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Multicolor Time-lapse Imaging of Transgenic Zebrafish: Visualizing Retinal Stem Cells Activated by Targeted Neuronal Cell Ablation

High-resolution time-lapse imaging of living zebrafish larvae can be utilized to visualize how biological processes unfold (for review see 1). Compound ...

Medical College of Georgia

&#x8513;&#x72B6;&#x5185;&#x5C42; (IPL) &#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E13;&#x95E8;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; sublaminae&#xFF0C;&#x4EE3;&#x8868;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x89C6;&#x89C9;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0E;&#x8E81;&#x90C1;&#x75C7;&#xFF0C;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8FDE;&#x63A5;&#x3002;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x672A;&#x77E5;&#x76EE;&#x6807;&#x6B63;&#x786E;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6; sublaminae &#x5230; neurites &#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x6620;&#x50CF; IPL &#x5F62;&#x6210;&#x548C; sublamination &#x4F53;&#x5185;&#x5E76;&#x95EE;&#x662F;&#x5426;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x4E3B;&#x8981;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x7535;&#x8DEF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x8F93;&#x5165;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728; lak/ath5 &#x7A81;&#x53D8;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x90A3;&#x91CC;&#x4ECE;&#x6765;&#x6CA1;&#x6709;&#x51FA;&#x751F;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; IPL &#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6700;&#x521D;&#x7684;&#x7A81;&#x8D77; ectopically &#x4F4D;&#x4E8E;&#x548C;&#x4E25;&#x91CD;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3002;&#x4E45;&#x800C;&#x4E45;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x65E9;&#x671F;&#x8F74;&#x7A81;&#x6295;&#x5F71;&#x9519;&#x8BEF;&#x7EA0;&#x6B63;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x5173;&#x95ED; sublaminae &#x505A;&#x7A97;&#x4F53;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6DF7;&#x4E71;&#x7684;&#x91CD;&#x70B9;&#x5730;&#x533A;&#x4ECD;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#x90A3;&#x91CC; sublaminae &#x672A;&#x5F62;&#x6210;&#x6B63;&#x786E;&#x3002;&#x4E24;&#x6781;&#x8F74;&#x7A81;&#xFF0C;&#x5230;&#x8FBE;&#x4EE5;&#x540E;&#xFF0C;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x5728;&#x4E2D;&#x65AD;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x5206;&#x5C42;&#x7684;&#x5730;&#x65B9;&#x9664;&#x5916;&#x3002;Lak &#x7A81;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#x8868;&#x660E;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x6700;&#x65E9;&#x7684;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x9884;&#x6D4B;&#x5230; IPL &#x77AC;&#x6001;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F7C;&#x6B64;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x671F;&#x95F4; IPL &#x5F62;&#x6210; &#xFF1B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x51FA;&#x73B0;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210; IPL&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; amacrines &#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5206;&#x5C42;&#x63D0;&#x793A;&#x6307;&#x5BFC; IPL sublamination&#x3002;

&#x77AC;&#x6001;&#x8981;&#x6C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x5927;&#x4F1A;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x56FE;&#x5C42;&#x3002;

The inner plexiform layer (IPL) of the vertebrate retina comprises functionally specialized sublaminae, representing connections between bipolar, amacrine and ganglion cells with distinct visual functions. Developmental mechanisms that target neurites to the correct synaptic sublaminae are largely unknown. Using transgenic zebrafish expressing GFP in subsets of amacrine cells, we imaged IPL formation and sublamination in vivo and asked whether the major postsynaptic cells in this circuit, the ganglion cells, organize the presynaptic inputs. We found that in the lak/ath5 mutant retina, where ganglion cells are never born, formation of the IPL is delayed, with initial neurite outgrowth ectopically located and grossly disorganized. Over time, the majority of early neurite projection errors are corrected, and major ON and OFF sublaminae do form. However, focal regions of disarray persist where sublaminae do not form properly. Bipolar axons, which arrive later, are targeted correctly, except at places where amacrine stratification is disrupted. The lak mutant phenotype reveals that ganglion cells have a transient role organizing the earliest amacrine projections to the IPL. However, it also suggests that amacrine cells interact with each other during IPL formation; these interactions alone appear sufficient to form the IPL. Furthermore, our results suggest that amacrines may guide IPL sublamination by providing stratification cues for other cell types.

Transient requirement for ganglion cells during assembly of retinal synaptic layers.

La couche int&#xE9;rieure plexiforme (IPL) de la r&#xE9;tine comprend vert&#xE9;br&#xE9; sublaminae fonctionnellement sp&#xE9;cialis&#xE9;, soit les connexions entre bipolaire, et amacrines cellules ganglionnaires avec distinctes fonctions visuelles. M&#xE9;canismes de d&#xE9;veloppement qui neurites cibles &#xE0; la sublaminae correcte synaptique sont largement inconnues. En utilisant le poisson z&#xE8;bre transg&#xE9;nique exprimant la GFP dans des sous-ensembles de cellules amacrines, nous imager la formation IPL et sublamination in vivo et a demand&#xE9; si les principales cellules postsynaptiques dans ce circuit, les cellules ganglionnaires, organiser les entr&#xE9;es pr&#xE9;synaptiques. Nous avons constat&#xE9; que dans la r&#xE9;tine lak/ath5 mutant, o&#xF9; les cellules ganglionnaires ne sont jamais n&#xE9;es, la formation de l&#x26;#39;IPL est retard&#xE9;, avec l&#x26;#39;excroissance des neurites initiale ectopique et grossi&#xE8;rement d&#xE9;sorganis&#xE9;. Au fil du temps, la majorit&#xE9; des premi&#xE8;res erreurs de projection neurites sont corrig&#xE9;es, et les principaux ON et OFF sublaminae se forment. Cependant, les r&#xE9;gions focales de d&#xE9;sarroi o&#xF9; persistent sublaminae ne se forme pas correctement. Axones bipolaires, qui arrivent plus tard, sont la cible correctement, sauf aux endroits o&#xF9; la stratification est perturb&#xE9;e amacrines. Le ph&#xE9;notype mutant lak r&#xE9;v&#xE8;le que les cellules ganglionnaires ont un r&#xF4;le transitoire d&#x26;#39;organiser les premi&#xE8;res projections amacrines &#xE0; l&#x26;#39;IPL. Toutefois, il sugg&#xE8;re aussi que les cellules amacrines interagissent les uns avec les autres lors de la formation IPL; ces interactions seuls semblent pas suffisantes pour former de l&#x26;#39;IPL. En outre, nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que amacrines peuvent guider sublamination IPL en fournissant des indices de stratification pour les autres types de cellules.

Exigence transitoire pour les cellules ganglionnaires de la r&#xE9;tine Au cours de l&#x26;#39;Assembl&#xE9;e Couches Synaptic

Transiente Voraussetzung f&#xFC;r Ganglienzellen w&#xE4;hrend der Montage des retinalen synaptischen Schichten.

Lo strato plessiforme interno (IPL) della retina vertebrato comprende sublaminae funzionalmente specializzati, che rappresentano connessioni tra le cellule di amacrine e gangliari bipolari, con distinte funzioni visive. Meccanismi dello sviluppo target neuriti per la corrette sublaminae sinaptiche che sono in gran parte sconosciuti. Utilizzando zebrafish transgenici che esprimono GFP in sottoinsiemi di cellule amacrine, abbiamo ripreso la formazione IPL e sublamination in vivo e ha chiesto se la major postsinaptica cellule in questo circuito, il ganglio, organizzare gli ingressi presinaptico. Abbiamo trovato che nella retina lak/ath5 mutante, dove le cellule gangliari non sono mai nato, formazione di IPL &egrave; ritardato, con iniziale dei neuriti escrescenza ectopically trova e grossolanamente disorganizzato. Nel corso del tempo, la maggior parte dei primi dei neuriti proiezione errori &egrave; corretti e major ON e OFF sublaminae forma. Aree focali di sbando persistono tuttavia, dove sublaminae non forma correttamente. Assoni bipolare, che arrivano pi&ugrave; tardi, sono mirati correttamente, tranne che nei luoghi dove amacrine stratificazione &egrave; perturbato. Il fenotipo mutante lak rivela che le cellule gangliari hanno un ruolo transitorio organizzando le prime proiezioni amacrine di IPL. Tuttavia, suggerisce inoltre che le cellule amacrine interagiscono con a vicenda durante la formazione del IPL; queste interazioni solo appaiono sufficiente per formare l&#39;IPL. Inoltre, i nostri risultati suggeriscono che il amacrines pu&ograve; guidare sublamination IPL fornendo spunti di stratificazione per altri tipi di cellule.

Transitoria requisito per le cellule gangliari durante l&#39;assemblaggio degli strati della retina sinaptiche.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x5185;&#x7DB2;&#x72B6;&#x5C64;&#xFF08;IPL&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x8996;&#x899A;&#x7684;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30DD;&#x30FC;&#x30E9;&#x3001;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;sublaminae&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6B63;&#x3057;&#x3044;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;sublaminae&#x306B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x7A81;&#x8D77;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306A;&#x70B9;&#x304C;&#x591A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3002;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;GFP&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;IPL&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;sublamination&#x3092;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x56DE;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5165;&#x529B;&#x3092;&#x6574;&#x7406;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5C0B;&#x306D;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x751F;&#x307E;&#x308C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;lak/ath5&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x7DB2;&#x819C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;IPL&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3001;&#x8089;&#x773C;&#x7684;&#x306B;&#x7121;&#x79E9;&#x5E8F;&#x306A;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x3068;&#x3001;&#x9045;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x7D4C;&#x904E;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x3001;&#x65E9;&#x671F;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x6295;&#x5F71;&#x8AA4;&#x5DEE;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x304C;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;sublaminae ON&#x3068;OFF&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6DF7;&#x4E71;&#x306E;&#x7126;&#x70B9;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;sublaminae&#x304C;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3069;&#x3053;&#x306B;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x964D;&#x306B;&#x3054;&#x5230;&#x7740;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30DD;&#x30FC;&#x30E9;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x6210;&#x5C64;&#x304C;&#x7834;&#x58CA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x6240;&#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30AA;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;IPL&#x306B;&#x65E9;&#x3044;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3092;&#x6574;&#x7406;&#x3057;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;IPL&#x5F62;&#x6210;&#x6642;&#x306B;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;IPL&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;amacrines&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x6210;&#x5C64;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;IPL sublamination&#x3092;&#x5C0E;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x7DB2;&#x819C;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C64;&#x306E;&#x7D44;&#x7ACB;&#x6642;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904E;&#x6E21;&#x8981;&#x4EF6;

&#xCC99;&#xCD94; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; plexiform &#xACC4;&#xCE35; (IPL) &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xBC14;&#xC774; &#xD3F4;&#xB77C;, amacrine &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD2B9;&#xD654; &#xB41C; sublaminae &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC62C;&#xBC14;&#xB978; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; sublaminae neurites&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;.&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. IPL &#xD615;&#xC131; &#xBA87; &#xAD70;&#xB370; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; zebrafish amacrine &#xC140;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C; GFP&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; sublamination in vivo&#xC640; &#xBB3B;&#xB294; postsynaptic &#xC8FC;&#xC694; &#xC140;,&#xC774; &#xD68C;&#xB85C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC; &#xC5EC;&#xBD80; &#xAD6C;&#xC131; presynaptic &#xC785;&#xB825;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B4;&#xB514; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC801; &#xD0DC;&#xC5B4;&#xB098;&#xB294;, &#xC624;&#xB77D;/ath5 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; IPL&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC740; &#xC9C0;&#xC5F0;, &#xCD08;&#xAE30; neurite &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; ectopically &#xC704;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xC870;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBB34;&#xC9C8;&#xC11C;&#xC640; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC9C0;&#xB0A8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; neurite &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xC158; &#xC624;&#xB958; ON &#xC8FC;&#xC694; &#xBC0F; sublaminae&#xC5D0;&#xC11C; &#xC591;&#xC2DD; &#xD560; &#xC218;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD63C;&#xB780;&#xC758; &#xCD08;&#xC810; &#xC601;&#xC5ED; &#xC720;&#xC9C0; sublaminae &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xC911;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xCC29;, &#xBC14;&#xC774; &#xD3F4;&#xB77C; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; amacrine &#xACC4;&#xCE35; &#xC911;&#xB2E8; &#xB418;&#xB294; &#xACF3;&#xC5D0;&#xB97C; &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0;. &#xC624;&#xB77D; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD615; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; IPL &#xCD08;&#xAE30; amacrine &#xC608;&#xCE21; &#xAD6C;&#xC131; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xC81C;&#xC548; amacrine &#xC140; IPL &#xD615;&#xC131;; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC11C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD63C;&#xC790; IPL&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; amacrines &#xB2E4;&#xB978; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xACC4;&#xCE35; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xC5EC; IPL sublamination&#xC744; &#xAC00;&#xC774;&#xB4DC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; &#xC694;&#xAD6C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xB9BD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;.

