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Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

BloodCenter of Wisconsin

Rap1b&#x3001; &#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#xFF0C;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D;&#x53D8;&#x5F97;&#x8FC5;&#x901F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#x4E0E;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5B83;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x4E0B;&#x6E38;&#x91C7;&#x53D6;&#x4ECE; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53; (GPCRs) &#x548C;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha; IIbbeta3&#xFF0C;Rap1b &#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x529F;&#x80FD;&#x4E00;&#x76F4;&#x662F;&#x53EF;&#x671B;&#x800C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x53CA;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x751F;&#x6210;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; rap1b &#x548C; Rap1b &#x7F3A;&#x4E4F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51FA;&#x8840;&#x7531;&#x4E8E;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x529F;&#x80FD;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x3002;&#x5BF9; Rap1b null &#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x805A;&#x96C6;&#x4E0E;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x94FE;&#x63A5;&#x548C;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x523A;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684; Rap1b null &#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x662F;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; alphaIIbbeta3 &#x5728;&#x4E0E;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha; IIbbeta3 &#x4ECE;&#x4E0B;&#x6E38;&#x4FE1;&#x53F7;&#x523A;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;Rap1b null &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0D;&#x53D7;&#x52A8;&#x8109;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x63D0;&#x4F9B;&#x9057;&#x4F20;&#x8BC1;&#x636E; Rap1b &#x53C2;&#x4E0E;&#x4E86;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x5171;&#x540C;&#x9014;&#x5F84;&#x3001; &#x662F;&#x9700;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x6B63;&#x5E38;&#x6B62;&#x8840;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x4E34;&#x5E8A;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x6CBB;&#x7597;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

Rap1b &#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x6B62;&#x8840;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;

Rap1b, an abundant small GTPase in platelets, becomes rapidly activated upon stimulation with agonists. Though it has been implicated to act downstream from G protein-coupled receptors (GPCRs) and upstream of integrin alpha IIbbeta3, the precise role of Rap1b in platelet function has been elusive. Here we report the generation of a murine rap1b knockout and show that Rap1b deficiency results in a bleeding defect due to defective platelet function. Aggregation of Rap1b-null platelets is reduced in response to stimulation with both GPCR-linked and GPCR-independent agonists. Underlying the defective Rap1b-null platelet function is decreased activation of integrin alphaIIbbeta3 in response to stimulation with agonists and signaling downstream from the integrin alpha IIbbeta3. In vivo, Rap1b-null mice are protected from arterial thrombosis. These data provide genetic evidence that Rap1b is involved in a common pathway of integrin activation, is required for normal hemostasis in vivo, and may be a clinically relevant antithrombotic therapy target.

Rap1b is required for normal platelet function and hemostasis in mice.

Rap1b, une GTPase abondante petite dans les plaquettes, devient rapidement activ&#xE9; lors de la stimulation par des agonistes. Bien qu&#x26;#39;il ait &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; d&#x26;#39;agir en aval de coupl&#xE9;s aux prot&#xE9;ines G (RCPG r&#xE9;cepteurs) et en amont de l&#x26;#39;int&#xE9;grine alpha IIbbeta3, le r&#xF4;le pr&#xE9;cis de Rap1b dans la fonction plaquettaire a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;vasif. Ici, nous rapportons la g&#xE9;n&#xE9;ration d&#x26;#39;un knock-out rap1b murin et montrent que les r&#xE9;sultats de carence Rap1b dans un d&#xE9;faut de saignement en raison d&#x26;#39;un d&#xE9;faut de la fonction plaquettaire. L&#x26;#39;agr&#xE9;gation des plaquettes Rap1b-nulles est r&#xE9;duite en r&#xE9;ponse &#xE0; une stimulation par deux agonistes GPCR li&#xE9;es GPCR et ind&#xE9;pendant. Derri&#xE8;re la d&#xE9;fectueuse Rap1b-nulle de la fonction plaquettaire est diminu&#xE9;e d&#x26;#39;activation de l&#x26;#39;int&#xE9;grine alphaIIbbeta3 en r&#xE9;ponse &#xE0; une stimulation par des agonistes et de signalisation en aval de la IIbbeta3 int&#xE9;grine alpha. In vivo, les souris nulles Rap1b sont prot&#xE9;g&#xE9;s contre la thrombose art&#xE9;rielle. Ces donn&#xE9;es fournissent la preuve g&#xE9;n&#xE9;tique qui Rap1b est impliqu&#xE9; dans une voie commune d&#x26;#39;activation de l&#x26;#39;int&#xE9;grine, est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;h&#xE9;mostase normale in vivo, et peut &#xEA;tre une cible antithrombotique cliniquement pertinente th&#xE9;rapie.

Rap1b est requis pour une fonction plaquettaire normale et d&#x26;#39;H&#xE9;mostase chez la souris

Rap1b ist f&#xFC;r den normalen Thrombozytenfunktion und H&#xE4;mostase in M&#xE4;usen erforderlich.

Rap1b, un&#39;abbondante piccolo GTPase in piastrine, diventa rapidamente attivato dopo stimolazione con agonisti. Anche se &egrave; stato implicato per agire a valle da recettori accoppiati a proteine G (GPCR) e a monte dell&#39;integrina alfa IIbbeta3, il preciso ruolo di Rap1b in funzione delle piastrine &egrave; stato sfuggente. Qui riportiamo la generazione di un rap1b murino knockout e spettacolo che Rap1b risultati deficit in un sanguinamento difetto a causa della funzione piastrinica difettosi. Aggregazione delle piastrine Rap1b null &egrave; ridotto in risposta alla stimolazione con agonisti sia legata al GPCR e GPCR-indipendente. Sottostanti la funzione piastrinica Rap1b null difettosa &egrave; diminuita attivazione dell&#39;integrina alphaIIbbeta3 in risposta alla stimolazione con agonisti e segnalazione a valle dall&#39;integrina alfa IIbbeta3. In vivo, topi Rap1b-null sono protetti da trombosi arteriosa. Questi dati forniscono prove genetiche Rap1b &egrave; coinvolto in un percorso comune di integrina attivazione, &egrave; necessario per l&#39;emostasi normale in vivo che pu&ograve; essere un obiettivo della terapia antitrombotica clinicamente rilevanti.

Rap1b &egrave; richiesto per la funzione piastrinica normale e l&#39;emostasi nei topi.

Rap1b&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTPase&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;GPCR&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3001;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3B1;IIbbeta3&#x306E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;Rap1b&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;rap1b&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3001;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x51FA;&#x8840;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x305D;&#x306E;Rap1b&#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Rap1b null&#x3067;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;GPCR&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;GPCR&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E0D;&#x826F;Rap1b null&#x3067;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;IIbbeta3&#x304B;&#x3089;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;alphaIIbbeta3&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3002; in vivo&#x3067;&#x3001;Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x8108;&#x8840;&#x6813;&#x75C7;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;Rap1b&#x304C;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x6B62;&#x8840;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Rap1b&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x6B62;&#x8840;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

Rap1b, &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC791;&#xC740; GTPase agonists&#xC640; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GPCRs)&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB958; &#xD589;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &#xC54C;&#xD30C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; IIbbeta3, rap1b&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC560;&#xB9E4; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; murine rap1b &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xBC0F; &#xC1FC; Rap1b &#xACB0;&#xD54D; &#xACB0;&#xACFC; &#xCD9C;&#xD608; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xAE30;&#xB2A5; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. GPCR &#xC5F0;&#xACB0; &#xBC0F; GPCR &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; agonists&#xC640; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; Rap1b null &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC758; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB97C; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; Rap1b null &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAE30;&#xBCF8; agonists &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &#xC54C;&#xD30C; Iibbeta3&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB958; &#xC2E0;&#xD638; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; integrin Alphaiibbeta3&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Vivo&#xC5D0;&#xC11C; Rap1b null &#xC950; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xD608;&#xC804; &#xC99D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xD638; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; Rap1b integrin &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; hemostasis in vivo&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xBA70; &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828; antithrombotic &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rap1b&#xB294; &#xC815;&#xC0C1; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rap1b, una GTPasa peque&#xF1;a abundante en las plaquetas, se activa r&#xE1;pidamente a la estimulaci&#xF3;n con agonistas. A pesar de que se ha implicado a actuar aguas abajo de acoplados a prote&#xED;nas G receptores (GPCR) y aguas arriba de la integrina alfa IIbbeta3, el papel preciso de Rap1b en la funci&#xF3;n plaquetaria ha sido dif&#xED;cil de alcanzar. Aqu&#xED; se presenta la generaci&#xF3;n de un golpe de gracia rap1b murino y muestran que los resultados Rap1b deficiencia en un defecto de sangrado debido a defectos en la funci&#xF3;n plaquetaria. La agregaci&#xF3;n de las plaquetas Rap1b nulo se reduce en respuesta a la estimulaci&#xF3;n con agonistas GPCR y GPCR vinculados independiente. Subyacente a la defectuosa Rap1b nulo funci&#xF3;n de las plaquetas se disminuye la activaci&#xF3;n de la integrina alphaIIbbeta3 en respuesta a la estimulaci&#xF3;n con agonistas y de se&#xF1;alizaci&#xF3;n hacia abajo desde la IIbbeta3 integrina alfa. In vivo, Rap1b nulo ratones est&#xE1;n protegidos de la trombosis arterial. Estos datos proporcionan evidencia gen&#xE9;tica de que Rap1b est&#xE1; implicado en una v&#xED;a com&#xFA;n de activaci&#xF3;n de la integrina, se requiere para la hemostasis normal in vivo, y puede ser un objetivo antitromb&#xF3;tico terapia cl&#xED;nicamente relevantes.

Rap1b se requiere para la funci&#xF3;n normal de las plaquetas y de la hemostasia en ratones

&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x662F;&#x8840;&#x7BA1;&#x91CD;&#x5EFA;&#x5F00;&#x53D1;&#x540E;&#x671F;&#x548C;&#x4EA7;&#x540E;&#x4F24;&#x53E3;&#x6108;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x764C;&#x75C7;&#x3001; &#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3001; &#x7F3A;&#x8840;&#x3001; &#x708E;&#x75C7;&#x53D1;&#x751F;&#x6270;&#x52A8;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x63A7;&#x5236;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x65B9;&#x9762;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x5F88;&#x5927;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x7CBE;&#x786E;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x6574;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;Rap1b&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3002;Rap1b &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E86; Matrigel &#x63D2;&#x5934;&#x548C;&#x65B0;&#x751F;&#x513F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x65B0;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x5206;&#x79BB; Rap1b &#x7F3A;&#x52A8;&#x7269;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x53D1;&#x82BD; 2 &#x4E3B;&#x8981;&#x751F;&#x7406;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x54CD;&#x5E94;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#xFF1A; &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x548C;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (bFGF)&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x539F;&#x4F4D;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x80BA;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A; Rap1b &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x6709;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x5206;&#x5B50;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;2 MAP &#x6FC0;&#x9176;&#x3001; p38 MAPK &#x548C; p42/44 ERK&#xFF0C;&#x91CD;&#x8981;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0B;&#x964D; Rap1b &#x7F3A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D; VEGF &#x523A;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E; Rap1b &#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x6B63;&#x5E38;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x548C;&#x63ED;&#x793A; Rap1 proangiogenic &#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x8C03;&#x63A7;&#x65B0;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3001; &#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3001; &#x589E;&#x6B96;&#x548C; MAPK &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC; Rap1b &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;

Angiogenesis is the main mechanism of vascular remodeling during late development and, after birth, in wound healing. Perturbations of angiogenesis occur in cancer, diabetes, ischemia, and inflammation. While much progress has been made in identifying factors that control angiogenesis, the understanding of the precise molecular mechanisms involved is incomplete. Here we identify a small GTPase, Rap1b, as a positive regulator of angiogenesis. Rap1b-deficient mice had a decreased level of Matrigel plug and neonatal retinal neovascularization, and aortas isolated from Rap1b-deficient animals had a reduced microvessel sprouting response to 2 major physiological regulators of angiogenesis: vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblasts growth factor (bFGF), indicating an intrinsic defect in endothelial cells. Proliferation of retinal endothelial cells in situ and in vitro migration of lung endothelial cells isolated from Rap1b-deficient mice were inhibited. At the molecular level, activation of 2 MAP kinases, p38 MAPK and p42/44 ERK, important regulators of endothelial migration and proliferation, was decreased in Rap1b-deficient endothelial cells in response to VEGF stimulation. These studies provide evidence that Rap1b is required for normal angiogenesis and reveal a novel role of Rap1 in regulation of proangiogenic signaling in endothelial cells.

Defective angiogenesis, endothelial migration, proliferation, and MAPK signaling in Rap1b-deficient mice.

L&#x26;#39;angiogen&#xE8;se est le principal m&#xE9;canisme de remodelage vasculaire au cours du d&#xE9;veloppement et de la fin, apr&#xE8;s la naissance, dans la cicatrisation des plaies. Perturbations de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se se produire dans le cancer, le diab&#xE8;te, l&#x26;#39;isch&#xE9;mie, et l&#x26;#39;inflammation. Alors que beaucoup de progr&#xE8;s ont &#xE9;t&#xE9; accomplis dans l&#x26;#39;identification des facteurs de contr&#xF4;le que l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se, la compr&#xE9;hension des m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires pr&#xE9;cis impliqu&#xE9;s est incompl&#xE8;te. Ici nous identifions une petite GTPase, Rap1b, comme un r&#xE9;gulateur positif de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se. Rap1b souris d&#xE9;ficientes en avait une baisse du niveau de Matrigel et n&#xE9;onatale n&#xE9;ovascularisation r&#xE9;tinienne, et aortes isol&#xE9;es de Rap1b-animaux d&#xE9;ficients ont eu une r&#xE9;ponse microvaisseaux r&#xE9;duite germination &#xE0; 2 grands r&#xE9;gulateurs physiologiques de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se: vascular endothelial growth factor (VEGF) et de facteur de croissance basique des fibroblastes (bFGF), indiquant un d&#xE9;faut intrins&#xE8;que dans des cellules endoth&#xE9;liales. Prolif&#xE9;ration des cellules endoth&#xE9;liales r&#xE9;tiniennes in situ et la migration in vitro des cellules endoth&#xE9;liales pulmonaires isol&#xE9;es &#xE0; partir de Rap1b souris d&#xE9;ficientes ont &#xE9;t&#xE9; inhib&#xE9;es. Au niveau mol&#xE9;culaire, l&#x26;#39;activation de 2 MAP kinases, p38 MAPK et ERK p42/44, d&#x26;#39;importants r&#xE9;gulateurs de la migration et la prolif&#xE9;ration endoth&#xE9;liale, a &#xE9;t&#xE9; diminu&#xE9; dans Rap1b d&#xE9;ficientes cellules endoth&#xE9;liales en r&#xE9;ponse &#xE0; la stimulation du VEGF. Ces &#xE9;tudes fournissent des preuves que Rap1b est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se normale et r&#xE9;v&#xE8;lent un nouveau r&#xF4;le de Rap1 dans la r&#xE9;gulation de la signalisation pro-angiog&#xE9;niques dans les cellules endoth&#xE9;liales.

L&#x26;#39;angiogen&#xE8;se d&#xE9;fectueuse, la migration endoth&#xE9;liale, la prolif&#xE9;ration, et MAPK dans Rap1b souris d&#xE9;ficientes

Angiogenese ist der wichtigste Mechanismus der vaskul&auml;ren Umgestaltung w&auml;hrend der sp&auml;ten Entwicklung und nach der Geburt in der Wundheilung. St&ouml;rungen von Angiogenesis treten bei Krebs, Diabetes, Isch&auml;mie und Entz&uuml;ndungen. Obwohl viel Fortschritte bei der Identifizierung von Faktoren, die Angiogenese zu steuern, ist das Verst&auml;ndnis der beteiligten genauen molekularen Mechanismen unvollst&auml;ndig. Hier identifizieren wir eine kleine GTPase, Rap1b, als ein positiver Regulator der Angiogenese. Rap1b-defizienten M&auml;usen hatte eine verminderte Ebene Matrigel Plug and neonatal retinale Neovaskularisation und Aortas von Rap1b-defizienten Tieren isoliert hatte eine reduzierte Microvessel sprie&szlig;en Reaktion auf 2 wichtigen physiologischen Atemregler von Angiogenesis: vascular endothelial Growth Factor (VEGF) und grundlegende Fibroblasten-Wachstumsfaktor (bFGF), Angabe eines intrinsischen Defekts in Endothelzellen. Verbreitung von retinalen Endothelzellen in-situ und in-vitro-Migration der Lunge Endothelzellen aus Rap1b-defizienten M&auml;usen isoliert wurden gehemmt. Auf molekularer Ebene wurde die Aktivierung von 2 MAP-Kinasen, p38 MAPK und p42/44 ERK, wichtige Regulatoren der endothelial Migration und Proliferation, in Rap1b-defizienten Endothelzellen in Reaktion auf VEGF Stimulation verringert. Diese Studien belegen, dass Rap1b f&uuml;r normale Angiogenese erforderlich ist und eine neuartige Rolle von Rap1 bei Regulierung der Proangiogenic signalisieren in Endothelzellen zu offenbaren.

Defekte Angiogenese, endotheliale Migration, Weiterverbreitung und MAPK signalisieren in Rap1b-defizienten M&auml;usen.

L&#39;angiogenesi &egrave; il principale meccanismo di rimodellamento vascolare durante lo sviluppo ritardato e, dopo la nascita, nella guarigione delle ferite. Perturbazioni dell&#39;angiogenesi si verificano in cancro, diabete, ischemia e infiammazione. Mentre molti progressi compiuti nell&#39;identificare i fattori che controllano l&#39;angiogenesi, la comprensione dei precisi meccanismi molecolari coinvolti &egrave; incompleta. Qui ci identifichiamo un piccolo GTPase, Rap1b, come un regolatore positivo dell&#39;angiogenesi. Rap1b-deficient mice avevano un livello diminuito di Matrigel spina e neovascolarizzazione della retina neonatale, e aortas isolati da animali di Rap1b-deficient un microvessel ridotta germinazione risposta a 2 principali regolatori fisiologici dell&#39;angiogenesi: fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) e fattore di crescita di base dei fibroblasti (bFGF), indicando un difetto intrinseco nelle cellule endoteliali. Proliferazione delle cellule endoteliali retiniche in situ e in vitro la migrazione delle cellule endoteliali del polmone isolata dal mouse Rap1b-carenti sono stati inibiti. A livello molecolare, &egrave; stata ridotta attivazione della chinasi di mappa 2, p38 MAPK e p42/44 ERK, importanti regolatori della migrazione endoteliale e la proliferazione, in cellule endoteliali Rap1b-carenti in risposta alla stimolazione di VEGF. Questi studi forniscono prove che Rap1b &egrave; richiesto per la normale angiogenesi e rivelano un romanzo ruolo di Rap1 nel regolamento di proangiogenic segnalazione nelle cellule endoteliali.

Angiogenesi difettoso, endoteliali migrazione, proliferazione e MAPK segnalazione in mouse Rap1b-carenti.

&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306F;&#x5275;&#x50B7;&#x6CBB;&#x7652;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x751F;&#x5F8C;&#x3001;&#x5F8C;&#x534A;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x3001;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3001;&#x865A;&#x8840;&#x3001;&#x708E;&#x75C7;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306F;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x306B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x6B63;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTPase&#x3001;Rap1b&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B2;&#x30EB;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x7DB2;&#x819C;&#x65B0;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x52D5;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x7E2E;&#x5C0F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x767A;&#x82BD;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;VEGF&#xFF09;&#x3068;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#xFF08;bFGF&#xFF09;&#x306E;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5834;&#x3067;&#x3068;Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x80BA;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x904A;&#x8D70;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7DB2;&#x819C;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x304C;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;MAP&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;p38 MAPK&#x304A;&#x3088;&#x3073;ERK p42/44&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x904A;&#x8D70;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;VEGF&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;Rap1b&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;Rap1&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x904A;&#x8D70;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;MAPK&#x306F;Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;

&#xC2E0;&#xC0DD; &#xD608;&#xAD00; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xB2A6;&#xAC8C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xCC98; &#xCE58;&#xC720;&#xC5D0; &#xCD9C;&#xC0B0; &#xD6C4;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; &#xBB3C;&#xACB0;&#xC5D0; &#xC554;, &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;, &#xD5C8; &#xD608;, &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC99D; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC644;&#xC804; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xC791;&#xC740; GTPase, Rap1b, &#xC2DD;&#xBCC4;. Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; Matrigel &#xD50C;&#xB7EC;&#xADF8; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; &#xB9DD;&#xB9C9; neovascularization&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xACE0; aortas Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; 2 &#xC8FC;&#xC694; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xB3CB; &#xC544; &#xAC10;&#xC18C; microvessel &#xD588;&#xB2E4;: &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (VEGF)&#xC640; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (bFGF), &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xD3D0; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC790; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; 2 &#xC9C0;&#xB3C4; kinases, p38 MAPK p42/44 ERK, &#xB0B4; &#xD53C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xD655;&#xC0B0;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; VEGF &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; rap1b&#xC740; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; proangiogenic &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; rap1&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xC0DD;, &#xB0B4; &#xD53C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;, &#xD655;&#xC0B0;, &#xBC0F; Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; MAPK &#xC2E0;&#xD638;.

La angiog&#xE9;nesis es el principal mecanismo de remodelado vascular durante el desarrollo de tarde y, despu&#xE9;s de su nacimiento, en la cicatrizaci&#xF3;n de heridas. Las perturbaciones de la angiog&#xE9;nesis se producen en el c&#xE1;ncer, la diabetes, isquemia y la inflamaci&#xF3;n. Si bien se ha avanzado mucho en la identificaci&#xF3;n de los factores que controlan la angiog&#xE9;nesis, la comprensi&#xF3;n de los mecanismos moleculares implicados es incompleta. Aqu&#xED; identificamos una peque&#xF1;a GTPasa, Rap1b, como un regulador positivo de la angiog&#xE9;nesis. Rap1b ratones deficientes ten&#xED;a una disminuci&#xF3;n del nivel de complemento Matrigel y neovascularizaci&#xF3;n retiniana neonatal y aortas aisladas de animales deficientes en Rap1b tuvieron una respuesta microvascular reducida a 2 brotes principales reguladores fisiol&#xF3;gicos de la angiog&#xE9;nesis: factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF) y factor de crecimiento b&#xE1;sico de fibroblastos (bFGF), lo que indica un defecto intr&#xED;nseco en las c&#xE9;lulas endoteliales. Proliferaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas endoteliales de retina in situ y en la migraci&#xF3;n in vitro de c&#xE9;lulas endoteliales aisladas de pulm&#xF3;n Rap1b ratones deficientes fueron inhibidas. A nivel molecular, la activaci&#xF3;n de 2 MAP quinasas, p38 MAPK y ERK p42/44, reguladores importantes de la migraci&#xF3;n y proliferaci&#xF3;n endotelial, se redujo en Rap1b con deficiencia de c&#xE9;lulas endoteliales en respuesta a la estimulaci&#xF3;n de VEGF. Estos estudios proporcionan evidencia de que Rap1b es necesario para la angiog&#xE9;nesis normal y revelar un nuevo papel de Rap1 en la regulaci&#xF3;n de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n proangiog&#xE9;nicos en las c&#xE9;lulas endoteliales.

