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Expression, Detergent Solubilization, and Purification of a Membrane Transporter, the MexB Multidrug Resistance Protein

Multidrug resistance (MDR), the ability of a cancer cell or pathogen to be resistant to a wide range of structurally and functionally unrelated ...

University of Illinois Chicago - UIC

Phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x9176; (EC) &#x50AC;&#x5316;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x3001; &#x53EF;&#x9006;&#x7684; D-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6; 6 &#x78F7;&#x9178;&#x5BF9; D-&#x679C;&#x7CD6; 6-&#x78F7;&#x9178;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6B65;&#x3002;&#x53CD;&#x5E94;&#x673A;&#x7406;&#x4E0E;&#x8D28;&#x5B50;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6D89;&#x53CA;&#x9178;&#x78B1;&#x50AC;&#x5316;&#x548C;&#x6536;&#x76CA;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E2D;&#x95F4;&#x7684; cis-enediol(ate)&#x3002;5-&#x78F7;&#x9178;-D-arabinonohydroxamic &#x9178; (5PAH) &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4E2D;&#x95F4;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x53EA;&#x5B83;&#x5DF2;&#x53D6;&#x4EE3; C1 &#x7684;&#x6C2E;&#x539F;&#x5B50;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;5PAH &#x662F;&#x6700;&#x4F73;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4E0E; K(i) 2 x 10(-7) M &#x7684;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x5154; phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x9176; 5PAH 1.9 A &#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x4E0E;&#x7EDC;&#x5408;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x4E0E;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x7684;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; 5PAH &#x652F;&#x6301; Glu 357 C1 &#x548C; C2 &#x4E4B;&#x95F4;&#x4F20;&#x8F93;&#x8D28;&#x5B50;&#x548C; Arg 272 &#x5E2E;&#x52A9;&#x7A33;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x673A;&#x7406;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x5B83;&#x8FD8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E4B;&#x95F4; O1 &#x548C; O2 &#x7684;&#x8D28;&#x5B50;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

5-&#x78F7;&#x9178;-D-arabinonohydroxamic &#x9178;&#x7EDC;&#x5408;&#x5154; phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x9176;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

Phosphoglucose isomerase (EC ) catalyzes the second step in glycolysis, the reversible isomerization of D-glucose 6-phosphate to D-fructose 6-phosphate. The reaction mechanism involves acid-base catalysis with proton transfer and proceeds through a cis-enediol(ate) intermediate. 5-Phospho-D-arabinonohydroxamic acid (5PAH) is a synthetic small molecule that resembles the reaction intermediate, differing only in that it has a nitrogen atom in place of C1. Hence, 5PAH is the best inhibitor of the isomerization reaction reported to date with a K(i) of 2 x 10(-7) M. Here we report the crystal structure of rabbit phosphoglucose isomerase complexed with 5PAH at 1.9 A resolution. The interaction of 5PAH with amino acid residues in the enzyme active site supports a model of the catalytic mechanism in which Glu-357 transfers a proton between C1 and C2 and Arg-272 helps stabilize the intermediate. It also suggests a mechanism for proton transfer between O1 and O2.

The crystal structure of rabbit phosphoglucose isomerase complexed with 5-phospho-D-arabinonohydroxamic acid.

Phosphoglucose isom&#xE9;rase (CE) catalyse la deuxi&#xE8;me &#xE9;tape dans la glycolyse, l&#x26;#39;isom&#xE9;risation r&#xE9;versible de D-glucose-6-phosphate &#xE0; D-fructose-6-phosphate. Le m&#xE9;canisme de r&#xE9;action implique catalyse acide-base avec le transfert de proton et de produits &#xE0; travers un cis-&#xE8;nediol (ATE) interm&#xE9;diaire. 5-phospho-D-arabinonohydroxamic acide (5PAH) est une petite mol&#xE9;cule synth&#xE9;tique semblable au interm&#xE9;diaire r&#xE9;actionnel, diff&#xE9;rant seulement en ce qu &#x26;#39;il comporte un atome d&#x26;#39;azote &#xE0; la place de C1. Par cons&#xE9;quent, 5PAH est le meilleur inhibiteur de la r&#xE9;action d&#x26;#39;isom&#xE9;risation signal&#xE9;e &#xE0; ce jour avec un K (i) de 2 x 10 (-7) M. Nous rapportons ici la structure cristalline de la phosphoglucose isom&#xE9;rase lapin complex&#xE9; avec 5PAH &#xE0; 1,9 &#xC5; de r&#xE9;solution. L&#x26;#39;interaction du 5PAH avec les r&#xE9;sidus d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s dans le site actif de l&#x26;#39;enzyme supporte un mod&#xE8;le du m&#xE9;canisme de catalyseur dans laquelle Glu-357 transferts une protons entre C1 et C2 et Arg-272 permet de stabiliser l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire. Il sugg&#xE8;re &#xE9;galement un m&#xE9;canisme de transfert de proton entre O1 et O2.

La structure cristalline de la phosphoglucose isom&#xE9;rase lapin Complex&#xE9; avec le 5-phospho-D-acide arabinonohydroxamic

Die Kristallstruktur von Kaninchen Phosphoglucoseisomerase komplexiert mit 5-Phosho-D-arabinonohydroxamic S&#xE4;ure.

Fosfoglucosio-isomerasi (CE) catalizza il secondo passo nella glicolisi, l&#39;isomerizzazione reversibile di D-glucosio 6-fosfato di D-fruttosio 6-fosfato. Il meccanismo di reazione coinvolge la catalisi acido-base con trasferimento di protone e procede attraverso un cis-enediol(ate) intermedio. Acido 5-fosfo-D-arabinonohydroxamic (5PAH) &egrave; una piccola molecola sintetica che ricorda la reazione intermedia, differendo solo nel senso che ha un atomo di azoto al posto di C1. Quindi, 5PAH &egrave; il miglior inibitore della reazione di isomerizzazione segnalata fino ad oggi con un K(i) di 2 x 10(-7) M. Qui riportiamo la struttura cristallina del fosfoglucosio coniglio-isomerasi complessato con 5PAH a risoluzione 1,9. L&#39;interazione del 5PAH con residui dell&#39;amminoacido del sito attivo enzimatico supporta un modello del meccanismo catalitico in cui Glu-357 trasferisce un protone tra C1 e C2 e Arg-272 aiuta a stabilizzare l&#39;intermedio. Suggerisce inoltre un meccanismo per il trasferimento protonico tra O1 e O2.

La struttura di cristallo del fosfoglucosio coniglio-isomerasi complessato con acido 5-fosfo-D-arabinonohydroxamic.

&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;EC&#xFF09;&#x306F;&#x89E3;&#x7CD6;&#x7CFB;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6BB5;&#x968E;&#x3001;D-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x7570;&#x6027;&#x5316;D-&#x30D5;&#x30EB;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B9; - &#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;ATE&#xFF09;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x79FB;&#x52D5;&#x3068;&#x53CE;&#x76CA;&#x3068;&#x306E;&#x9178;&#x5869;&#x57FA;&#x89E6;&#x5A92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 5-&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-D-arabinonohydroxamic&#x9178;&#xFF08;5PAH&#xFF09;&#x306F;C1&#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x7A92;&#x7D20;&#x539F;&#x5B50;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x70B9;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3001;&#x53CD;&#x5FDC;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5408;&#x6210;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;5PAH&#x304C;2&#xD7;10&#xFF08;-7&#xFF09;M&#x306E;K&#xFF08;i&#xFF09;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;1.9&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3067;5PAH&#x3068;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3068;5PAH&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;Glu-357&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;C1&#x3068;C2&#x3068;Arg-272&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x89E6;&#x5A92;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;O1&#x3068;O2&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x79FB;&#x52D5;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;5  - &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-D-arabinonohydroxamic&#x9178;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;

Phosphoglucose isomerase (EC) &#xBD84;&#xD574;, D-&#xACFC; &#xB2F9; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xC744; D-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xC758; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC218;&#xC758; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4; catalyzes. &#xBC18;&#xC751; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0B0;-&#xC5FC;&#xAE30; &#xCD09;&#xB9E4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xAC04; cis-enediol(ate)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 5 &#xC778; D arabinonohydroxamic &#xC0B0; (5PAH)&#xC740; &#xC911;&#xAE09;, C1 &#xB300;&#xC2E0; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC6D0;&#xC790;&#xB294; &#xADF8;&#xB9CC; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC18;&#xC751; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xD569;&#xC131; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, 5PAH 2 x 10(-7) M k(i)&#xC640; &#xB0A0;&#xC9DC;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC218; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD1A0;&#xB07C; phosphoglucose isomerase complexed 1.9 A &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; 5pah&#xB85C;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 5PAH &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xD638;&#xB294; Glu-357 c 1&#xACFC; C2 &#xC0AC;&#xC774; &#xC591;&#xC131;&#xC790;&#xB97C; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558; &#xACE0; Arg-272 &#xC911;&#xAC04;&#xC744; &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCD09;&#xB9E4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. O 1&#xC640; o 2 &#xC0AC;&#xC774; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD1A0;&#xB07C; phosphoglucose isomerase complexed 5 &#xC778; D arabinonohydroxamic &#xC0B0;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;.

Fosfoglucosa isomerasa (CE) cataliza el segundo paso en la glic&#xF3;lisis, la isomerizaci&#xF3;n reversible de D-glucosa 6-fosfato a D-fructosa-6-fosfato. El mecanismo de reacci&#xF3;n implica cat&#xE1;lisis &#xE1;cido-base con la transferencia de protones y procede a trav&#xE9;s de un cis-enodiol (ate) intermedio. 5-fosfo-D-arabinonohydroxamic &#xE1;cido (5PAH) es una mol&#xE9;cula peque&#xF1;a sint&#xE9;tica que se asemeja a la reacci&#xF3;n intermedia, diferenci&#xE1;ndose &#xFA;nicamente en que tiene un &#xE1;tomo de nitr&#xF3;geno en lugar de C1. Por lo tanto, 5PAH es el mejor inhibidor de la reacci&#xF3;n de isomerizaci&#xF3;n inform&#xF3; al d&#xED;a con una K (i), de 2 x 10 (-7) M. A continuaci&#xF3;n se presenta la estructura cristalina de isomerasa conejo fosfoglucosa complejado con 5PAH a 1,9 Una resoluci&#xF3;n. La interacci&#xF3;n de 5PAH con residuos de amino&#xE1;cidos en el sitio activo de la enzima compatible con un modelo del mecanismo catal&#xED;tico en el que Glu-357 transfiere un prot&#xF3;n entre C1 y C2 y Arg 272-ayuda a estabilizar el intermedio. Tambi&#xE9;n sugiere un mecanismo para la transferencia de protones entre O1 y O2.

La estructura cristalina de isomerasa Conejo fosfoglucosa Complejado con 5-fosfo-D-&#xE1;cido arabinonohydroxamic

Phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x9176; (pgi &#x751F;&#x6210; &#xFF1B;EC 5.3.1.9) &#x662F;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x9176;&#xFF0C;&#x5B83;&#x50AC;&#x5316;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684; D-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;-6-&#x78F7;&#x9178;&#x5BF9; D-&#x679C;&#x7CD6;-6-&#x78F7;&#x9178;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x81EA;&#x5206;&#x6CCC;&#x8FD0;&#x52A8;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x8C03;&#x89E3;&#x5458;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; neuroleukin &#x540C;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x914D;&#x4F53;&#x5728;&#x5176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x62A5;&#x544A;&#x65B0;&#x7684; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5154; PGI (rPGI)&#x3002;&#x7ED3;&#x6784;&#x89E3;&#x51B3;&#x5728; 1.8A &#x540C;&#x6676;&#x9010;&#x6B65;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x89E3;&#x51B3;&#x7684; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5305;&#x542B; 6-&#x78F7;&#x9178;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x5728;&#x5176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9; rPGI &#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x7684;&#x51B3;&#x8BAE;&#x3002;&#x5BF9;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x65B0;&#x7ED3;&#x6784;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4F7F;&#x9274;&#x5B9A;&#x5728;&#x5E95;&#x7269;&#x6216;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5730;&#x533A;&#x542B;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA; 209-215&#xFF0C;245 259 &#x548C; 385-389 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5951;&#x5408;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x4EE5;&#x524D;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x5F00;&#x73AF;&#x548C;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B; 513 521 &#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x87BA;&#x65CB;&#x8D70;&#x5411;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x886C;&#x5E95;&#x4E4B;&#x95F4;&#x53D1;&#x751F;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;Liganded &#x548C; unliganded &#x7ED3;&#x6784;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x8BE5;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x53CA;&#x9644;&#x8FD1;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x53E3;&#x888B;&#x91CC;&#x3002;

&#x5728;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684; phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x9176;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

Phosphoglucose isomerase (PGI; EC 5.3.1.9) is the second enzyme in glycolysis, where it catalyzes the isomerization of D-glucose-6-phosphate to D-fructose-6-phosphate. It is the same protein as autocrine motility factor, differentiation and maturation mediator, and neuroleukin. Here, we report a new X-ray crystal structure of rabbit PGI (rPGI) without ligands bound in its active site. The structure was solved at 1.8A resolution by isomorphous phasing with a previously solved X-ray crystal structure of the rPGI dimer containing 6-phosphogluconate in its active site. Comparison of the new structure to previously reported structures enables identification of conformational changes that occur during binding of substrate or inhibitor molecules. Ligand binding causes an induced fit of regions containing amino acid residues 209-215, 245-259 and 385-389. This conformational change differs from the change previously reported to occur between the ring-opening and isomerization steps, in which the helix containing residues 513-521 moves toward the bound substrate. Differences between the liganded and unliganded structures are limited to the region within and close to the active-site pocket.

Conformational changes in phosphoglucose isomerase induced by ligand binding.

Phosphoglucose isom&#xE9;rase (PGI; CE 5.3.1.9) est la seconde enzyme de la glycolyse, o&#xF9; elle catalyse l&#x26;#39;isom&#xE9;risation du D-glucose-6-phosphate &#xE0; D-fructose-6-phosphate. Il s&#x26;#39;agit de la m&#xEA;me prot&#xE9;ine en tant que facteur motilit&#xE9; autocrine, la diff&#xE9;renciation et la maturation de m&#xE9;diateur, et neuroleukin. Ici, nous rapportons une nouvelle structure cristalline aux rayons X de lapin IGP (rPGI) sans ligands li&#xE9;s &#xE0; son site actif. La structure a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;solue &#xE0; la r&#xE9;solution de 1.8A par isomorphe progressive avec une structure cristalline aux rayons X d&#xE9;j&#xE0; r&#xE9;solu du dim&#xE8;re contenant rPGI 6-phosphogluconate dans son site actif. Comparaison de la nouvelle structure &#xE0; des structures d&#xE9;j&#xE0; signal&#xE9;s permet d&#x26;#39;identifier les changements de conformation qui se produisent lors de la fixation de mol&#xE9;cules de substrat ou d&#x26;#39;un inhibiteur. La fixation du ligand provoque un ajustement induit des r&#xE9;gions contenant des r&#xE9;sidus d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s 209-215, 245-259 et 385-389. Ce changement conformationnel diff&#xE8;re de la variation ant&#xE9;rieurement &#xE0; se produire entre les &#xE9;tapes d&#x26;#39;ouverture de cycle et d&#x26;#39;isom&#xE9;risation, dans lequel l&#x26;#39;h&#xE9;lice contenant des r&#xE9;sidus 513-521 se d&#xE9;place vers le substrat li&#xE9;. Diff&#xE9;rences entre les structures ligand&#xE9; et sans ligand sont limit&#xE9;es &#xE0; la r&#xE9;gion &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur et &#xE0; proximit&#xE9; de la poche du site actif.

Des changements conformationnels de la phosphoglucose isom&#xE9;rase induites par la liaison du ligand

Konformations&#xE4;nderungen in Phosphoglucoseisomerase durch Ligandenbindung induziert.

Fosfoglucosio-isomerasi (IGP; CE 5.3.1.9) &egrave; il secondo enzima nella glicolisi, dove catalizza l&#39;isomerizzazione del D-glucosio-6-fosfato di D-fruttosio-6-fosfato. &Egrave; la stessa proteina come fattore di motilit&agrave; di autocrine, differenziazione e maturazione mediatore e neuroleukin. Riportiamo una nuova struttura di cristallo dei raggi x del coniglio IGP (rPGI) senza ligandi legati nel suo sito attivo. La struttura &egrave; stato risolto in 1.8A risoluzione fasatura isomorfe con una struttura di cristallo dei raggi x precedentemente risolta del dimero rPGI contenente 6-fosfogluconato nel suo sito attivo. Confronto della nuova struttura alle strutture precedentemente riportati consente di identificare i cambiamenti conformazionali che si verificano durante l&#39;associazione di molecole di substrato o inibitore. Associazione ligando provoca un adattamento indotto delle regioni contenenti residui dell&#39;amminoacido 209-215, 245-259 e 385-389. Questo cambio conformazionale differisce dal cambiamento precedentemente riportato a verificarsi tra i passaggi di anello-apertura e isomerizzazione, in cui l&#39;elica contenenti residui 513-521 si sposta verso il substrato legato. Le differenze tra le strutture liganded e unliganded sono limitate alla regione all&#39;interno e in prossimit&agrave; della tasca del sito attivo.

Alterazioni conformazionali fosfoglucosio-isomerasi indotta dal legame del ligando.

