neutrophil-extracellular-traps-how-to-generate-and-visualize-them

Neutrophil Extracellular Traps: How to Generate and Visualize Them

Neutrophil granulocytes are the most abundant group of leukocytes in the peripheral blood. As professional phagocytes, they engulf bacteria and kill them ...

Max Planck Institute for Infection Biology

&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x541E;&#x566C;&#x548C;&#x6740;&#x6B7B;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x5F53;&#x5176;&#x6297;&#x83CC;&#x9897;&#x7C92;&#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;&#x4E0E; phagosome&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x5728;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CA;&#x653E;&#x9897;&#x7C92;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x5171;&#x540C;&#x6784;&#x6210;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9633;&#x6027;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x548C;-&#x9634;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x9677;&#x9631; &#xFF08;&#x82F1;&#x8BED;&#x6559;&#x5E08;&#xFF09; &#x4F1A;&#x964D;&#x4F4E;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x6740;&#x6B7B;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3002;&#x868A;&#x5E10;&#x662F;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x75E2;&#x75BE;&#x548C;&#x81EA;&#x53D1;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9611;&#x5C3E;&#x708E;&#xFF0C;&#x6025;&#x6027;&#x708E;&#x75C7;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4F8B;&#x5B50;&#x3002;&#x7F51;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x5929;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3001; &#x9632;&#x6B62;&#x8513;&#x5EF6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x786E;&#x4FDD;&#x672C;&#x5730;&#x9AD8;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x6297;&#x83CC;&#x836F;&#x7269;&#x4EE5;&#x964D;&#x4F4E;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x6740;&#x6B7B;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3002;

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Neutrophils engulf and kill bacteria when their antimicrobial granules fuse with the phagosome. Here, we describe that, upon activation, neutrophils release granule proteins and chromatin that together form extracellular fibers that bind Gram-positive and -negative bacteria. These neutrophil extracellular traps (NETs) degrade virulence factors and kill bacteria. NETs are abundant in vivo in experimental dysentery and spontaneous human appendicitis, two examples of acute inflammation. NETs appear to be a form of innate response that binds microorganisms, prevents them from spreading, and ensures a high local concentration of antimicrobial agents to degrade virulence factors and kill bacteria.

Neutrophil extracellular traps kill bacteria.

Engloutir neutrophiles et tuer les bact&#xE9;ries lorsque leurs granules antimicrobiens fusionner avec le phagosome. Ici, nous d&#xE9;crivons ce que, lors de l&#x26;#39;activation, les neutrophiles lib&#xE8;rent des prot&#xE9;ines de granules et la chromatine qui forment ensemble les fibres extracellulaires qui lient Gram-positives et n&#xE9;gatives des bact&#xE9;ries. Ces pi&#xE8;ges extracellulaires neutrophiles (EVF) se d&#xE9;gradent facteurs de virulence et de tuer les bact&#xE9;ries. NET sont abondants in vivo dans la dysenterie exp&#xE9;rimentale et spontan&#xE9;e appendicite humaine, deux exemples d&#x26;#39;inflammation aigu&#xEB;. NET semble &#xEA;tre une forme de r&#xE9;ponse inn&#xE9;e qui lie les micro-organismes, les emp&#xEA;che de se propager, et assure une forte concentration locale d&#x26;#39;agents antimicrobiens &#xE0; d&#xE9;grader les facteurs de virulence et de tuer les bact&#xE9;ries.

Neutrophiles pi&#xE8;ges extracellulaires Tuez les bact&#xE9;ries

Neutrophile extrazellul&#xE4;re Fallen t&#xF6;ten Bakterien.

Neutrofili fagocitare e uccidono i batteri quando loro granuli antimicrobiche fusibile con il Fagosoma. Qui, descriviamo che, dopo l&#39;attivazione, i neutrofili rilascio granulo proteine e della cromatina che insieme formano fibre extracellulari che legano Gram-positivi e - negativo batteri. Queste trappole extracellulari del neutrofilo (reti) degradano i fattori di virulenza e uccidono i batteri. Le reti sono abbondanti in vivo in dissenteria sperimentale e spontanea umana appendicite, due esempi di infiammazione acuta. Reti sembrano essere una forma di risposta innata che associa i microrganismi, impedisce loro di diffusione e assicura un&#39;elevata concentrazione locale di agenti antimicrobici per degradare i fattori di virulenza e uccidere i batteri.

Trappole extracellulari del neutrofilo uccidono i batteri.

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Los neutr&#xF3;filos fagocitan y matan a las bacterias cuando sus gr&#xE1;nulos de antimicrobianos se fusionan con el fagosoma. Aqu&#xED;, se describe que, tras la activaci&#xF3;n, los neutr&#xF3;filos liberan prote&#xED;nas granulares y cromatina que juntos forman fibras extracelulares que se unen Gram-positivas y negativas bacterias. Estas trampas extracelulares de neutr&#xF3;filos (TNE) se degradan los factores de virulencia y matar las bacterias. NET son abundantes en vivo en la disenter&#xED;a experimental y la apendicitis humana espont&#xE1;nea, dos ejemplos de la inflamaci&#xF3;n aguda. NET parece ser una forma de respuesta innata que une a los microorganismos, impide que se propaguen, y garantiza una alta concentraci&#xF3;n local de agentes antimicrobianos para degradar los factores de virulencia y matar las bacterias.

Neutr&#xF3;filos trampas extracelulares matar las bacterias

&#x5E7D;&#x95E8;&#x87BA;&#x6746;&#x83CC;&#x5B58;&#x5728;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x6746;&#x5F62;&#x6216;&#x7403;&#x5F62;&#xFF0C;&#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7684;&#x80C3;&#x91CC;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7684;&#x7403;&#x5F62;&#x7279;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x8FA9;&#x79F0;&#x5BF9;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x7403;&#x5F62;&#x5E7D;&#x95E8;&#x5230;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5982;&#x589E;&#x5F3A;&#x6301;&#x7EED;&#x6027;&#x6216;&#x4F20;&#x8F93;&#x5230;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E3B;&#x673A;&#x3002;

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Helicobacter pylori exists in two distinct forms, rod shaped or coccoid, in stomachs of infected patients. Based on in vitro proteome comparisons, there are no detectable coccoid-specific proteins, which argues against the specific adaptation of coccoid Helicobacter to distinct biological functions, such as enhanced persistence or transmission to other hosts.

Lack of stage-specific proteins in coccoid Helicobacter pylori cells.

Helicobacter pylori existe sous deux formes distinctes, tige en forme ou cocco&iuml;de, dans les estomacs des patients infect&eacute;s. Ne bas&eacute;e sur des comparaisons de proteome in vitro, il y a aucune prot&eacute;ine cocco&iuml;des sp&eacute;cifiques d&eacute;tectables, qui milite contre l&#39;adaptation sp&eacute;cifique des Helicobacter cocco&iuml;de &agrave; des fonctions biologiques distinctes, telles que la persistance accrue ou transmission &agrave; d&#39;autres h&ocirc;tes.

Manque de prot&eacute;ines sp&eacute;cifiques au stade cocco&iuml;des cellules de Helicobacter pylori.

Mangelnde Stadium-spezifische Proteine &#x200B;&#x200B;in kokkoiden Helicobacter-pylori-Zellen.

Helicobacter pylori esiste in due forme distinte, tondino sagomato o asporigeni, in stomaci dei pazienti infetti. Non basato sul confronto del proteoma in vitro, esistono rilevabili coccoid specifiche proteine, che argomenta contro l&#39;adattamento specifico di Helicobacter asporigeni a distinte funzioni biologiche, quali una maggiore persistenza o trasmissione ad altri host.

Mancanza di fase specifiche proteine asporigeni cellule di Helicobacter pylori.

2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3067;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x72B6;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7403;&#x72B6;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x80C3;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x83CC;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;In vitro &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x4F1D;&#x9001;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x7403;&#x72B6;&#x306E;&#x30D8;&#x30EA;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30FB; &#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x306E; coccoid &#x56FA;&#x6709;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

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&#xD5EC;&#xB9AC;&#xCF54;&#xBC15;&#xD130; &#xD30C;&#xC77C;&#xB85C;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9C9;&#xB300; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xB610;&#xB294; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xC704;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; coccoid &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634; &#xBE44;&#xAD50;&#xB97C; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC5C6;&#xB294; &#xAC10;&#xC9C0; coccoid &#xD2B9;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC804;&#xC1A1; &#xB4F1;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; coccoid &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCF54;&#xBC15;&#xD130;&#xC758; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; &#xC801;&#xC751;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC8FC;&#xC7A5;.

Coccoid &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCF54;&#xBC15;&#xD130; &#xD30C;&#xC77C;&#xB85C;&#xB9AC; &#xC140;&#xC5D0; &#xBB34;&#xB300; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;.

Helicobacter pylori existe en dos formas distintas, barra forma o cocoide, en est&oacute;magos de pacientes infectados. Basada en comparaciones de proteoma in vitro, no hay ninguna prote&iacute;na cocoide espec&iacute;ficos detectable, que sostiene contra la adaptaci&oacute;n espec&iacute;fica de Helicobacter cocoide a distintas funciones biol&oacute;gicas, como mayor persistencia o transmisi&oacute;n a otros hosts.

Falta de prote&iacute;nas de la fase espec&iacute;fica en c&eacute;lulas de los p&iacute;loros de Helicobacter cocoides.

&#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x75AB;&#x82D7;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x725B;&#x578B;&#x6838;&#x9178;&#x7ED3;&#x679C; (BCG) &#x914D;&#x5907;&#x4E86;&#x819C;&#x7A7F;&#x5B54; listeriolysin &#xFF08;Hly) &#x7684;&#x674E;&#x65AF;&#x7279;&#x83CC;&#xFF0C;&#x6240;&#x793A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6539;&#x5584;&#x5BF9;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x3002;&#x4E4B;&#x540E;&#x7684;&#x6C14;&#x6EB6;&#x80F6;&#xFF0C;Hly &#x5206;&#x6CCC;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5361;&#x4ECB;&#x82D7; (hly + rBCG) &#x8868;&#x660E;&#x662F;&#x4FDD;&#x62A4;&#x5BF9;&#x6C14;&#x6EB6;&#x80F6;&#x611F;&#x67D3;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x6BD4;&#x80B2;&#x513F;&#x5361;&#x4ECB;&#x82D7;&#x83CC;&#x682A;&#x660E;&#x663E;&#x66F4;&#x597D;&#x3002;&#x7B49;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x8132;&#x9176; C &#x7F3A; hly + rBCG (DeltaureC hly + rBCG) &#x75AB;&#x82D7;&#xFF0C;&#x4E3A; Hly &#x6D3B;&#x52A8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6700;&#x4F73;&#x7684;&#x9178;&#x6027; ph &#x503C;&#x5230;&#x66F4;&#x63A5;&#x8FD1; intraphagosomal pH &#x5C55;&#x51FA;&#x80B2;&#x513F;&#x5361;&#x4ECB;&#x82D7;&#x6BD4;&#x4ECD;&#x9AD8;&#x51FA;&#x75AB;&#x82D7;&#x6548;&#x529B;&#x3002;DeltaureC hly + rBCG &#x8FD8;&#x8BF1;&#x5BFC; M.&#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x5317;&#x4EAC;/W &#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x6DF1;&#x523B;&#x9632;&#x62A4;&#x867D;&#x7136;&#x80B2;&#x513F;&#x5361;&#x4ECB;&#x82D7;&#x672A;&#x80FD;&#x4E00;&#x8D2F;&#x5982;&#x6B64;&#x505A;&#x3002;Hly &#x4E0D;&#x4EC5;&#x80FD;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6297;&#x539F;&#x6613;&#x4F4D;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E5F;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7ED3;&#x675F;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4F18;&#x8D8A;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x6548;&#x679C;&#x7684; DeltaureC hly + rBCG &#x4E0E;&#x80B2;&#x513F;&#x5361;&#x4ECB;&#x82D7;&#x4E3B;&#x8981;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6539;&#x8FDB;&#x8DE8;&#x5438;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x5F3A; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x589E;&#x52A0;&#x5BF9;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x725B;&#x578B;&#x6838;&#x9178;&#x7ED3;&#x679C;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5206;&#x6CCC; listeriolysin &#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x75AB;&#x82D7;&#x6548;&#x529B;&#x3002;

The tuberculosis vaccine Mycobacterium bovis bacille Calmette-GuÃ©rin (BCG) was equipped with the membrane-perforating listeriolysin (Hly) of Listeria monocytogenes, which was shown to improve protection against Mycobacterium tuberculosis. Following aerosol challenge, the Hly-secreting recombinant BCG (hly+ rBCG) vaccine was shown to protect significantly better against aerosol infection with M. tuberculosis than did the parental BCG strain. The isogenic, urease C-deficient hly+ rBCG (DeltaureC hly+ rBCG) vaccine, providing an intraphagosomal pH closer to the acidic pH optimum for Hly activity, exhibited still higher vaccine efficacy than parental BCG. DeltaureC hly+ rBCG also induced profound protection against a member of the M. tuberculosis Beijing/W genotype family while parental BCG failed to do so consistently. Hly not only promoted antigen translocation into the cytoplasm but also apoptosis of infected macrophages. We concluded that superior vaccine efficacy of DeltaureC hly+ rBCG as compared with parental BCG is primarily based on improved cross-priming, which causes enhanced T cell-mediated immunity.

Increased vaccine efficacy against tuberculosis of recombinant Mycobacterium bovis bacille Calmette-GuÃ©rin mutants that secrete listeriolysin.

La tuberculose vaccin Mycobacterium bovis bacille Calmette-Gu&eacute;rin (BCG) &eacute;tait &eacute;quip&eacute; de la membrane-perforation list&eacute;riolysine (Hly) de Listeria monocytogenes, qui a &eacute;t&eacute; montr&eacute; pour am&eacute;liorer la protection contre Mycobacterium tuberculosis. Apr&egrave;s le d&eacute;fi de l&#39;a&eacute;rosol, le recombinant Hly s&eacute;cr&eacute;tant le vaccin BCG (hly + rBCG) a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute; de protection nettement mieux contre l&#39;infection par M. tuberculosis a&eacute;rosol, que fait la souche BCG. Isog&eacute;nique, ur&eacute;ase C-deficient hly + rBCG (DeltaureC hyl + rBCG) vaccin, pr&eacute;voyant un pH d&#39;intraphagosomal plus pr&egrave;s &agrave; l&#39;acide pH optimal Hly activit&eacute;, ont montr&eacute; l&#39;efficacit&eacute; du vaccin demeure plus &eacute;lev&eacute;e que le BCG parental. DeltaureC hyl + rBCG induit aussi profonde protection contre un membre de la famille de g&eacute;notype de M. tuberculosis Beijing/W alors que le BCG parental n&#39;a pas pu le font en permanence. HLY promu non seulement la translocation de l&#39;antig&egrave;ne dans le cytoplasme, mais aussi l&#39;apoptose des macrophages infect&eacute;s. Nous avons conclu que l&#39;efficacit&eacute; du vaccin sup&eacute;rieure de DeltaureC rBCG hly + par rapport au BCG parental repose principalement sur Croix-amor&ccedil;age am&eacute;lior&eacute;e, entra&icirc;nant am&eacute;lior&eacute; l&#39;immunit&eacute; &agrave; m&eacute;diation cellulaire T.

Augmente l&#39;efficacit&eacute; du vaccin contre la tuberculose de recombinants Mycobacterium bovis bacille Calmette-Gu&eacute;rin mutants qui s&eacute;cr&egrave;tent la list&eacute;riolysine.

Erh&#xF6;hte Wirksamkeit des Impfstoffes gegen Tuberkulose von rekombinanten Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Gu&#xE9;rin-Mutanten, dass absondern Listeriolysin.

