visualizing-cell-to-cell-transfer-hiv-using-fluorescent-clones-hiv

Visualizing Cell-to-cell Transfer of HIV using Fluorescent Clones of HIV and Live Confocal Microscopy

By fusing the green fluorescent protein to their favorite proteins, biologists now have the ability to study living complex cellular processes using ...

Mount Sinai School of Medicine 

&#x541E;&#x566C;&#x662F;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3-&#x54E6;-&#x6FC0;&#x9176; (PI (3) K)-&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4ECE;&#x5C5E;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; Myo10 (&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;-X)&#xFF0C;&#x975E;&#x5E38;&#x89C4;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x5219;&#x4E0E; pleckstrin (PH) &#x540C;&#x6E90;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684; PI (3) K.Myo10 &#x4E0B;&#x6E38;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x5F81;&#x8058;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x676F;&#x6E25;&#x6F2B;&#x9752;&#x9709;&#x7D20;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;Myo10 &#x622A;&#x65AD;&#x6784;&#x9020;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F; (Myo10 tail) &#x5728;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x6E38;&#x79BB;&#x52A0;&#x8F7D;&#x6297; Myo10 &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x725B;&#x80BA;&#x6CE1;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;Myo10 &#x5C3E;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6784;&#x9020;&#x5305;&#x542B;&#x672A;&#x80FD;&#x6291;&#x5236;&#x541E;&#x566C;&#x5176; PH &#x57DF;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;Myo10 &#x5C3E;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D7;&#x5230;&#x6291;&#x5236;&#x8513;&#x5EF6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5374;&#x4E0D;&#x7C98;&#x9644; IgG &#x6D82;&#x5C42;&#x57FA;&#x677F;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x4E2D; pseudopod &#x6269;&#x5C55;&#x540D;&#x4E3A; Myo10 &#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; Myo10 &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86; PI (3) K &#x548C; pseudopod &#x6269;&#x5C55;&#x671F;&#x95F4;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x5B50;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;

&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; X &#x671F;&#x95F4;&#x541E;&#x566C; PI (3) K &#x4E0B;&#x6E38;&#x6548;&#x5E94;&#x3002;

Phagocytosis is a phosphatidylinositol-3-OH-kinase (PI(3)K)-dependent process in macrophages. We identified Myo10 (Myosin-X), an unconventional myosin with pleckstrin homology (PH) domains, as a potential downstream target of PI(3)K. Myo10 was recruited to phagocytic cups in a wortmannin-sensitive manner. Expression of a truncation construct of Myo10 (Myo10 tail) in a macrophage cell line or cytosolic loading of anti-Myo10 antibodies in bovine alveolar macrophages inhibited phagocytosis. In contrast, expression of a Myo10 tail construct containing a point mutation in one of its PH domains failed to inhibit phagocytosis. Expression of Myo10 tail inhibited spreading, but not adhesion, on IgG-coated substrates, consistent with a function for Myo10 in pseudopod extension. We propose that Myo10 provides a molecular link between PI(3)K and pseudopod extension during phagocytosis.

Myosin X is a downstream effector of PI(3)K during phagocytosis.

La phagocytose est une phosphatidylinositol-3-OH-kinase (PI (3) K)-processus d&eacute;pendant dans les macrophages. Nous avons identifi&eacute; Myo10 (myosine-X), une myosine non conventionnelle avec pleckstrine domaines d&#39;homologie (PH), comme une cible potentielle en aval de PI (3) K. Myo10 a &eacute;t&eacute; recrut&eacute;s &agrave; phagocytaires tasses de fa&ccedil;on sensible &agrave; la wortmannine. Expression d&#39;une construction de troncation de Myo10 (Myo10 queue) dans une lign&eacute;e de cellules macrophages ou chargement cytosolique des anticorps anti-Myo10 dans la phagocytose des macrophages alv&eacute;olaires bovins inhib&eacute;es. En revanche, vecteur d&#39;expression d&#39;une queue de Myo10 contenant une mutation ponctuelle dans l&#39;un de ses domaines de PH ne pas pu inhiber la phagocytose. Expression de queue Myo10 inhibe la propagation, mais pas d&#39;adh&eacute;rence, sur des substrats enduits IgG, compatibles avec une fonction de Myo10 dans l&#39;extension de pseudopodes. Nous proposons que Myo10 fournit un lien mol&eacute;culaire entre extension (3) K et pseudopodes PI durant la phagocytose.

X la myosine est un effecteur de PI (3) K au cours de la phagocytose.

Myosin X ist ein nachgeschalteter Effektor PI (3) K w&#xE4;hrend der Phagozytose.

Fagocitosi sono una fosfatidilinositolo-3-OH-chinasi (PI (3) K)-processo dipendente in macrofagi. Abbiamo identificato Myo10 (miosina-X), un&#39;anticonvenzionale miosina con settori dominii di omologia (PH), come un potenziale bersaglio a valle di PI (3) K. Myo10 &egrave; stati reclutati per fagocitaria tazze in maniera sensibile wortmannin. Espressione di un costrutto di troncamento di Myo10 (coda Myo10) in una linea cellulare dei macrofagi o caricamento citosolica degli anticorpi anti-Myo10 di fagocitosi dei macrofagi alveolari bovina inibiti. Al contrario, espressione di una coda Myo10 costrutto contenente una mutazione puntiforme in uno dei suoi domini PH non &egrave; riusciti a inibire la fagocitosi. Espressione di Myo10 coda ha inibito la diffusione, ma non l&#39;adesione, su substrati ricoperti da IgG, coerenti con una funzione per Myo10 in estensione pseudopodo. Proponiamo che Myo10 fornisce un legame molecolare tra PI (3) K e pseudopodo estensione durante la fagocitosi.

Miosina X &egrave; un effettore a valle di PI (3) K durante la fagocitosi.

&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB; 3-&#x30AA;&#x30CF;&#x30A4;&#x30AA;-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (PI (3) K)-&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3002;&#x6211;&#x3005; Myo10 &#x8B58;&#x5225; (&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; X)&#x3001;&#x578B;&#x7834;&#x308A;&#x306E;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; &#x30D7;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x76F8;&#x540C;&#x6027; (PH) &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068; PI (3) K. Myo10 &#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7; &#x30EF;&#x30EB;&#x30C8;&#x30DE;&#x30CB;&#x30F3;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3002;Myo10 &#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E;&#x5F0F; &#xFF08;Myo10 &#x5C3E;&#xFF09; &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x30A6;&#x30B7;&#x306E;&#x80BA;&#x80DE;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x306E;&#x6297; Myo10 &#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x8AAD;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;Myo10 &#x5C3E;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x304C;&#x69CB;&#x7BC9;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x305D;&#x306E; PH &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F0F; Myo10 &#x5C3E;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;IgG &#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x57FA;&#x677F;&#x3001;&#x95A2;&#x6570; Myo10 &#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x507D;&#x8DB3;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x4ED8;&#x7740;&#x6291;&#x5236;&#x3002;Myo10 PI (3) K &#x3068;&#x507D;&#x8DB3;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50; b-6-1010 &#x9593;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; X &#x4E0B;&#x6D41;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; PI (3) K &#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x4E2D;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; phosphatidylinositol-3-&#xC624;-&#xD0A4; (PI (3) K)-&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC885;&#xC18D; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;. Myo10 &#xC2DD;&#xBCC4; (Myosin-X), &#xD30C;&#xC774; (3) K. myo10&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; pleckstrin homology (PH) &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;, &#xD2C0;&#xC5D0; &#xC5BD;&#xB9E4;&#xC774;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; myosin&#xB294; phagocytic&#xC5D0; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xB41C; &#xCEF5; wortmannin &#xAD6C;&#xBD84; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C;. Myo10&#xC758; &#xC798;&#xB9BC; &#xAD6C;&#xBB38; &#xC2DD; (Myo10 &#xAF2C;&#xB9AC;) macrophage &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xB610;&#xB294; &#xC800;&#xD574; &#xC18C;&#xACFC; &#xD3D0; &#xD3EC; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xD2F0;-Myo10 &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; cytosolic &#xB85C;&#xB4DC;&#xC5D0;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC2DD; Myo10 &#xAF2C;&#xB9AC;&#xC758; &#xC810; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xB294; PH &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC131;. Myo10 &#xAF2C;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD655;&#xC0B0;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; pseudopod &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0; myo10&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; IgG &#xCF54;&#xD305; &#xB41C; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29; &#xD558;&#xC9C0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Myo10 &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD30C;&#xC774; (3) K&#xC640; pseudopod &#xD655;&#xC7A5; &#xC0AC;&#xC774; &#xBD84;&#xC790; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Myosin X &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD30C;&#xC774; (3) K&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La fagocitosis es una fosfatidilinositol-3-OH-quinasa (PI (3) K)-proceso dependiente en macr&oacute;fagos. Identificamos Myo10 (miosina-X), una miosina no convencional con dominios de la homolog&iacute;a (PH) de pleckstrin, como una potencial diana de PI (3) K. Myo10 fue reclutados a fagoc&iacute;ticas tazas de manera sensible a la wortmannin. Expresi&oacute;n de una construcci&oacute;n de truncamiento de Myo10 (Myo10 cola) en una l&iacute;nea celular de macr&oacute;fagos o carga citos&oacute;lica de anticuerpos anti-Myo10 en la fagocitosis de los macr&oacute;fagos alveolares bovina inhibidas. En cambio, la expresi&oacute;n de una cola de Myo10 construir que contiene una mutaci&oacute;n de punto en uno de sus dominios de PH no inhiben la fagocitosis. Expresi&oacute;n de cola Myo10 hab&iacute;a inhibido separarse, pero no la adherencia, sobre superficies de IgG-revestida, consistentes con una funci&oacute;n para Myo10 en la extensi&oacute;n del seud&oacute;podo. Proponemos que Myo10 proporciona un v&iacute;nculo molecular entre PI (3) K y seud&oacute;podo extensi&oacute;n durante la fagocitosis.

Miosina X es un efector downstream de PI (3) K durante la fagocitosis.

&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; ATP &#x7ED3;&#x5408;&#x76D2;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D; A1 &#x548C; A7 &#xFF08;ABCA1 &#x548C;-A7&#xFF09; &#x653E;&#x6620;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x571F;&#x6728;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7F72;-7&#xFF0C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#x7684;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5229;&#x7528; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x6280;&#x672F;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x6253;&#x9776;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x6572;&#x4E0B;&#x6765;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; ABCA7 &#x4F46;&#x4E0D;-A1 &#x5BFC;&#x81F4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x88AB;&#x706B;&#x7130;&#x541E;&#x6CA1;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#xFF0C;ABCA7 &#x5C06;&#x79FB;&#x81F3;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0E;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; 1 (LRP1) &#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x676F; colocalizes&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x5B9A;&#x4F4D; ABCA7 &#x4E0E; LRP1 ABCA7 &#x7F3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;C1q &#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x901A;&#x8FC7;&#x541E;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; LRP1 &#x8BF1;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x8282;&#x6FC0;&#x9176; &#xFF08;ERK&#xFF09; &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x8C03;&#x7406;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; ERK &#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x4E3A;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6216; C1q &#x56DE;&#x5E94; ERK &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5904;&#x4E8E; ABCA7 &#x7F3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; ABCA7 &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x4E0D;-&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#x4E2D; A1 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x5EFA;&#x8BAE; ABCA7 &#x662F;&#x6B63;&#x5B97;&#x7684;&#x571F;&#x6728;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7F72; 7 orthologue&#x3002;

ATP &#x7ED3;&#x5408;&#x76D2;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D; A7 &#x589E;&#x5F3A;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x5173;&#x8054; ERK&#x3002;

The mammalian ATP-binding cassette transporters A1 and A7 (ABCA1 and -A7) show sequence similarity to CED-7, a Caenorhabditis elegans gene that mediates the clearance of apoptotic cells. Using RNA interference or gene targeting, we show that knock down of macrophage ABCA7 but not -A1 results in defective engulfment of apoptotic cells. In response to apoptotic cells, ABCA7 moves to the macrophage cell surface and colocalizes with the low-density lipoprotein receptor-related protein 1 (LRP1) in phagocytic cups. The cell surface localization of ABCA7 and LRP1 is defective in ABCA7-deficient cells. C1q is an opsonin of apoptotic cells that acts via phagocyte LRP1 to induce extracellular signal-regulated kinase (ERK) signaling. We show that ERK signaling is required for phagocytosis of apoptotic cells and that ERK phosphorylation in response to apoptotic cells or C1q is defective in ABCA7-deficient cells. These studies reveal a major role of ABCA7 and not -A1 in the clearance of apoptotic cells and therefore suggest that ABCA7 is an authentic orthologue of CED-7.

ATP-binding cassette transporter A7 enhances phagocytosis of apoptotic cells and associated ERK signaling in macrophages.

