RavA-ATPase-Aktivit&auml;t. Gewonnenen Daten schlagen vor, da&szlig; die Interaktion RavA-LdcI m&ouml;glicherweise wichtig f&uuml;r die Regulierung von RavA Aktivit&auml;t gegen ihre Ziele.

Bildung eines unverwechselbaren komplexes zwischen der durch Induktion bakterielle Lysin-Decarboxylase und eine neuartige AAA +-ATPase.

AAA + ATPases sono proteine onnipresente che impiegano l&#39;energia ottenuta dall&#39;idrolisi dell&#39;ATP per rimodellare le proteine, DNA o RNA. La famiglia MoxR di AAA + proteine &egrave; diffusa in tutto batteri e archaea, ma &egrave; in gran parte atipiche. Lavoro limitato con specifici membri ha suggerito un ruolo potenziale come chaperoni molecolari coinvolti nell&#39;assemblaggio di complessi della proteina. Come parte di uno sforzo volto a determinare la funzione del romanzo AAA + accompagnatori in Escherichia coli, riportiamo la caratterizzazione di un membro rappresentanza della famiglia MoxR, stella, che abbiamo rinominato RavA (variante di ATPasi normativo A). Dimostriamo che il gene ravA esiste su un operone con un altro gene che codifica per una proteina, YieM, della funzione sconosciuta che contiene un tipo di fattore Von Willebrand un dominio. RavA espressione &egrave; sotto il controllo del fattore di trascrizione Sigma, e i suoi livelli aumentano verso fine fase stazionaria registro anticipata, coerenza con il suo possibile ruolo come una proteina di risposta allo stress generale. RavA funziona come un&#39;ATPasi e forma esamerica oligomeri. Importante, abbiamo dimostrato che RavA interagisce fortemente con decarbossilasi lisina inducibile (LdcI o CadA) formando una grande gabbia-come struttura composta da due LdcI decamers legate da un massimo di cinque oligomeri di RavA. Sorprendentemente, l&#39;attivit&agrave; di LdcI non sembrano essere influenzati dal legame con RavA in un certo numero di saggi in vitro e in vivo, tuttavia, risultati di formazione complessa nella stimolazione dell&#39;attivit&agrave; dell&#39;ATPasi RavA. Dati ottenuti suggeriscono che l&#39;interazione di RavA-LdcI pu&ograve; essere importante per la regolazione dell&#39;attivit&agrave; RavA contro gli obiettivi prefissati.

Formazione di un complesso distintivo fra la decarbossilasi inducibile lisina batterica e un romanzo AAA + ATPasi.

AAA + ATP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x6539;&#x9020;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;DNA&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;RNA&#x306B;ATP&#x306E;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; AAA +&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;MoxR&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x3084;&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x5E83;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x672A;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;+&#x5C0F;&#x8AAC;AAA&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x76EE;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x53D6;&#x308A;&#x7D44;&#x307F;&#x306E;&#x4E00;&#x74B0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;&#xFF08;&#x898F;&#x5236;&#x306E;ATPase&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#xFF09;&#x540D;&#x524D;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x305F;MoxR&#x5BB6;&#x65CF;&#x3001;YieN&#x306E;&#x4EE3;&#x8868;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;von Willebrand&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x6A5F;&#x80FD;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;YieM&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x5225;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x30AA;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;&#x5F0F;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x30ED;&#x30B0;/&#x5B9A;&#x5E38;&#x671F;&#x521D;&#x671F;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;ATP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3001;&#x516D;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;&#x306F;&#x3001;5&#x3064;&#x306E;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x5024;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9023;&#x7D50;&#x3055;&#x308C;&#x305F;2&#x3064;&#x306E;LdcI&#x306E;decamers&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x304B;&#x3054;&#x72B6;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x8131;&#x70AD;&#x9178;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;LdcI&#x307E;&#x305F;&#x306F;CADA&#xFF09;&#x3068;&#x5F37;&#x304F;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;LdcI&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;ATPase&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;-LdcI&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x8131;&#x70AD;&#x9178;&#x9175;&#x7D20;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x65B0;&#x898F;AAA + ATPase&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;

AAA + Atpases&#xB294; ATP &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, DNA, &#xB610;&#xB294; RNA&#xB97C; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. AAA + &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; MoxR &#xC81C;&#xD488;&#xAD70; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xACE0;&#xC138;&#xADE0;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xC815; &#xD68C;&#xC6D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xC77C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC870;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBD84;&#xC790; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xB85C; &#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB178;&#xB825;&#xC744; &#xACA8;&#xB0E5; &#xD55C; &#xC18C;&#xC124; AAA + &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xC77C;&#xD658;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC14;&#xAFBC; YieN MoxR &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xB300;&#xD45C; &#xD68C;&#xC6D0;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; RavA (&#xADDC;&#xC81C; ATPase &#xBCC0;&#xC885; A). &#xC6B0;&#xB9AC; ravA &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0;&#xB294; &#xC624; &#xD398;&#xB860; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xD3F0; Willebrand &#xC778;&#xC790; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xD568;&#xC218; YieM &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. RavA &#xC2DD;&#xC774; sigmaS &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558;&#xBA70; &#xB2A6;&#xC740; &#xB85C;&#xADF8;/&#xCD08;&#xAE30; &#xACE0;&#xC815; &#xC704;&#xC0C1;, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xB300;&#xC751; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xADF8; &#xC218;&#xCE58;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rava&#xB294; Atpase&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; hexameric &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD615;&#xC131;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; RavA &#xAC15;&#xD558;&#xAC8C; &#xC791;&#xC6A9; &#xC785;&#xC99D; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; lysine decarboxylase (LdcI &#xB610;&#xB294; CadA)&#xC640; &#xCD5C;&#xB300; 5 &#xAC1C;&#xC758; RavA &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xB450; LdcI decamers&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xB300;&#xD615; &#xC0C8; &#xC7A5; &#xAC19;&#xC740; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, LdcI &#xD65C;&#xB3D9; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; RavA &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC744; RavA ATPase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC740; RavA-LdcI &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; RavA &#xD65C;&#xB3D9; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; lysine decarboxylase &#xC18C;&#xC124; AAA + ATPase &#xC0AC;&#xC774; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xD615;&#xC131;.

AAA ATPasas forman ubicuidad de las prote&#xED;nas que emplean la energ&#xED;a obtenida de la hidr&#xF3;lisis de ATP a las prote&#xED;nas de remodelaci&#xF3;n, el ADN, o ARN. La familia de la AAA + MoxR prote&#xED;nas est&#xE1; muy extendida en las bacterias y arqueas, pero est&#xE1; caracterizado en gran medida. Poco trabajo con los miembros espec&#xED;ficos ha sugerido un posible papel como chaperones moleculares que intervienen en el montaje de complejos de prote&#xED;nas. Como parte de un esfuerzo dirigido a determinar la funci&#xF3;n de la novela de AAA + acompa&#xF1;antes en Escherichia coli, se reporta la caracterizaci&#xF3;n de un miembro representante de la familia MoxR, Yien, que ha cambiado el nombre Rava (reglamentario variante de la ATPasa A). Se demuestra que el gen rava existe en un oper&#xF3;n con otro gen que codifica una prote&#xED;na, YieM, de funci&#xF3;n desconocida que contiene un tipo de factor Von Willebrand Un dominio. Rava expresi&#xF3;n est&#xE1; bajo el control del factor de transcripci&#xF3;n sigmas, y sus niveles aumentan hacia logar&#xED;tmica tard&#xED;a / fase estacionaria temprana, coherente con su posible papel como general de respuesta al estr&#xE9;s prote&#xED;na. Rava funciona como una ATPasa y forma olig&#xF3;meros hexam&#xE9;ricas. Es importante destacar que demostrar que interact&#xFA;a fuertemente con Rava descarboxilasa inducible lisina (LdcI o CADA) la formaci&#xF3;n de una gran jaula-como la estructura que consta de dos dec&#xE1;meros LdcI unidos por un m&#xE1;ximo de cinco olig&#xF3;meros Rava. Sorprendentemente, la actividad de LdcI no parece ser afectada por la uni&#xF3;n a Rava en un n&#xFA;mero de ensayos in vitro y en ensayos in vivo, sin embargo, los resultados de complejos de formaci&#xF3;n en la estimulaci&#xF3;n de la actividad de ATPasa Rava. Los datos obtenidos sugieren que la interacci&#xF3;n Rava-LdcI puede ser importante para la regulaci&#xF3;n de la actividad Rava contra sus objetivos.

Formaci&#xF3;n de un complejo especial entre los inducible bacteriana lisina descarboxilasa y una novela AAA + ATPasa

MoxR AAA + &#x5BB6;&#x5EAD;&#x662F;&#x4E09;&#xFF0C;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5DEE;&#x7814;&#x7A76;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x3001; &#x591A;&#x6837;&#x5316;&#x7EC4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;&#x904D;&#x5E03;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x53E4;&#x7EC6;&#x83CC; superkingdoms&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C1A;&#x672A;&#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x4F34;&#x4FA3;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x53D1;&#x5E03;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86; MoxR &#x5BB6;&#x5EAD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5206;&#x4E3A;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E03;&#x5B50;&#x65CF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; MoxR &#x9002;&#x5F53; (MRP)&#x3001; TM0930&#x3001; &#x62C9;&#x5A03;&#x3001; &#x80BE;&#x708E;&#x3001; APE2220&#x3001; PA2707 &#x548C; YehL&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x4E3A;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B50;&#x65CF;&#x5305;&#x62EC;&#x5168;&#x9762;&#x7684;&#x6982;&#x8FF0;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x67D0;&#x4E9B; MoxR &#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x652F;&#x6301;&#x8BB8;&#x591A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x7684; MoxR AAA + &#x9644;&#x8FD1; Von &#x8840;&#x7BA1;&#x6027;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x56E0;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B; A (&#x98DF;&#x54C1;) &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x751F;&#x7269;&#x4FE1;&#x606F;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x6587;&#x732E;&#xFF0C;MoxR AAA + &#x86CB;&#x767D;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x57DF;&#x542B;&#x6709;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F34;&#x4FA3;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6298;&#x53E0;/&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x8F66;&#x884C;&#x5230;&#x57FA;&#x677F;&#x5206;&#x5B50;&#x91D1;&#x5C5E;&#x8F85;&#x52A9;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x63D2;&#x5165;&#x3002;

MoxR AAA + &#x4E09;&#xFF1A; &#x5206;&#x5B50;&#x4F34;&#x4FA3;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x578B;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x5417;&#xFF1F;

The MoxR AAA+ family is a large, diverse group of ATPases that, so far, has been poorly studied. Members of this family are found throughout the Bacteria and Archaea superkingdoms, but have not yet been detected in Eukaryota. The limited experimental data available to date suggest that members of this family might have chaperone-like activities. Here we present an extensive phylogenetic analysis which builds upon our previously published work, and reveals that the MoxR family can be divided into at least seven subfamilies, including MoxR Proper (MRP), TM0930, RavA, CGN, APE2220, PA2707, and YehL. We also include a comprehensive overview and gene context analysis for each of these subfamilies. Our data reveal distinct conserved associations of certain MoxR family members with specific genes, including further support for our previously reported observation that many members of the MoxR AAA+ family are found near Von Willebrand Factor Type A (VWA) proteins and are likely to function with them. We propose, based on bioinformatic analyses and the available literature, that the MoxR AAA+ proteins function with VWA domain-containing proteins to form a chaperone system that is important for the folding/activation of proteins and protein complexes by primarily mediating the insertion of metal cofactors into the substrate molecules.

MoxR AAA+ ATPases: a novel family of molecular chaperones?

Le MoxR AAA + famille est un grand groupe diversifi&#xE9; de ATPases qui, jusqu&#x26;#39;&#xE0; pr&#xE9;sent, a &#xE9;t&#xE9; peu &#xE9;tudi&#xE9;es. Les membres de cette famille se retrouvent partout dans les bact&#xE9;ries et les Archaea superkingdoms, mais n&#x26;#39;ont pas encore &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9; dans Eukaryota. Les donn&#xE9;es limit&#xE9;es exp&#xE9;rimentales disponibles &#xE0; ce jour sugg&#xE8;rent que les membres de cette famille pourrait avoir chaperon activit&#xE9;s semblables. Nous pr&#xE9;sentons ici une analyse phylog&#xE9;n&#xE9;tique vaste qui s&#x26;#39;appuie sur notre travail d&#xE9;j&#xE0; publi&#xE9;, et r&#xE9;v&#xE8;le que la famille MoxR peut &#xEA;tre divis&#xE9; en au moins sept sous-familles, y compris MoxR correcte (MRP), TM0930, Rava, CGN, APE2220, PA2707, et YehL. Nous incluons &#xE9;galement un aper&#xE7;u complet et l&#x26;#39;analyse du contexte g&#xE9;n&#xE9;tique de chacune de ces sous-familles. Nos donn&#xE9;es r&#xE9;v&#xE8;lent distinctes des associations conserv&#xE9;es de certains membres de la famille MoxR avec des g&#xE8;nes sp&#xE9;cifiques, y compris un soutien suppl&#xE9;mentaire pour notre observation pr&#xE9;c&#xE9;demment rapport&#xE9; que de nombreux membres de la famille MoxR AAA + se trouvent &#xE0; proximit&#xE9; de type Von Willebrand Factor A prot&#xE9;ines (VWA) et sont susceptibles de fonctionner avec eux . Nous proposons, bas&#xE9;e sur des analyses bioinformatiques et la documentation disponible, que le AAA MoxR + prot&#xE9;ines de fonction avec la SVA de domaine contenant des prot&#xE9;ines pour former un syst&#xE8;me chaperon qui est important pour le pliage / activation des prot&#xE9;ines et des complexes prot&#xE9;iques par principalement la m&#xE9;diation de l&#x26;#39;insertion de cofacteurs m&#xE9;talliques dans les mol&#xE9;cules de substrat.

MoxR AAA + ATPases: une nouvelle famille de chaperons mol&#xE9;culaires?

