Eukaryotic Polyribosome Profile Analysis

Protein synthesis is a complex cellular process that is regulated at many levels. For example, global translation can be inhibited at the initiation phase ...

University of Medicine and Dentistry of New Jersey, Robert Wood Johnson Medical School

&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; Pif1p DNA &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x662F;&#x7ED9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4ECE;&#x9175;&#x6BCD;&#x5B88;&#x6052;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x4E9A;&#x79D1;&#x7684;&#x539F;&#x578B;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7C7B;&#x4F3C; PIF1 &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;PIF1 &#x672C;&#x8EAB;&#x548C; RRM3&#xFF0C;&#x5728;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x3001; &#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; DNA &#x4E2D;&#x6709;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x4E0E;&#x8868;&#x5F81; pfh1 +&#xFF0C;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801; Pif1 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7C9F;&#x9152;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;Pfh1p &#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x5230;&#x917F;&#x9152; Pif1p S.&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD; S.&#x9175;&#x6BCD; Pif1 &#x4E9A;&#x79D1;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;S.&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD; Pfh1p &#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x3002;&#x917F;&#x9152; Pif1p S.&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x622A;&#x65AD;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x5C31;&#x50CF; 5&#39; &#x5230; 3&#39; DNA &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;Pfh1p &#x7684;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x7ED3;&#x5408;&#x53E3;&#x888B;&#x91CC;&#x4E0D;&#x53D8;&#x7684;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E86;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5220;&#x9664; pfh1 +&#xFF0C;&#x8BC1;&#x660E; Pfh1p &#x7684; ATPase/&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x76F8;&#x540C;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8D2B;&#x4E3A; Pfh1p &#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5B62;&#x5B50;&#x63A5;&#x7740;&#x901A;&#x8FC7; S &#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x902E;&#x6355;&#x4E0E;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x4E0E; DNA &#x590D;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684; postinitiation &#x7F3A;&#x9677;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;Pfh1p &#x5982;&#x679C;&#x6CA1;&#x6709;&#x9002;&#x5EA6;&#x7F29;&#x77ED;&#x7AEF;&#x7C92; dna &#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7AEF;&#x7C92; dna &#x5E8F;&#x5217;&#x4E0D;&#x662F;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD; S.Pfh1p &#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x91CD;&#x8981;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x7C9F;&#x9152;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD; pfh1 + &#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x57FA;&#x672C; 5&#39; &#x5230;&#x89E3;&#x65CB; 3&#39; DNA &#x9176;&#x7684; DNA helicases PIF1 &#x4E9A;&#x79D1;&#x6210;&#x5458;&#x3002;

The Saccharomyces cerevisiae Pif1p DNA helicase is the prototype member of a helicase subfamily conserved from yeast to humans. S. cerevisiae has two PIF1-like genes, PIF1 itself and RRM3, that have roles in maintenance of telomeric, ribosomal, and mitochondrial DNA. Here we describe the isolation and characterization of pfh1+, a Schizosaccharomyces pombe gene that encodes a Pif1-like protein. Pfh1p was the only S. pombe protein with high identity to Saccharomyces Pif1p. Unlike the two S. cerevisiae Pif1 subfamily proteins, the S. pombe Pfh1p was essential. Like Saccharomyces Pif1p, a truncated form of the S. pombe protein had 5' to 3' DNA helicase activity. Point mutations in an invariant lysine residue in the ATP binding pocket of Pfh1p had the same phenotype as deleting pfh1+, demonstrating that the ATPase/helicase activity of Pfh1p was essential. Although mutant spores depleted for Pfh1p proceeded through S phase, they arrested with a terminal cellular phenotype consistent with a postinitiation defect in DNA replication. Telomeric DNA was modestly shortened in the absence of Pfh1p. However, genetic analysis demonstrated that maintenance of telomeric DNA was not the sole essential function of S. pombe Pfh1p.

Schizosaccharomyces pombe pfh1+ encodes an essential 5' to 3' DNA helicase that is a member of the PIF1 subfamily of DNA helicases.

Le Saccharomyces cerevisiae Pif1p DNA helicase appartient le prototype d&#39;une sous-famille de helicase conserv&eacute;e de la levure &agrave; l&#39;homme. S. cerevisiae a deux g&egrave;nes ressemblant &agrave; des PIF1, PIF1 et RRM3, qui jouent un r&ocirc;le dans le maintien de l&#39;ADN t&eacute;lom&eacute;rique et ribosomique mitochondrial. Ici, nous d&eacute;crivons l&#39;isolement et la caract&eacute;risation de pfh1 +, un g&egrave;ne de pombe Schizosaccharomyces qui code pour une prot&eacute;ine ressemblant &agrave; des Pif1. Pfh1p est la seule prot&eacute;ine de S. pombe avec une identit&eacute; forte &agrave; Saccharomyces Pif1p. &Agrave; la diff&eacute;rence des deux S. cerevisiae Pif1 sous-famille des prot&eacute;ines, la S. pombe Pfh1p est indispensable. Comme Saccharomyces Pif1p, une forme tronqu&eacute;e de la prot&eacute;ine de S. pombe a 5&#39; &agrave; 3&#39; activit&eacute; h&eacute;licase de l&#39;ADN. Des mutations ponctuelles dans un r&eacute;sidu lysine invariante dans la poche de fixation ATP de Pfh1p avait le m&ecirc;me ph&eacute;notype comme suppression pfh1 +, ce qui d&eacute;montre que l&#39;activit&eacute; ATPase/helicase de Pfh1p est indispensable. Bien que les spores mutants &eacute;puis&eacute;s pour Pfh1p a proc&eacute;d&eacute; par l&#39;interm&eacute;diaire de la phase S, ils ont arr&ecirc;t&eacute; avec un ph&eacute;notype cellulaire terminal compatible avec un d&eacute;faut postinitiation dans la r&eacute;plication de l&#39;ADN. ADN t&eacute;lom&eacute;rique a &eacute;t&eacute; l&eacute;g&egrave;rement raccourci en l&#39;absence de Pfh1p. Cependant, l&#39;analyse g&eacute;n&eacute;tique a montr&eacute; que le maintien de l&#39;ADN t&eacute;lom&eacute;rique n&#39;est pas la seule fonction essentielle de S. pombe Pfh1p.

Schizosaccharomyces pombe pfh1 + encode un essentiel 5&#39; &agrave; 3&#39; ADN h&eacute;licase qui appartient &agrave; la sous-famille des PIF1 d&#39;ADN h&eacute;licases.

Schizosaccharomyces pombe pfh1 + kodiert eine wesentliche 5 &#x26;#39;zu 3&#x26;#39; DNA-Helikase, die ein Mitglied der Unterfamilie PIF1 von DNA-Helicasen ist.

Il Saccharomyces cerevisiae Pif1p DNA elicasi sono il membro del prototipo di una sottofamiglia di helicase conservato dal lievito all&#39;uomo. S. cerevisiae ha due geni come PIF1, PIF1 si e RRM3, che hanno ruoli nella manutenzione del DNA mitocondriale, ribosomiale e telomerica. Qui descriviamo l&#39;isolamento e caratterizzazione di pfh1 +, Schizosaccharomyces pombe gene che codifica per una proteina simile a Pif1. Pfh1p era l&#39;unica proteina di S. pombe con alta identit&agrave; di Saccharomyces Pif1p. A differenza delle due S. cerevisiae Pif1 sottofamiglia proteine, lo S. pombe Pfh1p era essenziale. Come Saccharomyces Pif1p, una forma troncata della proteina S. pombe aveva 5&#39; 3&#39; attivit&agrave; di helicase del DNA. Mutazioni puntiformi in un residuo di lisina invariante della tasca di legame ATP di Pfh1p avevano lo stesso fenotipo come l&#39;eliminazione di pfh1 +, dimostrando che l&#39;attivit&agrave; di helicase/ATPasi del Pfh1p era essenziale. Anche se le spore mutanti impoverite per Pfh1p procedettero attraverso la fase S, hanno arrestato con un fenotipo cellulare terminale coerenza con un difetto postinitiation nella replicazione del DNA. DNA telomeric modestamente &egrave; stato ridotto in assenza di Pfh1p. Tuttavia, l&#39;analisi genetica ha dimostrato che la manutenzione del DNA telomerica non era l&#39;unica funzione essenziale di S. pombe Pfh1p.

Schizosaccharomyces pombe pfh1 + codifica un&#39;essenziale 5&#39; al 3&#39; del DNA elicasi che sono un membro della sottofamiglia PIF1 di DNA elicasi.