Le mammif&egrave;res ATP-binding cassette transporteurs A1 et A7 (ABCA1 et - A7) Voir la similarit&eacute; de s&eacute;quence &agrave; CED-7, un g&egrave;ne d&#39;elegans de Caenorhabditis qui intervient dans le d&eacute;gagement des cellules apoptotic. En utilisant l&#39;interf&eacute;rence ARN ou ciblage g&eacute;n&eacute;tique, nous montrons que frapper vers le bas des macrophages ABCA7 mais pas - A1 entra&icirc;ne d&eacute;fectueuse d&#39;une dur&eacute;e de cellules apoptotiques. En r&eacute;ponse &agrave; des cellules apoptotiques, ABCA7 se d&eacute;place &agrave; la surface des cellules macrophages et localis&eacute;e avec la prot&eacute;ine ax&eacute;es sur les r&eacute;cepteurs de lipoprot&eacute;ines de basse densit&eacute; 1 (LRP1) dans des tasses phagocytaires. La localisation de surface cellulaire de ABCA7 et LRP1 est d&eacute;fectueuse dans les cellules d&eacute;ficientes en ABCA7. C1q est une opsonine de cellules apoptotiques qui agit par l&#39;interm&eacute;diaire de phagocyte LRP1 pour induire la signalisation de la kinase de signal-r&eacute;gl&eacute;e extracellulaire (ERK). Nous montrons qu&#39;il est n&eacute;cessaire pour la phagocytose des cellules apoptotiques ERK signalisation et que la phosphorylation de ERK en r&eacute;ponse &agrave; cellules apoptotiques ou C1q est d&eacute;fectueuse dans les cellules d&eacute;ficientes en ABCA7. Ces &eacute;tudes r&eacute;v&egrave;lent un r&ocirc;le majeur d&#39;ABCA7 et non - A1 dans la clairance de l&#39;apoptose des cellules et sugg&egrave;re donc que le ABCA7 est un authentique orthologue de CED-7.

Transporteur de ATP binding cassette A7 am&eacute;liore la phagocytose des cellules apoptotiques et ERK associ&eacute; de signalisation dans les macrophages.

Die S&auml;ugetier-ATP-Bindung Kassette Transporter A1 und A7 (ABCA1 und -A7) Karte Sequenz &Auml;hnlichkeit mit CED-7, ein Fadenwurm Caenorhabditis Elegans-Gen, das den Abstand der Apoptotic Zellen vermittelt. Mithilfe von RNA-Interferenz oder Gene targeting, zeigen wir, dass Knock nach unten von Makrophagen ABCA7 aber nicht - A1 f&uuml;hrt zu defekten Engulfment der Apoptotic Zellen. Reaktion auf Apoptotic Zellen ABCA7 bewegt sich der Zelloberfl&auml;che Makrophagen und colocalizes mit dem low density Lipoprotein Rezeptor-related Protein 1 (LRP1) in phagozytische Tassen. Die Zelle Oberfl&auml;che Lokalisierung von ABCA7 und LRP1 ist in ABCA7-defizienten Zellen defekt. C1q ist ein Opsonin Apoptotic Zellen, die &uuml;ber Phagozyten LRP1 extrazellul&auml;re Signal-regulierte Kinase (ERK) Signalisierung veranlassen fungiert. Wir zeigen, dass ERK Signalisierung f&uuml;r Phagozytose der Apoptotic Zellen ben&ouml;tigt und ERK Phosphorylierung Reaktion auf Apoptotic Zellen oder C1q in ABCA7-defizienten Zellen defekt ist. Diese Studien zeigen eine wichtige Rolle des ABCA7 und nicht - A1 in der Abwicklung der Apoptotic Zellen und daher vorschlagen, dass ABCA7 eine authentische Orthologue CED-7.

ATP verbindliche Kassette Transporter A7 verbessert die Phagozytose von apoptotischen Zellen und zugeh&ouml;rigen ERK signalisieren in Makrophagen.

Il mammifero ATP-binding cassette trasportatori A1 e A7 (ABCA1 e - A7) Visualizza sequenza somiglianza con CED-7, un gene elegans di Caenorhabditis che media la distanza delle cellule apoptotic. Utilizzo di interferenza del RNA o gene targeting, mostriamo che bussare gi&ugrave; del macrofago ABCA7 ma non - A1 risultati in engulfment difettoso delle cellule apoptotic. In risposta a cellule apoptotic, ABCA7 si sposta verso la superficie cellulare dei macrofagi e colocalizza con lipoproteine a bassa densit&agrave; receptor-related protein 1 (LRP1) in tazze fagocitiche. La localizzazione superficiale delle cellule di ABCA7 e LRP1 &egrave; difettosa in cellule ABCA7-carenti. C1q &egrave; un&#39;opsonina delle cellule apoptotic che agisce tramite fagocita LRP1 per indurre la segnalazione chinasi segnale-regolata extracellulare (ERK). Mostriamo che ERK segnalazione &egrave; necessaria per la fagocitosi delle cellule apoptotic e che la fosforilazione di ERK in risposta a cellule apoptotic o C1q &egrave; difettosa in cellule ABCA7-carenti. Questi studi rivelano un importante ruolo di ABCA7 e non - A1 in liquidazione di apoptotic cellule e quindi suggeriscono che la ABCA7 &egrave; un&#39;autentica orthologue di CED-7.

Trasportatore di ATP-binding cassette A7 migliora la fagocitosi delle cellule apoptotic e associati ERK segnalazione in macrofagi.

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E; ATP &#x7D50;&#x5408;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; A1 &#x3068; A7 (ABCA1 &#x3068; - A7) &#x30B7;&#x30E7;&#x30FC; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;&#x7DDA;&#x866B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; CED 7&#x3002;RNA &#x5E72;&#x6E09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x305D;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF; &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E; ABCA7 &#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;A1 &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x306A;&#x3044;-&#x3002;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3001;ABCA7 &#x306F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x3001;&#x4F4E;&#x6BD4;&#x91CD;&#x30EA;&#x30DD;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 1 (LRP1) &#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068; colocalizes&#x3002;ABCA7 &#x3068; LRP1 &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x5C40;&#x5728; ABCA7 &#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x88DC;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;ERK&#xFF09; &#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B; LRP1 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x30AA;&#x30D7;&#x30BD;&#x30CB;&#x30F3; &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;ERK &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x304C;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068; ERK &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x88DC; ABCA7 &#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76; ABCA7 &#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x306A;&#x3044; - A1 &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066; ABCA7&#x3001;&#x672C;&#x683C;&#x7684;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x76F4;&#x7CFB;&#x306E; CED 7 &#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

ATP &#x7D50;&#x5408;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; A7 &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F; ERK &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD3EC;&#xC720;&#xB958; ATP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; a 1&#xACFC; a 7 &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30; (abca1&#xC640;-A7) &#xC1FC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131; apoptotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; Caenorhabditis elegans &#xC720;&#xC804;&#xC790; CED 7. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; abca7&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADF8; &#xB178;&#xD06C; &#xD45C;&#xC2DC; RNA &#xAC04;&#xC12D; &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, A1 apoptotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; engulfment&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xD558;&#xC9C0;-&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;. Apoptotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;, ABCA7 macrophage &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; &#xC800;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; phagocytic &#xCEF5;&#xC5D0;&#xC11C; 1 (LRP1)&#xC640; colocalizes. ABCA7 &#xBC0F; LRP1 &#xC140; &#xD45C;&#xBA74; &#xD604;&#xC9C0;&#xD654;&#xC5D0; ABCA7 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. C1q apoptotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (ERK) &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; LRP1 &#xD1B5;&#xD574; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; opsonin&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; ERK &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; apoptotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xBA70; ABCA7 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; ERK apoptotic &#xC138;&#xD3EC; c1q&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; abca7&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xC9C0;-apoptotic &#xC815;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; A1 &#xC140; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; ABCA7 CED 7&#xC758; &#xBCF8;&#xACA9;&#xC801;&#xC778; orthologue&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

ATP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; &#xC804;&#xC1A1; A7 apoptotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; ERK &#xC2E0;&#xD638; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los mam&iacute;fera ATP-binding cassette transportadores A1 y A7 (ABCA1 - A7) Mostrar secuencia similitud y a CED-7, un gen de Caenorhabditis elegans que media la separaci&oacute;n de c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas. Utilizando ARN de interferencia o gene targeting, mostramos eso golpes abajo de macr&oacute;fagos ABCA7 pero no - A1 produce inmersi&oacute;n defectuoso de c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas. En respuesta a c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas, ABCA7 se traslada a la superficie de la c&eacute;lula de macr&oacute;fagos y colocalizes con la prote&iacute;na del receptor-relacionada de la lipoprote&iacute;na de baja densidad 1 (LRP1) en tazas fagocitarias. La localizaci&oacute;n superficial de la c&eacute;lula de ABCA7 y LRP1 es defectuosa en c&eacute;lulas ABCA7-deficientes. C1q es opsonina de c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas que act&uacute;a v&iacute;a fagocito LRP1 para inducir la se&ntilde;alizaci&oacute;n de la quinasa regulada por se&ntilde;ales extracelular (ERK). Mostramos que es necesaria para la fagocitosis de c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas la se&ntilde;alizaci&oacute;n de ERK y que la fosforilaci&oacute;n de ERK en c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas o C1q es defectuosa en c&eacute;lulas ABCA7-deficientes. Estos estudios revelan una importante funci&oacute;n de ABCA7 y no - A1 en la liquidaci&oacute;n de la apoptosis de las c&eacute;lulas y por lo tanto sugerimos que ABCA7 es un aut&eacute;ntico orthologue del CED-7.

Transportador de ATP-binding cassette A7 mejora la fagocitosis de c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas y se&ntilde;alizaci&oacute;n de ERK asociado en macr&oacute;fagos.

&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;-3 &#xFF08;&#x6EDE;&#x540E; 3&#xFF09; &#x662F; CD4 &#x76F8;&#x5173;&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x6240;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5C06; MHC II &#x88C5;&#x7532;&#x8FD0;&#x5175;&#x8F66;&#x4E0A;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#x5728; Treg:DC &#x4EA4;&#x4E92;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6EDE;&#x540E; 3 &#x53C2;&#x4E0E;&#x4E0E; MHC &#x7C7B;&#x4E8C;&#x6291;&#x5236;&#x76F4;&#x6D41;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x7531;&#x5361;&#x5DF4; Abs &#x4EA4;&#x8054;&#x7684; MHC II &#x8BF1;&#x5BFC; ITAM &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6291;&#x5236;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA; FcgammaRgamma &#x548C; ERK &#x4ECB;&#x5BFC;&#x62DB;&#x8058;&#x5C0F;&#x6C34;&#x7535;-1 &#x80FD;&#x6291;&#x5236;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x53CA;&#x514D;&#x75AB;&#x523A;&#x6FC0;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x65B0;&#x578B; ITAM &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6291;&#x5236;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF; dcs &#x7CFB;&#x7EDF;&#x89E6;&#x53D1;&#x7684; MHC II &#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x6EDE;&#x540E; 3&#x3001; &#x63D0;&#x4F9B;&#x76D1;&#x7BA1; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x7981;&#x6B62;&#x663E;&#x793A;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x76F4;&#x6D41;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6291;&#x5236;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7B2C; II &#x7C7B; MHC &#x7684;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0; 3 &#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;

Lymphocyte activation gene-3 (LAG-3) is a CD4-related transmembrane protein expressed by regulatory T cells that binds MHC II on APCs. It is shown in this study that during Treg:DC interactions, LAG-3 engagement with MHC class II inhibits DC activation. MHC II cross-linking by agonistic Abs induces an ITAM-mediated inhibitory signaling pathway, involving FcgammaRgamma and ERK-mediated recruitment of SHP-1 that suppresses dendritic cell maturation and immunostimulatory capacity. These data reveal a novel ITAM-mediated inhibitory signaling pathway in DCs triggered by MHC II engagement of LAG-3, providing a molecular mechanism in which regulatory T cells may suppress via modulating DC function.

Regulatory T cells inhibit dendritic cells by lymphocyte activation gene-3 engagement of MHC class II.

Lymphocyte activation g&eacute;nique-3 (gal-3) est une ax&eacute;s sur les CD4 prot&eacute;ine transmembranaire exprim&eacute;e par les cellules T r&eacute;gulatrices qui lie le CMH II sur TTB. Il est montr&eacute; dans cette &eacute;tude que lors des interactions Treg:DC, LAG-3 engagement avec MHC classe II emp&ecirc;che l&#39;activation de la DC. MHC II r&eacute;ticulation par Abs agonistiques induit une voie signalisation inhibitrice m&eacute;di&eacute;e par ITAM, FcgammaRgamma et ERK m&eacute;di&eacute;e par le recrutement de SHP-1, ce qui supprime la capacit&eacute; de maturation et immunostimulantes de cellules dendritiques. Ces donn&eacute;es r&eacute;v&egrave;lent un roman ITAM inhibiteur signalisation m&eacute;di&eacute; dans DCs d&eacute;clench&eacute;e par l&#39;engagement de MHC II de LAG-3, fournissant un m&eacute;canisme mol&eacute;culaire dans laquelle les lymphocytes T r&eacute;gulateurs peuvent supprimer via modulant DC fonction.