Die MoxR AAA +-Familie ist eine gro&szlig;e, vielf&auml;ltige Gruppe von ATPasen, die bisher schlecht untersucht wurde. Mitglieder dieser Familie sind in den Bakterien und Archaeen Superkingdoms gefunden, aber noch nicht in Eukaryota erkannt wurden. Die begrenzten Versuchsdaten bisher verf&uuml;gbaren vorschlagen, dass Mitglieder dieser Familie Chaperon-&auml;hnliche Aktivit&auml;ten haben k&ouml;nnte. Hier pr&auml;sentieren wir eine umfassende phylogenetische Analyse baut auf bereits publizierten arbeiten, und offenbart, dass mindestens sieben Unterfamilien, einschlie&szlig;lich MoxR richtige (WWS), TM0930, RavA, CGN, APE2220, PA2707 und YehL die MoxR-Familie geteilt werden kann. Wir haben auch eine umfassende &Uuml;bersicht und gen-Kontext-Analyse f&uuml;r jede dieser Unterfamilien. Unsere Daten zeigen unterschiedliche konservierten Verb&auml;nde der bestimmte MoxR Familienangeh&ouml;rige mit bestimmten Genen, darunter weitere Unterst&uuml;tzung f&uuml;r unsere fr&uuml;her berichteten Beobachtung, dass viele Mitglieder der Familie MoxR AAA + sich in der N&auml;he Von-Willebrand-Faktor Typ A (VWA) Proteine befinden und sich Funktion mit ihnen d&uuml;rften. Wir schlagen auf der Grundlage von bioinformatische Analysen und der verf&uuml;gbaren Literatur, dass die MoxR AAA + Proteine mit VWA Dom&auml;ne-haltige Proteine funktionieren, ein Chaperon-System bilden, das wichtig f&uuml;r die Faltung/Aktivierung von Proteinen und Proteinkomplexen durch Vermittlung in erster Linie die Aufnahme von Metall Cofaktoren in der Substrat-Molek&uuml;le.

MoxR AAA + ATPases: eine neue Familie von Molekulare Chaperone?

La famiglia MoxR AAA + &egrave; un gruppo di grandi dimensioni, diverso di ATPasi che, finora, sono stato scarsamente studiato. Membri di questa famiglia si trovano in tutto i batteri e Archaea superkingdoms, ma non sono ancora stati rilevati in eucarioti. I limitati dati sperimentali disponibili fino ad oggi suggeriscono che i membri di questa famiglia potrebbero avere attivit&agrave; chaperone-like. Qui di seguito presentiamo un&#39;analisi filogenetica estesa che si basa il nostro lavoro precedentemente pubblicato e rivela che la famiglia di MoxR pu&ograve; essere diviso in almeno sette sottofamiglie, tra cui MoxR corretto (MRP), TM0930, RavA, CGN, APE2220, PA2707 e YehL. Includiamo anche un&#39;analisi di contesto gene e panoramica completa per ciascuna di queste sottofamiglie. I nostri dati rivelano distinte associazioni conservate di alcuni membri della famiglia MoxR con geni specifici, tra cui ulteriore supporto per la nostra osservazione precedentemente riportato che molti membri della famiglia MoxR AAA + sono trovati vicino proteine di Von Willebrand Factor tipo A (VWA) e sono suscettibili di funzione con loro. Vi proponiamo, sulla base di analisi bioinformatiche e la letteratura disponibile, che le proteine MoxR AAA + funzionano con le proteine contenenti dominio VWA per formare un sistema tuttofare che &egrave; importante per l&#39;attivazione/folding delle proteine e dei complessi della proteina di mediazione principalmente l&#39;inserimento di cofattori metallici in molecole del substrato.

MoxR AAA + ATPases: una famiglia romanzo di chaperoni molecolari?

MoxR AAA +&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x3068;&#x3053;&#x308D;&#x3001;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;ATP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x3067;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x3084;&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;superkingdoms&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x3060;Eukaryota&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x304C;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x69D8;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x767A;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4F5C;&#x696D;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3055;&#x308C;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x7CFB;&#x7D71;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x3001;MoxR&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306F;MoxR&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#xFF08;MRP&#xFF09;&#x3001;TM0930&#x3001;&#x30E9;&#x30F4;&#x30A1;&#x3001;CGN&#x3001;APE2220&#x3001;PA2707&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;YehL&#x542B;&#x3080;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;7&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x5206;&#x5272;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x6982;&#x89B3;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6587;&#x8108;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;MoxR AAA +&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;von Willebrand&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#xFF08;VWA&#xFF09;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;MoxR&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;VWA&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x91D1;&#x5C5E;&#x88DC;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3084;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x305F;&#x305F;&#x307F;/&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x305D;&#x306E;MoxR AAA +&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x89E3;&#x6790;&#x3068;&#x5165;&#x624B;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6587;&#x732E;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x57FA;&#x8CEA;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x3002;

MoxR AAA + ATP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF1A;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5BB6;&#x65CF;&#xFF1F;

MoxR AAA + &#xAC00;&#xC871;&#xC740; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB294; Atpases&#xC758; &#xB300;&#xD615;, &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; superkingdoms, &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xACE0;&#xC138;&#xADE0;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Eukaryota&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xC9C1; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xB0A0;&#xC9DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294;&#xC774; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xAC8C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC791;&#xD488;&#xC740; MoxR &#xAC00;&#xC871; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 7 &#xC11C;&#xBE0C;&#xD328;&#xBC00;&#xB9AC;&#xAC00;, MoxR &#xC801;&#xC808; &#xD55C; (MRP), TM0930, RavA, CGN, APE2220, PA2707, YehL &#xB4F1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xB20C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD600; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; phylogenetic &#xBD84;&#xC11D; &#xC120;&#xBB3C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xAC01;&#xC774; &#xC11C;&#xBE0C;&#xD328;&#xBC00;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB300; &#xD55C; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xC694; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xCD94;&#xAC00; MoxR AAA + &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; Von Willebrand &#xC778;&#xC790; &#xD0C0;&#xC785; A (VWA) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADFC;&#xCC98; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xD568;&#xC218; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xD2B9;&#xC815; MoxR &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xD611;&#xD68C; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC; bioinformatic &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBB38;&#xD559;, MoxR AAA + &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; VWA &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC8FC;&#xB85C; &#xAE08;&#xC18D; cofactors &#xAE30;&#xD310; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0;&#xC758; &#xC0BD;&#xC785;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xD3F4;&#xB529;/&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC81C;&#xC548;.

MoxR AAA + ATPases: &#xBD84;&#xC790; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xAC00;&#xC871;?

El MoxR AAA + familia es un grupo grande y diverso de ATPasas que, hasta ahora, ha sido poco estudiado. Los miembros de esta familia se encuentra en todas las bacterias y arqueas superkingdoms, pero a&#xFA;n no han sido detectados en Eucariontes. Los escasos datos experimentales disponibles hasta la fecha sugieren que los miembros de esta familia podr&#xED;a tener como acompa&#xF1;ante de las actividades. Aqu&#xED; presentamos un an&#xE1;lisis filogen&#xE9;tico amplio que se basa en nuestro trabajo publicado anteriormente, y revela que la familia MoxR se pueden dividir en por lo menos siete subfamilias, incluyendo MoxR adecuada (MRP), TM0930, Rava, CGN, APE2220, PA2707, y Yehl. Tambi&#xE9;n se incluye una visi&#xF3;n general y an&#xE1;lisis del contexto gen&#xE9;tico de cada una de estas subfamilias. Nuestros datos revelan distintas asociaciones conservadas de algunos miembros de la MoxR de la familia con genes espec&#xED;ficos, incluyendo un mayor apoyo para la observaci&#xF3;n ya se ha informado de que muchos miembros de la familia MoxR AAA + se encuentran cerca de Tipo de factor von Willebrand A prote&#xED;nas (SVA) y es probable que funcionen con ellos . Proponemos, en base a los an&#xE1;lisis bioinform&#xE1;ticas y la literatura disponible, que la AAA MoxR + prote&#xED;nas funci&#xF3;n con SVA dominio que contienen prote&#xED;nas para formar un sistema chaperona que es importante para el plegado / activaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas y complejos de prote&#xED;nas por principalmente mediar en la inserci&#xF3;n de cofactores met&#xE1;licos en las mol&#xE9;culas de sustrato.

MoxR AAA + ATPasas: una nueva familia de chaperonas moleculares?

AAA + &#xFF08;&#x4E09;&#x4E0E;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x52A8;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#xFF09; &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#x8868;&#x793A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5927;&#x7C7B;&#x7684; P &#x5FAA;&#x73AF; NTPases &#x6CBF;&#x88AD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x4F7F;&#x7528;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x6C34;&#x89E3;&#x7684;&#x529B;&#x91CF;&#x76F4;&#x63A5;&#x5206;&#x5B50;&#x6539;&#x5EFA;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x6240;&#x6709; AAA + &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x90FD;&#x5171;&#x4EAB;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x900F;&#x8FC7;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x6539;&#x7F16;&#x6210;&#x663E;&#x8457;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x7684;&#x60F3;&#x65B9;&#x8BBE;&#x6CD5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x7406;&#x53CA;&#x5176;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; AAA + &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7ED3;&#x6784;&#x8981;&#x7D20;&#x7684;&#x7B80;&#x8981;&#x63CF;&#x8FF0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x88AB;&#x63CF;&#x8FF0;&#x6700;&#x8FD1;&#x5206;&#x7C7B;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4E0A;&#x3002;

AAA + &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF1A; &#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3001; &#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x3002;

The AAA+ (ATPases associated with various cellular activities) superfamily of proteins represents a distinct lineage of the larger class of P-loop NTPases. Members of this superfamily use the power of nucleotide binding and hydrolysis to direct molecular remodelling events. All AAA+ proteins share a common core architecture, which, through various sequence and structural modifications, has been adapted for use in a remarkably diverse range of functions. The following mini-review provides a concise description of the major structural elements common to all AAA+ proteins in the context of their mechanistic roles. In addition, the evolutionary and functional diversity of this superfamily is described on the basis of recent classification studies.

AAA+ proteins: diversity in function, similarity in structure.

Le + AAA (ATPases associ&#xE9;es &#xE0; diverses activit&#xE9;s cellulaires) superfamille des prot&#xE9;ines repr&#xE9;sente une lign&#xE9;e distincte de la plus grande classe de P-boucle NTPases. Les membres de cette superfamille utiliser la puissance de la liaison de nucl&#xE9;otides et d&#x26;#39;hydrolyse d&#x26;#39;&#xE9;v&#xE9;nements directs de remodelage mol&#xE9;culaire. Toutes les prot&#xE9;ines AAA + partagent une architecture de base commun, qui, &#xE0; travers la s&#xE9;quence diverses modifications structurelles, a &#xE9;t&#xE9; adapt&#xE9; pour une utilisation dans une gamme tr&#xE8;s vari&#xE9;e de fonctions. Ce qui suit mini-revue fournit une description concise des principaux &#xE9;l&#xE9;ments de structure communs &#xE0; toutes les prot&#xE9;ines AAA + dans le cadre de leurs r&#xF4;les m&#xE9;canistiques. En outre, la diversit&#xE9; &#xE9;volutive et fonctionnelle de cette superfamille est d&#xE9;crite sur la base d&#x26;#39;&#xE9;tudes de classification des derni&#xE8;res ann&#xE9;es.

AAA + Prot&#xE9;ines: la diversit&#xE9; dans la fonction, une similitude de structure

Die AAA + (ATPasen verschiedene zellul&auml;re Aktivit&auml;ten zugeordnet) &Uuml;berfamilie Proteine stellt eine eindeutige Linie der gr&ouml;&szlig;eren Klasse von P-Lauf-NTPases. Mitglieder dieser Superfamilie nutzen die Kraft der Nukleotid-Bindung und Hydrolyse Molekulare Filialumbauten Ereignisse zu lenken. Alle AAA + Proteine teilen eine gemeinsame Core-Architektur, die durch verschiedene Sequenz und strukturellen &Auml;nderungen f&uuml;r den Einsatz in bemerkenswert vielf&auml;ltige Funktionen angepasst hat. Die folgenden Mini-Review bietet eine pr&auml;zise Beschreibung der wichtigsten Bauteile f&uuml;r alle AAA + Proteine im Kontext ihrer mechanistischen Rollen. Dar&uuml;ber hinaus wird die evolution&auml;re und funktionale Vielfalt dieser &Uuml;berfamilie auf der Grundlage der neueren Klassifikation Studien beschrieben.

AAA + Proteine: Vielfalt in Funktion, &Auml;hnlichkeit in der Struktur.

AAA + (ATPasi associata con varie attivit&agrave; cellulari) Superfamiglia delle proteine rappresenta un distinto lignaggio della pi&ugrave; grande classe di P-loop NTPases. Membri di questa superfamiglia utilizzano il potere del nucleotide binding e idrolisi di dirigere eventi molecolari rimodellante. Tutte le AAA + proteine condividono una comune architettura core, che, attraverso varie sequenza e modifiche strutturali, &egrave; stata adattata per l&#39;uso in una gamma straordinariamente varia di funzioni. La mini-recensione seguente fornisce una concisa descrizione degli elementi strutturali principali comuni a tutti gli AAA + proteine nel contesto dei loro ruoli meccanicistici. Inoltre, la diversit&agrave; evolutiva e funzionale di questa superfamiglia &egrave; descritto sulla base di recenti studi di classificazione.

AAA + proteine: diversit&agrave; in funzione, la somiglianza nella struttura.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;AAA +&#xFF08;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;ATP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF09;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;P-&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;NTPases&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x96FB;&#x529B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;AAA +&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x9069;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x3068;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#xB7;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x30DF;&#x30CB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;AAA +&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x5171;&#x901A;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x7C21;&#x6F54;&#x306A;&#x8AAC;&#x660E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x5206;&#x985E;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

AAA +&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF1A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;

AAA + (ATPases &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; superfamily P &#xB8E8;&#xD504; Ntpases&#xC758; &#xD070; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; &#xACE0;&#xC720; &#xD608;&#xD1B5;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; superfamily&#xC758; &#xBA64;&#xBC84; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xC758; &#xD30C;&#xC6CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC790; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811;. &#xBAA8;&#xB4E0; AAA + &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACF5;&#xC720; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xCF54;&#xC5B4; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC640; &#xAD6C;&#xC870; &#xC218;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC801;&#xC751; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC74C; &#xBBF8;&#xB2C8; &#xB9AC;&#xBDF0; &#xAE30;&#xACC4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; AAA + &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xACF5;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xC8FC;&#xC694; &#xAD6C;&#xC870; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xACB0;&#xD55C; &#xC124;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;,&#xC774; superfamily&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBD84;&#xB958; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xADFC;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

AAA + &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;: &#xD568;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;, &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;.

La AAA + (ATPasas asociado con diversas actividades celulares) superfamilia de prote&#xED;nas representa un linaje distinto de la clase m&#xE1;s grande de NTPases P-loop. Los miembros de esta superfamilia usar el poder de uni&#xF3;n de nucle&#xF3;tidos y la hidr&#xF3;lisis de los eventos directos remodelaci&#xF3;n moleculares. Todas las prote&#xED;nas + AAA comparten una arquitectura b&#xE1;sica com&#xFA;n, que, a trav&#xE9;s de secuencia y modificaciones estructurales, ha sido adaptado para su uso en una gama muy diversa de funciones. El siguiente mini-revisi&#xF3;n se ofrece una descripci&#xF3;n concisa de los principales elementos estructurales comunes a todas las prote&#xED;nas AAA + en el marco de sus funciones mec&#xE1;nicas. Adem&#xE1;s, la diversidad evolutiva y funcional de esta superfamilia se describe en la base de estudios recientes de clasificaci&#xF3;n.

