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Preparation of Mica and Silicon Substrates for DNA Origami Analysis and Experimentation

The designed nature and controlled, one-pot synthesis of DNA origami provides exciting opportunities in many fields, particularly nanoelectronics. Many of ...

Chicago State University

Cells undergo M phase arrest in response to stresses like UV irradiation or DNA damage. Stress-activated protein kinase (SAPK, also known as c-Jun N-terminal kinase, JNK) is activated by such stress stimuli. We addressed the potential effects of SAPK activation on cell cycle regulatory proteins. Activation of SAPK strongly correlated with inhibition of cdc2/cyclin B kinase, an important regulator of G2/M phase. SAPK directly phosphorylated the cdc2 regulator, cdc25c, in vitro on serine 168 (S168). This residue was highly phosphorylated in vivo in response to stress stimuli. cdc25c phosphorylated on S168 in cells lacks phosphatase activity, and expression of a S168A mutant of cdc25c reversed the inhibition of cdc2/cyclin B kinase activity by cell stress. Antibodies directed against phosphorylated S168 detect increased phosphorylation of S168 after cell stress. We conclude that SAPK regulates cdc2/cyclin B kinase following stress events by a novel mechanism involving inhibitory phosphorylation of the cdc2-activating phosphatase cdc25c on S168.

SAPK/JNK regulates cdc2/cyclin B kinase through phosphorylation and inhibition of cdc25c.

Activation of 40S ribosomal protein S6 kinases (S6Ks) is mediated by anabolic signals triggered by hormones, growth factors, and nutrients. Stimulation by any of these agents is inhibited by the bacterial macrolide rapamycin, which binds to and inactivates the mammalian target of rapamycin, an S6K kinase. In mammals, two genes encoding homologous S6Ks, S6K1 and S6K2, have been identified. Here we show that mice deficient for S6K1 or S6K2 are born at the expected Mendelian ratio. Compared to wild-type mice, S6K1(-/-) mice are significantly smaller, whereas S6K2(-/-) mice tend to be slightly larger. However, mice lacking both genes showed a sharp reduction in viability due to perinatal lethality. Analysis of S6 phosphorylation in the cytoplasm and nucleoli of cells derived from the distinct S6K genotypes suggests that both kinases are required for full S6 phosphorylation but that S6K2 may be more prevalent in contributing to this response. Despite the impairment of S6 phosphorylation in cells from S6K1(-/-)/S6K2(-/-) mice, cell cycle progression and the translation of 5'-terminal oligopyrimidine mRNAs were still modulated by mitogens in a rapamycin-dependent manner. Thus, the absence of S6K1 and S6K2 profoundly impairs animal viability but does not seem to affect the proliferative responses of these cell types. Unexpectedly, in S6K1(-/-)/S6K2(-/-) cells, S6 phosphorylation persisted at serines 235 and 236, the first two sites phosphorylated in response to mitogens. In these cells, as well as in rapamycin-treated wild-type, S6K1(-/-), and S6K2(-/-) cells, this step was catalyzed by a mitogen-activated protein kinase (MAPK)-dependent kinase, most likely p90rsk. These data reveal a redundancy between the S6K and the MAPK pathways in mediating early S6 phosphorylation in response to mitogens.

S6K1(-/-)/S6K2(-/-) mice exhibit perinatal lethality and rapamycin-sensitive 5'-terminal oligopyrimidine mRNA translation and reveal a mitogen-activated protein kinase-dependent S6 kinase pathway.

&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x764C;&#x75C7;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x7A81;&#x51FA;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x9A7E;&#x9A76;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7684;&#x7624;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x662F;&#x5F88;&#x96BE;&#x786E;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x7531;&#x4E8E;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x548C;&#x90E8;&#x5206;&#x7531;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C34;&#x5E73;&#x4F4E;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x4E00;&#x822C;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5168;&#x7403;&#x7684; phosphoproteomic &#x65B9;&#x6CD5;&#x63ED;&#x793A;&#x5C11;&#x91CF;&#x542B;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5F3A;&#x8C03;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x5E76;&#x6807;&#x8BC6;&#x5927;&#x91CF;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x542B;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x76F4;&#x63A5;&#x4ECE;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D88;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x63D0;&#x53D6;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x4E0E;&#x9694;&#x79BB;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7531;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;&#x5C06;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5E94;&#x7528;&#x5230;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x786E;&#x5B9A;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x4FE1;&#x4EE4;&#x7F51;&#x7EDC;&#x4E2D;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x4E8B;&#x5148;&#x4E0D;&#x77E5;&#x60C5;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B65;&#x5728;&#x5206;&#x6790;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x7624;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7F51;&#x7EDC;&#x4E2D;&#x3002;

&#x514D;&#x75AB;&#x4EB2;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;

Tyrosine kinases play a prominent role in human cancer, yet the oncogenic signaling pathways driving cell proliferation and survival have been difficult to identify, in part because of the complexity of the pathways and in part because of low cellular levels of tyrosine phosphorylation. In general, global phosphoproteomic approaches reveal small numbers of peptides containing phosphotyrosine. We have developed a strategy that emphasizes the phosphotyrosine component of the phosphoproteome and identifies large numbers of tyrosine phosphorylation sites. Peptides containing phosphotyrosine are isolated directly from protease-digested cellular protein extracts with a phosphotyrosine-specific antibody and are identified by tandem mass spectrometry. Applying this approach to several cell systems, including cancer cell lines, shows it can be used to identify activated protein kinases and their phosphorylated substrates without prior knowledge of the signaling networks that are activated, a first step in profiling normal and oncogenic signaling networks.

Immunoaffinity profiling of tyrosine phosphorylation in cancer cells.

Tyrosine kinases jouent un r&#xF4;le de premier plan dans le cancer humain, mais les voies de signalisation oncog&#xE9;niques de conduite la prolif&#xE9;ration cellulaire et la survie ont &#xE9;t&#xE9; difficiles &#xE0; identifier, en partie en raison de la complexit&#xE9; des voies et en partie en raison des faibles niveaux cellulaires de la phosphorylation sur tyrosine. En g&#xE9;n&#xE9;ral, les approches globales phosphoproteomic r&#xE9;v&#xE9;ler un petit nombre de peptides contenant phosphotyrosine. Nous avons &#xE9;labor&#xE9; une strat&#xE9;gie qui met l&#x26;#39;accent sur la composante de la phosphotyrosine phosphoprot&#xE9;ome et identifie un grand nombre de sites de phosphorylation de tyrosine. Peptides contenant des phosphotyrosine sont isol&#xE9;s directement &#xE0; partir de la prot&#xE9;ase-dig&#xE9;r&#xE9;s extraits prot&#xE9;iques cellulaires avec un anticorps sp&#xE9;cifique &#xE0; la phosphotyrosine et sont identifi&#xE9;es par spectrom&#xE9;trie de masse en tandem. Appliquant cette m&#xE9;thode &#xE0; plusieurs syst&#xE8;mes cellulaires, y compris les lign&#xE9;es de cellules canc&#xE9;reuses, montre qu&#x26;#39;il peut &#xEA;tre utilis&#xE9; pour identifier les prot&#xE9;ines kinases activ&#xE9;es et leurs substrats phosphoryl&#xE9;s sans connaissance pr&#xE9;alable des r&#xE9;seaux de signalisation qui sont activ&#xE9;s, une premi&#xE8;re &#xE9;tape dans le profilage normales et les r&#xE9;seaux de signalisation oncog&#xE9;nique.

Profilage immunoaffinit&#xE9; de phosphorylation de la tyrosine dans les cellules canc&#xE9;reuses

Immunoaffinity Profilierung der Tyrosinphosphorylierung in Krebszellen.

Chinasi della tirosina giocano un ruolo prominente nel cancro umano, eppure le vie di segnalazione oncogenica guida la proliferazione cellulare e la sopravvivenza sono state difficili da identificare, in parte a causa della complessit&agrave; dei percorsi e in parte a causa di livelli bassi di fosforilazione della tirosina. In generale, gli approcci globali phosphoproteomic rivelano un piccolo numero di peptidi contenenti phosphotyrosine. Abbiamo sviluppato una strategia che enfatizza la componente phosphotyrosine della phosphoproteome e identifica un gran numero di siti di fosforilazione della tirosina. Peptidi contenenti phosphotyrosine sono isolate direttamente dagli estratti di proteina cellulare proteasi-digerito con un anticorpo specifico phosphotyrosine e sono identificati tramite spettrometria di massa tandem. Applicare questo approccio a diversi sistemi di cell, compreso linee di cellule di cancro, spettacoli pu&ograve; essere utilizzato per identificare la chinasi di proteina attivata e loro substrati fosforilati senza preventiva conoscenza delle reti di segnalazione che vengono attivati, un primo passo in reti di segnalazione normale e oncogenica di profilatura.

Immunoaffinity profilatura di fosforilazione della tirosina nelle cellule tumorali.

&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x764C;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x767A;&#x764C;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3068;&#x4E00;&#x90E8;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x4F4E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x4E00;&#x90E8;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;phosphoproteomic&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x6570;&#x5B57;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x6210;&#x5206;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3001;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D88;&#x5316;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x76F4;&#x63A5;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x4E8B;&#x524D;&#x77E5;&#x8B58;&#x304C;&#x306A;&#x304F;&#x3066;&#x3082;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x3068;&#x767A;&#x764C;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;

Tyrosine kinases &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC554;&#xC5D0; &#xB450;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC9C4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC544;&#xC9C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC874; &#xC6B4;&#xC804; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xC77C;&#xBD80; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xACBD;&#xB85C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6E0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; phosphoproteomic &#xBC29;&#xBC95; &#xACF5;&#xAC1C; phosphotyrosine&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xC22B;&#xC790;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; phosphoproteome&#xC758; phosphotyrosine &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xAC15;&#xC870; &#xD558; &#xACE0; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC218;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; phosphotyrosine &#xB4E4;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; phosphotyrosine &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC18C;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120;, &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinases&#xC640; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC804; &#xC9C0;&#xC2DD; &#xC5C6;&#xC774; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; phosphorylated &#xAE30;&#xD310; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC218; &#xC1FC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC140; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC801;&#xC6A9; &#xD55C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xB2E8;&#xACC4;.

Immunoaffinity &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las tirosina quinasas desempe&#xF1;an un papel importante en el c&#xE1;ncer humano, sin embargo, las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n oncog&#xE9;nicas de conducir la proliferaci&#xF3;n celular y la supervivencia han sido dif&#xED;ciles de identificar, en parte debido a la complejidad de las v&#xED;as y en parte debido a los bajos niveles celulares de fosforilaci&#xF3;n de la tirosina. En general, los enfoques globales phosphoproteomic revelan un peque&#xF1;o n&#xFA;mero de p&#xE9;ptidos que contienen fosfotirosina. Hemos desarrollado una estrategia que enfatiza el componente de la fosfotirosina phosphoproteome e identifica un gran n&#xFA;mero de sitios de fosforilaci&#xF3;n de la tirosina. P&#xE9;ptidos que contienen fosfotirosina est&#xE1;n aislados directamente de la proteasa-digeridos extractos de prote&#xED;nas celulares con un anticuerpo espec&#xED;fico de fosfotirosina y se identifican por espectrometr&#xED;a de masas en t&#xE1;ndem. La aplicaci&#xF3;n de este enfoque a los sistemas celulares, incluyendo varias l&#xED;neas celulares cancerosas, muestra que puede ser utilizado para identificar quinasas activadas prote&#xED;nas y sus sustratos fosforilados sin conocimiento previo de las redes de se&#xF1;alizaci&#xF3;n que se activan, un primer paso en perfilar las redes de se&#xF1;alizaci&#xF3;n normales y oncog&#xE9;nico.

Inmunoafinidad perfiles de fosforilaci&#xF3;n de la tirosina en c&#xE9;lulas cancerosas

Our understanding of the mechanisms by which BCR-ABL drives CML is based, in part, on the use of model cell lines such as the K562 cell line. However, the BCR-ABL translocation may occur via a number of different junction points. In addition, CML is a disease of hematopoietic stem cells and, as a result, can give rise to multiple lineages of tumor cells. In this study, we examined the cellular signaling profiles following imatinib mesylate treatment of eight model CML and ALL cell lines that encompass three BCR-ABL junction points and multiple lineages. We used phosphorylation-specific antibodies and flow cytometry to determine the kinase and pathway activation states with each of the cell lines before and after imatinib mesylate exposure. The comparisons of signaling response profiles, junction points and lineages indicate that cell line lineage rather than BCR-ABL junction point may determine cellular response to imatinib mesylate. The large amount of variation observed among the cell lines suggests that further analysis is required to understand the complex signaling profiles present in CML patients.

Evaluation of CML model cell lines and imatinib mesylate response: determinants of signaling profiles.

STAT5 is constitutively phosphorylated in leukemic cells in approximately 70% of acute myeloid leukemia (AML) patients. To identify kinase candidates potentially responsible for STAT5 phosphorylation, we used liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) mass spectrometry to detect phosphoproteins in AML cell lines. We established TEL-ARG and BCR-ABL fusion proteins as the mechanism underlying STAT5 phosphorylation in HT-93 and KBM-3 cells, respectively. In addition, we identified a JAK2 pseudokinase domain mutation in HEL cells and using siRNA downregulation, established JAK2 as the kinase responsible for phosphorylating STAT5. This study illustrates the benefit of LC-MS/MS mass spectrometry and siRNA for the identification of novel targets and mutations.

Phosphoproteomic analysis of AML cell lines identifies leukemic oncogenes.

