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Colony Forming Cell (CFC) Assay for Human Hematopoietic Cells

Human hematopoietic stem/progenitor cells are usually obtained from bone marrow, cord blood, or peripheral blood and are used to study hematopoiesis and ...

Washington University School of Medicine

&#x57FA;&#x56E0;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x62DB;&#x8058;&#x6A21;&#x578B;&#x5047;&#x5B9A; DNA &#x662F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7EC4;&#x88C5;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x800C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x60F3;&#x6CD5;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A; Rap1/Gcr1/Gcr2 &#x8F6C;&#x5F55;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x751F;&#x901A;&#x8FC7;&#x5927;&#x578B;&#x951A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;Nup84 &#x6838;&#x5B54; subcomplex&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;Nup84 &#x548C; subcomplex &#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x81EA;&#x5DF1;&#x4F53;&#x5185;&#x65F6;&#x878D;&#x5408;&#x5230;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5916;&#x6E90; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x3002;Rap1 &#x5171; Gcr1 &#x548C; Gcr2 &#x5F62;&#x6210;&#x9175;&#x6BCD;&#x6838;&#x5B54;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x673A;&#x5236;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6865;&#x6881;&#x3002;Nucleoporin &#x6FC0;&#x6D3B;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x771F;&#x6838;&#x73B0;&#x8C61;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x7531;&#x4E8E;&#x7624;&#x91CD;&#x6392;&#x7684;&#x6025;&#x6027;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x548C;&#x76F8;&#x5173;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9996;&#x6B21;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6613;&#x4F4D;&#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x6027;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD; Nup84 subcomplex &#x540C;&#x6E90;&#x76D2;&#x57FA;&#x56E0; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x5230;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x540C;&#x6E90; (hNup98)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; Rap1 &#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x79FB;&#x52A8;&#x8054;&#x7CFB;&#x6761;&#x5757;&#x5206;&#x5272;&#x7684;&#x6838;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x62DB;&#x8058;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6269;&#x6563;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x957F;&#x671F;&quot;&#x9006;&#x5411;&#x62DB;&#x8058;&quot;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x4EE5;&#x524D;&#x53D8;&#x79CD;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x771F;&#x6838;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x9006;&#x5411;&#x62DB;&#x8058;&#x89C4;&#x5B9A;&#x6D3B;&#x5316;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F; DNA &#x6838;&#x5B54;&#x7EC4;&#x88C5;&#x8F6C;&#x5F55;&#x673A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x62F4;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

&#x626D;&#x8F6C;&#x62DB;&#x8058;&#xFF1A; Nup84 &#x6838;&#x5B54; subcomplex &#x4ECB;&#x5BFC; Rap1/Gcr1/Gcr2 &#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

The recruitment model for gene activation presumes that DNA is a platform on which the requisite components of the transcriptional machinery are assembled. In contrast to this idea, we show here that Rap1/Gcr1/Gcr2 transcriptional activation in yeast cells occurs through a large anchored protein platform, the Nup84 nuclear pore subcomplex. Surprisingly, Nup84 and associated subcomplex components activate transcription themselves in vivo when fused to a heterologous DNA-binding domain. The Rap1 coactivators Gcr1 and Gcr2 form an important bridge between the yeast nuclear pore complex and the transcriptional machinery. Nucleoporin activation may be a widespread eukaryotic phenomenon, because it was first detected as a consequence of oncogenic rearrangements in acute myeloid leukemia and related syndromes in humans. These chromosomal translocations fuse a homeobox DNA-binding domain to the human homolog (hNup98) of a transcriptionally active component of the yeast Nup84 subcomplex. We conclude that Rap1 target genes are activated by moving to contact compartmentalized nuclear assemblages, rather than through recruitment of the requisite factors to chromatin by means of diffusion. We term this previously undescribed mechanism "reverse recruitment" and discuss the possibility that it is a central feature of eukaryotic gene regulation. Reverse recruitment stipulates that activators work by bringing the DNA to an nuclear pore complex-tethered platform of assembled transcriptional machine components.

Reverse recruitment: the Nup84 nuclear pore subcomplex mediates Rap1/Gcr1/Gcr2 transcriptional activation.

Le mod&egrave;le de recrutement pour l&#39;activation du g&egrave;ne pr&eacute;sume que l&#39;ADN est une plate-forme sur laquelle sont assembl&eacute;s les &eacute;l&eacute;ments n&eacute;cessaires de la machinerie transcriptionnelle. Contrairement &agrave; cette id&eacute;e, nous montrons ici que l&#39;activation transcriptionnelle Rap1/Gcr1/Gcr2 dans les cellules de levure se produit gr&acirc;ce &agrave; une plate-forme de grandes prot&eacute;ines ancr&eacute;es, le complexe du pore nucl&eacute;aire Nup84. &Eacute;tonnamment, Nup84 et leurs composantes subcomplex activent la transcription eux-m&ecirc;mes in vivo lorsque fusionn&eacute; &agrave; un domaine de liaison &agrave; l&#39;ADN h&eacute;t&eacute;rologue. Les coactivateurs Rap1 Gcr1 et Gcr2 forment un pont important entre le complexe de pores nucl&eacute;aires de levure et de la machinerie transcriptionnelle. Nucl&eacute;oporine activation peut &ecirc;tre un ph&eacute;nom&egrave;ne largement r&eacute;pandu d&#39;eucaryote, parce qu&#39;il a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute; pour la premi&egrave;re fois en raison des r&eacute;arrangements oncog&egrave;nes dans la leuc&eacute;mie my&eacute;lo&iuml;de aigu&euml; et les syndromes connexes chez les humains. Ces translocations chromosomiques fusionnent un domaine de liaison &agrave; l&#39;ADN de bo&icirc;te hom&eacute;otique &agrave; l&#39;homologue humain (hNup98) d&#39;un composant transcriptionnellement actif du complexe de Nup84 de levure. Nous concluons que les g&egrave;nes cibles Rap1 sont activ&eacute;s en d&eacute;pla&ccedil;ant contact assemblages nucl&eacute;aires compartiment&eacute;es, plut&ocirc;t que par le biais de recrutement des facteurs n&eacute;cessaires &agrave; la chromatine au moyen de la diffusion. Nous ce m&eacute;canisme pr&eacute;c&eacute;demment non d&eacute;crit du terme &laquo; recrutement inverse &raquo; et discuter de la possibilit&eacute; qu&#39;il est un &eacute;l&eacute;ment central de la r&eacute;gulation des g&egrave;nes eucaryotes. Recrutement inverse stipule qu&#39;activateurs fonctionnent en apportant l&#39;ADN &agrave; une plate-forme de complexe-attach&eacute; de pore nucl&eacute;aire des composants de la machine Assembl&eacute;e de transcriptional.

Inverser le recrutement : le complexe du pore nucl&eacute;aire Nup84 intervient dans l&#39;activation transcriptionnelle Rap1/Gcr1/Gcr2.

Reverse-Rekrutierung: Die Nup84 Kernpore Subkomplex vermittelt Rap1/Gcr1/Gcr2 Transkriptionsaktivierung.

Il modello di reclutamento per l&#39;attivazione del gene presume che il DNA &egrave; una piattaforma su cui sono montati i componenti necessari del macchinario trascrizionale. Contrariamente a questa idea, vi mostriamo qui che attivazione trascrizionale Rap1/Gcr1/Gcr2 in cellule di lievito si verifica attraverso una piattaforma di grandi proteine ancorate, il subcomplex del poro nucleare Nup84. Sorprendentemente, Nup84 e componenti associati subcomplex attivano trascrizione se stessi nel vivo quando fusa a un dominio DNA-binding eterologo. I coattivatori Rap1 Gcr1 e Gcr2 formano un importante ponte tra il complesso del poro nucleare di lievito e il macchinario trascrizionale. Nucleoporin attivazione pu&ograve; essere un fenomeno diffuso negli eucarioti, perch&egrave; in primo luogo &egrave; stato rilevato come conseguenza oncogenica riarrangiamenti nella leucemia mieloide acuta e sindromi correlate in esseri umani. Queste traslocazioni cromosomiche fusibile un dominio DNA-binding homeobox per l&#39;omologo umano (hNup98) di un componente transcriptionally active di subcomplex di Nup84 il lievito. Possiamo concludere che sono attivati geni bersaglio Rap1 spostando Contatta compartimentati assemblages nucleare, piuttosto che attraverso il reclutamento dei fattori necessari alla cromatina mediante diffusione. Noi termine questo meccanismo precedentemente nuovo &quot;reclutamento inversa&quot; e discutere la possibilit&agrave; che &egrave; una caratteristica centrale di regolazione genica eucariotica. Reclutamento inversa stabilisce che gli attivatori lavoro portando il DNA in una poro nucleare legato complesso piattaforma di componenti assemblati macchina trascrizionale.

Invertire il reclutamento: il Nup84 poro nucleare subcomplex media attivazione trascrizionale Rap1/Gcr1/Gcr2.

&#x52DF;&#x96C6;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081; DNA &#x8EE2;&#x5199;&#x30DE;&#x30B7;&#x30CA;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x90E8;&#x54C1;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x306B;&#x306F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x524D;&#x63D0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A2;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x79C1;&#x9054;&#x3053;&#x3053; Rap1/Gcr1/Gcr2 &#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Nup84 &#x6838;&#x819C;&#x5B54; subcomplex&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;Nup84 &#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x8EE2;&#x5199;&#x81EA;&#x8EAB;&#x304C;&#x7570;&#x7A2E;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3059;&#x308B; in vivo &#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rap1 &#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; Gcr1 &#x3068; Gcr2 &#x9175;&#x6BCD;&#x6838;&#x819C;&#x5B54;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x30DE;&#x30B7;&#x30CA;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x67B6;&#x3051;&#x6A4B;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x306E;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306E;&#x3067;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x73FE;&#x8C61;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7269; (hNup98) &#x9175;&#x6BCD; Nup84 subcomplex &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rap1 &#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x533A;&#x5206;&#x306E;&#x6838;&#x7FA4;&#x96C6;&#x306B;&#x9023;&#x7D61;&#x3059;&#x308B;&#x79FB;&#x52D5;&#x62E1;&#x6563;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x524D;&#x8FF0;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x300C;&#x30EA;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9;&#x52DF;&#x96C6;&#x300D;&#x7528;&#x8A9E;&#x3057;&#x3001;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8A71;&#x3057;&#x5408;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x52DF;&#x96C6;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x819C;&#x5B54;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x7E4B;&#x7559;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6A5F;&#x68B0;&#x90E8;&#x54C1;&#x306B; DNA &#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x6765;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9A;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9006;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#xFF1A; Nup84 &#x6838;&#x819C;&#x5B54; subcomplex Rap1/Gcr1/Gcr2 &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC44;&#xC6A9; &#xBAA8;&#xB378; DNA &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; transcriptional &#xAE30;&#xACC4;&#xC758; &#xD544;&#xC218; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC870;&#xB9BD; &#xB418;&#xB294; &#xAC00;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC544;&#xC774;&#xB514;&#xC5B4;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; Rap1/Gcr1/Gcr2 transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; Nup84 &#xD575; &#xAE30; &#xACF5; subcomplex &#xB300;&#xD615; &#xACE0;&#xC815; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Nup84 &#xBC0F; subcomplex &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xBD80;&#xD488; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC804;&#xC0AC; &#xC2A4;&#xC2A4;&#xB85C; vivo heterologous DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;. Rap1 coactivators Gcr1 &#xBC0F; Gcr2 &#xC591;&#xC2DD;&#xC744; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xD575; &#xAE30; &#xACF5; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; transcriptional &#xAE30;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC774;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB9AC;. &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xD558; &#xACE0; &#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; syndromes&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xCC98;&#xC74C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; Nucleoporin &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC9C4; &#xD575; &#xD604;&#xC0C1; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; translocations transcriptionally &#xD65C;&#xC131; &#xD6A8; &#xBAA8; Nup84 subcomplex &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8;&#xC758; homeobox DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCCB4; (hNup98)&#xC744; &#xD4E8;&#xC988;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACB0;&#xB860; Rap1 &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD655;&#xC0B0; &#xD1B5;&#xD574; chromatin&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;&#xC11C;&#xAC00; &#xC544;&#xB2CC; &#xC774;&#xB3D9;&#xB85C; &#xD55C;&#xC815;&#xB41C; &#xD575; assemblages&#xC5D0; &#xBB38;&#xC758; &#xD558; &#xC5EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC6A9;&#xC5B4;&#xC774; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; undescribed &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &quot;&#xC5ED; &#xBAA8;&#xC9D1;&quot; &#xACE0; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC9C4; &#xD575; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xCC44;&#xC6A9; &#xADDC;&#xC815; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C; &#xD575; &#xAE30; &#xACF5; &#xBCF5;&#xD569; &#xB2FF;&#xB294; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xC870;&#xB9BD;&#xB41C; transcriptional &#xAE30;&#xACC4; &#xBD80;&#xD488;&#xC758; DNA&#xB97C; &#xB370; &#xB824;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC791;&#xB3D9;.

&#xBC18;&#xB300;&#xB85C; &#xBAA8;&#xC9D1;: Nup84 &#xD575; &#xAE30; &#xACF5; subcomplex &#xC911;&#xC7AC; Rap1/Gcr1/Gcr2 transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xD654;.

El modelo de contrataci&oacute;n para la activaci&oacute;n del gen presupone que el ADN es una plataforma en la que se ensamblan los componentes necesarios de la maquinaria transcripcional. En contraste con esta idea, mostramos aqu&iacute; que Rap1/Gcr1/Gcr2 activaci&oacute;n transcripcional en c&eacute;lulas de levadura se produce a trav&eacute;s de una plataforma de prote&iacute;na anclada grande, el subcomplex de poro nuclear Nup84. Sorprendentemente, Nup84 y componentes asociados subcomplex activan transcripci&oacute;n ellos mismos en vivo cuando fusionado a un dominio de uni&oacute;n al ADN heter&oacute;logo. La activaci&oacute;n de Rap1, Gcr1 y Gcr2 forma un puente importante entre el complejo de poro nuclear de la levadura y la maquinaria transcripcional. Activaci&oacute;n de nucleoporin puede ser un fen&oacute;meno generalizado de eucariota, porque primero fue detectado como consecuencia de los cambios oncog&eacute;nicos en la leucemia mieloide aguda y s&iacute;ndromes relacionados en los seres humanos. Estas Translocaciones cromos&oacute;micas fusionan un dominio de uni&oacute;n al ADN de la caja homeo para el hom&oacute;logo humano (hNup98) de un componente transcripcionalmente activo de la subcomplex de Nup84 de la levadura. Concluimos que genes diana de Rap1 se activan moviendo contacto con ensamblajes nucleares compartimentadas, en lugar de a trav&eacute;s del reclutamiento de los factores necesarios para la cromatina por medio de difusi&oacute;n. Que este mecanismo sin descripci&oacute;n previa del t&eacute;rmino &quot;reclutamiento inversa&quot; y discutir la posibilidad de que es una caracter&iacute;stica central de la regulaci&oacute;n de los genes eucariotas. Reclutamiento inversa estipula que activadores trabajan por lo que el ADN a una plataforma de atado por el complejo de poro nuclear de componentes de equipo ensamblado y transcripcional.

