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IP-FCM:  Immunoprecipitation Detected by Flow Cytometry

Immunoprecipitation detected by flow cytometry (IP-FCM) is an efficient method for detecting and quantifying protein-protein interactions. The basic ...

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Quantification of Protein Interaction Network Dynamics using Multiplexed Co-Immunoprecipitation

Dynamic protein-protein interactions control cellular behavior, from motility to DNA replication to signal transduction. However, monitoring dynamic ...

Mayo Clinic

University of Missouri

&#x5F3A;&#x6297;&#x539F;&#x76F8;&#x9047;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC5;&#x901F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x8868;&#x9762;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) &#x4E0B;&#x8C03;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8868;&#x9762; TCR &#x8868;&#x8FBE;&#x51E0;&#x5929;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FDD;&#x6301;&#x4F4E;&#x4F4D;&#xFF0C;T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FDD;&#x6301;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x4E00;&#x76F4;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x662F;&#x5426;&#x957F;&#x671F;&#x6297;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x8868;&#x9762; TCR &#x8865;&#x8D27;&#xFF0C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&quot;nondownregulatable&quot;&#x8868;&#x9762;&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;&#x53EF;&#x80FD;&#x9A7B;&#x7559;&#x5728; synaptosomal &#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x8868;&#x9762; TCR &#x6C34;&#x5E73;&#x4F4E;&#x6297;&#x539F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x53EF;&#x80FD;&#x8868;&#x793A;&#x6D89;&#x53CA;&#x8FDE;&#x7EED;&#x8868;&#x9762; TCR &#x8865;&#x8D27;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5F97;&#x6297;&#x539F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x65AD;&#x4E0B;&#x8C03;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x52A8;&#x6001;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x89E3;&#x51B3;&#x6B64;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x7814;&#x7A76;&#x4F53;&#x5185;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x53CC;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x4E3B;&#x8981;&#x5929;&#x771F; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x5B8C;&#x5168;&#x7F16;&#x7801;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x6297;&#x539F;-&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#xFF0C;&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x79CD;&#x624B;&#x6BB5;&#x6765;&#x8DDF;&#x8E2A; TCR &#x8BA2;&#x5A5A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E5F;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x4F7F;&#x7528; TCR &#x6297;&#x539F;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6297;&#x539F; TCR &#x53C2;&#x4E0E;&#x4ECE;&#x8DDF;&#x8E2A; TCR &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x8868;&#x9762; TCR &#x8865;&#x5145;&#x5185;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E00;&#x5929;&#x5F00;&#x59CB;&#xFF0C;&#x6301;&#x7EED;&#x4E0D;&#x65AD;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; TCR &#x53C2;&#x4E0E;&#x4E0E;&#x4E0B;&#x8C03;&#x540C;&#x6B65;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x5F3A; CD25 &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x6269;&#x5C55;&#x901A;&#x8FC7;&#x8868;&#x9762;&#x8865;&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;&#x663E;&#x8457;&#x653E;&#x5927;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x81F4;&#x529B;&#x4E8E;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x5929;&#x771F; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x9700;&#x8981; TCR &#x53C2;&#x4E0E;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0D;&#x901A;&#x8FC7;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 2 &#x53D6;&#x4EE3;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; TCR &#x89E6;&#x53D1;&#x548C;&#x6D88;&#x8D39;&#x53EF;&#x4EE5;&#x51FA;&#x73B0;&#x8F83;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x4ECE;&#x5929;&#x771F; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;

&#x4E2A;&#x522B;&#x5929;&#x771F; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x4F53;&#x89E6;&#x53D1;&#x653E;&#x5927;&#x3002;

Strong antigenic encounter by T cells rapidly induces immunological synapse formation and surface T cell receptor (TCR) downregulation. Although surface TCR expression can remain low for several days, T cells can still sustain antigenic signaling. It has been unclear whether prolonged antigenic signaling occurs in the absence of surface TCR replenishment, being maintained by a few "nondownregulatable" surface TCRs that might reside in a synaptosomal structure. Alternatively, the low surface TCR level induced by antigen might represent a dynamic state of expression involving continual surface TCR replenishment, reengagement by antigen, and ongoing downregulation. To resolve this issue, we studied in vivo-generated, dual-specificity primary naive CD4(+) T cells. On these cells, antigenic stimulus exclusively downregulated antigen-specific, but not antigen-nonspecific, TCRs. In addition to providing a means to track TCR engagement, this also allowed us to use the antigen nonspecific TCR to track TCR expression in isolation from TCR engagement by antigen. Surface TCR replenishment began within the first day of stimulation, and occurred synchronously with continuous antigen-specific TCR engagement and downregulation. Furthermore, by enhancing CD25 expression, extended signaling through surface-replenishing TCRs significantly amplified the number of daughter cells generated by naive CD4(+) T cells that had already committed to proliferate. This effect required TCR engagement and could not be substituted for by interleukin 2. These data demonstrate that TCR triggering and consumption can occur over an extended period of time, with a significant impact on the effector responses evoked from naive CD4(+) T cells.

The proliferative capacity of individual naive CD4(+) T cells is amplified by prolonged T cell antigen receptor triggering.

Rencontre antig&#xE9;nique par les cellules T Forte induit rapidement la formation de la synapse immunologique et T de surface cellulaire des r&#xE9;cepteurs (TCR) r&#xE9;gulation &#xE0; la baisse. Bien que la surface TCR expression peut rester faible pendant plusieurs jours, les cellules T peut encore soutenir la signalisation antig&#xE9;niques. Il a &#xE9;t&#xE9; difficile de d&#xE9;terminer si la signalisation antig&#xE9;nique prolong&#xE9;e survient en l&#x26;#39;absence de la surface de TCR reconstitution, &#xE9;tant maintenu par quelques &#x26;quot;nondownregulatable&#x26;quot; TCR surface qui pourrait r&#xE9;sider dans une structure synaptosomale. Alternativement, la surface &#xE0; faible niveau de TCR induite par l&#x26;#39;antig&#xE8;ne pourrait repr&#xE9;senter un &#xE9;tat dynamique de l&#x26;#39;expression impliquant continuelle surface TCR reconstitution, le r&#xE9;engagement par l&#x26;#39;antig&#xE8;ne, et la r&#xE9;gulation n&#xE9;gative continue. Pour r&#xE9;soudre ce probl&#xE8;me, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; in vivo-g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s, &#xE0; double sp&#xE9;cificit&#xE9; primaires CD4 na&#xEF;fs (+) des cellules T. Sur ces cellules stimulation antig&#xE9;nique, exclusivement r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la baisse sp&#xE9;cifique de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne, mais pas l&#x26;#39;antig&#xE8;ne non sp&#xE9;cifique, TCR. En plus de fournir un moyen de suivre l&#x26;#39;engagement du TCR, ce nous a &#xE9;galement permis d&#x26;#39;utiliser l&#x26;#39;antig&#xE8;ne non sp&#xE9;cifique du TCR pour suivre l&#x26;#39;expression du TCR dans l&#x26;#39;isolement de l&#x26;#39;engagement du TCR par un antig&#xE8;ne. TCR surface reconstitution commenc&#xE9; dans le premier jour de la stimulation, et produite en continu en synchronisme avec l&#x26;#39;antig&#xE8;ne sp&#xE9;cifique de l&#x26;#39;engagement TCR et la r&#xE9;gulation n&#xE9;gative. En outre, en am&#xE9;liorant expression de CD25, &#xE9;tendu de signalisation &#xE0; travers la surface-de r&#xE9;approvisionnement TCR consid&#xE9;rablement amplifi&#xE9; le nombre de cellules filles g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;es par CD4 na&#xEF;fs (+) des cellules T qui avait d&#xE9;j&#xE0; commis de prolif&#xE9;rer. Cet effet exige un engagement du TCR et ne pouvait pas &#xEA;tre remplac&#xE9; par de l&#x26;#39;interleukine 2. Ces donn&#xE9;es d&#xE9;montrent que TCR d&#xE9;clenchement et de la consommation peut se produire sur une longue p&#xE9;riode de temps, avec un impact significatif sur les r&#xE9;ponses effectrices CD4 na&#xEF;fs &#xE9;voqu&#xE9;s &#xE0; partir de (+) des cellules T.

La capacit&#xE9; prolif&#xE9;rative des lymphocytes CD4 na&#xEF;fs individuels (+) des cellules T est amplifi&#xE9;e par prolong&#xE9;e r&#xE9;cepteur cellulaire Antig&#xE8;ne T D&#xE9;clenchement

Die proliferative Kapazit&#xE4;t der einzelnen naiven CD4 (+) T-Zellen durch l&#xE4;ngere T-Zell-Antigen-Rezeptors ausgel&#xF6;st amplifiziert.

Forte incontro antigenico da parte delle cellule T rapidamente induce la formazione di sinapsi immunologica e superficie T cell receptor (TCR) downregulation. Anche se espressione di superficie TCR pu&ograve; rimanere basso per diversi giorni, cellule T possono ancora sostenere antigenica di segnalazione. &Egrave; stato chiaro se segnalazione antigenica prolungata si verifica in assenza di superficie rifornimento TCR, mantenuto da qualche &quot;nondownregulatable&quot; superficie TCRs che potrebbe risiedere in una struttura synaptosomal. In alternativa, il basso livello TCR superficie indotto dall&#39;antigene potrebbe rappresentare uno stato dinamico di espressione che coinvolge il continuo rifornimento superficie TCR, riconferma di antigene e downregulation in corso. Per risolvere questo problema, abbiamo studiato in vivo-generato, dual-specificit&agrave; cellule T CD4(+) ingenue primarie. Su queste cellule, stimolo antigenico esclusivamente downregolata antigene-specifiche, ma non antigene-aspecifici, TCRs. Oltre a fornire un mezzo per tenere traccia di fidanzamento TCR, questo anche ci ha permesso di utilizzare l&#39;aspecifici antigene TCR per tenere traccia di espressione del TCR in isolamento da fidanzamento TCR da antigene. Superficie rifornimento TCR inizia entro il primo giorno di stimolazione e si &egrave; verificata in modo sincrono con downregulation e continuo impegno di TCR specifici per l&#39;antigene. Inoltre, aumentando l&#39;espressione di CD25, esteso segnalazione attraverso il reintegro superficie TCRs amplificato notevolmente il numero di cellule figlie generate dalle cellule T CD4(+) ingenue che avevano gi&agrave; commesso per proliferare. Questo effetto richiesto impegno TCR e non potrebbe essere sostituito da interleuchina 2. Questi dati dimostrano che innescando TCR e consumo pu&ograve; verificarsi per un periodo prolungato di tempo, con un impatto significativo sulle risposte effettrici evocato dalle cellule T CD4(+) ingenue.

La capacit&agrave; proliferativa delle singole cellule T CD4(+) ingenue &egrave; amplificata dalla prolungata delle cellule T antigene recettore triggering.

T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x51FA;&#x4F1A;&#x3044;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x8868;&#x9762;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x306E;TCR&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x6570;&#x65E5;&#x9593;&#x4F4E;&#x3044;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x4F9D;&#x7136;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6297;&#x539F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x9577;&#x671F;&#x6297;&#x539F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E; &#x26;quot;nondownregulatable&#x26;quot;&#x8868;&#x9762;&#x306E;TCR&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x306E;TCR&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4F4E;&#x8868;&#x9762;TCR&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x306E;TCR&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x3088;&#x308B;reengagement&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5F0F;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x4E3B;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;TCR&#x306E;&#x4E0A;&#x306B;&#x3002; TCR&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;TCR&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3066;TCR&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;TCR&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x306E;TCR&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x306F;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x65E5;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x3001;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;TCR&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3068;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x540C;&#x671F;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;CD25&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x65E2;&#x306B;&#x5897;&#x6B96;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7D04;&#x675F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5A18;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x8868;&#x9762;&#x88DC;&#x7D66;&#x3059;&#x308B;TCR&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;TCR&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;2&#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;TCR&#x304C;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3068;&#x6D88;&#x8CBB;&#x306F;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x8A98;&#x767A;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x306E;&#x5EF6;&#x9577;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5897;&#x5E45;&#x3055;&#x308C;

T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC15;&#xD55C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xB9CC;&#xB0A8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xD45C;&#xBA74; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR) downregulation&#xC5D0; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xD45C;&#xBA74; TCR &#xC2DD; &#xBA70;&#xCE60; &#xB3D9;&#xC548; &#xB0AE;&#xC740; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; T &#xC138;&#xD3EC; antigenic &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xC720;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD84;&#xBA85; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &quot;nondownregulatable&quot; &#xD45C;&#xBA74; TCRs synaptosomal &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC788;&#xC744; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC9C0; &#xB418; &#xACE0; &#xD45C;&#xBA74; TCR &#xBCF4;&#xAE09;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04; antigenic &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;. &#xB610;&#xB294;, &#xB0AE;&#xC740; &#xD45C;&#xBA74; TCR &#xC218;&#xC900; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD45C;&#xBA74; TCR &#xBCF4;&#xCDA9;, &#xD56D; &#xC6D0;, &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; downregulation reengagement&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; vivo &#xC0DD;&#xC131;, &#xC774;&#xC911; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xC8FC; &#xC21C; &#xC9C4; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; downregulated &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD56D; &#xC6D0;-&#xD2B9;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1;, TCRs. TCR &#xC57D;&#xD63C;&#xC744; &#xCD94;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB2E8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; TCR&#xC758; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; TCR &#xC2DD; TCR &#xC57D;&#xD63C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xC801; &#xD5C8;&#xC6A9;. &#xD45C;&#xBA74; TCR &#xBCF4;&#xCDA9; &#xC790;&#xADF9;, &#xCCAB; &#xB0A0;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; TCR &#xCC38;&#xC5EC;&#xC640; downregulation&#xC640; &#xB3D9;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xB610;&#xD55C;, CD25 &#xC2DD;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xB538; &#xC140; &#xC218;&#xAC00; &#xACA9; &#xC99D;&#xC744; &#xC774;&#xBBF8; &#xC57D;&#xC18D; &#xD588;&#xB2E4; &#xC21C; &#xC9C4; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xD45C;&#xBA74; &#xBCF4;&#xCDA9; TCRs &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xD3ED;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638; &#xD655;&#xC7A5;. &#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; TCR &#xCC38;&#xC5EC; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8; 2&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xCCB4; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; TCR &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xC18C;&#xBE44; &#xC21C; &#xC9C4; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC16;&#xB294; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC758; &#xC5F0;&#xC7A5;&#xB41C; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC1C;&#xBCC4; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xB2A5;&#xB825;&#xC740; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04;&#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC2E4;&#xD589; &#xD558; &#xC5EC; &#xC99D;&#xD3ED; &#xB41C;&#xB2E4;.

Fuerte encuentro antig&#xE9;nico por las c&#xE9;lulas T induce r&#xE1;pidamente la formaci&#xF3;n de sinapsis inmunol&#xF3;gica y superficie de las c&#xE9;lulas T del receptor de regulaci&#xF3;n a la baja (TCR). Aunque la superficie de la expresi&#xF3;n de TCR puede permanecer baja durante varios d&#xED;as, las c&#xE9;lulas T todav&#xED;a pueden mantener la se&#xF1;alizaci&#xF3;n antig&#xE9;nicos. Ha sido claro si la se&#xF1;alizaci&#xF3;n antig&#xE9;nico prolongado se produce en ausencia de la superficie de reposici&#xF3;n de TCR, se mantiene por unos pocos TCR &#x26;quot;nondownregulatable&#x26;quot; superficiales que pueden residir en una estructura de sinaptosomas. Alternativamente, la superficie bajo nivel de TCR inducida por ant&#xED;geno podr&#xED;a representar un estado din&#xE1;mico de expresi&#xF3;n que contenga superficie continua reposici&#xF3;n de TCR, reacoplamiento por el ant&#xED;geno, y downregulation en curso. Para resolver este problema, hemos realizado un estudio in vivo generados, de doble especificidad CD4 primarias ingenuas (+) las c&#xE9;lulas T. En estas c&#xE9;lulas, el est&#xED;mulo antig&#xE9;nico exclusivamente downregulated ant&#xED;geno-espec&#xED;fica, pero no ant&#xED;geno espec&#xED;fica, TCR. Adem&#xE1;s de proporcionar un medio para realizar un seguimiento de la participaci&#xF3;n de TCR, esto tambi&#xE9;n nos permiti&#xF3; utilizar el ant&#xED;geno espec&#xED;fica TCR para rastrear la expresi&#xF3;n del TCR en el aislamiento a partir del compromiso TCR por el ant&#xED;geno. Superficie reposici&#xF3;n TCR comenz&#xF3; en el primer d&#xED;a de estimulaci&#xF3;n, y se produjo de forma sincr&#xF3;nica con continuo ant&#xED;geno-espec&#xED;fica compromiso TCR y downregulation. Adem&#xE1;s, mediante la mejora de la expresi&#xF3;n de CD25, extendido a trav&#xE9;s de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n para el llenado del TCR superficie significativamente amplificadas el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas hijas generadas por las c&#xE9;lulas CD4 naive (+) las c&#xE9;lulas T que ya se hab&#xED;a comprometido a proliferar. Este efecto se requiere compromiso TCR y no podr&#xED;a ser sustituido por interleucina 2. Estos datos demuestran que TCR y el consumo puede ocurrir durante un per&#xED;odo prolongado de tiempo, con un impacto significativo sobre las respuestas efectoras evocados de CD4 naive (+) las c&#xE9;lulas T.

La capacidad proliferativa de las c&#xE9;lulas CD4 naive individuales (+) las c&#xE9;lulas T es amplificado por la prolongada del receptor de ant&#xED;geno de c&#xE9;lulas T Disparo

&#x5B83;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x7406;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x6574;&#x4E2A;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x8C03;&#x8282; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) &#x53C2;&#x4E0E;&#x548C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x8FD9;&#x6B21;&#x68C0;&#x8BA8;&#x4F1A;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x9762; TCR &#x8868;&#x8FBE;&#x53CA;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5728;&#x80F8;&#x817A;&#x4E2D;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x4E0E;&#x6548;&#x5E94; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;&#x867D;&#x7136; TCR &#x53EF;&#x4EE5;&#x63A5;&#x53D7;&#x8868;&#x9762;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5DE8;&#x5927;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECD;&#x7136;&#x80FD;&#x591F;&#x7EF4;&#x6301; TCR &#x8BA2;&#x5A5A;&#x671F;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x6D89;&#x53CA; (a) &#x63A7;&#x5236;&#x8868;&#x9762; TCR &#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x914D;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x548C; (b) &#x63A7;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6FC0;&#x6D3B; T &#x7EC6;&#x80DE; TCR &#x8868;&#x8FBE;&#x8868;&#x9762;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x6765;&#x5B9E;&#x73B0;&#x3002;TCR &#x4FE1;&#x53F7;&#x672C;&#x8EAB;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x8868;&#x9762; TCR &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x7D20;&#x4E4B;&#x4E00;&#xFF0C;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0B;&#x8C03;&#x548C;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x4E0A;&#x8C03;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x662F;&#x7531;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x53EF;&#x8C03;&#x8C10;&#x3002;&#x6709;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5B58;&#x5728;&#x7740;&#x672C;&#x8D28;&#x4E0A;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684; TCR&#xFF0C;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5728;&#x6301;&#x7EED;&#x6297;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E2D;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x4F5C;&#x7528;&#x8FD8;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86;&#x3002;&#x6765;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8868;&#x9762; TCR &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x7684;&#x8C03;&#x5236;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6F84;&#x6E05;&#x5176;&#x5BF9;&#x8C03;&#x8282;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5C06;&#x662F;&#x672A;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3002;

It is important to understand how T-cell antigen receptor (TCR) engagement and signaling are regulated throughout an immune response. This review examines the dynamics of surface TCR expression and signaling capacity during thymic and effector T-cell development. Although the TCR can undergo vast changes in surface expression, T cells remain capable of sustaining TCR engagement for long periods of time. This may be achieved by a combination of mechanisms that involve (a) controlling the quantity of surface TCR available for ligand interaction and (b) controlling the quality of surface TCR expression during T-cell activation. TCR signaling itself appears to be one of the main quantitative modulators of surface TCR expression, and it can cause both downregulation and upregulation at different times of T-cell activation. Recent studies indicate that the degree of upregulation is tunable by the strength of antigenic stimulation. There is evidence that qualitatively distinct forms of the TCR exist, and their potential role in sustained antigenic signaling is also discussed. A goal of future studies will be to better characterize these modulations in surface TCR expression and to clarify their impact on the regulation of immune responses.

Surface T-cell antigen receptor expression and availability for long-term antigenic signaling.