&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PGI&#x3001;EC 5.3.1.9&#xFF09;&#x306F;&#x3001;D-&#x30D5;&#x30EB;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;D-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x89E3;&#x7CD6;&#x7CFB;&#x3067;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x5206;&#x6CCC;&#x578B;&#x904B;&#x52D5;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x6210;&#x719F;&#x306E;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;neuroleukin&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x304C;&#x306A;&#x304F;&#x3066;&#x3082;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;PGI&#xFF08;rPGI&#xFF09;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;X&#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;6  - &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x542B;&#x3080;rPGI&#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3057;&#x3001;X&#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x6BB5;&#x968E;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x5F62;&#x3067;1.8A&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x57FA;&#x8CEA;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x6642;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;209&#x304B;&#x3089;215&#x307E;&#x3067;&#x3001;245&#x304B;&#x3089;259&#x3068;385&#x304B;&#x3089;389&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x9069;&#x5408;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x958B;&#x74B0;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4E2D;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x57FA;&#x677F;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;513&#x304B;&#x3089;521&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x5909;&#x5316;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x975E;&#x7D50;&#x5408;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x5185;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x8FD1;&#x63A5;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x8D77;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x5909;&#x5316;

Phosphoglucose isomerase (PGI; EC 5.3.1.9) &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xAC83; catalyzes D-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;-6-&#xC778;&#xC0B0; D&#xACFC; &#xB2F9; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xC744; &#xC218; &#xBD84;&#xD574;, &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC774;&#xB2E4;. Autocrine &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC694;&#xC778;, &#xBD84;&#xD654; &#xBC0F; &#xC131;&#xC219; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790; &#xBC0F; neuroleukin&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; ligands&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xD1A0;&#xB07C; PGI (rPGI)&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; x-&#xC120; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 1.8 A&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; isomorphous 6-phosphogluconate&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; rPGI &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xC758; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD574;&#xACB0;&#xB41C; x-&#xC120; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD574;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xAE30;&#xD310; &#xB610;&#xB294; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD558;&#xBA74; 209-215, 245-259&#xC640; 385-389 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xC801;&#xD569; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xAE30;&#xD310; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB4E4;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 513-521 &#xB098;&#xC120; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC18;&#xC9C0; &#xC5F4;&#xACE0; &#xC218; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xBCC0;&#xD654; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. Liganded &#xBC0F; unliganded &#xAD6C;&#xC870; &#xAC04;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xC2DC;&#xAC04;&#xACFC; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC8FC;&#xBA38;&#xB2C8;&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Phosphoglucose isomerase &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;.

Fosfoglucosa isomerasa (PGI; CE 5.3.1.9) es la segunda enzima en la glic&#xF3;lisis, donde cataliza la isomerizaci&#xF3;n de D-glucosa-6-fosfato a D-fructosa-6-fosfato. Es la misma prote&#xED;na como factor de motilidad autocrino, la diferenciaci&#xF3;n y maduraci&#xF3;n mediador, y neuroleukin. Aqu&#xED;, se presenta una nueva estructura de rayos X de cristales de conejo IGP (rPGI) sin ligandos unidos en su sitio activo. La estructura se resolvi&#xF3; en la resoluci&#xF3;n 1.8A por isomorfa gradual con una estructura cristalina previamente resuelto de rayos X del d&#xED;mero rPGI que contiene 6-fosfogluconato en su sitio activo. Comparaci&#xF3;n de la nueva estructura a las estructuras ya se ha informado permite la identificaci&#xF3;n de los cambios conformacionales que ocurren durante la uni&#xF3;n de mol&#xE9;culas de sustrato o inhibidor. Uni&#xF3;n ligando provoca un ajuste inducido de las regiones que contienen residuos de amino&#xE1;cidos 209-215, 245-259 y 385-389. Este cambio conformacional difiere del cambio ya se ha informado que se produzca entre los pasos de apertura del anillo y la isomerizaci&#xF3;n, en la que la h&#xE9;lice que contiene los residuos 513-521 se mueve hacia el sustrato enlazado. Las diferencias entre las estructuras y liganded unliganded se limitan a la regi&#xF3;n dentro y cerca de la bolsa del sitio activo.

Los cambios conformacionales en fosfoglucosa isomerasa inducidos por el ligando se une

&#x5C06;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x5F88;&#x96BE;&#x89E3;&#x91CA;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x6CE8;&#x91CA;&#x86CB;&#x767D;&#x5E8F;&#x5217;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4E00;&#x79CD;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x4EE5; &#39;&#x6708;&#x5149;&#39;&#xFF0C;&#x6216;&#x6267;&#x884C;&#x591A;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x663E;&#x7136;&#x65E0;&#x5173;&#xFF0C;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#x603B;&#x7ED3;&#x4E86;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53CA;&#x751F;&#x5316;&#x9014;&#x5F84;&#x5728;&#x764C;&#x75C7;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F8B;&#x5B50;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5305;&#x62EC;&#x591A;&#x79CD;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x673A;&#x5236;&#x529F;&#x80FD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x8FDB;&#x884C;&#x5207;&#x6362;&#x3002;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x5229;&#x4E8E;&#x673A;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5982;&#x901A;&#x8FC7;&#x534F;&#x8C03;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x6F5C;&#x5728;&#x53EF;&#x66F4;&#x96BE;&#x786E;&#x5B9A;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x86CB;&#x767D;&#xFF1A; &#x57FA;&#x56E0;&#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x4F8B;&#x5B50;&#x3002;

Adding to the difficulty of interpreting the human genome sequence and annotating protein sequence databases is the observation that a single protein can 'moonlight' or perform multiple, apparently unrelated, functions. This review summarizes examples of moonlighting proteins in cellular activities and biochemical pathways important in cancer and other diseases. The proteins include a variety of combinations of functions and mechanisms to switch between functions. Moonlighting proteins can be beneficial to the organism, such as by coordinating cellular activities. However, moonlighting proteins can potentially make more difficult the determination of the molecular mechanisms of disease and the process of rational drug design.

Multifunctional proteins: examples of gene sharing.

Ajout de la difficult&#xE9; de l&#x26;#39;interpr&#xE9;tation de la s&#xE9;quence du g&#xE9;nome humain et l&#x26;#39;annotation des bases de donn&#xE9;es de s&#xE9;quences de prot&#xE9;ines est l&#x26;#39;observation que d&#x26;#39;une seule prot&#xE9;ine peut &#x26;#39;Moonlight&#x26;#39; ou ex&#xE9;cuter des fonctions multiples, apparemment sans rapport,. Cette revue r&#xE9;sume les exemples de prot&#xE9;ines au noir dans les activit&#xE9;s cellulaires et les voies biochimiques importantes dans le cancer et d&#x26;#39;autres maladies. Les prot&#xE9;ines comprennent une vari&#xE9;t&#xE9; de combinaisons de fonctions et les m&#xE9;canismes pour basculer entre les fonctions. Prot&#xE9;ines au noir peut &#xEA;tre b&#xE9;n&#xE9;fique pour l&#x26;#39;organisme, tels que par la coordination des activit&#xE9;s cellulaires. Toutefois, les prot&#xE9;ines de cumul d&#x26;#39;emplois peut potentiellement rendre plus difficile la d&#xE9;termination des m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires de la maladie et le processus de conception rationnelle de m&#xE9;dicaments.

Prot&#xE9;ines multifonctionnelles: Exemples de partage Gene

Multifunktionale Proteine: Beispiele f&#xFC;r Gen-Sharing.

Aggiunta la difficolt&agrave; di interpretare la sequenza del genoma umano e l&#39;annotazione di banche dati di sequenza della proteina &egrave; l&#39;osservazione che una singola proteina pu&ograve; &#39;moonlight&#39; o eseguire multiple, apparentemente estranei, funzioni. Questa recensione riassume esempi di proteine praticate in attivit&agrave; cellulare e vie biochimiche importante nel cancro e altre malattie. Le proteine includono una variet&agrave; di combinazioni di funzioni e meccanismi per passare tra le funzioni. Praticate le proteine possono essere benefiche per l&#39;organismo, come ad esempio coordinando le attivit&agrave; cellulari. Tuttavia, le proteine moonlighting possono potenzialmente rendere pi&ugrave; difficile la determinazione dei meccanismi molecolari di malattia e il processo di progettazione farmacologica razionale.

Proteine multifunzionali: esempi di condivisione di gene.

&#x30D2;&#x30C8;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x89E3;&#x91C8;&#x306E;&#x96E3;&#x3057;&#x3055;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x914D;&#x5217;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x6CE8;&#x91C8;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F; &#x26;quot;&#x6708;&#x5149;&#x26;quot;&#x3084;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3084;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x3084;&#x4ED6;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x526F;&#x696D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4F8B;&#x3092;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x6709;&#x76CA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x591C;&#x8972;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x56F0;&#x96E3;&#x306A;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x85AC;&#x7269;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF1A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x306E;&#x4F8B;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#39;&#xB2EC;&#xBE5B;&#39; &#xC218; &#xB610;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xC218;&#xD589; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD574;&#xC11D;&#xC758; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xBD84;&#xBA85;&#xD788; &#xBB34;&#xAD00;, &#xAE30;&#xB2A5;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; &#xC694;&#xC57D; moonlighting &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC554; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC608;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB4F1; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0AC;&#xC774; &#xC804;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC870;&#xD569;. Moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB4F1; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xC77C;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6CC;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F; &#xD569;&#xB9AC;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xC57D; &#xC124;&#xACC4; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xACB0;&#xC815;.

&#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;: &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xACF5;&#xC720;&#xC758; &#xC608;.

Adem&#xE1;s de la dificultad de interpretar la secuencia del genoma humano y la anotaci&#xF3;n de bases de datos de secuencias de prote&#xED;nas es la observaci&#xF3;n de que una sola prote&#xED;na puede &#x26;quot;luz de la luna &#x26;#39;o realizar m&#xFA;ltiples funciones, aparentemente sin relaci&#xF3;n,. Esta revisi&#xF3;n resume ejemplos de prote&#xED;nas de noche en las actividades celulares y v&#xED;as bioqu&#xED;micas importantes en el c&#xE1;ncer y otras enfermedades. Las prote&#xED;nas incluyen una variedad de combinaciones de funciones y mecanismos para cambiar entre funciones. Prote&#xED;nas Moonlighting pueden ser beneficiosos para el organismo, como por ejemplo mediante la coordinaci&#xF3;n de las actividades celulares. Sin embargo, las prote&#xED;nas de pluriempleo potencialmente puede hacer m&#xE1;s dif&#xED;cil la determinaci&#xF3;n de los mecanismos moleculares de la enfermedad y el proceso de dise&#xF1;o racional de f&#xE1;rmacos.

Las prote&#xED;nas multifuncionales: Ejemplos de distribuci&#xF3;n gen&#xE9;tica

&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x786E;&#x5B9A;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x3001; &#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#xFF0C;&#x5148;&#x524D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684; &#39;&#x65B0;&#39; &#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5355;&#x4E00;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E;&#x591A;&#x4E2A;&#x51FD;&#x6570;&#x770B;&#x8D77;&#x6765;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x5B9E;&#x5F88;&#x591A;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; &#39;&#x6708;&#x5149;&#39;&#xFF0C;&#x6216;&#x5728;&#x673A;&#x4F53;&#x4E2D;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x5C06;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x548C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5DF2;&#x77E5;&#x6708;&#x5149;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x5B9E;&#x4F8B;&#x5C06;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x6F5C;&#x5728;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;

&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#xFF1A; &#x5B66;&#x4E60;&#x65B0;&#x6280;&#x5DE7;&#x7684;&#x65E7;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;

Recently, several laboratories identifying proteins involved in the complex processes of replication, transcription and tumor suppression found that the 'new' protein they discovered had another, previously identified, function. A single protein with multiple functions might seem surprising, but there are actually many cases of proteins that 'moonlight', or have more than one role in an organism. As well as adding to the number and types of proteins that are known to moonlight, these new examples add to our understanding of the potential importance of moonlighting proteins.

Moonlighting proteins: old proteins learning new tricks.

R&#xE9;cemment, plusieurs laboratoires d&#x26;#39;identification des prot&#xE9;ines impliqu&#xE9;es dans les processus complexes de la suppression de la r&#xE9;plication, la transcription et la tumeur a constat&#xE9; que la &#xAB;nouvelle&#xBB;, ils ont d&#xE9;couvert la prot&#xE9;ine avait un autre, pr&#xE9;c&#xE9;demment identifi&#xE9;e, la fonction. Une seule prot&#xE9;ine avec de multiples fonctions peut sembler surprenant, mais il ya effectivement beaucoup de cas de prot&#xE9;ines que &#xAB;lune&#xBB;, ou avoir plus d&#x26;#39;un r&#xF4;le dans un organisme. Ainsi que l&#x26;#39;ajout du nombre et de types de prot&#xE9;ines qui sont connues au clair de lune, ces nouveaux exemples ajoutent &#xE0; notre compr&#xE9;hension de l&#x26;#39;importance potentielle de prot&#xE9;ines au noir.

Prot&#xE9;ines Moonlighting: vieilles prot&#xE9;ines apprendre de nouveaux trucs

Model und der Schn&#xFC;ffler Proteine: Proteine &#x200B;&#x200B;alten Erlernen neuer Tricks.

Recentemente, diversi laboratori, identificando le proteine coinvolte in complessi processi di replicazione, trascrizione e soppressione di tumore trovato che la proteina &#39;nuova&#39; scoprirono che aveva un altro, precedentemente identificato, funzione. Una singola proteina con funzioni multiple potrebbe sembrare sorprendente, ma ci sono effettivamente molti casi di proteine che &#39;moonlight&#39;, o che hanno pi&ugrave; di un ruolo in un organismo. Cos&igrave; come l&#39;aggiunta per il numero e i tipi di proteine che sono noti al chiaro di luna, questi nuovi esempi aggiungere alla nostra comprensione dell&#39;importanza potenziale di proteine moonlighting.

Moonlighting proteine: proteine vecchie imparare nuovi trucchi.

&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F; &#x26;quot;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x26;quot;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x5225;&#x306E;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5206;&#x304B;&#x3063;&#x8907;&#x88FD;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x9A5A;&#x304F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001; &#x26;quot;&#x6708;&#x5149;&#x26;quot;&#x305D;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x305D;&#x3053;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x6708;&#x660E;&#x304B;&#x308A;&#x306B;&#x3088;&#x304F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6570;&#x3068;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x4F8B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x526F;&#x696D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF1A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x5B66;&#x3076;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;

&#xCD5C;&#xADFC;, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xBCF5;&#xC81C;, &#xC804;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB610; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4; &#39;&#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4;&#39; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xACAC;, &#xAE30;&#xB2A5;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC678;, &#xD560;&#xC9C0;&#xB294; &#xBAA8;&#xB974;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#39;&#xB2EC;&#xBE5B;&#39;, &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB3C4; &#xB9CE;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC640; &#xB2EC;&#xBE5B;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC885;&#xB958;&#xB97C; &#xCD94;&#xAC00;, &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC608;&#xC81C; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;: &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD2B8;&#xB9AD;&#xC744; &#xD559;&#xC2B5; &#xD558;&#xB294; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;.

Recientemente, varios laboratorios de la identificaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas implicadas en los complejos procesos de supresi&#xF3;n de la replicaci&#xF3;n, transcripci&#xF3;n y tumor que se encuentra que el &#x26;quot;nuevo&#x26;quot; que descubrieron la prote&#xED;na ten&#xED;a otro, previamente identificados, la funci&#xF3;n. Una sola prote&#xED;na con m&#xFA;ltiples funciones puede parecer sorprendente, pero hay casos en realidad muchas de las prote&#xED;nas que &#x26;#39;la luna&#x26;#39;, o tener m&#xE1;s de una funci&#xF3;n en un organismo. As&#xED; como la adici&#xF3;n a la cantidad y el tipo de prote&#xED;nas que se sabe que la luna, estos ejemplos se suman a nuestra comprensi&#xF3;n de la importancia potencial de las prote&#xED;nas de pluriempleo.

Luz de luna Prote&#xED;nas: Las prote&#xED;nas Antiguo aprendiendo nuevos trucos

&#x7518;&#x9732; isomerases (PMI) &#x7531;&#x7EC4;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#xFF1A; &#x7B2C;&#x4E00;&#x7C7B;&#x3001; &#x4E8C;&#x7C7B;&#x548C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; Pmi&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x53EF;&#x9006;&#x5F02;&#x6784;&#x5316; D-&#x7518;&#x9732;&#x7CD6; 6-&#x78F7;&#x9178; (M6P) &#x548C; D-&#x679C;&#x7CD6; 6-&#x78F7;&#x9178; (F6P)&#xFF0C;&#x4F46;&#x5171;&#x4EAB;&#x5F88;&#x5C11;&#x6216;&#x6CA1;&#x6709;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A; Pmi (1) &#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3001; &#x9175;&#x6BCD;&#x548C;&#x751F;&#x5B58;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x5E76;&#x4E14; (2) &#x4ECE;&#x51E0;&#x79CD;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x5728; PMI &#x9176;&#x4E0D;&#x5171;&#x4EAB;&#x4EBA;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x5E8F;&#x5217;&#x8EAB;&#x4EFD;&#xFF0C;Pmi &#x4E00;&#x76F4;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x9776;&#x70B9;&#x3002;&#x7406;&#x6027;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x5F3A;&#x70C8;&#x9700;&#x8981;&#x6F84;&#x6E05;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684; Pmi &#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x548C;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x548C;&#x6676;&#x4F53;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x6240;&#x6709; Pmi &#x4ECD;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x86EE;&#x8352;&#x4E4B;&#x5730;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x919B;&#x7CD6;&#x7CD6;&#x7C7B; isomerases &#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x9879;&#x76EE;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6B64;&#x62A5;&#x544A;&#x5206;&#x522B;&#x4E00;&#x548C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E8C;&#x3001; Pmi &#x4ECE;&#x9762;&#x5305;&#x9175;&#x6BCD;&#x548C;&#x94DC;&#x7EFF;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x3001; &#x7EB8;&#x5F20;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;5-&#x78F7;&#x9178;-D-arabinonohydroxamic &#x9178; (5PAH) &#x7684; phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x9176; (PGI) &#x6700;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x662F;&#x6700;&#x4F73;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4EE5;&#x5F80;&#x4EFB;&#x4F55;&#x65F6;&#x5019;&#x90FD;&#x62A5;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E00;&#x548C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E8C;&#x3001; PMI &#x50AC;&#x5316;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x5230; F6P M6P&#x3002;5PAH &#x5177;&#x6709;&#x6052;&#x5B9A;&#x81F3;&#x5C11; 3 &#x6570;&#x91CF;&#x7EA7;&#x8F83;&#x4EE5;&#x524D;&#x62A5;&#x544A;&#x7684; PMI &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x6291;&#x5236;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x9AD8;&#x80FD;&#x4E2D;&#x95F4;&#x6A21;&#x62DF;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x9176;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5206;&#x5B50; 5-&#x78F7;&#x9178;-D-arabinonate (5PAA)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5F3A;&#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x5242; pgi &#x751F;&#x6210;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53D1;&#x73B0;&#x5B83;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x59A8;&#x788D;&#x4EFB;&#x4F55; PMI&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x90FD;&#x7B26;&#x5408; PMI &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x7684;&#x91D1;&#x5C5E;&#x8F85;&#x9176;&#x53D1;&#x6325;&#x50AC;&#x5316;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

I &#x578B;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x53CA;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x95F4;&#x6A21;&#x62DF; 5-&#x78F7;&#x9178;-D-arabinonohydroxamic &#x9178;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x7518;&#x9732;&#x7CD6; isomerases &#x652F;&#x6301;&#x50AC;&#x5316;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x91D1;&#x5C5E;&#x7684;&#x8F85;&#x9176;&#x3002;

The phosphomannose isomerases (PMI) comprise three families of proteins: type I, type II, and type III PMIs. Members of all three families catalyze the reversible isomerization of D-mannose 6-phosphate (M6P) and D-fructose 6-phosphate (F6P) but share little or no sequence identity. Because (1) PMIs are essential for the survival of several microorganisms, including yeasts and bacteria, and (2) the PMI enzymes from several pathogens do not share significant sequence identity to the human protein, PMIs have been considered as potential therapeutic targets. Elucidation of the catalytic and regulatory mechanisms of the different types of PMIs is strongly needed for rational species-specific drug design. To date, inhibition and crystallographic studies of all PMIs are still largely unexplored. As part of our research program on aldose-ketose isomerases, we report in this paper the evaluation of two new inhibitors of type I and type II PMIs from baker's yeast and Pseudomonas aeruginosa, respectively. We found that 5-phospho-D-arabinonohydroxamic acid (5PAH), which is the most potent inhibitor of phosphoglucose isomerase (PGI), is by far the best inhibitor ever reported of both type I and type II PMI-catalyzed isomerization of M6P to F6P. 5PAH, which has an inhibition constant at least 3 orders of magnitude smaller than that of previously reported PMI inhibitors, may be the first high-energy intermediate analogue inhibitor of the enzymes. We also tested the related molecule 5-phospho-D-arabinonate (5PAA), which is a strong competitive inhibitor of PGI, and found that it does not inhibit either PMI. All together, our results are consistent with a catalytic role for the metal cofactor in PMI activity.