Defectuoso angiog&#xE9;nesis, la migraci&#xF3;n endotelial, proliferaci&#xF3;n y se&#xF1;alizaci&#xF3;n MAPK en Rap1b ratones deficientes

B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x662F;&#x7CBE;&#x5FC3;&#x7B56;&#x5212;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;Rap1 &#x662F;&#x5C0F; GTP &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; Ras &#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5DF2; 2 &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;Rap1a &#x548C; Rap1b&#x3002;Rap1 &#x66FE;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6CA1;&#x6709;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4E3A; Rap1 B &#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Rap1b Rap1 &#x5728; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Rap1b &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D7;&#x5230;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x4F46;&#x660E;&#x663E;&#x51CF;&#x5C11;&#x813E;&#x8FB9;&#x7F18;&#x533A; (MZ) B &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x548C;&#x9ECF;&#x819C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x5185;&#x7684;&#x6210;&#x719F; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;Rap1b &#x7F3A; B &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x6B63;&#x5E38;&#x751F;&#x5B58;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Rap1b &#x7F3A; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x5DF2;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x9644;&#x7740;&#x529B;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x4F53;&#x5185;&#x5F52;&#x5DE2;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Rap1b &#x7F3A;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x3001; BCR &#x6216;&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x548C; AKT SDF-1 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x660E;&#x663E;&#x53D7;&#x635F;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x81EA;&#x536B;&#x961F; 1 &#x6FC0;&#x6D3B; Pyk-2&#x3001; &#x4ECB;&#x5BFC;&#x81EA;&#x536B;&#x961F; 1 B &#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x6210;&#x719F; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x8D29;&#x8FD0; Rap1b &#x5173;&#x952E;&#x548C;&#x72EC;&#x7279;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C; MZ B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;

Rap1b &#x5728; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8D29;&#x8FD0;&#x548C;&#x8FB9;&#x9645;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x533A; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;

B-cell development is orchestrated by complex signaling networks. Rap1 is a member of the Ras superfamily of small GTP-binding proteins and has 2 isoforms, Rap1a and Rap1b. Although Rap1 has been suggested to have an important role in a variety of cellular processes, no direct evidence demonstrates a role for Rap1 in B-cell biology. In this study, we found that Rap1b was the dominant isoform of Rap1 in B cells. We discovered that Rap1b deficiency in mice barely affected early development of B cells but markedly reduced marginal zone (MZ) B cells in the spleen and mature B cells in peripheral and mucosal lymph nodes. Rap1b-deficient B cells displayed normal survival and proliferation in vivo and in vitro. However, Rap1b-deficient B cells had impaired adhesion and reduced chemotaxis in vitro, and lessened homing to lymph nodes in vivo. Furthermore, we found that Rap1b deficiency had no marked effect on LPS-, BCR-, or SDF-1-induced activation of mitogen-activated protein kinases and AKT but clearly impaired SDF-1-mediated activation of Pyk-2, a key regulator of SDF-1-mediated B-cell migration. Thus, we have discovered a critical and distinct role of Rap1b in mature B-cell trafficking and development of MZ B cells.

A critical role of Rap1b in B-cell trafficking and marginal zone B-cell development.

D&#xE9;veloppement des cellules B est orchestr&#xE9;e par des r&#xE9;seaux complexes de signalisation. Rap1 est un membre de la superfamille des Ras petites prot&#xE9;ines G et a 2 isoformes, Rap1a et Rap1b. Bien que Rap1 a &#xE9;t&#xE9; sugg&#xE9;r&#xE9; d&#x26;#39;avoir un r&#xF4;le important dans une vari&#xE9;t&#xE9; de processus cellulaires, aucune preuve directe d&#xE9;montre un r&#xF4;le &#xE0; jouer dans Rap1 B la biologie des cellules. Dans cette &#xE9;tude, nous avons constat&#xE9; que Rap1b &#xE9;tait l&#x26;#39;isoforme dominante de Rap1 dans les cellules B. Nous avons d&#xE9;couvert que la carence en Rap1b chez la souris &#xE0; peine affect&#xE9; le d&#xE9;veloppement pr&#xE9;coce des cellules B, mais nettement r&#xE9;duit la zone marginale (MZ) des cellules B dans la rate et les cellules B matures dans les ganglions lymphatiques p&#xE9;riph&#xE9;riques et des muqueuses. Les cellules B d&#xE9;ficientes Rap1b affich&#xE9; une survie normale et la prolif&#xE9;ration in vivo et in vitro. Cependant, les cellules B d&#xE9;ficientes Rap1b a port&#xE9; atteinte &#xE0; l&#x26;#39;adh&#xE9;rence et le chimiotactisme r&#xE9;duit in vitro, et diminu&#xE9; de ralliement aux ganglions lymphatiques in vivo. En outre, nous avons trouv&#xE9; que la carence en Rap1b n&#x26;#39;a eu aucun effet notable sur LPS-, BCR-, ou SDF-1-activation induite par des prot&#xE9;ines kinases activ&#xE9;es par les mitog&#xE8;nes et AKT, mais clairement atteinte SDF-1-activation m&#xE9;di&#xE9;e par des Pyk-2, un r&#xE9;gulateur cl&#xE9; de SDF-1-m&#xE9;di&#xE9;e cellules B de migration. Ainsi, nous avons d&#xE9;couvert un r&#xF4;le essentiel et distinct de Rap1b dans les &#xE9;conomies matures &#xE0; cellules B le trafic et le d&#xE9;veloppement des cellules B MZ.

Un r&#xF4;le critique de Rap1b dans des cellules B et la traite des zones marginales d&#xE9;veloppement des cellules B

B-Zell-Entwicklung ist von komplexen Signalisierung Netzwerken orchestriert. Rap1 ist ein Mitglied der Ras-Superfamilie der kleine GTP-bindende Proteine und hat 2 Isoformen, Rap1a und Rap1b. Obwohl Rap1 vorgeschlagen wurde, eine wichtige Rolle in einer Vielzahl zellul&auml;rer Prozesse haben, zeigt keine direkten Beweise eine Rolle f&uuml;r Rap1 in der B-Zell-Biologie. In dieser Studie fanden wir, dass Rap1b die dominante Isoform von Rap1 in B-Zellen war. Wir entdeckten, dass Rap1b Mangel an M&auml;usen kaum fr&uuml;he Entwicklung von B-Zellen betroffen jedoch deutlich (MZ)-Marginalzonen B-Zellen in der Milz und Reifen B-Zellen im peripheren und Schleimhaut Lymphknoten reduziert. Rap1b-defizienten B Zellen angezeigt, normale &uuml;berleben und Vermehrung in vivo und in vitro. Rap1b-defizienten B-Zellen hatte jedoch beeintr&auml;chtigt wird Adh&auml;sion und Chemotaxis in vitro und vermindert homing auf Lymphknoten in-vivo reduziert. Dar&uuml;ber hinaus fanden wir, dass Rap1b Mangel keine deutliche Auswirkungen auf die LPS - BCR- oder SDF-1-induzierte Aktivierung von Mitogen-aktivierte Proteinkinasen und AKT hatte aber deutlich SDF-1-vermittelte Aktivierung von Pyk-2, ein wichtiger Regulator der B-Zell-SDF-1-vermittelte Migration beeintr&auml;chtigt. Daher haben wir eine kritische und unterschiedliche Rolle der Rap1b Reife B-Zell-Handel und Entwicklung von MZ-B-Zellen entdeckt.

Eine entscheidende Rolle der Rap1b in B-Zellen des Drogenhandels und marginal zone B-Zell-Entwicklung.

Lo sviluppo delle cellule di B &egrave; orchestrato da complesse reti di segnalazione. Rap1 &egrave; un membro della superfamiglia Ras di piccole proteine GTP-binding e ha 2 isoforme, Rap1a e Rap1b. Sebbene Rap1 ha ipotizzato di avere un ruolo importante in una variet&agrave; di processi cellulari, nessuna prova diretta dimostra un ruolo per Rap1 B-cell biology. In questo studio, abbiamo trovato che Rap1b era l&#39;isoforma dominante di Rap1 in cellule B. Abbiamo scoperto che Rap1b deficit nei topi colpiti a malapena lo sviluppo precoce delle cellule di B ma marcatamente ridotta delle cellule di B di zona marginale (MZ) nella milza e le cellule B mature nei linfonodi periferici e delle mucose. Le cellule di B di Rap1b-deficient visualizzato normale sopravvivenza e proliferazione in vitro e in vivo. Tuttavia, le cellule Rap1b-carenti B avevano alterata adesione e ridotta chemiotassi diminuita homing ai linfonodi in vivo e in vitro. Inoltre, abbiamo trovato che il deficit di Rap1b ha avuto alcun effetto marcato sulla LPS, BCR- o indotta da SDF-1 attivazione della chinasi di proteina mitogene-attivata e AKT ma chiaramente alterata attivazione SDF-1-mediata di Pyk-2, un regolatore chiave della migrazione mediata da SDF-1 B-cellulare. Cos&igrave;, abbiamo scoperto un ruolo critico e distinto di Rap1b nel traffico di cellule B mature e lo sviluppo delle cellule B MZ.

Lo sviluppo delle cellule di B di zona un ruolo critico di Rap1b nel traffico e marginale a cellule B.

B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTP&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;Ras&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3001;2&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;Rap1a&#x3068;Rap1b&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;B&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;Rap1&#x3068;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Rap1b&#x306F;&#x3001;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rap1&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x304B;&#x308D;&#x3046;&#x3058;&#x3066;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x305D;&#x306E;Rap1b&#x6B20;&#x4E4F;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x5468;&#x8FBA;&#x3084;&#x7C98;&#x819C;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x3001;&#x813E;&#x81D3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x719F;B&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x8FBA;&#x7E01;&#x5E2F;&#xFF08;MZ&#xFF09;B&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; Rap1b&#x6B20;&#x640D;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;in vivo&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x3067;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Rap1b&#x6B20;&#x640D;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x5BC6;&#x7740;&#x6027;&#x3068;&#x4F4E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x3078;&#x306E;&#x30DB;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x306E;Rap1b&#x6B20;&#x4E4F;&#x306F;LPS-&#x3001;BCR-&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;SDF-1&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;Akt&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;Pyk-2&#x306E;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x640D;&#x306A;&#x308F;SDF-1&#x5A92;&#x4ECB;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x30AD;&#x30FC;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x306F;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;SDF-1&#x5A92;&#x4ECB;B&#x7D30;&#x80DE;&#x904A;&#x8D70;&#x306E;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x719F;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3084;MZ B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;Rap1b&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x304B;&#x3064;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3068;&#x30DE;&#x30FC;&#x30B8;&#x30CA;&#x30EB;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;Rap1b&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;

B &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC740; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC728; &#xB41C;. Rap1 &#xC791;&#xC740; GTP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Ras superfamily&#xC758; &#xBA64;&#xBC84; &#xC774;&#xBA70; 2 isoforms&#xB97C; Rap1a &#xBC0F; Rap1b. Rap1 &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; B-&#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; rap1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; rap1b&#xB294; Rap1 B &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; isoform &#xBC1C;&#xACAC;. Rap1b &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACA8;&#xC6B0; B &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBE44;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD55C;&#xACC4; &#xC601;&#xC5ED; (MZ) B &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xBC0F; &#xC810; &#xB9C9; &#xB9BC;&#xD504;&#xC808;&#xC5D0; &#xC131;&#xC219; B &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rap1b-&#xACB0;&#xD54D; B &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC815;&#xC0C1; &#xC0DD;&#xC874;&#xACFC; &#xD655;&#xC0B0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, Rap1b-&#xACB0;&#xD54D; B &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xC84C;&#xACE0; chemotaxis &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9BC;&#xD504;&#xC808;&#xC5D0; &#xC790;&#xB3D9; &#xC704;&#xCE58; &#xAC10;&#xC18C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rap1b &#xACB0;&#xD54D; LPS, BCR &#xB610;&#xB294; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinases&#xC640; AKT &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC790;&#xC704;&#xB300; 1 &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xBD84;&#xBA85;&#xD788; Pyk-2, &#xC790;&#xC704;&#xB300; 1 &#xC911;&#xC7AC; B &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xB3D9;&#xC758; &#xD0A4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xC790;&#xC704;&#xB300; 1 &#xC911;&#xC7AC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC7A5;&#xC560; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC; MZ B &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xACFC; &#xC131;&#xC219; B &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC5D0; rap1b&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC640; &#xD55C;&#xACC4; B &#xC140;&#xC5D0; rap1b&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC601;&#xC5ED; B &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C;.

De c&#xE9;lulas B es orquestada por el desarrollo de complejas redes de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Rap1 es un miembro de la superfamilia Ras de peque&#xF1;as GTP-prote&#xED;nas de uni&#xF3;n y tiene 2 isoformas, Rap1a y Rap1b. Aunque Rap1 Se ha sugerido que tienen un papel importante en una variedad de procesos celulares, no hay evidencia directa demuestra un papel para Rap1 en la biolog&#xED;a de c&#xE9;lulas B. En este estudio, se encontr&#xF3; que era Rap1b la isoforma dominante de Rap1 en las c&#xE9;lulas B. Hemos descubierto que la deficiencia en los ratones Rap1b apenas afect&#xF3; al desarrollo temprano de las c&#xE9;lulas B, pero reduce notablemente la zona marginal (MZ), las c&#xE9;lulas B en el bazo y las c&#xE9;lulas B maduras en los ganglios linf&#xE1;ticos perif&#xE9;ricos y de las mucosas. Rap1b deficientes en c&#xE9;lulas B muestra la supervivencia normal y la proliferaci&#xF3;n in vivo e in vitro. Sin embargo, Rap1b las c&#xE9;lulas deficientes en B se hab&#xED;a deteriorado la adhesi&#xF3;n y la quimiotaxis reducida in vitro, y se redujo homing a los ganglios linf&#xE1;ticos en vivo. Adem&#xE1;s, hemos encontrado que la deficiencia de Rap1b no tuvo un efecto marcado en LPS-BCR-, o el SDF-1 inducida por la activaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas quinasas activadas por mit&#xF3;genos y AKT, pero claramente afectada SDF-1 mediada por la activaci&#xF3;n de Pyk-2, un regulador clave de SDF-1 mediada por c&#xE9;lulas B de la migraci&#xF3;n. Por lo tanto, hemos descubierto un papel fundamental y distintiva de Rap1b en c&#xE9;lulas B maduras tr&#xE1;fico y el desarrollo de las c&#xE9;lulas B MZ.

Una funci&#xF3;n fundamental de la Rap1b en el tr&#xE1;fico de c&#xE9;lulas B y el Desarrollo de la zona marginal de c&#xE9;lulas B

Rap1 &#x662F;&#x5C5E;&#x4E8E; Ras &#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8FD9;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x6574;&#x5408;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;Rap1 &#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x578B;&#xFF1A; Rap1a &#x548C; Rap1b&#x3002;Rap1 &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6CA1;&#x6709;&#x9610;&#x660E; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CA;&#x5176;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7279;&#x5B9A;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Rap1b &#x662F;&#x5728; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x3002;Rap1b &#x7F3A;&#x4E4F;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11; B220(+)IgM(-) pro/pre-B &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; B220(+)IgM(+) &#x672A;&#x6210;&#x719F; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-7 Rap1b(-/-) pro/pre-B &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51CF;&#x5C11;&#x9ECF;&#x9644;&#x5230;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;Rap1b(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x663E;&#x793A;&#x51CF;&#x5C11;&#x813E;&#x8FB9;&#x7F18;&#x533A; (MZ) B &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0;&#x65B0;&#x5F62;&#x6210; B &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x800C;&#x6EE4;&#x6CE1; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x3002;&#x5C31;&#x529F;&#x80FD;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;Rap1b(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5448;&#x51CF;&#x5C11;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; T &#x7684;&#x4F46;&#x6B63;&#x5E38; T &#x72EC;&#x7ACB;&#x4F53;&#x6DB2;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;Rap1b(-/-) &#x5C0F;&#x9F20; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x660E;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5BF9; SDF-1&#x3001; CXCL13 &#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x5BFB;&#x5230;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x3002;MZ B &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x51CF;&#x5C11;&#x9798;&#x6C28;&#x9187; 1-&#x78F7;&#x9178;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x7C98;&#x9644;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709; Rap1b &#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x813E; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3001; Erk1/2&#x3001; p38 MAPKs &#x548C; AKT &#x7684; BCR &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x5316;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;Rap1b &#x662F;&#x65E9;&#x671F;&#x7684; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3001; MZ B &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A33;&#x6001;&#x548C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; T &#x7684;&#x4F53;&#x6DB2;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

Rap1b &#x8C03;&#x8282; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3001; &#x5F52;&#x5DE2;&#x53CA; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4F53;&#x6DB2;&#x514D;&#x75AB;&#x3002;

Rap1 is a small GTPase that belongs to Ras superfamily. This ubiquitously expressed GTPase is a key regulator of integrin functions. Rap1 exists in two isoforms: Rap1a and Rap1b. Although Rap1 has been extensively studied, its isoform-specific functions in B cells have not been elucidated. In this study, using gene knockout mice, we show that Rap1b is the dominant isoform in B cells. Lack of Rap1b significantly reduced the absolute number of B220(+)IgM(-) pro/pre-B cells and B220(+)IgM(+) immature B cells in bone marrow. In vitro culture of bone marrow-derived Rap1b(-/-) pro/pre-B cells with IL-7 showed similar proliferation levels but reduced adhesion to stromal cell line compared with wild type. Rap1b(-/-) mice displayed reduced splenic marginal zone (MZ) B cells, and increased newly forming B cells, whereas the number of follicular B cells was normal. Functionally, Rap1b(-/-) mice showed reduced T-dependent but normal T-independent humoral responses. B cells from Rap1b(-/-) mice showed reduced migration to SDF-1, CXCL13 and in vivo homing to lymph nodes. MZ B cells showed reduced sphingosine-1-phosphate-induced migration and adhesion to ICAM-1. However, absence of Rap1b did not affect splenic B cell proliferation, BCR-mediated activation of Erk1/2, p38 MAPKs, and AKT. Thus, Rap1b is crucial for early B cell development, MZ B cell homeostasis and T-dependent humoral immunity.

Rap1b regulates B cell development, homing, and T cell-dependent humoral immunity.

Rap1 est une petite GTPase qui appartient &#xE0; la superfamille Ras. Cette GTPase exprim&#xE9;e de mani&#xE8;re ubiquitaire est un r&#xE9;gulateur cl&#xE9; de fonctions des int&#xE9;grines. Rap1 existe sous deux isoformes: Rap1a et Rap1b. Bien que Rap1 a &#xE9;t&#xE9; largement &#xE9;tudi&#xE9;e, ses isoforme fonctions sp&#xE9;cifiques dans les cellules B n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; &#xE9;lucid&#xE9;s. Dans cette &#xE9;tude, en utilisant des souris knock-out de g&#xE8;nes, nous montrons que Rap1b est l&#x26;#39;isoforme dominante dans les cellules B. Manque de Rap1b consid&#xE9;rablement r&#xE9;duit le nombre absolu de B220 (+) IgM (-) des cellules pro / pr&#xE9;-B et B220 (+) IgM (+) des cellules B immatures dans la moelle osseuse. Dans la culture in vitro de la moelle osseuse provenant Rap1b (- / -) PRO / cellules pr&#xE9;-B avec de l&#x26;#39;IL-7 ont montr&#xE9; des niveaux similaires de prolif&#xE9;ration, mais d&#x26;#39;adh&#xE9;rence r&#xE9;duite &#xE0; la ligne de cellules stromales rapport avec le type sauvage. Rap1b (- / -) chez la souris affich&#xE9; r&#xE9;duite spl&#xE9;niques de la zone marginale (MZ) des cellules B, et une augmentation des cellules B nouvellement formant, tandis que le nombre de cellules B folliculaires &#xE9;tait normal. Fonctionnellement, Rap1b (- / -) des souris a montr&#xE9; une r&#xE9;duction T-d&#xE9;pendants, mais normale T-ind&#xE9;pendants r&#xE9;ponses humorales. Cellules B de Rap1b (- / -) des souris a montr&#xE9; la migration r&#xE9;duite &#xE0; SDF-1, CXCL13 et in vivo de ralliement aux ganglions lymphatiques. MZ cellules B ont r&#xE9;duit la sphingosine-1-phosphate induite par la migration et l&#x26;#39;adh&#xE9;sion &#xE0; ICAM-1. Toutefois, l&#x26;#39;absence de Rap1b n&#x26;#39;affectait pas la prolif&#xE9;ration des cellules spl&#xE9;niques B, BCR-m&#xE9;diation activation de ERK1 / 2, p38 MAPK et AKT. Ainsi, Rap1b est crucial pour le d&#xE9;veloppement cellulaire B pr&#xE9;coce, l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie des lymphocytes B et MZ T-d&#xE9;pendante l&#x26;#39;immunit&#xE9; humorale.

Rap1b r&#xE9;gule le d&#xE9;veloppement des cellules B, Homing, et d&#xE9;pendant des lymphocytes T immunit&#xE9; humorale

Rap1 ist eine kleine GTPase, die Ras-&Uuml;berfamilie geh&ouml;rt. Diese ubiquit&auml;r exprimierten GTPase ist ein wichtiger Regulator der Integrin-Funktionen. Rap1 existiert in zwei Isoformen: Rap1a und Rap1b. Obwohl Rap1 ausgiebig studiert hat, haben seine Isoform-spezifischen Funktionen in B-Zellen nicht gekl&auml;rt. In dieser Studie zufolge mit Gen-Knockout-M&auml;use, wir Rap1b die dominante Isoform in B-Zellen ist. Mangelnde Rap1b reduziert deutlich die absolute Anzahl der B220(+)IgM(-) Pro/Pre-B Zellen und B220(+)IgM(+) unreifen B-Zellen im Knochenmark. In-vitro-Kultur von Knochenmark gewonnenen Rap1b(-/-) Pro/Pre-B Zellen mit IL-7 Verbreitung vergleichbarer zeigte aber reduziert Haftung stromal Zelllinie im Vergleich zu Wildtyp. Rap1b(-/-) M&auml;use angezeigt (MZ)-Splenisches Marginalzonen B-Zellen reduziert und erh&ouml;ht neu B-Zellen bilden, w&auml;hrend die Anzahl der follikul&auml;ren B-Zellen normal war. Funktionell, Rap1b(-/-) M&auml;use zeigte reduzierte T-abh&auml;ngigen aber normale T-unabh&auml;ngige humorale Antworten. B-Zellen von Rap1b(-/-) M&auml;usen zeigte reduzierte Migration SDF-1, CXCL13 und in-vivo Referenzfahrt Lymphknoten. MZ B Zellen zeigte reduzierte Sphingosin-1-Phosphat-induzierte Migration und Haftung zu ICAM-1. Fehlen von Rap1b hatte jedoch keine Auswirkungen auf Milz B Zellproliferation, BCR-vermittelte Aktivierung der Erk1/2, p38 MAPKs und AKT. So ist Rap1b f&uuml;r fr&uuml;he B-Zell-Entwicklung, MZ B-Zelle-Hom&ouml;ostase und T-abh&auml;ngige humorale Immunit&auml;t von entscheidender Bedeutung.