Il est important de comprendre comment r&#xE9;cepteur d&#x26;#39;antig&#xE8;ne des cellules T (TCR) l&#x26;#39;engagement et la signalisation sont r&#xE9;glement&#xE9;s pendant une r&#xE9;ponse immunitaire. Cette revue examine la dynamique de la surface de TCR expression et la capacit&#xE9; de signalisation au cours du thymus et des lymphocytes T effecteurs de d&#xE9;veloppement. Bien que la TCR peuvent subir de grands changements dans l&#x26;#39;expression de surface, les cellules T restent capables de soutenir l&#x26;#39;engagement du TCR pendant de longues p&#xE9;riodes de temps. Ceci peut &#xEA;tre r&#xE9;alis&#xE9; par une combinaison de m&#xE9;canismes qui impliquent (a) contr&#xF4;ler la quantit&#xE9; de surface disponible pour l&#x26;#39;interaction TCR ligand et (b) contr&#xF4;le de la qualit&#xE9; de la surface de TCR expression au cours de l&#x26;#39;activation des lymphocytes T. Signalisation du TCR lui-m&#xEA;me semble &#xEA;tre l&#x26;#39;un des modulateurs principaux quantitatives de la surface de TCR expression, et il peut causer &#xE0; la fois la r&#xE9;gulation n&#xE9;gative et une r&#xE9;gulation positive &#xE0; diff&#xE9;rents moments de l&#x26;#39;activation des cellules T. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes indiquent que le degr&#xE9; de r&#xE9;gulation &#xE0; la hausse est accordable par la force de la stimulation antig&#xE9;nique. Il est prouv&#xE9; que les formes qualitativement distinctes de la TCR existent, et leur r&#xF4;le potentiel dans la signalisation antig&#xE9;nique soutenue est &#xE9;galement discut&#xE9;. Un objectif des &#xE9;tudes &#xE0; venir sera de mieux caract&#xE9;riser ces modulations dans la surface TCR expression et de clarifier leur impact sur la r&#xE9;gulation des r&#xE9;ponses immunitaires.

Surface des lymphocytes T Expression r&#xE9;cepteur de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne et la disponibilit&#xE9; de long terme antig&#xE9;nique de signalisation

Fl&#xE4;che T-Zell-Antigen-Rezeptor-Expression und die Verf&#xFC;gbarkeit von langfristigen antigene Signalisierung.

&Egrave; importante capire come le cellule T antigene recettore (TCR) impegno e segnalazione sono regolati durante una risposta immunitaria. Questa revisione esamina le dinamiche di superficie TCR espressione e capacit&agrave; di segnalazione durante del timo e lo sviluppo delle cellule T effettrici. Sebbene il TCR pu&ograve; subire vasti cambiamenti nell&#39;espressione di superficie, le cellule T rimangono in grado di sostenere l&#39;impegno di TCR per lunghi periodi di tempo. Questo pu&ograve; essere raggiunto da una combinazione di meccanismi che coinvolgono (a) controllare la quantit&agrave; di superficie disponibile per l&#39;interazione ligando TCR e (b) controllare la qualit&agrave; della superficie espressione TCR durante l&#39;attivazione delle cellule T. TCR segnalazione stessa sembra essere uno dei principali modulatori quantitativi della superficie espressione del TCR e pu&ograve; causare sia Sottoregolazione in tempi diversi di attivazione delle cellule T. Studi recenti indicano che il grado di upregulation &egrave; sintonizzabile dalla forza della stimolazione antigenica. Non c&#39;&egrave; prova che esistono forme qualitativamente distinte del TCR, e loro ruolo potenziale nella segnalazione antigenica sostenuta &egrave; anche discusso. Un obiettivo degli studi futuri saranno meglio caratterizzano queste modulazioni in superficie espressione del TCR e chiarire il loro impatto sulla regolazione della risposta immunitaria.

Superficie dell&#39;espressione dei recettori dell&#39;antigene delle cellule T e disponibilit&agrave; per segnalazione antigenico a lungo termine.

T&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3068;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x8868;&#x9762;&#x306E;TCR&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x80F8;&#x817A;&#x3068;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x307E;&#x3059;&#x3002; TCR&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5E83;&#x5927;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x9593;TCR&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;a&#xFF09;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x8868;&#x9762;&#x306E;TCR&#x306E;&#x91CF;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#xFF08;b&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x6642;&#x306B;&#x8868;&#x9762;&#x306E;TCR&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x7BA1;&#x7406;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; TCR&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x81EA;&#x4F53;&#x306F;&#x8868;&#x9762;TCR&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6642;&#x671F;&#x306B;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306F;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x5F37;&#x3055;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x6574;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x306B;TCR&#x306E;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5F62;&#x614B;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x8A3C;&#x62E0;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3082;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x9762;TCR&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x9577;&#x671F;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;

&#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR) &#xCC38;&#xC5EC; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB418;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; TCR &#xC2DD; &#xD45C;&#xBA74;&#xACFC; thymic &#xC911; &#xC6A9;&#xB7C9; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559; &#xC870;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC774;&#xD399;&#xD130; T &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C;. TCR &#xD45C;&#xBA74; &#xC2DD;&#xC758; &#xAC70; &#xB300; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBC1B;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC624;&#xB79C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; TCR &#xC57D;&#xD63C; &#xC720;&#xC9C0; &#xB2A5;&#xB825;&#xC774; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; (&#xAC00;) &#xD45C;&#xBA74;&#xC758; TCR ligand &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC218;&#xB7C9;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xACE0; (b) &#xD45C;&#xBA74; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC911; &#xC2DD; TCR&#xC758; &#xD488;&#xC9C8; &#xAD00;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. TCR &#xC790;&#xCCB4; &#xC2E0;&#xD638; &#xD55C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC758; TCR &#xC2DD; &#xC8FC;&#xC694; &#xC591;&#xC801; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; downregulation &#xBC0F; upregulation T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB974;&#xBA74; upregulation &#xC815;&#xB3C4; antigenic &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xAC15;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC74C;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. TCR &#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560; &#xB17C;&#xC758; &#xB610;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xB798; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xD45C;&#xBA74; TCR &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xC870; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD45C;&#xBA74; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2DD;&#xC640; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

Es importante entender c&#xF3;mo receptor de c&#xE9;lulas T ant&#xED;geno (TCR) compromiso y se&#xF1;alizaci&#xF3;n est&#xE1;n regulados durante una respuesta inmune. Esta revisi&#xF3;n examina la din&#xE1;mica de la superficie de la expresi&#xF3;n de TCR y la capacidad de se&#xF1;alizaci&#xF3;n durante el timo y las c&#xE9;lulas T efectoras de desarrollo. Aunque el TCR puede someterse a grandes cambios en la expresi&#xF3;n de superficie, las c&#xE9;lulas T siendo capaz de sostener el compromiso TCR durante largos per&#xED;odos de tiempo. Esto puede lograrse mediante una combinaci&#xF3;n de mecanismos que implican (a) controlando la cantidad de superficie disponible para la interacci&#xF3;n TCR ligando y (b) el control de la calidad de la superficie de la expresi&#xF3;n de TCR durante la activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T. TCR misma se&#xF1;alizaci&#xF3;n parece ser uno de los moduladores principales cuantitativos de superficie expresi&#xF3;n de TCR, y puede causar tanto downregulation y upregulation en diferentes momentos de la activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T. Estudios recientes indican que el grado de regulaci&#xF3;n positiva es sintonizable por la fuerza de la estimulaci&#xF3;n antig&#xE9;nica. Hay evidencia de que las formas cualitativamente distintas de la TCR existen, y su posible papel en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n antig&#xE9;nica sostenida se discute tambi&#xE9;n. Uno de los objetivos de los futuros estudios ser&#xE1; la de caracterizar mejor estas modulaciones en la superficie de la expresi&#xF3;n de TCR y de clarificar su impacto en la regulaci&#xF3;n de la respuesta inmune.

Superficie de las c&#xE9;lulas T la expresi&#xF3;n del receptor de ant&#xED;geno y la disponibilidad para el largo plazo antig&#xE9;nica de se&#xF1;alizaci&#xF3;n

&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x4E86; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) &beta; &#x94FE;&#x8DE8;&#x819C;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x57DF; &#xFF08;betaTM/&#x7EC6;&#x80DE;) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x540E; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C; betaTM &#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57DF;&#x8868;&#x793A; TCR &#x5927;&#x91CF;&#x79EF;&#x7D2F;&#x4E0E;&#x5177;&#x4F53;&#x7F3A;&#x9677;&#x5728;&#x7ECF;&#x5386;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1; (&#x9178;)&#x3002;TCR &#x5DEE;&#x7A81;&#x53D8;&#x65B0;&#x5175;&#x86CB;&#x767D;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x5361;&#x739B; 1&#xFF0C;&#x548C;&#x540E;&#x6765;&#x5728;&#x6FC0;&#x6D3B; NF &#x6D3B;&#x5316;&#x800C;&#x53D7;&#x635F;&#x3002;&#x6B64;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; Fas &#x914D;&#x4F53; (FasL) &#x7B80;&#x5316;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5E76;&#x51CF;&#x5C11;&#x9178;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; &beta; &#x94FE;&#x57DF;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5224;&#x522B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;

T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x88AB;&#x5206;&#x5F00;&#x7531; TCRbeta &#x94FE;&#x5E38;&#x91CF;&#x57DF;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;

We have studied the role of the T cell receptor (TCR) beta chain transmembrane and cytoplasmic domains (betaTM/Cyto) in T cell signaling. Upon antigen stimulation, T lymphocytes expressing a TCR with mutant and betaTM and Cyto domains accumulate in large numbers and are specifically defective in undergoing activation-induced cell death (AICD). The mutant TCR poorly recruits the protein adaptor Carma-1 and is subsequently impaired in activating NF-kappaB. This signaling defect leads to a reduced expression of Fas ligand (FasL) and to a reduction in AICD. These beta chain domains are involved in discriminating cell division and apoptosis.

T cell division and death are segregated by mutation of TCRbeta chain constant domains.

Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; le r&#xF4;le du r&#xE9;cepteur des cellules T (TCR) transmembranaire de la cha&#xEE;ne b&#xEA;ta et domaines cytoplasmiques (betaTM / Cyto) dans la signalisation cellulaire T. Lors de la stimulation antig&#xE9;nique, les lymphocytes T exprimant un TCR avec le mutant et betaTM et domaines Cyto s&#x26;#39;accumulent en grand nombre et sont sp&#xE9;cifiquement d&#xE9;fectueux en subissant la mort cellulaire induite par activation (AICD). Le TCR mutant recrute mal l&#x26;#39;adaptateur prot&#xE9;ines Carma-1 et est d&#xE9;pr&#xE9;ci&#xE9; ult&#xE9;rieurement dans l&#x26;#39;activation de NF-kappaB. Ce d&#xE9;faut de signalisation conduit &#xE0; une expression r&#xE9;duite de ligand Fas (FasL) et &#xE0; une r&#xE9;duction de l&#x26;#39;AICD. Ces domaines de la cha&#xEE;ne b&#xEA;ta sont impliqu&#xE9;s dans la division cellulaire et l&#x26;#39;apoptose discrimination.

La division cellulaire T et de la mort sont s&#xE9;par&#xE9;s par mutation de domaines de la cha&#xEE;ne TCRbeta constants

T-Zell-Teilung und Tod werden durch Mutation des TCRbeta Kette konstanten Dom&#xE4;nen getrennt.

Abbiamo studiato il ruolo dei T cell receptor (TCR) beta catena transmembrana e citoplasmatici domini (betaTM/Cyto) nella segnalazione delle cellule T. Dopo stimolazione con l&#39;antigene, i linfociti T che esprimono un TCR con mutante e betaTM e Cyto domini si accumulano in grandi numeri e sono specificatamente difettosi in fase di morte cellulare indotta da attivazione (AICD). Il mutante TCR mal reclute l&#39;adattatore proteico Carma-1 e successivamente viene alterato nell&#39;attivazione di NF-kappaB. Questo difetto di segnalazione porta ad una ridotta espressione del ligando di Fas (FasL) e ad una riduzione di AICD. Questi domini di catena beta sono coinvolti nella discriminante di divisione cellulare e l&#39;apoptosi.

Morte e divisione delle cellule t sono segregati dalla mutazione dei domini costante TCRbeta catena.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x3B2;&#x9396;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;betaTM / CYTO&#xFF09;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068;betaTM&#x3068;CYTO&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;TCR&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x304C;&#x5927;&#x91CF;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#xFF08;AICD&#xFF09;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x306E;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;TCR&#x304C;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;Carma&#x306E;A-1&#x3092;&#x52DF;&#x96C6;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;NF-&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x304C;&#x969C;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x3001;Fas&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#xFF08;FasL&#xFF09;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x91CF;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304A;&#x3088;&#x3073;AICD&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3B2;&#x9396;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x8B58;&#x5225;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3068;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x3068;&#x6B7B;&#x306F;TCRbeta&#x9396;&#x5B9A;&#x5E38;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR) &#xBCA0;&#xD0C0; &#xCCB4;&#xC778; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (betaTM/Cyto) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD56D; &#xC6D0; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; TCR&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; betaTM &#xBC0F; Cyto &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB2E4; &#xC218;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; (AICD) &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; TCR &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; Carma 1 &#xC2E0;&#xBCD1; &#xBC0F; NF kappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC560; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0;. &#xC774; &#xC2E0;&#xD638; &#xACB0;&#xD568; &#xB9AC;&#xB4DC; Fas &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; (FasL)&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DD; &#xBC0F; AICD &#xAC10;&#xC18C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xCCB4;&#xC778; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xCC28;&#xBCC4; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xBC0F; apoptosis&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828;.

T &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xACFC; &#xC8FD;&#xC74C; TCRbeta &#xCCB4;&#xC778; &#xC77C;&#xC815; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos estudiado el papel del receptor de c&#xE9;lulas T (TCR) de transmembrana de la cadena beta y dominios citopl&#xE1;smicos (betaTM / cito) en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas T. Despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n antig&#xE9;nica, los linfocitos T que expresan un TCR con el mutante y betaTM y los dominios de Cyto se acumulan en grandes cantidades y son espec&#xED;ficamente sometidos a defectos en la activaci&#xF3;n de la muerte celular inducida (AICD). El TCR mutante deficiente recluta el adaptador de prote&#xED;nas Carma-1 y sufriese posteriormente un deterioro en la activaci&#xF3;n de NF-kappaB. Este defecto de se&#xF1;alizaci&#xF3;n conduce a una reducci&#xF3;n de expresi&#xF3;n de Fas ligando (FasL) y una reducci&#xF3;n de DAI. Estos dominios de la cadena beta est&#xE1;n involucrados en la divisi&#xF3;n celular y la apoptosis discriminaci&#xF3;n.

Divisi&#xF3;n de c&#xE9;lulas T y la muerte est&#xE1;n separadas por una mutaci&#xF3;n de los dominios de la cadena de constantes TCRbeta

&#x5929;&#x771F;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x4E3A;&#x7F16;&#x7A0B;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x81A8;&#x80C0;&#x548C;&#x6536;&#x7F29;&#x671F;&#x95F4;&#x51CC;&#x6668;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x652F;&#x6301;&#x81EA;&#x52A8;&#x9A7E;&#x9A76;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x89C4;&#x6A21;&#x540C;&#x65F6;&#x786E;&#x5B9A;&#x5355;&#x4E00;&#x3001; &#x77ED;&#x6682;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x66B4;&#x9732;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x5E7C;&#x7A1A;&#x7684; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x5FC5;&#x987B;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x4E0A; &#39;&#x81EA;&#x52A8;&#x9A7E;&#x9A76;&#x4EEA;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x662F;&#x957F;&#x7684;&#x65F6;&#x671F;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x5BF9;&#x6297;&#x539F;&#x4E3B;&#x8981;&#x589E;&#x6B96;&#x53CD;&#x5E94;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; APC)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5355;&#x4E2A;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x6297;&#x539F; (18 h) &#x540C;&#x65F6;&#x72AF;&#x4E0B; T &#x7EC6;&#x80DE; (2) &#x63A5;&#x53D7;&#x6700;&#x5C0F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;(1) &#x5411;&#x4E0A;-&#x8C03;&#x8282;&#x8868;&#x9762; TCR &#x5C31;&#x5929;&#x771F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E4B;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x548C; (3) &#x83B7;&#x5F97;&#x5BF9; TCR &#x4F9D;&#x8D56;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7EE7;&#x7EED;&#x6297;&#x539F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x8F93; 18 &#x548C; 72 h &#x9700;&#x8981;&#x653E;&#x5927;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x81F4;&#x529B;&#x4E8E; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x79BB;&#x6563;&#x627F;&#x8BFA;&#x65F6;&#x95F4;&#x5176;&#x540E; &#39;&#x8C03;&#x6574;&#39; &#x7684;&#x65F6;&#x671F;&#xFF0C;&#x5728;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x786E;&#x5B9A;&#x8BE5;&#x5377;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF0C;T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F1A;&#x81F4;&#x529B;&#x4E0E; TCR &#x4F9D;&#x8D56;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x8868;&#x793A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x7F16;&#x7A0B;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x65F6;&#x673A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; APC &#x5B8C;&#x6574;&#x514B;&#x9686;&#x6269;&#x5C55;&#x3002;

&#x4E0D;&#x540C;&#x65F6;&#x6001;&#x7F16;&#x7A0B;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; TCR &#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x9012;&#x5448;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x5E7C;&#x7A1A;&#x7684; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Naive T cells become programmed for clonal expansion and contraction during the early hours of antigenic signaling. Recent studies support an 'autopilot' model, wherein the commitment to proliferate and the magnitude of the proliferative response are simultaneously determined during a single, brief period of antigen exposure. Here, we have examined whether the proliferation of naive CD4+ T cells must occur on 'autopilot', or whether extended periods of antigenic signaling can impact primary proliferative responses to antigen-presenting macrophages (macrophage APC). We found that a single exposure to antigen (18 h) simultaneously committed T cells to (1) up-regulate surface TCR above the level expressed on naive T cells, (2) undergo minimal cell division, and (3) acquire susceptibility to TCR-dependent activation-induced cell death. However, continued antigenic signaling between 18 and 72 h was required to amplify the number of daughter cells derived from the already committed T cells. Thus, a discrete commitment time was followed by a 'tuning' period, where extended antigenic signaling determined the volume of the proliferative response. We conclude that T cell commitment to full clonal expansion versus TCR-dependent death susceptibility represent two separate programming events whose timing can be segregated by macrophage APC.

Distinct temporal programming of naive CD4+ T cells for cell division versus TCR-dependent death susceptibility by antigen-presenting macrophages.

Les lymphocytes T na&#xEF;fs deviennent programm&#xE9; pour l&#x26;#39;expansion clonale et la contraction durant les premi&#xE8;res heures de la signalisation antig&#xE9;niques. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes l&#x26;#39;appui d&#x26;#39;une &#xAB;pilotage automatique&#xBB; du mod&#xE8;le, dans lequel l&#x26;#39;engagement &#xE0; prolif&#xE9;rer et &#xE0; l&#x26;#39;ampleur de la r&#xE9;ponse prolif&#xE9;rative sont d&#xE9;termin&#xE9;s simultan&#xE9;ment au cours d&#x26;#39;une seule, br&#xE8;ve p&#xE9;riode d&#x26;#39;exposition antig&#xE8;ne. Ici, nous avons examin&#xE9; si la prolif&#xE9;ration des cellules CD4 + na&#xEF;ves T doit &#xEA;tre en &#xAB;pilotage automatique&#xBB;, ou si de longues p&#xE9;riodes de signalisation antig&#xE9;niques peuvent avoir un impact primaires r&#xE9;ponse prolif&#xE9;rative &#xE0; pr&#xE9;sentatrices d&#x26;#39;antig&#xE8;ne (macrophages macrophage APC). Nous avons constat&#xE9; que d&#x26;#39;une seule exposition &#xE0; un antig&#xE8;ne (18 h) simultan&#xE9;ment commis des cellules T &#xE0; (1) jusqu&#x26;#39;&#xE0; r&#xE9;glementer la surface TCR-dessus du niveau exprim&#xE9; sur les cellules T na&#xEF;ves, (2) subir une division cellulaire minimale, et (3) d&#x26;#39;acqu&#xE9;rir la sensibilit&#xE9; &#xE0; TCR -d&#xE9;pendante induite par activation mort cellulaire. Cependant, a poursuivi antig&#xE9;nique de signalisation entre 18 et 72 h est n&#xE9;cessaire pour amplifier le nombre de cellules filles issues des cellules T sont d&#xE9;j&#xE0; engag&#xE9;s. Ainsi, un engagement &#xE0; temps discret a &#xE9;t&#xE9; suivi par un &#x26;#39;tuning&#x26;#39; p&#xE9;riode, o&#xF9; antig&#xE9;nique prolong&#xE9;e de signalisation a d&#xE9;termin&#xE9; le volume de la r&#xE9;ponse prolif&#xE9;rative. Nous concluons que l&#x26;#39;engagement des cellules T &#xE0; l&#x26;#39;expansion clonale compl&#xE8;te contre TCR-d&#xE9;pendante la susceptibilit&#xE9; de mort repr&#xE9;sentent deux &#xE9;v&#xE9;nements de programmation distincts dont les dates peuvent &#xEA;tre s&#xE9;par&#xE9;s par les macrophages APC.