Inhibition of type I and type II phosphomannose isomerases by the reaction intermediate analogue 5-phospho-D-arabinonohydroxamic acid supports a catalytic role for the metal cofactor.

Les isom&#xE9;rases phosphomannose (PMI) comprennent trois familles de prot&#xE9;ines: le type I, type II, et le type III PMI. Les membres des trois familles de catalyser l&#x26;#39;isom&#xE9;risation r&#xE9;versible de D-mannose-6-phosphate (M6P) et D-fructose-6-phosphate (F6P) mais la part de peu ou pas d&#x26;#39;identit&#xE9; de s&#xE9;quence. Parce que (1) Les indices PMI sont essentielles pour la survie de plusieurs micro-organismes, y compris les levures et les bact&#xE9;ries, et (2) les enzymes PMI de plusieurs agents pathog&#xE8;nes ne partageons pas l&#x26;#39;identit&#xE9; de s&#xE9;quence significative avec la prot&#xE9;ine humaine, PMI ont &#xE9;t&#xE9; consid&#xE9;r&#xE9;s comme des cibles th&#xE9;rapeutiques potentielles. L&#x26;#39;&#xE9;lucidation des m&#xE9;canismes catalytiques et r&#xE9;glementaires des diff&#xE9;rents types de PMI est fortement n&#xE9;cessaire pour la conception rationnelle de m&#xE9;dicaments sp&#xE9;cifique &#xE0; l&#x26;#39;esp&#xE8;ce. &#xC0; ce jour, les &#xE9;tudes d&#x26;#39;inhibition et cristallographique de tous les indices PMI sont encore largement inexplor&#xE9;. Dans le cadre de notre programme de recherche sur l&#x26;#39;aldose-c&#xE9;tose isom&#xE9;rases, nous rapportons dans le pr&#xE9;sent document l&#x26;#39;&#xE9;valuation de deux nouveaux inhibiteurs de type I et type II PMI de levure de boulanger et Pseudomonas aeruginosa, respectivement. Nous avons trouv&#xE9; que le 5-phospho-D-arabinonohydroxamic acide (5PAH), qui est le plus puissant inhibiteur de la phosphoglucose isom&#xE9;rase (PGI), est de loin le meilleur inhibiteur jamais signal&#xE9; &#xE0; la fois de type I et type II PMI-catalys&#xE9;e isom&#xE9;risation du M6P &#xE0; F6P. 5PAH, qui a une constante d&#x26;#39;inhibition d&#x26;#39;au moins 3 ordres de grandeur plus faible que celle des inhibiteurs de la PMI signal&#xE9;s pr&#xE9;c&#xE9;demment, peut-&#xEA;tre le premier inhibiteur de haute &#xE9;nergie interm&#xE9;diaire analogique des enzymes. Nous avons &#xE9;galement test&#xE9; la mol&#xE9;cule apparent&#xE9;e 5-phospho-D-arabinonate (5PAA), qui est un inhibiteur comp&#xE9;titif de forte IGP, et j&#x26;#39;ai trouv&#xE9; qu&#x26;#39;il n&#x26;#39;inhibe pas soit PMI. Tous ensemble, nos r&#xE9;sultats sont coh&#xE9;rents avec un r&#xF4;le de catalyseur pour le cofacteur m&#xE9;tallique de l&#x26;#39;activit&#xE9; PMI.

L&#x26;#39;inhibition de Type I et Type II isom&#xE9;rases phosphomannose par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire r&#xE9;actionnel analogique 5-phospho-D-acide arabinonohydroxamic Prise en charge un r&#xF4;le de catalyseur pour le cofacteur m&#xE9;tallique

Die Hemmung der Typ I und Typ II Phosphomannose Isomerasen durch die Reaktion Zwischen-Analogon 5-Phospho-D-arabinonohydroxamic S&#xE4;ure unterst&#xFC;tzt eine katalytische Rolle f&#xFC;r die Metall-Cofaktor.

Il isomerases fosfomannosio (PMI) comprendono tre famiglie di proteine: tipo I, tipo II e tipo III le PMI. Membri di tutte e tre le famiglie catalizzano l&#39;isomerizzazione reversibile di D-mannosio 6-fosfato (M6P) e D-fruttosio 6-fosfato (F6P) ma condividono poca o nessuna identit&agrave; di sequenza. Perch&eacute; le PMI (1) sono essenziali per la sopravvivenza di diversi microrganismi, compresi i lieviti e batteri, e (2) gli enzimi PMI da diversi agenti patogeni non condividono identit&agrave; di sequenza significativa alla proteina umana, le PMI sono state considerate come potenziali bersagli terapeutici. Delucidazione dei meccanismi catalitici e regolamentazione dei tipi differenti di PMI &egrave; fortemente necessari per progettazione razionale farmacologica specie-specifici. Ad oggi, inibizione e studi cristallografici di tutte le PMI sono ancora in gran parte inesplorati. Come parte del nostro programma di ricerca su isomerases aldoso-chetoso, riportiamo in questa carta la valutazione di due nuovi inibitori di tipo I e tipo II PMI da lievito e Pseudomonas aeruginosa, rispettivamente. Abbiamo trovato che l&#39;acido 5-fosfo-D-arabinonohydroxamic (5PAH), che &egrave; il pi&ugrave; potente inibitore della fosfoglucosio-isomerasi (IGP), &egrave; di gran lunga il miglior inibitore mai segnalato di sia di tipo I e tipo II PMI-catalizzata di isomerizzazione del M6P a F6P. 5PAH, che ha un&#39;inibizione costanti almeno 3 ordini di grandezza pi&ugrave; piccoli di quello di precedentemente segnalato inibitori PMI, pu&ograve; essere il primo intermedio ad alta energia analogico inibitore degli enzimi. Abbiamo anche testato la molecola correlati 5-fosfo-D-arabinonate (5PAA), che &egrave; un forte inibitore competitivo della IGP, e ha trovato che non inibisce o PMI. Tutti insieme, i nostri risultati sono coerenti con un ruolo catalitico per il metallo cofattore nell&#39;attivit&agrave; PMI.

Inibizione di tipo I e tipo II fosfomannosio isomerases con l&#39;acido 5-fosfo-D-arabinonohydroxamic analogico intermedio reazione supporta un ruolo catalitico per il cofattore metallico.

phosphomannose&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PMI&#xFF09;&#x200B;&#x200B;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#xFF1A;I&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;II&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;III PMIS&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;D-&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;M6P&#xFF09;&#x3068;D-&#x30D5;&#x30EB;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;F6P&#xFF09;&#x304C;&#x5171;&#x6709;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x307E;&#x3063;&#x305F;&#x304F;&#x914D;&#x5217;&#x540C;&#x4E00;&#x6027;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x3002; &#xFF08;1&#xFF09;PMIS&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x3084;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#xFF08;2&#xFF09;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;PMI&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x540C;&#x4E00;&#x6027;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x3067;&#x3001;PMIS&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002; PMIS&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x89E3;&#x660E;&#x304C;&#x5F37;&#x304F;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x7A2E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x85AC;&#x7269;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x307E;&#x3067;&#x306B;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;PMIS&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x672A;&#x8E0F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C9;&#x30FC;&#x30B9; - &#x30B1;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x4E00;&#x74B0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;I&#x578B;&#x3068;II PMIS&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x30D1;&#x30F3;&#x9175;&#x6BCD;&#x3068;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;&#xFF08;Pseudomonas aeruginosa&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x672C;&#x8AD6;&#x6587;&#x3067;&#x306F;&#x578B;&#x306E;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PGI&#xFF09;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;5  - &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-D-arabinonohydroxamic&#x9178;&#xFF08;5PAH&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;M6P&#x306E;I&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;II&#x578B;PMI-&#x89E6;&#x5A92;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;F6P&#x3002;&#x963B;&#x5BB3;&#x5B9A;&#x6570;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;PMI&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;3&#x3064;&#x306E;&#x6CE8;&#x6587;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;5PAH&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;PGI&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x7AF6;&#x5408;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;5  - &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-D-arabinonate&#xFF08;5PAA&#xFF09;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x3069;&#x3061;&#x3089;PMI&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;PMI&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x91D1;&#x5C5E;&#x88DC;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x53CD;&#x5FDC;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x3067;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;I&#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;II Phosphomannose&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;5  - &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-D-arabinonohydroxamic&#x9178;&#x306F;&#x91D1;&#x5C5E;&#x88DC;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Phosphomannose isomerases (PMI) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; 3 &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;: &#xC720;&#xD615; I, &#xC720;&#xD615; II, &#xBC0F; III Pmis&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xC9C4;&#xC791; D &#xC2A4; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; (M6P) &#xBC0F; D-&#xACFC; &#xB2F9; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; (F6P)&#xC758; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC70;&#xC758; &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xD600; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; id &#xACF5;&#xC720;. (1) Pmis&#xB294; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC640; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; PMI &#xD6A8;&#xC18C; (2) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; id&#xB97C; &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; PMIs &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xD615;&#xC758; Pmis&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xBC0F; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xD569;&#xB9AC;&#xC801;&#xC778; &#xC885;&#xC758; &#xC2E0;&#xC57D; &#xC124;&#xACC4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB4E0; Pmis&#xC758; crystallographic &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD0D0;&#xD5D8;. Aldose ketose isomerases&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xC77C;&#xD658;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC800; &#xD574;&#xC81C;&#xC758; &#xD3C9;&#xAC00; I &#xBC0F; &#xC720;&#xD615; II PMIs &#xBCA0;&#xC774;&#xCEE4;&#xC758; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xBC0F; &#xB179; &#xB18D; &#xADE0;, &#xAC01;&#xAC01; &#xC885;&#xC774;. &#xADF8; 5 &#xC778; D arabinonohydroxamic &#xC0B0;&#xC744; (5PAH) phosphoglucose isomerase (PGI)&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;,&#xC740; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB450; &#xC720;&#xD615; I &#xBC0F; &#xC720;&#xD615; II PMI &#xCD09;&#xB9E4; &#xC218; F6P &#xD558; m6p&#xC758; &#xC801; &#xBCF4;&#xACE0;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 5PAH &#xC0C1;&#xC218; 3 &#xC8FC;&#xBB38; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC791;&#xC740; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758;&#xB294; PMI &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xD55C; &#xC800;&#xD574;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xACE0; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC911;&#xAC04; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB294; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xBD84;&#xC790; 5-&#xC778;-D-arabinonate (5PAA), PGI&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xACBD;&#xC7C1; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C;&#xC774; &#xACE0; &#xC5B4;&#xB290; PMI&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBAA8;&#xB450; &#xD568;&#xAED8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; PMI &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE08;&#xC18D; &#xACF5;&#xB3D9; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xC720;&#xD615; I &#xBC0F; &#xC720;&#xD615; II phosphomannose isomerases &#xBC18;&#xC751; &#xC911;&#xAC04; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; 5 &#xC778; D arabinonohydroxamic &#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE08;&#xC18D; &#xACF5;&#xB3D9; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;.

Los isomerasas fosfomanosa (PMI) constar&#xE1; de tres familias de prote&#xED;nas: tipo I, tipo II y tipo III PMI. Los miembros de las tres familias catalizan la isomerizaci&#xF3;n reversible de D-manosa-6-fosfato (M6P) y D-fructosa-6-fosfato (F6P) pero poca o ninguna acci&#xF3;n de identidad de secuencia. Debido a que (1) PMI son esenciales para la supervivencia de varios microorganismos, incluyendo levaduras y bacterias, y (2) las enzimas del PMI de varios pat&#xF3;genos no comparten una identidad de secuencia significativa a la prote&#xED;na humana, el PMI se han considerado como posibles dianas terap&#xE9;uticas. La elucidaci&#xF3;n de los mecanismos catal&#xED;ticos y regulatorios de los distintos tipos de PMI es muy necesario para el dise&#xF1;o racional de drogas espec&#xED;fico de la especie. Hasta la fecha, los estudios de inhibici&#xF3;n y cristalogr&#xE1;fica de todos los PMI est&#xE1;n todav&#xED;a en gran parte inexplorado. Como parte de nuestro programa de investigaci&#xF3;n sobre la aldosa-cetosa isomerasas, se presenta en este trabajo la evaluaci&#xF3;n de dos nuevos inhibidores de tipo I y tipo II PMI de levadura de panadero y Pseudomonas aeruginosa, respectivamente. Se encontr&#xF3; que el 5-fosfo-D-arabinonohydroxamic &#xE1;cido (5PAH), que es el inhibidor m&#xE1;s potente de fosfoglucosa isomerasa (PGI), es de lejos el mejor inhibidor de la alguna vez reportados, tanto de tipo I y tipo II PMI catalizada por isomerizaci&#xF3;n de M6P de F6P. 5PAH, que tiene una constante de inhibici&#xF3;n al menos 3 &#xF3;rdenes de magnitud menor que la de los inhibidores de PMI se inform&#xF3; anteriormente, puede ser el primero de alta energ&#xED;a inhibidor intermedio an&#xE1;logo de las enzimas. Tambi&#xE9;n probamos la mol&#xE9;cula relacionada con 5-fosfo-D-arabinonate (5PAA), que es un potente inhibidor competitivo de la IGP, y encontr&#xF3; que no inhibe ni PMI. En conjunto, nuestros resultados son consistentes con un papel de catalizador para el metal cofactor en la actividad de PMI.

La inhibici&#xF3;n de tipo I y tipo II Isomerasas fosfomanosa por la reacci&#xF3;n intermedia anal&#xF3;gica 5-fosfo-D-&#xE1;cido arabinonohydroxamic Soporta un papel de catalizador para el metal cofactor

&#x6700;&#x8FD1;&#x786E;&#x5B9A; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x5E2E;&#x52A9;&#x9610;&#x660E;&#x5982;&#x4F55;&#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#xFF0C;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5176;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6761;&#x4EF6;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x51FD;&#x6570;&#x4E4B;&#x95F4;&#x8FDB;&#x884C;&#x5207;&#x6362;&#x3002;AniI &#x5BFB;&#x6838;&#x9178;&#x5185;&#x5207;&#x9176;/maturase &#x548C;&#x5371;&#x9669;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176;/&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8BC1;&#x636E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5229;&#x7528;&#x5176;&#x591A;&#x79CD;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;DegP (HtrA) &#x86CB;&#x767D;&#x9176;/&#x4F34;&#x4FA3;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x8868;&#x660E;&#x5176;&#x4F34;&#x4FA3;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6709;&#x5173;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5982;&#x4F55;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5176;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5176;&#x5355;&#x529F;&#x80FD;&#x9176;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E; eta-&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;/&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x7EBF;&#x7D22;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x5176;&#x80FD;&#x529B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x540C;&#x65F6;&#x4E5F;&#x53EF;&#x80FD;&#x5E26;&#x6765;&#x4E0D;&#x5229;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x6784;&#x53D8;&#x5316;&#x5F71;&#x54CD;&#x5176;&#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

&#x591A;&#x4EFB;&#x52A1;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#xFF1A; &#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

Recently determined X-ray crystal structures of moonlighting proteins are helping to elucidate how a protein can evolve two different functions and, in some cases, switch between its two functions in response to cellular conditions. X-ray crystal structures of the I-AniI homing endonuclease/maturase and the PutA proline dehydrogenase/transcription factor have provided evidence that these proteins utilize separate protein surfaces for their multiple functions. Also, the structure of the DegP (HtrA) protease/chaperone has revealed information about the mechanism of its chaperone activity and suggests how the protein regulates its protease activity. Comparing the structure of eta-crystallin/retinal dehydrogenase with structures of its single-function enzyme homologs provides clues to changes in the protein structure that may have improved its ability to serve as a crystallin, but at the same time may have adversely affected its catalytic activity.

Molecular mechanisms for multitasking: recent crystal structures of moonlighting proteins.