La capa plexiforme interna (IPL) de la retina de los vertebrados comprende sublaminae funcionalmente especializada, lo que representa las conexiones entre bipolares, amacrinas y c&#xE9;lulas ganglionares con distintas funciones visuales. Desarrollo de mecanismos que neuritas destino a la correcta sublaminae sin&#xE1;ptica son en gran parte desconocido. Uso de pez cebra transg&#xE9;nico que expresa GFP en los subconjuntos de c&#xE9;lulas amacrinas, que fotografiada formaci&#xF3;n de IPL y sublamination in vivo y le pregunt&#xF3; si las c&#xE9;lulas principales postsin&#xE1;pticos en este circuito, las c&#xE9;lulas ganglionares, organizar las entradas presin&#xE1;pticas. Se encontr&#xF3; que en la retina lak/ath5 mutante, donde las c&#xE9;lulas ganglionares no nacen, la formaci&#xF3;n de la IPL se retrasa, con el crecimiento neur&#xED;tico inicial ect&#xF3;pica encuentra desorganizado y groseramente. Con el tiempo, la mayor&#xED;a de los primeros errores de proyecci&#xF3;n de neuritas se corrigen, y los principales de encendido y apagado sublaminae se forman. Sin embargo, las regiones centrales de la desorganizaci&#xF3;n que persisten sublaminae no se forman correctamente. Axones bipolares, que llegan m&#xE1;s tarde, se dirigen correctamente, excepto en los lugares donde se interrumpe la estratificaci&#xF3;n amacrinas. El fenotipo mutante lak revela que las c&#xE9;lulas ganglionares tienen una funci&#xF3;n transitoria de la organizaci&#xF3;n de las primeras proyecciones amacrinas de la IPL. Sin embargo, tambi&#xE9;n sugiere que las c&#xE9;lulas amacrinas interact&#xFA;an entre s&#xED; durante la formaci&#xF3;n de IPL; estas interacciones solo parece suficiente para formar la IPL. Por otra parte, nuestros resultados sugieren que puede servir de gu&#xED;a amacrines sublamination IPL, proporcionando se&#xF1;ales de estratificaci&#xF3;n de otros tipos de c&#xE9;lulas.

Requisito transitoria de las c&#xE9;lulas ganglionares de la retina durante el montaje de las capas sin&#xE1;pticas

&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x524D;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x51C6;&#x786E;&#x5E03;&#x7EBF;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x673A;&#x5236;&#x57FA;&#x7840;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8FDE;&#x63A5;&#x6BD4;&#x8F83;&#x56F0;&#x96BE;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x3002;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x7A81;&#x89E6;&#x8054;&#x7CFB;&#x7684;&#x5730;&#x533A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6210;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5E73;&#x884C;&#x5C42;&#x6216;&#x690E;&#x677F;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5B89;&#x6392;&#x4F7F;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#xFF0C;&#x66F4;&#x5BB9;&#x6613;&#x5730;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x8BA4;&#x4E3A;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x590D;&#x5408;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7ED3;&#x6784;&#x3001; &#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x56FE;&#x5C42;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x53D1;&#x5C55;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6982;&#x8FF0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x4E2D;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5185;&#x5C42;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#xFF0C;&#x51E1;&#x6D89;&#x53CA;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7535;&#x8DEF;&#x7CBE;&#x786E;&#x5730;&#x88C5;&#x914D;&#x5728;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x79BB;&#x6563; sublaminae &#x6D3B;&#x6027;&#x4F9D;&#x8D56;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x65B0;&#x7684;&#x5149;&#x5B66;&#x6210;&#x50CF;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x9610;&#x660E;&#x5982;&#x4F55;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7A81;&#x89E6;&#x590D;&#x5408;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;

&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C42;&#x6D41;&#x7535;&#x8DEF;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

Neuronal function depends on the accurate wiring between pre- and postsynaptic cells. Determining the mechanisms underlying precision in neuronal connectivity is challenging because of the complexity of the nervous system. In diverse parts of the nervous system, regions of synaptic contact are organized into distinct parallel layers, or laminae, that are correlated with distinct functions. Such an arrangement enables the development of synapse specificity to be more readily investigated. Here, we present an overview of the developmental mechanisms that are thought to underlie the formation of synaptic layers in the vertebrate retina, a highly laminated CNS structure. We will contrast the roles of activity-dependent and activity-independent mechanisms in establishing functionally discrete sublaminae in the inner retina, where circuits involving many subtypes of retinal neurons are assembled precisely. In addition, we will discuss new optical imaging approaches for elucidating how retinal synaptic lamination occurs in vivo.

Laminar circuit formation in the vertebrate retina.

La fonction neuronale d&#xE9;pend de la pr&#xE9;cision de c&#xE2;blage entre les cellules pr&#xE9;-et post-synaptique. D&#xE9;terminer les m&#xE9;canismes sous-jacents de pr&#xE9;cision en mati&#xE8;re de connectivit&#xE9; neuronale est difficile en raison de la complexit&#xE9; du syst&#xE8;me nerveux. Dans diverses parties du syst&#xE8;me nerveux, les r&#xE9;gions de contact synaptique sont organis&#xE9;s en couches distinctes parall&#xE8;les, ou lames, qui sont corr&#xE9;l&#xE9;es avec des fonctions distinctes. Une telle disposition permet le d&#xE9;veloppement de la sp&#xE9;cificit&#xE9; des synapses d&#x26;#39;&#xEA;tre plus facilement &#xE9;tudi&#xE9;. Ici, nous pr&#xE9;sentons un aper&#xE7;u des m&#xE9;canismes de d&#xE9;veloppement qui sont cens&#xE9;s &#xEA;tre &#xE0; l&#x26;#39;origine de la formation de couches synaptiques dans la r&#xE9;tine des vert&#xE9;br&#xE9;s, une structure tr&#xE8;s feuillet&#xE9;e CNS. Nous allons comparer les r&#xF4;les des m&#xE9;canismes d&#xE9;pendants de l&#x26;#39;activit&#xE9; et l&#x26;#39;activit&#xE9; ind&#xE9;pendante dans l&#x26;#39;&#xE9;tablissement fonctionnellement sublaminae discret dans la r&#xE9;tine interne, o&#xF9; les circuits impliquant de nombreux sous-types de neurones de la r&#xE9;tine sont assembl&#xE9;s avec pr&#xE9;cision. En outre, nous allons discuter de nouvelles approches d&#x26;#39;imagerie optique pour &#xE9;lucider la fa&#xE7;on dont la r&#xE9;tine lamination synaptique se produit in vivo.

Formation Circuit laminaire dans la r&#xE9;tine des vert&#xE9;br&#xE9;s

Laminar Schaltung Bildung in der Wirbeltier-Netzhaut.

Funzione neuronale dipende il cablaggio accurato tra cellule pre e postsinaptiche. Determinare i meccanismi sottostanti precisione nella connettivit&agrave; neuronale &egrave; impegnativo a causa della complessit&agrave; del sistema nervoso. In diverse parti del sistema nervoso, regioni di contatto sinaptico sono organizzate in strati paralleli distinti, o lamelle, che sono correlate con funzioni distinte. Tale disposizione consente lo sviluppo di specificit&agrave; di sinapsi per essere pi&ugrave; facilmente studiate. Qui, vi presentiamo una panoramica dei meccanismi dello sviluppo che si pensa che sottendono la formazione di strati sinaptiche nella retina vertebrata, una struttura altamente stratificata di CNS. Si confronteranno i ruoli dei meccanismi attivit&agrave;-dipendente e indipendente dall&#39;attivit&agrave; nello stabilire sublaminae funzionalmente discreti nella retina interna, dove i circuiti che coinvolge molti sottotipi dei neuroni della retina sono assemblati precisamente. Nuovi approcci di imaging ottici, inoltre, si discuter&agrave; per chiarire come retinica laminazione sinaptica si verifica in vivo.

Formazione laminare circuito nella retina Vertebrata.

&#x795E;&#x7D4C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x914D;&#x7DDA;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3067;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x90E8;&#x54C1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x5E73;&#x884C;&#x306A;&#x5C64;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CA;&#x306B;&#x7DE8;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x914D;&#x7F6E;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x3001;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x7A4D;&#x5C64;CNS&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C64;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x56DE;&#x8DEF;&#x304C;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x3066;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x96E2;&#x6563;&#x7684;sublaminae&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3068;&#x6D3B;&#x52D5;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5BFE;&#x6BD4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5149;&#x5B66;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x5C64;&#x56DE;&#x8DEF;&#x5F62;&#x6210;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0AC;&#xC804; &#xBC0F; postsynaptic &#xC140; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xBC30;&#xC120;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xC815; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC815;&#xBC00;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC804; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC811;&#xCD09; &#xC601;&#xC5ED; &#xBCC4;&#xAC1C; &#xBCD1;&#xB82C; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB098; laminae &#xACE0;&#xC720; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0C1;&#xD638; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xB294; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC740; &#xB354; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xB0C5; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC120;&#xBB3C;&#xC774; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC801; &#xCE35;&#xB41C; CNS &#xAD6C;&#xC870; &#xCC99;&#xCD94; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xACC4;&#xCE35;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xAE30;&#xCD08;&#xAC00; &#xC0DD;&#xAC01; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xAC1C;&#xC694;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9DD;&#xB9C9;, &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD558;&#xC704; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD68C;&#xB85C; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC870;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5B4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; sublaminae &#xC218;&#xB9BD; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC885;&#xC18D; &#xBC0F; &#xD65C;&#xB3D9; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xBA85;&#xC554; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC1C;&#xC0DD; elucidating &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC801; &#xCE35;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAD11;&#xD559; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE35; &#xB958; &#xD68C;&#xB85C; &#xD615;&#xC131;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La funci&#xF3;n neuronal depende de la precisi&#xF3;n de cableado entre las c&#xE9;lulas pre-y post-sin&#xE1;ptica. La determinaci&#xF3;n de los mecanismos que subyacen a la precisi&#xF3;n en la conectividad neuronal es un desaf&#xED;o debido a la complejidad del sistema nervioso. En diversas partes del sistema nervioso, las regiones de contacto sin&#xE1;ptico est&#xE1;n organizados en distintas capas paralelas, o l&#xE1;minas, que est&#xE1;n correlacionados con funciones distintas. Tal disposici&#xF3;n permite el desarrollo de sinapsis especificidad para ser m&#xE1;s f&#xE1;cilmente investigado. A continuaci&#xF3;n, presentamos una visi&#xF3;n general de los mecanismos de desarrollo que se cree que la base de la formaci&#xF3;n de capas sin&#xE1;pticas en la retina de los vertebrados, una estructura de sistema nervioso central altamente estratificada. Vamos a contrastar el papel de los mecanismos que dependen de la actividad e independientes de la actividad en el establecimiento de sublaminae discreta funcionalmente en la retina interna, donde los circuitos que involucran muchos subtipos de neuronas de la retina se ensamblan con precisi&#xF3;n. Adem&#xE1;s, vamos a discutir los nuevos enfoques de imagen &#xF3;ptica para elucidar c&#xF3;mo la laminaci&#xF3;n sin&#xE1;ptica retina se produce in vivo.

Laminar la formaci&#xF3;n en el Circuito de retina de los vertebrados

&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x90FD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6295;&#x5C04;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x76EE;&#x6807;&#x53CA;&#x5176;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x4F19;&#x4F34;&#x7684;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11; interneurons &#x5982;&#x4F55;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x8FDE;&#x63A5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x8C03;&#x67E5;&#x5982;&#x4F55;&#x53D1;&#x5C55;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81; interneurons &#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x5185;&#x5C42;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#xFF0C;&#x8513;&#x72B6;&#x5185;&#x5C42; (IPL) &#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6; neuropil&#xFF0C;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#xFF08;&#x4E0A;&#xFF09; &#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11; (OFF) &#x5728;&#x5149;&#x7167;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7531;&#x7ED3;&#x6784;&#x5C40;&#x9650;&#xFF0C;&#x5355;&#x72EC;&#x7684; ON &#x548C; OFF &#x7A81;&#x89E6;&#x5185; IPL sublaminae &#x7684;&#x7535;&#x8DEF;&#x8FDB;&#x884C;&#x5904;&#x7406;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x80DE;&#x4F53;&#x5728;&#x5230;&#x671F;&#x65E5;&#xFF0C;&#x9A7B;&#x7559;&#x5728;&#x6B64;&#x4E1B;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x4FA7;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6700;&#x65E9;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x6D3E;&#x751F;&#x795E;&#x7ECF;&#x708E;&#x4E1B;&#x3002;&#x5F53;&#x6211;&#x4EEC;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x9075;&#x5FAA;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x65F6;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x53D1;&#x5C55;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x671F;&#x95F4;&#xFF0C;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C55;&#x51FA;&#x7684;&#x662F;&#x8FDE;&#x901A;&#x7684; neurites &#x65FA;&#x76DB;&#x7684;&#x4EA7;&#x7269;&#x3002;&#x6EE1;&#x6210;&#x5F62;&#x7684; IPL&#xFF0C;&#x671D;&#x7740;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C42;&#x6269;&#x5C55;&#x7684; neurites &#x5219;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x4E3A;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5F53;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5F62;&#x6210;&#x4E54;&#x6728;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4F18;&#x5148;&#x7EBF;&#x6216;&#x8005;&#x5185;&#x90E8;&#x6216;&#x5916;&#x90E8; IPL &#x5BF9;&#x5E94;&#x4E8E;&#x4ECA;&#x540E;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x5E76;&#x5173;&#x95ED; sublaminae&#xFF0C;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5206;&#x5C42;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x7531;&#x54EA;&#x4E9B; ON &#x548C; OFF &#x65E0;&#x957F;&#x7A81; interneurons &#x4E0E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6295;&#x5C04;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x548C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5176;&#x4ED6;&#x5730;&#x65B9;&#x652F;&#x914D;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5404;&#x81EA; sublaminae &#x5728; IPL &#x5F62;&#x6210;&#x4E86;&#x9C9C;&#x660E;&#x7684;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x3002;

&#x9488;&#x5BF9;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x7EC6;&#x80DE; neurites &#x5BF9;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x80B2;&#x9002;&#x5F53;&#x7A81;&#x89E6;&#x7EB9;&#x5C42;&#x3002;

Cellular mechanisms underlying the precision by which neurons target their synaptic partners have largely been determined based on the study of projection neurons. By contrast, little is known about how interneurons establish their local connections in vivo. Here, we investigated how developing amacrine interneurons selectively innervate the appropriate region of the synaptic neuropil in the inner retina, the inner plexiform layer (IPL). Increases (ON) and decreases (OFF) in light intensity are processed by circuits that are structurally confined to separate ON and OFF synaptic sublaminae within the IPL. Using transgenic zebrafish in which the majority of amacrine cells express fluorescent protein, we determined that the earliest amacrine-derived neuritic plexus formed between two cell populations whose somata, at maturity, resided on opposite sides of this plexus. When we followed the behavior of individual amacrine cells over time, we discovered that they exhibited distinct patterns of structural dynamics at different stages of development. During cellular migration, amacrine cells exhibited an exuberant outgrowth of neurites that was undirected. Upon reaching the forming IPL, neurites extending towards the ganglion cell layer were relatively more stable. Importantly, when an arbor first formed, it preferentially ramified in either the inner or outer IPL corresponding to the future ON and OFF sublaminae, and maintained this stratification pattern. The specificity by which ON and OFF amacrine interneurons innervate their respective sublaminae in the IPL contrasts with that observed for projection neurons in the retina and elsewhere in the central nervous system.