&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED; &#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#x9175;&#x6BCD; Pif1p DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x9175;&#x6BCD;&#x304B;&#x3089;&#x30D2;&#x30C8;&#x3078;&#x4FDD;&#x5B58;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x4E9C;&#x79D1;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; &#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;1D14-5 PIF1 2 &#x3064; PIF1 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x81EA;&#x4F53;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x3001;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;, &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; DNA &#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3064; RRM3 &#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5206;&#x96E2;&#x3068; pfh1 +&#x3001;Pif1 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Pfh1p &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x552F;&#x4E00; S. &#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD; Pif1p &#x306B;&#x9AD8;&#x3044; id &#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3002;2 S. &#x9175;&#x6BCD; Pif1 &#x4E9C;&#x79D1;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;s.pombe Pfh1p &#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD; Pif1p &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7701;&#x7565;&#x5F62; S. &#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E; 5&#39; 3&#39; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x5909;&#x306E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E; ATP &#x7D50;&#x5408;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E; Pfh1p &#x3067; pfh1 + Pfh1p &#x306E; ATPase/&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x3058;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x67AF;&#x6E07;&#x306E; Pfh1p &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x304C; S &#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9032;&#x3093;&#x3060;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x73FE;&#x578B; DNA &#x8907;&#x88FD;&#x306E; postinitiation &#x6B20;&#x9665;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x3092;&#x902E;&#x6355;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2; DNA &#x306F;&#x63A7;&#x3048;&#x3081;&#x306A; Pfh1p &#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x89E3;&#x6790;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2; DNA &#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9; s.pombe Pfh1p &#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x5FC5;&#x9808;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD; pfh1 + &#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20; 5&#39; &#x3078;&#x306E; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC; PIF1 &#x4E9C;&#x79D1;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B; 3&#39; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Saccharomyces cerevisiae Pif1p DNA helicase helicase &#xC544; &#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xD0C0;&#xC785; &#xBA64;&#xBC84;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. S. cerevisiae &#xB450; PIF1 &#xAC19;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, pif1&#xB294; &#xC790;&#xCCB4; &#xBC0F; RRM3, telomeric, ribosomal, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; DNA&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xACA9;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC131; pfh1 +, Schizosaccharomyces pombe &#xC720;&#xC804;&#xC790; pif1&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xC124;&#xBA85;. Pfh1p&#xB294; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; S. pombe &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Saccharomyces pif1p&#xC744; &#xB192;&#xC740; id &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; S. cerevisiae Pif1 &#xC544; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB2EC;&#xB9AC; S. pombe Pfh1p &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. Saccharomyces Pif1p &#xCC98;&#xB7FC; S. pombe &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4; 5&#39; 3&#39; DNA helicase &#xD65C;&#xB3D9;. Pfh1p&#xC758; ATP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC8FC;&#xBA38;&#xB2C8;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC815; lysine &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC810; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0AD;&#xC81C; pfh1 + pfh1p&#xC758; ATPase/helicase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xD544;&#xC218; &#xC2DC;&#xC5F0;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xD615;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. Pfh1p&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC18C;&#xC9C4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD3EC;&#xC790; S &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; postinitiation &#xACB0;&#xD568; DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;&#xC640; &#xCCB4;&#xD3EC;. Telomeric DNA&#xB294; pfh1p&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xACB8;&#xC190; &#xD558; &#xAC8C; &#xB2E8;&#xCD95; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D; telomeric DNA&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xB294; S. pombe pfh1p&#xC758; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

Schizosaccharomyces pombe pfh1 +&#xB294; &#xD544;&#xC218; 5&#39; 3&#39; DNA helicase DNA helicases&#xC758; PIF1 &#xC544;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La Saccharomyces cerevisiae Pif1p ADN helicasa es el miembro de prototipo de una subfamilia helicase conservado de la levadura a los seres humanos. S. cerevisiae tiene dos genes como PIF1, PIF1 de s&iacute; mismo y RRM3, que tienen un papel en el mantenimiento del ADN telom&eacute;rico, mitocondrial y ribosomal. Aqu&iacute; describimos el aislamiento y caracterizaci&oacute;n de pfh1 +, un gen de Schizosaccharomyces pombe que codifica una prote&iacute;na similar a Pif1. Pfh1p fue la &uacute;nica prote&iacute;na de S. pombe con alta identidad a Saccharomyces Pif1p. A diferencia de las dos S. cerevisiae Pif1 subfamilia prote&iacute;nas el S. pombe Pfh1p era esencial. Como Saccharomyces Pif1p, una forma truncada de la prote&iacute;na de S. pombe ten&iacute;a 5&#39; a 3&#39; actividad de helicasa ADN. Mutaciones puntuales en un residuo de lisina invariante en el bolsillo de uni&oacute;n del ATP de Pfh1p ten&iacute;a el mismo fenotipo como borrar pfh1 +, demostrando que la actividad de la ATPasa/helicase de Pfh1p fue esencial. Aunque mutantes esporas agotadas para Pfh1p procedieron a trav&eacute;s de la fase S, detuvieron a un fenotipo celular terminal constante con un defecto postinitiation en la replicaci&oacute;n del ADN. ADN telom&eacute;rico modestamente fue acortado en la ausencia de Pfh1p. Sin embargo, el an&aacute;lisis gen&eacute;tico demostr&oacute; que el mantenimiento del ADN telom&eacute;rico no era la &uacute;nica funci&oacute;n esencial de S. pombe Pfh1p.

Schizosaccharomyces pombe pfh1 + codifica una esencial 5&#39; a 3&#39; DNA helicase que pertenece a la subfamilia de PIF1 de ADN helicasas.

Myc &#x539F;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x5176;&#x4E0D;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E0E;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;Myc &#x4E0A;&#x8C03;&#x5F3A;&#x5236;&#x589E;&#x957F;&#x3001; &#x62EE;&#x6297;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x64A4;&#x51FA;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8868;&#x578B;&#x5982;&#x4F55;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x662F;&#x4E0D;&#x597D;&#x7406;&#x89E3;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x5173;&#x4E0B;&#x6E38;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x7684;&#x6E05;&#x6670;&#x56FE;&#x7247;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E3A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E00;&#x5957;&#x6316;&#x7A7A; c-myc &#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x7684; Myc &#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4F18;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x8C03;&#x8282; Myc &#x6D3B;&#x52A8;&#x4ECE;&#x672C;&#x8D28;&#x4E0A;&#x662F;&#x7A7A;&#x7684; supraphysiological &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x9020;&#x6210;&#x5927;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#x7684;&#x4EA7;&#x91CF;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x548C;&#x63ED;&#x793A;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6700;&#x4F73;&#x65B9;&#x5F0F;&#x56DE;&#x5E94; Myc &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5176;&#x751F;&#x7406;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x5927;&#x578B;&#x5B50;&#x96C6;&#x3002;&#x603B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F15;&#x8D77; Myc &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x662F;&#x4E86;&#x4E0D;&#x8D77;&#x7684;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x6210;&#x5343;&#x4E0A;&#x4E07;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x4E0D;&#x662F;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x95F4;&#x63A5;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x8C03;&#x89E3;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x3002;Myc &#x6FC0;&#x6D3B;&#x529F;&#x80FD;&#x662F;&#x6307;&#x793A;&#x6027;&#x7684;&#x9762;&#x5411;&#x8FC5;&#x901F;&#x5229;&#x7528;&#x7684;&#x78B3;&#x6E90;&#x3001; &#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x5408;&#x6210;&#x3001; &#x524D;&#x4F53;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x538B;&#x6291; Myc &#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x548C;&#x6C9F;&#x901A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0E;&#x5176;&#x5916;&#x90E8;&#x73AF;&#x5883;&#xFF0C;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5DF2;&#x77E5;&#x62E5;&#x6709;&#x6297;&#x589E;&#x6B96;&#x6216;&#x8FDC;&#x5904;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;

C-Myc &#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5927;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x9057;&#x4F20;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

The myc proto-oncogenes encode transcriptional regulators whose inappropriate expression is correlated with a wide array of human malignancies. Up-regulation of Myc enforces growth, antagonizes cell cycle withdrawal and differentiation, and in some situations promotes apoptosis. How these phenotypes are elicited is not well understood, largely because we lack a clear picture of the biologically relevant downstream effectors. We created a new biological system for the optimal profiling of Myc target genes based on a set of isogenic c-myc knockout and conditional cell lines. The ability to modulate Myc activity from essentially null to supraphysiological resulted in a significantly increased and reproducible yield of targets and revealed a large subset of genes that respond optimally to Myc in its physiological range of expression. The total extent of transcriptional changes that can be triggered by Myc is remarkable and involves thousands of genes. Although the majority of these effects are not direct, many of the indirect targets are likely to have important roles in mediating the elicited cellular phenotypes. Myc-activated functions are indicative of a physiological state geared toward the rapid utilization of carbon sources, the biosynthesis of precursors for macromolecular synthesis, and the accumulation of cellular mass. In contrast, the majority of Myc-repressed genes are involved in the interaction and communication of cells with their external environment, and several are known to possess antiproliferative or antimetastatic properties.