Les lymphocytes T r&eacute;gulateurs inhibent les cellules dendritiques de lymphocyte activation g&eacute;nique-3 engagement du CMH de classe II.

Lymphozyte Aktivierung Gen-3 (LAG-3) ist ein CD4-bezogene Transmembraneprotein ausgedr&uuml;ckt durch regulatorische T-Zellen, die MHC-II auf APCs bindet. Es wird in dieser Studie gezeigt, dass w&auml;hrend Treg:DC Interaktionen, LAG-3 Engagement mit MHC-Klasse II DC Aktivierung hemmt. MHC-II, die Vernetzung von agonistischen Abs induziert eine ITAM-vermittelte hemmenden Signalweg, FcgammaRgamma und ERK-vermittelten Rekrutierung von SHP-1, die Reifung und immunstimulierendes Kapazit&auml;t dendritischen Zellen unterdr&uuml;ckt. Diese Daten zeigen eine neuartige ITAM-vermittelte hemmenden Signalweges in DCs durch MHC-II-Engagement der LAG-3, Bereitstellen eines molekularen Mechanismus in dem regulatorische T-Zellen unterdr&uuml;cken k&ouml;nnen, &uuml;ber die Modulation der DC-Funktion ausgel&ouml;st.

Regulatorische T-Zellen hemmen dendritische Zellen von Lymphozyte Aktivierung Gen-3 Engagement der MHC-Klasse II.

Linfocita attivazione genica-3 (Gal-3) &egrave; una CD4-correlati proteina transmembrana espressa da cellule T regolatorie che lega il MHC II sulla APC. In questo studio si &egrave; mostrato che durante le interazioni Treg:DC, Gal-3 fidanzamento con classe MHC II inibisce attivazione DC. MHC II cross-linking da Abs agonistica induce un ITAM-mediata inibitorio signaling pathway, che coinvolge FcgammaRgamma ed ERK-mediata assunzione di SHP-1 che sopprime la capacit&agrave; di maturazione e immunostimolante delle cellule dendritiche. Questi dati rivelano una romanzo ITAM-mediata inibitoria via di segnalazione nel sistema DCs innescato dall&#39;impegno di MHC II della Gal-3, fornendo un meccanismo molecolare in cui cellule T regolatorie possono sopprimere via modulando la funzione DC.

Cellule T regolatorie inibiscono le cellule dendritiche di impegno di gene-3 attivazione dei linfociti della classe MHC II.

&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; 3 (&#x30E9;&#x30B0;-3) Apc &#x306E; MHC II &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x73FE; CD4 &#x95A2;&#x9023;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F; Treg:DC &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E2D;&#x306B;&#x30E9;&#x30B0; 3 &#x5A5A;&#x7D04; MHC &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x3068; DC &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;MHC &#x6575;&#x5BFE; Abs &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x67B6;&#x6A4B; II &#x306F; ITAM &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3001;FcgammaRgamma &#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B; SHP 1 &#x306E; ERK &#x4ECB;&#x5728;&#x6027;&#x52DF;&#x96C6;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x65B0;&#x898F; ITAM &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF; MHC II &#x5A5A;&#x7D04;&#x306E;&#x30E9;&#x30B0;-3 &#x306F; DC &#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x6027; T &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B; DCs &#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;

&#x5236;&#x5FA1;&#x6027; T &#x7D30;&#x80DE;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; 3 &#x5A5A;&#x7D04; MHC &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xC804;&#xC790;-3 (&#xC9C0;&#xC5F0;-3)&#xC740; CD4 &#xAD00;&#xB828; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADDC;&#xC81C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; Apcs&#xC5D0; MHC II&#xB294;. Treg:DC &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC9C0;&#xC5F0; 3 &#xCC38;&#xC5EC; MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II&#xC640; DC &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. MHC II agonistic &#xBCF5; &#xADFC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0C1;&#xD638; Fcgammargamma&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC219;&#xACFC; immunostimulatory &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; SHP 1 &#xBAA8;&#xC9D1; ERK &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; ITAM &#xC911;&#xC7AC; &#xAE08;&#xC9C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;, &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC18C;&#xC124; ITAM &#xC911;&#xC7AC; &#xAE08;&#xC9C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; MHC II &#xACC4;&#xC57D; &#xC9C0;&#xC5F0;-3, &#xADDC;&#xC81C; T &#xC138;&#xD3EC; DC &#xD568;&#xC218; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5B5;&#xC555; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; Dc&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xAC1C;.

&#xADDC;&#xC81C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xC804;&#xC790;-3 MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Linfocito activaci&oacute;n g&eacute;nica-3 (LAG-3) es una relacionados con CD4 prote&iacute;na transmembrana expresada por las c&eacute;lulas T reguladoras que une MHC II en APC. En este estudio se demuestra que durante las interacciones Treg:DC, LAG-3 compromiso con MHC de clase II inhibe la activaci&oacute;n de la DC. MHC II Cross-linking de Abs agon&iacute;stica induce una v&iacute;a se&ntilde;alizaci&oacute;n inhibitoria mediada por el ITAM, FcgammaRgamma y reclutamiento de ERK-mediada de SHP-1 que suprime la capacidad de maduraci&oacute;n e inmunoestimulantes de c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas. Estos datos revelan una novela ITAM-mediada inhibitoria v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n en DCs desencadenada por compromiso de MHC II de LAG-3, proporcionando un mecanismo molecular que pueden suprimir las c&eacute;lulas T reguladoras mediante modulaci&oacute;n funci&oacute;n DC.

Las c&eacute;lulas T reguladoras inhiben a las c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas por participaci&oacute;n de gene-3 de activaci&oacute;n de linfocitos de MHC de clase II.

&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x662F;&#x5927;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x8FDE;&#x79F0;&#x4E3A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5E95;&#x5C42;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4E00;&#x76F4;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x4E0E;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8DDF;&#x8E2A; Gag &#x6D3B;&#x7684; CD4 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x548C;&#x6355;&#x83B7;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8DE8;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x76F4;&#x63A5;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3001; &#x9AD8;&#x901F;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x89C6;&#x9891;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x663E;&#x793A;&#x5FAE;&#x7C73;&#x5927;&#x5C0F;&quot;&#x6309;&#x94AE;&quot;&#x542B; oligomerized &#x75C5;&#x6BD2; hiv-1 &#x6838;&#x5FC3;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6309;&#x94AE;&#x6324;&#x6EE1;&#x4E86;&#x840C;&#x82BD;&#x75C5;&#x6BD2; crescents&#x3002;&#x5F80;&#x7A97;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2;-&#x62C9;&#x767B;&#x5185;&#x90E8;&#x8F66;&#x53A2;&#x5728;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x8F93;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FDE;&#x7EED;&#x5B9A;&#x65F6;&#x76D1;&#x6D4B;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F18;&#x60E0;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x8026;&#x5408;&#x5230;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x541E;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7A81;&#x89E6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x52A0;&#x5F3A;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;

&#x5B9A;&#x91CF; 3D &#x89C6;&#x9891;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x8DE8;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A81;&#x89E6;&#x3002;

The spread of HIV between immune cells is greatly enhanced by cell-cell adhesions called virological synapses, although the underlying mechanisms have been unclear. With use of an infectious, fluorescent clone of HIV, we tracked the movement of Gag in live CD4 T cells and captured the direct translocation of HIV across the virological synapse. Quantitative, high-speed three-dimensional (3D) video microscopy revealed the rapid formation of micrometer-sized "buttons" containing oligomerized viral Gag protein. Electron microscopy showed that these buttons were packed with budding viral crescents. Viral transfer events were observed to form virus-laden internal compartments within target cells. Continuous time-lapse monitoring showed preferential infection through synapses. Thus, HIV dissemination may be enhanced by virological synapse-mediated cell adhesion coupled to viral endocytosis.

Quantitative 3D video microscopy of HIV transfer across T cell virological synapses.

La propagation du VIH entre les cellules immunitaires est grandement renforc&#xE9;e par cellule-cellule, appel&#xE9;es synapses virologiques adh&#xE9;rences, bien que les m&#xE9;canismes sous-jacents ont &#xE9;t&#xE9; claire. Avec l&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;une maladie infectieuse, le clone fluorescent du VIH, nous avons suivi le mouvement de Gag en direct les cellules T CD4 et s&#x26;#39;empara de la translocation directe du VIH &#xE0; travers la synapse virologique. Quantitative, &#xE0; haute vitesse en trois dimensions la vid&#xE9;o-microscopie (3D) a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; la formation rapide d&#x26;#39;taille microm&#xE9;trique &#x26;quot;boutons&#x26;quot; contenant oligom&#xE9;ris&#xE9; prot&#xE9;ine Gag virale. La microscopie &#xE9;lectronique a montr&#xE9; que ces boutons ont &#xE9;t&#xE9; emball&#xE9;s avec herbe croissants virales. &#xC9;v&#xE9;nements de transfert virales ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;es pour former charg&#xE9;es de virus compartiments internes au sein des cellules cibles. Continue time-lapse de surveillance ont montr&#xE9; une infection pr&#xE9;f&#xE9;rentielle par des synapses. Ainsi, la diffusion du VIH peut &#xEA;tre renforc&#xE9;e par l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire m&#xE9;di&#xE9;e par synapse virologique coupl&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;endocytose virale.

Microscopie quantitative vid&#xE9;o 3D du VIH de transfert &#xE0; travers les synapses virologiques cellules T

Die Ausbreitung von HIV zwischen Immunzellen wird durch Zell-Zell-Adh&auml;sionen genannt virologische Synapsen erheblich verbessert, obwohl die zugrunde liegenden Mechanismen unklar gewesen. Mit Einsatz von einer infekti&ouml;sen, fluoreszierend Klon des HIV wir verfolgt die Bewegung der Gag in lebenden CD4 T-Zellen und erfasst den direkten Translokation von HIV in der virologischen Synapse. Quantitative, High-Speed-dreidimensionale (3D)-video-Mikroskopie deckte die rasche Bildung von Mikrometer Gr&ouml;&szlig;e &quot;Schaltfl&auml;chen&quot; mit oligomerized virale Gag-Protein. Elektronenmikroskopie zeigte, dass diese Tasten mit angehenden virale Halbmonde verpackt wurden. Zum Formular Virus beladene Innenf&auml;cher in Zielzellen wurden virale Transfer Ereignisse beobachtet. Kontinuierliche &Uuml;berwachung der Zeitraffer zeigte bevorzugte Infektionen durch Synapsen. Somit kann HIV-Verbreitung durch virologische Synapse-vermittelte Zelladh&auml;sion gekoppelt mit viralen Endozytose verbessert werden.

Quantitative 3D video-Mikroskopie der HIV-&Uuml;bertragung &uuml;ber T-Zell-virologischen Synapsen.

La diffusione dell&#39;HIV tra cellule del sistema immunitario &egrave; notevolmente migliorata da adesioni cellula-cellula chiamati sinapsi virologiche, sebbene i meccanismi sottostanti sono state poco chiari. Con l&#39;uso di un clone infettivo, fluorescente dell&#39;HIV, abbiamo monitorato il movimento di Gag in vivo delle cellule T CD4 e catturato la traslocazione diretta dell&#39;HIV attraverso la sinapsi virologica. Quantitativa, ad alta velocit&agrave; tridimensionale (3D) video microscopia rivel&ograve; la rapida formazione di dimensioni micrometriche &quot;pulsanti&quot; contenente oligomerized proteina virale di Gag. La microscopia elettronica ha dimostrato che questi pulsanti sono stati confezionati con mezzaluna virale in erba. Gli eventi di trasferimento virale sono stati osservati a scomparti interni carichi di virus forma all&#39;interno delle cellule bersaglio. Time-lapse di monitoraggio continuo hanno mostrato infezione preferenziale attraverso la sinapsi. Cos&igrave;, diffusione dell&#39;HIV pu&ograve; essere rafforzata dall&#39;adesione virologica mediata da sinapsi cellulare accoppiato per endocitosi virale.

Quantitativa 3D video microscopia del trasferimento dell&#39;HIV attraverso cellule T virologica sinapsi.