Targeting of amacrine cell neurites to appropriate synaptic laminae in the developing zebrafish retina.

M&#xE9;canismes cellulaires qui sous-tendent la pr&#xE9;cision avec laquelle les neurones cibler leurs partenaires synaptiques ont &#xE9;t&#xE9; en grande partie d&#xE9;termin&#xE9; sur la base de l&#x26;#39;&#xE9;tude des neurones de projection. En revanche, on sait peu sur la fa&#xE7;on dont les interneurones &#xE9;tablir leurs connexions locales in vivo. Ici, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; comment d&#xE9;velopper des interneurones amacrines s&#xE9;lective innervent la r&#xE9;gion appropri&#xE9;e du neuropile synaptique dans la r&#xE9;tine interne, la couche interne plexiforme (IPL). Augmente (ON) et diminue (OFF) de l&#x26;#39;intensit&#xE9; lumineuse sont trait&#xE9;es par des circuits qui sont structurellement limit&#xE9;es &#xE0; s&#xE9;parer ON et OFF sublaminae synaptique au sein de l&#x26;#39;IPL. En utilisant le poisson z&#xE8;bre transg&#xE9;nique dans laquelle la majorit&#xE9; des cellules amacrines exprimer une prot&#xE9;ine fluorescente, nous avons d&#xE9;termin&#xE9; que la plus ancienne amacrines d&#xE9;riv&#xE9; neuritique plexus form&#xE9; entre deux populations de cellules dont les corps cellulaires, &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;ch&#xE9;ance, r&#xE9;sidait sur les c&#xF4;t&#xE9;s oppos&#xE9;s de ce plexus. Lorsque nous avons suivi le comportement de cellules individuelles amacrines au fil du temps, nous avons d&#xE9;couvert qu&#x26;#39;ils pr&#xE9;sentent des profils distincts de la dynamique des structures &#xE0; diff&#xE9;rents stades de d&#xE9;veloppement. Lors de la migration cellulaire, les cellules amacrines expos&#xE9; une excroissance exub&#xE9;rante de neurites qui &#xE9;tait non orient&#xE9;. En arrivant &#xE0; l&#x26;#39;IPL de formation, neurites s&#x26;#39;&#xE9;tendant vers le couche de cellules ganglionnaires &#xE9;taient relativement plus stable. Important, lorsqu&#x26;#39;un arbre d&#x26;#39;abord form&#xE9;, il soit pr&#xE9;f&#xE9;rentiellement ramifi&#xE9;e dans l&#x26;#39;IPL int&#xE9;rieure ou ext&#xE9;rieure correspondant &#xE0; la future ON et OFF sublaminae, et maintenu ce motif de stratification. La sp&#xE9;cificit&#xE9; par laquelle ON et OFF interneurones amacrines innervent leur sublaminae respective dans les contrastes d&#x26;#39;IPL avec celle observ&#xE9;e pour les neurones de projection de la r&#xE9;tine et ailleurs dans le syst&#xE8;me nerveux central.

Le ciblage des neurites de cellules amacrines &#xE0; lames Synaptic appropri&#xE9;e dans la r&#xE9;tine Zebrafish d&#xE9;veloppement

Zellul&auml;re Mechanismen der Pr&auml;zisions durch die Neuronen ihre synaptische Partner deiner Wahl wurden weitgehend basierend auf der Studie der Projektion Neuronen bestimmt. Im Gegensatz dazu ist wenig bekannt &uuml;ber, wie Interneuronen ihre lokalen Verbindungen, die in-vivo herzustellen. Hier untersuchten wir wie entwickelnden Amacrine Interneuronen selektiv anregen die entsprechende Region der synaptischen Neuropil der inneren Retina, die innere plexiforme Schicht (IPL). Erh&ouml;hungen (ON) und R&uuml;ckgang der Lichtintensit&auml;t (OFF) werden durch Schaltungen verarbeitet, die strukturell beschr&auml;nkt werden, um separate ON und OFF synaptischen Sublaminae innerhalb der IPL. Mit transgenen Zebrafisch, in der die Mehrheit der Amacrine Zellen fluoreszierendes Protein Ausdr&uuml;cken, haben wir festgestellt, dass die fr&uuml;hesten Amacrine abgeleitete neuritische Plexus zwischen zwei Zelle Bev&ouml;lkerungen gebildet deren Somata, am Ende der Laufzeit auf gegen&uuml;berliegenden Seiten des dieser Plexus residierte. Wenn wir das Verhalten der einzelnen Amacrine Zellen im Laufe der Zeit gefolgt, entdeckten wir, dass sie unterschiedliche Muster der Strukturdynamik in verschiedenen Stadien der Entwicklung ausgestellt. W&auml;hrend zellulare Migration ausgestellt Amacrine Zellen ein &uuml;ppiger Auswuchs der Neurites, die ungerichtete war. Bei die Umformung IPL erreichen, waren Neurites Verl&auml;ngerung in Richtung der Ganglion-Zellschicht relativ stabiler. Wichtig ist, wenn ein Arbor, zuerst gebildet, es bevorzugt ver&auml;stelte in entweder die innere oder &auml;u&szlig;ere IPL entspricht dem zuk&uuml;nftigen ON OFF Sublaminae und verwaltet diese Schichtung-Muster. Die Besonderheit von welche ON, die und OFF Amacrine Interneuronen ihren jeweiligen Sublaminae in die IPL-Kontraste mit, dass f&uuml;r die Projektion Neuronen in der Netzhaut und des zentralen Nervensystems beobachtet anregen.

Ausrichtung der Amacrine Zellen Neurites zu entsprechenden synaptische Spreiten der entwickelnden Zebrafisch-Netzhaut.

Meccanismi cellulari sottostanti la precisione con cui i neuroni bersaglio loro partner sinaptica sono stati determinati in gran parte basata sullo studio dei neuroni di proiezione. Al contrario, poco &egrave; conosciuto circa come interneurons stabilire le connessioni locali in vivo. Qui, abbiamo studiato come sviluppo amacrine interneurons selettivamente innervano la regione appropriata del neuropilo sinaptica nella retina interna, lo strato plessiforme interno (IPL). Aumenti (su) e diminuisce (OFF) in intensit&agrave; luminosa vengono elaborati da circuiti che strutturalmente sono confinati per separare ON e OFF sublaminae sinaptici all&#39;interno di IPL. Utilizzando zebrafish transgenici in cui la maggior parte delle cellule amacrine espressa la proteina fluorescente, abbiamo determinato che il primi derivati amacrine neuritica plesso formato tra due popolazioni di cellule cui somata, a maturit&agrave;, ha riseduto sui lati opposti di questo plesso. Quando abbiamo seguito il comportamento delle cellule amacrine individuale nel corso del tempo, abbiamo scoperto che hanno esposto distinti modelli di dinamica strutturale nelle diverse fasi di sviluppo. Durante la migrazione cellulare, le cellule amacrine esposta un&#39;escrescenza esuberante di neuriti che era grafi. Dopo aver raggiunto la formatura IPL, neuriti che si estende verso lo strato delle cellule gangliari sono stati relativamente pi&ugrave; stabile. Importante, quando un arbor formata in primo luogo, esso preferenzialmente ramificata nell&#39;IPL interno o esterno con corrispondente al futuro ON e OFF sublaminae e mantenuto questo modello di stratificazione. La specificit&agrave; di cui ON e OFF amacrine interneurons innervano loro rispettivi sublaminae in IPL contrasti con quella osservata per i neuroni di proiezione nella retina e in altre parti del sistema nervoso centrale.

Targeting di neuriti delle cellule amacrine a lamine appropriate sinaptiche nella retina zebrafish sviluppo.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x6295;&#x5C04;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5C11;&#x3057;&#x306F;&#x4ECB;&#x5728;&#x304C;in vivo&#x3067;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x5185;&#x7DB2;&#x72B6;&#x5C64;&#xFF08;IPL&#xFF09;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x795E;&#x7D4C;&#x7DB2;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x5730;&#x57DF;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4ECB;&#x5728;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5149;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#xFF08;ON&#xFF09;&#x3068;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#xFF08;OFF&#xFF09;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;IPL&#x5185;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;sublaminae&#x3092;&#x30AA;&#x30F3;&#x3068;&#x30AA;&#x30D5;&#x3092;&#x4F7F;&#x3044;&#x5206;&#x3051;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x56DE;&#x8DEF;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x53E4;&#x306E;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x53E2;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3001;&#x6E80;&#x671F;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x53E2;&#x306E;&#x53CD;&#x5BFE;&#x5074;&#x306B;&#x4F4F;&#x3093;&#x3067;2&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6319;&#x200B;&#x200B;&#x52D5;&#x3092;&#x8FFD;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x5404;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x69CB;&#x9020;&#x529B;&#x5B66;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7121;&#x5411;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x71B1;&#x72C2;&#x7684;&#x306A;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6210;&#x5F62;IPL&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C64;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x5EF6;&#x3073;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x306F;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x6771;&#x5C4B;&#x304C;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;sublaminae ON&#x3068;OFF&#x306E;&#x5C06;&#x6765;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x5185;&#x5074;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5916;&#x5074;&#x306E;IPL&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x5206;&#x5C90;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5C64;&#x5316;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4ECB;&#x5728;ON&#x3068;OFF&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x3084;&#x4ED6;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3067;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x6295;&#x5C04;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;IPL&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;sublaminae&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x958B;&#x767A;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x7DB2;&#x819C;&#x3067;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CA;&#x306B;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;

&#xAE30;&#xBCF8; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xC158; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC791;&#xC740; &#xC218; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xAC1C;&#xBC1C; amacrine &#xC218; &#xC870;&#xC0AC; &#xC548; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xB0B4; plexiform &#xCE35; (IPL)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; neuropil&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; innervate. (&#xC5D0;) &#xC99D;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C; (OFF) &#xBE5B;&#xC758; &#xAC15;&#xB3C4; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; ON &#xD558; &#xACE0; IPL &#xB0B4; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; sublaminae &#xD574;&#xC81C;&#xB97C; &#xAD6D;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xD68C;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; zebrafish amacrine &#xC140;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; amacrine &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; neuritic &#xCD1D;&#xC774;&#xC774; &#xCD1D;&#xC758; &#xBC18;&#xB300;&#xD3B8;&#xC5D0; &#xC0B4;&#xACE0; &#xB9CC;&#xAE30;, &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; somata &#xB450; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xC774; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xACB0;&#xC815;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC9C0;&#xB0A8;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBCC4; amacrine &#xC140;&#xC758; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xB530;&#xB77C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC870; &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; amacrine &#xC140; neurites&#xB294; &#xAC10;&#xB3C5;&#xC758; &#xBB34;&#xC131; &#xD55C; &#xAC00;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC;. &#xD615;&#xC131; IPL&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC;, neurites &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE35;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xC548;&#xC815;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740; &#xB54C; &#xBA3C;&#xC800; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xC815;&#xC790;, &#xADF8;&#xAC83; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; ramified &#xC911; &#xB0B4;&#xBD80; &#xB610;&#xB294; &#xC678;&#xBD80; ipl &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; on&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558; &#xACE0; sublaminae&#xB97C; &#xB044;&#xACE0;&#xC774; &#xACC4;&#xCE35; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; amacrine &#xC218;&#xB294; ON&#xACFC; OFF &#xD558; &#xC5EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xC158; &#xB274;&#xB7F0; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xACFC; IPL &#xB300;&#xC870;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAC01;&#xAC01; sublaminae innervate.

&#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; laminae &#xAC1C;&#xBC1C; zebrafish &#xB9DD;&#xB9C9; &#xD558; amacrine &#xC140; neurites&#xC758;.