A large scale genetic analysis of c-Myc-regulated gene expression patterns.

Les proto-oncog&egrave;nes myc encodent des r&eacute;gulateurs transcriptionnels dont l&#39;expression inappropri&eacute;e est corr&eacute;l&eacute;e avec un large &eacute;ventail de cancers humains. R&eacute;gulation de Myc applique la croissance, s&#39;oppose &agrave; la diff&eacute;renciation et retrait du cycle cellulaire et dans certaines situations favorise l&#39;apoptose. Comment ces ph&eacute;notypes sont provoqu&eacute;es ne sont pas bien comprise, en grande partie parce que nous n&#39;avons pas une id&eacute;e claire des biologiquement pertinentes effecteurs en aval. Nous avons cr&eacute;&eacute; un nouveau syst&egrave;me biologique pour le profilage optimal des g&egrave;nes cibles de Myc bas&eacute;s sur un ensemble de knockout isog&eacute;nique de c-myc et de lign&eacute;es cellulaires avec sursis. La capacit&eacute; de moduler l&#39;activit&eacute; de Myc provient essentiellement de null &agrave; supraphysiologiques a entra&icirc;n&eacute; un rendement significativement accru et reproductible des cibles et a r&eacute;v&eacute;l&eacute; un large sous-ensemble de g&egrave;nes qui r&eacute;pondent de fa&ccedil;on optimale aux Myc dans ses limites physiologiques de l&#39;expression. L&#39;&eacute;tendue totale de transcriptionnelles changements qui peuvent &ecirc;tre d&eacute;clench&eacute;es par le Myc est remarquable et implique des milliers de g&egrave;nes. M&ecirc;me si la plupart de ces effets n&#39;est pas directement, nombreux objectifs indirects sont susceptibles d&#39;avoir un r&ocirc;le important dans la m&eacute;diation des ph&eacute;notypes cellulaires ont incit&eacute;. Fonctions activ&eacute;es myc t&eacute;moignent d&#39;un &eacute;tat physiologique, ax&eacute; sur l&#39;utilisation rapide des sources de carbone, la biosynth&egrave;se des pr&eacute;curseurs pour la synth&egrave;se macromol&eacute;culaire et l&#39;accumulation de la masse cellulaire. En revanche, la majorit&eacute; des g&egrave;nes r&eacute;prim&eacute;s Myc est impliqu&eacute;e dans l&#39;interaction et la communication des cellules avec leur environnement externe, et plusieurs sont reconnus pour poss&eacute;der antiprolif&eacute;rative ou propri&eacute;t&eacute;s antim&eacute;tastatiques.

Une analyse g&eacute;n&eacute;tique &agrave; grande &eacute;chelle des profils d&#39;expression g&eacute;nique r&eacute;gl&eacute; par c-Myc.

Eine gro&#xDF; angelegte genetische Analyse von c-Myc-regulierter Genexpression.

I proto-oncogeni myc codificano regolatori trascrizionali cui inappropriata espressione &egrave; correlata con una vasta gamma di tumori maligni umani. Up-regulation di Myc impone la crescita, antagonizza la differenziazione e il ritiro del ciclo cellulare e in alcune situazioni promuove l&#39;apoptosi. Come questi fenotipi sono suscitati non &egrave; ben compreso, in gran parte perch&eacute; ci manca un quadro chiaro del biologicamente rilevanti effettori a valle. Abbiamo creato un nuovo sistema biologico per la profilatura ottimale dei geni bersaglio di Myc basati su un set di knockout isogeni di c-myc e linee cellulari condizionale. La capacit&agrave; di modulare l&#39;attivit&agrave; di Myc da essenzialmente null a sovrafisiologici ha provocato un rendimento significativamente aumentato e riproducibile di obiettivi e ha rivelato un grande sottoinsieme dei geni che rispondono in modo ottimale di Myc in sua range fisiologico di espressione. L&#39;estensione totale di transcriptional modifiche che possono essere innescati da Myc &egrave; notevole e coinvolge migliaia di geni. Anche se la maggior parte di questi effetti non &egrave; diretta, molti degli obiettivi indiretti sono suscettibili di avere ruoli importanti nella mediazione dei fenotipi cellulari indotti. Myc-attivato funzioni sono indicative di uno stato fisiologico, orientato verso il rapido utilizzo di fonti di carbonio, la biosintesi dei precursori per la sintesi macromolecolare e l&#39;accumulo di massa cellulare. Al contrario, la maggior parte dei geni Myc repressi &egrave; coinvolti nell&#39;interazione e la comunicazione delle cellule con il loro ambiente esterno, e molti sono noti per possedere propriet&agrave; antimetastatica o antiproliferativi.

Un&#39;analisi genetica su larga scala dei modelli di espressione del gene c-Myc-regolato.

Myc &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AA;&#x30F3;&#x30B3;&#x30B8;&#x30FC;&#x30F3;&#x4E0D;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x5F0F;&#x3072;&#x3068;&#x60AA;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x914D;&#x5217;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Myc &#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x5F37;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x64A4;&#x9000;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x6575;&#x306B;&#x307E;&#x308F;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3067;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E3B;&#x6211;&#x3005; &#x751F;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x306E;&#x9BAE;&#x660E;&#x306A;&#x753B;&#x50CF;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3082;&#x3001;&#x308F;&#x304B;&#x3089;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x540C;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; c-myc &#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3068;&#x6761;&#x4EF6;&#x3064;&#x304D;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x884C;&#x306E;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066; Myc &#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Myc &#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B; null &#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5909;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x518D;&#x73FE;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x53CE;&#x91CF;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x9069; Myc &#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x5FDC;&#x7B54;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Myc &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306F;&#x9855;&#x8457;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6570;&#x5343;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x306F;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x9593;&#x63A5;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x8A98;&#x767A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Myc &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x70AD;&#x7D20;&#x6E90;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5229;&#x7528;, &#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x91CF;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x3066;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x751F;&#x7406;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5916;&#x90E8;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E; Myc &#x6291;&#x5236;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6297;&#x8EE2;&#x79FB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x6240;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

C Myc &#x898F;&#x5236;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x3002;

Myc proto-oncogenes &#xC778;&#xCF54;&#xB529; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xBD80;&#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC2DD;&#xC774; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04; &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC5C5;-&#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; Myc&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xCCA0;&#xC218;&#xC640; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;, &#xBC18;&#xAC10; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB3C4; apoptosis&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACE0;&#xAE30; elicited &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC798; &#xC778;&#xC2DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD558;&#xB294;, &#xB355;&#xBD84;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xC120;&#xBA85; &#xBD80;&#xC871;. Myc &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; isogenic c-myc &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xBC0F; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Supraphysiological&#xC5D0; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; null&#xC5D0;&#xC11C; Myc &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB300;&#xC0C1;&#xC758; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC7AC;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xC218;&#xC728;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xACE0; &#xC2DD;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; Myc&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xC751; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD070; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Myc&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xD55C; transcriptional &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xBC94;&#xC704; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xC774;&#xBA70; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC218;&#xCC9C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC740; &#xC9C1;&#xC811;, &#xAC04;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC774;&#xB04C;&#xB824; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xACE0;&#xAE30; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB192;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Myc &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xB300;&#xC0C1; &#xD0C4;&#xC18C; &#xC18C;&#xC2A4;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD65C;&#xC6A9;, &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790;&#xC758; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C8;&#xB7C9;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xBC18;&#xBA74;, Myc &#xC5B5;&#xC555; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xD658;&#xACBD;, &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; antiproliferative &#xB610;&#xB294; antimetastatic &#xC18D;&#xC131;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C Myc &#xADDC;&#xC81C; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC720;&#xC804; &#xBD84;&#xC11D;.

Los protooncogenes myc codifican reguladores transcripcionales cuya expresi&oacute;n inadecuado se correlaciona con una gran variedad de Neoplasias humanas. Para arriba-regulaci&oacute;n de Myc impone el crecimiento, antagoniza la diferenciaci&oacute;n y la retirada de ciclo celular y en algunos casos promueve la apoptosis. &iquest;C&oacute;mo estos fenotipos son sacados no se comprende bien, principalmente porque no tenemos una idea clara de los efectores descendentes biol&oacute;gicamente relevantes. Hemos creado un nuevo sistema biol&oacute;gico para la &oacute;ptima elaboraci&oacute;n de perfiles de genes diana de Myc basados en una serie de octavos de final de c-myc isog&eacute;nicas y l&iacute;neas celulares condicional. La capacidad para modular la actividad de Myc de esencialmente nulo a supraphysiological dio lugar a un rendimiento significativamente mayor y reproducible de objetivos y revel&oacute; un gran subconjunto de genes que responden &oacute;ptimamente a Myc en su rango fisiol&oacute;gico de expresi&oacute;n. La extensi&oacute;n total de cambios transcripcionales que se puede accionar por Myc es notable e implica miles de genes. Aunque la mayor&iacute;a de estos efectos no es directa, muchos de los objetivos indirectos est&aacute;n probables que tienen un papel importante en la mediaci&oacute;n de los fenotipos celulares sacados. MYC-activa funciones son indicativas de un estado fisiol&oacute;gico dirigido a la utilizaci&oacute;n r&aacute;pida de fuentes de carbono, la bios&iacute;ntesis de precursores para la s&iacute;ntesis macromolecular y la acumulaci&oacute;n de masa celular. En contraste, la mayor&iacute;a de los genes Myc reprimidas est&aacute; implicada en la interacci&oacute;n y la comunicaci&oacute;n de las c&eacute;lulas con su ambiente externo, y varios son conocidos por poseer antiproliferativo o propiedades antimetast&aacute;ticos.