AAA + Prote&#xED;nas: la diversidad en la funci&#xF3;n, la similitud en la estructura

&#x6458;&#x8981;&#xFF1A; AAA + &#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#x662F;&#x5927;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6837;&#x5316;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7ED3;&#x5408;&#x548C;&#x50AC;&#x5316;&#x6A21;&#x5757;&#x3001; AAA + &#x6A21;&#x5757;&#x7684; NTPases &#x7684;&#x5BB6;&#x65CF;&#x3002;&#x6210;&#x5458;&#x90FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x60CA;&#x4EBA;&#x8303;&#x56F4;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6B64;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x7ED3;&#x6784;&#x56FE;&#x6848;&#x548C;&#x5BF9;&#x6838;&#x5FC3; AAA + &#x6A21;&#x5757;&#x8FDB;&#x884C;&#x4FEE;&#x6539;&#x3002;

AAA + &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#x3002;

SUMMARY: The AAA+ superfamily is a large and functionally diverse superfamily of NTPases that are characterized by a conserved nucleotide-binding and catalytic module, the AAA+ module. Members are involved in an astonishing range of different cellular processes, attaining this functional diversity through additions of structural motifs and modifications to the core AAA+ module.

The AAA+ superfamily of functionally diverse proteins.

R&#xC9;SUM&#xC9;: La superfamille + AAA est une grande superfamille et fonctionnellement diversifi&#xE9; de NTPases qui sont caract&#xE9;ris&#xE9;s par un module conserv&#xE9; de fixation des nucl&#xE9;otides et catalytique, le module + AAA. Les membres sont impliqu&#xE9;s dans une gamme &#xE9;tonnante de diff&#xE9;rents processus cellulaires, la r&#xE9;alisation de cette diversit&#xE9; fonctionnelle gr&#xE2;ce &#xE0; l&#x26;#39;ajout de motifs structuraux et des modifications &#xE0; la base AAA + module.

Le Super + AAA des prot&#xE9;ines fonctionnellement diverses

Zusammenfassung: Die AAA + &Uuml;berfamilie ist eine gro&szlig;e und funktional vielf&auml;ltige &Uuml;berfamilie der NTPases, die durch eine konservierte Nucleotid-Bindung und katalytische-Modul, das AAA +-Modul gekennzeichnet sind. Mitglieder engagieren sich in eine erstaunliche Palette verschiedener zellul&auml;rer Prozesse, erreichen diese Funktionsvielfalt durch Hinzuf&uuml;gungen der strukturelle Motive und &Auml;nderungen die Basissoftware AAA +.

Die AAA + &Uuml;berfamilie funktional unterschiedliche Proteine.

Sommario: La Superfamiglia AAA + &egrave; una superfamiglia di grande e funzionalmente diversa di NTPases che sono caratterizzati da un modulo nucleotide-binding e catalitico conservato, il modulo AAA +. I membri sono coinvolti in una sorprendente gamma di diversi processi cellulari, raggiungendo questa diversit&agrave; funzionale attraverso aggiunte di motivi strutturali e le modifiche al modulo di core AAA +.

AAA + Superfamiglia delle proteine funzionalmente diverse.

&#x6982;&#x8981;&#xFF1A;AAA +&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x89E6;&#x5A92;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;NTPases&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x304B;&#x3064;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3001;AAA +&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3001;&#x30B3;&#x30A2;AAA +&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;AAA +&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;

&#xC694;&#xC57D;: AAA + superfamily &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xCD09;&#xB9E4; &#xBAA8;&#xB4C8;, AAA + &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC744; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C;&#xD558;&#xB294; Ntpases&#xC758; &#xB300;&#xD615;&#xC774; &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; superfamily&#xAC00; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBA64;&#xBC84;&#xB294; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC870; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xC640; &#xCF54;&#xC5B4; AAA + &#xBAA8;&#xB4C8; &#xC218;&#xC815; &#xCD94;&#xAC00; &#xD1B5;&#xD574;&#xC774; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131;.

AAA + superfamily &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758;.

RESUMEN: La superfamilia AAA + es una superfamilia de gran diversidad y funcionalmente de la NTPases que se caracterizan por un m&#xF3;dulo conservado nucle&#xF3;tidos vinculante y catalizador, el m&#xF3;dulo de AAA +. Los miembros est&#xE1;n involucrados en una asombrosa variedad de diferentes procesos celulares, la consecuci&#xF3;n de esta diversidad funcional a trav&#xE9;s de la adici&#xF3;n de motivos estructurales y modificaciones en el n&#xFA;cleo de la AAA + m&#xF3;dulo.

La superfamilia AAA + de prote&#xED;nas funcionalmente diversas

ATP &#x7ED3;&#x5408;&#x76D2;&#x5F0F;&#x78C1;&#x5E26; &#xFF08;ABC&#xFF09; &#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3001; &#x771F;&#x83CC;&#x3001; &#x690D;&#x7269;&#x3001; &#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x53D8;&#x6001;&#x53CD;&#x5E94;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3001; &#x751F;&#x7406;&#x886C;&#x5E95;&#x548C;&#x6709;&#x6BD2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#x7684;&#x5C04;&#x6D41;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#xFF0C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; ABC &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x88AB;&#x5206;&#x4E3A;&#x4E03;&#x4E2A;&#x5B50;&#x65CF;&#xFF0C;ABC &#x4E9A;&#x79D1; (ABCA) &#x5230; ABCG&#x3002;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7684;&#x91CD;&#x70B9;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x7406;&#x89E3;&#x6A21;&#x578B;&#x751F;&#x7269;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; ABC &#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E3A;&#x9175;&#x6BCD; ABC &#x516D;&#x5B50;&#x65CF;&#x4EE5;&#x53CD;&#x6620;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x578B;&#x53F7;&#x4E3A; ABCG ABCA &#x7684;&#x8BA2;&#x6B63;&#x7EDF;&#x4E00;&#x7684;&#x672F;&#x8BED;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E13;&#x95E8;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E9A;&#x730E;&#x6237;&#x5EA7;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D22;&#x507F;&#x79D1; &#xFF08;&#x539F;&#x6307;&#x5B9A; MRP/CFTR &#x4E9A;&#x79D1;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x516D;&#x540D;&#x6210;&#x5458; &#xFF08;Ycf1p&#x3001; Bpt1p&#x3001; Ybt1p/Bat1p&#x3001; Nft1p&#x3001; Vmr1p &#x548C; Yor1p&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4FA7;&#x91CD; Ycf1p&#xFF0C;best-characterized &#x9175;&#x6BCD;&#x7D22;&#x507F;&#x519C;&#x7528;&#x8FD0;&#x8F93;&#x8F66;&#x3002;Ycf1p &#x5750;&#x843D;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684; vacuolar membrane &#x548C;&#x804C;&#x80FD;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x591A;&#x836F;&#x8010;&#x836F;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; (MRP1&#xFF0C;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; ABCC1&#xFF09;&#xFF0C;&#x8C03;&#x89E3;&#x7684;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x5171;&#x8F6D;&#x6709;&#x6BD2;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8;&#x6240;&#x77E5;&#x7684; Ycf1p &#x57FA;&#x677F;&#x3001; &#x8D29;&#x8FD0;&#x3001; &#x52A0;&#x5DE5;&#x3001; &#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#x3001; &#x8C03;&#x8282;&#x548C;&#x6F20;&#x89C6;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x53EB;&#x505A;&#x96C6;&#x6210;&#x7684;&#x819C;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4; (iMYTH) &#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x5176;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x67E5;&#x660E;&#x975E;&#x540C;&#x5C0F;&#x53EF;&#x7684;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5F3A;&#x5927;&#x65B0;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F;&#x3002;iMYTH &#x6280;&#x672F;&#x5DF2;&#x6210;&#x529F;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684; Ycf1p &#x65B0;&#x578B;&#x975E;&#x540C;&#x5C0F;&#x53EF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06;&#x6210;&#x4E3A;&#x4ECA;&#x540E;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x6765;&#x5168;&#x9762;&#x5730;&#x5B9A;&#x4E49;&#x9175;&#x6BCD; ABC interactome &#x7684;&#x5B9D;&#x8D35;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

ABC &#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6F20;&#x89C6;&#xFF1A; &#x65B0;&#x6280;&#x672F;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x7D22;&#x507F; (MRP) &#x4E9A;&#x79D1;&#x3002;

Members of the ATP-binding cassette (ABC) transporter superfamily exist in bacteria, fungi, plants, and animals and play key roles in the efflux of xenobiotic compounds, physiological substrates, and toxic intracellular metabolites. Based on sequence relatedness, mammalian ABC proteins have been divided into seven subfamilies, ABC subfamily A (ABCA) to ABCG. This review focuses on recent advances in our understanding of ABC transporters in the model organism Saccharomyces cerevisiae. We propose a revised unified nomenclature for the six yeast ABC subfamilies to reflect the current mammalian designations ABCA to ABCG. In addition, we specifically review the well-studied yeast ABCC subfamily (formerly designated the MRP/CFTR subfamily), which includes six members (Ycf1p, Bpt1p, Ybt1p/Bat1p, Nft1p, Vmr1p, and Yor1p). We focus on Ycf1p, the best-characterized yeast ABCC transporter. Ycf1p is located in the vacuolar membrane in yeast and functions in a manner analogous to that of the human multidrug resistance-related protein (MRP1, also called ABCC1), mediating the transport of glutathione-conjugated toxic compounds. We review what is known about Ycf1p substrates, trafficking, processing, posttranslational modifications, regulation, and interactors. Finally, we discuss a powerful new yeast two-hybrid technology called integrated membrane yeast two-hybrid (iMYTH) technology, which was designed to identify interactors of membrane proteins. iMYTH technology has successfully identified novel interactors of Ycf1p and promises to be an invaluable tool in future efforts to comprehensively define the yeast ABC interactome.

ABC transporters in Saccharomyces cerevisiae and their interactors: new technology advances the biology of the ABCC (MRP) subfamily.

Les membres du ATP-binding cassette (ABC) du transporteur superfamille existent chez les bact&#xE9;ries, les champignons, les plantes et les animaux et jouer des r&#xF4;les cl&#xE9;s dans l&#x26;#39;efflux de compos&#xE9;s x&#xE9;nobiotiques, des substrats physiologiques et toxiques m&#xE9;tabolites intracellulaires. Bas&#xE9; sur la parent&#xE9; de s&#xE9;quence, de mammif&#xE8;res prot&#xE9;ines ABC ont &#xE9;t&#xE9; divis&#xE9;es en sept sous-familles, sous-famille ABC A (ABCA) &#xE0; ABCG. Cette revue se concentre sur les progr&#xE8;s r&#xE9;cents dans notre compr&#xE9;hension des transporteurs ABC dans la cerevisiae organisme Saccharomyces mod&#xE8;le. Nous proposons une nomenclature r&#xE9;vis&#xE9;e et unifi&#xE9;e pour les six sous-familles ABC de levure afin de refl&#xE9;ter les d&#xE9;signations actuelles de mammif&#xE8;res ABCA &#xE0; ABCG. En outre, nous avons sp&#xE9;cifiquement examiner la sous-famille bien &#xE9;tudi&#xE9; la levure ABCC (anciennement d&#xE9;sign&#xE9; la sous-famille MRP / CFTR), qui comprend six membres (Ycf1p, Bpt1p, Ybt1p/Bat1p, Nft1p, Vmr1p, et Yor1p). Nous nous concentrons sur Ycf1p, le transporteur de levure mieux caract&#xE9;ris&#xE9; ABCC. Ycf1p est situ&#xE9; dans la membrane vacuolaire dans la levure et des fonctions d&#x26;#39;une mani&#xE8;re analogue &#xE0; celle de la multir&#xE9;sistance li&#xE9;e prot&#xE9;ine humaine (MRP1, &#xE9;galement appel&#xE9; ABCC1), le transport de m&#xE9;diation de la glutathion-conjugu&#xE9;s compos&#xE9;s toxiques. Nous passons en revue ce qui est connu Ycf1p substrats, le trafic, le traitement, modifications post-traductionnelles, la r&#xE9;glementation et interacteurs. Enfin, nous discutons d&#x26;#39;une levure puissante nouvelle technologie double-hybride en levure appel&#xE9;e membrane int&#xE9;gr&#xE9;e double-hybride (iMYTH) la technologie, qui a &#xE9;t&#xE9; con&#xE7;u pour identifier les interacteurs des prot&#xE9;ines membranaires. iMYTH la technologie a r&#xE9;ussi &#xE0; identifier de nouveaux interacteurs de Ycf1p et promet d&#x26;#39;&#xEA;tre un outil pr&#xE9;cieux dans les efforts futurs de mani&#xE8;re exhaustive d&#xE9;finissent la levure ABC interactome.

Les transporteurs ABC chez Saccharomyces cerevisiae et de leurs Interactiens: De nouvelles avanc&#xE9;es technologiques de la biologie de l&#x26;#39;ABCC (MRP) Sous-famille

Mitglieder der ATP verbindliche Kassette (ABC)-Transporter-Superfamilie in Bakterien, Pilzen, Pflanzen und Tieren vorhanden und spielen eine Schl&uuml;sselrolle in der Efflux xenobiotic Substanzen, physiologische Substrate und toxischen Metaboliten der intrazellul&auml;ren. Basierend auf Sequenz Verbundenheit, wurden S&auml;ugetierproteine ABC in sieben Unterfamilien, ABC-Unterfamilie A (ABCA) zu ABCG unterteilt. Diesen Bericht konzentriert sich auf die j&uuml;ngsten Fortschritte im Verst&auml;ndnis der ABC-Transporter in das Modell Organismus Saccharomyces Cerevisiae. Wir schlagen eine &uuml;berarbeitete einheitliche Nomenklatur f&uuml;r die sechs Hefe ABC Familien die aktuellen S&auml;ugetier-Bezeichnungen ABCA zu ABCG widerspiegeln. Dar&uuml;ber hinaus &uuml;berpr&uuml;fen wir speziell gut erforscht Hefe ABCC Unterfamilie (fr&uuml;her als Unterfamilie die WWS/CFTR), umfasst sechs Mitglieder (Ycf1p, Bpt1p, Ybt1p/Bat1p, Nft1p, Vmr1p und Yor1p). Wir setzen auf Ycf1p, die best-characterized Hefe ABCC Transporter. Ycf1p befindet sich in der Vacuolar membrane in der Hefe und Funktionen in einer Weise analog zu, dass des Menschen erfolgt mit breiter Widerstand-bezogene Proteins (MRP1, auch genannt ABCC1), den Transport von Glutathion konjugierte toxischen Verbindungen vermitteln. Wir &uuml;berpr&uuml;fen, was &uuml;ber Ycf1p Substrate, Handel, Verarbeitung, posttranslationale Modifikationen, Regulierung und Interaktoren bekannt ist. Schlie&szlig;lich diskutieren wir eine leistungsstarke neue Hefe zwei-Mischling Technologie namens integrierte Membran-Hefe-zwei-Hybrid (iMYTH)-Technologie, die entwickelt wurde, um Interaktoren von Membranproteinen zu identifizieren. iMYTH Technologie hat neuartige Interaktoren des Ycf1p erfolgreich identifiziert und verspricht, ein wertvolles Werkzeug in k&uuml;nftigen Bem&uuml;hungen um die Hefe ABC Interaktom umfassend zu definieren.