Distinct de programmation temporelle de CD4 + na&#xEF;ves cellules T pour la division cellulaire Versus Sensibilit&#xE9; Mort TCR-d&#xE9;pendante par pr&#xE9;sentatrices d&#x26;#39;antig&#xE8;ne Macrophages

Distinct zeitliche Planung der naiven CD4 + T-Zellen f&#xFC;r die Zellteilung gegen&#xFC;ber TCR-abh&#xE4;ngige Tod Empfindlichkeit durch Antigen-pr&#xE4;sentierende Makrophagen.

Le cellule T Naive diventano programmate per espansione clonale e la contrazione durante le prime ore di segnalazione antigenica. Studi recenti supportano un modello &#39;autopilota&#39;, in cui l&#39;impegno a proliferare e la grandezza della risposta proliferativa simultaneamente sono determinati durante un unico, breve periodo di esposizione dell&#39;antigene. Qui, abbiamo esaminato se la proliferazione delle cellule T CD4 + naive deve verificarsi su &#39;autopilota&#39; o se lunghi periodi di segnalazione antigenica possono avere un impatto primario proliferativa responses to presentanti l&#39;antigene macrofagi (macrofago APC). Abbiamo scoperto che una singola esposizione a cellule T antigene (18 h) impegnati simultaneamente (1) up-regolare superficie TCR sopra il livello espresso sulle cellule T naive, (2) subiscono minima divisione cellulare, e (3) acquisire sensibilit&agrave; alla morte cellulare indotta da attivazione TCR-dipendente. Tuttavia, continua segnalazione antigenica tra 18 e 72 h era necessaria per amplificare il numero di cellule figlie derivate dalle cellule T gi&agrave; impegnate. Cos&igrave;, un tempo discreto impegno fu seguito da un periodo di &#39;tuning&#39;, dove estese antigenica segnalazione determinato il volume della risposta proliferativa. Concludiamo che cellule T impegno per espansione clonale pieno versus TCR-dipendente morte suscettibilit&agrave; rappresentano due distinti programmazione eventi cui temporizzazione pu&ograve; essere segregati dai macrofagi APC.

Programmazione temporale distinto delle cellule T CD4 + naive per divisione cellulare versus suscettibilit&agrave; morte TCR-dipendente da presentanti l&#39;antigene macrofagi.

&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x6297;&#x539F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x65E9;&#x3044;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x81A8;&#x5F35;&#x3068;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x66B4;&#x9732;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x3001;&#x77ED;&#x3044;&#x671F;&#x9593;&#x4E2D;&#x306B;&#x5897;&#x6B96;&#x3057;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x304C;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x3001; &#x26;quot;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D1;&#x30A4;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x26;quot;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;CD4 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x304C; &#x26;quot;&#x81EA;&#x52D5;&#x64CD;&#x7E26;&#x26;quot;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9577;&#x6642;&#x9593;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#xFF08;&#x5927;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;APC&#xFF09;&#x3078;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5897;&#x6B96;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5358;&#x56DE;&#x66B4;&#x9732;&#xFF08;18&#x6642;&#x9593;&#xFF09;&#x306B;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;T&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x3001;&#x4E0A;&#x8A18;&#xFF08;1&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x8868;&#x9762;TCR&#xFF08;2&#xFF09;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#xFF08;3&#xFF09;TCR&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x7372;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;h&#x306F;&#x65E2;&#x306B;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x5A18;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x305F;18&#x304A;&#x3088;&#x3073;72&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x6297;&#x539F;&#x3092;&#x7D9A;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x96E2;&#x6563;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x6642;&#x9593;&#x304C;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x539F;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x91CF;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054; &#x26;#39;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x26;#39;&#x671F;&#x9593;&#x304C;&#x7D9A;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;TCR-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62E1;&#x5F35;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;APC&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;2&#x3064;&#x306E;&#x5225;&#x3005;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x306B;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;CD4&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;+&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;TCR-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6B7B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x5BFE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;

&#xC21C; &#xC9C4; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD074;&#xB860; &#xD655;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC218;&#xCD95; antigenic &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xC774;&#xB978; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC774; &#xB420; &#xAC83;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB974;&#xBA74; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACA9; &#xC99D; &#xC9C0;&#xC640; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xD56D; &#xC6D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C;, &#xC9E7;&#xC740; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xACB0;&#xC815;&#xC740; &#39;&#xC790;&#xB3D9; &#xBAA8;&#xB4DC;&#39; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#39;&#xC790;&#xB3D9; &#xBAA8;&#xB4DC;&#39;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD574;&#xC57C; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xBD80; &#xB610;&#xB294; &#xC7A5;&#xC2DC;&#xAC04; antigenic &#xC2E0;&#xD638; &#xC8FC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC751;&#xB2F5; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; (macrophage APC). &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD56D; &#xC6D0; (18h)&#xC5D0; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB178;&#xCD9C; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; T &#xC138;&#xD3EC; (1) &#xCD5C;&#xB300; &#xC870;&#xC808; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC900; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; TCR, (2) &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xBC1B; &#xB2E4;&#xB97C; &#xD22C;&#xC785; &#xD558; &#xACE0; (3) &#xCDE8;&#xB4DD; TCR &#xC885;&#xC18D; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, 18 72 h &#xAC04;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC2E0;&#xD638; &#xC774;&#xBBF8; &#xCEE4;&#xBC0B;&#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB538; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xB97C; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC57D;&#xC18D; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC5B4;&#xB514; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xBCFC;&#xB968;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD655;&#xC7A5; antigenic &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1; &#39;&#xD29C;&#xB2DD;&#39; &#xAE30;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC120;&#xD589; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; TCR &#xC885;&#xC18D; &#xC8FD;&#xC74C; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131; &#xB300;&#xD45C; &#xB450; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; macrophage APC&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xBCC4; &#xC218; &#xB300; &#xC804;&#xCCB4; &#xD074;&#xB860; &#xD655;&#xC7A5; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD22C;&#xC785; &#xADF8; &#xACB0;&#xB860;.

&#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558; &#xC5EC; TCR &#xC885;&#xC18D; &#xC8FD;&#xC74C; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131; &#xB300; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC784;&#xC2DC; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;.

C&#xE9;lulas T v&#xED;rgenes se vuelven programadas para la expansi&#xF3;n clonal y la contracci&#xF3;n en las primeras horas de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n antig&#xE9;nicos. Estudios recientes apoyan un &#x26;#39;piloto autom&#xE1;tico&#x26;#39; modelo, en donde el compromiso con la proliferaci&#xF3;n y la magnitud de la respuesta proliferativa se determinan simult&#xE1;neamente durante un per&#xED;odo breve y &#xFA;nica de la exposici&#xF3;n al ant&#xED;geno. Aqu&#xED;, hemos examinado si la proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas CD4 + T debe ocurrir en &#x26;#39;piloto autom&#xE1;tico&#x26;#39;, o si durante largos per&#xED;odos de se&#xF1;alizaci&#xF3;n antig&#xE9;nicas pueden afectar la respuesta proliferativa a los principales presentadoras de ant&#xED;geno-macr&#xF3;fagos (macr&#xF3;fagos APC). Se encontr&#xF3; que una sola exposici&#xF3;n a un ant&#xED;geno (18 h) al mismo tiempo comprometidos a las c&#xE9;lulas T (1) hasta de regular la superficie sobre el nivel del TCR expresado en las c&#xE9;lulas T ingenuas, (2) sufren una divisi&#xF3;n celular m&#xED;nima, y &#x200B;&#x200B;(3) adquirir la susceptibilidad a la TCR dependiente de la activaci&#xF3;n inducida por la muerte celular. Sin embargo, continu&#xF3; antig&#xE9;nico de se&#xF1;alizaci&#xF3;n entre 18 y 72 h se requiere para amplificar el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas hijas derivadas de las c&#xE9;lulas T ya comprometidos. Por lo tanto, un tiempo discreto compromiso fue seguido por un &#x26;quot;ajuste&#x26;quot; per&#xED;odo, donde antig&#xE9;nico prolongado se&#xF1;alizaci&#xF3;n determin&#xF3; el volumen de la respuesta proliferativa. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que el compromiso de las c&#xE9;lulas T a la plena expansi&#xF3;n clonal frente TCR-dependiente de la susceptibilidad de muerte son dos eventos independientes, cuyo calendario de programaci&#xF3;n pueden ser segregadas por los macr&#xF3;fagos de APC.

Programaci&#xF3;n distinta temporal de ingenuo CD4 + c&#xE9;lulas T para la divisi&#xF3;n celular versus susceptibilidad dependiente de la Muerte TCR mediante la presentaci&#xF3;n de ant&#xED;geno-macr&#xF3;fagos

T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) &#x53EF;&#x4EE5;&#x8BC6;&#x522B;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x80BD;&#x4E3B;&#x8981;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x76F8;&#x5BB9;&#x6027;&#x590D;&#x5408; &#xFF08;&#x62B5;&#x62BC;&#xFF09; &#x914D;&#x4F53;&#x548C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x5316;&#x4E3A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8981;&#x5B9E;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E00;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;nonsignaling alphabeta &#x9ED1;&#x8179;&#x901A;&#x4FE1;&#x914D;&#x4F53;&#x8BC6;&#x522B;&#x5230; CD3 &#x4E9A;&#x57FA;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7531;&#x4E00;&#x79CD;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x79EF;&#x6781;&#x548C;&#x6D88;&#x6781;&#x9009;&#x62E9;&#x62B5;&#x62BC;&#x914D;&#x4F53;&#x516C;&#x5F00;&#x795E;&#x79D8;&#x4E2D;&#x590D;&#x6742; TCR &#x8BA2;&#x5A5A;&#x65F6; CD3 &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x4F53;&#x5185;&#x8BF1;&#x53D1;&#x548C;&#x9700;&#x8981;&#x540C;&#x6E90; MHC &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x4E0E;&#x540C;&#x6E90;&#x62B5;&#x62BC;&#x914D;&#x4F53; TCR &#x63A5;&#x89E6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; CD3 &#x60C5;&#x7ED3;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x51FA;&#x8FD9;&#x671F;&#x95F4;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x6297;&#x539F;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x80F8;&#x817A;&#x9009;&#x62E9;&#x6807;&#x5FD7;&#x521D;&#x59CB;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x80BD; MHC &#x914D;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; CD3 &#x60C5;&#x7ED3;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

The T cell receptor (TCR) can recognize a variety of cognate peptide/major histocompatibility complex (pMHC) ligands and translate their affinity into distinct cellular responses. To achieve this, the nonsignaling alphabeta heterodimer communicates ligand recognition to the CD3 signaling subunits by an unknown mechanism. In thymocytes, we found that both positive- and negative-selecting pMHC ligands expose a cryptic epitope in the CD3 complex upon TCR engagement. This conformational change is induced in vivo and requires the expression of cognate MHC. We conclude that TCR engagement with a cognate pMHC ligand induces a conformational change in the CD3 complex of thymocytes and propose that this marks an initial event during thymic selection that signals the recognition of self-antigen.

T cell receptor engagement by peptide-MHC ligands induces a conformational change in the CD3 complex of thymocytes.

Le r&#xE9;cepteur de cellule T (TCR) peut reconna&#xEE;tre une vari&#xE9;t&#xE9; de peptide apparent&#xE9; / complexe majeur d&#x26;#39;histocompatibilit&#xE9; (pMHC) et traduire les ligands d&#x26;#39;affinit&#xE9; en leur r&#xE9;ponses cellulaires distinctes. Pour atteindre cet objectif, le nonsignaling alphabeta h&#xE9;t&#xE9;rodim&#xE8;re communique reconnaissance du ligand pour les sous-unit&#xE9;s CD3 de signalisation par un m&#xE9;canisme inconnu. Dans les thymocytes, nous avons constat&#xE9; que les deux ligands positives et n&#xE9;gatives s&#xE9;lection PMHC exposer un &#xE9;pitope cryptique dans le complexe CD3 lors de l&#x26;#39;engagement du TCR. Ce changement de conformation est induite in vivo et n&#xE9;cessite l&#x26;#39;expression de MHC apparent&#xE9;. Nous concluons que l&#x26;#39;engagement du TCR avec un ligand apparent&#xE9; pMHC induit un changement conformationnel dans le complexe CD3 des thymocytes et proposer que la pr&#xE9;sente constitue un &#xE9;v&#xE9;nement initial lors de la s&#xE9;lection thymique qui signale la reconnaissance des auto-antig&#xE8;nes.

Engagement r&#xE9;cepteur de cellules T par peptide-CMH ligands induit un changement conformationnel dans le complexe CD3 des thymocytes

T-Zell-Rezeptor Eingriff von Peptid-MHC-Liganden induziert eine Konformations&#xE4;nderung in den CD3-Komplex von Thymozyten.

Il recettore delle cellule T (TCR) pu&ograve; riconoscere una variet&agrave; di ligandi di cognate del peptide/major istocompatibilit&agrave; complex (pMHC) e loro affinit&agrave; si traducono in risposte cellulari distinte. Per raggiungere questo obiettivo, l&#39;eterodimero nonsignaling alphabeta comunica il riconoscimento del ligando per il CD3 signaling subunit&agrave; da un meccanismo sconosciuto. In timociti, abbiamo trovato che sia positivo e negativo-selezione pMHC ligandi espongono un epitopo criptico nel CD3 complesse su fidanzamento TCR. Questo cambiamento conformazionale &egrave; indotta in vivo e richiede l&#39;espressione di MHC affine. Concludiamo che impegno TCR con un ligando cognate pMHC induce un cambiamento conformazionale nel complesso CD3 di timociti e propongono che questo segna un evento iniziale durante la selezione timica che segnala il riconoscimento di auto-antigene.

Impegno del recettore delle cellule t da ligandi del peptide-MHC induce un cambiamento conformazionale nel complesso CD3 di timociti.

T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x65CF;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;/&#x4E3B;&#x8981;&#x7D44;&#x7E54;&#x9069;&#x5408;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#xFF08;pMHC&#xFF09;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x975E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;alphabeta&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;CD3&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3092;&#x4F1D;&#x9054;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6B63;&#x3068;&#x8CA0;&#x306E;&#x9078;&#x629E;pMHC&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x304C;TCR&#x306E;&#x5A5A;&#x7D04;&#x6642;&#x306B;CD3&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x89E3;&#x306A;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x516C;&#x958B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x540C;&#x65CF;&#x306E;MHC&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x65CF;pMHC&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;TCR&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306F;&#x3001;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;CD3&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3092;&#x901A;&#x77E5;&#x3059;&#x308B;&#x80F8;&#x817A;&#x9078;&#x629E;&#x4E2D;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8FCE;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;-MHC&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306F;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;CD3&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;

T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR) &#xB3D9;&#xC871; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;/&#xC8FC;&#xC694; &#xC870;&#xC9C1; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xBCF5;&#xD569;&#xCCB4; (pMHC) ligands&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC778;&#xC2DD;&#xACFC; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBC88;&#xC5ED;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; nonsignaling alphabeta heterodimer &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xC778;&#xC2DD;&#xC744; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; cd3&#xC5D0; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Thymocytes, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB458; &#xB2E4; &#xAE0D;&#xC815; &#xBC0F; &#xBD80;&#xC815; &#xC120;&#xD0DD; pMHC ligands TCR &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; c d 3&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC0C1;&#xD55C; epitope &#xB178;&#xCD9C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB418;&#xC5B4; &#xB3D9;&#xC871; MHC&#xC758; &#xC2DD;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC871; pMHC ligand&#xC640; TCR &#xC57D;&#xD63C; thymocytes CD3 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC790;&#xAE30; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC778;&#xC2DD; thymic &#xC120;&#xD0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCD08;&#xAE30; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC81C;&#xC548; &#xACB0;&#xB860;.

&#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;-MHC ligands&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; t &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xACB0;&#xD63C; thymocytes CD3 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

El receptor de c&#xE9;lulas T (TCR) puede reconocer una variedad de p&#xE9;ptidos afines / complejo mayor de histocompatibilidad (pMHC) ligandos y traducir su afinidad en distintas respuestas celulares. Para lograr esto, el nonsignaling alphabeta heterod&#xED;mero comunica reconocimiento ligando a las subunidades CD3 se&#xF1;alizaci&#xF3;n por un mecanismo desconocido. En timocitos, se encontr&#xF3; que ambos ligandos pMHC positivos y negativos-seleccionar-exponer un ep&#xED;topo cr&#xED;ptico en el complejo CD3 sobre el compromiso de TCR. Este cambio conformacional es inducida in vivo y requiere la expresi&#xF3;n de MHC de cognado. Se concluye que el compromiso de TCR con un ligando cognado pMHC induce un cambio conformacional en el complejo CD3 de los timocitos y proponer que esto marca un evento inicial durante la selecci&#xF3;n del timo que se&#xF1;ala el reconocimiento de la auto-ant&#xED;geno.

Participaci&#xF3;n del receptor de c&#xE9;lulas T por el p&#xE9;ptido-MHC ligandos induce un cambio conformacional en el complejo CD3 de los timocitos

&#x7531;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x63A7;&#x5236;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3001; &#x751F;&#x7406;&#x548C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x673A;&#x5236;&#x3002;Multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6D41;&#x5F0F; (IP FCM) &#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x6C89;&#x6DC0;&#x662F;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8861;&#x91CF;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;&#x9AD8;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x5F97;&#x6709;&#x7528;&#x5373;&#x4F7F;&#x5F88;&#x5C0F;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6750;&#x6599;&#x662F;&#x53EF;&#x4F9B;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x7F55;&#x89C1;&#x7684;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x6216;&#x60A3;&#x8005;&#x6837;&#x672C;&#x7684;&#x4E2A;&#x6848;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F8B;&#x5B50;&#x63D0;&#x51FA;&#x5173;&#x8054;&#x590D;&#x6742;&#x4ECE;&#x5C11;&#x5219; 300 &#x4E3B;&#x5C0F;&#x9F20; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; CD3 &#x4E0D;&#x80B2;&#x75C7;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5B83;&#x80FD;&#x591F;&#x4F30;&#x8BA1; coimmunoprecipitated &#x5206;&#x5B50;&#x6570;&#x76EE;&#x4E0E;&#x517C;&#x5BB9;&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5206;&#x6790;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x672C;&#x6784;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5982;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3001; &#x4F7F;&#x7528;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD; S-&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;-&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0B;&#x62C9;&#x83DC;&#x5355;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x6240;&#x793A;&#x3002;IP FCM &#x8868;&#x793A;&#x5F3A;&#x5065;&#x3001; &#x5B9A;&#x91CF;&#x3001; &#x751F;&#x5316;&#x6280;&#x672F;&#x8BC4;&#x4F30;&#x672C;&#x673A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6216;&#x5927;&#x6837;&#x672C;&#x5927;&#x5C0F;&#x3002;

&#x9AD8;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x672C;&#x673A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x6D41;&#x5F0F; multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

Most mechanisms of cell development, physiology, and signal transduction are controlled by protein-protein interactions. Immunoprecipitation of multiprotein complexes detected by flow cytometry (IP-FCM) is a means to quantitatively measure these interactions. The high sensitivity of this method makes it useful even when very little biomaterial is available for analysis, as in the case of rare primary cell subsets or patient samples. Detection of the T cell antigen receptor associated with the CD3 multiprotein complex from as few as 300 primary murine T cells is presented as an example. The method is compatible with quantitative flow cytometry techniques, making it possible to estimate the number of coimmunoprecipitated molecules. Both constitutive and inducible protein-protein interactions can be analyzed, as illustrated in related methodology using glutathione S-transferase-fusion protein pull-down experiments. IP-FCM represents a robust, quantitative, biochemical technique to assess native protein-protein interactions, without requiring genetic engineering or large sample sizes.

High-sensitivity detection and quantitative analysis of native protein-protein interactions and multiprotein complexes by flow cytometry.