Los mecanismos celulares que subyacen a la precisi&#xF3;n con la que orientar sus socios de las neuronas sin&#xE1;pticas han sido en gran parte determinado con base en el estudio de las neuronas de proyecci&#xF3;n. Por el contrario, poco se sabe acerca de c&#xF3;mo establecer sus conexiones de las interneuronas locales en vivo. Aqu&#xED;, hemos investigado c&#xF3;mo el desarrollo de las interneuronas amacrinas selectivamente inervan la regi&#xF3;n correspondiente de la neuropilo sin&#xE1;ptica en la retina interna, la capa plexiforme interna (IPL). Los aumentos (ON) y disminuye (OFF) en la intensidad de la luz se procesan mediante circuitos que est&#xE1;n estructuralmente limitado a separar de encendido y apagado sublaminae sin&#xE1;ptica en el IPL. Uso de pez cebra transg&#xE9;nico en el que la mayor&#xED;a de las c&#xE9;lulas amacrinas expresar la prote&#xED;na fluorescente, se determin&#xF3; que los primeros amacrinas derivado neur&#xED;tico del plexo formado entre dos poblaciones de c&#xE9;lulas cuya somata, en la madurez, residi&#xF3; en lados opuestos de este plexo. Cuando seguimos el comportamiento de las distintas c&#xE9;lulas amacrinas lo largo del tiempo, descubrimos que mostraron patrones de la din&#xE1;mica estructural en las diferentes etapas de desarrollo. Durante la migraci&#xF3;n celular, las c&#xE9;lulas amacrinas exhibi&#xF3; una consecuencia exuberante de neuritas que estaba dirigido. Al llegar a la conformaci&#xF3;n de IPL, neuritas se extiende hacia la capa de c&#xE9;lulas ganglionares eran relativamente m&#xE1;s estable. Es importante destacar que, cuando una primera cenador formado, preferentemente ramificado, ya sea en la IPL interior o exterior correspondiente a la futura ON y OFF sublaminae, y se mantiene este patr&#xF3;n de estratificaci&#xF3;n. La especificidad por el cual ON y OFF interneuronas amacrinas inervan la sublaminae respectivo en los contrastes de IPL con la observada para las neuronas de proyecci&#xF3;n en la retina y otras partes del sistema nervioso central.

Focalizaci&#xF3;n de las neuritas de c&#xE9;lulas amacrinas de l&#xE1;minas Synaptic apropiada en la retina de pez cebra en desarrollo

&#x9488;&#x5BF9;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x7EB9;&#x5C42;&#x662F;&#x7CBE;&#x786E;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8FDE;&#x63A5;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x9488;&#x5BF9;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EB9;&#x5C42;&#xFF0C;&#x5374;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x590D;&#x5408;&#x53D1;&#x751F;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x7531;&#x4E0D;&#x9002;&#x5F53;&#x5730;&#x653E;&#x7F6E;&#x4E54;&#x6728;&#x6811;&#x79CD;&#x7684;&#x4FEE;&#x526A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4F53;&#x5185;&#x5EF6;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x7814;&#x8D44;&#x5C40;) &#x6811;&#x7A81;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x7275;&#x8FDE;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x76EE;&#x6807;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x7528;&#x4E8E;&#x8054;&#x7CFB;&#x5408;&#x9002;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F19;&#x4F34;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x79CD;&#x7FA4;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E0D;&#x540C;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x5730;&#x5C42;&#x987A;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x4ECE;&#x5185;&#x90E8;&#x5230;&#x5916;&#x90E8;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x3002;&#x5386;&#x4EFB;&#x5929;&#x6210;&#x50CF;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8BC1;&#x5B9E; multistratified &#x7684;&#x667A;&#x4E50;&#x751F;&#x6210;&#x5730;&#x5C42;&#x4F9D;&#x6B21;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x690E;&#x677F;&#x5185;&#x62DF;&#x8BA2;&#x7684;&#x4E54;&#x6728;&#x3002;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x548C;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81; interneurons &#x900F;&#x9732;&#x7814;&#x8D44;&#x5C40;&#x6811;&#x7A81;&#x76EE;&#x6807;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x53E0;&#x5C42;&#x7684;&#x65E0;&#x957F;&#x7A81; plexuses&#x3002;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7684; prepatterned afferents &#x9488;&#x5BF9;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x80FD;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x6B63;&#x786E;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x8FDE;&#x63A5;&#x7684;&#x65B0;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x4F53;&#x5185;&#x6210;&#x50CF;&#x663E;&#x793A;&#x53E0;&#x5C42; afferents &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

Targeting of axons and dendrites to particular synaptic laminae is an important mechanism by which precise patterns of neuronal connectivity are established. Although axons target specific laminae during development, dendritic lamination has been thought to occur largely by pruning of inappropriately placed arbors. We discovered by in vivo time-lapse imaging that retinal ganglion cell (RGC) dendrites in zebrafish show growth patterns implicating dendritic targeting as a mechanism for contacting appropriate synaptic partners. Populations of RGCs labeled in transgenic animals establish distinct dendritic strata sequentially, predominantly from the inner to outer retina. Imaging individual cells over successive days confirmed that multistratified RGCs generate strata sequentially, each arbor elaborating within a specific lamina. Simultaneous imaging of RGCs and subpopulations of presynaptic amacrine interneurons revealed that RGC dendrites appear to target amacrine plexuses that had already laminated. Dendritic targeting of prepatterned afferents may thus be a novel mechanism for establishing proper synaptic connectivity.

In vivo imaging reveals dendritic targeting of laminated afferents by zebrafish retinal ganglion cells.

Le ciblage des axones et des dendrites &#xE0; lames synaptique particuli&#xE8;re est un m&#xE9;canisme important par lequel des sch&#xE9;mas pr&#xE9;cis de la connectivit&#xE9; neuronale sont &#xE9;tablis. Bien que les axones lames cible sp&#xE9;cifique au cours du d&#xE9;veloppement, le laminage dendritique a &#xE9;t&#xE9; pens&#xE9; pour produire en grande partie par l&#x26;#39;&#xE9;lagage des arbres mal plac&#xE9;. Nous avons d&#xE9;couvert par in vivo imagerie time-lapse que la r&#xE9;tine des cellules ganglionnaires (RGC) dendrites dans les mod&#xE8;les de croissance de poisson z&#xE8;bre spectacle impliquant dendritique ciblage comme un m&#xE9;canisme pour mettre en contact des partenaires appropri&#xE9;s synaptiques. Les populations de CGR marqu&#xE9; chez les animaux transg&#xE9;niques &#xE0; &#xE9;tablir des strates distinctes dendritiques s&#xE9;quentiellement, principalement de l&#x26;#39;int&#xE9;rieur vers la r&#xE9;tine externe. Cellules individuelles d&#x26;#39;imagerie au cours des jours successifs a confirm&#xE9; que RGC multistratified g&#xE9;n&#xE9;rer des strates de mani&#xE8;re s&#xE9;quentielle, chaque arbre d&#x26;#39;&#xE9;laborer au sein d&#x26;#39;une lame sp&#xE9;cifique. L&#x26;#39;imagerie simultan&#xE9;e de CGR et sous-populations de pr&#xE9;synaptiques des interneurones amacrines r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que les dendrites CJR semblent viser plexus amacrines qui avaient d&#xE9;j&#xE0; lamin&#xE9;. Dendritiques ciblage des aff&#xE9;rences prepatterned peut donc &#xEA;tre un nouveau m&#xE9;canisme pour l&#x26;#39;&#xE9;tablissement correct de la connectivit&#xE9; synaptique.

L&#x26;#39;imagerie in vivo r&#xE9;v&#xE8;le dendritiques ciblage des aff&#xE9;rences lamin&#xE9;s par poisson-z&#xE8;bre cellules ganglionnaires r&#xE9;tiniennes

Verwendung von Axonen und Dendriten zu bestimmten synaptische Spreiten ist ein wichtiger Mechanismus, durch den pr&auml;zise Muster der neuronalen Verbindungen hergestellt werden. Obwohl Axone spezifische Spreiten w&auml;hrend der Entwicklung zielgerichteter, hat weitgehend durch Beschneiden der unpassend platzierte Dorne auftreten dendritische Laminierung gedacht. Wir entdeckten durch in-vivo-Zeitraffer-Bildgebung, dass retinalen Ganglienzellen Zelle (RGC) Dendriten im Zebrafisch Wachstumsmuster Nicht&uuml;bernahme dendritische Ausrichtung als Mechanismus f&uuml;r die Kontaktaufnahme mit entsprechenden synaptische Partner zeigen. Populationen von Routinggruppenconnectors beschriftet in transgenen Tieren schaffen unterschiedliche dendritische Schichten nacheinander &uuml;berwiegend von innen an &auml;u&szlig;ere Netzhaut. Imaging von einzelne Zellen in aufeinander folgenden Tagen best&auml;tigt, dass multistratified Routinggruppenconnectors Schichten nacheinander jede Arbor Ausarbeitung innerhalb einer bestimmten Lamina generieren. Gleichzeitige Darstellung von Routinggruppenconnectors und Subpopulationen von pr&auml;synaptischen Amacrine Interneuronen ergab, dass RGC Dendriten scheinen Amacrine Plexi zu konzentrieren, die bereits laminiert hatte. Dendritische Ausrichtung der prepatterned afferenten m&ouml;glicherweise so ein neuer Mechanismus f&uuml;r die Festlegung der richtigen synaptischen Konnektivit&auml;t.

In-vivo Bildgebung zeigt dendritische Ausrichtung der laminierten afferenten von Zebrafish retinalen Ganglienzellen.

Targeting di assoni e dendriti di lamine sinaptiche particolare &egrave; un importante meccanismo mediante il quale sono stabiliti precisi schemi di connettivit&agrave; neuronale. Sebbene assoni bersaglio specifici lamine durante lo sviluppo, laminazione dendritiche &egrave; stato pensato per verificarsi in gran parte da potatura delle pergole impropriamente inseriti. Abbiamo scoperto di imaging in vivo di Time-Lapse che dendriti (RGC) cellule gangliari della retina nello zebrafish mostrano modelli di crescita implicando dendritiche targeting come un meccanismo per contattare partner adeguati sinaptica. Popolazioni di RGCs in animali transgenici etichettati stabiliscono distinti strati dendritiche sequenzialmente, prevalentemente dall&#39;interno a retina esterna. Imaging singole celle nei giorni successivi hanno confermato che RGCs multistratified generare gli strati in sequenza, ogni arbor elaborando all&#39;interno una lamina specifica. Imaging simultanea di RGCs e sottopopolazioni di amacrine presinaptica interneurons ha rivelato che dendriti RGC sembrano amacrine plessi che gi&agrave; avevano stratificato di destinazione. Dendritico mirata delle afferenze prepatterned pu&ograve; essere cos&igrave; un nuovo meccanismo per stabilire la corretta connessione sinaptica.

Imaging in vivo rivela dendritiche targeting di laminato afferenze dalle cellule gangliari della retina di zebrafish.

&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CA;&#x306B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x63A5;&#x7D9A;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CA;&#x304C;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x4E0D;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x7F6E;&#x304B;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x526A;&#x5B9A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306B;&#x9023;&#x7D61;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x6A39;&#x3092;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;RGC&#xFF09;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x3002;&#x4E3B;&#x306B;&#x5185;&#x5074;&#x304B;&#x3089;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x9806;&#x6B21;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6A39;&#x72B6;&#x306E;&#x5730;&#x5C64;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x6A19;&#x8B58;RGC&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3002;&#x9023;&#x7D9A;&#x3057;&#x305F;&#x65E5;&#x9593;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x6771;&#x5C4B;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x677F;&#x5185;&#x306E;&#x8D77;&#x8349;&#x3001;multistratified&#x306E;RGC&#x304C;&#x9806;&#x6B21;&#x5C64;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4ECB;&#x5728;&#x306E;RGC&#x3068;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;RGC&#x306E;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3067;&#x306B;&#x7A4D;&#x5C64;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x795E;&#x7D4C;&#x53E2;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; prepatterned&#x6C42;&#x5FC3;&#x6027;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

in vivo&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#x6C42;&#x5FC3;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x6A39;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;

&#xCD95; &#xC0AD;&#xACFC; dendrites &#xD2B9;&#xC815; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC758; laminae &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xD328;&#xD134; &#xC124;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD2B9;&#xC815; laminae &#xB300;&#xC0C1;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC801; &#xCE35; &#xBD80;&#xC801;&#xC808; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC30;&#xCE58; &#xB41C; &#xC544; &#xBC84;&#xC758; &#xC804; &#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xD654;&#xC0C1; &#xC9C4; &#xCC30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; zebrafish&#xC758; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC; (RGC) dendrites &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC5F0;&#xB77D; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xC131;&#xC7A5; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. RGCs &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB958;&#xC758; &#xD655;&#xB9BD; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC9C0;&#xCE35; &#xC21C;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC8FC;&#xB85C; &#xC678;&#xBD80; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC744; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC5F0;&#xC18D; &#xC77C; &#xB3D9;&#xC548; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xD655;&#xC778; multistratified RGCs &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC9C0;&#xCE35; &#xC21C;&#xC11C; &#xB300;&#xB85C;, &#xAC01; &#xC544; &#xBC84; &#xD2B9;&#xC815; lamina &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. RGCs &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; presynaptic amacrine &#xC218;&#xC758; &#xACF5;&#xAC1C; RGC dendrites amacrine plexuses &#xD588;&#xB2E4; &#xC774;&#xBBF8; &#xC801; &#xCE35;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; prepatterned afferents&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC218; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

In vivo &#xC601;&#xC0C1; &#xC801; &#xCE35;&#xB41C; afferents zebrafish &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

Focalizaci&#xF3;n de los axones y las dendritas de las l&#xE1;minas sin&#xE1;ptica en particular es un importante mecanismo por el cual los patrones precisos de la conectividad neuronal se establecen. A pesar de l&#xE1;minas de los axones durante el desarrollo del objetivo espec&#xED;fico, la laminaci&#xF3;n dendr&#xED;ticas se ha pensado que se producen en gran parte por la poda de los cenadores colocan de forma inadecuada. Hemos descubierto in vivo de lapso de tiempo de impresi&#xF3;n de im&#xE1;genes de c&#xE9;lulas ganglionares de la retina (CGR) de dendritas en los patrones de crecimiento de pez cebra muestran que implican dendr&#xED;ticas la focalizaci&#xF3;n como un mecanismo para ponerse en contacto con socios adecuados sin&#xE1;pticas. Las poblaciones de CGR etiquetado de los animales transg&#xE9;nicos a establecer los estratos dendr&#xED;ticas distintas secuencialmente, sobre todo desde el interior de la retina externa. C&#xE9;lulas de im&#xE1;genes individuales en d&#xED;as sucesivos confirm&#xF3; que CGR pluriestratificada generar secuencialmente estratos, cada eje elaborar dentro de una l&#xE1;mina espec&#xED;fica. Im&#xE1;genes simult&#xE1;neas de la CGR y de las subpoblaciones de interneuronas presin&#xE1;pticos amacrinas revel&#xF3; que las dendritas RGC parecen estar dirigidas plexos amacrinas que ya hab&#xED;an laminado. Dendr&#xED;ticas orientaci&#xF3;n de las fibras aferentes prepatterned por lo tanto puede ser un nuevo mecanismo para el establecimiento de la conectividad sin&#xE1;ptica adecuada.