ABC-Transporter in Saccharomyces Cerevisiae und ihre Interaktoren: neuer Technologie Fortschritte die Biologie der Unterfamilie ABCC (MRP).

Membri della superfamiglia trasportatore ATP-binding cassette (ABC) esistono in batteri, funghi, piante e animali e svolgono un ruolo chiave nell&#39;efflusso di composti xenobiotici, substrati fisiologici e metaboliti tossici intracellulari. Basato sulla parentela di sequenza, le proteine ABC dei mammiferi sono stati divisi in sette sottofamiglie, sottofamiglia ABC A (ABCA) a ABCG. Questa recensione si concentra sui recenti progressi nella nostra comprensione dei trasportatori ABC nel modello organismo Saccharomyces cerevisiae. Vi proponiamo una nomenclatura unificata rivista per sei sottofamiglie ABC lievito riflettere le designazioni dei mammiferi attuali ABCA a ABCG. Inoltre, esaminiamo in particolare della sottofamiglia ABCC lievito ben studiata (precedentemente indicata della sottofamiglia MRP/CFTR), che comprende sei membri (Ycf1p, Bpt1p, Ybt1p/Bat1p, Nft1p, Vmr1p e Yor1p). Ci concentriamo su Ycf1p, il trasportatore ABCC lievito best-characterized. Ycf1p si trova in vacuolar membrane in lievito e funzioni in maniera analoga al che dell&#39;umana multidrug resistenza-related protein (MRP1, chiamato anche ABCC1), mediando il trasporto di composti tossici coniugato con glutatione. Passiamo in rassegna ci&ograve; che &egrave; noto circa Ycf1p substrati, traffico, trattamento, modifiche di posttranslational, regolamento e interattori. Infine, si parler&agrave; di una potente tecnologia two-hybrid lievito nuovo chiamata tecnologia a membrana integrata lievito due-ibrido (iMYTH), che &egrave; stata progettata per identificare gli Interactiani delle proteine di membrana. la tecnologia iMYTH ha identificato con successo gli Interactiani romanzo di Ycf1p e promette di essere uno strumento prezioso in futuri sforzi per definire completamente il lievito ABC interactome.

Trasportatori ABC in Saccharomyces cerevisiae e loro Interactiani: nuova tecnologia avanza la biologia della sottofamiglia ABCC (MRP).

ATP-&#x7D50;&#x5408;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF08;ABC&#xFF09;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3001;&#x771F;&#x83CC;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x3001;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x7570;&#x7269;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6BD2;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x6392;&#x51FA;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;ABC&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;7&#x4E9C;&#x79D1;&#xFF08;ABCA&#xFF09;ABCG&#x306E;ABC&#x30B5;&#x30D6;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x5206;&#x5272;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;Saccharomyces cerevisiae&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ABC&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;ABCA ABCG&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x6307;&#x5B9A;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;6&#x9175;&#x6BCD;ABC&#x30B5;&#x30D6;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6539;&#x8A02;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D71;&#x4E00;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x547D;&#x540D;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;6&#x4EBA;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#xFF08;Ycf1p&#x3001;Bpt1p&#x3001;Ybt1p/Bat1p&#x3001;Nft1p&#x3001;Vmr1p&#x3001;&#x3068;Yor1p&#xFF09;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3088;&#x304F;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9175;&#x6BCD;ABCC&#x30B5;&#x30D6;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#xFF08;&#x65E7;MRP / CFTR&#x30B5;&#x30D6;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3068;&#x547D;&#x540D;&#xFF09;&#x3001;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Ycf1p&#x3001;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x9175;&#x6BCD;ABCC&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Ycf1p&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x62B1;&#x5408;&#x6BD2;&#x6027;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x591A;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#xFF08;MRP1&#x3001;&#x307E;&#x305F;ABCC1&#x3068;&#x3082;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x9175;&#x6BCD;&#x3084;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x6DB2;&#x80DE;&#x819C;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Ycf1p&#x57FA;&#x677F;&#x3001;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3001;&#x52A0;&#x5DE5;&#x3001;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3001;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D71;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x819C;&#x9175;&#x6BCD;&#x30C4;&#x30FC;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#xFF08;iMYTH&#xFF09;&#x6280;&#x8853;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x9175;&#x6BCD;&#x30C4;&#x30FC;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x6280;&#x8853;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; iMYTH&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;Ycf1p&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x7DCF;&#x5408;&#x7684;&#x306B;&#x9175;&#x6BCD;ABC&#x30E9;&#x30AF;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x7D44;&#x307F;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7D04;&#x675F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DE;&#x30A4;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;ABC&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF1A;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;ABCC&#xFF08;MRP&#xFF09;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;

ATP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; (ABC) &#xC804;&#xC1A1; superfamily&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;, &#xACF0; &#xD321;&#xC774;, &#xC2DD;&#xBB3C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xBA70; xenobiotic &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;, &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xAE30;&#xD310; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C;&#xC758; &#xACBD;&#xACFC;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;. &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; relatedness&#xC744; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; ABC &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 7 &#xC11C;&#xBE0C;&#xD328;&#xBC00;&#xB9AC;&#xAC00;, ABC &#xC544; A (ABCA) ABCG&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xD560; &#xB41C;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; ABC &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBC1C;&#xC804;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD94;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xBA85;&#xCE6D; ABCA ABCG&#xC5D0; &#xBC18;&#xC601; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xD6A8; &#xBAA8; ABC &#xC11C;&#xBE0C;&#xD328;&#xBC00;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xBA85;&#xCE6D;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5EC;&#xC12F; &#xBA64;&#xBC84; (Ycf1p, Bpt1p, Ybt1p/Bat1p, Nft1p, Vmr1p, &#xBC0F; Yor1p)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; (&#xC774;&#xC804;&#xC5D0; MRP/CFTR &#xC778;&#xB3C4;&#xC758; &#xC9C0;&#xC815;), &#xC774;&#xC57C;&#xAE30;&#xB3C4; &#xD6A8; &#xBAA8; ABCC &#xC544; &#xAC80;&#xD1A0;. &#xC6B0;&#xB9AC; Ycf1p, best-characterized &#xD6A8; &#xBAA8; ABCC &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;. Ycf1p &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; vacuolar membrane &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; multidrug &#xC800;&#xD56D;&#xC740; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (MRP1, abcc1&#xC774; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4;), &#xC911;&#xC7AC; glutathione &#xD65C;&#xC6A9; &#xB3C5;&#xC131; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC804;&#xC1A1; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ycf1p &#xAE30;&#xD310;, &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;, &#xCC98;&#xB9AC;, posttranslational &#xC218;&#xC815;, &#xADDC;&#xC81C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC778;&#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC778;&#xD130;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xB9C9; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; (iMYTH) &#xAE30;&#xC220; &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xAE30;&#xC220; &#xB17C;&#xC758;. iMYTH &#xAE30;&#xC220;&#xACFC; ycf1p&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xC778;&#xD130; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xD6A8; &#xBAA8; ABC &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xB178;&#xB825;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB420; &#xAC83;&#xC744; &#xC57D;&#xC18D; &#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;.

ABC &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30; Saccharomyces cerevisiae&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC778;&#xD130;: &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAE30;&#xC220; &#xBC1C;&#xC804; ABCC (MRP) &#xC778;&#xB3C4;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;.

Los miembros de la ATP vinculante cassette (ABC) transportador superfamilia existen en bacterias, hongos, plantas y animales, y desempe&#xF1;an un papel clave en el flujo de los compuestos xenobi&#xF3;ticos, sustratos fisiol&#xF3;gicos y metabolitos t&#xF3;xicos intracelulares. Sobre la base de la relaci&#xF3;n de secuencia, los mam&#xED;feros las prote&#xED;nas ABC se han dividido en siete subfamilias, la subfamilia ABC A (ABCA) para ABCG. Esta revisi&#xF3;n se centra en los avances recientes en nuestra comprensi&#xF3;n de los transportadores ABC en el organismo modelo Saccharomyces cerevisiae. Se propone una nueva nomenclatura unificada para las seis de levadura subfamilias ABC para reflejar las designaciones actuales de mam&#xED;feros ABCA a ABCG. Adem&#xE1;s, espec&#xED;ficamente revisar la subfamilia de levadura bien estudiado ABCC (antiguamente denominada la subfamilia MRP / CFTR), que incluye seis miembros (Ycf1p, Bpt1p, Ybt1p/Bat1p, Nft1p, Vmr1p y Yor1p). Nos centramos en Ycf1p, el transportador de la levadura ABCC mejor caracterizado. Ycf1p est&#xE1; localizado en la membrana vacuolar en la levadura y las funciones de una manera an&#xE1;loga a la de la resistencia a m&#xFA;ltiples f&#xE1;rmacos humano relacionados con la prote&#xED;na (Mrp1, tambi&#xE9;n llamado ABCC1), mediando el transporte de glutation-conjugados compuestos t&#xF3;xicos. Revisamos lo que se sabe acerca de Ycf1p sustratos, el tr&#xE1;fico, el procesamiento, modificaciones postraduccionales, la regulaci&#xF3;n y interactores. Finalmente, se discute una levadura nueva y poderosa tecnolog&#xED;a de dos h&#xED;bridos de levadura llamada integrada de membrana de dos h&#xED;bridos (iMYTH), la cual fue dise&#xF1;ado para identificar los interactores de prote&#xED;nas de la membrana. iMYTH la tecnolog&#xED;a se ha identificado con &#xE9;xito nuevos interactores de Ycf1p y promete ser una herramienta inestimable para los esfuerzos futuros para definir en forma amplia la levadura ABC interactoma.

ABC transportadores en Saccharomyces cerevisiae y sus interactianos: Avances de Nuevas Tecnolog&#xED;as de la Biolog&#xED;a de la ABCC (MRP) de la subfamilia

&#x53EF;&#x80FD;&#x7531;&#x9274;&#x5B9A;&#x53CA;&#x5176;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4F19;&#x4F34;&#xFF0C;&#x9884;&#x6D4B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x540E;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x65F6;&#x4EE3;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x4E4B;&#x4E00;&#x5C31;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7684;&#x6620;&#x5C04;&#x3002;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x7279;&#x522B;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x56E0;&#x5728;&#x75BE;&#x75C5;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x56E0;&#x5176;&#x6D41;&#x884C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5236;&#x836F;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x4E0D;&#x5E78;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x957F;&#x671F;&#x4EE5;&#x6765;&#x4E00;&#x76F4;&#x96BE;&#x5B66;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7684;&#x683C;&#x5F0F;&#x3002;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x5236;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x662F;&#x819C;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4; (&#x795E;&#x8BDD;) &#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x795E;&#x8BDD;&#x6539;&#x7F16;&#xFF0C;&#x62C6;&#x5206;&#x6CDB;&#x7D20;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7B5B;&#x67E5;&#x975E;&#x540C;&#x5C0F;&#x53EF;&#x7684;&#x5168;&#x957F;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x9175;&#x6BCD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x673A;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x539F;&#x5219;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x795E;&#x8BDD;&#x9975;&#x751F;&#x6210;&#x3001; &#x9A8C;&#x8BC1;&#x548C;&#x5E93;&#x7B5B;&#x9009;&#x4E00;&#x9879;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66;&#x3002;&#x901A;&#x5E38;&#x53EF;&#x5728; 4-6 &#x5468;&#x5185;&#x5B8C;&#x6210;&#x6574;&#x4E2A;&#x795E;&#x8BDD;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

&#x4EA4;&#x4E92;&#x4E0E;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x819C;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

The biological function of proteins may be predicted by identification of their interacting partners, and one of the major goals of the postgenomic era is the mapping of protein interaction networks. Membrane proteins are of particular interest because of their role in disease and because of their prevalence as major pharmaceutical targets. Unfortunately, because of their hydrophobic nature, they have long been difficult to study in a high-throughput format. A powerful technology recently developed to facilitate the characterization of membrane protein interactions is the membrane yeast two-hybrid (MYTH) assay. MYTH adapts the principle of split ubiquitin for use as a potent in vivo sensor of protein-protein interactions, allowing large-scale screening for interactors of full-length membrane proteins, from a range of organisms, using Saccharomyces cerevisiae as a host. In this article, we describe a protocol for MYTH bait generation, validation and library screening. The entire MYTH procedure can generally be completed in 4-6 weeks.

Detecting interactions with membrane proteins using a membrane two-hybrid assay in yeast.

La fonction biologique des prot&#xE9;ines peut &#xEA;tre pr&#xE9;dite par l&#x26;#39;identification de leurs partenaires d&#x26;#39;interaction, et l&#x26;#39;un des objectifs majeurs de l&#x26;#39;&#xE8;re post-g&#xE9;nomique est la cartographie des r&#xE9;seaux d&#x26;#39;interactions prot&#xE9;iques. Les prot&#xE9;ines membranaires sont d&#x26;#39;un int&#xE9;r&#xEA;t particulier en raison de leur r&#xF4;le dans la maladie et en raison de leur pr&#xE9;valence que les principaux objectifs pharmaceutiques. Malheureusement, en raison de leur caract&#xE8;re hydrophobe, ils ont longtemps &#xE9;t&#xE9; difficiles &#xE0; &#xE9;tudier dans un format &#xE0; haut d&#xE9;bit. Une technologie puissante r&#xE9;cemment mis au point pour faciliter la caract&#xE9;risation des interactions prot&#xE9;ine membranaire est la levure membrane double-hybride (MYTHE) dosage. MYTHE adapte le principe de la scission ubiquitine pour une utilisation comme un puissant capteur de in vivo de interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine, permettant d&#xE9;pistage &#xE0; grande &#xE9;chelle pour les interacteurs des prot&#xE9;ines membranaires de longue dur&#xE9;e, &#xE0; partir d&#x26;#39;une gamme d&#x26;#39;organismes, en utilisant Saccharomyces cerevisiae comme un h&#xF4;te. Dans cet article, nous d&#xE9;crivons un protocole pour l&#x26;#39;app&#xE2;t MYTHE production, la validation et la biblioth&#xE8;que de d&#xE9;pistage. La proc&#xE9;dure MYTHE ensemble peuvent g&#xE9;n&#xE9;ralement &#xEA;tre compl&#xE9;t&#xE9; en 4-6 semaines.