&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;HIV&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x5E83;&#x304C;&#x308A;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; HIV&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;CD4 T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3057;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;HIV&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x6355;&#x7372;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x3001;&#x9AD8;&#x901F;&#x306A;3&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;3D&#xFF09;&#x30D3;&#x30C7;&#x30AA;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;Gag&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x542B;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E; &#x26;quot;&#x30DC;&#x30BF;&#x30F3;&#x26;quot;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DC;&#x30BF;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x82BD;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E09;&#x65E5;&#x6708;&#x304C;&#x8A70;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3060;&#x5185;&#x90E8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x306E;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;HIV&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;HIV&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;3D&#x30D3;&#x30C7;&#x30AA;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;

&#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04;&#xC758; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;&#xC758; &#xD655;&#xC0B0;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBD84;&#xBA85; &#xC788;&#xB2E4; &#xC9C0;&#xB9CC; &#xC140; &#xC720;&#xCC29; virological &#xB0C5; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD558;&#xBA74; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. HIV&#xC758; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131;, &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC1C; &#xADF8; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; CD4 T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xCD94;&#xC801; &#xD558; &#xACE0; &#xCEA1;&#xCC98;&#xD55C; virological &#xB0C5;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; HIV&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC804;. &#xC591;&#xC801;, &#xACE0;&#xC18D; 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xC601;&#xC0C1; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD130; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &quot;&#xBC84;&#xD2BC;&quot; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; oligomerized &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC1C; &#xADF8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC774;&#xC774; &#xB2E8;&#xCD94; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD06C;&#xB808;&#xC13C;&#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB77C;&#xB374; &#xB0B4;&#xBD80; &#xAD6C;&#xD68D; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xC18D; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC6B0;&#xC120; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; HIV &#xBCF4;&#xAE09; virological &#xB0C5; &#xC911;&#xC7AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; endocytosis &#xD558; &#xAC8C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

T &#xC140; virological &#xAC78;&#xCCD0; HIV &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xC591;&#xC801; 3D &#xBE44;&#xB514;&#xC624; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; synapses.

La propagaci&#xF3;n del VIH entre las c&#xE9;lulas del sistema inmune es mucho mayor por las adherencias c&#xE9;lula-c&#xE9;lula llamadas sinapsis virol&#xF3;gicas, aunque los mecanismos subyacentes no han sido claros. Con el uso de un clon infeccioso, fluorescente de VIH, seguimiento del movimiento de la mordaza en vivo las c&#xE9;lulas T CD4 y captur&#xF3; la translocaci&#xF3;n directa del VIH a trav&#xE9;s de la sinapsis virol&#xF3;gica. Cuantitativo, de alta velocidad en tres dimensiones (3D) la microscop&#xED;a de v&#xED;deo revela la r&#xE1;pida formaci&#xF3;n de micr&#xF3;metros de tama&#xF1;o &#x26;quot;botones&#x26;quot; que contienen la prote&#xED;na Gag oligomerizarse viral. La microscopia electr&#xF3;nica demostr&#xF3; que estos botones se llena de medias lunas en ciernes virales. Eventos virales de transferencia se observaron para formar virus cargados de compartimentos internos dentro de las c&#xE9;lulas diana. Continua de lapso de tiempo de seguimiento mostraron infecci&#xF3;n preferencial a trav&#xE9;s de las sinapsis. As&#xED;, la difusi&#xF3;n del VIH puede ser mejorada por adhesi&#xF3;n celular sinapsis virol&#xF3;gicas mediada acoplado a endocitosis viral.

Microscop&#xED;a cuantitativa de v&#xED;deo 3D del VIH de transferencia a trav&#xE9;s de sinapsis virol&#xF3;gicas de c&#xE9;lulas T

Fc &gamma; &#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;Fc &#x4F3D;&#x9A6C;)-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x541E;&#x566C;&#x4F5C;&#x7528;&#x5DF2;&#x77E5;&#x9700;&#x8981;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176; (&#x8C22;&#x8C22;)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; c Cbl &#x548C; Cbl b &#x4F5C;&#x4E3A;&#x63A5;&#x53D7;&#x5728;&#x541E;&#x566C;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;Cbl &#x7F3A;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x5F3A; Fc &#x4F3D;&#x9A6C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x548C;&#x541E;&#x566C;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86; IgG &#x6D82;&#x5C42;&#x76EE;&#x6807; &#xFF08;&#x57C3;&#x683C;&#x5C9B;&#xFF09; &#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; c Cbl &#x7F3A;&#x8868;&#x793A;&#x5C11; Fc gammaRIIb&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x7684; Fc &gamma; &#x53D7;&#x4F53; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6CA1;&#x6709;&#x8003;&#x8651;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B64;&#x7ACB;&#x4E00;&#x4E2A; Fc &#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x578B;&#xFF0C;Fc gammaRI &#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x4F7F;&#x7528; IgG2a &#x6D82;&#x5C42;&#x76EE;&#x6807; (EIgG2a)&#x3002;Cbl &#x7F3A;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x7684; EIgG2a&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x8C03;&#x8282; opsonized &#x76EE;&#x6807;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6548;&#x7387;&#x4E0D;&#x6210;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x5728;&#x9759;&#x606F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;Fc gammaRI colocalized &#x7684; Src &#x5BB6;&#x5EAD; TK Hck F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#xFF0C;Cbl &#x7F3A;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5F97;&#x5230;&#x4E86;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x7684;&#x5BF9;&#x4F20;&#x7EDF;&#x77E5;&#x8BC6;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x6DF1;&#x523B;&#x5730;&#x6291;&#x5236;&#x540E;&#x6D88;&#x8017;&#xFF0C;&#x548C;&#x70E7;&#x8680;&#x5728;&#x6444;&#x6C0F; 4 &#x5EA6;&#x6216;&#x6291;&#x5236;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x5242;&#x654F;&#x611F;&#x3002;&#x57C3;&#x683C;&#x5C9B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x9AA8;&#x67B6;&#x4E2D;&#x65AD;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x662F;&#x8C03;&#x7406;&#x7D20;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x6210;&#x53CD;&#x6BD4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728; Fc &#x4F3D;&#x9A6C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x88AB;&#x52A8;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x89C2;&#x70B9;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x8D28;&#x7591;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8C22;&#x8C22;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&quot;&#x91D1;&#x661F;&#x98DE;&#x9677;&#x9631;&quot;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6355;&#x83B7;&#x7684;&#x8C03;&#x7406;&#x7D20;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x9650;&#x5236;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

&#x5728;&#x7F3A;&#x4E4F; Cbl &#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86; Fc &gamma; &#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x76EE;&#x6807;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Fc gamma receptor (Fc gammaR)-mediated phagocytosis is known to require tyrosine kinases (TKs). We identified c-Cbl and Cbl-b as proteins that undergo tyrosine phosphorylation during phagocytosis. Cbl-deficient macrophages displayed enhanced Fc gammaR-mediated signaling and phagocytosis. Surprisingly, binding of IgG-coated targets (EIgG) was also enhanced. c-Cbl-deficient macrophages expressed less Fc gammaRIIb, the inhibitory Fc gamma receptor; however, this did not account for enhanced target binding. We isolated the function of one Fc receptor isoform, Fc gammaRI, using IgG2a-coated targets (EIgG2a). Cbl-deficient macrophages demonstrated a disproportionate increase in binding EIgG2a, suggesting that signal strength regulates binding efficiency toward opsonized targets. In resting cells, Fc gammaRI colocalized with the Src family TK Hck in F-actin-rich structures, which was enhanced in Cbl-deficient macrophages. Target binding was sensitive to TK inhibitors, profoundly inhibited following depletion of cholesterol, and ablated at 4 degrees C or in the presence of inhibitors of actin polymerization. Sensitivity of EIgG binding to cytoskeletal disruption was inversely proportional to opsonin density. These findings challenge the view that Fc gammaR-mediated binding is a passive event. They suggest that dynamic engagement of TKs and the cytoskeleton enables macrophages to serve as cellular "Venus fly traps", with the capacity to capture phagocytic targets under conditions of limiting opsonin density.

Phagocytosis in macrophages lacking Cbl reveals an unsuspected role for Fc gamma receptor signaling and actin assembly in target binding.

R&eacute;cepteurs de FC gamma (Fc gammaR)-phagocytose m&eacute;di&eacute;e est connue pour exiger des tyrosines kinases (TKs). Nous avons identifi&eacute; c-Cbl et Cbl-b sous forme de prot&eacute;ines qui subissent une phosphorylation de tyrosine au cours de la phagocytose. CBL-deficient macrophages affich&eacute;es am&eacute;lior&eacute; Fc gammaR induite par la signalisation et la phagocytose. &Eacute;tonnamment, la fixation de cibles IgG-enduit (EIgG) a aussi augment&eacute;e. c-Cbl-d&eacute;ficients en macrophages exprim&eacute; moins gammaRIIb Fc, le r&eacute;cepteur inhibiteur de gamma des Fc ; Toutefois, cela ne tenaient pas compte pour la liaison de cibles am&eacute;lior&eacute;s. Nous avons isol&eacute; la fonction des Fc une isoforme du r&eacute;cepteur, Fc gammaRI, &agrave; l&#39;aide d&#39;enduit IgG2a cibles (EIgG2a). CBL-deficient macrophages ont d&eacute;montr&eacute; une augmentation disproportionn&eacute;e dans la liaison EIgG2a, ce qui sugg&egrave;re que la puissance du signal r&eacute;gule efficacit&eacute; de liaison pour atteindre les cibles opsonis&eacute;es. Dans les cellules au repos, Fc gammaRI colocalis&eacute; avec la famille Src Hck de savoirs traditionnels dans des structures riches en actine-F, qui a &eacute;t&eacute; renforc&eacute;e dans les macrophages de la Cbl-deficient. Cible de liaison est sensible aux inhibiteurs de la TK, profond&eacute;ment inhib&eacute;e apr&egrave;s &eacute;puisement du cholest&eacute;rol et ablation &agrave; 4 degr&eacute;s C ou en pr&eacute;sence d&#39;inhibiteurs de la polym&eacute;risation de l&#39;actine. Sensibilit&eacute; de EIgG contraignant &agrave; une d&eacute;sorganisation du cytosquelette &eacute;tait inversement proportionnelle &agrave; la densit&eacute; des opsonines. Ces conclusions remettent en question l&#39;opinion que la liaison de m&eacute;diation gammaR Fc est un &eacute;v&eacute;nement passif. Ils sugg&egrave;rent qu&#39;un engagement dynamique des savoirs traditionnels et le cytosquelette permet aux macrophages servir de cellulaires &laquo; Venus pi&egrave;ges &agrave; mouches &raquo;, avec la capacit&eacute; de capturer phagocytaires cibles dans des conditions de limiter la densit&eacute; des opsonines.

La phagocytose dans les macrophages manque Cbl r&eacute;v&egrave;le un r&ocirc;le insoup&ccedil;onn&eacute; pour Fc gamma receptor de signalisation et de l&#39;actine Assembl&eacute;e dans la liaison de la cible.

FC-Gamma-Rezeptor (Fc GammaR)-vermittelten Phagozytose ist bekannt, dass Tyrosinkinasen (TKs) erfordern. Wir identifizierten c-Cbl und Cbl-b als Proteine, die Tyrosin-Phosphorylierung w&auml;hrend der Phagozytose zu unterziehen. CBL-defizienten Makrophagen angezeigt Verbesserte Fc GammaR-vermittelte Signalisierung und Phagozytose. &Uuml;berraschenderweise wurde die Bindung von IgG-beschichtete Zielen (EIgG) auch verbessert. c-Cbl-defizienten Makrophagen ausgedr&uuml;ckt weniger Fc GammaRIIb, den hemmenden Fc-Gamma-Rezeptor; Dies jedoch nicht verbesserte Ziel Bindung ber&uuml;cksichtigt. Wir isoliert die Funktion von einem Fc-Rezeptor-Isoform, Fc GammaRI, IgG2a-beschichtete Ziele (EIgG2a) zu verwenden. CBL-defizienten Makrophagen gezeigt einen &uuml;berproportionalen Anstieg des EIgG2a, die darauf hindeutet, dass die Signalst&auml;rke Bindung Effizienz gegen&uuml;ber opsonized Ziele regelt verbindlich. In Ruhestellung Zellen, Fc GammaRI colocalized mit der Src Familie TK Hck in F-Aktin-reiche Strukturen, die in Cbl-defizienten Makrophagen gesteigert wurde. Ziel-Bindung wurde sensibel auf TK-Inhibitoren, zutiefst gehemmt nach Ersch&ouml;pfung des Cholesterins und ablated bei 4 Grad C oder in Anwesenheit von Inhibitoren der Aktin-Polymerisation. Empfindlichkeit der EIgG Bindung an Zytoskelett Unterbrechung war umgekehrt proportional zur Opsonin Dichte. Diese Erkenntnisse fordern die Ansicht, dass Fc GammaR-vermittelte Bindung ein passiver Event ist. Sie schlagen vor, da&szlig; dynamische Engagement der TKs und das Zytoskelett Makrophagen, dienen als zellul&auml;re &quot;Venus fliegen fallen&quot;, mit einer Kapazit&auml;t von phagozytische Ziele unter Bedingungen begrenzen Opsonin Dichte erfassen kann.