Rap1b regelt B-Zell-Entwicklung, Referenzfahrt und T-Zell-abh&auml;ngige humorale Immunit&auml;t.

Rap1 &egrave; un piccolo GTPase che appartiene alla Superfamiglia Ras. Questo GTPase ubiquitously espresso &egrave; un regolatore chiave dell&#39;integrina funzioni. Rap1 esiste in due isoforme: Rap1a e Rap1b. Sebbene Rap1 &egrave; stata ampiamente studiata, sue funzioni specifiche dell&#39;isoforma in cellule B non sono state chiarite. In questo studio, utilizzando topi knockout gene, mostriamo che Rap1b &egrave; l&#39;isoforma dominante nelle cellule B. Mancanza di Rap1b ha ridotto significativamente il numero assoluto di cellule pro/pre-B B220(+)IgM(-) e B220(+)IgM(+) cellule B immature nel midollo osseo. Coltura in vitro delle derivate da midollo osseo Rap1b(-/-) pre/pro-B cellule con IL-7 ha mostrato simili livelli di proliferazione ma ridotta aderenza alla linea delle cellule stromali rispetto al wild type. Rap1b(-/-) topi visualizzati ridotta delle cellule di B di zona marginale splenica (MZ) e aumentato appena formando le cellule B, considerando che il numero delle cellule B follicolare era normale. Funzionalmente, Rap1b(-/-) topi ha mostrati ridotte T-dipendente ma normale T-indipendente umorale risposte. Le cellule B da Rap1b(-/-) topi ha mostrato ridotta migrazione a SDF-1, CXCL13 e homing in vivo ai linfonodi. MZ B cellule ha mostrato ridotta migrazione sfingosina 1-fosfato-indotta e adesione ICAM-1. Tuttavia, l&#39;assenza di Rap1b non ha influito proliferazione delle cellule di B spleniche, BCR-mediato sull&#39;attivazione di Erk1/2, p38 MAPKs e AKT. Cos&igrave;, Rap1b &egrave; cruciale per lo sviluppo precoce delle cellule B, l&#39;omeostasi cellulare MZ B e immunit&agrave; umorale T-dipendente.

Rap1b regola lo sviluppo delle cellule B, homing e immunit&agrave; umorale delle cellule T-dipendente.

Rap1&#x306E;&#x306F;Ras&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x5C5E;&#x3059;&#x308B;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTPase&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;GTP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; Rap1a&#x3068;Rap1b&#xFF1A;Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Rap1&#x306E;&#x306F;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x89E3;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Rap1b&#x306F;&#x3001;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;/&#x30D7;&#x30EC;B&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;B220&#xFF08;+&#xFF09;IgM&#x6297;&#x4F53;&#xFF08;+&#xFF09;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x4E2D;&#x306E;&#x672A;&#x719F;&#x306A;B&#x7D30;&#x80DE;Rap1b&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306F;&#x8457;&#x3057;&#x304F;B220&#x306E;&#x7D76;&#x5BFE;&#x6570;&#x3092;&#xFF08;+&#xFF09;IgM&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7531;&#x6765;Rap1b&#x306E;in vitro&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x30D7;&#x30ED;/&#x30D7;&#x30EC;B IL-7&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Rap1b&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x813E;&#x81D3;&#x8FBA;&#x7E01;&#x5E2F;&#xFF08;MZ&#xFF09;B&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6FFE;&#x80DE;&#x6027;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;B&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;Rap1b&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;T&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;T-&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x4F53;&#x6DB2;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;Rap1b&#x304B;&#x3089;B&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;SDF-1&#x3001;CXCL13&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x3078;&#x306E;&#x30DB;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;in vivo&#x3067;&#x3002; MZ B&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;ICAM-1&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30B7;&#x30F3;-1  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x904A;&#x8D70;&#x53CA;&#x3073;&#x63A5;&#x7740;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Rap1b&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306F;&#x3001;&#x813E;&#x81D3;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;ERK1 / 2&#x306E;BCR&#x5A92;&#x4ECB;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;p38 MAPK&#x306F;&#x3001;&#x3068;AKT&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;Rap1b&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3001;MZ B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3068;T-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x4F53;&#x6DB2;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

Rap1b&#x306F;&#x3001;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x30DB;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;T&#x7D30;&#x80DE;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x6DB2;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

Rap1 Ras superfamily&#xC5D0; &#xC18D;&#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC740; GTPase &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD3B8; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; GTPase integrin &#xAE30;&#xB2A5; &#xD0A4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC774;&#xB2E4;. Rap1 &#xB450; isoforms&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC;: Rap1a &#xBC0F; Rap1b. Rap1 &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4; &#xBE44;&#xB85D; B &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; isoform &#xD2B9;&#xC815; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD574;&#xBA85; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; &#xAC83;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; rap1b&#xC740; B &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; isoform &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. Rap1b&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C; B220(+)IgM(-) pro/&#xC0AC;&#xC804;-B &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xACE8; &#xC218;&#xC5D0; B220(+)IgM(+) &#xBBF8; &#xC219; B &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC808;&#xB300; &#xC218;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-7 &#xACE8; &#xC218; &#xC720;&#xB798; Rap1b(-/-) pro/&#xC0AC;&#xC804;-B &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xBB38;&#xD654; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; stromal &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;. Rap1b(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBE44;&#xC7A5; &#xD55C;&#xACC4; &#xC601;&#xC5ED; (MZ) B &#xC138;&#xD3EC; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0; &#xBC18;&#xBA74; follicular B &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xAC00; &#xC815;&#xC0C1; B &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0C8;&#xB85C; &#xD615;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00;. &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, Rap1b(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC18C; T &#xC885;&#xC18D; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; T &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; humoral &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. Rap1b(-/-) &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; B &#xC138;&#xD3EC; &#xAC10;&#xC18C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC790;&#xC704;&#xB300; 1, CXCL13 &#xBC0F; &#xB9BC;&#xD504;&#xC808;&#xC744; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. MZ B &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; &#xAC10;&#xC18C; sphingosine 1 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xC720;&#xBC1C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xC811;&#xCC29; ICAM-1. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, rap1b&#xC758; &#xBE44;&#xC7A5; B &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;, BCR &#xC911;&#xC7AC; Erk1/2, p38 MAPKs, AKT&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, rap1b&#xC740; &#xCD08;&#xAE30; B &#xC140; &#xAC1C;&#xBC1C;, MZ B &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xBC0F; T &#xC885;&#xC18D; &#xCCB4;&#xC561; &#xC131; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rap1b B &#xC140; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xC720;&#xB3C4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; T&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC758;&#xC874; &#xCCB4;&#xC561; &#xC131; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC744; &#xC870;&#xC808;.

Rap1 es una GTPasa peque&#xF1;a que pertenece a la superfamilia Ras. Este GTPasa expres&#xF3; doquier es un regulador clave de las funciones de la integrina. Rap1 existe en dos isoformas: Rap1a y Rap1b. Aunque Rap1 ha sido ampliamente estudiado, su isoforma funciones espec&#xED;ficas en las c&#xE9;lulas B no han sido aclaradas. En este estudio, el uso de ratones knockout de genes, nos muestran que Rap1b es la isoforma predominante en las c&#xE9;lulas B. La falta de Rap1b redujo significativamente el n&#xFA;mero absoluto de B220 (+) IgM (-), las c&#xE9;lulas pro / pre-B y B220 (+) IgM (+) las c&#xE9;lulas B inmaduras en la m&#xE9;dula &#xF3;sea. Cultivo in vitro de la m&#xE9;dula &#xF3;sea derivados de Rap1b (- / -) PRO / pre B-c&#xE9;lulas con IL-7 mostraron niveles similares de proliferaci&#xF3;n, pero reducido de adhesi&#xF3;n a la l&#xED;nea de c&#xE9;lulas del estroma en comparaci&#xF3;n con el tipo salvaje. Rap1b (- / -) ratones muestran reducido espl&#xE9;nicos zona marginal (MZ) c&#xE9;lulas B, y aumentado recientemente que forman las c&#xE9;lulas B, mientras que el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas B folicular normal. Funcionalmente, Rap1b (- / -) ratones mostraron reducci&#xF3;n de T-dependientes, pero normal T-independientes las respuestas humorales. Las c&#xE9;lulas B de Rap1b (- / -) ratones mostraron reducci&#xF3;n de la migraci&#xF3;n a SDF-1, CXCL13 e in vivo homing a los ganglios linf&#xE1;ticos. MZ c&#xE9;lulas B mostr&#xF3; reduce la esfingosina-1-fosfato-inducida por la migraci&#xF3;n y la adhesi&#xF3;n a la ICAM-1. Sin embargo, la ausencia de Rap1b no afect&#xF3; a la proliferaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas B del bazo, BCR-mediada por la activaci&#xF3;n de ERK1 / 2, p38 MAPK y AKT. As&#xED;, Rap1b es crucial para el desarrollo temprano de las c&#xE9;lulas B, MZ la homeostasis de c&#xE9;lulas B y T-dependiente inmunidad humoral.

Rap1b regula el desarrollo de c&#xE9;lulas B, de objetivos, y de c&#xE9;lulas T dependen de la inmunidad humoral

&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7684;&#x9ECF;&#x9644;&#x5230;&#x8840;&#x7BA1;&#x80F6;&#x539F;&#x901A;&#x8FC7;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53;&#x3001; &#x7CD6;&#x86CB;&#x767D; VI (GPVI) &#x4F1A;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x8FD9;&#x5C06;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6709;&#x529B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8D70;&#x5411;&#x78F7;&#x8102;&#x9176; Cgamma2&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x76F8;&#x4F3C;&#x8BF1;&#x53D1; T &#x548C; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; 3-&#x6FC0;&#x9176; (&#x808C;&#x9187;) &#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x80F6;&#x539F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6D3B;&#x5316;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8C03;&#x8282;&#x5206;&#x6CCC; ADP &#x7684;&#x81EA;&#x5206;&#x6CCC;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x808C;&#x9187;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x76F4;&#x63A5;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684; GPVI &#x5728;&#x4EBA;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x548C;&#x51B3;&#x5FC3;&#x5728; GPVI &#x4F9D;&#x8D56;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x9488;&#x5BF9;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; PI3Kalpha &#x6216; beta &#x7248;&#xFF0C;&#x5F3A;&#x70C8;&#x548C;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x6291;&#x5236; GPVI &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7ECF;&#x52A8;&#x5458;&#x548C; 1,4,5 &#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x808C;&#x9187;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x8868;&#x660E;&#x78F7;&#x8102; Cgamma2 PI3Kalpha/beta &#x7248;&#x7684;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;PI3Kalpha &#x548C; beta &#x7248;&#x4E2D; GPVI &#x8BF1;&#x5BFC;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6D3B;&#x5316;&#x548C;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x5177;&#x6709;&#x975E;&#x5197;&#x4F59;&#x529F;&#x80FD;&#x4ECE;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; (i) &#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; Akt&#x3001; (ii) &#x81F4;&#x5BC6;&#x9897;&#x7C92;&#x5206;&#x6CCC;&#x3001; (&#x4E09;) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x8868;&#x9762;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x4E0B;&#x6D41;&#x52A8;&#x53CA; (iv) &#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x51E1; PI3Kalpha/beta &#x53D7;&#x963B;&#x6216; p85alpha &#x662F;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;GPVI &#x8BF1;&#x5BFC;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6D3B;&#x5316;&#x662F;&#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x6216; PI3Kdelta &#x6216;&#x4F3D;&#x739B;&#x7684;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;PI3Kalpha/beta &#x7248;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; PI3Kgamma&#xFF0C;&#x8D21;&#x732E;&#x8BF1;&#x5BFC; GPVI Rap1b &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x5BF9;&#x901A;&#x8FC7; GPVI Rap1b &#x72EC;&#x7ACB;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6D3B;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;PI3Kalpha &#x548C;-&beta; &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5B8C;&#x5168;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; GPVI &#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7ECF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x662F;&#x4E0E; Rap1b &#x65E0;&#x5173;&#x3002;&#x8FD9;&#x63D0;&#x4F9B;&#x808C;&#x9187;&#x6291;&#x5236;&#x65B0;&#x673A;&#x68B0;&#x89E3;&#x91CA;&#x6297;&#x6813;&#x6548;&#x679C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F7F; PI3Kalpha &#x6709;&#x8DA3;&#x6297;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x65B0;&#x9776;&#x70B9;&#x3002;

&#x975E;&#x5197;&#x4F59;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; 3-&#x6FC0;&#x9176;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x548C;&#x8D1D;&#x5854;&#x7CD6;&#x516D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

Platelets are activated by adhesion to vascular collagen via the immunoglobulin receptor, glycoprotein VI (GPVI). This causes potent signaling toward activation of phospholipase Cgamma2, which bears similarity to the signaling pathway evoked by T- and B-cell receptors. Phosphoinositide 3-kinase (PI3K) plays an important role in collagen-induced platelet activation, because this activity modulates the autocrine effects of secreted ADP. Here, we identified the PI3K isoforms directly downstream of GPVI in human and mouse platelets and determined their role in GPVI-dependent thrombus formation. The targeting of platelet PI3Kalpha or -beta strongly and selectively suppressed GPVI-induced Ca(2+) mobilization and inositol 1,4,5-triphosphate production, thus demonstrating enhancement of phospholipase Cgamma2 by PI3Kalpha/beta. That PI3Kalpha and -beta have a non-redundant function in GPVI-induced platelet activation and thrombus formation was concluded from measurements of: (i) serine phosphorylation of Akt, (ii) dense granule secretion, (iii) intracellular Ca(2+) increases and surface expression of phosphatidylserine under flow, and (iv) thrombus formation, under conditions where PI3Kalpha/beta was blocked or p85alpha was deficient. In contrast, GPVI-induced platelet activation was insensitive to inhibition or deficiency of PI3Kdelta or -gamma. Furthermore, PI3Kalpha/beta, but not PI3Kgamma, contributed to GPVI-induced Rap1b activation and, surprisingly, also to Rap1b-independent platelet activation via GPVI. Together, these findings demonstrate that both PI3Kalpha and -beta isoforms are required for full GPVI-dependent platelet Ca(2+) signaling and thrombus formation, partly independently of Rap1b. This provides a new mechanistic explanation for the anti-thrombotic effect of PI3K inhibition and makes PI3Kalpha an interesting new target for anti-platelet therapy.

Non-redundant roles of phosphoinositide 3-kinase isoforms alpha and beta in glycoprotein VI-induced platelet signaling and thrombus formation.

Les plaquettes sont activ&#xE9;es par adh&#xE9;rence &#xE0; vasculaire du collag&#xE8;ne par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du r&#xE9;cepteur de la glycoprot&#xE9;ine d&#x26;#39;immunoglobuline VI, (GPVI). Cela provoque de signalisation puissant vers activation de la phospholipase Cgamma2, qui porte similitude avec la voie de signalisation &#xE9;voqu&#xE9;e par T-et B-r&#xE9;cepteurs des cellules. Phosphoinositide 3-kinase (PI3K) joue un r&#xF4;le important dans induite par le collag&#xE8;ne activation plaquettaire, parce que cette activit&#xE9; module les effets autocrines de s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e ADP. Ici, nous avons identifi&#xE9; les isoformes de PI3K directement en aval de la GPVI dans les plaquettes humaines et de la souris et d&#xE9;termin&#xE9; leur r&#xF4;le dans la GPVI-d&#xE9;pendante de la formation de thrombus. Le ciblage des plaquettes ou PI3Kalpha-b&#xEA;ta fortement et s&#xE9;lectivement supprim&#xE9;e GPVI induite par Ca (2 +) la mobilisation et l&#x26;#39;inositol 1,4,5-triphosphate de production, d&#xE9;montrant ainsi l&#x26;#39;am&#xE9;lioration de la phospholipase Cgamma2 par PI3Kalpha/beta. Et que PI3Kalpha-b&#xEA;ta ont une fonction non-redondant de GPVI induite activation plaquettaire et la formation de thrombus a &#xE9;t&#xE9; conclu &#xE0; partir des mesures consistant &#xE0;: (i) la s&#xE9;rine phosphorylation de Akt, (ii) la s&#xE9;cr&#xE9;tion granule dense, (iii) intracellulaire de Ca (2 +) augmente et l&#x26;#39;expression de surface de la phosphatidyls&#xE9;rine sous flux, et (iv) la formation de thrombus, dans des conditions o&#xF9; PI3Kalpha/beta &#xE9;t&#xE9; bloqu&#xE9;s ou p85alpha &#xE9;tait d&#xE9;ficiente. En revanche, GPVI induite par l&#x26;#39;activation plaquettaire &#xE9;tait insensible &#xE0; l&#x26;#39;inhibition ou l&#x26;#39;insuffisance de PI3Kdelta ou gamma. En outre, PI3Kalpha/beta, mais pas PI3Kgamma, a contribu&#xE9; &#xE0; GPVI l&#x26;#39;activation induite par Rap1b et, &#xE9;tonnamment, aussi Rap1b ind&#xE9;pendant activation plaquettaire par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire GPVI. Ensemble, ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que les deux PI3Kalpha et-b&#xEA;ta isoformes sont n&#xE9;cessaires pour pleinement GPVI-d&#xE9;pendante des plaquettes Ca (2 +) de signalisation et de la formation de thrombus, en partie ind&#xE9;pendamment de Rap1b. Cela fournit une nouvelle explication m&#xE9;canistique de l&#x26;#39;effet anti-thrombotique de l&#x26;#39;inhibition de la PI3K et de fait une cible int&#xE9;ressante PI3Kalpha nouvelle th&#xE9;rapie anti-plaquettaire.

Non redondants R&#xF4;les de la phosphoinositide 3-kinase Alpha et Beta isoformes de la glycoprot&#xE9;ine VI-induite de signalisation plaquettaire et la formation du thrombus

Thrombozyten werden durch Adh&auml;sion auf vaskul&auml;re Kollagen &uuml;ber die Immunglobulin-Rezeptor Glykoprotein VI (GPVI) aktiviert. Dies bewirkt, dass potente Signalisierung zur Aktivierung der Phospholipase Cgamma2, die &Auml;hnlichkeit mit den Signalweg, hervorgerufen durch T - und B-Zell-Rezeptoren aufweist. Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K) spielt eine wichtige Rolle in der Kollagen-induzierten Thrombozyten Aktivierung, weil diese T&auml;tigkeit die Autocrine Auswirkungen der sezernierte ADP moduliert. Hier wir identifiziert die PI3K-Isoformen direkt nachgeschaltete GPVI in Mensch und Maus Thrombozyten und zielstrebig ihre Rolle in der GPVI-abh&auml;ngige Thrombus-Bildung. Die Ausrichtung der Thrombozyten, PI3Kalpha oder -Beta, stark und selektiv unterdr&uuml;ckt GPVI-induzierte Ca(2+) Mobilisierung und Inosit 1,4,5-Triphosphat Produktion, somit Verbesserung der Phospholipase Cgamma2 von PI3Kalpha/Beta zu demonstrieren. Haben PI3Kalpha und -Beta eine nicht-redundante Funktion GPVI-induzierten Thrombozyten-Aktivierung und Thrombus-Bildung aus Messungen der geschlossen wurde: (i) Serin Phosphorylierung von Akt, (Ii) dichten Untermodul Sekretion, (Iii) die intrazellul&auml;re Ca(2+) erh&ouml;ht und Oberfl&auml;che Ausdruck der Phosphatidylserin unter Str&ouml;mung und (iv) Thrombus-Bildung, unter Bedingungen, wo PI3Kalpha/Beta wurde blockiert oder p85alpha war mangelhaft. Im Gegensatz dazu war GPVI-induzierte Thrombozyten Aktivierung unempfindlich gegen Hemmung oder Mangel an PI3Kdelta oder -Gamma. Dar&uuml;ber hinaus haben PI3Kalpha/Beta, aber nicht PI3Kgamma, beigetragen Rap1b GPVI-induzierte Aktivierung und, &uuml;berraschenderweise, auch f&uuml;r Rap1b-unabh&auml;ngige Thrombozyten Aktivierung &uuml;ber GPVI. Zusammen, diese Ergebnisse zeigen, dass sowohl PI3Kalpha und -Beta-Isoformen sind erforderlich f&uuml;r volle GPVI-abh&auml;ngige Thrombozyten Ca(2+) Signalisierung und Thrombus Bildung, teilweise unabh&auml;ngig von Rap1b. Dadurch bietet eine neue mechanistische Erkl&auml;rung f&uuml;r den antithrombotischen Effekt der PI3K Hemmung und PI3Kalpha ein interessantes neues Ziel anti-platelet Therapie.

Nicht redundante Rollen Phosphoinositid-3-Kinase-Isoformen Alpha und Beta in Glykoprotein VI-induzierten Thrombozyten-Signalisierung und Thrombus-Bildung.

Le piastrine sono attivate dall&#39;adesione al collagene vascolare attraverso il recettore immunoglobulina, glicoproteina VI (GPVI). Questo provoca una segnalazione potente verso la attivazione della fosfolipasi Cgamma2, che ha una somiglianza con la via di segnalazione evocata dai recettori delle cellule T e B. Fosfoinositide 3-chinasi (PI3K) svolge un ruolo importante nell&#39;attivazione piastrinica indotta dal collagene, perch&eacute; questa attivit&agrave; modula gli effetti autocrino di ADP secreta. Qui, abbiamo identificato le isoforme di PI3K direttamente a valle della GPVI in umani e piastrine mouse e determinato loro ruolo nella formazione di trombi GPVI-dipendente. Il targeting di piastrine beta o - PI3Kalpha fortemente e selettivamente soppresso GPVI-induced Ca(2+) mobilizzazione e produzione di inositolo 1.4.5-trifosfato, dimostrando cos&igrave; la valorizzazione della fosfolipasi Cgamma2 da PI3Kalpha/beta. PI3Kalpha e - beta hanno una funzione non ridondante nella formazione di attivazione e trombo aggregazione piastrinica indotta GPVI &egrave; stato concluso da misurazioni di: fosforilazione della serina (i) di Akt, la secrezione di granuli densi (ii), (iii) intracellulare aumenta Ca(2+) ed espressione superficiale della fosfatidilserina sotto flusso e la formazione di trombi (iv), in condizioni dove PI3Kalpha/beta &egrave; stato bloccato o p85alpha era carente. Al contrario, attivazione piastrinica indotta da GPVI era insensibile alla inibizione o deficit di PI3Kdelta o - gamma. Inoltre, PI3Kalpha/beta, ma non PI3Kgamma, hanno contribuito ad attivazione indotta da GPVI Rap1b e, sorprendentemente, anche per attivazione piastrinica Rap1b-indipendente via GPVI. Insieme, questi risultati dimostrano che sia PI3Kalpha e - beta isoforme sono necessari per la piena GPVI-dipendente delle piastrine Ca(2+) segnalazione trombo formazione e, in parte indipendentemente da Rap1b. Questo fornisce una nuova spiegazione meccanicistica per l&#39;effetto antitrombotiche dell&#39;inibizione di PI3K e rende PI3Kalpha un interessante nuovo bersaglio per la terapia anti-piastrine.

Ruoli non ridondanti della fosfoinositide 3-chinasi isoforme alfa e beta nella glicoproteina piastrinica indotta VI segnalazione e trombo la formazione.