Un an&aacute;lisis gen&eacute;tico de gran escala de patrones de expresi&oacute;n del gen c-Myc-regulado.

&#x83B7;&#x53D6;&#x5230;&#x672B;&#x5C3E;&#xFF1A; &#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x8BBF;&#x95EE;&#x3002;

Getting to the end: telomerase access in yeast and humans.

&Agrave; la fin : acc&egrave;s de la t&eacute;lom&eacute;rase chez la levure et l&#39;humain.

Anreise bis zum Ende: Telomerase-Zugang in Hefe und Mensch.

Ottenendo alla fine: accesso telomerasi nel lievito e gli esseri umani.

&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x53D6;&#x5F97;: &#x9175;&#x6BCD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3002;

&#xB05D;&#xC744;: &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC640; &#xC778;&#xAC04; telomerase &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;.

Llegar al final: acceso de la telomerasa en levadura y los seres humanos.

Pif1 &#x662F; 5&#39;-&#x5230;-3&#39; DNA &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; DNA &#x590D;&#x5236;&#x548C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;ScPif1 &#x662F;&#x7531;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#xFF0C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x91CD;&#x590D;&#x5408;&#x6210;&#x8D1F;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x548C;&#x4ECE;&#x7AEF;&#x7C92; DNA &#x4F53;&#x5916;&#x91CD;&#x7EC4; ScPif1 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176; RNA &#x6A21;&#x677F;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x5256;&#x6790; mPif1 &#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6253;&#x4E71;&#x4E86; mPif1 &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x53EA;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x9020;&#x8840;&#x8C31;&#x7CFB;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; mPif1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;mPif1(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x662F;&#x53EF;&#x884C;&#x5728;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x65E0;&#x53EF;&#x89C1;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x6CA1;&#x6709;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#x7684;&#x6539;&#x5EFA;&#x4E2D;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7A7A;&#x80CC;&#x666F;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x540E;&#x51E0;&#x4EE3;&#x4EBA;&#x3002;MPif1(-/-) &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x813E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5149;&#x8C31;&#x6838;&#x578B;&#x5206;&#x6790;&#x6280;&#x672F;&#x53D1;&#x73B0;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x6392;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6216; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x663E;&#x793A;&#x6CA1;&#x6709;&#x5DEE;&#x5F02;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x4EC0;&#x4E48;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x813E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x4E0E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176; mPif1 &#x65B0;&#x578B;&#x534F;&#x4F1A;&#xFF0C;mPif1 &#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x5EF6;&#x4F38;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6240;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5; ScPif1&#xFF0C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7A33;&#x6001;&#x6216;&#x9057;&#x4F20;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x5E76;&#x4E0D;&#x53D6;&#x51B3; mPif1&#xFF0C;&#x4E5F;&#x8BB8;&#x7531;&#x4E8E;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0E;&#x9175;&#x6BCD;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; &#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x8C03;&#x63A7;&#x57FA;&#x672C;&#x5DEE;&#x5F02;&#x6216;&#x7531;&#x4E8E;&#x9057;&#x4F20;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6; DNA helicases &#x5197;&#x4F59;&#x3002;

&#x5C0F;&#x9F20; Pif1 &#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x662F;&#x53EF;&#x6709;&#x53EF;&#x65E0;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Pif1 is a 5'-to-3' DNA helicase critical to DNA replication and telomere length maintenance in the budding yeast Saccharomyces cerevisiae. ScPif1 is a negative regulator of telomeric repeat synthesis by telomerase, and recombinant ScPif1 promotes the dissociation of the telomerase RNA template from telomeric DNA in vitro. In order to dissect the role of mPif1 in mammals, we cloned and disrupted the mPif1 gene. In wild-type animals, mPif1 expression was detected only in embryonic and hematopoietic lineages. mPif1(-/-) mice were viable at expected frequencies, displayed no visible abnormalities, and showed no reproducible alteration in telomere length in two different null backgrounds, even after several generations. Spectral karyotyping of mPif1(-/-) fibroblasts and splenocytes revealed no significant change in chromosomal rearrangements. Furthermore, induction of apoptosis or DNA damage revealed no differences in cell viability compared to what was found for wild-type fibroblasts and splenocytes. Despite a novel association of mPif1 with telomerase, mPif1 did not affect the elongation activity of telomerase in vitro. Thus, in contrast to what occurs with ScPif1, murine telomere homeostasis or genetic stability does not depend on mPif1, perhaps due to fundamental differences in the regulation of telomerase and/or telomere length between mice and yeast or due to genetic redundancy with other DNA helicases.

Murine Pif1 interacts with telomerase and is dispensable for telomere function in vivo.

Pif1 est une 5&#39;-3&#39; ADN h&eacute;licase essentiel au maintien de longueur des r&eacute;plication et les t&eacute;lom&egrave;res de l&#39;ADN dans la levure Saccharomyces cerevisiae. ScPif1 est un r&eacute;gulateur n&eacute;gatif de la synth&egrave;se de r&eacute;p&eacute;tition t&eacute;lom&eacute;rique de t&eacute;lom&eacute;rase et recombinant ScPif1 favorise la dissociation du descripteur d&#39;ARN de la t&eacute;lom&eacute;rase d&#39;ADN t&eacute;lom&eacute;rique in vitro. Afin de diss&eacute;quer le r&ocirc;le de mPif1 chez les mammif&egrave;res, nous avons clon&eacute; et perturb&eacute; le g&egrave;ne mPif1. Chez les animaux sauvage, expression mPif1 a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;e que dans les lign&eacute;es embryonnaires et h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques. mPif1(-/-) souris &eacute;taient viables &agrave; des fr&eacute;quences attendues, n&#39;affich&eacute; aucune anomalie visible et ont montr&eacute; aucune alt&eacute;ration reproductible dans la longueur des t&eacute;lom&egrave;res dans deux diff&eacute;rents fonds null, m&ecirc;me apr&egrave;s plusieurs g&eacute;n&eacute;rations. Caryotype spectral des spl&eacute;nocytes et des fibroblastes de mPif1(-/-) a r&eacute;v&eacute;l&eacute; aucun changement significatif dans les r&eacute;arrangements chromosomiques. En outre, l&#39;induction de l&#39;apoptose ou de dommages &agrave; l&#39;ADN a r&eacute;v&eacute;l&eacute; aucune diff&eacute;rence dans la viabilit&eacute; des cellules par rapport &agrave; ce qui a &eacute;t&eacute; trouv&eacute; pour les spl&eacute;nocytes et fibroblastes sauvage. Malgr&eacute; une nouvelle liaison de mPif1 avec t&eacute;lom&eacute;rase, mPif1 n&#39;a pas affect&eacute; l&#39;activit&eacute; de l&#39;&eacute;longation de la t&eacute;lom&eacute;rase in vitro. Ainsi, contrairement &agrave; ce qui se passe avec ScPif1, hom&eacute;ostasie du t&eacute;lom&egrave;re murine ou stabilit&eacute; g&eacute;n&eacute;tique ne d&eacute;pend pas du mPif1, peut-&ecirc;tre en raison des diff&eacute;rences fondamentales dans la r&eacute;gulation de la t&eacute;lom&eacute;rase et/ou les t&eacute;lom&egrave;res de longueur entre la souris et de la levure ou en raison de la redondance g&eacute;n&eacute;tique avec les autres h&eacute;licases d&#39;ADN.

Pif1 murin interagit avec la t&eacute;lom&eacute;rase et n&#39;est pas indispensable pour la fonction des t&eacute;lom&egrave;res in vivo.