R&#xE9;cemment d&#xE9;termin&#xE9;s structures cristallines aux rayons X des prot&#xE9;ines au noir contribuent &#xE0; &#xE9;lucider la fa&#xE7;on dont une prot&#xE9;ine peut &#xE9;voluer de deux fonctions diff&#xE9;rentes et, dans certains cas, passer entre ses deux fonctions en r&#xE9;ponse &#xE0; des conditions cellulaires. Structures cristallines des rayons X de l&#x26;#39;endonucl&#xE9;ase homing I-Anii / maturase et la proline d&#xE9;shydrog&#xE9;nase Puta / facteur de transcription ont fourni des preuves que ces prot&#xE9;ines d&#x26;#39;utiliser la surface des prot&#xE9;ines distinctes pour leurs multiples fonctions. En outre, la structure de la DegP (HtrA) prot&#xE9;ase / chaperon a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; des informations sur le m&#xE9;canisme de son activit&#xE9; chaperon et sugg&#xE8;re comment la prot&#xE9;ine r&#xE9;gule son activit&#xE9; prot&#xE9;ase. En comparant la structure de la d&#xE9;shydrog&#xE9;nase eta-crystallin/retinal avec les structures de ses homologues d&#x26;#39;enzymes &#xE0; fonction unique fournit des indices &#xE0; des changements dans la structure des prot&#xE9;ines qui peuvent avoir am&#xE9;lior&#xE9; sa capacit&#xE9; &#xE0; servir comme un cristallin, mais en m&#xEA;me temps peut-&#xEA;tre nui &#xE0; sa catalytique activit&#xE9;.

M&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires pour le multit&#xE2;che: structures cristallines r&#xE9;centes des prot&#xE9;ines au noir

Molekulare Mechanismen f&#xFC;r Multitasking: Letzte Kristallstrukturen von Proteinen Schwarzarbeit.

Recentemente determinati raggi x strutture di cristallo delle proteine moonlighting stanno aiutando a chiarire come una proteina pu&ograve; evolvere due funzioni diverse e, in alcuni casi, passare tra le sue due funzioni in risposta alle condizioni cellulari. Strutture di cristallo dei raggi x l&#39;homing-AniI endonucleasi/maturase e il PutA prolina deidrogenasi/trascrizione fattore hanno fornito evidenze che queste proteine utilizzano superfici proteina separato per le loro molteplici funzioni. Inoltre, la struttura della proteasi/chaperone DegP (HtrA) ha rivelato informazioni circa il meccanismo della sua attivit&agrave; di chaperone e suggerisce come la proteina regola la sua attivit&agrave; di proteasi. Confrontando la struttura di eta-crystallin/retinale deidrogenasi con strutture di suoi omologhi di singolo-funzione enzima fornisce indizi ai cambiamenti nella struttura della proteina che pu&ograve; hanno migliorato la sua capacit&agrave; di servire come un crystallin, ma allo stesso tempo potrebbe essere negativamente influenzato l&#39;attivit&agrave; catalitica.

Meccanismi molecolari per il multitasking: recenti strutture cristalline delle proteine moonlighting.

&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306E;X&#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x9593;&#x306E;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x9032;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x89E3;&#x660E;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; I-AniI&#x30DB;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;/ maturase&#x3068;&#x58F2;&#x6625;&#x5A66;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;/&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;X&#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3054;&#x3068;&#x306B;&#x5225;&#x3005;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;DegP&#xFF08;HtrA&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;/&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5358;&#x6A5F;&#x80FD;&#x9175;&#x7D20;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;eta-crystallin/retinal&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x306B;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x305F;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3078;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3002;

&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30BF;&#x30B9;&#x30AF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#xFF1A;&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xAD6C;&#xC870; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC9C4;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95;&#xACFC;, &#xC5B4;&#xB5A4; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; 2 &#xAC1C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0AC;&#xC774; &#xC804;&#xD658; &#xD558; &#xB3D5;&#xACE0; x &#xC120; &#xACB0;&#xC815;. AniI &#xC720;&#xB3C4; endonuclease/maturase &#xACE0;&#xB3C4; &#xB370; &#xCCB4; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xD6A8;&#xC18C;/&#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; x-&#xC120; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC6A9; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xBA74; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, DegP (HtrA) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;/&#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; &#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xAD50; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD6A8;&#xC18C; homologs&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xB3C4;&#xCC29; &#xC608;&#xC815;-crystallin/&#xB9DD;&#xB9C9; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; crystallin&#xB85C; &#xBD09;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB098;&#xC05C; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBA40;&#xD2F0;&#xD0DC;&#xC2A4;&#xD0B9; &#xC704;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;: moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xAD6C;&#xC870;.

Recientemente determinadas estructuras de rayos X de cristal de prote&#xED;nas pluriempleo est&#xE1;n ayudando a dilucidar c&#xF3;mo una prote&#xED;na puede evolucionar dos funciones diferentes y, en algunos casos, cambiar entre sus dos funciones en respuesta a las condiciones celulares. De rayos X las estructuras cristalinas de la endonucleasa I-homing Anii / maturase y el factor de la prolina deshidrogenasa Puta / transcripci&#xF3;n se han aportado pruebas de que estas prote&#xED;nas utilizan superficies distintas de prote&#xED;nas para sus m&#xFA;ltiples funciones. Adem&#xE1;s, la estructura de la degP (HtrA) proteasa / acompa&#xF1;ante ha revelado informaci&#xF3;n sobre el mecanismo de su actividad chaperona y sugiere c&#xF3;mo la prote&#xED;na regula su actividad de la proteasa. Comparando la estructura de la deshidrogenasa eta-crystallin/retinal con las estructuras de sus hom&#xF3;logos enzima sola funci&#xF3;n proporciona pistas a los cambios en la estructura de la prote&#xED;na que puede haber mejorado su capacidad para servir como una cristalina, pero al mismo tiempo pueden haber afectado adversamente su catal&#xED;tico actividad.

Mecanismos Moleculares para la multitarea: Estructuras recientes de cristal de prote&#xED;nas Moonlighting

&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x6210;&#x4E3A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x4E2D;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#xFF0C;multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x6B64;&#x4FE1;&#x606F;&#x6709;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x548C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5408;&#x4F5C;&#x4F19;&#x4F34;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x4EF7;&#x503C;&#x7684;&#x7EBF;&#x7D22;&#x6765;&#x63A8;&#x65AD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x548C;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&quot;&#x6708;&#x5149;&quot;&#xFF0C;&#x6216;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x51FD;&#x6570;&#xFF0C;&#x548C;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x9AD8;&#x96BE;&#x5EA6;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x529F;&#x80FD;&#x9274;&#x5B9A;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5BA1;&#x67E5;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7684;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x793A;&#x4F8B;&#x548C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x5982;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD;&#x786E;&#x5B9A;&#x5730;&#x70B9;&#x3001; &#x7EA7;&#x522B;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x53D8;&#x5F97;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x5149;&#x8C31;&#x6CD5;&#x6E90;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x975E;&#x5E38;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x67E5;&#x627E;&#x5176;&#x4ED6;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x4E8B;&#x5148;&#x5047;&#x8BBE;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x548C;&#x5BFB;&#x627E;&#x517C;&#x804C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;

Mass spectrometry has become one of the most important techniques in proteomics because of its use to identify the proteins found in different cell types, organelles, and multiprotein complexes. This information about protein location and binding partners can provide valuable clues to infer a protein's function. However, more and more proteins are found that "moonlight," or have more than one function, and the presence of moonlighting proteins can make more difficult the identification of protein function in those studies. This review discusses examples of moonlighting proteins and how their presence can affect the results of mass spectrometry studies that identify the locations, levels, and changes in protein expression. Although the presence of moonlighting proteins can complicate the results of those studies, mass spectrometry-derived protein-expression profiles potentially provides a very powerful method to find additional moonlighting proteins because they do not require a prior hypothesis of the protein's function.

Mass spectrometry and the search for moonlighting proteins.

La spectrom&#xE9;trie de masse est devenue l&#x26;#39;une des techniques les plus importants en prot&#xE9;omique en raison de son utilisation pour identifier les prot&#xE9;ines qui se trouvent dans diff&#xE9;rents types cellulaires, les organites, et des complexes multiprot&#xE9;iques. Cette information sur la localisation des prot&#xE9;ines et des partenaires de liaison peuvent fournir de pr&#xE9;cieux indices pour d&#xE9;duire la fonction d&#x26;#39;une prot&#xE9;ine. Toutefois, les prot&#xE9;ines sont de plus en plus constat&#xE9; que &#xAB;clair de lune&#xBB;, ou avoir plus d&#x26;#39;une fonction, et la pr&#xE9;sence de prot&#xE9;ines au noir peut rendre plus difficile l&#x26;#39;identification de la fonction des prot&#xE9;ines dans ces &#xE9;tudes. Cette revue discute des exemples de prot&#xE9;ines au noir et la fa&#xE7;on dont leur pr&#xE9;sence peut influer sur les r&#xE9;sultats des &#xE9;tudes de spectrom&#xE9;trie de masse qui permettent d&#x26;#39;identifier les endroits, les niveaux, et des changements dans l&#x26;#39;expression des prot&#xE9;ines. Bien que la pr&#xE9;sence de prot&#xE9;ines au noir peut compliquer les r&#xE9;sultats de ces &#xE9;tudes, spectrom&#xE9;trie de masse des prot&#xE9;ines d&#xE9;riv&#xE9;es profils d&#x26;#39;expression fournit potentiellement un moyen tr&#xE8;s puissant pour trouver des prot&#xE9;ines au noir suppl&#xE9;mentaires parce qu&#x26;#39;ils ne n&#xE9;cessitent pas une hypoth&#xE8;se ant&#xE9;rieure de la fonction de la prot&#xE9;ine.

Spectrom&#xE9;trie de masse et la recherche des prot&#xE9;ines de cumul d&#x26;#39;emplois

Die Massenspektrometrie und die Suche nach Schwarzarbeit Proteine.

A causa del suo uso per identificare le proteine che si trovano in diversi tipi di cellule, organelli e complessi multiproteici, spettrometria di massa &egrave; diventata una delle pi&ugrave; importanti tecniche di proteomica. Questa informazioni su partner posizione e associazione di proteine possono fornire indizi preziosi per dedurre la funzione della proteina. Tuttavia pi&ugrave; proteine si trovano quel &quot;moonlight&quot;, o avere pi&ugrave; di una funzione, e la presenza di proteine moonlighting pu&ograve; rendere pi&ugrave; difficile l&#39;identificazione della funzione della proteina in quegli studi. Questa recensione vengono illustrati esempi di proteine moonlighting e come la loro presenza pu&ograve; influenzare i risultati di studi di spettrometria di massa che identificano la localit&agrave;, livelli e cambiamenti nell&#39;espressione della proteina. Anche se la presenza di proteine moonlighting pu&ograve; complicare i risultati di tali studi, profili di espressione della proteina derivata da spettrometria di massa potenzialmente fornisce un metodo molto potente per trovare ulteriori proteine moonlighting perch&eacute; non necessitano di una prima ipotesi di funzione della proteina.

Spettrometria di massa e la ricerca di proteine moonlighting.

&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x591A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x60C5;&#x5831;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x63A8;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001; &#x26;quot;&#x6708;&#x5149;&#x26;quot;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x306E;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3089;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3061;&#x3001;&#x526F;&#x696D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x3088;&#x308A;&#x56F0;&#x96E3;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4F8B;&#x306F;&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x5834;&#x6240;&#x3001;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8907;&#x96D1;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x4E8B;&#x524D;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x526F;&#x696D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x691C;&#x7D22;

&#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;, organelles, &#xBC0F; multiprotein &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBBC0;&#xB85C; proteomics&#xC5D0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAE30;&#xC220; &#xC911; &#xD558;&#xB098; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC704;&#xCE58; &#xBC0F; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;&#xC774; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xCD94; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC810;&#xC810; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &quot;&#xB2EC;&#xBE5B;&quot; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xB354; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6CC;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xADF8; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0AC;&#xB840;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC704;&#xCE58;, &#xC218;&#xC900;, &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xB294; &#xADF8; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD574;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xD604; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC740; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC774;&#xC804; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00;&#xC801;&#xC778; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xCC3E;&#xC744; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La espectrometr&#xED;a de masas se ha convertido en una de las t&#xE9;cnicas m&#xE1;s importantes de la prote&#xF3;mica, debido a su uso para identificar las prote&#xED;nas que se encuentran en diferentes tipos de c&#xE9;lulas, org&#xE1;nulos, y complejos multiproteicos. Esta informaci&#xF3;n sobre la localizaci&#xF3;n de la prote&#xED;na y la uni&#xF3;n de compa&#xF1;eros pueden proporcionar valiosas pistas para inferir la funci&#xF3;n de una prote&#xED;na. Sin embargo, las prote&#xED;nas m&#xE1;s y m&#xE1;s se encontr&#xF3; que &#x26;quot;luna&#x26;quot;, o tener m&#xE1;s de una funci&#xF3;n, y la presencia de prote&#xED;nas pluriempleo puede hacer m&#xE1;s dif&#xED;cil la identificaci&#xF3;n de funci&#xF3;n de las prote&#xED;nas en estos estudios. Esta revisi&#xF3;n describe ejemplos de prote&#xED;nas pluriempleo y la forma en que su presencia puede afectar los resultados de los estudios de espectrometr&#xED;a de masas que identifican los lugares, los niveles y cambios en la expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na. Aunque la presencia de prote&#xED;nas pluriempleo puede complicar los resultados de dichos estudios, espectrometr&#xED;a de masas derivados de expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na-perfiles potencialmente proporciona un m&#xE9;todo muy eficaz para encontrar las prote&#xED;nas adicionales pluriempleo porque no requieren una hip&#xF3;tesis antes de la funci&#xF3;n de la prote&#xED;na.

Espectrometr&#xED;a de masas y la b&#xFA;squeda de prote&#xED;nas Moonlighting

Phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x9176; (PGI) &#x50AC;&#x5316;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684; D-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;-6-&#x78F7;&#x9178; (G6P) &#x548C; D-&#x679C;&#x7CD6;-6-&#x78F7;&#x9178; (F6P) &#x5728;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x548C;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x62A5;&#x544A;&#x7684; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790; PGI &#x4E0D;&#x914D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684; F6P&#xFF0C;&#x6216;&#x6A21;&#x4EFF;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53; enediol &#x4E2D;&#x95F4;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x5BFC;&#x81F4;&#x73AF;&#x5F00;&#x5E55;&#x7684;&#x62DF;&#x8BAE;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x53CD;&#x5E94;&#x6B65;&#x9AA4;&#x591A;&#x6B65;&#x6CD5;&#x50AC;&#x5316;&#x673A;&#x7406;&#x3002;&#x4E3A;&#x5E2E;&#x52A9;&#x5B8C;&#x6210;&#x6211;&#x4EEC;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6574;&#x4F53;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4FE1;&#x606F;&#x9700;&#x8981;&#x6709;&#x5173;&#x72B6;&#x6001;&#x7684; pgi &#x751F;&#x6210;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5F00;&#x73AF;&#x548C;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x6362;&#x8A00;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x677F;&#x6216;&#x6A21;&#x62DF;&#x7684;&#x6253;&#x5F00;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#x4E0E;&#x7EDC;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x5154; PGI &#x7EDC;&#x5408;&#x4E0E; D-&#x5C71;&#x68A8;&#x7CD6;&#x9187;-6-&#x78F7;&#x9178; &#xFF08;S6P&#xFF09; &#x5728; 2.0 A &#x5206;&#x8FA8;&#x7387; G6P&#xFF0C;&#x5F00;&#x94FE;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x6A21;&#x62DF;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x6B63;&#x5982;&#x770B;&#x5230; PGI/F6P &#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5728;&quot;out&quot;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5F62;&#x5F0F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8DB3;&#x591F;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x8BE5;&#x87BA;&#x65CB;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x53EA;&#x662F;&#x540E;&#x73AF;&#x5F00;&#x5E55; &#xFF08;&#x6216;&#x53EA;&#x662F;&#x524D;&#x73AF;&#x5C01;&#x95ED;&#xFF09; &#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x542B;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA; 512 520 &#x87BA;&#x65CB;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;S6P &#x914D;&#x4F53;&#x662F;&#x5728;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5982;&#x4EE5;&#x524D;&#x770B;&#x5230;&#x6A21;&#x4EFF;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53; enediol &#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x3002;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x4F7F;&#x914D;&#x4F53;&#x4E0E; Glu357&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x8D28;&#x5B50;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x9636;&#x6BB5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;PGI/S6P &#x7ED3;&#x6784;&#x8868;&#x793A;&#x6784;&#x8C61;&#x7684;&#x9176;&#x548C;&#x73AF;&#x6253;&#x5F00; &#xFF08;&#x6216;&#x5173;&#x95ED;&#x73AF;&#xFF09; &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x6B65;&#x548C;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E2E;&#x52A9;&#x5B8C;&#x6210; PGI &#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x673A;&#x7406;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

&#x5154; phosphoglucose &#x7EDC;&#x5408;&#x4E0E; D-&#x5C71;&#x68A8;&#x7CD6;&#x9187;-6-&#x78F7;&#x9178;&#xFF0C;&#x6A21;&#x62DF;&#x5F00;&#x94FE;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684; D-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;-6-&#x78F7;&#x9178;&#x5F02;&#x6784;&#x9176;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

Phosphoglucose isomerase (PGI) catalyzes the isomerization of D-glucose-6-phosphate (G6P) and D-fructose-6-phosphate (F6P) in glycolysis and gluconeogenesis. Analysis of previously reported X-ray crystal structures of PGI without ligand, with the cyclic form of F6P, or with inhibitors that mimic the cis-enediol intermediate led to proposed mechanisms for the ring opening and isomerization steps in the multistep catalytic mechanism. To help complete our model of the overall mechanism, information is needed about the state of PGI between the ring opening and isomerization steps, in other words, a structure of the enzyme complexed with the open form of a substrate or an analog. Here, we report the crystal structure of rabbit PGI complexed with D-sorbitol-6-phosphate (S6P), an analog of the open chain form of G6P, at 2.0 A resolution. As was seen in the PGI/F6P structure, a helix containing amino acid residues 512-520 is found in the "out" position, which provides sufficient space in the active site for a substrate in its cyclic form and which is probably the location of that helix just after ring opening (or just before ring closure). However, the S6P ligand is in an extended conformation, as was seen previously with ligands that mimic the cis-enediol intermediate. The extended conformation enables the ligand to interact with Glu357, which transfers a proton during the isomerization step. The PGI/S6P structure represents the conformation of the enzyme and substrate between the ring opening (or ring closing) step and the isomerization step and helps to complete the model for PGI's catalytic mechanism.

The crystal structure of rabbit phosphoglucose isomerase complexed with D-sorbitol-6-phosphate, an analog of the open chain form of D-glucose-6-phosphate.