La plupart des m&#xE9;canismes de d&#xE9;veloppement cellulaire, la physiologie, et la transduction du signal sont contr&#xF4;l&#xE9;s par interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine. Immunopr&#xE9;cipitation de complexes multiprot&#xE9;iques d&#xE9;tect&#xE9;s par cytom&#xE9;trie en flux (IP-FCM) est un moyen de mesurer quantitativement ces interactions. La grande sensibilit&#xE9; de cette m&#xE9;thode, il est utile m&#xEA;me lorsque tr&#xE8;s peu de biomat&#xE9;riau est disponible pour l&#x26;#39;analyse, comme dans le cas des sous-ensembles de cellules primaires rares ou des &#xE9;chantillons de patients. D&#xE9;tection du r&#xE9;cepteur antig&#xE8;ne des cellules T associ&#xE9; au complexe CD3 multiprot&#xE9;ique d&#x26;#39;aussi peu que 300 cellules T murines primaires est pr&#xE9;sent&#xE9; comme un exemple. La m&#xE9;thode est compatible avec les techniques quantitatives de cytom&#xE9;trie en flux, ce qui rend possible d&#x26;#39;estimer le nombre de mol&#xE9;cules coimmunoprecipitated. Les deux constitutifs et inductibles interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine peut &#xEA;tre analys&#xE9;e, comme illustr&#xE9; dans la m&#xE9;thodologie li&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;utilisation de glutathion-S-transf&#xE9;rase-prot&#xE9;ine de fusion d&#xE9;roulant exp&#xE9;riences. IP-FCM repr&#xE9;sente un solide, quantitative, technique biochimique pour &#xE9;valuer indig&#xE8;nes interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine, sans n&#xE9;cessiter le g&#xE9;nie g&#xE9;n&#xE9;tique ou grandes tailles d&#x26;#39;&#xE9;chantillon.

Haute sensibilit&#xE9; de d&#xE9;tection et d&#x26;#39;analyse quantitative des autochtones interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine et complexes multiprot&#xE9;iques par cytom&#xE9;trie en flux

Die meisten Mechanismen der Signaltransduktion Zelle Entwicklung und Physiologie werden durch Protein-Protein Interaktionen gesteuert. Immunopr&auml;zipitation der multiprotein komplexe von Durchflusszytometrie (IP-FCM) erkannt wird, diese Interaktionen quantitativ zu messen. Die hohe Empfindlichkeit dieser Methode ist daher hilfreich, selbst wenn sehr wenig Biomaterial f&uuml;r Analyse, wie im Fall von seltenen Prim&auml;rzellen Teilmengen oder Patientenproben verf&uuml;gbar ist. Nachweis von den T-Zell-Antigen-Rezeptor zugeordnet die CD3-Multiprotein komplexe aus so wenig wie 300 prim&auml;ren murinen T-Zellen ist beispielhaft dargestellt. Die Methode ist kompatibel mit quantitativen flie&szlig;en Cytometry Techniken, macht es m&ouml;glich, die Anzahl der Coimmunoprecipitated Molek&uuml;le zu sch&auml;tzen. Beide konstitutive und durch Induktion erh&auml;ltlichen Protein-Protein-Interaktionen k&ouml;nnen analysiert werden, wie &auml;hnliche Methodik mit Glutathion S-Transferase-Fusion Protein Pulldown-Experimenten veranschaulicht. IP-FCM stellt eine robuste, quantitative, biochemische Technik native Protein-Protein-Wechselwirkungen, zu beurteilen, ohne Gentechnik oder gro&szlig;e Stichprobenumf&auml;nge.

Hochempfindlichen Nachweis und Quantitative Analyse von nativen Protein-Protein Interaktionen und multiprotein komplexe durch Durchflusszytometrie.

La maggior parte dei meccanismi di trasduzione del segnale, la fisiologia e lo sviluppo delle cellule sono controllati da interazioni proteina-proteina. Immunoprecipitazione dei complessi multiproteici rilevato tramite flusso cytometry (IP-FCM) &egrave; un mezzo per misurare quantitativamente queste interazioni. L&#39;elevata sensibilit&agrave; di questo metodo lo rende utile anche quando molto poco biomaterial &egrave; disponibile per l&#39;analisi, come nel caso dei sottoinsiemi di rara cellula primaria o campioni dei pazienti. Rilevamento del recettore delle cellule T antigene associato il CD3 multiprotein complesso da come pochi come cellule T 300 murine primarie &egrave; presentato come un esempio. Il metodo &egrave; compatibile con tecniche di citometria a flusso quantitativa, rendendo possibile la stima del numero di molecole coimmunoprecipitated. Possono essere analizzate sia le interazioni proteina-proteina costitutivi e inducibili, come illustrato nella metodologia correlata mediante esperimenti di glutatione S-transferasi-fusione proteina pull-down. IP-FCM rappresenta una tecnica robusta, quantitativa, biochimica per valutare le interazioni proteina-proteina nativa, senza la necessit&agrave; di ingegneria genetica o campioni di grandi dimensioni.

Ad alta sensibilit&agrave; rilevazione e analisi quantitativa delle interazioni proteina-proteina nativa e complessi multiproteici tramite flusso cytometry.

&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x591A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#xFF08;IP-FCM&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x751F;&#x4F53;&#x306F;&#x73CD;&#x3057;&#x3044;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x60A3;&#x8005;&#x691C;&#x4F53;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3067;&#x3082;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;300&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x4E00;&#x6B21;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;CD3&#x591A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306F;&#x3001;&#x4F8B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x9650;&#x308A;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F5C;&#x6210;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x6280;&#x8853;&#x3068;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x69CB;&#x6210;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30D7;&#x30EB;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;S-&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x95A2;&#x9023;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x306B;&#x793A;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; IP-FCM&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5DE5;&#x5B66;&#x3084;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x5929;&#x7136;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x3001;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x591A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x691C;&#x51FA;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;

&#xC140; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xC0DD;&#xB9AC;, &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Immunoprecipitation multiprotein &#xB2E8;&#xC9C0; cytometry (IP-FCM)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0;&#xC758; &#xC591;&#xC801; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB2E8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xAC10;&#xB3C4; &#xB124;&#xC694; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xAC8C; &#xC544;&#xC8FC; &#xC791;&#xC740; biomaterial &#xB4DC;&#xBB38; 1 &#xCC28; &#xC140;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569; &#xB610;&#xB294; &#xD658;&#xC790; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;. &#xC801;&#xC740; 300 &#xC8FC; murine T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; CD3 multiprotein&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C; &#xC608;&#xC81C;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC29;&#xBC95; &#xC591;&#xC801; &#xD750;&#xB984; cytometry &#xAE30;&#xBC95;, coimmunoprecipitated &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC608;&#xC0C1; &#xC218;&#xC640; &#xD638;&#xD658; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Glutathione S&#xACFC; &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD480; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xB4EF;&#xC774; &#xBAA8;&#xB450; &#xC81C;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. IP FCM &#xC720;&#xC804; &#xACF5;&#xD559; &#xB610;&#xB294; &#xD070; &#xC0D8;&#xD50C; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xACE0;, &#xC591;&#xC801;, &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACE0;&#xAC10;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; cytometry&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; multiprotein &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;.

La mayor&#xED;a de los mecanismos de desarrollo de las c&#xE9;lulas, la fisiolog&#xED;a y la transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales son controladas por las interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na. La inmunoprecipitaci&#xF3;n de los complejos multiproteicos detectados por citometr&#xED;a de flujo (IP-FCM) es un medio para medir cuantitativamente estas interacciones. La alta sensibilidad de este m&#xE9;todo hace que sea &#xFA;til incluso cuando muy poco biomaterial est&#xE1; disponible para el an&#xE1;lisis, como en el caso raro de subconjuntos de c&#xE9;lulas primarias o muestras de pacientes. Detecci&#xF3;n del receptor de c&#xE9;lulas T ant&#xED;geno asociado con el complejo CD3 multiproteico desde tan s&#xF3;lo 300 c&#xE9;lulas primarias T murinas se presenta como un ejemplo. El m&#xE9;todo es compatible con las t&#xE9;cnicas cuantitativas de citometr&#xED;a de flujo, por lo que es posible estimar el n&#xFA;mero de mol&#xE9;culas coinmunoprecipit&#xF3;. Ambos constitutivos e inducibles interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na pueden ser analizados, como se ilustra en la metodolog&#xED;a relacionada con la glutati&#xF3;n S-transferasa-prote&#xED;na de fusi&#xF3;n desplegable experimentos. IP-FCM representa una robusta t&#xE9;cnica cuantitativa, bioqu&#xED;mica para evaluar nativos interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na, sin necesidad de la ingenier&#xED;a gen&#xE9;tica o muestras de gran tama&#xF1;o.

Alta sensibilidad de detecci&#xF3;n y an&#xE1;lisis cuantitativo de los nativos interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na y Complejos Multiproteinas por citometr&#xED;a de flujo

TCR &#x53C2;&#x4E0E;&#x7531;&#x80BD; MHC I &#x7C7B; (&#x62B5;&#x62BC;) &#x914D;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC; CD3 &#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316; &#xFF08;Deltac&#xFF09; &#xFF08;CD3Deltac&#xFF09;&#xFF0C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5F53;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4E92;&#x52A8;&#x662F;&#x4E3B; T &#x7CFB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x88C5;&#x7532;&#x8FD0;&#x5175;&#x8F66;&#x4E4B;&#x95F4;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;CD8 hiv &#x611F;&#x67D3;&#x6291;&#x5236;&#x9700;&#x8981;&#x751F;&#x6210; CD3Deltac&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x94F6;&#x7ED3;&#x5408;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x589E;&#x5F3A;&#x65E2; Src &#x6FC0;&#x9176;&#x4FE1;&#x53F7;&#x89E3;&#x91CA;&#x8FD9;&#x79CD; hiv &#x611F;&#x67D3;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC; Ag CD3Deltac &#x53D1;&#x80B2;&#x51CF;&#x6BD2;&#x7684;&#x800C;&#x4E14;&#x4F34;&#x968F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x548C;&#x9650;&#x5236; CD8 &#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5F31;&#x8005;&#x548C;&#x5F3A;&#x8005;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC; CD3Deltac &#x9884;&#x9009;&#x7684;&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EA;&#x5F3A;&#x914D;&#x4F53;&#x6709;&#x6548;&#x5728;&#x6210;&#x719F;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; CD8 &#x53C2;&#x4E0E; TCR/&#x62B5;&#x62BC;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7269;&#x7406;&#x4E0A;&#x53EF;&#x8C03;&#x8282;&#x7684; CD3Deltac&quot;&#x7FFB;&#x8BD1;&quot;&#x751F;&#x4EA7;&#x94F6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9047;&#x5230;&#x4ECE; TCR &#x5230;&#x590D;&#x6742; CD3&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x5176;&#x4E2D; CD8 &#x800C;&#x4E14;&#x53D1;&#x80B2;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x8C03;&#x6574;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

CD8 &#x5728;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C; CD3 &#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x8C03;&#x6574;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

TCR engagement by peptide-MHC class I (pMHC) ligands induces a conformational change (Deltac) in CD3 (CD3Deltac) that contributes to T cell signaling. We found that when this interaction took place between primary T lineage cells and APCs, the CD8 coreceptor was required to generate CD3Deltac. Interestingly, neither enhancement of Ag binding strength nor Src kinase signaling explained this coreceptor activity. Furthermore, Ag-induced CD3Deltac was developmentally attenuated by the increase in sialylation that accompanies T cell maturation and limits CD8 activity. Thus, both weak and strong ligands induced CD3Deltac in preselection thymocytes, but only strong ligands were effective in mature T cells. We propose that CD8 participation in the TCR/pMHC interaction can physically regulate CD3Deltac induction by "translating" productive Ag encounter from the TCR to the CD3 complex. This suggests one mechanism by which the developmentally regulated variation in CD8 sialylation may contribute to the developmental tuning of T cell sensitivity.

A role for CD8 in the developmental tuning of antigen recognition and CD3 conformational change.

L&#x26;#39;engagement par TCR peptide-CMH de classe I (pMHC) ligands induit un changement conformationnel (Deltac) dans CD3 (CD3Deltac) qui contribue &#xE0; la signalisation des cellules T. Nous avons constat&#xE9; que lorsque cette interaction a eu lieu entre les cellules de la lign&#xE9;e T primaires et les APC, le cor&#xE9;cepteur CD8 a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour g&#xE9;n&#xE9;rer CD3Deltac. Fait int&#xE9;ressant, ni l&#x26;#39;am&#xE9;lioration de la force de liaison Ag, ni de signalisation kinase Src a expliqu&#xE9; cette activit&#xE9; cor&#xE9;cepteur. En outre, Ag-induite est CD3Deltac d&#xE9;veloppemental att&#xE9;nu&#xE9; par l&#x26;#39;augmentation de la sialylation qui accompagne la maturation des cellules T CD8 et limite l&#x26;#39;activit&#xE9;. Ainsi, les deux ligands faibles et forts induite CD3Deltac dans les thymocytes de pr&#xE9;s&#xE9;lection, mais seulement des ligands forts ont &#xE9;t&#xE9; efficaces dans les cellules T matures. Nous proposons que la participation CD8 dans l&#x26;#39;interaction TCR / pMHC peut physiquement r&#xE9;guler l&#x26;#39;induction CD3Deltac en &#x26;quot;traduisant&#x26;quot; productive rencontre Ag de la TCR au complexe CD3. Ceci sugg&#xE8;re un m&#xE9;canisme par lequel la variation r&#xE9;gul&#xE9;e par le d&#xE9;veloppement des CD8 sialylation peut contribuer &#xE0; la mise au point du d&#xE9;veloppement de la sensibilit&#xE9; des cellules T.

Un r&#xF4;le pour le CD8 dans le d&#xE9;veloppement de Tuning reconnaissance de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne CD3 et changement de conformation

TCR-Engagement von Peptid-MHC Klasse I (pMHC) Liganden induziert eine Konformations&auml;nderungen &Auml;nderung (Deltac) CD3 (CD3Deltac) zu T-Zelle Signalisierung beitr&auml;gt. Wir fanden, dass diese Interaktion zwischen prim&auml;ren Herkunfts-T-Zellen und APC stattfand, die CD8-Coreceptor erforderlich, um CD3Deltac zu erzeugen. Interessanterweise erkl&auml;rt Verbesserung der Bindungsst&auml;rke Ag weder Src Kinase signalisieren diese Coreceptor Aktivit&auml;t. Dar&uuml;ber hinaus wurde Ag-induzierte CD3Deltac entwicklungspolitisch durch den Anstieg des Sialylation abgeschw&auml;cht, die begleitet von T-Zell-Reifung und CD8-Aktivit&auml;t begrenzt. Also, sowohl starke als auch schwache Liganden CD3Deltac in Vorauswahl Thymozyten induziert, sondern nur starke Liganden in Reifen T-Zellen wirksam waren. Wir vorschlagen, dass CD8-Teilnahme der TCR/pMHC-Wechselwirkung CD3Deltac Induktion von &quot;&uuml;bersetzen&quot; produktive Ag Auftreten von TCR zu den CD3-Komplex physisch regulieren kann. Dies deutet auf einen Mechanismus, mit dem die entwicklungspolitisch geregelte Variation in CD8-Sialylation zu der Entwicklungsbiologie Abstimmung des T-Zell-Empfindlichkeit beitragen kann.

Eine Rolle f&uuml;r CD8 in der Entwicklungs-Stimmung der Antigen-Anerkennung und CD3 Konformations&auml;nderungen &auml;ndern.

Impegno di TCR di peptide-MHC di classe I ligandi (pMHC) induce un cambiamento conformazionale (Deltac) CD3 (CD3Deltac) che contribuisce alla segnalazione delle cellule T. Abbiamo trovato che quando questa interazione ha avvenuto fra cellule T lineage primario e APC, il coreceptor CD8 era richiesto per generare CD3Deltac. &Egrave; interessante notare, potenziamento della forza di legame Ag n&eacute; segnalazione chinasi di Src ha spiegato questa attivit&agrave; coreceptor. Inoltre, Ag-induced CD3Deltac inerente allo sviluppo &egrave; stato attenuato da un aumento della sialylation che accompagna la maturazione delle cellule T e limita attivit&agrave; CD8. Cos&igrave;, debole e forte ligandi indotta CD3Deltac in timociti preselezione, ma solo forte ligandi erano efficaci in cellule T mature. Proponiamo che CD8 partecipazione nell&#39;interazione TCR/pMHC fisicamente possibile regolare CD3Deltac induzione di &quot;tradurre&quot; Ag produttivo incontro da TCR per il complesso CD3. Ci&ograve; suggerisce un meccanismo mediante il quale la variazione inerente allo sviluppo regolamentata in CD8 sialylation possa contribuire alla sintonizzazione sullo sviluppo della sensibilit&agrave; delle cellule T.

Un ruolo per CD8 nella sintonizzazione dello sviluppo del riconoscimento dell&#39;antigene e CD3 cambio conformazionale.

&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;-MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;I&#xFF08;pMHC&#xFF09;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;TCR&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;CD3&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#xFF08;Deltac&#xFF09;&#xFF08;CD3Deltac&#xFF09;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x4E00;&#x6B21;T&#x7CFB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;APC&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306F;&#x3001;CD8&#x30B3;&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;CD3Deltac&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;Ag&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F37;&#x3055;&#x3082;Src&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x62E1;&#x5F35;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;AG-&#x8A98;&#x5C0E;CD3Deltac&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;CD8&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x767A;&#x9054;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x5F31;&#x3044;&#x3068;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x4E8B;&#x524D;&#x306E;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;CD3Deltac&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x719F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6709;&#x52B9;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;TCR / pMHC&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CD8&#x53C2;&#x52A0;&#x306F;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B;TCR&#x304B;&#x3089;CD3&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;Ag&#x306E;&#x51FA;&#x4F1A;&#x3044;&#x3092; &#x26;quot;&#x7FFB;&#x8A33;&#x26;quot;&#x3067;CD3Deltac&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;CD8&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;1&#x3064;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x6297;&#x539F;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3068;CD3&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;CD8&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

TCR &#xD3EC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;-MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; I (pMHC) ligands &#xC720;&#xB3C4; CD3 &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654; (Deltac) (CD3Deltac)&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC0AC;&#xC774; &#xAE30;&#xBCF8; T &#xD608;&#xD1B5; &#xC140; &#xBC0F; APCs &#xD588;&#xB2E4;, CD8 coreceptor&#xB294; cd3deltac&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Ag &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC15;&#xB3C4; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA70; Src kinase &#xC2E0;&#xD638;&#xC774; coreceptor &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Ag &#xC720;&#xB3C4; CD3Deltac sialylation T &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC219; &#xD568;&#xAED8; &#xD558; &#xACE0; CD8 &#xD65C;&#xB3D9; &#xC81C;&#xD55C;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC1E0; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC57D;&#xD558;&#xACE0; &#xAC15;&#xD55C; ligands &#xBBF8;&#xB9AC; thymocytes&#xC5D0;&#xC11C; cd3deltac&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xAC15;&#xD55C; ligands &#xD588;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; TCR/pMHC &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; CD8 &#xCC38;&#xC5EC; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &quot;&#xBC88;&#xC5ED;&quot; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC801;&#xC778; Ag&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; CD3 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; TCR&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; cd3deltac&#xB97C; &#xC870;&#xC808;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; CD8 sialylation &#xBC1C;&#xB2EC; &#xADDC;&#xC81C; &#xBCC0;&#xD654; T &#xC140; &#xAC10;&#xB3C4; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD29C;&#xB2DD;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD56D; &#xC6D0; &#xC778;&#xC2DD; &#xBC0F; CD3 &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD29C;&#xB2DD;&#xC5D0; cd8&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

El compromiso por el p&#xE9;ptido TCR-MHC de clase I (pMHC) ligandos induce un cambio conformacional (Deltac) en el CD3 (CD3Deltac) que contribuye a la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas T. Hemos encontrado que cuando esta interacci&#xF3;n se llev&#xF3; a cabo entre las principales c&#xE9;lulas T linaje y veh&#xED;culos blindados, el correceptor CD8 se requiere para generar CD3Deltac. Curiosamente, ni aumento de la fuerza vinculante, ni Ag quinasa Src de se&#xF1;alizaci&#xF3;n se explica esta actividad co-receptor. Adem&#xE1;s, Ag inducida CD3Deltac fue el desarrollo atenuada por el aumento de sialilaci&#xF3;n que acompa&#xF1;a a la maduraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T CD8 y limita la actividad. As&#xED;, ambos ligandos d&#xE9;biles y fuertes inducida CD3Deltac en timocitos de preselecci&#xF3;n, pero s&#xF3;lo ligandos fuertes fueron eficaces en c&#xE9;lulas T maduras. Proponemos que CD8 participaci&#xF3;n en la interacci&#xF3;n TCR / pMHC f&#xED;sica puede regular la inducci&#xF3;n CD3Deltac por &#x26;quot;traducir&#x26;quot; productivo encuentro Ag del TCR por el complejo CD3. Esto sugiere un mecanismo por el cual la variaci&#xF3;n desarrollo regulado en CD8 sialilaci&#xF3;n puede contribuir a la sintonizaci&#xF3;n de desarrollo de la sensibilidad de las c&#xE9;lulas T.