Invertir selecci&oacute;n: el subcomplex de poro nuclear Nup84 interviene en la activaci&oacute;n transcripcional de Rap1/Gcr1/Gcr2.

&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x662F;&#x53D1;&#x80B2;&#x3001; &#x6052;&#x4E45;&#x7684;&#x548C;&#x7624;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x9006;&#x5411;&#x62DB;&#x8058;&#x6A21;&#x578B;&#x5047;&#x8BBE;&#x771F;&#x6838;&#x57FA;&#x56E0;&#x6210;&#x4E3A;&#x79EF;&#x6781;&#x901A;&#x8FC7;&#x79FB;&#x52A8;&#x8054;&#x7CFB;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5DE5;&#x5382;&#x5728;&#x6838;&#x7684;&#x5B50;&#x7ED3;&#x6784; &#xFF1B;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x5728;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5DE5;&#x5382;&#x88AB;&#x6813;&#x5230;&#x6838;&#x6BDB;&#x5B54;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x6838;&#x7684;&#x5916;&#x56F4;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5728;&#x8C03;&#x8282;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x538B;&#x6291;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4E00;&#x8D77;&#x8C31;&#x5199;&#x516D;&#x5206;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x538B;&#x6291;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0; SUC2 &#x4E0E;&#x6838;&#x5468;&#x56F4;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x52A8;&#x65F6;&#x5C06;&#x7D27;&#x5BC6;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x79FB;&#x52A8;&#x65F6;&#x7684;&#x538B;&#x6291;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;SUC2 &#x662F;&#x65E2; derepressed&#xFF0C;&#x5C40;&#x9650;&#x4E8E;&#x6838; rim &#x5728;&#x5176;&#x4E2D; Mig1 &#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x662F;&#x6838;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6838;&#x4E0D;&#x5468;&#x3002;&#x6839;&#x636E; derepression &#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5B50;&#x5355;&#x5143; &#xFF08;alpha&#x3001; beta &#x7248;&#x548C; &gamma;&#xFF09; &#x79EF;&#x6781;&#x7F72;&#x7406; Snf1 &#x6FC0;&#x9176;&#x590D;&#x6742;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x6838;&#x7684;&#x5916;&#x56F4;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; Mig1 &#x548C;&#x5176;&#x51FA;&#x53E3;&#x9020;&#x6210;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53CD;&#x5411;&#x62DB;&#x8058;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x89E3;&#x91CA;&#x7684;&#x771F;&#x6838;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x6839;&#x672C;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

&#x6838;&#x5916;&#x56F4;&#x8BBE;&#x5907;&#x901A;&#x8FC7;&#x9006;&#x5411;&#x62DB;&#x8058;&#x673A;&#x5236;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x53CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;

Regulation of gene transcription is a key feature of developmental, homeostatic, and oncogenic processes. The reverse recruitment model of transcriptional control postulates that eukaryotic genes become active by moving to contact transcription factories at nuclear substructures; our previous work showed that at least some of these factories are tethered to nuclear pores. We demonstrate here that the nuclear periphery is the site of key events in the regulation of glucose-repressed genes, which together compose one-sixth of the Saccharomyces cerevisiae genome. We also show that the canonical glucose-repressed gene SUC2 associates tightly with the nuclear periphery when transcriptionally active but is highly mobile when repressed. Strikingly, SUC2 is both derepressed and confined to the nuclear rim in mutant cells where the Mig1 repressor is nuclear but not perinuclear. Upon derepression all three subunits (alpha, beta, and gamma) of the positively acting Snf1 kinase complex localize to the nuclear periphery, resulting in phosphorylation of Mig1 and its export to the cytoplasm. Reverse recruitment therefore appears to explain a fundamental pathway of eukaryotic gene regulation.

Glucose-responsive regulators of gene expression in Saccharomyces cerevisiae function at the nuclear periphery via a reverse recruitment mechanism.

R&eacute;gulation de la transcription du g&egrave;ne est un &eacute;l&eacute;ment cl&eacute; du processus de d&eacute;veloppement, hom&eacute;ostatiques et oncog&egrave;nes. Le mod&egrave;le de recrutement inverse de contr&ocirc;le transcriptionnel postule que les g&egrave;nes eucaryotes deviennent actifs en se d&eacute;pla&ccedil;ant &agrave; communiquer avec les usines de transcription de sous-structures nucl&eacute;aires ; nos travaux ant&eacute;rieurs ont montr&eacute; que certains de ces usines sont attach&eacute;s &agrave; des pores nucl&eacute;aires. Nous montrons ici que la p&eacute;riph&eacute;rie nucl&eacute;aire est le site des &eacute;v&eacute;nements cl&eacute;s dans la r&eacute;gulation des g&egrave;nes r&eacute;prim&eacute;s glucose, qui composent ensemble un sixi&egrave;me du g&eacute;nome Saccharomyces cerevisiae. Nous montrons &eacute;galement que le g&egrave;ne canonique r&eacute;prim&eacute;s glucose SUC2 associe &eacute;troitement &agrave; la p&eacute;riph&eacute;rie nucl&eacute;aire lorsque transcriptionnellement actif mais tr&egrave;s mobile lorsque r&eacute;prim&eacute;e. &Eacute;tonnamment, SUC2 est d&eacute;r&eacute;prim&eacute;e et confin&eacute; &agrave; la jante nucl&eacute;aire dans les cellules mutantes o&ugrave; le r&eacute;presseur Mig1 est nucl&eacute;aire mais pas &agrave; p&eacute;rinucl&eacute;aires. Sur d&eacute;r&eacute;pression tous les trois sous-unit&eacute;s (alpha, b&ecirc;ta et gamma) de la Snf1 positivement par int&eacute;rim kinase complexe localiser &agrave; la p&eacute;riph&eacute;rie nucl&eacute;aire, ce qui entra&icirc;ne la phosphorylation de Mig1 et son exportation vers le cytoplasme. Recrutement inverse semble donc expliquer une voie fondamentale de la r&eacute;gulation des g&egrave;nes eucaryotes.

Glucose-r&eacute;actif r&eacute;gulateurs de l&#39;expression des g&egrave;nes en fonction de Saccharomyces cerevisiae &agrave; la p&eacute;riph&eacute;rie nucl&eacute;aire via un m&eacute;canisme de recrutement inverse.

Regulierung der Gen-Transkription ist ein Hauptmerkmal der Entwicklungsbiologie, hom&ouml;ostatische und Onkogene Prozesse. Das umgekehrte Einstellung Modell transkriptionelle Steuerelements postuliert, dass eukaryotic Gene aktiv werden, durch Transkription Fabriken auf nukleare Br&uuml;ckenger&uuml;ste Kontakt verschieben; Unsere bisherigen Arbeiten zeigten, dass zumindest einige der Zulieferbetriebe auf nukleare Poren angebunden sind. Hier zeigen wir, dass die nukleare Peripherie ist Standort der wichtigsten Ereignisse in der Regelung der Glukose-unterdr&uuml;ckt Gene, die zusammen ein Sechstel der Saccharomyces Cerevisiae Genom bilden. Wir zeigen auch, dass das kanonische Glukose unterdr&uuml;ckten gen, das suc2 eng verkn&uuml;pft mit der nuklearen Peripherie, wenn transcriptionally aktiv aber ist sehr mobil, wenn unterdr&uuml;ckt. Auff&auml;llig ist, ist SUC2 sowohl derepressed und auf die nukleare Felge im mutierten Zellen, wo die Mig1 Verdr&auml;nger nukleare ist, aber nicht perinukle&auml;re beschr&auml;nkt. Auf derepression alle drei Untereinheiten (Alpha, Beta und Gamma) des positiv handeln Snf1 Kinase-Komplex zur nuklearen Peripherie zu lokalisieren, was in der Phosphorylierung von Mig1 und seinen Export an Zytoplasma. Umgekehrte Einstellung erscheint daher einen grundlegenden Weg der eukaryotischen Genregulation zu erkl&auml;ren.

Glukose-responsive Regler der Genexpression in Saccharomyces Cerevisiae-Funktion bei der nuklearen Peripherie &uuml;ber ein umgekehrter Rekrutierung-Mechanismus.

Regolazione della trascrizione del gene &egrave; una funzionalit&agrave; chiave dei processi di sviluppo, omeostatici e oncogeni. Il modello di reclutamento inversione del controllo trascrizionale postula che geni eucariotici diventano attivi spostando a contatto fabbriche trascrizione nucleare sottostrutture; il nostro lavoro precedente dimostrato che almeno alcune di queste fabbriche sono legati a pori nucleari. Qui dimostriamo che la periferia nucleare &egrave; il sito degli eventi chiavi nella regolazione dei geni repressi glucosio, che nell&#39;insieme costituiscono un sesto del genoma Saccharomyces cerevisiae. Ci mostrano anche che il gene represso glucosio canonico SUC2 associa strettamente alla periferia nucleare quando transcriptionally active ma &egrave; altamente mobile quando represso. Sorprendentemente, SUC2 &egrave; derepressed sia confinata al bordo nucleare nelle cellule mutanti dove il repressore Mig1 &egrave; nucleare ma non perinucleare. Su derepression tutte le tre subunit&agrave; (alfa, beta e gamma) della recitazione positivamente Snf1 complesso chinasi localizzare alla periferia nucleare, con conseguente fosforilazione di Mig1 e sua esportazione nel citoplasma. Reclutamento inversa appare quindi spiegare un percorso fondamentale di regolazione genica eucariotica.

Glucosio-reattiva regolatori dell&#39;espressione genica in funzione di Saccharomyces cerevisiae alla periferia nucleare attraverso un meccanismo di reclutamento inversa.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x767A;&#x9054;&#x3001;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3001;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x9006;&#x52DF;&#x96C6;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x5DE5;&#x5834;&#x3067;&#x6838;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x9023;&#x7D61;&#x3057;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x524D;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5DE5;&#x5834;&#x306E;&#x6838;&#x306E;&#x6BDB;&#x7A74;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6838;&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x304C;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E; 6 &#x5206;&#x306E; 1 &#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6291;&#x5727;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;SUC2&#x3001;&#x6838;&#x306E;&#x5916;&#x5468;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x304D;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x6291;&#x5727;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306A;&#x30E2;&#x30D0;&#x30A4;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x6B63;&#x898F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6291;&#x5236;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x3001;SUC2 &#x306F;&#x4E21;&#x65B9; derepressed &#x3057;&#x3001;Mig1 &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x304C;&#x6838;&#x3067;&#x3059;&#x5909;&#x7570;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x6838;&#x306E;&#x6838;&#x306E;&#x7E01;&#x306B;&#x9589;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8981; Mig1 &#x3068;&#x8F38;&#x51FA;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306B;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x6838;&#x5468;&#x56F2;&#x306B;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B; Snf1 &#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; 3 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; (&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x3001;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#xFF09; &#x3092; derepression &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x52DF;&#x96C6;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x7684;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED; &#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#x9175;&#x6BCD;&#x95A2;&#x6570;&#x9006;&#x52DF;&#x96C6;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6838;&#x5468;&#x8FBA;&#x90E8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3002;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xC870;&#xC808;, &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;, &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD558; &#xACE0; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C4; &#xD575; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB3D9; &#xD575; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xC758;;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC0AC; &#xACF5;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xBB38;&#xC758; &#xD558; &#xC5EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB420; transcriptional &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xCC44;&#xC6A9; &#xBAA8;&#xB378;&#xC774; &#xC5EC;&#xAE34;&#xB2E4; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xC791;&#xC5C5; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xC77C;&#xBD80; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACF5;&#xC7A5;&#xC758; &#xD575; &#xBAA8; &#xACF5;&#xC5D0; &#xB2FF;&#xB294; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xAE30; &#xD575; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC5B5;&#xC555; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD568;&#xAED8; &#xC791;&#xC131; Saccharomyces cerevisiae &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; 1 / 6&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xC694; &#xD589;&#xC0AC;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xC815;&#xC2DD; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC5B5;&#xC555; &#xC720;&#xC804;&#xC790; SUC2 transcriptionally &#xD65C;&#xC131; &#xB54C; &#xD575; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC5B5;&#xC555; &#xB54C; &#xBAA8;&#xBC14;&#xC77C; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xAE30; &#xB9C9;&#xD788;&#xAC8C;, SUC2 derepressed&#xC640; Mig1 &#xC9C4;&#xC555; &#xD575; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC140;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; perinuclear &#xD575; &#xAC00;&#xC7A5;&#xC790;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; Mig1 &#xBC0F; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC218;&#xCD9C;&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD589;&#xB3D9; Snf1 &#xB2C8; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD575; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; subunits (&#xC54C;&#xD30C;, &#xBCA0;&#xD0C0;, &#xAC10;&#xB9C8;) derepression. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xC9C4; &#xD575; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xACBD;&#xB85C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC5ED; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD575; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0; Saccharomyces cerevisiae &#xD568;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758;.

Regulaci&oacute;n de la transcripci&oacute;n del gene es una caracter&iacute;stica clave de los procesos de desarrollo, homeost&aacute;ticas y oncog&eacute;nicos. El modelo de contrataci&oacute;n inversa de control transcripcional postula que genes eucari&oacute;ticos activarse moviendo contacto con f&aacute;bricas de transcripci&oacute;n en subestructuras nucleares; nuestro trabajo previo demostr&oacute; que al menos algunas de estas f&aacute;bricas est&aacute;n atados a poros nucleares. Aqu&iacute; demostramos que la periferia nuclear es el sitio de los acontecimientos claves en la regulaci&oacute;n de los genes reprimidos por glucosa, que juntas componen una sexta parte del genoma de Saccharomyces cerevisiae. Tambi&eacute;n demostramos que el can&oacute;nico reprimidas glucosa gen SUC2 asocia estrechamente la periferia nuclear cuando transcripcionalmente activo pero es altamente m&oacute;vil cuando reprime. Sorprendentemente, SUC2 se ha y confinado al borde nuclear en las c&eacute;lulas mutantes donde el represor Mig1 es nuclear pero no perinuclear. A derepression todos tres subunidades (alfa, beta y gamma) de la Snf1 positivamente temporario quinasa complejo localizar a la periferia nuclear, dando por resultado la fosforilaci&oacute;n de Mig1 y su exportaci&oacute;n hacia el citoplasma. Reclutamiento inversa por lo tanto parece explicar una v&iacute;a fundamental de regulaci&oacute;n de los genes eucariotas.