Bcr-abl &#x878D;&#x5408;&#x6FC0;&#x9176;&#x5728;&#x6162;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; (CML) &#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x6162;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x76EE;&#x524D;&#x6CBB;&#x7597; Abl &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; imatinib&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4F0A;&#x9A6C;&#x66FF;&#x5C3C;&#x8010;&#x5728;&#x75BE;&#x75C5;&#x540E;&#x671F;&#x51FA;&#x73B0;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E; Bcr-abl &#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x8981;&#x83B7;&#x5F97; Bcr-abl &#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6DF1;&#x5165;&#x6D1E;&#x5BDF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178; 6 &#x4F7F;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x4EB2;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x80BD;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x968F;&#x540E;&#x8868;&#x793A; 3 Bcr-abl &#x878D;&#x5408;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; 188 &#x975E;&#x5197;&#x4F59;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D; 77 &#x662F;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x8F83;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E9B;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7F51;&#x7AD9;&#x5171;&#x6709; 6 &#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80CC;&#x666F;&#x548C;&#x878D;&#x5408;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x4F0A;&#x9A6C;&#x66FF;&#x5C3C;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x3002;&#x6B64; Bcr-abl &#x7B7E;&#x540D;&#x4E0E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x793A;&#x66FF;&#x4EE3;&#x4F0A;&#x9A6C;&#x66FF;&#x5C3C;&#x654F;&#x611F;&#x878D;&#x5408;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;FIP1L1-PDGFRalpha&#xFF0C;&#x8BE5;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6FC0;&#x9176;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;Bcr-abl &#x878D;&#x5408;&#x6FC0;&#x9176;&#x6B64; phosphoproteomic &#x7814;&#x7A76;&#x7A81;&#x51FA;&#x4E86;&#x65B0;&#x578B;&#x75BE;&#x75C5;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x548C;&#x6F5C;&#x5728;&#x836F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6DFB;&#x52A0;&#x65B0;&#x578B;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684; Bcr-abl &#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x7624;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

Bcr-abl &#x6FC0;&#x9176;&#x5171;&#x540C;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7B7E;&#x540D;&#x3002;

The Bcr-Abl fusion kinase drives oncogenesis in chronic myeloid leukemia (CML). CML patients are currently treated with the Abl tyrosine kinase inhibitor imatinib, which is effective in early stages of the disease. However, resistance to imatinib arises in later disease stages primarily because of a Bcr-Abl mutation. To gain deeper insight into Bcr-Abl signaling pathways, we generated phosphotyrosine profiles for 6 cell lines that represent 3 Bcr-Abl fusion types by using immunoaffinity purification of tyrosine phosphopeptides followed by tandem mass spectrometry. We identified 188 nonredundant tyrosine-phosphorylated sites, 77 of which are novel. By comparing the profiles, we found a number of phosphotyrosine sites common to the 6 cell lines regardless of cellular background and fusion type, several of which are decreased by imatinib treatment. Comparison of this Bcr-Abl signature with the profile of cells expressing an alternative imatinib-sensitive fusion kinase, FIP1L1-PDGFRalpha, revealed that these kinases signal through different pathways. This phosphoproteomic study of the Bcr-Abl fusion kinase highlights novel disease markers and potential drug-responsive biomarkers and adds novel insight into the oncogenic signals driven by the Bcr-Abl kinase.

A common phosphotyrosine signature for the Bcr-Abl kinase.

La kinase de fusion Bcr-Abl conduit oncogen&#xE8;se dans la leuc&#xE9;mie my&#xE9;lo&#xEF;de chronique (LMC). Patients atteints de LMC sont actuellement trait&#xE9;s par l&#x26;#39;Abl tyrosine kinase imatinib, qui est efficace dans les stades pr&#xE9;coces de la maladie. Cependant, la r&#xE9;sistance &#xE0; l&#x26;#39;imatinib se pose dans les stades avanc&#xE9; de la maladie principalement en raison d&#x26;#39;une mutation de Bcr-Abl. Pour approfondir la connaissance dans Bcr-Abl voies de signalisation, nous avons g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; des profils phosphotyrosine pour 6 lign&#xE9;es cellulaires qui repr&#xE9;sentent 3 types de fusion Bcr-Abl &#xE0; l&#x26;#39;aide de la purification d&#x26;#39;immunoaffinit&#xE9; de phosphopeptides tyrosine suivie par spectrom&#xE9;trie de masse en tandem. Nous avons identifi&#xE9; 188 non redondantes tyrosine-phosphoryl&#xE9;s sites, dont 77 sont nouveaux. En comparant les profils, nous avons trouv&#xE9; un certain nombre de sites phosphotyrosine communs aux 6 lign&#xE9;es de cellules ind&#xE9;pendamment de leur origine cellulaire et le type de fusion, dont plusieurs sont diminu&#xE9;s par un traitement par imatinib. La comparaison de cette signature Bcr-Abl avec le profil des cellules exprimant une kinase de fusion de remplacement &#xE0; l&#x26;#39;imatinib sensibles, FIP1L1-PDGFRalpha, a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que ces kinases signal &#xE0; travers diff&#xE9;rentes voies. Cette &#xE9;tude phosphoproteomic de la kinase de fusion Bcr-Abl souligne marqueurs de maladies nouvelles et potentielles des m&#xE9;dicaments sensibles au biomarqueurs et ajoute un nouvel aper&#xE7;u des signaux oncog&#xE8;nes entra&#xEE;n&#xE9;s par la kinase Bcr-Abl.

Une signature commune Phosphotyrosine pour la kinase Bcr-Abl

Das Bcr-Abl-Fusion-Kinase f&auml;hrt Onkogenese in chronische myeloische Leuk&auml;mie (CML). CML-Patienten sind derzeit mit der Abl Tyrosin-Kinase-Inhibitor Imatinib behandelt die in fr&uuml;hen Stadien der Krankheit wirksam ist. Allerdings stellt sich die Resistenz gegen Imatinib in sp&auml;teren Krankheitsstadien vor allem wegen eines Bcr-Abl-Mutationen. Um tieferen Einblick in die Bcr-Abl-Signalwege, generierten wir Phosphotyrosine Profile f&uuml;r 6 Zelllinien, die 3 Arten von Bcr-Abl-Fusion mit Immunoaffinity Reinigung von Tyrosin-Phosphopeptides gefolgt von Tandem-Massenspektrometrie darstellen. Wir haben 188 nicht redundantes Tyrosin-phosphoryliert Websites, von die 77 Roman sind identifiziert. Durch den Vergleich der Profile, fanden wir eine Anzahl von Phosphotyrosine Websites &uuml;blich, die 6-Zellen-Linien unabh&auml;ngig von zellul&auml;ren Hintergrund und Fusion-Typ, von die mehrere durch Imatinib-Behandlung verringert werden. Vergleich dieser Bcr-Abl-Signatur mit dem Profil der Zellen auszudr&uuml;cken eine alternative Imatinib-Sensitive-Fusion-Kinase, FIP1L1-PDGFRalpha, ergab, dass diese Kinasen auf verschiedenen Wegen zu signalisieren. Phosphoproteomic Studie der Bcr-Abl-Fusion-Kinase highlights Roman Krankheitsmarker und m&ouml;gliche Droge-responsive Biomarker und f&uuml;gt neue Einblicke in die Onkogene Signale, getrieben von der Bcr-Abl-Kinase.

Eine gemeinsame Phosphotyrosine Signatur f&uuml;r das Bcr-Abl-Kinase.

La chinasi di fusione Bcr-Abl unit&agrave; oncogenesi nella leucemia mieloide cronica (CML). CML pazienti sono attualmente trattati con l&#39;imatinib Abl tirosin chinasi inibitore, che &egrave; efficace nelle fasi iniziali della malattia. Tuttavia, resistenza a imatinib si pone nelle successive fasi di malattia, principalmente a causa di una mutazione Bcr-Abl. Per ottenere l&#39;approfondimento in Bcr-Abl signaling pathways, abbiamo generato phosphotyrosine profili per 6 linee cellulari che rappresentano 3 tipi di fusione Bcr-Abl utilizzando immunoaffinity purificazione della tirosina fosfopeptidi seguita dalla spettrometria di massa tandem. Abbiamo identificato 188 nonredundant siti tirosina fosforilata, 77 dei quali sono il romanzo. Confrontando i profili, abbiamo trovato un certo numero di siti di phosphotyrosine comuni alle linee 6 celle indipendentemente dal cellulare sfondo e il tipo di fusione, molte delle quali sono diminuiti da trattamento di imatinib. Confronto di questa firma di Bcr-Abl con il profilo di cellule che esprimono una chinasi alternativo fusion imatinib-sensibili, FIP1L1-PDGFRalpha, ha rivelato che queste chinasi segnalano attraverso percorsi diversi. Questo studio phosphoproteomic della chinasi Bcr-Abl fusione di highlights marcatori di malattia nuovi e potenziali biomarcatori farmaco-sensibile e aggiunge nuovi insight in segnali oncogeni guidato dalla chinasi Bcr-Abl.

Una comune phosphotyrosine firma per la chinasi Bcr-Abl.

bcr-abl&#x878D;&#x5408;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x6162;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#xFF08;CML&#xFF09;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x764C;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; CML&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x6709;&#x52B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;Abl&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30A4;&#x30DE;&#x30C1;&#x30CB;&#x30D6;&#x3067;&#x6CBB;&#x7642;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30DE;&#x30C1;&#x30CB;&#x30D6;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;Bcr-Abl&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Bcr-Abl&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3078;&#x306E;&#x6DF1;&#x3044;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;3 bcr-abl&#x878D;&#x5408;&#x578B;&#x3092;&#x8868;&#x3059;6&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x3067;77&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;188&#x5197;&#x9577;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A4;&#x30DE;&#x30C1;&#x30CB;&#x30D6;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x643A;&#x5E2F;&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#x3068;&#x878D;&#x5408;&#x578B;&#x306E;6&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5171;&#x901A;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30C1;&#x30CB;&#x30D6;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x878D;&#x5408;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;FIP1L1-PDGFRalpha&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3053;&#x306E;Bcr-Abl&#x306E;&#x7F72;&#x540D;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002; bcr-abl&#x878D;&#x5408;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x3053;&#x306E;phosphoproteomic&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x75BE;&#x60A3;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x85AC;&#x7269;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3001;Bcr-Abl&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

BCR-ABL&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x7F72;&#x540D;

Bcr Abl &#xC735;&#xD569; &#xB2C8; &#xB9CC;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; (CML)&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC554;&#xC744; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;. CML &#xD658;&#xC790;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC;&#xB294; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; Abl tyrosine kinase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; imatinib&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, imatinib&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xD6C4;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; Bcr Abl &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bcr Abl &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB354; &#xAE4A;&#xC740; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74;, &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphopeptides &#xB4A4;&#xC5D0; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; immunoaffinity &#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; 3 Bcr Abl &#xD4E8;&#xC804; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; 6 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; phosphotyrosine &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 188 &#xBE44;&#xC911;&#xBCF5; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; 77&#xC740; &#xC18C;&#xC124;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC911; &#xBA87; &#xAC1C;&#xB294; imatinib &#xCE58;&#xB8CC; &#xAC10;&#xC18C;&#xB294; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xBC30;&#xACBD;&#xACFC; &#xD4E8;&#xC804; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; 6 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xACF5;&#xD1B5; phosphotyrosine &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC218; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB300;&#xCCB4; imatinib&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xD4E8;&#xC804; kinase, FIP1L1 Pdgfralpha&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xACFC;&#xC774; Bcr Abl &#xC11C;&#xBA85;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; kinases &#xB2E4;&#xB978; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. Bcr Abl &#xC735;&#xD569; kinase&#xC758; phosphoproteomic &#xC5F0;&#xAD6C;&#xAC00; &#xC18C;&#xC124; &#xC9C8;&#xD658; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xBC0F; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC18;&#xC751; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xACE0; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; Bcr Abl kinase&#xC5D0; &#xD798;&#xC785;&#xC5B4; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xCD94;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Bcr Abl &#xD0A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; phosphotyrosine &#xC11C;&#xBA85;.

La fusi&#xF3;n de la cinasa Bcr-Abl impulsa la oncog&#xE9;nesis en la leucemia mieloide cr&#xF3;nica (LMC). Pacientes con LMC se tratan actualmente con la Abl tirosina kinasa inhibidor imatinib, que es eficaz en las primeras etapas de la enfermedad. Sin embargo, la resistencia a imatinib se plantea en posteriores estadios de la enfermedad sobre todo a causa de una mutaci&#xF3;n Bcr-Abl. Para tener una visi&#xF3;n m&#xE1;s profunda de Bcr-Abl v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, se generaron perfiles fosfotirosina por 6 l&#xED;neas de c&#xE9;lulas que representan 3 Bcr-Abl tipos de fusi&#xF3;n mediante el uso de purificaci&#xF3;n por inmunoafinidad de fosfop&#xE9;ptidos tirosina seguido por espectrometr&#xED;a de masas en t&#xE1;ndem. Se identificaron 188 nonredundant tirosina fosforilados sitios, de las cuales 77 son nuevos. Mediante la comparaci&#xF3;n de los perfiles, nos encontramos con una serie de sitios fosfotirosina comunes a las 6 l&#xED;neas celulares independientemente de su origen celular y el tipo de fusi&#xF3;n, varios de los cuales son disminuidos por el tratamiento con imatinib. La comparaci&#xF3;n de esta firma de Bcr-Abl con el perfil de las c&#xE9;lulas que expresan una alternativa al imatinib quinasa sensible a la fusi&#xF3;n, FIP1L1-PDGFRalpha, revel&#xF3; que estas quinasas se&#xF1;al a trav&#xE9;s de diferentes v&#xED;as. Este estudio phosphoproteomic de la quinasa de fusi&#xF3;n Bcr-Abl se destacan nuevos marcadores de enfermedad y posibles marcadores biol&#xF3;gicos de drogas sensibles y a&#xF1;ade nuevas luces en las se&#xF1;ales oncog&#xE9;nicas impulsadas por la cinasa Bcr-Abl.

A la firma que la fosfotirosina cinasa Bcr-Abl

Tyrosinkinasen sind abnorm zahlreiche Krebserkrankungen, einschlie&szlig;lich akuten myeloischen Leuk&auml;mie (AML) aktiviert. Ermittlung von Tyrosinkinasen aktiviert in AML, entwickelten wir eine Screening-Strategie, die Tyrosin-phosphoryliert Proteine mit Massenspektrometrie schnell identifiziert. Dies erlaubt die Identifizierung eine aktivierende Mutation (A572V) im Bereich Pseudokinase JAK3 in die akute megachorioblaste Leuk&auml;mie (AMKL)-Zelllinie CMK. Nachfolgende Analyse identifiziert zwei zus&auml;tzliche JAK3 Allele, V722I und P132T, bei AMKL Patienten. JAK3(A572V), JAK3(V722I) und JAK3(P132T) jede Transformation Ba F3 zu Wachstum Faktor-unabh&auml;ngige Zellen und JAK3(A572V) &uuml;bertr&auml;gt Features von Megakaryoblastic Leuk&auml;mie in einem murinen Modell. Diese Befunde zeigen die biologische Bedeutung der Gain of Function JAK3 Mutationen im Leukemogenesis und das Dienstprogramm Proteomic Ans&auml;tze zur Identifizierung von klinisch relevanter Mutations zu demonstrieren.

Aktivierung der Allele von JAK3 in akuten Megakaryoblastic Leuk&auml;mie.