Un papel para CD8 en la optimizaci&#xF3;n del desarrollo de reconocimiento de ant&#xED;genos y CD3 cambio conformacional

(&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;) &#x540E;&#x8F74;&#x627F;&#x7279;&#x5B9A;&#x75C5;&#x539F;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x5E7C;&#x7A1A;&#x7684; CD8 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x77ED;&#x6682;&#x6548;&#x5E94;&#x548C;&#x957F;&#x5BFF;&#x547D;&#x7684;&#x8BB0;&#x5FC6; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6DF7;&#x5408;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x6765;&#x8C03;&#x89E3;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;TCR &#x5982;&#x4F55;&#x89C4;&#x7BA1;&#x8BB0;&#x5FC6; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E00;&#x76F4;&#x96BE;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x73B0;&#x3002;&#x5229;&#x7528;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; TCR &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; TCR &beta; &#x8DE8;&#x819C;&#x57DF; (betaTMD) &#x4E2D;&#x7684;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x635F;&#x5BB3; CD8 + &#x8BB0;&#x5FC6; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E3B;&#x6548;&#x5E94; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x504F;&#x5149; TCR &#x5E76;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5728;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x6838;&#x56E0;&#x5B50;&#x6D3B;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6548;&#x5E94;&#x548C;&#x5185;&#x5B58;&#x72B6;&#x6001;&#x7684; CD8 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x53EF;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x7531; TCR &#x5DEE;&#x5206;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x786E;&#x5B9A; CD8 + &#x5185;&#x5B58;&#x4E2D;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

Following infection, naÃ¯ve CD8+ T cells bearing pathogen-specific T cell receptors (TCRs) differentiate into a mixed population of short-lived effector and long-lived memory T cells to mediate an adaptive immune response. How the TCR regulates memory T cell development has remained elusive. Using a mutant TCR transgenic model, we found that point mutations in the TCR beta transmembrane domain (betaTMD) impair the development and function of CD8+ memory T cells without affecting primary effector T cell responses. Mutant T cells are deficient in polarizing the TCR and in organizing the nuclear factor kappaB signal at the immunological synapse. Thus, effector and memory states of CD8+ T cells are separable fates, determined by differential TCR signaling.

Different T cell receptor signals determine CD8+ memory versus effector development.

Apr&#xE8;s l&#x26;#39;infection, na&#xEF;ve cellules T CD8 + portant pathog&#xE8;nes sp&#xE9;cifiques r&#xE9;cepteurs des cellules T (TCR) se diff&#xE9;rencient en une population mixte de courte dur&#xE9;e de vie effectrices et longue dur&#xE9;e de vie des cellules T m&#xE9;moires &#xE0; la m&#xE9;diation une r&#xE9;ponse immunitaire adaptative. Comment le TCR r&#xE9;gule le d&#xE9;veloppement des cellules T m&#xE9;moire est rest&#xE9; inaccessible. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;un mutant TCR transg&#xE9;nique mod&#xE8;le, nous avons constat&#xE9; que des mutations ponctuelles dans le domaine transmembranaire TCR beta (betaTMD) nuire &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;panouissement et la fonction des cellules CD8 + T &#xE0; m&#xE9;moire sans affecter primaires r&#xE9;ponses des lymphocytes T effecteurs. Mutant cellules T sont d&#xE9;ficientes en polarisant le TCR et &#xE0; l&#x26;#39;organisation du signal de facteur nucl&#xE9;aire kappa B &#xE0; la synapse immunologique. Ainsi, les Etats m&#xE9;moires et effectrices de cellules T CD8 + sont destins s&#xE9;parables, d&#xE9;termin&#xE9;s par la diff&#xE9;rence de signalisation du TCR.

Diff&#xE9;rents signaux r&#xE9;cepteur de cellules T CD8 + M&#xE9;moire D&#xE9;terminer Versus d&#xE9;veloppement Effector

Nach Infektion, naiven CD8 + T-Zellen tragen Erreger-spezifische T-ZELLREZEPTOREN unterscheiden (TCRs) in eine gemischte Bev&ouml;lkerung von kurzlebiger Effektor und langlebigen T Ged&auml;chtniszellen, eine adaptive Immunantwort zu vermitteln. Wie TCR Speicher T-Zell-Entwicklung reguliert ist schwer fassbaren geblieben. Verwenden ein mutant transgene TCR-Modell, fanden wir, dass Punktmutationen in TCR-Beta-Transmembranegebiet (BetaTMD) die Entwicklung und Funktion von CD8 + T Speicherzellen beeintr&auml;chtigen, ohne prim&auml;re Effektor-T-Zell-Antworten. Mutant T-Zellen sind mangelhaft in TCR Polfilter und bei der Organisation des nuklearen Faktor KappaB Signals an die immunologische Synapse. Effektor und Speicherzust&auml;nde von CD8 + T-Zellen sind daher trennbar Schicksale, bestimmt durch das differenzielle TCR signalisieren.

Verschiedene T-Zell-Rezeptor-Signale bestimmen CD8 + Speicher im Vergleich zu Effektor-Entwicklung.

Seguito di infezione, na&iuml;ve cellule T CD8 + recanti i recettori delle cellule T da organismi patogeni specifici (TCRs) differenziarsi in una popolazione mista di breve durata effettrici e longeva memoria T cellule per mediare una risposta immunitaria adattativa. Come il TCR regola lo sviluppo delle cellule T memoria &egrave; rimasta elusiva. Utilizzando un modello transgenico di TCR mutante, abbiamo trovato che mutazioni puntiformi del dominio transmembrana di TCR beta (betaTMD) compromettere lo sviluppo e la funzione delle cellule CD8 + memoria T senza influire sulle risposte delle cellule T effettrici primarie. Mutante T cellule sono carenti nella polarizzazione del TCR e nell&#39;organizzazione del fattore nucleare kappaB segnale presso la sinapsi immunologica. Cos&igrave;, effector e Stati di memoria di cellule T CD8 + sono separabili fates, determinato dal TCR differential signaling.

Diverso T cell receptor segnali determinano CD8 + memoria versus sviluppo effettrici.

&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3001;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;CD8 +&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x77ED;&#x547D;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x9577;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x30FC;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x96C6;&#x56E3;&#x3078;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3002; TCR&#x304C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x30FC;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x63A8;&#x79FB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;TCR&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;TCR&#x3B2;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;betaTMD&#xFF09;&#x306E;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;CD8 +&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x30FC;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x7570;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;TCR&#x306E;&#x504F;&#x5149;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6838;&#x56E0;&#x5B50;&#x3BA;B&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x6B20;&#x640D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;CD8 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306F;&#x3001;&#x5DEE;&#x52D5;TCR&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5206;&#x96E2;&#x904B;&#x547D;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x5225;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x5BFE;CD8 +&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;

&#xB2E4;&#xC74C; &#xAC10;&#xC5FC;, &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xAD00;&#xB828; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCRs) &#xC801;&#xC751; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xB2E8;&#xAE30; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC640; &#xC218;&#xBA85;&#xC774; &#xAE34; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD63C;&#xD569; &#xB41C; &#xC778;&#xAD6C;&#xB85C; &#xBD84;&#xD654;. TCR &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; T &#xC140; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC740; &#xC560;&#xB9E4; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; TCR &#xBCA0;&#xD0C0; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (betaTMD)&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; CD8 + &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC774;&#xD399;&#xD130; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74; &#xC11C; &#xC190;&#xC0C1; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; TCR &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; TCR &#xD3B8;&#xAD11; &#xBC0F; &#xBA74;&#xC5ED;&#xD559; &#xB0C5;&#xC5D0; &#xD575; &#xC694;&#xC18C; kappaB &#xC2E0;&#xD638; &#xC870;&#xC9C1; &#xACB0;&#xD54D;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC640; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBD84;&#xB9AC; &#xAC00;&#xB2A5; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744;, &#xCC28;&#xB3D9; TCR &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E4;&#xB978; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; CD8 + effector &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xACB0;&#xC815;.

Despu&#xE9;s de la infecci&#xF3;n, ingenuo c&#xE9;lulas T CD8 + que llevan pat&#xF3;genos espec&#xED;ficos de receptores de c&#xE9;lulas T (TCR) se diferencian en una poblaci&#xF3;n mixta de corta duraci&#xF3;n las c&#xE9;lulas T efectoras y de larga vida de la memoria para mediar una respuesta inmune adaptativa. &#xBF;C&#xF3;mo el TCR regula la memoria desarrollo de c&#xE9;lulas T se ha mantenido esquiva. El uso de un mutante TCR modelo transg&#xE9;nico, se encontr&#xF3; que las mutaciones puntuales en el dominio de transmembrana de TCR beta (betaTMD) poner en peligro el desarrollo y la funci&#xF3;n de los CD8 + c&#xE9;lulas T de memoria sin afectar a las respuestas primarias de c&#xE9;lulas T efectoras. Mutant las c&#xE9;lulas T son deficientes en la polarizaci&#xF3;n del TCR y en la organizaci&#xF3;n de la se&#xF1;al de factor de kappaB nuclear en la sinapsis inmunol&#xF3;gica. Por lo tanto, los estados efectoras y de memoria de c&#xE9;lulas T CD8 + son separables destinos, determinadas por la diferencia de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n del TCR.

Diferentes se&#xF1;ales del receptor de c&#xE9;lulas T CD8 de memoria + Determinar frente al desarrollo de Efectos

Multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Coimmunoprecipitation &#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6D41;&#x5F0F; &#xFF08;IP-FCM &#x6216;&quot;&#x98DE; p&quot;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF09; &#x5206;&#x6790;&#x63D0;&#x4F9B;&#x654F;&#x611F;&#x624B;&#x6BB5;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4E2D;&#x7684;&#x672C;&#x673A;/nondenatured &#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;immunoprecipitating &#x6297;&#x4F53;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x8026;&#x5408;&#x5230;&#x5176;&#x4F4E;&#x81EA;&#x4F53;&#x8367;&#x5149;&#x662F;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x4E0E;&#x517C;&#x5BB9;&#x7684;&#x805A;&#x82EF;&#x4E59;&#x70EF;&#x4E73;&#x80F6;&#x73E0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6297;&#x4F53;&#x8026;&#x5408;&#x73E0;&#x7528;&#x4E8E;&#x5411;&#x7279;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D; (&#x67F1;&#x5B50;) &#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3; immunoprecipitate&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5173;&#x8054;&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x63A2;&#x6D4B;&#x4E0E;&#x5171;&#x8F6D;&#x8367;&#x5149;&#x6297;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4F19;&#x4F34;&#x6216;&#x8F85;&#x52A9;&#x5206;&#x6790;&#x7269;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x67F1;&#x5B50;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x3002;&#x91C7;&#x7528;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5141;&#x8BB8;&#x751F;&#x6210;&#x8981;&#x8F6C;&#x6362;&#x6210;&#x73E0;&#x5B50; co-associated &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x4F30;&#x8BA1;&#x6570;&#x5B57;&#x7684;&#x534A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8367;&#x5149;&#x6570;&#x636E;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8868;&#x793A;&#x9C81;&#x68D2;&#x6280;&#x672F;&#x8BC4;&#x4F30;&#x672C;&#x673A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6216;&#x5927;&#x6837;&#x672C;&#x5927;&#x5C0F;&#x3002;

Multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7684;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x6548;&#x679C;&#x3002;

Multiprotein complexes and other protein-protein interactions play important roles in virtually all cellular processes. Analysis of coimmunoprecipitation of protein complexes by flow cytometry (IP-FCM, or "the fly-p" method) provides a sensitive means to measure these interactions in the native/nondenatured state. First, immunoprecipitating antibodies are covalently coupled to polystyrene latex beads whose low autofluorescence is compatible with flow cytometry. These antibody-coupled beads are used to immunoprecipitate a specific protein (primary analyte) present in cell lysates. Finally, the protein complexes associated with the beads are probed with fluorochrome-conjugated antibodies specific for interaction partners, or secondary analytes, that may be associated with the primary analyte. The use of quantitative flow cytometric methodology can allow the semiquantitative fluorescence data generated to be converted into estimated numbers of co-associated molecules on the beads. The method represents a robust technique to assess native protein-protein interactions without requiring genetic engineering or large sample sizes.

Visualization of multiprotein complexes by flow cytometry.

Complexes multiprot&#xE9;iques et autres interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine jouent un r&#xF4;le important dans pratiquement tous les processus cellulaires. L&#x26;#39;analyse de co-immunopr&#xE9;cipitation de complexes prot&#xE9;iques par cytom&#xE9;trie en flux (IP-FCM, ou &#xAB;&#xE0; la vol&#xE9;e p&#x26;quot; m&#xE9;thode) fournit un moyen sensible pour mesurer ces interactions dans l&#x26;#39;&#xE9;tat natif / non d&#xE9;natur&#xE9;. Premi&#xE8;rement, les anticorps sont coupl&#xE9;s de mani&#xE8;re covalente immunopr&#xE9;cipiter &#xE0; des billes de latex de polystyr&#xE8;ne dont la faible autofluorescence est compatible avec la cytom&#xE9;trie de flux. Ces perles d&#x26;#39;anticorps coupl&#xE9;s sont utilis&#xE9;s pour immunopr&#xE9;cipiter une prot&#xE9;ine sp&#xE9;cifique (analyte principal) pr&#xE9;sente dans les lysats cellulaires. Enfin, les complexes de prot&#xE9;ines associ&#xE9;es &#xE0; des perles sont sond&#xE9;s avec un fluorochrome conjugu&#xE9;s d&#x26;#39;anticorps sp&#xE9;cifiques pour les partenaires d&#x26;#39;interaction, ou des analytes secondaires, qui peuvent &#xEA;tre associ&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;analyte principal. L&#x26;#39;utilisation de la m&#xE9;thode d&#x26;#39;&#xE9;coulement cytom&#xE9;trique quantitative peut permettre que les donn&#xE9;es semi-quantitatives de fluorescence g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s &#xE0; convertir en nombre estim&#xE9; de co-associ&#xE9;s mol&#xE9;cules sur les billes. La m&#xE9;thode repr&#xE9;sente une technique robuste pour &#xE9;valuer indig&#xE8;nes interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine sans n&#xE9;cessiter le g&#xE9;nie g&#xE9;n&#xE9;tique ou grandes tailles d&#x26;#39;&#xE9;chantillon.

Visualisation des complexes multiprot&#xE9;iques par cytom&#xE9;trie en flux

Multiprotein komplexe und anderen Protein-Protein-Interaktionen spielen wichtige Rollen in praktisch allen zellul&auml;ren Prozessen. Analyse der Coimmunoprecipitation von Proteinkomplexen durch Durchflusszytometrie (IP-FCM, oder &quot;die Fliege-p&quot; Methode) bietet ein empfindlichen bedeutet, diese Interaktionen in die Native/nondenatured Zustand zu messen. Immunoprecipitating Antik&ouml;rper sind zun&auml;chst kovalent zu Polystyrol Latex Perlen gekoppelt, deren geringe Autofluoreszenz mit Durchflusszytometrie kompatibel ist. Diese Antik&ouml;rper gekoppelten Perlen werden verwendet, um Immunoprecipitate ein bestimmtes Protein (prim&auml;re Analyten) in Zelllysate vorhanden. Schlie&szlig;lich sind die Proteinkomplexe, die Perlen zugeordnet sondiert mit Fluorochrom-konjugierte Antik&ouml;rper, die spezifisch f&uuml;r Interaktion Partner oder sekund&auml;re Analyten, die prim&auml;re Analyten zugeordnet werden k&ouml;nnen. Die Verwendung von quantitativen flie&szlig;en Cytometric Methodik k&ouml;nnen die semiquantitative Fluoreszenz-Daten generiert, um die gesch&auml;tzten Zahlen der co-associated Molek&uuml;le an den Perlen umgewandelt werden. Die Methode stellt eine robuste Technik, um native Protein-Protein Interaktionen zu beurteilen, ohne Gentechnik oder gro&szlig;e Stichprobenumf&auml;nge.

Visualisierung von multiprotein-komplexen durch Durchflusszytometrie.

Altre interazioni proteina-proteina e complessi multiproteici svolgono un ruolo importante in quasi tutti i processi cellulari. Analisi del coimmunoprecipitation dei complessi della proteina in citometria a flusso (FCM-IP, o metodo &quot;fly-p&quot;) forniscono che un sensibile significa misurare queste interazioni dello stato nativo/nondenatured. In primo luogo, gli anticorpi immunoprecipitating sono covalentemente accoppiati al polistirene perline lattice cui basso autofluorescenza &egrave; compatibile con la citometria a flusso. Vengono utilizzate queste perle anticorpo-accoppiato a una proteina specifica (primario dell&#39;analita) presente nei lisati cellulari immunoprecipitate. Infine, i complessi di proteine associati con le perline sono sondati con fluorocromo coniugato con anticorpi specifici per partner di interazione, o analiti secondarie, che possono essere associati con l&#39;analita primario. L&#39;utilizzo della metodologia cytometric di flusso quantitativa pu&ograve; consentire i dati semiquantitativo fluorescenza generati per essere convertiti in numeri stimati di molecole co-associated sulle perle. Il metodo rappresenta una tecnica robusta per valutare le interazioni proteina-proteina nativa senza richiedere l&#39;ingegneria genetica o campioni di grandi dimensioni.

Visualizzazione dei complessi multiproteici tramite flusso cytometry.

&#x591A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5206;&#x6790;&#xFF08;IP-FCM&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F; &#x26;quot;&#x30D5;&#x30E9;&#x30A4;-P&#x26;quot;&#xFF09;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;/ nondenatured&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3001;&#x4F4E;&#x81EA;&#x5BB6;&#x86CD;&#x5149;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3068;&#x306E;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30E9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#xFF08;&#x4E3B;&#x691C;&#x4F53;&#xFF09;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x691C;&#x4F53;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E8C;&#x6B21;&#x691C;&#x4F53;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x6297;&#x4F53;&#x3067;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x534A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x5171;&#x540C;&#x95A2;&#x9023;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6570;&#x5024;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5DE5;&#x5B66;&#x3084;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x5929;&#x7136;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x591A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;

Multiprotein &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cytometry (IP FCM &#xB610;&#xB294; &quot;&#xBE44;&#xD589;-p&quot; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; coimmunoprecipitation&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C;/nondenatured &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB2E8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB;&#xC9F8;, immunoprecipitating &#xD56D; &#xCCB4; &#x70AD; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; autofluorescence cytometry&#xC640; &#xD638;&#xD658; &#xB418;&#xB294; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD2F0; &#xB80C; &#xB77C;&#xD14D;&#xC2A4; &#xAD6C;&#xC2AC; &#xACB0;&#xD569;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xACB0;&#xD569; &#xBE44;&#xC988;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xAE30;&#xBCF8; &#xBD84;&#xC11D;) &#xC140; lysates&#xC5D0; immunoprecipitate&#xC744;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xAD6C;&#xC2AC; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xD638; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108; &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBCF4;&#xC870; analytes&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xD615;&#xAD11; &#xC0C9;&#xC18C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC870;&#xC0AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC591;&#xC801; &#xD750;&#xB984; cytometric &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAD6C;&#xC2AC;&#xC5D0; co-associated &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; &#xBC88;&#xD638;&#xB97C; &#xBCC0;&#xD658;&#xD560; &#xC218; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; semiquantitative &#xD615;&#xAD11; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC29;&#xBC95; &#xC720;&#xC804; &#xACF5;&#xD559; &#xB610;&#xB294; &#xD070; &#xC0D8;&#xD50C; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cytometry&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; multiprotein &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Complejos Multiproteinas y otras interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na juegan un papel importante en casi todos los procesos celulares. An&#xE1;lisis de coimmunoprecipitation de complejos de prote&#xED;nas por citometr&#xED;a de flujo (IP-FCM, o &#x26;quot;al vuelo-p&#x26;quot; m&#xE9;todo) proporciona un m&#xE9;todo sensible para medir estas interacciones en el estado nativo / nondenatured. En primer lugar, los anticuerpos inmunoprecipitaci&#xF3;n se acopla covalentemente a perlas de l&#xE1;tex de poliestireno cuyo bajo autofluorescencia es compatible con citometr&#xED;a de flujo. Estas perlas acoplados anticuerpos se utilizan para inmunoprecipitar una prote&#xED;na espec&#xED;fica (analito primario) presente en lisados &#x200B;&#x200B;celulares. Finalmente, los complejos de prote&#xED;nas asociadas con las perlas se probaron con fluorocromo conjugados de anticuerpos espec&#xED;ficos para los socios de interacci&#xF3;n, o analitos secundarios, que pueden estar asociados con el analito primario. El uso de la metodolog&#xED;a de citometr&#xED;a de flujo cuantitativa puede permitir que los datos semicuantitativos fluorescencia generados para ser convertido en n&#xFA;mero estimado de co-mol&#xE9;culas asociadas a las perlas. El m&#xE9;todo representa una t&#xE9;cnica robusta para evaluar nativas interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na sin necesidad de ingenier&#xED;a gen&#xE9;tica o grandes tama&#xF1;os de muestra.