D&#xE9;tection des interactions avec des prot&#xE9;ines membranaires en utilisant une membrane dosage &#xE0; deux hybrides chez la levure

Die biologische Funktion von Proteinen Identifikation ihrer interagierenden Partner vorhergesagt werden kann, und eines der Hauptziele von der postgenomic-&Auml;ra ist die Zuordnung von Protein Interaktionsnetzwerken. Membranproteine sind von besonderem Interesse aufgrund ihrer Rolle in der Krankheit und ihre Pr&auml;valenz als wichtigen pharmazeutischen Ziele. Leider sind aufgrund ihrer hydrophoben Natur sie schwierig, in einem Format mit hohem Durchsatz zu studieren seit langem. Eine leistungsstarke Technologie, die vor kurzem entwickelt, um die Charakterisierung von Membran-Protein-Interaktionen zu erleichtern ist die Membran Hefe zwei-Mischling (Mythos) Assay. Mythos passt sich an das Prinzip der geteilten Ubiquitin zur Verwendung als ein potenter in-vivo-Sensor von Protein-Protein Interaktionen, so dass gro&szlig;angelegte Screening f&uuml;r Interaktoren in Membrane Proteine, aus einer Reihe von Organismen, Saccharomyces Cerevisiae als Host verwenden. In diesem Artikel beschreiben wir ein Protokoll f&uuml;r Mythos K&ouml;der Erstellung, Validierung und Bibliothek-Screening. Das gesamte Mythos-Verfahren kann in der Regel in 4-6 Wochen abgeschlossen werden.

Erkennen von Wechselwirkungen mit Membranproteine mit einer Membran-zwei-Hybrid-Assay in Hefe.

La funzione biologica delle proteine pu&ograve; essere predetto dalla identificazione dei loro partners interagenti, e uno degli obiettivi principali dell&#39;epoca postgenomic &egrave; la mappatura delle reti di interazione della proteina. Le proteine di membrana sono di particolare interesse a causa del loro ruolo nella malattia e a causa della loro prevalenza come principali obiettivi farmaceutici. Purtroppo, a causa della loro natura idrofobica, essi sono stati a lungo difficili da studiare in un formato ad alta velocit&agrave;. Una potente tecnologia di recente sviluppata per agevolare la caratterizzazione delle interazioni della proteina di membrana &egrave; il membrana lievito due-ibrido (mito) test. MITO si adegua al principio di ubiquitin split per uso come un potente sensore in vivo delle interazioni della proteina-proteina, permettendo di screening su larga scala per gli Interactiani di proteine di membrana full-length, da una vasta gamma di organismi, utilizzando il Saccharomyces cerevisiae come host. In questo articolo, descriviamo un protocollo per la generazione esca mito, convalida e lo screening libreria. L&#39;intera procedura di mito in genere pu&ograve; essere completata in 4-6 settimane.

Rilevare le interazioni con le proteine di membrana utilizzando un dosaggio di due-ibrido membrana in lievito.

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&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x819C;&#x30C4;&#x30FC;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC608;&#xCE21; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; postgenomic &#xC2DC;&#xB300;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBAA9;&#xD45C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xB9E4;&#xD551;. &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC8FC;&#xC694; &#xC81C;&#xC57D; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD88;&#xD589;&#xD788;&#xB3C4;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xD2B9;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC624;&#xB7AB;&#xB3D9;&#xC548; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xD615;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4;. &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220; &#xB9C9; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; (&#xC2E0;&#xD654;) &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xD654; Saccharomyces cerevisiae&#xB97C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC778;&#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC2A4;&#xD06C;&#xB9AC;&#xB2DD; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC13C;&#xC11C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBD84;&#xD560; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;&#xC758; &#xC6D0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC801;&#xC751;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E0;&#xD654; &#xBBF8;&#xB07C; &#xC0DD;&#xC131;, &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xC2EC;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xC2E0;&#xD654; &#xC808;&#xCC28;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; 4-6 &#xC8FC;&#xC5D0; &#xC644;&#xB8CC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0C1;&#xD638; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB9C9; &#xB450; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La funci&#xF3;n biol&#xF3;gica de las prote&#xED;nas puede ser predicha por la identificaci&#xF3;n de sus socios que interact&#xFA;an, y uno de los principales objetivos de la era postgen&#xF3;mica es el mapeo de las redes de interacci&#xF3;n de prote&#xED;nas. Las prote&#xED;nas de membrana son de particular inter&#xE9;s debido a su papel en la enfermedad y debido a su prevalencia como los principales objetivos de farmac&#xE9;uticos. Desafortunadamente, debido a su naturaleza hidrof&#xF3;bica, que han sido durante mucho tiempo dif&#xED;ciles de estudiar en un formato de alto rendimiento. Una potente tecnolog&#xED;a recientemente desarrollada para facilitar la caracterizaci&#xF3;n de las interacciones prote&#xED;na de membrana es la levadura de la membrana de dos h&#xED;bridos (MITO) ensayo. MITO adapta el principio de divisi&#xF3;n de ubiquitina para su uso como un potente sensor in vivo de las interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na, lo que permite a gran escala de cribado para interactores de prote&#xED;nas de membrana de longitud completa, a partir de una variedad de organismos, utilizando Saccharomyces cerevisiae como un hu&#xE9;sped. En este art&#xED;culo se describe un protocolo para el cebo MITO generaci&#xF3;n, validaci&#xF3;n y control bibliotecario. El procedimiento MITO entero generalmente se puede completar en 4-6 semanas.

La detecci&#xF3;n de interacciones con prote&#xED;nas de membrana que utiliza una membrana de dos h&#xED;bridos de ensayo en la levadura

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5F88;&#x5C11;&#x65BD;&#x52A0;&#x5176;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x901A;&#x5E38;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x6838;&#x5FC3;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F; interactomes &#x7684;&#x4E0D;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x662F; interactomes &#x7684;&#x6240;&#x8C13;&#xFF0C;&#x5728;&#x5168;&#x7403;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x73B0;&#x4EE3;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x5939;&#x5C42;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x4F19;&#x4F34;&#x80FD;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x5230;&#x5176;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E2E;&#x52A9;&#x4EBA;&#x4EEC;&#x4E86;&#x89E3;&#x75BE;&#x75C5;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6700;&#x7EC8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x76EE;&#x6807;&#x5B9A;&#x4E49;&#x3002;&#x591A;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5B58;&#x5728;&#x7834;&#x574F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7EBF;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x53D6;&#x5F97;&#x91CD;&#x5927;&#x8FDB;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x5927;&#x578B;&#x4E92;&#x52A8;&#x6570;&#x636E;&#x96C6;&#x4E00;&#x4EE3;&#x9002;&#x5E94;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x6700;&#x65B0;&#x8FDB;&#x5C55;&#x6982;&#x8FF0;&#x548C;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

&#x4EA4;&#x4E92;&#x5F0F;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x6280;&#x672F;&#xFF1A; &#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x548C;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

Proteins rarely exert their function alone. They normally function in multiprotein complexes that play central roles in all biological functions. Thus, it is not surprising that the investigation of protein-protein interactions on a global scale, of so-called interactomes, has become crucial to modern molecular biology. Dissecting partners in protein complexes gives insight into their molecular function and can help in understanding disease-related mechanisms, ultimately resulting in better drug target definition. A variety of methods exist to unravel protein interaction circuitries and recently, significant progress has been made in adapting these tools for the generation of large-scale interaction datasets. Here, we present an overview of the latest advances and applications of interactive proteomics research technologies.

Interactive proteomics research technologies: recent applications and advances.

Prot&#xE9;ines rarement exercer leur seule fonction. Ils fonctionnent normalement dans des complexes multiprot&#xE9;iques qui jouent un r&#xF4;le central dans toutes les fonctions biologiques. Ainsi, il n&#x26;#39;est pas surprenant que l&#x26;#39;enqu&#xEA;te sur les interactions entre prot&#xE9;ines &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle mondiale, de la soi-disant interactomes, est devenu crucial pour la biologie mol&#xE9;culaire moderne. Partenaires dissection dans des complexes de prot&#xE9;ines donne un aper&#xE7;u de leur fonction mol&#xE9;culaire et peut aider &#xE0; comprendre la maladie li&#xE9;s &#xE0; des m&#xE9;canismes, entra&#xEE;nant finalement dans la d&#xE9;finition de la drogue meilleure cible. Une vari&#xE9;t&#xE9; de m&#xE9;thodes existent pour d&#xE9;m&#xEA;ler circuits de d&#x26;#39;interactions prot&#xE9;iques et, plus r&#xE9;cemment, des progr&#xE8;s significatifs ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;s dans l&#x26;#39;adaptation de ces outils pour la g&#xE9;n&#xE9;ration d&#x26;#39;ensembles de donn&#xE9;es d&#x26;#39;interaction &#xE0; grande &#xE9;chelle. Ici, nous pr&#xE9;sentons un aper&#xE7;u des derni&#xE8;res avanc&#xE9;es et les applications interactives de la prot&#xE9;omique des technologies de recherche.

Interactive Technologies prot&#xE9;omique de recherche: applications r&#xE9;centes et avances

Proteine &uuml;ben selten allein ihre Funktion. Sie funktionieren normalerweise in multiprotein komplexe, die zentrale in allen biologischen Funktionen Rolle. Daher ist es nicht verwunderlich, dass die Untersuchung von Protein-Protein Interaktionen im globalen Ma&szlig;stab, der sogenannten Interactomes, entscheidend f&uuml;r die moderne Molekularbiologie geworden ist. Sezieren Partner in Proteinkomplexe gibt Einblick in ihre molekulare Funktion und helfen beim Verst&auml;ndnis Krankheitsbezogene Mechanismen, was letztlich bessere Droge Zieldefinition. Eine Vielzahl von Methoden gibt es um Protein Interaktion stellen zu entwirren und in letzter Zeit erhebliche Fortschritte bei der Anpassung dieser Tools zur Generierung von gro&szlig; angelegten Interaktion Datasets. Hier pr&auml;sentieren wir einen &Uuml;berblick &uuml;ber die neuesten Entwicklungen und Anwendungen der interaktiven Proteomics Forschung Technologien.

Interaktive Proteomics-Forschung-Technologien: aktuelle Anwendungen und Fortschritte.

Proteine raramente esercitano la loro funzione da solo. Funzionano normalmente in complessi multiproteici che giocano un ruolo centrale in tutte le funzioni biologiche. Cos&igrave;, non &egrave; sorprendente che l&#39;indagine delle interazioni della proteina-proteina su scala globale, della cosiddetta interactomes, &egrave; diventato cruciale per biologia molecolare moderna. Partner in complessi proteici di dissezione d&agrave; comprensione nella loro funzione molecolare e pu&ograve; aiutare nella comprensione dei meccanismi riguardanti le malattie, che si traduce in una migliore definizione di target di droga. Esiste una variet&agrave; di metodi per svelare la circuiteria di interazione della proteina e recentemente, significativi progressi nell&#39;adattare questi strumenti per la generazione di DataSet di interazione su larga scala. Qui, vi presentiamo una panoramica dei pi&ugrave; recenti progressi e le applicazioni della proteomica interattive tecnologie di ricerca.

Tecnologie di ricerca proteomica interattiva: applicazioni recenti e anticipazioni.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3081;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x591A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5730;&#x7403;&#x898F;&#x6A21;&#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x308F;&#x3086;&#x308B;interactomes&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x73FE;&#x4EE3;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x5275;&#x85AC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x75BE;&#x60A3;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x56DE;&#x8DEF;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9032;&#x5C55;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x9069;&#x5FDC;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6700;&#x65B0;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x3068;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xB300;&#xD654;&#xD615; proteomics &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAE30;&#xC220;: &#xCD5C;&#xADFC; &#xC751;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xC804;.

Las prote&#xED;nas rara vez ejercen su funci&#xF3;n solo. Por lo general funcionan en complejos multiproteicos que juegan un papel central en todas las funciones biol&#xF3;gicas. Por lo tanto, no es sorprendente que la investigaci&#xF3;n de las interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na a una escala global, de los llamados interactomes, se ha convertido en fundamental para la biolog&#xED;a molecular moderna. Socios de disecci&#xF3;n en los complejos de prote&#xED;nas da una idea de su funci&#xF3;n molecular y puede ayudar en la comprensi&#xF3;n de los mecanismos relacionados con la enfermedad, lo que se traduce en una mejor definici&#xF3;n del objetivo de drogas. Una variedad de m&#xE9;todos para desentra&#xF1;ar circuiter&#xED;a de interacci&#xF3;n de prote&#xED;nas y, recientemente, un progreso significativo se ha hecho en la adaptaci&#xF3;n de estas herramientas para la generaci&#xF3;n de bases de datos de interacci&#xF3;n a gran escala. A continuaci&#xF3;n, presentamos un resumen de los &#xFA;ltimos avances y aplicaciones de las tecnolog&#xED;as interactivas de investigaci&#xF3;n prote&#xF3;mica.

Prote&#xF3;mica interactivos Tecnolog&#xED;as de investigaci&#xF3;n: Aplicaciones y Avances Recientes

&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x8131;&#x7FA7;&#x9176;&#xFF0C;LdcI/&#x52A0;&#xFF0C;&#x52A0;&#x5185;&#x819C;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x8150;&#x81ED; antiporter&#xFF0C;CadB&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x9488;&#x5BF9;&#x8F7B;&#x5EA6;&#x9178;&#x6027;&#x6761;&#x4EF6; &#xFF08;pH&sim;5&#xFF09; &#x4FDD;&#x62A4;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x4EE5;&#x57FA;&#x7840;&#x9178;&#x7684;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6709;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A; LdcI &#x7684; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x7ED3;&#x6784;&#x8868;&#x660E;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x9F50;&#x805A;&#x7269;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210; decamer &#x4E94;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;LdcI &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E0E;&#x4E25;&#x683C;&#x5E94;&#x7B54;&#x6548;&#x5E94;&#x5206;&#x5B50; ppGpp&#xFF0C;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; alarmone &#x4E0E; decamer 10 ppGpp &#x5206;&#x5B50; co-crystallize&#x3002;ppGpp &#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x8C03;&#x89E3;&#x7684;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x54CD;&#x5E94;&#x517B;&#x5206;&#x5265;&#x593A;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;Alarmone &#x5F3A;&#x70C8;&#x6291;&#x5236; LdcI &#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6291;&#x5236;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x517B;&#x5206;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x9178;&#x80C1;&#x8FEB;&#x671F;&#x95F4;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x6D88;&#x8D39;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BC1;&#x636E;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x9178;&#x5E94;&#x6FC0;&#x548C;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;

&#x7EC6;&#x83CC;&#x9178;&#x5E94;&#x6FC0;&#x548C;&#x4E25;&#x5389;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#xFF1A; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x8131;&#x7FA7;&#x9176;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

The Escherichia coli inducible lysine decarboxylase, LdcI/CadA, together with the inner-membrane lysine-cadaverine antiporter, CadB, provide cells with protection against mild acidic conditions (pHâˆ¼5). To gain a better understanding of the molecular processes underlying the acid stress response, the X-ray crystal structure of LdcI was determined. The structure revealed that the protein is an oligomer of five dimers that associate to form a decamer. Surprisingly, LdcI was found to co-crystallize with the stringent response effector molecule ppGpp, also known as the alarmone, with 10 ppGpp molecules in the decamer. ppGpp is known to mediate the stringent response, which occurs in response to nutrient deprivation. The alarmone strongly inhibited LdcI enzymatic activity. This inhibition is important for modulating the consumption of lysine in cells during acid stress under nutrient limiting conditions. Hence, our data provide direct evidence for a link between the bacterial acid stress and stringent responses.