Phosphoglucose isom&#xE9;rase (PGI) catalyse l&#x26;#39;isom&#xE9;risation du D-glucose-6-phosphate (G6P) et D-fructose-6-phosphate (F6P) dans la glycolyse et la n&#xE9;oglucogen&#xE8;se. L&#x26;#39;analyse des structures cristallines pr&#xE9;c&#xE9;demment rapport&#xE9; des rayons X de l&#x26;#39;IGP sans ligand, avec la forme cyclique de F6P, ou avec des inhibiteurs qui imitent le cis-&#xE8;nediol interm&#xE9;diaire men&#xE9;e par des m&#xE9;canismes propos&#xE9;s pour l&#x26;#39;ouverture du cycle et des mesures d&#x26;#39;isom&#xE9;risation dans le m&#xE9;canisme en plusieurs &#xE9;tapes catalytique. Pour aider &#xE0; compl&#xE9;ter notre mod&#xE8;le du dispositif d&#x26;#39;ensemble, l&#x26;#39;information est n&#xE9;cessaire sur l&#x26;#39;&#xE9;tat de l&#x26;#39;IGP entre l&#x26;#39;ouverture du cycle et des mesures d&#x26;#39;isom&#xE9;risation, en d&#x26;#39;autres termes, une structure de l&#x26;#39;enzyme complex&#xE9; avec la forme ouverte d&#x26;#39;un substrat ou un analogue. Ici, nous rapportons la structure cristalline de lapin IGP complex&#xE9; avec le D-sorbitol-6-phosphate (S6P), un analogue de la forme &#xE0; cha&#xEE;ne ouverte de G6P, &#xE0; 2,0 &#xC5; de r&#xE9;solution. Comme on l&#x26;#39;a vu dans la structure PGI/F6P, une h&#xE9;lice contenant des r&#xE9;sidus d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s 512-520 se trouve dans la position &#x26;quot;out&#x26;quot;, qui offre suffisamment d&#x26;#39;espace dans le site actif pour un substrat sous sa forme cyclique et qui est probablement l&#x26;#39;emplacement de que h&#xE9;lice juste apr&#xE8;s l&#x26;#39;ouverture du cycle (ou juste avant la fermeture du cycle). Toutefois, le ligand S6P est dans une conformation &#xE9;tendue, comme cela a &#xE9;t&#xE9; vu pr&#xE9;c&#xE9;demment avec des ligands qui imitent l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire cis-&#xE8;nediol. La conformation du ligand &#xE9;tendue permet d&#x26;#39;interagir avec Glu357, qui transf&#xE8;re un proton pendant l&#x26;#39;&#xE9;tape d&#x26;#39;isom&#xE9;risation. La structure PGI/S6P repr&#xE9;sente la conformation de l&#x26;#39;enzyme et le substrat entre l&#x26;#39;ouverture de cycle (ou de fermeture de cycle) &#xE9;tape et l&#x26;#39;&#xE9;tape d&#x26;#39;isom&#xE9;risation et permet de compl&#xE9;ter le mod&#xE8;le pour le m&#xE9;canisme de PGI catalytique.

La structure cristalline de la phosphoglucose isom&#xE9;rase lapin Complex&#xE9; par D-sorbitol-6-phosphate, un analogue de la formule de la cha&#xEE;ne ouverte de D-glucose-6-phosphate

Die Kristallstruktur von Kaninchen Phosphoglucoseisomerase komplexiert mit D-Sorbitol-6-Phosphat, ein Analogon der offenkettigen Form von D-Glucose-6-Phosphat.

Fosfoglucosio-isomerasi (IGP) catalizza l&#39;isomerizzazione del D-glucosio-6-fosfato (G6P) e D-fruttosio-6-fosfato (F6P) nella glicolisi e gluconeogenesi. Analisi delle strutture cristalline precedentemente riportati a raggi x di IGP senza ligando, con la forma ciclica di F6P, o con gli inibitori che imitano l&#39;intermedio cis-enediol portato a meccanismi proposti per l&#39;apertura di anello e isomerizzazione passi nel meccanismo catalitico multistep. Per aiutare completa il nostro modello del meccanismo complessivo, informazioni &egrave; necessario circa lo stato della IGP tra l&#39;anello di apertura e passaggi di isomerizzazione, in altre parole, una struttura dell&#39;enzima complessato con la forma aperta di un substrato o un analogo. Riportiamo la struttura di cristallo del coniglio IGP complessato con D-sorbitolo-6-fosfato (S6P), un analogo catena aperta in forma di G6P, a risoluzione 2.0. Come si &egrave; visto nella struttura IGP/F6P, un&#39;elica contenenti residui dell&#39;amminoacido 512-520 si trova in posizione &quot;out&quot;, che offre spazio sufficiente nel sito attivo per un substrato nella sua forma ciclica e che probabilmente &egrave; la posizione di tale elica appena dopo l&#39;apertura di anello (o appena prima della chiusura del ring). Tuttavia, il ligando S6P &egrave; in una conformazione estesa, come si &egrave; visto in precedenza con ligandi che imitano l&#39;intermedio cis-enediol. La conformazione estesa consente il ligando di interagire con Glu357, che trasferisce un protone durante il passaggio di isomerizzazione. La struttura IGP/S6P rappresenta la conformazione dell&#39;enzima e substrato tra l&#39;anello di apertura (o chiusura) passaggio e l&#39;isomerizzazione e aiuta a completare il modello per il meccanismo catalitico della PGI.

La struttura di cristallo del fosfoglucosio coniglio-isomerasi complessato con D-sorbitolo-6-fosfato, un analogo della forma a catena aperta di D-glucosio-6-fosfato.

&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PGI&#xFF09;&#x306F;&#x3001;D-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;G6P&#xFF09;&#x3068;&#x89E3;&#x7CD6;&#x3068;&#x7CD6;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;D-&#x30D5;&#x30EB;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;F6P&#xFF09;&#x306E;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x3002; F6P&#x306E;&#x5DE1;&#x56DE;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B7;&#x30B9; - &#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3001;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306A;&#x3057;&#x3067;PGI&#x306E;X&#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x958B;&#x74B0;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x5B8C;&#x4E86;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x60C5;&#x5831;&#x304C;&#x958B;&#x74B0;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x9593;PGI&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x8A00;&#x3044;&#x63DB;&#x3048;&#x308C;&#x3070;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x958B;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;PGI&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;2.0&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;D-&#x30BD;&#x30EB;&#x30D3;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;S6P&#xFF09;&#x3001;G6P&#x306E;&#x958B;&#x9396;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PGI/F6P&#x69CB;&#x9020;&#x3067;&#x898B;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;512&#x304B;&#x3089;520&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x74B0;&#x72B6;&#x306E;&#x5F62;&#x3067;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3067;&#x3042;&#x308B; &#x26;quot;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x26;quot;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3060;&#x3001;&#x958B;&#x74B0;&#x5F8C;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#xFF08;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5358;&#x306B;&#x9589;&#x74B0;&#x524D;&#xFF09;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;S6P&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B9; - &#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x4EE5;&#x524D;&#x898B;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x3092;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;Glu357&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PGI/S6P&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x958B;&#x74B0;&#xFF08;&#x53C8;&#x306F;&#x9589;&#x74B0;&#xFF09;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x57FA;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;PGI&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x5B8C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

D-&#x30BD;&#x30EB;&#x30D3;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;D-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x958B;&#x9396;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;

Phosphoglucose isomerase (PGI) catalyzes &#xBD84;&#xD574; &#xBC0F; gluconeogenesis D-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;-6-&#xC778;&#xC0B0; (G6P) &#xBC0F; D-&#xACFC; &#xB2F9;-6-&#xC778;&#xC0B0; (F6P)&#xC758; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;, F6P, &#xC21C;&#xD658; &#xD615;&#xD0DC; &#xB610;&#xB294; cis enediol &#xC911;&#xAE09;&#xC744; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558;&#xB294; &#xC800; &#xD574;&#xC81C; &#xC5C6;&#xC774; PGI&#xC758; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; x-&#xC120; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870; &#xBD84;&#xC11D; &#xB9C1; &#xC624;&#xD504;&#xB2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xC548; &#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xB800;&#xACE0; &#xB2E4;&#xB2E8;&#xACC4; &#xCD09;&#xB9E4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;, &#xC815;&#xBCF4; &#xD544;&#xC694; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; PGI&#xC758; &#xBC18;&#xC9C0; &#xC5EC; &#xC218; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC774; &#xC989;, &#xC624;&#xD508; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xAE30;&#xD310; &#xB610;&#xB294; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; complexed &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD1A0;&#xB07C;&#xC640; D-&#xC194; &#xBE44; &#xD1A8;-6-&#xC778;&#xC0B0; (S6P) 2.0 A &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; G6P&#xC758; &#xC624;&#xD508; &#xCCB4;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; complexed PGI&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PGI/F6P &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF8;&#xB294; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 512-520&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB098;&#xC120; &quot;&#xBC16; &#xC73C;&#xB85C;&quot; &#xC704;&#xCE58;, &#xC21C;&#xD658; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xACF5;&#xAC04;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xB9C1; &#xC624;&#xD504;&#xB2DD; &#xC9C1;&#xD6C4; (&#xB610;&#xB294; &#xBC18;&#xC9C0; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xC9C1;&#xC804;) &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xADF8; &#xB098;&#xC120;&#xD615;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, S6P &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; ligands cis enediol &#xC911;&#xAE09;&#xC744; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xB4EF;&#xC774; &#xD655;&#xC7A5; &#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD655;&#xC7A5; &#xB41C; &#xB098; &#xB780; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC218; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; glu357&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PGI/S6P &#xAD6C;&#xC870; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xAE30;&#xD310; &#xC5F4; &#xBC18;&#xC9C0; (&#xB610;&#xB294; &#xB2EB;&#xB294; &#xB9C1;) &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC218; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB098; &#xB780; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; PGI&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC644;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD1A0;&#xB07C; phosphoglucose isomerase complexed D-&#xC194; &#xBE44; &#xD1A8;-6-&#xC778;&#xC0B0;, D-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;-6-&#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xC758; &#xC624;&#xD508; &#xCCB4;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8;&#xC640;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;.

Fosfoglucosa isomerasa (PGI) cataliza la isomerizaci&#xF3;n de D-glucosa-6-fosfato (G6P) y D-fructosa-6-fosfato (F6P) en la glicolisis y la gluconeog&#xE9;nesis. An&#xE1;lisis de informado anteriormente estructuras de rayos X de cristal del PGI sin ligando, con la forma c&#xED;clica de F6P, o con inhibidores que imitan el cis-enodiol intermedio dirigida a los mecanismos propuestos para la apertura del anillo y los pasos de isomerizaci&#xF3;n en el mecanismo catal&#xED;tico de etapas m&#xFA;ltiples. Para ayudar a completar nuestro modelo del dispositivo general, se necesita informaci&#xF3;n sobre el estado del PGI entre la apertura del anillo y los pasos de isomerizaci&#xF3;n, en otras palabras, una estructura de la enzima acomplejado con la forma abierta de un sustrato o un an&#xE1;logo. Aqu&#xED;, se presenta la estructura cristalina de conejo PGI complejado con D-sorbitol-6-fosfato (S6P), un an&#xE1;logo de la forma de cadena abierta de G6P, a 2,0 Una resoluci&#xF3;n. Como se vio en la estructura PGI/F6P, una h&#xE9;lice que contiene los residuos de amino&#xE1;cidos 512-520 se encuentra en la posici&#xF3;n &#x26;quot;out&#x26;quot;, que proporciona espacio suficiente en el sitio activo de un sustrato en su forma c&#xED;clica y que es probablemente la ubicaci&#xF3;n de que h&#xE9;lice justo despu&#xE9;s de la apertura del anillo (o justo antes de cierre de anillo). Sin embargo, el ligando S6P est&#xE1; en una conformaci&#xF3;n extendida, como se ha visto anteriormente con ligandos que mimetizan el intermedio de cis-enodiol. La conformaci&#xF3;n extendida permite que el ligando para interactuar con Glu357, que transfiere un prot&#xF3;n durante la etapa de isomerizaci&#xF3;n. La estructura PGI/S6P representa la conformaci&#xF3;n de la enzima y el sustrato entre la apertura del anillo (o cierre de anillo) y el paso de la etapa de isomerizaci&#xF3;n y ayuda a completar el modelo para el mecanismo catal&#xED;tico de PGI.

La estructura cristalina de isomerasa conejo fosfoglucosa Complejados con D-sorbitol-6-fosfato, un an&#xE1;logo de la forma de cadena abierta de D-glucosa-6-fosfato

&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x9176;&#x5DF2;&#x88AB;&#x5217;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x9776;&#x6807;&#x4E3A;&#x975E;&#x6D32;&#x660F;&#x7761;&#x75C5;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x662F;&#x6B64;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x5F62;&#x5F0F;&#x4E3A; ATP &#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x51E0;&#x79CD;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x636E;&#x8BF4;&#x4EE5;&#x524D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4F18;&#x5148;&#x5411;&#x514B;&#x9C81;&#x65AF; phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x4E2D;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x9176; PGI&#xFF09; &#x6BD4;&#x5BF9;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x8F66;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; pgi &#x751F;&#x6210;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x4F7F;&#x7269;&#x79CD;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x597D;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x91CD;&#x7EC4;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x7EAF;&#x5316;&#x3001; &#x7ED3;&#x6676;&#x548C; T.&#x9525;&#x4F53; PGI &#x7684; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x89E3;&#x51B3;&#x5728; 1.6 A &#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x6784;&#x5305;&#x542B;&#x57FA;&#x677F;&#x3001; D-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;-6-&#x78F7;&#x9178;&#xFF0C;&#x5728;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E2D;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x3002;1.9 A &#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x89E3;&#x51B3;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x6784;&#x5305;&#x542B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E2D;&#x7684;&#x67E0;&#x6AAC;&#x9178;&#x76D0;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E; pgi &#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x548C;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B;&#x58A8;&#x897F;&#x54E5;&#x8FDB;&#x884C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7BA1;&#x7406;&#x548C;&#x5176;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x662F;&#x5728;&#x8003;&#x8651;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x9776;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;

&#x4ECE;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x4E0E;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;-6-&#x78F7;&#x9178;&#x5728; 1.6 A &#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7EDC;&#x5408; phosphoglucose &#x5F02;&#x6784;&#x9176;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

Enzymes of glycolysis in Trypanosoma brucei have been identified as potential drug targets for African sleeping sickness because glycolysis is the only source of ATP for the bloodstream form of this parasite. Several inhibitors were previously reported to bind preferentially to trypanosomal phosphoglucose isomerase (PGI, the second enzyme in glycolysis) than to mammalian PGIs, which suggests that PGI might make a good target for species-specific drug design. Herein, we report recombinant expression, purification, crystallization and X-ray crystal structure determination of T. brucei PGI. One structure solved at 1.6 A resolution contains a substrate, D-glucose-6-phosphate, in an extended conformation in the active site. A second structure solved at 1.9 A resolution contains a citrate molecule in the active site. The structures are compared with the crystal structures of PGI from humans and from Leishmania mexicana. The availability of recombinant tPGI and its first high-resolution crystal structures are initial steps in considering this enzyme as a potential drug target.

Crystal structure of phosphoglucose isomerase from Trypanosoma brucei complexed with glucose-6-phosphate at 1.6 A resolution.

Les enzymes de la glycolyse dans Trypanosoma brucei ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s comme cibles potentielles de m&#xE9;dicaments pour la maladie du sommeil africaine, parce que la glycolyse est la seule source de l&#x26;#39;ATP pour la forme sanguine de ce parasite. Plusieurs inhibiteurs ont &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment rapport&#xE9; pour lier pr&#xE9;f&#xE9;rentiellement &#xE0; phosphoglucose isom&#xE9;rase trypanosomes (IGP, la deuxi&#xE8;me enzyme de la glycolyse) que de mammif&#xE8;res IGP, ce qui sugg&#xE8;re que le PGI pourrait faire une bonne cible pour la conception de m&#xE9;dicaments sp&#xE9;cifiques aux esp&#xE8;ces. Ici, nous rapportons d&#x26;#39;expression recombinant, la purification, de cristallisation et de rayons X d&#xE9;termination de la structure cristalline de T. brucei IGP. Une structure r&#xE9;solu &#xE0; 1,6 A contient un substrat de r&#xE9;solution, le D-glucose-6-phosphate, dans une conformation &#xE9;tendue dans le site actif. Une seconde structure r&#xE9;solu &#xE0; 1,9 Une r&#xE9;solution contient une mol&#xE9;cule de citrate dans le site actif. Les structures sont compar&#xE9;es avec les structures cristallines de PGI de l&#x26;#39;homme et de Leishmania mexicana. La disponibilit&#xE9; de recombinaison et de ses premiers tPGI structures cristallines &#xE0; haute r&#xE9;solution sont les &#xE9;tapes initiales de l&#x26;#39;examen de cette enzyme comme une cible th&#xE9;rapeutique potentielle.

La structure cristalline de la phosphoglucose isom&#xE9;rase provenant de Trypanosoma brucei Complex&#xE9; par Glucose-6-phosphate &#xE0; 1,6 A R&#xE9;solution

Enzyme der Glykolyse in Trypanosoma Brucei wurden als m&ouml;gliche Droge-Ziele f&uuml;r afrikanischen Schlafkrankheit festgestellt, weil der Glykolyse ist die einzige Quelle f&uuml;r ATP der Blutstrom Form der Parasit. Mehrere Inhibitoren wurden zuvor gemeldet, bevorzugt auf trypanosomale Phosphoglucose Isomerase (g.g.a., das zweite Enzym in Glykolyse) als auf S&auml;ugetier-G.g.a binden, was darauf hindeutet, dass PGI ein gutes Ziel f&uuml;r artspezifische Wirkstoffdesign machen k&ouml;nnte. Hier berichten wir rekombinante Expression, Reinigung, Kristallisation und R&ouml;ntgen Kristall Struktur Bestimmung von T. Brucei G.G.A. Eine Struktur, die bei 1,6 A Aufl&ouml;sung gel&ouml;st enth&auml;lt ein Substrat, D-Glucose-6-Phosphat, in eine erweiterte Anpassung in der aktiven Site. Eine zweite Struktur gel&ouml;st bei 1,9 A Aufl&ouml;sung enth&auml;lt ein Molek&uuml;l Citrat in der aktiven Site. Die Strukturen sind mit den Kristallstrukturen von PGI von Menschen und von Leishmania Mexicana verglichen. Die Verf&uuml;gbarkeit von rekombinanten tPGI und seine ersten hochaufl&ouml;sende Kristallstrukturen sind erste Schritte bei der Pr&uuml;fung dieses Enzyms als m&ouml;gliches Angriffsziel Droge.