Glucosa-responsiva reguladores de la expresi&oacute;n g&eacute;nica en funci&oacute;n de Saccharomyces cerevisiae en la periferia nuclear mediante un mecanismo de reclutamiento inversa.

NUP98 HOXA9 &#x662F;&#x4E00;&#x7EC4;&#x4E0E;&#x6025;&#x6027;&#x9AD3;&#x7CFB;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x539F;&#x578B;&#x3002;&#x5B83;&#x7531; NUP98 &#x878D;&#x5408;&#x7684; HOXA9 homeodomain N &#x7AEF;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x76F8;&#x4FE1;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5F02;&#x5E38;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7; homeodomain &#x7684; DNA&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; NUP98 HOXA9 &#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x8282;&#x4E0D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; DNA &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x786E;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x5316;&#x80FD;&#x529B;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x7684; NUP98 &#x548C; HOXA9 &#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8D21;&#x732E;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E3B; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x89E3;&#x5256;&#x548C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; HOXA9&#x3002;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#xFF0C;HOXA9 &#x4E86;&#x53EA;&#x6709;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9020;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x4E0E;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x4E2D;&#x65AD;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EBA;&#x7C7B; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E3B;&#x8981;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x7684; NUP98 &#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x800C;&#x611F;&#x5E94;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x589E;&#x6B96;&#x6240;&#x9700;&#x7684; NUP98 &#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x5B8C;&#x6574;&#x7684; homeodomain&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E3B; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x4E00;&#x7EC4;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x65F6;&#x5F02;&#x5E38;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E; NUP98 &#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC; RAP1A&#x3001; HEY1 &#x548C; PTGS2 (&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176;-2&#xFF09;&#x3002;&#x5176;&#x804C;&#x80FD;&#x53EF;&#x80FD;&#x53CD;&#x6620;&#x5411;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x7684; NUP98 &#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5BF9;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x5F71;&#x54CD;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x673A;&#x5236;&#xFF1A; &#x4E00;&#x4E2A;&#x6D89;&#x53CA;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x63A5;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x4E0E; homeodomain &#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x4E3B;&#x8981;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; NUP98 &#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x4E0D;&#x6D89;&#x53CA; DNA &#x76F4;&#x63A5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;

&#x8F6C;&#x578B;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EBA;&#x9020;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; NUP98 HOXA9 &#x5939;&#x5C42;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#x3002;

NUP98-HOXA9 is the prototype of a group of oncoproteins associated with acute myeloid leukemia. It consists of an N-terminal portion of NUP98 fused to the homeodomain of HOXA9 and is believed to act as an aberrant transcription factor that binds DNA through the homeodomain. Here we show that NUP98-HOXA9 can regulate transcription without binding to DNA. In order to determine the relative contributions of the NUP98 and HOXA9 portions to the transforming ability of NUP98-HOXA9, the effects of NUP98-HOXA9 on primary human CD34+ cells were dissected and compared to those of wild-type HOXA9. In contrast to previous findings in mouse cells, HOXA9 had only mild effects on the differentiation and proliferation of primary human hematopoietic cells. The ability of NUP98-HOXA9 to disrupt the differentiation of primary human CD34+ cells was found to depend primarily on the NUP98 portion, whereas induction of long-term proliferation required both the NUP98 moiety and an intact homeodomain. Using oligonucleotide microarrays in primary human CD34+ cells, a group of genes was identified whose dysregulation by NUP98-HOXA9 is attributable primarily to the NUP98 portion. These include RAP1A, HEY1, and PTGS2 (COX-2). Their functions may reflect the contribution of the NUP98 moiety of NUP98-HOXA9 to leukemic transformation. Taken together, these results suggest that the effects of NUP98-HOXA9 on gene transcription and cell transformation are mediated by at least two distinct mechanisms: one that involves promoter binding through the homeodomain with direct transcriptional activation, and another that depends predominantly on the NUP98 moiety and does not involve direct DNA binding.

Dissection of the transformation of primary human hematopoietic cells by the oncogene NUP98-HOXA9.

NUP98-HOXA9 est le prototype d&#x26;#39;un groupe de oncoprot&#xE9;ines associ&#xE9;s &#xE0; la leuc&#xE9;mie my&#xE9;lo&#xEF;de aigu&#xEB;. Il se compose d&#x26;#39;une partie N-terminale de NUP98 fusionn&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;hom&#xE9;odomaine de HOXA9 et est cens&#xE9; agir comme un facteur de transcription qui se lie aberrante d&#x26;#39;ADN &#xE0; travers l&#x26;#39;hom&#xE9;odomaine. Ici, nous montrons que NUP98-HOXA9 peut r&#xE9;guler la transcription sans se lier &#xE0; l&#x26;#39;ADN. Afin de d&#xE9;terminer les contributions relatives des NUP98 et HOXA9 parties &#xE0; la capacit&#xE9; de transformation de NUP98-HOXA9, les effets de NUP98-HOXA9 sur humaines primaires de cellules CD34 + ont &#xE9;t&#xE9; diss&#xE9;qu&#xE9;es et compar&#xE9;es &#xE0; celles de type sauvage HOXA9. Contrairement aux r&#xE9;sultats pr&#xE9;c&#xE9;dents dans les cellules de souris, HOXA9 eu que des effets l&#xE9;gers sur la diff&#xE9;renciation et la prolif&#xE9;ration des cellules h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques humaines primaires. La capacit&#xE9; de NUP98-HOXA9 de perturber la diff&#xE9;renciation des humains primaires cellules CD34 + a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; &#xE0; d&#xE9;pendre principalement sur la partie NUP98, alors que l&#x26;#39;induction de la prolif&#xE9;ration &#xE0; long terme n&#xE9;cessaire &#xE0; la fois la fraction NUP98 et un hom&#xE9;odomaine intacte. Utilisation de puces &#xE0; oligonucl&#xE9;otides dans le primaire de l&#x26;#39;homme cellules CD34 +, un groupe de g&#xE8;nes a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9; dont la d&#xE9;r&#xE9;gulation par NUP98-HOXA9 est principalement attribuable &#xE0; la portion NUP98. Il s&#x26;#39;agit notamment de RAP1A, HEY1, et PTGS2 (COX-2). Leurs fonctions peuvent refl&#xE9;ter la contribution de la fraction de NUP98 NUP98-HOXA9 &#xE0; la transformation leuc&#xE9;mique. Pris ensemble, ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que les effets de NUP98-HOXA9 sur la transcription du g&#xE8;ne et la transformation cellulaire sont m&#xE9;di&#xE9;es par au moins deux m&#xE9;canismes distincts: l&#x26;#39;un qui implique la liaison par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du promoteur hom&#xE9;odomaine avec activation de la transcription directe, et une autre qui d&#xE9;pend principalement de la fraction NUP98 et n&#x26;#39;implique pas de liaison directe de l&#x26;#39;ADN.

Dissection de la transformation des primaires des cellules h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques humaines par l&#x26;#39;oncog&#xE8;ne NUP98-HOXA9

NUP98-HOXA9 ist der Prototyp einer Gruppe von Oncoproteinen, die akute myeloische Leuk&auml;mie zugeordnet. Es besteht aus einer N-terminalen Teil des NUP98 verschmolzen, die Hom&ouml;odom&auml;ne des HOXA9 und wird geglaubt, um ein Transkriptionsfaktor, aberrante handeln, die durch die Hom&ouml;odom&auml;ne DNA bindet. Hier zeigen wir, dass NUP98-HOXA9 ohne Bindung an DNA Transkription regulieren kann. Um die relative Beitr&auml;ge der NUP98 und HOXA9 Teile die verwandelnde F&auml;higkeit der NUP98-HOXA9 zu ermitteln, wurden die Auswirkungen der NUP98-HOXA9 auf prim&auml;ren humanen CD34 + Zellen zerlegt und im Vergleich zu Wildtyp HOXA9. Im Gegensatz zu fr&uuml;heren befunden in Maus-Zellen hatte HOXA9 nur milde Effekte auf die Differenzierung und Vermehrung von prim&auml;ren humanen h&auml;matopoetischen Zellen. Die F&auml;higkeit des NUP98-HOXA9, die Differenzierung der prim&auml;ren humanen CD34 + Zellen st&ouml;ren wurde festgestellt, dass in erster Linie abh&auml;ngig von der NUP98 Teil, w&auml;hrend die Induktion der langfristigen Verbreitung der NUP98-Gruppe und eine intakte Hom&ouml;odom&auml;ne erforderlich. Oligonucleotide Microarrays in prim&auml;ren humanen CD34 + Zellen verwenden, wurde eine Gruppe von Genen identifiziert, deren Dysregulation durch NUP98-HOXA9 in erster Linie auf den NUP98 Teil zur&uuml;ckzuf&uuml;hren ist. Dazu geh&ouml;ren RAP1A, HEY1 und PTGS2 (COX-2). Ihre Funktionen k&ouml;nnen den Beitrag der NUP98 Teil des NUP98-HOXA9 zu leuk&auml;mischen Transformation widerspiegeln. Zusammen genommen, diese Ergebnisse legen nahe, dass die Auswirkungen der NUP98-HOXA9 gen-Transkription und Zelle-Transformation durch mindestens zwei verschiedene Mechanismen vermittelt sind: eine, die Projekttr&auml;ger, die Bindung durch die Hom&ouml;odom&auml;ne mit direkten transkriptionelle Aktivierung beinhaltet und ein anderes, das h&auml;ngt &uuml;berwiegend von der NUP98-Gruppe und das ohne direkte DNA-Bindung.

Dissektion der Transformation der prim&auml;ren menschlichen blutbildender Zellen durch das Onkogen-NUP98-HOXA9.

NUP98-HOXA9 &egrave; il prototipo di un gruppo di oncoproteins associati a leucemia mieloide acuta. Esso &egrave; costituito da una porzione N-terminale di NUP98 fuso a omeodominio di HOXA9 e si crede di agire come un fattore di trascrizione aberranti che lega il DNA attraverso l&#39;omeodominio. Qui vi mostriamo che NUP98-HOXA9 pu&ograve; regolare la trascrizione senza legame al DNA. Al fine di determinare i contributi relativi delle parti NUP98 e HOXA9 per la capacit&agrave; trasformante di NUP98-HOXA9, gli effetti della NUP98-HOXA9 su primarie cellule umane CD34 + furono sezionati e rispetto a quelle del selvaggio-tipo HOXA9. In contrasto con i risultati precedenti in cellule di topo, HOXA9 aveva solo lievi effetti sulla differenziazione e proliferazione delle cellule emopoietiche umane primarie. La capacit&agrave; di interferire con la differenziazione delle principali cellule umane CD34 + NUP98-HOXA9 &egrave; stata trovata a dipendere principalmente la porzione di NUP98, considerando che l&#39;induzione di proliferazione a lungo termine necessaria sia la frazione di NUP98 e un omeodominio intatto. Usando i microarrays del oligonucleotide in primarie cellule umane CD34 +, &egrave; stato identificato un gruppo di geni cui disregolazione di NUP98-HOXA9 &egrave; attribuibile principalmente alla parte NUP98. Questi includono RAP1A, HEY1 e PTGS2 (COX-2). Loro funzioni potrebbero riflettere il contributo del gruppo funzionale NUP98 di NUP98-HOXA9 di trasformazione leucemiche. Presi insieme, questi risultati suggeriscono che gli effetti di NUP98-HOXA9 sulla trasformazione delle cellule e trascrizione genica sono mediati da almeno due meccanismi distinti: uno che coinvolge promotore associazione attraverso l&#39;omeodominio con attivazione trascrizionale diretta e l&#39;altro che dipende principalmente la frazione NUP98 e non coinvolgere il binding diretto del DNA.

Dissezione della trasformazione delle cellule ematopoietiche primarie mediante la NUP98-HOXA9.

NUP98-HOXA9&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;HOXA9&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;DNA&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;NUP98&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;NUP98-HOXA9&#x306F;&#x3001;DNA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; NUP98-HOXA9&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x4EE3;&#x30D2;&#x30C8;CD34 +&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;NUP98&#x3068;HOXA9&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x89E3;&#x5256;&#x3057;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;HOXA9&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;HOXA9&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x30D2;&#x30C8;&#x9020;&#x8840;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x8EFD;&#x5EA6;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x521D;&#x4EE3;&#x30D2;&#x30C8;CD34 +&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3055;&#x305B;&#x308B;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;NUP98&#x90E8;&#x5206;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;NUP98&#x90E8;&#x5206;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x521D;&#x4EE3;&#x30D2;&#x30C8;CD34 +&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x4E0D;&#x5168;NUP98-HOXA9&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;NUP98&#x90E8;&#x5206;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;RAP1A&#x3001;HEY1&#x3001;&#x3068;PTGS2&#xFF08;COX-2&#xFF09;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;NUP98-HOXA9&#x306E;NUP98&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002; NUP98&#x90E8;&#x5206;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x76F4;&#x63A5;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3001;&#x3082;&#x3046;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x306B;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x4F34;&#x308F;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;NUP98-HOXA9&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E00;&#x6B21;&#x30D2;&#x30C8;&#x9020;&#x8840;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x306E;&#x89E3;&#x5256;

NUP98-HOXA9 oncoproteins &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0; &#xD0C0;&#xC785;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xACFC; NUP98 HOXA9 homeodomain &#xC735;&#xD569;&#xC758; N &#xB2E8;&#xC790; &#xBD80;&#xBD84;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xD55C; &#xD0C8; &#xC120; &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; homeodomain&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; DNA&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xD589;&#xC704;&#xB85C; &#xC5EC;&#xACA8;&#xC9C4;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; NUP98 HOXA9 DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC5C6;&#xC774; &#xB179;&#xC74C;&#xC744; &#xC870;&#xC808;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. NUP98 &#xBC0F; HOXA9 NUP98 hoxa9&#xC758; &#xBCC0;&#xD615; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC77C;&#xBD80;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xAE30;&#xC5EC;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; CD34 + &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; NUP98 hoxa9&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD574; &#xBD80; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; hoxa9&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC140;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2EC;&#xB9AC; HOXA9 &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; &#xC870; &#xD608; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC628;&#xD654;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74; &#xC7A5;&#xAE30; &#xD655;&#xC0B0; &#xC720;&#xB3C4; &#xD544;&#xC694; NUP98 moiety &#xACE0; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; homeodomain NUP98 &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD558; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; CD34 + &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; NUP98 hoxa9&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. Oligonucleotide microarrays&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; CD34 + &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xADF8;&#xB8F9; NUP98 hoxa9&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; dysregulation NUP98 &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xAE30;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. RAP1A, HEY1, &#xBC0F; PTGS2 &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; (-2). &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; leukemic &#xBCC0;&#xD658; NUP98 hoxa9&#xC758; NUP98 moiety&#xC758; &#xAE30;&#xC5EC;&#xB3C4; &#xBC18;&#xC601; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xC640; &#xC140; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; NUP98 hoxa9&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548;: &#xC9C1;&#xC811; transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; homeodomain&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;&#xC640; &#xB41C; NUP98 moiety&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C1;&#xC811; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Oncogene NUP98 hoxa9&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; &#xC870; &#xD608; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCC0;&#xD658;&#xC758; &#xD574; &#xBD80;.