Phagozytose in Makrophagen fehlt Cbl zeigt eine ungeahnte Rolle f&uuml;r Fc Gamma Rezeptor Signalgebung und Actin Assembly in deiner Bindung.

Recettori FC gamma (Fc gammaR)-fagocitosi mediata sono noto per richiedere chinasi della tirosina (TKs). Abbiamo identificato c-Cbl e Cbl-b come le proteine che subiscono fosforilazione della tirosina durante la fagocitosi. CBL-carenti macrofagi visualizzati enhanced gammaR-mediata segnalazione di Fc e fagocitosi. Sorprendentemente, associazione degli obiettivi rivestite di IgG (EIgG) inoltre &egrave; stata migliorata. c-Cbl-carenti macrofagi espresso meno gammaRIIb Fc, il recettore inibitorio della gamma Fc; Tuttavia, questo non ha fatto conto per l&#39;associazione destinazione rafforzata. Abbiamo isolato la funzione dell&#39;isoforma di recettore una Fc, Fc gammaRI, utilizzando obiettivi IgG2a-rivestito (EIgG2a). CBL-carenti macrofagi hanno dimostrato un aumento sproporzionato della associazione EIgG2a, suggerendo che la potenza del segnale regola l&#39;efficienza di legame verso obiettivi opsonized. Nelle celle di riposo, Fc gammaRI colocalized con Src famiglia TK Hck in strutture ricchi di F-actina, che &egrave; stata migliorata in macrofagi Cbl-carenti. Associazione destinazione era sensibile a inibitori TK, profondamente inibito a seguito di riduzione del colesterolo e ablazione a 4 gradi C o in presenza di inibitori di polimerizzazione dell&#39;actina. Sensibilit&agrave; di EIgG associazione citoscheletriche rottura era inversamente proporzionale alla densit&agrave; opsonina. Questi risultati sfidano la vista che Fc mediata gammaR associazione &egrave; un evento passivo. Essi suggeriscono che dinamico impegno di TKs e il citoscheletro consente di macrofagi a servire come cellulare &quot;Venus fly Trap&quot;, con la capacit&agrave; di catturare fagocitaria obiettivi in condizioni di limitare la densit&agrave; opsonina.

Fagocitosi nei macrofagi manca Cbl rivela un&#39;insospettabile ruolo per Fc gamma receptor signaling actina montaggio e nell&#39;associazione di destinazione.

Fc &gamma; &#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC; (Fc &#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;)-&#x5A92;&#x4ECB;&#x8CAA;&#x98DF;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (TKs) &#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;B-6-1010 &#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066; c Cbl &#x3068; Cbl b &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8868;&#x793A; Cbl &#x6B20;&#x4E4F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; Fc &#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CAA;&#x98DF;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;IgG &#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; (&#x3053;&#x3068; EIgG) &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3082;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;c Cbl &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5C11;&#x306A;&#x3044; Fc gammaRIIb, &#x6291;&#x5236;&#x6027; Fc &gamma; &#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x767A;&#x73FE;;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061; IgG2a &#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; (EIgG2a) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; 1 &#x3064;&#x306E; Fc &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;Fc gammaRI &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Cbl &#x6B20;&#x4E4F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x52B9;&#x7387;&#x30AA;&#x30D7;&#x30BD;&#x30CB;&#x30F3;&#x76EE;&#x6A19;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506; EIgG2a &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x4E0D;&#x5747;&#x8861;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9759;&#x6B62;&#x671F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;, Cbl &#x6B20;&#x4E4F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3067;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F; Src &#x5BB6;&#x65CF;&#x3068; TK &#x30D3;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C1;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A; F &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D50;&#x679C; Fc gammaRI&#x3002;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F; TK &#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x6DF1;&#x304F;&#x67AF;&#x6E07;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x3001;4 &#x2103; &#x3067;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CD;&#x5408;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x84B8;&#x6563;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068; EIgG &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x30AA;&#x30D7;&#x30BD;&#x30CB;&#x30F3;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306B;&#x53CD;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C; Fc &#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x53D7;&#x52D5;&#x7684;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x306E;&#x898B;&#x65B9;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F; TKs &#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x5A5A;&#x7D04;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x300C;&#x30D3;&#x30FC;&#x30CA;&#x30B9; &#x30D5;&#x30E9;&#x30A4; &#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x300D;&#x3001;&#x8CAA;&#x98DF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30AA;&#x30D7;&#x30BD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Cbl &#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF; Fc &gamma; &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x601D;&#x3044;&#x3082;&#x5BC4;&#x3089;&#x306A;&#x3044;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Fc &#xAC10;&#xB9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (Fc gammaR)-&#xC911;&#xC7AC; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; tyrosine kinases (TKs)&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. C-Cbl, Cbl b &#xBC1B; &#xB2E4; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xC911; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xD30C;&#xC545;. Cbl &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; Fc gammaR &#xC911;&#xC7AC; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xBC14;&#xC778;&#xB529; IgG &#xCF54;&#xD305; &#xB300;&#xC0C1; (EIgG)&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. c Cbl &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xC801;&#xC740; Fc gammaRIIb &#xAE08;&#xC9C0; Fc &#xAC10;&#xB9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;&#xC774; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACE0;&#xB9BD; &#xD55C; Fc &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; isoform, Fc gammaRI &#xD568;&#xC218; IgG2a &#xCF54;&#xD305; &#xB300;&#xC0C1; (EIgG2a)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. Cbl &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; EIgG2a, &#xC2E0;&#xD638; &#xAC15;&#xB3C4; opsonized &#xB300;&#xC0C1; &#xD5A5;&#xD574; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD6A8;&#xC728; &#xADDC;&#xC81C; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xACFC;&#xB3C4; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD734;&#xC2DD; &#xC140;, Fc gammaRI Cbl &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC15;&#xD654;&#xB294; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; Src &#xAC00;&#xC871; TK Hck colocalized. &#xB300;&#xC0C1; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; TK &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC2EC;&#xD788; &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; ablated 4 &#xC12D;&#xC528; &#xB610;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC911; &#xD569; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10; &#xD588;&#xB2E4;. EIgG &#xBC14;&#xC778;&#xB529; cytoskeletal &#xC911;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xAC10;&#xB3C4; opsonin &#xBC00;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xBC18;&#xBE44;&#xB840; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xAE30; Fc gammaR &#xC911;&#xC7AC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC218;&#xB3D9; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xB3C4;&#xC804;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB3D9;&#xC801; &#xCC38;&#xC5EC; Tks&#xB294; cytoskeleton&#xC758; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &quot;&#xBE44;&#xB108;&#xC2A4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC774; &#xD2B8;&#xB7A9;&quot;, opsonin &#xBC00;&#xB3C4; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; phagocytic &#xBAA9;&#xD45C;&#xBB3C;&#xC744; &#xC7A1;&#xC73C;&#xB824;&#xACE0; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cbl &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; Fc &#xAC10;&#xB9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xD55C; &#xB73B;&#xBC16;&#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

FC gamma receptor (Fc gammaR)-fagocitosis mediada se sabe que requieren tirosina quinasas (TKs). Se identificaron c-Cbl y Cbl-b como prote&iacute;nas que se someten a la fosforilaci&oacute;n de la tirosina durante la fagocitosis. CBL-deficiente macr&oacute;fagos aparece mejorado Fc gammaR-mediada se&ntilde;alizaci&oacute;n y fagocitosis. Sorprendentemente, Uni&oacute;n de IgG recubiertos blancos (EIgG) tambi&eacute;n mejor&oacute;. c-Cbl-deficient macr&oacute;fagos expresan menos gammaRIIb Fc, el Fc gamma receptor inhibitorio; sin embargo, esto no cuenta para el enlace del objetivo mayor. Aislamos la funci&oacute;n de las isoformas del receptor un Fc, Fc gammaRI, utilizando objetivos IgG2a recubierto (EIgG2a). CBL-deficiente macr&oacute;fagos demostraron un aumento desproporcionado en enlace EIgG2a, sugiriendo que la fuerza de se&ntilde;al regula eficacia vinculante hacia objetivos opsonizadas. En las c&eacute;lulas de reclinaci&oacute;n, Fc gammaRI colocalized con la familia Src Hck TK en las estructuras de la F-actina-ricos, que mejor&oacute; en macr&oacute;fagos de Cbl-deficiente. Objetivo vinculante era sensible a los inhibidores de TK, profundamente inhibido tras el agotamiento del colesterol y la ablaci&oacute;n a 4 grados C o en presencia de inhibidores de la polimerizaci&oacute;n de la actina. Sensibilidad de EIgG vinculante a la interrupci&oacute;n del citoesqueleto fue inversamente proporcional a la densidad de opsoninas. Estos resultados desaf&iacute;an la visi&oacute;n que Fc gammaR-mediada vinculante es algo pasivo. Sugieren que el compromiso din&aacute;mico de TKs y citoesqueleto permite macr&oacute;fagos que sirven como celulares &quot;Venus mosqueros&quot;, con la capacidad de capturar objetivos fagoc&iacute;ticas en condiciones de limitar la densidad de opsoninas.

Fagocitosis en macr&oacute;fagos carecer de Cbl revela un papel insospechado para Fc gamma del receptor de se&ntilde;alizaci&oacute;n y actina Asamblea en el enlace de destino.

&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x6807;&#x8BB0;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5728;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x542F;&#x7528;&#x4E86;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x76D1;&#x6D4B;&#x548C;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4F18;&#x5316; Gag GFP &#x6784;&#x9020;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6837;&#x9897;&#x7C92; &#xFF08;VLP&#xFF09; &#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E2D;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x53D8;&#x79CD;&#x643A;&#x5E26;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E86;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E00;&#x76F4;&#x5728;&#x76D1;&#x6D4B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x540E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x7528;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag iGFP&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x5305;&#x542B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x63D2;&#x5165;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x77E9;&#x9635; (MA) &#x548C;&#x8863;&#x58F3; (CA) &#x57DF;&#xFF0C;&#x662F;&#x538B;&#x5236;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x590D;&#x5236;&#x4E3B;&#x7BA1;&#x5206;&#x5B50;&#x514B;&#x9686;&#x751F;&#x6210;&#x8367;&#x5149;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5229;&#x7528;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag iGFP &#x6D41;&#x5F0F;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x5728;&#x5927;&#x4F1A;&#x548C;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x4F20;&#x8F93;&#x671F;&#x95F4;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x8DDF;&#x8E2A;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8367;&#x5149;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4F20;&#x9001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

The green fluorescent protein (GFP) is a powerful genetic marking tool that has enabled virologists to monitor and track viral proteins during HIV infection. Expression-optimized Gag-GFP constructs have been used to study virus-like particle (VLP) assembly and localization in cell types that are easily transfected. The development of HIV-1 variants carrying GFP within the context of the viral genome has facilitated the study of infection and has been particularly useful in monitoring the transfer of virus between cells following virological synapse formation. HIV Gag-iGFP, a viral clone that contains GFP inserted between the matrix (MA) and capsid (CA) domains of Gag, is the first replication competent molecular clone that generates fluorescent infectious particles. Here, we discuss some methods that exploit HIV Gag-iGFP to quantify cell-to-cell transmission of virus by flow cytometry and to track the proteins during assembly and transmission using live-cell imaging.

Tracking and quantitation of fluorescent HIV during cell-to-cell transmission.

La prot&#xE9;ine fluorescente verte (GFP) est un puissant outil de marquage g&#xE9;n&#xE9;tique qui a permis virologues pour surveiller et suivre les prot&#xE9;ines virales lors de l&#x26;#39;infection par le VIH. Expression optimis&#xE9;s Gag-GFP ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;es pour &#xE9;tudier les virus-like particle (VLP) de montage et de la localisation dans des types cellulaires qui sont facilement transfect&#xE9;es. Le d&#xE9;veloppement de la lutte contre le VIH-1 des variantes portant GFP dans le contexte du g&#xE9;nome viral a facilit&#xE9; l&#x26;#39;&#xE9;tude de l&#x26;#39;infection et a &#xE9;t&#xE9; particuli&#xE8;rement utile dans le suivi du transfert du virus entre les cellules suivantes formation de la synapse virologique. VIH-gag iGFP, un clone viral qui contient la GFP ins&#xE9;r&#xE9; entre la matrice (MA) et de capside (CA) de domaines Gag, la premi&#xE8;re r&#xE9;plication est comp&#xE9;tente clone mol&#xE9;culaire qui g&#xE9;n&#xE8;re fluorescentes particules infectieuses. Ici, nous discutons de certaines m&#xE9;thodes qui exploitent le VIH Gag-iGFP de quantifier de cellule &#xE0; cellule de transmission du virus par cytom&#xE9;trie de flux et de suivre les prot&#xE9;ines lors de l&#x26;#39;assemblage et la transmission en utilisant imagerie des cellules vivantes.