Kristallstruktur von Phosphoglucose-Isomerase von Trypanosoma Brucei komplexiert mit Glukose-6-Phosphat bei 1,6 A Aufl&ouml;sung.

Gli enzimi della glicolisi in Trypanosoma brucei sono stati identificati come potenziali bersagli di farmaci per la malattia del sonno africana perch&eacute; la glicolisi &egrave; l&#39;unica fonte di ATP per la forma del flusso sanguigno di questo parassita. Diversi inibitori sono stati segnalati in precedenza legano preferenzialmente a fosfoglucosio trypanosomal-isomerasi (IGP, il secondo enzima nella glicolisi) rispetto ai mammiferi IGP, che suggerisce che IGP potrebbe fare una buona destinazione per specie-drug design. Riportiamo qui, espressione recombinant, purificazione, cristallizzazione e determinazione della struttura dei raggi x cristallo di T. brucei IGP. Una struttura risolto alla risoluzione 1.6 contiene un substrato, D-glucosio-6-fosfato, una conformazione estesa nel sito attivo. Una seconda struttura risolta a 1,9 risoluzione contiene una molecola di citrato nel sito attivo. Le strutture vengono confrontate con le strutture di cristallo della IGP da esseri umani e da Leishmania mexicana. La disponibilit&agrave; di tPGI ricombinante e sue prime strutture di cristallo ad alta risoluzione sono i primi passi nel considerare questo enzima come un potenziale obiettivo di droga.

Struttura cristallina di fosfoglucosio-isomerasi dal Trypanosoma brucei complessato con glucosio-6-fosfato a risoluzione 1.6.

&#x89E3;&#x7CD6;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x8840;&#x6D41;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;ATP&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x89E3;&#x7CD6;&#x7CFB;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x7761;&#x7720;&#x75C5;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5275;&#x85AC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;PGI&#x306F;&#x3001;&#x7A2E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x85AC;&#x7269;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x826F;&#x3044;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;PGIS&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PGI&#x3001;&#x89E3;&#x7CD6;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#xFF09;&#x306B;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3001;&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x3068;T.&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;PGI&#x306E;X&#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;1.6&#x3067;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3064;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x3001;D-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 1.9&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3092;&#x89E3;&#x304F;&#x7B2C;2&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x4E2D;&#x306E;&#x30AF;&#x30A8;&#x30F3;&#x9178;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x30E1;&#x30AD;&#x30B7;&#x30AB;&#x30FC;&#x30CA;&#x304B;&#x3089;PGI&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;tPGI&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5275;&#x85AC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x304B;&#x3089;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;1.6&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3067;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;

Trypanosoma brucei&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBD84;&#xD574;&#xAC00;&#xC774; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xD608; &#xB958; &#xD615;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; ATP&#xC758; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC774;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC544;&#xD504;&#xB9AC;&#xCE74; &#xC218; &#xBA74; &#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC57D;&#xBB3C; &#xD45C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC800; &#xD574;&#xC81C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB824;&#xBA74; trypanosomal phosphoglucose isomerase (PGI, &#xBD84;&#xD574;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD6A8;&#xC18C;) &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; PGIs &#xD558; PGI &#xC885;&#xC758; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC88B;&#xC740; &#xB300;&#xC0C1; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC9C0;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; T. brucei PGI&#xC758; x-&#xC120; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870; &#xACB0;&#xC815;, &#xACB0;&#xC815; &#xD654;, &#xC815;&#xD654;, &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC2DD; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 1.6 A &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xD574;&#xACB0; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; &#xD3EC;&#xD568; &#xAE30;&#xD310;, D-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;-6-&#xC778;&#xC0B0;, &#xD604;&#xC7AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD655;&#xC7A5; &#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC5D0;. 1.9 A &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xC2DC;&#xD2B8;&#xB974;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC790; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; &#xBC0F; Leishmania mexicana PGI&#xC758; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; tPGI &#xBC0F; &#xADF8; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xAD6C;&#xC870; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB294;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC57D;&#xBB3C; &#xD45C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0;&#xB824;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;.

&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;-6-&#xC778;&#xC0B0; 1.6 A &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; complexed Trypanosoma brucei&#xC5D0;&#xC11C; phosphoglucose isomerase&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;.

Las enzimas de la glic&#xF3;lisis en el Trypanosoma brucei se han identificado como objetivos potenciales de los medicamentos para la enfermedad del sue&#xF1;o africano, por la gluc&#xF3;lisis es la &#xFA;nica fuente de ATP para la forma de torrente sangu&#xED;neo de este par&#xE1;sito. Varios inhibidores se hab&#xED;a informado anteriormente que se unen preferentemente a fosfoglucosa isomerasa tripanosomas (IGP, la segunda enzima en la gluc&#xF3;lisis) que a la IGP de mam&#xED;feros, lo que sugiere que la IGP podr&#xED;a hacer un buen objetivo para el dise&#xF1;o de f&#xE1;rmacos espec&#xED;ficos de especie. Aqu&#xED;, nos informan de expresi&#xF3;n recombinante, purificaci&#xF3;n, cristalizaci&#xF3;n y de rayos-X determinaci&#xF3;n de la estructura cristalina de T. brucei IGP. Una estructura resuelto en 1,6 Una resoluci&#xF3;n contiene un sustrato, D-glucosa-6-fosfato, en una conformaci&#xF3;n extendida en el sitio activo. Una segunda estructura resuelto en 1,9 Una resoluci&#xF3;n contiene una mol&#xE9;cula de citrato en el sitio activo. Las estructuras se comparan con las estructuras cristalinas de PGI de humanos y de Leishmania mexicana. La disponibilidad de tPGI recombinante y sus primeros alta resoluci&#xF3;n de estructuras cristalinas son los primeros pasos en el examen de esta enzima como diana terap&#xE9;utica potencial.

Estructura Tridimensional de fosfoglucosa isomerasa de Trypanosoma brucei complejar glucosa-6-fosfato a 1,6 A Resoluci&#xF3;n

&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x88AB;&#x6807;&#x8BC6;&#x7684;&#x6708;&#x5149;&#x3002;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x86CB;&#x767D;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x591A;&#x80BD;&#x94FE;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x5B50;&#x96C6;&#x3002;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x5305;&#x62EC;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x878D;&#x5408;&#x3001; &#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3001; &#x62FC;&#x63A5;&#x7684;&#x53D8;&#x79CD;&#x6216;&#x6DF7;&#x6742;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#x603B;&#x7ED3;&#x4E86;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x5DF2;&#x77E5;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x5217;&#x8868;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5305;&#x62EC;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x79CD;&#x7C7B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6848;&#x4F8B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x65B0;&#x578B;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x529F;&#x80FD;&#x627E;&#x4E00;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x9176;&#x901A;&#x8FC7;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x82AF;&#x7247;&#x9879;&#x76EE;&#x3002;&#x5BA1;&#x67E5;&#x8FD8;&#x603B;&#x7ED3;&#x4E86;&#x6700;&#x8FD1; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6216;&#x4E24;&#x4E2A;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7EBF;&#x7D22;&#x548C;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x5982;&#x4F55;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5207;&#x6362;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86;&#x8BB8;&#x591A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E;&#x5185;&#x5728;&#x975E;&#x7ED3;&#x6784;&#x5316;&#x533A;&#x57DF;&#x53EF;&#x80FD;&#x8FD8;&#x6708;&#x5149;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;--&#x66F4;&#x65B0;&#x3002;

A growing number of diverse proteins are being identified that moonlight. Moonlighting proteins comprise an interesting subset of multifunctional proteins in which the two functions are found in a single polypeptide chain. They do not include proteins that are multifunctional due to gene fusions, families of homologous proteins, splice variants, or promiscuous enzyme activities. This review summarizes recent discoveries that add to the list of known moonlighting proteins. They include several different kinds of proteins and combinations of functions. In one case, a novel DNA binding function was found for a biosynthetic enzyme through a proteomics microarray project. The review also summarizes recent X-ray crystal structures that provide clues to the molecular mechanisms of one or both functions, and in some cases how a protein can switch between functions. In addition, the possibility that many proteins with intrinsically unstructured regions might also moonlight is discussed.

Moonlighting proteins--an update.

Un nombre croissant de prot&#xE9;ines diverses sont en cours d&#x26;#39;identification ce clair de lune. Prot&#xE9;ines au noir comporte un sous-ensemble int&#xE9;ressant de prot&#xE9;ines multifonctionnelles dans laquelle les deux fonctions se trouvent dans une seule cha&#xEE;ne polypeptidique. Ils ne comprennent pas les prot&#xE9;ines qui sont multifonctionnel en raison de fusions de g&#xE8;nes, les familles de prot&#xE9;ines homologues, les variants d&#x26;#39;&#xE9;pissage, ou d&#x26;#39;activit&#xE9;s enzymatiques promiscuit&#xE9;. Cette revue r&#xE9;sume les d&#xE9;couvertes r&#xE9;centes qui ajoutent &#xE0; la liste des prot&#xE9;ines au noir connus. Ils comprennent plusieurs types diff&#xE9;rents de prot&#xE9;ines et de combinaisons de fonctions. Dans un cas, une fonction de liaison d&#x26;#39;ADN roman a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; pour une enzyme de biosynth&#xE8;se &#xE0; travers un projet puce prot&#xE9;omique. La revue r&#xE9;sume aussi les r&#xE9;cents structures cristallines de rayons X qui fournissent des indices sur les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires de l&#x26;#39;un ou les deux fonctions, et, dans certains cas comment une prot&#xE9;ine peut commuter entre les fonctions. En outre, la possibilit&#xE9; que de nombreuses prot&#xE9;ines intrins&#xE8;quement non structur&#xE9;es avec les r&#xE9;gions pourraient aussi clair de lune est discut&#xE9;e.

Prot&#xE9;ines Moonlighting - une mise &#xE0; jour

Eine wachsende Zahl von unterschiedlichen Proteinen sind diese Mondschein identifiziert werden. Schwarzarbeit Proteine bilden eine interessante Teilmenge der multifunktionelle Proteine, in denen die beiden Funktionen in einer einzigen Polypeptidkette gefunden werden. Sie enthalten keine Proteine, die multifunktionale durch Gen-Fusionen, Familien homologe Proteine, Splice-Varianten oder promiskuitive Enzymaktivit&auml;ten sind. Diesen Bericht fasst Neuere Entdeckungen, die die Liste der bekannten Schwarzarbeit Proteinen hinzuf&uuml;gen. Sie umfassen verschiedene Arten von Proteinen und Kombinationen von Funktionen. In einem Fall wurde eine neuartige DNA-Bindung-Funktion f&uuml;r ein biosynthetisches Enzym durch ein Proteomik-Microarray-Projekt gefunden. Die &Uuml;berpr&uuml;fung fasst auch den letzten R&ouml;ntgen-Kristallstrukturen, die Hinweise auf die molekularen Mechanismen eines oder beider Funktionen bereitstellen, und in einigen F&auml;llen wie ein Protein kann wechseln zwischen Funktionen. Dar&uuml;ber hinaus ist die M&ouml;glichkeit, dass viele Proteine mit intrinsisch unstrukturierte Regionen auch Mondschein k&ouml;nnte diskutiert.

Schwarzarbeit Proteine--ein Update.

Un numero crescente di diverse proteine &egrave; essere identificati che moonlight. Moonlighting proteine costituiscono un sottoinsieme interessante delle proteine multifunzionale in cui si trovano le due funzioni in una catena polipeptidica singola. Essi non includono le proteine che sono multifunzionali a causa di fusioni del gene, famiglie di proteine omologhe, varianti di splicing o attivit&agrave; promiscua enzima. Questa recensione riassume recenti scoperte che aggiungere all&#39;elenco delle proteine conosciute e praticate. Essi comprendono diversi tipi di proteine e combinazioni di funzioni. In un caso, una romanzo funzione di associazione del DNA &egrave; stata trovata per un enzima biosintetico attraverso un progetto di microarray proteomica. La recensione riassume anche recenti strutture di cristallo dei raggi x che forniscono indizi per i meccanismi molecolari di una o di entrambe le funzioni, e in alcuni casi come una proteina pu&ograve; passare tra le funzioni. Inoltre, &egrave; discussa la possibilit&agrave; che molte proteine intrinsecamente non strutturate regioni potrebbero anche al chiaro di luna.

Proteine Moonlighting - un aggiornamento.

&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6708;&#x660E;&#x304B;&#x308A;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x9396;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x56E0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x3001;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6DF7;&#x5408;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x526F;&#x696D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x3092;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x985E;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3042;&#x308B;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;1&#x3064;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;X&#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x69CB;&#x9020;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x6708;&#x5149;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30C7;&#x30FC;&#x30C8;

&#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xADF8; &#xB2EC;&#xBE5B;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB418; &#xACE0;. Moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB450; &#xD568;&#xC218; &#xD558;&#xB098;&#xC758; polypeptide &#xC0AC;&#xC2AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xB294; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; fusions, &#xB3D9;&#xC885; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xC2A4;&#xD50C;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC885; &#xB610;&#xB294; &#xBB34;&#xCC28;&#xBCC4; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0;&#xB294; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBAA9;&#xB85D;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC744; &#xC694;&#xC57D; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD55C; &#xACBD;&#xC6B0;, &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD568;&#xC218; proteomics microarray &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xAC80;&#xD1A0;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD558;&#xB098; &#xB610;&#xB294; &#xB458; &#xB2E4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; x-&#xC120; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870; &#xC694;&#xC57D; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC804;&#xD658;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAE30;&#xB2A5;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC870;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xB3C4; &#xB2EC;&#xBE5B; &#xC218; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xC5C5;&#xB370;&#xC774;&#xD2B8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Un n&#xFA;mero creciente de diversas prote&#xED;nas que se identifican esa luz de luna. Prote&#xED;nas Moonlighting comprenden un subconjunto interesante de prote&#xED;nas multifuncionales en el que las dos funciones se encuentran en una sola cadena polipept&#xED;dica. No se incluyen las prote&#xED;nas que son multifuncionales, debido a las fusiones de genes, familias de prote&#xED;nas hom&#xF3;logas, las variantes de empalme, o actividades promiscuas enzima. Esta revisi&#xF3;n resume los &#xFA;ltimos descubrimientos que se suman a la lista de las prote&#xED;nas conocidas pluriempleo. Se incluyen varios tipos diferentes de prote&#xED;nas y combinaciones de funciones. En un caso, una funci&#xF3;n de uni&#xF3;n ADN nuevo se encontr&#xF3; para una enzima biosint&#xE9;tico a trav&#xE9;s de un proyecto de microarrays prote&#xF3;mica. La revisi&#xF3;n tambi&#xE9;n un resumen de los &#xFA;ltimos rayos X las estructuras de cristal que proporcionan pistas sobre los mecanismos moleculares de una o ambas funciones, y en algunos casos la forma de una prote&#xED;na puede cambiar entre las funciones. Adem&#xE1;s, la posibilidad de que muchas prote&#xED;nas con regiones intr&#xED;nsecamente no estructurados tambi&#xE9;n podr&#xED;a luz de la luna se discute.

Las prote&#xED;nas pluriempleo - una actualizaci&#xF3;n

&#x7518;&#x9732; isomerases (Pmi) &#x7B2C;&#x4E00;&#x7C7B;&#x662F;&#x542B;&#x950C;&#x91D1;&#x5C5E;&#x9176;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684; D-&#x7518;&#x9732;&#x7CD6; 6-&#x78F7;&#x9178; (M6P) &#x548C; D-&#x679C;&#x7CD6; 6-&#x78F7;&#x9178; (F6P) &#x7684;&#x53EF;&#x9006;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x3002;5-&#x78F7;&#x9178;-D-arabinonohydroxamic &#x9178; (5PAH)&#x3001; &#x8D4B;&#x6709;&#x9175;&#x6BCD; nanomolar &#x4EB2;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x5242; (I &#x578B;) &#x548C;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x94DC;&#x7EFF; &#xFF08;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E8C;&#xFF09; Pmi (Roux &#x4E2D;&#x5357;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x5927;&#x5B66;&#x3001; &#x751F;&#x7269;&#x5316;&#x5B66; 2004&#x5E74; &#xFF1B; 43:2926-2934&#x5E74;)&#xFF0C;&#x5F3A;&#x70C8;&#x6291;&#x5236;&#x4EBA;&#x7C7B; &#xFF08;I &#x7C7B;&#xFF09; PMI &#xFF08;&#x4E3A;&#x5176;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A; PMI &#x4EE5;&#x53CA;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; (&#x4E00;&#x7C7B;)&#x3002;41 &#x5C4A; K(i) &#x503C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B; PMI nM &#x662F;&#x4EE5;&#x5F80;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242; PMI &#x7684;&#x6700;&#x4F4E;&#x503C;&#x3002;5-&#x78F7;&#x9178;-D-arabinonhydrazide&#xFF0C;&#x4E2D;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6A21;&#x62DF;&#x4E2D;&#x7EA7; 1&#xFF0C;2-&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;-enediol&#xFF0C;&#x5728;&#x6291;&#x5236;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9176;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E2D;&#x95F4;&#x7684;&#x5047;&#x60F3;&#x9AD8;&#x80FD;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x6027;&#x8D28;&#x7B26;&#x5408;&#x6548;&#x7387;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x4F4E;&#x7EA6; 15 &#x500D;&#x3002;PMI &#x548C;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5E95;&#x7269; &beta;-D-mannopyranose 6-&#x78F7;&#x9178; (&beta;-M6P&#xFF09; &#x4F7F;&#x7528;&#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x5B66;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5934;&#x8BA1;&#x7B97; (SIBFA) &#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x788E;&#x7247;&#xFF0C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x603B;&#x548C;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7684;&#x767D;&#x8272;&#x5FF5;&#x73E0;&#x83CC; (&#x4E00;&#x7C7B;) &#x4E4B;&#x95F4;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x9176;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x80FD;&#x4E2D;&#x95F4;&#x6A21;&#x62DF;&#x6291;&#x5236;&#x5242; 5PAH &#x636E;&#x62A5;&#x9053;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x6807;&#x8BC6;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4E2A;&#x522B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5047;&#x8BBE;&#x4E3A;&#x6574;&#x4F53;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x673A;&#x5236;&#x50AC;&#x5316;&#x7C7B;&#x578B; I Pmi&#xFF0C;&#x5373;&#x5F00;&#x73AF;&#x548C;&#x5F02;&#x6784;&#x5316;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x9176;&#x50AC;&#x5316;&#x73AF;-&#x5F00;&#x5E55;&#x540E;&#x7684; &beta;-M6P &#x950C;&#x534F;&#x8C03;&#x6C34;&#x548C; Gln111 &#x914D;&#x4F53;&#xFF0C;Lys136 &#x88AB;&#x6807;&#x8BC6;&#x4E3A;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x78B3;&#x539F;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4; C1 &#x548C; C2 &#x7684;&#x886C;&#x5E95; D-&#x7518;&#x9732;&#x7CD6; 6-&#x78F7;&#x9178;&#x7684;&#x8D28;&#x5B50;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x50AC;&#x5316;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