&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3001;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;VI&#xFF08;GPVI&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;T&#x304A;&#x3088;&#x3073;B&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x3092;&#x62C5;&#x3046;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;Cgamma2&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x3066;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x304C;&#x5206;&#x6CCC;ADP&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;3  - &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PI3K&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;GPVI&#x306E;PI3K&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;GPVI&#x4F9D;&#x5B58;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F37;&#x304F;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;PI3Kalpha&#x307E;&#x305F;&#x306F;-&#x3B2;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;GPVI&#x8A98;&#x767A;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x52D5;&#x54E1;&#x3068;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;1,4,5  - &#x4E09;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;PI3Kalpha/beta&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;Cgamma2&#x306E;&#x5411;&#x4E0A;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08;II&#xFF09;&#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x9846;&#x7C92;&#x5206;&#x6CCC;&#x3057;&#x3001;&#xFF08;iii&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3001;Akt&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;I&#xFF09;&#xFF1A;PI3Kalpha&#x3068;-&#x3B2;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5024;&#x304B;&#x3089;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3055;&#x308C;&#x305F;GPVI&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x975E;&#x5197;&#x9577;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;PI3Kalpha/beta&#x304C;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x307E;&#x305F;&#x306F;p85alpha&#x304C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x767A;&#x73FE;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x306E;&#x4E0B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#xFF08;iv&#xFF09;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;GPVI&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;PI3Kdelta&#x307E;&#x305F;&#x306F;-&#x3B3;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;PI3Kalpha/beta&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;PI3Kgamma&#x307E;&#x305F;&#x3001;GPVI&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;Rap1b&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;GPVI&#x8A98;&#x8D77;Rap1b&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;PI3Kalpha&#x3068;-&#x3B2;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x304C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;Rap1b&#x306E;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;GPVI-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;PI3K&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;PI3Kalpha&#x6297;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x76EE;&#x6A19;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7CD6;VI-&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;3  - &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3068;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x975E;&#x5197;&#x9577;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

&#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xC811;&#xCC29; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; VI (GPVI)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD608;&#xAD00; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xBA74; phospholipase Cgamma2, &#xACF0; T &#xBC0F; B &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC16;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xB97C; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;. Phosphoinositide 3-&#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (PI3K)&#xC774;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBCC0;&#xC870; &#xBE44; ADP autocrine &#xD6A8;&#xACFC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;-&#xC720;&#xB3C4; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC9C1;&#xC811; &#xC778;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; GPVI &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBC0F; &#xACB0;&#xC815; PI3K isoforms &#xC2DD;&#xBCC4; GPVI &#xC885;&#xC18D; &#xD608;&#xC804; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;. &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; PI3Kalpha &#xB610;&#xB294;-&#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; GPVI&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; Ca(2+) &#xB3D9;&#xC6D0;&#xACFC; &#xC774;&#xB178; &#xC2DC; &#xD1A8; 1,4,5-&#xC0BC;&#xC778;&#xC0B0; &#xC0DD;&#xC0B0;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; phospholipase Cgamma2 PI3Kalpha/&#xBCA0;&#xD0C0;&#xB85C;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4;&#xACB0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; PI3Kalpha &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;-&#xBCA0;&#xD0C0; GPVI &#xC720;&#xB3C4; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xD608;&#xC804; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC911;&#xBCF5; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;: (i) &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; phosphatidylserine &#xD750;&#xB984;&#xACFC; PI3Kalpha/&#xBCA0;&#xD0C0; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB610;&#xB294; p85alpha&#xB294; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; (4) &#xD608;&#xC804; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xC2DD;, (iii) &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xC99D;&#xAC00;, (ii) &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xB9BD; &#xBD84; &#xBE44;, Akt &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, GPVI &#xC720;&#xB3C4; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; PI3Kdelta &#xB610;&#xB294;-&#xAC10;&#xB9C8;&#xC758; &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10; &#xD588;&#xB2E4;. PI3Kalpha/&#xBCA0;&#xD0C0;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; PI3Kgamma, GPVI&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; Rap1b &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xB610;&#xD55C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, GPVI &#xD1B5;&#xD574; Rap1b &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C;&#xB3C4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBAA8;&#xB450; PI3Kalpha &#xBC0F;-&#xBCA0;&#xD0C0; isoforms &#xC785;&#xC99D;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; GPVI &#xC885;&#xC18D; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xD608;&#xC804; &#xD615;&#xC131;, Rap1b &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xD560;. PI3K &#xC800;&#xD574;&#xC758; anti-thrombotic &#xD6A8;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAE30;&#xACC4; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xBA70; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; PI3Kalpha &#xBC29;&#xC9C0; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA9;&#xD45C;.

Phosphoinositide 3-&#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; isoforms &#xC54C;&#xD30C;&#xC640; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; VI &#xC720;&#xB3C4; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xD608;&#xC804; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC911;&#xBCF5; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC74C;.

Las plaquetas son activadas por la adhesi&#xF3;n al col&#xE1;geno vascular a trav&#xE9;s del receptor de inmunoglobulina VI glicoprote&#xED;na, (GPVI). Esto hace que la se&#xF1;alizaci&#xF3;n potente hacia la activaci&#xF3;n de la fosfolipasa Cgamma2, que tiene similitud con la v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n provocada por T y c&#xE9;lulas B-receptores. Phosphoinositide 3-kinasa (PI3K) juega un papel importante en el col&#xE1;geno inducida por la activaci&#xF3;n de plaquetas, ya que esta actividad moduladora de los efectos autocrinos de secretada ADP. En este caso, hemos identificado las isoformas de PI3K directamente aguas abajo de GPVI en las plaquetas humanas y de rat&#xF3;n y se determin&#xF3; su papel en la GPVI dependiente de la formaci&#xF3;n de trombos. La selecci&#xF3;n de las plaquetas PI3Kalpha o beta-fuerte y selectivamente suprimido GPVI inducida por Ca (2 +) la movilizaci&#xF3;n y el inositol 1,4,5-trifosfato de producci&#xF3;n, lo que demuestra la mejora de la fosfolipasa Cgamma2 por PI3Kalpha/beta. Eso PI3Kalpha y beta-tienen una funci&#xF3;n no-redundante en GPVI inducida por la activaci&#xF3;n de plaquetas y la formaci&#xF3;n de trombos se concluy&#xF3; a partir de mediciones de: (i) serina fosforilaci&#xF3;n de Akt, (ii) la secreci&#xF3;n de gr&#xE1;nulos densos, (iii) intracelular de Ca (2 +) aumenta y la expresi&#xF3;n superficial de fosfatidilserina bajo flujo, y (iv) la formaci&#xF3;n de trombos, bajo condiciones en donde se PI3Kalpha/beta bloqueados o p85alpha era deficiente. Por el contrario, GPVI inducida por la activaci&#xF3;n plaquetaria fue insensible a la inhibici&#xF3;n o la deficiencia de PI3Kdelta o gamma. Por otra parte, PI3Kalpha/beta, pero no PI3Kgamma, contribuy&#xF3; a GPVI inducida por la activaci&#xF3;n Rap1b y, sorprendentemente, tambi&#xE9;n a Rap1b independiente de activaci&#xF3;n de las plaquetas a trav&#xE9;s de GPVI. En conjunto, estos resultados demuestran que tanto PI3Kalpha y beta isoformas son necesarios para la plena GPVI dependiente de plaquetas Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n y la formaci&#xF3;n de trombos, en parte, con independencia de Rap1b. Esto proporciona una nueva explicaci&#xF3;n mecanicista para el efecto antitromb&#xF3;tico de la inhibici&#xF3;n de la PI3K y hace PI3Kalpha un objetivo interesante para la nueva terapia anti-plaqueta.

No redundantes funciones de Phosphoinositide 3-quinasa isoformas alfa y beta de la glicoprote&#xED;na VI se&#xF1;alizaci&#xF3;n inducida por plaquetas y formaci&#xF3;n de trombos

&#x7CA5;&#x6837;&#x786C;&#x5316;&#x6591;&#x5757;&#x5F62;&#x6210;&#x53CA;&#x8840;&#x7BA1;&#x4ECB;&#x5165;&#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x518D;&#x72ED;&#x7A84;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x5185;&#x819C;&#x75C5;&#x53D8;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x6821;&#x8463;&#x4F1A;&#xFF09; &#x90E8;&#x5206;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4E34;&#x5E8A;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x4E0E;&#x975E;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x76F8;&#x6BD4; beta3 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x8D4B;&#x4E88;&#x4ECE;&#x72ED;&#x7A84;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5C11;&#x662F;&#x5DF2;&#x77E5;&#x5173;&#x4E8E; beta3 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x5BF9; SMC &#x54CD;&#x5E94;&#x5728;&#x6B64;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x4E86;&#x89E3;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5; SMC &#x529F;&#x80FD;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E2D;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; beta3 &#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; SMC &#x54CD;&#x5E94;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6307;&#x51FA;&#x9700;&#x8981;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x80DE;&#x5916;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x6FC0;&#x9176; (ERK) &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x589E;&#x5F3A;&#x819C;&#x5F81;&#x8058;&#x548C;&#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; PKCbeta &#x6574;&#x5408;&#x7D20; beta3 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x4E5F;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E86; SMC &#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9700;&#x8981; alphaVbeta3&#x3001; PKCbeta&#x3001; &#x548C; ERK &#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6FC0;&#x9176;&#x534F;&#x4F1A;&#x53D7; alphaVbeta3 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x914D;&#x4F53;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x8C03;&#x5236;&#x5668; Rap1 &#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6709;&#x5DEE;&#x5F02;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5B58;&#x5728;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x8840;&#x7BA1;&#x635F;&#x4F24;&#x7684; SMC &#x7B54;&#x590D;&#x4E2D;&#x548C; SMC &#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x4F5C;&#x51FA;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x4ECB;&#x5BFC; beta3 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x3002;

&#x7531; beta3 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#x63A7;&#x5236;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8840;&#x7BA1;&#x635F;&#x4F24;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Atheroma formation and restenosis following percutaneous vascular intervention involve the growth and migration of vascular smooth muscle cells (SMCs) into neointimal lesions, in part due to changes in the extracellular matrix. While some clinical studies have suggested that, in comparison to non-diabetics, beta3 integrin inhibition in diabetic patients confers protection from restenosis, little is known regarding the role of beta3 integrin inhibition on SMC responses in this context. To understand the molecular mechanisms underlying integrin-mediated regulation of SMC function in diabetes, we examined SMC responses in diabetic mice deficient in integrin beta3 and observed that the integrin was required for enhanced proliferation, migration and extracellular regulated kinase (ERK) activation. Hyperglycemia-enhanced membrane recruitment and catalytic activity of PKCbeta in an integrin beta3-dependent manner. Hyperglycemia also promoted SMC filopodia formation and cell migration, both of which required alphaVbeta3, PKCbeta, and ERK activity. Furthermore, the integrin-kinase association was regulated by the alphaVbeta3 integrin ligand thrombospondin and the integrin modulator Rap1 under conditions of hyperglycemia. These results suggest that there are differences in SMC responses to vascular injury depending on the presence or absence of hyperglycemia and that SMC response under hyperglycemic conditions is largely mediated through beta3 integrin signaling.

Enhanced proliferation and migration of vascular smooth muscle cells in response to vascular injury under hyperglycemic conditions is controlled by beta3 integrin signaling.

La formation d&#x26;#39;ath&#xE9;rome et la rest&#xE9;nose apr&#xE8;s angioplastie vasculaire impliquent la croissance et la migration des cellules musculaires lisses vasculaires (CML) dans les l&#xE9;sions n&#xE9;o-intimale, en partie en raison de changements dans la matrice extracellulaire. Bien que certaines &#xE9;tudes cliniques ont sugg&#xE9;r&#xE9; que, en comparaison aux non-diab&#xE9;tiques, l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;int&#xE9;grine beta3 chez les patients diab&#xE9;tiques conf&#xE8;re une protection de la rest&#xE9;nose, est peu connu du r&#xF4;le de l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;int&#xE9;grine beta3 sur les r&#xE9;ponses SMC dans ce contexte. Pour comprendre les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires sous-jacents de l&#x26;#39;int&#xE9;grine-m&#xE9;diation r&#xE9;gulation de la fonction SMC dans le diab&#xE8;te, nous avons examin&#xE9; les r&#xE9;ponses SMC chez les souris diab&#xE9;tiques d&#xE9;ficientes en int&#xE9;grine beta3 et a observ&#xE9; que l&#x26;#39;int&#xE9;grine a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour la prolif&#xE9;ration accrue, la migration et extracellulaire kinase r&#xE9;gul&#xE9;e (ERK) d&#x26;#39;activation. L&#x26;#39;hyperglyc&#xE9;mie-renforc&#xE9;e de recrutement membranaire et activit&#xE9; catalytique de PKCbeta dans une int&#xE9;grine beta3-d&#xE9;pendante. L&#x26;#39;hyperglyc&#xE9;mie a &#xE9;galement favoris&#xE9; la formation de filopodes SMC et la migration cellulaire, qui ont exig&#xE9; alphaVbeta3, PKCbeta, et l&#x26;#39;activit&#xE9; ERK. En outre, l&#x26;#39;association de l&#x26;#39;int&#xE9;grine-kinase a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;glement&#xE9; par le ligand de l&#x26;#39;int&#xE9;grine alphaVbeta3 thrombospondine et l&#x26;#39;int&#xE9;grine modulateur Rap1 dans des conditions de l&#x26;#39;hyperglyc&#xE9;mie. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;il existe des diff&#xE9;rences dans les r&#xE9;ponses SMC &#xE0; une l&#xE9;sion vasculaire en fonction de la pr&#xE9;sence ou l&#x26;#39;absence de l&#x26;#39;hyperglyc&#xE9;mie et que la r&#xE9;ponse de SMC dans des conditions hyperglyc&#xE9;miques est en grande partie gr&#xE2;ce &#xE0; la m&#xE9;diation beta3 int&#xE9;grine signalisation.

Prolif&#xE9;ration et la migration accrue des cellules musculaires lisses en r&#xE9;ponse &#xE0; une l&#xE9;sion vasculaire dans des conditions hyperglyc&#xE9;miques est contr&#xF4;l&#xE9;e par Beta3 Integrin signalisation

Atherom Entstehung und Restenose nach perkutane vaskul&auml;re Intervention umfassen das Wachstum und die Migration von vaskul&auml;ren glatten Muskelzellen (SMCs) in Neointimal L&auml;sionen, teilweise aufgrund von &Auml;nderungen in der extrazellul&auml;ren Matrix. W&auml;hrend einige klinischen Studien ergeben haben, dass, im Vergleich zu nicht-Diabetikern, beta3-Integrin-Hemmung bei diabetischen Patienten Schutz vor Restenose verleiht, ist wenig &uuml;ber die Rolle der beta3-Integrin-Hemmung auf SMC Antworten in diesem Zusammenhang bekannt. Um die molekularen Mechanismen Integrin-vermittelte Verordnung der SMC-Funktion bei Diabetes zu verstehen, haben wir gepr&uuml;ft SMC Antworten bei diabetischen M&auml;usen einen Mangel an Integrin beta3 und merkt an, dass das Integrin f&uuml;r verst&auml;rkte Proliferation, Migration und extrazellul&auml;re regulierte Kinase (ERK) Aktivierung erforderlich. Hyperglyk&auml;mie erh&ouml;hter Membran Rekrutierung und katalytische Aktivit&auml;t des PKCbeta Integrin beta3-abh&auml;ngigen Weise. Hyperglyk&auml;mie gef&ouml;rdert auch SMC Filopodium Bildung und Zelle Migration, beide, alphaVbeta3, PKCbeta und ERK ben&ouml;tigt Aktivit&auml;t. Dar&uuml;ber hinaus wurde der Integrin-Kinase-Verein der alphaVbeta3 Integrin Ligand Thrombospondin und der Integrin-Modulator Rap1 unter Bedingungen der Hyperglyk&auml;mie geregelt. Diese Ergebnisse legen nahe, dass es Unterschiede in SMC Antworten auf vaskul&auml;re Sch&auml;digung abh&auml;ngig von der Anwesenheit oder Abwesenheit der Hyperglyk&auml;mie und SMC Antwort hyperglyk&auml;mischen Bedingungen weitgehend durch beta3 Integrin Signalisierung vermittelt wird.

Verst&auml;rkte Proliferation und Migration von vaskul&auml;ren glatten Muskelzellen als Reaktion auf vaskul&auml;re Sch&auml;digung unter hyperglyk&auml;mischen Bedingungen Auswahlteam beta3 Integrin signalisieren.

Formazione di ateroma e la ristenosi dopo intervento vascolare percutaneo coinvolgono la crescita e la migrazione delle cellule muscolari lisce vascolari (SMCs) nelle lesioni neointimale, in parte a causa di cambiamenti nella matrice extracellulare. Mentre alcuni studi clinici hanno suggerito che, rispetto ai non-diabetici, beta3 integrina inibizione nei pazienti diabetici conferisce protezione da restenosi, poco &egrave; noto riguardo al ruolo di beta3 integrina inibizione sulle risposte SMC in questo contesto. Per comprendere i meccanismi molecolari sottostanti regolamento integrina-mediata della funzione SMC nel diabete, abbiamo esaminato le risposte SMC in topi diabetici carenti di beta3 integrina e osservato che l&#39;integrina &egrave; stato richiesto per una maggiore proliferazione, migrazione e l&#39;attivazione di chinasi regolata extracellulare (ERK). Iperglicemia-enhanced membrana reclutamento e attivit&agrave; catalitica di PKCbeta in maniera dipendente dalla beta3 integrina. Iperglicemia promosso anche SMC filopodia delle cellule e formazione di migrazione, entrambi i quali necessaria alphaVbeta3, PKCbeta ed ERK attivit&agrave;. Inoltre, l&#39;associazione di integrina-chinasi &egrave; stato regolamentato dalla trombospondina alphaVbeta3 integrin ligando e il modulatore di integrina Rap1 in condizioni di iperglicemia. Questi risultati suggeriscono che ci sono differenze nelle risposte SMC a lesioni vascolari a seconda della presenza o assenza di iperglicemia e che risposta SMC condizioni iperglicemica &egrave; in gran parte mediato attraverso beta3 integrina segnalazione.

Una maggiore proliferazione e migrazione delle cellule muscolari lisce vascolari in risposta a lesioni vascolari in condizioni iperglicemica &egrave; controllata dalla beta3 integrina segnalazione.

&#x7D4C;&#x76AE;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5F8C;&#x306B;&#x30A2;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x518D;&#x72ED;&#x7A84;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E00;&#x90E8;&#x306E;&#x65B0;&#x751F;&#x5185;&#x819C;&#x75C5;&#x5909;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x79FB;&#x884C;&#xFF08;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3001;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Beta3&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x518D;&#x72ED;&#x7A84;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3053;&#x306E;&#x6587;&#x8108;&#x3067;&#x306F;SMC&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;beta3&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306E;SMC&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;Beta3&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;SMC&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x904A;&#x8D70;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;ERK&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;beta3&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x8840;&#x7CD6;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x819C;&#x306E;&#x63A1;&#x7528;&#x3068;PKCbeta&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x306F;&#x307E;&#x305F;alphaVbeta3&#x3001;PKCbeta&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;ERK&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;SMC&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x904A;&#x8D70;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;alphaVbeta3&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x30DC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B8;&#x30F3;&#x3084;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;Rap1&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;Beta3&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x3068;&#x305D;&#x306E;SMC&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x8840;&#x7BA1;&#x640D;&#x50B7;&#x306B;SMC&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x9055;&#x3044;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x640D;&#x50B7;&#x3078;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3067;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x6B96;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306F;&#x3001;Beta3&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Atheroma &#xD615;&#xC131;&#xACFC; restenosis &#xAD00;&#xC0C1;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xD608;&#xAD00; &#xAC1C;&#xC785;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD3EC;&#xD568; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; neointimal &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC73C;&#xB85C; &#xD608;&#xAD00; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; (SMCs)&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; &#xB54C;&#xBB38;. &#xC77C;&#xBD80; &#xC784;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xBE44; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; beta3 integrin &#xC800;&#xD574; restenosis&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xD638; &#xC81C;&#xACF5;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC57D;&#xAC04;&#xC774; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; SMC &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; beta3 integrin &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. Integrin &#xC911;&#xC7AC; &#xADDC;&#xC815; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xC5D0; SMC &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; SMC &#xC751;&#xB2F5; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xC950; integrin beta3 &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; integrin &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD655;&#xC0B0;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (ERK) &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD608;&#xB2F9; &#xAC15;&#xD654; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xBC0F; integrin beta3 &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; Pkcbeta&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xD65C;&#xB3D9;. &#xD608;&#xB2F9; &#xB610;&#xD55C; &#xC2B9;&#xC9C4; SMC filopodia &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;, alphaVbeta3, PKCbeta, &#xBC0F; ERK&#xB294; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9;. &#xB610;&#xD55C;, integrin &#xB2C8; &#xD611;&#xD68C; alphaVbeta3 integrin &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; thrombospondin &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30; Rap1 &#xD608;&#xB2F9;&#xC758; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; SMC &#xC751;&#xB2F5; &#xD608;&#xB2F9;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC720;&#xBB34;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD608;&#xAD00; &#xC0C1;&#xD574;&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xC774; SMC &#xC751;&#xB2F5; hyperglycemic &#xC870;&#xAC74; beta3 integrin &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD558;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC14;&#xB78D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC751;&#xB2F5; hyperglycemic &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xAD00; &#xC190;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD608;&#xAD00; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; beta3 integrin &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Formaci&#xF3;n de ateromas y la reestenosis despu&#xE9;s de una intervenci&#xF3;n percut&#xE1;nea vascular implican el crecimiento y la migraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas musculares lisas vasculares (SMC) en las lesiones neointimal, en parte debido a los cambios en la matriz extracelular. Mientras que algunos estudios cl&#xED;nicos han sugerido que, en comparaci&#xF3;n con los no diab&#xE9;ticos, la inhibici&#xF3;n de la integrina beta3 en los pacientes diab&#xE9;ticos confiere protecci&#xF3;n frente a la reestenosis, se sabe poco sobre el papel de la inhibici&#xF3;n de la integrina beta3 en las respuestas de SMC en este contexto. Para comprender los mecanismos moleculares que subyacen a la integrina mediada por la regulaci&#xF3;n de la funci&#xF3;n del SMC en la diabetes, se examinaron las respuestas de SMC en ratones diab&#xE9;ticos con deficiencia de integrina beta3 y observ&#xF3; que la integrina se requiere para una mayor proliferaci&#xF3;n, la migraci&#xF3;n y la activaci&#xF3;n extracelular regulada quinasa (ERK). La hiperglucemia mejorada reclutamiento membrana y la actividad catal&#xED;tica de PKCbeta en una integrina beta3 forma dependiente. La hiperglucemia tambi&#xE9;n promueve la formaci&#xF3;n de filopodios SMC y la migraci&#xF3;n celular, tanto de las que se exige alphaVbeta3, PKCbeta, y la actividad de ERK. Adem&#xE1;s, la asociaci&#xF3;n de la integrina-quinasa regulada por el ligando de la integrina alphaVbeta3 trombospondina y la integrina Rap1 modulador en condiciones de hiperglucemia. Estos resultados sugieren que hay diferencias en las respuestas de SMC a una lesi&#xF3;n vascular dependiendo de la presencia o ausencia de la hiperglucemia y la respuesta de SMC que bajo condiciones de hiperglucemia est&#xE1; en gran parte mediadas a trav&#xE9;s de la integrina beta3 se&#xF1;alizaci&#xF3;n.

