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Monitoring Immune Cells Trafficking Fluorescent Prion Rods Hours after Intraperitoneal Infection

Presence of an abnormal form a host-encoded prion protein (PrPC) that is protease resistant, pathologic and infectious characterizes prion diseases such ...

Colorado State University

&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x4E32;&#x884C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x5FAA;&#x73AF;&#x6269;&#x589E; (sPMCA) &#x653E;&#x5927; D10 &#x5E94;&#x53D8;&#x7684; CWD &#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7EBF;&#x6027;&#x5173;&#x7CFB;&#x8986;&#x76D6;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65E5;&#x5FD7;&#x7684; D10 &#x7A00;&#x91CA;&#x5EA6;&#x5E76;&#x3002;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; PMCA &#x653E;&#x5927; D10 &#x8BF1;&#x5BFC; CWD &#x6613; Tg (cerPrP) 1536&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x5B58;&#x6D3B;&#x65F6;&#x95F4;&#x6BD4;&#x539F;&#x6765;&#x7684; D10 &#x83CC;&#x5242;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; D10 Tg (cerPrP) 1536&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x4F53;&#x5185; sub-passage &#x77ED;&#x7EA6; 80 &#x5929;&#x7684;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x8C22;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x6269;&#x589E;&#x548C;&#x9F20;&#x6807; passaged D10 &#x4EA7;&#x751F;&#x8111;&#x75C5;&#x53D8;&#x6982;&#x51B5;&#x3001; glycoform &#x6BD4;&#x7387;&#x548C;&#x6784;&#x8C61;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x6BD4;&#x662F;&#x7531; Tg (cerPrP) 1536&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x539F;&#x59CB; D10 &#x83CC;&#x5242;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;sPMCA &#x53EF;&#x4EE5;&#x653E;&#x5927;&#x548C;&#x9F20;&#x6807;&#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x548C;&#x6BD4;&#x4F53;&#x5185;&#x5E94;&#x53D8;&#x9002;&#x5E94;&#x5F97;&#x66F4;&#x5FEB;&#x5730;&#x9002;&#x5E94;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64; sPMCA &#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x8BC4;&#x4F30;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x9002;&#x5E94;&#x548C;&#x7269;&#x79CD;&#x5C4F;&#x969C;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x4E32;&#x884C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x5FAA;&#x73AF;&#x6269;&#x589E; CWD &#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x5916;&#x5E94;&#x53D8;&#x9002;&#x5E94;&#x3002;

We used serial protein misfolding cyclic amplification (sPMCA) to amplify the D10 strain of CWD prions in a linear relationship over two logs of D10 dilutions. The resultant PMCA-amplified D10 induced terminal TSE disease in CWD-susceptible Tg(cerPrP)1536 mice with a survival time approximately 80 days shorter than the original D10 inoculum, similar to that produced by in vivo sub-passage of D10 in Tg(cerPrP)1536 mice. Both in vitro-amplified and mouse-passaged D10 produced brain lesion profiles, glycoform ratios and conformational stabilities significantly different than those produced by the original D10 inoculum in Tg(cerPrP)1536 mice. These findings demonstrate that sPMCA can amplify and adapt prion strains in vitro as effectively and much more quickly than in vivo strain adaptation by mouse passage. Thus sPMCA may represent a powerful tool to assess prion strain adaptation and species barriers in vitro.

In vitro strain adaptation of CWD prions by serial protein misfolding cyclic amplification.

Nous avons utilis&#xE9; s&#xE9;rie d&#x26;#39;amplification cyclique de prot&#xE9;ines repliement (sPMCA) pour amplifier la souche D10 de prions MDC dans une relation lin&#xE9;aire sur deux b&#xFB;ches de D10 dilutions. La r&#xE9;sultante PMCA-amplifi&#xE9; D10 induite par la borne EST maladie CWD-sensibles de Tg (cerPrP) 1536 souris avec un temps de survie d&#x26;#39;environ 80 jours de moins que l&#x26;#39;original D10 inoculum, semblable &#xE0; celle produite par in vivo sous-passage de D10 dans Tg (cerPrP ) 1536 souris. La fois in vitro-amplifi&#xE9; et de la souris passages D10 produit des profils de l&#xE9;sions c&#xE9;r&#xE9;brales, les ratios de glycoformes et les stabilit&#xE9;s conformationnelles significativement diff&#xE9;rentes de celles produites par l&#x26;#39;original D10 inoculum de Tg (cerPrP) 1536 souris. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que sPMCA peut amplifier et adapter souches de prion in vitro de mani&#xE8;re aussi efficace et beaucoup plus rapidement que dans l&#x26;#39;adaptation souche in vivo par le passage de la souris. Ainsi sPMCA peut repr&#xE9;senter un outil puissant pour &#xE9;valuer l&#x26;#39;adaptation souche de prion et les barri&#xE8;res d&#x26;#39;esp&#xE8;ces in vitro.