Im&#xE1;genes in vivo revela dendr&#xED;ticas focalizaci&#xF3;n de los aferentes laminados por el pez cebra c&#xE9;lulas ganglionares de la retina

&#x766B;&#x75EB;&#x662F;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x57FA;&#x7840;&#x795E;&#x7ECF;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03;&#x6216;&#x75BE;&#x75C5;&#x590D;&#x53D1;&#x6027;&#x766B;&#x75EB;&#x53D1;&#x4F5C;&#x7684;&#x5178;&#x578B;&#x3002;&#x7EA6;&#x6709;&#x4E09;&#x5206;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x60A3;&#x8005;&#x90FD;&#x6CA1;&#x6709;&#x53CD;&#x5E94;&#x5F53;&#x524D;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x7597;&#x6CD5;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x766B;&#x75EB;&#x7684;&#x75C5;&#x56E0;&#x5B66;&#x548C;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x7684;&#x66F4;&#x6DF1;&#x523B;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x63A8;&#x52A8;&#x65B0;&#x7684;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E0E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x766B;&#x75EB;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x6CBB;&#x7597;&#x662F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x60CA;&#x53A5;&#x6837;&#x578B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x9C7C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6E29;&#x987A;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E86;&#x89E3;&#x766B;&#x75EB;&#x6613;&#x611F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x57FA;&#x56E0;&#x94FE;&#x63A5;&#x766B;&#x75EB;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x4EAE;&#x6C28;&#x9178;&#x4E30;&#x5BCC;&#x3001; &#x8111;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x706D;&#x6D3B; 1a morpholino (MO) &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x521D;&#x6B65;&#x8868;&#x5F81; (lgi1a) &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B; LGI1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F1A;&#x53D1;&#x5C55;&#x6210;&#x663E;&#x6027;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x663E;&#x6027;&#x9057;&#x4F20;&#x6027;&#x766B;&#x75EB;&#x7684;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF; Lgi1a MO &#x51FB;&#x5012;&#x9C7C; (morphants) &#x51FA;&#x73B0;&#x5F62;&#x6001;&#x6B63;&#x5E38;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x766B;&#x75EB;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x3002;&#x9AD8;&#x5242;&#x91CF; Lgi1a morphants &#x6709;&#x5F62;&#x6001;&#x5206;&#x4E3A;&#x6210;&#x4EBA;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x5178;&#x578B;&#x5730;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x66F4;&#x5C0F;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x548C;&#x773C;&#x775B;&#x548C;&#x5C3E;&#x90E8;&#x5F62;&#x72B6;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x52A8;&#x6E38;&#x6CF3;&#x884C;&#x4E3A;&#x6301;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6574;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x9AD8;&#x5242;&#x91CF; morphant &#x9C7C;&#xFF0C;&#x4F1A;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x5927;&#x5C0F;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x5229;&#x7528;&#x6765;&#x89E3;&#x5256;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x81F3;&#x60CA;&#x53A5;&#x6837;&#x884C;&#x4E3A;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x51FD;&#x6570;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6F5C;&#x5728;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x5F02;&#x5E38;&#x548C;&#x6263;&#x62BC;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; Lgi1a &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53D1;&#x80B2;&#x5F02;&#x5E38;&#x3001; &#x8111;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;&#x6263;&#x62BC;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x884C;&#x4E3A;&#x8868;&#x578B;&#x3002;

Epilepsy is a common disorder, typified by recurrent seizures with underlying neurological disorders or disease. Approximately one-third of patients are unresponsive to currently available therapies. Thus, a deeper understanding of the genetics and etiology of epilepsy is needed to advance the development of new therapies. Previously, treatment of zebrafish with epilepsy-inducing pharmacological agents was shown to result in a seizure-like phenotype, suggesting that fish provide a tractable model to understand the function of epilepsy-predisposing genes. Here, we report the first model of genetically linked epilepsy in zebrafish and provide an initial characterization of the behavioral and neurological phenotypes associated with morpholino (MO) knockdown of leucine-rich, glioma-inactivated 1a (lgi1a) expression. Mutations in the LGI1 gene in humans have been shown to predispose to a subtype of autosomal dominant epilepsy. Low-dose Lgi1a MO knockdown fish (morphants) appear morphologically normal but are sensitized to epilepsy-inducing drugs. High-dose Lgi1a morphants have morphological defects which persist into adult stages that are typified by smaller brains and eyes and abnormalities in tail shape, and display hyperactive swimming behaviors. Increased apoptosis was observed throughout the central nervous system of high-dose morphant fish, accounting for the size reduction of neural tissues. These observations demonstrate that zebrafish can be exploited to dissect the embryonic function(s) of genes known to predispose to seizure-like behavior in humans, and offer potential insight into the relationship between developmental neurobiological abnormalities and seizure.

Knockdown of zebrafish Lgi1a results in abnormal development, brain defects and a seizure-like behavioral phenotype.

L&#x26;#39;&#xE9;pilepsie est un trouble fr&#xE9;quent, caract&#xE9;ris&#xE9;e par des crises r&#xE9;currentes sous-jacente des troubles neurologiques ou de maladies. Environ un tiers des patients ne r&#xE9;pondent pas aux th&#xE9;rapies actuellement disponibles. Ainsi, une meilleure compr&#xE9;hension de la g&#xE9;n&#xE9;tique et l&#x26;#39;&#xE9;tiologie de l&#x26;#39;&#xE9;pilepsie est n&#xE9;cessaire pour faire avancer le d&#xE9;veloppement de nouvelles th&#xE9;rapies. Auparavant, le traitement du poisson z&#xE8;bre &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;pilepsie-induire des agents pharmacologiques a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; que conduire &#xE0; une saisie-comme le ph&#xE9;notype, ce qui sugg&#xE8;re que le poisson fournit un mod&#xE8;le souple de comprendre la fonction des g&#xE8;nes de pr&#xE9;disposition &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;pilepsie. Nous rapportons ici le premier mod&#xE8;le de l&#x26;#39;&#xE9;pilepsie chez le poisson z&#xE8;bre g&#xE9;n&#xE9;tiquement li&#xE9;s et fournir une caract&#xE9;risation initiale des ph&#xE9;notypes comportementaux et neurologiques associ&#xE9;es &#xE0; morpholino (MO) knockdown de la leucine-riche, gliome-1a inactiv&#xE9; (lgi1a) expression. Des mutations dans le g&#xE8;ne LGI1 chez les humains ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour pr&#xE9;disposer &#xE0; un sous-type de l&#x26;#39;&#xE9;pilepsie autosomique dominante. &#xC0; faible dose poissons Lgi1a knockdown MO (morphants) semblent morphologiquement normaux, mais sont sensibilis&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;pilepsie m&#xE9;dicaments inducteurs. &#xC0; haute dose morphants Lgi1a avoir des d&#xE9;fauts morphologiques qui persistent dans les stades adultes qui sont caract&#xE9;ris&#xE9;es par des cerveaux plus petits et les yeux et les anomalies dans la forme la queue, et d&#x26;#39;afficher des comportements hyperactifs natation. Apoptose accrue a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e tout au long du syst&#xE8;me nerveux central de fortes doses de poissons morphant, ce qui repr&#xE9;sente pour la r&#xE9;duction de la taille des tissus nerveux. Ces observations d&#xE9;montrent que le poisson-z&#xE8;bre peut &#xEA;tre exploit&#xE9;e afin de diss&#xE9;quer la fonction embryonnaire (s) de g&#xE8;nes connus pour pr&#xE9;disposer &#xE0; la saisie-comme le comportement chez l&#x26;#39;homme, et la perspicacit&#xE9; offre potentielle sur la relation entre d&#xE9;veloppement anomalies neurobiologiques et la saisie.

Knockdown de poisson z&#xE8;bre Lgi1a R&#xE9;sultats dans le d&#xE9;veloppement anormal, des anomalies c&#xE9;r&#xE9;brales et un ph&#xE9;notype comportemental comme la saisie-

Epilepsie ist eine h&auml;ufige Erkrankung, versinnbildlicht durch wiederkehrende Anf&auml;lle mit zugrunde liegenden neurologischen St&ouml;rungen oder Krankheiten. Etwa ein Drittel der Patienten sind reagieren nicht auf die derzeit verf&uuml;gbaren Therapien. Daher ist ein tieferes Verst&auml;ndnis der Genetik und &Auml;tiologie der Epilepsie erforderlich, um die Entwicklung neuer Therapien. Behandlung von Zebrafish mit Epilepsie-induzierende pharmakologische Agenten wurde zuvor eine Beschlagnahme-&auml;hnlichen Ph&auml;notyp, darauf hindeutet, dass Fisch als steuerbar Modell zum Verst&auml;ndnis der Funktion der Epilepsie-pr&auml;disponierenden Gene dienen zur Folge gezeigt. Wir berichten hier, das erste Modell der genetisch verkn&uuml;pften Epilepsie im Zebrafisch und bieten eine erste Charakterisierung von der Verhaltens- und neurologischen Ph&auml;notypen zugeordnete Morpholino (MO) Niederschlag von Leucin-reiche, Gliom-inaktiviert 1a (lgi1a) Ausdruck. Mutationen im LGI1-Gen beim Menschen nachweislich f&uuml;r ein Untertyp von autosomal dominante Epilepsie pr&auml;disponieren. Niedrig dosierte Lgi1a MO Niederschlag Fisch (Morphants) erscheinen morphologisch normalen aber Epilepsie-induzierende Medikamente sensibilisiert sind. Hochdosis-Lgi1a Morphants haben morphologische M&auml;ngel, die in Erwachsenen Phasen beibehalten, die sind typische von kleineren Gehirne und Augen und Fehlbildungen in Form von Schwanz und hyperaktiven Schwimmen Verhalten anzeigen. Erh&ouml;hte Apoptose wurde im gesamten ZNS Hochdosis-Morphant Fisch, Bilanzierung der Zerkleinerung Nervengewebe beobachtet. Diese Beobachtungen zeigen, dass Zebrafisch kann genutzt werden, um die embryonale Funktion(en) Gene pr&auml;disponieren zur Beschlagnahme-&auml;hnliches Verhalten beim Menschen bekannterma&szlig;en zu sezieren und bieten potenziellen Einblick in die Beziehung zwischen Entwicklungsst&ouml;rungen neurobiologische Auff&auml;lligkeiten und Beschlagnahme.

Niederschlag von Zebrafish Lgi1a f&uuml;hrt zu abnormer Entwicklung, Gehirn-M&auml;ngel und eine Beschlagnahme-&auml;hnlichen Verhaltens Ph&auml;notyp.