Il vaccino di tubercolosi Mycobacterium bovis bacillo di Calmette-Gu&eacute;rin (BCG) era equipaggiata con la perforazione membrana listeriolysin (Hly) di Listeria monocytogenes, che &egrave; stato indicato per migliorare la protezione contro il Mycobacterium tuberculosis. Dopo la sfida di aerosol, il Hly-secernenti ricombinante vaccino BCG (hly + rBCG) ha dimostrato di proteggere significativamente meglio contro l&#39;infezione aerosol con M. tuberculosis che ha fatto il ceppo BCG parentale. Isogeni, ureasi C-carenti hly + rBCG (DeltaureC hly + rBCG) vaccino, fornendo un pH intraphagosomal pi&ugrave; vicino al pH acido ottimale per attivit&agrave; Hly, esposto ancora maggiore efficacia del vaccino di BCG parentale. DeltaureC hly + rBCG indotta anche profonda protezione contro un membro della famiglia di genotipo Beijing/W di M. tuberculosis mentre parentale BCG non &egrave; riuscito a fare cos&igrave; costantemente. Hly promosso non solo traslocazione di antigene nel citoplasma ma anche apoptosi dei macrofagi infetti. Abbiamo concluso che efficacia del vaccino superiore di DeltaureC hly + rBCG rispetto al BCG parentale si basa principalmente sulla Croce-innesco migliorato, che causa maggiore immunit&agrave; mediata da cellule T.

Maggiore efficacia del vaccino contro la tubercolosi di ricombinanti Mycobacterium bovis bacillo di Calmette-Gu&eacute;rin mutanti che secernono listeriolysin.

&#x7D50;&#x6838;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; bovis bacille &#x30AB;&#x30EB;&#x30E1;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B2;&#x30E9;&#x30F3; &#xFF08;BCG&#xFF09; &#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x83CC;&#x306E;&#x819C;&#x7A7F;&#x5B54;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3; (Hly) &#x3092;&#x642D;&#x8F09;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A8;&#x30A2;&#x30ED;&#x30BE;&#x30EB;&#x8AB2;&#x984C;&#x4EE5;&#x4E0B; Hly &#x3092;&#x5206;&#x6CCC;&#x3059;&#x308B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; BCG (hly + rBCG) &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30A2;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x611F;&#x67D3;&#x7D50;&#x6838;&#x75C7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; BCG &#x89AA;&#x682A;&#x304C;&#x3084;&#x3063;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x826F;&#x597D;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Hly &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8FD1;&#x3044;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x9178;&#x6027; pH &#x3092; intraphagosomal pH &#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x540C;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7CFB;&#x7D71;, &#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; C &#x6B20;&#x4E4F; hly + rBCG &#xFF08;DeltaureC hly + rBCG) &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BF;&#x30EB; BCG &#x3088;&#x308A;&#x307E;&#x3060;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BF;&#x30EB; BCG &#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x3046;&#x306B;&#x306F;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089; DeltaureC hly + rBCG &#x306F;&#x307E;&#x305F; M. &#x7D50;&#x6838;&#x5317;&#x4EAC;/W &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Hly &#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x6297;&#x539F;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x304C;&#x307E;&#x305F;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x6607;&#x683C;&#x3002;Hly + rBCG &#x30DA;&#x30A2;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BF;&#x30EB; BCG &#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x304C;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308B; T &#x7D30;&#x80DE;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x5F37;&#x5316;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6539;&#x826F;&#x3067;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; DeltaureC &#x306E;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30D2;&#x30C8;&#x578B;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC; bovis bacille &#x30AB;&#x30EB;&#x30E1;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B2;&#x30E9;&#x30F3;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x7D50;&#x6838;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xACB0;&#xD575; &#xBC31;&#xC2E0; Mycobacterium bovis bacille Calmette Gu&eacute;rin (BCG) &#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;&#xB97C; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC92C;&#xB358; Listeria monocytogenes&#xC758; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; perforating listeriolysin (Hly)&#xB97C; &#xC7A5;&#xCC29; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5D0; &#xC5B4;&#xB85C; &#xC878;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC804;, &#xB2E4;&#xC74C; Hly &#xC740;&#xB2C9; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; BCG (hly + rBCG) &#xBC31;&#xC2E0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; BCG &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; M. &#xACB0;&#xD575;&#xC73C;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB85C; &#xC878; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xBCF4;&#xD638;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. Isogenic, urease C &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; hly + rBCG (DeltaureC hly + rBCG) &#xBC31;&#xC2E0;, Hly &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC0B0; &#xC131; Ph&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; intraphagosomal Ph&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; BCG &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xC804;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C; DeltaureC hly + Rbcg&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C4; M. &#xACB0;&#xD575; &#xBCA0;&#xC774;&#xC9D5;/W &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC77C;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2EC;&#xC624;&#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; BCG &#xADF8;&#xB807;&#xAC8C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD560; &#xC77C;&#xC740; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. Hly&#xB294; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; apoptosis&#xC5D0; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC804; &#xC2B9;&#xC9C4;. Hly + rBCG &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; BCG&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC8FC;&#xB85C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xBABB;&#xC4F0;&#xAC8C;, &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC6D0;&#xC778; T &#xC140; &#xC911;&#xC7AC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAC15;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; Deltaurec&#xC758; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xADF8; &#xACB0;&#xB860;&#xC744; &#xB0B4;&#xB838;&#xB2E4;.

Listeriolysin&#xC744; &#xBD84; &#xBE44; &#xD558;&#xB294; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; Mycobacterium bovis bacille Calmette Gu&eacute;rin &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xACB0;&#xD575;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;.

La vacuna de tuberculosis Mycobacterium bovis bacille Calmette-Gu&eacute;rin (BCG) fue equipado con el listeriolysin de la perforaci&oacute;n de la membrana (AVF) de Listeria monocytogenes, que fue demostrado para mejorar la protecci&oacute;n frente a Mycobacterium tuberculosis. Tras el desaf&iacute;o de aerosol, la recombinante Hly-secreci&oacute;n vacuna BCG (hly + rBCG) fue demostrada para proteger significativamente mejor contra la infecci&oacute;n con M. tuberculosis de aerosol de la cepa parental de BCG. La isog&eacute;nicas, ureasa C deficientes hly + rBCG (DeltaureC hly + rBCG) vacuna, prev&eacute;n un pH de intraphagosomal m&aacute;s cercano al &aacute;cida pH &oacute;ptimo de actividad Hly, exhibi&oacute; mayor eficacia de la vacuna de BCG parental. DeltaureC hly + rBCG inducida tambi&eacute;n protecci&oacute;n profunda contra un miembro de la familia de M. tuberculosis Beijing/W genotipo mientras que los padres BCG no tan constantemente. HLY no s&oacute;lo promueve la translocaci&oacute;n de ant&iacute;geno en el citoplasma sino tambi&eacute;n la apoptosis de los macr&oacute;fagos infectados. Llegamos a la conclusi&oacute;n eficacia de la vacuna superior de DeltaureC hly + rBCG en comparaci&oacute;n con los padres BCG se basa principalmente en la reactividad cruzada mejorada, que causa mayor inmunidad mediada por c&eacute;lulas T.

Aumenta la eficacia de la vacuna contra la tuberculosis de recombinantes Mycobacterium bovis bacille Calmette-Gu&eacute;rin mutantes que secretan listeriolysin.

&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x9677;&#x9631; (&#x7F51;) &#x662F;&#x80DE;&#x5916;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5E76;&#x6740;&#x6B7B;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x548C;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x65F6;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4F1A;&#x6539;&#x53D8;&#x5F62;&#x72B6;&#xFF0C;&#x800C;&#x6B27;&#x76DF;&#x548C;&#x5F02;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x5747;&#x8D28;&#x3002;&#x540E;&#x6765;&#xFF0C;&#x6838;&#x4FE1;&#x5C01;&#x548C;&#x9897;&#x7C92;&#x819C;&#x74E6;&#x89E3;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x6DF7;&#x5408;&#x7684;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x9632;&#x9CA8;&#x7F51;&#x7684;&#x53D1;&#x884C;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7B26;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x574F;&#x6B7B;&#x548C; NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS) &#x4EE3;&#x53D6;&#x51B3;&#x3002;&#x6162;&#x6027;&#x8089;&#x82BD;&#x80BF;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x643A;&#x5E26;&#x7A81;&#x53D8; NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x548C;&#x4E0D;&#x80FD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x9014;&#x5F84;&#x6216;&#x4F7F;&#x868A;&#x5E10;&#x3002;&#x8FD9;&#x672C;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x4F9D;&#x8D56; ROS &#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x4F7F;&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5C65;&#x884C;&#x5176;&#x6297;&#x83CC;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x8D85;&#x8D8A;&#x4E86;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x5BFF;&#x547D;&#x3002;

&#x65B0;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DE;&#x5916;&#x7684;&#x9677;&#x9631;&#x3002;

Neutrophil extracellular traps (NETs) are extracellular structures composed of chromatin and granule proteins that bind and kill microorganisms. We show that upon stimulation, the nuclei of neutrophils lose their shape, and the eu- and heterochromatin homogenize. Later, the nuclear envelope and the granule membranes disintegrate, allowing the mixing of NET components. Finally, the NETs are released as the cell membrane breaks. This cell death process is distinct from apoptosis and necrosis and depends on the generation of reactive oxygen species (ROS) by NADPH oxidase. Patients with chronic granulomatous disease carry mutations in NADPH oxidase and cannot activate this cell-death pathway or make NETs. This novel ROS-dependent death allows neutrophils to fulfill their antimicrobial function, even beyond their lifespan.

Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps.

Neutrophiles pi&#xE8;ges extracellulaires (filets) sont des structures extracellulaires compos&#xE9;es de prot&#xE9;ines de la chromatine et de granules qui se lient et tuer les microorganismes. Nous montrons que lors de la stimulation, les noyaux des neutrophiles perdre leur forme, et l&#x26;#39;Union europ&#xE9;enne et l&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rochromatine homog&#xE9;n&#xE9;iser. Plus tard, l&#x26;#39;enveloppe nucl&#xE9;aire et les membranes de granules se d&#xE9;sint&#xE8;grent, ce qui permet le m&#xE9;lange des composants NET. Enfin, les filets sont lib&#xE9;r&#xE9;s en raison des coupures des membranes cellulaires. Ce processus de mort cellulaire est distinct de l&#x26;#39;apoptose et la n&#xE9;crose et d&#xE9;pend de la g&#xE9;n&#xE9;ration d&#x26;#39;esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne (ROS) par la NADPH oxydase. Les patients atteints de la maladie granulomateuse chronique sont porteuses de mutations dans la NADPH oxydase et ne peut pas activer cette voie de mort cellulaire ou faire des filets. Ce roman ROS-d&#xE9;pendante la mort permet neutrophiles &#xE0; remplir leur fonction antimicrobienne, m&#xEA;me au-del&#xE0; de leur dur&#xE9;e de vie.

Novel programme de mort cellulaire conduit &#xE0; des neutrophiles pi&#xE8;ges extracellulaires

Neutrophile extrazellul&auml;re fallen (NETs) sind extrazellul&auml;re Strukturen bestehend aus Chromatin und Granulat Proteine, die binden und Mikroorganismen zu t&ouml;ten. Wir zeigen, dass auf Anregung, die Kernen der Neutrophilen ihre Form verlieren und die Eu und Heterochromatin zu homogenisieren. Sp&auml;ter zerfallen die Kernh&uuml;lle und das Granulat-Membranen, erm&ouml;glicht das Mischen von NET-Komponenten. Schlie&szlig;lich sind die Netze als die Zellmembran-Pausen ver&ouml;ffentlicht. Dieser Zelle Tod Proze&szlig; unterscheidet sich von Apoptose und Nekrose und h&auml;ngt die Generation von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) von der NADPH-Oxidase. Patienten mit chronischen Granulomatose Mutationen in NADPH Oxydase zu tragen und nicht diese Zelltod Option zu aktivieren oder Netze. Dieser Roman ROS-abh&auml;ngige Tod kann Neutrophilen antimikrobielle Funktion, sogar &uuml;ber ihre Lebensdauer hinaus zu erf&uuml;llen.

Neuartige Zell-Tod-Programm f&uuml;hrt zu neutrophil extrazellul&auml;re fallen.

Trappole extracellulari del neutrofilo (reti) sono strutture extracellulari composte da proteine della cromatina e granulo che legano e uccidono microrganismi. Mostriamo che dopo stimolazione, i nuclei dei neutrofili perdono la loro forma, e l&#39;UE - ed eterocromatina omogeneizzare. Pi&ugrave; tardi, l&#39;involucro nucleare e le membrane granulo disintegrano, permettendo la miscelazione dei componenti di rete. Infine, le reti vengono rilasciate come la membrana cellulare si rompe. Questo processo di morte cellulare &egrave; distinto dal apoptosis e necrosi e la generazione di specie reattive dell&#39;ossigeno (ROS) dipende da NADPH ossidasi. I pazienti con malattia granulomatosa cronica portano mutazioni in NADPH ossidasi e non attivare questo pathway di morte cellulare o reti. Questo romanzo morte ROS-dipendente consente di neutrofili adempiere la loro funzione antimicrobica, anche oltre la loro vita.

Programma di morte cellulare romanzo conduce a trappole extracellulari del neutrofilo.

&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#xFF08;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x9846;&#x7C92;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x6BBA;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x6838;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5F62;&#x72B6;&#x3092;&#x5931;&#x3044;&#x3001;EU&#x3068;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30DB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30CA;&#x30A4;&#x30BA;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x6838;&#x819C;&#x3068;&#x9846;&#x7C92;&#x819C;&#x306F;&#x3001;NET&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x5D29;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x6539;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x30CD;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x306F;&#x533A;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3001;NADPH&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#xFF08;ROS&#xFF09;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6162;&#x6027;&#x8089;&#x82BD;&#x816B;&#x75C7;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;NADPH&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;ROS&#x4F9D;&#x5B58;&#x6B7B;&#x306F;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x3082;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6297;&#x83CC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5C0F;&#x8AAC;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;

&#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD2B8;&#xB7A9; (&#xADF8;&#xBB3C;)&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC8FD; &#xC77C; chromatin &#xBC0F;&#xACFC; &#xB9BD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC758; &#xD575; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xBD84;&#xC2E4; &#xD558; &#xACE0; eu&#xC640; &#xC12C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xC911;&#xC5D0;, &#xD575; &#xBD09;&#xD22C;&#xC640;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xBD84;&#xD574;, NET &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD63C;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xADF8;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD574;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xACFC;&#xC815; apoptosis&#xC640; &#xAD34; &#xC0AC;&#xB294; &#xBCC4;&#xAC1C; &#xC774;&#xBA70; NADPH &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;)&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Granulomatous &#xB9CC;&#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xD658;&#xC790; NADPH &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC218;&#xD589; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xADF8;&#xBB3C;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC18C;&#xC124;&#xC740; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC885;&#xC18D; &#xC8FD;&#xC74C;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC218;&#xBA85; &#xB118;&#xC5B4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD56D;&#xADE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC911; &#xC131;&#xAD6C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC18C;&#xC124; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD2B8;&#xB7A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neutr&#xF3;filos trampas extracelulares (TNE) son estructuras extracelulares compuestas de prote&#xED;nas de la cromatina y los gr&#xE1;nulos que se unen y matan a los microorganismos. Se demuestra que la estimulaci&#xF3;n, los n&#xFA;cleos de los neutr&#xF3;filos pierden su forma, y &#x200B;&#x200B;homogeneizar la UE-y heterocromatina. Posteriormente, la membrana nuclear y las membranas de gr&#xE1;nulos se desintegran, lo que permite la mezcla de componentes NET. Por &#xFA;ltimo, las redes se libera como se rompe la membrana celular. Este proceso de muerte celular es distinta de la apoptosis y necrosis, y depende de la generaci&#xF3;n de especies reactivas del ox&#xED;geno (ROS) por la NADPH oxidasa. Los pacientes con enfermedad granulomatosa cr&#xF3;nica son portadores de mutaciones en la NADPH oxidasa y no se puede activar esta v&#xED;a de muerte celular o hacer redes. Esta novela ROS dependiente de la muerte de los neutr&#xF3;filos permite cumplir su funci&#xF3;n antimicrobiana, incluso m&#xE1;s all&#xE1; de su vida &#xFA;til.