&#x53CD;&#x5E94;&#x673A;&#x7406;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x7C7B;&#x7518;&#x9732; isomerases&#xFF1A; &#x4ECE;&#x6291;&#x5236;&#x548C;&#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x65B0;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;

Type I phosphomannose isomerases (PMIs) are zinc-dependent metalloenzymes involved in the reversible isomerization of D-mannose 6-phosphate (M6P) and D-fructose 6-phosphate (F6P). 5-Phospho-D-arabinonohydroxamic acid (5PAH), an inhibitor endowed with nanomolar affinity for yeast (Type I) and Pseudomonas aeruginosa (Type II) PMIs (Roux et al., Biochemistry 2004; 43:2926-2934), strongly inhibits human (Type I) PMI (for which we report an improved expression and purification procedure), as well as Escherichia coli (Type I) PMI. Its K(i) value of 41 nM for human PMI is the lowest value ever reported for an inhibitor of PMI. 5-Phospho-D-arabinonhydrazide, a neutral analogue of the reaction intermediate 1,2-cis-enediol, is about 15 times less efficient at inhibiting both enzymes, in accord with the anionic nature of the postulated high-energy reaction intermediate. Using the polarizable molecular mechanics, sum of interactions between fragments ab initio computed (SIBFA) procedure, computed structures of the complexes between Candida albicans (Type I) PMI and the cyclic substrate Î²-D-mannopyranose 6-phosphate (Î²-M6P) and between the enzyme and the high-energy intermediate analogue inhibitor 5PAH are reported. Their analysis allows us to identify clearly the nature of each individual active site amino acid and to formulate a hypothesis for the overall mechanism of the reaction catalyzed by Type I PMIs, that is, the ring-opening and isomerization steps, respectively. Following enzyme-catalyzed ring-opening of Î²-M6P by zinc-coordinated water and Gln111 ligands, Lys136 is identified as the probable catalytic base involved in proton transfer between the two carbon atoms C1 and C2 of the substrate D-mannose 6-phosphate.

The reaction mechanism of type I phosphomannose isomerases: new information from inhibition and polarizable molecular mechanics studies.

Type I isom&#xE9;rases phosphomannose (PMIS) sont d&#xE9;pendantes du zinc-m&#xE9;talloenzymes impliqu&#xE9;es dans l&#x26;#39;isom&#xE9;risation r&#xE9;versible de D-mannose-6-phosphate (M6P) et le D-fructose-6-phosphate (F6P). 5-Phospho-D-arabinonohydroxamic acide (5PAH), un inhibiteur dot&#xE9; d&#x26;#39;une affinit&#xE9; nanomolaire pour la levure (type I) et Pseudomonas aeruginosa (Type II) PMI (Roux et al, Biochemistry 2004;. 43:2926-2934), inhibe fortement humaine (type I) PMI (pour laquelle nous signaler une expression am&#xE9;lior&#xE9;e et la proc&#xE9;dure de purification), ainsi que Escherichia coli (type I) PMI. Son K (i) la valeur de 41 nM pour PMI humaine est la valeur la plus basse jamais enregistr&#xE9;e pour un inhibiteur de la PMI. 5-phospho-D-arabinonhydrazide, un analogue neutre de l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire r&#xE9;actionnel 1,2-cis-&#xE8;nediol, est environ 15 fois moins efficace pour inhiber les deux enzymes, en accord avec la nature anionique du postul&#xE9; haute &#xE9;nergie de r&#xE9;action interm&#xE9;diaire. En utilisant les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires polarisables, la somme des interactions entre les fragments ab initio calcul&#xE9;es (SIBFA) la proc&#xE9;dure, les structures calcul&#xE9;es des complexes entre le Candida albicans (type I) et le PMI cyclique substrat &#x3B2;-D-mannopyranose 6-phosphate (&#x3B2;-M6P) et entre l&#x26;#39;enzyme et les 5PAH haute &#xE9;nergie interm&#xE9;diaires inhibiteurs analogues sont rapport&#xE9;s. Leur analyse nous permet d&#x26;#39;identifier clairement la nature de chaque acide amin&#xE9; du site actif individuelle et de formuler une hypoth&#xE8;se pour le m&#xE9;canisme global de la r&#xE9;action catalys&#xE9;e par type I PMI, qui est, l&#x26;#39;ouverture de cycle et &#xE9;tapes d&#x26;#39;isom&#xE9;risation, respectivement. &#xC0; la suite catalys&#xE9;e par l&#x26;#39;enzyme par ouverture de cycle de &#x3B2;-M6P par le zinc-coordonn&#xE9;e de l&#x26;#39;eau et Gln111 ligands, Lys136 est identifi&#xE9; en tant que base probables catalytique impliqu&#xE9;s dans le transfert de protons entre les atomes de carbone C1 et C2 deux du substrat D-mannose-6-phosphate.

Le m&#xE9;canisme de r&#xE9;action de type I Isomerases phosphomannose: Nouvelle information de l&#x26;#39;inhibition et polarisables mol&#xE9;culaires &#xE9;tudes M&#xE9;canique

Typ I Phosphomannose-Isomerase (PMIs) sind Zink-abh&auml;ngige Metalloenzyme die reversible Isomerisierung von D-Mannose-6-Phosphat (M6P) und D-Fructose-6-Phosphat (F6P) beteiligt. 5-Phospho-D-Arabinonohydroxamic S&auml;ure (5PAH), einem Inhibitor, dotiert mit Nanomolar Affinit&auml;t f&uuml;r Hefe (Typ I) und Pseudomonas Aeruginosa (Typ II) PMIs (Roux Et Al., Biochemie 2004; 43:2926-2934), stark hemmt menschliche (Typ I) PMI (wof&uuml;r wir Berichten ein verbessertes Expression und Reinigung-Verfahrens), als auch Escherichia coli (Typ I) PMI. Seine K(i)-Wert von 40 nM f&uuml;r menschliche PMI ist der niedrigste Wert, der jemals f&uuml;r ein Inhibitor der PMI berichtet. 5-Phospho-D-Arabinonhydrazide, eine neutrale analog der Reaktion Mittelstufe 1,2-Cis-Enediol, etwa 15 mal weniger effizient an beide Enzyme, in &Uuml;bereinstimmung mit der anionischen Natur der Mittelstufe postulierten energiereiche Reaktion Hemmung. Die polarisierbar molekularen Mechanismen, Summe der Interaktionen zwischen Fragmente ab initio berechnete (SIBFA) Verfahren, berechnete Strukturen der komplexe zwischen Candida Albicans (Typ I) PMI und die zyklische Substrat-&beta;-D-Mannopyranose 6-Phosphat (&beta;-M6P) und zwischen dem Enzym und der hochenergetischen fortgeschrittene analoge Inhibitor 5PAH gemeldet werden. Ihre Untersuchung erlaubt uns, klar zu identifizieren, die Natur jede einzelne aktive Website-Aminos&auml;ure und um formulieren eine Hypothese f&uuml;r den gesamten Mechanismus der Reaktion katalysiert durch Typ I PMIs, d. h. die Ring-&Ouml;ffnung und Isomerisierung Schritte bzw.. Nach Enzym-katalysierte Ring-&Ouml;ffnung des &beta;-M6P Zink-koordinierter Wasser-und Gln111-Liganden, wird Lys136 als der wahrscheinliche katalytische Base Protonen-Transfer zwischen den beiden Kohlenstoffatomen C1 und C2 der Substrat-D-Mannose-6-Phosphat beteiligt identifiziert.

Der Reaktionsmechanismus der Typ I Phosphomannose-Isomerase: neue Informationen aus Hemmung und polarisierbar Molekulare Mechaniker Studien.

Tipo I fosfomannosio isomerases (PMI) sono coinvolti nell&#39;isomerizzazione reversibile di D-mannosio 6-fosfato (M6P) e D-fruttosio 6-fosfato (F6P) zinco-dipendente metalloenzymes. Acido 5-fosfo-D-arabinonohydroxamic (5PAH), un inibitore dotato nanomolari affinit&agrave; per il lievito (tipo I) e Pseudomonas aeruginosa (tipo II) PMI (Roux et al., 2004 biochimica; 43:2926-2934), inibisce fortemente umano (tipo I) PMI (di cui riportiamo una procedura migliorata, espressione e purificazione), come pure Escherichia coli (tipo I) PMI. Il valore di K(i) di 41 nM per PMI umano &egrave; il valore pi&ugrave; basso mai segnalato per un inibitore di PMI. 5-Fosfo-D-arabinonhydrazide, un analogo della reazione neutro intermedio 1,2-cis-enediol, &egrave; circa 15 volte meno efficiente inibisce entrambi gli enzimi, in accordo con la natura della reazione ad alta energia postulata intermedia anionica. Usando la meccanica molecolare polarizzabile, somma delle interazioni tra procedura (SIBFA) calcolata ab initio di frammenti, calcolato strutture dei complessi tra Candida albicans (tipo I) PMI e il substrato ciclico &beta;-D-mannopiranosi 6-fosfato (&beta;-M6P) e tra l&#39;enzima e l&#39;inibitore analogo intermedio ad alta energia sono segnalati 5PAH. Loro analisi permette di identificare chiaramente la natura di ogni amminoacido del sito attivo individuale e per formulare un&#39;ipotesi per il meccanismo generale della reazione catalizzata da PMI tipo I, cio&egrave;, la procedura di apertura di anello e isomerizzazione, rispettivamente. A seguito di enzima-catalizzato anello-apertura della &beta;-M6P da acqua zinco coordinato e ligandi Gln111, Lys136 &egrave; identificato come probabile base catalitica coinvolta nel trasferimento di protoni fra due atomi di carbonio C1 e C2 del substrato D-mannosio 6-fosfato.

Il meccanismo di reazione di tipo I fosfomannosio isomerases: nuove informazioni da studi polarizzabile meccanica molecolare e inibizione.

&#x79C1;phosphomannose&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PMIS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;D-&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;M6P&#xFF09;&#x3068;D-&#x30D5;&#x30EB;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;F6P&#xFF09;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x4E9C;&#x925B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x91D1;&#x5C5E;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3002; 5-&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-D-arabinonohydroxamic&#x9178;&#xFF08;5PAH&#xFF09;&#x3001;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E2;&#x30EB;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#xFF08;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;I&#xFF09;&#x3068;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;&#xFF08;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;II&#xFF09;PMIS&#xFF08;&#x30EB;&#x30FC;&#x3089;&#x3001;Biochemistry 2004; 43:2926-2934&#xFF09;&#x306B;&#x6075;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x304F;&#x963B;&#x5BB3;&#x4EBA;&#x9593;&#xFF08;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;I&#xFF09;PMI&#xFF08;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x304C;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x767A;&#x73FE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CBE;&#x88FD;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#xFF09;&#x3001;&#x306A;&#x3089;&#x3073;&#x306B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#xFF08;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;I&#xFF09;PMI&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;PMI&#x306F;41 nM&#x306E;&#x305D;&#x306E;K&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306B;PMI&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x6700;&#x4F4E;&#x5024;&#x3067;&#x3059;&#x3002; 5-&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-D-arabinonhydrazide&#x3001;&#x53CD;&#x5FDC;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;1,2  - &#x30B7;&#x30B9; - &#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x4E2D;&#x7ACB;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x9593;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x30A2;&#x30CB;&#x30AA;&#x30F3;&#x6027;&#x3001;&#x81EA;&#x7136;&#x3068;&#x8ABF;&#x548C;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x7D04;15&#x500D;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x5206;&#x6975;&#x6027;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x5B66;&#x3001;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;ab initio&#x8A08;&#x7B97;&#xFF08;SIBFA&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x548C;&#x3001;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30C0;&#xB7;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B9;&#xFF08;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;I&#xFF09;PMI&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x74B0;&#x72B6;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3B2;-D-&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30D4;&#x30E9;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;&#x3B2;-M6P&#xFF09;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;5PAH&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x958B;&#x74B0;&#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;I PMIS&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x89E6;&#x5A92;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E9C;&#x925B;&#x914D;&#x4F4D;&#x6C34;&#x3068;Gln111&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3B2;-M6P&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x89E6;&#x5A92;&#x958B;&#x74B0;&#x5F8C;&#x3001;Lys136&#x306F;&#x57FA;&#x8CEA;D-&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;2&#x500B;&#x306E;&#x70AD;&#x7D20;&#x539F;&#x5B50;&#x3001;C1&#x3068;C2&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x79FB;&#x52D5;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x5869;&#x57FA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x963B;&#x5BB3;&#x3068;&#x5206;&#x6975;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x5B66;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x304B;&#x3089;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x60C5;&#x5831;&#xFF1A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;I Phosphomannose&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6A5F;&#x69CB;

&#xC720;&#xD615; I phosphomannose isomerases (PMIs) &#xC544;&#xC5F0; &#xC885;&#xC18D; metalloenzymes D &#xC2A4; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; (M6P) &#xBC0F; D-&#xACFC; &#xB2F9; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; (F6P)&#xC758; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC218;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294;. 5 &#xC778; D arabinonohydroxamic &#xC0B0; (5PAH), &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; nanomolar &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBD80;&#xC5EC;&#xB294; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; (&#xC720;&#xD615; I) &#xBC0F; &#xB179; &#xB18D; &#xADE0; (&#xD0C0;&#xC785; II) PMIs (&#xB8E8; &#xC678;., &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; 2004; 43:2926-2934), &#xC778;&#xAC04;&#xC744; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5B5;&#xC81C; (&#xC720;&#xD615; I) PMI (&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC815;&#xD654; &#xC808;&#xCC28; &#xBCF4;&#xACE0;)&#xB85C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; (&#xC720;&#xD615; I) PMI. 41&#xC758; K(i) &#xAC12; nM &#xC778;&#xAC04;&#xC758; PMI&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; PMI&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xB3C4; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB0AE;&#xC740; &#xAC12;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778; 5 D arabinonhydrazide &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC911;&#xB9BD; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; 1, 2-cis-enediol&#xB294; &#xC911;&#xAC04;, &#xC911;&#xAC04; postulated &#xACE0; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xC790;&#xC5F0;&#xC5D0; &#xB450; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC57D; 15 &#xBC30; &#xB35C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. PMI&#xC640; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xAE30;&#xD310; &beta;-D-mannopyranose 6-&#xC778;&#xC0B0; (&beta;-M6P) Candida albicans (&#xC720;&#xD615; I) &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xACC4;&#xC0B0; polarizable &#xBD84;&#xC790; &#xC5ED;&#xD559;, &#xC870;&#xAC01; ab initio &#xACC4;&#xC0B0;&#xB41C; &#xC808;&#xCC28; (SIBFA) &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xD569;&#xACC4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xB192;&#xC740; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC911;&#xAC04; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; 5PAH &#xBCF4;&#xACE0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD574;&#xC900;&#xB2E4; &#xAC01; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; &#xC131;&#xACA9;&#xC744; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xD30C;&#xC545; &#xD558; &#xACE0; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xACF5;&#xC2DD;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC720;&#xD615; I PMIs &#xC5EC; &#xC989;, &#xBC18;&#xC9C0; &#xC5F4;&#xACE0; &#xC218; &#xB2E8;&#xACC4; &#xAC01;&#xAC01;. &#xD6A8;&#xC18C; &#xCD09;&#xB9E4; &#xBC18;&#xC9C0;-&#xC624;&#xD504;&#xB2DD; &beta;-M6P &#xC544;&#xC5F0; &#xC870;&#xC815; &#xBB3C; &#xBC0F; Gln111 ligands&#xC758;, &#xB2E4;&#xC74C; Lys136 &#xB450; &#xD0C4;&#xC18C; &#xC6D0;&#xC790; c 1&#xACFC; c 2&#xC758; &#xAE30;&#xD310; &#xB514; &#xC2A4; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xC0AC;&#xC774; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xCD09;&#xB9E4; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC18;&#xC751; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC720;&#xD615; I phosphomannose isomerases: &#xC5B5;&#xC81C;&#xC640; polarizable &#xBD84;&#xC790; &#xC5ED;&#xD559; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC815;&#xBCF4;.