L&#39;epilessia &egrave; un disturbo comune, caratterizzato da crisi epilettiche ricorrenti con disturbi neurologici sottostanti o malattia. Circa un terzo dei pazienti non rispondono alle terapie attualmente disponibili. Cos&igrave;, una pi&ugrave; profonda comprensione della genetica e l&#39;eziologia dell&#39;epilessia &egrave; necessaria per far avanzare lo sviluppo di nuove terapie. In precedenza, trattamento di zebrafish con agenti farmacologici che inducono l&#39;epilessia &egrave; stato indicato per causare un fenotipo simile sequestro, suggerendo che pesce forniscono un modello trattabili per comprendere la funzione dei geni che predispongono l&#39;epilessia. Riportiamo il primo modello di epilessia geneticamente collegato nello zebrafish e fornire una caratterizzazione iniziale i fenotipi comportamentali e neurologici associati oligonucleotides (MO) atterramento di ricchi di leucina, glioma-inattivato 1a espressione (lgi1a). Mutazioni nel gene LGI1 negli esseri umani hanno dimostrate di predisporre a un sottotipo di epilessia autosomica dominante. Low-dose Lgi1a MO atterramento pesci (morphants) appaiono morfologicamente normali, ma sono allergico a farmaci che inducono l&#39;epilessia. Morphants Lgi1a ad alte dosi hanno difetti morfologici che persistono nell&#39;adulti fasi che sono caratterizzate da piccoli cervelli e occhi e anomalie nella forma della coda e visualizzare i comportamenti iperattivi nuoto. Aumentata apoptosi &egrave; stata osservata in tutto il sistema nervoso centrale della alto-dose morphant pesce, contabilit&agrave; per la riduzione delle dimensioni dei tessuti neurali. Queste osservazioni dimostrano che zebrafish pu&ograve; essere sfruttato per sezionare la funzione embrionali i geni predispongono al grippaggio-come comportamento negli esseri umani e offrire potenziale approfondita della relazione tra anomalie dello sviluppo neurobiologici e sequestro.

Atterramento di zebrafish Lgi1a risultati nello sviluppo anormale, difetti cerebrali e un fenotipo comportamentale del sequestro-come.

&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x75BE;&#x60A3;&#x3084;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x518D;&#x767A;&#x767A;&#x4F5C;&#x306B;&#x4EE3;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x7D04;3&#x5206;&#x306E;1&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x3068;&#x75C5;&#x56E0;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x6DF1;&#x3081;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x9032;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x3001;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x85AC;&#x5264;&#x3068;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9B5A;&#x304C;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x7D20;&#x56E0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6271;&#x3044;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x793A;&#x5506;&#x3001;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3001;&#x30ED;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x81A0;&#x816B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;1A&#xFF08;lgi1a&#xFF09;&#x5F0F;&#x306E;&#x30E2;&#x30EB;&#x30DB;&#x30EA;&#x30CE;&#xFF08;MO&#xFF09;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x884C;&#x52D5;&#x3084;&#x795E;&#x7D4C;&#x5B66;&#x7684;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;LGI1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x512A;&#x6027;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x7D20;&#x56E0;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;Lgi1a MO&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x9B5A;&#xFF08;morphants&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x614B;&#x7684;&#x306B;&#x6B63;&#x5E38;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x85AC;&#x3078;&#x306E;&#x611F;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x7528;&#x91CF;Lgi1a&#x306E;morphants&#x306F;&#x5C3E;&#x72B6;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x304F;&#x3001;&#x8133;&#x3084;&#x76EE;&#x3001;&#x7570;&#x5E38;&#x306B;&#x4EE3;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6210;&#x4EBA;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x7D9A;&#x304F;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A;&#x6C34;&#x6CF3;&#x306E;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x7E2E;&#x5C0F;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x5360;&#x3081;&#x3001;&#x9AD8;&#x7528;&#x91CF;morphant&#x9B5A;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x5BDF;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x304C;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x52D5;&#x4F5C;&#x306E;&#x7D20;&#x56E0;&#x3068;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x795E;&#x7D4C;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x7570;&#x5E38;&#x3068;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x80DA;&#x6027;&#x95A2;&#x6570;&#xFF08;s&#xFF09;&#x3092;&#x89E3;&#x5256;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x60AA;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7570;&#x5E38;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3068;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x884C;&#x52D5;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Lgi1a&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;

&#xAC04; &#xC9C8;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC7A5;&#xC560; &#xB610;&#xB294; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC7AC;&#xBC1C; &#xC131; &#xBC1C;&#xC791;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xD45C; &#xB418;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC7A5;&#xC560;. &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xC57D; 1 / 3 &#xD604;&#xC7AC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xBC18;&#xC751; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC720;&#xC804;&#xD559;&#xC758; &#xAE4A;&#xC740; &#xC774;&#xD574; &#xBC0F; &#xAC04; &#xC9C8;&#xC758; &#xBCD1;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xBC95; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC804;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, &#xAC04; &#xC9C8; &#xC720;&#xB3C4; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; zebrafish&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xAC04; &#xC9C8; predisposing &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xC628;&#xC21C;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xACF5; &#xC81C;&#xC548; &#xBC1C;&#xC791; &#xAC19;&#xC740; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; zebrafish&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xAC04; &#xC9C8;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC2E0;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C;, &#xC2E0;&#xACBD; inactivated 1a&#xC758; &#xCD5C;&#xC800; morpholino (&#xBAA8;)&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD589;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xACE0;&#xAE30;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; (lgi1a) &#xC2DD;. &#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; LGI1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; autosomal &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xAC04; &#xC9C8;&#xC758; &#xD558;&#xC704; predispose &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; Lgi1a &#xBAA8; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; (morphants) &#xC815;&#xC0C1; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC57D;&#xBB3C; &#xAC04; &#xC9C8; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAC10; &#xC751;. &#xB192;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; Lgi1a morphants &#xC791;&#xC740; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC640; &#xB208; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xBAA8;&#xC591;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC774;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xD45C; &#xB418; &#xACE0; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xC601; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC131;&#xC778; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xACB0;&#xC810;&#xC744; &#xAC16;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xAC00; apoptosis &#xB192;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; morphant &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD68C;&#xACC4;&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xADF8; zebrafish &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;, &#xBC1C;&#xC791; &#xAC19;&#xC740; &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; predispose &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xBCF5;&#xC218;&#xB97C; &#xD574; &#xBD80; &#xC545;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC1C;&#xB2EC; neurobiological &#xC885;&#xC591;&#xACFC; &#xBC1C;&#xC791; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;.

Zebrafish lgi1a&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xB1CC;&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xACFC; &#xBC1C;&#xC791; &#xAC19;&#xC740; &#xD589;&#xB3D9; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;.

La epilepsia es un trastorno com&#xFA;n, caracterizado por convulsiones recurrentes con trastornos neurol&#xF3;gicos subyacentes o enfermedades. Aproximadamente de los pacientes un tercio no responden a las terapias actualmente disponibles. Por lo tanto, una comprensi&#xF3;n m&#xE1;s profunda de la gen&#xE9;tica y la etiolog&#xED;a de la epilepsia es necesario para avanzar en el desarrollo de nuevas terapias. Anteriormente, el tratamiento de la epilepsia, el pez cebra con la inducci&#xF3;n de agentes farmacol&#xF3;gicos ha demostrado resultar en un ataque similar al fenotipo, lo que sugiere que el pescado proporciona un modelo manejable para entender la funci&#xF3;n de la epilepsia de genes de predisposici&#xF3;n. Aqu&#xED;, se presenta el primer modelo de epilepsia gen&#xE9;tica vinculada en el pez cebra y proporcionar una caracterizaci&#xF3;n inicial de los fenotipos de comportamiento y neurol&#xF3;gicos asociados con morfolino (MO) desmontables de ricos en leucina, el glioma inactivado por 1a (lgi1a) expresi&#xF3;n. Las mutaciones en el gen LGI1 en los seres humanos se ha demostrado que predisponen a un subtipo de la epilepsia autos&#xF3;mica dominante. Bajas dosis de Lgi1a peces ca&#xED;da MO (morphants) parece morfol&#xF3;gicamente normal, pero son sensibles a f&#xE1;rmacos inductores de la epilepsia. Altas dosis de morphants Lgi1a tienen defectos morfol&#xF3;gicos que persisten en etapas adultas que se caracterizan por cerebros m&#xE1;s peque&#xF1;os y los ojos y las anomal&#xED;as en la forma de la cola, y muestran comportamientos hiperactivos nataci&#xF3;n. Aumento de la apoptosis se observ&#xF3; en todo el sistema nervioso central de altas dosis de peces morphant, lo que representa la reducci&#xF3;n del tama&#xF1;o de los tejidos neurales. Estas observaciones demuestran que el pez cebra puede ser explotado para diseccionar la funci&#xF3;n embrionaria (s) de los genes que se sabe predisponen a la crisis un comportamiento similar en los seres humanos, y ofrecen una visi&#xF3;n potencial en la relaci&#xF3;n entre el desarrollo y la incautaci&#xF3;n alteraciones neurobiol&#xF3;gicas.

Derribo del pez cebra Lgi1a Resultados en el Desarrollo anormal, defectos cerebrales y un fenotipo similar al apoderamiento del Comportamiento

LGI1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F1A;&#x53D1;&#x5C55;&#x6210;&#x4E00;&#x79CD;&#x9057;&#x4F20;&#x6027;&#x766B;&#x75EB;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5173;&#x8054;&#x4E0D;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A; paralogs LGI1 &#x57FA;&#x56E0;&#x3001; lgi1a &#x548C; lgi1b&#x3002;Lgi1a &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x60CA;&#x53A5;&#x6837;&#x591A;&#x52A8;&#x8868;&#x578B;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x7279;&#x5F81;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#xFF0C;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x548C;&#x773C;&#x775B;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x5DF2;&#x751F;&#x6210;&#x51FB;&#x5012; morphants lgi1b &#x57FA;&#x56E0;&#x4E5F;&#x663E;&#x793A;&#x53D1;&#x80B2;&#x5F02;&#x5E38;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x6263;&#x62BC;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x6700;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x6D89;&#x53CA;&#x91CD;&#x5927; (&#x8111;&#x79EF;&#x6C34;) &#x8111;&#x5BA4;&#x6269;&#x5927;&#x3002;&#x5982;&#x56FE;&#x6240;&#x793A;&#x4E3A; lgi1a morphants&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;lgi1b morphants &#x8FD8;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230; PTZ &#x81F4;&#x591A;&#x52A8;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A; lgi1 morphants &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x652F;&#x6301;&#x4E24;&#x4E2A; paralogs subfunctionalization &#x6A21;&#x578B;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; lgi1b &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8111;&#x79EF;&#x6C34;&#x548C;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5BF9;&#x620A;&#x56DB;&#x6C2E;&#x81F4;&#x60CA;&#x53A5;&#x6837;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;

Mutations in the LGI1 gene predispose to a hereditary epilepsy syndrome and is the first gene associated with this disease which does not encode an ion channel protein. In zebrafish, there are two paralogs of the LGI1 gene, lgi1a and lgi1b. Knockdown of lgi1a results in a seizure-like hyperactivity phenotype with associated developmental abnormalities characterized by cellular loss in the eyes and brain. We have now generated knockdown morphants for the lgi1b gene which also show developmental abnormalities but do not show a seizure-like behavior. Instead, the most striking phenotype involves significant enlargement of the ventricles (hydrocephalus). As shown for the lgi1a morphants, however, lgi1b morphants are also sensitized to PTZ-induced hyperactivity. The different phenotypes between the two lgi1 morphants support a subfunctionalization model for the two paralogs.

Loss of zebrafish lgi1b leads to hydrocephalus and sensitization to pentylenetetrazol induced seizure-like behavior.

Des mutations dans le g&#xE8;ne LGI1 pr&#xE9;disposer &#xE0; un syndrome d&#x26;#39;&#xE9;pilepsie h&#xE9;r&#xE9;ditaire et est le premier g&#xE8;ne associ&#xE9; &#xE0; cette maladie qui ne codent pas une prot&#xE9;ine canal ionique. Chez le poisson z&#xE8;bre, il ya deux paralogues du g&#xE8;ne LGI1, lgi1a et lgi1b. Knockdown des r&#xE9;sultats lgi1a &#xE0; un ph&#xE9;notype hyperactivit&#xE9; saisie-comme avec des anomalies du d&#xE9;veloppement associ&#xE9;es caract&#xE9;ris&#xE9;es par une perte cellulaire dans les yeux et le cerveau. Nous avons maintenant g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; morphants knockdown pour le g&#xE8;ne lgi1b qui montrent &#xE9;galement des anomalies du d&#xE9;veloppement, mais ne montrent pas un comportement de saisie-comme. Au lieu de cela, le ph&#xE9;notype le plus frappant concerne l&#x26;#39;&#xE9;largissement significatif des ventricules (hydroc&#xE9;phalie). Comme le montre pour les morphants lgi1a, cependant, morphants lgi1b sont &#xE9;galement sensibilis&#xE9;s &#xE0; PTZ-hyperactivit&#xE9; induite. Les diff&#xE9;rents ph&#xE9;notypes entre les deux LGI1 morphants soutenir un mod&#xE8;le de subfunctionalization pour les deux paralogues.

Perte de poisson z&#xE8;bre Lgi1b m&#xE8;ne &#xE0; l&#x26;#39;hydroc&#xE9;phalie et Sensibilisation &#xE0; la pentyl&#xE8;net&#xE9;trazol induite saisie-comme le comportement

Mutationen im Gen LGI1 pr&auml;disponieren zu eine erbliche Epilepsie-Syndrom und ist das erste gen im Zusammenhang mit dieser Krankheit, die kein Ionen-Kanal-Protein kodiert wird. Im Zebrafisch gibt es zwei Paralogs der LGI1 gen, lgi1a und lgi1b. Niederschlag des lgi1a f&uuml;hrt zu einer Beschlagnahme-wie Hyperaktivit&auml;t-Ph&auml;notyp mit zugeordneten entwicklungsbedingte Anomalien gekennzeichnet durch zellul&auml;re Verlust in die Augen und das Gehirn. Wir haben jetzt Niederschlag Morphants f&uuml;r das lgi1b-gen, die auch entwicklungsbedingte Anomalien zeigen, sondern zeigen eine Beschlagnahme-&auml;hnliches Verhalten nicht generiert. Der auff&auml;lligste Ph&auml;notyp betrifft stattdessen erhebliche Erweiterung der Ventrikel (Hydrozephalus). Wie f&uuml;r die lgi1a Morphants gezeigt, sind jedoch lgi1b Morphants auch f&uuml;r PTZ-induzierte Hyperaktivit&auml;t sensibilisiert. Die verschiedenen Ph&auml;notypen zwischen den zwei lgi1 Morphants unterst&uuml;tzt ein Subfunctionalization-Modell f&uuml;r die zwei Paralogs.