Una mayor proliferaci&#xF3;n y migraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas musculares lisas vasculares en respuesta a una lesi&#xF3;n vascular bajo condiciones de hiperglucemia es controlado por la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de integrina Beta 3

&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D; Rap1 &#x5DF2;&#x7ECF;&#x88AB;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x591A;&#x4E2A;&#x57FA;&#x672C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6240;&#x793A;&#x3002;&#x76F4;&#x5230;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;Rap1 &#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6700;&#x4F73;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x65B9;&#x9762;&#x6D89;&#x53CA;&#x5728;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA4;&#x754C;&#x5904;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0E;&#x91CD;&#x6784;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x8C03;&#x8282; Rap1 &#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BE5; Rap1 &#x8C03;&#x8282;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x7403;&#x5458;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x5174;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;Rap1 &#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5C40;&#x9650;&#x4E8E;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5C4F;&#x969C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x8FD8;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x5BF9;&#x8840;&#x7BA1;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C; Rap1 &#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x79EF;&#x6781;&#x8C03;&#x8282;&#x4F53;&#x5185;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x6982;&#x8FF0;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A; Rap1 &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F;&#x5173;&#x4E8E;&#x901A;&#x8FC7;&#x54EA;&#x4E9B; Rap1 &#x53EF;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x673A;&#x5236;&#x6295;&#x673A;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x7531;&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D; Rap1 &#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

Small GTPase Rap1 has been extensively studied in vitro and shown to regulate multiple basic cellular processes. Until recently, the best studied aspect of Rap1 function in endothelial cells involved its role in regulation of cell-cell junction formation and remodeling. These in vitro studies have increased understanding of the molecular players regulating Rap1 activity, including mechanisms through which Rap1 regulates endothelial permeability. Several recent reports provide emerging evidence that Rap1 function in endothelial cells is not limited to promoting barrier but that it also regulates basic endothelial responses to angiogenic stimulation and that Rap1 may act as a positive regulator of angiogenesis in vivo. This article provides an overview of these findings in the context of the existing knowledge of the function of the two Rap1 isoforms, followed by speculation regarding potential mechanisms through which Rap1 proteins may be regulating angiogenesis.

Regulation of angiogenesis by a small GTPase Rap1.

Petite GTPase Rap1 a &#xE9;t&#xE9; largement &#xE9;tudi&#xE9; in vitro et montr&#xE9; &#xE0; r&#xE9;glementer plusieurs processus cellulaires de base. Jusqu&#x26;#39;&#xE0; r&#xE9;cemment, l&#x26;#39;aspect le mieux &#xE9;tudi&#xE9; de Rap1 fonction dans les cellules endoth&#xE9;liales impliqu&#xE9;es son r&#xF4;le dans la r&#xE9;gulation de la cellule-cellule formation de la jonction et le remodelage. Ces &#xE9;tudes in vitro ont permis de mieux comprendre les joueurs mol&#xE9;culaires r&#xE9;gulant Rap1 activit&#xE9;, y compris les m&#xE9;canismes par lesquels Rap1 r&#xE9;glemente la perm&#xE9;abilit&#xE9; endoth&#xE9;liale. Plusieurs rapports r&#xE9;cents fournissent des preuves &#xE9;mergentes que Rap1 fonction dans les cellules endoth&#xE9;liales ne se limite pas &#xE0; la promotion de barri&#xE8;re, mais qu&#x26;#39;il r&#xE9;glemente &#xE9;galement de base des r&#xE9;ponses &#xE0; la stimulation angiog&#xE9;nique endoth&#xE9;liales et que Rap1 peut agir comme un r&#xE9;gulateur positif de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se in vivo. Cet article donne un aper&#xE7;u de ces r&#xE9;sultats dans le contexte des connaissances actuelles de la fonction des deux isoformes Rap1, suivis par la sp&#xE9;culation concernant les m&#xE9;canismes potentiels par lesquels Rap1 prot&#xE9;ines peuvent &#xEA;tre r&#xE9;glementant l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se.

R&#xE9;gulation de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se par une petite GTPase Rap1

Kleine GTPase Rap1 wurde ausgiebig studiert in vitro und gezeigt, mehrere grundlegende zellul&auml;re Prozesse zu regulieren. Bis vor kurzem beteiligt der am besten untersuchte Aspekt Rap1 Funktion in Endothelzellen seine Rolle bei der Regulierung der Zell-Zell-Kreuzung-Bildung und Umbau. Diese in-vitro-Studien haben Verst&auml;ndnis der molekularen Spieler Regulierung Rap1 Aktivit&auml;t, einschlie&szlig;lich der Mechanismen, die durch die Rap1 endothelialer Permeabilit&auml;t regelt erh&ouml;ht. Mehrere aktuelle Berichte belegen aufstrebenden, die Rap1 Funktion in Endothelzellen ist nicht beschr&auml;nkt auf die F&ouml;rderung der Barriere sondern es regelt auch grundlegende endotheliale Antworten zu Stimulation der Angiogenese und da&szlig; Rap1 als positive Regulator von Angiogenesis in vivo t&auml;tig werden kann. Dieser Artikel enth&auml;lt eine &Uuml;bersicht &uuml;ber diese Erkenntnisse im Zusammenhang mit der vorhandenen Kenntnisse &uuml;ber die Funktion der beiden Rap1-Isoformen, gefolgt von Spekulationen &uuml;ber m&ouml;gliche Mechanismen, durch welche Rap1 Proteine Angiogenese regulieren k&ouml;nnen.

Regulierung der Angiogenese durch eine kleine GTPase Rap1.

Piccolo GTPase Rap1 &egrave; stato ampiamente studiato in vitro ed indicato per regolare pi&ugrave; processi cellulari fondamentali. Fino a poco tempo fa, l&#39;aspetto studiato meglio della funzione Rap1 in cellule endoteliali coinvolto suo ruolo nella regolazione della formazione di giunzione cellula-cellula e rimodellamento. Questi studi in vitro hanno aumentato la comprensione dei giocatori molecolari che regolano attivit&agrave; Rap1, inclusi i meccanismi attraverso i quali Rap1 regola la permeabilit&agrave; endoteliale. Diversi rapporti recenti forniscono prove emergenti che funzione Rap1 in cellule endoteliali non &egrave; limitato a promuovere la barriera ma che regola anche base endoteliali risposte allo stimolo angiogenico e che Rap1 pu&ograve; agire come un regolatore positivo dell&#39;angiogenesi in vivo. Questo articolo fornisce una panoramica di questi risultati nel contesto delle conoscenze esistenti della funzione delle due isoforme di Rap1, seguita dalla speculazione per quanto riguarda i possibili meccanismi attraverso cui Rap1 proteine possono regolare l&#39;angiogenesi.

Regolamento dell&#39;angiogenesi da un piccolo GTPase Rap1.

&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTPase Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;in vitro&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rap1&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x3088;&#x304F;&#x7814;&#x200B;&#x200B;&#x7A76;&#x3055;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3002; in vitro&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;Rap1&#x3068;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x7D4C;&#x7531;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;Rap1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x9078;&#x624B;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rap1&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x305D;&#x306E;Rap1&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x76AE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;in vivo&#x3067;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x6B63;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8CC7;&#x6599;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Rap1&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x61B6;&#x6E2C;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;2 Rap1&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6240;&#x898B;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTPase Rap1&#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;

&#xCCB4; &#xC678;&#xC640; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC870;&#xC808; &#xAC19;&#xC774; &#xC791;&#xC740; GTPase Rap1 &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xAE4C;&#xC9C0;, &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; Rap1 &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xACF5;&#xBD80; &#xCE21;&#xBA74; &#xC140; &#xC811;&#xD569; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xCC38;&#xC5EC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBD84;&#xC790; &#xC120;&#xC218;&#xB294; Rap1 &#xB0B4; &#xD53C; &#xD22C;&#xACFC;&#xC728;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; Rap1 &#xD65C;&#xB3D9; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xC81C;&#xACF5; &#xC2E0;&#xD765; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; Rap1 &#xD568;&#xC218; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC751;&#xB2F5; angiogenic &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; Rap1 &#xC2E0;&#xC0DD; vivo&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD64D;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xB294; Rap1 &#xD1B5;&#xD574; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218; &#xC218; &#xADDC;&#xC81C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xCD94;&#xCE21;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xB450; Rap1 isoforms &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xAE30;&#xC874; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xAC1C;&#xC694;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC791;&#xC740; GTPase Rap1 &#xC5EC; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Peque&#xF1;as Rap1 GTPasa ha sido ampliamente estudiado in vitro y demostrado que regulan m&#xFA;ltiples procesos celulares b&#xE1;sicos. Hasta hace poco, el mejor de los aspectos estudiados de Rap1 funci&#xF3;n en las c&#xE9;lulas endoteliales participan su papel en la regulaci&#xF3;n de la c&#xE9;lula-c&#xE9;lula la formaci&#xF3;n de la uni&#xF3;n y la remodelaci&#xF3;n. Estos estudios in vitro han aumentado la comprensi&#xF3;n de los actores moleculares que regulan la actividad Rap1, incluyendo mecanismos mediante los cuales Rap1 regula la permeabilidad endotelial. Varios informes recientes proporcionan nuevas pruebas de que Rap1 funci&#xF3;n en las c&#xE9;lulas endoteliales no se limita a la promoci&#xF3;n de barrera, sino que regula tambi&#xE9;n b&#xE1;sicos respuestas endoteliales a la estimulaci&#xF3;n angiog&#xE9;nica y que Rap1 puede actuar como un regulador positivo de la angiog&#xE9;nesis in vivo. Este art&#xED;culo proporciona una visi&#xF3;n general de estos hallazgos en el contexto de los conocimientos existentes sobre la funci&#xF3;n de las dos isoformas Rap1, seguido por las especulaciones sobre los posibles mecanismos a trav&#xE9;s del cual Rap1 prote&#xED;nas que regulan la angiog&#xE9;nesis puede ser.

Regulaci&#xF3;n de la angiog&#xE9;nesis por una peque&#xF1;a GTPasa Rap1

&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x662F;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6E;&#x56DE;&#x4E2D;&#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x672C;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;CalDAG GEFI &#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528; beta1 &#x548C; beta2&#x3001; beta3 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E2D;&#x7684;&#x6362;&#x4E0A; Rap1 GTP GDP&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x8BA8;&#x4E86;&#x5728;&#x72EC;&#x7ACB;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027; CalDAG GEFI &#x548C; Rap1b &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728; transwell &#x6D4B;&#x5B9A;&#xFF0C;CalDAG GEFI/&#x4E2D;&#x6027;&#x8F6E;&#x56DE;&#x76F8;&#x6BD4; WT LTB4 &#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E86;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; 46%&#x3002;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x5728; 10 mM EDTA &#x900F;&#x9732; CalDAG GEFI/&#x4E2D;&#x6027;&#x4E86;&#x76F8;&#x6BD4; WT &#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x548C;&#x65B9;&#x5411;&#x6027;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x884C;&#x4E3A;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;Rap1b/&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x53EF;&#x901A;&#x8FC7; Rap1b &#x884C;&#x4E8B; CalDAG GEFI&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x662F;&#x5426;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x91CD;&#x6392;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89E3;&#x91CA; CalDAG GEFI/&#x4E2D;&#x6027;&#x72EC;&#x7ACB;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7684;&#x8D64;&#x5B57;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; CalDAG GEFI/&#x4E2D;&#x6027;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D; pseudopodia LTB4 &#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x6697;&#x793A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A; CalDAG GEFI &#x5E2E;&#x52A9;&#x8C03;&#x8282;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#xFF0C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x5176;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6D89;&#x53CA;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; CalDAG GEFI &#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x3002;

Chemotaxis and integrin activation are essential processes for neutrophil transmigration in response to injury. CalDAG-GEFI plays a key role in the activation of beta1, beta2, and beta3 integrins in platelets and neutrophils by exchanging a GDP for a GTP on Rap1. Here, we explored the role of CalDAG-GEFI and Rap1b in integrin-independent neutrophil chemotaxis. In a transwell assay, CalDAG-GEFI-/- neutrophils had a 46% reduction in transmigration compared with WT in response to a low concentration of LTB4. Visualization of migrating neutrophils in the presence of 10 mM EDTA revealed that CalDAG-GEFI-/- neutrophils had abnormal chemotactic behavior compared with WT neutrophils, including reduced speed and directionality. Interestingly, Rap1b-/- neutrophils had a similar phenotype in this assay, suggesting that CalDAG-GEFI may be acting through Rap1b. We investigated whether the deficit in integrin-independent chemotaxis in CalDAG-GEFI-/- neutrophils could be explained by defective cytoskeleton rearrangement. Indeed, we found that CalDAG-GEFI-/- neutrophils had reduced formation of F-actin pseudopodia after LTB4 stimulation, suggesting that they have a defect in polarization. Overall, our studies show that CalDAG-GEFI helps regulate neutrophil chemotaxis, independent of its established role in integrin activation, through a mechanism that involves actin cytoskeleton and cellular polarization.

Integrin-independent role of CalDAG-GEFI in neutrophil chemotaxis.

Chimiotactisme et l&#x26;#39;activation de l&#x26;#39;int&#xE9;grine sont des processus essentiels pour la transmigration des neutrophiles en r&#xE9;ponse &#xE0; une blessure. CalDAG-GEFI joue un r&#xF4;le cl&#xE9; dans l&#x26;#39;activation de la beta1, beta2, beta3 et int&#xE9;grines dans les plaquettes et des neutrophiles par l&#x26;#39;&#xE9;change d&#x26;#39;un PIB pour un GTP sur Rap1. Ici, nous avons explor&#xE9; le r&#xF4;le de CalDAG-GEFI et Rap1b dans le chimiotactisme des neutrophiles int&#xE9;grine-ind&#xE9;pendants. Dans un dosage transwell, CalDAG-GEFI-/ - neutrophiles ont une r&#xE9;duction de 46% &#xE0; la transmigration rapport &#xE0; WT en r&#xE9;ponse &#xE0; une faible concentration de LTB4. Visualisation de migration des neutrophiles en pr&#xE9;sence de 10 mM d&#x26;#39;EDTA r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que CalDAG-GEFI-/ - neutrophiles ont un comportement anormal chimiotactique rapport avec les neutrophiles WT, y compris une vitesse r&#xE9;duite et la directivit&#xE9;. Fait int&#xE9;ressant, Rap1b-/ - neutrophiles avaient un ph&#xE9;notype similaire &#xE0; ce test, ce qui sugg&#xE8;re que CalDAG-GEFI peut &#xEA;tre agissant par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire Rap1b. Nous avons examin&#xE9; si le d&#xE9;ficit en int&#xE9;grine-ind&#xE9;pendants chimiotactisme dans CalDAG-GEFI-/ - neutrophiles pourrait &#xEA;tre expliqu&#xE9; par un d&#xE9;faut de r&#xE9;arrangement du cytosquelette. En effet, nous avons constat&#xE9; que CalDAG-GEFI-/ - neutrophiles avait r&#xE9;duit la formation de F-actine pseudopodes apr&#xE8;s LTB4 la stimulation, ce qui sugg&#xE8;re qu&#x26;#39;ils ont un d&#xE9;faut de la polarisation. Dans l&#x26;#39;ensemble, nos &#xE9;tudes montrent que CalDAG-GEFI aide &#xE0; r&#xE9;guler la chimiotaxie des neutrophiles, ind&#xE9;pendamment de son r&#xF4;le bien &#xE9;tabli dans l&#x26;#39;activation de l&#x26;#39;int&#xE9;grine, &#xE0; travers un m&#xE9;canisme qui implique cytosquelette d&#x26;#39;actine et de la polarisation cellulaire.

Integrin ind&#xE9;pendant r&#xF4;le de CalDAG-GEFI dans la chimiotaxie des neutrophiles

Chemotaxis und Integrin Aktivierung sind wesentliche Prozesse f&uuml;r neutrophil Seelenwanderung als Reaktion auf Verletzungen. CalDAG-GEFI spielt eine Schl&uuml;sselrolle bei der Aktivierung von beta1, beta2 und beta3 Integrine in Thrombozyten und Neutrophilen durch den Austausch von einen BIP f&uuml;r ein GTP auf Rap1. Hier erkunden wir die Rolle des CalDAG-GEFI und Rap1b in Integrin-unabh&auml;ngige neutrophil Chemotaxis. In einem Transwell-Assay hatte CalDAG GEFI/neutrophile Seelenwanderung gegen&uuml;ber WT in Reaktion auf eine niedrige Konzentration von LTB4 eine Erm&auml;&szlig;igung von 46 %. Visualisierung der Migration neutrophile in Anwesenheit von 10 mM EDTA ergeben, dass CalDAG GEFI/neutrophile chemotaktische Verhaltensauff&auml;lligkeiten gegen&uuml;ber WT Neutrophilen, einschlie&szlig;lich reduzierter Geschwindigkeit und Direktionalit&auml;t gehabt. Interessanterweise hatte Rap1b/neutrophile einen &auml;hnlichen Ph&auml;notyp hervorrufen, was darauf hindeutet, dass CalDAG-GEFI durch Rap1b handeln kann. Wir wurde untersucht, ob das Defizit in Integrin-unabh&auml;ngige Chemotaxis in CalDAG GEFI/neutrophile durch defekte Zytoskelett-Umlagerung erkl&auml;rt werden k&ouml;nnte. Tats&auml;chlich fanden wir, dass CalDAG GEFI/neutrophile Bildung von F-Actin Pseudopodien nach LTB4 Stimulation, und was darauf hindeutet reduziert hatte, dass sie einen Mangel an Polarisation. Insgesamt zeigen unsere Untersuchungen, dass CalDAG-GEFI hilft neutrophil Chemotaxis, unabh&auml;ngig von ihrer etablierten Rolle in Integrin Aktivierung durch einen Mechanismus zu regulieren, die Aktin-Zytoskelett und Porenbetonsteinen Polarisation umfasst.

Integrin-unabh&auml;ngige Rolle des CalDAG-GEFI neutrophil Chemotaxis.

Chemiotassi e integrina attivazione sono processi essenziali per la trasmigrazione dei neutrofili in risposta alla lesione. CalDAG-GEFI gioca un ruolo chiave nell&#39;attivazione della beta1, beta2 e beta3 integrine in piastrine e neutrofili scambiando un PIL per un GTP su Rap1. Qui, abbiamo esplorato il ruolo di CalDAG-GEFI e Rap1b nella chemiotassi neutrofila integrina-indipendente. In un saggio di transwell, CalDAG-GEFI-/-neutrofili avevano una riduzione del 46% in trasmigrazione confrontato con WT in risposta a una bassa concentrazione di LTB4. Visualizzazione della migrazione dei neutrofili in presenza di 10 mM EDTA ha rivelato che CalDAG-GEFI-/-neutrofili avevano anormale comportamento chemiotattico rispetto ai neutrofili WT, tra cui la ridotta velocit&agrave; e direzionalit&agrave;. Interessante, Rap1b-/-neutrofili ha un fenotipo simile a questo dosaggio, suggerendo che CalDAG-GEFI possono agire attraverso Rap1b. Abbiamo valutato se il deficit di integrina-indipendente chemiotassi in CalDAG-GEFI-/-neutrofili potrebbe essere spiegato da riarrangiamento del citoscheletro difettosi. Infatti, abbiamo trovato che CalDAG-GEFI-/-neutrofili erano ridotta formazione di pseudopodi di F-actina dopo stimolazione LTB4, suggerendo che essi hanno un difetto nella polarizzazione. Nel complesso, i nostri studi mostrano che CalDAG-GEFI aiuta a regolare la chemiotassi dei neutrofili, indipendente del suo ruolo nell&#39;attivazione dell&#39;integrina, stabilita attraverso un meccanismo che coinvolge la polarizzazione del citoscheletro e cellulare dell&#39;actina.

Integrina-indipendente dal ruolo di CalDAG-GEFI nella chemiotassi dei neutrofili.

&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x50B7;&#x5BB3;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x79FB;&#x4F4F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002; CalDAG-GEFI&#x306F;&#x3001;&#x3B2;1&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;2&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3068;Rap1&#x3068;&#x306E;GTP&#x306E;GDP&#x3092;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;beta3&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CalDAG-GEFI&#x3068;Rap1b&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CalDAG-GEFI  -  /  - &#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306F;LTB4&#x306E;&#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;WT&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x8F2A;&#x5EFB;&#x306E;46&#xFF05;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x901F;&#x5EA6;&#x3068;&#x65B9;&#x5411;&#x6027;&#x3092;&#x542B;&#x3081;WT&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3001;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x884C;&#x52D5;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F; -  10mM&#x306E;EDTA&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;CalDAG-GEFI-/&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;Rap1b  -  /  - &#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306F;CalDAG-GEFI&#x304C;Rap1b&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x8EE2;&#x4F4D;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3067;&#x304D;&#x308B; - &#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;CalDAG-GEFI-/&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x8D64;&#x5B57;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x504F;&#x5149;&#x306B;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;LTB4&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306B;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x507D;&#x8DB3;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F; - &#x5B9F;&#x969B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;CalDAG-GEFI-/&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x504F;&#x5149;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x3001;CalDAG-GEFI&#x306F;&#x3001;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CalDAG-GEFI&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

Chemotaxis integrin &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD638; &#xD658;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;. CalDAG GEFI rap1&#xC5D0; GTP&#xB97C; GDP&#xB97C; &#xAD50;&#xD658; &#xD558; &#xC5EC; beta1, beta2, &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xBC0F; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C; beta3 integrins&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD0D0;&#xD5D8; integrin &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xD638; chemotaxis&#xC5D0; CalDAG GEFI &#xBC0F; rap1b&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;. Transwell &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; CalDAG GEFI/&#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xD658;&#xC0DD; WT ltb4&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 46% &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; neutrophils 10mm EDTA &#xC874;&#xC7AC; &#xACF5;&#xAC1C; CalDAG GEFI/&#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; WT &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD608; &#xB3D9;&#xC791; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Rap1b/&#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xD588;&#xB2E4; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC774; &#xBD84;&#xC11D;&#xC774; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; CalDAG GEFI rap1b&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5F0;&#xAE30; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; CalDAG GEFI/&#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; integrin &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; chemotaxis&#xC5D0; &#xC801;&#xC790; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; cytoskeleton &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xBA85; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0AC;&#xC2E4;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC591;&#xADF9; &#xD654;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xB294; F-&#xB9D0;&#xB77C; pseudopodia LTB4 &#xC790;&#xADF9; &#xD6C4; &#xD615;&#xC131; CalDAG GEFI/&#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; CalDAG GEFI &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC591;&#xADF9; &#xD654; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; integrin &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC124;&#xC815; &#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xD638; chemotaxis&#xB97C; &#xC870;&#xC808;&#xD560; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Integrin &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xD638; chemotaxis&#xC5D0; CalDAG GEFI&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

La quimiotaxis y la activaci&#xF3;n de las integrinas son procesos esenciales para la transmigraci&#xF3;n de neutr&#xF3;filos en respuesta a una lesi&#xF3;n. CalDAG-GEFI juega un papel clave en la activaci&#xF3;n de la beta 1, beta 2, y beta3 integrinas en las plaquetas y neutr&#xF3;filos mediante el intercambio de un producto interno bruto de un GTP en Rap1. Aqu&#xED;, hemos explorado el papel de CalDAG-GEFI y Rap1b de la integrina independientes quimiotaxis de neutr&#xF3;filos. En un ensayo transwell, CalDAG-GEFI / - neutr&#xF3;filos ten&#xED;a una reducci&#xF3;n del 46% en comparaci&#xF3;n con la transmigraci&#xF3;n WT en respuesta a una baja concentraci&#xF3;n de LTB4. La visualizaci&#xF3;n de la migraci&#xF3;n de los neutr&#xF3;filos en presencia de EDTA 10 mM revel&#xF3; que CalDAG-GEFI / - neutr&#xF3;filos ten&#xED;a comportamiento quimiot&#xE1;ctico anormal en comparaci&#xF3;n con los neutr&#xF3;filos WT, incluida la velocidad reducida y direccionalidad. Curiosamente, Rap1b / - neutr&#xF3;filos ten&#xED;a un fenotipo similar en este ensayo, lo que sugiere que CalDAG-GEFI puede estar actuando a trav&#xE9;s de Rap1b. Hemos investigado si el d&#xE9;ficit de la integrina-independientes en la quimiotaxis CalDAG-GEFI / - neutr&#xF3;filos podr&#xED;a explicarse por un defecto en la reorganizaci&#xF3;n del citoesqueleto. De hecho, encontramos que CalDAG-GEFI / - neutr&#xF3;filos redujo la formaci&#xF3;n de F-actina pseud&#xF3;podos despu&#xE9;s de LTB4 estimulaci&#xF3;n, lo que sugiere que tienen un defecto en la polarizaci&#xF3;n. En general, nuestros estudios demuestran que CalDAG-GEFI ayuda a regular la quimiotaxis de neutr&#xF3;filos, independientemente de su papel establecido en la activaci&#xF3;n de la integrina, a trav&#xE9;s de un mecanismo que implica citoesqueleto de actina y la polarizaci&#xF3;n celular.