Linkage between the bacterial acid stress and stringent responses: the structure of the inducible lysine decarboxylase.

Les Escherichia coli inductible lysine d&#xE9;carboxylase, LdcI / CadA, conjointement avec l&#x26;#39;int&#xE9;rieur de la membrane lysine-cadav&#xE9;rine antiport, Cadb, fournir des cellules avec une protection contre des conditions acides douces (pH ~ 5). Pour acqu&#xE9;rir une meilleure compr&#xE9;hension des processus mol&#xE9;culaires qui sous-tendent la r&#xE9;ponse au stress acide, la structure cristalline aux rayons X de LdcI a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;e. La structure a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la prot&#xE9;ine est un oligom&#xE8;re de cinq dim&#xE8;res qui associent pour former un d&#xE9;cam&#xE8;re. &#xC9;tonnamment, LdcI a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; de co-cristalliser avec la r&#xE9;ponse stricte ppGpp mol&#xE9;cule effectrice, &#xE9;galement connu sous le nom alarmone, avec des mol&#xE9;cules ppGpp 10 dans le d&#xE9;cam&#xE8;re. ppGpp est connu pour servir de m&#xE9;diateur de la r&#xE9;ponse rigoureuse, qui se produit en r&#xE9;ponse &#xE0; une carence en nutriments. Le alarmone fortement inhib&#xE9;e LdcI activit&#xE9; enzymatique. Cette inhibition est important pour moduler la consommation de la lysine dans les cellules au cours du stress acide sous nutriments conditions limitantes. Par cons&#xE9;quent, nos donn&#xE9;es fournissent la preuve directe d&#x26;#39;un lien entre le stress acide bact&#xE9;rienne et les r&#xE9;ponses rigoureuses.

Lien entre le stress acide bact&#xE9;rienne et r&#xE9;ponses rigoureuses: la structure de la d&#xE9;carboxylase inductible Lysine

Die Escherichia-coli-durch Induktion erh&auml;ltlichen Lysin-Decarboxylase, LdcI/CadA, zusammen mit der inneren Membrane Lysin-Kadaverine-Antiporter, CadB, bieten Zellen mit Schutz gegen milden sauren Bedingungen (pH&sim;5). Um ein besseres Verst&auml;ndnis der molekularen Prozesse zugrunde liegen die saure Stressantwort zu gewinnen, wurde die R&ouml;ntgen-Kristallstruktur von LdcI ermittelt. Die Struktur ergeben, dass das Protein ein Oligomer von f&uuml;nf-Dimer, das Zuordnen eines Decamer zu bilden. &Uuml;berraschenderweise wurde LdcI festgestellt, dass mit der strengen Antwort Effektor Molek&uuml;l PpGpp, auch bekannt als die Alarmone, mit 10 PpGpp-Molek&uuml;le in die Decamer co-crystallize. PpGpp ist bekannt, dass die strenge Antwort zu vermitteln, die als Reaktion auf N&auml;hrstoff Mangel auftritt. Die Alarmone gehemmt stark LdcI enzymatische Aktivit&auml;t. Diese Hemmung ist wichtig f&uuml;r die Modulierung des Verbrauchs von Lysin in Zellen bei sauren Stress unter N&auml;hrstoff einschr&auml;nkenden Bedingungen. Daher liefern unsere Daten direkte Beweise f&uuml;r einen Zusammenhang zwischen der bakteriellen S&auml;ure Stress und strengen Antworten.

Verbindung zwischen der bakteriellen S&auml;ure Stress und strengen Antworten: die Struktur der durch Induktion Lysin-Decarboxylase.

Opera dell&#39;Escherichia coli inducibile lisina decarbossilasi, LdcI/CadA, insieme con il trasportatore del interno-membrana lisina-cadaverina, CadB, fornire cellule con protezione contro condizioni di acidit&agrave; lieve (pH&sim;5). Per acquisire una migliore comprensione dei processi molecolari alla base della risposta allo stress acido, &egrave; stata determinata la struttura di cristallo dei raggi x di LdcI. La struttura ha rivelato che la proteina &egrave; un oligomero di cinque dimeri che associano a formare un decamer. Sorprendentemente, LdcI &egrave; stato trovato a co-crystallize con la rigorosa risposta effettrici molecola ppGpp, anche conosciuto come il alarmone, con 10 molecole di ppGpp nel decamer. ppGpp &egrave; noto per mediare la risposta rigorosa, che si verifica in risposta alla privazione dei nutrienti. Il alarmone fortemente inibito LdcI attivit&agrave; enzimatica. Questa inibizione &egrave; importante per modulante il consumo della lisina, nelle cellule durante lo stress acido condizioni limitanti dei nutrienti. Quindi, i nostri dati forniscono prove dirette per un collegamento tra stress acido batterico e risposte rigorose.

Collegamento tra stress acido batterico e risposte rigorose: la struttura della decarbossilasi lisina inducibile.

&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x819C;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;LdcI / CADA&#x3001;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x8131;&#x70AD;&#x9178;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AB;&#x30C0;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;CADB&#x306F;&#x3001;&#x6E29;&#x548C;&#x306A;&#x9178;&#x6027;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF08;pH&#x301C;5&#xFF09;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9178;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;LdcI&#x306E;X&#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;decamer&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;5&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;LdcI&#x306F;decamer 10 ppGpp&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x3067;&#x3082;&#x3001;alarmone&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7DCA;&#x7E2E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5206;&#x5B50;ppGpp&#x306E;&#x3001;&#x3068;&#x5171;&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; ppGpp&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x6804;&#x990A;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; alarmone&#x5F37;&#x304F;LdcI&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x6804;&#x990A;&#x5236;&#x9650;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x9178;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x6642;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x6D88;&#x8CBB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x9178;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3068;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x9178;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3068;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#xFF1A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x8131;&#x70AD;&#x9178;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; lysine decarboxylase LdcI/&#xACE0; &#xB0B4; &#xB9C9; lysine cadaverine antiporter CadB, &#xD568;&#xAED8; &#xC140; &#xC628;&#xD654;&#xD55C; &#xC0B0; &#xC131; &#xC870;&#xAC74; (pH&sim;5)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; &#xC81C;&#xACF5;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xC0B0; &#xC131; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xBC18;&#xC751; &#xBD84;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC5BB;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; Ldci&#xC758; x-&#xC120; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; decamer &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xC758; oligomer &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Ldci&#xC640; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xBD84;&#xC790; ppGpp 10 ppGpp &#xBD84;&#xC790;&#xB294; decamer&#xC640; alarmone&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; co-crystallize &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. ppGpp &#xC601;&#xC591;&#xC18C; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xC911;&#xC7AC; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. Alarmone &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; LdcI &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;. &#xC774; &#xC800;&#xD574; &#xBCC0;&#xC870; &#xC601;&#xC591;&#xC18C; &#xC81C;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0; &#xC131; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC140;&#xC5D0; lysine&#xC758; &#xC18C;&#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC138;&#xADE0; &#xC0B0; &#xC131; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC640; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB9C1;&#xD06C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xADE0; &#xC0B0; &#xC131; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC640; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xC5F0;&#xB3D9;: &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; lysine decarboxylase &#xAD6C;&#xC870;.

Las Escherichia coli inducible lisina descarboxilasa, LdcI / Cada, junto con el interior de la membrana lisina-cadaverina antiporter, Cadb, proporcionar protecci&#xF3;n contra las c&#xE9;lulas con suaves condiciones &#xE1;cidas (pH ~ 5). Para obtener una mejor comprensi&#xF3;n de los procesos moleculares que subyacen a la respuesta al estr&#xE9;s &#xE1;cido, la estructura cristalina de rayos X de LdcI se determin&#xF3;. La estructura revel&#xF3; que la prote&#xED;na es un olig&#xF3;mero de cinco d&#xED;meros que se asocian para formar una dec&#xE1;mero. Sorprendentemente, se encontr&#xF3; que LdcI co-cristalizar con la mol&#xE9;cula ppGpp estrictas respuesta efectora, tambi&#xE9;n conocida como la alarmone, con 10 mol&#xE9;culas ppGpp en la dec&#xE1;mero. ppGpp se conoce para mediar en la respuesta estrictas, que se produce en respuesta a la privaci&#xF3;n de nutrientes. El alarmone inhibi&#xF3; la actividad enzim&#xE1;tica LdcI. Esta inhibici&#xF3;n es importante para modular el consumo de lisina en las c&#xE9;lulas durante el estr&#xE9;s &#xE1;cido bajo condiciones nutrientes limitantes. Por lo tanto, nuestros datos proporcionan una evidencia directa de un v&#xED;nculo entre el estr&#xE9;s &#xE1;cido bacteriana y respuestas rigurosas.

Relaci&#xF3;n entre el estr&#xE9;s y las respuestas de bacterias &#xE1;cido estrictas: la estructura de la descarboxilasa de lisina inducible

&#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x7EF4;&#x6301;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6240;&#x6709;&#x597D;&#x6C27;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x5728;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS) &#x751F;&#x6210;&#x671F;&#x95F4;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x56E0;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x538B;&#x529B;&#x3002;&#x5F02;&#x5E38;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x4F1A;&#x89E6;&#x53D1;&#x9632;&#x5FA1;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x907F;&#x514D;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x6709;&#x5BB3;&#x540E;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Rho1 &#x86CB;&#x767D;&#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x8D4B;&#x4E88;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x5728;&#x840C;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3002;Rho1 &#x6E29;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; &#xFF08;rho1(ts)) &#x662F;&#x8FC7;&#x654F;&#x6027;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x548C;&#x5C55;&#x54C1;&#x7684; ROS &#x751A;&#x81F3;&#x5728; semipermissive &#x6E29;&#x5EA6;&#x9AD8;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;Rho1 Ycf1&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x91D1;&#x5C5E;&#x89E3;&#x6BD2;&#x6DB2;&#x6CE1;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD; S &#x5171;&#x8F6D;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;Rho1 &#x548C; Ycf1 &#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x65B9;&#x7684;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x6DB2;&#x6CE1;&#x819C;&#x4E0A;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x79CD;&#x53CC;&#x5206;&#x5B50;&#x8367;&#x5149;&#x590D;&#x6742;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x4E92;&#x8865;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; GTP &#x7ED1;&#x5B9A; Rho1 &#x5C06;&#x4E0E; Ycf1 &#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E92;&#x52A8;&#x589E;&#x5F3A;&#x66B4;&#x9732;&#x5728;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x6C22;&#x3002;Rho1(ts) &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E5F;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x9549;&#x3001; &#x643A;&#x5E26;&#x7684; YCF1 &#x5220;&#x9664;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x5BF9;&#x8FC7;&#x654F;&#x6216;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x7684; Pkc1 &#x5730;&#x56FE;&#x6FC0;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x5C55;&#x793A;&#x6216;&#x6B21;&#x8981;&#x5BF9;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; Rho1 &#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x5305;&#x62EC; Ycf1 &#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x4E0B;&#x6E38;&#x76EE;&#x6807;&#x4FDD;&#x62A4;&#x514D;&#x53D7;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;Rho1 &#x548C; Ycf1 &#x90FD;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x5B88;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x80FD;&#x5B58;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;

Rho1 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4FDD;&#x62A4;&#x514D;&#x53D7;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6DB2;&#x6CE1;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD; S &#x5171;&#x8F6D;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x3002;

Maintenance of redox homeostasis is critical for the survival of all aerobic organisms. In the budding yeast Saccharomyces cerevisiae, as in other eukaryotes, reactive oxygen species (ROS) are generated during metabolism and upon exposure to environmental stresses. The abnormal production of ROS triggers defense mechanisms to avoid the deleterious consequence of ROS accumulation. Here, we show that the Rho1 GTPase is necessary to confer resistance to oxidants in budding yeast. Temperature-sensitive rho1 mutants (rho1(ts)) are hypersensitive to oxidants and exhibit high accumulation of ROS even at a semipermissive temperature. Rho1 associates with Ycf1, a vacuolar glutathione S-conjugate transporter, which is important for heavy metal detoxification in yeast. Rho1 and Ycf1 exhibit a two-hybrid interaction with each other and form a bimolecular fluorescent complex on the vacuolar membrane. A fluorescent-based complementation assay suggests that the GTP-bound Rho1 associates with Ycf1 and that their interaction is enhanced upon exposure to hydrogen peroxide. The rho1(ts) mutants also exhibit hypersensitivity to cadmium, while cells carrying a deletion of YCF1 or mutations in a component of the Pkc1-MAP kinase pathway exhibit little or minor sensitivity to oxidants. We thus propose that Rho1 protects yeast cells from oxidative stress by regulating multiple downstream targets including Ycf1. Since both Rho1 and Ycf1 belong to highly conserved families of proteins, similar mechanisms may exist in other eukaryotes.

The Rho1 GTPase acts together with a vacuolar glutathione S-conjugate transporter to protect yeast cells from oxidative stress.