&#x5728;&#x4F17;&#x591A;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x6025;&#x6027;&#x9AD3;&#x7CFB;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; (AML) &#x95ED;&#x5408;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x5728;&#x53CD;&#x6D17;&#x94B1;&#x4E2D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x7B5B;&#x9009;&#x6218;&#x7565;&#x5FEB;&#x901F;&#x6807;&#x8BC6;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8D28;&#x8C31;&#x3002;&#x8FD9;&#x5141;&#x8BB8; JAK3 &#x5047;&#x6FC0;&#x9176;&#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684; megakaryoblastic &#x6025;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; (AMKL) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x897F;&#x9EA6;&#x514B;&#x6D3B;&#x5316;&#x7A81;&#x53D8; (A572V) &#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E24;&#x4E2A;&#x989D;&#x5916; JAK3 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;V722I &#x548C; P132T&#xFF0C;AMKL &#x60A3;&#x8005;&#x3002;JAK3(A572V)&#x3001; JAK3(V722I) &#x548C; JAK3(P132T) &#x6BCF;&#x4E2A;&#x53D8;&#x6362; Ba/F3 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x548C; JAK3(A572V) &#x8D4B;&#x4E88; megakaryoblastic &#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BF4;&#x660E;&#x589E;&#x76CA;&#x7684;&#x51FD;&#x6570; JAK3 &#x7A81;&#x53D8;&#x5728;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x53CA;&#x8BC1;&#x660E;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x76F8;&#x5173;&#x7A81;&#x53D8;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x6FC0;&#x6D3B; megakaryoblastic &#x6025;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; JAK3 &#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;

Tyrosine kinases are aberrantly activated in numerous malignancies, including acute myeloid leukemia (AML). To identify tyrosine kinases activated in AML, we developed a screening strategy that rapidly identifies tyrosine-phosphorylated proteins using mass spectrometry. This allowed the identification of an activating mutation (A572V) in the JAK3 pseudokinase domain in the acute megakaryoblastic leukemia (AMKL) cell line CMK. Subsequent analysis identified two additional JAK3 alleles, V722I and P132T, in AMKL patients. JAK3(A572V), JAK3(V722I), and JAK3(P132T) each transform Ba/F3 cells to factor-independent growth, and JAK3(A572V) confers features of megakaryoblastic leukemia in a murine model. These findings illustrate the biological importance of gain-of-function JAK3 mutations in leukemogenesis and demonstrate the utility of proteomic approaches to identifying clinically relevant mutations.

Activating alleles of JAK3 in acute megakaryoblastic leukemia.

Tyrosine kinases sont aberrante activ&#xE9; dans les tumeurs malignes de nombreux, y compris la leuc&#xE9;mie my&#xE9;lo&#xEF;de aigu&#xEB; (LMA). Pour identifier les tyrosine kinases activ&#xE9;es dans les LAM, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une strat&#xE9;gie de d&#xE9;pistage qui identifie rapidement la tyrosine-phosphoryl&#xE9;s des prot&#xE9;ines par spectrom&#xE9;trie de masse. Cela a permis l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;une mutation activatrice (A572V) dans le domaine JAK3 pseudokinase dans la leuc&#xE9;mie aigu&#xEB; m&#xE9;gacaryoblastique (AMKL) de la lign&#xE9;e cellulaire CMK. Une analyse ult&#xE9;rieure a identifi&#xE9; deux autres JAK3 all&#xE8;les, V722I et P132T, chez les patients AMKL. JAK3 (A572V), JAK3 (V722I), et JAK3 (P132T) chaque transformer des cellules Ba/F3 au facteur ind&#xE9;pendant de la croissance, et JAK3 (A572V) conf&#xE8;re des caract&#xE9;ristiques de la leuc&#xE9;mie m&#xE9;gacaryoblastique dans un mod&#xE8;le murin. Ces r&#xE9;sultats illustrent l&#x26;#39;importance biologique de gain de fonction JAK3 mutations dans la leuc&#xE9;mogen&#xE8;se et de d&#xE9;montrer l&#x26;#39;utilit&#xE9; des approches prot&#xE9;omiques &#xE0; l&#x26;#39;identification de mutations cliniquement pertinentes.

All&#xE8;les Activation de JAK3 dans la leuc&#xE9;mie aigu&#xEB; m&#xE9;gacaryoblastiques

Chinasi della tirosina vengono attivate in modo anomalo in numerose neoplasie, tra cui la leucemia mieloide acuta (AML). Per identificare le chinasi tirosina attivate in AML, abbiamo sviluppato una strategia di screening che identifica rapidamente le proteine tirosina fosforilata mediante spettrometria di massa. Questo ha permesso l&#39;identificazione di una mutazione attiva (A572V) nel dominio pseudokinase JAK3 nella linea cellulare (AMKL) la leucemia acuta megacarioblastica CMK. Successive analisi identificato due ulteriori JAK3 alleli, V722I e P132T, in pazienti AMKL. JAK3(A572V), JAK3(V722I) e JAK3(P132T) ogni trasformazione Ba/F3 cellule indipendenti dal fattore di crescita, e JAK3(A572V) conferisce caratteristiche di leucemia megacarioblastica in un modello murino. Questi risultati illustrano l&#39;importanza biologica delle mutazioni JAK3 guadagno di funzione in leukemogenesis e dimostrano l&#39;utilit&agrave; degli approcci di proteomica per identificare mutazioni clinicamente rilevanti.

Attivando gli alleli di JAK3 nella leucemia acuta megacarioblastica.

&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x5E38;&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#xFF08;AML&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x60AA;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; AML&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x6027;&#x5DE8;&#x6838;&#x82BD;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#xFF08;AMKL&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;CMK&#x306B;JAK3 pseudokinase&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;A572V&#xFF09;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;AMKL&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;JAK3&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;V722I&#x3068;P132T&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; JAK3&#xFF08;A572V&#xFF09;&#x3001;JAK3&#xFF08;V722I&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;JAK3&#xFF08;P132T&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5404;&#x56E0;&#x5B50;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;Ba/F3&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3057;&#x3001;JAK3&#xFF08;A572V&#xFF09;&#x304C;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x5DE8;&#x6838;&#x82BD;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4ED8;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x578B;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3067;JAK3&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x7684;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6025;&#x6027;&#x5DE8;&#x6838;&#x82BD;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3067;JAK3&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;

Tyrosine kinases aberrantly &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; (AML)&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; tyrosine kinases &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xC804;&#xB7B5; &#xAC1C;&#xBC1C;. Megakaryoblastic &#xAE09;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; (AMKL) &#xC140; &#xB77C;&#xC778; CMK JAK3 pseudokinase &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (A572V)&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xD6C4; &#xBD84;&#xC11D; &#xB450; &#xCD94;&#xAC00; JAK3 &#xB300;&#xB9BD;, V722I &#xBC0F; P132T, AMKL &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xAC01; &#xBCC0;&#xD658; &#xD559;&#xC0AC;/f 3 &#xC140; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; JAK3(A572V), JAK3(V722I), &#xBC0F; JAK3(P132T) &#xBC0F; JAK3(A572V) megakaryoblastic &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; murine &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218; &#xC5EC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; leukemogenesis&#xC5D0;&#xC11C; &#xD568;&#xC218; &#xC774;&#xB4DD; JAK3 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2DD;&#xBCC4; proteomic &#xBC29;&#xC2DD;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Megakaryoblastic &#xAE09;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; jak3&#xC758; &#xB300;&#xB9BD;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las tirosina quinasas son aberrantemente activado en numerosas neoplasias como la leucemia mieloide aguda (LMA). Para identificar las tirosina quinasas activadas en la LMA, hemos desarrollado una estrategia de cribado que r&#xE1;pidamente identifica tirosina fosforilados prote&#xED;nas mediante espectrometr&#xED;a de masas. Esto permiti&#xF3; la identificaci&#xF3;n de una mutaci&#xF3;n activadora (A572V) en el dominio JAK3 pseudokinase en la leucemia aguda megacariobl&#xE1;stica (LMCA) l&#xED;nea celular de CMK. Tras el an&#xE1;lisis se identificaron dos adicionales Jak3 alelos, V722I y P132T, en pacientes LMCA. JAK3 (A572V), JAK3 (V722I), y JAK3 (P132T) cada transformar c&#xE9;lulas Ba/F3 al factor de crecimiento independiente y JAK3 (A572V) confiere caracter&#xED;sticas de la leucemia megacariobl&#xE1;stica en un modelo murino. Estos resultados ilustran la importancia biol&#xF3;gica de ganancia de funci&#xF3;n de mutaciones en Jak3 leucemog&#xE9;nesis y demostrar la utilidad de la prote&#xF3;mica a la identificaci&#xF3;n de mutaciones cl&#xED;nicamente relevantes.

Activaci&#xF3;n de los alelos de JAK3 en la leucemia aguda megacariobl&#xE1;stica

&#x5E72;&#x6270;&#x4F0A;&#x9A6C;&#x66FF;&#x5C3C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684; Bcr-abl &#x6FC0;&#x9176;&#x57DF; (&#x79D1;&#x5A01;&#x7279;&#x7B2C;&#x7EB3;&#x5C14;) &#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x540E;&#x5929;&#x4F0A;&#x9A6C;&#x66FF;&#x5C3C;&#x8010;&#x836F;&#x7684;&#x8D39;&#x57CE;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684; ATP &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5FAA;&#x73AF; &#xFF08;p-&#x73AF;&#x8DEF;&#xFF09; &#x5DF2;&#x4E0E;&#x9884;&#x540E;&#x4E0D;&#x826F;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E94;&#x4E2A;&#x5E38;&#x89C1; KD &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5404;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x68C0;&#x5B9A;&#x7684;&#x8F6C;&#x6362;&#x6548;&#x80FD;&#x3002;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E; unmutated &#xFF08;&#x672C;&#x673A;&#xFF09; Bcr-abl&#xFF0C;ATP &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; Y253F &#x548C; E255K &#x5C55;&#x51FA;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8F6C;&#x6362;&#x6548;&#x80FD;&#x3001; M351T &#x548C; H396P &#x662F;&#x4E0D;&#x662F;&#x5F88;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x548C; T315I &#x7684;&#x6027;&#x80FD;&#x662F;&#x4ECE;&#x5C5E;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;Y253F &#x548C; M351T &#x7684;&#x8F6C;&#x6362;&#x6548;&#x80FD;&#x4E0E;&#x5185;&#x5728; Bcr-abl &#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x800C; E255K&#x3001; H396P&#x3001; &#x548C; T315I &#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0D;&#x5C06;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5316;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x989D;&#x5916;&#x56E0;&#x7D20;&#x5F71;&#x54CD;&#x8F6C;&#x6362;&#x6548;&#x80FD;&#x5173;&#x8054;&#x8D77;&#x6765;&#x3002;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x9274;&#x522B;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6539;&#x53D8;&#x5E95;&#x7269;&#x4E13;&#x4E00;&#x6027;&#x548C;&#x901A;&#x8DEF;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;Bcr-abl &#x79D1;&#x5A01;&#x7279;&#x7B2C;&#x7EB3;&#x5C14;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4EE5;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6536;&#x76CA;&#x6216;&#x635F;&#x5931;-&#x7684;-&#x529F;&#x80FD;&#x53D8;&#x5F02;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x62B5;&#x6297;&#x548C;&#x8F6C;&#x6362;&#x6548;&#x80FD;&#x53EF;&#x80FD;&#x786E;&#x5B9A; Abl &#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

Bcr-abl &#x6FC0;&#x9176;&#x57DF;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5C55;&#x73B0;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x8F6C;&#x6362;&#x6548;&#x80FD;&#x3001; &#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x5E95;&#x7269;&#x5229;&#x7528;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8BBA;&#x5BF9;&#x4F0A;&#x9A6C;&#x66FF;&#x5C3C;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;

Kinase domain (KD) mutations of Bcr-Abl interfering with imatinib binding are the major mechanism of acquired imatinib resistance in patients with Philadelphia chromosome-positive leukemia. Mutations of the ATP binding loop (p-loop) have been associated with a poor prognosis. We compared the transformation potency of five common KD mutants in various biological assays. Relative to unmutated (native) Bcr-Abl, the ATP binding loop mutants Y253F and E255K exhibited increased transformation potency, M351T and H396P were less potent, and the performance of T315I was assay dependent. The transformation potency of Y253F and M351T correlated with intrinsic Bcr-Abl kinase activity, whereas the kinase activity of E255K, H396P, and T315I did not correlate with transforming capabilities, suggesting that additional factors influence transformation potency. Analysis of the phosphotyrosine proteome by mass spectroscopy showed differential phosphorylation among the mutants, a finding consistent with altered substrate specificity and pathway activation. Mutations in the KD of Bcr-Abl influence kinase activity and signaling in a complex fashion, leading to gain- or loss-of-function variants. The drug resistance and transformation potency of mutants may determine the outcome of patients on therapy with Abl kinase inhibitors.

Kinase domain mutants of Bcr-Abl exhibit altered transformation potency, kinase activity, and substrate utilization, irrespective of sensitivity to imatinib.

Les mutations de domaine (KD) kinase de Bcr-Abl interf&egrave;re avec la liaison de l&#39;imatinib sont le principal m&eacute;canisme de r&eacute;sistance acquise imatinib chez les patients atteints de leuc&eacute;mie chromosome Philadelphie. Des mutations de la boucle de liaison ATP (boucle p) ont &eacute;t&eacute; associ&eacute;es &agrave; un mauvais pronostic. Nous avons compar&eacute; l&#39;activit&eacute; de transformation de cinq mutants de KD communs dans divers dosages biologiques. Par rapport &agrave; unmutated Bcr-Abl (native), les mutants de boucle de liaison ATP Y253F et E255K expos&eacute; puissance de transformation accrue, M351T et H396P &eacute;taient moins puissants et la performance de T315I &eacute;tait d&eacute;pendante de dosage. L&#39;activit&eacute; de transformation de Y253F et M351T en corr&eacute;lation avec l&#39;activit&eacute; intrins&egrave;que de la kinase Bcr-Abl, tandis que l&#39;activit&eacute; de la kinase de T315I, H396P et E255K n&#39;est pas corr&eacute;l&eacute; avec la transformation des capacit&eacute;s, ce qui laisse supposer que d&#39;autres facteurs influencent puissance de transformation. Analyse du prot&eacute;ome phosphotyrosine par spectrom&eacute;trie de masse a montr&eacute; la phosphorylation diff&eacute;rentielle parmi les mutants, une conclusion conforme &agrave; la sp&eacute;cificit&eacute; de substrat alt&eacute;r&eacute;e et l&#39;activation de la voie. Des mutations dans le KD de Bcr-Abl influencent l&#39;activit&eacute; kinase et la signalisation d&#39;une mani&egrave;re complexe, conduisant &agrave; des variantes de gain - ou perte de fonction. La puissance de r&eacute;sistance et de la transformation des drogues de mutants peut-&ecirc;tre d&eacute;terminer le r&eacute;sultat des patients sous traitement avec des inhibiteurs de kinase Abl.

Mutants de domaine kinase de Bcr-Abl pi&egrave;ce puissance de transformation alt&eacute;r&eacute;e, activit&eacute; kinase et utilisation de substrats, quelle que soit la sensibilit&eacute; &agrave; l&#39;imatinib.

Kinase-Dom&auml;ne (KD)-Mutationen des Bcr-Abl-Anrufnotizen Imatinib Bindung sind der Hauptmechanismus der erworbenen Imatinib Widerstand bei Patienten mit Philadelphia-Chromosom-positiver-Leuk&auml;mie. Mutationen der ATP-Bindung-Schleife (p-Loop) haben mit einer schlechten Prognose assoziiert. Wir verglichen die Transformation-Potenz der f&uuml;nf gemeinsamen KD-Mutanten in verschiedenen biologischen Proben. Vergleich zu unmutated (native) Bcr-Abl, die ATP-Bindung Schleife Mutanten, Y253F und E255K stellte erh&ouml;hte Transformation Potenz, M351T und H396P waren weniger potenten und die Leistung der T315I war Assay abh&auml;ngig. Die Transformation-Wirksamkeit von Y253F und M351T korreliert mit systeminternen Bcr-Abl-Kinase-Aktivit&auml;t, w&auml;hrend die Kinaseaktivit&auml;t von E255K, H396P und T315I Umgestaltung F&auml;higkeiten, was darauf hindeutet, dass zus&auml;tzliche Faktoren beeinflussen die Transformation Potenz keine Entsprechungen. Die Phosphotyrosine Proteome von Massenspektroskopie zeigte differenzielle Phosphorylierung unter den Mutanten mit ver&auml;nderten Substratspezifit&auml;t und Stoffwechselweg Aktivierung Feststellung. Mutationen in der KD von Bcr-Abl beeinflussen Kinase-Aktivit&auml;t und Signalisierung auf komplexe Weise zu Gewinn oder Verlust-of Function Varianten. Die Droge-Widerstand und Transformation-Potenz der Mutanten kann das Ergebnis der Patienten auf die Therapie mit Abl-Kinase-Inhibitoren bestimmen.