Nup98-Hoxa9 es el prototipo de un grupo de oncoprote&#xED;nas asociadas con la leucemia mieloide aguda. Se compone de una porci&#xF3;n N-terminal de Nup98 fusionado al homeodominio de Hoxa9 y se cree que act&#xFA;a como un factor de transcripci&#xF3;n aberrante que se une el ADN a trav&#xE9;s de la homeodominio. Aqu&#xED; nos muestran que Nup98-Hoxa9 puede regular la transcripci&#xF3;n, sin unirse al ADN. Con el fin de determinar las contribuciones relativas de los Nup98 y Hoxa9 porciones a la capacidad transformadora de la Nup98-Hoxa9, los efectos de Nup98-Hoxa9 en c&#xE9;lulas humanas primarias CD34 + fueron disecados y en comparaci&#xF3;n con los de tipo salvaje Hoxa9. En contraste con los resultados anteriores en c&#xE9;lulas de rat&#xF3;n, Hoxa9 ten&#xED;a s&#xF3;lo leves efectos sobre la diferenciaci&#xF3;n y proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas hematopoy&#xE9;ticas humanas primarias. La capacidad de Nup98-Hoxa9 para interrumpir la diferenciaci&#xF3;n de primarios humanos c&#xE9;lulas CD34 + se encontr&#xF3; que dependen principalmente de la porci&#xF3;n Nup98, mientras que la inducci&#xF3;n de la proliferaci&#xF3;n a largo plazo requiere tanto la fracci&#xF3;n Nup98 y un homeodominio intacta. El uso de microarrays de oligonucle&#xF3;tidos en la ense&#xF1;anza primaria humanos c&#xE9;lulas CD34 +, un grupo de genes fue identificada por la desregulaci&#xF3;n, cuyo Nup98-Hoxa9 es atribuible principalmente a la parte Nup98. Estos incluyen RAP1A, Hey1 y PTGS2 (COX-2). Sus funciones pueden reflejar la contribuci&#xF3;n de la fracci&#xF3;n de Nup98 Nup98-Hoxa9 a la transformaci&#xF3;n leuc&#xE9;mica. En conjunto, estos resultados sugieren que los efectos de Nup98-Hoxa9 en la transcripci&#xF3;n de genes y la transformaci&#xF3;n celular son mediados por lo menos dos mecanismos diferentes: una que consiste en la uni&#xF3;n a trav&#xE9;s del promotor de homeodominio con la activaci&#xF3;n transcripcional directa, y otro que depende sobre todo de la fracci&#xF3;n Nup98 y no implica uni&#xF3;n directa del ADN.

La disecci&#xF3;n de la transformaci&#xF3;n de estas c&#xE9;lulas hematopoy&#xE9;ticas Humanos por el oncog&#xE9;n Nup98-Hoxa9

NUP98 &#x662F; nucleoporin &#x8D77;&#x8D29;&#x8FD0;&#x80DE;&#x6838;&#x80DE;&#x8D28;&#x8FDE;&#x4F53;&#x7684;&#x5927;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x91CD;&#x6392;&#x7684; NUP98 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x4E2D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8BB8;&#x591A;&#x878D;&#x5408;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x80DE;&#x6838;&#x80DE;&#x8D28;&#x8FDE;&#x4F53;&#x8D29;&#x8FD0;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x62A5;&#x544A;&#x8FDB;&#x884C;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x5BF9; CRM1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3; leukemogenic NUP98 &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;NUP98-HOXA9&#xFF0C;&#x539F;&#x578B;&#x7684; NUP98 &#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684; CRM1 &#x886C;&#x5E95;&#xFF1A; &#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x548C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x4FEE;&#x8BA2;&#x7248;&#x4F53;&#x5916;&#x7ED3;&#x5408;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x63ED;&#x793A; NUP98 HOXA9 &#x7ED1;&#x5B9A; CRM1&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7; FG &#x91CD;&#x590D;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x5189; GTP &#x4F9D;&#x8D56;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4F46;&#x6BD4; CRM1 &#x548C;&#x5176;&#x51FA;&#x53E3;&#x886C;&#x5E95;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A; NUP98 &#x878D;&#x5408;&#xFF0C;NUP98 HOXA9 &#x548C; NUP98 DDX10&#xFF0C;&#x5176;&#x878D;&#x5408;&#x4F19;&#x4F34;&#x662F;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x65E0;&#x5173;&#xFF0C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; CRM1 co &#x6C89;&#x6DC0;&#x6240;&#x793A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; leukemogenic NUP98 &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528; CRM1&#x3001; &#x5189;&#xFF0C;&#x4E0E; nucleoporin NUP214 &#x91CE;&#x751F;&#x578B; NUP98 &#x622A;&#x7136;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;NUP98 HOXA9 &#x548C; NUP98 DDX10 &#x5F62;&#x6210;&#x7279;&#x5F81;&#x805A;&#x5408;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x548C;&#x4E3B; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x5185;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9020;&#x6210;&#x5F02;&#x5E38;&#x7684; CRM1 &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x518D;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x805A;&#x5408;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; NUP98 &#x878D;&#x5408;&#x9020;&#x6210;&#x6838;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;NFAT &#x548C; NFkappaB&#xFF0C;&#x7531; CRM1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x51FA;&#x53E3;&#x7BA1;&#x5236;&#x3002;NFAT &#x548C; NFkappaB &#x7684;&#x6838;&#x8BF1;&#x60D1;&#x4E0E;&#x589E;&#x5F3A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4ECE;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x56DE;&#x5E94;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x7531;&#x54EA;&#x4E9B; NUP98 &#x878D;&#x5408; dysregulate &#x8F6C;&#x5F55;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x65B0;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x5BFC;&#x81F4;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5373;&#x6291;&#x5236;&#x7684; CRM1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x5F02;&#x5E38;&#x6838;&#x4FDD;&#x7559;&#x3002;

CRM1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; leukemogenic NUP98 &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

NUP98 is a nucleoporin that plays complex roles in the nucleocytoplasmic trafficking of macromolecules. Rearrangements of the NUP98 gene in human leukemia result in the expression of numerous fusion oncoproteins whose effect on nucleocytoplasmic trafficking is poorly understood. The present study was undertaken to determine the effects of leukemogenic NUP98 fusion proteins on CRM1-mediated nuclear export. NUP98-HOXA9, a prototypic NUP98 fusion, inhibited the nuclear export of two known CRM1 substrates: mutated cytoplasmic nucleophosmin and HIV-1 Rev. In vitro binding assays revealed that NUP98-HOXA9 binds CRM1 through the FG repeat motif in a Ran-GTP-dependent manner similar to but stronger than the interaction between CRM1 and its export substrates. Two NUP98 fusions, NUP98-HOXA9 and NUP98-DDX10, whose fusion partners are structurally and functionally unrelated, interacted with endogenous CRM1 in myeloid cells as shown by co-immunoprecipitation. These leukemogenic NUP98 fusion proteins interacted with CRM1, Ran, and the nucleoporin NUP214 in a manner fundamentally different from that of wild-type NUP98. NUP98-HOXA9 and NUP98-DDX10 formed characteristic aggregates within the nuclei of a myeloid cell line and primary human CD34+ cells and caused aberrant localization of CRM1 to these aggregates. These NUP98 fusions caused nuclear accumulation of two transcription factors, NFAT and NFkappaB, that are regulated by CRM1-mediated export. The nuclear entrapment of NFAT and NFkappaB correlated with enhanced transcription from promoters responsive to these transcription factors. Taken together, the results suggest a new mechanism by which NUP98 fusions dysregulate transcription and cause leukemia, namely, inhibition of CRM1-mediated nuclear export with aberrant nuclear retention of transcriptional regulators.

Inhibition of CRM1-mediated nuclear export of transcription factors by leukemogenic NUP98 fusion proteins.

NUP98 est un nucl&#xE9;oporine qui joue un r&#xF4;le complexe dans le trafic nucl&#xE9;ocytoplasmique des macromol&#xE9;cules. Les r&#xE9;arrangements du g&#xE8;ne NUP98 dans le r&#xE9;sultat de leuc&#xE9;mie humaine dans l&#x26;#39;expression de oncoprot&#xE9;ines de fusion de nombreuses dont l&#x26;#39;effet sur le trafic nucl&#xE9;ocytoplasmique est mal comprise. La pr&#xE9;sente &#xE9;tude a &#xE9;t&#xE9; entreprise pour d&#xE9;terminer les effets de leuc&#xE9;mog&#xE8;nes NUP98 prot&#xE9;ines de fusion sur CRM1 m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;exportation nucl&#xE9;aire. NUP98-HOXA9, un prototype NUP98 fusion, inhib&#xE9; l&#x26;#39;exportation nucl&#xE9;aire de deux substrats connus CRM1: mut&#xE9; cytoplasmique nucl&#xE9;ophosmine et le VIH-1 Rev Dans les essais de liaison in vitro ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que NUP98-HOXA9 lie CRM1 &#xE0; travers le motif r&#xE9;p&#xE9;t&#xE9; FG dans un Ran-GTP- de fa&#xE7;on d&#xE9;pendante similaire &#xE0;, mais plus fort que l&#x26;#39;interaction entre CRM1 et ses substrats exportation. Deux NUP98 fusions, NUP98-HoxA9 et NUP98-DDX10, dont la fusion des partenaires sont structurellement et fonctionnellement ind&#xE9;pendant, en interaction avec CRM1 endog&#xE8;ne dans les cellules my&#xE9;lo&#xEF;des, comme indiqu&#xE9; par co-immunopr&#xE9;cipitation. Ces NUP98 leuc&#xE9;mog&#xE8;nes prot&#xE9;ines de fusion ont interagi avec CRM1, Ran, et la NUP214 nucl&#xE9;oporine d&#x26;#39;une mani&#xE8;re fondamentalement diff&#xE9;rente de celle de type sauvage NUP98. NUP98-HOXA9 et NUP98-DDX10 form&#xE9;e agr&#xE9;gats caract&#xE9;ristiques dans les noyaux d&#x26;#39;une ligne de cellules my&#xE9;lo&#xEF;des et humaines primaires cellules CD34 + et la localisation caus&#xE9; aberrante de CRM1 &#xE0; ces agr&#xE9;gats. Ces fusions NUP98 provoqu&#xE9; une accumulation nucl&#xE9;aire de deux facteurs de transcription, NFAT et NFkappaB, qui sont r&#xE9;glement&#xE9;s par CRM1 m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;exportation. Le pi&#xE9;geage nucl&#xE9;aire de NFAT et NFkappaB en corr&#xE9;lation avec augmentation de la transcription des promoteurs sensibles &#xE0; ces facteurs de transcription. Pris dans leur ensemble, les r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent un nouveau m&#xE9;canisme par lequel NUP98 fusions d&#xE9;r&#xE9;gler la transcription et la leuc&#xE9;mie cause, &#xE0; savoir, l&#x26;#39;inhibition de CRM1 m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;exportation nucl&#xE9;aire avec r&#xE9;tention nucl&#xE9;aire aberrante de r&#xE9;gulateurs de transcription.

L&#x26;#39;inhibition de la CRM1 m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;exportation nucl&#xE9;aire de facteurs de transcription par leuc&#xE9;mog&#xE8;ne NUP98 prot&#xE9;ines de fusion

NUP98 ist eine Nucleoporin, die komplexe Rollen in den Nucleocytoplasmic Handel von Makromolek&uuml;len spielt. Umlagerungen des NUP98-Gens in menschliche Leuk&auml;mie f&uuml;hren in der Auspr&auml;gung der zahlreichen Fusion-Oncoproteinen, dessen Auswirkungen auf die Nucleocytoplasmic des Menschenhandels schlecht verstanden wird. Die vorliegende Studie wurde durchgef&uuml;hrt, zur Bestimmung der Wirkung von Leukemogenic NUP98 Schmelzverfahrensproteine auf nukleare Export CRM1-vermittelte. NUP98-HOXA9, eine prototypische NUP98 Fusion, gehemmt nukleare Ausfuhr von zwei bekannten CRM1 Substrate: mutierte zellplasmatisches Nucleophosmin und HIV-1 Rev. In-Vitro-verbindliche Proben ergeben, dass NUP98-HOXA9 durch das FG-wiederholen-Motiv in Ran-GTP-abh&auml;ngigen &auml;hnlich aber st&auml;rker als die Interaktion zwischen CRM1 und seine Export-Substrate CRM1 bindet. Zwei NUP98-Fusions, NUP98-HOXA9 und NUP98-DDX10, deren Verschmelzung Partner strukturell und funktionell nichts zu tun haben, interagierte mit endogenen CRM1 in myeloid Zellen, wie co-Immunopr&auml;zipitation gezeigt. Diese Leukemogenic NUP98 Schmelzverfahrensproteine interagierte mit CRM1, Ran und die Nucleoporin NUP214 in einer Weise grundlegend verschieden von der Wildtyp NUP98. NUP98-HOXA9 und NUP98-DDX10 charakteristische Aggregate innerhalb der Kerne von einer myeloische Zelllinie und prim&auml;ren humanen CD34 + Zellen gebildet und aberrante Lokalisierung von CRM1 um diese Aggregate verursacht. Diese NUP98-Fusionen verursachte nukleare Anreicherung von zwei Transkriptionsfaktoren, NFAT und NFkappaB, die CRM1-vermittelte Export geregelt sind. Die nukleare Fangstellen NFAT und NFkappaB korreliert mit verst&auml;rkten Transkription von Projekttr&auml;gern reagieren auf diese Transkriptionsfaktoren. Zusammen genommen die Ergebnisse schlagen Sie einen neuen Mechanismus, durch welche NUP98 Fusionen Dysregulate Transkription und verursachen Leuk&auml;mie, n&auml;mlich Hemmung der CRM1-vermittelte nukleare export mit aberrante nukleare Eigentumsvorbehalt transkriptionelle Regulatoren.