En adaptation de la souche in vitro des prions CWD par amplification cyclique de prot&#xE9;ines de s&#xE9;rie Misfolding

Wir verwendet serielle Protein misfolding zyklische Amplifikation (sPMCA), um die D10-Belastung von CWD Prionen verst&auml;rken in eine lineare Beziehung &uuml;ber zwei Protokolle der D10 Verd&uuml;nnungen. Die resultierende PMCA-amp-D10 induzierte terminal TSE-Krankheit in CWD-empf&auml;nglichen Tg (CerPrP) 1536 M&auml;use mit einer &Uuml;berlebenszeit k&uuml;rzer als die urspr&uuml;ngliche D10 Inokulum, &auml;hnlich wie von in-vivo Sub-passage D10 Tg (CerPrP) 1536 M&auml;usen produziert ungef&auml;hr 80 Tage. Sowohl in Vitro verst&auml;rkt und Maus-passaged-D10 produziert Gehirn L&auml;sion Profile, Glycoform Verh&auml;ltnis und Konformations&auml;nderungen Stabilit&auml;ten deutlich anders als die von der urspr&uuml;nglichen D10-Inokulum Tg (CerPrP) 1536 M&auml;usen produziert. Diese Ergebnisse zeigen, dass sPMCA kann verst&auml;rken und Prion-St&auml;mme in-vitro-so effektiv und wesentlich schneller als in-vivo Belastung Anpassung durch Maus-Passage anzupassen. Somit kann sPMCA ein leistungsf&auml;higes Werkzeug zur Bewertung Prion Belastung Anpassung und Arten Barrieren in-vitro-vertreten.

In-vitro-Stamm Anpassung der CWD Prionen durch serielle Protein misfolding zyklische Amplifikation.

Abbiamo usato il seriale protein misfolding amplificazione ciclico (sPMCA) per amplificare il ceppo D10 di prioni CWD in una relazione lineare sopra i due registri di diluizioni D10. Il risultante D10 IVETTE-amplificato indotta da malattia terminale TSE nei topi 1536 Tg CWD-sensibili (cerPrP) con un tempo di sopravvivenza pi&ugrave; corte rispetto l&#39;originale inoculo D10, simile a quello prodotto da sub-passage in vivo di D10 in topi 1536 Tg (cerPrP) circa 80 giorni. Entrambi in vitro-amplificato e attraversate mouse D10 prodotto profili di lesione cerebrale, glycoform rapporti e stabilit&agrave; conformazionale significativamente diversi rispetto a quelli prodotti da inoculo D10 originale nei topi 1536 Tg (cerPrP). Questi risultati dimostrano che sPMCA pu&ograve; amplificare e adattare i ceppi da prioni in vitro nel modo pi&ugrave; efficace e molto pi&ugrave; rapidamente di adattamento in vivo ceppo dal passaggio del mouse. Cos&igrave; sPMCA pu&ograve; rappresentare un potente strumento per valutare l&#39;adattamento di ceppo da prioni e le barriere di specie in vitro.

Adattamento di ceppo in vitro dei prioni CWD da seriale protein misfolding amplificazione ciclico.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;D10&#x306E;&#x5E0C;&#x91C8;&#x6DB2;&#x306E;2&#x30ED;&#x30B0;&#x4E0A;&#x306B;&#x76F4;&#x7DDA;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;CWD&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;D10&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30B7;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30DF;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x74B0;&#x72B6;&#x5897;&#x5E45;&#xFF08;sPMCA&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;PMCA&#x5897;&#x5E45;Tg&#x306E;D10&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF08;cerPrP&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3001;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;D10&#x63A5;&#x7A2E;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x7D04;80&#x65E5;&#x77ED;&#x3044;&#x751F;&#x5B58;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x6301;&#x3064;CWD&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;Tg&#xFF08;cerPrP&#xFF09;1536&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;D10&#x8A98;&#x5C0E;&#x7AEF;&#x672B;TSE&#x75BE;&#x60A3;&#x3092;&#xFF09;1536&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x5897;&#x5E45;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D99;&#x4EE3;D10&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x8133;&#x75C5;&#x5909;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x6BD4;&#x3068;Tg&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30CA;&#x30EB;D10&#x63A5;&#x7A2E;&#xFF08;cerPrP&#xFF09;1536&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;sPMCA&#x304C;&#x3088;&#x308A;&#x8FC5;&#x901F;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x901A;&#x904E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;in vivo&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x304B;&#x3064;&#x9650;&#x308A;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x682A;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x3057;&#x3001;&#x9069;&#x5FDC;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;sPMCA&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x682A;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x3068;&#x7A2E;&#x306E;&#x58C1;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;