Programa de la novela La muerte de la c&#xE9;lula lleva a trampas extracelulares neutr&#xF3;filos

&#x611F;&#x67D3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x7CBE;&#x7EC6;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x4E0E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x672C;&#x7AE0;&#x91CD;&#x70B9;&#x6807;&#x51C6;&#x6280;&#x672F;&#x4F20;&#x8F93;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x626B;&#x63CF;&#x7535;&#x955C;&#x89C2;&#x5BDF;&#xFF0C;&#x5C06;&#x66F4;&#x6709;&#x5229;&#x4E8E;&#x65B0;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458;&#x3002;

&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;

Fine structural analysis of the infection process is indispensable for understanding the relation between microorganisms and host cells. This chapter focuses on standard techniques for transmission as well as scanning electron microscopy that will be of benefit even to researchers new to the field.

Infection at the cellular level.

L&#39;analyse structurale fine du processus d&#39;infection est indispensable pour comprendre la relation entre les micro-organismes et les cellules de l&#39;h&ocirc;te. Ce chapitre se concentre sur les techniques standard de transmission ainsi que la microscopie &eacute;lectronique qui sera utile m&ecirc;me aux chercheurs &agrave; nouveau dans le domaine.

Infection au niveau cellulaire.

Feine Strukturanalyse Ablauf der Infektion ist unverzichtbar f&uuml;r das Verst&auml;ndnis der Beziehung zwischen Mikroorganismen und Wirtszellen. Dieses Kapitel konzentriert sich auf standard-Techniken f&uuml;r die &Uuml;bertragung sowie die Raster-Elektronenmikroskopie, die sogar f&uuml;r Forscher, die neu auf dem Gebiet von Nutzen sein wird.

Infektion auf zellul&auml;rer Ebene.

Fine analisi strutturale del processo di infezione sono indispensabile per la comprensione del rapporto tra microrganismi e cellule ospiti. Questo capitolo si concentra su tecniche standard per la trasmissione cos&igrave; come la scansione microscopia elettronica che sar&agrave; di beneficio anche per i ricercatori di nuovi al campo.

Infezione a livello cellulare.

&#x611F;&#x67D3;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x306F;&#x3001;&#x4F1D;&#x9001;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8D70;&#x67FB;&#x578B;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x306B;&#x3082;&#x306A;&#x308B;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x6280;&#x8853;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3002;

&#xAC10;&#xC5FC; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xBBF8;&#xC138; &#xAD6C;&#xC870; &#xBD84;&#xC11D; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xBD88;&#xAC00;&#xACB0; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xCE90;&#xB2DD; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBD84;&#xC57C;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC804;&#xC1A1; &#xC704;&#xD55C; &#xD45C;&#xC900; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD94;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Excelente an&aacute;lisis estructural del proceso de infecci&oacute;n es indispensable para comprender a la relaci&oacute;n entre microorganismos y c&eacute;lulas hospedadoras. Este cap&iacute;tulo se centra en las t&eacute;cnicas est&aacute;ndar para transmisi&oacute;n y microscop&iacute;a electr&oacute;nica de barrido que beneficiar&aacute; incluso a los investigadores de nuevos al campo.

Infecci&oacute;n a nivel celular.

&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x9632;&#x7EBF;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x9047;&#x5230;&#x5E76;&#x6740;&#x6B7B;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x541E;&#x566C;&#x540E;&#x819C;&#x5C42;&#x6216; extracellularly &#x6297;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8131;&#x9897;&#x7C92;&#x53CA;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DE;&#x5916;&#x9677;&#x9631; (&#x7F51;)&#x3002;&#x868A;&#x5E10;&#x662F;&#x6240;&#x793A;&#x6349;&#x4F4F;&#x5E76;&#x6740;&#x6B7B;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5176;&#x5B8C;&#x6574;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x6210;&#x53CA;&#x6297;&#x83CC;&#x673A;&#x5236;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x592A;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A; 24 &#x7F51;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x5B66;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x7F51;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x6539;&#x6027;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x4E25;&#x683C;&#x8BC4;&#x9009;&#x3002;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E2A;&#x9759;&#x6001;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x51C0;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6297;&#x83CC;&#x9ED1;&#x8179;&#x9499;&#x91CA;&#x653E;&#x7F51;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x5728;&#x868A;&#x5E10;&#x4E2D;&#x9499;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4F53;&#x5916;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E27;&#x5931;&#x3002;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E2D;&#x767D;&#x8272;&#x5FF5;&#x73E0;&#x83CC;&#x4F53;&#x5185;&#x611F;&#x67D3;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x51C0;&#x5F62;&#x6210;&#x662F;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x65E0;&#x6CD5;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x8DEF;&#x7531;&#x7684;&#x9499;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x8F83;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C;&#x9499;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x52A8;&#x7269;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x9499;&#x662F;&#x6E05;&#x9664;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x73B0;&#x65F6;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x9499;&#x4F53;&#x5916;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#xFF0C;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8BC1;&#x660E;&#x4E86;&#x5B83;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6709;&#x6548;&#x4E3B;&#x673A;&#x9632;&#x5FA1; C.&#x767D;&#x8272;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x7684;&#x56FA;&#x5B9A;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x868A;&#x5E10;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x9996;&#x6B21;&#x3002;

&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DE;&#x5916;&#x9677;&#x9631;&#x5305;&#x542B;&#x56FA;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x767D;&#x8272;&#x5FF5;&#x73E0;&#x83CC;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x9632;&#x5FA1;&#x80DE;&#x6D46;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

Neutrophils are the first line of defense at the site of an infection. They encounter and kill microbes intracellularly upon phagocytosis or extracellularly by degranulation of antimicrobial proteins and the release of Neutrophil Extracellular Traps (NETs). NETs were shown to ensnare and kill microbes. However, their complete protein composition and the antimicrobial mechanism are not well understood. Using a proteomic approach, we identified 24 NET-associated proteins. Quantitative analysis of these proteins and high resolution electron microscopy showed that NETs consist of modified nucleosomes and a stringent selection of other proteins. In contrast to previous results, we found several NET proteins that are cytoplasmic in unstimulated neutrophils. We demonstrated that of those proteins, the antimicrobial heterodimer calprotectin is released in NETs as the major antifungal component. Absence of calprotectin in NETs resulted in complete loss of antifungal activity in vitro. Analysis of three different Candida albicans in vivo infection models indicated that NET formation is a hitherto unrecognized route of calprotectin release. By comparing wild-type and calprotectin-deficient animals we found that calprotectin is crucial for the clearance of infection. Taken together, the present investigations confirmed the antifungal activity of calprotectin in vitro and, moreover, demonstrated that it contributes to effective host defense against C. albicans in vivo. We showed for the first time that a proportion of calprotectin is bound to NETs in vitro and in vivo.

Neutrophil extracellular traps contain calprotectin, a cytosolic protein complex involved in host defense against Candida albicans.

Les neutrophiles sont la premi&#xE8;re ligne de d&#xE9;fense sur le site d&#x26;#39;une infection. Ils rencontrent et tuer les microbes intracellulaire ou extracellulaire sur la phagocytose par la d&#xE9;granulation des prot&#xE9;ines antimicrobiennes et la lib&#xE9;ration de neutrophiles pi&#xE8;ges extracellulaires (filets). NET ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour les s&#xE9;duire et tuer les microbes. Cependant, leur composition prot&#xE9;ique compl&#xE8;te et le m&#xE9;canisme antimicrobien ne sont pas bien comprises. En utilisant une approche prot&#xE9;omique, nous avons identifi&#xE9; 24 prot&#xE9;ines associ&#xE9;es NET. L&#x26;#39;analyse quantitative de ces prot&#xE9;ines et microscopie &#xE9;lectronique &#xE0; haute r&#xE9;solution a montr&#xE9; que les filets se composent de nucl&#xE9;osomes modifi&#xE9;s et une s&#xE9;lection rigoureuse d&#x26;#39;autres prot&#xE9;ines. Contrairement aux r&#xE9;sultats pr&#xE9;c&#xE9;dents, nous avons trouv&#xE9; plusieurs prot&#xE9;ines NET qui sont cytoplasmique dans les neutrophiles non stimul&#xE9;s. Nous avons d&#xE9;montr&#xE9; que de ces prot&#xE9;ines, la calprotectine h&#xE9;t&#xE9;rodim&#xE8;re antimicrobien est publi&#xE9; dans les filets que la principale composante antifongique. Absence de calprotectine dans les filets a entra&#xEE;n&#xE9; la perte compl&#xE8;te de l&#x26;#39;activit&#xE9; antifongique in vitro. Analyse de trois albicans diff&#xE9;rente Candida dans les mod&#xE8;les d&#x26;#39;infection in vivo ont montr&#xE9; que la formation de NET est une route jusque-l&#xE0; m&#xE9;connue de la lib&#xE9;ration calprotectine. En comparant les animaux de type sauvage et d&#xE9;ficient en calprotectine nous avons trouv&#xE9; que la calprotectine est crucial pour le jeu de l&#x26;#39;infection. Pris dans leur ensemble, les enqu&#xEA;tes actuelles ont confirm&#xE9; l&#x26;#39;activit&#xE9; antifongique de calprotectine in vitro et, par ailleurs, d&#xE9;montr&#xE9; qu&#x26;#39;il contribue &#xE0; la d&#xE9;fense d&#x26;#39;accueil efficace contre C. albicans in vivo. Nous avons montr&#xE9; pour la premi&#xE8;re fois qu&#x26;#39;une proportion de calprotectine est li&#xE9; &#xE0; NET in vitro et in vivo.

Neutrophiles pi&#xE8;ges extracellulaires Contenir calprotectine, un complexe prot&#xE9;ique cytosolique impliqu&#xE9;e dans la d&#xE9;fense de l&#x26;#39;h&#xF4;te contre Candida albicans

Neutrophile sind die erste Verteidigungslinie am Standort einer Infektion. Sie begegnen und t&ouml;ten Mikroben intrazellul&auml;r nach Phagozytose oder extracellularly durch Degranulation der antimikrobiellen Proteine und die Freisetzung von Neutrophil extrazellul&auml;re Traps (NETs). Netze wurden gezeigt, zu umgarnen und Mikroben zu t&ouml;ten. Jedoch sind ihre vollst&auml;ndige Protein-Zusammensetzung und der antimikrobiellen Mechanismus nicht gut verstanden. Ein Proteomic Ansatz haben wir 24 NET-assoziierte Proteine identifiziert. Quantitative Analyse dieser Proteine und hochaufl&ouml;sende Elektronenmikroskopie zeigte, dass die Netze der ge&auml;nderte Nucleosomes und eine strenge Auswahl anderer Proteine bestehen. Im Gegensatz zu vorherigen Ergebnisse fanden wir mehrere NET Proteine, die in ab neutrophile cytoplasmatische sind. Wir bewiesen, dass diese Proteine, die antimikrobielle Heterodimer Calprotectin in Netzen als Hauptkomponente antimykotische freigegeben wird. Abwesenheit von Calprotectin in Netzen f&uuml;hrte v&ouml;lligen Verlust von in-vitro-antimykotische Aktivit&auml;t. Analyse von drei verschiedenen Candida Albicans in Vivo Infektion Modelle zeigten, dass NET-Formation eine bisher unbekannte Route Calprotectin-Release ist. Durch den Vergleich der Wildtyp und Calprotectin-defizienten Tiere fanden wir, dass Calprotectin ist entscheidend f&uuml;r die Freigabe der Infektion. Zusammen genommen die vorliegenden Untersuchungen best&auml;tigt die antimykotische Aktivit&auml;t von Calprotectin in Vitro und, dar&uuml;ber hinaus gezeigt, dass es zur effektiven Host Verteidigung gegen C. Albicans in-vivo beitr&auml;gt. Wir zeigten zum ersten Mal, das ein Teil der Calprotectin Netze in vitro und in vivo gebunden ist.

Neutrophil extrazellul&auml;re Traps enthalten Calprotectin, ein cytosolisches Protein Komplex Host Verteidigung gegen Candida Albicans beteiligt.

I neutrofili sono la prima linea di difesa presso il sito di un&#39;infezione. Essi incontrano e uccidere i microbi intracellularly sulla fagocitosi o extracellularly degranulazione delle proteine antimicrobiche e il rilascio di neutrofili trappole extracellulare (reti). Le reti sono state mostrate per intrappolare e uccidere i microbi. Tuttavia, loro composizione proteica completa e il meccanismo di antimicrobici non sono ben chiari. Utilizzando un approccio proteomico, abbiamo individuato 24 NET-associated proteins. Analisi quantitativa di queste proteine e la microscopia elettronica ad alta risoluzione hanno mostrato che le reti consistono di nucleosomi modificate e una rigorosa selezione di altre proteine. In contrasto con i risultati precedenti, abbiamo trovato parecchie proteine nette che sono citoplasmatiche nei neutrofili sia. Abbiamo dimostrato che di quelle proteine, la calprotectina eterodimero antimicrobica &egrave; rilasciato in reti come il componente principale di antimicotico. Assenza di calprotectina nelle reti risult&ograve; nella perdita completa dell&#39;attivit&agrave; antifungina in vitro. Analisi di tre differenti Candida albicans in modelli di infezione vivo indicano che NET formazione &egrave; un percorso finora non riconosciuto della calprotectina release. Confrontando animali wild-type e carente di calprotectina abbiamo trovato che quel calprotectina &egrave; cruciale per la liquidazione dell&#39;infezione. Presi nel loro insieme, le presenti indagini hanno confermato l&#39;attivit&agrave; antifungina della calprotectina in vitro e, inoltre, hanno dimostrato che contribuisce alla difesa ospite efficace contro la c. albicans in vivo. Abbiamo mostrato per la prima volta che una proporzione di calprotectina &egrave; associata alle reti in vitro e in vivo.

Neutrofili trappole extracellulare contengono calprotectina, un complesso di proteine citosoliche coinvolto nella difesa ospite contro la Candida albicans.

&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306F;&#x611F;&#x67D3;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3067;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x9632;&#x885B;&#x7DDA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x83CC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8131;&#x9846;&#x7C92;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#xFF08;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF09;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8CAA;&#x98DF;&#x6642;&#x200B;&#x200B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x6BBA;&#x3059;&#x3002;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x8A98;&#x60D1;&#x3057;&#x3066;&#x6BBA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7D44;&#x6210;&#x3068;&#x6297;&#x83CC;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;24 NET&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x9078;&#x629E;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x523A;&#x6FC0;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;NET&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x3001;&#x6297;&#x83CC;&#x6027;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x6210;&#x5206;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7DB2;&#x306B;&#x653E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002; in vivo&#x3067;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30C0;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;NET&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x6B20;&#x640D;&#x52D5;&#x7269;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3082;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;in vivo&#x3067;&#x306E;C.albicans&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30C0;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3080;

&#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xB294; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC904;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC744; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xCE68; &#xB610;&#xB294; extracellularly degranulation &#xD56D;&#xADE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xACE0; &#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD2B8;&#xB7A9; (&#xADF8;&#xBB3C;) &#xCD9C;&#xC2DC; &#xD558; &#xC5EC; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC8FD; &#xC77C;. &#xADF8;&#xBB3C; &#xC720;&#xD639; &#xD560; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC8FD; &#xC77C;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC131;&#xBD84; &#xBC0F; &#xD56D;&#xADE0; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;. 24 NET &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4; proteomic &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC758; &#xADF8;&#xBB3C; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; nucleosomes&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC120;&#xD0DD; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; unstimulated &#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC740; &#xC5EC;&#xB7EC; NET &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD56D;&#xADE0; &#xC131; heterodimer calprotectin &#xCD9C;&#xC2DC; &#xADF8;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC694; &#xD56D;&#xC9C4;&#xADE0; &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8;&#xB85C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xBB3C;&#xC5D0; calprotectin&#xC758; &#xD56D;&#xC9C4;&#xADE0; &#xD65C;&#xB3D9; &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xC190;&#xC2E4; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. Vivo &#xAC10;&#xC5FC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC138; &#xB2E4;&#xB978; Candida albicans&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xADF8;&#xBB3C; &#xD615;&#xC131; calprotectin &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC758; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xACBD;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; calprotectin &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; calprotectin &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC815;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xD604;&#xC7AC; &#xC870;&#xC0AC; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC5D0; calprotectin&#xC758; &#xD56D;&#xC9C4;&#xADE0; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD655;&#xC778; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;, &#xB610;&#xD55C;, &#xC2DC;&#xC5F0; &#xADF8;&#xAC83; C. albicans &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; calprotectin&#xC758; &#xBE44;&#xC728; &#xADF8;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;.