Visualizaci&#xF3;n de los Complejos Multiproteinas por citometr&#xED;a de flujo

Ag &#x7279;&#x5B9A; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8010;&#x53D7;&#x80BF;&#x7624;&#x9003;&#x9038;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x7624;&#x4E3B;&#x673A; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8010;&#x53D7;&#x7275;&#x8FDE;&#x5230;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;MDSCs&#xFF09;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x73B0;&#x8C61;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5B75;&#x5316;&#x7684; Ag &#x7279;&#x5B9A; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x80BD;&#x52A0;&#x8F7D; MDSCs&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4FE1;&#x53F7; TCR &#x7684;&#x4E0B;&#x6E38;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x963B;&#x6B62;&#x968F;&#x540E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x80BD;&#x52A0;&#x8F7D;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CC; TCR &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; MDSC &#x8BF1;&#x5BFC;&#x8010;&#x53EA;&#x80BD;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684; MDSCs.T &#x7EC6;&#x80DE;&#x54CD;&#x5E94;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6; TCR &#x80BD;&#x4E0D;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;MDSCs Ag &#x7279;&#x5B9A; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x5B75;&#x5316; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x785D;&#x5316;&#x3001; &#x5165;&#x90E8;&#x4F4D;&#x5C40;&#x90E8; MDSC &#x4E0E; T &#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x4F18;&#x5148;&#x53EA; TCR &#x5177;&#x4F53;&#x63D0;&#x51FA; MDSCs&#x3002; MDSCs&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x9633;&#x6027; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x6DF1;&#x523B; nonresponsiveness &#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x80BD;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x80BD;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x8D1F; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x5E38;&#x56DE;&#x5E94;&#x90A3;&#x523A;&#x6FC0;&#x800C;&#x3002;MDSCs &#x9020;&#x6210; TCR &#x548C; CD3zeta &#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7834;&#x574F;&#x5BF9; T &#x7EC6;&#x80DE; TCR &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7279;&#x5B9A; Ag &#x7684; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8010;&#x53D7;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x65B0;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8010;&#x53D7;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Ag-specific T cell tolerance plays a critical role in tumor escape. Recent studies implicated myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) in the induction of CD8(+) T cell tolerance in tumor-bearing hosts. However, the mechanism of this phenomenon remained unclear. We have found that incubation of Ag-specific CD8(+) T cells, with peptide-loaded MDSCs, did not induce signaling downstream of TCR. However, it prevented subsequent signaling from peptide-loaded dendritic cells. Using double TCR transgenic CD8(+) T cells, we have demonstrated that MDSC induced tolerance to only the peptide, which was presented by MDSCs. T cell response to the peptide specific to the other TCR was not affected. Incubation of MDSCs with Ag-specific CD8(+) T cells caused nitration of the molecules on the surface of CD8(+) T cells, localized to the site of physical interaction between MDSC and T cells, which involves preferentially only TCR specific for the peptide presented by MDSCs. Postincubation with MDSCs, only nitrotyrosine-positive CD8(+) T cells demonstrated profound nonresponsiveness to the specific peptide, whereas nitrotyrosine-negative CD8(+) T cells responded normally to that stimulation. MDSCs caused dissociation between TCR and CD3zeta molecules, disrupting TCR complexes on T cells. Thus, these data describe a novel mechanism of Ag-specific CD8(+) T cell tolerance in cancer.

Mechanism of T cell tolerance induced by myeloid-derived suppressor cells.

Ag-tol&#xE9;rance sp&#xE9;cifique des lymphocytes T joue un r&#xF4;le crucial dans l&#x26;#39;&#xE9;vasion de la tumeur. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes impliqu&#xE9; my&#xE9;lo&#xEF;de des cellules d&#xE9;riv&#xE9;es de suppresseurs (MDSC) dans l&#x26;#39;induction de lymphocytes CD8 (+) la tol&#xE9;rance des cellules T dans la tumeur portant h&#xF4;tes. Cependant, le m&#xE9;canisme de ce ph&#xE9;nom&#xE8;ne demeure incertain. Nous avons trouv&#xE9; que l&#x26;#39;incubation de l&#x26;#39;Ag-CD8 sp&#xE9;cifiques (+) des cellules T, avec le peptide-charg&#xE9;s MDSC, n&#x26;#39;a pas induit de signalisation en aval du TCR. Toutefois, il a emp&#xEA;ch&#xE9; de signalisation suivantes &#xE0; partir des cellules dendritiques charg&#xE9;es de peptides. En utilisant le double CD8 TCR transg&#xE9;nique (+) des cellules T, nous avons d&#xE9;montr&#xE9; que MDSC tol&#xE9;rance induite &#xE0; la seule peptide, qui a &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;sent&#xE9; par MDSC. R&#xE9;ponse des lymphocytes T &#xE0; l&#x26;#39;peptide sp&#xE9;cifique &#xE0; l&#x26;#39;autre TCR n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; affect&#xE9;e. Incubation de MDSC avec Ag-CD8 (+) des cellules T caus&#xE9; nitration des mol&#xE9;cules sur la surface de cellules CD8 (+) des cellules T, localis&#xE9;e au site d&#x26;#39;interaction physique entre MDSC et les cellules T, qui comporte de pr&#xE9;f&#xE9;rence seulement TCR sp&#xE9;cifique pour l&#x26;#39; peptidique pr&#xE9;sent&#xE9; par MDSC. Postincubation avec MDSC, que nitrotyrosine positif CD8 (+) des cellules T ont d&#xE9;montr&#xE9; une absence de r&#xE9;ponse profonde &#xE0; la peptide sp&#xE9;cifique, alors que nitrotyrosine n&#xE9;gatif CD8 (+) des cellules T a r&#xE9;pondu normalement &#xE0; cette stimulation. MDSC caus&#xE9; dissociation entre TCR et les mol&#xE9;cules CD3zeta, perturbant complexes TCR sur les cellules T. Ainsi, ces donn&#xE9;es d&#xE9;crivent un nouveau m&#xE9;canisme d&#x26;#39;Ag-CD8 sp&#xE9;cifiques (+) la tol&#xE9;rance des cellules T dans le cancer.

M&#xE9;canisme de la tol&#xE9;rance des cellules T induite par my&#xE9;lo&#xEF;de d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules suppressives

AG-spezifische T-Zell-Toleranz spielt eine wichtige Rolle im Tumor Escape. J&uuml;ngste Studien verwickelt myeloische abgeleitete Suppressorzellen (MDSCs) in die Induktion von CD8(+) T Zelle Toleranz in Tumor-Lager-Hosts. Der Mechanismus dieses Ph&auml;nomens blieb jedoch unklar. Wir haben festgestellt, dass die Inkubation von Ag-spezifische CD8(+) T-Zellen, mit Peptid-geladen MDSCs, keine Signalisierung induzieren flussabw&auml;rts von TCR. Allerdings verhinderten es, nachfolgende Signalisierung von dendritischen Zellen Peptid-geladen. Verwenden doppelte TCR transgene CD8(+) T-Zellen, haben wir bewiesen, dass MDSC induzierte Toleranz gegen&uuml;ber nur das Peptid, das von MDSCs. T vorgestellt wurde, die Reaktion der Zelle auf das Peptid spezifisch f&uuml;r andere TCR nicht betroffen war. Inkubation von MDSCs mit Ag-spezifische CD8(+) T-Zellen verursacht Nitrierung der Molek&uuml;le auf der Oberfl&auml;che der CD8(+) T-Zellen, lokalisiert an den Standort der physische Interaktion zwischen MDSC und T Zellen, die bevorzugt nur TCR speziell f&uuml;r das Peptid pr&auml;sentiert von MDSCs. Postincubation mit MDSCs, nur Nitrotyrosine-Positive CD8(+) T Zellen nachgewiesene profunde Nonresponsiveness zu den spezifischen Peptid beinhaltet, w&auml;hrend Nitrotyrosine-negativen CD8(+) T-Zellen normalerweise auf diese Stimulation reagiert. MDSCs verursachte Spaltung zwischen TCR und CD3zeta Molek&uuml;le, die Unterbrechung des TCR-komplexe auf T-Zellen. Diese Daten beschreiben daher einen neuen Mechanismus der Ag-spezifische CD8(+) T Zelle Toleranz bei Krebs.

Mechanismus der T-Zell-Toleranz von Suppressorzellen myeloide abgeleitete induziert.

Cellule T AG-specifica tolleranza svolge un ruolo critico nella fuga di tumore. Studi recenti implicati cellule mieloidi derivato soppressore (MDSCs) nell&#39;induzione di tolleranza delle cellule T cellule nel tumore-cuscinetto ospita. Tuttavia, il meccanismo di questo fenomeno &egrave; rimasto poco chiaro. Abbiamo trovato che incubazione delle cellule specifiche cellule T, con caricamento del peptide MDSCs, non ha indotto di segnalazione a valle del TCR. Tuttavia, ha impedito la successiva segnalazione da cellule dendritiche caricate del peptide. Usando doppie TCR transgeniche cellule T cellule, abbiamo dimostrato che MDSC indotta tolleranza a solo del peptide, che &egrave; stato presentato da MDSCs. T risposta cellulare per il peptide specifico per altri TCR non &egrave; stata influenzata. Incubazione di MDSCs con cellule specifiche cellule T causato nitrazione delle molecole sulla superficie delle cellule T cellule, localizzate al sito di interazione fisica tra MDSC e T cellule, che coinvolge preferenzialmente solo il TCR specifico per il peptide presentato da MDSCs. Postincubation con MDSCs, solo positivi nitrotyrosine cellule T cellule ha dimostrato profonda nonresponsiveness per il peptide specifico, mentre nitrotyrosine negativo cellule T cellule normalmente risposero a tale stimolazione. MDSCs ha causato la dissociazione tra molecole TCR e CD3zeta, perturbano complessi TCR sulle cellule T. Cos&igrave;, questi dati descrivono un nuovo meccanismo di tolleranza delle cellule specifiche cellule T in cancro.

Meccanismo di tolleranza delle cellule T indotta dalle cellule mieloidi derivato soppressore.

AG-&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x30A8;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CD8&#xFF08;+&#xFF09;&#x62C5;&#x764C;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7531;&#x6765;&#x6291;&#x5236;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;MDSCs&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#xB7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;MDSCs&#x3068;&#x9280;&#x7279;&#x7570;&#x7684;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;TCR&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB;TCR&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;MDSCs&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x305D;&#x306E;MDSC&#x8A98;&#x5C0E;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;TCR&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; CD8&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;Ag&#x7279;&#x7570;&#x7684;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x539F;&#x56E0;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x5316;&#xFF08;+&#xFF09;&#x3068;MDSCs&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;TCR&#x304C;&#x542B;&#x307E;MDSC&#x3068;T&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3078;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3001; MDSCs&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3002; &#xFF08;+&#xFF09;CD8&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x9670;&#x6027;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;MDSCs&#x306E;Postincubation&#x3001;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x967D;&#x6027;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A;&#x975E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; MDSCs&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x306E;TCR&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3001;TCR&#x3068;CD3zeta&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x306E;Ag&#x7279;&#x7570;&#x7684;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7531;&#x6765;&#x6291;&#x5236;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;

Ag &#xAD00;&#xB828; T &#xC140; &#xACF5;&#xCC28; &#xC885;&#xC591; &#xD0C8;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; CD8(+) T &#xC140; &#xAD00;&#xC6A9; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC555; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC140; (MDSCs) &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xD604;&#xC0C1;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xB85C;&#xB4DC; Mdscs&#xC640; Ag &#xAD00;&#xB828; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xC158; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; TCR&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC774;&#xD6C4;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xB85C;&#xB4DC; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354;&#xBE14; TCR &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; MDSC&#xB9CC; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; MDSCs. T &#xC140; &#xC751;&#xB2F5; &#xB2E4;&#xB978; TCR&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB410;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xB0B4;&#xC131; &#xC720;&#xBC1C;&#xC744; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. Ag &#xAD00;&#xB828; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; Mdscs&#xC758; &#xBD80; &#xD654; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; nitration &#xBC1C;&#xC0DD;, &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9; MDSC T &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC140;, &#xC74C;&#xC774; nitrotyrosine CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xADF8; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; MDSCs. Postincubation MDSCs&#xB9CC; nitrotyrosine &#xC591;&#xC131; CD8(+) T &#xC140; &#xC2DC;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC2EC;&#xC624;&#xD55C; nonresponsiveness &#xD2B9;&#xC815; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xD568;&#xAED8; &#xC81C;&#xC2DC;&#xD55C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; TCR &#xD2B9;&#xC815; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294;. MDSCs T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; TCR &#xB2E8;&#xC9C0; &#xBC29;&#xD574; TCR &#xBC0F; CD3zeta &#xBD84;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC554;&#xC5D0;&#xC11C; Ag &#xAD00;&#xB828; CD8(+) T &#xC140; &#xAD00;&#xC6A9;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5B5;&#xC555; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

Ag-espec&#xED;fica de la tolerancia de las c&#xE9;lulas T juegan un papel cr&#xED;tico en el escape tumoral. Estudios recientes implicados mieloide derivados de las c&#xE9;lulas supresoras (MDSCs) en la inducci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas CD8 (+) la tolerancia de las c&#xE9;lulas T en los portadores de tumores anfitriones. Sin embargo, el mecanismo de este fen&#xF3;meno no est&#xE1; clara. Hemos encontrado que la incubaci&#xF3;n de Ag-espec&#xED;fica CD8 (+) las c&#xE9;lulas T, con el p&#xE9;ptido-cargados MDSCs, no indujo se&#xF1;alizaci&#xF3;n corriente abajo de TCR. Sin embargo, se impide la se&#xF1;alizaci&#xF3;n posteriores a partir de c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas p&#xE9;ptido-cargados. Uso de doble CD8 TCR transg&#xE9;nicos (+) las c&#xE9;lulas T, se ha demostrado que la tolerancia inducida por MDSC que s&#xF3;lo el p&#xE9;ptido, que fue presentado por MDSCs. Respuesta de c&#xE9;lulas T al p&#xE9;ptido espec&#xED;fico a la otra TCR no fue afectada. La incubaci&#xF3;n de MDSCs con Ag-espec&#xED;fica CD8 (+) las c&#xE9;lulas T causado nitraci&#xF3;n de las mol&#xE9;culas en la superficie de las c&#xE9;lulas CD8 (+) las c&#xE9;lulas T, localizado en el sitio de interacci&#xF3;n f&#xED;sica entre MDSC y las c&#xE9;lulas T, lo que implica preferentemente s&#xF3;lo TCR espec&#xED;fico para el p&#xE9;ptido presentado por MDSCs. Postincubation con MDSCs, s&#xF3;lo nitrotirosina CD8-positivo (+) las c&#xE9;lulas T demuestra la falta de respuesta profunda al p&#xE9;ptido espec&#xED;fico, mientras que nitrotirosina negativo CD8 (+) las c&#xE9;lulas T responde normalmente a la estimulaci&#xF3;n. MDSCs causado la disociaci&#xF3;n entre el TCR y mol&#xE9;culas CD3zeta, alterando complejos TCR en las c&#xE9;lulas T. As&#xED;, estos datos describen un nuevo mecanismo de Ag-espec&#xED;fica CD8 (+) tolerancia de c&#xE9;lulas T en el c&#xE1;ncer.

Mecanismo de la tolerancia de c&#xE9;lulas T inducida por mieloide derivados de las c&#xE9;lulas supresoras

T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5C31;&#x53D7;&#x5230;&#x4E86;&#x4E2D;&#x8001;&#x5E74;&#x4EBA;&#x3002;B7 CD28 &#x5BB6;&#x65CF;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5E94;&#x7B54;&#x8C03;&#x63A7;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x662F;&#x5426; B7-&#x5BB6;&#x65CF;&#x548C; CD28 &#x5BB6;&#x65CF;&#x53D7;&#x4F53;&#x88AB;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x548C; CD4(+) &#x548C; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9752;&#x5E74;&#x548C;&#x8001;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x53EF;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5728;&#x65E7;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x5BF9;&#x540C;&#x6837;&#x8868;&#x793A;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5728; &gt; 85%&#x7684;&#x8001;&#x5929;&#x771F; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE; B7 H1 &#x76F8;&#x6BD4;&#x5728;&#x5E74;&#x8F7B;&#x4EBA;&#x4E2D;&#x7684; 25%&#x3002;&#x8003;&#x8651;&#x5230; B7 H1 &#x6D88;&#x6781;&#x8C03;&#x8282;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; B7 H1 &#x5C06;&#x4E0B;&#x8C03;&#x65E7; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x65E7; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C01;&#x9501;&#x7684; B7 H1 &#x5230;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5E74;&#x8F7B;&#x7684; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x6062;&#x590D;&#x65E7; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;B7 H1 &#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x5C01;&#x9501;&#x6062;&#x590D;&#x5BF9; B7-H1(-) BM 185 &#x589E;&#x5F3A;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x80BF;&#x7624;&#x3001; &#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x53CD;&#x5E94;&#x8FD9;&#x6837;&#x5E7C;&#x9F20;&#x7684;&#x76F8;&#x540C;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x65E7;&#x52A8;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x4E5F;&#x8868;&#x660E;&#x65E7; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x8F83;&#x5E74;&#x8F7B;&#x7684; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE; TCR&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x65E7;&#x7684; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x66F4;&#x5F3A;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x6062;&#x590D;&#x4E86;&#x4E0B; B7 H1 &#x5C01;&#x9501;&#xFF0C;TCR &#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; B7 H1 &#x65E7; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F1A;&#x635F;&#x5BB3;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5C01;&#x9501;&#x7684; B7 H1 &#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#xFF0C;&#x6700;&#x5927;&#x9650;&#x5EA6;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x65E7; CD8 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

B7 H1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5BF9;&#x8001; CD8 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x8D1F;&#x9762;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x8001;&#x5E74;&#x52A8;&#x7269;&#x514D;&#x75AB;&#x5E94;&#x7B54;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

T cell responses are compromised in the elderly. The B7-CD28 family receptors are critical in the regulation of immune responses. We evaluated whether the B7-family and CD28-family receptors were differentially expressed in dendritic cells, macrophages, and CD4(+) and CD8(+) T cells from young and old mice, which could contribute to the immune dysfunction in the old. Although most of the receptors were equally expressed in all cells, >85% of the old naive CD8(+) T cells expressed B7-H1 compared with 25% in the young. Considering that B7-H1 negatively regulates immune responses, we hypothesized that expression of B7-H1 would downregulate the function of old CD8(+) T cells. Old CD8(+) T cells showed reduced ability to proliferate, but blockade of B7-H1 restored the proliferative capacity of old CD8(+) T cells to a level similar to young CD8(+) T cells. In vivo blockade of B7-H1 restored antitumor responses against the B7-H1(-) BM-185-enhanced GFP tumor, such that old animals responded with the same efficiency as young mice. Our data also indicate that old CD8(+) T cells express lower levels of TCR compared with young CD8(+) T cells. However, following antigenic stimulation in the presence of B7-H1 blockade, the levels of TCR expression were restored in old CD8(+) T cells, which correlated with stronger T cell activation. These studies demonstrated that expression of B7-H1 in old CD8(+) T cells impairs the proper activation of these cells and that blockade of B7-H1 could be critical to optimally stimulate a CD8 T cell response in the old.

B7-H1 expression on old CD8+ T cells negatively regulates the activation of immune responses in aged animals.