&#x30B7;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30DF;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x5897;&#x5E45;&#x306B;&#x3088;&#x308B;CWD&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x8A66;&#x9A13;&#x7BA1;&#x5185;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x3067;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC21C;&#xD658; &#xC99D;&#xD3ED; (sPMCA) misfolding &#xC9C1;&#xB82C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558;&#xB294; &#xC0AC;&#xC6A9; CWD prions D10 &#xBCC0;&#xD615; &#xC120;&#xD615; &#xAD00;&#xACC4;&#xC5D0; d 10 &#xD76C;&#xC11D;&#xC81C;&#xC758; &#xB450; &#xB85C;&#xADF8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;. &#xACB0;&#xACFC; PMCA &#xC99D;&#xD3ED; D10 &#xC0DD;&#xC874; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC57D; 80 &#xC77C; Tg (cerPrP) 1536 &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; d 10&#xC758; vivo&#xC5D0;&#xC11C; sub-passage&#xB97C; &#xC81C;&#xC791;&#xD55C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC6D0;&#xB798; d 10 inoculum &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC9E7;&#xC740; CWD &#xCDE8;&#xC57D; Tg (cerPrP) 1536 &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; TSE &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC720;&#xBC1C;. &#xB450;&#xC5D0; &#xCCB4; &#xC678; &#xC99D;&#xD3ED; &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; passaged D10 &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB1CC; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;, glycoform &#xBE44;&#xC728; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xD06C;&#xAC8C; Tg (cerPrP) 1536 &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xB798; d 10 inoculum&#xC744; &#xC81C;&#xC791;&#xD55C; &#xADF8; &#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; sPMCA &#xC218;&#xB97C; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558; &#xACE0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xBCC0;&#xC885; &#xCCB4; &#xC678;&#xB97C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xC801;&#xC751; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xBE68;&#xB9AC; &#xC801;&#xC751;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; sPMCA &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xBCC0;&#xD615; &#xC801;&#xC751; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xC885; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C1;&#xB82C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; misfolding &#xC21C;&#xD658; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558; &#xC5EC; CWD prions&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xC801;&#xC751;.

Utilizamos mal plegamiento de prote&#xED;nas serie de amplificaci&#xF3;n c&#xED;clica (sPMCA) para amplificar la cepa D10 de los priones CWD en una relaci&#xF3;n lineal en dos registros de diluciones D10. La resultante EPCP-amplificado D10 inducida por la enfermedad terminal de EET en CWD-susceptibles de Tg (cerPrP) 1536 ratones con un tiempo de supervivencia de aproximadamente 80 d&#xED;as m&#xE1;s corto que el original D10 in&#xF3;culo, de forma similar a la producida por in vivo paso secundario de la D10 en Tg (cerPrP ) 1536 ratones. Tanto in vitro-amplificado y el rat&#xF3;n a inocular D10 produce perfiles de lesi&#xF3;n cerebral, relaciones glicoforma y estabilidades conformacionales significativamente diferentes a los producidos por el original D10 in&#xF3;culo de los TG (cerPrP) 1536 ratones. Estos hallazgos demuestran que sPMCA puede ampliar y adaptar cepas de priones in vitro manera m&#xE1;s eficaz y mucho m&#xE1;s r&#xE1;pidamente que en la adaptaci&#xF3;n de la cepa vivo por el paso del rat&#xF3;n. As&#xED; sPMCA puede representar una poderosa herramienta para evaluar la adaptaci&#xF3;n del pri&#xF3;n tensi&#xF3;n y barreras de las especies in vitro.

En la adaptaci&#xF3;n de tensi&#xF3;n in vitro de priones CWD por la amplificaci&#xF3;n c&#xED;clica de prote&#xED;nas mal plegamiento de serie