&#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD2B8;&#xB7A9; calprotectin, Candida albicans&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; cytosolic &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568;.

Los neutr&#xF3;filos son la primera l&#xED;nea de defensa en el sitio de una infecci&#xF3;n. Ellos encuentran y matan a los microbios intracelular al extracelular por fagocitosis o degranulaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas antimicrobianas y la liberaci&#xF3;n de neutr&#xF3;filos trampas extracelulares (TNE). NET, se mostr&#xF3; a atrapar y matar a los microbios. Sin embargo, su composici&#xF3;n prote&#xED;na completa y el mecanismo antimicrobiano no se comprenden bien. Utilizando un enfoque prote&#xF3;mico, hemos identificado 24 prote&#xED;nas asociadas con NET. El an&#xE1;lisis cuantitativo de estas prote&#xED;nas y microscop&#xED;a de electrones de alta resoluci&#xF3;n mostr&#xF3; que las redes constan de nucleosomas modificados y una selecci&#xF3;n rigurosa de otras prote&#xED;nas. En contraste con los resultados anteriores, hemos encontrado varias prote&#xED;nas NET que est&#xE1;n frente al citoplasma de los neutr&#xF3;filos no estimulados. Hemos demostrado que de estas prote&#xED;nas, la calprotectina heterod&#xED;mero a los antimicrobianos se libera en los TNE como el componente antif&#xFA;ngico importante. Ausencia de calprotectina en TNE como resultado la p&#xE9;rdida completa de la actividad antif&#xFA;ngica in vitro. El an&#xE1;lisis de tres diferentes Candida albicans en modelos de infecci&#xF3;n in vivo indican que la formaci&#xF3;n de NET es una v&#xED;a hasta ahora desconocida de la liberaci&#xF3;n de calprotectina. Mediante la comparaci&#xF3;n de los animales de tipo salvaje y calprotectina deficientes encontramos que calprotectina es crucial para la liquidaci&#xF3;n de la infecci&#xF3;n. Tomados en conjunto, las presentes investigaciones confirmaron la actividad antif&#xFA;ngica de calprotectina in vitro y, adem&#xE1;s, demostr&#xF3; que contribuye a la defensa del hu&#xE9;sped eficaz contra C. albicans in vivo. Hemos demostrado por primera vez que una proporci&#xF3;n de calprotectina est&#xE1; obligado a TNE in vitro e in vivo.

Neutr&#xF3;filos trampas extracelulares contienen calprotectina, un complejo de prote&#xED;na citos&#xF3;lica implicada en la defensa del hu&#xE9;sped frente a Candida albicans

beta &#x6876;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3001; &#x53F6;&#x7EFF;&#x4F53;&#x548C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x5916;&#x819C;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x3002;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x5B88;&#x6392;&#x5E8F;&#x548C;&#x88C5;&#x914D;&#x673A;&#x68B0; (SAM &#x590D;&#x6742;) &#x88C5;&#x914D;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; beta &#x6876;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5982;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x58F0;&#x9053; 1 (VDAC1)&#xFF0C;&#x4E3A;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x901A;&#x8FC7;&#x627F;&#x8BA4;&#x6392;&#x5E8F; beta-&#x4FE1;&#x53F7;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7FA7;&#x57FA;&#x7AEF;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x5916;&#x819C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#xFF0C;beta &#x6876;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; C-&#x5DF4;&#x58EB;&#x603B;&#x7AD9;&#x7684;&#x63A9;&#x853D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x95F4;&#x9699;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5C06;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x5206;&#x88C2;&#x548C;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x635F;&#x5931; misassembled &#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x662F; &beta;-&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F1A;&#x88AB;&#x7F29;&#x77ED;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x5220;&#x9664;&#x6216;&#x5B88;&#x6052;&#x758F;&#x6C34;&#x6B8B;&#x7559;&#x5728; beta &#x4FE1;&#x53F7;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x65F6;&#x5019;&#x3002;C &#x603B;&#x7AD9;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684; VDAC1&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x9635;&#x5730; 130&#x3001; 222&#x3001; 225 &#x548C; 251 &#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x5927;&#x4F1A;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5982;&#x679C;&#x6291;&#x5236; &beta;-&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x6216; beta &#x6876;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6298;&#x53E0;&#xFF0C;nonassembled &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5C06;&#x5806;&#x79EF;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#xFF0C;&#x805A;&#x5408;&#x5728;&#x7834;&#x574F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x65B9;&#x4FBF;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76; &beta; &#x6876;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3001; &#x819C;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x63D0;&#x9192;&#x60A8;&#x8981;&#x5C0F;&#x5FC3;&#x89E3;&#x91CA;&#x7684; beta &#x6876;&#x86CB;&#x767D;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7ED3;&#x679C;&#x65F6;&#x3002;

&#x6807;&#x8BB0;&#x5728;&#x7FA7;&#x57FA;&#x603B;&#x7AD9;&#x9632;&#x6B62; VDAC1 &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;

beta-Barrel proteins are found in the outer membranes of bacteria, chloroplasts and mitochondria. The evolutionary conserved sorting and assembly machinery (SAM complex) assembles mitochondrial beta-barrel proteins, such as voltage-dependent anion-selective channel 1 (VDAC1), into complexes in the outer membrane by recognizing a sorting beta-signal in the carboxy-terminal part of the protein. Here we show that in mammalian mitochondria, masking of the C-terminus of beta-barrel proteins by a tag leads to accumulation of soluble misassembled protein in the intermembrane space, which causes mitochondrial fragmentation and loss of membrane potential. A similar phenotype is observed if the beta-signal is shortened, removed or when the conserved hydrophobic residues in the beta-signal are mutated. The length of the tag at the C-terminus is critical for the assembly of VDAC1, as well as the amino acid residues at positions 130, 222, 225 and 251 of the protein. We propose that if the recognition of the beta-signal or the folding of the beta-barrel proteins is inhibited, the nonassembled protein will accumulate in the intermembrane space, aggregate and damage mitochondria. This effect offers easy tools for studying the requirements for the membrane assembly of beta-barrel proteins, but also advises caution when interpreting the outcome of the beta-barrel protein overexpression experiments.

A tag at the carboxy terminus prevents membrane integration of VDAC1 in mammalian mitochondria.

les prot&eacute;ines b&ecirc;ta-Barrel sont trouvent dans la membrane externe des bact&eacute;ries, les chloroplastes et les mitochondries. Conserv&eacute; l&#39;&eacute;volutif tri et machines d&#39;assemblage (SAM complex) assemble des prot&eacute;ines mitochondriales de b&ecirc;ta-baril, comme d&eacute;pendant de la tension s&eacute;lective anion channel 1 (VDAC1), en complexes dans la membrane externe en reconnaissant un b&ecirc;ta-signal de tri dans la partie carboxy-terminale de la prot&eacute;ine. Nous montrons ici que dans les mitochondries mammif&egrave;res, masquage de l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale de prot&eacute;ines b&ecirc;ta-baril par une balise entra&icirc;ne l&#39;accumulation d&#39;une prot&eacute;ine misassembled soluble dans l&#39;espace intermembranaire, ce qui provoque la fragmentation mitochondriale et la perte de potentiel de membrane. Un ph&eacute;notype similaire est observ&eacute; si la b&ecirc;ta-signal est raccourci, supprim&eacute;s ou lorsque les r&eacute;sidus hydrophobes conserv&eacute;es dans le signal b&ecirc;ta sont mut&eacute;s. La longueur de l&#39;&eacute;tiquette &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale est essentielle pour l&#39;assemblage de VDAC1, ainsi que les r&eacute;sidus d&#39;acides amin&eacute;s aux positions 130, 222, 225 et 251 de la prot&eacute;ine. Nous proposons que si la reconnaissance de la b&ecirc;ta-signal ou le repliement des prot&eacute;ines b&ecirc;ta-baril est inhib&eacute;, la prot&eacute;ine nonassembled s&#39;accumulent dans l&#39;espace intermembranaire, agr&eacute;gation et endommager les mitochondries. Cet effet offre des outils simples pour &eacute;tudier les exigences pour l&#39;assemblage de la membrane de prot&eacute;ines b&ecirc;ta-baril, mais aussi recommande la prudence dans l&#39;interpr&eacute;tation des r&eacute;sultats des exp&eacute;riences de la surexpression de prot&eacute;ines b&ecirc;ta-baril.

Une balise &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; carboxy emp&ecirc;che l&#39;int&eacute;gration de la membrane de VDAC1 dans les mitochondries des mammif&egrave;res.

Beta-Barrel Proteine findet man in den &auml;u&szlig;eren Membranen von Bakterien, Chloroplasten und Mitochondrien. Die evolution&auml;r konserviert sortieren und Verarbeitungstechnik (SAM-Komplex) assembliert mitochondrialen Beta-Fass-Proteine, wie Spannung-abh&auml;ngigen Anion-selektive Kanal 1 (VDAC1), in komplexen in die &auml;u&szlig;ere Membran durch die Anerkennung einer Sortierung Beta-Signal in der Carboxy-Terminal-Teil des Proteins. Hier zeigen wir, dass in den S&auml;ugetier-Mitochondrien, Maskierung von der C-Terminus Beta-Fass-Proteine durch ein Tag zur Ansammlung von l&ouml;slichen misassembled Protein in den Intermembranraum, f&uuml;hrt die mitochondriale Fragmentierung und Verlust des Membrane Potentials verursacht. Ein &auml;hnlicher Ph&auml;notyp wird beobachtet, wenn das Beta-Signal verk&uuml;rzt wird, entfernt oder wenn die konservierten hydrophoben R&uuml;ckst&auml;nden im Beta-Signal mutiert sind. Die L&auml;nge des Tags im C-Terminus ist entscheidend f&uuml;r die Montage von VDAC1 sowie die Aminos&auml;urereste um Pl&auml;tze 130, 222, 225 und 251 des Proteins. Wir schlagen vor, wenn die Anerkennung des Beta-Signals oder die Faltung der Beta-Fass-Proteine gehemmt, das nonassembled Protein sammeln sich in den Intermembranraum, Aggregieren und Mitochondrien sch&auml;digen. Dieser Effekt bietet einfache Werkzeuge zur Untersuchung der Anforderungendes f&uuml;r die Membran-Einheit des Beta-Fass-Proteine, sondern ber&auml;t auch Vorsicht beim Interpretieren von des Ergebnis der Experimente eine &Uuml;berexpression Beta-Fass-Protein.

Ein Tag im Carboxy-Terminus verhindert Membrane Integration von VDAC1 in den S&auml;ugetier-Mitochondrien.

Beta-Barrel proteine si trovano nelle membrane esterne di batteri, cloroplasti e mitocondri. L&#39;evolutiva conservato l&#39;ordinamento e macchinari destinati all&#39;assemblaggio (SAM complessa) Assembla le proteine beta-barilotto mitocondriale, come 1 (VDAC1), il canale voltaggio-dipendente anione selettivo in complessi nella membrana esterna riconoscendo un ordinamento beta-segnale nella parte carbossi-terminale della proteina. Qui vi mostriamo che nei mitocondri mammiferi, mascheramento del C-terminale delle proteine beta-barilotto da un tag determina l&#39;accumulo di proteina solubile misassembled nello spazio intermembrana, che provoca la perdita del potenziale di membrana e frammentazione mitocondriale. Un fenotipo simile si osserva se il segnale di beta &egrave; accorciato, rimosso o quando sono mutati i residui idrofobi conservati beta-segnale. La lunghezza del tag al C-terminale &egrave; critica per l&#39;assemblaggio di VDAC1, cos&igrave; come i residui dell&#39;amminoacido nelle posizioni 130, 222, 225 e 251 della proteina. Noi proponiamo che se il riconoscimento del segnale-beta o il ripiegamento delle proteine beta-barilotto &egrave; inibito, la proteina nonassembled si accumulano nello spazio intermembrana, aggregato e danneggiare i mitocondri. Questo effetto offre facili strumenti per studiare i requisiti per il montaggio di membrana di proteine beta-barilotto, ma anche consiglia cautela quando si interpretano i risultati degli esperimenti di sovraespressione della proteina beta-barrel.

Un tag al capolinea carboxy impedisce l&#39;integrazione della membrana di VDAC1 nei mitocondri dei mammiferi.

&beta; &#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x7D30;&#x83CC;&#x3001;&#x8449;&#x7DD1;&#x4F53;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x819C;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x3001;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x6A5F;&#x68B0; (&#x8907;&#x96D1;&#x306A; SAM) &#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E; &beta; &#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x672B;&#x7AEF;&#x90E8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x819C;&#x306B;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; 1 (VDAC1) &#x306A;&#x3069;&#x3092;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x3001;&#x30BF;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B; &beta; &#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x65AD;&#x7247;&#x5316;&#x3068;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x9593;&#x90E8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; misassembled &#x86CB;&#x767D;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x6B8B;&#x57FA;&#x304C;&#x5909;&#x7570;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3002;&#x30BF;&#x30B0; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3067; 130 222&#x3001;225&#x3001;251 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B; VDAC1&#x3001;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x307E;&#x305F;&#x306F; &beta; &#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x304C;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;nonassembled &#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x9593;&#x8154;&#x3067;&#x3001;&#x96C6;&#x8A08;&#x304C;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x819C;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6; &beta; &#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x6CE8;&#x610F; &beta; &#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x89E3;&#x91C8;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x52A9;&#x8A00;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x819C;&#x7D71;&#x5408; VDAC1 &#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x30BF;&#x30B0;&#x3092;&#x9632;&#x304E;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBCA0;&#xD0C0;-&#xBC30;&#xB7F4;&#xB2F9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; chloroplasts, &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC758; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; &#xC9C4;&#xD654; &#xBCF4;&#xC874; &#xBC0F; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xAE30;&#xACC4; (&#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC0D8;) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; carboxy &#xB2E8;&#xC790; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xC815;&#xB82C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC778;&#xC2DD; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xCC44;&#xB110; 1 (VDAC1) &#xAC19;&#xC740; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC30;&#xB7F4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC870;&#xB9BD;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC870;&#xAC01;&#xD654; &#xC6D0;&#xC778;&#xACFC; &#xB9C9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; intermembrane &#xACF5;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; misassembled &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xD0DC;&#xADF8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC30;&#xB7F4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC758; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD0B9; &#xB9AC;&#xB4DC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xB2E8;&#xCD95; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC81C;&#xAC70; &#xB610;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB54C;. C-&#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xD0DC;&#xADF8;&#xC758; &#xAE38;&#xC774; VDAC1, 130, 222, 225 &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; 251 &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xC778;&#xC2DD; &#xB610;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC30;&#xB7F4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD3F4;&#xB529;&#xB97C; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; nonassembled &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9D1;&#xACC4; intermembrane &#xACF5;&#xAC04;&#xC5D0; &#xCD95;&#xC801; &#xB418;&#xBA70; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xB97C; &#xC190;&#xC0C1; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACF5;&#xBD80; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC30;&#xB7F4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC26C;&#xC6B4; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC30;&#xB7F4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; overexpression &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD574;&#xC11D;&#xD560; &#xB54C; &#xC8FC;&#xC758; &#xAD8C;&#xACE0; &#xD588;&#xB2E4;.