Hemmung der CRM1-vermittelte nukleare Export von Transkriptionsfaktoren durch Leukemogenic NUP98 Schmelzverfahrensproteine.

NUP98 &egrave; un nucleoporin che interpreta ruoli complessi del traffico nucleo-citoplasmatici di macromolecole. Riarrangiamenti del gene NUP98 nella leucemia umana come risultato l&#39;espressione di numerosi oncoproteins di fusione cui effetto sul traffico nucleo-citoplasmatici &egrave; capita male. Il presente studio &egrave; stato intrapreso per determinare gli effetti delle proteine di fusione leucemogeno NUP98 all&#39;esportazione nucleare CRM1-mediata. NUP98-HOXA9, una fusione di NUP98 prototipiche, inibito l&#39;esportazione nucleare di due noti substrati CRM1: mutato cytoplasmic nucleophosmin e Rev HIV-1 In vitro dosaggi di associazione ha rivelato che NUP98-HOXA9 lega CRM1 attraverso il motivo di ripetizione FG in modo simile ma pi&ugrave; forte che l&#39;interazione tra CRM1 e suo esportazione substrati Ran-GTP-dipendente. Due fusioni di NUP98, NUP98-HOXA9 e NUP98-DDX10, cui partner di fusione sono strutturalmente e funzionalmente correlate, interagivano con CRM1 endogena in cellule mieloidi come mostrato da co-immunoprecipitazione. Queste proteine di fusione NUP98 leucemogeno interagivano con CRM1, Ran e nucleoporin NUP214 in un modo fondamentalmente diverso da quello del selvaggio-tipo NUP98. NUP98-HOXA9 e NUP98-DDX10 formano caratteristici aggregati all&#39;interno di nuclei di una linea di cellule mieloidi e primarie cellule umane CD34 + e causato localizzazione aberrante di CRM1 di questi aggregati. Queste fusioni NUP98 causato accumulo nucleare di due fattori di trascrizione, NFAT e NFkappaB, che sono regolati da esportazione CRM1-mediata. L&#39;intrappolamento nucleare di NFAT e NFkappaB correlato con maggiore trascrizione dai promotori sensible a reagire a questi fattori di trascrizione. Presi insieme, i risultati suggeriscono un nuovo meccanismo da cui trascrizione di dysregulate NUP98 fusioni e causano leucemia, vale a dire, l&#39;inibizione di CRM1-mediata nucleare export con ritenzione nucleari aberranti di regolatori trascrizionali.

Inibizione di esportazione nucleare CRM1-mediata di fattori di trascrizione di proteine di fusione NUP98 leucemogeno.

NUP98&#x306F;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6838; - &#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306B;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;NUP98&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CRM1&#x5A92;&#x4ECB;&#x6838;&#x8F38;&#x51FA;&#x306E;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;NUP98&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3002; NUP98-HOXA9&#x3001;&#x539F;&#x578B;NUP98&#x878D;&#x5408;&#x3001;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;CRM1&#x57FA;&#x8CEA;&#x306E;&#x6838;&#x5916;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#xFF1A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D3;&#x30C8;&#x30ED;&#x7D50;&#x5408;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x3068;HIV-1&#x7267;&#x5E2B;&#x306F;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x306B;FG&#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;CRM1&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;RAN-GTP-&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;CRM1&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x8F38;&#x51FA;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5F37;&#x3044;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x3002;&#x4E8C;NUP98&#x878D;&#x5408;&#x3001;&#x5171;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x3067;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;CRM1&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3067;&#x3059;NUP98-HOXA9&#x3068;NUP98-DDX10&#x3001;&#x3001;&#x3002; CRM1&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;NUP98&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;NUP98&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x6839;&#x672C;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x3001;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;NUP214&#x3002; NUP98-HOXA9&#x3068;NUP98-DDX10&#x306F;&#x3001;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x521D;&#x4EE3;&#x30D2;&#x30C8;CD34 +&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6838;&#x5185;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x306B;CRM1&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;NUP98&#x878D;&#x5408;&#x306F;CRM1&#x5A92;&#x4ECB;&#x8F38;&#x51FA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;2&#x3064;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;NFAT&#x3068;&#x5E30;&#x7740;&#x306E;&#x6838;&#x5185;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002; NFAT&#x3068;&#x5E30;&#x7740;&#x306E;&#x6838;&#x6355;&#x6349;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x6838;&#x4FDD;&#x6301;&#x306E;CRM1&#x5A92;&#x4ECB;&#x6838;&#x8F38;&#x51FA;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;NUP98&#x878D;&#x5408;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;dysregulate&#x3084;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x767D;&#x8840;&#x75C5;NUP98&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;CRM1&#x5A92;&#x4ECB;&#x6838;&#x8F38;&#x51FA;&#x306E;&#x6291;&#x5236;

NUP98 nucleocytoplasmic &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xBC00;&#xB9E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; nucleoporin&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; NUP98 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xB420; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xD4E8;&#xC804; oncoproteins nucleocytoplasmic &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC5D0; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC11C; &#xD22C;&#xB974; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;. CRM1 &#xC911;&#xC7AC; &#xD575; &#xC218;&#xCD9C; leukemogenic NUP98 &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xCC29;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. NUP98-HOXA9, prototypic NUP98 &#xD4E8;&#xC804; &#xB450; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; CRM1 &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xD575; &#xC218;&#xCD9C; &#xC800;&#xD574;: &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; nucleophosmin&#xC640; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xBAA9;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACF5;&#xAC1C; NUP98 HOXA9 crm1&#xC640; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC218;&#xCD9C; &#xAE30;&#xD310; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAC15;&#xB825; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; Ran GTP &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD; FG &#xBC18;&#xBCF5; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; crm1&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACF5;&#xB3D9;-immunoprecipitation&#xC640; &#xAC19;&#xC774; &#xB450; NUP98 fusions, NUP98-hoxa9&#xC640; NUP98-DDX10, &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xD4E8;&#xC804; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC9C0; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD; crm1&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. CRM1, Ran, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; nup98&#xC758; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; nucleoporin NUP214 leukemogenic NUP98 &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC791;&#xC6A9;. NUP98-HOXA9 &#xBC0F; NUP98 DDX10 &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xACFC; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; CD34 + &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD575; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC758; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9D1;&#xACC4; crm1&#xC758; &#xD0C8; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; NUP98 fusions CRM1 &#xC911;&#xC7AC; &#xB0B4;&#xBCF4;&#xB0B4;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB450; &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C;, NFAT&#xC640; NFkappaB, &#xC911; &#xD575; &#xCD95;&#xC801;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. NFAT&#xC640; Nfkappab&#xC758; &#xD575; &#xD568;&#xC815; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC774; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC804;&#xC0AC;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; NUP98 fusions dysregulate &#xC804;&#xC0AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558; &#xACE0; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC6D0;&#xC778;, &#xC989;, &#xD575; CRM1 &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xC800;&#xD574; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xD0C8; &#xD575; &#xC720;&#xC9C0;&#xC640; &#xC218;&#xCD9C;.

Leukemogenic NUP98 &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xD575; &#xC218;&#xCD9C; CRM1 &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xC800;&#xD574;.

Nup98 es un nucleoporin que desempe&#xF1;a funciones complejas en el tr&#xE1;fico nucleocytoplasmic de macromol&#xE9;culas. Los reordenamientos del gen Nup98 en el resultado de la leucemia humana en la expresi&#xF3;n de las oncoprote&#xED;nas de fusi&#xF3;n numerosos cuyo efecto sobre el tr&#xE1;fico de nucleocytoplasmic es poco conocida. El presente estudio se realiz&#xF3; para determinar los efectos de leucemog&#xE9;nicos Nup98 prote&#xED;nas de fusi&#xF3;n en CRM1 mediada por las exportaciones nucleares. Nup98-Hoxa9, un prototipo Nup98 fusi&#xF3;n, inhibe la exportaci&#xF3;n nuclear de dos conocidos CRM1 sustratos: mutado citoplasm&#xE1;tica nucleofosmina y el VIH-1 Rev. En los ensayos de uni&#xF3;n in vitro revelaron que Nup98-Hoxa9 CRM1 une a trav&#xE9;s de la repetici&#xF3;n de motivos de FG en un Ran-GTP- manera dependiente similar pero m&#xE1;s fuerte que la interacci&#xF3;n entre CRM1 y sus sustratos de exportaci&#xF3;n. Dos Nup98 fusiones, Nup98-Hoxa9 y Nup98 DDX10-, cuya fusi&#xF3;n asociados son estructural y funcionalmente relacionados, interactuado con CRM1 end&#xF3;geno en c&#xE9;lulas mieloides como se muestra por la co-inmunoprecipitaci&#xF3;n. Estas prote&#xED;nas de fusi&#xF3;n leucemog&#xE9;nicos Nup98 interactuaron con CRM1, corri&#xF3;, y el nucleoporin NUP214 de una manera fundamentalmente diferente de la de tipo salvaje Nup98. Nup98-Hoxa9 Nup98 DDX10 formado agregados caracter&#xED;sticos en el n&#xFA;cleo de una l&#xED;nea de c&#xE9;lulas mieloides y primaria humanos c&#xE9;lulas CD34 + y caus&#xF3; la localizaci&#xF3;n aberrante de CRM1 de estos agregados. Estas fusiones Nup98 causado la acumulaci&#xF3;n nuclear de dos factores de transcripci&#xF3;n, NFAT y NFkappaB, que est&#xE1;n regulados por CRM1 mediada por la exportaci&#xF3;n. El atrapamiento nuclear de NFAT y NFkappaB correlacionado con una mayor transcripci&#xF3;n de los promotores que responden a estos factores de transcripci&#xF3;n. En conjunto, los resultados sugieren un nuevo mecanismo por el cual Nup98 fusiones dysregulate la transcripci&#xF3;n y la leucemia causa, a saber, la inhibici&#xF3;n de CRM1 mediada por exportaciones de material nuclear con la retenci&#xF3;n de aberrante nuclear de reguladores transcripcionales.

La inhibici&#xF3;n de la CRM1 mediada por las exportaciones nucleares de factores de transcripci&#xF3;n por leucemog&#xE9;nicos Nup98 prote&#xED;nas de fusi&#xF3;n

NUP98 HOXA9 &#x662F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6025;&#x6027;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7684; NUP98 &#x878D;&#x5408;&#x764C;&#x7684;&#x539F;&#x578B;&#x3002;&#x5B83;&#x7531; NUP98 &#x878D;&#x5408;&#x5230; homeodomain &#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x76D2;&#x57FA;&#x56E0;&#x86CB;&#x767D; HOXA9 &#x548C;&#x884C;&#x4E3A;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; nucleoporin N &#x7EC8;&#x7AEF; FG &#x5BCC;&#x90E8;&#x5206;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4F19;&#x4F34;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x80DE;&#x8D28;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6765;&#x907F;&#x514D;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4F20;&#x7EDF;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7531;&#x4E8E;&#x77ED;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x5C5E;&#x6027;&#x4F1A;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x51FA;&#x6C28;&#x57FA;&#x672B;&#x7AEF;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x62C6;&#x5206; (AES) NUP98 HOXA9 transducin &#x6837;&#x5F3A;&#x5316;&#x5242;/&#x7F57;&#x514B;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x65B0;&#x578B;&#x4E92;&#x52A8;&#x5408;&#x4F5C;&#x4F19;&#x4F34;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x4E0B;&#x62C9;&#x5217;&#x8868;&#x4E2D;&#x548C; co &#x6C89;&#x6DC0;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x9700;&#x8981;&#x7684; NUP98 HOXA9 FG &#x91CD;&#x590D;&#x533A;&#x57DF;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E92;&#x52A8;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; AES &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3B;&#x8981;&#x5411;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x3002;AES &#x4E5F;&#x8868;&#x660E;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; NUP98 &#x5F3A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;AES &#x589E;&#x5F3A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; NUP98 HOXA9&#x3002;&#x5F53;&#x7740; NUP98-HOXA9&#xFF0C;AES &#x9020;&#x6210;&#x589E;&#x52A0;&#x957F;&#x671F;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EBA; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x4E0E;&#x539F;&#x59CB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x660E;&#x663E;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;AES &#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F71;&#x54CD;&#x5747;&#x672A;&#x89C2;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x7F3A;&#x5E2D;&#x3002;AES &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x51CF;&#x5C11; NUP98 HOXA9 &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;AES &#x9020;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE; NUP98 HOXA9 &#x7CFB;&#x7956;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7684;&#x8F6C;&#x53D8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; NUP98 HOXA9 &#x5408;&#x4F5C;&#x4F19;&#x4F34;&#x5EFA;&#x7ACB; AES &#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x5B83;&#x4E0E;&#x5408;&#x4F5C; NUP98 HOXA9 &#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5316;&#x3002;

&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x62C6;&#x5206; (AES) NUP98 HOXA9 &#x57FA;&#x56E0;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x5176;&#x8F6C;&#x578B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

NUP98-HOXA9 is the prototype of NUP98 fusion oncoproteins that cause acute myeloid leukemia. It consists of an N-terminal FG-rich portion of the nucleoporin NUP98 fused to the homeodomain region of the homeobox protein HOXA9, and acts as an aberrant transcription factor. To identify interacting partners of NUP98-HOXA9, we used a cytoplasmic yeast two-hybrid assay to avoid the nonspecific trans-activation that would occur with the traditional yeast two-hybrid assay due to the transactivating properties of NUP98-HOXA9. We identified amino-terminal enhancer of split (AES), a transcriptional regulator of the transducin-like enhancer/Groucho family as a novel interaction partner of NUP98-HOXA9. The interaction was confirmed by in vitro pulldown and co-immunoprecipitation assays and was shown to require the FG repeat region of NUP98-HOXA9. Immunofluorescence analysis showed that AES localizes primarily to the interior of the nucleus. AES also showed a strong interaction with wild-type NUP98. AES augmented the transcriptional activity of NUP98-HOXA9. In the presence of NUP98-HOXA9, AES caused an increase in long-term proliferation of primary human CD34+ cells with a marked increase in the numbers of primitive cells. These effects of AES were not observed in the absence of NUP98-HOXA9. AES knockdown diminished the transcriptional and proliferative effects of NUP98-HOXA9. AES caused a shift away from the erythroid lineage in cells expressing NUP98-HOXA9. These data establish AES as an interacting partner of NUP98-HOXA9 and show that it cooperates with NUP98-HOXA9 in transcriptional regulation and cell transformation.

Amino-terminal enhancer of split (AES) interacts with the oncoprotein NUP98-HOXA9 and enhances its transforming ability.