Integrina independiente papel de CalDAG-GEFI en la quimiotaxis de neutr&#xF3;filos

Rap1 &#x9176;&#x63A7;&#x5236;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053; Rap1 &#x4F5C;&#x81EA;&#x7136;&#x6740;&#x624B; (NK) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E86;&#x89C4;&#x5B9A;&#x7684;&#x7CBE;&#x786E;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; Rap1a &#x6216; Rap1b &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x6807;&#x8BC6; Rap1b &#x4E3A; NK &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x3002;&#x5982;&#x679C;&#x6CA1;&#x6709;&#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x635F;&#x5BB3;&#x4E86; LFA1 &#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x4F20;&#x64AD;&#xFF0C;&#x548C; NK &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5FC3; &#xFF08;MTOC&#xFF09; &#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x65E2;&#x4E0D; Rap1 &#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x662F; NK &#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Rap1b &#x6CA1;&#x6709;&#x53D7;&#x635F; NKG2D&#x3001; Ly49D&#x3001; &#x548C; NCR1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x540E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;Rap1b colocalized &#x652F;&#x67B6;&#x86CB;&#x767D; IQGAP1&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4E92;&#x52A8;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5E8F;&#x8D2F;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; B-&#x82F1;&#x56FD;&#x7687;&#x5BB6;&#x7A7A;&#x519B;&#x7684; C-&#x82F1;&#x56FD;&#x7687;&#x5BB6;&#x7A7A;&#x519B;&#x548C; ERK1/2 &#x548C;&#x5E2E;&#x52A9;&#x7684; IQGAP1 &#x5F62;&#x6210;&#x5927;&#x578B; signalosome &#x6838;&#x5468;&#x5730;&#x533A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x4EE5;&#x524D;&#x65E0;&#x6CD5;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E3A; Rap1b NK &#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x4E0E;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x51FD;&#x6570;&#x4E2D;&#x3002;

Rap1b &#x4FBF;&#x4E8E;&#x901A;&#x8FC7;&#x4ECB;&#x5BFC; IQGAP1 signalosomes NK &#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Rap1 GTPases control immune synapse formation and signaling in lymphocytes. However, the precise molecular mechanism by which Rap1 regulates natural killer (NK) cell activation is not known. Using Rap1a or Rap1b knockout mice, we identify Rap1b as the major isoform in NK cells. Its absence significantly impaired LFA1 polarization, spreading, and microtubule organizing center (MTOC) formation in NK cells. Neither Rap1 isoform was essential for NK cytotoxicity. However, absence of Rap1b impaired NKG2D, Ly49D, and NCR1-mediated cytokine and chemokine production. Upon activation, Rap1b colocalized with the scaffolding protein IQGAP1. This interaction facilitated sequential phosphorylation of B-Raf, C-Raf, and ERK1/2 and helped IQGAP1 to form a large signalosome in the perinuclear region. These results reveal a previously unrecognized role for Rap1b in NK cell signaling and effector functions.

Rap1b facilitates NK cell functions via IQGAP1-mediated signalosomes.

Rap1 GTPases contr&#xF4;ler la formation de synapse immunologique et de signalisation dans les lymphocytes. Cependant, le m&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire pr&#xE9;cis par lequel Rap1 r&#xE9;glemente naturelle activation des cellules tueuses (NK) n&#x26;#39;est pas connue. Utilisation Rap1a ou souris knock-out Rap1b, nous identifions Rap1b que l&#x26;#39;isoforme majeure dans les cellules NK. Son absence porterait gravement atteinte LFA1 polarisation, la diffusion, et organisateur des microtubules centre (MTOC) la formation dans les cellules NK. Ni Rap1 isoforme &#xE9;tait essentiel pour la cytotoxicit&#xE9; des NK. Toutefois, l&#x26;#39;absence de Rap1b avec facult&#xE9;s affaiblies NKG2D, Ly49D, et NCR1 m&#xE9;di&#xE9;e par des cytokines et de chimiokines. Lors de l&#x26;#39;activation, Rap1b colocalis&#xE9;s avec le IQGAP1 prot&#xE9;ine d&#x26;#39;&#xE9;chafaudage. Cette interaction facilit&#xE9;e phosphorylation s&#xE9;quentielle de B-Raf, C-Raf, et de ERK1 / 2 et a aid&#xE9; &#xE0; former un IQGAP1 signalosome grande dans la r&#xE9;gion p&#xE9;rinucl&#xE9;aire. Ces r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent un r&#xF4;le non comptabilis&#xE9; ant&#xE9;rieurement pour Rap1b dans la signalisation des cellules NK et les fonctions effectrices.

Rap1b facilite les fonctions des cellules NK Via IQGAP1 m&#xE9;diation Signalosomes

Rap1 GTPasen Steuern immun Synapse Bildung und signalisieren in Lymphozyten. Die genaue Molekulare Mechanismen, die durch die Rap1 nat&uuml;rlichen killer (NK)-ZELLAKTIVIERUNG regelt ist jedoch nicht bekannt. Mit Rap1a oder Rap1b Knock-out-M&auml;use, identifizieren wir Rap1b als der gro&szlig;en Isoform in NK-Zellen. Seine Abwesenheit erheblich beeintr&auml;chtigt, LFA1 Polarisation, Verbreitung und Microtubule organisierende Mitte (MTOC) Bildung in NK-Zellen. Weder Rap1-Isoform war wesentlich f&uuml;r die Zytotoxizit&auml;t der NK. Fehlen von Rap1b beeintr&auml;chtigt jedoch NKG2D, Ly49D und NCR1-vermittelte Zytokine und Chemokine Produktion. Nach der Aktivierung colocalized Rap1b mit dem Ger&uuml;stbau-Protein IQGAP1. Diese Interaktion erleichtert sequenzielle Phosphorylierung von B-Raf C-Raf und ERK1/2 und half IQGAP1, eine gro&szlig;e Signalosome in der Region perinukle&auml;re zu bilden. Diese Ergebnisse zeigen eine zuvor unbekannte Rolle f&uuml;r Rap1b in NK-Zelle signalisieren und Effektor-Funktionen.

Rap1b erleichtert die NK-Zelle-Funktionen via IQGAP1-vermittelte Signalosomes.

GTPases Rap1 controllo formazione sinapsi immunitaria e segnalazione nei linfociti. Tuttavia, non &egrave; noto il preciso meccanismo molecolare con cui Rap1 regola naturale killer attivazione cellulare (NK). Utilizzando Rap1a o Rap1b topi knockout, identifichiamo Rap1b come l&#39;isoforma principale nelle cellule NK. La sua assenza ha alterato significativamente LFA1 polarizzazione diffusione e formazione di centro (MTOC) organizzazione dei microtubuli nelle cellule NK. N&eacute; isoforma Rap1 era essenziale per citotossicit&agrave; NK. Tuttavia, assenza di Rap1b alterata NKG2D, Ly49D e la produzione di citochine e chemochine NCR1-mediata. Dopo l&#39;attivazione, Rap1b colocalized con la proteina IQGAP1 di ponteggi. Questa interazione ha facilitato la fosforilazione sequenza di B-Raf, C-Raf ed ERK1/2 e IQGAP1 ha contribuito a formare un grande signalosome nella regione perinucleare. Questi risultati rivelano un ruolo precedentemente non riconosciuto per Rap1b in funzioni di segnalazione ed effettrici delle cellule NK.

Rap1b facilita le funzioni della cellula NK via signalosomes IQGAP1-mediata.

Rap1&#x306E;GTP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30C1;&#x30E5;&#x30E9;&#x30EB;&#x30AD;&#x30E9;&#x30FC;&#xFF08;NK&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002; Rap1a&#x307E;&#x305F;&#x306F;Rap1b&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;NK&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Rap1b&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x3057;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x5FC3;&#xFF08;MTOC&#xFF09;NK&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;LFA1&#x504F;&#x5149;&#x3092;&#x969C;&#x5BB3;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;Rap1&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;NK&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; Rap1b&#x969C;&#x5BB3;NKG2D&#x3001;Ly49D&#x3001;&#x3068;NCR1&#x5A92;&#x4ECB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F;&#x304C;&#x3001;&#x4E0D;&#x5728;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6642;&#x306B;&#x3001;Rap1b&#x306F;&#x8DB3;&#x5834;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;IQGAP1&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;B-Raf&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3001;C-RAF&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;ERK1 / 2&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x6838;&#x5468;&#x8FBA;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30ED;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;IQGAP1&#x3092;&#x52A9;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;NK&#x7D30;&#x80DE;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;Rap1b&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Rap1b&#x306F;IQGAP1&#x5A92;&#x4ECB;Signalosomes&#x7D4C;&#x7531;NK&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;

Rap1 GTPases &#xBA74;&#xC5ED; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; Rap1 &#xC790;&#xC5F0; &#xD0AC;&#xB7EC; (NK) &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rap1a &#xB610;&#xB294; Rap1b &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; NK &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xC694; isoform Rap1b &#xC2DD;&#xBCC4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; LFA1 &#xC591;&#xADF9; &#xD654;, &#xD655;&#xC0B0;, &#xBC0F; NK &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xC13C;&#xD130; (MTOC) &#xD615;&#xC131; &#xC7A5;&#xC560;. &#xC5B4;&#xB290; Rap1 isoform NK &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, rap1b&#xC758; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; NKG2D, Ly49D, &#xBC0F; NCR1 &#xC911;&#xC7AC; cytokine &#xBC0F; chemokine &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, Rap1b &#xBE44; &#xACC4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; iqgap1&#xC640; &#xD568;&#xAED8; colocalized. &#xC774; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xCD09;&#xC9C4; B Raf&#xC758; &#xC5F0;&#xC18D; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; C &#xC601;&#xAD6D; &#xACF5;&#xAD70; &#xBC0F; ERK1/2&#xC640; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; IQGAP1 perinuclear &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD070; signalosome&#xC744; &#xD615;&#xC131;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; NK &#xC138;&#xD3EC; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; rap1b&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC778;&#xC2DD;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C;.

Rap1b signalosomes IQGAP1 &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; NK &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rap1 GTPasas controlar la formaci&#xF3;n de sinapsis inmunol&#xF3;gica y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n en los linfocitos. Sin embargo, el mecanismo molecular preciso por el cual regula Rap1 asesinas naturales (NK) activaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas no se conoce. Usando Rap1a o ratones knock-out Rap1b, identificamos Rap1b como la isoforma principal en las c&#xE9;lulas NK. Su ausencia significativamente afectada LFA1 la polarizaci&#xF3;n, la difusi&#xF3;n y organizaci&#xF3;n de microt&#xFA;bulos central (COMT) en la formaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas NK. Ni Rap1 isoforma era esencial para la citotoxicidad NK. Sin embargo, la ausencia de deterioro Rap1b NKG2D, Ly49D y NCR1 mediada por citoquinas y la producci&#xF3;n de quimioquinas. Tras la activaci&#xF3;n, Rap1b colocalized con la IQGAP1 andamio de prote&#xED;nas. Esta interacci&#xF3;n facilita la fosforilaci&#xF3;n secuencial de B-Raf, C-Raf, y ERK1 / 2 y ayud&#xF3; a formar un IQGAP1 signalosome grande en la regi&#xF3;n perinuclear. Estos resultados revelan un papel previamente no reconocido de Rap1b en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas NK y las funciones efectoras.

Rap1b facilita las funciones de las c&#xE9;lulas NK mediadas por Via IQGAP1 Signalosomes

&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; RhoA&#xFF0C;&#x548C;&#x5176;&#x6548;&#x5E94; Rho &#x6FC0;&#x9176;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0B;&#x8C03; (SM) &#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE; (RLC(20)) &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x90E8;&#x961F;&#x3002;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x53EF;&#x4EE5;&#x626D;&#x8F6C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x901A;&#x8FC7; Epac&#xFF0C;&#x56E0;&#x800C;&#x589E;&#x52A0; Rap1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x5236;&#x6B62; RhoA &#x6D3B;&#x52A8;&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D; Rap1 GTP &#x4EA4;&#x6D41;&#x56E0;&#x7D20; cAMP &#x4ECB;&#x5BFC;&#x653E;&#x5BBD;&#x65B0;&#x673A;&#x5236;&#x3002;Epac &#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x8425;&#x6A21;&#x62DF;&#xFF0C;8-pCPT-2&#39;-O-Me-cAMP (&quot;007&quot;)&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x964D;&#x4F4E;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6536;&#x7F29;&#x529B;&#x3001; RLC(20) &#x548C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5B8C;&#x597D;&#x548C;&#x900F;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x80A0;&#x548C;&#x6C14;&#x9053; SMs &#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; PKA &#x548C; PKG.&#x8212;&#x5F20;&#x6A21;&#x62DF;&#xFF0C;PGI(2) cicaprost&#xFF0C;Rap1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11; RhoA &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x5B8C;&#x597D;&#x65E0;&#x635F; SMs&#x3002; &#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x4E8C;&#x916F;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; isobutylmethylxanthine&#xFF0C;&#x548C;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x4E5F;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86; Rap1 GTP &#x5927;&#x9F20;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109; SM &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;PKA &#x6291;&#x5236; H89 &#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9; Rap1 GTP &#x7684; 007 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6EB6;&#x8840;&#x78F7;&#x8102;&#x9178;&#x8BF1;&#x5BFC; RhoA &#x6D3B;&#x52A8;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x6CBB;&#x7597; 007 WT &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; Rap1B &#x7A7A;&#x7EA4;&#x7EF4;&#xFF0C;&#x4E0E; Epac &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7; Rap1B &#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282; RhoA &#x6D3B;&#x52A8;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x81F4; Rap1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x6C89;&#x9ED8; Epac1 &#x5927;&#x9F20;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109; SM &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8BE5;&#x5408;&#x4F5C;&#x793E;&#x8425;&#x6FC0;&#x6D3B; PKA &#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x548C; Epac &#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x653E;&#x677E;&#x7684; SM&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BC1;&#x660E;&#x5373; Epac &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D; PKA &#x72EC;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282; RhoA &#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x4E0B;&#x529B;&#x7684; SM Rap1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7ECF;&#x8131;&#x654F;&#x7684; cAMP &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#x673A;&#x5236;&#x3002;RhoA &#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x6291;&#x5236;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7; Epac &#x548C; PKA &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x3002;

&#x8425;&#x53CD;&#x5E94; Rap1 &#x9E1F;&#x560C;&#x5464;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4EA4;&#x6362;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;Epac&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x677E;&#x5F1B;&#x7684;&#x4E0B;&#x964D;&#x8C03;&#x8282; RhoA &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

Agonist activation of the small GTPase, RhoA, and its effector Rho kinase leads to down-regulation of smooth muscle (SM) myosin light chain phosphatase activity, an increase in myosin light chain (RLC(20)) phosphorylation and force. Cyclic nucleotides can reverse this process. We report a new mechanism of cAMP-mediated relaxation through Epac, a GTP exchange factor for the small GTPase Rap1 resulting in an increase in Rap1 activity and suppression of RhoA activity. An Epac-selective cAMP analog, 8-pCPT-2'-O-Me-cAMP ("007"), significantly reduced agonist-induced contractile force, RLC(20), and myosin light chain phosphatase phosphorylation in both intact and permeabilized vascular, gut, and airway SMs independently of PKA and PKG. The vasodilator PGI(2) analog, cicaprost, increased Rap1 activity and decreased RhoA activity in intact SMs. Forskolin, phosphodiesterase inhibitor isobutylmethylxanthine, and isoproterenol also significantly increased Rap1-GTP in rat aortic SM cells. The PKA inhibitor H89 was without effect on the 007-induced increase in Rap1-GTP. Lysophosphatidic acid-induced RhoA activity was reduced by treatment with 007 in WT but not Rap1B null fibroblasts, consistent with Epac signaling through Rap1B to down-regulate RhoA activity. Isoproterenol-induced increase in Rap1 activity was inhibited by silencing Epac1 in rat aortic SM cells. Evidence is presented that cooperative cAMP activation of PKA and Epac contribute to relaxation of SM. Our findings demonstrate a cAMP-mediated signaling mechanism whereby activation of Epac results in a PKA-independent, Rap1-dependent Ca(2+) desensitization of force in SM through down-regulation of RhoA activity. Cyclic AMP inhibition of RhoA is mediated through activation of both Epac and PKA.

The cAMP-responsive Rap1 guanine nucleotide exchange factor, Epac, induces smooth muscle relaxation by down-regulation of RhoA activity.

Activation agoniste de la petite GTPase, RhoA, et son effecteur Rho kinase conduit &#xE0; une r&#xE9;gulation du muscle lisse (SM) cha&#xEE;ne l&#xE9;g&#xE8;re de myosine activit&#xE9; de la phosphatase, une augmentation de la cha&#xEE;ne l&#xE9;g&#xE8;re de myosine (RLC (20)) la phosphorylation et de la force. Nucl&#xE9;otides cycliques peuvent inverser ce processus. Nous rapportons un nouveau m&#xE9;canisme d&#x26;#39;AMPc m&#xE9;di&#xE9;e par la relaxation par Epac, un facteur d&#x26;#39;&#xE9;change GTP pour la petite GTPase Rap1 r&#xE9;sultant en une augmentation de l&#x26;#39;activit&#xE9; et Rap1 suppression de l&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA. Un convertisseur analogique-AMPc Epac s&#xE9;lective, 8-PCPT-2&#x26;#39;-O-Me-AMPc (&#x26;quot;007&#x26;quot;), sensiblement r&#xE9;duite induite par l&#x26;#39;agoniste de la force contractile, RLC (20), et la phosphorylation de la cha&#xEE;ne l&#xE9;g&#xE8;re de myosine phosphatase dans les deux intacte et perm&#xE9;abilis&#xE9;es vasculaire , l&#x26;#39;intestin et des voies respiratoires SM ind&#xE9;pendamment de la PKA et PKG. Le vasodilatateur PGI (2) analogique, cicaprost, augment&#xE9; Rap1 activit&#xE9; et diminution de l&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA dans SMS intactes. La forskoline, inhibiteur de la phosphodiest&#xE9;rase isobutylm&#xE9;thylxanthine, et de l&#x26;#39;isoprot&#xE9;r&#xE9;nol &#xE9;galement augment&#xE9; de fa&#xE7;on significative Rap1-GTP dans les cellules de rat SM aortiques. La PKA inhibiteur de H89 a &#xE9;t&#xE9; sans effet sur l&#x26;#39;augmentation de 007-induite dans Rap1-GTP. Acide lysophosphatidique activit&#xE9; induite RhoA a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duite par un traitement avec 007 dans le document WT mais pas Rap1B fibroblastes nuls, compatible avec la signalisation par Epac Rap1B &#xE0; r&#xE9;guler &#xE0; la baisse d&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA. Isoprot&#xE9;r&#xE9;nol induite par augmentation de l&#x26;#39;activit&#xE9; Rap1 a &#xE9;t&#xE9; inhib&#xE9;e par faire taire Epac1 dans les cellules de rat SM aortiques. La preuve est pr&#xE9;sent&#xE9;e que l&#x26;#39;activation de la PKA AMPc coop&#xE9;rative et Epac contribuer &#xE0; la d&#xE9;tente de la SM. Nos r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent un m&#xE9;canisme AMPc m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;activation de signalisation dans lequel des r&#xE9;sultats Epac dans un PKA-ind&#xE9;pendante, Rap1-d&#xE9;pendante Ca (2 +) d&#xE9;sensibilisation de la force dans SM travers la r&#xE9;gulation n&#xE9;gative de l&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA. L&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;AMP cyclique de RhoA est m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;activation de deux Epac et PKA.

Le CAMP sensible Rap1 Facteur Guanine &#xE9;change de nucl&#xE9;otides, Epac, incite &#xE0; la relaxation des muscles lisses par la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA

Agonist Aktivierung der kleine GTPase RhoA und seiner Effektor-Rho-Kinase f&uuml;hrt zu Herunterregulation glatte Muskulatur (SM) Myosin Leichtketten Phosphatase-Aktivit&auml;t, eine Zunahme der Myosin-Leichtketten (RLC(20)) Phosphorylierung und Kraft. Zyklische Nukleotide k&ouml;nnen diesen Prozess umkehren. Wir berichten einen neuen Mechanismus der cAMP-vermittelten Entspannung durch Epac, ein Faktor im GTP-Austausch f&uuml;r die kleine GTPase Rap1 Rap1 Aktivit&auml;t und Unterdr&uuml;ckung von RhoA T&auml;tigkeit anfallen. Epac-selektive cAMP Analogon, 8-pCPT-2&#39;-O-Me-cAMP (&quot;007&quot;), deutlich reduziert Agonist-induzierten kontraktilen Kraft, RLC(20) und Myosin leichte Kette Phosphatase Phosphorylierung in intakt und permeabilized Durchblutungsst&ouml;rungen, Darm und Atemwege SMs unabh&auml;ngig von PKA und PKG. Die gef&auml;&szlig;erweiternden PGI(2) analog, Cicaprost, erh&ouml;hte Rap1 Aktivit&auml;t und verringerte RhoA Aktivit&auml;t im intakten SMs. Forskolin, Phosphodiesterase-Hemmer Isobutylmethylxanthine, und Isoproterenol auch deutlich erh&ouml;ht Rap1-GTP in Ratte Aorten SM Zellen. Die PKA-Inhibitor H89 war ohne Auswirkung auf die 007-induzierte Zunahme Rap1-GTP. Lysophosphatidic Acid-induzierte RhoA Aktivit&auml;t reduzierte sich durch Behandlung mit 007 in WT aber nicht Rap1B null Fibroblasten, Einklang mit Epac Signalisierung durch Rap1B RhoA T&auml;tigkeit nach unten zu Regeln. Isoproterenol-induzierte Zunahme Rap1 Aktivit&auml;t war an, indem Epac1 in Ratte Aorten SM Zellen gehemmt. Beweise pr&auml;sentiert sich dieser kooperativen cAMP Aktivierung der PKA und Epac tragen zur Entspannung von SM. Unsere Ergebnisse zeigen einen Lager-vermittelten Signalisierungsmechanismus bei Aktivierung der Epac eine PKA-unabh&auml;ngig, Rap1-abh&auml;ngige Ca(2+) Desensibilisierung von Gewalt in SM durch Herunterregulation RhoA Aktivit&auml;t f&uuml;hrt. Zyklischem AMP Hemmung der RhoA ist durch Aktivierung von Epac und PKA vermittelt.