Carboxy &#xC885;&#xC810;&#xC5D0; &#xD0DC;&#xADF8; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0; vdac1&#xC758; &#xB9C9; &#xD1B5;&#xD569;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0;.

las prote&iacute;nas beta-barril se encuentran en las membranas externas de las bacterias, cloroplastos y mitocondrias. Conserva el evolutivo clasificaci&oacute;n y maquinaria de montaje (SAM compleja) monta prote&iacute;nas mitocondriales de barril beta, como dependientes de voltaje del ani&oacute;n selectivo canal 1 (VDAC1), en complejos en la membrana externa mediante el reconocimiento de una clasificaci&oacute;n beta-se&ntilde;al en la parte de carboxi-terminal de la prote&iacute;na. Aqu&iacute; mostramos que en las mitocondrias mam&iacute;feras, enmascaramiento de la c-terminal de prote&iacute;nas beta-barril por una etiqueta conduce a la acumulaci&oacute;n de prote&iacute;na soluble ensamblada en el espacio del intermembrane, que provoca la fragmentaci&oacute;n mitocondrial y la p&eacute;rdida del potencial de membrana. Un fenotipo similar se observa si se acorta la se&ntilde;al beta, eliminado o cuando mutan los residuos hidrof&oacute;bicos conservados en la beta-se&ntilde;al. La longitud de la etiqueta en el c-terminal es cr&iacute;tica para la Asamblea de VDAC1, as&iacute; como los residuos del amino&aacute;cido en la posici&oacute;n 130, 222, 225 y 251 de la prote&iacute;na. Proponemos que si el reconocimiento de la se&ntilde;al de beta o el plegamiento de las prote&iacute;nas beta-barril se inhibe, la prote&iacute;na nonassembled se acumulan en el espacio del intermembrane, agregado y da&ntilde;ar las mitocondrias. Este efecto ofrece sencillas herramientas para estudiar los requisitos para el montaje de la membrana de prote&iacute;nas beta-barril, pero tambi&eacute;n aconseja precauci&oacute;n al interpretar los resultados de los experimentos de sobreexpresi&oacute;n de la prote&iacute;na beta-barril.

Una etiqueta en la terminal de carboxilo impide integraci&oacute;n de membrana de VDAC1 en las mitocondrias mam&iacute;feras.

&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DE;&#x5916;&#x9677;&#x9631; (&#x7F51;) &#x5728;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x611F;&#x67D3;&#x5230;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x868A;&#x5E10;&#x8FF0;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51C0;&#x5F62;&#x6210;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7EC6;&#x8282;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x672A;&#x5F97;&#x5230;&#x89E3;&#x51B3;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4F18;&#x5316;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x6765;&#x8C03;&#x67E5;&#x51C0;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x540E;&#x79EF;&#x6781;&#x5FC3;&#x6001;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x51C0;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF1A; &#x4EA7;&#x751F;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS)&#x3001; &#x51C0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x548C;&#x51C0;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x4E0D;&#x51FA;&#x6240;&#x6599;&#xFF0C;&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE; NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4ECE;&#x672A;&#x80FD;&#x4EA7;&#x751F;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x548C;&#x505A;&#x4E0D;&#x6B7B;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x91CA;&#x653E;&#x7F51;&#x540E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x54C1;&#x7CFB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x4EA7;&#x868A;&#x5E10;&#x4EE5;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x548C;&#x51C0;&#x5F62;&#x6210;&#x76F8;&#x5173;&#x4E0E;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7684;&#x91CF;&#x4EA7;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x767D;&#x8272;&#x5FF5;&#x73E0;&#x83CC;&#x4E5F;&#x5BFC;&#x81F4; ROS &#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x51C0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x771F;&#x83CC;&#x7684;&#x83CC;&#x4E1D;&#x5F62;&#x5F0F;&#x6BD4;&#x9175;&#x6BCD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x868A;&#x5E10;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5728;&#x9F20;&#x6807;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7814;&#x7A76;&#x4F53;&#x5916;&#x51C0;&#x5927;&#x4F1A;&#x3002;

&#x9F20;&#x6807;&#x5728;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DE;&#x5916;&#x9677;&#x9631;&#x3002;

Neutrophil extracellular traps (NETs) play an important role in innate immunity to microbial infections. NETs have been described in several species, but the molecular details of NET formation and their role in infection has not been addressed, partly because we lack optimal experimental models. Here we describe tools to investigate NET formation in neutrophils isolated from mice. Upon in vitro stimulation of wild-type mouse neutrophils with PMA, we analyzed 3 important steps in the process of NET formation: reactive oxygen species (ROS) production, NET cell death and NET release. As expected, neutrophils from NADPH oxidase-deficient mice failed to produce ROS and did not die nor release NETs upon stimulation. We found that neutrophils from several mouse strains produced NETs with different efficiency and that NET formation correlated with the amount of ROS produced. Activation with Candida albicans also resulted in ROS production and NET cell death. The hyphal form of this fungus induced NETs more effectively than the yeast form. With this work, we provide tools to study in vitro NET assembly in the mouse system.

Mouse neutrophil extracellular traps in microbial infections.

Neutrophiles pi&#xE8;ges extracellulaires (filets) jouent un r&#xF4;le important dans l&#x26;#39;immunit&#xE9; inn&#xE9;e aux infections microbiennes. NET ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;crites dans plusieurs esp&#xE8;ces, mais les d&#xE9;tails mol&#xE9;culaires de la formation NET et leur r&#xF4;le dans l&#x26;#39;infection n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; abord&#xE9;e, en partie parce que nous manquons optimales des mod&#xE8;les exp&#xE9;rimentaux. Nous d&#xE9;crivons ici les outils pour &#xE9;tudier la formation NET dans les neutrophiles isol&#xE9;s &#xE0; partir de souris. Sur la stimulation in vitro des neutrophiles de souris de type sauvage avec PMA, nous avons analys&#xE9; 3 &#xE9;tapes importantes dans le processus de formation NET: les esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne (ROS), la mort cellulaire et la lib&#xE9;ration NET NET. Comme pr&#xE9;vu, les neutrophiles de NADPH oxydase-souris d&#xE9;ficientes pas r&#xE9;ussi &#xE0; produire des ROS et ne pas mourir, ni lib&#xE9;rer NET lors de la stimulation. Nous avons constat&#xE9; que les neutrophiles des souches de souris plusieurs produits avec une efficacit&#xE9; diff&#xE9;rente NET et que la formation NET en corr&#xE9;lation avec la quantit&#xE9; de ROS produites. Activation avec Candida albicans a &#xE9;galement entra&#xEE;n&#xE9; la production de ROS et la mort cellulaire NET. La forme des hyphes de ce champignon induit NET plus efficacement que la forme levure. Avec ce travail, nous fournissons des outils pour &#xE9;tudier in vitro NET dans le syst&#xE8;me de la souris.

Souris pi&#xE8;ges neutrophiles extracellulaires dans les infections microbiennes

Neutrophil extrazellul&auml;re Traps (NETs) spielen eine wichtige Rolle in der angeborenen Immunit&auml;t gegen&uuml;ber mikrobiellen Infektionen. Netze wurden in mehrere Arten, aber die molekularen Details NET-Formation beschrieben und ihre Rolle bei der Infektion nicht gerichtet wurde, teils, weil wir optimale experimentelle Modelle fehlen. Hier beschreiben wir Tools zur NET-Formation in Neutrophilen, die isoliert von den M&auml;usen zu untersuchen. Bei in-vitro-Stimulation der Wildtyp Maus Neutrophilen mit PMA, analysierten wir 3 wichtige Schritte NET verschmelzen: reaktive Sauerstoff-Spezies (ROS), NET Zelltod und NET Release. Wie erwartet, neutrophile von NADPH Oxydase-defizienten M&auml;usen konnte ROS zu produzieren und haben nicht sterben noch Version Netze auf Anregung. Wir fanden, dass neutrophile aus mehrere Maus-St&auml;mmen Netze mit unterschiedlichen Effizienz hergestellten und, dass NET Bildung mit der Menge der ROS korreliert. Aktivierung mit Candida Albicans ergab auch ROS Produktion und NET Zelltod. Geflochtenen Form dieser Pilz induzierte Netze effektiver als die Hefe-Form. Mit dieser Arbeit bieten wir Tools f&uuml;r in-vitro-NET-Assembly in das Maus-System zu studieren.

Neutrophil extrazellul&auml;re Mausefallen mikrobiellen Infektionen.

Trappole extracellulari del neutrofilo (reti) giocano un ruolo importante nell&#39;immunit&agrave; innata alle infezioni microbiche. Le reti sono state descritte in diverse specie, ma i dettagli molecolari di formazione NET e loro ruolo nell&#39;infezione non &egrave; stata affrontata, in parte perch&eacute; ci mancano modelli sperimentali ottimali. Qui descriviamo gli strumenti per indagare NET formazione in neutrofili isolati da topi. Dopo stimolazione in vitro dei neutrofili selvaggio-tipo mouse con PMA, abbiamo analizzato 3 passi importanti nel processo di formazione di NET: produzione di ossigeno reattivo (ROS) specie, morte cellulare NET e NET release. Come previsto, neutrofili dal mouse di NADPH ossidasi-carenti non &egrave; riuscito a produrre ROS e fatto le reti non morire n&eacute; comunicato dopo stimolazione. Abbiamo scoperto che i neutrofili da diversi ceppi di topo prodotto reti con diversa efficienza e che NET formazione correlata con la quantit&agrave; di ROS prodotte. Attivazione con Candida albicans ha portato anche nella produzione di ROS e morte cellulare NET. La forma ifale di questo fungo indotta da reti pi&ugrave; efficacemente che la forma di lievito. Con questo lavoro, forniamo gli strumenti per lo studio in vitro NET assembly nel sistema del mouse.

Trappole extracellulari del neutrofilo mouse in infezioni microbiche.

&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#xFF08;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7A2E;&#x306B;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7406;&#x7531;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;NET&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306F;&#x3001;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;NET&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#xFF08;ROS&#xFF09;&#x7523;&#x751F;&#x3001;NET&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3068;NET&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#xFF1A;PMA&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x969B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;NET&#x5F62;&#x6210;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;3&#x3064;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E88;&#x60F3;&#x901A;&#x308A;&#x3001;NADPH&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;ROS&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;NET&#x3092;&#x6B7B;&#x306C;&#x3082;&#x89E3;&#x653E;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7CFB;&#x7D71;&#x304B;&#x3089;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x304C;&#x5225;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x6027;&#x3068;&#x751F;&#x7523;ROS&#x91CF;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;NET&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30C0;&#xB7;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;ROS&#x7523;&#x751F;&#x3068;NET&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x83CC;&#x306E;&#x83CC;&#x7CF8;&#x5F62;&#x614B;&#x304C;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3088;&#x308A;NET&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7CFB;&#x306E;in vitro NET&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3067;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;

&#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD2B8;&#xB7A9; (&#xADF8;&#xBB3C;) &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xBB3C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC885; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xBB3C; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC138;&#xBD80; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; &#xD574;&#xACB0; &#xB418;&#xC9C0;, &#xC77C;&#xBD80; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBD80;&#xC871; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBAA8;&#xB378;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xBB3C; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PMA&#xC640; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xADF8;&#xBB3C; &#xD615;&#xC131; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; 3 &#xB2E8;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D;: &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;) &#xC0DD;&#xC0B0;, NET &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xACFC; NET &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;. &#xC608;&#xC0C1; &#xB300;&#xB85C;, NADPH &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xADF9; &#xC2DC; &#xB2E4; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA70; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xADF8;&#xBB3C; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; neutrophils &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD6A8;&#xC728; &#xADF8;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xADF8;&#xBB3C; &#xD615;&#xC131; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; NET &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; Candida albicans&#xC640; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xD55C; &#xCD08;&#xB798; &#xD588;&#xB2E4;. Hyphal &#xD615;&#xD0DC;&#xC758;&#xC774; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xD615;&#xD0DC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xBB3C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC740;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; NET &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD2B8;&#xB7A9;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neutr&#xF3;filos trampas extracelulares (TNE) juegan un papel importante en la inmunidad innata a las infecciones microbianas. NET se han descrito en varias especies, pero los detalles moleculares de la formaci&#xF3;n de NET y su papel en la infecci&#xF3;n no se ha abordado, en parte porque carecemos de modelos experimentales &#xF3;ptimas. A continuaci&#xF3;n se describen las herramientas para investigar la formaci&#xF3;n NET en los neutr&#xF3;filos aislados de los ratones. Despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n in vitro de los neutr&#xF3;filos de ratones de tipo salvaje con PMA, se analizaron 3 pasos importantes en el proceso de formaci&#xF3;n NET: especies reactivas del ox&#xED;geno (ROS), la muerte celular y la liberaci&#xF3;n de NET Framework. Como era de esperar, los neutr&#xF3;filos de la NADPH oxidasa de los ratones deficientes no producen ROS y no morir ni liberar NET a la estimulaci&#xF3;n. Se encontr&#xF3; que los neutr&#xF3;filos de varias cepas de rat&#xF3;n producidos TNE con eficacia diferente y que la formaci&#xF3;n NET correlacionada con la cantidad de ROS producido. La activaci&#xF3;n por Candida albicans tambi&#xE9;n dio lugar a la producci&#xF3;n de ROS y la muerte celular NET. La forma de las hifas del hongo inducida de redes m&#xE1;s eficaz que la forma de levadura. Con este trabajo, se proporcionan herramientas para el estudio in vitro en el montaje NET en el sistema de rat&#xF3;n.

Rat&#xF3;n de neutr&#xF3;filos extracelular trampas en infecciones microbianas

&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9634;&#x6027;&#x83CC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF; &#xFF08;TTSS&#xFF09; &#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EB3;&#x5165;&#x65E5;&#x76CA; TTSS &#x7684;&#x987A;&#x5E8F;&#x662F;&#x5F88;&#x597D;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E86;&#xFF0C;&#x5E95;&#x5C42;&#x7684;&#x5927;&#x4F1A;&#x673A;&#x5236;&#x867D;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; TTSS &#x9488; protomer refolds&#xFF0C;&#x81EA;&#x53D1;&#x5730;&#x628A;&#x9488;&#x4ECE;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x9488; protomer &#x4ECE;&#x798F;&#x6C0F;&#x5FD7;&#x8D3A;&#x83CC;&#x548C;&#x9F20;&#x4F24;&#x5BD2;&#x6C99;&#x95E8;&#x6C0F;&#x83CC;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x5176;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; protomer &#x90E8;&#x5206; refolds &#x4ECE;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x87BA;&#x65CB;&#x6210; &beta;-&#x94FE;&#x6784;&#x8C61;&#x5F62;&#x6210; TTSS &#x9488;&#x3002;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x9488;&#x751F;&#x957F;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981; ATP&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x50CF;&#x9488;&#x4F38;&#x957F;&#x7684;&#x4E9A;&#x57FA;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x8FDC;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x9700;&#x8981; protomer &#x590D;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8D77;&#x59CB;&#x70B9;&#x6765;&#x4E86;&#x89E3;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC4;&#x88C5;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x539F;&#x5B50;&#x4E00;&#x7EA7; TTSS &#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

&#x9700;&#x8981;&#x5BF9;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5206;&#x6CCC;&#x9488;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x6027;&#x3002;

Pathogenic Gram-negative bacteria use a type three secretion system (TTSS) to deliver virulence factors into host cells. Although the order in which proteins incorporate into the growing TTSS is well described, the underlying assembly mechanisms are still unclear. Here we show that the TTSS needle protomer refolds spontaneously to extend the needle from the distal end. We developed a functional mutant of the needle protomer from Shigella flexneri and Salmonella typhimurium to study its assembly in vitro. We show that the protomer partially refolds from alpha-helix into beta-strand conformation to form the TTSS needle. Reconstitution experiments show that needle growth does not require ATP. Thus, like the structurally related flagellar systems, the needle elongates by subunit polymerization at the distal end but requires protomer refolding. Our studies provide a starting point to understand the molecular assembly mechanisms and the structure of the TTSS at atomic level.

Protein refolding is required for assembly of the type three secretion needle.

Pathog&#xE8;nes Gram n&#xE9;gatif utiliser un syst&#xE8;me de s&#xE9;cr&#xE9;tion de type trois (SSTT) pour d&#xE9;livrer des facteurs de virulence dans des cellules h&#xF4;tes. Bien que l&#x26;#39;ordre dans lequel les prot&#xE9;ines incorporer dans le SSTT de plus en plus est bien d&#xE9;crite, les m&#xE9;canismes d&#x26;#39;assemblage sous-jacents sont encore mal connues. Ici, nous montrons que le protom&#xE8;re aiguille SSTT replie spontan&#xE9;ment pour &#xE9;tendre l&#x26;#39;aiguille de l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; distale. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un mutant fonctionnel du protom&#xE8;re aiguille de Shigella flexneri et Salmonella typhimurium pour &#xE9;tudier son assembl&#xE9;e in vitro. Nous montrons que le protom&#xE8;re replie partiellement &#xE0; partir de l&#x26;#39;h&#xE9;lice alpha en b&#xEA;ta-brin conformation pour former l&#x26;#39;aiguille SSTT. Des exp&#xE9;riences de reconstitution montrent que la croissance aiguille ne n&#xE9;cessite pas d&#x26;#39;ATP. Ainsi, comme les syst&#xE8;mes structurellement li&#xE9;s flagellaires, l&#x26;#39;aiguille s&#x26;#39;allonge par polym&#xE9;risation sous-unit&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; distale, mais n&#xE9;cessite repliement protom&#xE8;re. Nos &#xE9;tudes apportent un point de d&#xE9;part pour comprendre les m&#xE9;canismes d&#x26;#39;assemblage mol&#xE9;culaire et la structure des SSTT au niveau atomique.