Pif1 ist eine 5&#39; zu 3&#39; DNA Helicase entscheidend f&uuml;r die DNA-Replikation und Telomer-L&auml;nge-Wartung in der Backhefe. ScPif1 ist ein negativer Regulator der Telomerisches wiederholen Synthese von Telomerase und rekombinante ScPif1 f&ouml;rdert die Dissoziation der Telomerase-RNA-Vorlage von in-vitro-Telomerisches DNA. Um die Rolle der mPif1 bei S&auml;ugetieren zu zergliedern, wir geklont und das mPif1-Gen gest&ouml;rt. Im Wildtyp Tiere war mPif1 Ausdruck nur in embryonalen und h&auml;matopoetischen Linien festgestellt. mPif1(-/-) M&auml;use wurden praktikable bei erwarteten Frequenzen, keine sichtbaren Abnormit&auml;ten angezeigt, und zeigte keine reproduzierbare &Auml;nderung Telomer-L&auml;nge in zwei verschiedenen null Hintergrund, auch nach mehreren Generationen. Spektrale Chromosomenanalyse mPif1(-/-) Fibroblasten und Splenocytes ergab keine signifikanten Ver&auml;nderungen in chromosomale Rearrangements. Dar&uuml;ber hinaus ergab die Induktion von Apoptose oder DNA-Sch&auml;den keine Unterschiede in der Zellviabilit&auml;t im Vergleich zu was f&uuml;r Wildtyp Fibroblasten und Splenocytes gefunden wurde. Trotz einer neuartigen Verbindung von mPif1 mit Telomerase hatte mPif1 keine Auswirkungen auf die Dehnung-Aktivit&auml;t der Telomerase in-vitro. Also, im Gegensatz zu dem, was bei ScPif1 auftritt, murine Telomer-Hom&ouml;ostase oder genetische Stabilit&auml;t h&auml;ngt nicht von mPif1, vielleicht wegen der grundlegenden Unterschiede bei der Regulierung der Telomerase und/oder Telomer-L&auml;nge zwischen M&auml;usen und Hefe oder genetische Redundanz mit anderen DNA-Helikasen.

Murinen Pif1 interagiert mit Telomerase und f&uuml;r in-vivo Telomer-Funktion entbehrlich ist.

Pif1 &egrave; un 5&#39; a 3&#39; del DNA elicasi fondamentale per la replicazione del DNA e manutenzione lunghezza telomeri nel lievito gemmante Saccharomyces cerevisiae. ScPif1 &egrave; un regolatore negativo della sintesi ripetizione telomerica di telomerasi e ricombinante ScPif1 promuove la dissociazione del modello RNA telomerasi da telomerica del DNA in vitro. Al fine di sezionare il ruolo di mPif1 nei mammiferi, abbiamo clonato e interrotto il gene mPif1. Nel selvaggio-tipo animali, mPif1 espressione &egrave; stato rilevato solo nei lignaggi embrionale ed emopoietiche. mPif1(-/-) topi erano vitali alle frequenze attese, non visualizzato anomalie visibili e ha mostrato nessuna alterazione riproducibile in lunghezza telomeri in due diverse provenienze null, anche dopo diverse generazioni. Cariotipo spettrale di splenocytes e fibroblasti mPif1(-/-) non rivelato alcun cambiamento significativo in riarrangiamenti cromosomici. Inoltre, induzione di apoptosi o di danni del DNA ha rivelato differenze nella vitalit&agrave; cellulare rispetto a quello che &egrave; stato trovato per splenocytes e selvaggio-tipo fibroblasti. Nonostante una romanzo associazione di mPif1 con la telomerasi, mPif1 non ha interessato l&#39;attivit&agrave; di allungamento della telomerasi in vitro. Cos&igrave;, contrariamente a ci&ograve; che si verifica con ScPif1, l&#39;omeostasi telomeri murino o stabilit&agrave; genetica non dipende mPif1, forse a causa di differenze fondamentali nella regolazione della telomerasi e/o telomeri di lunghezza tra topi e lievito o ridondanza genetica con altri DNA elicasi.

Pif1 murino &egrave; dispensabile per funzione telomeri in vivo e interagisce con la telomerasi.

Pif1&#x3001;5&#39;--&#x3059;&#x308B; 3&#39; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC; DNA &#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;ScPif1 &#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2; &#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x8CA0;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; RNA &#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2; DNA &#x4F53;&#x5916;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; ScPif1 &#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; mPif1 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x4F5C;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073; mPif1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;mPif1 &#x5F0F;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x80DA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9020;&#x8840;&#x7CFB;&#x7D71;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;mPif1(-/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3044;&#x305F;&#x671F;&#x5F85;&#x306E;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x8868;&#x793A;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306F;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305A;&#x3001;&#x518D;&#x73FE;&#x5909;&#x8CEA; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B; null &#x80CC;&#x666F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x9577;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x5F8C;&#x3082;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;MPif1(-/-) &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x813E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5149; karyotyping &#x3082;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3084; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x813E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023; mPif1 &#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;mPif1 &#x4F38;&#x9577;&#x6D3B;&#x6027;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;.&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;ScPif1 &#x3067;&#x4F55;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3084;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027; mPif1 &#x4E0A;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x4ED6; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5197;&#x9577;&#x6027;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Pif1 &#x306F;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x3001;in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Pif1&#xC740; &#xD55C; 5&#39;-3&#39; DNA helicase &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Scpif1&#xC740; telomeric &#xBC18;&#xBCF5; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; telomerase&#xC758; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; ScPif1 telomeric DNA &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; telomerase RNA &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; Mpif1&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD574; &#xBD80; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; mPif1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB3D9;&#xBB3C; mPif1 &#xC2DD; &#xBC30;&#xC544; &#xBC0F; &#xC870; &#xD608; &#xACC4;&#xBCF4;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. mPif1(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD588;&#xB2E4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCFC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC774;&#xC0C1; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xB300; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; null &#xBC30;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC7AC;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xBCC0;&#xACBD; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. MPif1(-/-) &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; splenocytes&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; karyotyping &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, apoptosis &#xB610;&#xB294; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xC720;&#xB3C4; &#xBB34;&#xC5C7; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xAC8C;&#xC7AC; &#xBC0F; splenocytes&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. Telomerase&#xC640; Mpif1&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xD611;&#xD68C;&#xC5D0; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; mPif1 telomerase &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Scpif1&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; murine telomere &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; mPif1, &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xC950;&#xC640; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; telomerase &#xBC0F; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xCC28;&#xC774;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; DNA helicases &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC911;&#xBCF5; &#xB54C;&#xBB38;.

Murine Pif1 telomerase&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; telomere &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xBD88;&#xAC00;&#xACB0; &#xC774;&#xB2E4;.

Pif1 es un 5&#39;-a-3&#39; DNA helicase fundamental para el mantenimiento de ADN replicaci&oacute;n y tel&oacute;meros de longitud en la levadura Saccharomyces cerevisiae del florecimiento. ScPif1 es un regulador negativo de telom&eacute;rica repetici&oacute;n s&iacute;ntesis de telomerasa y recombinante ScPif1 promueve la disociaci&oacute;n de la plantilla de RNA de la telomerasa de ADN telom&eacute;rico in vitro. Para diseccionar el papel de mPif1 en los mam&iacute;feros, hemos clonado e interrumpi&oacute; el gen mPif1. En animales de tipo salvaje, mPif1 expresi&oacute;n fue detectada s&oacute;lo en linajes embrionarios y hematopoy&eacute;ticos. mPif1(-/-) ratones eran viables en frecuencias esperadas, no muestra ninguna anormalidad visible y no demostr&oacute; ninguna alteraci&oacute;n reproducible en longitud de los tel&oacute;meros en dos diferentes nulos, incluso despu&eacute;s de varias generaciones. Cariotipo espectral de esplenocitos y fibroblastos mPif1(-/-) revel&oacute; un cambio significativo en los cambios cromos&oacute;micos. Adem&aacute;s, la inducci&oacute;n de apoptosis o da&ntilde;os en el ADN revel&oacute; diferencias en la viabilidad celular en comparaci&oacute;n con lo que encontr&oacute; para esplenocitos y fibroblastos de tipo salvaje. A pesar de una asociaci&oacute;n nueva del mPif1 con la telomerasa, mPif1 no afect&oacute; la actividad de la elongaci&oacute;n de la telomerasa in vitro. As&iacute;, en contraste con lo que ocurre con ScPif1, homeostasis del tel&oacute;mero murino o estabilidad gen&eacute;tica no depende mPif1, tal vez debido a diferencias fundamentales en la regulaci&oacute;n de la longitud de la telomerasa o tel&oacute;meros entre ratones y levadura o redundancia gen&eacute;tica con otros ADN helicasas.

Pif1 murino interact&uacute;a con la telomerasa y es prescindible para la funci&oacute;n del tel&oacute;mero en vivo.