Suivi et quantification de Fluorescent VIH cours de cellule &#xE0; cellule-Transmission

Das gr&uuml;ne fluoreszierende Protein (GFP) ist eine starke genetische Kennzeichnung-Tool, mit dem Virologen zur &Uuml;berwachung und Verfolgung virale Proteine w&auml;hrend der HIV-Infektion aktiviert hat. Optimiert f&uuml;r Ausdruck Gag-GFP-Konstrukte sind benutzt worden, Virus-Like Particle (VLP) Montage und Lokalisierung in Zelltypen, die leicht die transfected sind zu studieren. Die Entwicklung von HIV-1 Varianten mit GFP im Rahmen des viralen Genoms hat erleichtert das Studium der Infektion und wurde besonders f&uuml;r die &Uuml;bertragung des Virus zwischen Zellen, die nach Gr&uuml;ndung der virologischen Synapse &Uuml;berwachung. HIV Gag-iGFP, eine virale Klon, die GFP eingef&uuml;gt zwischen der Matrix (MA) und Kapsid (CA) Dom&auml;nen der Gag, enth&auml;lt ist die erste Replikation zust&auml;ndigen Molekulare Klon, der fluoreszierende infekti&ouml;se Partikel erzeugt. Hier diskutieren wir einige Methoden, die HIV Gag-iGFP, Zell-Zell-&Uuml;bertragung des Virus durch Durchflusszytometrie zu quantifizieren und die Proteine w&auml;hrend der Versammlung und Getriebe nach Leben-Zelle Darstellung verfolgen ausnutzen.

Tracking und quantitative Bestimmung der fluoreszierenden HIV w&auml;hrend der &Uuml;bertragung von Zelle zu Zelle.

La proteina fluorescente verde (GFP) &egrave; uno strumento potente marcatura genetica che ha permesso i virologi a monitor e traccia le proteine virali durante l&#39;infezione da HIV. Espressione-ottimizzato costrutti Gag-GFP sono stati utilizzati per studiare le particelle virus-simili (VLP) montaggio e localizzazione in tipi di celle transfected facilmente. Lo sviluppo delle varianti di HIV-1 che trasportano GFP all&#39;interno del contesto del genoma virale ha facilitato lo studio dell&#39;infezione ed &egrave; stato particolarmente utile nel monitoraggio il trasferimento del virus tra cellule in seguito formazione sinapsi virologiche. HIV Gag-iGFP, un clone virale contenente GFP inserito tra i domini di capside (CA) di Gag, e matrix (MA) &egrave; il primo replica competente molecular clone che genera particelle infettive fluorescenti. Qui, discuteremo alcuni metodi che sfruttano l&#39;HIV Gag-iGFP per quantificare la cella di trasmissione del virus tramite citometria a flusso e per tenere traccia delle proteine durante la trasmissione utilizzando live-cell imaging e assemblaggio.

Rilevamento e la quantificazione dell&#39;HIV fluorescenti durante la trasmissione di cella.

&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x8005;&#x306F;&#x3001;HIV&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x3001;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;-GFP&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x69D8;&#x7C92;&#x5B50;&#xFF08;VLP&#xFF09;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x3067;GFP&#x3092;&#x904B;&#x3076;HIV-1&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306E;&#x76E3;&#x8996;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; HIV GAG-iGFP&#x3001;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;MA&#xFF09;&#x3068;Gag&#x306E;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#xFF08;CA&#xFF09;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x306B;&#x633F;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;GFP&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x7C92;&#x5B50;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x80FD;&#x3092;&#x5206;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;HIV GAG-iGFP&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3001;&#x4F1D;&#x9001;&#x4E2D;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6D3B;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x9001;&#x4FE1;&#x6642;&#x306E;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;HIV&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;

&#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP)&#xB294; HIV &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; virologists &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xCD94;&#xC801; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C; &#xADF8;-GFP &#xAD6C;&#xBB38; &#xC2DD; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC27D;&#xAC8C; &#xD398; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC790; (VLP) &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hiv-1 &#xBCC0;&#xC885; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; GFP&#xB97C; &#xC6B4;&#xBC18;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xACE0; virological &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC140; &#xAC04;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC720;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP, GFP &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; (MA)&#xACFC; &#xAC1C; &#xADF8;&#xC758; capsid (CA) &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC720;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xD074;&#xB860;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD615;&#xAD11; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC785;&#xC790;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC545;&#xC6A9; HIV &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP cytometry&#xB85C; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xACC4;&#xB7C9; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xCD94;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD94;&#xC801; &#xBC0F; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xC911; &#xD615;&#xAD11; HIV&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;.

La prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) es una poderosa herramienta de marcado gen&#xE9;tico que ha permitido a los vir&#xF3;logos para supervisar y realizar un seguimiento de las prote&#xED;nas virales durante la infecci&#xF3;n por el VIH. Optimizaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n-GFP Gag-construcciones se han utilizado para estudiar el virus-como part&#xED;cula (VLP) de la Asamblea y la localizaci&#xF3;n de los tipos de c&#xE9;lulas que son f&#xE1;cilmente transfectadas. El desarrollo de VIH-1 variantes que llevan GFP en el contexto del genoma viral ha facilitado el estudio de la infecci&#xF3;n y ha sido particularmente &#xFA;tiles para controlar la transferencia de virus entre las c&#xE9;lulas siguientes formaci&#xF3;n de sinapsis virol&#xF3;gicas. VIH Gag-iGFP, un clon viral que contiene las buenas pr&#xE1;cticas agrarias insertada entre la matriz (MA) y la c&#xE1;pside (CA) los dominios de la mordaza, es la primera replicaci&#xF3;n competente clon molecular que genera fluorescentes part&#xED;culas infecciosas. En este caso, hablamos de algunos de los m&#xE9;todos que se aprovechan de VIH Gag-iGFP para cuantificar la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transmisi&#xF3;n del virus por citometr&#xED;a de flujo y para realizar un seguimiento de las prote&#xED;nas durante el montaje y la transmisi&#xF3;n que utiliza c&#xE9;lulas vivas im&#xE1;genes.

Seguimiento y cuantificaci&#xF3;n de VIH durante el fluorescente de la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transmisi&#xF3;n

&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x5929;&#x751F;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x548C;&#x8F6F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x635F;&#x4F24;&#x548C;&#x4FEE;&#x590D;&#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5BF9;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5728;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x51FA;&#x73B0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1; (ER) &#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x5E94;&#x6FC0;&#x548C;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x8FF9;&#x8C61;&#x3002;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x5374;&#x4E0D;&#x751A;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D; (BCAP&#xFF09; p85 &#x808C;&#x9187;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3001; &#x4FC3;&#x8FDB;&#x8054;&#x5408;&#x6311;&#x6218;&#x54CD;&#x5E94; LPS &#x548C; ER &#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x5728;&#x5F3A;&#x8C03;&#x3002;BCAP &#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x808C;&#x9187;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x8BF1; &gt; LPS 10 &#x500D;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x523A;&#x6FC0;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; thapsigargin&#xFF0C;&#x808C;&#x6D46;&#x7F51;/&#x5185;&#x8D28;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x9499; ATPase &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x5B75;&#x5316;&#x672F;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-3 &#x6D3B;&#x5316;&#x4E0E;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;BCAP(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;BCAP &#x7F3A;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E0B;&#x964D;&#x7684; Akt&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; ERK &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0E; BCAP &#x7F3A; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x540C;&#x8868;&#x793A;&#x6B63;&#x5E38;&#x6570;&#x91CF;&#x7684; NF-&kappa; B &#x4E9A;&#x57FA;&#x3001; c-&#x533A;&#x57DF;&#x5FEB;&#x7EBF;&#x548C;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; BCAP &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; Y4F BCAP &#x7A81;&#x53D8;&#x5728;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684; p85 &#x808C;&#x9187; SH2 &#x57DF;&#x5B58;&#x5728;&#x7F3A;&#x9677; BCAP &#x7F3A;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x9006;&#x8F6C; BCAP &#x7F3A;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6D46;&#x6DB2;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; BCAP &#x975E;&#x5197;&#x4F59;&#x808C;&#x9187;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x6D3B;&#x5728;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5982;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5176;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x7684;&#x6307;&#x6807;&#xFF0C;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x53D7;&#x4F53;&#x89E6;&#x53D1; BCAP&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x8D4B;&#x4E88;&#x5B83;&#x4EEC;&#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x627F;&#x53D7;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x6B63;&#x5728;&#x8FDB;&#x884C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FAE;&#x8FB1;&#x3001; &#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7B49;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;

P85 &#x808C;&#x9187;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x4E2D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; BCAP &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x5E94;&#x6FC0;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x8981;&#x6C42;&#x3002;

Macrophages are innate immune cells that play key roles in regulation of the immune response and in tissue injury and repair. In response to specific innate immune stimuli, macrophages may exhibit signs of endoplasmic reticulum (ER) stress and progress to apoptosis. Factors that regulate macrophage survival under these conditions are poorly understood. In this study, we identified B cell adapter protein (BCAP), a p85 PI3K-binding adapter protein, in promoting survival in response to the combined challenge of LPS and ER stress. BCAP was unique among nine PI3K adapter proteins in being induced >10-fold in response to LPS. LPS-stimulated macrophages incubated with thapsigargin, a sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase inhibitor that induces ER stress, underwent caspase-3 activation and apoptosis. Macrophages from BCAP(-/-) mice exhibited increased apoptosis in response to these stimuli. BCAP-deficient macrophages demonstrated decreased activation of Akt, but not ERK, and, unlike BCAP-deficient B cells, expressed normal amounts of the NF-ÎºB subunits, c-Rel and RelA. Retroviral transduction of BCAP-deficient macrophages with wild-type BCAP, but not a Y4F BCAP mutant defective in binding the SH2 domain of p85 PI3K, reversed the proapoptotic phenotype observed in BCAP-deficient macrophages. We conclude that BCAP is a nonredundant PI3K adapter protein in macrophages that is required for maximal cell survival in response to ER stress. We suggest that as macrophages engage their pathogenic targets, innate immune receptors trigger increased expression of BCAP, which endows them with the capacity to withstand further challenges from ongoing cellular insults, such as ER stress.

A requirement for the p85 PI3K adapter protein BCAP in the protection of macrophages from apoptosis induced by endoplasmic reticulum stress.

Les macrophages sont des cellules immunitaires inn&eacute;es qui jouent un r&ocirc;le cl&eacute; dans la r&eacute;gulation de la r&eacute;ponse immunitaire et dans la r&eacute;paration et de l&eacute;sions tissulaires. En r&eacute;ponse &agrave; des stimuli sp&eacute;cifiques de syst&egrave;me immunitaires inn&eacute;s, les macrophages peuvent pr&eacute;senter des signes de stress du r&eacute;ticulum endoplasmique (ER) et de progr&egrave;s &agrave; l&#39;apoptose. On conna&icirc;t mal les facteurs qui r&eacute;gulent la survie des macrophages dans ces conditions. Dans cette &eacute;tude, nous avons identifi&eacute; des cellules B Adaptateur prot&eacute;ines (PCE), une prot&eacute;ine d&#39;adapteur de PI3K liant p85, en favorisant la survie en r&eacute;ponse &agrave; la stimulation combin&eacute;e de LPS et ER le stress. PCE est unique parmi les neuf prot&eacute;ines PI3K adaptateur &eacute;tant induite &gt; 10 fois en r&eacute;ponse &agrave; LPS. Stimul&eacute;es par LPS macrophages incub&eacute;s thapsigargine, un inhibiteur d&#39;ATPase de calcium du r&eacute;ticulum sarcoplasmique/endoplasmique qui provoque le stress du re, a subi l&#39;apoptose et l&#39;activation de la caspase-3. Macrophages de souris BCAP(-/-) pr&eacute;sentaient une apoptose accrue en r&eacute;ponse &agrave; ces stimuli. PCE-deficient macrophages d&eacute;montr&eacute;s a diminu&eacute; l&#39;activation de Akt, mais pas de ERK et, contrairement aux cellules d&eacute;ficientes en PCE B, a exprim&eacute; les quantit&eacute;s normales des sous-unit&eacute;s NF-&kappa;B, c-Rel et RelA. Transduction r&eacute;trovirale des macrophages d&eacute;ficients en PCE PCE sauvage, mais pas un mutant Y4F PCE d&eacute;fectueux dans la liaison du domaine SH2 de PI3K p85, invers&eacute; le ph&eacute;notype proapoptotique observ&eacute; dans les macrophages de PCE-deficient. Nous concluons que le PCE est une prot&eacute;ine d&#39;adapteur PI3K non redondante dans les macrophages qui est n&eacute;cessaire pour la survie des cellules maximale en r&eacute;ponse au stress du re. Nous sugg&eacute;rons que comme les macrophages livrent leurs cibles de pathog&egrave;nes, les r&eacute;cepteurs immunitaires inn&eacute;es d&eacute;clenchent une expression accrue de PCE, ce qui leur conf&egrave;re la capacit&eacute; de r&eacute;sister aux d&eacute;fis suppl&eacute;mentaires des injures de cellulaires en cours, tels que le stress de l&#39;ER.