Kinase-Dom&auml;ne-Mutanten von Bcr-Abl weisen ver&auml;nderte Transformation Potenz, Kinaseaktivit&auml;t und Substrat Auslastung, unabh&auml;ngig von der Empfindlichkeit gegen&uuml;ber Imatinib.

Chinasi dominio (KD) mutazioni di Bcr-Abl, interferendo con l&#39;associazione imatinib sono il meccanismo principale della resistenza acquisita imatinib nei pazienti con leucemia positivo cromosoma Philadelphia. Mutazioni del ciclo associazione ATP (p loop) sono state associate con una prognosi infausta. Abbiamo confrontato la potenza di trasformazione di cinque comuni mutanti KD in vari saggi biologici. Relativo a unmutated Bcr-Abl (nativo), i mutanti ATP binding loop Y253F ed E255K esposto trasformazione maggiore potenza, M351T e H396P erano meno potenti, e le prestazioni di T315I erano dipendente dal dosaggio. La potenza di trasformazione di Y253F e M351T correlata con attivit&agrave; intrinseca della chinasi Bcr-Abl, considerando che l&#39;attivit&agrave; della chinasi di E255K, H396P e T315I non correlare con trasformando le capacit&agrave;, suggerendo che altri fattori influenzano potenza di trasformazione. Analisi del proteoma phosphotyrosine dalla spettroscopia di massa ha mostrato la fosforilazione differenziale tra i mutanti, una ricerca coerenza con la specificit&agrave; di substrato alterato e l&#39;attivazione di pathway. Mutazioni in KD di Bcr-Abl influenzano l&#39;attivit&agrave; della chinasi e segnalazione in modo complesso, che conduce alle varianti di guadagno o perdita-di-funzione. La potenza di farmaco resistenza e trasformazione dei mutanti possa determinare l&#39;esito dei pazienti in terapia con inibitori della chinasi Abl.

Mutanti dominio chinasi di Bcr-Abl esibiscono alterata trasformazione potenza, l&#39;attivit&agrave; della chinasi e l&#39;utilizzo di substrato, a prescindere dalla sensibilit&agrave; all&#39;imatinib.

&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; (KD) &#x5909;&#x7570; Bcr-abl &#x30A4;&#x30DE;&#x30C1;&#x30CB;&#x30D6; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x5E72;&#x6E09;&#x306E;&#x8CB7;&#x53CE;&#x3057;&#x305F;&#x30A4;&#x30DE;&#x30C1;&#x30CB;&#x30D6;&#x62B5;&#x6297;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30C7;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30A2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x967D;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;ATP &#x7D50;&#x5408;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; (p-&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;) &#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x4E88;&#x5F8C;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;5 &#x3064;&#x306E;&#x5171;&#x901A; KD &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7E04;&#x5F35;&#x308A; (&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;) Bcr-abl &#x306B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A; ATP &#x7D50;&#x5408;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5909;&#x7570; Y253F &#x3068; E255K &#x5897;&#x52A0;&#x5909;&#x63DB;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30FC;&#x5C55;&#x793A;&#x3001;M351T &#x3068; H396P &#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x3068; T315I &#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;E255K&#x3001;H396P&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; T315I &#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x4F5C;&#x696D;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x5909;&#x63DB;&#x52B9;&#x529B;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; Y253F &#x3068; M351T &#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x52B9;&#x529B;&#x56FA;&#x6709; Bcr-Abl &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3002;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x5DEE;&#x52D5;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x57FA;&#x8CEA;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3068;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x7570; Bcr-Abl &#x306E; KD &#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068; - &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x640D;&#x5931;-&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x5909;&#x7A2E;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x85AC;&#x5264;&#x62B5;&#x6297;&#x5909;&#x63DB;&#x80FD; Abl &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x4F75;&#x7528;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Bcr-Abl &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5909;&#x63DB;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30FC;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x57FA;&#x677F;&#x4F7F;&#x7528;&#x7387;&#x30A4;&#x30DE;&#x30C1;&#x30CB;&#x30D6;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x5EA6;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x304F;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Bcr Abl imatinib &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558; &#xB2C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (KD) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD544;&#xB77C;&#xB378;&#xD53C;&#xC544; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC591;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD68D;&#xB4DD;&#xB41C; imatinib &#xC800;&#xD56D;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. ATP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB8E8;&#xD504; (&#xB8E8;&#xD504; p)&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; &#xC608; &#xD6C4;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; 5 &#xBA85;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; KD &#xBBA4;&#xD134;&#xD2B8; &#xBCC0;&#xD658; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xBE44;&#xAD50;. Unmutated (&#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C;) Bcr Abl &#xC0C1;&#xB300; ATP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB8E8;&#xD504; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; Y253F &#xBC0F; E255K &#xC804;&#xC2DC; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCC0;&#xD658; &#xD798; &#xD558; &#xACE0; M351T &#xBC0F; H396P &#xB35C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4; t315i&#xC758; &#xC131;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;&#xC5D0; E255K, H396P, &#xBC0F; T315I &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBCC0;&#xD658; &#xAE30;&#xB2A5;, &#xCD94;&#xAC00; &#xC694;&#xC18C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD798; &#xC601;&#xD5A5; &#xC81C;&#xC548; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; y253f&#xC640; m351t&#xC758; &#xBCC0;&#xD658; &#xD798; &#xB0B4;&#xC7A5; Bcr Abl &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00;. &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; phosphotyrosine &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634; &#xBD84;&#xC11D; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC911; &#xCC3E;&#xB294; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xAE30;&#xC9C8; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xBC0F; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; Bcr Abl&#xC758; KD&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC774;&#xB4DD; &#xB610;&#xB294; &#xC190;&#xC2E4;-&#xC758;-&#xAE30;&#xB2A5; &#xC774;&#xCCB4;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD; &#xC2E0;&#xD638; &#xC601;&#xD5A5;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC800;&#xD56D; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xD658; &#xD798; Abl kinase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xACB0;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Bcr Abl&#xC758; &#xB2C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC804;&#xC2DC; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD798;, &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; imatinib&#xC5D0; &#xAC10;&#xB3C4; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xAE30;&#xD310; &#xC0AC;&#xC6A9;.

Las mutaciones de dominio (KD) de cinasa de Bcr-Abl interferir con imatinib enlace son el principal mecanismo de resistencia adquirida de imatinib en pacientes con leucemia cromosoma-positiva de Philadelphia. Mutaciones del lazo de uni&oacute;n de ATP (p-bucle) se han asociado con un pron&oacute;stico pobre. Comparamos la potencia de transformaci&oacute;n de cinco mutantes de KD com&uacute;n en varios ensayos biol&oacute;gicos. Comparado con unmutated (nativa) Bcr-Abl, los mutantes de lazo de uni&oacute;n de ATP Y253F y E255K exhibieron mayor transformaci&oacute;n potencia, M351T y H396P fueron menos potente y el rendimiento de T315I era dependiente del ensayo. La potencia de la transformaci&oacute;n de Y253F y M351T se correlaciona con actividad intr&iacute;nseca del quinasa Bcr-Abl, mientras que la actividad de la quinasa de E255K, H396P y T315I no se correlacion&oacute; con la transformaci&oacute;n de las capacidades, lo que sugiere que otros factores influyen en potencia de transformaci&oacute;n. El an&aacute;lisis del proteoma phosphotyrosine por espectrometr&iacute;a de masas demostr&oacute; fosforilaci&oacute;n diferencial entre los mutantes, un hallazgo consistente con la especificidad de sustrato alterado y activaci&oacute;n de la v&iacute;a. Las mutaciones en el KD de Bcr-Abl influencian quinasa y se&ntilde;alizaci&oacute;n de manera compleja, llevando a las variantes de la ganancia o p&eacute;rdida de funci&oacute;n. La potencia de resistencia y transformaci&oacute;n de drogas de mutantes puede determinar el resultado de los pacientes en terapia con inhibidores de la cinasa de Abl.

Mutantes de dominio quinasa de Bcr-Abl exhiben potencia de transformaci&oacute;n alterada, quinasa y la utilizaci&oacute;n de sustrato, independientemente de su sensibilidad al imatinib.

8 P 11 &#x9AA8;&#x9AD3;&#x589E;&#x751F;&#x5F02;&#x5E38;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; (EMS) &#x662F;&#x6270;&#x4E71; FGFR1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6613;&#x4F4D;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A; FGFR1 8 &#x878D;&#x5408;&#x4F19;&#x4F34;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x53D1;&#x73B0;&#x5305;&#x542B;&#x4EFB;&#x4F55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7B5B;&#x9009;&#x672C;&#x6784;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; STAT5 &#x8D85;&#x8FC7; 40 &#x6025;&#x6027;&#x9AD3;&#x7CFB;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x548C;&#x5E94;&#x7528;&#x5206;&#x6790;&#x7B56;&#x7565;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x516C;&#x65A4; 1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x514D;&#x75AB;&#x4EB2;&#x548C;&#x3002;&#x5343;&#x514B;-1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x5F02;&#x5E38;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; FGFR1&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x878D;&#x5408;&#x7684; FGFR1OP2 &#x57FA;&#x56E0;&#x5BF9; FGFR1 &#x57FA;&#x56E0;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x9488;&#x5BF9; FGFR1 &#x7684;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA (siRNA) &#x4E13;&#x95E8;&#x6291;&#x5236;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x516C;&#x65A4; 1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x516C;&#x65A4; 1 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#x4E3A; FGFR1 &#x878D;&#x5408;&#x4E0E;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5BF9; FGFR1 &#x878D;&#x5408;&#x3002;

&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x5206;&#x6790;&#x5C06;&#x516C;&#x65A4; 1 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x6807;&#x8BC6;&#x4E3A; FGFR1 &#x878D;&#x5408;&#x5728;&#x6025;&#x6027;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

The 8p11 myeloproliferative syndrome (EMS) is associated with translocations that disrupt the FGFR1 gene. To date, 8 fusion partners of FGFR1 have been identified. However, no primary leukemia cell lines were identified that contain any of these fusions. Here, we screened more than 40 acute myeloid leukemia cell lines for constitutive phosphorylation of STAT5 and applied an immunoaffinity profiling strategy to identify tyrosine-phosphorylated proteins in the KG-1 cell line. Mass spectrometry analysis of KG-1 cells revealed aberrant tyrosine phosphorylation of FGFR1. Subsequent analysis led to the identification of a fusion of the FGFR1OP2 gene to the FGFR1 gene. Small interfering RNA (siRNA) against FGFR1 specifically inhibited the growth and induced apoptosis of KG-1 cells. Thus, the KG-1 cell line provides an in vitro model for the study of FGFR1 fusions associated with leukemia and for the analysis of small molecule inhibitors against FGFR1 fusions.

Phosphotyrosine profiling identifies the KG-1 cell line as a model for the study of FGFR1 fusions in acute myeloid leukemia.

Le syndrome my&#xE9;loprolif&#xE9;ratif 8p11 (EMS) est associ&#xE9; &#xE0; des translocations qui perturbent le g&#xE8;ne FGFR1. &#xC0; ce jour, 8 partenaires de la fusion de FGFR1 ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s. Toutefois, aucune des lignes de cellules leuc&#xE9;miques primaires ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s qui contient n&#x26;#39;importe quel de ces fusions. Ici, nous avons examin&#xE9; plus de 40 lignes aigu&#xEB;s my&#xE9;lo&#xEF;des leuc&#xE9;miques de cellules pour la phosphorylation constitutive de STAT5 et appliqu&#xE9; une strat&#xE9;gie de profilage immunoaffinit&#xE9; pour identifier la tyrosine-phosphoryl&#xE9;s des prot&#xE9;ines dans le KG-1 lign&#xE9;e cellulaire. L&#x26;#39;analyse par spectrom&#xE9;trie de masse de cellules KG-1 a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; aberrante phosphorylation sur tyrosine de FGFR1. Une analyse ult&#xE9;rieure a conduit &#xE0; l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;une fusion du g&#xE8;ne FGFR1OP2 au g&#xE8;ne FGFR1. Des petits ARN interf&#xE9;rents (siRNA) contre FGFR1 sp&#xE9;cifiquement inhib&#xE9; la croissance et l&#x26;#39;apoptose induite par des cellules KG-1. Ainsi, le KG-1 lign&#xE9;e cellulaire fournit un mod&#xE8;le in vitro pour l&#x26;#39;&#xE9;tude des fusions FGFR1 associ&#xE9;s &#xE0; la leuc&#xE9;mie et pour l&#x26;#39;analyse de petites mol&#xE9;cules inhibitrices contre FGFR1 fusions.

Profilage Phosphotyrosine Identifie le KG-1 lign&#xE9;e cellulaire comme un mod&#xE8;le pour l&#x26;#39;&#xE9;tude de FGFR1 Fusions dans la leuc&#xE9;mie my&#xE9;lo&#xEF;de aigu&#xEB;

8 P 11 myeloproliferativen Syndroms (EMS) ist mit Translokationen, die das FGFR1-Gen zu st&ouml;ren. Bis heute wurden 8 Fusion Partner von FGFR1 identifiziert. Allerdings wurden keine prim&auml;re Leuk&auml;mie-Zelllinien identifiziert, die diese Fusionen enth&auml;lt. Hier sehen wir mehr als 40 akute myeloische Leuk&auml;mie-Zelllinien f&uuml;r konstitutiven Phosphorylierung von STAT5 und angewendet ein Immunoaffinity Profilerstellung Strategie um Tyrosin-phosphoryliert Proteine in die KG-1-Zelllinie zu identifizieren. Massenspektrometrie-Analyse der KG-1 Zellen ergab aberrante Tyrosin-Phosphorylierung von FGFR1. Nachfolgende Analyse f&uuml;hrte zur Identifizierung einer Verschmelzung des FGFR1OP2-Gens an das FGFR1-Gen. Small interfering RNA (SiRNA) gegen FGFR1 hemmte das Wachstum insbesondere und induzierten Apoptose KG-1 Zellen. Daher bietet die Zelllinie KG-1 ein in-vitro-Modell f&uuml;r die Erforschung der FGFR1 Fusionen Leuk&auml;mie zugeordnet und f&uuml;r die Analyse von niedermolekularen Inhibitoren gegen FGFR1-Fusionen.