&#x6162;&#x6027;&#x6D88;&#x8017;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5; (CWD) &#x662F;&#x5F71;&#x54CD;&#x81EA;&#x7531;&#x7B49;&#x91CE;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x5DF2;&#x77E5;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x6D77;&#x7EF5;&#x72B6;&#x8111;&#x75C5;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x786E;&#x5207;&#x7684;&#x81EA;&#x7136;&#x4F20;&#x64AD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6C34;&#x5E93;&#x548C;&#x4F20;&#x8F93;&#x8F66;&#x8F86;&#x987B;&#x7275;&#x8FDE;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4ECD;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;(1-4) CWD &#x9633;&#x6027;&#x52A8;&#x7269;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x73AF;&#x5883;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8D1F;&#x8377;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x89E3;&#x7684;&#x5C60;&#x4F53;&#x53CA;&#x751F;&#x7269;&#x6750;&#x6599;&#x5305;&#x62EC;&#x553E;&#x6DB2;&#x3001; &#x8840;&#x6DB2;&#x3001; &#x5C3F;&#x6DB2;&#x548C;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x3002;(5-7) &#x5E38;&#x89C4;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x9650;&#x5236;&#x963B;&#x788D;&#x73AF;&#x5883;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8D1F;&#x8377;&#x5728;&#x571F;&#x58E4;&#x548C;&#x6C34;&#x4E2D;&#x7684;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4E32;&#x884C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x5FAA;&#x73AF;&#x6269;&#x589E; (sPMCA) &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x653E;&#x5927; 1.3 x 10(-7) &#x7A00;&#x91CA; CWD &#x611F;&#x67D3;&#x8111;&#x5300;&#x6D46;&#x5C16;&#x523A;&#x5165;&#x6C34;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x5927;&#x7EA6; 5 x 10(7) &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x8010; cervid &#x670A;&#x86CB;&#x767D; (PrP(CWD)) &#x5355;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0; PrP(CWD) CWD &#x75AB;&#x533A;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6C34;&#x5F84;&#x6D41;&#x7684;&#x878D;&#x5316;&#x51AC;&#x5929;&#x96EA;&#x5305;&#xFF0C;&#x4E00;&#x6B21;&#x6536;&#x96C6;&#x5230;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x6C34;&#x6837;&#x672C;&#x4E4B;&#x4E00;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4ECE;&#x6C34;&#x7684;&#x5E02;&#x653F;&#x6C34;&#x5904;&#x7406;&#x8BBE;&#x65BD;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x7D6E;&#x51DD;&#x9636;&#x6BB5;&#x540C;&#x65F6;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x6C34;&#x6837;&#x672C;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#x6307;&#x51FA;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; PrP(CWD) &#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x6C34;&#x5E73;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x7531; sPMCA PrP(CWD) &#x5728;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x7684;&#x6781;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6301;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728;&#x548C;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x53EF;&#x4FC3;&#x8FDB; CWD &#x4F20;&#x8F93;&#x3002;

&#x4ECE; CWD &#x6D41;&#x884C;&#x533A;&#x7684;&#x6C34;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x8010; cervid &#x670A;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

Chronic wasting disease (CWD) is the only known transmissible spongiform encephalopathy affecting free-ranging wildlife. Although the exact mode of natural transmission remains unknown, substantial evidence suggests that prions can persist in the environment, implicating components thereof as potential prion reservoirs and transmission vehicles.(1-4) CWD-positive animals may contribute to environmental prion load via decomposing carcasses and biological materials including saliva, blood, urine and feces.(5-7) Sensitivity limitations of conventional assays hamper evaluation of environmental prion loads in soil and water. Here we show the ability of serial protein misfolding cyclic amplification (sPMCA) to amplify a 1.3 x 10(-7) dilution of CWD-infected brain homogenate spiked into water samples, equivalent to approximately 5 x 10(7) protease resistant cervid prion protein (PrP(CWD)) monomers. We also detected PrP(CWD) in one of two environmental water samples from a CWD endemic area collected at a time of increased water runoff from melting winter snow pack, as well as in water samples obtained concurrently from the flocculation stage of water processing by the municipal water treatment facility. Bioassays indicated that the PrP(CWD) detected was below infectious levels. These data demonstrate detection of very low levels of PrP(CWD) in the environment by sPMCA and suggest persistence and accumulation of prions in the environment that may promote CWD transmission.

Detection of protease-resistant cervid prion protein in water from a CWD-endemic area.

La maladie d&#xE9;bilitante chronique (MDC) est l&#x26;#39;enc&#xE9;phalopathie spongiforme transmissible affecte seulement connu en libert&#xE9; de la faune. Bien que le mode exact de transmission naturelle reste inconnue, des preuves substantielles indiquent que les prions peuvent persister dans l&#x26;#39;environnement, impliquant des composants de celui-ci en tant que r&#xE9;servoirs potentiels &#xE0; prions et les v&#xE9;hicules de transport. (1-4) MDC-animaux positifs peuvent contribuer &#xE0; la charge de l&#x26;#39;environnement par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du prion carcasses en d&#xE9;composition et des mat&#xE9;riaux biologiques, y compris la salive, sang, urine et les f&#xE8;ces. (5-7) les limites de sensibilit&#xE9; des tests classiques d&#x26;#39;entraver l&#x26;#39;&#xE9;valuation des charges environnementales prions dans le sol et l&#x26;#39;eau. Ici, nous montrons la capacit&#xE9; d&#x26;#39;amplification cyclique de prot&#xE9;ines s&#xE9;rie repliement (sPMCA) pour amplifier un 1,3 x 10 (-7) de dilution d&#x26;#39;homog&#xE9;nat de cerveau infect&#xE9; par l&#x26;#39;enc&#xE9;phalopathie des cervid&#xE9;s surcharg&#xE9;s dans des &#xE9;chantillons d&#x26;#39;eau, soit l&#x26;#39;&#xE9;quivalent d&#x26;#39;environ 5 x 10 (7) prot&#xE9;ase prot&#xE9;ine prion r&#xE9;sistante cervid&#xE9; (PRP (MDC)) monom&#xE8;res. Nous avons &#xE9;galement d&#xE9;tect&#xE9; la PrP (MDC) dans l&#x26;#39;un des deux &#xE9;chantillons d&#x26;#39;eau de l&#x26;#39;environnement d&#x26;#39;une zone end&#xE9;mique MDC recueillies &#xE0; un moment de l&#x26;#39;&#xE9;coulement des eaux de la fonte accrue hiver manteau neigeux, ainsi que dans des &#xE9;chantillons d&#x26;#39;eau obtenus simultan&#xE9;ment &#xE0; partir de l&#x26;#39;&#xE9;tape de floculation du traitement de l&#x26;#39;eau par le municipale de traitement des eaux. Bioassays a indiqu&#xE9; que la PrP (MDC) a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e en dessous des niveaux infectieuses. Ces donn&#xE9;es d&#xE9;montrent la d&#xE9;tection de tr&#xE8;s faibles niveaux de PrP (MDC) dans l&#x26;#39;environnement par sPMCA et sugg&#xE8;rent la persistance et l&#x26;#39;accumulation de prions dans l&#x26;#39;environnement qui peuvent favoriser la transmission MDC.