NUP98-HOXA9 est le prototype de NUP98 oncoprot&#xE9;ines de fusion qui causent la leuc&#xE9;mie my&#xE9;lo&#xEF;de aigu&#xEB;. Il se compose d&#x26;#39;une partie N-terminale FG-riche de la NUP98 nucl&#xE9;oporine fusionn&#xE9; &#xE0; la r&#xE9;gion hom&#xE9;odomaine de la prot&#xE9;ine hom&#xE9;obox HOXA9, et agit comme un facteur de transcription aberrante. Pour identifier les partenaires d&#x26;#39;interaction de NUP98-HOXA9, nous avons utilis&#xE9; une levure cytoplasmique test double-hybride pour &#xE9;viter la trans-activation non sp&#xE9;cifique qui se produirait avec la levure traditionnelle dosage &#xE0; deux hybrides en raison des propri&#xE9;t&#xE9;s de transactivatrices NUP98-HOXA9. Nous avons identifi&#xE9; amino-terminale rehausseur de split (AES), un r&#xE9;gulateur transcriptionnel de la transducine-comme amplificateur / Groucho famille en tant que partenaire d&#x26;#39;interaction roman de NUP98-HOXA9. L&#x26;#39;interaction a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9;e par de pulldown vitro et co-immunopr&#xE9;cipitation et a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour exiger la r&#xE9;gion de r&#xE9;p&#xE9;tition FG de NUP98-HOXA9. Analyse par immunofluorescence a montr&#xE9; que AES localise principalement &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur du noyau. AES a &#xE9;galement montr&#xE9; une forte interaction avec le type sauvage NUP98. AES augment&#xE9; l&#x26;#39;activit&#xE9; transcriptionnelle de NUP98-HOXA9. En pr&#xE9;sence de NUP98-HOXA9, AES a caus&#xE9; une augmentation &#xE0; long terme la prolif&#xE9;ration des primaires de l&#x26;#39;homme cellules CD34 + avec une augmentation marqu&#xE9;e du nombre de cellules primitives. Ces effets de AES n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;s en l&#x26;#39;absence de NUP98-HOXA9. Knockdown AES diminu&#xE9; les effets de la transcription et de prolif&#xE9;ration de NUP98-HOXA9. AES a provoqu&#xE9; un d&#xE9;placement loin de la lign&#xE9;e &#xE9;rythro&#xEF;de dans les cellules exprimant NUP98-HOXA9. Ces donn&#xE9;es &#xE9;tablissent AES en tant que partenaire d&#x26;#39;interaction de NUP98-HOXA9 et montrer qu&#x26;#39;il coop&#xE8;re avec NUP98-HOXA9 dans la r&#xE9;gulation transcriptionnelle et la transformation cellulaire.

Amino-terminale Enhancer de Split (AES) interagit avec l&#x26;#39;oncoprot&#xE9;ine NUP98-HOXA9 et am&#xE9;liore sa capacit&#xE9; Transformer

NUP98-HOXA9 ist der Prototyp des NUP98 Fusion Oncoproteinen, die akuten myeloischen Leuk&auml;mie verursachen. Es besteht aus eine N-terminale FG-reiche Teil der Nucleoporin, die NUP98 der Hom&ouml;odom&auml;ne-Region der Homeobox Protein HOXA9 und Handlungen ein Transkriptionsfaktor, aberrante verschmolzen. Ermittlung der interagierenden Partner des NUP98-HOXA9, haben wir eine zellplasmatische Hefe-zwei-Hybrid-Assay verwendet, die unspezifische Trans-Aktivierung zu vermeiden, die mit der traditionellen Hefe-zwei-Hybrid-Assay aufgrund der transactivating Eigenschaften des NUP98-HOXA9 auftreten w&uuml;rde. Wir identifizieren die amino-Terminal Vergr&ouml;&szlig;erer Split (AES), ein transcriptional Regulator der Familie transducin-wie Enhancer/Groucho als neuartige Interaktion Partner NUP98-HOXA9. Die Interaktion von in-vitro-Pulldown und co-Immunopr&auml;zipitation Assays best&auml;tigt wurde und zeigte FG Wiederholbereich des NUP98-HOXA9 zu verlangen. Immunofluoreszenz-Analyse zeigte, dass AES in erster Linie auf das Innere des Zellkerns lokalisiert. AES zeigten ebenfalls eine starke Wechselwirkung mit Wildtyp NUP98. AES erg&auml;nzt die transkriptionelle Aktivit&auml;t der NUP98-HOXA9. In Anwesenheit von NUP98-HOXA9 verursachte AES eine Erh&ouml;hung in langfristige Verbreitung von prim&auml;ren humanen CD34 + Zellen mit einem deutlichen Anstieg der Zahl der primitiven Zellen. Diese Effekte von AES wurden nicht ohne NUP98-HOXA9 beobachtet. AES Niederschlag verringert die transkriptionelle und proliferative Effekte des NUP98-HOXA9. AES verursachte eine Abkehr von der Linie Erythroid Zellen, die NUP98-HOXA9 zum Ausdruck zu bringen. Diese Daten AES als interagierenden Partner der NUP98-HOXA9 schaffen und zeigen, dass es mit NUP98-HOXA9 in transkriptionelle Verordnung und Zelle Transformation zusammenarbeitet.

Amino-Terminal Enhancer von Split (AES) interagiert mit der OIT3 NUP98-HOXA9 und erh&ouml;ht seine verwandelnde F&auml;higkeit.

NUP98-HOXA9 &egrave; il prototipo del NUP98 fusione oncoproteins che causano la leucemia mieloide acuta. Esso &egrave; costituito da una porzione N-terminale FG-ricco di nucleoporin che nup98 fuse nella regione di homeodomain del homeobox proteina HOXA9 e gli atti come un fattore di trascrizione aberranti. Per identificare partner interagenti di NUP98-HOXA9, abbiamo utilizzato un dosaggio di due-ibrido citoplasmatico lievito per evitare la trans-attivazione aspecifica che si sarebbe verificato con il dosaggio di due ibridi di lievito tradizionale a causa delle propriet&agrave; transactivating di NUP98-HOXA9. Abbiamo identificato amminico-terminale rinforzatore di Spalato (AES), un regolatore di transcriptional della famiglia transducina-come enhancer/Groucho come partner di interazione romanzo di NUP98-HOXA9. L&#39;interazione &egrave; stata confermata dai saggi in vitro di pulldown e co-immunoprecipitazione e fu dimostrato che richiedono la regione di ripetizione FG di NUP98-HOXA9. Immunofluorescenza analisi ha mostrato che AES si localizza principalmente all&#39;interno del nucleo. AES ha anche mostrato una forte interazione con selvaggio-tipo NUP98. AES aumentata l&#39;attivit&agrave; trascrizionale di NUP98-HOXA9. In presenza di NUP98-HOXA9, AES ha causato un aumento nella proliferazione a lungo termine di primarie cellule CD34 + umane con un marcato aumento del numero di celle primitive. Questi effetti di AES non sono stati osservati in assenza di NUP98-HOXA9. Atterramento AES ha diminuito gli effetti transcriptional e proliferativi di NUP98-HOXA9. AES ha provocato uno spostamento dal lignaggio eritroidi in cellule che esprimono NUP98-HOXA9. Questi dati stabiliscono AES come partner di interazione di NUP98-HOXA9 e mostrano che coopera con NUP98-HOXA9 in transcriptional trasformazione delle cellule e regolamento.

Amino-terminale rinforzatore di Spalato (AES) interagisce con l&#39;oncoproteina dei tipo NUP98-HOXA9 e migliora la sua capacit&agrave; di trasformazione.

NUP98-HOXA9&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;NUP98&#x878D;&#x5408;&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x539F;&#x578B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;HOXA9&#x3068;&#x3001;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;NUP98&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;FG-&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x306A;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; NUP98-HOXA9&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x9175;&#x6BCD;&#x30C4;&#x30FC;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x907F;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x9175;&#x6BCD;&#x30C4;&#x30FC;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x672B;&#x7AEF;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#xFF08;AES&#xFF09;&#x3001;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;/&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E7;&#xB7;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30D7;&#x30EB;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3068;&#x5171;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;NUP98-HOXA9&#x306E;FG&#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;AES&#x306F;&#x6838;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AES&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;NUP98&#x3068;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AES&#x306F;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3002; NUP98-HOXA9&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;AES&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x59CB;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x521D;&#x4EE3;&#x30D2;&#x30C8;CD34 +&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AES&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; AES&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5897;&#x6B96;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3002; AES&#x306F;NUP98-HOXA9&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x8D64;&#x82BD;&#x7403;&#x7CFB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;NUP98-HOXA9&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;AES&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x306B;NUP98-HOXA9&#x3068;&#x5354;&#x529B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B9;&#x30D7;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x672B;&#x7AEF;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#xFF08;AES&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;NUP98-HOXA9&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;

NUP98 HOXA9 &#xC6D0;&#xC778; &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; NUP98 &#xC735;&#xD569; oncoproteins&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0; &#xD0C0;&#xC785;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. NUP98 &#xD0C8; &#xC120; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; homeobox &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; HOXA9, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD589;&#xC704;&#xC758; homeodomain &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC735;&#xD569; nucleoporin&#xC758; N &#xB2E8;&#xC790; FG &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; NUP98 HOXA9 &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; NUP98 hoxa9&#xC758; transactivating &#xC18D;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4;-&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD53C;&#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xD560; (AES), NUP98-hoxa9&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xB85C; transducin &#xAC19;&#xC740; &#xC99D;&#xAC15;/&#xADF8;&#xB8E8;&#xCD08; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC99D;&#xAC15; &#xD30C;&#xC545;. &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC678; &#xD480; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xBC0F; co immunoprecipitation &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD544;&#xC694; NUP98 hoxa9&#xC758; FG &#xBC18;&#xBCF5; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC11D; AES &#xD575; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; localizes &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. AES&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; nup98&#xC640; &#xAC15;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. AES NUP98 hoxa9&#xC758; transcriptional &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC15;. NUP98 HOXA9 &#xC874;&#xC7AC; AES &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; CD34 + &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC140;&#xC758; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC7A5;&#xAE30; &#xD655;&#xC0B0; &#xC99D;&#xAC00; &#xC77C;&#xC73C;&#xCF30;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. AES&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB418;&#xC9C0; NUP98 hoxa9&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. AES &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; NUP98 hoxa9&#xC758; transcriptional &#xBC0F; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAC10;&#xC18C;. AES NUP98 hoxa9&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; erythroid &#xD608;&#xD1B5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; AES NUP98 hoxa9&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xB85C; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; NUP98 hoxa9&#xB97C; transcriptional &#xADDC;&#xC815;&#xACFC; &#xC140; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD611;&#xB825; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD84;&#xD560; (AES)&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC99D;&#xAC15; oncoprotein NUP98 hoxa9&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBCC0;&#xD615; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nup98-Hoxa9 es el prototipo de Nup98 oncoprote&#xED;nas de fusi&#xF3;n que causan la leucemia mieloide aguda. Se compone de una porci&#xF3;n N-terminal FG-rico de la nucleoporin Nup98 fusionada a la regi&#xF3;n de la prote&#xED;na homeodominio homeobox Hoxa9, y act&#xFA;a como un factor de transcripci&#xF3;n aberrante. Para identificar la interacci&#xF3;n de los socios Nup98-Hoxa9, se utiliz&#xF3; una levadura citoplasm&#xE1;tica ensayo de dos h&#xED;bridos para evitar la trans-activaci&#xF3;n no espec&#xED;fica que se producir&#xED;a con la levadura tradicional de dos h&#xED;bridos de ensayo debido a las propiedades de transactivating Nup98-Hoxa9. Se identificaron amino-terminal de potenciador de la divisi&#xF3;n (AES), un regulador transcripcional de la transducina-como potenciador / Groucho familia como un compa&#xF1;ero de interacci&#xF3;n novela de Nup98-Hoxa9. La interacci&#xF3;n fue confirmada por telecine vitro y en ensayos de inmunoprecipitaci&#xF3;n de co-y se demostr&#xF3; que requieren la regi&#xF3;n de repetici&#xF3;n de FG Nup98-Hoxa9. El an&#xE1;lisis de inmunofluorescencia mostr&#xF3; que AES localiza principalmente en el interior del n&#xFA;cleo. AES tambi&#xE9;n mostr&#xF3; una fuerte interacci&#xF3;n con el tipo salvaje Nup98. AES aument&#xF3; la actividad transcripcional de Nup98-Hoxa9. En presencia de Nup98-Hoxa9, AES provocado un aumento en la proliferaci&#xF3;n a largo plazo de la ense&#xF1;anza primaria humanos c&#xE9;lulas CD34 +, con un marcado incremento en el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas primitivas. Estos efectos de la AES no se observaron en la ausencia de Nup98-Hoxa9. AES ca&#xED;da disminuye los efectos de la transcripci&#xF3;n y la proliferaci&#xF3;n de Nup98-Hoxa9. AES causado un desplazamiento del linaje eritroide en c&#xE9;lulas que expresan Nup98-Hoxa9. Estos datos establecen AES como un socio de la interacci&#xF3;n de los Nup98-Hoxa9 y demostrar que coopera con Nup98-Hoxa9 en la regulaci&#xF3;n transcripcional y la transformaci&#xF3;n celular.