Phosphotyrosine Profilerstellung identifiziert die KG-1-Zelllinie als Modell f&uuml;r die Erforschung der FGFR1 Fusionen in akuter myeloischer Leuk&auml;mie.

La sindrome mieloproliferativa 8 p 11 (EMS) &egrave; associata con le traslocazioni che interrompono il gene FGFR1. Ad oggi, sono state identificate 8 partner di fusione del FGFR1. Tuttavia, nessun linee di cellule di leucemia primaria sono stati identificati che contengono qualsiasi di queste fusioni. Qui, abbiamo proiettato oltre 40 linee di cellule di leucemia mieloide acuta per fosforilazione costitutiva di STAT5 e applicato un immunoaffinity profilatura strategia per identificare le proteine tirosina fosforilata nella linea cellulare KG-1. Analisi di spettrometria di massa di KG-1 cellule ha rivelato la fosforilazione della tirosina aberrante del FGFR1. Successive analisi ha portato all&#39;identificazione di una fusione del gene per il gene FGFR1 FGFR1OP2. Piccolo RNA interferente (siRNA) contro FGFR1 specificamente inibito la crescita e induce apoptosi delle cellule KG-1. Cos&igrave;, la linea cellulare KG-1 fornisce un modello in vitro per lo studio delle fusioni FGFR1 associati a leucemia e per l&#39;analisi di piccole molecole inibitori contro FGFR1 fusioni.

Profilatura phosphotyrosine identifica la linea cellulare KG-1 come un modello per lo studio delle fusioni FGFR1 nella leucemia mieloide acuta.

8p11&#x9AA8;&#x9AC4;&#x5897;&#x6B96;&#x6027;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;EMS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;FGFR1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x8EE2;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65E5;&#x4ED8;&#x306B;&#x3001;FGFR1&#x306E;8&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x305D;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;STAT5&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;40&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;KG-1&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002; KG-1&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;FGFR1&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;FGFR1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;FGFR1OP2&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002; FGFR1&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6E09;RNA&#xFF08;siRNA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;KG-1&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;KG-1&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;FGFR1&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;in vitro&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;FGFR1&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7528;&#x610F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;FGFR1&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;KG-1&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

8 P 11 myeloproliferative &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (EMS) &#xBC29;&#xD574; FGFR1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; translocations&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xAE4C;&#xC9C0; 8 &#xD4E8;&#xC804; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108; FGFR1 &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC544;&#xB2C8; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; fusions&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; stat5&#xC758; &#xC81C;&#xC815; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 40 &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120; &#xC0C1;&#xC601; k G-1 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xD55C; immunoaffinity &#xC801;&#xC6A9;. K G-1 &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBD84;&#xC11D; fgfr1&#xC758; &#xD0C8; &#xC120; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xD6C4; &#xBD84;&#xC11D; FGFR1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; FGFR1OP2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC735;&#xD569;&#xC758; &#xC774;&#xB04C;&#xC5B4; &#xB0C8;&#xB2E4;. Fgfr1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA (siRNA)&#xB294; &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; k G-1 &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; apoptosis&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, k G-1 &#xC140; &#xB77C;&#xC778; FGFR1 fusions &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; FGFR1 fusions&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xACF5;.

Phosphotyrosine &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; FGFR1 fusions &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; k G-1 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El s&#xED;ndrome mieloproliferativo 8p11 (EMS) se asocia con translocaciones que alteran el gen FGFR1. Hasta la fecha, 8 parejas de fusi&#xF3;n de FGFR1 han sido identificados. Sin embargo, no hay l&#xED;neas de leucemia de c&#xE9;lulas primarias se identificaron que contiene cualquiera de estas fusiones. En este sentido, se examinaron m&#xE1;s de 40 mieloides agudas l&#xED;neas celulares de leucemia para la fosforilaci&#xF3;n constitutiva de STAT5 y aplicado una estrategia de creaci&#xF3;n de perfiles de inmunoafinidad para identificar tirosina fosforilados prote&#xED;nas en el KG-1 l&#xED;nea celular. An&#xE1;lisis de espectrometr&#xED;a de masas de KG-1 c&#xE9;lulas revel&#xF3; la fosforilaci&#xF3;n aberrante de la tirosina de FGFR1. El an&#xE1;lisis subsiguiente condujo a la identificaci&#xF3;n de una fusi&#xF3;n del gen FGFR1OP2 al gen FGFR1. Peque&#xF1;os ARN de interferencia (siRNA) en contra de FGFR1 inhibe espec&#xED;ficamente el crecimiento y la apoptosis inducida por las c&#xE9;lulas-1 KG. As&#xED;, la KG-1 l&#xED;nea celular proporciona un modelo in vitro para el estudio de FGFR1 fusiones asociadas con la leucemia y para el an&#xE1;lisis de inhibidores de mol&#xE9;culas peque&#xF1;as contra FGFR1 fusiones.

Perfiles de fosfotirosina Identifica el KG-1 l&#xED;nea celular como un modelo para el estudio de FGFR1 Fusiones en la leucemia mieloide aguda

&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x7ECF;&#x5E38;&#x5377;&#x5165;&#x764C;&#x75C7;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x6025;&#x6027;&#x9AD3;&#x7CFB;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; (AML) &#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x5E72;&#x9884;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0E;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x8981;&#x8BC6;&#x522B;&#x65B0;&#x578B;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x53CD;&#x6D17;&#x94B1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4EB2;&#x5206;&#x6790;&#x8D28;&#x8C31;&#x6807;&#x8BC6;&#x6570;&#x76EE;&#x4F17;&#x591A;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x6FC0;&#x9176;&#x53D1;&#x73B0;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x663E;&#x793A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x53D7;&#x4F53; (CSF1R) &#x6FC0;&#x9176; megakaryoblastic &#x6025;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; (AMKL) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C; MKPL-1 &#x4E2D;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5229;&#x7528; siRNA &#x548C;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; CSF1R &#x662F;&#x589E;&#x957F;&#x548C; MKPL-1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x751F;&#x6210;&#x7684; 5&#39; &#x7ADE;&#x8D5B;&#x4ECE; CSF1R &#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684; cDNA DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x5206;&#x6790;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x6BCD;&#x9898; 6 (RBM6) &#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x878D;&#x5408;&#x5230;&#x7531; t(3;5)(p21;q33) &#x6613;&#x4F4D;&#x5927;&#x6982;&#x662F;&#x751F;&#x6210;&#x7684; CSF1R &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;RBM6 CSF1R &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8D4B;&#x4E88;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 3 (IL-3&#xFF09;-BaF3 &#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x589E;&#x957F;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x751F;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5; (MPD) &#x4E0E; megakaryoblastic &#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x5C0F;&#x9F20;&#x79FB;&#x690D;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x786E;&#x5B9A;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x53D1;&#x75C5;&#xFF0C;&#x6F5C;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B0;&#x9776;&#x70B9;&#x548C;&#x8BC1;&#x660E;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0; phosphoproteomic &#x6218;&#x7565;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x65B0;&#x578B;&#x878D;&#x5408;&#x7684; RBM6 &#x5230; CSF1R megakaryoblastic &#x6025;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3002;

&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; tyrosine kinases &#xC554;, &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; (AML) &#xB4F1;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC790;&#xC8FC; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xACE0; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; kinase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xAC1C;&#xC785;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC774; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB41C; &#xBAA9;&#xD45C;. AML&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC124; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; tyrosine kinases &#xC2DD;&#xBCC4;, immunoaffinity &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xD65C;&#xC131; kinases &#xB4F1;&#xC758; &#xB2E4; &#xC218;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; 1 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (CSF1R) &#xB2C8; megakaryoblastic &#xAE09;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; (AMKL) &#xC140; &#xB77C;&#xC778; MKPL-1&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Sirna&#xC640; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; CSF1R &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; MKPL-1 &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. 5&#39; &#xACBD;&#xC8FC; CSF1R &#xCF54;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; Cdna&#xC758; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DD;&#xBCC4; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; 6 (RBM6)&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xD4E8;&#xC804; t(3;5)(p21;q33) &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC544;&#xB9C8; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; CSF1R &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;. RBM6 CSF1R &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD; &#xC218; &#xC5EC; &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8;-3 (IL-3)-Baf3&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;, &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5; murine &#xC774;&#xC2DD; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; megakaryoblastic &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xC758; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC9C8;&#xD658; (MPD) &#xC720;&#xB3C4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; leukemogenesis, &#xC18C;&#xC124; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xB300;&#xB9BD;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; phosphoproteomic &#xC804;&#xB7B5;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Megakaryoblastic &#xAE09;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; CSF1R rbm6&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xD4E8;&#xC804;.

Activated tyrosine kinases have been frequently implicated in the pathogenesis of cancer, including acute myeloid leukemia (AML), and are validated targets for therapeutic intervention with small-molecule kinase inhibitors. To identify novel activated tyrosine kinases in AML, we used a discovery platform consisting of immunoaffinity profiling coupled to mass spectrometry that identifies large numbers of tyrosine-phosphorylated proteins, including active kinases. This method revealed the presence of an activated colony-stimulating factor 1 receptor (CSF1R) kinase in the acute megakaryoblastic leukemia (AMKL) cell line MKPL-1. Further studies using siRNA and a small-molecule inhibitor showed that CSF1R is essential for the growth and survival of MKPL-1 cells. DNA sequence analysis of cDNA generated by 5'RACE from CSF1R coding sequences identified a novel fusion of the RNA binding motif 6 (RBM6) gene to CSF1R gene generated presumably by a t(3;5)(p21;q33) translocation. Expression of the RBM6-CSF1R fusion protein conferred interleukin-3 (IL-3)-independent growth in BaF3 cells, and induces a myeloid proliferative disease (MPD) with features of megakaryoblastic leukemia in a murine transplant model. These findings identify a novel potential therapeutic target in leukemogenesis, and demonstrate the utility of phosphoproteomic strategies for discovery of tyrosine kinase alleles.

A novel fusion of RBM6 to CSF1R in acute megakaryoblastic leukemia.

Tyrosine kinases activ&#xE9;es ont &#xE9;t&#xE9; fr&#xE9;quemment impliqu&#xE9;s dans la pathogen&#xE8;se du cancer, y compris la leuc&#xE9;mie my&#xE9;lo&#xEF;de aigu&#xEB; (LMA), et sont valid&#xE9;s cibles d&#x26;#39;intervention th&#xE9;rapeutique avec des inhibiteurs de kinase &#xE0; petites mol&#xE9;cules. Pour identifier de nouvelles tyrosine kinases activ&#xE9;es dans les LAM, nous avons utilis&#xE9; une plate-forme de d&#xE9;couverte compos&#xE9; de profilage immunoaffinit&#xE9; coupl&#xE9;e &#xE0; la spectrom&#xE9;trie de masse qui identifie un grand nombre de tyrosine-phosphoryl&#xE9;s des prot&#xE9;ines kinases, y compris les actifs. Cette m&#xE9;thode a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;une activation colony-stimulating factor 1 receptor (CSF1R) kinase dans la leuc&#xE9;mie aigu&#xEB; m&#xE9;gacaryoblastique lign&#xE9;e cellulaire (AMKL) MKPL-1. Des &#xE9;tudes suppl&#xE9;mentaires utilisant siRNA et un inhibiteur de petite mol&#xE9;cule a montr&#xE9; que CSF1R est essentiel pour la croissance et la survie des cellules MKPL-1. Analyse de la s&#xE9;quence d&#x26;#39;ADN de l&#x26;#39;ADNc g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; par 5&#x26;#39;RACE &#xE0; partir de s&#xE9;quences de codage identifi&#xE9; CSF1R une nouvelle fusion de l&#x26;#39;ARN motif de liaison 6 (RBM6) g&#xE8;ne de g&#xE8;ne CSF1R g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; par vraisemblablement &#xE0; (3, 5) (p21; q33) translocation. Expression de la prot&#xE9;ine de fusion RBM6-CSF1R conf&#xE9;r&#xE9; interleukine-3 (IL-3) une croissance ind&#xE9;pendante de cellules BaF3, et induit une maladie prolif&#xE9;rative my&#xE9;lo&#xEF;de (MPD) avec des caract&#xE9;ristiques de la leuc&#xE9;mie m&#xE9;gacaryoblastique dans un mod&#xE8;le murin de greffe. Ces r&#xE9;sultats permettent d&#x26;#39;identifier une nouvelle cible th&#xE9;rapeutique potentielle dans la leuc&#xE9;mogen&#xE8;se, et de d&#xE9;montrer l&#x26;#39;utilit&#xE9; des strat&#xE9;gies pour la d&#xE9;couverte de phosphoproteomic des all&#xE8;les de la tyrosine kinase.

Un roman de Fusion RBM6 &#xE0; CSF1R dans la leuc&#xE9;mie aigu&#xEB; m&#xE9;gacaryoblastiques

Aktivierte Tyrosinkinasen haben h&auml;ufig bei der Entstehung von Krebs, einschlie&szlig;lich akuten myeloischen Leuk&auml;mie (AML), verwickelt wurde und validierte Ziel f&uuml;r therapeutische Intervention mit klein-Molek&uuml;l-Kinase-Inhibitoren sind. Um neuartige aktivierte Tyrosinkinasen in AML zu identifizieren, haben wir eine Entdeckung-Plattform bestehend aus Immunoaffinity Profilerstellung gekoppelt mit Massenspektrometrie, die gro&szlig;e Anzahl von Tyrosin-phosphoryliert Proteine, einschlie&szlig;lich aktive Kinasen identifiziert verwendet. Diese Methode ergab das Vorhandensein von einer aktivierten Kolonie-stimulierende Faktor 1 Rezeptor (CSF1R) Kinase in die akute megachorioblaste Leuk&auml;mie (AMKL)-Zelllinie MKPL-1. Weitere Studien mit SiRNA und ein klein-Molek&uuml;l-Hemmer zeigte, dass CSF1R f&uuml;r das Wachstum und das &Uuml;berleben von MKPL-1 Zellen wichtig. DNA-Sequenzanalyse der cDNA von 5&#39; Rennen von CSF1R kodierende Sequenzen generiert identifiziert eine neuartige Mischung aus der RNA verbindlichem Motiv 6 (RBM6) gen an CSF1R gen, die vermutlich durch eine Translokation t(3;5)(p21;q33) generiert. Ausdruck der RBM6-CSF1R-Fusionsprotein &uuml;bertragenen Interleukin-3 (IL-3)-unabh&auml;ngiges Wachstum in BaF3 Zellen und induziert eine myeloische proliferative Erkrankung (MPD) mit Features von Megakaryoblastic Leuk&auml;mie in einem murinen Transplantation-Modell. Diese Erkenntnisse identifizieren potenzielles neuartiges therapeutisches Ziel in Leukemogenesis und das Dienstprogramm Phosphoproteomic Strategien f&uuml;r die Ermittlung von Tyrosin-Kinase-Allele zu demonstrieren.

Eine neuartige Verschmelzung von RBM6 zu CSF1R in akuten Megakaryoblastic Leuk&auml;mie.