La d&#xE9;tection de la prot&#xE9;ase-r&#xE9;sistante prot&#xE9;ine prion des cervid&#xE9;s dans l&#x26;#39;eau &#xE0; partir d&#x26;#39;une zone de l&#x26;#39;enc&#xE9;phalopathie des cervid&#xE9;s est end&#xE9;mique

Chronic wasting Disease (CWD) ist die einzige bekannte transmissible spongiforme Enzephalopathie, die Auswirkungen auf Wildtiere frei-schwanken. Obwohl die genaue Art der nat&uuml;rlichen Vererbung unbekannt bleibt, gibt wesentliche Hinweise, dass Prionen in der Umgebung von Nicht&uuml;bernahme Komponenten davon als potenzielle Prion-Stauseen und Getriebe Fahrzeuge beibehalten k&ouml;nnen.(1-4) CWD-positiven Tieren k&ouml;nnen zu &ouml;kologischen Prion Belastung durch Zersetzung von Tierk&ouml;rpern und biologische Materialien wie Speichel, Blut, Urin und Kot beitragen.(5-7) Empfindlichkeit Einschr&auml;nkungen von konventionellen Assays behindern Bewertung der &ouml;kologischen Prion Lasten in Boden und Wasser. Hier zeigen wir die F&auml;higkeit der seriellen Protein misfolding zyklische Amplifikation (sPMCA), eine 1,3 x 10(-7) Verd&uuml;nnung von CWD-infizierten Gehirn-Homogenats Pfennigabsatz in Wasserproben, entspricht ca. 5 x 7 Protease-resistent cesya Prionprotein (PrP(CWD)) Monomere. verst&auml;rken Wir stellten au&szlig;erdem PrP(CWD), in einer der zwei &ouml;kologischen Wasserproben aus einem CWD-Endemiegebiet zusammengestellt in einer Zeit der erh&ouml;hten Wasserabfluss aus Schmelzen Winter Schnee Pack sowie in Wasserproben, die gleichzeitig aus der Flockung-Stufe der Verarbeitung durch die kommunale Wasser-Verwertungsanlage Wasser gewonnen. Bioassays angedeutet, dass infekti&ouml;se Niveau der PrP(CWD) erkannt wurde. Diese Daten zeigen, Erkennung von sehr geringen PrP(CWD) in der Umgebung von sPMCA und vorschlagen, Persistenz und Anreicherung von Prionen in der Umgebung, die CWD &Uuml;bertragung f&ouml;rdern kann.

Erkennung von proteaseresistenten Hirsch Prionprotein in Wasser aus einem CWD-endemischen Gebiet.

Malattia del deperimento cronico (CWD) &egrave; l&#39;unico conosciuto encefalopatie spongiformi che interessano la fauna selvatiche. Sebbene l&#39;esatta modalit&agrave; di trasmissione naturale rimane sconosciuta, sostanza evidenza suggerisce che i prioni possono persistere nell&#39;ambiente, implicando esso componenti come potenziali serbatoi da prioni e veicoli di trasmissione.Animali CWD-positivi (1-4) possono contribuire a carico ambientale prione via decomposizione delle carcasse e materiali biologici tra cui saliva, sangue, urina e feci.Limiti di sensibilit&agrave; (5-7) di dosaggi convenzionali ostacolano la valutazione dei carichi ambientali da prioni nel suolo e nell&#39;acqua. Qui vi mostriamo la capacit&agrave; della proteina seriale misfolding amplificazione ciclico (sPMCA) per amplificare un 1.3 x 10(-7) diluizione del cervello infetto CWD omogeneizzato a spillo in campioni di acqua, equivalenti a circa 5 x 10 resistente alle proteasi cervidi proteina prionica (PrP(CWD)) monomeri. Abbiamo rilevato anche PrP(CWD) in uno dei due campioni ambientali dell&#39;acqua da una zona endemica CWD raccolti in un momento di deflusso acqua aumentata dalla fusione pack neve invernale, cos&igrave; come in campioni di acqua contemporaneamente ottenuti dalla fase di flocculazione dell&#39;acqua trattamento da parte dell&#39;impianto di trattamento acqua comunale. Analisi biologiche ha indicato che il PrP(CWD) ha rilevato era sotto livelli infettivi. Questi dati dimostrano il rilevamento di livelli molto bassi di PrP(CWD) nell&#39;ambiente di sPMCA e suggeriscono di persistenza e accumulo di prioni nell&#39;ambiente che pu&ograve; favorire la trasmissione di CWD.

Rilevazione della proteina prionica resistente alle proteasi cervidi in acqua da una zona endemica CWD.

&#x6162;&#x6027;&#x6D88;&#x8017;&#x75C5;&#xFF08;CWD&#xFF09;&#x304C;&#x653E;&#x3057;&#x98FC;&#x3044;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x6027;&#x6D77;&#x7DBF;&#x72B6;&#x8133;&#x75C7;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x81EA;&#x7136;&#x306E;&#x4F1D;&#x9001;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x8CAF;&#x6C34;&#x6C60;&#x3084;&#x4F1D;&#x9001;&#x5A92;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x304C;&#x74B0;&#x5883;&#x4E2D;&#x306B;&#x6B8B;&#x7559;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#xFF08;1-4&#xFF09;CWD&#x967D;&#x6027;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x304C;&#x5206;&#x89E3;&#x3057;&#x3066;&#x6B7B;&#x4F53;&#x3092;&#x7D4C;&#x7531;&#x3057;&#x3066;&#x74B0;&#x5883;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x8CA0;&#x8377;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x553E;&#x6DB2;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x3001;&#x5C3F;&#x3001;&#x7CDE;&#x4FBF;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x6750;&#x6599;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x3002;&#xFF08;5-7&#xFF09;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x9650;&#x754C;&#x306F;&#x3001;&#x571F;&#x58CC;&#x3068;&#x6C34;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x8CA0;&#x8377;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D04;5&#xD7;10&#xFF08;7&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x8010;&#x6027;&#x30B7;&#x30AB;&#x79D1;&#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x76F8;&#x5F53;&#x3059;&#x308B;&#x6C34;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306B;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;CWD&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x8133;&#x30DB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;1.3&#xD7;10&#xFF08;-7&#xFF09;&#x5E0C;&#x91C8;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30DF;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x74B0;&#x72B6;&#x5897;&#x5E45;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#xFF08;sPMCA&#xFF09;&#x3001;&#x8868;&#x793A;&#xFF08;PRP&#xFF08;CWD&#xFF09;&#xFF09;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6EB6;&#x878D;&#x51AC;&#x306E;&#x96EA;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x6C34;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x6BB5;&#x968E;&#x304B;&#x3089;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6C34;&#x8A66;&#x6599;&#x4E2D;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x6C34;&#x306E;&#x6D41;&#x51FA;&#x306E;&#x6642;&#x306B;&#x53CE;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x305F;CWD&#x6D41;&#x884C;&#x5730;&#x57DF;&#x304B;&#x3089;2&#x3064;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x6C34;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x306E;PrP&#xFF08;CWD&#xFF09;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x81EA;&#x6CBB;&#x4F53;&#x306E;&#x6C34;&#x51E6;&#x7406;&#x65BD;&#x8A2D;&#x3002;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;PRP&#xFF08;CWD&#xFF09;&#x304C;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;sPMCA&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;PrP&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#xFF08;CWD&#xFF09;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;CWD&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x306F;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x3068;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

CWD&#x6D41;&#x884C;&#x5730;&#x57DF;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6C34;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x8010;&#x6027;&#x30B7;&#x30AB;&#x79D1;&#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;

&#xB9CC;&#xC131; &#xB0AD;&#xBE44; &#xC9C8;&#xBCD1; (CWD)-&#xC774;&#xB974;&#xAE30;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC804;&#xC1A1; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD574; &#xB1CC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC790;&#xC5F0; &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC720;&#xC9C0;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; prions &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xC800;&#xC218;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xC804;&#xC1A1; &#xCC28;&#xB7C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC720;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.(1-4) CWD &#xC591;&#xC131; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xC640; &#xD0C0; &#xC561;, &#xD608;&#xC561;, &#xC18C;&#xBCC0;&#xACFC; &#xBC30;&#xC124;&#xBB3C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC7AC;&#xB8CC; &#xBD84;&#xD574;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD658;&#xACBD; &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xBD80;&#xD558;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.&#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4; &#xC81C;&#xD55C; (5-7) &#xD1A0;&#xC591; &#xBC0F; &#xBB3C; &#xD658;&#xACBD; &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xBD80;&#xD558;&#xC758; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBC29;&#xD574;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; CWD&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB1CC; homogenate &#xC57D; 5 10(7) &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C; &#xB0B4;&#xC131; cervid &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PrP(CWD)) &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4; &#xBC30; &#xB3D9;&#xC77C; &#xBB3C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC544;&#xAD70;&#xC758; &#xD76C;&#xC11D; 10(-7) x 1.3 &#xC99D;&#xD3ED; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xC99D;&#xD3ED; (sPMCA) misfolding &#xC9C1;&#xB82C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xBB3C; &#xC2DC; &#xBB3C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC2DC;&#xC124;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC758; &#xD50C; &#xBB34;&#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC5BB;&#xC740; &#xBB3C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC99D;&#xAC00; &#xBB3C; &#xACB0;&#xC120; &#xB179;&#xB294; &#xACA8;&#xC6B8; &#xC2A4;&#xB178;&#xC6B0; &#xD329;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1; &#xB41C; CWD &#xBC1C;&#xBCD1; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xD658;&#xACBD; &#xBB3C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC5D0;&#xC11C; Prp(cwd)&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bioassays &#xD45C;&#xC2DC; &#xAC80;&#xC0C9; PrP(CWD) &#xAC10;&#xC5FC; &#xC218;&#xC900; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; Prp(cwd)&#xC758; Spmca&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACE0; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB048;&#xAE30;&#xC640; prions CWD &#xC804;&#xC1A1; &#xD64D;&#xBCF4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;.

CWD &#xBC1C;&#xBCD1; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; protease &#xC800;&#xD56D; cervid &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;.

La caquexia cr&#xF3;nica (CWD) es la encefalopat&#xED;a espongiforme transmisible s&#xF3;lo se conoce que afecta a animales salvajes libre. Aunque el modo exacto de transmisi&#xF3;n natural sigue siendo desconocida, evidencia sustancial sugiere que los priones pueden persistir en el medio ambiente, que implican a sus componentes como reservorios potenciales de priones y los veh&#xED;culos de transmisi&#xF3;n. (1-4) CWD-positivos los animales pueden contribuir a la carga del medio ambiente a trav&#xE9;s de priones cad&#xE1;veres en descomposici&#xF3;n y los materiales biol&#xF3;gicos como la saliva, sangre, orina y heces. (5-7) las limitaciones de sensibilidad de los ensayos convencionales dificultan la evaluaci&#xF3;n de las cargas ambientales causadas por priones en el suelo y el agua. Aqu&#xED; se muestra la capacidad de amplificaci&#xF3;n c&#xED;clica de prote&#xED;nas mal plegamiento de serie (sPMCA) para amplificar un 1,3 x 10 (-7) la diluci&#xF3;n de homogeneizado de cerebro de la caquexia cr&#xF3;nica infectados se dispararon en las muestras de agua, equivalente a aproximadamente 5 x 10 (7) resistente a la proteasa prote&#xED;na pri&#xF3;nica c&#xE9;rvido (PRP (CWD)) mon&#xF3;meros. Tambi&#xE9;n se detect&#xF3; la PrP (ECD) en una de dos muestras de agua del medio ambiente de una zona end&#xE9;mica CWD recogieron en un tiempo de escurrimiento del agua aumento de la fundici&#xF3;n de nieve en invierno, as&#xED; como en muestras de agua obtenidas simult&#xE1;neamente desde la etapa de floculaci&#xF3;n de procesamiento de agua por el municipal de agua planta de tratamiento. Los bioensayos se indica que la PrP (EDC) fue detectado debajo de los niveles infecciosos. Estos datos demuestran la detecci&#xF3;n de niveles muy bajos de PrP (EDC) en el medio ambiente sPMCA y sugieren la persistencia y la acumulaci&#xF3;n de priones en el medio ambiente que pueden promover la transmisi&#xF3;n de la CWD.

La detecci&#xF3;n de la proteasa-resistente a la prote&#xED;na del pri&#xF3;n c&#xE9;rvido en el agua de una zona end&#xE9;mica de CWD

&#x5BF9;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x6700;&#x65B0;&#x8FDB;&#x5C55;&#x91C7;&#x7528; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x6280;&#x672F;&#x6291;&#x5236; PrP(C) &#x8868;&#x8FBE;&#x53CA;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x795E;&#x7ECF;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x4E3B;&#x673A; PrP(C) &#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x548C;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x73B0;&#x8C61;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684;&#x7F16;&#x7801; PrP shRNA &#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x4F53;&#x5185;&#x53EA;&#x6709;&#x6E29;&#x548C;&#x7597;&#x6548;&#x3002;

&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;-siRNA-&#x591A;&#x80BD;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x8DE8;&#x8840;&#x8111;&#x5C4F;&#x969C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE; PrP &#x548C; PrP &#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;

Recent advances toward an effective therapy for prion diseases employ RNA interference to suppress PrP(C) expression and subsequent prion neuropathology, exploiting the phenomenon that disease severity and progression correlate with host PrP(C) expression levels. However, delivery of lentivirus encoding PrP shRNA has demonstrated only modest efficacy in vivo.