Die Lager-responsive Rap1 Guaninnukleotid-Austauschfaktor, Epac, ausl&ouml;st Entspannung der glatten Muskulatur durch Herunterregulation RhoA Aktivit&auml;t.

Attivazione agonista la piccola GTPasi RhoA e la chinasi di Rho effettrici conduce alla down-regulation dell&#39;attivit&agrave; della fosfatasi di muscolo liscio (SM) della miosina catena leggera, un aumento della catena leggera della miosina (RLC(20)) fosforilazione e forza. Nucleotidi ciclici possono invertire questo processo. Segnaliamo un nuovo meccanismo di rilassamento accampamento-mediata attraverso Epac, un fattore di scambio GTP per il piccolo GTPase Rap1 risultanti in un aumento in attivit&agrave; Rap1 e soppressione dell&#39;attivit&agrave; RhoA. Epac-selettivo campo analogico, 8-pCPT-2&#39;-O-Me-cAMP (&quot;007&quot;), ha ridotto significativamente agonista-indotta contrattile forza, RLC(20) e miosina catena leggera fosfatasi fosforilazione in sia intatto e permeabilized vascolare, intestinale e delle vie aeree SMs indipendentemente dalla PKA e PKG. Vasodilatatore PGI(2) analogico, cicaprost, aumento dell&#39;attivit&agrave; Rap1 e diminuita attivit&agrave; RhoA intatto SMs. forskolina, isobutylmethylxanthine inibitore della fosfodiesterasi, e isoproterenolo anche significativamente aumentato Rap1 GTP in cellule di ratto aortiche SM. L&#39;inibitore PKA H89 fu senza effetto l&#39;aumento indotto da 007 Rap1 GTP. Attivit&agrave; di RhoA indotta da acido lysophosphatidic &egrave; stata ridotta dal trattamento con 007 in fibroblasti null WT ma non Rap1B, coerenti con Epac segnalazione attraverso Rap1B per down-regolare attivit&agrave; di RhoA. Isoproterenol-induced aumento dell&#39;attivit&agrave; Rap1 era inibito da tacere Epac1 in cellule di ratto aortiche SM. Prova &egrave; presentata che cooperativa campo attivazione della PKA ed Epac contribuiscono al rilassamento della SM. I nostri risultati dimostrano un meccanismo di segnalazione accampamento-mediata, per cui attivazione di Epac si traduce in un indipendente dalla PKA, desensibilizzazione Rap1-dipendente Ca(2+) di forza in SM attraverso la down-regulation di RhoA attivit&agrave;. Inibizione di AMP ciclico di RhoA &egrave; mediata attraverso l&#39;attivazione di PKA e di Epac.

Il cAMP-reattivo Rap1 fattore nucleotide della guanina exchange, Epac, induce rilassamento della muscolatura liscia di down-regulation di RhoA attivit&agrave;.

&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTPase&#x3001;RhoA&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;Rho&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xFF08;SM&#xFF09;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#xFF08;RLC&#xFF08;20&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;&#x529B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x9006;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;EPAC&#x3001;Rap1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;RhoA&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTPase&#x306E;Rap1&#x3068;&#x306E;GTP&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;cAMP&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x30EA;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; EPAC&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x306E;cAMP&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;8 PCPT-2&#x26;#39;-O-Me&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;cAMP&#xFF08; &#x26;quot;007&#x26;quot;&#xFF09;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x8A98;&#x767A;&#x53CE;&#x7E2E;&#x529B;&#x3001;RLC&#xFF08;20&#xFF09;&#x3068;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x900F;&#x904E;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x8178;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PKA&#x304A;&#x3088;&#x3073;PKG&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x6C17;&#x9053;&#x306E;SM&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;PGI&#xFF08;2&#xFF09;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;cicaprost&#x306F;&#x3001;Rap1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;SMS&#x3067;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B8;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D6;&#x30C1;&#x30EB;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3082;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;SM&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;Rap1&#x3068;&#x3B3;-GTP&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; PKA&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;H89&#x306B;&#x306F;&#x3001;Rap1&#x306E;-GTP&#x306E;007-&#x8A98;&#x767A;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3082;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30BE;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;RhoA&#x6D3B;&#x6027;EPAC&#x306F;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;Rap1B&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;Rap1B&#x30CC;&#x30EB;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x3001;WT&#x306E;007&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; Rap1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;SM&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;Epac1&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;PKA&#x3068;EPAC&#x306E;&#x5354;&#x540C;&#x7D44;&#x5408;&#x306E;cAMP&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;SM&#x306E;&#x7DE9;&#x548C;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;cAMP&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3067;EPAC&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;PKA&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3001;Rap1&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;SM&#x306E;&#x529B;&#x306E;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x3002; RhoA&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;AMP&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;EPAC&#x3068;PKA&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;

cAMP&#x5FDC;&#x7B54;Rap1&#x306E;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;EPAC&#x306F;&#x3001;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x5F1B;&#x7DE9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;

&#xC791;&#xC740; GTPase, RhoA, &#xBC0F; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xB85C; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC758; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; (SM) myosin &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;, myosin &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; (RLC(20)) &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xBC0F; &#xD798; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xAC00;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB418;&#xB3CC;&#xB9B4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; Epac, Rap1 &#xD65C;&#xB3D9; RhoA &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC791;&#xC740; GTPase Rap1 &#xC704;&#xD574; GTP exchange &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xCEA0;&#xD504; &#xC911;&#xC7AC; &#xD734;&#xC2DD;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;. Epac &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xCEA0;&#xD504; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8;, 8-pCPT-2&#39;-O-Me-cAMP (&#xC774; &#xD558; &quot;007&quot;) &#xC778; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C; &#xC218;&#xCD95; &#xD798;, RLC(20), &#xBC0F; myosin &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1; &#xBC0F; permeabilized &#xD608;&#xAD00;, &#xC18C;&#xD654; &#xAD00; &#xBC0F; PKA&#xC640; PKG. &#xBCC4;&#xB3C4;&#xB85C; &#xAE30;&#xB3C4; Sms&#xB97C; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; Vasodilator &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8;, PGI(2) cicaprost, Rap1 &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; SMs. Forskolin, &#xD3EC;&#xC2A4; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; isobutylmethylxanthine&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; RhoA &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; isoproterenol &#xB610;&#xD55C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; Rap1 GTP &#xC950; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; SM &#xC140;&#xC5D0;. PKA &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; H89 Rap1 GTP&#xC758; 007 &#xC720;&#xBC1C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xD588;&#xB2E4;. Lysophosphatidic &#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; RhoA &#xD65C;&#xB3D9; WT&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; Rap1B null &#xAC8C;&#xC7AC;, Epac &#xB2E4;&#xC6B4; RhoA &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; rap1b&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638; &#xC77C;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; 007&#xACFC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. Rap1 &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00; Isoproterenol &#xC720;&#xB3C4; &#xC785;&#xC744; &#xC950; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; SM &#xC140;&#xC5D0; epac1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xAC70; PKA&#xC758; &#xADF8; &#xD611;&#xB825; &#xCEA0;&#xD504; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Epac SM&#xC758; &#xC644;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCEA0;&#xD504; &#xC911;&#xC7AC; &#xC2E0;&#xD638; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBE7C;&#xC557;&#xC544; Epac &#xD65C;&#xC131;&#xD654; PKA &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;, &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; RhoA &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; SM&#xC5D0; &#xD798;&#xC758; &#xB454;&#xAC10; Rap1 &#xC885;&#xC18D; Ca(2+) &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rhoa&#xC758; &#xC21C;&#xD658; &#xC570;&#xD504; &#xC800;&#xD574; Epac&#xC640; PKA&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCEA0;&#xD504; &#xC751;&#xB2F5; Rap1 guanine &#xC5FC;&#xAE30; &#xAD50;&#xD658; &#xC694;&#xC778;, Epac, &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; RhoA &#xD65C;&#xB3D9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC774;&#xC644;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La activaci&#xF3;n agonista de la GTPasa peque&#xF1;a, RhoA y su efector Rho quinasa conduce a la baja regulaci&#xF3;n de m&#xFA;sculo liso (SM) de la cadena ligera de la miosina actividad de la fosfatasa, un aumento de la cadena ligera de la miosina (RLC (20)) fosforilaci&#xF3;n y la fuerza. Nucle&#xF3;tidos c&#xED;clicos pueden revertir este proceso. Se presenta un nuevo mecanismo de AMPc mediada por relajaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de EPAC, un factor de intercambio de GTP para la GTPasa peque&#xF1;a Rap1 que resulta en un aumento en la actividad Rap1 y la supresi&#xF3;n de la actividad de RhoA. Un an&#xE1;logo de cAMP Epac selectivo, 8-PCPT-2&#x26;#39;-O-Me-AMPc (&#x26;quot;007&#x26;quot;), redujo significativamente agonista inducida por la fuerza contr&#xE1;ctil, RLC (20), y ligera de la miosina cadena fosforilaci&#xF3;n fosfatasa en ambos intacta y se permeabilizaron vascular , los intestinos y las v&#xED;as respiratorias SM independientemente de PKA y PKG. El vasodilatador IGP (2) anal&#xF3;gico, cicaprost, el aumento de la actividad y Rap1 disminuci&#xF3;n de la actividad de RhoA en SMS intactas. Forskolina, inhibidor de la fosfodiesterasa isobutilmetilxantina, y el isoproterenol tambi&#xE9;n aument&#xF3; significativamente Rap1-GTP en las c&#xE9;lulas de aorta de rata SM. El inhibidor de PKA H89 fue sin efecto sobre el aumento de 007-inducida en Rap1-GTP. Lisofosfat&#xED;dico inducida por el &#xE1;cido se redujo la actividad de RhoA por el tratamiento con 007 en WT, pero los fibroblastos, los nulos no Rap1B consistente con la se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s Epac Rap1B de regular a la baja la actividad de RhoA. Isoproterenol inducida por aumento de Rap1 actividad fue inhibida por silenciar Epac1 en las c&#xE9;lulas de aorta de rata SM. Se presenta evidencia de que la activaci&#xF3;n de la PKA AMPc cooperaci&#xF3;n y EPAC contribuyen a la relajaci&#xF3;n de SM. Nuestros hallazgos demuestran un mecanismo de se&#xF1;alizaci&#xF3;n mediada por AMPc mediante el cual la activaci&#xF3;n de los resultados de EPAC en un PKA-independiente, Rap1-dependiente de Ca (2 +) la desensibilizaci&#xF3;n de la fuerza en SM por la baja regulaci&#xF3;n de la actividad de RhoA. La inhibici&#xF3;n de AMP c&#xED;clico de RhoA est&#xE1; mediada por la activaci&#xF3;n de ambos Epac y PKA.

El CAMP-responde Rap1 factor intercambiador de nucle&#xF3;tidos de guanina, EPAC, induce la relajaci&#xF3;n del m&#xFA;sculo liso por la baja regulaci&#xF3;n de la actividad de RhoA

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; 2 (VEGFR2) &#x5BF9;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (ECs) &#x884C;&#x4E8B;&#x662F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#xFF0C;&#x4F24;&#x53E3;&#x6108;&#x5408;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;Rap1a &#x548C; Rap1b&#xFF0C;2 &#x9AD8;&#x5EA6;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x5C0F; G &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4E24;&#x8005;&#x548C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684; VEGF EC &#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BE5; Rap1 &#x4FC3;&#x8FDB; VEGF &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6CBF;&#x88AD;&#x9650;&#x5236; Rap1 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x663E;&#x793A; Rap1 &#x865A;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7F3A;&#x9677;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; ECs Rap1 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7D22;&#x53D6;&#x8BC1;&#x660E; Rap1b &#x4FC3;&#x8FDB; VEGF VEGFR2 &#x6FC0;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Rap1b &#x7684; VEGF-VEGFR2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x90E8;&#x5206;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(3) &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x662F; Rap1b &#x662F;&#x53D1;&#x82BD; intersomitic &#x8239;&#x53EA;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; 2 &#x72EC;&#x7279;&#x836F;&#x7406; VEGFR2 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x663E;&#x793A; Rap1b &#x548C; VEGFR2 &#x52A0;&#x884C;&#x52A8;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; Rap1b &#x4FC3;&#x8FDB; VEGF &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x901A;&#x8FC7;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(3) ECs VEGFR2 &#x6D3B;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x6D1E;&#x5BDF; Rap1 &#x5728; ECs VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Rap1 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x673A;&#x5236;&#x6D89;&#x53CA;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;v&beta;&#x2083; VEGFR2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

Vascular endothelial growth factor (VEGF) acting through VEGF receptor 2 (VEGFR2) on endothelial cells (ECs) is a key regulator of angiogenesis, a process essential for wound healing and tumor metastasis. Rap1a and Rap1b, 2 highly homologous small G proteins, are both required for angiogenesis in vivo and for normal EC responses to VEGF. Here we sought to determine the mechanism through which Rap1 promotes VEGF-mediated angiogenesis. Using lineage-restricted Rap1-knockout mice we show that Rap1-deficiency in endothelium leads to defective angiogenesis in vivo, in a dose-dependent manner. Using ECs obtained from Rap1-deficient mice we demonstrate that Rap1b promotes VEGF-VEGFR2 kinase activation and regulates integrin activation. Importantly, the Rap1b-dependent VEGF-VEGFR2 activation is in part mediated via integrin Î±(v)Î²(3). Furthermore, in an in vivo model of zebrafish angiogenesis, we demonstrate that Rap1b is essential for the sprouting of intersomitic vessels, a process known to be dependent on VEGF signaling. Using 2 distinct pharmacologic VEGFR2 inhibitors we show that Rap1b and VEGFR2 act additively to control angiogenesis in vivo. We conclude that Rap1b promotes VEGF-mediated angiogenesis by promoting VEGFR2 activation in ECs via integrin Î±(v)Î²(3). These results provide a novel insight into the role of Rap1 in VEGF signaling in ECs.

Rap1 promotes VEGFR2 activation and angiogenesis by a mechanism involving integrin Î±vÎ²â‚ƒ.

Facteur de croissance vasculaire endoth&#xE9;liale (VEGF) agissant par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du r&#xE9;cepteur VEGF 2 (VEGFR2) sur les cellules endoth&#xE9;liales (CE) est un r&#xE9;gulateur cl&#xE9; de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se, un processus essentiel pour la gu&#xE9;rison des plaies et des m&#xE9;tastases tumorales. Rap1a et Rap1b, 2 hautement homologue petites prot&#xE9;ines G, sont tous deux n&#xE9;cessaires pour l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se in vivo et des r&#xE9;ponses communautaires normales &#xE0; VEGF. Ici nous avons cherch&#xE9; &#xE0; d&#xE9;terminer le m&#xE9;canisme par lequel Rap1 favorise VEGF-angiogen&#xE8;se induite. Utilisation de la lign&#xE9;e restreints Rap1-souris d&#xE9;ficientes en prot&#xE9;ine, nous montrons que Rap1 carence dans l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium conduit &#xE0; un d&#xE9;faut de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se in vivo, d&#x26;#39;une mani&#xE8;re dose-d&#xE9;pendante. Reposant sur ECS obtenu &#xE0; partir de Rap1-souris d&#xE9;ficientes en nous d&#xE9;montrant que Rap1b favorise activation de la kinase du VEGF-VEGFR2 et r&#xE9;gule l&#x26;#39;activation de l&#x26;#39;int&#xE9;grine. Important, l&#x26;#39;Rap1b-d&#xE9;pendante du VEGF VEGFR2-activation est en partie m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1; (v) &#x3B2; (3). En outre, dans un mod&#xE8;le in vivo de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se poisson z&#xE8;bre, nous d&#xE9;montrons que Rap1b est essentielle pour la germination des navires intersomitic, un processus connu pour &#xEA;tre d&#xE9;pendant de signalisation du VEGF. Utilisation de 2 distinctes pharmacologiques VEGFR2 inhibiteurs nous montrons que Rap1b et VEGFR2 agissent additivement pour contr&#xF4;ler l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se in vivo. Nous concluons que Rap1b favorise VEGF-angiogen&#xE8;se induite par la promotion activation du VEGFR2 dans ECS par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1; (v) &#x3B2; (3). Ces r&#xE9;sultats donnent un aper&#xE7;u roman dans le r&#xF4;le de Rap1 dans signalisation du VEGF dans ECS.

Rap1 Favorise activation du VEGFR2 et de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se par un m&#xE9;canisme impliquant l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1;v&#x3B2; &#x2083;

Vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF) handelnd durch VEGF-Rezeptor 2 (VEGFR2) auf Endothelzellen (ECs) ist ein wichtiger Regulator der Angiogenese, ein Prozess wesentlich f&uuml;r Wunde heilen und Tumor Metastasen. Rap1a und Rap1b, 2 hochgradig homologe kleine G-Proteine, sind beide f&uuml;r Angiogenesis in vivo und normalen EG Antworten zu VEGF erforderlich. Wir wollten hier den Mechanismus zu bestimmen, durch den welche Rap1 VEGF-vermittelten Angiogenese f&ouml;rdert. Mit Linie kalorienarme Rap1-Knockout-M&auml;use zeigen wir, dass Rap1-Mangel im Endothel zu defekten Angiogenesis in vivo eine dosisabh&auml;ngige Weise f&uuml;hrt. Mit ECs gewonnenen Rap1-defizienten M&auml;usen zeigen wir, dass Rap1b VEGF-VEGFR2 Kinase Aktivierung f&ouml;rdert und reguliert die Integrin Aktivierung. Wichtig ist, ist die Aktivierung von Rap1b abh&auml;ngigen VEGF-VEGFR2 teilweise durch Integrin &alpha;(v)&beta;(3) vermittelt. Dar&uuml;ber hinaus in einem in-vivo-Modell von Zebrafish Angiogenesis beweisen wir, dass Rap1b wesentlich f&uuml;r das sprie&szlig;en von intersomitic Schiffen, eines Prozess namens VEGF Signalisierung abh&auml;ngig zu sein. Mit 2 unterschiedliche pharmakologische VEGFR2 Hemmnissen zeigen wir, dass Rap1b und VEGFR2 Additiv handeln, um Angiogenesis in vivo zu steuern. Wir schlie&szlig;en, dass Rap1b VEGF-vermittelten Angiogenese f&ouml;rdert durch die F&ouml;rderung von VEGFR2 Aktivierung in ECs &uuml;ber Integrin &alpha;(v)&beta;(3). Diese Ergebnisse liefern einen neuartigen Einblick in die Rolle von Rap1 bei VEGF signalisieren in ECs.

Rap1 f&ouml;rdert VEGFR2 Aktivierung und Angiogenese durch einen Mechanismus Integrin &alpha;v&beta;&#x2083;.

Vascular endothelial growth factor (VEGF) che agiscono attraverso recettori VEGF 2 (VEGFR2) sulle cellule endoteliali (ECs) &egrave; un regolatore chiave dell&#39;angiogenesi, un processo essenziale per metastasi di tumore e di guarigione ferita. Rap1a e Rap1b, 2 altamente omologhe piccole proteine G, sono che entrambi necessari per l&#39;angiogenesi in vivo e per le normali risposte CE di VEGF. Qui abbiamo cercato di determinare il meccanismo attraverso il quale Rap1 promuove l&#39;angiogenesi VEGF-mediata. Utilizzando topi knockout Rap1 lineage-restricted mostriamo che Rap1-deficit di endotelio conduce a difettoso angiogenesi in vivo, in modo dose-dipendente. Utilizzando ECs ottenuti da topi carenti Rap1 ci dimostrano che Rap1b promuove l&#39;attivazione della chinasi VEGF-VEGFR2 e regola dell&#39;integrina attivazione. Soprattutto, l&#39;attivazione Rap1b-dipendente VEGF-VEGFR2 &egrave; in parte mediato via integrina &alpha;(v)&beta;(3). Inoltre, in un modello in vivo di zebrafish angiogenesi, dimostreremo che Rap1b &egrave; essenziale per la germinazione dei vasi intersomitic, un processo conosciuto per essere dipendente su segnalazione di VEGF. Utilizzando 2 distinti farmacologici inibitori VEGFR2 mostriamo che Rap1b e VEGFR2 agiscono additivamente per controllare l&#39;angiogenesi in vivo. Concludiamo che Rap1b promuove l&#39;angiogenesi VEGF-mediata promuovendo VEGFR2 attivazione in ECs via integrina &alpha;(v)&beta;(3). Questi risultati forniscono una visione romanzo il ruolo di Rap1 nella segnalazione di VEGF in ECs.

Rap1 promuove un meccanismo che coinvolge integrina &alpha;v&beta;&#x2083; VEGFR2 attivazione e l&#39;angiogenesi.