&#x4ECE;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x89D2;&#x5EA6;&#x5B88;&#x6052;&#x7684; PIF1 DNA &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001; &#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EF4;&#x62A4;&#x3002;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A; PIF1 &#x5BB6;&#x5EAD; helicases &#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;Pif1p &#x548C; Rrm3p&#xFF0C;&#x65E2;&#x62E5;&#x6709; 5&#39;--&gt; 3&#39; DNA &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4FDD;&#x6301;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x8C03;&#x8282;&#x548C; semi-conservative DNA &#x590D;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; PIF1 &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7531;&#x5355;&#x4E2A;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x5206;&#x6790; PIF1 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x514B;&#x9686; cDNA &#x5168;&#x957F;&#x4EBA;&#x7C7B; PIF (hPIF) &#x7684;&#x3002;HPIF &#x4E0E;&#x53CA;&#x5176; S.&#x9175;&#x6BCD;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8868;&#x660E;&#x4EBA;&#x7C7B; PIF &#x662F;&#x540C;&#x6837;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; Pif1p &#x548C; Rrm3p.&#x4EBA;&#x7C7B;&#x592A;&#x5E73;&#x6D0B;&#x5C9B;&#x5C7F;&#x8BBA;&#x575B;&#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x5F02;&#x4F4D; hPIF &#x88AB;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x6838;&#x75AB;&#x6E90;&#x5730;&#x3002;hPIF &#x8868;&#x793A; S/G2 &#x671F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5E76;&#x6B64;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8C03;&#x8282;&#x4E30;&#x5EA6;&#x8D4B;&#x4E88;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x79EF;&#x7D2F;&#x548C;&#x6CDB;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x9000;&#x5316;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;hPIF &#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x540E;&#x671F;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x590D;&#x6742;/cyclosome&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x4E30;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x65F6;&#x7684; APC/C &#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x5242;&#x5916;&#x57DF;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;hPIF immunoprecipitated &#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230; hPIF &#x4E0E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#xFF0C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684; PIF&#xFF0C;&#x50CF;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; Pif1p&#xFF0C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x8C03;&#x8282;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B; PIF &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8C03;&#x8282;&#x548C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

The evolutionarily conserved PIF1 DNA helicase family is important for the maintenance of genome stability in the yeast, Saccharomyces cerevisiae. There are two PIF1 family helicases in S. cerevisiae, Pif1p and Rrm3p that both possess 5'-->3' DNA helicase activity but maintain unique functions in telomerase regulation and semi-conservative DNA replication. Database analysis shows that the PIF1 helicase family is represented by a single homologue in higher eukaryotes. To analyze the function of PIF1 homologues in mammals, we cloned the full length human PIF (hPIF) cDNA. Comparison of hPIF with its S. cerevisiae homologues showed that human PIF is equally similar to Pif1p and Rrm3p. Human PIF was expressed at low levels in a variety of tissues and immunofluorescence analysis showed that ectopic hPIF was localized to nuclear foci. hPIF was expressed in late S/G2 phase of the cell cycle and this cell cycle regulated abundance was conferred by both cell cycle regulated mRNA accumulation and ubiquitin-mediated degradation. Furthermore, hPIF is likely a target of the anaphase promoting complex/cyclosome as its abundance was decreased when an activator of the APC/C was overexpressed. Finally, antibodies against hPIF immunoprecipitated telomerase activity from human cell lines, and we have observed a physical interaction between hPIF and the catalytic subunit of telomerase, hTERT. Our data suggest that human PIF, like S. cerevisiae Pif1p, plays a role in telomerase regulation.

Human PIF helicase is cell cycle regulated and associates with telomerase.

La famille de helicase PIF1 ADN &eacute;volutivement conserv&eacute;e est importante pour le maintien de la stabilit&eacute; du g&eacute;nome de la levure Saccharomyces cerevisiae. Il y a deux PIF1 familles h&eacute;licases chez S. cerevisiae, Pif1p et Rrm3p que les deux poss&egrave;dent 5&#39;--&gt; 3&#39; l&#39;activit&eacute; h&eacute;licase ADN mais maintenir des fonctions uniques dans le r&egrave;glement de la t&eacute;lom&eacute;rase et r&eacute;plication de l&#39;ADN semi-conservative. Analyse de la base de donn&eacute;es montre que la famille de helicase PIF1 est repr&eacute;sent&eacute;e par un homologue unique chez les eucaryotes sup&eacute;rieurs. Pour analyser la fonction de PIF1 homologues chez les mammif&egrave;res, nous avons clon&eacute; l&#39;ADNc pleine longueur de la PIF (hPIF) humaine. Comparaison des hPIF avec ses homologues de cerevisiae S. a montr&eacute; que PIF humaine est &eacute;galement semblable &agrave; Pif1p et Rrm3p. humain PIF a &eacute;t&eacute; exprim&eacute; en faibles quantit&eacute;s dans une vari&eacute;t&eacute; de tissus et immunofluorescence analyse a montr&eacute; que hPIF ectopique est localis&eacute;e aux foyers de nucl&eacute;aires. hPIF a &eacute;t&eacute; exprim&eacute; &agrave; la fin de la phase S/G2 du cycle cellulaire et cette abondance de cycle cellulaire r&eacute;glement&eacute;e a &eacute;t&eacute; conf&eacute;r&eacute;e par l&#39;accumulation des ARNm cycle cellulaire r&eacute;glement&eacute; et d&eacute;gradation induite par l&#39;ubiquitine. Par ailleurs, hPIF est probablement une cible de l&#39;anaphase promotion complexe/cyclosome que son abondance est diminu&eacute;e lorsqu&#39;un activateur de l&#39;APC/C &eacute;tait surexprim&eacute;. Enfin, les anticorps dirig&eacute;s contre l&#39;activit&eacute; t&eacute;lom&eacute;rase hPIF immunopr&eacute;cipit&eacute;e de lign&eacute;es de cellules humaines, et nous avons observ&eacute; une interaction physique entre hPIF et la sous-unit&eacute; catalytique de la t&eacute;lom&eacute;rase, hTERT. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que le PIF humaine, comme S. cerevisiae Pif1p, joue un r&ocirc;le dans le r&egrave;glement de la t&eacute;lom&eacute;rase.

Helicase humain de PIF est cycle cellulaire r&eacute;glement&eacute; et associe &agrave; la t&eacute;lom&eacute;rase.

Die evolution&auml;r konservierte PIF1 DNA Helicase-Familie ist wichtig f&uuml;r die Aufrechterhaltung der Genomstabilit&auml;t bei der Hefe Saccharomyces Cerevisiae. Es gibt zwei PIF1-Familie-Helikasen in S. Cerevisiae, Pif1p und Rrm3p, die beide 5&#39;--&gt; 3&#39; DNA Helicase T&auml;tigkeit besitzen aber einzigartige Funktionen Telomerase-Verordnung und semi-conservative DNA-Replikation pflegen. Datenbankanalyse zeigt, dass die PIF1 Helicase-Familie durch einen einzigen Homolog in h&ouml;heren Eukaryotes dargestellt wird. Um die Funktion von PIF1 Homologen bei S&auml;ugetieren zu analysieren, geklont wir das volle L&auml;nge menschliche PIF (hPIF) cDNA. Vergleich der hPIF mit seinen S. Cerevisiae Homologen zeigte, dass menschliche PIF ebenso vergleichbar mit Pif1p ist und Rrm3p. menschliche PIF sich auf niedrigem Niveau in einer Vielzahl von Geweben &auml;u&szlig;erten und Immunfluoreszenz-Analyse zeigte, dass die ektopische hPIF f&uuml;r nukleare Foki lokalisiert wurde. hPIF fand ihren Niederschlag in sp&auml;ten S/G2-Phase des Zellzyklus und diese F&uuml;lle Zellzyklus reguliert wurde aus der Zellzyklus reguliert mRNA Anh&auml;ufung und Ubiquitin-vermittelte Erniedrigung. Dar&uuml;ber hinaus ist hPIF wahrscheinlich ein Ziel von der Anaphase Komplex/Cyclosome zu f&ouml;rdern, da ihre H&auml;ufigkeit verringert wurde, wenn ein Aktivator des APC/C Pleuramesotheliom war. Schlie&szlig;lich Antik&ouml;rper gegen hPIF Immunoprecipitated Telomerase-Aktivit&auml;t von menschlichen Zelllinien, und wir haben festgestellt, dass eine physische Interaktion zwischen hPIF und die katalytische Untereinheit der Telomerase, hTERT. Unsere Daten zeigen, dass menschliche PIF, S. cerevisiae Pif1p, Telomerase-Verordnung eine Rolle spielt.

Menschliche PIF Helicase ist Zellzyklus reguliert und ordnet Telomerase.