Liposome-siRNA-peptide complexes cross the blood-brain barrier and significantly decrease PrP on neuronal cells and PrP in infected cell cultures.

Les progr&#xE8;s r&#xE9;cents vers une th&#xE9;rapie efficace pour les maladies &#xE0; prions employer l&#x26;#39;interf&#xE9;rence ARN pour supprimer la PrP (C) et l&#x26;#39;expression du prion ult&#xE9;rieure neuropathologie, exploitant le ph&#xE9;nom&#xE8;ne que la s&#xE9;v&#xE9;rit&#xE9; de la maladie et la progression en corr&#xE9;lation avec les niveaux de PrP h&#xF4;tes d&#x26;#39;expression (C). Toutefois, la livraison de lentivirus codant pour la PrP shRNA a d&#xE9;montr&#xE9; une efficacit&#xE9; modeste in vivo.

Liposomes siARN-peptide traversent la barri&#xE8;re h&#xE9;mato-enc&#xE9;phalique et de r&#xE9;duire consid&#xE9;rablement la PrP sur des cellules neuronales et PrP dans des cultures cellulaires infect&#xE9;es

J&uuml;ngste Fortschritte in Richtung eine wirksame Therapie f&uuml;r Prion-Krankheiten besch&auml;ftigen RNA-Interferenz, PrP(C) Ausdruck und nachfolgende Prion Neuropathologie, Nutzung des Ph&auml;nomens, die Krankheit und Progression mit Host PrP(C) Stufen korrelieren zu unterdr&uuml;cken. Jedoch hat die Lieferung von Lentiviren PrP ShRNA-Codierung in-vivo nur bescheidene Wirksamkeit bewiesen.

Liposomen-SiRNA-Peptid-komplexe &uuml;berqueren die Blut - Hirn-Schranke und verringern erheblich PrP auf Nervenzellen und PrP in infizierten Zellkulturen.

I recenti progressi verso un&#39;efficace terapia per le malattie da prioni impiegano interferenza del RNA di sopprimere l&#39;espressione PrP(C) e successive prione neuropatologia, sfruttando il fenomeno che progressione e la gravit&agrave; della malattia si correlano con i livelli di espressione PrP(C) host. Tuttavia, la consegna di lentivirus codifica PrP shRNA ha dimostrato solo modesta efficacia in vivo.

Liposoma-siRNA-peptide complessi attraversano la barriera emato - encefalica e diminuiscono significativamente PrP su cellule neuronali e PrP in colture di cellule infette.

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&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;siRNA-&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x8133;&#x95A2;&#x9580;&#x3092;&#x901A;&#x904E;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;PRP&#x306E;PrP&#x3092;&#x4E0B;&#x3052;&#x308B;

&#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB85C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBC1C;&#xC804; PrP(C) &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xD6C4;&#xC18D; &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; neuropathology, &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; &#xC9C4;&#xD589; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; PrP(C) &#xC2DD; &#xC218;&#xC900; &#xC5F0;&#xAD00; &#xD604;&#xC0C1;&#xC744; &#xC545;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74; RNA &#xAC04;&#xC12D; &#xACE0;&#xC6A9;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, PrP shRNA &#xC778;&#xCF54;&#xB529; lentivirus &#xBC30;&#xB2EC;&#xB9CC; &#xACB8;&#xC190; &#xD55C; &#xD6A8;&#xB2A5; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

Liposome siRNA &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C; &#xD608;&#xC561; &#xB1CC; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xAD50;&#xCC28; &#xD558; &#xACE0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; Prp&#xC640; PrP &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C;.

Los recientes avances hacia una terapia eficaz para las enfermedades por priones emplean la interferencia de ARN para suprimir la PrP (C) y la subsiguiente expresi&#xF3;n de priones neuropatolog&#xED;a, aprovechando el fen&#xF3;meno de que la gravedad de la enfermedad y la progresi&#xF3;n se correlaciona con los niveles de expresi&#xF3;n de acogida de PrP (C). Sin embargo, la entrega de los lentivirus que codifica la PrP shRNA ha demostrado una eficacia modesta en vivo.

Liposomas de p&#xE9;ptidos complejos siRNA cruzar la barrera sangre-cerebro y disminuir significativamente la PrP en las c&#xE9;lulas neuronales y de PrP en cultivos de c&#xE9;lulas infectadas

Article	Year
In vitro strain adaptation of CWD prions by serial protein misfolding cyclic amplification. Virology\| PubMed ID: 18952250	2008
Detection of protease-resistant cervid prion protein in water from a CWD-endemic area. Prion\| PubMed ID: 19823039	2009
Liposome-siRNA-peptide complexes cross the blood-brain barrier and significantly decrease PrP on neuronal cells and PrP in infected cell cultures. PloS one\| PubMed ID: 20559428	2010

Crystal Meyerett

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