Une exigence pour la prot&eacute;ine d&#39;adapteur de PI3K p85 PCE dans la protection des macrophages de l&#39;apoptose induite par le stress du r&eacute;ticulum endoplasmique.

Makrophagen sind angeborene immune Zellen, die in der Verordnung der Immunantwort und Gewebeverletzungen und Reparatur Hauptakteure. Als Reaktion auf bestimmte angeborene Immunsystem reizen k&ouml;nnen Makrophagen Anzeichen f&uuml;r Endoplasmatisches Reticulum (ER) Stress und Fortschritt zum Apoptosis aufweisen. Faktoren, die Makrophagen &Uuml;berleben unter diesen Bedingungen zu Regeln sind oft missverstanden. In dieser Studie wir B-Zell-Adapter Protein (BCAP), ein p85 PI3K-Bindung Adapter Protein identifiziert, bei der F&ouml;rderung von &Uuml;berleben in Reaktion auf die kombinierten Herausforderung des LPS und ER betonen. BCAP war einzigartig unter den neun PI3K-Adapter-Proteine in wird induzierte &gt; 10fach verbesserter als Reaktion auf LPS. LPS stimuliert Makrophagen inkubiert mit Thapsigargin, ein sarcoplasmic/endoplasmic Reticulum Kalzium ATPase-Hemmer, die ER Stress, bedingt unterzog Caspase-3-Aktivierung und Apoptose. Makrophagen aus BCAP(-/-) M&auml;usen zeigte erh&ouml;hte Apoptose als Reaktion auf diese Reize. BCAP-defizienten Makrophagen gezeigt verringerte Aktivierung von Akt, aber nicht ERK und, im Gegensatz zu BCAP-defizienten B-Zellen, ausgedr&uuml;ckt normale Mengen von NF-&kappa;B-Untereinheiten, die c-Rel und RelA. Retrovirale Transduktion der BCAP-defizienten Makrophagen mit Wildtyp BCAP, aber keine Y4F BCAP Mutante defekt unter binden die SH2-Dom&auml;ne des p85 PI3K, umgekehrt die Proapoptotischen Ph&auml;notyp in BCAP-defizienten Makrophagen beobachtet. Wir schlie&szlig;en, dass BCAP ein nicht redundantes PI3K-Adapter-Protein in Makrophagen, die f&uuml;r maximale Zelle &uuml;berleben als Reaktion auf Stress ER erforderlich ist. Wir empfehlen, wie Makrophagen ihre pathogenen Ziele engagieren, angeborene immune-Rezeptoren erh&ouml;hte Expression von BCAP,, was ihnen die Kapazit&auml;t ausl&ouml;sen stattet um weitere Herausforderungen aus laufenden zellulare Beleidigungen, wie ER Stress zu widerstehen.

Eine Anforderung f&uuml;r das p85 PI3K Adapter Protein BCAP beim Schutz der Makrophagen aus Apoptose induziert durch Endoplasmatisches Reticulum Stress.

Macrofagi sono cellule del sistema immunitario innate che giocano un ruolo chiave nella regolazione della risposta immunitaria e nella riparazione e lesioni tessutali. In risposta a specifici stimoli immunitarie innate, macrofagi possono presentare segni di stress del reticolo endoplasmatico (ER) e progresso di apoptosi. Fattori che regolano la sopravvivenza dei macrofagi in queste condizioni sono capiti male. In questo studio, abbiamo individuato delle cellule B proteina adattatore (BCAP), una p85 PI3K-adattatore proteina, nel promuovere la sopravvivenza in risposta alla sfida combinata di LPS ed ER stress. BCAP era unica tra nove proteine adattatore PI3K essere indotta &amp;gt; 10 volte in risposta a LPS. LPS-stimolato macrofagi incubati con thapsigargin, un inibitore di ATPasi calcio del reticolo sarcoplasmatico/endoplasmic che induce stress ER, sub&igrave; l&#39;apoptosi e la attivazione di caspase-3. Macrofagi da topi BCAP(-/-) esposto aumentata apoptosi in risposta a questi stimoli. Macrofagi BCAP-carenti dimostrati diminuita attivazione di Akt, ma non ERK e, a differenza delle cellule di B BCAP-carenti, espresso normale quantit&agrave; di subunit&agrave; NF-&kappa;B, c-Rel e rilassarsi. Trasduzione retrovirale di macrofagi BCAP-carenti con selvaggio-tipo BCAP, ma non un mutante Y4F BCAP difettoso in associazione al dominio SH2 della p85 PI3K, invertito il fenotipo Miselli osservato nei macrofagi BCAP-carenti. Concludiamo che BCAP &egrave; una proteina di adattatore PI3K nonredundant nei macrofagi che &egrave; necessaria per la sopravvivenza delle cellule maximal in risposta allo stress di ER. Suggeriamo che come macrofagi impegnano loro bersagli patogeni, recettori immunitario innati scatenare aumentata espressione di BCAP, che conferisce loro la capacit&agrave; di sopportare ulteriori sfide da insulti cellulare in corso, quali lo stress ER.

Un requisito per la proteina adattatore di PI3K p85 BCAP nella protezione dei macrofagi di apoptosi indotta da stress del reticolo endoplasmatico.

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x640D;&#x50B7;&#x3068;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x751F;&#x5F97;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x751F;&#x6765;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x523A;&#x6FC0;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53; &#xFF08;ER&#xFF09; &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3068;&#x9032;&#x6B69;&#x306E;&#x5146;&#x5019;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x8981;&#x56E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;, B &#x7D30;&#x80DE;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (BCAP) p85 PI3K &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; &#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3001;LPS &#x3068; ER &#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6311;&#x6226;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;BCAP &#x8A98;&#x5C0E;&#x306E; 9 PI3K &#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x76EE; LPS &#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E; 10 &#x500D;&#x3067;&#x3002;LPS &#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x7B4B;&#x6F3F;/&#x9762;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; atp &#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;-3 &#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x65BD;&#x884C;&#x3057;&#x305F;.&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; BCAP(-/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x51FA;&#x5C55;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B9F;&#x8A3C; BCAP &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; Akt&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x3044; ERK &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;BCAP &#x6B20;&#x640D; B &#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A; NF-&kappa; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;c Rel &#x3068;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x91CF;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054; BCAP &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; BCAP&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x3044; Y4F BCAP &#x5909;&#x7570; p85 PI3K &#x306E; SH2 &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x306E; BCAP &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x9006;&#x306B;&#x3002;BCAP &#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6975;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x975E;&#x5197;&#x9577;&#x306E; PI3K &#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5927;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;.&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x76EE;&#x6A19;&#x3067;&#x884C;&#x3046;&#x3068;&#x3001;&#x751F;&#x6765;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x4FAE;&#x8FB1;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x6311;&#x6226;&#x306B;&#x8010;&#x3048;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059; BCAP &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

P85 PI3K &#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; BCAP &#x306E;&#x5927;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x3002;

&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC870;&#xC808; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xC0C1;&#xD574; &#xBC0F; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xC815; &#xC120; &#xCC9C; &#xC801; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;, &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; apoptosis&#xC5D0; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; (ER) &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC640; &#xC9C4;&#xD589; &#xB41C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xC11C; &#xD22C;&#xB974; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; B &#xC138;&#xD3EC; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (BCAP) &#xD56D;&#xBAA9;&#xC774; p85 PI3K &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4;, LPS&#xC640; &#xC751;&#xAE09;&#xC2E4;&#xC758; &#xACB0;&#xD569;&#xB3C4; &#xC804;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC2B9;&#xC9C4; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294;&#xC5D0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;. BCAP&#xB294; &#xC720;&#xB3C4; &#xB418; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; 9 &#xAC1C;&#xC758; PI3K &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &amp;gt; &#xC0AC;&#xC9C4; &#xC751;&#xB2F5; LPS&#xC5D0;. LPS &#xC790;&#xADF9; &#xC138;&#xD3EC; thapsigargin, ER &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;-&#xC720;&#xB3C4;/endoplasmic sarcoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xCE7C;&#xC298; ATPase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; incubated caspase 3 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; apoptosis&#xB97C; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. BCAP(-/-) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; apoptosis &#xC804;&#xC2DC;. &#xC2DC;&#xC5F0; BCAP &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; Akt, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; ERK&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0; BCAP-&#xACB0;&#xD54D; B &#xC138;&#xD3EC;&#xC640;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; NF &kappa;B &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;, c-Rel &#xBC0F; &#xD734;&#xC2DD;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAE08;&#xC561;&#xC744; &#xD45C;&#xD604;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; BCAP&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; Y4F BCAP &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC774; p85 pi3k&#xC758; SH2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; BCAP &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; retroviral &#xBCC0;&#xD658; BCAP &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; proapoptotic &#xD615; &#xBC18;&#xC804;. &#xC6B0;&#xB9AC; BCAP&#xB294; &#xBE44;&#xC911;&#xBCF5; PI3K &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; ER &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xACB0;&#xB860;. &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC0C1; &#xCC38;&#xC5EC;, ER &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xB4F1; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xBAA8;&#xC695;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xAC00; &#xACFC;&#xC81C;&#xB97C; &#xACAC;&#xB51C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC6A9;&#xB7C9; endows BCAP&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DD; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD56D;&#xBAA9;&#xC774; p85 PI3K &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; BCAP apoptosis endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCF4;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;.

Los macr&oacute;fagos son c&eacute;lulas inmunitarias innatas que desempe&ntilde;an papeles claves en la regulaci&oacute;n de la respuesta inmune y en la reparaci&oacute;n y la lesi&oacute;n tisular. En respuesta a est&iacute;mulos inmunes innatos espec&iacute;ficos, los macr&oacute;fagos pueden exhibir signos de estr&eacute;s del ret&iacute;culo endopl&aacute;smico (ER) y el progreso a la apoptosis. Factores que regulan la supervivencia del macr&oacute;fago en estas condiciones son poco conocidos. En este estudio, identific&oacute; c&eacute;lulas B adaptador prote&iacute;na (BCAP), una prote&iacute;na de adaptador de PI3K-Uni&oacute;n p85, en la promoci&oacute;n de la supervivencia en respuesta al desaf&iacute;o combinado de LPS y ER estr&eacute;s. BCAP fue &uacute;nico entre los nueve las prote&iacute;nas del adaptador de PI3K en ser inducido &gt; 10 veces en respuesta a LPS. LPS-estimulada macr&oacute;fagos incubados con thapsigargin, un inhibidor de ATPasa sarcopl&aacute;smica/ret&iacute;culo endopl&aacute;smico calcio que induce estr&eacute;s ER, experimentaron la apoptosis y la activaci&oacute;n de la caspasa-3. Los macr&oacute;fagos de ratones BCAP(-/-) exhibieron mayor apoptosis en respuesta a estos est&iacute;mulos. Macr&oacute;fagos deficientes BCAP demostrados disminuci&oacute;n activaci&oacute;n de Akt, pero no de ERK y, a diferencia de las c&eacute;lulas B BCAP deficientes, expresaron cantidades normales de las subunidades de NF-&kappa;B, c-Rel y RelA. Transducci&oacute;n retroviral de macr&oacute;fagos BCAP deficientes con el salvaje-tipo BCAP, pero no un mutante Y4F BCAP defectuoso en vinculante el dominio SH2 de PI3K p85, revertir el fenotipo proapopt&oacute;ticas observado en macr&oacute;fagos BCAP deficientes. Concluimos que BCAP es una no redundante prote&iacute;na adaptador de la PI3K en macr&oacute;fagos que se requiere para la supervivencia de la c&eacute;lula m&aacute;xima en respuesta a estr&eacute;s de ER. Nos sugieren que como macr&oacute;fagos atacar sus objetivos pat&oacute;genos, receptores inmunes innatos desencadenan expresi&oacute;n creciente de BCAP, que dota de la capacidad para soportar m&aacute;s desaf&iacute;os de continuos insultos celulares, tales como estr&eacute;s ER.

Un requisito para la prote&iacute;na p85 adaptador de PI3K BCAP en la protecci&oacute;n de los macr&oacute;fagos de la apoptosis inducida por el estr&eacute;s del ret&iacute;culo endoplasm&aacute;tico.