La famiglia di helicase del DNA PIF1 evolutivamente conservata &egrave; importante per il mantenimento della stabilit&agrave; del genoma del lievito Saccharomyces cerevisiae. Ci sono due elicasi famiglie PIF1 in S. cerevisiae, Pif1p e Rrm3p che sia in possesso di 5&#39;--&gt; 3&#39; attivit&agrave; di helicase del DNA ma mantenere funzioni uniche nel regolamento telomerasi e replicazione del DNA semi-conservative. Analisi del database dimostra che la famiglia di helicase PIF1 &egrave; rappresentata da un singolo omologo negli eucarioti superiori. Per analizzare la funzione di PIF1 omologhi nei mammiferi, abbiamo clonato il cDNA PIF (hPIF) umano piena lunghezza. Confronto di hPIF con i suoi cromosomi omologhi di S. cerevisiae ha mostrato che PIF umana &egrave; altrettanto simile a Pif1p e Rrm3p. PIF umana &egrave; stata espressa a livelli bassi in una variet&agrave; di tessuti e immunofluorescenza analisi ha mostrato che hPIF ectopica &egrave; stato localizzato a foci nucleari. hPIF &egrave; stato espresso in tarda fase S/G2 del ciclo cellulare e questa abbondanza di ciclo cellulare regolato le venne conferita da accumulo di mRNA del ciclo cellulare regolato sia di ubiquitin-mediato degradazione. Inoltre, hPIF &egrave; probabilmente un bersaglio dell&#39;anafase complesso/cyclosome come sua abbondanza &egrave; stato diminuito quando un attivatore della APC/C era overexpressed. Infine, gli anticorpi contro l&#39;attivit&agrave; telomerasica immunoprecipitated hPIF da linee di cellule umane, e abbiamo osservato un&#39;interazione fisica tra hPIF e la subunit&agrave; catalitica della telomerasi, hTERT. I nostri dati suggeriscono che PIF umana, come S. cerevisiae Pif1p, gioca un ruolo nel regolamento telomerasi.

Umano PIF elicasi sono ciclo cellulare regolata e associa la telomerasi.

&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E; PIF1 DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC; &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306F;&#x3001;Pif1p &#x3068; Rrm3p &#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9; 5&#39;3 &#39; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;--&gt; &#x6240;&#x6709;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x898F;&#x5236;&#x3068;&#x534A;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7684; DNA &#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B; 2 &#x3064; PIF1 &#x5BB6;&#x65CF;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x5206;&#x6790; PIF1 &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x5BB6;&#x65CF;&#x304C;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PIF1 &#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593; PIF (hPIF) cDNA &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; PIF &#x304C; Pif1p &#x306B;&#x5747;&#x7B49;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593; PIF Rrm3p&#x3002; &#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027; hPIF &#x6838;&#x306E;&#x5DE3;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CD;&#x5149;&#x6297;&#x4F53;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; hPIF &#x305D;&#x306E; S. &#x9175;&#x6BCD;&#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;hPIF &#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E; S/G2 &#x671F;&#x306E;&#x5F8C;&#x671F;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x898F;&#x5236;&#x8C4A;&#x304B;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x898F;&#x5236; mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3068;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x52A3;&#x5316;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6388;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;hPIF &#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3001;APC/C &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;&#x904E;&#x5270;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x305D;&#x306E;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;/cyclosome &#x3092;&#x63A8;&#x9032;&#x3057;&#x3066;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x304B;&#x3089; hPIF &#x6C88;&#x6FB1;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x6211;&#x3005; &#x306F; hPIF &#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD; Pif1p &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; PIF &#x304C;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x898F;&#x5236;&#x3067;&#x306F;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; PIF &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x898F;&#x5236;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; PIF1 DNA helicase &#xAC00;&#xC871;&#xC774; &#xB204; &#xB8E9;, Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. S. cerevisiae, pif1p&#xC640; Rrm3p &#xB450; &#xC18C;&#xC720; 5&#39;3 &#39; DNA helicase &#xD65C;&#xB3D9;--&gt; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; telomerase &#xADDC;&#xC815;&#xACFC; semi-conservative DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; PIF1 &#xAC00;&#xC871; helicases&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; PIF1 helicase &#xAC00;&#xC871; &#xB192;&#xC740; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; homologue&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; PIF1 homologues&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; PIF (hPIF) &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774;&#xC758; cDNA &#xBCF5;&#xC81C;. S. cerevisiae homologues&#xC640; Hpif&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; PIF&#xB294; pif1p&#xC640; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; Rrm3p. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; PIF &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC11D; &#xADF8; &#xC18C;&#xC131; hPIF &#xD575; foci &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB294; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. Hpif&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; &#xD6C4;&#xBC18; S/g 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xD1B5;&#xC81C; mRNA &#xCD95;&#xC801;&#xACFC; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;-&#xC911;&#xC7AC; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218; &#xC5EC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, hPIF &#xC544;&#xB9C8;&#xB85C; &#xD48D;&#xC694;&#xB85C; &#xC6C0; &#xB54C; APC/C&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xAE30;&#xB294; overexpressed &#xAC10;&#xC18C;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;/cyclosome&#xB97C; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD558;&#xB294; anaphase&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; hPIF immunoprecipitated telomerase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC; hPIF telomerase Htert&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC2E4;&#xC81C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; S. cerevisiae Pif1p, &#xAC19;&#xC740; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; PIF telomerase &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; PIF helicase&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; telomerase &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La familia de helicase PIF1 ADN conservada evolutivamente es importante para el mantenimiento de la estabilidad del genoma en la levadura Saccharomyces cerevisiae. Hay dos PIF1 familias helicasas en S. cerevisiae, Pif1p y Rrm3p que ambos poseen 5&#39;--&gt; 3&#39; actividad de helicasa ADN pero mantener funciones &uacute;nicas en la regulaci&oacute;n de la telomerasa y replicaci&oacute;n del DNA semi-conservative. An&aacute;lisis de la base de datos muestran que la familia de helicase PIF1 est&aacute; representada por un &uacute;nico hom&oacute;logo en eucariotas superiores. Para analizar la funci&oacute;n de PIF1 hom&oacute;logos en los mam&iacute;feros, hemos clonado el cDNA PIF (hPIF) humano integral. Comparaci&oacute;n de hPIF con sus hom&oacute;logos de S. cerevisiae mostr&oacute; que humano PIF es igualmente similar a Pif1p y Rrm3p. humano PIF se expres&oacute; en bajos niveles en una variedad de tejidos y an&aacute;lisis de la inmunofluorescencia demostraron que hpif ect&oacute;pico fue localizado focos nucleares. hPIF se expres&oacute; en la &uacute;ltima fase de S/G2 del ciclo celular y esta abundancia de ciclo celular regulado fue investida por la acumulaci&oacute;n de mRNA de ciclo celular reglamentado tanto la degradaci&oacute;n mediada por ubiquitina. Adem&aacute;s, hPIF es probablemente un objetivo de la anafase promoci&oacute;n complejo/cyclosome como su abundancia disminuy&oacute; cuando se sobreexpresa un activador de la APC/C. Finalmente, los anticuerpos contra hPIF immunoprecipitated la actividad de la telomerasa de l&iacute;neas celulares humanas, y hemos observado una interacci&oacute;n f&iacute;sica entre hPIF y la subunidad catal&iacute;tica de la telomerasa, hTERT. Nuestros datos sugieren que PIF humana, como S. cerevisiae Pif1p, desempe&ntilde;a un papel en la regulaci&oacute;n de la telomerasa.

Helicase humano de PIF es ciclo celular regulado y asocia a la telomerasa.

&#x771F;&#x6838;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x4F38;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; 1A (eEF1A) &#x662F;&#x6700;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x56E0;&#x7D20;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;eEF1A &#x8D1F;&#x8D23;&#x6240;&#x6709;&#x6C28;&#x57FA;&#x9170;-chin &#x5982;&#x8FD0;&#x9001;&#x5230;&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x542F;&#x52A8;&#x5668;&#x548C; selenocysteine chin &#x5982;&#x3002;&#x5728;&#x591A;&#x80BD;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x5176;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5DF2;&#x5F52;&#x5165; eEF1A &#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4ECE;&#x9175;&#x6BCD;&#x5BF9;&#x690D;&#x7269;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x4ECE;&#x521D;&#x6B65;&#x7684;&#x6295;&#x673A;&#x534F;&#x4F1A;&#x597D;&#x7279;&#x70B9;&#x751F;&#x5316;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x663E;&#x800C;&#x6613;&#x89C1;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;eEF1A &#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4E00;&#x76F4;&#x5F52;&#x6700;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x975E;&#x89C4;&#x8303;&#x51FD;&#x6570; eEF1A &#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x7406;&#x89E3;&#x5C06;&#x63ED;&#x793A;&#x8BB8;&#x591A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E0E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001; &#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

eEF1A&#xFF1A; &#x4E4B;&#x5916;&#xFF0C;&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x7684;&#x601D;&#x8003;&#x3002;

Eukaryotic translation elongation factor 1A (eEF1A) is one of the most abundant protein synthesis factors. eEF1A is responsible for the delivery of all aminoacyl-tRNAs to the ribosome, aside from initiator and selenocysteine tRNAs. In addition to its roles in polypeptide chain elongation, unique cellular and viral activities have been attributed to eEF1A in eukaryotes from yeast to plants and mammals. From preliminary, speculative associations to well characterized biochemical and biological interactions, it is clear that eEF1A, of all the translation factors, has been ascribed the most functions outside of protein synthesis. A mechanistic understanding of these non-canonical functions of eEF1A will shed light on many important biological questions, including viral-host interaction, subcellular organization, and the integration of key cellular pathways.

eEF1A: thinking outside the ribosome.