Repliement des prot&#xE9;ines est n&#xE9;cessaire pour le montage de l&#x26;#39;aiguille de s&#xE9;cr&#xE9;tion de type trois

Pathogene Gramnegative Bakterien mithilfe einer Art drei Sekretionssystem (TTSS) um Virulenzfaktoren in Wirtszellen zu &uuml;bermitteln. Obwohl die Reihenfolge, in der Proteine in der wachsenden TTSS integrieren, gut beschrieben ist, sind die zugrunde liegenden Mechanismen der Versammlung noch unklar. Hier zeigen wir, dass die TTSS Nadel Protomer Refolds spontan um die Nadel aus dem distalen Ende zu erweitern. Wir entwickelten eine funktionale Mutante von der Nadel Protomer von Shigella Flexneri und Salmonella Typhimurium seiner in-vitro-Assembly zu studieren. Wir zeigen, dass die Protomer teilweise aus &alpha;-Helix in Beta-Strang Konformation TTSS Nadel zu bilden refolds. Rekonstitution Experimente zeigen, dass die Nadel Wachstum ATP nicht erforderlich ist. So wie die strukturverwandter Flimmerband Systeme, die Nadel Kieme&ouml;ffnungen durch Untereinheit Polymerisation am distalen Ende aber Protomer R&uuml;ckfaltung erfordert. Unsere Studien stellen einen Ausgangspunkt um die molekulare Montage-Mechanismen und die Struktur der TTSS auf atomarer Ebene zu verstehen.

Proteinr&uuml;ckfaltung ist erforderlich f&uuml;r die Montage der Typ drei Sekretion Nadel.

Batteri patogeni gram-negativi utilizzano un sistema di secrezione tre tipi (SS3) per fornire fattori di virulenza in cellule ospiti. Anche se l&#39;ordine in cui le proteine incorporano nella SS3 crescente &egrave; ben descritto, sono ancora poco chiari i meccanismi di assemblaggio sottostante. Qui vi mostriamo che la SS3 ago protomer ripiegamenti spontaneamente per estendere l&#39;ago dall&#39;estremit&agrave; distale. Abbiamo sviluppato un mutante funzionale dell&#39;ago protomer da Shigella flexneri e Salmonella typhimurium per studiare la sua Assemblea in vitro. Mostriamo che la protomer refolds parzialmente da alfa-elica in conformazione beta-filo per formare l&#39;ago SS3. Ricostituzione esperimenti mostrano che ago crescita non richiede ATP. Cos&igrave;, come i sistemi flagellari strutturalmente correlati, l&#39;ago si allunga per polimerizzazione di subunit&agrave; all&#39;estremit&agrave; distale ma richiede protomer ripiegamento. I nostri studi forniscono un punto di partenza per comprendere i meccanismi di assemblaggio molecolare e la struttura del SS3 a livello atomico.

Ripiegamento di proteine &egrave; necessaria per il montaggio dell&#39;ago tipo tre secrezione.

&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;3&#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#xFF08;TTSS&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x6210;&#x9577;TTSS&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x9806;&#x5E8F;&#x306B;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4F9D;&#x7136;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;TTSS&#x91DD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x5148;&#x7AEF;&#x304B;&#x3089;&#x91DD;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;refolds&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;in vitro&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x8D64;&#x75E2;&#x83CC;&#x3068;&#x30CD;&#x30BA;&#x30DF;&#x30C1;&#x30D5;&#x30B9;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x91DD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30DE;&#x30FC;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;TTSS&#x91DD;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3B2;-&#x9396;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3B1;-&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;refolds&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x91DD;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306F;ATP&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x97AD;&#x6BDB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x91DD;&#x304C;&#x9060;&#x4F4D;&#x7AEF;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F38;&#x9577;&#x304C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x539F;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;TTSS&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x51FA;&#x767A;&#x70B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x4E09;&#x5206;&#x6CCC;&#x91DD;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xD615; 3 &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (TTSS)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; TTSS&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC21C;&#xC11C;&#xB294; &#xC798; &#xC124;&#xBA85;, &#xAE30;&#xBCF8; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC544;&#xC9C1; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; TTSS protomer refolds &#xC2A4;&#xCF54;&#xD504; &#xB05D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xB298;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xB298;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; Shigella flexneri &#xBC0F; &#xC0B4; &#xBAA8; &#xB12C; &#xB77C; &#xD2F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xB298; protomer&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8;&#xB97C; protomer &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; refolds &#xC54C;&#xD30C;-&#xD5EC;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; TTSS &#xBC14;&#xB298;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xAC00;&#xB2E5; &#xB098; &#xB780;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBC14;&#xB298; &#xC131;&#xC7A5; ATP&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; flagellar &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xCC98;&#xB7FC; &#xBC14;&#xB298; elongates &#xC2A4;&#xCF54;&#xD504; &#xB05D;&#xC5D0; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC911; &#xD569; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; protomer refolding &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xC790; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; TTSS&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xC791; &#xC9C0;&#xC810;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

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Pat&#xF3;genas bacterias Gram-negativas utilizar un tipo de sistema de secreci&#xF3;n de tres (SSTT) para entregar factores de virulencia en las c&#xE9;lulas hu&#xE9;sped. Aunque el orden en que las prote&#xED;nas incorporar en el SSTT creciente est&#xE1; bien descrito, los mecanismos de montaje subyacentes son todav&#xED;a no est&#xE1; claro. Aqu&#xED; nos muestran que la aguja prot&#xF3;mero SSTT repliega espont&#xE1;neamente para extender la aguja desde el extremo distal. Hemos desarrollado un mutante funcional de la prot&#xF3;mero aguja de Shigella flexneri y Salmonella typhimurium para estudiar su montaje in vitro. Se demuestra que la parte prot&#xF3;mero repliega a partir de alfa-h&#xE9;lice en la conformaci&#xF3;n beta-cadena para formar la aguja SSTT. Experimentos muestran que el crecimiento de reconstituci&#xF3;n aguja no requiere ATP. As&#xED;, como los sistemas estructuralmente relacionados flagelares, la aguja se alarga mediante polimerizaci&#xF3;n subunidad en el extremo distal, sino que requiere replegamiento prot&#xF3;mero. Nuestros estudios proporcionan un punto de partida para comprender los mecanismos moleculares de montaje y la estructura de los SSTT a nivel at&#xF3;mico.

Replegamiento prote&#xED;na es necesaria para el montaje de la aguja de secreci&#xF3;n tipo tres

&#x8840;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63D0;&#x4F9B;&#x9632;&#x5FA1;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x884C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x8840;&#x6813;&#x6027;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E00;&#x53CC;&#x91CD;&#x529F;&#x80FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53CD;&#x6620;&#x51DD;&#x8840;&#x548C;&#x6297;&#x83CC;&#x9632;&#x5FA1;&#xFF0C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5206;&#x5B50;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5173;&#x8054;&#x610F;&#x4E49;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; G&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5916;&#x5728;&#x5316;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x6740;&#x83CC;&#x5242;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x51DD;&#x8840;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x8840;&#x6813;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x548C;&#x80DE;&#x5916;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x52A0;&#x5F3A;&#x6D89;&#x53CA;&#x5F53;&#x5730;&#x51DD;&#x8840;&#x6291;&#x5236;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x56E0;&#x5B50;&#x9014;&#x5F84;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x89E3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x56E0;&#x5B50; XII &#x4F9D;&#x8D56;&#x51DD;&#x56FA;&#x3002;&#x5168;&#x8EAB;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x51DD;&#x8840;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x809D;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x5E76;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4FB5;&#x5165;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x75C5;&#x539F;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x548C;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8D21;&#x732E;&#x5927;&#x8840;&#x7BA1;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B;&#x548C;&#x8111;&#x5352;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x89E6;&#x53D1;&#x3002;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x83CC;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x51DD;&#x8840;&#x80FD;&#x529B;&#x6307;&#x793A;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x8868;&#x793A;&#x4E3B;&#x673A;&#x9632;&#x5FA1;&#x751F;&#x7406;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x51DD;&#x8840;&#x4E0E;&#x5929;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x8026;&#x5408;&#x3002;

Blood neutrophils provide the first line of defense against pathogens but have also been implicated in thrombotic processes. This dual function of neutrophils could reflect an evolutionarily conserved association between blood coagulation and antimicrobial defense, although the molecular determinants and in vivo significance of this association remain unclear. Here we show that major microbicidal effectors of neutrophils, the serine proteases neutrophil elastase and cathepsin G, together with externalized nucleosomes, promote coagulation and intravascular thrombus growth in vivo. The serine proteases and extracellular nucleosomes enhance tissue factor- and factor XII-dependent coagulation in a process involving local proteolysis of the coagulation suppressor tissue factor pathway inhibitor. During systemic infection, activation of coagulation fosters compartmentalization of bacteria in liver microvessels and reduces bacterial invasion into tissue. In the absence of a pathogen challenge, neutrophil-derived serine proteases and nucleosomes can contribute to large-vessel thrombosis, the main trigger of myocardial infarction and stroke. The ability of coagulation to suppress pathogen dissemination indicates that microvessel thrombosis represents a physiological tool of host defense.

Reciprocal coupling of coagulation and innate immunity via neutrophil serine proteases.

Neutrophiles sanguins fournissent la premi&egrave;re ligne de d&eacute;fense contre les agents pathog&egrave;nes, mais sont aussi impliqu&eacute;s dans les processus thrombotique. Cette double fonction des neutrophiles pourrait refl&eacute;ter une association &eacute;volutivement conserv&eacute;e entre la coagulation du sang et de la d&eacute;fense antimicrobienne, bien que les d&eacute;terminants mol&eacute;culaires et signification in vivo de cette association restent floues. Nous d&eacute;montrons que microbicide principaux effecteurs des neutrophiles, l&#39;&eacute;lastase neutrophile prot&eacute;ases de s&eacute;rine et cathepsine G, ainsi que les nucl&eacute;osomes externalis&eacute;s, favorisent la coagulation et la croissance de thrombus intravasculaires in vivo. Les prot&eacute;ases &agrave; s&eacute;rine et extracellulaires nucl&eacute;osomes am&eacute;liorent la coagulation du tissu facteur - et facteur de la XII-d&eacute;pendants en faisant intervenir la prot&eacute;olyse locale de l&#39;inhibiteur de voie du facteur coagulation suppresseur tissu. Au cours de l&#39;infection syst&eacute;mique, activation de la coagulation favorise la compartimentation des bact&eacute;ries dans les microvaisseaux du foie et r&eacute;duit l&#39;invasion bact&eacute;rienne dans les tissus. En l&#39;absence d&#39;une faute de l&#39;agent pathog&egrave;ne, nucl&eacute;osomes et prot&eacute;ases de s&eacute;rine d&eacute;riv&eacute; de neutrophile peuvent contribuer &agrave; gros vaisseaux thrombose, le principal d&eacute;clencheur de l&#39;infarctus du myocarde et d&#39;AVC. La capacit&eacute; de coagulation pour r&eacute;primer la diffusion de l&#39;agent pathog&egrave;ne indique que les microvaisseaux thrombose repr&eacute;sente un outil physiologique de d&eacute;fense de l&#39;h&ocirc;te.

Couplage r&eacute;ciproque de coagulation et de l&#39;immunit&eacute; inn&eacute;e par les prot&eacute;ases &agrave; s&eacute;rine neutrophiles.

Blut Neutrophilen stellen die erste Verteidigungslinie gegen Krankheitserreger, sondern haben auch in thrombotische Prozesse verwickelt worden. Diese Doppelfunktion der Neutrophilen k&ouml;nnte eine evolution&auml;r konservierte Zuordnung zwischen Blutgerinnung und antimikrobielle Abwehr, spiegeln, obwohl die molekulare Determinanten und in-vivo Bedeutung dieses Vereins unklar bleiben. Hier zeigen wir, dass gro&szlig;e Mikrobizide Effektoren der Neutrophilen, der Serin-Proteasen neutrophil Elastase und Kathepsin G, zusammen mit externalisierte Nucleosomes, Gerinnung und in-vivo intravaskul&auml;re Thrombus Wachstum f&ouml;rdern. Die Serinproteasen und extrazellul&auml;re Nucleosomes verbessert Gewebe Faktor und Faktor XII-abh&auml;ngige Gerinnung in einem Prozess, der lokale Proteolyse von der Gerinnung Schutzbeschaltung Gewebe Weg Hemmer. W&auml;hrend systemische Infektion Aktivierung der Gerinnung f&ouml;rdert Untergliederung von Bakterien in Leber Microvessels und reduziert bakteriellen Invasion in Gewebe. In Ermangelung einer Pathogen-Herausforderung k&ouml;nnen Neutrophilen abgeleitete Serinproteasen und Nucleosomes zu gro&szlig;-Schiff-Thrombose, der wichtigste Ausl&ouml;ser von Myokardinfarkt und Schlaganfall beitragen. Die F&auml;higkeit der Gerinnung, Verbreitung der Erreger zu unterdr&uuml;cken bedeutet, dass Microvessel Thrombose physiologische Werkzeug der Host Verteidigung darstellt.

Gegenseitige Kopplung der Blutgerinnungs- und Angeborene Immunit&auml;t &uuml;ber neutrophil Serinproteasen.

I neutrofili sangue forniscono la prima linea di difesa contro agenti patogeni, ma inoltre sono stati implicati in processi trombotici. Questa duplice funzione dei neutrofili potrebbe riflettere un&#39;associazione evolutivamente conservata tra la coagulazione del sangue e difesa antimicrobica, anche se i determinanti molecolari e significato in vivo di questa associazione rimangono poco chiari. Qui vi mostriamo che effettori principali microbicida dei neutrofili, l&#39;elastasi neutrofila serina proteasi e catepsina G, insieme ai nucleosomes esteriorizzati, promuovono la coagulazione e la formazione di trombi intravascolari crescita in vivo. La serina proteasi e nucleosomi extracellulare migliorano la coagulazione dei tessuti fattore e fattore XII-dipendente in un processo che coinvolge la proteolisi locale dell&#39;inibitore della coagulazione soppressore tissue factor pathway. Durante l&#39;infezione sistemica, attivazione della coagulazione favorisce la compartimentazione dei batteri nel fegato Talengectasia e riduce l&#39;invasione batterica nel tessuto. In assenza di una sfida di agente patogeno, nucleosomi e le proteasi della serina neutrofili derivata possono contribuire alla grande vaso trombosi, il principale trigger di infarto miocardico e ictus. La capacit&agrave; di coagulazione di sopprimere la diffusione del patogeno indica che microvessel trombosi rappresenta uno strumento fisiologico della difesa ospite.

Accoppiamento reciproco della coagulazione e l&#39;immunit&agrave; innata tramite le proteasi della serina del neutrofilo.