&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x53EF;&#x7531;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x76F4;&#x63A5;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A5;&#x89E6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x79F0;&#x4E3A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6; (VS)&#x3002;&#x671F;&#x95F4; VS &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;virions &#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C; endosomes &#x5185;&#x5806;&#x79EF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7A7F;&#x8D8A; VS &#x540E;, &#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7ECF;&#x5386;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;VS &#x8F6C;&#x8BA9;&#x540E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x51FA;&#x73B0;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684; virions &#x5411;&#x75C5;&#x4EBA;&#x8840;&#x6E05;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6210;&#x719F;&#x3001; &#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x663E;&#x793A;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7C92;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x9700;&#x8981;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684; virions &#x63A5;&#x53D7;&#x627F;&#x5151;&#x4EBA;&#x7EC6;&#x80DE; endosomes&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x65F6;&#x5185;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6210;&#x719F;&#x3002;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x8868;&#x660E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x878D;&#x5408;&#x53EF;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x5DF2;&#x8FC1;&#x79BB; VS &#x7684;&#x8F66;&#x53A2;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9897;&#x7C92;&#x6210;&#x719F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x878D;&#x5408;&#x5728;&#x76EE;&#x6807; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE; endosomes &#x4EE5;&#x4E0B;&#x901A;&#x8FC7; VS &#x4F20;&#x8F93;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9003;&#x907F;&#x6297;&#x4F53;&#x4E2D;&#x548C;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x7684; endosomal &#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x6210;&#x719F;&#x3002;

HIV-1 can infect T cells by cell-free virus or by direct virion transfer between cells through cell contact-induced structures called virological synapses (VS). During VS-mediated infection, virions accumulate within target cell endosomes. We show that after crossing the VS, the transferred virus undergoes both maturation and viral membrane fusion. Following VS transfer, viral membrane fusion occurs with delayed kinetics and transferred virions display reduced sensitivity to patient antisera compared to mature, cell-free virus. Furthermore, particle fusion requires that the transferred virions undergo proteolytic maturation within acceptor cell endosomes, which occurs over several hours. Rapid, live cell confocal microscopy demonstrated that viral fusion can occur in compartments that have moved away from the VS. Thus, HIV particle maturation activates viral fusion in target CD4+ T cell endosomes following transfer across the VS and may represent a pathway by which HIV evades antibody neutralization.

Cell-to-cell transfer of HIV-1 via virological synapses leads to endosomal virion maturation that activates viral membrane fusion.

VIH-1 peut infecter des cellules T par acellulaire virus ou par transfert direct entre virion cellules &#xE0; travers de cellules de contact induites structures appel&#xE9; synapses virologiques (VS). Au cours de VS-m&#xE9;diation infection, les virions s&#x26;#39;accumulent dans la cellule cible endosomes. Nous montrons que, apr&#xE8;s avoir travers&#xE9; la VS, le virus transmis subit &#xE0; la fois la maturation et la fusion des membranes virale. Apr&#xE8;s le transfert VS, la fusion des membranes virale se produit avec une cin&#xE9;tique retard&#xE9;s et des virions transf&#xE9;r&#xE9;es s&#x26;#39;affichent une sensibilit&#xE9; r&#xE9;duite &#xE0; antis&#xE9;rums patient par rapport &#xE0; maturit&#xE9;, sans cellule du virus. En outre, la fusion des particules exige que les virions transmis subissent une maturation prot&#xE9;olytique dans la cellule accepteur endosomes, qui se produit pendant plusieurs heures. Rapide, la microscopie confocale de cellules vivantes ont d&#xE9;montr&#xE9; que la fusion virale peut se produire dans les compartiments qui ont d&#xE9;m&#xE9;nag&#xE9; loin de la VS. Ainsi, la maturation des particules VIH active la fusion virale des cellules CD4 + lymphocytes T cibles endosomes apr&#xE8;s le transfert &#xE0; travers le VS et peut repr&#xE9;senter une voie par laquelle le VIH &#xE9;chappe la neutralisation des anticorps.

Cell-&#xE0;-cellule de transfert du VIH-1 via les synapses virologiques m&#xE8;ne &#xE0; la maturation Virion endosomal qui active Fusion membrane virale

HIV-1 T-Zellen durch zellfreien Virus infizieren kann oder durch direkte Virion &Uuml;bertragung von Zellen durch Zelle Kontakt induziert Strukturen genannt virologischen Synapsen (VS). Sammeln Sie w&auml;hrend der VS-vermittelte Infektion Virionen innerhalb deiner Zelle Endosomen. Wir zeigen, dass das &uuml;bertragene Virus nach dem &Uuml;berqueren der VS, Reifung und virale Membrane Fusion durchl&auml;uft. Nach VS-Transfer virale Membran Verschmelzung tritt bei verz&ouml;gerten Kinetik und &uuml;bertragene Virionen geringere Empfindlichkeit f&uuml;r Patienten im Vergleich zu Reifen, zellfreien Virus Antiseren anzuzeigen. Partikel Fusion erfordert dar&uuml;ber hinaus, dass die &uuml;bertragenen Virionen proteolytische Reifung innerhalb Akzeptor Zelle Endosomen, unterziehen, die &uuml;ber mehrere Stunden auftritt. Schnelle, live Zelle confocal Mikroskopie gezeigt, dass virale Verschmelzung in den Abteilen auftreten kann, die Weg von der VS verschoben haben. Daher aktiviert HIV-Partikel-Reifung virale Schmelzverfahren in deiner CD4 + T Zelle Endosomen Folgendes &uuml;ber die VS &uuml;bertragen und kann einen Weg durch den HIV Antik&ouml;rper Neutralisierung entzieht.

Zell-Zell-&Uuml;bertragung von HIV-1 &uuml;ber virologischen Synapsen f&uuml;hrt zu Endosomen Virion Reifung, die virale Membran Verschmelzung aktiviert wird.

HIV-1 possono infettare le cellule T dal virus senza cellula o di trasferimento diretto virione tra cellule attraverso strutture cellulari indotta dal contatto chiamati virologiche sinapsi (VS). Durante l&#39;infezione VS-mediata, virioni si accumulano all&#39;interno endosomes delle cellule bersaglio. Mostriamo che dopo aver attraversato il VS, il virus trasferito subisce la maturazione e la fusione della membrana virale. In seguito VS trasferimento, fusione della membrana virale avviene con ritardo cinetica e virioni trasferiti visualizzazione ridotta sensibilit&agrave; al pazienti antisieri rispetto al virus maturo, privo di cella. Inoltre, la fusione delle particelle richiede che i virioni trasferiti sottoposti a maturazione proteolitica entro accettore cella endosomes, che si verifica sopra parecchie ore. Microscopia confocale cella rapida, diretta ha dimostrato che la fusione virale pu&ograve; verificarsi in compartimenti che hanno allontanato la VS. Cos&igrave;, maturazione della particella HIV attiva fusione virale nel bersaglio CD4 + T cell endosomes seguente trasferimento attraverso la VS e possono rappresentare un percorso da cui l&#39;HIV sfugge neutralizzazione dell&#39;anticorpo.

Trasferimento a cella di HIV-1 via sinapsi virologiche conduce alla maturazione del virione endosomal che attiva la fusione della membrana virale.

HIV-1&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#xFF08;VS&#xFF09;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x8EE2;&#x9001;&#x306B;&#x3088;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; VS-&#x5A92;&#x4ECB;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5185;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;VS&#x3092;&#x6A2A;&#x65AD;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x8EE2;&#x9001;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304C;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; VS&#x8EE2;&#x9001;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x53CD;&#x5FDC;&#x901F;&#x5EA6;&#x3084;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x60A3;&#x8005;&#x8840;&#x6E05;&#x306B;&#x611F;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x6570;&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5185;&#x3067;&#x5206;&#x89E3;&#x719F;&#x6210;&#x3092;&#x7D4C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8FC5;&#x901F;&#x3001;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306F;VS&#x304B;&#x3089;&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x305F;&#x533A;&#x753B;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;HIV&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;CD4&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;+ T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;VS&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;HIV&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x4E2D;&#x548C;&#x3092;&#x5FCC;&#x907F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;HIV-1&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x5C0E;&#x304F;

&#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; virological &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xC140; &#xC811;&#xCD09; &#xC720;&#xBC1C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC140; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; virion &#xC1A1;&#xAE08; synapses (&#xB300;). VS &#xC911;&#xC7AC; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; virions &#xB300;&#xC0C1; &#xC140; endosomes &#xB0B4;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;. &#xC6B0;&#xB9AC; VS &#xAC74;&#xB108; &#xD6C4; &#xC131;&#xC219;&#xACFC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC218;&#xD589;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300; &#xC804;&#xC1A1; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; virions &#xD658;&#xC790; antisera &#xC131;&#xC219;, &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xAC10;&#xB3C4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC785;&#xC790; &#xD4E8;&#xC804; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; virions &#xC218;&#xC220; &#xBA87; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xC140; endosomes &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC131;&#xC219; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD4E8;&#xC804; VS &#xBA40;&#xB9AC; &#xC774;&#xB3D9; &#xB41C; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; HIV &#xC785;&#xC790; &#xC131;&#xC219; &#xB300;&#xC0C1; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC; endosomes &#xB2E4;&#xC74C; &#xBE44;&#xAD50;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; HIV &#xD56D; &#xCCB4; &#xC911;&#xD654;&#xB97C; evades &#xD1B5;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Virological &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; h i V-1&#xC758; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; endosomal virion &#xC131;&#xC219;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

VIH-1 puede infectar a las c&#xE9;lulas T de c&#xE9;lulas libres de virus o viri&#xF3;n transferencia directa entre las c&#xE9;lulas a trav&#xE9;s de c&#xE9;lulas inducidas por contacto-estructuras llamadas sinapsis virol&#xF3;gicas (VS). Durante la infecci&#xF3;n VS-mediada, los viriones se acumulan en la c&#xE9;lula diana endosomas. Se demuestra que despu&#xE9;s de cruzar el VS, el virus se transfiere sufre la maduraci&#xF3;n y la fusi&#xF3;n de la membrana viral. Despu&#xE9;s de la transferencia de VS, la fusi&#xF3;n de la membrana viral se produce con retraso y la cin&#xE9;tica de viriones transferidas aparecen disminuci&#xF3;n de la sensibilidad a la paciente en comparaci&#xF3;n con antisueros madura, c&#xE9;lulas libres de virus. Adem&#xE1;s, la fusi&#xF3;n de part&#xED;culas requiere que los viriones transferidos someterse a la maduraci&#xF3;n proteol&#xED;tica dentro de la celda aceptor endosomas, que se produce durante varias horas. Microscopio r&#xE1;pido, celular confocal en vivo demostr&#xF3; que la uni&#xF3;n del virus puede ocurrir en compartimientos que se han alejado de los SV. De este modo, la maduraci&#xF3;n de las part&#xED;culas del VIH activa la uni&#xF3;n del virus en las c&#xE9;lulas CD4 + de destino de las c&#xE9;lulas T endosomas despu&#xE9;s de su traslado a trav&#xE9;s de la SV y puede representar una v&#xED;a por la cual el VIH evade la neutralizaci&#xF3;n de anticuerpos.

De la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transferencia del VIH-1 trav&#xE9;s de las sinapsis virol&#xF3;gicas lleva a la maduraci&#xF3;n del viri&#xF3;n endosomal que activa fusi&#xF3;n de la membrana viral

Article	Year
Myosin X is a downstream effector of PI(3)K during phagocytosis. Nature cell biology\| PubMed ID: 12055636	2002
ATP-binding cassette transporter A7 enhances phagocytosis of apoptotic cells and associated ERK signaling in macrophages. The Journal of cell biology\| PubMed ID: 16908670	2006
Regulatory T cells inhibit dendritic cells by lymphocyte activation gene-3 engagement of MHC class II. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)\| PubMed ID: 18424711	2008
Quantitative 3D video microscopy of HIV transfer across T cell virological synapses. Science (New York, N.Y.)\| PubMed ID: 19325119	2009
Phagocytosis in macrophages lacking Cbl reveals an unsuspected role for Fc gamma receptor signaling and actin assembly in target binding. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)\| PubMed ID: 19380812	2009
Tracking and quantitation of fluorescent HIV during cell-to-cell transmission. Methods (San Diego, Calif.)\| PubMed ID: 20627127	2011
A requirement for the p85 PI3K adapter protein BCAP in the protection of macrophages from apoptosis induced by endoplasmic reticulum stress. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)\| PubMed ID: 21685326	2011
Cell-to-cell transfer of HIV-1 via virological synapses leads to endosomal virion maturation that activates viral membrane fusion. Cell host & microbe\| PubMed ID: 22177560	2011

Benjamin Dale

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications