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Isolation and <em>In vitro</em> Activation of <em>Caenorhabditis elegans</em> Sperm

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Rutgers University

O-&#x786B;&#x9178;&#x916F;&#x5316;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x662F;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA; tyrosylprotein sulfotransferases &#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970; (TPST-1 &#x548C;-2) &#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x786B;&#x9178;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5DF2;&#x77E5; TPST &#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x4E2D;&#x901A;&#x8FC7;&#x63D0;&#x9AD8;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8981;&#x63A2;&#x8BA8;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4F53;&#x5185;&#x9176;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5E76;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3;&#x5176;&#x4ED6;&#x6F5C;&#x5728; TPST &#x886C;&#x5E95;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x4E2D;&#x65AD;&#x7684; Tpst2 &#x57FA;&#x56E0;&#x751F;&#x6210; TPST-2 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;Tpst2(+/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x663E;&#x793A;&#x6B63;&#x5E38;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#xFF0C;&#x5F53;&#x571F;&#x91CC;&#x571F;&#x6C14;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x51CB;&#x843D;&#x7269;&#x4E0E;&#x5B5F;&#x5FB7;&#x5C14;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;Tpst2(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x9002;&#x5EA6;&#x63A8;&#x8FDF;&#x4E86;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51FA;&#x73B0;&#x5065;&#x5EB7;&#x548C; 10 &#x5468;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84;&#x8FBE;&#x5230;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x4F53;&#x91CD;&#x3002;&#x4E0E; Tpst1(-/-) &#x6709;&#x6B63;&#x5E38;&#x751F;&#x80B2;&#x7684;&#x7537;&#x6027;&#xFF0C;Tpst2(-/-) &#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x4E0D;&#x80B2;&#x3002;Tpst2(-/-) &#x7CBE;&#x5B50;&#x6B63;&#x5E38;&#x6570;&#x91CF;&#x3001; &#x5F62;&#x6001;&#x53CA;&#x4ECB;&#x8D28;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x80C3;&#x548C;&#x6307;&#x6559;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FDB;&#x884C;&#x9876;&#x4F53;&#x9176;&#x80DE;&#x901A;&#x5E38;&#x4F1A;&#x51FA;&#x73B0;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x662F;&#x5728;&#x5176;&#x52A8;&#x529B;&#x5728;&#x7C98;&#x6027;&#x4ECB;&#x8D28;&#x548C;&#x65BD;&#x80A5;&#x5375;&#x900F;&#x660E;&#x5E26;&#x5B8C;&#x597D;&#x7684;&#x9E21;&#x86CB;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x4E25;&#x91CD;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;Tpst2(-/-) &#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E0E;&#x5375;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x9644;&#x7740;&#x529B;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7CBE;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7CBE;&#x5375;&#x878D;&#x5408;&#x662F;&#x76F8;&#x4F3C;&#x3001; &#x751A;&#x81F3;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6587;&#x6863;&#x4E2D;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x80B2;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x53CA;&#x5176;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x786B;&#x9178;&#x916F;&#x5316;&#x7684;&#x6781;&#x7AEF;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x548C;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x8131;&#x786B;&#x7684;&#x4E0D;&#x660E; substrate(s) &#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Tyrosylprotein &#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;-2&#x3001; &#x9176;&#x50AC;&#x5316;&#x53CA;&#x5176;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178; O-&#x786B;&#x9178;&#x916F;&#x5316;&#xFF0C;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x80B2;&#x7684;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3002;

Tyrosine O-sulfation is a post-translational modification mediated by one of two Golgi tyrosylprotein sulfotransferases (TPST-1 and -2) expressed in all mammalian cells. Tyrosine sulfation plays an important role in the function of some known TPST substrates by enhancing protein-protein interactions. To explore the role of these enzymes in vivo and gain insight into other potential TPST substrates, TPST-2-deficient mice were generated by targeted disruption of the Tpst2 gene. Tpst2(+/-) mice appear normal and, when interbred, yield litters of normal size with a Mendelian distribution of the targeted mutation. Tpst2(-/-) mice have moderately delayed growth but appear healthy and attain normal body weight by 10 weeks of age. In contrast to Tpst1(-/-) males that have normal fertility, Tpst2(-/-) males are infertile. Tpst2(-/-) sperm are normal in number, morphology, and motility in normal media and appear to capacitate and undergo acrosomal exocytosis normally. However, they are severely defective in their motility in viscous media and in their ability to fertilize zona pellucida-intact eggs. Adhesion of Tpst2(-/-) sperm to the egg plasma membrane is reduced compared with wild type sperm, but sperm-egg fusion is similar or even increased. These data strongly suggest that tyrosine sulfation of unidentified substrate(s) play a crucial role in these processes and document for the first time the critical importance of post-translational tyrosine sulfation in male fertility.

Targeted disruption of tyrosylprotein sulfotransferase-2, an enzyme that catalyzes post-translational protein tyrosine O-sulfation, causes male infertility.

O la tyrosine-sulfatation est une modification post-traductionnelle m&eacute;di&eacute;e par l&#39;un des deux Golgi tyrosylprot&eacute;ine sulfotransf&eacute;rases (TPST-1 et -2) exprim&eacute;es dans toutes les cellules de mammif&egrave;res. La sulfatation tyrosine joue un r&ocirc;le important dans le fonctionnement de certains substrats TPST connus en am&eacute;liorant les interactions prot&eacute;ine-prot&eacute;ine. Pour explorer le r&ocirc;le de ces enzymes in vivo et avoir un aper&ccedil;u d&#39;autres substrats potentiels de TPST, souris d&eacute;ficientes TPST-2 ont &eacute;t&eacute; g&eacute;n&eacute;r&eacute;s par une interruption cibl&eacute;e du g&egrave;ne Tpst2. Tpst2(+/-) souris semblent normaux et, lors de l&#39;entrecrois&eacute;s, donnent port&eacute;es de taille normale avec un mend&eacute;lienne distribution de la mutation cibl&eacute;e. Tpst2(-/-) souris ont retard&eacute; la croissance mod&eacute;r&eacute;ment mais apparemment en bonne sant&eacute;s et atteignent le poids corporel normal de 10 semaines d&#39;&acirc;ge. Contrairement aux Tpst1(-/-) les hommes qui ont une fertilit&eacute; normale, Tpst2(-/-) m&acirc;les sont st&eacute;riles. Tpst2(-/-) sperme est normaux dans le nombre, la morphologie et la motilit&eacute; normale m&eacute;dias et semble capacitate et subissent une exocytose acrosomique normalement. Cependant, ils sont s&eacute;v&egrave;rement d&eacute;fectueuses dans leur motilit&eacute; dans les milieux visqueux et dans leur capacit&eacute; &agrave; f&eacute;conder les &oelig;ufs zone pellucide intactes. Adh&eacute;rence de Tpst2(-/-) sperme &agrave; la membrane plasmique de le &oelig;uf est r&eacute;duite compar&eacute; avec le sperme du type sauvage, mais fusion spermatozo&iuml;de-ovule est similaire ou m&ecirc;me augment&eacute;. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent fortement que la sulfatation tyrosine de fonction non identifi&eacute;es jouent un r&ocirc;le crucial dans ces processus et document pour la premi&egrave;re fois l&#39;importance cruciale de sulfatation tyrosine post-traductionnelles fertilit&eacute; masculine.

Interruption cibl&eacute;e de tyrosylprot&eacute;ine sulfotransf&eacute;rase-2, une enzyme qui catalyse post-traductionnelles prot&eacute;ine tyrosine O-sulfatation, causes de l&#39;infertilit&eacute; masculine.

Tyrosin O-Sulfatierung ist eine post-translationale Modifikation, vermittelt durch eine der beiden Golgi Tyrosylprotein Sulfotransferasen (TPST-1 und-2) ausgedr&uuml;ckt in allen S&auml;ugetierzellen. Tyrosin Sulfatierung spielt eine wichtige Rolle in der Funktion von einigen bekannten TPST-Substraten durch die St&auml;rkung von Protein-Protein Interaktionen. Um die Rolle dieser Enzyme in-vivo zu erkunden und Einblick in andere potenzielle TPST-Substrate, wurden TPST-2-defizienten M&auml;usen durch gezielte St&ouml;rung im Tpst2-gen erzeugt. Tpst2(+/-) M&auml;use erscheinen normal und wenn Wildschweinbest&auml;nde, Ausbeute W&uuml;rfe von normaler Gr&ouml;&szlig;e mit einem Mendelian Verteilung der zielgerichtete Mutation. Tpst2(-/-) M&auml;use haben m&auml;&szlig;ig verz&ouml;gert Wachstum aber gesund erscheinen und normales K&ouml;rpergewicht durch Alter 10 Wochen erreichen. Im Gegensatz zu Tpst1(-/-)-M&auml;nnchen, die normale Fruchtbarkeit haben, sind die Tpst2(-/-) M&auml;nner unfruchtbar. Tpst2(-/-) Spermien sind normal in Anzahl, Morphologie und Motilit&auml;t in normalen Medien und scheinen capacitate und acrosomal Exozytose normalerweise zu unterziehen. Sie sind jedoch stark Defekt in ihre Motilit&auml;t in viskosen Medien und in ihrer F&auml;higkeit, Zona Pellucida-intakte Eier zu befruchten. Haftung des Tpst2(-/-), die Spermien, die Ei-Plasmamembran reduziert werden im Vergleich zu Wildtyp-Sperma, aber Sperma-Ei-Fusion ist &auml;hnlich oder sogar erh&ouml;ht. Diesen Daten zufolge stark Tyrosin Sulfatierung von nicht identifizierten Substrate(s) spielen eine entscheidende Rolle in diesen Prozessen und Dokument zum ersten Mal die entscheidende Bedeutung von POSTTRANSLATIONELLE Tyrosin Sulfatierung in m&auml;nnliche Fruchtbarkeit.

Gezielte St&ouml;rung des Tyrosylprotein Sulfotransferase-2, ein Enzym, die POSTTRANSLATIONELLE Protein-Tyrosin O-Sulfatierung katalysiert, wird M&auml;nnliche Unfruchtbarkeit.

Tirosina O-solfatazione &egrave; una modifica alberino-di traduzione mediata da uno dei due sulfotransferases di tyrosylprotein di Golgi (TPST-1 e -2) espressa in tutte le cellule di mammiferi. Solfatazione tirosina svolge un ruolo importante nella funzione di alcuni noti substrati TPST migliorando le interazioni della proteina-proteina. Per esplorare il ruolo di questi enzimi in vivo e insight in altri substrati TPST potenziali di guadagno, mouse TPST-2-carenti sono stati generati da perturbazioni mirate del gene Tpst2. Tpst2(+/-) topi appaiono normali e, quando si incrociarono, restituiscono cucciolate di dimensioni normali con un mendeliana distribuzione della mutazione mirata. Tpst2(-/-) topi moderatamente hanno ritardato la crescita, ma appaiono sani e raggiungono il peso corporeo normale da 10 settimane di et&agrave;. A differenza di Tpst1(-/-) maschi che hanno normale fertilit&agrave;, Tpst2(-/-) maschi sono sterili. Tpst2(-/-) spermatozoi normali in numero, morfologia e motilit&agrave; normale media e sembrano rendere capace e subiscono normalmente esocitosi acrosomale. Tuttavia, essi sono gravemente difettosi nel loro motilit&agrave; nei mezzi viscosi e nella loro capacit&agrave; di fecondare le uova zona pellucida intatte. Adesione della Tpst2(-/-) sperma alla membrana del plasma uovo &egrave; ridotto rispetto al wild type sperma, ma la fusione spermatozoo-uovo &egrave; simile o addirittura aumentato. Questi dati suggeriscono fortemente che la solfatazione tirosina di substrate(s) non identificato giocano un ruolo cruciale in questi processi e documento per la prima volta l&#39;importanza critica di solfatazione tirosina alberino-di traduzione nella fertilit&agrave; maschile.

Perturbazione mirati di tyrosylprotein sulfotransferase-2, un enzima che catalizza la seguente tirosina della proteina alberino-di traduzione O solfatazione, cause di infertilit&agrave; maschile.

&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x5316; O - &#x3067;&#x3059; 2 &#x3064;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8; tyrosylprotein &#x786B;&#x9178;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE; (TPST-1 &#x3068;-2) &#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E; TPST &#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A; TPST &#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;TPST 2 &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Tpst2 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Tpst2(+/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6DF7;&#x8840;&#x3057;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3067;&#x3001;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x304F;&#x305A;&#x914D;&#x5E03;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D5E;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x53CE;&#x91CF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Tpst2(-/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x7DE9;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x304C;&#x9045;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5065;&#x5EB7;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x3057;&#x3001;10 &#x9031;&#x9F62;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x4F53;&#x91CD;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x901A;&#x5E38;&#x4E0D;&#x598A;&#x304C;&#x3042;&#x308B; Tpst1(-/-) &#x306E;&#x7537;&#x6027;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3001;Tpst2(-/-) &#x7537;&#x6027;&#x306F;&#x80A5;&#x6C83;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Tpst2(-/-) &#x7CBE;&#x5B50;&#x306F;&#x6570;, &#x5F62;&#x614B;, &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3067;&#x6B63;&#x5E38;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6CD5;&#x7684;&#x306B;&#x9069;&#x683C;&#x3057;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x5148;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x7C98;&#x6027;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x3068;&#x900F;&#x660E;&#x5E2F;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x5375;&#x3092;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5375;&#x819C;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11; Tpst2(-/-) &#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5375;&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x304B;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x6B63;&#x4F53;&#x4E0D;&#x660E; substrate(s) &#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3068;&#x30C9;&#x30AD;&#x30E5;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x598A;&#x306B;&#x5F37;&#x304F;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D5E;&#x3063;&#x305F;&#x4E2D;&#x65AD;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; O &#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x598A;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x9175;&#x7D20;&#x786B;&#x9178;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20; 2 tyrosylprotein &#x306E;&#x3002;

&#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; O sulfation&#xC740; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218;&#xC815; &#xB450; Golgi tyrosylprotein sulfotransferases&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; (TPST-1&#xACFC;-2) &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604;. &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; sulfation &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; TPST &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. Vivo&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; TPST &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;, TPST 2 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; Tpst2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xBD95;&#xAD34;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C;. Tpst2(+/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC815;&#xC0C1; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBC0F; &#xC774;&#xC885; &#xB54C; &#xD56D;&#xBCF5; &#xD55C; &#xBA58;&#xB378;&#xC758;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xD1B5; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC0C8;&#xB07C; &#xB300;&#xC0C1;&#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xBD84;&#xD3EC;. Tpst2(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC131;&#xC7A5; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xC81C; &#xBC95; &#xC788;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC640; &#xC2DC;&#xB300;&#xC758; 10 &#xC8FC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC815;&#xC0C1; &#xCCB4;&#xC911;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131;. &#xC815;&#xC0C1; &#xBD88; &#xC784; Tpst1(-/-) &#xB0A8;&#xC131; &#xB2EC;&#xB9AC; Tpst2(-/-) &#xB0A8;&#xC131;&#xC740; &#xBE44;&#xC625;&#xD55C;. Tpst2(-/-) &#xC815;&#xC790; &#xBC88;&#xD638;, &#xD615;&#xD0DC;, &#xBC0F; &#xC77C;&#xBC18; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC815;&#xC0C1; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; capacitate &#xBC0F; acrosomal exocytosis&#xB97C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1B;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC810;&#xC131; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC640; zona pellucida &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xACC4;&#xB780;&#xC744; &#xAE30;&#xB984; &#xC9C0; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Tpst2(-/-) &#xACC4;&#xB780; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC815;&#xC790; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xC811;&#xCC29; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC815;&#xC790;-&#xB09C; &#xC790; &#xD4E8;&#xC804;&#xC740; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xC2EC;&#xC9C0;&#xC5B4; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; sulfation &#xC815;&#xCCB4; &#xBD88;&#xBA85;&#xB41C; substrate(s)&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC2DC;&#xAC04;&#xACFC; &#xCC98;&#xC74C; &#xBB38;&#xC11C; &#xB2E2; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; sulfation &#xC911;&#xC694; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784;&#xC5D0; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tyrosylprotein sulfotransferase-2 &#xB2E2; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; O sulfation catalyzes, &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784; &#xC6D0;&#xC778; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC911;&#xB2E8;.

Tirosina O-sulfataci&oacute;n es una modificaci&oacute;n post-translacional mediada por uno de dos Golgi tyrosylprotein molecular (TPST-1 y -2) expresan en todas las c&eacute;lulas mam&iacute;feras. Sulfataci&oacute;n de tirosina desempe&ntilde;a un papel importante en la funci&oacute;n de algunos sustratos TPST conocidos por mejorar las interacciones prote&iacute;na-prote&iacute;na. Para explorar el papel de estas enzimas en vivo y profundizar en otros sustratos TPST potenciales, se generaron ratones TPST-2-deficientes interrupci&oacute;n espec&iacute;fica del gen Tpst2. Tpst2(+/-) ratones parecen normales y, cuando se cruzaron, producci&oacute;n camadas de tama&ntilde;o normal con un mendeliana distribuci&oacute;n de la mutaci&oacute;n espec&iacute;fica. Tpst2(-/-) ratones han retrasado moderado crecimiento pero aparecen sanos y alcanzan el peso corporal normal por 10 semanas de edad. En contraste con los varones de Tpst1(-/-) que tienen fertilidad normal, Tpst2(-/-) machos son est&eacute;riles. Tpst2(-/-) esperma es normal en n&uacute;mero, morfolog&iacute;a y motilidad en medios normales y parece capacitar y experimentar la exocitosis acros&oacute;mica normalmente. Sin embargo, est&aacute;n seriamente defectuosos en su motilidad en medios viscosos y en su capacidad para fertilizar los huevos zona pel&uacute;cida intactos. Adhesi&oacute;n de Tpst2(-/-) esperma a la membrana plasm&aacute;tica de huevo es reducida en comparaci&oacute;n con esperma de tipo salvaje, pero la fusi&oacute;n de la esperma-huevo es similar o incluso mayor. Estos datos sugieren fuertemente que la sulfataci&oacute;n tirosina de substratos no identificados desempe&ntilde;an un papel crucial en estos procesos y documento por primera vez la importancia cr&iacute;tica de sulfataci&oacute;n de poste-de translaci&oacute;n de la tirosina en la fertilidad masculina.

Interrupci&oacute;n espec&iacute;fica de tyrosylprotein sulfotransferasa-2, una enzima que cataliza la tirosina de la prote&iacute;na poste-de translaci&oacute;n O-sulfataci&oacute;n, causas de infertilidad masculina.

Prostasin &#x662F;&#x808C;&#x9187;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x94A0;&#x901A;&#x9053;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x5165;&#x4FB5;&#x9547;&#x538B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x8180;&#x80F1;&#x4E3A; prostasin &#x8868;&#x8FBE;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x5728;&#x9F20;&#x6807;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x8180;&#x80F1;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x65F6;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; prostasin mRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x548C; prostasin &#x86CB;&#x767D;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x8180;&#x80F1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x3002;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS) &#x8179;&#x8154;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x8180;&#x80F1; prostasin mRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x7F16;&#x7801;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x5408;&#x9176; (iNOS) &#x8868;&#x8FBE;&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176;-2 &#xFF08;COX-2&#xFF09;&#xFF0C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; (&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&gamma;&#xFF09;&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha;&#x3001; &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-1beta &#x548C;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-6 &#x6709;&#x589E;&#x9AD8;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9A71;&#x52A8;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; prostasin &#x540C;&#x6E90;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8180;&#x80F1;&#x5185;&#x51CF;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x751F; LPS &#x8BF1;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x672A;&#x5E9F;&#x9664;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;LPS &#x8BF1;&#x5BFC;&#x73AF;&#x6C27;&#x5316;&#x9176;-2&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha;&#x3001; &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-1beta&#x3001; &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-6 &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; prostasin &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; prostasin &#x8868;&#x8FBE;&#x8D28;&#x7C92;&#x5230;&#x9F20;&#x6807;&#x8180;&#x80F1;&#x4EA7;&#x751F;&#x5BF9;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8BF1;&#x751F;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176;-2 &#x6216;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x8870;&#x51CF;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x63A5;&#x6536;&#x50AC;&#x5316;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; prostasin &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8D28;&#x7C92;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8868;&#x73B0; iNOS &#x8BF1;&#x5BFC;&#x8870;&#x51CF;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA; prostasin &#x62E6;&#x622A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8180;&#x80F1;&#x53D1;&#x708E;&#x671F;&#x95F4;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Prostasin &#x6291;&#x5236;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8180;&#x80F1;&#x708E;&#x75C7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Prostasin is a glycosylphosphatidylinositol-anchored serine protease, with epithelial sodium channel activation and tumor invasion suppression activities. We identified the bladder as an expression site of prostasin. In the mouse, prostasin mRNA expression was detected by reverse transcription and real-time polymerase chain reaction in the bladder, and the prostasin protein was localized by immunohistochemistry in the urothelial cells. In mice injected intraperitoneally with bacterial lipopolysaccharide (LPS), bladder prostasin mRNA expression was downregulated, whereas the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), interferon-gamma (IFN-gamma), TNF-alpha, IL-1beta, and IL-6 was upregulated. Viral promoter-driven expression of the human prostasin homolog in the bladder of transgenic mice attenuated the LPS induction of iNOS but did not abolish the induction. LPS induction of COX-2, TNF-alpha, IL-1beta, and IL-6 expression, however, was not reduced by prostasin transgene expression. Liposome-mediated delivery of prostasin-expressing plasmid into mouse bladder produced similar attenuation effects on LPS-induced iNOS expression, while not affecting COX-2 or cytokine induction. Mice receiving plasmid expressing a catalytic mutant prostasin did not manifest the iNOS induction attenuation phenotype. We propose a proteolytic mechanism for prostasin to intercept cytokine signaling during LPS-induced bladder inflammation.

Prostasin attenuates inducible nitric oxide synthase expression in lipopolysaccharide-induced urinary bladder inflammation.

Prostasin est une prot&eacute;ase de s&eacute;rine ancr&eacute;es &agrave; un glycosylphosphatidylinositol, avec sodium &eacute;pith&eacute;lial canal activation et tumeur invasion activit&eacute;s d&#39;extinction. Nous avons identifi&eacute; la vessie comme un site d&#39;expression des prostasin. Chez la souris, prostasin expression de l&#39;ARNm a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;e par transcription inverse et la PCR en temps r&eacute;el dans la vessie, et la prot&eacute;ine prostasin a &eacute;t&eacute; localis&eacute;e par immunohistochimie dans les cellules uroth&eacute;liales. Chez les souris par injection intrap&eacute;riton&eacute;ale bact&eacute;rien lipopolysaccharides (LPS), expression de l&#39;ARNm prostasin vessie &eacute;tait diminu&eacute;e, alors que l&#39;expression de la monoxyde d&#39;azote synthase inductible (iNOS), cyclo-oxyg&eacute;nase-2 (COX-2), l&#39;interf&eacute;ron-gamma (IFN-gamma), TNF-alpha, IL-1beta et IL-6 a augment&eacute;. Expression de pilot&eacute;e par le promoteur virale de l&#39;homologue humain prostasin dans la vessie des souris transg&eacute;niques a att&eacute;nu&eacute; l&#39;induction LPS d&#39;iNOS mais n&#39;abolit pas l&#39;induction. Induction LPS de la COX-2, TNF-alpha, IL-1beta, et l&#39;expression d&#39;IL-6, cependant, n&#39;est pas r&eacute;duite par l&#39;expression du transg&egrave;ne prostasin. Livraison m&eacute;di&eacute;e par les liposomes de plasmide exprimant le prostasin dans la vessie des souris produit des effets similaires d&#39;att&eacute;nuation sur l&#39;expression d&#39;iNOS induite par LPS, tout en n&#39;affectant ne pas induction COX-2 ou de cytokines. Souris ayant re&ccedil;u le plasmide exprimant un catalytique prostasin mutant ne pas manifester le ph&eacute;notype d&#39;att&eacute;nuation induction iNOS. Nous proposons un m&eacute;canisme prot&eacute;olytique pour prostasin intercepter des signalisation lors d&#39;une inflammation de la vessie induite par LPS de cytokine.

Prostasin att&eacute;nue l&#39;expression synthase inductible monoxyde d&#39;azote dans l&#39;inflammation induite par le lipopolysaccharide de la vessie.

Prostasin ist ein Glykosylphosphatidyl verankerte Serinproteasen mit epithelialen Natrium-Kanal Aktivierung und Tumor Invasion Unterdr&uuml;ckung Aktivit&auml;ten. Wir identifiziert die Blase als ein Expression-Website des Prostasin. In der Maus Prostasin mRNA Ausdruck wurde durch reverse Transkription und Real-Time Polymerase-Kettenreaktion in der Blase festgestellt und das Prostasin-Protein durch Immunhistochemie in den Urothelial Zellen lokalisiert wurde. Bei M&auml;usen intraperitoneal injizierten, bakterielles Lipopolysaccharid (LPS), Blase Prostasin mRNA Ausdruck war Downregulated, w&auml;hrend der Ausdruck des durch Induktion erh&auml;ltlichen Stickstoffoxid Synthase (iNOS), Cyclooxygenase-2 (COX-2), Interferon-Gamma (IFN-Gamma), TNF-Alpha, IL-1beta und IL-6 war herraufreguliert. Virale Promotor-gesteuerte Ausdruck der menschlichen Prostasin Homolog in der Blase von transgenen M&auml;usen vermindert die LPS-Induktion der iNOS aber schaffte die Induktion nicht ab. LPS Induktion von COX-2, TNF-Alpha, IL-1beta, und IL-6-Ausdruck, wurde jedoch nicht durch Prostasin Transgenexpression reduziert. Liposomen-vermittelte Lieferung des Plasmids Prostasin-Ausdr&uuml;cken in Maus Blase produziert &auml;hnliche D&auml;mpfung-Auswirkungen auf die LPS-induzierte iNOS Ausdruck, w&auml;hrend die COX-2 oder Cytokine Induktion nicht zu beeintr&auml;chtigen. M&auml;use erhalten Plasmid auszudr&uuml;cken eine katalytische mutant Prostasin nicht der iNOS Induktion D&auml;mpfung Ph&auml;notyp manifestieren. Wir schlagen einen proteolytischen Mechanismus f&uuml;r Prostasin Cytokine Signalisierung w&auml;hrend LPS-induzierten Blase Entz&uuml;ndung abfangen.

Prostasin d&auml;mpft durch Induktion erh&auml;ltlichen Stickstoffoxid Synthase Ausdruck Harnblase Lipopolysaccharid-induzierte Entz&uuml;ndungen.

Prostasin &egrave; una proteasi serina glicosilfosfatidilinositolo ancorata, con sodio epiteliali canale attivazione e tumore invasione soppressione attivit&agrave;. Abbiamo individuato la vescica come un luogo di espressione di prostasin. Nel topo, espressione del mRNA di prostasin &egrave; stato rilevato da trascrizione d&#39;inversione e reazione a catena della polimerasi in tempo reale nella vescica, e la proteina di prostasin &egrave; stata localizzata da immunohistochemistry nelle cellule uroteliali. Nei topi con lipopolisaccaride batterica (LPS) iniettati per via intraperitoneale, espressione del mRNA della vescica prostasin era downregolata, mentre l&#39;espressione inducibile ossido nitrico sintasi (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), interferone-gamma (IFN-gamma), TNF-alfa, IL-1beta, IL-6 era sovraregolati. Espressione virale promotore-driven dell&#39;omologo umano prostasin nella vescica di topi transgenici attenuato l&#39;induzione LPS di iNOS ma non ha fatto abolire l&#39;induzione. Induzione LPS di COX-2, TNF-alfa, IL-1beta, ed espressione di IL-6, tuttavia, non &egrave; stato ridotto da prostasin espressione del transgene. Consegna liposoma-mediata del plasmide prostasin-esprimendo in vescica del mouse prodotto simili effetti di attenuazione sull&#39;espressione di iNOS indotta da LPS, mentre non influiscono sul COX-2 o cytokine induction. Topi ricevendo plasmide esprimendo una catalitica prostasin mutante ha fatto non manifestano il fenotipo iNOS induzione attenuazione. Proponiamo un meccanismo proteolitico per prostasin intercettare cytokine signaling durante l&#39;infiammazione della vescica LPS-indotta.

Prostasin attenua inducibile ossido nitrico sintasi espressione nell&#39;infiammazione della vescica urinaria indotta da lipopolisaccaride.

Prostasin &#x4E0A;&#x76AE;&#x578B;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x6D78;&#x6F64;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x306E;&#x4E00;&#x7A2E;&#x505C;&#x6CCA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x8180;&#x80F1;&#x304C; prostasin &#x306E;&#x5F0F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;prostasin mRNA &#x767A;&#x73FE;&#x9006;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x304C;&#x8180;&#x80F1;&#x5185;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;prostasin &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5C3F;&#x8DEF;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x65B9;&#x306B; downregulated&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9; (LPS) &#x3092;&#x6295;&#x4E0E;&#x3057;, &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8180;&#x80F1; prostasin mRNA &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8A98;&#x5C0E;&#x578B;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20; (iNOS) &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 2 (COX-2&#xFF09; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; &#xFF08;IFN-&gamma;)&#x3001;TNF-&alpha;, IL-&#xFF0D;1 &beta;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; IL 6 &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x767A;&#x73FE;&#x4EA2;&#x9032;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x99C6;&#x52D5;&#x767A;&#x73FE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593; prostasin &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E; LPS &#x8A98;&#x5C0E;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x306E;&#x5F31;&#x6BD2;&#x682A;&#x304C;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;COX-2&#x3001;TNF-&alpha;, IL &#x306E; LPS &#x8A98;&#x5C0E;-&#xFF0D;1 &beta; &#x3068; IL-6 &#x5F0F;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; prostasin &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Prostasin &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x914D;&#x4FE1;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6E1B;&#x8870;&#x52B9;&#x679C; cox-2 &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x9593;&#x3001;LPS iNOS &#x767A;&#x73FE;&#x751F;&#x7523;&#x3002;&#x89E6;&#x5A92;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53; prostasin &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3092;&#x53D7;&#x4FE1;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; iNOS &#x8A98;&#x5C0E;&#x6E1B;&#x8870;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x30DE;&#x30CB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;Prostasin LPS &#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x8180;&#x80F1;&#x708E;&#x75C7;&#x6642;&#x306B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

Prostasin &#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x767A;&#x73FE;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x8A98;&#x8D77;&#x8180;&#x80F1;&#x708E;&#x75C7;&#x306B;&#x6E1B;&#x8870;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Prostasin &#xC0C1;&#xD53C; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xCC44;&#xB110; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xC885;&#xC591; &#xCE68;&#xC785; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; glycosylphosphatidylinositol &#xACE0;&#xC815; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; prostasin&#xC758; &#xC2DD; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC29;&#xAD11;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, prostasin mRNA &#xC2DD; &#xBC18;&#xC804; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751;, &#xBC29;&#xAD11;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; prostasin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; urothelial &#xC140;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC220; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C;. Intraperitoneally &#xC138;&#xADE0; lipopolysaccharide (LPS)&#xC744; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC29;&#xAD11; prostasin mRNA &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; downregulated, &#xBC18;&#xBA74; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; synthase (iNOS) &#xC2DD; cyclooxygenase-2 (c o X-2), &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;-&#xAC10;&#xB9C8; (IFN-&#xAC10;&#xB9C8;) TNF-&#xC54C;&#xD30C;, &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-1beta, &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-6 upregulated &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xC758; &#xBC29;&#xAD11;&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; prostasin &#xCCB4;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xC2DD; Inos&#xC758; LPS &#xC720;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC1E0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC720;&#xB3C4; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; c o X-2, TNF-&#xC54C;&#xD30C;, &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;&#xC758; LPS &#xC720;&#xB3C4;-1beta, &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-6 &#xC2DD;,, &#xD558;&#xC9C0; prostasin transgene &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC29;&#xAD11;&#xC5D0; prostasin&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC758; liposome &#xC911;&#xC7AC; &#xBC30;&#xB2EC; LPS &#xC720;&#xBC1C; iNOS &#xC2DD; &#xD558;&#xC9C0; c o X-2 &#xB610;&#xB294; cytokine &#xC720;&#xB3C4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xAC10;&#xC1C4; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xCD09;&#xB9E4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; prostasin&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xBC1B;&#xACE0; &#xC950; iNOS &#xC720;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC1E0; &#xD615;&#xC744; &#xCC38;&#xACE0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; cytokine &#xC911; LPS &#xC720;&#xBC1C; &#xBC29;&#xAD11; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; prostasin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Prostasin &#xC624; &#xC90C; &#xBC29;&#xAD11; lipopolysaccharide &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC5D0; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; synthase &#xC2DD; &#xC57D;&#xD654;.

Prostasin es una proteasa de serina glicosilfosfatidilinositol anclada, con sodio epitelial canal activaci&oacute;n y tumor invasi&oacute;n supresi&oacute;n actividades. Identificamos la vejiga como un sitio de expresi&oacute;n de prostasin. En el rat&oacute;n, la expresi&oacute;n del mRNA prostasin fue detectada por transcripci&oacute;n reversa y reacci&oacute;n en cadena de polimerasa en tiempo real en la vejiga, y la prote&iacute;na de prostasin fue localizada por inmunohistoqu&iacute;mica en las c&eacute;lulas uroteliales. En ratones inyectados intraperitonealmente con lipopolisac&aacute;rido bacteriano (LPS), expresi&oacute;n del mRNA de vejiga prostasin fue regulada, mientras que la expresi&oacute;n de la &oacute;xido n&iacute;trico sintasa inducible (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), interfer&oacute;n-gamma (IFN-gamma), TNF-alfa, IL-1beta e IL-6 fue el alza. Expresi&oacute;n basadas en promotor viral del hom&oacute;logo humano prostasin en la vejiga de ratones transg&eacute;nicos aten&uacute;a la inducci&oacute;n LPS de iNOS pero no suprimi&oacute; la inducci&oacute;n. Inducci&oacute;n de LPS de la COX-2, TNF-alfa, IL-1beta, y la expresi&oacute;n de IL-6, sin embargo, no se redujo por la expresi&oacute;n del transg&eacute;n de prostasin. Entrega liposoma-mediada del pl&aacute;smido prostasin-expresando en vejiga rat&oacute;n hab&iacute;a producido efectos similares de atenuaci&oacute;n en la expresi&oacute;n de iNOS inducida por LPS, mientras que no afecta a la inducci&oacute;n de la COX-2 o citoquinas. Ratones recibiendo pl&aacute;smido expresando un catal&iacute;tico prostasin mutante no manifest&oacute; el fenotipo de atenuaci&oacute;n de la inducci&oacute;n de iNOS. Proponemos un mecanismo proteol&iacute;tico para prostasin interceptar la citoquina se&ntilde;alizaci&oacute;n durante la inflamaci&oacute;n inducida por LPS de la vejiga.

Prostasin aten&uacute;a la expresi&oacute;n de sintasa inducible del &oacute;xido n&iacute;trico en la inflamaci&oacute;n de la vejiga urinaria inducida por lipopolisac&aacute;rido.

&#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x793A;&#x4ECE;&#x808C;&#x9187;&#x805A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x4E2D;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7CBE;&#x5B50; 5-&#x78F7;&#x9178;&#x9176; Inpp5b &#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x80A5;&#x6599;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5375;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D; A &#x53BB;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x9644;&#x777E;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x5904;&#x7406;&#x548C;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 2 (ADAM2)&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E2D;&#x592E;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x5047;&#x8BF4;&#x662F;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x4E9A;&#x5F53;&#x5288;&#x5C06;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x7CBE;&#x5375;&#x7ED3;&#x5408;&#x548C;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x4E0E;&#x51CF;&#x5C11; Inpp5b(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x80B2;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;[&#x4EA4;&#x914D;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x3001; &#x4F53;&#x5916;&#x53D7;&#x7CBE; (IVF) &#x6D4B;&#x5B9A;&#x548C; ADAM2 &#x548C; ADAM3 &#x5288;&#x88C2;] &#x751F;&#x6B96;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x7EC8;&#x7ED3;&#x70B9;&#x4E0E;&#x6210;&#x5BF9;&#x76F8;&#x5173;&#x5206;&#x6790;&#x7528;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5404;&#x79CD;&#x53C2;&#x6570;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x7531;&#x96C4;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4E0A;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x4ECE; Inpp5b(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x79CD;&#x7CBE;&#x5B50;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x53D7;&#x7CBE;&#x7684;&#x5375;&#x900F;&#x660E;&#x5E26;&#x514D;&#x8D39;&#x9E21;&#x86CB;&#x7531;&#x4E8E;&#x51CF;&#x5C11;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7684;&#x5375;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x914D;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;IZUMO1&#xFF0C;Inpp5b null &#x7CBE;&#x5B50;&#x4E2D;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6B63;&#x5E38;&#x3002;&#x4EE4;&#x6211;&#x4EEC;&#x5403;&#x60CA;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E;&#x4EE5;&#x5F80;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E9A;&#x5F53;&#x5288;&#x88C2;&#x53EA;&#x662F;&#x5C0F;&#x5E45;&#x65E0;&#x6570; Inpp5b null &#x7537;&#x6027;&#x53D7;&#x635F;&#xFF0C;&#x662F;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2A;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5404;&#x4E0D;&#x76F8;&#x540C;&#x3002;&#x5728;&#x4EA4;&#x914D;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x6027;&#x80FD;&#x4E5F;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x4EE5;&#x5F80;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;&#x6210;&#x5BF9;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; ADAM2 &#x548C; ADAM3 &#x5288;&#x88C2;&#x5448;&#x663E;&#x8457;&#x6B63;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5904;&#x7406;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53D1;&#x751F;&#x7531;&#x76F8;&#x5173;/&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5426;&#x5219;&#xFF0C;&#x6709;&#x751F;&#x6B96;&#x7684;&#x7AEF;&#x70B9;&#x8FDB;&#x884C;&#x68C0;&#x67E5;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x5206;&#x6790; Inpp5b(-/-) &#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x8FD8;&#x591A;&#x5143;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x5206;&#x5B50;&#x7279;&#x6027;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x529F;&#x80FD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x7684;&#x84DD;&#x56FE;&#x3002;

Inpp5b/&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x7537;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x56E0;&#x7D20;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x7F3A;&#x9677;&#x975E;&#x5747;&#x8D28;&#x6027;&#x751F;&#x80B2;&#x7387;&#x3001; &#x7CBE;&#x5375;&#x819C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E9A;&#x5F53;&#x65AF;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x88C2;&#x89E3;&#x3002;

Past work indicated that sperm from mice deficient in the inositol polyphosphate 5-phosphatase Inpp5b have reduced ability to fertilize eggs in vitro and reduced epididymal proteolytic processing of the sperm protein A Disintegrin and A Metalloprotease 2 (ADAM2). On the basis of these data, our central working hypothesis was that reduced ADAM cleavage would correlate with reduced sperm-egg binding and fusion and in turn with reduced male fertility in Inpp5b(-/-) mice. Multiple endpoints of reproductive functions [mating trials, in vitro fertilization (IVF) assays and ADAM2 and ADAM3 cleavage] were investigated on a male-by-male basis, with pair-wise correlation analysis used to assess the relationships between these various parameters. Motile sperm from Inpp5b(-/-) mice showed significantly reduced fertilization of zona pellucida-free eggs due to reduced binding to the egg plasma membrane and subsequent fusion. Localization of a mouse sperm protein required for gamete fusion, IZUMO1, appears normal in Inpp5b-null sperm. To our surprise and differing from previous reports, we found that ADAM cleavage was only modestly impaired in numerous Inpp5b-null males and varied between individual animals. Performance in mating trials also differed from past reports. The pair-wise correlation analysis revealed that ADAM2 and ADAM3 cleavage was positively correlated, suggesting that processing of these proteins occurs by related/identical mechanisms, but otherwise, there were few correlations between the reproductive endpoints examined here. Nevertheless, this work provides detailed analysis of the Inpp5b(-/-) phenotype and also a blueprint for multivariate analysis to examine relationships between molecular characteristics and in vitro and in vivo physiological functions.

Multivariate analysis of male reproductive function in Inpp5b-/- mice reveals heterogeneity in defects in fertility, sperm-egg membrane interaction and proteolytic cleavage of sperm ADAMs.

Travail a indiqu&eacute; que des spermatozo&iuml;des de souris d&eacute;ficientes en polyphosphate de l&#39;inositol 5-phosphatase Inpp5b ont r&eacute;duit capacit&eacute; &agrave; f&eacute;conder les oeufs in vitro et r&eacute;duite dans l&#39;&eacute;pididyme prot&eacute;olytique de la prot&eacute;ine de sperme A Disintegrin et A m&eacute;talloprot&eacute;ase 2 (ADAM2). Sur la base de ces donn&eacute;es, notre hypoth&egrave;se de travail centrale &eacute;tait que r&eacute;duit ADAM clivage serait en corr&eacute;lation avec la fusion et liaison spermatozo&iuml;de-ovule r&eacute;duit et &agrave; son tour r&eacute;duit la fertilit&eacute; masculine chez la souris Inpp5b(-/-). Plusieurs points de terminaison de la fonction reproductrice [d&#39;accouplement des essais, des essais de f&eacute;condation in vitro (FIV) et clivage ADAM2 et ADAM3] ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;es sur une base de par-m&acirc;le, avec une analyse de corr&eacute;lation par paire utilis&eacute;e pour &eacute;valuer les relations entre ces diff&eacute;rents param&egrave;tres. Sperme motile de Inpp5b(-/-) souris a montr&eacute; significativement r&eacute;duite la fertilisation des oeufs zone pellucide libres en raison de la liaison r&eacute;duite &agrave; la membrane plasmique &oelig;uf et la fusion subs&eacute;quente. Localisation d&#39;une prot&eacute;ine de spermatozo&iuml;des de souris n&eacute;cessaire pour la fusion des gam&egrave;tes, IZUMO1, apparaisse normale sous sperme Inpp5b null. &Agrave; notre grande surprise et diff&eacute;rant des rapports pr&eacute;c&eacute;dents, nous avons constat&eacute; que le clivage ADAM &eacute;tait seulement modestement alt&eacute;r&eacute; chez les nombreux hommes Inpp5b null et variait entre individus. Performance des essais d&#39;accouplement diff&egrave;re &eacute;galement des rapports pr&eacute;c&eacute;dents. L&#39;analyse de corr&eacute;lation par paire a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que le clivage ADAM2 et ADAM3 &eacute;tait positivement corr&eacute;l&eacute;, sugg&eacute;rant que le traitement de ces prot&eacute;ines se produit par des m&eacute;canismes associ&eacute;s/identiques, mais dans le cas contraire, il y avait peu de corr&eacute;lations entre les param&egrave;tres reproduction examin&eacute;s ici. N&eacute;anmoins, cet ouvrage fournit une analyse d&eacute;taill&eacute;e du ph&eacute;notype Inpp5b(-/-) et aussi un mod&egrave;le pour l&#39;analyse multivari&eacute;e &eacute;tudier le lien entre les caract&eacute;ristiques mol&eacute;culaires et les fonctions physiologiques in vitro et in vivo.

Analyse multivari&eacute;e de la fonction reproductrice m&acirc;le chez les souris Inpp5b-/ r&eacute;v&egrave;le une h&eacute;t&eacute;rog&eacute;n&eacute;it&eacute; dans les d&eacute;fauts dans la fertilit&eacute;, l&#39;interaction de membrane de spermatozo&iuml;de-ovule et clivage prot&eacute;olytique du sperme ADAMs.

Vergangene Arbeit angegeben Eier, dass Sperma von den M&auml;usen einen Mangel an der Inosit Polyphosphate 5-Phosphatase Inpp5b F&auml;higkeit, d&uuml;ngen verringert haben in vitro und reduzierte epididymale proteolytische Verarbeitung das Sperma Protein A Disintegrin und A Metalloproteinase 2 (ADAM2). Auf Basis dieser Daten wurde unsere zentrale Arbeitshypothese, dass reduzierte ADAM Spaltung mit reduzierten Sperma-Ei-Bindung und Fusion korrelieren w&uuml;rde und wiederum mit m&auml;nnliche Fruchtbarkeit bei Inpp5b(-/-) M&auml;usen reduziert. Mehrere Endpunkte der reproduktiven Funktionen [Paarung Studien, in-vitro-Fertilisation (IVF) Assays und ADAM2 und ADAM3 Spaltung] wurden auf Basis von Stecker-Stecker mit paarweisen Korrelationsanalyse zur Beurteilung der Beziehungen zwischen diesen verschiedenen Parametern untersucht. Bewegliche Spermien von Inpp5b(-/-) M&auml;usen zeigten deutlich reduzierten Befruchtung der Zona Pellucida-freie Eier aufgrund eingeschr&auml;nkter Bindung an die Plasmamembran der Eizelle und anschlie&szlig;ende Fusion. Lokalisierung eines Maus-Sperma-Proteins erforderlich f&uuml;r Gamet Fusion, IZUMO1, wird in Inpp5b-Null Spermien normal angezeigt. Zu unserer &Uuml;berraschung und unterscheiden Sie sich von fr&uuml;heren Berichten fanden wir, dass ADAM Spaltung nur geringf&uuml;gig in zahlreichen Inpp5b-Null-M&auml;nner beeintr&auml;chtigt und sich zwischen einzelnen Tieren bewegten. Leistung in Paarung Studien unterschieden sich auch aus vergangenen Berichten. Die paarweisen Korrelationsanalyse ergab, dass ADAM2 und ADAM3 Spaltung positiv darauf hindeutet korrelierte, dass die Verarbeitung dieser Proteine erfolgt durch &auml;hnliche/identische Mechanismen, aber ansonsten gab es einige Korrelationen zwischen den reproduktiven Endpunkten, die hier untersucht. Dennoch bietet diese Arbeit detaillierte Analyse der Inpp5b(-/-)-Ph&auml;notyp und auch eine Blaupause f&uuml;r multivariate Analyse Beziehungen zwischen molekularen Eigenschaften und physiologischen Funktionen von in-vitro und in vivo zu untersuchen.

Multivariate Analyse der m&auml;nnlichen Fortpflanzungsfunktion in Inpp5b-/-M&auml;use enth&uuml;llt Heterogenit&auml;t in M&auml;ngel in Fruchtbarkeit, Sperma-Ei-Membraninteraktion und proteolytische Spaltung der Spermien ADAMs.

Ultimi lavori indicato che sperma da topi carenti dell&#39;inositolo polifosfato 5-fosfatasi Inpp5b hanno ridotta capacit&agrave; di fecondare le uova in vitro e ridotto dell&#39;epididimo trattamento proteolitico della proteina dello sperma A Disintegrin e A Metalloprotease 2 (ADAM2). Sulla base di questi dati, la nostra ipotesi di lavoro centrale era che ridotto clivaggio ADAM sarebbe correlare con fusione e associazione ridotta degli spermatozoi-uovo e a sua volta con ridotta fertilit&agrave; maschile nei topi Inpp5b(-/-). Pi&ugrave; endpoint delle funzioni riproduttive [accoppiamento prove, fecondazione in vitro (IVF) dosaggi e scissione ADAM2 e ADAM3] sono state studiate su base di maschio-maschio, con analisi di correlazione pairwise utilizzati per valutare le relazioni tra questi vari parametri. Spermatozoi motili da Inpp5b(-/-) topi ha dimostrato significativamente ridotta fertilizzazione delle uova zona pellucida-libero a causa della ridotta associazione alla membrana plasmatica uovo e successiva fusione. Localizzazione di una proteina di sperma del mouse necessaria per la fusione del gamete, IZUMO1, appare normale in sperma Inpp5b-null. Con nostra sorpresa e differiscono dalle precedenti relazioni, abbiamo scoperto che clivaggio Adamo era solo modestamente alterato nei numerosi maschi Inpp5b-null e variava tra singoli animali. Prestazioni in prove di accoppiamento differiscono anche da precedenti relazioni. L&#39;analisi di correlazione pairwise ha rivelato che scollatura ADAM2 e ADAM3 &egrave; stata positivamente correlata, suggerendo che elaborazione di queste proteine avviene tramite meccanismi correlati identici, ma in caso contrario, c&#39;erano poche correlazioni tra gli endpoint riproduttivi qui esaminati. Tuttavia, questo lavoro fornisce un&#39;analisi dettagliata del fenotipo Inpp5b(-/-) e anche un modello di analisi multivariata esaminare le relazioni tra le caratteristiche molecolari e le funzioni fisiologiche in vitro e in vivo.

Analisi multivariata della funzione riproduttiva maschile nel Inpp5b-/-mice rivelano eterogeneit&agrave; nei difetti in fertilit&agrave;, sperma-uovo membrana interazione e clivaggio proteolitico di sperma ADAMs.

&#x904E;&#x53BB;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306E;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB; &#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x304C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B; 5 &#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC; Inpp5b &#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; A Disintegrin &#x306E; in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x4E0A;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x89E3;&#x51E6;&#x7406;&#x3068; A &#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 2 (ADAM2 &#x3092;) &#x5375;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x524A;&#x6E1B;&#x30A2;&#x30C0;&#x30E0;&#x80F8;&#x306E;&#x8C37;&#x9593;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5375;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x3057;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x598A; Inpp5b(-/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;[&#x8A66;&#x9A13;&#x3001;&#x4F53;&#x5916;&#x53D7;&#x7CBE; &#xFF08;IVF&#xFF09; &#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3001;ADAM2 &#x3068; ADAM3 &#x306E;&#x958B;&#x88C2;&#x3092;&#x4EA4;&#x914D;] &#x751F;&#x6B96;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x30AA;&#x30B9;-&#x30AA;&#x30B9;&#x304C;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x5404;&#x7A2E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EF;&#x30A4;&#x30BA;&#x76F8;&#x95A2;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;Inpp5b(-/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x904B;&#x52D5;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x900F;&#x660E;&#x5E2F;&#x7121;&#x6599;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x5375;&#x819C;&#x3068;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;IZUMO1&#x3001;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5C40;&#x5728; Inpp5b null &#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x9A5A;&#x304D;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30C0;&#x30E0;&#x80F8;&#x306E;&#x8C37;&#x9593;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3060;&#x3051;&#x63A7;&#x3048;&#x3081; Inpp5b null &#x7537;&#x6027;&#x3067;&#x306F;&#x6570;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x8A66;&#x9A13;&#x4EA4;&#x914D;&#x3067;&#x306F;&#x904E;&#x53BB;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x66F8;&#x304B;&#x3089;&#x3082;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EF;&#x30A4;&#x30BA;&#x76F8;&#x95A2;&#x5206;&#x6790;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;/&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x751F;&#x6B96;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506; ADAM2 &#x3068; ADAM3 &#x306E;&#x958B;&#x88C2;&#x306B;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x76F8;&#x95A2;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F; Inpp5b(-/-) &#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x7279;&#x6027;&#x3068; in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x591A;&#x5909;&#x91CF;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9752;&#x5199;&#x771F;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x591A;&#x5909;&#x91CF;&#x89E3;&#x6790;&#x306E; Inpp5b/&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x96C4;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x6027;&#x306F;&#x4E0D;&#x598A;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x5375;&#x819C;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x958B;&#x88C2;&#x7CBE;&#x5B50;&#x30A2;&#x30C0;&#x30E0;&#x30B9;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xACFC;&#xAC70;&#xC758; &#xC791;&#xC5C5; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; A Disintegrin&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; epididymal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCC98;&#xB9AC; &#xBC0F; A Metalloprotease 2 (ADAM2) &#xACC4;&#xB780; inositol polyphosphate &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC790; 5-&#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; Inpp5b &#xAE30;&#xB984; &#xC9C0; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0; &#xADFC;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC791;&#xC5C5; &#xAC00;&#xC124; &#xAC10;&#xC18C; &#xC544;&#xB2F4; &#xBD84;&#xC5F4; &#xAC10;&#xC18C; &#xC815;&#xC790; &#xACC4;&#xB780; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xD4E8;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xAC83; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD558; &#xACE0; &#xCC28;&#xB840; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; Inpp5b(-/-) &#xC950;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. [&#xC2DC;&#xB828;, &#xCCB4; &#xC678; &#xC218;&#xC815; (IVF) &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xACFC; ADAM2 &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; ADAM3 &#xBD84;&#xC5F4; &#xC9DD;&#xC9D3;&#xAE30;] &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB05D;&#xC810;&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xAC04;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC30D; &#xB2E8;&#xC704; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D;-&#xB0A8;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Inpp5b(-/-) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC815;&#xC790; zona pellucida &#xBB34;&#xB8CC; &#xACC4;&#xB780; &#xACC4;&#xB780; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; &#xD4E8;&#xC804; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC778;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC218;&#xC815;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. IZUMO1, &#xC0DD;&#xC2DD; &#xCCB4; &#xC735;&#xD569;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Inpp5b null &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB180;&#xB77C;&#xC6C0;&#xACFC; &#xC774;&#xC804; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC544;&#xB2F4; &#xBD84;&#xC5F4;&#xB9CC; &#xACB8;&#xC190; &#xD558; &#xAC8C; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; Inpp5b null &#xB0A8;&#xC131;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xC788;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAC04;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC131;&#xB2A5; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC9DD;&#xC9D3;&#xAE30;&#xC5D0; &#xACFC;&#xAC70;&#xC758; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2EC;&#xB790;&#xB2E4;. &#xC30D; &#xB2E8;&#xC704; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294; ADAM2 &#xBC0F; ADAM3 &#xC720; &#xBC29; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xACE8;&#xC9DC;&#xAE30;&#xB294; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xAD00;, &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB4E4;&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD00;&#xB828;/&#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB807;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74;, &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xAE30; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xB05D;&#xC810; &#xAC04;&#xC5D0; &#xBA87; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;,&#xC774; &#xC791;&#xD488; &#xB610;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC131; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC218; &#xBCC0;&#xC218; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCCAD;&#xC0AC;&#xC9C4; Inpp5b(-/-) &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC758; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0A8;&#xC131; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30;&#xB2A5; Inpp5b/&#xC950;&#xC758; &#xBCF5;&#xC218; &#xBCC0;&#xC218; &#xBD84;&#xC11D; &#xBD88; &#xC784;, &#xC815;&#xC790; &#xACC4;&#xB780; &#xB9C9; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC815;&#xC790; &#xC544;&#xB2F4;&#xC2A4;&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0;&#xC774; &#xC9C8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

M&aacute;s all&aacute; de trabajo indicada que los espermatozoides de ratones deficientes en el polifosfato de inositol 5-fosfatasa Inpp5b han reducido capacidad de fertilizaci&oacute;n huevos procesamiento proteol&iacute;tico epid&iacute;dimo in vitro y la reducci&oacute;n de la prote&iacute;na de la esperma A conclusi&oacute;n y A Metaloproteinasa 2 (ADAM2). Sobre la base de estos datos, nuestra hip&oacute;tesis central del trabajo fue que reducido escote ADAM correlacionar&iacute;an con fusi&oacute;n y Uni&oacute;n de esperma reducida-huevo y alternadamente con la reducci&oacute;n de la fertilidad masculina en ratones Inpp5b(-/-). M&uacute;ltiples criterios de valoraci&oacute;n de las funciones reproductivas [apareamiento ensayos, ensayos de fertilizaci&oacute;n in vitro (FIV) y escote ADAM2 y ADAM3] investigaron sobre una base de hombre por hombre, con an&aacute;lisis de correlaci&oacute;n pares utilizados para evaluar las relaciones entre estos distintos par&aacute;metros. Espermatozoides m&oacute;viles de Inpp5b(-/-) ratones demostraron fertilizaci&oacute;n significativamente reducida de huevos sin zona pel&uacute;cida debido a atar reducido a la membrana plasm&aacute;tica de huevo y posterior fusi&oacute;n. Localizaci&oacute;n de una prote&iacute;na de rat&oacute;n esperma necesaria para la fusi&oacute;n de gametos, IZUMO1, parece normal en esperma de Inpp5b-null. Para nuestra sorpresa y a diferencia de informes anteriores, encontramos que escote ADAM s&oacute;lo modestamente fue deteriorada en numerosos machos Inpp5b-null y vari&oacute; entre los individuos. Rendimiento en pruebas de acoplamiento tambi&eacute;n se diferenci&oacute; de informes anteriores. El an&aacute;lisis de correlaci&oacute;n pares revel&oacute; que escote ADAM2 y ADAM3 se correlacion&oacute; positivamente, sugiriendo que procesamiento de estas prote&iacute;nas se produce por mecanismos relacionados/id&eacute;nticos, pero de lo contrario, hubo algunas correlaciones entre los extremos reproductivas aqu&iacute; examinados. Sin embargo, esta obra ofrece un an&aacute;lisis detallado del fenotipo Inpp5b(-/-) y tambi&eacute;n un plan para an&aacute;lisis multivariado examinar las relaciones entre las caracter&iacute;sticas moleculares y funciones fisiol&oacute;gicas in vitro e in vivo.

An&aacute;lisis multivariado de la funci&oacute;n reproductiva masculina en Inpp5b-/-ratones revelan heterogeneidad en defectos en la fertilidad, interacci&oacute;n de la membrana del espermatozoide-huevo y clivaje proteol&iacute;tico de esperma ADAMs.

&#x65BD;&#x80A5;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x8BB8;&#x591A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x65BD;&#x80A5;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E13;&#x4E1A;&#x5316;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x7CBE;&#x5B50;&#x548C;&#x5375;&#x5B50;) &#x7684;&#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x89E6;&#x53D1;&#x4ECE;&#x9759;&#x6B62;&#xFF0C;&#x88AB;&#x6355;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x548C;&#x5375;&#x5B50;&#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x6F5C;&#x529B;&#x548C;&#x7CBE;&#x786E;&#x7684;&#x534F;&#x8C03;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x529F;&#x80FD;&#x662F;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7EBF;&#x866B;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x6709;&#x4EF7;&#x503C;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8BC6;&#x522B;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x4E0E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FC7;&#x6E21;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x4E86;&#x89E3;&#x63A7;&#x5236;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x53D7;&#x7CBE;&#x548C;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FC7;&#x6E21;&#x671F;&#x95F4;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x914D;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5F53;&#x524D;&#x77E5;&#x8BC6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F1A;&#x4E5F;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7EBF;&#x866B;&#x5230;&#x4E86;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#x3001; &#x4E13;&#x95E8;&#x9F20;&#x6807;&#xFF0C;&#x578B;&#x53F7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;

&#x65BD;&#x80A5;&#x548C;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FC7;&#x6E21;&#x3002;

Fertilization is a complex process comprised of numerous steps. During fertilization, two highly specialized and differentiated cells (sperm and egg) fuse and subsequently trigger the development of an embryo from a quiescent, arrested oocyte. Molecular interactions between the sperm and egg are necessary for regulating the developmental potential of an oocyte, and precise coordination and regulation of gene expression and protein function are critical for proper embryonic development. The nematode Caenorhabditis elegans has emerged as a valuable model system for identifying genes involved in fertilization and the oocyte-to-embryo transition as well as for understanding the molecular mechanisms that govern these processes. In this review, we will address current knowledge of the molecular underpinnings of gamete interactions during fertilization and the oocyte-to-embryo transition in C. elegans. We will also compare our knowledge of these processes in C. elegans to what is known about similar processes in mammalian, specifically mouse, model systems.

Fertilization and the oocyte-to-embryo transition in C. elegans.

La fertilisation est un processus complexe compos&#xE9; de nombreuses &#xE9;tapes. Lors de la f&#xE9;condation, deux cellules hautement sp&#xE9;cialis&#xE9;es et diff&#xE9;renci&#xE9;es (sperme et l&#x26;#39;ovule) fusible et par la suite d&#xE9;clencher le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un embryon &#xE0; partir d&#x26;#39;un repos, ovocyte arr&#xEA;t&#xE9;. Les interactions mol&#xE9;culaires entre le spermatozo&#xEF;de et l&#x26;#39;ovule sont n&#xE9;cessaires pour la r&#xE9;gulation du potentiel de d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un ovocyte, et la coordination pr&#xE9;cise et r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique et la fonction des prot&#xE9;ines sont essentielles pour le d&#xE9;veloppement embryonnaire bon. Les n&#xE9;matode Caenorhabditis elegans a &#xE9;merg&#xE9; comme un syst&#xE8;me mod&#xE8;le pr&#xE9;cieux pour identifier les g&#xE8;nes impliqu&#xE9;s dans la f&#xE9;condation des ovocytes et la transition &#xE0; l&#x26;#39;embryon ainsi que pour la compr&#xE9;hension des m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui r&#xE9;gissent ces processus. Dans cette revue, nous nous pencherons sur les connaissances actuelles des m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires des interactions lors de la f&#xE9;condation des gam&#xE8;tes et la transition ovocyte &#xE0; l&#x26;#39;embryon de C. elegans. Nous comparons &#xE9;galement notre connaissance de ces processus chez C. elegans pour ce qui est connu au sujet des processus similaires dans les syst&#xE8;mes mammif&#xE8;res, en particulier de souris mod&#xE8;les,.

La f&#xE9;condation des ovocytes et la transition &#xE0; l&#x26;#39;embryon de C. elegans

Befruchtung ist ein komplexer Prozess, der zahlreiche Schritte umfasst. W&auml;hrend der Befruchtung zwei hochgradig spezialisierte und differenzierte Zellen (Spermium und Eizelle) Sicherung und anschlie&szlig;end die Entwicklung eines Embryos aus einem Ruhezustand, verhafteten Eizelle ausl&ouml;sen. Molekulare Wechselwirkungen zwischen dem Sperma und Ei sind notwendig f&uuml;r die Regulierung des entwicklungspolitischen Potenzials der eine Eizelle und pr&auml;zise Koordination und Regulierung der Gen-Expression und Protein-Funktion sind entscheidend f&uuml;r eine ordnungsgem&auml;&szlig;e embryonale Entwicklung. Die Fadenw&uuml;rmer der Fadenwurm Caenorhabditis Elegans entstanden als wertvolle Modellsystem zur Identifizierung von Genen, die Befruchtung und die Eizelle-Embryo-&Uuml;bergang ebenso wie f&uuml;r das Verst&auml;ndnis der molekularen Mechanismen, die diese Prozesse steuern. In diesem Bericht wird wir aktuelles Wissen &uuml;ber die molekularen Grundlagen von Gamet Interaktionen w&auml;hrend der Befruchtung und der Eizelle-Embryo-&Uuml;bergang in C. Elegans befassen. Wir vergleichen auch unser Wissen &uuml;ber diese Prozesse in C. Elegans zu was &uuml;ber &auml;hnliche Prozesse in S&auml;ugetieren bekannt ist, speziell Maus, model Systeme.

D&uuml;ngung und der Eizelle-Embryo-&Uuml;bergang in C. Elegans.

La fecondazione &egrave; un processo complesso composto da numerosi passaggi. Durante la fecondazione, due altamente specializzati e le cellule differenziate (spermatozoo e uovo) fusibile e successivamente innescano lo sviluppo di un embrione da un ovocita quiescente, arrestato. Interazioni molecolari tra spermatozoo e uovo sono necessarie per regolare il potenziale dello sviluppo di un ovocita e preciso coordinamento e regolazione della funzione della proteina e di espressione del gene sono fondamentali per il corretto sviluppo embrionale. Il nematode Caenorhabditis elegans &egrave; emerso come un prezioso modello sistema per l&#39;identificazione di geni coinvolti nella fecondazione e la transizione degli ovociti-embrioni nonch&eacute; per quanto riguarda la comprensione dei meccanismi molecolari che regolano questi processi. In questa recensione, si affronter&agrave; la conoscenza corrente del underpinnings molecolare delle interazioni tra gameti durante la fecondazione e la transizione degli ovociti-embrioni in c. elegans. Anche confrontare la nostra conoscenza di questi processi in c. elegans a ci&ograve; che &egrave; noto circa i processi simili a mammiferi, in particolare il mouse, sistemi di modello.

Fecondazione e la transizione degli ovociti-embrioni in c. elegans.

&#x53D7;&#x7CBE;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x53D7;&#x7CBE;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x5C02;&#x9580;&#x5316;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3068;&#x5375;&#x5B50;&#xFF09;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BA;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x9759;&#x6B62;&#x3001;&#x902E;&#x6355;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3068;&#x5375;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3001;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x8ABF;&#x6574;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306F;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3068;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7CFB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3068;C. elegans&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x6642;&#x306B;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x76E4;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#xB7;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x7DDA;&#x866B;C. elegans&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x53D7;&#x7CBE;&#x3068;C. elegans&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;

&#xC218;&#xC815; &#xB2E4; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xACFC;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC815;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB450; &#xB192;&#xAC8C; &#xC804;&#xBB38;&#xD654; &#xBC0F; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; (&#xC815;&#xC790;&#xC640; &#xB09C; &#xC790;) &#xC735;&#xD569; &#xBC0F; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xBB34;&#xBD80;&#xD558;, &#xCCB4;&#xD3EC; &#xB41C; oocyte&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC744; &#xBC29; &#xC544; &#xC1E0;. &#xC815;&#xC790;&#xC640; &#xB09C; &#xC790; &#xAC04;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB41C; oocyte&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB418;&#xBA70; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC870;&#xC815;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC740; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;. &#xC120; &#xCDA9; &#xB958; Caenorhabditis elegans &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xB610;&#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; oocyte &#xBC30;&#xC544; &#xC804;&#xD658;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C; &#xB5A0;&#xC624;&#xB974;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC218;&#xC815; &#xBC0F; C. elegans oocyte &#xBC30;&#xC544; &#xC804;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xD1A0;&#xB300;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC8FC;&#xC18C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC758; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBB34;&#xC5C7;&#xC5D0; C. elegans&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558;, &#xD2B9;&#xD788; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744;.

&#xC218;&#xC815; &#xBC0F; C. elegans oocyte &#xBC30;&#xC544; &#xC804;&#xD658;.

La fertilizaci&#xF3;n es un proceso complejo compuesto de numerosos pasos. Durante la fecundaci&#xF3;n, dos c&#xE9;lulas altamente especializadas y diferenciadas (espermatozoide y el &#xF3;vulo) se fusionan y, posteriormente, desencadenar el desarrollo de un embri&#xF3;n a partir de un ovocito en reposo, detenido. Las interacciones moleculares entre el espermatozoide y el &#xF3;vulo son necesarias para regular el potencial de desarrollo de un ovocito, y la coordinaci&#xF3;n precisa y regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica y la funci&#xF3;n de las prote&#xED;nas son fundamentales para el desarrollo embrionario adecuado. El nematodo Caenorhabditis elegans se ha convertido en un sistema modelo valioso para identificar genes implicados en la fecundaci&#xF3;n de ovocitos y la transici&#xF3;n a embriones, as&#xED; como para la comprensi&#xF3;n de los mecanismos moleculares que regulan estos procesos. En esta revisi&#xF3;n, se abordar&#xE1; el conocimiento actual de los fundamentos moleculares de la interacci&#xF3;n de gametos durante la fecundaci&#xF3;n de ovocitos y la transici&#xF3;n a embriones de C. elegans. Tambi&#xE9;n vamos a comparar nuestro conocimiento de estos procesos en C. elegans para lo que se conoce acerca de los procesos similares en mam&#xED;feros, en particular los sistemas de modelo de rat&#xF3;n,.

La fecundaci&#xF3;n de ovocitos y la transici&#xF3;n a embriones de C. elegans

PPTR-1 &#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x65B0;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x4E9A;&#x57FA;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; 2A&#xFF0C;&#x5728; P &#x9897;&#x7C92;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x6311;&#x6218; P &#x9897;&#x7C92;&#x662F;&#x8D1F;&#x8D23;&#x786E;&#x5B9A;&#x5728;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x751F;&#x6B96;&#x7684;&#x4FE1;&#x5FF5;&#x3002;

&#x751F;&#x6B96;&#x6D4B;&#x5B9A;&#xFF1A; &#x4E0D;&#x4ECB;&#x610F; P &#x9897;&#x7C92;&#x3002;

A recently identified novel role for PPTR-1, the regulatory subunit of phosphatase 2A, in P granule segregation challenges the belief that P granules are responsible for determining the germline in Caenorhabditis elegans.

Germline determination: don't mind the P granules.

Un nouveau r&#xF4;le r&#xE9;cemment identifi&#xE9; pour PPTR-1, le sous-unit&#xE9; r&#xE9;gulatrice de phosphatase 2A, en isolement granules P conteste l&#x26;#39;id&#xE9;e que les granules P sont responsables de la d&#xE9;termination de la lign&#xE9;e germinale chez Caenorhabditis elegans.

D&#xE9;termination germinale: Ne vous occupez pas des granul&#xE9;s P

Ein k&uuml;rzlich identifizierten neuartige Rolle f&uuml;r PPTR-1, fordert die regulatorische Untereinheit der Phosphatase-2A, in P Untermodul Trennung die &Uuml;berzeugung, dass P-Granulat f&uuml;r die Bestimmung der Keimbahn in Caenorhabditis Elegans verantwortlich sind.

Germline Bestimmung: die P-Granulat st&ouml;rt nicht.

Un ruolo di romanzo recentemente identificato per PPTR-1, la subunit&agrave; normativa della fosfatasi 2A, nella segregazione granulo P sfida la credenza che i granuli P sono responsabili per la determinazione della linea germinale in Caenorhabditis elegans.

Determinazione della linea germinale: non mente i granuli P.

PPTR-1&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;P&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;2A&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;P&#x9846;&#x7C92;&#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#xFF08;Caenorhabditis elegans&#xFF09;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4FE1;&#x5FF5;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x5217;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#xFF1A;P&#x9846;&#x7C92;&#x3092;&#x6C17;&#x306B;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;

PPTR-1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;, P&#xACFC; &#xB9BD; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; 2a&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; P&#xACFC; &#xB9BD; Caenorhabditis elegans&#xC5D0; &#xBC88;&#xC9F8; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xC9C0;&#xB294; &#xBBFF;&#xC74C;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC804; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xBC88;&#xC9F8; &#xACB0;&#xC815;: P&#xACFC; &#xB9BD; &#xC0C1;&#xAD00; &#xC5C6;&#xC5B4;.

Un nuevo papel para el recientemente identificado PPTR-1, la subunidad reguladora de la fosfatasa 2A, en la segregaci&#xF3;n de gr&#xE1;nulos P desaf&#xED;a la creencia de que los gr&#xE1;nulos de P son los responsables de la determinaci&#xF3;n de la l&#xED;nea germinal en Caenorhabditis elegans.

Determinaci&#xF3;n de la l&#xED;nea germinal: No hagas caso de los gr&#xE1;nulos P

O-&#x786B;&#x9178;&#x916F;&#x5316;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x662F;&#x50AC;&#x5316;&#x4E24;&#x4E2A; tyrosylprotein sulfotransferases (TPST-1 &#x548C; TPST-2&#xFF09; &#x4E2D;&#x8DE8;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x3002;Tpst2 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5375;&#x819C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x80B2;&#x3001; &#x7CBE;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x7F3A;&#x9677;&#x4EE5;&#x53CA;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7CBE;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5C11; Tpst2 null &#x7CBE;&#x5B50;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x9E21;&#x86CB;&#x819C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x8FDB;&#x5C55;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7597;&#x6297; sulfotyrosine &#x6297;&#x4F53; PSG2 &#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x7CBE;&#x5375;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x591A;&#x7CBE;&#x53D7;&#x7CBE;&#x7684; Tpst2 null &#x7CBE;&#x5B50;&#x4E0E;&#x5375;&#x819C;&#x5757;&#x7684;&#x89E6;&#x53D1;&#x5668;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5931;&#x8D25;&#x3002;&#x6297; sulfotyrosine &#x67D3;&#x8272;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x663E;&#x793A;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x76F8;&#x4F3C; IZUMO1&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x914D;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5C0F;&#x5230;&#x6CA1;&#x6709;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x8131;&#x786B;&#x7684; IZUMO1&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BE5; IZUMO1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x662F;&#x5728; Tpst2 null &#x7CBE;&#x5B50;&#x6B63;&#x5E38;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C08;&#x5230;&#x4E00;&#x53D1;&#x73B0;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7528;&#x8D28;&#x8C31;&#x7279;&#x5F81;&#x4E0E; PSG2 &#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x8FD9;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; ADAM6&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6210;&#x5458; A &#x53BB;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x548C;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; (ADAM) &#x5BB6;&#x5EAD; &#xFF1B;&#x6B64;&#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x90FD;&#x662F;&#x4E0E;&#x591A;&#x4E2A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x53D1;&#x73B0; Tpst2 null &#x7CBE;&#x5B50;&#x7F3A;&#x4E4F; ADAM6 &#x548C; ADAM3&#x3002;ADAM3 &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x51FA;&#x73B0;&#x6316;&#x7A7A;&#x7684;&#x96C4;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5B9A;&#x884C;&#x7684;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x9A7B;&#x5730;&#x4F34;&#x4FA3;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8; TPST 2 &#x53EF;&#x80FD;&#x6B63;&#x5E38;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x63A7;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x548C;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x80B2;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5; TPST 2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178; O-&#x786B;&#x9178;&#x916F;&#x5316;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x6216;&#x819C;&#x987A;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x6700;&#x7EC8;&#x5F71;&#x54CD;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x80B2;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

Tyrosylprotein &#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;-2 &#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x7CBE;&#x5375;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x9644;&#x777E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5728; ADAM3 &#x548C; ADAM6 &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;

Tyrosine O-sulfation is a post-translational modification catalyzed by two tyrosylprotein sulfotransferases (TPST-1 and TPST-2) in the trans-Golgi network. Tpst2-deficient mice have male infertility, sperm motility defects, and possible abnormalities in sperm-egg membrane interactions. Studies here show that compared with wild-type sperm, fewer Tpst2-null sperm bind to the egg membrane, but more of these bound sperm progress to membrane fusion. Similar outcomes were observed with wild-type sperm treated with the anti-sulfotyrosine antibody PSG2. The increased extent of sperm-egg fusion is not due to a failure of Tpst2-null sperm to trigger establishment of the egg membrane block to polyspermy. Anti-sulfotyrosine staining of sperm showed localization similar to that of IZUMO1, a sperm protein that is essential for gamete fusion, but we detected little to no tyrosine sulfation of IZUMO1 and found that IZUMO1 expression and localization were normal in Tpst2-null sperm. Turning to a discovery-driven approach, we used mass spectrometry to characterize sperm proteins that associated with PSG2. This identified ADAM6, a member of the A disintegrin and A metalloprotease (ADAM) family; members of this protein family are associated with multiple sperm functions. Subsequent studies revealed that Tpst2-null sperm lack ADAM6 and ADAM3. Loss of ADAM3 is strongly associated with male infertility and is observed in knockouts of male germ line-specific endoplasmic reticulum-resident chaperones, raising the possibility that TPST-2 may function in quality control in the secretory pathway. These data suggest that TPST-2-mediated tyrosine O-sulfation participates in regulating the sperm surface proteome or membrane order, ultimately affecting male fertility.

Lack of tyrosylprotein sulfotransferase-2 activity results in altered sperm-egg interactions and loss of ADAM3 and ADAM6 in epididymal sperm.

O la tyrosine-sulfatation est une modification post-traductionnelle catalys&eacute;e par deux tyrosylprot&eacute;ine sulfotransf&eacute;rases (TPST-1 et TPST-2) dans le r&eacute;seau trans-Golgi. Tpst2-deficient mice ont infertilit&eacute; masculine spermatozo&iuml;des motilit&eacute; d&eacute;fauts et anomalies possibles dans les interactions de membrane de spermatozo&iuml;de-ovule. Ici les &eacute;tudes montrent que compar&eacute; avec le sperme du type sauvage, moins lier de sperme Tpst2 null &agrave; la membrane de le &oelig;uf, mais plus de ces progr&egrave;s de sperme li&eacute;e &agrave; la fusion membranaire. Des r&eacute;sultats similaires ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s avec le sperme de type sauvage trait&eacute;es avec l&#39;anticorps anti-sulfotyrosine PSG2. Dans quelle mesure une augmentation de la fusion du spermatozo&iuml;de-ovule n&#39;est pas d&ucirc; &agrave; une panne de sperme Tpst2 null &agrave; g&acirc;chette mise en place du bloc membrane oeuf &agrave; la polyspermie. Anti-sulfotyrosine la coloration des spermatozo&iuml;des a montr&eacute; localisation similaire &agrave; que de IZUMO1, une prot&eacute;ine de sperme qui est essentielle pour la fusion des gam&egrave;tes, mais nous avons ne d&eacute;tect&eacute; peu ou aucun sulfatation tyrosine de IZUMO1 et a trouv&eacute; cette expression IZUMO1 et localisation &eacute;taient normaux dans le sperme Tpst2 null. Quant &agrave; une approche ax&eacute;e sur la d&eacute;couverte, nous avons utilis&eacute; la spectrom&eacute;trie de masse pour caract&eacute;riser les prot&eacute;ines de sperme qui associ&eacute; &agrave; PSG2. Cela identifi&eacute; ADAM6, membre de la disintegrin de A et une famille de la m&eacute;talloprot&eacute;ase (ADAM) ; les membres de cette famille de prot&eacute;ines sont associ&eacute;es &agrave; des fonctions multiples de sperme. Des &eacute;tudes ult&eacute;rieures ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les spermatozo&iuml;des Tpst2 null n&#39;ont pas ADAM6 et ADAM3. Perte de ADAM3 est fortement associ&eacute;e &agrave; l&#39;infertilit&eacute; masculine et est observ&eacute;e dans les d&eacute;bouchures de chaperons de r&eacute;ticulum endoplasmique-r&eacute;sident de ligne sp&eacute;cifique germinale m&acirc;le, ce qui soul&egrave;ve la possibilit&eacute; que TPST-2 peut fonctionner en contr&ocirc;le de la qualit&eacute; dans la voie de s&eacute;cr&eacute;tion. Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que la tyrosine v&eacute;hicul&eacute;e par TPST-2 Qu&#39;o-sulfatation participe &agrave; r&eacute;glementer le sperme surface proteome ou membrane ordre, finalement qui affectent la fertilit&eacute; masculine.

Manque d&#39;activit&eacute; sulfotransf&eacute;rase-2 tyrosylprot&eacute;ine r&eacute;sulte des interactions de spermatozo&iuml;de-ovule alt&eacute;r&eacute;e et perte de ADAM3 et ADAM6 dans les spermatozo&iuml;des dans l&#39;&eacute;pididyme.

Tyrosin O-Sulfatierung ist eine post-translationale Modifikation katalysiert durch zwei Tyrosylprotein Sulfotransferasen (TPST-1 und TPST-2) in das Trans-Golgi-Netzwerk. Tpst2-defizienten M&auml;usen haben M&auml;nnliche Infertilit&auml;t, Spermien-Motilit&auml;t-M&auml;ngel und m&ouml;gliche Anomalien in Sperma-Ei-Membran-Interaktionen. Hier Studien zeigen, dass im Vergleich zu Wildtyp Sperma, weniger Tpst2-Null Spermien binden an die Ei-Membran, sondern eher diese gebundenen Sperma-Fortschritt zu Membrane Fusion. &Auml;hnliche Ergebnisse wurden beobachtet mit Wildtyp Spermien mit der Anti-Sulfotyrosine-Antik&ouml;rper PSG2 behandelt. Das erh&ouml;hte Ausma&szlig; von Sperma-Ei-Fusion ist kein Ausfall des Tpst2-Null Spermien Trigger Errichtung der Ei-Membran-Block zu Polyspermie. Anti-Sulfotyrosine F&auml;rbung der Spermien ergab Lokalisierung &auml;hnlich, dass der IZUMO1, ein Sperma-Protein, das notwendig f&uuml;r Gamet Fusion, sondern wir wenig bis gar keine Tyrosin Sulfatierung von IZUMO1 erkannt und gefunden, dass IZUMO1-Ausdruck und Lokalisierung waren in Tpst2-Null Spermien normal. Was eine Entdeckung Ansatz, verwendeten wir Massenspektrometrie, um Spermien Proteine zu charakterisieren, die PSG2 zugeordnet. Dies identifiziert ADAM6, Mitglied der A Disintegrin und eine Familie Metalloproteinase (ADAM); Mitglieder dieser Proteinfamilie sind mehrere Spermien Funktionen zugeordnet. Sp&auml;tere Studien ergab, dass Tpst2-Null Spermien ADAM6 und ADAM3 fehlen. Verlust der ADAM3 ist eng verbunden mit der m&auml;nnlichen Unfruchtbarkeit und wird in Aussparungen der m&auml;nnlichen Keim Linie-spezifische Endoplasmatisches Reticulum-Resident Chaperone, erh&ouml;hen die M&ouml;glichkeit, dass TPST-2 funktionieren, in der Qualit&auml;tskontrolle in der sekretorischen Weg beobachtet. Diese Daten legen nahe, dass TPST-2-vermittelten Tyrosin, die O-Sulfatierung beteiligt sich an der Regulierung der Spermien Oberfl&auml;chen Proteome oder Membran Reihenfolge, letztlich die m&auml;nnliche Fruchtbarkeit.

Mangelnde Tyrosylprotein Sulfotransferase-2 Aktivit&auml;t f&uuml;hrt zu ver&auml;nderten Sperma-Ei-Interaktionen und Verlust von ADAM3 und ADAM6 in epididymale Spermien.

Tirosina O-solfatazione &egrave; una modifica alberino-di traduzione catalizzata da due sulfotransferases tyrosylprotein (TPST-1 e TPST-2) nella rete trans-Golgi. Tpst2-deficient mice hanno infertilit&agrave; maschile, difetti di motilit&agrave; degli spermatozoi e possibili anomalie nelle interazioni membrana spermatozoi-uovo. Qui gli studi dimostrano che rispetto al wild-type sperma, meno Tpst2-null sperma associare la membrana dell&#39;uovo, ma pi&ugrave; di questi progressi degli spermatozoi legati alla fusione di membrana. Risultati simili sono stati osservati con selvaggio-tipo sperma trattato con l&#39;anticorpo anti-sulfotyrosine PSG2. Il maggiore misura di fusione spermatozoo-uovo non &egrave; causa di un errore di sperma Tpst2 null a grilletto istituzione del blocco di membrana dell&#39;uovo per polyspermy. Anti-sulfotyrosine colorazione dello sperma mostr&ograve; localizzazione simile a che di IZUMO1, una proteina di sperma che &egrave; essenziale per la fusione del gamete, ma abbiamo non rilevato poco o nessun solfatazione tirosina di IZUMO1 e trovato che IZUMO1 l&#39;espressione e localizzazione erano normali nello sperma Tpst2-null. Girandosi verso un approccio orientato alla scoperta, abbiamo utilizzato la spettrometria di massa per caratterizzare le proteine dello sperma che associato PSG2. Questo identificato ADAM6, un membro del disintegrin A e una famiglia metalloprotease (ADAM); membri di questa famiglia di proteine sono associati con funzioni multiple di sperma. Studi successivi hanno rivelato che lo sperma null Tpst2 mancanza ADAM6 e ADAM3. Perdita di ADAM3 &egrave; fortemente associato con infertilit&agrave; maschile ed &egrave; osservato in ritagli di accompagnatori di reticolo endoplasmatico-residente specifiche della linea germinale maschile, alzando la possibilit&agrave; che TPST-2 pu&ograve; funzionare nel controllo di qualit&agrave; nel percorso secretorio. Questi dati suggeriscono che tirosina TPST-2-mediata che o solfatazione partecipa nella regolazione dello sperma superficie proteome o membrana ordine, in definitiva che interessano la fertilit&agrave; maschile.

Mancanza di risultati sulfotransferase-2 attivit&agrave; tyrosylprotein in interazioni sperma-uovo alterato e perdita di ADAM3 e ADAM6 in spermatozoi dell&#39;epididimo.

&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x5316; O - &#x89E6;&#x5A92;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x786B;&#x9178;&#x8EE2;&#x79FB; 2 tyrosylprotein &#x9175;&#x7D20; &#xFF08;TPST 1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; TPST 2&#xFF09; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8; &#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3067;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Tpst2 &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x598A;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x7570;&#x5E38;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x5375;&#x819C;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3001;&#x5375;&#x819C;&#x304C;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9032;&#x884C;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044; Tpst2 null &#x7CBE;&#x5B50;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x6297; sulfotyrosine &#x6297;&#x4F53; PSG2 &#x51E6;&#x7406;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5375;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306F;&#x591A;&#x7CBE;&#x3078; Tpst2 null &#x7CBE;&#x5B50;&#x5375;&#x819C;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3078;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1; sulfotyrosine &#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; IZUMO1 &#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5C11;&#x3057;&#x3092; no &#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x5316; IZUMO1 &#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E; IZUMO1 &#x5F0F;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; Tpst2 null &#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x6B63;&#x5E38;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x691C;&#x51FA;&#x99C6;&#x52D5;&#x578B;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x56DE;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; PSG2 &#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F; ADAM6&#x3001;A disintegrin &#x3068;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; (ADAM) &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;;&#x3053;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x7814;&#x7A76; Tpst2 null &#x7CBE;&#x5B50;&#x304C; ADAM6 &#x3068; ADAM3 &#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;ADAM3 &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x7537;&#x6027;&#x306E;&#x4E0D;&#x598A;&#x3068;&#x5F37;&#x304F;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x7537;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x7DDA;&#x7279;&#x6709;&#x5C45;&#x4F4F;&#x8005;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x3001;TPST 2 &#x54C1;&#x8CEA;&#x7BA1;&#x7406;&#x306F;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F; O &#x3042;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x7CBE;&#x5B50;&#x8868;&#x9762;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x819C;&#x9806;&#x5E8F;&#x3001;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x7537;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x305D;&#x306E; TPST 2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Tyrosylprotein &#x786B;&#x9178;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20; 2 &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5375;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068; ADAM3 &#x3068; ADAM6 &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x4E0A;&#x4F53;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; O sulfation &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218;&#xC815; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; Golgi &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xB450; tyrosylprotein sulfotransferases (TPST-1&#xACFC; TPST-2)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC774;&#xB2E4;. Tpst2 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784;, &#xC815;&#xC790; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xACB0;&#xD568;&#xACFC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC774;&#xC0C1; &#xC815;&#xC790; &#xACC4;&#xB780; &#xB9C9; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC815;&#xC790;, &#xACC4;&#xB780; &#xB9C9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xC815;&#xC790; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC758; &#xB354; &#xC801;&#xC740; Tpst2 null &#xC815;&#xC790; bind&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC5EC;&#xAE30; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xC815;&#xC790; PSG2 &#xC548;&#xD2F0;-sulfotyrosine &#xD56D; &#xCCB4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xC790; &#xACC4;&#xB780; &#xD4E8;&#xC804;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC94;&#xC704; polyspermy Tpst2 null &#xC815;&#xC790; &#xACC4;&#xB780; &#xB9C9; &#xBE14;&#xB85D;&#xC758; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xC124;&#xB9BD;&#xC758; &#xC2E4;&#xD328; &#xB54C;&#xBB38; &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC548;&#xD2F0; sulfotyrosine &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xC5BC;&#xB8E9; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; IZUMO1, &#xC0DD;&#xC2DD; &#xCCB4; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC6B0;&#xB9AC; izumo1&#xC758; &#xB354; &#xC791;&#xC740; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; sulfation &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xD574;&#xB2F9; IZUMO1 &#xC2DD; &#xBC1C;&#xACAC; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; Tpst2 null &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xAC80;&#xC0C9; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC120;&#xBC18;, psg2&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; ADAM6, A disintegrin&#xC640; metalloprotease (ADAM) &#xAC00;&#xC871;;&#xC758; &#xD68C;&#xC6D0; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC815;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xC18D; &#xC5F0;&#xAD6C; Tpst2 null &#xC815;&#xC790; &#xBD80;&#xC871; adam6&#xACFC; adam3&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Adam3&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784;&#xC5D0; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xBA70; &#xB0A8;&#xC131; &#xC138;&#xADE0; &#xC120; &#xD2B9;&#xC815; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xC8FC; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;, TPST 2 &#xBD84; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC788;&#xB294; &#xD488;&#xC9C8; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; &#xC81C;&#xAE30;&#xC758; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD574;&#xB2F9; TPST 2 &#xC911;&#xC7AC; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0;&#xC744; O sulfation &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC815;&#xC790; &#xD45C;&#xBA74; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634; &#xB610;&#xB294; &#xB9C9; &#xC21C;&#xC11C; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tyrosylprotein sulfotransferase-2 &#xD65C;&#xB3D9; &#xACB0;&#xACFC;: &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xC815;&#xC790; &#xB09C; &#xC790; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; epididymal &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; ADAM3 &#xBC0F; adam6&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;.

Tirosina O-sulfataci&oacute;n es una modificaci&oacute;n post-translacional catalizada por dos Sulfotransferasas tyrosylprotein (TPST-1 y TPST-2) en la red de trans-Golgi. Tpst2-deficiente ratones tienen infertilidad, defectos de la motilidad del esperma y posibles anormalidades en las interacciones de membrana de esperma-huevo. Aqu&iacute; los estudios muestran en comparaci&oacute;n con semen de tipo salvaje, menos atar de esperma Tpst2 null a la membrana del huevo, sino m&aacute;s bien estos avances esperma encuadernado a la fusi&oacute;n de la membrana. Resultados similares fueron observados con esperma salvaje-tipo tratada con el anticuerpo anti-sulfotyrosine PSG2. El mayor grado de fusi&oacute;n de esperma-huevo no es debido a una falta de espermatozoides nulo Tpst2 establecimiento de gatillo del bloque de la membrana del huevo de polispermia. Anti-sulfotyrosine coloraci&oacute;n de esperma demostr&oacute; la localizaci&oacute;n similar a la de IZUMO1, una prote&iacute;na de esperma que es esencial para la fusi&oacute;n de gametos, pero hemos no detectado poco o ning&uacute;n sulfataci&oacute;n de tirosina de IZUMO1 y encontr&oacute; que la expresi&oacute;n IZUMO1 y localizaci&oacute;n eran normales en esperma de Tpst2-null. Pasando a un enfoque orientado al descubrimiento, utilizamos espectrometr&iacute;a de masas para caracterizar las prote&iacute;nas de esperma que asociada a PSG2. Esto identificado ADAM6, miembro de la conclusi&oacute;n del A y una familia de Metaloproteinasa (Ad&aacute;n); los miembros de esta familia de prote&iacute;nas se asocian con m&uacute;ltiples funciones de la esperma. Estudios posteriores revelaron que carecen de espermatozoides nulo Tpst2 ADAM6 y ADAM3. P&eacute;rdida de ADAM3 est&aacute; fuertemente asociada con la infertilidad masculina y se observa en nocauts de acompa&ntilde;antes de residente en el ret&iacute;culo endopl&aacute;smico germen masculino l&iacute;nea espec&iacute;fica, incrementa la posibilidad de que TPST-2 puede funcionar en control de calidad en la v&iacute;a secretora. Estos datos sugieren tirosina mediada por TPST-2 que o-sulfataci&oacute;n participa en la regulaci&oacute;n de la esperma superficie proteoma membrana orden o, en &uacute;ltima instancia, que afecta a la fertilidad masculina.

Falta de actividad de sulfotransferasa-2 tyrosylprotein da lugar a interacciones de esperma alterado-huevo y p&eacute;rdida de ADAM3 y ADAM6 de espermatozoides del epid&iacute;dimo.

&#x867D;&#x7136;&#x56F4;&#x7ED5;&#x65BD;&#x80A5;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x7269;&#x79CD;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x822C;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5F88;&#x597D;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E86;&#xFF0C;&#x5374;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x751A;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x65BD;&#x80A5;&#x3002;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x6210;&#x4E3A;&#x89E3;&#x51B3;&#x65BD;&#x80A5;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F18;&#x70B9;&#x662F;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x4F20;&#x64AD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5F71;&#x54CD;&#x914D;&#x5B50;&#x53CA;&#x6CA1;&#x6709;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x672C;&#x7AE0;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6982;&#x5FF5;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x65B9;&#x9488;&#x7684;&#x786E;&#x5B9A;&#x3001; &#x7EF4;&#x62A4;&#x548C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7814;&#x7A76;&#x751F;&#x80B2;&#x7387;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x83CC;&#x682A;&#x3002;

&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x65BD;&#x80A5;&#x3002;

Although the general events surrounding fertilization in many species are well described, the molecular underpinnings of fertilization are still poorly understood. Caenorhabditis elegans has emerged as a powerful model system for addressing the molecular and cell biological mechanism of fertilization. A primary advantage is the ability to isolate and propagate mutants that effect gametes and no other cells. This chapter provides conceptual guidelines for the identification, maintenance, and experimental approaches for the study fertility mutants.

The genetics and cell biology of fertilization.

Bien que les &#xE9;v&#xE9;nements entourant la f&#xE9;condation g&#xE9;n&#xE9;rales dans de nombreuses esp&#xE8;ces sont bien d&#xE9;crits, les fondements mol&#xE9;culaires de la f&#xE9;condation sont encore mal compris. Caenorhabditis elegans est apparu comme un syst&#xE8;me de mod&#xE8;le puissant pour traiter le m&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire et cellulaire biologique de la f&#xE9;condation. Un des principaux avantages est la capacit&#xE9; d&#x26;#39;isoler et de propager les mutants que les gam&#xE8;tes en vigueur et qu&#x26;#39;aucune d&#x26;#39;autres cellules. Ce chapitre fournit des lignes directrices conceptuelles pour l&#x26;#39;identification, l&#x26;#39;entretien, et des approches exp&#xE9;rimentales pour les mutants de f&#xE9;condit&#xE9; de l&#x26;#39;&#xE9;tude.

La g&#xE9;n&#xE9;tique et biologie cellulaire de la f&#xE9;condation

Obwohl die allgemeine Ereignisse im Zusammenhang mit Befruchtung bei zahlreichen Arten gut beschrieben sind, werden die molekularen Grundlagen der Befruchtung noch schlecht verstanden. Caenorhabditis Elegans hat als ein leistungsf&auml;higes Modell-System f&uuml;r die Adressierung des molekularen und Zelle biologischen Mechanismus der Befruchtung entstanden. Ein Hauptvorteil ist die M&ouml;glichkeit, zu isolieren und Mutanten zu verbreiten, dass Effekt Gameten und keine anderen Zellen. Dieses Kapitel enth&auml;lt grundlegende Richtlinien zur Kennzeichnung, Wartung und experimentelle Ans&auml;tze f&uuml;r die Studie-Fruchtbarkeit-Mutanten.

Die Genetik und Zellbiologie der Befruchtung.

Anche se gli eventi generali riguardanti fecondazione in molte specie sono ben descritti, la base molecolare della fecondazione sono ancora poco conosciuta. Caenorhabditis elegans &egrave; emerso come un potente modello sistema per affrontare il meccanismo biologico molecolare e cellulare della fecondazione. Un vantaggio primario &egrave; la capacit&agrave; di isolare e propagare mutanti che gameti di effetto e non altre cellule. Questo capitolo fornisce orientamenti concettuali per l&#39;identificazione, la manutenzione e approcci sperimentali per i mutanti di fertilit&agrave; di studio.

Biologia delle cellule e genetica della fecondazione.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7A2E;&#x3067;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5DFB;&#x304F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x3088;&#x304F;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x76E4;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7CFB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4E3B;&#x306A;&#x5229;&#x70B9;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x4F1D;&#x64AD;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8B58;&#x5225;&#x3001;&#x4FDD;&#x5B88;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x80A5;&#x6C83;&#x5EA6;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6982;&#x5FF5;&#x7684;&#x306A;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x53D7;&#x7CBE;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;

&#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC815;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC798; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xBD84;&#xC790; &#xC218;&#xC815; &#xD1A0;&#xB300; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xC11C; &#xD22C;&#xB974; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574; &#xB41C;&#xB2E4;. Caenorhabditis elegans &#xC218;&#xC815;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C; &#xB5A0;&#xC624;&#xB974;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xC694; &#xC7A5;&#xC810;&#xC740; &#xADF8; &#xD6A8;&#xACFC; gametes&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC804;&#xD30C;&#xB97C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBD88; &#xC784; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC1C;&#xB150;&#xC801; &#xC9C0;&#xCE68;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC218;&#xC815;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xD559; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

A pesar de los acontecimientos generales en torno a la fertilizaci&#xF3;n en muchas especies est&#xE1;n bien descritos, las bases moleculares de la fertilizaci&#xF3;n son a&#xFA;n poco conocidos. Caenorhabditis elegans se ha convertido en un poderoso sistema modelo para abordar el mecanismo de la biolog&#xED;a molecular y celular de la fecundaci&#xF3;n. Una ventaja principal es la capacidad de aislar y propagar mutantes que los gametos de efectos y no otras c&#xE9;lulas. Este cap&#xED;tulo proporciona directrices conceptuales para la identificaci&#xF3;n, mantenimiento y enfoques experimentales para estudiar la fertilidad de los mutantes.

Article	Year
Targeted disruption of tyrosylprotein sulfotransferase-2, an enzyme that catalyzes post-translational protein tyrosine O-sulfation, causes male infertility. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 16469738	2006
Prostasin attenuates inducible nitric oxide synthase expression in lipopolysaccharide-induced urinary bladder inflammation. American journal of physiology. Renal physiology\| PubMed ID: 16638913	2006
Multivariate analysis of male reproductive function in Inpp5b-/- mice reveals heterogeneity in defects in fertility, sperm-egg membrane interaction and proteolytic cleavage of sperm ADAMs. Molecular human reproduction\| PubMed ID: 20403911	2010
Fertilization and the oocyte-to-embryo transition in C. elegans. BMB reports\| PubMed ID: 20587328	2010
Germline determination: don't mind the P granules. Current biology : CB\| PubMed ID: 21334295	2011
Lack of tyrosylprotein sulfotransferase-2 activity results in altered sperm-egg interactions and loss of ADAM3 and ADAM6 in epididymal sperm. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 21339297	2011
The genetics and cell biology of fertilization. Methods in cell biology\| PubMed ID: 22118284	2011

Matthew R. Marcello

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