Verlust von Zebrafish lgi1b f&uuml;hrt zu Hydrozephalus und Sensibilisierung f&uuml;r Pentetrazol induzierte Beschlagnahme-&auml;hnliches Verhalten.

Mutazioni nel gene LGI1 predispongono a una sindrome di epilessia ereditaria ed &egrave; il primo gene associato a questa malattia che non codifica una proteina di canale ionico. In zebrafish, ci sono due paralogs del gene LGI1, lgi1a e lgi1b. Atterramento di lgi1a provoca un fenotipo simile sequestro iperattivit&agrave; con associate anomalie dello sviluppo caratterizzate da perdita cellulare nel cervello e gli occhi. Noi ora abbiamo generato morphants d&#39;arresto per il gene lgi1b che inoltre mostrano anomalie dello sviluppo ma non mostrano un comportamento simile al sequestro. Invece, il fenotipo pi&ugrave; eclatante coinvolge significativo ampliamento dei ventricoli (idrocefalo). Come indicato per la morphants lgi1a, tuttavia, lgi1b morphants sono anche sensibilizzato all&#39;iperattivit&agrave; PTZ-indotta. Dei fenotipi differenti tra le due morphants lgi1 supportano un modello subfunctionalization per i due paralogs.

Perdita di zebrafish lgi1b conduce a idrocefalo e sensibilizzazione alla pentylenetetrazol indotta da grippaggio-come comportamento.

LGI1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x907A;&#x4F1D;&#x6027;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306E;&#x7D20;&#x56E0;&#x3068;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;LGI1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;2&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;lgi1a&#x3068;lgi1b&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76EE;&#x3084;&#x8133;&#x5185;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x767A;&#x9054;&#x7570;&#x5E38;&#x3068;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;lgi1a&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3082;&#x767A;&#x9054;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x306A;&#x3044;lgi1b&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;morphants&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x5BA4;&#xFF08;&#x6C34;&#x982D;&#x75C7;&#xFF09;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x62E1;&#x5927;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; lgi1a&#x306E;morphants&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x793A;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;lgi1b&#x306E;morphants&#x3082;&#x3001;PTZ&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x306B;&#x611F;&#x4F5C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 2 LGI1 morphants&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;subfunctionalization&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Lgi1b&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x30DA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x8A98;&#x767A;&#x3051;&#x3044;&#x308C;&#x3093;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x52D5;&#x4F5C;&#x306B;&#x6C34;&#x982D;&#x75C7;&#x3068;&#x611F;&#x306B;&#x5C0E;&#x304F;

LGI1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804; &#xC131; &#xAC04; &#xC9C8; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xC744; predispose &#xD558; &#xACE0; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBBC0;&#xB85C;&#xC774; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;. Zebrafish, LGI1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;, lgi1a &#xBC0F; lgi1b&#xC758; &#xB450; paralogs&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lgi1a&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xBC1C;&#xC791; &#xAC19;&#xC740; &#xACFC;&#xB2E4; &#xD615; &#xB208;&#xACFC; &#xB1CC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC774;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xB610;&#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC1C;&#xC791; &#xAC19;&#xC740; &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; lgi1b &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; morphants&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xAC00;&#xC7A5; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xD615; &#xC2EC; (&#xC218; &#xB450; &#xC99D;)&#xC758; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xD655;&#xB300;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; lgi1a morphants&#xC640; &#xAC19;&#xC774;,, lgi1b morphants&#xB294; &#xB610;&#xD55C; PTZ &#xC720;&#xB3C4; &#xACFC;&#xB2E4;&#xC5D0; sensitized &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; lgi1 morphants &#xC0AC;&#xC774; &#xB2E4;&#xB978; &#xACE0;&#xAE30; &#xB450; paralogs&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; subfunctionalization &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish lgi1b&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xC218; &#xB450; &#xC99D;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; pentylenetetrazol&#xC5D0; &#xACFC;&#xBBFC;&#xC131; &#xBC1C;&#xC791; &#xAC19;&#xC740; &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las mutaciones en el gen LGI1 predisponen a un s&#xED;ndrome epil&#xE9;ptico hereditario y es el primer gen asociado con esta enfermedad que no codifica para una prote&#xED;na de canal i&#xF3;nico. En el pez cebra, hay dos paralogs del gen LGI1, lgi1a y lgi1b. Derribo de los resultados de lgi1a en un fenotipo hiperactividad similares a convulsiones asociadas con anormalidades del desarrollo que se caracterizan por la p&#xE9;rdida celular en los ojos y el cerebro. Hemos generado morphants desmontables para el gen lgi1b que tambi&#xE9;n muestran anormalidades en el desarrollo, pero no muestran un comportamiento convulsiva. En cambio, el fenotipo m&#xE1;s llamativo es el de la ampliaci&#xF3;n significativa de los ventr&#xED;culos (hidrocefalia). Como se muestra por las morphants lgi1a, sin embargo, morphants lgi1b son tambi&#xE9;n sensibles a PTZ inducida por la hiperactividad. Los fenotipos diferentes entre los dos lgi1 morphants apoyar un modelo subfunctionalization para los dos paralogs.

La p&#xE9;rdida de pez cebra Lgi1b lleva a la hidrocefalia y la sensibilizaci&#xF3;n a pentilentetrazol inducida apoderamiento un comportamiento similar al

&#x8BB0;&#x8005;&#x6839;&#x636E;&#x5316;&#x9A8C;&#x80CC;&#x540E;&#x8BB8;&#x591A;&#x7684;&#x9AD8;&#x901A;&#x91CF;&#x7B5B;&#x9009; &#xFF08;HTS&#xFF09; &#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x90FD;&#x662F;&#x9650;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x673A;&#x4F53;&#x9AD8;&#x6E29;&#x8D85;&#x5BFC;&#x65B9;&#x6CD5;&#x91CF;&#x5316;&#x8BB0;&#x8005;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x968F;&#x65F6;&#x95F4;&#x79F0;&#x4E3A;&#xFF0C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x8BB0;&#x8005;&#x91CF;&#x5316;&#x4E2A;&#x522B;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; (ARQiv) &#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;ARQiv &#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E;&#x5F53;&#x524D;&quot;&#x9AD8;&#x5185;&#x5BB9;&quot;(&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x5171;&#x7126;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#xFF09; &#x6574;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x7B5B;&#x9009;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x79CD;&#x7EAF;&#x7CB9;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6570;&#x636E;&#x91C7;&#x96C6;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x6539;&#x5584;&#x3002;ARQiv &#x9C81;&#x68D2;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F53;&#x5185;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x9176;&#x6807;&#x4EEA;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#xFF1A; 1&#xFF09; &#x8FC5;&#x901F;;&#x5B9E;&#x73B0;&#x771F;&#x6B63;&#x7684;&#x9AD8;&#x6E29;&#x8D85;&#x5BFC;&#x80FD;&#x529B; (&#x5373; &gt; &#x6BCF;&#x5929;&#x4E94;&#x4E07;&#x4E2A;&#x5355;&#x4F4D;)&#x3001; 2) &#x518D;&#x73B0; &#xFF1B;&#x5B9E;&#x73B0;&#x9AD8;&#x6E29;&#x8D85;&#x5BFC;&#x517C;&#x5BB9;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8D28;&#x91CF; (&#x5373;&#xFF0C;Z&#39;-&ge;0.5 &#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF09;&#xFF0C;&#x548C; 3&#xFF09; &#x7075;&#x6D3B; &#xFF1B;&#x9002;&#x4E8E;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x3001; &#x5E7C;&#x866B;&#x6216;&#x5C11;&#x5E74;&#x51E0;&#x4E4E;&#x4EFB;&#x4F55;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8BB0;&#x8005;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;ARQiv &#x7528;&#x4E8E;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x8FDB;&#x884C;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#xFF1A; 1&#xFF09; &#x624B;&#x673A;&#x53F7;&#x7801; &#xFF1B;&#x635F;&#x5931;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B; &#xFF08;&#x80F0;&#x817A; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#xFF09;&#xFF0C;2&#xFF09; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012; &#xFF1B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE3;&#x8C22;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6D3B;&#x6027;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; Notch &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x548C; 3&#xFF09; &#xFF1B;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;ARQiv &#x662F;&#x591A;&#x624D;&#x591A;&#x827A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x65B9;&#x4FBF;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4FBF;&#x4E8E;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x8865;&#x5145;&#x5F53;&#x524D;&quot;&#x9AD8;&#x5185;&#x5BB9;&quot;&#x6574;&#x4E2A;&#x673A;&#x4F53;&#x7B5B;&#x67E5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x5C42;&#x4F53;&#x5185;&#x9AD8;&#x6E29;&#x8D85;&#x5BFC;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x5E73;&#x53F0;&#x7684;&#x751F;&#x6D3B;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x548C;/&#x6216;&#x5316;&#x5B66;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3002;

&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x8BB0;&#x8005;&#x91CF;&#x5316;&#x4F53;&#x5185;&#xFF1A; &#x9AD8;&#x901A;&#x91CF;&#x7B5B;&#x9009;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8BB0;&#x8005;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x653E;&#x5C04;&#x514D;&#x75AB;&#x5206;&#x6790;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Reporter-based assays underlie many high-throughput screening (HTS) platforms, but most are limited to in vitro applications. Here, we report a simple whole-organism HTS method for quantifying changes in reporter intensity in individual zebrafish over time termed, Automated Reporter Quantification in vivo (ARQiv). ARQiv differs from current "high-content" (e.g., confocal imaging-based) whole-organism screening technologies by providing a purely quantitative data acquisition approach that affords marked improvements in throughput. ARQiv uses a fluorescence microplate reader with specific detection functionalities necessary for robust quantification of reporter signals in vivo. This approach is: 1) Rapid; achieving true HTS capacities (i.e., >50,000 units per day), 2) Reproducible; attaining HTS-compatible assay quality (i.e., Z'-factors of â‰¥0.5), and 3) Flexible; amenable to nearly any reporter-based assay in zebrafish embryos, larvae, or juveniles. ARQiv is used here to quantify changes in: 1) Cell number; loss and regeneration of two different fluorescently tagged cell types (pancreatic beta cells and rod photoreceptors), 2) Cell signaling; relative activity of a transgenic Notch-signaling reporter, and 3) Cell metabolism; accumulation of reactive oxygen species. In summary, ARQiv is a versatile and readily accessible approach facilitating evaluation of genetic and/or chemical manipulations in living zebrafish that complements current "high-content" whole-organism screening methods by providing a first-tier in vivo HTS drug discovery platform.

Automated reporter quantification in vivo: high-throughput screening method for reporter-based assays in zebrafish.

Reporter essais bas&#xE9;s sur les sous-tendent de nombreux criblage &#xE0; haut d&#xE9;bit (HTS) plates-formes, mais la plupart sont limit&#xE9;s &#xE0; des applications in vitro. Nous rapportons ici un simple organisme entier m&#xE9;thode HTS pour quantifier les changements de l&#x26;#39;intensit&#xE9; journaliste chez le poisson z&#xE8;bre personne au fil du temps appel&#xE9;, Quantification automatis&#xE9;e Reporter in vivo (ARQiv). ARQiv diff&#xE8;re de courant &#x26;quot;&#xE0; forte teneur&#x26;quot; (par exemple, l&#x26;#39;imagerie confocale &#xE0; base de) l&#x26;#39;ensemble de l&#x26;#39;organisme des technologies de d&#xE9;pistage en offrant une approche purement quantitative des donn&#xE9;es d&#x26;#39;acquisition qui offre des am&#xE9;liorations notables en termes de d&#xE9;bit. ARQiv utilise un lecteur de microplaques &#xE0; fluorescence avec des fonctionnalit&#xE9;s de d&#xE9;tection sp&#xE9;cifiques n&#xE9;cessaires pour la quantification robuste des signaux reporter in vivo. Cette approche est la suivante: 1) rapide; la r&#xE9;alisation de v&#xE9;ritables capacit&#xE9;s HTS (c.-&#xE0;-&#x26;gt; 50.000 unit&#xE9;s par jour), 2) reproductible; atteindre la qualit&#xE9; de dosage HTS-compatibles (c.-&#xE0;-Z&#x26;#39;-facteurs de &#x2265; 0,5), et 3) flexible; pr&#xEA;tent &#xE0; presque n&#x26;#39;importe quel dosage journaliste bas&#xE9; en embryons de poisson z&#xE8;bre, de larves ou des juv&#xE9;niles. ARQiv est utilis&#xE9; ici pour quantifier les changements dans le nombre de cellules: 1), la perte et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des deux diff&#xE9;rents types de cellules marqu&#xE9;es par fluorescence (cellules b&#xEA;ta du pancr&#xE9;as et les photor&#xE9;cepteurs de tige), 2) la signalisation cellulaire, l&#x26;#39;activit&#xE9; relative d&#x26;#39;un transg&#xE9;nique Notch-signalisation journaliste, et 3 Le m&#xE9;tabolisme cellulaire); accumulation d&#x26;#39;esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne. En r&#xE9;sum&#xE9;, ARQiv est une approche souple et facilement accessible en facilitant l&#x26;#39;&#xE9;valuation des manipulations g&#xE9;n&#xE9;tiques et / ou chimiques chez le poisson z&#xE8;bre vivre qui compl&#xE8;te actuelles &#x26;quot;haute teneur&#x26;quot; des m&#xE9;thodes de d&#xE9;pistage organisme entier en fournissant un premier niveau in vivo HTS plate-forme de d&#xE9;couverte de m&#xE9;dicaments.