Maintien de l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie redox est essentiel pour la survie de tous les organismes a&#xE9;robies. Dans la levure Saccharomyces cerevisiae en herbe, comme dans d&#x26;#39;autres eucaryotes, les esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne (ROS) sont produites au cours du m&#xE9;tabolisme et sur l&#x26;#39;exposition &#xE0; des stress environnementaux. La production anormale de ROS d&#xE9;clenche m&#xE9;canismes de d&#xE9;fense pour &#xE9;viter les cons&#xE9;quences d&#xE9;l&#xE9;t&#xE8;res de l&#x26;#39;accumulation de ROS. Ici, nous montrons que la GTPase Rho1 est n&#xE9;cessaire pour conf&#xE9;rer une r&#xE9;sistance aux oxydants dans la levure bourgeonnante. Sensibles &#xE0; la temp&#xE9;rature Rho1 mutants (Rho1 (ts)) sont hypersensibles aux oxydants et pr&#xE9;sentent une forte accumulation de ROS m&#xEA;me &#xE0; une temp&#xE9;rature semipermissive. Associ&#xE9;s avec Rho1 YCF1, un vacuolaire glutathion-S-conjugu&#xE9; transporteur, ce qui est important pour la d&#xE9;sintoxication des m&#xE9;taux lourds dans la levure. Rho1 et YCF1 pr&#xE9;sentent une interaction &#xE0; deux hybrides avec l&#x26;#39;autre et forment un complexe bimol&#xE9;culaire fluorescente sur la membrane vacuolaire. Un dosage de compl&#xE9;mentation fluorescente &#xE0; base indique que le GTP Rho1 associ&#xE9;s avec YCF1 et que leur interaction est am&#xE9;lior&#xE9;e lors de l&#x26;#39;exposition au peroxyde d&#x26;#39;hydrog&#xE8;ne. Les Rho1 (TS) pr&#xE9;sentent &#xE9;galement des mutants d&#x26;#39;hypersensibilit&#xE9; au cadmium, tandis que les cellules portant une d&#xE9;l&#xE9;tion de YCF1 ou des mutations dans un composant de la sensibilit&#xE9; PKC1-MAP kinase voie d&#x26;#39;exposition peu ou mineure aux oxydants. Nous proposons donc que Rho1 prot&#xE8;ge les cellules de levure du stress oxydatif en r&#xE9;gulant plusieurs cibles en aval, y compris YCF1. Depuis deux Rho1 et YCF1 appartiennent &#xE0; des familles de prot&#xE9;ines hautement conserv&#xE9;es, des m&#xE9;canismes similaires peuvent exister dans d&#x26;#39;autres eucaryotes.

La GTPase Rho1 agit de concert avec un vacuolaire glutathion S-conjugu&#xE9; Transporter &#xE0; prot&#xE9;ger les cellules de levure du stress oxydatif

Wartung von Redox-Hom&ouml;ostase ist entscheidend f&uuml;r das &Uuml;berleben aller aerobe Organismen. In der Backhefe, wie in anderen Eukaryoten entstehen reaktive Sauerstoffspezies (ROS) im Stoffwechsel und bei Gef&auml;hrdung durch Umwelteinfl&uuml;sse. Die abnorme ROS ausl&ouml;st Abwehrmechanismen um die sch&auml;dliche Folge ROS Akkumulation zu vermeiden. Hier zeigen wir, dass die Rho1 GTPase Widerstand gegen Oxidantien in Knospen Hefe verleihen notwendig ist. Temperaturempfindliche rho1 Mutanten (rho1(ts)) sind &uuml;berempfindlich auf Oxidantien und zeigen eine hohe Ansammlung von ROS sogar bei einer semipermissive Temperatur. Rho1 ordnet Ycf1, ein welches Glutathion-S-Konjugat-Transporter, f&uuml;r wichtige Schwermetall-Entgiftung in der Hefe. Rho1 und Ycf1 zeigen eine zwei-Hybrid-Interaktion miteinander und bilden einen bimolekular fluoreszierenden Komplex auf der Vacuolar-Membran. Eine Leuchtstofflampe-basierte Complementation Assay darauf hin, dass Ycf1 die GTP-gebundenen Rho1 zuordnet und ihre Wechselwirkung auf Exposition gegen&uuml;ber Wasserstoffperoxid erh&ouml;ht wird. Die rho1(ts)-Mutanten ausstellen auch &Uuml;berempfindlichkeit gegen Kadmium, w&auml;hrend Zellen, die Durchf&uuml;hrung einer L&ouml;schung von YCF1 oder Mutationen in einer Komponente der Pkc1-MAP-Kinase-Signalweg wenig ausstellen oder kleinere Empfindlichkeit gegen&uuml;ber Oxidantien. Wir schlagen daher Rho1 Hefezellen vor oxidativen Stress sch&uuml;tzt, indem Sie steuert mehrere nachgelagerte Ziele einschlie&szlig;lich Ycf1. Da Rho1 und Ycf1 stark konservierten Familien der Proteine geh&ouml;ren, k&ouml;nnen &auml;hnliche Mechanismen in anderen Eukaryoten vorhanden.

Die Rho1 GTPase fungiert zusammen mit einen welches Glutathion-S-Konjugat-Transporter Hefezellen vor oxidativem Stress zu sch&uuml;tzen.

Mantenimento dell&#39;omeostasi redox &egrave; fondamentale per la sopravvivenza di tutti gli organismi aerobici. Nel lievito gemmante Saccharomyces cerevisiae, come in altri eucarioti, le specie reattive dell&#39;ossigeno (ROS) sono generate durante il metabolismo e dopo l&#39;esposizione a stress ambientali. L&#39;anomala produzione di ROS innesca meccanismi di difesa per evitare la deleteria conseguenza dell&#39;accumulo di ROS. Qui, ci mostrano che il GTPase Rho1 &egrave; necessario conferire resistenza agli ossidanti nel lievito gemmante. Mutanti sensibili alla temperatura rho1 (rho1(ts)) sono ipersensibili a ossidanti ed esibiscono elevato accumulo di ROS anche a una temperatura semipermissive. Rho1 associa con Ycf1, un trasportatore di vacuolar glutatione S-coniugato, che &egrave; importante per la disintossicazione di metallo pesante nel lievito. Rho1 e Ycf1 mostrano un&#39;interazione del due-ibrido con a vicenda e formano un complesso fluorescente bimolecolare sulla membrana vacuolar. Un dosaggio basato su fluorescente complementazione suggerisce che il GTP-bound Rho1 associa con Ycf1 e che la loro interazione &egrave; migliorata dopo l&#39;esposizione al perossido di idrogeno. I mutanti rho1(ts) esibiscono anche ipersensibilit&agrave; al cadmio, mentre le cellule che trasportano una delezione di YCF1 o mutazioni in un componente del percorso Pkc1-MAP chinasi esibiscono poco o minore sensibilit&agrave; agli ossidanti. Proponiamo quindi Rho1 protegge le cellule di lievito da stress ossidativo regolando bersagli multipli a valle, tra cui Ycf1. Poich&eacute; sia Rho1 e Ycf1 appartengono alle famiglie altamente conservate delle proteine, possono esistere meccanismi simili in altri eucarioti.

Il GTPase Rho1 agisce insieme al trasportatore vacuolare glutatione S-coniugato per proteggere le cellule di lievito da stress ossidativo.

&#x9178;&#x5316;&#x9084;&#x5143;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x597D;&#x6C17;&#x6027;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;Saccharomyces cerevisiae&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#xFF08;ROS&#xFF09;&#x306F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3084;&#x74B0;&#x5883;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x6642;&#x306B;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; ROS&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x7523;&#x751F;&#x306F;&#x3001;ROS&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x907F;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x9632;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Rho1&#x306E;GTP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x4ED8;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x5909;&#x7570;rho1&#xFF08;rho1&#xFF08;TS&#xFF09;&#xFF09;&#x306F;&#x9178;&#x5316;&#x5264;&#x306B;&#x904E;&#x654F;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;semipermissive&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x3082;ROS&#x306E;&#x9AD8;&#x96C6;&#x7A4D;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002; Ycf1&#x3068;Rho1&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x91CD;&#x91D1;&#x5C5E;&#x306E;&#x89E3;&#x6BD2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6DB2;&#x80DE;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;S-&#x5171;&#x5F79;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x3002; Rho1&#x3068;Ycf1&#x306F;&#x304A;&#x4E92;&#x3044;&#x306E;two-hybrid&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6DB2;&#x80DE;&#x819C;&#x4E0A;&#x306B;&#x4E8C;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;Ycf1&#x3068;GTP&#x7D50;&#x5408;Rho1&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x904E;&#x9178;&#x5316;&#x6C34;&#x7D20;&#x306B;&#x66DD;&#x9732;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x9178;&#x5316;&#x5264;&#x306B;Pkc1-MAP&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5C55;&#x793A;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;YCF1&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x3092;&#x904B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x9593;rho1&#xFF08;TS&#xFF09;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30AB;&#x30C9;&#x30DF;&#x30A6;&#x30E0;&#x306B;&#x904E;&#x654F;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Rho1&#x304C;Ycf1&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x6A19;&#x7684;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002; Rho1&#x3068;Ycf1&#x4E21;&#x65B9;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306B;&#x5C5E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x4ED6;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

Rho1 GTP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x6DB2;&#x80DE;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;S-&#x5171;&#x5F79;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x306E;&#x6B69;&#x307F;

Redox &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC720;&#xC9C0;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD638; &#xAE30;&#xC131; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;. &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC5D0;&#xC11C;&#xCC98;&#xB7FC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;)&#xC640; &#xD658;&#xACBD; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418; &#xBA74; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;&#xC758; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xCD95;&#xC801;&#xC758; &#xD574;&#xB85C;&#xC6B4; &#xACB0;&#xACFC; &#xD53C;&#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBC29;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Rho1 GTPase oxidants &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xC628;&#xB3C4; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; rho1 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (rho1(ts)) oxidants&#xC5D0; &#xACFC;&#xBBFC; &#xD558; &#xACE0; &#xB192;&#xC740; &#xCD95;&#xC801; semipermissive &#xC628;&#xB3C4; &#xC5D0;&#xC11C;&#xB3C4; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;&#xC758; &#xC804;&#xC2DC;. Rho1 Ycf1, &#xC911; &#xAE08;&#xC18D; &#xD574;&#xB3C5; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; vacuolar glutathione S &#xACF5;&#xC561; &#xC6B4;&#xC1A1;&#xC5C5; &#xC790;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rho1 &#xBC0F; Ycf1 &#xB450; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC11C;&#xB85C; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; vacuolar &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; bimolecular &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xD569;&#xCCB4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131;. &#xD615;&#xAD11; &#xAE30;&#xBC18; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xAC00; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4; GTP &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; Rho1 ycf1&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xC218;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418; &#xBA74; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rho1(ts) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB610;&#xD55C; &#xCE74;&#xB4DC;&#xBBB4; &#xC140; YCF1 &#xC0AD;&#xC81C;&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xACFC;&#xBBFC; &#xC99D;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xB610;&#xB294; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; Pkc1 &#xB9F5; &#xB2C8; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC57D;&#xAC04; &#xC804;&#xC2DC; &#xB610;&#xB294; oxidants &#xAC10;&#xB3C4; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; Rho1 &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; Ycf1 &#xB4F1; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xD638;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;. Rho1&#xC640; Ycf1 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC18D;&#xD558;&#xB294;, &#xC774;&#xD6C4; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB2E4;&#xB978; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rho1 GTPase vacuolar glutathione S &#xACF5;&#xC561; &#xC6B4;&#xC1A1;&#xC5C5; &#xC790; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD568;&#xAED8; &#xC791;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El mantenimiento de la homeostasis redox es cr&#xED;tico para la supervivencia de todos los organismos aer&#xF3;bicos. En la levadura de gemaci&#xF3;n Saccharomyces cerevisiae, como en otros eucariotas, las especies de ox&#xED;geno reactivo (ROS) son generados durante el metabolismo y la exposici&#xF3;n a las tensiones ambientales. La producci&#xF3;n anormal de ROS desencadena mecanismos de defensa para evitar las consecuencias nocivas de las ROS acumulaci&#xF3;n. Aqu&#xED;, mostramos que la GTPasa Rho1 es necesario para conferir resistencia a los oxidantes en la levadura en ciernes. Sensibles a la temperatura Rho1 mutantes (Rho1 (TS)) es extremadamente sensible a los oxidantes y presentan alta acumulaci&#xF3;n de ROS, incluso a una temperatura semipermissive. Rho1 asociados con Ycf1, un vacuolar glutati&#xF3;n-S-conjugado transportador, lo cual es importante para la desintoxicaci&#xF3;n por metales pesados &#x200B;&#x200B;en la levadura. Rho1 y Ycf1 exhiben una interacci&#xF3;n de dos h&#xED;bridos entre s&#xED; y formar un complejo bimolecular fluorescente en la membrana vacuolar. Un ensayo de complementaci&#xF3;n fluorescente basado sugiere que el GTP determinada Rho1 asociados con Ycf1 y que su interacci&#xF3;n se mejora la exposici&#xF3;n al per&#xF3;xido de hidr&#xF3;geno. Los Rho1 (ts) mutantes tambi&#xE9;n muestran hipersensibilidad al cadmio, mientras que las c&#xE9;lulas que lleva una deleci&#xF3;n de YCF1 o mutaciones en un componente de la sensibilidad exhibici&#xF3;n Pkc1-MAP quinasa v&#xED;a poco o menor a los oxidantes. Por ello, proponemos que Rho1 protege las c&#xE9;lulas de levadura de estr&#xE9;s oxidativo mediante la regulaci&#xF3;n de m&#xFA;ltiples dianas incluyendo Ycf1. Dado que tanto Rho1 Ycf1 y pertenecen a familias altamente conservadas de las prote&#xED;nas, los mecanismos pueden ser similares en otros eucariotas.

La GTPasa Rho1 Hechos Junto con un vacuolar glutati&#xF3;n S-conjugado Transportador para proteger las c&#xE9;lulas de levadura por el estr&#xE9;s oxidativo

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x901A;&#x5E38;&#x88AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6210;&#x5206;&#x5B50;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x591A;&#x4E2A;&#x4E92;&#x52A8;&#x5408;&#x4F5C;&#x4F19;&#x4F34;&#x534F;&#x4F5C;&#x8FDB;&#x884C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8981;&#x6620;&#x5C04;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x5C1A;&#x65E0;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7279;&#x6027;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4F19;&#x4F34;&#x8C03;&#x67E5;&#x662F;&#x7279;&#x522B;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x5927;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5F80;&#x5F80;&#x76F4;&#x63A5;&#x5173;&#x7CFB;&#x5230;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x8BC1;&#x660E;&#x96BE;&#x4EE5;&#x7814;&#x7A76;&#x53CA;&#x5176;&#x4E92;&#x52A8;&#x7684;&#x4F19;&#x4F34;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x907F;&#x5F00;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9175;&#x6BCD;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x6280;&#x672F;&#x4F53;&#x5185;&#x68C0;&#x6D4B;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x62C6;&#x5206;&#x6CDB;&#x7D20;&#x819C;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4; &#xFF08;&#x795E;&#x8BDD;&#xFF09; &#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x795E;&#x8BDD;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x77AC;&#x6001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5141;&#x8BB8;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x5927;&#x7684;&#x548C;&#x5C0F;&#x5C4F;&#x5E55;&#x3002;&#x5B83;&#x4F7F;&#x7528;&#x62C6;&#x5206;&#x6CDB;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6CDB;&#x7D20;&#x534A;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7279;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7B80;&#x5355;&#x5730;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x9975;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x878D;&#x5408;&#x5230; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x6CDB;&#x7D20;&#x548C;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x4E00;&#x534A;&#x3002;&#x6CDB;&#x7D20;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x7ED3;&#x6784;&#x88AB;&#x878D;&#x5408;&#x5230;&#x730E;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x540E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8BF1;&#x9975;&#x548C;&#x730E;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x6CDB;&#x7D20;&#x662F;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x7531;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x968F;&#x540E;&#x5207;&#x5272;&#x6389;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x795E;&#x8BDD;&#x5DF2;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x7528;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76;&#x4ECE;&#x5404;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x53EA;&#x662F;&#x6700;&#x8FD1;&#x624D;&#x9002;&#x5408;&#x4E92;&#x52A8;&#x4F19;&#x4F34;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x53D7;&#x4F53;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x62C6;&#x5206;&#x6CDB;&#x7D20;&#x819C;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Proteins are generally organized into molecular complexes, in which multiple interaction partners collaborate to carry out cellular processes. Thus, techniques to map protein-protein interactions have become pivotal for biological studies of as yet uncharacterized proteins. Investigation of interaction partners of membrane proteins is of special interest, as they play a major role in cellular processes and are often directly linked to human diseases. Owing to their hydrophobic nature, however, it has proven difficult to study their interaction partners. To circumvent this problem, a yeast-based genetic technology for the in vivo detection of membrane protein interactions, the split-ubiquitin membrane yeast two-hybrid (MYTH) system, has been developed. MYTH allows for detection of both stable and transient interactions and can be applied to large- and small-scale screens. It uses the split-ubiquitin approach, in which the reconstitution of two ubiquitin halves is mediated by a specific protein-protein interaction. Briefly, the bait membrane protein is fused to the C-terminal half of ubiquitin and an artificial transcription factor. The mutated N-terminal moiety of ubiquitin is fused to the prey protein. Upon interaction of bait and prey proteins, ubiquitin is reconstituted and further recognized by ubiquitin-specific proteases, which subsequently cleave off the transcription factor, thus resulting in reporter gene activation. To date, MYTH has been successfully applied to study interactions of membrane proteins from various organisms and has only recently been adapted for the identification of interaction partners of mammalian receptor tyrosine kinases.