Traduction eucaryote 1 a facteur d&#39;&eacute;longation (eEF1A) est un des facteurs de synth&egrave;se prot&eacute;ines plus abondantes. eEF1A est responsable de la livraison de tous les aminoacyl-ARNt au ribosome, en dehors de l&#39;ARNt initiateur et s&eacute;l&eacute;nocyst&eacute;ine. En plus de son r&ocirc;le dans l&#39;&eacute;longation de la cha&icirc;ne polypeptidique, des activit&eacute;s cellulaires et virales uniques ont &eacute;t&eacute; attribu&eacute;es &agrave; eEF1A chez les eucaryotes de la levure pour les plantes et les mammif&egrave;res. De l&#39;enqu&ecirc;te pr&eacute;liminaire, sp&eacute;culatives associations bien caract&eacute;risent biochimiques et des interactions biologiques, il est clair qu&#39;eEF1A, de tous les facteurs de la traduction, a &eacute;t&eacute; attribu&eacute; le plus de fonctions &agrave; l&#39;ext&eacute;rieur de la synth&egrave;se des prot&eacute;ines. Une interpr&eacute;tation m&eacute;caniste de ces fonctions non canoniques d&#39;eEF1A mettra en lumi&egrave;re sur nombreuses questions biologiques importantes, y compris l&#39;interaction virus-h&ocirc;te, organisation subcellulaire et l&#39;int&eacute;gration des principales voies cellulaires.

eEF1A : penser en dehors du ribosome.

Eukaryotic &Uuml;bersetzung Dehnung Faktor 1A (eEF1A) geh&ouml;rt zu den am h&auml;ufigsten vorkommenden Protein-Synthese-Faktoren. eEF1A ist verantwortlich f&uuml;r die Lieferung von allen Aminoacyl-tRNAs an das Ribosom, abgesehen von Initiator und Selenocystein tRNAs. Neben seinen Aufgaben im Polypeptid Kette Dehnung haben einzigartige zellul&auml;re und virale Aktivit&auml;ten eEF1A in Eukaryoten aus Hefe zu Pflanzen und S&auml;ugetiere zugeschrieben. Vom Vorentwurf zugeschrieben spekulative Verb&auml;nde gut charakterisiert biochemische und biologische Interaktionen, es ist klar, dass eEF1A, der alle Faktoren, &Uuml;bersetzung, wurde selbst die Funktionen au&szlig;erhalb der Proteinsynthese. Eine mechanistische Verst&auml;ndnis f&uuml;r diese nicht-kanonischen Funktionen des eEF1A werden viele wichtige biologische Fragen, einschlie&szlig;lich viral-Host Interaktion, subzellulare Organisation und die Integration der wichtigsten zellul&auml;ren Wege beleuchten.

eEF1A: Denken au&szlig;erhalb der Ribosom.

Traduzione negli eucarioti allungamento factor 1A (eEF1A) &egrave; uno dei fattori di sintesi della proteina pi&ugrave; abbondanti. eEF1A &egrave; responsabile per la fornitura di tutte le amminoacil-tRNA al ribosoma, a parte il tRNA iniziatore e selenocisteina. Oltre ai suoi ruoli in allungamento catena polipeptidica, unica attivit&agrave; cellulari e virali sono state attribuite a eEF1A negli eucarioti da lievito a piante e mammiferi. Dal preliminare, speculativa associazioni ben caratterizzato biochimica e delle interazioni biologiche, &egrave; chiaro che eEF1A, di tutti i fattori di traduzione, &egrave; stata ascritta pi&ugrave; funzioni di fuori della sintesi proteica. Una comprensione meccanicistica di queste funzioni non-canoniche di eEF1A sar&agrave; gettare luce su importanti questioni biologiche, interazione virale-host, organizzazione subcellulare e l&#39;integrazione dei processi cellulari.

eEF1A: pensare di fuori del ribosoma.

&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x7FFB;&#x8A33;&#x4F38;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 1 a (eEF1A) &#x306F;&#x6700;&#x3082;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;eEF1A &#x306F;&#x3001;&#x8107;&#x30A4;&#x30CB;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x30BB;&#x30EC;&#x30CE;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; Trna &#x304C;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3078;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB; Trna &#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x9396;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x4E2D;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3001;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6D3B;&#x52D5; eEF1A &#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x690D;&#x7269;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306B;&#x9175;&#x6BCD;&#x304B;&#x3089;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x5916;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x3088;&#x304F;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x306F;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x751F;&#x7269;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305D;&#x306E; eEF1A &#x7FFB;&#x8A33;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6295;&#x6A5F;&#x7684;&#x306A;&#x66AB;&#x5B9A;&#x7248;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x5F97;&#x7684;&#x5730;&#x4F4D;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x975E;&#x6B63;&#x898F;&#x95A2;&#x6570;&#x306E; eEF1A &#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x7406;&#x89E3;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x4E0B;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x8CEA;&#x554F;&#x306B;&#x5149;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;

eEF1A: &#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5916;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x3066;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC9C4; &#xD575; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 1A (eEF1A)&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Eef1a&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; aminoacyl tRNAs &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xCD08;&#xAE30;&#xC790;&#xC640; &#xC140;&#xB808;&#xB178;&#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; tRNAs &#xB9AC;&#xBCF4;&#xC19C;&#xC5D0; &#xC804;&#xB2EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Polypeptide &#xC0AC;&#xC2AC; &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC720; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xACFC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xB97C; &#xB204; &#xB8E9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; Eef1a&#xC5D0; &#xD560;&#xB2F9; &#xB418;&#xC5B4;. &#xC608;&#xBE44;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC798; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBD84;&#xBA85; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xADF8; eEF1A, &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD22C;&#xAE30; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xAD00;&#xCC30;. Eef1a&#xC758; &#xC815;&#xC2DD;&#xC774; &#xC544;&#xB2CC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4; &#xC774;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;, subcellular &#xC870;&#xC9C1;&#xACFC; &#xC8FC;&#xC694; &#xC138;&#xD3EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD569;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC744; &#xBE44;&#xCD9C; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;.

eEF1A:&#xB294; &#xB9AC;&#xBCF4;&#xC19C; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558; &#xACE0;.

Traducci&oacute;n en eucariotas alargamiento factor 1A (eEF1A) es uno de los factores de s&iacute;ntesis de la prote&iacute;na m&aacute;s abundantes. eEF1A es responsable de la entrega de los aminoacil-ARNt al ribosoma, aparte de ARNt iniciador y selenociste&iacute;na. Adem&aacute;s de sus papeles en la elongaci&oacute;n de la cadena del polip&eacute;ptido, actividades celulares y virales se han atribuido a eEF1A en eucariotas de levadura a plantas y mam&iacute;feros. De preliminar, especulativos asociaciones bien caracterizan bioqu&iacute;mico e interacciones biol&oacute;gicas, es claro eEF1A, de todos los factores de traducci&oacute;n, ha sido atribuyen m&aacute;s funciones fuera de la s&iacute;ntesis de prote&iacute;nas. Una comprensi&oacute;n mecanicista de estas funciones no can&oacute;nicas de eEF1A arrojar&aacute; luz sobre muchas cuestiones biol&oacute;gicas importantes, incluyendo interacci&oacute;n viral-host, organizaci&oacute;n subcelular y la integraci&oacute;n de las v&iacute;as celulares claves.

Article	Year
Schizosaccharomyces pombe pfh1+ encodes an essential 5' to 3' DNA helicase that is a member of the PIF1 subfamily of DNA helicases. Molecular biology of the cell\| PubMed ID: 12058079	2002
A large scale genetic analysis of c-Myc-regulated gene expression patterns. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 12529326	2003
Getting to the end: telomerase access in yeast and humans. Nature reviews. Molecular cell biology\| PubMed ID: 14685173	2003
Murine Pif1 interacts with telomerase and is dispensable for telomere function in vivo. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 17130244	2007
Human PIF helicase is cell cycle regulated and associates with telomerase. Cell cycle (Georgetown, Tex.)\| PubMed ID: 17172855	2006
eEF1A: thinking outside the ribosome. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 20444696	2010

Maria Mateyak

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