&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x306E;VEGF&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;2&#xFF08;VEGFR2&#xFF09;&#xFF08;ECS&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;VEGF&#xFF09;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3001;&#x5275;&#x50B7;&#x6CBB;&#x7652;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x8EE2;&#x79FB;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002; Rap1a&#x3068;Rap1b&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;VEGF&#x3078;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;EC&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x4E21;&#x65B9;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;VEGF&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x7D71;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x305F;Rap1&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rap1&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306F;&#x3001;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Rap1b&#x306F;&#x3001;VEGF-VEGFR2&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x5B9F;&#x8A3C;Rap1&#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;EC&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;Rap1b&#x4F9D;&#x5B58;VEGF-VEGFR2&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3B1;&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;3&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;in vivo&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x306E;Rap1b&#x306F;intersomitic&#x8239;&#x8236;&#x3001;VEGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x767A;&#x82BD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3002; 2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;VEGFR2&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7684;Rap1b&#x3068;VEGFR2&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Rap1b&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3B1;&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D4C;&#x7531;&#x3067;ECS&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;VEGFR2&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;VEGF-A&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;ECS&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;VEGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rap1&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3067;VEGFR2&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3B1;v&#x3B2;&#x2083;

&#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (VEGF) VEGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (ECs) 2 (VEGFR2)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5F0;&#xAE30;&#xB294; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;, &#xC0C1;&#xCC98; &#xCE58;&#xC720; &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xC804;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC5D0;&#xC13C;&#xC15C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;. Rap1a &#xBC0F; Rap1b, 2 &#xB192;&#xC740; &#xB3D9;&#xC885; &#xC791;&#xC740; G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xB294; &#xB458; &#xB2E4; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC0F; VEGF&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; EC &#xC815;&#xC0C1; &#xC751;&#xB2F5;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rap1 VEGF &#xC911;&#xC7AC; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xACE0;&#xC790; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Rap1-&#xACB0;&#xD54D; endothelium&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD608;&#xD1B5; &#xC81C;&#xD55C; Rap1 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. Rap1 &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; Ecs&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; Rap1b VEGF VEGFR2 &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558; &#xACE0; &#xADDC;&#xC81C; integrin &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, Rap1b &#xC885;&#xC18D; VEGF VEGFR2 &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; integrin &alpha;(v)&beta;(3)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, zebrafish &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; in vivo &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; Rap1b &#xB3CB; intersomitic &#xC120;&#xBC15;&#xC758; VEGF &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2 &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; pharmacologic VEGFR2 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rap1b &#xBC0F; VEGFR2 &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC81C;&#xC5B4; additively &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rap1b integrin &alpha;(v)&beta;(3)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; Ecs&#xC758; VEGFR2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558; &#xC5EC; VEGF &#xC911;&#xC7AC; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xACB0;&#xB860;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; VEGF Ecs&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; rap1&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rap1 integrin &alpha;v&beta;&#x2083; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; VEGFR2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), actuando a trav&#xE9;s del receptor 2 de VEGF (VEGFR2) en las c&#xE9;lulas endoteliales (EC) es un regulador clave de la angiog&#xE9;nesis, un proceso esencial para la cicatrizaci&#xF3;n de heridas y la met&#xE1;stasis del tumor. Rap1a y Rap1b, 2 prote&#xED;nas G altamente hom&#xF3;loga peque&#xF1;os, ambos son necesarios para la angiog&#xE9;nesis in vivo y para respuestas normales CE a VEGF. Aqu&#xED; hemos tratado de determinar el mecanismo a trav&#xE9;s del cual Rap1 promueve la angiog&#xE9;nesis mediada por VEGF. Uso de linaje restringido Rap1 ratones knock-out nos muestran que la deficiencia de Rap1 en el endotelio lleva a un defecto en la angiog&#xE9;nesis in vivo, de una manera dosis-dependiente. Uso de EC de obtener Rap1 ratones deficientes que demuestran que Rap1b promueve la activaci&#xF3;n de VEGF-VEGFR2 cinasa y regula la activaci&#xF3;n de la integrina. Es importante destacar que la Rap1b dependiente de VEGF-VEGFR2 activaci&#xF3;n es en parte mediada a trav&#xE9;s de la integrina &#x3B1; (v) &#x3B2; (3). Adem&#xE1;s, en un modelo in vivo de la angiog&#xE9;nesis pez cebra, se demuestra que Rap1b es esencial para el crecimiento de vasos intersomitic, un proceso conocido por ser dependiente de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n VEGF. Con 2 diferentes inhibidores farmacol&#xF3;gicos VEGFR2 nos muestran que Rap1b VEGFR2 y actuar de forma aditiva para controlar la angiog&#xE9;nesis in vivo. Se concluye que el VEGF Rap1b promueve la angiog&#xE9;nesis mediada por promover VEGFR2 activaci&#xF3;n en ECs a trav&#xE9;s de la integrina &#x3B1; (v) &#x3B2; (3). Estos resultados proporcionan una visi&#xF3;n novedosa sobre el papel de Rap1 de se&#xF1;alizaci&#xF3;n VEGF en EC.

Promueve Rap1 VEGFR2 activaci&#xF3;n y angiog&#xE9;nesis por un mecanismo de participaci&#xF3;n de la integrina &#x3B1;v&#x3B2; &#x2083;

Rap1b &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(IIb)&beta;(3) &#x5185;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x805A;&#x5408;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8BF1;&#x5BFC; Rap1b &#x6D3B;&#x5316;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x523A;&#x6FC0;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A; &alpha;(IIb)&beta;(3) &#x5916;&#x5185;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6FC0;&#x6D3B; Rap1b&#xFF0C;&#x548C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC; Rap1b &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7D20;&#x5916;&#x4E2D;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x548C;&#x8840;&#x5757;&#x9000;&#x7F29;&#x4E0A;&#x8513;&#x5EF6;&#x3002;Rap1b &#x7F3A;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; ATP &#x5206;&#x6CCC;&#x548C;&#x51DD;&#x8840;&#x9176;&#x6216;&#x80F6;&#x539F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; P-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x7684; ADP &#x548C;/&#x6216;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x6062;&#x590D;&#x5BF9; Rap1b &#x7F3A;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x805A;&#x96C6;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Rap1b &#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x4F20;&#x64AD;&#x5BF9;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7684;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E0D;&#x53D7; P2Y(12) &#x6216; TXA(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x7F3A;&#x9677;&#xFF0C;&#x4F46;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027; Src &#x6291;&#x5236;&#x5242; PP2&#xFF0C;Ro-31-8220 PKC &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x6216;&#x9499;&#x87AF;&#x5408;&#x5242;&#x4E59; 1&#xFF0C;2 bis(2-aminophenoxy) &#x4E59;&#x70F7;-N&#xFF0C;N&#xFF0C;N&#39;&#xFF0C;N&#39;-&#x56DB;&#x9178;&#x56DB;&#x3002;&#x5E9F;&#x9664;&#x4E86;&#x8840;&#x5757;&#x9000;&#x7F29;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F20;&#x64AD;&#x5BF9;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x51CF;&#x5C11; Rap1b &#x7F3A;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x76F8;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x3002;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x51DD;&#x7ED3;&#x9000;&#x7F29;&#x548C;&#x4F20;&#x64AD;&#x4E0A;&#x7684; Rap1b &#x7F3A;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x4E0D;&#x83B7;&#x6551; MnCl(2)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x8BF1;&#x53D1; &alpha;(IIb)&beta;(3) &#x5916;&#x9762;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x91CC;&#x9762;&#x51FA;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6CA1;&#x6709;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x673A;&#x5236;&#x7684; Rap1b &#x4EE5;&#x53CA; Rap1b &#x65B0;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x5728;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(IIb)&beta;(3) &#x5916;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

Rap1b &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;IIb&beta;3 &#x5916;&#x9762;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

Rap1b is activated by platelet agonists and plays a critical role in integrin Î±(IIb)Î²(3) inside-out signaling and platelet aggregation. Here we show that agonist-induced Rap1b activation plays an important role in stimulating secretion of platelet granules. We also show that Î±(IIb)Î²(3) outside-in signaling can activate Rap1b, and integrin outside-in signaling-mediated Rap1b activation is important in facilitating platelet spreading on fibrinogen and clot retraction. Rap1b-deficient platelets had diminished ATP secretion and P-selectin expression induced by thrombin or collagen. Importantly, addition of low doses of ADP and/or fibrinogen restored aggregation of Rap1b-deficient platelets. Furthermore, we found that Rap1b was activated by platelet spreading on immobilized fibrinogen, a process that was not affected by P2Y(12) or TXA(2) receptor deficiency, but was inhibited by the selective Src inhibitor PP2, the PKC inhibitor Ro-31-8220, or the calcium chelator demethyl-1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid tetrakis. Clot retraction was abolished, and platelet spreading on fibrinogen was diminished in Rap1b-deficient platelets compared with wild-type controls. The defects in clot retraction and spreading on fibrinogen of Rap1b-deficient platelets were not rescued by addition of MnCl(2), which elicits Î±(IIb)Î²(3) outside-in signaling in the absence of inside-out signaling. Thus, our results reveal two different activation mechanisms of Rap1b as well as novel functions of Rap1b in platelet secretion and in integrin Î±(IIb)Î²(3) outside-in signaling.

Distinct roles for Rap1b protein in platelet secretion and integrin Î±IIbÎ²3 outside-in signaling.

Rap1b est activ&#xE9; par les agonistes plaquettaires et joue un r&#xF4;le essentiel dans l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1; (IIb) &#x3B2; (3) int&#xE9;rieur &#xE0; l&#x26;#39;ext&#xE9;rieur de signalisation et l&#x26;#39;agr&#xE9;gation plaquettaire. Ici, nous montrons que l&#x26;#39;activation induite par un agoniste Rap1b joue un r&#xF4;le important dans stimulant la s&#xE9;cr&#xE9;tion de granules plaquettaires. Nous montrons aussi que &#x3B1; (IIb) &#x3B2; (3) en dehors de signalisation en pouvez activer Rap1b, et de l&#x26;#39;int&#xE9;grine ext&#xE9;rieur vers l&#x26;#39;int&#xE9;rieur activation Rap1b de signalisation m&#xE9;di&#xE9;e par est important dans la facilitation de la diffusion de plaquettes sur le fibrinog&#xE8;ne et la r&#xE9;traction du caillot. Rap1b d&#xE9;ficientes plaquettes a diminu&#xE9; la s&#xE9;cr&#xE9;tion d&#x26;#39;ATP et la P-s&#xE9;lectine expression induite par la thrombine ou le collag&#xE8;ne. Il est important, plus de faibles doses d&#x26;#39;ADP et / ou du fibrinog&#xE8;ne restaur&#xE9; l&#x26;#39;agr&#xE9;gation des plaquettes d&#xE9;ficientes en Rap1b. En outre, nous avons constat&#xE9; que Rap1b a &#xE9;t&#xE9; activ&#xE9; par &#xE9;pandage sur les plaquettes du fibrinog&#xE8;ne immobilis&#xE9;, un processus qui n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; affect&#xE9;e par P2Y (12) ou TXA (2) d&#xE9;ficit en r&#xE9;cepteur, mais il a &#xE9;t&#xE9; inhib&#xE9;e par l&#x26;#39;inhibiteur s&#xE9;lectif de la Src PP2, inhibiteur de la PKC Ro-31 -8220, ou le ch&#xE9;lateur de calcium d&#xE9;m&#xE9;thyl-1 ,2-bis (2-aminoph&#xE9;noxy) &#xE9;thane-N, N, N &#x26;#39;, N&#x26;#39;-t&#xE9;trakis acide t&#xE9;traac&#xE9;tique. R&#xE9;traction du caillot a &#xE9;t&#xE9; aboli, et des plaquettes propagation sur le fibrinog&#xE8;ne a &#xE9;t&#xE9; diminu&#xE9; dans Rap1b d&#xE9;ficientes plaquettes par rapport &#xE0; des contr&#xF4;les de type sauvage. Les d&#xE9;fauts de r&#xE9;traction du caillot et la propagation sur le fibrinog&#xE8;ne des plaquettes Rap1b-d&#xE9;ficientes n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; recueilli par addition d&#x26;#39;MnCl (2), qui provoque &#x3B1; (IIb) &#x3B2; (3) &#xE0; l&#x26;#39;ext&#xE9;rieur en signaux en l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;int&#xE9;rieur &#xE0; l&#x26;#39;ext&#xE9;rieur de signalisation. Ainsi, nos r&#xE9;sultats mettent en &#xE9;vidence deux m&#xE9;canismes d&#x26;#39;activation de diff&#xE9;rents Rap1b ainsi que de nouvelles fonctions de s&#xE9;cr&#xE9;tion plaquettaire dans Rap1b et l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1; (IIb) &#x3B2; (3) en dehors-de la signalisation.

Des r&#xF4;les distincts pour des prot&#xE9;ines de la s&#xE9;cr&#xE9;tion plaquettaire Rap1b et de l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1;IIb&#x3B2;3 ext&#xE9;rieur-en signalisation

Rap1b wird durch Thrombozyten-Agonisten aktiviert und spielt eine wichtige Rolle in der Integrin-&alpha;(IIb)&beta;(3) Inside-Out-Signalisierung und Thrombozyten-Aggregation. Hier zeigen wir, dass Agonist-induzierte Rap1b Aktivierung eine wichtige Rolle spielt stimuliert die Sekretion von Thrombozyten-Granulat. Wir zeigen auch, dass &alpha;(IIb)&beta;(3) au&szlig;en nach innen signalisieren Rap1b aktivieren kann und Integrin au&szlig;en-Signalisierung-vermittelte Rap1b Aktivierung wichtig ist bei der Erleichterung der Thrombozyten, Fibrinogen und Blutgerinnsel Retraktion Verteilung. Rap1b-defizienten Thrombozyten hatte ATP-Sekretion und P-selectin Ausdruck induziert durch Thrombin oder Kollagen vermindert. Wichtig ist, wiederhergestellt Zusatz von geringen Dosen von ADP bzw. Fibrinogen Aggregation der Thrombozyten Rap1b-Mangel. Dar&uuml;ber hinaus fanden wir, dass Rap1b aktiviert wurde, von Thrombozyten, die Verbreitung &uuml;ber immobilisierte Fibrinogen, ein Prozess, der nicht von P2Y(12) oder TXA(2)-Rezeptor-Mangel betroffen war, aber wurde durch die selektive Src-Inhibitor PP2, der PKC-Hemmer Ro-31-8220, gehemmt oder das Kalzium Chelatbildner Heptyl-1,2-bis(2-aminophenoxy) Ethan-N, N, N&#39;, N&#39;-Tetraacetic S&auml;ure Tetrakis. Blutgerinnsel Retraktion wurde abgeschafft, und Thrombozyten, die Verbreitung auf Fibrinogen wurde in Rap1b-defizienten Thrombozyten im Vergleich zu Wildtyp Steuerelemente abgenommen. Die Defekte in gerinnen Retraktion und Verbreitung auf Fibrinogen der Rap1b-defizienten Thrombozyten wurden durch Zugabe von MnCl(2), die &alpha;(IIb)&beta;(3) au&szlig;en nach innen zu signalisieren, in Ermangelung von innen nach au&szlig;en zu signalisieren, l&ouml;st nicht gerettet. So zeigen unsere Ergebnisse zwei verschiedene Aktivierungs-Mechanismen der Rap1b sowie neuartige Funktionen des Rap1b in Thrombozyten Sekretion und Integrin &alpha;(IIb)&beta;(3) au&szlig;en nach innen signalisieren.

Rollen f&uuml;r Rap1b Protein in Thrombozyten Sekretion und Integrin &alpha;IIb&beta;3 au&szlig;en nach innen signalisieren.

Rap1b &egrave; attivata da agonisti piastrinici e svolge un ruolo critico nel integrina &alpha;(IIb)&beta;(3) inside-out segnalazione e piastrinica aggregazione. Qui vi mostriamo che agonista-indotta Rap1b attivazione gioca un ruolo importante stimolando la secrezione dei granuli piastrinici. Mostriamo anche che &alpha;(IIb)&beta;(3) outside-in segnalazione pu&ograve; attivare Rap1b e integrina outside-in segnalazione-mediato l&#39;attivazione Rap1b &egrave; importante nel facilitare la diffusione su retrazione del fibrinogeno e coagulo piastrinico. Rap1b-deficient piastrine erano diminuita secrezione di ATP e di P-Selectina espressione indotta da trombina o collagene. Soprattutto, aggiunta di basse dosi di ADP e/o fibrinogeno restaurato aggregazione delle piastrine di Rap1b-deficient. Inoltre, abbiamo scoperto che Rap1b &egrave; stato attivato da piastrine diffusione sul fibrinogeno immobilizzato, un processo che non &egrave; stato influenzato da deficit del recettore P2Y(12) o TXA(2), ma &egrave; stato inibito dall&#39;inibitore selettivo Src PP2, l&#39;inibitore PKC Ro-31-8220, o il calcio chelante demethyl-1,2-bis(2-aminophenoxy) etano-N, N, N&#39;, N&#39;-tetrakis acido etilendiamminotetraacetico. Retrazione del coagulo &egrave; stata abolita, e piastrine diffondendo il fibrinogeno &egrave; stata diminuita in piastrine Rap1b-carenti rispetto ai controlli wild-type. I difetti nella coagulazione retrazione e diffondendo il fibrinogeno di piastrine Rap1b-carenti non furono salvati mediante aggiunta di MnCl(2), che suscita &alpha;(IIb)&beta;(3) esterno nella segnalazione in assenza di segnalazione inside-out. Cos&igrave;, i nostri risultati rivelano due meccanismi di attivazione differenti di Rap1b cos&igrave; come romanzo funzioni di Rap1b in secrezione piastrinica e dell&#39;integrina &alpha;(IIb)&beta;(3) esterno nella segnalazione.

Ruoli distinti per proteina Rap1b nella secrezione piastrinica e dell&#39;integrina &alpha;IIb&beta;3 esterno nella segnalazione.

Rap1b&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3B1;&#xFF08;IIb&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;3&#xFF09;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x51DD;&#x96C6;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x8A98;&#x767A;Rap1b&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;Rap1b&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#xFF08;3&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5916;&#x304B;&#x3089;&#x3067;&#x3001;&#x3B1;&#xFF08;IIb&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5A92;&#x4ECB;Rap1b&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x9905;&#x9000;&#x7E2E;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ATP&#x5206;&#x6CCC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x30D3;&#x200B;&#x200B;&#x30F3;&#x3084;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;P-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;ADP&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x304C;Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Rap1b&#x304C;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x3001;P2Y&#xFF08;12&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;TXA&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x306E;Src&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;PP2&#x3001;PKC&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;Ro&#x306E;A-31&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-8220&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5264;&#x30C7;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;-1,2  - &#x30D3;&#x30B9;&#xFF08;2  - &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CE;&#x30AD;&#x30B7;&#xFF09;&#x30A8;&#x30BF;&#x30F3;-N&#x3001;N&#x3001;N &#x26;#39;&#x3001;N&#x26;#39;-&#x56DB;&#x9162;&#x9178;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AD;&#x30B9;&#x3002;&#x8840;&#x9905;&#x9000;&#x7E2E;&#x306F;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Rap1b&#x6B20;&#x640D;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306B;&#x8840;&#x9905;&#x9000;&#x7E2E;&#x3068;&#x62E1;&#x6563;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#xFF08;3&#xFF09;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5916;&#x30A4;&#x30F3;&#x3B1;&#xFF08;IIb&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;MnCl&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6551;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;Rap1b&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5206;&#x6CCC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3B1;&#xFF08;IIb&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;3&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5916;&#x304B;&#x3089;&#x5185;&#x306B;Rap1b&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5206;&#x6CCC;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3B1;IIb&#x3B2;3&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;Rap1b&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

Rap1b agonists &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418; &#xACE0; integrin &alpha;(IIb)&beta;(3) &#xB0B4;&#xBD80; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB97C; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; Rap1b &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xACFC; &#xB9BD; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &alpha;(IIb)&beta;(3) &#xC678;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638; Rap1b, &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xD560; &#xC218; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1; &#xC911;&#xC7AC; Rap1b &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC678;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; integrin&#xC740; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBC0F; &#xC751;&#xACE0; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0; &#xCD09;&#xC9C4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC;. ATP&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xC640; &#xD2B8; &#xB86C; &#xBE48; &#xB610;&#xB294; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; P selectin &#xC2DD; Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, ADP &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6D0;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rap1b &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xC9C0; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;, P2Y(12) &#xB610;&#xB294; TXA(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xACB0;&#xD54D;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0;&#xB294; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; Src &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; PP2, PKC &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB85C;-31-8220&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574; &#xB41C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xB610;&#xB294; &#xCE7C;&#xC298; chelator demethyl 1, 2 bis(2-aminophenoxy) &#xD0C4;-N, N, N&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xBC1C;&#xACAC; &#39;, N&#39;-tetraacetic &#xC0B0; tetrakis. &#xC751;&#xACE0; &#xCCA0;&#xD68C;&#xB294; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0; &#xC751;&#xACE0; &#xCCA0;&#xD68C; &#xBC0F; &#xD558;&#xC9C0; elicits &#xB0B4;&#xBD80; &#xC2E0;&#xD638;&#xC774; &#xC5C6;&#xC744; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638; &#xC678;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &alpha;(IIb)&beta;(3) Mncl(2)&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD588;&#xB2E4; Rap1b &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC758; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; rap1b&#xC758; 2 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xBD84; &#xBE44; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xC678;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &alpha;(IIb)&beta;(3) integrin rap1b&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xAE30;&#xB2A5; &#xACF5;&#xAC1C;.

&#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xBD84; &#xBE44; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xC678;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &alpha;IIb&beta;3 integrin Rap1b &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Rap1b se activa por los agonistas de las plaquetas y desempe&#xF1;a un papel cr&#xED;tico en la integrina &#x3B1; (IIb) &#x3B2; (3) de adentro hacia fuera la se&#xF1;alizaci&#xF3;n y la agregaci&#xF3;n plaquetaria. Aqu&#xED; nos muestran que la activaci&#xF3;n inducida por agonista Rap1b juega un papel importante en estimular la secreci&#xF3;n de gr&#xE1;nulos de las plaquetas. Tambi&#xE9;n se muestra que &#x3B1; (IIb) &#x3B2; (3) de afuera hacia adentro de se&#xF1;alizaci&#xF3;n puede activar Rap1b, y la integrina exterior-en la activaci&#xF3;n de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n mediada por Rap1b es importante para facilitar la difusi&#xF3;n de plaquetas sobre el fibrin&#xF3;geno y la retracci&#xF3;n del co&#xE1;gulo. Rap1b con deficiencia de plaquetas hab&#xED;a disminuido la secreci&#xF3;n de la ATP y la expresi&#xF3;n de P-selectina inducida por trombina o col&#xE1;geno. Es importante destacar que, adem&#xE1;s de dosis bajas de ADP y / o fibrin&#xF3;geno restaurado agregaci&#xF3;n de Rap1b deficientes en plaquetas. Adem&#xE1;s, hemos encontrado que Rap1b fue activado por la difusi&#xF3;n de plaquetas sobre el fibrin&#xF3;geno inmovilizado, un proceso que no se vio afectada por P2Y (12) o TXA (2) deficiencia del receptor, pero fue inhibido por el inhibidor selectivo de Src PP2, la PKC inhibidor Ro-31 -8220, o el quelante de calcio desmetil-1 ,2-bis (2-aminofenoxi) etano-N, N, N &#x26;#39;, N&#x26;#39;-tetraquis tetraac&#xE9;ticos &#xE1;cido. Retracci&#xF3;n del co&#xE1;gulo fue abolida, y la difusi&#xF3;n de plaquetas sobre el fibrin&#xF3;geno se redujo en Rap1b con deficiencia de plaquetas en comparaci&#xF3;n con los controles de tipo salvaje. Los defectos en la retracci&#xF3;n del co&#xE1;gulo y la difusi&#xF3;n sobre el fibrin&#xF3;geno de Rap1b deficientes en plaquetas no fueron rescatados por adici&#xF3;n de MnCl (2), que provoca &#x3B1; (IIb) &#x3B2; (3) de fuera a dentro de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en la ausencia de dentro a fuera de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Por lo tanto, nuestros resultados ponen de manifiesto dos diferentes mecanismos de activaci&#xF3;n de Rap1b, as&#xED; como funciones nuevas de Rap1b en la secreci&#xF3;n de las plaquetas y en la integrina &#x3B1; (IIb) &#x3B2; (3) de afuera hacia adentro de se&#xF1;alizaci&#xF3;n.

Distintas funciones de la prote&#xED;na Rap1b en la secreci&#xF3;n de la integrina plaquetaria y &#x3B1;IIb&#x3B2;3 afuera hacia adentro de se&#xF1;alizaci&#xF3;n

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Magdalena Chrzanowska-Wodnicka

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