Amino-terminal de reforzador de Split (AES) Interact&#xFA;a con la oncoprote&#xED;na Nup98-Hoxa9 y mejora su capacidad transformadora

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;&#x3001; &#x4E73;&#x817A;&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;-A (Mam-A)&#xFF0C;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x764C;&#x75C7;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x65B0;&#x9776;&#x70B9;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B9A;&#x4E49;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684; Mam A &#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x6297;&#x539F;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7C07;&#x7684; HLA-A24 (A * 2402) &#x4E3A;&#x80CC;&#x666F;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x5BF9; CD8(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE; (CTL) &#x53CD;&#x5E94;&#x3002;HLA A24 &#x6709;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x65E5;&#x8BED;&#x4E2D; 72%&#x3001; 27%&#xFF0C;&#x5728;&#x4E9A;&#x6D32;&#x7684;&#x5370;&#x5EA6;&#x3001; &#x548C;&#x5728;&#x9AD8;&#x52A0;&#x7D22;&#x5730;&#x533A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684; 18%&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F; (HLA)-&#x7ED1;&#x5B9A;&#x9884;&#x6D4B;&#x7B97;&#x6CD5;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; 7 HLA A24 &#x9650;&#x5236;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684; Mam A &#x5019;&#x9009;&#x6297;&#x539F;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7C07; &#xFF08;MAA24.1-7)&#x3002;&#x819C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0E;&#x6C34;&#x9F99;&#x5934;&#x7F3A; T2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x67D3; HLA-A2402 (T2&#x3002;A24) &#x8868;&#x793A; MAA24.2 &#xFF08;CYAGSGCPL&#xFF09; &#x548C; MAA24.4 &#xFF08;ETLSNVEVF&#xFF09; &#x62E5;&#x6709;&#x6700;&#x9AD8;&#x7684; HLA A24 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;2 CD8(+) CTL &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x5BF9; T2 &#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x3002;A24 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5206;&#x522B;&#x88C5;&#x6709;&#x6E90;&#x6027; Mam A &#x5019;&#x9009;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6D3B;&#x6027;&#x9488;&#x5BF9; MAA24.2 &#x548C; MAA24.4&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x76F8;&#x540C;&#x7684; CD8(+) CTL &#x884C;&#x53D1;&#x751F;&#x88C2;&#x89E3; HLA-A24(+)/Mam-A(+) &#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A; AU565 &#x548C;&#x4E19;&#x4E8C;&#x919B;-MB-361&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B; Ctl &#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9; HLA-A24(-)/Mam-A(+) &#x548C; HLA-A24(+)/Mam-A(-) &#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x5B9A;&#x4E49; HLA A24 &#x9650;&#x5236;&#x3001; Mam A &#x6D3E;&#x751F; CD8(+) CTL &#x8868;&#x4F4D;&#x53EF;&#x80FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x57FA;&#x4E8E; Mam A &#x7684;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x75AB;&#x82D7;&#x6CBB;&#x7597;&#x5BF9;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x60A3;&#x8005; HLA A24 &#x8868;&#x578B;&#x3002;

&#x9274;&#x5B9A; HLA A24 &#x9650;&#x5236; CD8(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x4ECE;&#x4E73;&#x817A;&#x73E0;&#x86CB;&#x767D; A &#x6D3E;&#x751F;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;&#x3002;

Human breast cancer-associated antigen, mammaglobin-A (Mam-A), potentially offers a novel therapeutic target as a breast cancer vaccine. In this study, we define the CD8(+) cytotoxic T lymphocyte (CTL) response to Mam-A-derived candidate epitopes presented in the context of HLA-A24 (A*2402). HLA-A24 has a frequency of 72% in Japanese, 27% in Asian Indian, and 18% in Caucasian populations. Using a human leukocyte antigen (HLA)-binding prediction algorithm we identified 7 HLA-A24-restricted Mam-A-derived candidate epitopes (MAA24.1-7). Membrane stabilization studies with TAP-deficient T2 cells transfected with HLA-A2402 (T2.A24) indicated that MAA24.2 (CYAGSGCPL) and MAA24.4 (ETLSNVEVF) have the highest HLA-A24 binding affinity. Further, 2 CD8(+) CTL cell lines generated in vitro against T2.A24 cells individually loaded with Mam-A-derived candidate epitopes demonstrated significant cytotoxic activity against MAA24.2 and MAA24.4. In addition, the same CD8(+) CTL lines lysed the HLA-A24(+)/Mam-A(+) stable transfected human breast cancer cell lines AU565 and MDA-MB-361. However, these CTLs had no cytotoxicity against HLA-A24(-)/Mam-A(+) and HLA-A24(+)/Mam-A(-) breast cancer cell lines. In summary, our results define HLA-A24-restricted, Mam-A-derived, CD8(+) CTL epitopes that can potentially be employed for Mam-A-based breast cancer vaccine therapy to breast cancer patients with HLA-A24 phenotype.

Identification of HLA-A24-restricted CD8(+) cytotoxic T-cell epitopes derived from mammaglobin-A, a human breast cancer-associated antigen.

Antig&egrave;ne d&#39;associ&eacute; &agrave; cancer du sein humain, mammaglobin-A (Mam-A), offre potentiellement une nouvelle cible th&eacute;rapeutique comme un vaccin contre le cancer du sein. Dans cette &eacute;tude, nous d&eacute;finissons la r&eacute;ponse des lymphocytes T cytotoxiques (CTL) de CD8 aux &eacute;pitopes candidat d&eacute;riv&eacute;s du Mam-A pr&eacute;sent&eacute; dans le cadre de HLA-A24 (A * 2402). HLA-A24 a une fr&eacute;quence de 72 % en japonais, 27 % chez les Indiens asiatiques et 18 % dans les populations caucasiennes. En utilisant un antig&egrave;ne leucocytaire humain (HLA)-algorithme de pr&eacute;diction de liaison nous avons identifi&eacute; des &eacute;pitopes HLA-A24-limit&eacute; de candidats d&eacute;riv&eacute;s du Mam-A 7 (MAA24.1-7). &Eacute;tudes de stabilisation de membrane avec robinet-deficient T2 cellules transfect&eacute;s avec HLA-A2402 (T2.A24) a indiqu&eacute; que MAA24.2 (CYAGSGCPL) et MAA24.4 (ETLSNVEVF) ont la plus forte affinit&eacute; de liaison de HLA-A24. En outre, 2 lign&eacute;es de cellules CD8 CTL generated in vitro contre T2.A24 cells charg&eacute;s individuellement avec Mam-A d&eacute;riv&eacute; des candidat &eacute;pitopes a d&eacute;montr&eacute; une activit&eacute; cytotoxique significative contre MAA24.2 et MAA24.4. En outre, les m&ecirc;mes lignes de CD8 CTL lysent les lign&eacute;es de cellules canc&eacute;reuses HLA-A24(+)/Mam-A(+) stable transfect&eacute;es maternel AU565 et MDA-MB-361. Toutefois, ces CTL n&#39;avaient aucune cytotoxicit&eacute; contre les lign&eacute;es cellulaires de cancer du sein HLA-A24(-)/Mam-A(+) et HLA-A24(+)/Mam-A(-). En r&eacute;sum&eacute;, nos r&eacute;sultats &eacute;pitopes HLA-A24-restreint, Mam A d&eacute;riv&eacute;-, CD8 CTL pouvant potentiellement servir &agrave; traitement de vaccin du cancer du sein Mam-A-based atteintes du cancer du sein avec le ph&eacute;notype HLA-A24.

Identification des &eacute;pitopes de lymphocytes cytotoxiques de CD8 restriction HLA-A24 d&eacute;riv&eacute;s de mammaglobin-A, un homme breast cancer-associated antigen.

Menschlichen Brust Krebs-assoziierte Antigen, Mammaglobin-Mam-A, potenziell bietet ein neuartiges therapeutisches Ziel als ein Brust-Krebs-Impfstoff. In dieser Studie definieren wir die CD8(+) zytotoxischen T-Lymphozyten (CTL) Reaktion auf Mam-A-abgeleitet Kandidat Epitopes, die im Zusammenhang mit HLA-A24 (A * 2402) dargestellt. HLA-A24 hat eine Frequenz von 72 % auf Japanisch, 27 % in asiatischen, indischen und 18 % in den kaukasischen Bev&ouml;lkerungen. Mit einem human Leukocyte Antigen (HLA)-Bindung-Vorhersage-Algorithmus, die wir identifiziert 7 HLA-A24-eingeschr&auml;nkt Mam-A-abgeleitet Kandidat Epitope (MAA24.1-7). Membran-Stabilisierung-Studien mit TAP-defizienten T2-Zellen, die transfected mit HLA-A2402 (T2.A24) darauf hingewiesen, dass MAA24.2 (CYAGSGCPL) und MAA24.4 (ETLSNVEVF) die h&ouml;chsten HLA-A24-Bindungsaffinit&auml;t haben. Des weiteren Sie 2 CD8(+) CTL-Zelllinien in Vitro gegen T2 generiert.A24-Zellen, die einzeln geladen mit Mam-A-abgeleitet Kandidat Epitopes zeigte deutliche zytotoxische Aktivit&auml;t gegen MAA24.2 und MAA24.4. Au&szlig;erdem Tauwetterprotokoll die gleichen CD8(+) CTL-Linien aufgel&ouml;st, die HLA-A24(+)/Mam-A(+) stabil transfizierte menschlichen Brust Krebszelllinien AU565 und MDA-MB-361. Allerdings hatte diese CTLs keine Zytotoxizit&auml;t gegen HLA-A24(-)/Mam-A(+) und HLA-A24(+)/Mam-A(-) Brust-Krebs-Zelllinien. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen definieren unsere Ergebnisse HLA-A24-beschr&auml;nkt, Mam-A-abgeleitet, CD8(+) CTL-Epitope, die potenziell f&uuml;r Mam-A-basierte Brust Impfstoff Krebstherapie zu Brustkrebspatientinnen mit HLA-A24-Ph&auml;notyp eingesetzt werden k&ouml;nnen.

Identifizierung von HLA-A24-eingeschr&auml;nkt CD8(+) zytotoxische T-Zelle Epitopes Mammaglobin-A abgeleitet, ein Menschen Brust-Krebs-assoziierte Antigen.

Antigene associato al cancro al seno umano, mammaglobin-A (Mam-A), potenzialmente offre un obiettivo terapeutico romanzo come un vaccino contro il cancro al seno. In questo studio, definiamo la risposta dei linfociti T citotossici (CTL) cellule di epitopi Mam-A-derivato candidato presentati nel contesto dell&#39;HLA-A24 (A * 2402). HLA-A24 ha una frequenza di 72% in giapponese, in indiano asiatico il 27% e 18% nelle popolazioni caucasiche. Usando un antigene leucocitario umano (HLA)-algoritmo di predizione di associazione abbiamo individuato 7 epitopi HLA-A24-limitato candidato Mam-A-derivati (MAA24.1-7). Studi di stabilizzazione di membrana con rubinetto-carenti T2 celle transfected con HLA-A2402 (T2.A24) indicato che MAA24.2 (CYAGSGCPL) e MAA24.4 (ETLSNVEVF) hanno la pi&ugrave; alta affinit&agrave; di legame HLA-A24. Inoltre, 2 linee di cellule cellule CTL, generati in vitro contro T2.Celle A24 caricate individualmente con gli epitopi candidato Mam-A-derivato ha dimostrato notevole attivit&agrave; citotossica contro MAA24.2 e MAA24.4. Inoltre, le stesse linee di cellule CTL lisati le linee di cellule cancro mammario umano transfected stabile HLA-A24(+)/Mam-A(+) AU565 e MDA-MB-361. Tuttavia, queste CTL non aveva alcuna citotossicit&agrave; contro linee di cellule di cancro al seno da HLA-A24(-)/Mam-A(+) e HLA-A24(+)/Mam-A(-). In sintesi, i nostri risultati definiscono epitopi di cellule CTL HLA-A24-limitato, Mam-A-derivati, che potenzialmente possono essere impiegati per la terapia del vaccino cancro al seno Mam-A-based per pazienti affetti da cancro al seno con fenotipo HLA-A24.

Identificazione di epitopi delle cellule T citotossici cellule HLA-A24-limitato derivati da mammaglobin-A, un uomo del seno antigeni tumore-associati.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x80F8;&#x764C;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;, mammaglobin-(Mam A) &#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x4E73;&#x623F;&#x304C;&#x3093;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E0A;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, hla-a24 (A &#x203B; 2402) &#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x63D0;&#x793A; Mam A &#x6D3E;&#x751F;&#x5019;&#x88DC;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3078;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027; T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403; (CTL) &#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Hla-a24 72% &#x65E5;&#x672C;&#x8A9E;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067; 27%&#x3001;&#x767D;&#x4EBA;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E; 18% &#x306E;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x6297;&#x539F; (HLA) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;-7 Mam A &#x6D3E;&#x751F;&#x5019;&#x88DC;&#x306E; HLA hla-a24 &#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; (MAA24.1-7&#xFF09; &#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E88;&#x6E2C;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3002;(T2&#x3002; HLA-a2402 &#x62D8;&#x675F;&#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8; &#x30BF;&#x30C3;&#x30D7;&#x6B20;&#x4E4F; T2 &#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x7814;&#x7A76;A24) MAA24.2 (CYAGSGCPL) &#x3068; MAA24.4 (ETLSNVEVF) &#x6700;&#x9AD8; hla-a24 &#x7D50;&#x5408;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;2 &#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; CTL &#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E; in vitro T2 &#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Mam A &#x6D3E;&#x751F;&#x5019;&#x88DC;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x8AAD;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E; A24 &#x7D30;&#x80DE; MAA24.2 &#x3068; MAA24.4 &#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; CTL &#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; HLA-A24(+)/Mam-A(+) &#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066; transfected &#x30D2;&#x30C8;&#x4E73;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A; AU565 &#x304A;&#x3088;&#x3073; MDA MB 361 &#x5206;&#x96E2;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; Ctl &#x306F; HLA-A24(-)/Mam-A(+) &#x3068; HLA-A24(+)/Mam-A(-) &#x306E;&#x4E73;&#x623F;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684; Mam &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; A &#x4E73;&#x623F;&#x304C;&#x3093;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7642;&#x6CD5;&#x4E73;&#x304C;&#x3093;&#x60A3;&#x8005; hla-a24 &#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7528;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3001;Mam A &#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3001;HLA A24 &#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; CTL &#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Mammaglobin-A &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6D3E;&#x751F;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; HLA hla-a24 &#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027; T &#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x4E73;&#x623F;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xAD00;&#xB828; &#xD56D; &#xC6D0;, mammaglobin-A (&#xC5C4;&#xB9CC;-A), &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC18C;&#xC124; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; CD8(+) cytotoxic T &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; (CTL) &#xC751;&#xB2F5; HLA-A24 (A * 2402)&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC5C4;&#xB9CC; A &#xD30C;&#xC0DD; &#xD6C4;&#xBCF4; epitopes &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. HLA-a24&#xAC00; &#xC77C;&#xBCF8;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; 72%, &#xC544;&#xC2DC;&#xC544; &#xC778;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; 27% &#xBC0F; &#xBC31;&#xC0C9; &#xC778;&#xC885; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; 18%&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;. &#xC778;&#xAC04; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xD56D; &#xC6D0; (HLA)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;-7 &#xC5C4;&#xB9CC; A &#xD30C;&#xC0DD; &#xD6C4;&#xBCF4; HLA-A24 &#xC81C;&#xD55C; epitopes (MAA24.1-7)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC608;&#xCE21; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;. HLA-A2402 (t2&#xC640; &#xD398; &#xAF2D;&#xC9C0; &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; T2 &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xC5F0;&#xAD6C;.A24) MAA24.2 (CYAGSGCPL) &#xBC0F; MAA24.4 (ETLSNVEVF)&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; HLA-A24 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C;, t 2&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; 2 CD8(+) CTL &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;.&#xC5C4;&#xB9CC; A &#xD30C;&#xC0DD; &#xD6C4;&#xBCF4; epitopes &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB85C;&#xB4DC; A24 &#xC140; MAA24.2 &#xBC0F; MAA24.4&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; cytotoxic &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; CD8(+) CTL &#xB77C;&#xC778; lysed HLA-A24(+)/Mam-A(+) &#xC548;&#xC815; transfected &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; AU565 &#xBC0F; MDA-MB-361. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; Ctl HLA-A24(-)/Mam-A(+) &#xBC0F; HLA-A24(+)/Mam-A(-) &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; &#xC5C6;&#xC74C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; HLA-A24 &#xC81C;&#xD55C;, &#xC5C4;&#xB9CC; A &#xD30C;&#xC0DD;, CD8(+) CTL epitopes HLA-A24 &#xD615; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC5C4;&#xB9CC; A &#xAE30;&#xBC18; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xBC31;&#xC2E0; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mammaglobin-A&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; HLA-A24 &#xC81C;&#xD55C; CD8(+) cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC; epitopes&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC554; &#xAD00;&#xB828; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC720; &#xBC29;.