R&#xE9;ponses des lymphocytes T sont compromises chez les personnes &#xE2;g&#xE9;es. Les r&#xE9;cepteurs de la famille B7-CD28 sont essentiels dans la r&#xE9;gulation des r&#xE9;ponses immunitaires. Nous avons &#xE9;valu&#xE9; si les r&#xE9;cepteurs B7-CD28-famille et famille ont &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;s de fa&#xE7;on diff&#xE9;rentielle dans les cellules dendritiques, les macrophages et lymphocytes CD4 (+) et CD8 (+) des cellules T de souris jeunes et vieux, qui pourraient contribuer &#xE0; la dysfonction immunitaire dans l&#x26;#39;ancien. Bien que la plupart des r&#xE9;cepteurs ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;galement exprim&#xE9;s dans toutes les cellules,&#x26;gt; 85% de la vieille CD8 na&#xEF;fs (+) des cellules T exprim&#xE9; B7-H1, comparativement &#xE0; 25% chez les jeunes. Consid&#xE9;rant que B7-H1 r&#xE9;gule n&#xE9;gativement les r&#xE9;ponses immunitaires, nous avons suppos&#xE9; que l&#x26;#39;expression de B7-H1 serait r&#xE9;guler n&#xE9;gativement la fonction des cellules CD8 ancienne (+) des cellules T. Vieux CD8 (+) des cellules T ont montr&#xE9; une capacit&#xE9; r&#xE9;duite &#xE0; prolif&#xE9;rer, mais le blocus de B7-H1 restaur&#xE9; la capacit&#xE9; de prolif&#xE9;ration des cellules CD8 ancienne (+) des cellules T &#xE0; un niveau similaire &#xE0; jeune CD8 (+) des cellules T. Dans blocus in vivo de B7-H1 r&#xE9;ponses antitumorales restaur&#xE9;es contre la B7-H1 (-) la tumeur GFP BM-185-am&#xE9;lior&#xE9;e, de telle sorte que les animaux &#xE2;g&#xE9;s ont r&#xE9;pondu avec la m&#xEA;me efficacit&#xE9; que les souris jeunes. Nos donn&#xE9;es indiquent &#xE9;galement que les CD8 anciennes (+) des cellules T expriment des niveaux inf&#xE9;rieurs de TCR par rapport avec les jeunes CD8 (+) des cellules T. Cependant, suite &#xE0; une stimulation antig&#xE9;nique dans la pr&#xE9;sence de B7-H1 blocus, les niveaux d&#x26;#39;expression du TCR ont &#xE9;t&#xE9; restaur&#xE9;s dans les anciennes cellules T CD8 (+), qui sont corr&#xE9;l&#xE9;s avec l&#x26;#39;activation des lymphocytes T plus forte. Ces &#xE9;tudes ont d&#xE9;montr&#xE9; que l&#x26;#39;expression de B7-H1 dans CD8 ancienne (+) des cellules T porte atteinte &#xE0; la bonne activation de ces cellules et que le blocage de B7-H1 pourrait &#xEA;tre critique pour stimuler une r&#xE9;ponse optimale des lymphocytes T CD8 dans l&#x26;#39;ancien.

B7-H1 expression sur Old lymphocytes T CD8 + de r&#xE9;gule n&#xE9;gativement l&#x26;#39;activation des r&#xE9;ponses immunitaires chez les animaux &#xE2;g&#xE9;s

T-Zell-Antworten, die bei &auml;lteren Menschen gef&auml;hrdet sind. Die Familien B7-CD28-Rezeptoren sind entscheidend bei der Regulierung der Immunantworten. Wir beurteilen, ob die CD28 und B7-Familie Rezeptoren differentiell zum Ausdruck kamen, dendritische Zellen, Makrophagen und CD4(+) und CD8(+) T-Zellen, junge und alte M&auml;use, die zu den Immun Dysfunktion im alten beitragen k&ouml;nnte. Obwohl die meisten der Rezeptoren gleicherma&szlig;en in allen Zellen, zum Ausdruck kamen &gt; 85 % der alten naiven CD8(+) T Zellen ausgedr&uuml;ckt B7-H1 verglichen mit 25 % in der jungen. Da die B7-H1 negativ Immunantworten regelt, Hypothese wir, dass die Expression von B7-H1 gulieren die Funktion des alten CD8(+) T-Zellen w&uuml;rden. Alte CD8(+) T Zellen zeigte reduzierte F&auml;higkeit zu vermehren, aber Blockade B7-H1 restauriert die proliferative Kapazit&auml;t des alten CD8(+) T-Zellen auf ein Niveau &auml;hnlich dem jungen CD8(+) T-Zellen. In-vivo Blockade B7-H1 wiederhergestellt antitumor Antworten gegen die B7-H1(-) BM-185-enhanced GFP-Tumor, so dass alte Tiere mit der gleichen Effizienz als junge M&auml;use reagierten. Unsere Daten zeigen auch, dass alte CD8(+) T-Zellen niedriger TCR junger CD8(+) T-Zellen gegen&uuml;ber ausdr&uuml;cken. Jedoch folgende Antigen Stimulation in Anwesenheit von B7-H1-Blockade, die Ebenen der TCR Ausdruck wurden restauriert in alten CD8(+) T-Zellen, die mit st&auml;rkeren T-ZELLAKTIVIERUNG korreliert. Diese Studien gezeigt, dass die Expression von B7-H1 in alten CD8(+) T-Zellen beeintr&auml;chtigt die ordnungsgem&auml;&szlig;e Aktivierung dieser Zellen und die Blockade der B7-H1 k&ouml;nnte darauf ankommen, eine CD8-T-Zelle Antwort in den alten optimal zu stimulieren.

B7-H1 Ausdruck auf alten CD8 + T-Zellen regelt sich negativ auf die Aktivierung von Immunantworten bei alten Tieren.

Le risposte delle cellule t sono compromesse nei pazienti anziani. I recettori della famiglia B7-CD28 sono fondamentali nella regolazione della risposta immunitaria. Abbiamo valutato se i recettori della famiglia B7 e CD28-famiglia erano differenzialmente espressi in cellule dendritiche, macrofagi e cellule CD4(+) e cellule T da topi giovani e vecchi, che potrebbero contribuire alla disfunzione immunitaria nel vecchio. Anche se la maggior parte dei recettori sono stati espressi ugualmente in tutte le cellule, &amp;gt; 85% delle cellule cellule T naive vecchie espresso B7-H1 rispetto al 25% nei giovani. Considerando che B7-H1 regola negativamente la risposta immunitaria, abbiamo ipotizzato che l&#39;espressione di B7-H1 sarebbe sottoregola la funzione delle cellule T cellule vecchie. Vecchie cellule T le cellule ha mostrato ridotta capacit&agrave; di proliferare, ma blocco di B7-H1 ripristinato la capacit&agrave; proliferativa delle cellule vecchie di cellule T ad un livello simile alle cellule T cellule giovani. Blocco in vivo di B7-H1 restaurato antitumorale risposte contro il tumore B7-H1(-) BM-185-enhanced GFP, tale che i vecchi animali hanno risposto con la stessa efficienza giovani topi. I nostri dati indicano anche che vecchie cellule T le cellule esprimono livelli inferiori di TCR rispetto ai giovani cellule cellule T. Tuttavia, dopo la stimolazione antigenica in presenza di blocco B7-H1, i livelli di espressione del TCR sono stati ristabiliti in vecchie cellule cellule T, che &egrave; correlata con l&#39;attivazione delle cellule T pi&ugrave; forte. Questi studi hanno dimostrato che l&#39;espressione di B7-H1 in vecchie cellule cellule T altera la corretta attivazione di queste cellule e quel blocco di B7-H1 potrebbe essere fondamentale per stimolare in modo ottimale una risposta delle cellule T CD8 nel vecchio.

B7-H1 espressione sulle cellule T CD8 + vecchie regola negativamente l&#39;attivazione della risposta immunitaria negli animali invecchiati.

T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x9F62;&#x8005;&#x306E;&#x5371;&#x967A;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; B7-CD28&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;B7-family&#x3068;CD28&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x5DEE;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3001;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x3068;CD8&#xFF08;+&#xFF09;&#x53E4;&#x3044;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x82E5;&#x3044;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3068;&#x53E4;&#x3044;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x53E4;&#x3044;&#xFF08;+&#xFF09;CD8&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x26;gt; 85&#xFF05;&#x306F;&#x3001;&#x82E5;&#x3044;25&#xFF05;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;B7-H1&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;B7-H1&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6211;&#x3005;&#x306F;B7-H1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x53E4;&#x3044;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x7ACB;&#x3066;&#x3001;&#x514D;&#x200B;&#x200B;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x53E4;&#x3044;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x5897;&#x6B96;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;B7-H1&#x306E;&#x5C01;&#x9396;&#x306F;&#x3001;&#x82E5;&#x3044;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x53E4;&#x3044;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;B7-H1&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;B7-H1&#x5FA9;&#x5143;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x5C01;&#x9396;&#x3067;BM-185-&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;GFP&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x3001;&#x53E4;&#x3044;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x82E5;&#x3044;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x52B9;&#x7387;&#x3067;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x53E4;&#x3044;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x82E5;&#x3044;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;TCR&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;B7-H1&#x906E;&#x65AD;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;TCR&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x53E4;&#x3044;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5FA9;&#x5143;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x53E4;&#x3044;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;B7-H1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;B7-H1&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5C01;&#x9396;&#x6700;&#x9069;&#x306B;&#x53E4;&#x3044;&#x306E;CD8 T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;CD8 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x306E;B7-H1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x8CA0;&#x306E;&#x9AD8;&#x9F62;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xB178;&#xC778;&#xC5D0; &#xC190;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. B7 CD28 &#xAC00;&#xC871; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. B7 &#xAC00;&#xC871;&#xACFC; CD28-&#xAC00;&#xC871; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;, &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC80A;&#xC740;&#xC774; &#xB178;&#xC778; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; CD4(+) &#xBC0F; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140;&#xC5D0; &#xB611;&#xAC19;&#xC774; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &amp;gt; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; 85% &#xD45C;&#xD604; B7-H1 &#xC80A;&#xC740;&#xC5D0;&#xC11C; 25%&#xC640; &#xBE44;&#xAD50;. &#xC6B0;&#xB9AC; b 7-h 1 &#xC2DD; downregulate &#xC624;&#xB798; &#xB41C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4; &#xAC00;&#xC124; B7-H1 &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xC870;&#xC808; &#xACE0;&#xB824;. &#xC624;&#xB798; &#xB41C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xACA9; &#xC99D;, &#xAC10;&#xC18C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; b 7-h 1&#xC758; &#xBD09;&#xC1C4; &#xC80A;&#xC740; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. B 7-h 1&#xC758; in vivo &#xBD09;&#xC1C4;&#xB294; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC80A;&#xC740; &#xC950;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xACFC; &#xC751;&#xB2F5; antitumor &#xC751;&#xB2F5; B7-H1(-) BM 185 &#xAC15;&#xD654; &#xB41C; GFP &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC6D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; TCR &#xC80A;&#xC740; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, b 7-h 1 &#xBD09;&#xC1C4;, TCR &#xC2DD; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; antigenic &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAC15;&#xD55C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xB294; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; b 7-h 1&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC190;&#xC0C1; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xADF8; &#xBD09;&#xC1C4; b 7-h 1&#xC758; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; CD8 T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC624;&#xB798; &#xB41C; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; b 7-h 1 &#xC2DD; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC138; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC808;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Respuestas de c&#xE9;lulas T se ven comprometidos en los ancianos. Los receptores de la familia B7-CD28 son fundamentales en la regulaci&#xF3;n de la respuesta inmune. Se evalu&#xF3; si los receptores de la familia B7-CD28, y la familia fueron expresadas diferencialmente en las c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas, los macr&#xF3;fagos y las c&#xE9;lulas CD4 (+) y CD8 (+) las c&#xE9;lulas T de ratones j&#xF3;venes y viejos, que podr&#xED;an contribuir a la disfunci&#xF3;n inmune en los ancianos. Aunque la mayor&#xED;a de los receptores se expresaron igualmente en todas las c&#xE9;lulas,&#x26;gt; 85% de la antigua CD8 ingenuo (+) las c&#xE9;lulas T expresado B7-H1 en comparaci&#xF3;n con 25% en los j&#xF3;venes. Teniendo en cuenta que la l&#xED;nea B7-H1 regula negativamente la respuesta inmune, la hip&#xF3;tesis de que la expresi&#xF3;n de B7-H1 que regula negativamente la funci&#xF3;n de la edad CD8 (+) las c&#xE9;lulas T. Antiguo CD8 (+) las c&#xE9;lulas T mostraron disminuci&#xF3;n de la capacidad de proliferar, pero el bloqueo de la l&#xED;nea B7-H1 restaurado la capacidad proliferativa de edad CD8 (+) las c&#xE9;lulas T a un nivel similar a los j&#xF3;venes CD8 (+) las c&#xE9;lulas T. En vivo el bloqueo de las respuestas H1-B7 antitumorales restaurados contra la B7-H1 (-) BM-185-mejorada del tumor GFP, de tal manera que los animales viejos respondieron con la misma eficacia que los ratones j&#xF3;venes. Nuestros datos tambi&#xE9;n indican que los antiguos CD8 (+) las c&#xE9;lulas T expresan niveles m&#xE1;s bajos de TCR en comparaci&#xF3;n con el joven CD8 (+) las c&#xE9;lulas T. Sin embargo, despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n antig&#xE9;nica en presencia de bloqueo B7-H1, los niveles de expresi&#xF3;n de TCR fueron restauradas en viejos CD8 (+) las c&#xE9;lulas T, que se correlacionaban con fuerte activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T. Estos estudios demostraron que la expresi&#xF3;n de B7-H1 en el viejo CD8 (+) las c&#xE9;lulas T perjudica la correcta activaci&#xF3;n de estas c&#xE9;lulas y que el bloqueo de la l&#xED;nea B7-H1 podr&#xED;a ser crucial para estimular de manera &#xF3;ptima una respuesta de c&#xE9;lulas T CD8 en el viejo.

B7-H1 de expresi&#xF3;n del Antiguo linfocitos T CD8 + regula negativamente la activaci&#xF3;n de la respuesta inmune en animales de edad avanzada

CD3&epsilon; &#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5C3E;&#x5305;&#x542B;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217; &#xFF08;PRS&#xFF09; TCR CD3 &#x8868;&#x8FBE;&#x53CA;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x51CF;&#x8D2B;&#x6218;&#x7565;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x6E38;&#x79BB;&#x9002;&#x914D;&#x5668; Nck SH3.1 &#x57DF;&#xFF0C;&#x51CF;&#x8D2B;&#x6218;&#x7565;&#x662F;&#x4E00;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E; Nck &#x7ED1;&#x5B9A;&#x8FD8;&#x662F;&#x76F8;&#x53CD;&#x8868;&#x793A;&#x901A;&#x8FC7; TCR CD3 &#x8BA2;&#x5A5A; (CD3&Delta;c) &#x65F6;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x516C;&#x5F00;&#x7684;&#x795E;&#x79D8;&#x56FE;&#x6848;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5C1A;&#x672A;&#x89E3;&#x51B3;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x7684;&#x987A;&#x5F0F; CD3&epsilon; &#x57FA;&#x672C;&#x5BCC;&#x542B;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x62C9;&#x4F38; &#xFF08;BRS&#xFF09;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD; PRS &#x8F85;&#x52A9;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x65B0;&#x9C9C;&#x6536;&#x83B7;&#x521D;&#x7EA7;&#x80F8;&#x817A;&#x8868;&#x793A;&#x4F4E;&#x8981;&#x9002;&#x5EA6;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; Nck &#x8BBF;&#x95EE;&#x51CF;&#x8D2B;&#x6218;&#x7565; &#xFF08;&quot;&#x6253;&#x5F00;-CD3&quot;&#xFF09;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5927;&#x591A;&#x6570; TCR CD3 &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x8FDB;&#x5165; Nck (&quot;&#x5173;&#x95ED;-CD3&quot;&#xFF09;&#x3002;Ag &#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6253;&#x5F00; CD3&#xFF0C;&#x4F1A;&#x8BA1;&#x4ECE; MHC(+) &#x5C0F;&#x9F20;&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x4E00;&#x534A;&#x3002;&#x989D;&#x5916;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E0E;&#x6297; CD3 Abs &#x6216;&#x80BD; MHC &#x914D;&#x4F53;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63D0;&#x5347;&#x5F00;&#x653E; CD3 &#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x5176;&#x4E2D;&#x6297;&#x539F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x6700;&#x5927;&#x7684; PRS &#x66B4;&#x9732;&#x6A21;&#x578B;&#x4E4B;&#x4E0A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x88C5;&#x7532;&#x8FD0;&#x5175;&#x8F66;&#x6253;&#x5F00; CD3 &#x6784;&#x8C61;&#x5BB6;&#x5BB6;&#x6237;&#x6237;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x5360;&#x7528;&#x65F6;&#x95F4;&#x6807;&#x8BB0;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8058;&#x7528;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;CD3&epsilon; BRS-&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#x4E92;&#x52A8;&#x53D1;&#x6325;&#x4EFB;&#x4F55;&#x4F5C;&#x7528;&#x8981;&#x4E48;&#x901A;&#x8FC7;&#x521D;&#x59CB;&#x5173;&#x95ED; CD3 &#x6784;&#x8C61;&#x6216;&#x611F;&#x5E94;&#x6253;&#x5F00; CD3 Ab &#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6253;&#x5F00; CD3 &#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x88AB;&#x6210;&#x529F;&#x7684;&#x8F83;&#x9AD8;&#x3001; &#x8BF1;&#x5BFC; TCR CD3 &#x8BA2;&#x5A5A;&#x65F6;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA; CD3&Delta;c &#x548C; CD3&epsilon; &#x5411; Nck &#x51CF;&#x8D2B;&#x6218;&#x7565;&#x957F;&#x671F;&#x53EF;&#x8BBF;&#x95EE;&#x6027;&#x7EA7;&#x522B;&#x3002;

&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x5728; CD3&epsilon; &#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x548C;&#x6297;&#x539F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x66DD;&#x5149;&#x3002;

The CD3Îµ cytoplasmic tail contains a conserved proline-rich sequence (PRS) that influences TCR-CD3 expression and signaling. Although the PRS can bind the SH3.1 domain of the cytosolic adapter Nck, whether the PRS is constitutively available for Nck binding or instead represents a cryptic motif that is exposed via conformational change upon TCR-CD3 engagement (CD3Î”c) is currently unresolved. Furthermore, the extent to which a cis-acting CD3Îµ basic amino acid-rich stretch (BRS), with its unique phosphoinositide-binding capability, might impact PRS accessibility is not clear. In this study, we found that freshly harvested primary thymocytes expressed low to moderate basal levels of Nck-accessible PRS ("open-CD3"), although most TCR-CD3 complexes were inaccessible to Nck ("closed-CD3"). Ag presentation in vivo induced open-CD3, accounting for half of the basal level found in thymocytes from MHC(+) mice. Additional stimulation with either anti-CD3 Abs or peptide-MHC ligands further elevated open-CD3 above basal levels, consistent with a model wherein antigenic engagement induces maximum PRS exposure. We also found that the open-CD3 conformation induced by APCs outlasted the time of ligand occupancy, marking receptors that had been engaged. Finally, CD3Îµ BRS-phosphoinositide interactions played no role in either adoption of the initial closed-CD3 conformation or induction of open-CD3 by Ab stimulation. Thus, a basal level of open-CD3 is succeeded by a higher, induced level upon TCR-CD3 engagement, involving CD3Î”c and prolonged accessibility of the CD3Îµ PRS to Nck.

Basal and antigen-induced exposure of the proline-rich sequence in CD3Îµ.

La queue cytoplasmique contient un CD3e conserv&#xE9;e riche en proline s&#xE9;quence (PRS) qui influe sur TCR-CD3 expression et de signalisation. Bien que le PRS peut lier le domaine de l&#x26;#39;SH3.1 Nck adaptateur cytosolique, si le PRS est constitutivement disponible pour Nck contraignant ou repr&#xE9;sente au contraire un motif cryptique qui est expos&#xE9;e via changement conformationnel lors de TCR-CD3 engagement (CD3&#x394;c) est actuellement en suspens. En outre, la mesure dans laquelle un agissant en cis CD3e base d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s riche en stretch (BRS), avec son unique phosphoinositide capable de fixer, pourrait avoir un impact PRS accessibilit&#xE9; n&#x26;#39;est pas clair. Dans cette &#xE9;tude, nous avons constat&#xE9; que fra&#xEE;chement r&#xE9;colt&#xE9;es thymocytes primaires exprim&#xE9; faible &#xE0; mod&#xE9;r&#xE9;e des taux de base de Nck accessible PRS (&#x26;quot;open-CD3&#x26;quot;), bien que la plupart des TCR-CD3 complexes &#xE9;taient inaccessibles aux Nck (&#x26;quot;ferm&#xE9;-CD3&#x26;quot;). Pr&#xE9;sentation Ag in vivo induite ouverte-CD3, ce qui repr&#xE9;sente la moiti&#xE9; du niveau de base dans les thymocytes de CMH (+) chez la souris. Stimulation suppl&#xE9;mentaire avec soit anti-CD3 Abs ou peptide-CMH ligands encore &#xE9;lev&#xE9;es en plein CD3-dessus des niveaux de base, conform&#xE9;ment &#xE0; un engagement antig&#xE9;nique mod&#xE8;le dans lequel induit maximale PRS exposition. Nous avons &#xE9;galement constat&#xE9; que la conformation ouverte-CD3 induit par les APC ont surv&#xE9;cu &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;poque de l&#x26;#39;occupation ligand, le marquage des r&#xE9;cepteurs qui avaient &#xE9;t&#xE9; engag&#xE9;s. Enfin, CD3e BRS-phosphoinositide interactions jou&#xE9; aucun r&#xF4;le dans l&#x26;#39;adoption de la soit ferm&#xE9;e initiale-CD3 conformation ou l&#x26;#39;induction de l&#x26;#39;open-CD3 par la stimulation Ab. Ainsi, un niveau basal de libre-CD3 est remplac&#xE9; par un plus haut, niveau induite sur TCR-CD3 engagement, impliquant l&#x26;#39;accessibilit&#xE9; CD3&#x394;c et prolong&#xE9;e de l&#x26;#39;CD3e SRP Nck.