Attivato tirosina chinasi sono stati frequentemente implicate nella patogenesi di cancro, tra cui la leucemia mieloide acuta (AML) e vengono convalidati gli obiettivi per un intervento terapeutico con inibitori della chinasi della piccolo-molecola. Per identificare le chinasi tirosina attivata romanzo in AML, abbiamo utilizzato una piattaforma di scoperta composto da immunoaffinity profilatura accoppiate alla spettrometria di massa che identifica un gran numero di proteine tirosina fosforilata, comprese le chinasi attive. Questo metodo ha rivelato la presenza di un&#39;attivo colony-stimulating factor 1 recettore (CSF1R) chinasi nella linea cellulare (AMKL) la leucemia acuta megacarioblastica MKPL-1. Ulteriori studi utilizzando siRNA e un inibitore della piccolo-molecola ha mostrato che CSF1R &egrave; essenziale per la crescita e la sopravvivenza delle cellule MKPL-1. Analisi di sequenza del DNA di cDNA generato da 5&#39;RACE da sequenze codificanti CSF1R identificato una romanzo fusione del motivo vincolante RNA 6 (RBM6) gene a gene CSF1R presumibilmente generato da una traslocazione t(3;5)(p21;q33). Espressione della proteina di fusione RBM6-CSF1R conferito interleuchina-3 (IL-3)-crescita indipendente in BaF3 le cellule e induce una malattia proliferativa mieloide (MPD) con caratteristiche di leucemia megacarioblastica in un modello murino di trapianto. Questi risultati identificano un romanzo potenziale bersaglio terapeutico nella leucemogenesi e dimostrano l&#39;utilit&agrave; delle strategie phosphoproteomic per la scoperta degli alleli di tirosina chinasi.

Una romanzo fusione di RBM6 di CSF1R nella leucemia acuta megacarioblastica.

&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#xFF08;AML&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x764C;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3068;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x7684;&#x4ECB;&#x5165;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; AML&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x756A;&#x53F7;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x767A;&#x898B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;1&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;CSF1R&#xFF09;&#x6025;&#x6027;&#x5DE8;&#x6838;&#x82BD;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#xFF08;AMKL&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;MKPL-1&#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; siRNA&#x3068;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;CSF1R&#x304C;MKPL-1&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08;P21&#x3001;Q33&#xFF09;&#x306E;&#x8EE2;&#x3001;&#xFF08;5&#xFF09;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;CSF1R&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3078;&#x306E;RNA&#x7D50;&#x5408;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;6&#xFF08;RBM6&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;CSF1R&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x914D;&#x5217;&#x304B;&#x3089;5&#x26;#39;RACE&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;cDNA&#x306E;DNA&#x914D;&#x5217;&#x89E3;&#x6790;&#x3002; RBM6-CSF1R&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;3&#xFF08;IL-3&#xFF09;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;BaF3&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x6388;&#x4E0E;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x79FB;&#x690D;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5DE8;&#x6838;&#x82BD;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x5897;&#x6B96;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#xFF08;MPD&#xFF09;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6A19;&#x7684;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;phosphoproteomic&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6025;&#x6027;&#x5DE8;&#x6838;&#x82BD;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3067;CSF1R&#x306B;RBM6&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x878D;&#x5408;

Tirosina quinasas activadas han sido frecuentemente implicado en la patog&#xE9;nesis del c&#xE1;ncer, incluyendo leucemia mieloide aguda (LMA), y se validan los objetivos para la intervenci&#xF3;n terap&#xE9;utica con inhibidores de la cinasa de mol&#xE9;cula peque&#xF1;a. Para identificar nuevos tirosina quinasas activadas en la LMA, se utiliz&#xF3; una plataforma de descubrimiento que consiste en la elaboraci&#xF3;n de perfiles de inmunoafinidad acoplada a espectrometr&#xED;a de masas que identifica a una gran cantidad de tirosina fosforilados prote&#xED;nas quinasas, incluidos los activos. Este m&#xE9;todo revel&#xF3; la presencia de una activa factor estimulante de colonias 1 receptor (CSF1R) quinasa en la leucemia aguda megacariobl&#xE1;stica (LMCA) l&#xED;nea celular MKPL-1. Otros estudios utilizando siRNA y un inhibidor de mol&#xE9;cula peque&#xF1;a mostr&#xF3; que CSF1R es esencial para el crecimiento y supervivencia de MKPL-1 en las c&#xE9;lulas. An&#xE1;lisis de la secuencia de ADN del ADNc generado por 5&#x26;#39;RACE CSF1R de secuencias de codificaci&#xF3;n identificado una fusi&#xF3;n novedosa del motivo de uni&#xF3;n a ARN 6 (RBM6) un gen a gen CSF1R generada presumiblemente por en (3, 5) (p21; q33) translocaci&#xF3;n. Expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na de fusi&#xF3;n RBM6-CSF1R conferido interleuquina-3 (IL-3)-independiente de crecimiento en BAF3 c&#xE9;lulas, e induce una enfermedad proliferativa mieloide (MPD) con caracter&#xED;sticas de leucemia megacariobl&#xE1;stica en un modelo murino de trasplante. Estos hallazgos identifican una nueva diana terap&#xE9;utica potencial de la leucemia, y demostrar la utilidad de las estrategias para el descubrimiento de phosphoproteomic de los alelos de la tirosina cinasa.

Una fusi&#xF3;n de la novela de RBM6 CSF1R en la leucemia aguda megacariobl&#xE1;stica

Two potassium uranyl sulfate compounds were synthesized, and their crystal structures were determined by single-crystal X-ray diffraction. K(UO2)(SO4)(OH)(H2O) (KUS1) crystallizes in space group P21/c, a = 8.0521(4) A, b = 7.9354(4) A, c = 11.3177(6) A, beta = 107.6780(10) degrees , V = 689.01(6) A3, and Z = 4. K(UO2)(SO4)(OH) (KUS2) is orthorhombic Pbca, a = 8.4451(2) A, b = 10.8058(4) A, c = 13.5406(5)A, V = 1235.66(7)A3, and Z = 8. Both structures were refined on the basis of F2 for all unique data collected with Mo Kalpha radiation and a CCD-based detector to agreement indices R1 = 0.0251 and 0.0206 calculated for 2856 and 2616 reflections for KUS1 and KUS2, respectively. The structures contain vertex-sharing uranyl pentagonal bipyramids and sulfate tetrahedra linked into new chains and sheet topologies. Infrared spectroscopy provides additional information about the linkages between the sulfate and uranyl polyhedra, as well as the hydrogen bonding present in the structures. The U-O-S connectivity is examined in detail, and the local bond angle is impacted by the steric constraints of the crystal structure.

Structure determination and infrared spectroscopy of K(UO2)(SO4)(OH)(H2O) and K(UO2)(SO4)(OH).

&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x8868;&#x793A;&#x5E76;&#x5217;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F19;&#x4F34;&#x95F4;&#x53D8;&#x6027;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x6FC0;&#x9176; &#xFF08;ALK&#xFF09; &#x7684;&#x6613;&#x4F4D;&#x5F15;&#x8D77;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x3002;ALK &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6784;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5316;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;&#x6F84;&#x6E05;&#x7EF4;&#x6301; lymphomagenesis &#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x7684; ALK &#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528; 2 &#x8865;&#x5145;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#xFF0C;ALK &#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x86CB;&#x767D;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x5229;&#x7528;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; ALK RNA &#x5E72;&#x6270; (RNAi) &#x6216;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E17;&#x900F;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x4E00;&#x5957;&#x660E;&#x786E;&#x7684;&#x5173;&#x8054; ALK &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x80BD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4EE3;&#x8C22;&#x9176;&#x3001; &#x6FC0;&#x9176;&#x3001; &#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7814;&#x7A76;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E0E; nucleophosmin (&#x6545;&#x5BAB;) &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x6269;&#x5F20;&#x523A;&#x6FC0;&#x78F7;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; 5-&#x6C28;&#x57FA;-4-&#x9170;&#x80FA;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; formyltransferase/&#x808C;&#x82F7;&#x78F7;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x9176; (&#x519C;)-ALK &#x548C;&#x5176;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x6240;&#x9700; ALK &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x963F;&#x8482;&#x5947;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x8BB0;&#x5F55;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x548C;&#x643A;&#x5E26; ALK &#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; TPR &#x4F1A;&#x9762;&#x7684;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; c &#x4F1A;&#x9762;&#x3002;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#xFF0C;ALK &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x963F;&#x8482;&#x5947;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x589E;&#x5F3A;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x7532;&#x6C28;&#x8776;&#x5464;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; transformylase &#x6D3B;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5728;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x5BF9;&#x7167;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x5141;&#x8BB8;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x5185;&#x5BB9;&#x4E30;&#x5BCC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x548C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x65B0;&#x578B; ALK &#x4E0B;&#x6E38;&#x7403;&#x5458;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x7532;&#x6C28;&#x8776;&#x5464;&#x5BF9;&#x80BF;&#x7624;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x53EF;&#x80FD;&#x8BC1;&#x660E;&#x5177;&#x4F53;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5316;&#x7597;&#x3002;

5-&#x6C28;&#x57FA;-4-&#x9170;&#x80FA;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; formyltransferase/IMP &#x5408;&#x6210;&#x9176;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x589E;&#x5F3A;&#x6545;&#x5BAB; ALK&#xFF1A; ALK &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x53CA;&#x6CBB;&#x7597;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x7684;&#x65B0;&#x89C1;&#x89E3;&#x3002;

Anaplastic large cell lymphoma represents a subset of neoplasms caused by translocations that juxtapose the anaplastic lymphoma kinase (ALK) to dimerization partners. The constitutive activation of ALK fusion proteins leads to cellular transformation through a complex signaling network. To elucidate the ALK pathways sustaining lymphomagenesis and tumor maintenance, we analyzed the tyrosine-kinase protein profiles of ALK-positive cell lines using 2 complementary proteomic-based approaches, taking advantage of a specific ALK RNA interference (RNAi) or cell-permeable inhibitors. A well-defined set of ALK-associated tyrosine phosphopeptides, including metabolic enzymes, kinases, ribosomal and cytoskeletal proteins, was identified. Validation studies confirmed that vasodilator-stimulated phosphoprotein and 5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide formyltransferase/inosine monophosphate cyclohydrolase (ATIC) associated with nucleophosmin (NPM)-ALK, and their phosphorylation required ALK activity. ATIC phosphorylation was documented in cell lines and primary tumors carrying ALK proteins and other tyrosine kinases, including TPR-Met and wild type c-Met. Functional analyses revealed that ALK-mediated ATIC phosphorylation enhanced its enzymatic activity, dampening the methotrexate-mediated transformylase activity inhibition. These findings demonstrate that proteomic approaches in well-controlled experimental settings allow the definition of informative proteomic profiles and the discovery of novel ALK downstream players that contribute to the maintenance of the neoplastic phenotype. Prediction of tumor responses to methotrexate may justify specific molecular-based chemotherapy.

The enzymatic activity of 5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide formyltransferase/IMP cyclohydrolase is enhanced by NPM-ALK: new insights in ALK-mediated pathogenesis and the treatment of ALCL.

Lymphome anaplasique &#xE0; grandes cellules repr&#xE9;sente un sous-ensemble des n&#xE9;oplasmes provoqu&#xE9;s par des translocations qui juxtaposent la kinase du lymphome anaplasique (ALK) &#xE0; des partenaires de dim&#xE9;risation. L&#x26;#39;activation constitutive des prot&#xE9;ines de fusion ALK conduit &#xE0; la transformation cellulaire par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire d&#x26;#39;un r&#xE9;seau de signalisation complexe. Pour &#xE9;lucider le maintien de voies de ALK lymphomagen&#xE8;se et l&#x26;#39;entretien des tumeurs, nous avons analys&#xE9; les profils prot&#xE9;iques de tyrosine-kinase de lign&#xE9;es de cellules ALK-positifs en utilisant 2 compl&#xE9;mentaires prot&#xE9;omique des approches fond&#xE9;es sur, profitant d&#x26;#39;un particulier interf&#xE9;rences ALK ARN (ARNi) ou de la cellule-perm&#xE9;ables inhibiteurs. Un ensemble bien d&#xE9;fini d&#x26;#39;ALK-associ&#xE9; phosphopeptides tyrosine, y compris les enzymes m&#xE9;taboliques, les kinases, des prot&#xE9;ines ribosomiques et du cytosquelette, a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;. &#xC9;tudes de validation confirm&#xE9; que vasodilatateur stimul&#xE9;e phosphoprot&#xE9;ine et 5-aminoimidazole-4-carboxamide cyclohydrolase monophosphate ribonucl&#xE9;otide formyltransf&#xE9;rase / inosine (ATIC) associ&#xE9; &#xE0; nucl&#xE9;ophosmine (NPM)-ALK, et leur phosphorylation n&#xE9;cessaire activit&#xE9; ALK. Phosphorylation ATIC a &#xE9;t&#xE9; document&#xE9;e dans des lign&#xE9;es cellulaires et des tumeurs primaires prot&#xE9;ines porteuses de ALK et d&#x26;#39;autres tyrosine kinases, y compris TPR-Met et de type sauvage c-Met. Les analyses fonctionnelles ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la phosphorylation m&#xE9;di&#xE9;e par ALK-ATIC a am&#xE9;lior&#xE9; son activit&#xE9; enzymatique, att&#xE9;nuant l&#x26;#39;inhibition m&#xE9;di&#xE9;e par le m&#xE9;thotrexate transformylase activit&#xE9;. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que les approches prot&#xE9;omiques dans bien contr&#xF4;l&#xE9;es param&#xE8;tres exp&#xE9;rimentaux permettent la d&#xE9;finition de profils prot&#xE9;omiques d&#x26;#39;information et de la d&#xE9;couverte de nouveaux joueurs ALK en aval qui contribuent au maintien du ph&#xE9;notype n&#xE9;oplasique. Pr&#xE9;diction de la r&#xE9;ponse tumorale au m&#xE9;thotrexate peut justifier mol&#xE9;culaire sp&#xE9;cifique bas&#xE9; sur la chimioth&#xE9;rapie.