Ant&iacute;geno asociada con el c&aacute;ncer de mama humano, mammaglobin-A (Mam-A), potencialmente ofrece una nueva diana terap&eacute;utica como una vacuna de c&aacute;ncer de mama. En este estudio, definimos la respuesta del linfocito T citot&oacute;xicos (CTL) de CD8 epitopes de Mam-A-derivado del candidato presentado en el contexto de HLA-A24 (A * 2402). HLA-A24 tiene una frecuencia de 72% en japon&eacute;s, 27% en India asi&aacute;tica y 18% en las poblaciones cauc&aacute;sicas. Utilizando un ant&iacute;geno leucocitario humano (HLA)-algoritmo de predicci&oacute;n de enlace se identificaron 7 restricci&oacute;n HLA-A24 derivados de Mam-A candidato epitopos (MAA24.1-7). Estudios de estabilizaci&oacute;n de membrana con grifo deficientes T2 en c&eacute;lulas transfectadas con HLA-A2402 (T2.A24) indica que MAA24.2 (CYAGSGCPL) y MAA24.4 (ETLSNVEVF) tienen la mayor afinidad de uni&oacute;n de HLA-A24. Adem&aacute;s, 2 l&iacute;neas de c&eacute;lulas CD8 CTL generadas in vitro contra T2.A24 c&eacute;lulas individualmente cargadas con derivados de Mam-A candidato epitopos demostraron significativa actividad citot&oacute;xica contra MAA24.2 y MAA24.4. Adem&aacute;s, las mismas l&iacute;neas de CTL CD8 lisis la HLA-A24(+)/Mam-A(+) l&iacute;neas de c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de mama humano transfected estable AU565 y MDA-MB-361. Sin embargo, estas listas CTL no ten&iacute;a ninguna citotoxicidad contra l&iacute;neas de c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de mama de HLA-A24(-)/Mam-A(+) y HLA-A24(+)/Mam-A(-). En Resumen, nuestros resultados definen ep&iacute;topos de CTL CD8 HLA-A24-restringido, Mam-A-derivado, que potencialmente pueden emplearse para terapia de vacuna del c&aacute;ncer de mama basadas en Mam-A pacientes de c&aacute;ncer de mama con fenotipo HLA-A24.

Identificaci&oacute;n de restricci&oacute;n HLA-A24 CD8 citot&oacute;xico t-c&eacute;lula epitopos derivado de mammaglobin-A, un ser humano pecho ant&iacute;geno asociada al c&aacute;ncer.

&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6539;&#x53D8;&#x5176;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x54CD;&#x5E94;&#x7CD6;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x3002;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53CD;&#x5E94; best-studied &#x4E0B;&#x6E38;&#x6548;&#x5E94;&#x662F; Mig1 &#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x8C03;&#x8282;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x6838;&#x5B54;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x8FD8;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7B79;&#x5907;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x53CD;&#x5E94;&#x8FC5;&#x901F;&#x9547;&#x538B;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x4EA4;&#x4E92; Mig1 &#x548C;&#x8C03;&#x89E3;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x80DE;&#x6838;&#x80DE;&#x8D28;&#x8FDE;&#x4F53;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5176;&#x4E30;&#x5BCC;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x589E;&#x52A0; nup120&Delta; &#x6216; nup133&Delta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;Mig1 &#x5DF2;&#x5931;&#x53BB;&#x5176;&#x4E0E;&#x76EE;&#x6807;&#x53D1;&#x8D77;&#x4EBA;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6838;&#x5B54;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x6CA1;&#x6709;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x9547;&#x538B;&#x7F3A;&#x9677;&#x56E0;&#x6B64;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4ECE; Mig1 &#x672A;&#x80FD;&#x8BBF;&#x95EE;&#x5176;&#x5171;&#x8BC6;&#x8BC6;&#x522B;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E2D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; DNA&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5168;&#x56FD;&#x4EBA;&#x5927;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x9547;&#x538B;&#x548C;&#x4E00;&#x7EA7;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x6838;&#x5B54;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x76EE;&#x6807;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458; Mig1 &#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x3002;

All eukaryotic cells alter their transcriptional program in response to the sugar glucose. In Saccharomyces cerevisiae, the best-studied downstream effector of this response is the glucose-regulated repressor Mig1. We show here that nuclear pore complexes also contribute to glucose-regulated gene expression. NPCs participate in glucose-responsive repression by physically interacting with Mig1 and mediating its function independently of nucleocytoplasmic transport. Surprisingly, despite its abundant presence in the nucleus of glucose-grown nup120Î” or nup133Î” cells, Mig1 has lost its ability to interact with target promoters. The glucose repression defect in the absence of these nuclear pore components therefore appears to result from the failure of Mig1 to access its consensus recognition sites in genomic DNA. We propose that the NPC contributes to both repression and activation at the level of transcription.

The nuclear pore complex mediates binding of the Mig1 repressor to target promoters.

Toutes les cellules eucaryotes modifient leur programme transcriptionnel en r&eacute;ponse au glucose sucre. Chez Saccharomyces cerevisiae, l&#39;effecteur mieux &eacute;tudi&eacute;e en aval de cette r&eacute;ponse est le r&eacute;presseur r&eacute;glement&eacute;s glucose Mig1. Nous montrons ici que les complexes du pore nucl&eacute;aire contribuent &agrave; l&#39;expression g&eacute;nique r&eacute;gl&eacute; par la glucose. PNJ participer &agrave; r&eacute;pression glucose-sensible par physiquement interagissant avec la Mig1 et de m&eacute;diation de sa fonction ind&eacute;pendamment de transport nucl&eacute;ocytoplasmique. &Eacute;tonnamment, malgr&eacute; sa pr&eacute;sence abondante dans le noyau des nup120&Delta; cultiv&eacute;es sur glucose ou des cellules nup133&Delta;, Mig1 a perdu sa capacit&eacute; &agrave; interagir avec les promoteurs de la cible. Donc, le d&eacute;faut de r&eacute;pression de glucose en l&#39;absence de ces composants de pore nucl&eacute;aire semble r&eacute;sulter de l&#39;&eacute;chec de Mig1 pour acc&eacute;der &agrave; ses sites de reconnaissance d&#39;un consensus dans l&#39;ADN g&eacute;nomique. Nous proposons que le NPC contribue &agrave; la fois la r&eacute;pression et l&#39;activation au niveau de la transcription.

Le pore nucl&eacute;aire complex intervient dans la liaison du r&eacute;presseur Mig1 aux promoteurs de la cible.

Alle eukaryotische Zellen ver&auml;ndern ihre transkriptionelle Programm in Reaktion auf die Zucker Glukose. Der genausten nachgeschaltete Effektor dieser Reaktion ist in Saccharomyces Cerevisiae die Glukose-regulierten Verdr&auml;nger Mig1. Wir zeigen hier, dass nukleare Pore-komplexe auch dazu, Glukose-regulierten Genexpression beitragen. NSCs teilnehmen in Glukose-responsive Repression durch k&ouml;rperlich Interaktion mit Mig1 und seine Funktion unabh&auml;ngig von der Nucleocytoplasmic Transport zu schlichten. &Uuml;berraschenderweise hat Mig1 trotz reichlich Pr&auml;senz in den Zellkern von Glukose angebauten nup120&Delta; oder nup133&Delta; Zellen, seine F&auml;higkeit zur Interaktion mit Ziel F&ouml;rderer verloren. Der Glukose-Unterdr&uuml;ckung-Mangel in Ermangelung dieser nuklearen Pore-Komponenten erscheint daher das Scheitern der Mig1 Zugriff auf seine Konsens-Anerkennung-Websites in der genomischen DNA Ergebnis. Wir schlagen vor, dass die NPC zu Unterdr&uuml;ckung und Aktivierung auf der Ebene der Transkription beitr&auml;gt.

Die nukleare Pore komplexe vermittelt die Bindung von den Mig1 Verdr&auml;nger Ziel Promotoren.

Tutte le cellule eucariotiche alterano il loro programma trascrizionale in risposta al glucosio zucchero. In Saccharomyces cerevisiae, l&#39;oggetto effettore a valle di questa risposta &egrave; il glucosio-regolato repressore Mig1. Mostriamo qui che poro nucleare complessi anche contribuiscano all&#39;espressione genica glucosio-regolato. NPC partecipano repressione glucosio-sensibli a reagire fisicamente interagendo con Mig1 e mediando la sua funzione indipendentemente da trasporto nucleo-citoplasmatici. Sorprendentemente, nonostante la sua abbondante presenza nel nucleo di nup120&Delta; glucosio-coltivate o cellule nup133&Delta;, Mig1 ha perso la sua capacit&agrave; di interagire con i promotori di destinazione. Il difetto di repressione del glucosio in assenza di questi componenti poro nucleare pertanto sembra derivare dal fallimento della Mig1 per accedere ai suoi siti di riconoscimento del consenso nel DNA genomico. Proponiamo che l&#39;Anp contribuisce all&#39;attivazione a livello di trascrizione e di repressione.

Il poro nucleare complesso media l&#39;associazione del repressore Mig1 ai promotori di destinazione.

&#x5168;&#x3066;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x7CD6;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E; best-studied &#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x898F;&#x5236;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC; Mig1 &#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6838;&#x819C;&#x5B54;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x304C;&#x30D6;&#x30C9;&#x30A6;&#x7CD6;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3082;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Npc &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6291;&#x5727;&#x3067;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B; Mig1 &#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x9593;&#x8F38;&#x9001;&#x3068;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6210;&#x9577; nup120&Delta; &#x307E;&#x305F;&#x306F; nup133&Delta; &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6838;&#x5185;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;Mig1 &#x3068;&#x6A19;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x3066;&#x3057;&#x307E;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6291;&#x5727;&#x6B20;&#x9665;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x6838;&#x819C;&#x5B54;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; DNA &#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3059;&#x308B; Mig1 &#x306E;&#x5931;&#x6557;&#x304B;&#x3089;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;NPC &#x304C;&#x6291;&#x5727;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6838;&#x819C;&#x5B54;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B; Mig1 &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBAA8;&#xB4E0; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC124;&#xD0D5;, &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; transcriptional &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xBCC0;&#xACBD;. Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC774; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; best-studied &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xADDC;&#xC81C; &#xC9C4;&#xC555; Mig1&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xAE30; &#xD575; &#xAE30; &#xACF5; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xB610;&#xD55C; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xD1B5;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;. NPCs &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; mig1&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; nucleocytoplasmic &#xC804;&#xC1A1; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xBC18;&#xC751; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xD3EC;&#xB3C4; &#xC7AC;&#xBC30; nup120&Delta; &#xB610;&#xB294; nup133&Delta; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC785;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; Mig1 &#xB300;&#xC0C1; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC0C1;&#xC2E4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD575; &#xAE30; &#xACF5; &#xBD80;&#xD488;&#xC774; &#xC5C6;&#xC744; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC5B5;&#xC555; &#xACB0;&#xD568; genomic DNA&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD569;&#xC758; &#xC778;&#xC2DD; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; mig1&#xC758; &#xC624;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; NPC &#xC5B5;&#xC555; &#xBC0F; &#xC804;&#xC0AC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD575; &#xACF5; &#xC911;&#xC7AC; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC744; Mig1 &#xC9C4;&#xC555;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;.

Todas las c&eacute;lulas eucariotas alteran su programa transcripcional en respuesta a la glucosa del az&uacute;car. En Saccharomyces cerevisiae, la mejor estudiada efectoras aguas abajo de esta respuesta es el represor regulados por glucosa Mig1. Aqu&iacute; mostramos que complejos de poro nuclear tambi&eacute;n contribuyen a la expresi&oacute;n de genes regulados por glucosa. PNJs participan en glucosa-responsiva represi&oacute;n f&iacute;sica interactuando con Mig1 y mediar su funci&oacute;n independientemente de transporte NUCLEOCITOPLASM&Aacute;TICO. Sorprendentemente, a pesar de su abundante presencia en el n&uacute;cleo de la glucosa-crecido nup120&Delta; o c&eacute;lulas nup133&Delta;, Mig1 ha perdido su capacidad de interactuar con los promotores de destino. Por lo tanto, el defecto de represi&oacute;n de la glucosa en ausencia de estos componentes de poro nuclear parece resultar de la falta de Mig1 acceder a sus sitios de reconocimiento de consenso en el ADN gen&oacute;mico. Proponemos que el NPC contribuye a la represi&oacute;n y la activaci&oacute;n a nivel de transcripci&oacute;n.

Article	Year
Reverse recruitment: the Nup84 nuclear pore subcomplex mediates Rap1/Gcr1/Gcr2 transcriptional activation. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 15817685	2005
Glucose-responsive regulators of gene expression in Saccharomyces cerevisiae function at the nuclear periphery via a reverse recruitment mechanism. Genetics\| PubMed ID: 17237508	2007
Dissection of the transformation of primary human hematopoietic cells by the oncogene NUP98-HOXA9. PloS one\| PubMed ID: 19696924	2009
Inhibition of CRM1-mediated nuclear export of transcription factors by leukemogenic NUP98 fusion proteins. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 20233715	2010
Amino-terminal enhancer of split (AES) interacts with the oncoprotein NUP98-HOXA9 and enhances its transforming ability. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 21937451	2011
Identification of HLA-A24-restricted CD8(+) cytotoxic T-cell epitopes derived from mammaglobin-A, a human breast cancer-associated antigen. Human immunology\| PubMed ID: 22074997	2012
The nuclear pore complex mediates binding of the Mig1 repressor to target promoters. PloS one\| PubMed ID: 22110603	2011

Nayan J. Sarma

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