Tipo I isomerasas fosfomanosa (PMI) son dependientes del zinc metaloenzimas que participan en la isomerizaci&#xF3;n reversible de D-manosa-6-fosfato (M6P) y D-fructosa-6-fosfato (F6P). 5-fosfo-D-arabinonohydroxamic &#xE1;cido (5PAH), un inhibidor dotado de afinidad nanomolar para la levadura (Tipo I) y Pseudomonas aeruginosa (Tipo II) PMI (Roux et al, Biochemistry 2004;. 43:2926-2934), inhibe fuertemente humano (Tipo I) PMI (para los que se informa sobre una expresi&#xF3;n mejorada y procedimiento de purificaci&#xF3;n), as&#xED; como la Escherichia coli (Tipo I) PMI. Su K (i) el valor de 41 nM para PMI humano es el valor m&#xE1;s bajo jam&#xE1;s registrado de un inhibidor de la PMI. 5-fosfo-D-arabinonhydrazide, un an&#xE1;logo neutro de la reacci&#xF3;n intermedio 1,2-cis-enodiol, es aproximadamente 15 veces menos eficaz en la inhibici&#xF3;n de ambas enzimas, de acuerdo con la naturaleza ani&#xF3;nica del postulado de alta energ&#xED;a de reacci&#xF3;n intermedio. Utilizando la mec&#xE1;nica polarizables moleculares, la suma de las interacciones entre los fragmentos ab initio calculadas (SIBFA) procedimiento, las estructuras calculadas de los complejos entre Candida albicans (Tipo I) PMI y el c&#xED;clico sustrato &#x3B2;-D-manopiranosa 6-fosfato (&#x3B2;-M6P) y entre la enzima y los 5PAH alta energ&#xED;a intermedios anal&#xF3;gicos inhibidor se inform&#xF3;. Su an&#xE1;lisis nos permite identificar claramente la naturaleza de cada &#xE1;cido amino sitio individual activa y formular una hip&#xF3;tesis sobre el mecanismo general de la reacci&#xF3;n catalizada por la de tipo I PMI, es decir, la apertura del anillo y los pasos de isomerizaci&#xF3;n, respectivamente. Tras catalizada por enzimas de apertura del anillo de &#x3B2;-M6P por zinc-coordinada agua y ligandos Gln111, Lys136 se identifica como la base probable catal&#xED;tico implicado en la transferencia de protones entre los dos &#xE1;tomos de carbono C1 y C2 del sustrato D-manosa-6-fosfato.

El mecanismo de reacci&#xF3;n de tipo I Isomerasas fosfomanosa: Nueva informaci&#xF3;n de la inhibici&#xF3;n y polarizables Estudios Mec&#xE1;nica Molecular

&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;TM &#x86CB;&#x767D;) &#x5360; 25%&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x53D1;&#x6325;&#x8BB8;&#x591A;&#x75BE;&#x75C5;&#x548C;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x592A;&#x4E86;&#x89E3;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x6BD4;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3001; &#x589E;&#x6EB6;&#x3001; &#x7EAF;&#x5316;&#x53CA;&#x7ED3;&#x6676;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#x5BFC;&#x81F4;&#x74F6;&#x9888;&#x5728; TM &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x9879;&#x76EE;&#x89E3;&#x51B3;&#x4E86;&#x9700;&#x8981;&#x83B7;&#x5F97;&#x8DB3;&#x591F;&#x6570;&#x91CF;&#x7684; TM &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6539;&#x8FDB;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x7EFF;&#x8113;&#x83CC;&#x5185;&#x5728;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x8868;&#x8FBE;&#x7B5B;&#x67E5;&#x3002;

Transmembrane proteins (TM proteins) make up 25% of all proteins and play key roles in many diseases and normal physiological processes. However, much less is known about their structures and molecular mechanisms than for soluble proteins. Problems in expression, solubilization, purification, and crystallization cause bottlenecks in the characterization of TM proteins. This project addressed the need for improved methods for obtaining sufficient amounts of TM proteins for determining their structures and molecular mechanisms.

Recombinant expression screening of P. aeruginosa bacterial inner membrane proteins.

Prot&#xE9;ines transmembranaires (TM prot&#xE9;ines) repr&#xE9;sentent 25% de toutes les prot&#xE9;ines et jouent un r&#xF4;le cl&#xE9; dans de nombreuses maladies et des processus physiologiques normaux. Cependant, on sait beaucoup moins sur leurs structures et les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires que pour les prot&#xE9;ines solubles. Probl&#xE8;mes dans l&#x26;#39;expression, la solubilisation, la purification, et les goulets d&#x26;#39;&#xE9;tranglement provoquer la cristallisation dans la caract&#xE9;risation des prot&#xE9;ines TM. Ce projet portait sur la n&#xE9;cessit&#xE9; de meilleures m&#xE9;thodes pour obtenir des quantit&#xE9;s suffisantes de prot&#xE9;ines TM pour d&#xE9;terminer leurs structures et les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires.

Criblage de l&#x26;#39;expression recombinante de P. aeruginosa bact&#xE9;riennes prot&#xE9;ines membranaires int&#xE9;rieures

Transmembranproteine (TM-Proteine) machen 25 % aller Proteine und spielen eine Schl&uuml;sselrolle in vielen Krankheiten und normalen physiologischen Prozesse. Allerdings ist viel weniger &uuml;ber ihre Strukturen und Molekulare Mechanismen als l&ouml;sliche Proteine bekannt. Probleme im Ausdruck, Solubilization, Reinigung und Kristallisation verursachen Engp&auml;sse in der Charakterisierung von TM-Proteine. Dieses Projekt behandelt die Notwendigkeit einer verbesserten Methoden zur Erlangung ausreichender Mengen TM Proteine zur Bestimmung ihrer Strukturen und molekularen Mechanismen.

Rekombinante Ausdruck Screening von p. Aeruginosa bakterielle inneren Membranproteine.

Proteine transmembrana (proteine TM) costituiscono il 25% di tutte le proteine e svolgono un ruolo chiave in molte malattie e normali processi fisiologici. Tuttavia, molto meno &egrave; conosciuto circa loro strutture e meccanismi molecolari rispetto per le proteine solubili. Problemi nell&#39;espressione, solubilizzazione, purificazione e cristallizzazione causano colli di bottiglia nella caratterizzazione delle proteine TM. Questo progetto affrontato la necessit&agrave; di metodi pi&ugrave; efficaci per ottenere una quantit&agrave; sufficiente di proteine TM per determinare le loro strutture e meccanismi molecolari.

Screening ricombinante espressione delle proteine di membrana interna batterica p. aeruginosa.

&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;TM&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x3066;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;25&#xFF05;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x3084;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x53EF;&#x6EB6;&#x5316;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;TM&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x306E;&#x30DC;&#x30C8;&#x30EB;&#x30CD;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;TM&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x91CF;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x4E0A;&#x3052;&#x305F;&#x3002;

&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x5185;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x767A;&#x73FE;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;

&#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (TM &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;) &#xBAA8;&#xB4E0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; 25%&#xB97C; &#xCC28;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBC0F; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD6E8;&#xC52C; &#xB35C;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC2DD;, &#xAC00;&#xC6A9; &#xD654;, &#xC815;&#xD654;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xACB0;&#xC815; &#xD654;&#xC5D0; &#xBB38;&#xC81C; TM &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xBCD1;&#xBAA9; &#xD604;&#xC0C1;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xD2B8; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; TM &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC591;&#xC744; &#xC5BB;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xAC1C;&#xC120;&#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xD574;&#xACB0;.

P. &#xB18D; &#xADE0; &#xC138;&#xADE0; &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC2DD; &#xC2EC;&#xC0AC;.

Prote&#xED;nas transmembrana (TM prote&#xED;nas) representan el 25% de todas las prote&#xED;nas y desempe&#xF1;an un papel clave en muchas enfermedades y procesos fisiol&#xF3;gicos normales. Sin embargo, se sabe mucho menos acerca de sus estructuras y mecanismos moleculares que para las prote&#xED;nas solubles. Los problemas en la expresi&#xF3;n, solubilizaci&#xF3;n, purificaci&#xF3;n, cristalizaci&#xF3;n y cuellos de botella de la causa en la caracterizaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas TM. Este proyecto respond&#xED;a a la necesidad de mejorar los m&#xE9;todos para la obtenci&#xF3;n de cantidades suficientes de prote&#xED;nas TM para la determinaci&#xF3;n de sus estructuras y mecanismos moleculares.

Detecci&#xF3;n de expresi&#xF3;n recombinante de P. aeruginosa prote&#xED;nas bacterianas membrana interna

&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6F14;&#x5316;&#x3001; &#x6DF7;&#x6742;&#x9176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x517C;&#x804C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x529F;&#x80FD;&#x671F;&#x95F4;&#x7531;&#x4E8E; RNA &#x62FC;&#x63A5;&#x53D8;&#x5F02;&#x3001; &#x57FA;&#x56E0;&#x878D;&#x5408;&#x7F16;&#x7801;&#x591A;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x51FD;&#x6570;&#x90FD;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&quot;&#x6B63;&#x5E38;&quot;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x6216;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x4F20;&#x6388;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x662F;&quot;&#x6B63;&#x5E38;&quot;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0A;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8981;&#x8C03;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x51FD;&#x6570;&quot;neomorphic &#x517C;&#x804C;&#x51FD;&#x6570;&quot;&#x3002;Neomorphic &#x517C;&#x804C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x4F8B;&#x5B50;&#x662F;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x4F20;&#x6388;&#x65B0;&#x578B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x96C6;&#x5728;&#x8001;&#x5E74;&#x75F4;&#x5446;&#x75C7;&#xFF0C;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x548C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x7684; amyloidoses&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5728; neomorphic &#x51FD;&#x6570;&#x4E2D;&#x517C;&#x804C;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x66F4;&#x6539;&#x5305;&#x62EC; SMAD4 &#x86CB;&#x767D;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x65B0;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8005;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6539;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3001; &#x4F20;&#x6388;&#x65B0;&#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x67E0;&#x6AAC;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C;&#x5728; dihydrolipoamide &#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x9690;&#x85CF;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B; neomorphic &#x517C;&#x804C;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x65B0;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x5BFC;&#x81F4;&#x764C;&#x75C7;&#x6216;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x635F;&#x5BB3;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x65B0;&#x51FD;&#x6570;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;

Neomorphic &#x517C;&#x804C;&#x5C65;&#x884C;&#x804C;&#x80FD;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;

One gene can encode multiple protein functions because of RNA splice variants, gene fusions during evolution, promiscuous enzyme activities, and moonlighting protein functions. In addition to these types of multifunctional proteins, in which both functions are considered "normal" functions of a protein, some proteins have been described in which a mutation or conformational change imparts a second function on a protein that is not a "normal" function of the protein. We propose to call these new functions "neomorphic moonlighting functions". The most common examples of neomorphic moonlighting functions are due to conformational changes that impart novel protein-protein interactions resulting in the formation of protein aggregates in Alzheimers, Parkinsons disease, and the systemic amyloidoses. Other changes that can result in a neomorphic moonlighting function include a mutation in SMAD4 that causes the protein to bind to new promoters and thereby alter gene transcription patterns, mutations in two isocitrate dehydrogenase isoforms that impart a new catalytic activity, and mutations in dihydrolipoamide dehydrogenase that activate a hidden protease activity. These neomorphic moonlighting functions were identified because of their connection to disease. In the cases described herein, the new functions cause cancers or severe neurological impairment, although in most cases the mechanism by which the new function leads to disease is unknown.

Proteins with neomorphic moonlighting functions in disease.

Un g&#xE8;ne peut coder plusieurs prot&#xE9;ines fonctions en raison de variants d&#x26;#39;&#xE9;pissage d&#x26;#39;ARN, des fusions de g&#xE8;nes au cours de l&#x26;#39;&#xE9;volution, les activit&#xE9;s enzymatiques promiscuit&#xE9;, et les fonctions des prot&#xE9;ines travail au noir. En plus de ces types de prot&#xE9;ines multifonctionnels, dans laquelle les deux fonctions sont consid&#xE9;r&#xE9;es comme &#xAB;normales&#xBB; les fonctions d&#x26;#39;une prot&#xE9;ine, certaines prot&#xE9;ines ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;crits dans laquelle une mutation ou un changement de conformation donne une seconde fonction d&#x26;#39;une prot&#xE9;ine qui n&#x26;#39;est pas une fonction &#xAB;normale&#xBB; de la prot&#xE9;ine. Nous proposons d&#x26;#39;appeler ces nouvelles fonctions &#x26;quot;au noir n&#xE9;omorphiques fonctions&#x26;quot;. Les exemples les plus courants de fonctions au noir n&#xE9;omorphiques sont dues &#xE0; des changements conformationnels qui conf&#xE8;rent de nouveaux interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine conduisant &#xE0; la formation d&#x26;#39;agr&#xE9;gats prot&#xE9;iques dans la maladie d&#x26;#39;Alzheimer, la maladie de Parkinson, et les amyloses syst&#xE9;miques. D&#x26;#39;autres changements qui peuvent r&#xE9;sulter dans une fonction au noir n&#xE9;omorphiques comprennent une mutation dans SMAD4 qui provoque la prot&#xE9;ine de se lier &#xE0; de nouveaux promoteurs et ainsi modifier les modes de transcription des g&#xE8;nes, des mutations dans les deux isoformes isocitrate d&#xE9;shydrog&#xE9;nase, qui conf&#xE8;rent une nouvelle activit&#xE9; catalytique, et des mutations dans d&#xE9;shydrog&#xE9;nase dihydrolipoamide que activer une activit&#xE9; prot&#xE9;ase cach&#xE9;e. Ces fonctions ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;es au noir n&#xE9;omorphiques raison de leur lien &#xE0; la maladie. Dans les cas d&#xE9;crits ci-apr&#xE8;s, les nouvelles fonctions provoquer des cancers ou des troubles neurologiques graves, bien que dans la plupart des cas, le m&#xE9;canisme par lequel la nouvelle fonction conduit &#xE0; la maladie est inconnue.

Prot&#xE9;ines ayant des fonctions au noir n&#xE9;omorphiques dans la maladie

Gen kann mehrere Protein-Funktionen durch RNA-Splice-Varianten, Gen Fusionen w&auml;hrend der Evolution, promiskuitive Enzymaktivit&auml;ten und Schwarzarbeit Protein-Funktionen codieren. Zus&auml;tzlich zu diesen Arten von multifunktionelle Proteine, in denen beide Funktionen &quot;normale&quot; Funktionen eines Proteins als werden, einige Proteine sind beschrieben worden, in denen eine Mutation oder Konformations&auml;nderungen &Auml;nderung vermittelt eine zweite Funktion auf ein Protein, das keine &quot;normale&quot; Funktion des Proteins ist. Wir schlagen diese neuen Funktionen &quot;Neomorphic Schwarzarbeit Funktionen&quot; aufrufen. Die h&auml;ufigsten Beispiele Neomorphic Schwarzarbeit Funktionen sind durch Konformationsver&auml;nderungen, die neuartige Protein-Protein-Interaktionen, wodurch die Bildung von Protein-Aggregate in Alzheimers, vermitteln Parkinson und die systemischen Amyloidosen. Andere &Auml;nderungen, die in einer Neomorphic-Schwarzarbeit-Funktion f&uuml;hren k&ouml;nnen geh&ouml;ren eine Mutation im SMAD4, die bewirkt, das Protein an neue F&ouml;rderer binden und dadurch ver&auml;ndern dass, Gen-Transkription-Muster, Mutationen in zwei Isoformen der Isocitrat-Dehydrogenase, die eine neue katalytische Aktivit&auml;t zu vermitteln und Mutationen in dihydro-Dehydrogenase, die eine versteckte Protease-Aktivit&auml;t zu aktivieren. Diese Neomorphic-Schwarzarbeit-Funktionen wurden wegen ihrer Verbindung mit der Krankheit identifiziert. In den hier beschriebenen F&auml;llen f&uuml;hren die neuen Funktionen Krebs oder schwere neurologische Beeintr&auml;chtigung, obwohl der Mechanismus, mit dem die neue Funktion zur Krankheit f&uuml;hrt, in den meisten F&auml;llen unbekannt ist.

Proteine mit Neomorphic Schwarzarbeit Funktionen bei Krankheit.

Un gene pu&ograve; codificare pi&ugrave; funzioni della proteina a causa di varianti di splicing del RNA, fusioni del gene durante l&#39;evoluzione, enzima promiscua attivit&agrave; e funzioni della proteina moonlighting. Oltre a questi tipi di proteine multifunzionali, in cui entrambe le funzioni sono considerate &quot;normali&quot; funzioni di una proteina, sono state descritte alcune proteine in cui una mutazione o cambio conformazionale impartisce una seconda funzione su una proteina che non &egrave; una &quot;normale&quot; funzione della proteina. Noi proponiamo di chiamare queste nuove funzioni &quot;neomorphic moonlighting funzioni&quot;. Gli esempi pi&ugrave; comuni di moonlighting funzioni neomorphic sono dovute a cambiamenti conformazionali che conferiscono le interazioni proteina-proteina novella con conseguente formazione di aggregati di proteine nel morbo di Alzheimer, malattia di Parkinson e l&#39;amiloidosi sistemica. Altri cambiamenti che possono risultare in una funzione moonlighting neomorphic includono una mutazione in SMAD4 che provoca la proteina a legarsi a nuovi promotori e quindi modificare modelli di trascrizione genica, mutazioni in due Isocitrato deidrogenasi isoforme che conferiscono una nuova attivit&agrave; catalitica e mutazioni di Diidrolipoamide deidrogenasi che attivare un&#39;attivit&agrave; proteasica nascosti. Queste funzioni moonlighting neomorphic sono state identificate a causa della loro connessione alla malattia. Nei casi descritti, le nuove funzioni di causano tumori o gravi danni neurologici, anche se nella maggior parte dei casi il meccanismo mediante il quale la nuova funzione conduce alla malattia &egrave; sconosciuto.

Proteine con funzioni moonlighting neomorphic nella malattia.

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&#x75C5;&#x306E;Neomorphic&#x306E;&#x3053;&#x3061;&#x3089;&#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x30FC;&#x30F3;&#x63A2;&#x5075;&#x793E;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;

&#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; RNA &#xC2A4;&#xD50C;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC885;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; fusions &#xC9C4;&#xD654;, &#xBB34;&#xCC28;&#xBCC4; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; moonlighting &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC911; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB450; &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &quot;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778;&quot; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB098; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &quot;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778;&quot; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD568;&#xC218; &#xBD80;&#xC5EC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xD638;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &quot;neomorphic moonlighting &#xD568;&#xC218;&quot;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;. Neomorphic moonlighting &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC608;&#xB294; &#xC18C;&#xC124; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9D1;&#xACC4; Alzheimers&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC5BB;&#xC73C;&#xBA70; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; Parkinsons &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; amyloidoses. Neomorphic moonlighting &#xD568;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xD328;&#xD134;, &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCD09;&#xB9E4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5BB;&#xC73C;&#xBA70; &#xB450; isocitrate &#xD6A8;&#xC18C; isoforms&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC228;&#xACA8;&#xC9C4;&#xB41C; protease &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; dihydrolipoamide &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; smad4&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; neomorphic moonlighting &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xB41C; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC54C; &#xC554; &#xB610;&#xB294; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC7A5;&#xC560;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC;.

Article	Year
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Constance J. Jeffery

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