Exposition basale induite par un antig&#xE8;ne et de la s&#xE9;quence riche en proline dans CD3e

Der CD3&epsilon; zellplasmatische Schwanz enth&auml;lt eine konservierte Prolin-reiche-Sequenz (PRS), die TCR-CD3-Ausdruck und Signalisierung beeinflusst. Obwohl die PRS die SH3.1-Dom&auml;ne des Zytosolische Adapters Nck gebunden werden kann, ob die PRS konstitutiv f&uuml;r die Nck-Bindung verf&uuml;gbar ist oder stattdessen darstellt ist eine kryptische Motiv, das &uuml;ber Konformations&auml;nderungen &Auml;nderung auf TCR-CD3-Engagement (CD3&Delta;c) ausgesetzt ist derzeit ungel&ouml;st. Dar&uuml;ber hinaus ist der Umfang, zu dem eine Cis wirkende CD3&epsilon; grundlegende Aminos&auml;ure-reiche Strecke (BRS), mit seiner einzigartigen Phosphoinositid-Bindung f&auml;hig, PRS Barrierefreiheit auswirken kann, nicht klar. In dieser Studie fanden wir, dass frisch geerntete prim&auml;re Thymozyten gering ausgedr&uuml;ckt m&auml;&szlig;ig Basalebenen des Nck zug&auml;nglichen PRS (&quot;&ouml;ffnen-CD3&quot;), obwohl die meisten TCR-CD3-komplexe Nck (&quot;geschlossen-CD3&quot;) unzug&auml;nglich waren. AG Pr&auml;sentation in-vivo induziert &ouml;ffnen-CD3, die H&auml;lfte der basalen Ebene in Thymozyten MHC(+) M&auml;use gefunden. Zus&auml;tzliche Stimulation mit Anti-CD3-Abs oder Peptid-MHC-Liganden erh&ouml;ht weiter offen-CD3 oben Basalebenen, konsistent mit einem Modell, wobei Antigene Engagement PRS-maximale induziert. Wir fanden auch, dass die &ouml;ffnen-CD3-Konformation induziert durch APCs &uuml;berdauerte die Zeit &uuml;ber die Belegung der Ligand, Kennzeichnung von Rezeptoren, die verwickelt hatte. Schlie&szlig;lich CD3&epsilon; BRS-Phosphoinositid-Interaktionen keine Rolle gespielt in entweder den ersten geschlossen-CD3-Konformation Annahme oder Induktion der &ouml;ffnen-CD3 durch Stimulation Ab. Eine basale Ebene der &ouml;ffnen-CD3 ist, durch eine h&ouml;here, induzierte Stufe auf TCR-CD3-Engagement, mit CD3&Delta;c und verl&auml;ngerte Zug&auml;nglichkeit der CD3&epsilon; PRS um Nck geschafft.

Basale und Antigen-induzierte Exposition der Prolin-reichen Sequenz in CD3&epsilon;.

La coda citoplasmatica CD3&epsilon; contiene una sequenza di ricco di prolina conservata (PRS) che influenza l&#39;espressione del TCR-CD3 e segnalazione. Sebbene il PRS &egrave; possibile associare il dominio SH3.1 dell&#39;adattatore Nck citosolico, la PRS &egrave; costitutivamente disponibili per l&#39;associazione Nck o rappresenta invece un motivo criptico che viene esposto tramite cambiamento conformazionale all&#39;impegno TCR-CD3 (CD3&Delta;c) &egrave; attualmente irrisolto. Inoltre, nella misura in cui un cis-acting CD3&epsilon; base dell&#39;amminoacido ricco tratto (BRS), con la sua capacit&agrave; unica di phosphoinositide-associazione, possa avere un impatto accessibilit&agrave; PRS non &egrave; chiara. In questo studio, abbiamo trovato che appena raccolte primarie timociti espresso Bassi a moderati livelli basali di PRS Nck-accessibile (&quot;open-CD3&quot;), anche se la maggior parte dei complessi TCR-CD3 erano inaccessibili a Nck (&quot;chiuso-CD3&quot;). Presentazione di AG in vivo indotta open-CD3, contabilit&agrave; per la met&agrave; del livello basale trovato in timociti di topi MHC(+). Stimolazione supplementare con anti-CD3 Abs o ligandi del peptide-MHC elevato ulteriormente aperto-CD3 sopra i livelli basali, coerenti con un modello in cui impegno antigenica induce la massima esposizione PRS. Abbiamo anche trovato che la conformazione aperta-CD3 indotta da APC outlasted il tempo della occupazione ligando, i recettori che si erano impegnati di marcatura. Infine, le interazioni CD3&epsilon; BRS-fosfoinositide ha giocato alcun ruolo o adozione di conformazione chiusa-CD3 iniziale o induzione di open-CD3 da stimolazione Ab. Cos&igrave;, un livello basale di open-CD3 &egrave; riuscito da un livello superiore, indotto all&#39;aggancio del TCR-CD3, che coinvolge CD3&Delta;c e prolungato l&#39;accessibilit&agrave; dello SPE CD3&epsilon; a Nck.

Basale e antigene-indotta dell&#39;esposizione della sequenza prolina-ricca in CD3&epsilon;.

CD3&#x3B5;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5C3E;&#x90E8;&#x306B;&#x306F;&#x3001;TCR-CD3&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5BCC;&#x3080;&#x914D;&#x5217;&#xFF08;PRS&#xFF09;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PRS&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;NCK&#x306E;SH3.1&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;PRS&#x306F;NCK&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x516C;&#x958B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x89E3;&#x306A;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3084;TCR-CD3&#x30A8;&#x30F3;&#x30B2;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#xFF08;CD3&#x394;c&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x672A;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30B7;&#x30B9;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;CD3&#x3B5;&#x5869;&#x57FA;&#x6027;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306B;&#x5BCC;&#x3093;&#x3060;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C1;&#xFF08;BRS&#xFF09;&#x3001;&#x72EC;&#x81EA;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B7;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x306F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;PRS&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;TCR-CD3&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x304C;NCK&#xFF08; &#x26;quot;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30BA;-CD3&#x26;quot;&#xFF09;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x53CE;&#x7A6B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x4E3B;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;NCK&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;PRS&#xFF08; &#x26;quot;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;CD3&#x26;quot;&#xFF09;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x4F4E;&#x301C;&#x4E2D;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; in vivo&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;CD3&#x306E;Ag&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;MHC&#xFF08;+&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x57FA;&#x790E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x534A;&#x5206;&#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x57FA;&#x790E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;CD3&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3001;&#x6297;CD3 ABS&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;-MHC&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;PRS&#x9732;&#x51FA;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;APC&#x306F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;CD3&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x5F93;&#x4E8B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x5360;&#x6709;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x9577;&#x6301;&#x3061;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;CD3&#x3B5;BRS-&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x6297;&#x4F53;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x521D;&#x671F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30BA;&#x30C9;&#xB7;CD3&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;CD3&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x63A1;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304F;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;CD3&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;PRS NCK&#x306B;CD3&#x3B5;&#x306E;CD3&#x394;c&#x3068;&#x9577;&#x671F;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B7;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;TCR-CD3&#x306E;&#x5A5A;&#x7D04;&#x6642;&#x306B;&#x9AD8;&#x304F;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CD3&#x3B5;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5BCC;&#x3080;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x3068;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x66B4;&#x9732;

CD3&epsilon; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xAF2C;&#xB9AC;&#xB294; TCR-CD3 &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE69;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; (PRS)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PRS Nck cytosolic &#xC5B4;&#xB311;&#xD130;&#xC758; SH3.1 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;, PRS constitutively Nck &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xB610;&#xB294; &#xB300;&#xC2E0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; TCR CD3 &#xC57D;&#xD63C; (CD3&Delta;c)&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418;&#xB294; &#xC560;&#xB9E4; &#xD55C; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xD604;&#xC7AC; &#xD574;&#xACB0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xB610;&#xD55C;,&#xB294; cis &#xC5F0;&#xAE30; CD3&epsilon; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xCE6D; (BRS)&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; phosphoinositide &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAE30;&#xB2A5; PRS &#xB0B4;&#xAC8C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC904; &#xC815;&#xB3C4; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; TCR CD3 &#xB2E8;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; Nck (&quot;&#xD3D0;&#xC1C4;-CD3&quot;)&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC13; &#xC218;&#xD655;&#xB41C; &#xAE30;&#xBCF8; thymocytes Nck &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; PRS (&quot;&#xC624;&#xD508;-CD3&quot;), &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xB0AE;&#xC740; &#xD45C;&#xD604; &#xAC83; &#xBC1C;&#xACAC;. Vivo&#xC5D0;&#xC11C; Ag &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158; &#xC624;&#xD508;-CD3, thymocytes MHC(+) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC808;&#xBC18;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD68C;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC548;&#xD2F0;-CD3 Abs &#xB610;&#xB294; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;-MHC ligands &#xCD94;&#xAC00; &#xC790;&#xADF9; &#xCD94;&#xAC00; &#xC624;&#xD508;-CD3 &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;, &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; antigenic &#xCC38;&#xC5EC; &#xC720;&#xB3C4; &#xCD5C;&#xB300; PRS &#xB178;&#xCD9C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC77C;&#xCE58; &#xC774;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xC2B9;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; Apcs&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC624;&#xD508; CD3 &#xB098; &#xB780; outlasted &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xC778; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC885;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, CD3&epsilon; BRS-phosphoinositide &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; Ab &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD08;&#xAE30; &#xD3D0;&#xC1C4; CD3 &#xB098; &#xB780;&#xC758; &#xC5B4;&#xB290; &#xCC44;&#xD0DD; &#xB610;&#xB294; &#xC624;&#xD508; CD3 &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC624;&#xD508; CD3 TCR CD3 &#xCC38;&#xC5EC;, &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; CD3&Delta;c &#xBC0F; CD3&epsilon; PRS Nck &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04;&#xB41C; &#xC811;&#xADFC;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB354; &#xB192;&#xC740;, &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC218;&#xC900;&#xBCC4; &#xC131;&#xACF5;.

CD3&epsilon; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xBC0F; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC720;&#xBC1C; &#xB178;&#xCD9C;.

La cola CD3&#x3B5; citoplasma contiene una conservadas prolina-rica secuencia de la Pobreza (ERP) que influye en la expresi&#xF3;n de TCR-CD3 y se&#xF1;alizaci&#xF3;n. A pesar de la ERP se puede unir al dominio de la SH3.1 Nck adaptador citos&#xF3;lica, si el ERP es constitutivamente disponible para Nck vinculante o m&#xE1;s bien representa un motivo secreto que se expone a trav&#xE9;s de cambios conformacionales en el compromiso TCR-CD3 (CD3&#x394;c) se encuentra actualmente sin resolver. Adem&#xE1;s, el grado en que una cis-actuando CD3&#x3B5; amino b&#xE1;sico rico en &#xE1;cido tramo (BRS), con su &#xFA;nica fosfoinositida de uni&#xF3;n a la capacidad, podr&#xED;a tener un impacto PRS accesibilidad no est&#xE1; claro. En este estudio, encontramos que reci&#xE9;n cosechadas timocitos primarios expres&#xF3; bajos a moderados niveles basales de Nck accesible ERP (&#x26;quot;open-CD3&#x26;quot;), aunque la mayor&#xED;a de los complejos TCR-CD3 eran inaccesibles para Nck (&#x26;quot;closed-CD3&#x26;quot;). Ag presentaci&#xF3;n en vivo inducida abierto-CD3, lo que representa la mitad del nivel basal se encuentra en timocitos de MHC (+) ratones. La estimulaci&#xF3;n adicional, ya sea con anti-CD3 Abs o ligandos p&#xE9;ptido-MHC m&#xE1;s elevados abierto-CD3 por encima de los niveles basales, en consonancia con un modelo de colaboraci&#xF3;n en el que antig&#xE9;nica induce la exposici&#xF3;n m&#xE1;xima de la ELP. Tambi&#xE9;n se encontr&#xF3; que la conformaci&#xF3;n abierta-CD3 inducida por la APC super&#xF3; el tiempo de ocupaci&#xF3;n de ligando, los receptores de marca que hab&#xED;an sido contratados. Por &#xFA;ltimo, CD3&#x3B5; BRS-phosphoinositide interacciones no jug&#xF3; ning&#xFA;n papel, ya sea en la adopci&#xF3;n de la primera cerrada-CD3 o la inducci&#xF3;n de la conformaci&#xF3;n abierta-CD3 por la estimulaci&#xF3;n Ab. Por lo tanto, un nivel basal de abierto-CD3 es sucedido por un nivel superior, inducida por el TCR-CD3 en el compromiso, la participaci&#xF3;n de la accesibilidad CD3&#x394;c y prolongada de la CD3&#x3B5; PRS NCK.

La exposici&#xF3;n basal y la inducida por ant&#xED;geno de la secuencia rica en prolina en CD3&#x3B5;

&#x50CF; BCR &#x548C;&#x5206;&#x6CCC;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;TCR &#x8868;&#x8FBE;&#x4E0D;&#x60F3;&#x4EE5;&#x4E8C;&#x4EF7;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x51FA;&#x73B0;&#x3002;TCR/CD3 &#x7684;&#x5E38;&#x89C4;&#x5355;&#x4EF7;&#x6A21;&#x578B;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x6EB6;&#x5728;&#x6D17;&#x6DA4;&#x5242; digitonin&#xFF0C;&#x65E0;&#x53D1;&#x73B0;&#x4F50;&#x5242;&#x5DF2;&#x53D1;&#x8868;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x652F;&#x6301;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x65B0;&#x7814;&#x7A76; TCR &#x4EF7;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x68C0;&#x67E5; digitonin &#x4E2D;&#x7684;&#x589E;&#x6EB6;&#x540E;&#x4E3B; &alpha;&beta; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x914D;&#x5408;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8DDF;&#x6D41;&#x5F0F;&#x6C89;&#x6DC0;&#xFF0C;&#x610F;&#x5916;&#x53D1;&#x73B0; TCR/CD3 &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x5305;&#x542B;&#x590D;&#x6742;&#x6BCF;&#x4E24;&#x4E2A;&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;&#x3002;&#x6807;&#x51C6;&#x6297; TCR Abs&#x3001; &#x88AB;&#x4E8C;&#x4EF7;&#x672C;&#x8EAB;&#xFF0C;&#x5F80;&#x5F80;&#x8981;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4E8C;&#x4EF7;&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB; &#xFF1B; &#x53CC;&#x4EBA;&#x5165;&#x4F4F;&#x6B64;&#x5C5E;&#x6027;&#x88AB;&#x5C4F;&#x853D;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A; TCR &#x6BCF;&#x4E2D;&#x67D0;&#x4E9B; Ab &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5316;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6216;&#x8BB8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x90E8;&#x5206;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E3A;&#x4EC0;&#x4E48;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x793A;&#x51FA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53CC;&#x4EF7;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x60C5;&#x7ED3;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5B8C;&#x5168;&#x7EC4;&#x88C5;&#x3001; &#x6210;&#x719F; TCR/CD3 &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x4F50;&#x5242;&#x7684;&#x6D41;&#x884C;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5F71;&#x54CD; immunoprecipitated &#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;&#x4E2D;&#x7ED3;&#x5408;&#x6297;&#x539F;&#x80BD;/MHC-Ig &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E8C;&#x4EF7;&#x590D;&#x6742;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; TCR &#x804C;&#x4F4D;&#x8981;&#x6C42;&#x4E0E;&#x6548;&#x679C;&#x6700;&#x4F18;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x914D;&#x4F53;&#x94F6;&#x7279;&#x5B9A; TCR&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x5728;&#x4E3B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;TCR/CD3 &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x53EF;&#x4EE5;&#x627E;&#x5230;&#x90A3;&#x4E9B;&#x7269;&#x7406;&#x4E0A;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x53CC;&#x4EF7;&#x3002;&#x53CC;&#x4EF7; TCR/CD3 &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86;&#x5173;&#x4E8E;&#x6F5C;&#x5728;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x94F6;&#x53EF;&#x80FD;&#x89E6;&#x53D1;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5B83;&#x8FD8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x53CC;&#x4EF7;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x4E00;&#x822C;&#x94F6;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

&#x5206;&#x79BB;&#x4E3B; T &#x7EC6;&#x80DE; TCR/CD3 &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x4E4B;&#x95F4;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4F50;&#x5242;&#x3002;

Unlike BCR and secreted Ig, TCR expression is not thought to occur in a bivalent form. The conventional monovalent model of TCR/CD3 is supported by published studies of complexes solubilized in the detergent digitonin, in which bivalency was not observed. We revisited the issue of TCR valency by examining complexes isolated from primary Î±Î² T cells after solubilization in digitonin. Using immunoprecipitation followed by flow cytometry, we unexpectedly observed TCR/CD3 complexes that contained two TCRs per complex. Standard anti-TCR Abs, being bivalent themselves, tended to bind with double occupancy to bivalent TCRs; this property masked the presence of the second TCR per complex in certain Ab binding assays, which may partially explain why previous data did not reveal these bivalent complexes. We also found that the prevalence of bivalency among fully assembled, mature TCR/CD3 complexes was sufficient to impact the functional performance of immunoprecipitated TCRs in binding antigenic peptide/MHC-Ig fusion proteins. Both TCR positions per bivalent complex required an Ag-specific TCR to effect optimal binding to these soluble ligands. Therefore, we conclude that in primary T cells, TCR/CD3 complexes can be found that are physically and functionally bivalent. The expression of bivalent TCR/CD3 complexes has implications regarding potential mechanisms by which Ag may trigger signaling. It also suggests the possibility that the potential for bivalent expression could represent a general feature of Ag receptors.

Physical and functional bivalency observed among TCR/CD3 complexes isolated from primary T cells.

Contrairement &#xE0; la BCR et s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e Ig, l&#x26;#39;expression du TCR est pas pens&#xE9; &#xE0; se produire dans une forme bivalente. Le mod&#xE8;le classique monovalent de TCR/CD3 est pris en charge par les &#xE9;tudes publi&#xE9;es de complexes solubilis&#xE9;s dans le digitonine d&#xE9;tergent, dans lequel bivalence n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;. Nous avons revisit&#xE9; la question de la valence TCR en examinant complexes isol&#xE9;s &#xE0; partir de cellules T primaires a&#xDF; apr&#xE8;s solubilisation dans la digitonine. Utilisation immunopr&#xE9;cipitation suivie par cytom&#xE9;trie en flux, nous avons observ&#xE9; de fa&#xE7;on inattendue TCR/CD3 complexes qui contenaient deux TCR par complexe. Norme anti-TCR Abs, &#xE9;tant bivalent eux-m&#xEA;mes, ont tendance &#xE0; se lier avec une occupation double pour TCR bivalents; cette propri&#xE9;t&#xE9; masqu&#xE9; la pr&#xE9;sence du second TCR par complexe dans des essais Ab certaines contraignantes, ce qui peut expliquer en partie pourquoi les donn&#xE9;es pr&#xE9;c&#xE9;dentes n&#x26;#39;ont pas r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; de ces complexes bivalents . Nous avons &#xE9;galement constat&#xE9; que la pr&#xE9;valence de bivalence entre enti&#xE8;rement assembl&#xE9;s, matures TCR/CD3 complexes &#xE9;tait suffisante pour influer sur le rendement fonctionnel de TCR immunopr&#xE9;cipit&#xE9;es en peptide de liaison antig&#xE9;nique / prot&#xE9;ines de fusion CMH-Ig. Les deux positions TCR par complexe bivalent a n&#xE9;cessit&#xE9; un TCR Ag sp&#xE9;cifique pour effectuer une liaison optimale &#xE0; ces ligands solubles. Par cons&#xE9;quent, nous concluons que dans des cellules T primaires, TCR/CD3 complexes peuvent &#xEA;tre trouv&#xE9;s qui sont physiquement et fonctionnellement bivalent. L&#x26;#39;expression de bivalents TCR/CD3 complexes a des implications concernant les m&#xE9;canismes potentiels par lesquels Ag peuvent d&#xE9;clencher de signalisation. Il sugg&#xE8;re &#xE9;galement la possibilit&#xE9; que le potentiel d&#x26;#39;expression bivalent pourrait repr&#xE9;senter une caract&#xE9;ristique g&#xE9;n&#xE9;rale des r&#xE9;cepteurs Ag.

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Publication title Cited by 16	2010
Publication title Cited by 14	2019

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Adam G. Schrum

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