L&#x26;#39;activit&#xE9; enzymatique de la 5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucl&#xE9;otide formyltransf&#xE9;rase / IMP cyclohydrolase est renforc&#xE9;e par NPM-ALK: Nouvelles connaissances en ALK-m&#xE9;diation pathogen&#xE8;se et le traitement des ALCL

Anaplastisches gro&szlig;zelliges Lymphom stellt eine Teilmenge der Tumoren verursacht durch Translokationen, die das anaplastisches Lymphom Kinase (ALK) zur Dimerisierung Partner nebeneinander. Die konstitutive Aktivierung von ALK Schmelzverfahrensproteine f&uuml;hrt zur zellul&auml;ren Transformation durch ein kompliziertes Netz der Signalisierung. Um die Erhaltung der Lymphomagenesis und Tumor Wartung ALK-Wege zu erhellen, analysierten wir die Tyrosin-Kinase-Protein-Profile der ALK-positiven Zelllinien mit 2 erg&auml;nzende Proteomic-basierte Ans&auml;tze, nutzen eine bestimmte ALK RNA-Interferenz (RNAi) oder Zelle-durchl&auml;ssig-Hemmer. Eine definierte Menge von ALK-assoziierten Tyrosinkinase-Phosphopeptides, einschlie&szlig;lich metabolische Enzyme, Kinasen, ribosomal und Zytoskelett-Proteine, wurde identifiziert. Validierungsstudien best&auml;tigt, dass Phosphoprotein Vasodilatator angeregt und 5-aminoimidazol-4-carboxamid-RIBONUKLEOTID-Formyltransferase/Inosin-Monophosphat-Cyclohydrolase (ATIC) im Zusammenhang mit Nucleophosmin (NPM)-ALK und ihre Phosphorylierung ben&ouml;tigt, ALK-Aktivit&auml;t. ATIC Phosphorylierung war in Zelllinien und Prim&auml;rtumoren ALK Proteine und andere Tyrosinkinasen, einschlie&szlig;lich TPR-Met dokumentiert und Wildtyp c-Met. Funktionsanalysen ergab, dass ALK-vermittelte ATIC Phosphorylierung seine enzymatische Aktivit&auml;t, D&auml;mpfung der Methotrexat-vermittelte Transformylase T&auml;tigkeit Hemmung verbessert. Diese Ergebnisse zeigen, dass Proteomic Ans&auml;tze in kontrollierten experimentellen Einstellungen erm&ouml;glichen die Definition von informativen Proteomic-Profile und die Entdeckung der neuartige nachgeschaltete ALK-Spieler, die f&uuml;r die Aufrechterhaltung des neoplastischen Ph&auml;notyps einbringen. Vorhersage der Tumor Antworten zu Methotrexat kann spezifische Molekulare-haltigen Chemotherapie rechtfertigen.

Die enzymatische Aktivit&auml;t der 5-aminoimidazol-4-carboxamid-RIBONUKLEOTID-Formyltransferase/IMP-Cyclohydrolase wird erg&auml;nzt durch NPM-ALK: neue Einblicke in ALK-vermittelten Pathogenese und Behandlung von ALCL.

Linfoma a grandi cellule anaplastico rappresenta un sottoinsieme delle neoplasie causate da traslocazioni che accostare la chinasi Linfoma anaplastico (ALK) ai partner di dimerizzazione. L&#39;attivazione costitutiva delle proteine di fusione ALK conduce alla trasformazione cellulare attraverso una complessa rete di segnalazione. Per chiarire i percorsi ALK sostenere la manutenzione lymphomagenesis e tumore, abbiamo analizzato i profili di proteina tirosin-chinasi di linee di cellule ALK-positivo utilizzando 2 approcci complementari basata su proteomic, approfittando di un specifico ALK RNA interference (RNAi) o inibitori della cellula permeabile. Un insieme ben definito di fosfopeptidi tirosina ALK-associati, compresi gli enzimi metabolici, chinasi, proteine ribosomiali e del citoscheletro, &egrave; stato identificato. Studi di convalida ha confermato che la fosfoproteina stimolata vasodilatatore e 5-aminoimidazole-4-carbossamide ribonucleotide formiltransferasi/inosina monofosfato cicloidrolasi (ATIC) associato con nucleophosmin (NPM)-ALK e loro fosforilazione necessaria attivit&agrave; ALK. ATIC fosforilazione &egrave; stata documentata in linee cellulari e tumori primari che trasportano le proteine ALK e altre chinasi della tirosina, compresi TPR-Met e wild type c-Met. Analisi funzionale hanno rivelato che la fosforilazione ATIC ALK-mediata enhanced sua attivit&agrave; enzimatica, l&#39;inibizione di attivit&agrave; mediata da metotrexato transformylase di bagnatura. Questi risultati dimostrano che approcci di proteomica in impostazioni sperimentali controllati permettono la definizione di profili di proteomic informativo e la scoperta di nuovi giocatori a valle ALK che contribuiscono al mantenimento del fenotipo neoplastico. Predizione delle risposte tumore al metotrexato possa giustificare la chemioterapia a base di molecolare specifica.

Dell&#39;attivit&agrave; enzimatica della 5-aminoimidazole-4-carbossamide ribonucleotide formiltransferasi/IMP cicloidrolasi &egrave; rafforzata da NPM-ALK: nuove intuizioni nel trattamento di ALCL e patogenesi ALK-mediata.

&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306B;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;ALK&#xFF09;&#x3092;&#x4E26;&#x7F6E;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; ALK&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;ALK&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;ALK RNA&#x5E72;&#x6E09;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;ALK&#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x89E3;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306A;&#x3069;&#x3001;ALK-&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3001;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30D0;&#x30EA;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#xFF08;NPM&#xFF09;-ALK&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;5  - &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C0;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;-4  - &#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B5;&#x30DF;&#x30C9;&#x30EA;&#x30DC;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;/&#x30DB;&#x30EB;&#x30DF;&#x30EB;&#x4E00;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#xFF08;ATIC&#xFF09;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x62E1;&#x5F35;&#x85AC;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;ALK&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002; ATIC&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;TPR-Met&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;c-Met&#x3068;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;ALK&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3068;&#x539F;&#x767A;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;ALK&#x200B;&#x200B;-&#x5A92;&#x4ECB;ATIC&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x30E1;&#x30C8;&#x30C8;&#x30EC;&#x30AD;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x5A92;&#x4ECB;transformylase&#x6D3B;&#x6027;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x6E7F;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306A;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x6709;&#x76CA;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x65AC;&#x65B0;&#x306A;ALK&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E4;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30E1;&#x30C8;&#x30C8;&#x30EC;&#x30AD;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x3092;&#x6B63;&#x5F53;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

5  - &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C0;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;-4  - &#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B5;&#x30DF;&#x30C9;&#x30EA;&#x30DC;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;IMP /&#x30DB;&#x30EB;&#x30DF;&#x30EB;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x306F;&#x3001;NPM-ALK&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#xFF1A;ALK-&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x306E;&#x75C5;&#x614B;&#x3068;ALCL&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;

Anaplastic &#xB300;&#xD615; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9BC;&#xD504; &#xC885; neoplasms translocations dimerization &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108; anaplastic &#xB9BC;&#xD504; &#xC885; &#xB2C8; (ALK)&#xB97C; &#xB098;&#xB780;&#xD788; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. ALK &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC81C;&#xC815; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xBCC0;&#xD658;&#xC740; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lymphomagenesis &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xC720;&#xC9C0;&#xAC00; &#xACBD;&#xB85C; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; ALK RNA &#xAC04;&#xC12D; (RNAi) &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xD65C;&#xC6A9; ALK &#xC591;&#xC131; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; 2 &#xBCF4;&#xC644; proteomic &#xAE30;&#xBC18; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C; &#xBD84;&#xC11D;. &#xAC00; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphopeptides, &#xB300;&#xC0AC; &#xD6A8;&#xC18C;, kinases, ribosomal&#xC640; cytoskeletal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC798; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC9D1;&#xD569; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD655;&#xC778; phosphoprotein vasodilator &#xC790;&#xADF9; &#xBC0F; 5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide formyltransferase/inosine monophosphate cyclohydrolase (ATIC) nucleophosmin (NPM)&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;-&#xAC00;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xAC00; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD544;&#xC694;. ATIC &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xACFC; ALK &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; TPR &#xB9CC;&#xB09C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; tyrosine kinases &#xB4E4;&#xACE0; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xBC0F; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; c-&#xB9CC;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xADF8;&#xAC00; &#xC911;&#xC7AC; ATIC &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB310;&#xD37C; &#xB2DD; transformylase methotrexate &#xC911;&#xC7AC; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC800;&#xD574;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; well-controlled &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; proteomic &#xC811;&#xADFC; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xC720;&#xC775;&#xD55C; proteomic &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xC815; &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xC57D; &#xD615; &#xC720;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC18C;&#xC124; ALK &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC120;&#xC218;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1A0;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC885;&#xC591; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC608;&#xCE21; &#xD2B9;&#xC815; &#xBD84;&#xC790; &#xAE30;&#xBC18; &#xD654;&#xD559; &#xC694;&#xBC95;&#xC744; &#xC815;&#xB2F9;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

5-Aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide formyltransferase/&#xAF2C;&#xB9C8; &#xB3C4;&#xAE68;&#xBE44; cyclohydrolase&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xACE0;&#xAD81; &#xBC15;&#xBB3C;&#xC6D0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xAC15;&#xD654;: ALK &#xC911;&#xC7AC; pathogenesis &#xBC0F; ALCL&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;.

El linfoma anapl&#xE1;sico de c&#xE9;lulas grandes representa un subconjunto de las neoplasias causadas por translocaciones que yuxtaponen la cinasa del linfoma anapl&#xE1;sico (ALK) a los socios de dimerizaci&#xF3;n. La activaci&#xF3;n constitutiva de las prote&#xED;nas de fusi&#xF3;n ALK conduce a la transformaci&#xF3;n celular a trav&#xE9;s de una red de se&#xF1;alizaci&#xF3;n compleja. Para dilucidar la ALK v&#xED;as de sostenimiento y mantenimiento linfomag&#xE9;nesis tumor, se analizaron los perfiles de prote&#xED;nas tirosina-quinasa de l&#xED;neas celulares de ALK-positivos por medio de 2 complementarios enfoques basados &#x200B;&#x200B;en la prote&#xF3;mica, aprovech&#xE1;ndose de un determinado interferencias ALK ARN (RNAi) o inhibidores penetran en las c&#xE9;lulas. Un conjunto bien definido de ALK-asociada fosfop&#xE9;ptidos tirosina, incluyendo las enzimas metab&#xF3;licas, quinasas, prote&#xED;nas ribosomales y el citoesqueleto, fue identificado. Los estudios de validaci&#xF3;n confirma que la fosfoprote&#xED;na estimulada por vasodilatador y 5-aminoimidazol-4-carboxamida ribonucle&#xF3;tido formiltransferasa / inosina monofosfato ciclohidrolasa (ATIC) asociado con nucleofosmina (NGP)-ALK, y su fosforilaci&#xF3;n requiere la actividad de ALK. Fosforilaci&#xF3;n ATIC se document&#xF3; en las l&#xED;neas celulares y los tumores primarios que llevan prote&#xED;nas ALK y otras tirosina quinasas, incluyendo TPR-Met y de tipo salvaje c-Met. An&#xE1;lisis funcional revel&#xF3; que ALK-mediada por la fosforilaci&#xF3;n de ATIC ha mejorado su actividad enzim&#xE1;tica, humedeciendo la inhibici&#xF3;n transformilasa metotrexato mediada por la actividad. Estos hallazgos demuestran que los enfoques prote&#xF3;micos en bien controlados par&#xE1;metros experimentales permiten la definici&#xF3;n de perfiles prote&#xF3;micos informativos y el descubrimiento de nuevos jugadores ALK intermedios que contribuyen al mantenimiento del fenotipo neopl&#xE1;sico. Predicci&#xF3;n de la respuesta tumoral a metotrexato puede justificar molecular espec&#xED;fico basado en la quimioterapia.

La actividad enzim&#xE1;tica de la 5-aminoimidazol-4-carboxamida ribonucle&#xF3;tido formiltransferasa / ciclohidrolasa IMP se ve reforzada por la NGP-ALK: Nuevos conocimientos en ALK-mediada por la Patog&#xE9;nesis y el Tratamiento de LACG

&#x4E00;&#x79EF;&#x6781;&#x7684; JAK2V617F &#x548C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x751F;&#x6210;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53; (TpoR) W515L/K &#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x589E;&#x751F;&#x5F02;&#x5E38;&#x80BF;&#x7624; (MPNs) &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; 2 &#x9AA8;&#x9AD3;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8; TpoRW515 (W515A) &#x548C; Delta5TpoR &#x79EF;&#x6781;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x7C7B; R/KW (515) QFP &#x6BCD;&#x9898;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x4F1A;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x589E;&#x751F;&#x5F02;&#x5E38;&#x8868;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x3002;&#x6B64;&#x8868;&#x578B;&#x6240;&#x9700; TpoR &#x6E38;&#x79BB;&#x7684; Y112&#x3002;&#x916A;&#x6C28;&#x9178; immunoprofiling &#x8868;&#x793A; TpoRW515A &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x6E38;&#x79BB; TpoR Y78 &#x548C; Y112&#x3002;&#x82EF;&#x4E19;&#x6C28;&#x9178;&#x6E38;&#x79BB; Y112 &#x7A81;&#x53D8;&#x963B;&#x6B62;&#x4F53;&#x5185;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x672C;&#x6784;&#x79EF;&#x6781;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7531; Delta5TpoR &#x548C; TpoRW515A&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x56FE;&#xFF09;-&#x6FC0;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x964D;&#x4F4E; Janus &#x6FC0;&#x9176; 2 (JAK2) &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x82EF;&#x4E19;&#x6C28;&#x9178;&#x6E38;&#x79BB; Y78 &#x7A81;&#x53D8;&#x589E;&#x5F3A;&#x81F4; TpoRW515 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x5F3A;&#x53D7;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC; JAK2 &#x6D3B;&#x5316;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x589E;&#x751F;&#x5F02;&#x5E38;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; TpoR &#x6E38;&#x79BB;&#x78F7;&#x9178; Y112 &#x548C;&#x4FA7;&#x7FFC;&#x5E8F;&#x5217;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6210;&#x4E3A;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x5728; MPNs &#x4E2D;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x9AA8;&#x9AD3;&#x589E;&#x751F;&#x5F02;&#x5E38;&#x7D0A;&#x4E71;&#x548C;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x751F;&#x6210;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53; W515 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x662F;&#x7531;&#x80DE;&#x6D46;&#x916A;&#x6C28;&#x9178; 112 &#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x3002;

Constitutively active JAK2V617F and thrombopoietin receptor (TpoR) W515L/K mutants are major determinants of human myeloproliferative neoplasms (MPNs). We show that a TpoRW515 mutation (W515A), which we detected in 2 myelofibrosis patients, and the Delta5TpoR active mutant, where the juxtamembrane R/KW(515)QFP motif is deleted, induce a myeloproliferative phenotype in mouse bone marrow reconstitution experiments. This phenotype required cytosolic Y112 of the TpoR. Phosphotyrosine immunoprofiling detected phosphorylated cytosolic TpoR Y78 and Y112 in cells expressing TpoRW515A. Mutation of cytosolic Y112 to phenylalanine prevented establishment of the in vivo phenotype and decreased constitutive active signaling by Delta5TpoR and TpoRW515A, especially via the mitogen-activated protein (MAP)-kinase pathway, without decreasing Janus kinase 2 (JAK2) activation. In contrast, mutation of cytosolic Y78 to phenylalanine enhanced the myeloproliferative syndrome induced by the TpoRW515 mutants, by enhancing receptor-induced JAK2 activation. We propose that TpoR cytosolic phosphorylated Y112 and flanking sequences could become targets for pharmacologic inhibition in MPNs.

Induction of myeloproliferative disorder and myelofibrosis by thrombopoietin receptor W515 mutants is mediated by cytosolic tyrosine 112 of the receptor.

Mutantes de W515L/K constitutivamente activas del receptor (TpoR) de la JAK2V617F y trombopoyetina son determinantes principales de Neoplasias mieloproliferativas humanas (MPN). Demostramos que una mutaci&oacute;n de TpoRW515 (W515A), que detectamos en 2 pacientes mielofibrosis, y el mutante activo de Delta5TpoR, donde se elimina el motivo de juxtamembrane R/KW (515) QFP, inducen un fenotipo mieloproliferativo en experimentos de reconstituci&oacute;n de la m&eacute;dula &oacute;sea de rat&oacute;n. Este fenotipo necesaria Y112 citos&oacute;lica de la TpoR. Fosfotirosina immunoprofiling hab&iacute;a detectado fosforilada citos&oacute;lica TpoR Y78 y Y112 en las c&eacute;lulas que expresan TpoRW515A. Mutaci&oacute;n de Y112 citos&oacute;lica a fenilalanina impidieron el establecimiento del fenotipo en vivo y disminuido la se&ntilde;alizaci&oacute;n activa constitutiva por Delta5TpoR y TpoRW515A, especialmente a trav&eacute;s de la prote&iacute;na activada por mit&oacute;geno (mapa)-v&iacute;a de la kinasa, sin disminuir la quinasa de Janus 2 (JAK2) activaci&oacute;n. En cambio, mutaci&oacute;n de Y78 citos&oacute;lica a fenilalanina mejorado el S&iacute;ndrome mieloproliferativo inducido por los mutantes TpoRW515, favoreciendo la activaci&oacute;n inducida por receptores de JAK2. Proponemos que TpoR citos&oacute;lica fosforila Y112 y que flanquean las secuencias podr&iacute;a convertirse en objetivos para la inhibici&oacute;n farmacol&oacute;gica de MPN.

Inducci&oacute;n de S&iacute;ndrome mieloproliferativo y mielofibrosis por mutantes del receptor W515 de trombopoyetina est&aacute; mediada por la tirosina citos&oacute;lica 112 del receptor.

Mutants de W515L/K r&eacute;cepteur (TpoR) constitutivement actifs JAK2V617F et thrombopo&iuml;&eacute;tine sont des d&eacute;terminants majeurs de n&eacute;oplasmes my&eacute;loprolif&eacute;ratifs humains (NPP). Nous montrons qu&#39;une mutation de TpoRW515 (W515A), dont nous avons d&eacute;tect&eacute; chez 2 patients my&eacute;lofibrose idiopathique, et le mutant actif Delta5TpoR, o&ugrave; le motif de R/KW (515) BAA juxtamembrane est supprim&eacute;, induisent un ph&eacute;notype my&eacute;loprolif&eacute;ratif dans les exp&eacute;riences de reconstitution de la moelle osseuse la souris. Ce ph&eacute;notype requis Y112 cytosolique de la TpoR. Phosphotyrosine immunoprofiling d&eacute;tect&eacute; phosphoryl&eacute;s cytosolique TpoR Y78 et Y112 dans les cellules exprimant TpoRW515A. Mutation de Y112 cytosolique de ph&eacute;nylalanine a emp&ecirc;ch&eacute; la mise en place du ph&eacute;notype in vivo et a diminu&eacute; la signalisation active constitutive par Delta5TpoR et TpoRW515A, en particulier par l&#39;interm&eacute;diaire de la prot&eacute;ine mitog&egrave;ne-(carte)-voie de la kinase, sans diminuer les Janus kinase 2 (JAK2) activation. En revanche, mutation de Y78 cytosolique de ph&eacute;nylalanine am&eacute;lior&eacute; le syndrome my&eacute;loprolif&eacute;ratif induit par les mutants de TpoRW515, en am&eacute;liorant l&#39;activation induite par le r&eacute;cepteur de JAK2. Nous proposons que TpoR cytosolique phosphoryl&eacute;e Y112 et s&eacute;quences d&#39;accompagnement pourrait devenir la cible de l&#39;inhibition pharmacologique au NPP.

Induction de syndromes my&eacute;loprolif&eacute;ratifs et my&eacute;lofibrose idiopathique par des mutants de r&eacute;cepteurs W515 thrombopo&iuml;&eacute;tine est m&eacute;di&eacute;e par la tyrosine cytosolique 112 du r&eacute;cepteur.

Konstitutiv aktive JAK2V617F und Thrombopoetin-Rezeptor (TpoR) W515L/K-Mutanten sind wichtige Determinanten des menschlichen myeloproliferative Neoplasien (MPNs). Wir zeigen, dass eine TpoRW515-Mutation (W515A), die wir in 2 Myelofibrose Patienten erkannt, und die Delta5TpoR aktive Mutant, wo das Juxtamembrane R/KW (515) QFP Motiv gel&ouml;scht wird, einen myeloproliferativen Ph&auml;notyp Maus Knochenmark Rekonstitution Experimente induzieren. Dieser Ph&auml;notyp ben&ouml;tigt Zytosolischer Y112 von der TpoR. Phosphotyrosine Immunoprofiling erkannt phosphorylierten Zytosolische TpoR Y78 und Y112 in Zellen, die TpoRW515A zum Ausdruck zu bringen. Mutation des zellul&auml;ren Y112, Phenylalanin verhinderten Gr&uuml;ndung der in-vivo Ph&auml;notyp und verringerte konstitutiv aktive Signalisierung durch Delta5TpoR und TpoRW515A, vor allem &uuml;ber die Mitogen-aktivierte Protein (MAP)-Kinase-Signalweg, ohne Minderung der Janus Kinase 2 (JAK2) Aktivierung. Dagegen verbessert die Mutation des Zytosolische Y78, Phenylalanin das Myelodysplastische Syndrom, induziert durch die TpoRW515-Mutanten, durch die St&auml;rkung der Rezeptor-induzierte JAK2-Aktivierung. Wir schlagen TpoR Zytosolische phosphoryliert Y112 und flankierenden Sequenzen Ziele f&uuml;r pharmakologische Hemmung in MPNs werden k&ouml;nnte.

Induktion von myeloproliferative Erkrankung und Myelofibrose von Thrombopoetin-Rezeptor W515 Mutanten ist durch Zytosolische Tyrosin 112 des Rezeptors vermittelt.

Costitutivamente attive JAK2V617F e trombopoietina mutanti W515L/K recettore (TpoR) sono importanti fattori determinanti delle neoplasie mieloproliferative umane (MPNs). Mostriamo che una mutazione di TpoRW515 (W515A), che abbiamo rilevato in 2 pazienti mielofibrosi, e il Delta5TpoR attivo mutante, dove viene eliminato il motivo del QFP R/KW (515) juxtamembrane, indurre un fenotipo mieloproliferativa negli esperimenti di ricostituzione del midollo osseo del mouse. Questo fenotipo necessaria Y112 citosolico della TpoR. Phosphotyrosine immunoprofiling rilevato fosforilata citosolico TpoR Y78 e Y112 in cellule che esprimono TpoRW515A. Mutazione di Y112 citosolico di fenilalanina impedito l&#39;istituzione del fenotipo in vivo e diminuito di segnalazione attivo costitutiva di Delta5TpoR e TpoRW515A, soprattutto tramite la proteina mitogene-attivata (mappa)-chinasi via, senza diminuire la chinasi Janus 2 (JAK2) attivazione. Al contrario, mutazione di Y78 citosolico di fenilalanina rafforzata la sindrome mieloproliferativa indotta da mutanti TpoRW515, potenziando la attivazione di JAK2 indotta dal recettore. Proponiamo che TpoR citosolico fosforilato Y112 e sequenze di accompagnamento potrebbe diventare bersagli per inibizione farmacologica in MPNs.

Induzione di malattia mieloproliferativa e mielofibrosi da mutanti recettore W515 trombopoietina &egrave; mediata dalla tirosina citosolico 112 del recettore.

&#x6052;&#x5E38;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E; JAK2V617F &#x3068;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x30DC;&#x30DD;&#x30A8;&#x30C1;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (TpoR) &#x306E; W515L/K &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3072;&#x3068;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x5897;&#x6B96;&#x6027;&#x816B;&#x760D; (MPNs) &#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; 2 &#x9AA8;&#x9AC4;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x75C7;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x691C;&#x51FA;&#x3001;TpoRW515 &#x5909;&#x7570; (W515A) &#x3068;&#x7D30;&#x80DE; R/KW (515) QFP &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x304C;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059; Delta5TpoR active &#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x5897;&#x6B96;&#x6027;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E; Y112&#x3001;TpoR &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3002;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; immunoprofiling &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA; TpoR Y78 &#x3068; Y112 TpoRW515A &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3002;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x3092;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA; Y112 &#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;&#x69CB;&#x6210;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; Delta5TpoR &#x3068; TpoRW515A&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; &#xFF08;&#x5730;&#x56F3;&#xFF09; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6E1B;&#x5C11;-&#x30E4;&#x30CC;&#x30B9; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 2 (JAK2) &#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x3092;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA; Y78 &#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308B; TpoRW515 &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x8A98;&#x8D77; JAK2 &#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x5897;&#x6B96;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;Y112 &#x306E;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA; TpoR &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x4E26;&#x3076; MPNs &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x9AA8;&#x9AC4;&#x5897;&#x6B96;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x3068;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x75C7;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x30DC;&#x30DD;&#x30A8;&#x30C1;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; W515 &#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 112 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Constitutively &#xD65C;&#xC131; JAK2V617F &#xBC0F; thrombopoietin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TpoR) W515L/K &#xBBA4;&#xD134;&#xD2B8;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; myeloproliferative neoplasms (MPNs)&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; determinants. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; 2 myelofibrosis &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC9C0;, TpoRW515 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (W515A)&#xC640; juxtamembrane R/kw &#xAE09; (515) QFP &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xB97C; &#xC0AD;&#xC81C; Delta5TpoR &#xD65C;&#xC131; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xACE8; &#xC218; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; myeloproliferative &#xD615; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xC774; &#xD615;&#xC5D0;&#xB294; Tpor&#xC758; cytosolic Y112 &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Phosphotyrosine immunoprofiling Tporw515a&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; phosphorylated cytosolic TpoR Y78 &#xBC0F; Y112 &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD398;&#xB2D0;&#xC54C;&#xB77C;&#xB2CC;&#xC744; cytosolic Y112 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC81C;&#xC815; &#xD65C;&#xC131; &#xC2E0;&#xD638; Delta5TpoR &#xBC0F; TpoRW515A, &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xC9C0;&#xB3C4;)&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD2B9;&#xD788; &#xAC10;&#xC18C;-&#xC57C;&#xB204;&#xC2A4; &#xD0A4; 2 (JAK2) &#xAC10;&#xC18C; &#xC5C6;&#xC774; &#xB2C8; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xD398;&#xB2D0;&#xC54C;&#xB77C;&#xB2CC;&#xC744; cytosolic Y78 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; JAK2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC720;&#xBC1C;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; TpoRW515 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; myeloproliferative &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xD5A5;&#xC0C1;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; TpoR cytosolic phosphorylated Y112 &#xACE0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xCE21;&#xBA74; MPNs &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559; &#xC801;&#xC778; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;.

Cytosolic &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; 112 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xC7A5;&#xC560; myeloproliferative&#xC640; myelofibrosis thrombopoietin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; W515 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CONSPECTUS: Our work on lithographic patterning of DNA nanostructures was inspired by a collaboration on molecular electronic devices known as quantum-dot cellular automata or QCA. QCA is a paradigm for computation in which information is transmitted and processed through the interaction of coupled electrical charges or magnetic dipoles. We began to explore the idea of molecular scale QCA and found that ab initio methods, a thermodynamic Ising model, and larger scale circuit design work suggested that circuits that did computationally interesting things could function at room temperature if made from molecular QCA cells of chemically reasonable design. But how could the QCA cells be patterned to form the complex arrays needed for computationally interesting circuitry, and how could those arrays of molecular circuitry be integrated with conventional electronic inputs and outputs? Top-down methods lacked the spatial resolution and high level of parallelism needed to make molecular circuits. Bottom-up chemical synthesis lacked the ability to fabricate arbitrary and heterogeneous structures tens to hundreds of nanometers in size. Chemical self-assembly at the time could produce structures in the right size scale, but was limited to homogeneous arrays. A potential solution to this conundrum was just being demonstrated in the late 1990s and early 2000s: DNA nanostructures self-assembled from oligonucleotides, whose high information density could handle the creation of arbitrary structures and chemical inhomogeneity. Our group became interested in whether DNA nanostructures could function as self-assembling circuit boards for electrical or magnetic QCA systems. This Account focuses on what we learned about the interactions of DNA nanostructures with silicon substrates and, particularly, on how electron-beam lithography could be used to direct the binding of DNA nanostructures on a variety of functional substrates.

Article	Year
SAPK/JNK regulates cdc2/cyclin B kinase through phosphorylation and inhibition of cdc25c. Cellular signalling\| PubMed ID: 12742231	2003
S6K1(-/-)/S6K2(-/-) mice exhibit perinatal lethality and rapamycin-sensitive 5'-terminal oligopyrimidine mRNA translation and reveal a mitogen-activated protein kinase-dependent S6 kinase pa... Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 15060135	2004
Immunoaffinity profiling of tyrosine phosphorylation in cancer cells. Nature biotechnology\| PubMed ID: 15592455	2005
Evaluation of CML model cell lines and imatinib mesylate response: determinants of signaling profiles. Journal of immunological methods\| PubMed ID: 16169003	2005
Phosphoproteomic analysis of AML cell lines identifies leukemic oncogenes. Leukemia research\| PubMed ID: 16464493	2006
A common phosphotyrosine signature for the Bcr-Abl kinase. Blood\| PubMed ID: 16497976	2006
Activating alleles of JAK3 in acute megakaryoblastic leukemia. Cancer cell\| PubMed ID: 16843266	2006
Kinase domain mutants of Bcr-Abl exhibit altered transformation potency, kinase activity, and substrate utilization, irrespective of sensitivity to imatinib. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 16880519	2006
Phosphotyrosine profiling identifies the KG-1 cell line as a model for the study of FGFR1 fusions in acute myeloid leukemia. Blood\| PubMed ID: 16946300	2006
A novel fusion of RBM6 to CSF1R in acute megakaryoblastic leukemia. Blood\| PubMed ID: 17360941	2007
Structure determination and infrared spectroscopy of K(UO2)(SO4)(OH)(H2O) and K(UO2)(SO4)(OH). Inorganic chemistry\| PubMed ID: 17655223	2007
The enzymatic activity of 5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide formyltransferase/IMP cyclohydrolase is enhanced by NPM-ALK: new insights in ALK-mediated pathogenesis and the treatme... Blood\| PubMed ID: 18845790	2009
Induction of myeloproliferative disorder and myelofibrosis by thrombopoietin receptor W515 mutants is mediated by cytosolic tyrosine 112 of the receptor. Blood\| PubMed ID: 19996410	2010
Electron-beam lithography and molecular liftoff for directed attachment of DNA nanostructures on silicon: top-down meets bottom-up. Accounts of chemical research\| PubMed ID: 24716716	2014

Valerie Goss

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