Quantification in vivo automatis&#xE9; Reporter: M&#xE9;thode de d&#xE9;pistage &#xE0; haut d&#xE9;bit pour les tests bas&#xE9;s sur Reporter chez le poisson z&#xE8;bre

Reporter-basierte Assays zugrunde liegen viele Hochdurchsatz-screening (HTS) Plattformen, aber die meisten sind auf in-vitro-Anwendungen beschr&auml;nkt. Hier berichten wir &uuml;ber eine einfache ganz-Organismus-HTS-Methode zur Quantifizierung von &Auml;nderungen in der Intensit&auml;t der Reporter in einzelnen Zebrafisch im Laufe der Zeit genannt, automatisierte Reporter Quantifizierung in-vivo (ARQiv). ARQiv unterscheidet sich von der aktuellen &quot;High-Content&quot; (z.B., konfokale Darstellung-gegr&uuml;ndete) ganze-Organismus screening-Technologien durch einen rein quantitativen Daten Akquisition Ansatz, die deutliche Verbesserungen im Durchsatz bietet. ARQiv verwendet ein Fluoreszenz-Mikroplatten mit spezifischen Nachweis Funktionalit&auml;ten f&uuml;r robuste Quantifizierung der Reporter Signale in-vivo notwendig. Dieser Ansatz ist: 1) Rapid; wahre HTS-Kapazit&auml;ten zu erreichen (d. h. &gt; 50.000 Einheiten pro Tag), 2) reproduzierbare; HTS-kompatiblen Assay Qualit&auml;t zu erreichen (d. h. Z&#39;-Faktoren von &ge;0), und 3) flexibel; Parallelisierung auf nahezu jedem Reporter-gegr&uuml;ndeten Probe im Zebrafisch-Embryonen, Larven oder Jungtiere. ARQiv wird hier verwendet, um &Auml;nderungen zu quantifizieren: 1) Handy-Nummer; Verlust und Regeneration von zwei verschiedenen Leuchtstoff markiert Zelltypen (pankreatischen Betazellen und Stab Photorezeptoren), 2) Zelle signalisieren; Zellstoffwechsel relative Aktivit&auml;t von transgenen Notch-Signalisierung Reporter und 3); Anh&auml;ufung reaktiver Sauerstoffspezies. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen ist ARQiv ein vielseitig und leicht zug&auml;nglichen Ansatz, die Bewertung der genetischen und/oder chemischen Manipulationen in lebenden Zebrafisch, das aktuelle &quot;High-Content&quot; ganz-Organismus Screening-Methoden erg&auml;nzt durch eine erst-Reihe in-vivo HTS Droge Entdeckung Plattform zu erleichtern.

Automatisierte Reporter Quantifizierung in-vivo: Hochdurchsatz-screening-Methode f&uuml;r Reporter basierende Assays im Zebrafisch.

Reporter-based assays sono alla base di molte piattaforme di high-throughput screening (HTS), ma la maggior parte sono limitata alle applicazioni in vitro. Riportiamo un semplice metodo HTS intero organismo per quantificare le modifiche nell&#39;intensit&agrave; di reporter in zebrafish individuale nel corso del tempo definito, Automated Reporter quantificazione in vivo (ARQiv). ARQiv differisce dalla corrente &quot;ad alto contenuto&quot; (ad es., confocale basata su imaging) intero-organismo di screening technologies fornendo un approccio di acquisizione dati puramente quantitativa che offre una marcata miglioramenti nella produttivit&agrave;. ARQiv utilizza un lettore di micropiastre fluorescenza con funzionalit&agrave; di rilevamento specifico necessaria per la quantificazione solida di segnali reporter in vivo. Questo approccio &egrave;: 1) rapida; raggiungere la vera capacit&agrave; HTS (cio&egrave; &amp;gt; 50.000 unit&agrave; al giorno), 2) riproducibili; raggiungere la qualit&agrave; di dosaggio HTS-compatibile (cio&egrave;, Z&#39;-fattori di &ge;0.5) e 3) flessibile; assoggettabile a quasi qualsiasi dosaggio basato su reporter in embrioni di zebrafish, larve o avannotti. ARQiv &egrave; qui utilizzato per quantificare le modifiche in: 1) Cell numero; perdita e rigenerazione di due diversi fluorescente tagged tipi di cellule (le cellule beta del pancreas e fotorecettori asta), 2) segnalazione delle cellule; metabolismo cellulare attivit&agrave; relativa di un reporter di segnalazione Notch transgenico e 3); accumulo di specie reattive dell&#39;ossigeno. In sintesi, ARQiv &egrave; un approccio versatile e facilmente accessibile, facilitando la valutazione delle manipolazioni genetiche e/o chimiche in zebrafish vivente che complementa attuali metodi di screening intero organismo &quot;ad alto contenuto&quot; fornendo una piattaforma di scoperta primo livello droga HTS in vivo.

Automatizzato di quantificazione di reporter in vivo: high-throughput screening method for reporter-based assays in zebrafish.

&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;HTS&#xFF09;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#xFF08;ARQiv&#xFF09;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7C21;&#x5358;&#x200B;&#x200B;&#x306A;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x751F;&#x7269;HTS&#x6CD5;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 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&#x26;quot;&#x9AD8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x26;quot;&#x5168;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x6D3B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x6C4E;&#x7528;&#x6027;&#x3068;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

in vivo&#x3067;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#xFF1A;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x6CD5;

&#xAE30;&#xC790; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xAE30;&#xCD08; &#xB9CE;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; (HTS) &#xC0C1;&#xC601; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xCCB4; &#xC678; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB418; &#xB098;, &#xC790;&#xB3D9;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xC790; &#xBD80; &#xB7C9; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAC1C;&#xBCC4; zebrafish&#xC758; &#xAE30;&#xC790;&#xAC00; &#xAC15;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654; (ARQiv) &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC804;&#xCCB4; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; HTS &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. ARQiv &#xC804;&#xB958; &quot;&#xB192;&#xC740; &#xB0B4;&#xC6A9;&quot;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, confocal &#xC601;&#xC0C1; &#xAE30;&#xBC18;) &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xC804;&#xCCB4; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xAC1C;&#xC120;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC21C;&#xC218; &#xD558; &#xAC8C; &#xC591;&#xC801; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC218;&#xC9D1; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xC220; &#xC2EC;&#xC0AC;. ARQiv &#xD615;&#xAD11; &#xBBF8; &#xD310; &#xD310;&#xB3C5;&#xAE30;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD2B9;&#xC815; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAE30;&#xC790; &#xC2E0;&#xD638; vivo&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC815;&#xB7C9;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740;: 1) &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C;; &#xC0AC;&#xC2E4; HTS &#xC6A9;&#xB7C9; &#xB2EC;&#xC131; (&#xC989;, &amp;gt; &#xD558;&#xB8E8; 50, 000 &#xB2E8;&#xC704;), 2) Reproducible; HTS &#xD638;&#xD658; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xD488;&#xC9C8; &#xB2EC;&#xC131; (&#xC989;, Z&#39;-&#xC774;&#xB4E4; &#xC694;&#xC778;), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 3) &#xC720;&#xB3D9;; zebrafish &#xD0DC;&#xC544;, &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;, &#xB610;&#xB294; &#xCCAD;&#xC18C;&#xB144; &#xAE30;&#xC790; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC758;&#xBB34;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. ARQiv &#xC5EC;&#xAE30; &#xBCC0;&#xD654; &#xCC99;&#xB3C4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294;: 1) &#xD734;&#xB300; &#xBC88;&#xD638;; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB450; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD; (&#xCDCC; &#xC7A5; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xB9C9;&#xB300; &#xB300;&#xB1CC;) &#xD0DC;&#xADF8; 2) &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638;; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB178;&#xCE58; &#xC2E0;&#xD638; &#xAE30;&#xC790;&#xC640; 3&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; &#xD65C;&#xB3D9;) &#xC138;&#xD3EC; &#xB300;&#xC0AC;; &#xBC18;&#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B8; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, Arqiv&#xC740; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xACC4;&#xCE35; vivo&#xC5D0;&#xC11C; HTS &#xC57D;&#xBB3C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xC5EC; &#xD604;&#xC7AC; &quot;&#xB192;&#xC740; &#xB0B4;&#xC6A9;&quot; &#xC804;&#xCCB4; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xC120;&#xBCC4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC644; &#xC0DD;&#xD65C; zebrafish&#xC758; &#xC720;&#xC804; &#xBC0F;/&#xB610;&#xB294; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xC870;&#xC791;&#xC758; &#xD3C9;&#xAC00; &#xCD09;&#xC9C4; &#xB2E4;&#xC591; &#xD558; &#xACE0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC811;&#xADFC; &#xC774;&#xB2E4;.

&#xC790;&#xB3D9;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xC790; &#xBD80; &#xB7C9; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;: &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xBC29;&#xBC95; zebrafish&#xC758; &#xAE30;&#xC790; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2EC;&#xC0AC;.

Basados &#x200B;&#x200B;en ensayos de reportero-la base de muchas de cribado de alto rendimiento (HTS) las plataformas, pero la mayor&#xED;a se limitan a aplicaciones in vitro. Aqu&#xED;, se presenta un sencillo de todo el organismo, m&#xE9;todo de HTS para cuantificar los cambios en la intensidad de reportero en el pez cebra individuo con el tiempo llamado, cuantificaci&#xF3;n automatizada de Reportero en vivo (ARQiv). ARQiv difiere de la actual &#x26;quot;alto contenido&#x26;quot; (por ejemplo, confocal de im&#xE1;genes basado en) todo el organismo, las tecnolog&#xED;as de detecci&#xF3;n, proporcionando un enfoque puramente cuantitativo de adquisici&#xF3;n de datos que ofrece notables mejoras en el rendimiento. ARQiv utiliza un lector de microplacas de fluorescencia con funcionalidades de detecci&#xF3;n espec&#xED;ficos necesarios para la cuantificaci&#xF3;n de las se&#xF1;ales de s&#xF3;lida reportero en vivo. Este enfoque es el siguiente: 1) r&#xE1;pida, logrando verdaderas capacidades de superconductores de alta temperatura (es decir,&#x26;gt; 50.000 unidades por d&#xED;a), 2) reproducible, que alcanzan HTS-compatible con la calidad del ensayo (es decir, Z &#x26;#39;factores de &#x2265; 0,5), y flexible 3), susceptibles de a casi cualquier reportero de ensayo basado en los embriones de pez cebra, larvas o juveniles. ARQiv se utiliza aqu&#xED; para cuantificar los cambios en: 1) el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas, la p&#xE9;rdida y la regeneraci&#xF3;n de dos tipos diferentes de c&#xE9;lulas marcado con fluorescencia (c&#xE9;lulas beta del p&#xE1;ncreas y los fotorreceptores de varilla), 2) la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular, la actividad relativa de un transg&#xE9;nico Notch de se&#xF1;alizaci&#xF3;n reportero, y 3 ) el metabolismo celular, la acumulaci&#xF3;n de especies reactivas del ox&#xED;geno. En resumen, ARQiv es un enfoque vers&#xE1;til y f&#xE1;cilmente accesible para facilitar la evaluaci&#xF3;n de las manipulaciones gen&#xE9;ticas y / o qu&#xED;micas en el pez cebra vida que complementa actuales de &#x26;quot;alto contenido&#x26;quot; organismo entero m&#xE9;todos de cribado, proporcionando un primer nivel in vivo plataforma HTS descubrimiento de f&#xE1;rmacos.

La cuantificaci&#xF3;n automatizada de Reportero en vivo: de alto rendimiento basados &#x200B;&#x200B;en el m&#xE9;todo de detecci&#xF3;n de Periodista-Los ensayos en el pez cebra

Article	Year
Transient requirement for ganglion cells during assembly of retinal synaptic layers. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 14973290	2004
Laminar circuit formation in the vertebrate retina. Progress in brain research\| PubMed ID: 15581704	2005
Targeting of amacrine cell neurites to appropriate synaptic laminae in the developing zebrafish retina. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 16258076	2005
In vivo imaging reveals dendritic targeting of laminated afferents by zebrafish retinal ganglion cells. Neuron\| PubMed ID: 17114046	2006
Knockdown of zebrafish Lgi1a results in abnormal development, brain defects and a seizure-like behavioral phenotype. Human molecular genetics\| PubMed ID: 20819949	2010
Loss of zebrafish lgi1b leads to hydrocephalus and sensitization to pentylenetetrazol induced seizure-like behavior. PloS one\| PubMed ID: 22053218	2011
Automated reporter quantification in vivo: high-throughput screening method for reporter-based assays in zebrafish. PloS one\| PubMed ID: 22238673	2012

Jeff S. Mumm

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