Investigation of membrane protein interactions using the split-ubiquitin membrane yeast two-hybrid system.

Les prot&#xE9;ines sont g&#xE9;n&#xE9;ralement organis&#xE9;s en complexes mol&#xE9;culaires, dans laquelle les partenaires d&#x26;#39;interaction de multiples collaborer pour mener &#xE0; bien les processus cellulaires. Ainsi, les techniques &#xE0; la carte des interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine sont devenus pivot pour des &#xE9;tudes biologiques de prot&#xE9;ines encore non caract&#xE9;ris&#xE9;es. Enqu&#xEA;te sur les partenaires d&#x26;#39;interaction de prot&#xE9;ines membranaires est d&#x26;#39;un int&#xE9;r&#xEA;t particulier, car ils jouent un r&#xF4;le majeur dans les processus cellulaires et sont souvent directement li&#xE9;s aux maladies humaines. En raison de leur caract&#xE8;re hydrophobe, cependant, il s&#x26;#39;est av&#xE9;r&#xE9; difficile d&#x26;#39;&#xE9;tudier leurs partenaires d&#x26;#39;interaction. Pour contourner ce probl&#xE8;me, une technologie &#xE0; base de levure g&#xE9;n&#xE9;tique pour la d&#xE9;tection in vivo des interactions de prot&#xE9;ines membranaires, la levure membrane split-ubiquitine double-hybride (MYTHE) du syst&#xE8;me, a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9;. MYTHE permet la d&#xE9;tection des interactions &#xE0; la fois stables et transitoires et ne peut &#xEA;tre appliqu&#xE9;e &#xE0; de grands &#xE9;crans et &#xE0; petite &#xE9;chelle. Il utilise l&#x26;#39;approche &#xE0; double-ubiquitine, dans laquelle la reconstitution des deux moiti&#xE9;s ubiquitine est m&#xE9;di&#xE9;e par un particulier interaction prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine. Bri&#xE8;vement, la prot&#xE9;ine de membrane app&#xE2;t est fusionn&#xE9;e &#xE0; la moiti&#xE9; C-terminale de l&#x26;#39;ubiquitine et un facteur de transcription artificiel. Le mut&#xE9;e fragment N-terminal de l&#x26;#39;ubiquitine est fusionn&#xE9; &#xE0; la prot&#xE9;ine proie. Sur l&#x26;#39;interaction des prot&#xE9;ines app&#xE2;ts et proies, l&#x26;#39;ubiquitine est reconstitu&#xE9; et a en outre reconnu par l&#x26;#39;ubiquitine prot&#xE9;ases sp&#xE9;cifiques, qui ont ensuite cliver hors du facteur de transcription, ce qui en r&#xE9;sultent dans l&#x26;#39;activation du g&#xE8;ne rapporteur. &#xC0; ce jour, le mythe a &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;e avec succ&#xE8;s pour &#xE9;tudier les interactions des prot&#xE9;ines membranaires de divers organismes et n&#x26;#39;a que r&#xE9;cemment &#xE9;t&#xE9; adapt&#xE9; pour l&#x26;#39;identification des partenaires d&#x26;#39;interaction de r&#xE9;cepteurs tyrosine kinases de mammif&#xE8;res.

&#xC9;tude des interactions prot&#xE9;ines membranaires utilisant la levure membrane Split-ubiquitine syst&#xE8;me double-hybride

Proteine sind in der Regel in molekularen komplexe, organisiert in denen mehrere Interaktion Partner zusammenarbeiten, um zellul&auml;re Prozesse durchzuf&uuml;hren. Daher sind Techniken, um Protein-Protein Interaktionen Landkarte f&uuml;r biologische Studien noch uncharakterisiertes Proteine geworden. Untersuchung der Interaktion Partner von Membranproteinen ist von besonderem Interesse, da sie eine wichtige in zellul&auml;re Prozesse Rolle und oft auf menschliche Krankheiten unmittelbar sind. Aufgrund ihrer hydrophoben Natur jedoch ist es schwierig, ihre Interaktion Partner Studie nachgewiesen. Um dieses Problem zu umgehen, wurde eine Hefe-basierte Gentechnologie zum in-vivo Nachweis von Membran-Protein-Interaktionen, die Split-Ubiquitin Hefe zwei-Mischling (Mythos) Membransystem, entwickelt. Mythos erm&ouml;glicht die Erkennung von stabilen und Transienten Interaktionen und kann auf gro&szlig;en und kleinen - scale Bildschirme angewendet werden. Es verwendet den Split-Ubiquitin-Ansatz, in dem die Neubildung der zwei Ubiquitin-H&auml;lften von einem spezifischen Protein-Protein-Interaktion vermittelt wird. Kurz, die K&ouml;der-Membranprotein an der C-terminalen verschmolzen ist H&auml;lfte Ubiquitin und eine k&uuml;nstliche Transkriptionsfaktor. Die mutierten N-terminalen Teil des Ubiquitin ist dem Beute-Protein fusioniert. Bei der Interaktion des K&ouml;ders und Beute Proteine, Ubiquitin rekonstituiert und weiter von Ubiquitin-spezifische Proteasen, die anschlie&szlig;end aus den Transkriptionsfaktor, wodurch sich Reporter Genaktivierung cleave anerkannt ist. Bis heute Mythos um Wechselwirkungen von Membranproteinen aus verschiedenen Organismen zu studieren erfolgreich angewendet wurde und hat erst vor kurzem f&uuml;r die Identifizierung der Interaktion Partner des S&auml;ugetier-Rezeptor-Tyrosin-Kinasen angepasst worden.

Untersuchung der Membran-Protein-Interaktionen mit das Split-Ubiquitin Membran Hefe-zwei-Hybrid-System.

Le proteine sono generalmente organizzate in complessi molecolari, in cui pi&ugrave; partner di interazione collaborano per svolgere i processi cellulari. Cos&igrave;, tecniche per mappare le interazioni della proteina-proteina sono diventati cardine per gli studi biologici di proteine ancora atipici. Ricerca di partners di interazione delle proteine di membrana &egrave; di particolare interesse, come essi svolgono un ruolo importante nei processi cellulari e sono spesso direttamente collegati a malattie umane. A causa della loro natura idrofobica, tuttavia, ha dimostrato difficile studiare loro partner di interazione. Per aggirare questo problema, &egrave; stata sviluppata una tecnologia genetica basata su lievito per la rilevazione in vivo delle interazioni della proteina di membrana, sistema split-ubiquitina membrana lievito due-ibrido (mito). MITO consente la rilevazione delle interazioni stabili e transitorie e pu&ograve; essere applicato a schermi di grandi dimensioni - e small - scala. Utilizza l&#39;approccio di Spalato-ubiquitina, in cui la ricostituzione delle due met&agrave; di ubiquitin &egrave; mediata da un&#39;interazione proteina-proteina specifica. Brevemente, la proteina di membrana esca &egrave; fuso al C-terminale met&agrave; dell&#39;ubiquitina e un fattore di trascrizione artificiali. Il mutato moiety N-terminale di ubiquitin &egrave; fuso alla proteina preda. All&#39;interazione di esche e prede proteine, ubiquitina &egrave; ricostituito e ulteriormente riconosciuto dalle proteasi ubiquitin-specifiche, che successivamente cleave fuori il fattore di trascrizione, cos&igrave; con conseguente attivazione del gene reporter. Ad oggi, il mito &egrave; stato applicato con successo per studiare le interazioni delle proteine di membrana da vari organismi e solo recentemente &egrave; stato adattato per l&#39;identificazione dei partner di interazione della chinasi tirosina del recettore dei mammiferi.

Indagine delle interazioni della proteina di membrana utilizzando il sistema split-ubiquitina membrana lievito due-ibrido.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x306B;&#x5206;&#x5B50;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x7DE8;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x9042;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5354;&#x529B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x7279;&#x5225;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x306E;&#x304A;&#x304B;&#x3052;&#x3067;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x8A3C;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;in vivo&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9175;&#x6BCD;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6280;&#x8853;&#x3001;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x819C;&#x9175;&#x6BCD;&#x30C4;&#x30FC;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#xFF08;&#x795E;&#x8A71;&#xFF09;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x795E;&#x8A71;&#x306F;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x904E;&#x6E21;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5C0F;&#x898F;&#x6A21;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x534A;&#x5206;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; - &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x5206;&#x5272;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x8A00;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x990C;&#x306E;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x534A;&#x5206;&#x3068;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x7570;N&#x672B;&#x7AEF;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x3001;prey&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x990C;&#x3068;&#x7372;&#x7269;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x5207;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x30AA;&#x30D5;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x307E;&#x3067;&#x306B;&#x3001;&#x795E;&#x8A71;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x3054;&#x304F;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xBD84;&#xD560; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9C9; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC870;&#xC0AC;.

Las prote&#xED;nas se organizan generalmente en complejos moleculares, en el que varias parejas de interacci&#xF3;n colaboran para llevar a cabo los procesos celulares. Por lo tanto, las t&#xE9;cnicas para mapear interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na se han convertido en fundamental para los estudios biol&#xF3;gicos de las prote&#xED;nas a&#xFA;n no caracterizadas. Investigaci&#xF3;n de los socios de la interacci&#xF3;n de prote&#xED;nas de la membrana es de especial inter&#xE9;s, ya que desempe&#xF1;an un papel importante en los procesos celulares y son a menudo directamente relacionadas con las enfermedades humanas. Debido a su naturaleza hidrof&#xF3;bica, sin embargo, se ha demostrado que es dif&#xED;cil para estudiar sus compa&#xF1;eros de interacci&#xF3;n. Para evitar este problema, una tecnolog&#xED;a gen&#xE9;tica a base de levadura para la detecci&#xF3;n in vivo de las interacciones prote&#xED;na de membrana, la membrana de la levadura dividida ubiquitina de dos h&#xED;bridos (MITO) del sistema, se ha desarrollado. MITO permite la detecci&#xF3;n de interacciones, tanto estables y transitorios y pueden ser aplicados a las pantallas grandes y peque&#xF1;as. Se utiliza el m&#xE9;todo de divisi&#xF3;n-ubiquitina, en la que la reconstituci&#xF3;n de dos mitades de ubiquitina est&#xE1; mediada por una espec&#xED;fica interacci&#xF3;n prote&#xED;na-prote&#xED;na. En pocas palabras, la prote&#xED;na de la membrana cebo se fusiona a la mitad C-terminal de la ubiquitina y un factor de transcripci&#xF3;n artificial. El mutado N-terminal resto de ubiquitina est&#xE1; fusionado a la prote&#xED;na presa. Luego de la interacci&#xF3;n de las prote&#xED;nas cebo y presa, la ubiquitina es reconstituida y adem&#xE1;s reconocido por la ubiquitina-proteasas espec&#xED;ficas, las cuales posteriormente escindir el factor de transcripci&#xF3;n, lo que resulta en la activaci&#xF3;n del gen reportero. Hasta la fecha, el mito ha sido aplicado con &#xE9;xito para estudiar las interacciones de las prote&#xED;nas de membrana de diversos organismos y s&#xF3;lo recientemente ha sido adaptada para la identificaci&#xF3;n de los socios de la interacci&#xF3;n de mam&#xED;feros receptores tirosina quinasas.

La investigaci&#xF3;n de interacciones entre prote&#xED;nas de membrana utilizando la levadura de la membrana de Split-ubiquitina sistema h&#xED;brido de dos

Article	Year
Adenosine kinase deficiency is associated with developmental abnormalities and reduced transmethylation. Plant physiology\| PubMed ID: 11891238	2002
Formation of a distinctive complex between the inducible bacterial lysine decarboxylase and a novel AAA+ ATPase. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 16301313	2006
MoxR AAA+ ATPases: a novel family of molecular chaperones? Journal of structural biology\| PubMed ID: 16677824	2006
AAA+ proteins: diversity in function, similarity in structure. Biochemical Society transactions\| PubMed ID: 18208389	2008
The AAA+ superfamily of functionally diverse proteins. Genome biology\| PubMed ID: 18466635	2008
ABC transporters in Saccharomyces cerevisiae and their interactors: new technology advances the biology of the ABCC (MRP) subfamily. Microbiology and molecular biology reviews : MMBR\| PubMed ID: 19946134	2009
Detecting interactions with membrane proteins using a membrane two-hybrid assay in yeast. Nature protocols\| PubMed ID: 20595957	2010
Interactive proteomics research technologies: recent applications and advances. Current opinion in biotechnology\| PubMed ID: 20884196	2011
Linkage between the bacterial acid stress and stringent responses: the structure of the inducible lysine decarboxylase. The EMBO journal\| PubMed ID: 21278708	2011
The Rho1 GTPase acts together with a vacuolar glutathione S-conjugate transporter to protect yeast cells from oxidative stress. Genetics\| PubMed ID: 21625004	2011
Investigation of membrane protein interactions using the split-ubiquitin membrane yeast two-hybrid system. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)\| PubMed ID: 22218863	2012

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