&#x8840;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306F;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x884C;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x304C;&#x3082;&#x8840;&#x6813;&#x6027;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3068;&#x3053;&#x306E;&#x5354;&#x4F1A;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x610F;&#x7FA9;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x304C;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x8840;&#x6DB2;&#x51DD;&#x56FA;&#x3068;&#x6297;&#x83CC;&#x9632;&#x885B;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6BBA;&#x83CC;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x30BB;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30AB;&#x30C6;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3; G&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x5916;&#x5728;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x51DD;&#x56FA;&#x3068; in vivo &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x8840;&#x6813;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D44;&#x7E54;&#x8981;&#x56E0;&#x3068;&#x8981;&#x56E0; XII-&#x6276;&#x990A;&#x5BB6;&#x65CF;&#x51DD;&#x56FA;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x51DD;&#x56FA;&#x6291;&#x5236;&#x7D44;&#x7E54;&#x56E0;&#x5B50;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5168;&#x8EAB;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x51DD;&#x56FA;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x809D;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x5FAA;&#x74B0;&#x306E;&#x533A;&#x753B;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x4FB5;&#x5165;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x6311;&#x6226;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x7531;&#x6765;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5927;&#x8840;&#x7BA1;&#x8840;&#x6813;&#x75C7;&#x3001;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6897;&#x585E;&#x3084;&#x8133;&#x5352;&#x4E2D;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3092;&#x8CA2;&#x732E;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x51DD;&#x56FA;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x8840;&#x6813;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x51DD;&#x56FA;&#x3068;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x30BB;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x7D50;&#x5408;&#x3002;

&#xD608;&#xC561; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; thrombotic &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;. &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC758;&#xC774; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC790; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xBC0F;&#xC774; &#xD611;&#xD68C;&#xC758; in vivo&#xC758; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD608;&#xC561; &#xC751;&#xACE0; &#xBC0F; &#xD56D;&#xADE0; &#xC131; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xD611;&#xD68C;&#xB97C; &#xBC18;&#xC601; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xD638; elastase &#xBC0F; &#xC678;&#xBD80;&#xD654; nucleosomes &#xD568;&#xAED8; cathepsin G, &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; microbicidal &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC751;&#xACE0;&#xC640; in vivo intravascular &#xD608;&#xC804; &#xC131;&#xC7A5; &#xCD09;&#xC9C4;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; nucleosomes &#xC751;&#xACE0; &#xC5B5;&#xC555; &#xC870;&#xC9C1; &#xC694;&#xC18C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xB85C;&#xCEEC; &#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1; &#xC694;&#xC778; &#xBC0F; &#xC778;&#xC790; XII &#xC885;&#xC18D; &#xC751;&#xACE0;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xC751;&#xACE0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBCF4;&#xD5D8;&#xD68C;&#xC0AC; &#xAC04; microvessels&#xC5D0; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xC721;&#xC131; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xADE0; &#xCE68;&#xC785;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD0A8;&#xB2E4;. &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xB3C4;&#xC804; &#xBD80;&#xC7AC; neutrophil &#xD30C;&#xC0DD; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C; &#xBC0F; nucleosomes &#xD070; &#xD608;&#xAD00; &#xD608;&#xC804; &#xC99D;, &#xC2EC;&#xADFC; &#xACBD;&#xC0C9;&#xACFC; &#xB1CC;&#xC878;&#xC911;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBC29; &#xC544; &#xC1E0;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC804;&#xD30C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74; &#xC751;&#xACE0; &#xB2A5;&#xB825; microvessel &#xD608;&#xC804; &#xC99D; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC751;&#xACE0; &#xBC0F; &#xD638; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC81C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xACB0;&#xD569;.

Neutr&oacute;filos de la sangre proporcionan la primera l&iacute;nea de defensa contra pat&oacute;genos sino tambi&eacute;n han sido implicados en procesos tromb&oacute;ticos. Esta funci&oacute;n dual de neutr&oacute;filos podr&iacute;a reflejar una asociaci&oacute;n evolutivamente conservada entre la coagulaci&oacute;n sangu&iacute;nea y defensa antimicrobiana, aunque los determinantes moleculares y significado en vivo de esta asociaci&oacute;n todav&iacute;a no est&aacute;n claros. Aqu&iacute; mostramos que microbicidas principales efectores de neutr&oacute;filos, la elastasa de serina proteasas y catepsina G, junto con nucleosomas externalizadas, promoci&oacute;n la coagulaci&oacute;n y el crecimiento del trombo intravascular en vivo. Las proteasas de serina y nucleosomas extracelulares mejoran la coagulaci&oacute;n del XII dependientes de factor - y factor de tejido en un proceso que involucra la prote&oacute;lisis local del inhibidor de la coagulaci&oacute;n supresor tejido factor v&iacute;a. Durante la infecci&oacute;n sist&eacute;mica, activaci&oacute;n de la coagulaci&oacute;n fomenta la compartimentalizaci&oacute;n de las bacterias en los microvasos del h&iacute;gado y reduce la invasi&oacute;n bacteriana en el tejido. En la ausencia de un reto del pat&oacute;geno, nucleosomas y proteasas de serina derivado del neutr&oacute;filo pueden contribuir a trombosis de grandes vasos, el gatillo principal de infarto de miocardio y accidentes cerebrovasculares. La capacidad de coagulaci&oacute;n para suprimir la diseminaci&oacute;n del pat&oacute;geno indica que los microvasos trombosis representa una herramienta fisiol&oacute;gica de defensa del hu&eacute;sped.

Acoplamiento rec&iacute;proco de la coagulaci&oacute;n y la inmunidad innata por proteasas de serina neutr&oacute;filo.

&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5355;&#x7EC6;&#x80DE;&#x771F;&#x6838;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3001; &#x4F7F;&#x7528;&#x81EA;&#x5DF1;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7535;&#x673A;&#x673A;&#x68B0;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x6B63;&#x5411;&#x8FD0;&#x52A8;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x58C1;&#x5792;&#xFF0C;&#x6E17;&#x900F;&#x548C;&#x5165;&#x4FB5;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x663E;&#x793A;&#x5FEB;&#x901F;&#x6ED1;&#x7FD4;&#x52A8;&#x529B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x4F7F;&#x7528;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x548C;&#x7C98;&#x9644;&#x7F51;&#x7AD9;&#x66F4;&#x66FF;&#x7684;&#x7387;&#x5F88;&#x9AD8;&#x3002;&#x77DB;&#x76FE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7ECF;&#x5178;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x51FA;&#x73B0;&#x7F16;&#x7801;&#x5C06;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x3002;&#x5C0F;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x5DF2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; HSP20 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x5458;&#x5728;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x52A8;&#x529B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7275;&#x5F15;&#x548C;&#x52A8;&#x529B;&#x5C0F;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; HSP20 &#x6D88;&#x878D;&#x6DF1;&#x523B;&#x5730;&#x5F71;&#x54CD;&#x7740;&#x5B50;&#x5B62;&#x5B50;&#x57FA;&#x4F53;&#x7684;&#x9644;&#x7740;&#x529B;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5316;&#x4E3A;&#x5F02;&#x5E38;&#x901F;&#x5EA6;&#x548C;&#x65B9;&#x5411;&#x6027;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;HSP20 &#x673A;&#x80FD;&#x4E27;&#x5931;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#x5728;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x627E;&#x5230;&#x4E00;&#x6839;&#x8840;&#x7BA1;&#x548C;&#x5B58;&#x5165;&#x7531;&#x868A;&#x5B50;&#x76AE;&#x80A4;&#x540E;&#x5230;&#x8FBE;&#x809D;&#x810F;&#x6240;&#x9700;&#x91CD;&#x8981;&#x5B50;&#x5B62;&#x5B50;&#x7279;&#x8D28;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A;&#x671F;&#x95F4;&#x81EA;&#x7136;&#x759F;&#x75BE;&#x4F20;&#x64AD;&#x5FEB;&#x901F;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x866B;&#x5B50;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 20 (HSP20) &#x5728;&#x8FC1;&#x79FB;&#x4E2D;&#x7684;&#x759F;&#x75BE;&#x866B;&#x5B50;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Plasmodium sporozoites, single cell eukaryotic pathogens, use their own actin/myosin-based motor machinery for life cycle progression, which includes forward locomotion, penetration of cellular barriers, and invasion of target cells. To display fast gliding motility, the parasite uses a high turnover of actin polymerization and adhesion sites. Paradoxically, only a few classic actin regulatory proteins appear to be encoded in the Plasmodium genome. Small heat shock proteins have been associated with cytoskeleton modulation in various biological processes. In this study, we identify HSP20 as a novel player in Plasmodium motility and provide molecular genetics evidence for a critical role of a small heat shock protein in cell traction and motility. We demonstrate that HSP20 ablation profoundly affects sporozoite-substrate adhesion, which translates into aberrant speed and directionality in vitro. Loss of HSP20 function impairs migration in the host, an important sporozoite trait required to find a blood vessel and reach the liver after being deposited in the skin by the mosquito. Our study also shows that fast locomotion of sporozoites is crucial during natural malaria transmission.

Critical Role for Heat Shock Protein 20 (HSP20) in Migration of Malarial Sporozoites.

Sporozo&iuml;tes Plasmodium, les pathog&egrave;nes eucaryotes unicellulaires, utilisent leurs propres machines moteur actine/myosine-bas&eacute; pour la progression du cycle de vie, qui comprend la locomotion avant, p&eacute;n&eacute;tration des barri&egrave;res cellulaires et l&#39;invasion des cellules cibles. Pour afficher les rapide mobilit&eacute; par glissement, le parasite utilise un roulement &eacute;lev&eacute; de polym&eacute;risation de l&#39;actine et sites de l&#39;adh&eacute;rence. Paradoxalement, seulement quelques prot&eacute;ines r&eacute;gulatrices actine classiques semblent &ecirc;tre cod&eacute;s dans le g&eacute;nome du Plasmodium. Prot&eacute;ines de choc thermique petit ont &eacute;t&eacute; associ&eacute;s &agrave; la modulation du cytosquelette dans divers processus biologiques. Dans cette &eacute;tude, nous identifions HSP20 en tant que nouveau joueur dans la motilit&eacute; de Plasmodium et fournir la preuve g&eacute;n&eacute;tique mol&eacute;culaire pour un r&ocirc;le d&#39;une prot&eacute;ine de choc thermique faible en traction de la cellule et la motilit&eacute;. Nous d&eacute;montrons que l&#39;ablation HSP20 affecte profond&eacute;ment adh&eacute;sion sporozo&iuml;te-substrat, ce qui se traduit par vitesse aberrante et directionnalit&eacute; in vitro. Perte de fonction HSP20 alt&egrave;re la migration de l&#39;h&ocirc;te, un trait important sporozo&iuml;te n&eacute;cessaire pour trouver un vaisseau sanguin et atteindre le foie apr&egrave;s avoir &eacute;t&eacute; d&eacute;pos&eacute;s dans la peau par le moustique. Notre &eacute;tude montre &eacute;galement que la locomotion rapide des sporozo&iuml;tes est cruciale au cours de la transmission du paludisme naturel.

R&ocirc;le crucial pour la prot&eacute;ine de choc thermique 20 (HSP20) dans la Migration des sporozo&iuml;tes malariques.

Plasmodium Sporozoites, einzelne Zelle eukaryotischen Krankheitserreger, verwenden ihre eigenen Aktin/Myosin-basierte motor Maschinen f&uuml;r Lebenszyklus Fortschreiten, vorw&auml;rts Fortbewegung, Eindringen von zellul&auml;ren Barrieren und Invasion der Zielzellen umfasst. Um darzustellen schnell gleiten Motilit&auml;t, der Parasit nutzt einen hohen Umsatz von Aktin-Polymerisation und Adh&auml;sion Websites. Paradoxerweise scheinen nur wenige klassische Aktin regulatorischen Proteine im Plasmodium Genom kodiert werden. Kleine Hitze-Schock-Proteine wurden Zytoskeletts Modulation in verschiedenen biologischen Prozessen zugeordnet. In dieser Studie, die wir identifizieren HSP20 als neuartige Spieler Plasmodium Motilit&auml;t und molekulare Genetik nachweisen f&uuml;r eine kritische Rolle eines kleinen Hitze-Schock-Proteins in Zelle Traktion und Motilit&auml;t. Wir zeigen, dass HSP20 Ablation zutiefst Sporozoite-Substrat Adh&auml;sion, beeinflusst, die in abweichenden Geschwindigkeit und Richtung in-vitro &uuml;bersetzt. HSP20 Funktionsverlust beeintr&auml;chtigt die Migration im Host, vererbt wichtige Sporozoite ben&ouml;tigt, um ein Blutgef&auml;&szlig; finden und erreichen die Leber nach wird durch die M&uuml;cke in der Haut abgelagert. Unsere Studie zeigt auch, dass schnelle Fortbewegung der Sporozoites w&auml;hrend nat&uuml;rliche Malaria&uuml;bertragung entscheidend ist.

Entscheidende Rolle f&uuml;r Heat Shock Protein 20 (HSP20) bei Migration von Malariagebiete Sporozoites.

Sporozoiti Plasmodium, agenti patogeni eucariote unicellulare, usare le proprie macchine motore basato su actina/miosina per la progressione del ciclo di vita, che comprende la locomozione avanti, penetrazione di barriere cellulari e l&#39;invasione delle cellule bersaglio. Per visualizzare velocemente scivolando motilit&agrave;, il parassita utilizza un elevato turnover dei siti di adesione e la polimerizzazione dell&#39;actina. Paradossalmente, solo proteine di regolamentazione qualche classico actina sembrano essere codificati nel genoma del Plasmodium. Proteine di scossa di calore piccoli sono state associate con modulazione del citoscheletro in vari processi biologici. In questo studio, individuiamo HSP20 come un giocatore di romanzo nella motilit&agrave; Plasmodium e fornire prove di genetica molecolare per un ruolo critico di una proteina shock termico piccolo in cella trazione e motilit&agrave;. Dimostriamo che l&#39;ablazione HSP20 colpisce profondamente adesione sporozoite-substrato, che si traduce in velocit&agrave; aberrante e direzionalit&agrave; in vitro. Perdita della funzione HSP20 altera la migrazione nell&#39;ospite, un tratto importante sporozoite necessario per trovare un vaso sanguigno e raggiungere il fegato dopo aver depositato nella pelle dalla zanzara. Anche il nostro studio indica che la locomozione veloce di sporozoiti &egrave; cruciale durante la trasmissione di malaria naturale.

Ruolo critico di Heat Shock Protein 20 (HSP20) in migrazione di sporozoiti malariche.

&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x72EC;&#x81EA;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30FB; &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x7CFB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6A5F;&#x68B0;&#x524D;&#x9032;&#x79FB;&#x52D5;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x3068;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8868;&#x793A;&#x9AD8;&#x901F;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x6ED1;&#x7A7A;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x5165;&#x308C;&#x66FF;&#x308F;&#x308A;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x8AAC;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x306E;&#x307F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x578B;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x5909;&#x8ABF;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F; HSP20 &#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E4;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x5C0F;&#x578B;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x727D;&#x5F15;&#x529B;&#x3068;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; HSP20 &#x30A2;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6DF1;&#x304F;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x901F;&#x5EA6;&#x3068;&#x65B9;&#x5411;&#x6027;&#x306E; in vitro &#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x5BC6;&#x7740;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HSP20 &#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x76AE;&#x819A;&#x306B;&#x868A;&#x306B;&#x5806;&#x7A4D;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x306B;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x5F62;&#x8CEA;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x9AD8;&#x901F;&#x6B69;&#x884C;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x306A;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x4F1D;&#x9001;&#x4E2D;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 20 (HSP20) &#x306E;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

Plasmodium sporozoites, &#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C4; &#xD575; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;, &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B4;&#xB3D9;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xCE68;&#xD22C; &#xBC0F; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140;&#xC758; &#xCE68;&#xACF5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xB9D0;&#xB77C;/myosin &#xAE30;&#xBC18; &#xBAA8;&#xD130; &#xAE30;&#xACC4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD45C;&#xC2DC;&#xD560; &#xBE60;&#xB978; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, &#xD65C;&#xACF5; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC911; &#xD569; &#xC811;&#xCC29; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xD68C;&#xC804;&#xC728;. &#xC5ED;&#xC124;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB2E8;&#xC9C0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xACE0;&#xC804;&#xC801;&#xC778; &#xB9D0;&#xB77C; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Plasmodium &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC791;&#xC740; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; cytoskeleton &#xBCC0;&#xC870; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC; Plasmodium &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC120;&#xC218;&#xB85C; &#xC11C; hsp20&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC140; &#xACAC;&#xC778; &#xBC0F; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC791;&#xC740; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xD559; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;. HSP20 &#xC808;&#xC81C;&#xB294; &#xBFCC;&#xB9AC;&#xAE4A;&#xC740; sporozoite &#xAE30;&#xD310; &#xC811;&#xCC29; &#xD0C8; &#xC120; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xCCB4; &#xC678; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. HSP20 &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4;&#xACFC; &#xC190;&#xC0C1; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;, &#xD608;&#xAD00;&#xC744; &#xCC3E;&#xC544; &#xAC04; &#xBAA8;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC785;&#xAE08; &#xB418; &#xACE0; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; sporozoite &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; sporozoites&#xC758; &#xBE60;&#xB978; &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC744; &#xC790;&#xC5F0; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC804;&#xC1A1; &#xC911; &#xACB0;&#xC815;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 20 (HSP20) &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; Sporozoites&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Esporozoitos de Plasmodium, agentes pat&oacute;genos eucariotas unicelulares, utilizan su propia maquinaria motor actina/miosina-basado para la progresi&oacute;n del ciclo de vida, que incluye la locomoci&oacute;n hacia adelante, penetraci&oacute;n de barreras celulares y la invasi&oacute;n de las c&eacute;lulas diana. Para mostrar r&aacute;pido deslizamiento de la motilidad, el par&aacute;sito utiliza una alta rotaci&oacute;n de polimerizaci&oacute;n de la actina y sitios de adhesi&oacute;n. Parad&oacute;jicamente, s&oacute;lo unos cl&aacute;sicos de la actinia prote&iacute;nas reguladoras del parecen ser codificadas en el genoma del Plasmodium. Peque&ntilde;o heat shock proteins se han asociado a la modulaci&oacute;n del citoesqueleto en varios procesos biol&oacute;gicos. En este estudio, identificamos HSP20 como un nuevo jugador en la motilidad de Plasmodium y proporcionan la evidencia de la gen&eacute;tica molecular para un papel cr&iacute;tico de una prote&iacute;na de choque de calor peque&ntilde;o en la tracci&oacute;n de la c&eacute;lula y la motilidad. Demostramos que HSP20 ablaci&oacute;n afecta profundamente la adhesi&oacute;n de esporozoito-sustrato, que se traduce en velocidad aberrante y direccionalidad in vitro. P&eacute;rdida de la funci&oacute;n HSP20 deteriora la migraci&oacute;n en la hostia, un rasgo importante de esporozoito necesaria para encontrar un vaso sangu&iacute;neo y alcanzan el h&iacute;gado despu&eacute;s de ser depositados en la piel por el mosquito. Nuestro estudio tambi&eacute;n muestra que la locomoci&oacute;n r&aacute;pida de esporozoitos es crucial durante la transmisi&oacute;n de la malaria natural.

Papel fundamental para la prote&iacute;na de choque t&eacute;rmico 20 (HSP20) en migraci&oacute;n de esporozoitos pal&uacute;dicas.

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x62E5;&#x6709;&#x5916; &#xFF08;OMM) &#x548C;&#x54EA;&#x4E9B;&#x6298;&#x6210; invaginations &#x53EB;&#x505A;&#x5D74;&#x5185;&#x819C; (IMM)&#x3002;&#x8102;&#x8D28;&#x6210;&#x5206;&#x3001; &#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x5728; IMM &#x5F71;&#x54CD;&#x5D74;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x5D74;&#x7ED3;&#x6784;&#x7EF4;&#x62A4;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A; OMM &#x86CB;&#x767D; Sam50 &#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Sam50 &#x662F;&#x6392;&#x5E8F;&#x548C;&#x88C5;&#x914D;&#x673A;&#x68B0; (SAM)&#xFF0C;&#x5FC5;&#x8981; OMM &beta; &#x6876;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684; SAM &#x7EC4;&#x4EF6;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x5927;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269; IMM &#x86CB;&#x767D; Mitofilin &#x548C; CHCHD3&#xFF0C;&#x800C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E00;&#x8BCD;&#x4E0E;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; Intermembrane &#x7A7A;&#x95F4;&#x7F29;&#x5C0F; (MIB) &#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;OMM &#x548C; IMM &#x7684; MIB &#x590D;&#x6742;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x5D74;&#x4FDD;&#x62A4;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x540E;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x7684; MIB&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x865A;&#x4E2D;&#x547C;&#x5438;&#x94FE;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5927;&#x4F1A;&#x3002;Sam50 &#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x635F;&#x8017;&#x5F71;&#x54CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4ECE;&#x5305;&#x542B;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x4E9A;&#x57FA;&#xFF0C;&#x6307;&#x5411;&#x5D74;&#x7ED3;&#x6784;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x3001; &#x547C;&#x5438;&#x914D;&#x5408;&#x5927;&#x4F1A;&#x548C;/&#x6216;&#x7EF4;&#x6301;&#x7684; mtDNA &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8FDE;&#x63A5;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5927;&#x578B;&#x547C;&#x5438;&#x914D;&#x5408;&#x7684;&#x91D1;&#x989D;&#x3002;

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x95F4;&#x9699;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7F29;&#x5C0F;&#x548C;&#x547C;&#x5438;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684; Sam50 &#x51FD;&#x6570;&#x3002;

Mitochondria possess an outer (OMM) and an inner membrane (IMM), which folds into invaginations called cristae. Lipid composition, membrane potential and proteins in the IMM influence cristae organization. Here we show an essential role of the OMM protein Sam50 in the maintenance of cristae structure. Sam50 is a part of the sorting and assembly machinery (SAM), necessary for the assembly of Î²-barrel proteins in the OMM. We provide evidence that the SAM components exist in a large protein complex together with the IMM proteins Mitofilin and CHCHD3, which we term the Mitochondrial Intermembrane Space Bridging (MIB) complex. Interactions between OMM and IMM components of the MIB complex are crucial for the preservation of cristae. After destabilization of the MIB complex, we observe deficiency in the assembly of respiratory chain complexes. Long term depletion of Sam50 influences the amounts of proteins from all large respiratory complexes that contain mitochondria-encoded subunits, pointing to a connection between cristae structural integrity, assembly of respiratory complexes and/or the maintenance of mtDNA.

Sam50 functions in mitochondrial intermembrane space bridging and biogenesis of respiratory complexes.

Les mitochondries poss&egrave;dent un externe (OMM) et une membrane interne (IMM), dont les plis dans les invaginations appel&eacute; cr&ecirc;tes. La composition lipidique, de potentiel de membrane et de prot&eacute;ines dans l&#39;IMM influent organisation de cr&ecirc;tes. Ici, nous montrons de la prot&eacute;ine de l&#39;OMM Sam50, un r&ocirc;le essentiel dans le maintien de la structure des cr&ecirc;tes. Sam50 est une partie de l&#39;Assembl&eacute;e de tri et de machines (SAM), n&eacute;cessaires pour l&#39;assemblage des prot&eacute;ines &beta;-Canon &agrave; l&#39;OMM. Nous d&eacute;montrons que les composants de SAM existent dans une grande prot&eacute;ine complexe ainsi que l&#39;expression de prot&eacute;ines Mitofilin et CHCHD3, qui nous IMM le complexe mitochondrique intermembranaire espace Bridging (MIB). Interactions entre les composants de l&#39;OMM et IMM du complexe MIB sont cruciale pour la pr&eacute;servation des cr&ecirc;tes. Apr&egrave;s la d&eacute;stabilisation de la MIB complexe, nous observons la carence dans l&#39;assemblage des complexes de la cha&icirc;ne respiratoire. L&#39;appauvrissement &agrave; long terme de Sam50 influe sur les quantit&eacute;s de prot&eacute;ines provenant de tous les grands complexes respiratoires qui contiennent des sous-unit&eacute;s cod&eacute;es mitochondries, pointant vers une connexion entre l&#39;int&eacute;grit&eacute; structurale de cr&ecirc;tes, assemblage des complexes respiratoires et/ou la maintenance de l&#39;ADNmt.

Sam50 fonctions dans l&#39;espace intermembranaire mitochondrial pontage et biogen&egrave;se des complexes respiratoires.

Mitochondrien besitzen eine &auml;u&szlig;ere (OMM) und eine innere Membran (IMM), welche Falten in Invaginationen Cristae genannt. Lipid-Komposition, Membran potenzielle und Proteine in der IMM beeinflussen Cristae Organisation. Hier zeigen wir eine wesentliche Rolle des Proteins OMM Sam50 in der Pflege der Cristae-Struktur. Sam50 ist ein Teil der Sortierung und Montage Maschinen (SAM), erforderlich f&uuml;r die Montage von &beta;-Barrel-Proteine in der OMM. Wir belegen, dass die SAM-Komponenten in einem gro&szlig;en Protein-komplexen zusammen mit der IMM-Proteine, Mitofilin und CHCHD3, die wir-Begriff den Mitochondrial Intermembrane Raum Bridging (MIB)-Komplex vorhanden sind. Interaktionen zwischen OMM und IMM Komponenten des Komplexes MIB sind entscheidend f&uuml;r die Erhaltung der Cristae. Nach der Destabilisierung der komplexen MIB beobachten wir Mangel in der Versammlung der komplexe der Atmungskette. Langfristige Ersch&ouml;pfung des Sam50 beeinflusst die Betr&auml;ge der Proteine von allen grossen Atemwege komplexe, die Mitochondrien-kodierten Untereinheiten, Hinweis auf eine Verbindung zwischen Cristae strukturelle Integrit&auml;t, Montage der Atemwege komplexe oder die Aufrechterhaltung der MtDNA enthalten.

Sam50 Funktionen in mitochondrialen Intermembranraum bridging und Biogenese der Atemwege komplexe.

Mitocondri possiedono un esterno (OMM) e una membrana interna (IMM), che si piega in invaginations chiamato cristae. Organizzazione cristae influenzano la composizione lipidica, potenziale di membrana e proteine in IMM. Mostriamo qui un ruolo essenziale della proteina OMM Sam50 nel mantenimento della struttura cristae. Sam50 &egrave; una parte dell&#39;ordinamento e assemblaggio macchinari (SAM), necessari per l&#39;assemblaggio delle proteine &beta;-barrel nell&#39;OMM. Noi fornire evidenza che i componenti di SAM esistano in una grande proteina complessa insieme con il termine di proteine Mitofilin e CHCHD3, che noi IMM del complesso mitocondriale Intermembrane spazio Bridging (MIB). Interazioni tra le componenti OMM e IMM del complesso MIB sono cruciali per la conservazione delle cristae. Dopo la destabilizzazione del complesso MIB, osserviamo il deficit nell&#39;assemblaggio di complessi della catena respiratoria. Esaurimento di lungo termine di Sam50 influenza la quantit&agrave; di proteine da tutti i grandi complessi respiratori che contengono subunit&agrave; codificata di mitocondri, che punta ad un collegamento tra l&#39;integrit&agrave; strutturale cristae, assemblaggio di complessi respiratori e/o il mantenimento del mtDNA.

Sam50 funzioni in bridging nello spazio intermembrana mitocondriale e biogenesi dei complessi respiratori.

&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x306E; (OMM) &#x3084;&#x9665;&#x5165;&#x306B;&#x6298;&#x308A;&#x7A1C;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x5185;&#x819C; (IMM) &#x3092;&#x6240;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8102;&#x8CEA;&#x7D44;&#x6210;&#x3001;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; IMM &#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x7A1C;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B; OMM &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; Sam50 &#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Sam50 &#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306F;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA; (SAM)&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3001;omm &beta; &#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;SAM &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; Intermembrane &#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30B8; (MIB) &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; IMM &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; Mitofilin &#x3068; CHCHD3&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x7528;&#x8A9E;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;MIB &#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E; OMM &#x3068; IMM &#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x7A1C;&#x306E;&#x4FDD;&#x5168;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; MIB &#x3092;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Sam50 &#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x67AF;&#x6E07;&#x30AF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x3001;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F; mtDNA &#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3092;&#x6307;&#x3059;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x306E;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x91CF;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x819C;&#x9593;&#x90E8;&#x306E;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30B8;&#x3068; Sam50 &#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xB294; &#xC678;&#xBD80; (OMM) &#xBC0F; invaginations&#xB294; &#xC811;&#xAE30; &#xB77C;&#xACE0; cristae &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9C9; (IMM) &#xC18C;&#xC720;. &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC870;&#xC131;&#xACFC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; IMM cristae &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; cristae &#xAD6C;&#xC870; &#xC720;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; OMM &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; sam50&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sam50&#xB294; &#xC815;&#xB82C; &#xBC0F; &#xC870;&#xB9BD; &#xAE30;&#xACC4; (SAM)&#xB294; OMM&#xC5D0;&#xC11C; &beta;-&#xBC30;&#xB7F4;&#xB2F9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC870;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; SAM &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xD070; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; IMM Mitofilin &#xBC0F; CHCHD3, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC6A9;&#xC5B4;&#xC640; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; Intermembrane &#xACF5;&#xAC04; &#xBE0C;&#xB9AC;&#xC9D5; (MIB) &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. OMM&#xC640; IMM MIB &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC740; cristae &#xBCF4;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; MIB&#xC758; &#xBD88;&#xC548;, &#xD6C4; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC778; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xD54D;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30;. Sam50&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC18C;&#xBAA8; cristae &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;, &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBC0F; Mtdna&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xAC00;&#xB9AC;&#xD0A4;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD070; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC591;&#xC744; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; intermembrane&#xC758; Sam50 &#xD568;&#xC218; &#xBE0C;&#xB9AC;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC18D; &#xACF5;&#xAC04;.

Las mitocondrias poseen un exterior (OMM) y una membrana interna (IMM), que dobla en invaginaciones llamadas cristae. Organizaci&oacute;n cristae influyen en la composici&oacute;n lip&iacute;dica, potencial de membrana y prote&iacute;nas en la IMM. A continuaci&oacute;n os mostramos un papel esencial de la prote&iacute;na Sam50 de la OMM en el mantenimiento de la estructura de cristae. Sam50 es una parte de la clasificaci&oacute;n y montaje maquinaria (SAM), necesaria para el ensamblaje de las prote&iacute;nas &beta;-barril de la OMM. Proporcionamos evidencia que los componentes de SAM existen en una prote&iacute;na grande compleja junto con el t&eacute;rmino de las prote&iacute;nas Mitofilin y CHCHD3, que nos de la IMM el complejo mitocondrial intermembrana espacio Bridging (MIB). Interacciones entre los componentes de la OMM y la IMM del complejo MIB son cruciales para la preservaci&oacute;n de cristae. Despu&eacute;s de la desestabilizaci&oacute;n del complejo MIB, observamos la deficiencia en la Asamblea de los complejos de la cadena respiratoria. Agotamiento a largo plazo de Sam50 influye en la cantidad de prote&iacute;nas de grandes complejos respiratorios que contienen subunidades codificada en las mitocondrias, apuntando a una conexi&oacute;n entre la integridad estructural cristae, montaje de complejos respiratorios y/o el mantenimiento del ADNmt.

Article	Year
Neutrophil extracellular traps kill bacteria. Science (New York, N.Y.)\| PubMed ID: 15001782	2004
Lack of stage-specific proteins in coccoid Helicobacter pylori cells. Infection and immunity\| PubMed ID: 15501814	2004
Increased vaccine efficacy against tuberculosis of recombinant Mycobacterium bovis bacille Calmette-GuÃ©rin mutants that secrete listeriolysin. The Journal of clinical investigation\| PubMed ID: 16110326	2005
Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps. The Journal of cell biology\| PubMed ID: 17210947	2007
Infection at the cellular level. Methods in cell biology\| PubMed ID: 18617048	2008
Neutrophil extracellular traps contain calprotectin, a cytosolic protein complex involved in host defense against Candida albicans. PLoS pathogens\| PubMed ID: 19876394	2009
A tag at the carboxy terminus prevents membrane integration of VDAC1 in mammalian mitochondria. Journal of molecular biology\| PubMed ID: 20117113	2010
Mouse neutrophil extracellular traps in microbial infections. Journal of innate immunity\| PubMed ID: 20375576	2009
Protein refolding is required for assembly of the type three secretion needle. Nature structural & molecular biology\| PubMed ID: 20543831	2010
Reciprocal coupling of coagulation and innate immunity via neutrophil serine proteases. Nature medicine\| PubMed ID: 20676107	2010
Critical Role for Heat Shock Protein 20 (HSP20) in Migration of Malarial Sporozoites. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 22139844	2012
Sam50 functions in mitochondrial intermembrane space bridging and biogenesis of respiratory complexes. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 22252321	2012

Christian Goosmann

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