the-culture-primary-motor-sensory-neurons-defined-media-on

The Culture of Primary Motor and Sensory Neurons in Defined Media on Electrospun Poly-L-lactide Nanofiber Scaffolds

Electrospinning is a technique for producing micro- to nano-scale fibers. Fibers can be electrospun with varying degrees of alignment, from highly aligned ...

University of Michigan 

&#x4E4B;&#x540E;&#x968F;&#x7740;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x9075;&#x5B88;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x9540;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x9636;&#x6BB5;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F62;&#x6001;&#x9636;&#x6BB5;&#x8F6C;&#x6362;&#x53EF;&#x4EE5;&#x76D1;&#x6D4B;&#x65F6;&#x95F4;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5065;&#x5EB7;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x4EE5;&#x53CA;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x80B2;&#x901A;&#x5E38;&#x662F;&#x5411;&#x6709;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x7684;&#x773C;&#x775B;&#x5F88;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7ECF;&#x5E38;&#x96BE;&#x4EE5;&#x91CF;&#x5316;&#x4E2D;&#x6709;&#x610F;&#x4E49;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x5F62;&#x6001;&#x91CF;&#x5316;&#x901A;&#x5E38;&#x4F9D;&#x9760;&#x624B;&#x52A8;&#x56FE;&#x50CF;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7E41;&#x7410;&#x3001; &#x8017;&#x65F6;&#x548C;&#x5BB9;&#x6613;&#x51FA;&#x73B0;&#x4EBA;&#x4E3A;&#x9519;&#x8BEF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x6210;&#x529F;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x5546;&#x4E1A;&#x4E0A;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x5206;&#x6790;&#x7A0B;&#x5E8F; MetaMorph(&reg;) &#x6765;&#x5206;&#x6790;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x810A;&#x9AD3;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x5305;&#x542B;&#x5728; MetaMorph(&reg;) &#x7684;&#x7A81;&#x8D77;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8BC4;&#x5206;&#x6A21;&#x5757;&#x548C;&#x7F16;&#x5199;&#x7684; MATLAB(&reg;) &#x7B97;&#x6CD5;&#x5206;&#x6790;&#x5BFC;&#x51FA;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9996;&#x5148;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x80B2;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5927;&#x81F4;&#x5206;&#x4E3A;&#x76F4;&#x63A5;&#x4ECE;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x7B97;&#x6CD5;&#x5199;&#x5728; MATLAB(&reg;) MetaMorph(&reg;) &#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x8F93;&#x51FA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x9488;&#x5BF9;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x624B;&#x52A8;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6B63;&#x786E;&#x914D;&#x7F6E;&#x65F6;&#xFF0C;MetaMorph(&reg;) &#x81EA;&#x52A8;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x5206;&#x6790;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x53EF;&#x9760;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x624B;&#x5DE5;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6709;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x52A0;&#x5FEB;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;

&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x5C55;&#x9636;&#x6BB5;&#x4F53;&#x5916; &mdash; &mdash; &#x81EA;&#x52A8;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

Following plating in vitro, neurons pass through a series of morphological stages as they adhere and mature. These morphological stage transitions can be monitored as a function of time to evaluate the relative health and development of neuronal cultures under different conditions. While morphological development is usually quite obvious to the experienced eye, it can often be difficult to quantify in a meaningful way. Morphology quantification typically relies on manual image measurement and can therefore be tedious, time consuming and prone to human error. Here we report the successful development of an automated process using the commercially available image analysis program MetaMorph(Â®) to analyze the morphology and quantify the growth of embryonic spinal motor neurons in vitro. Our process relied on the Neurite Outgrowth and Cell Scoring modules included in MetaMorph(Â®) and on analyzing the exported data with an algorithm written in MATLAB(Â®). We first adopted a series of stages of motor neuron development in vitro. Neurons were classified into these stages directly from the available output of MetaMorph(Â®) using the algorithm written in MATLAB(Â®). We validated the results of the automated analysis against a manual analysis of the same images and found no statistically significant difference between the two methods. When properly configured, automated image analysis with MetaMorph(Â®) is a rapid and reliable alternative to manual measurement and has the potential to accelerate the research process.

Stages of neuronal morphological development in vitro--an automated assay.

Apr&#xE8;s placage in vitro, les neurones passent &#xE0; travers une s&#xE9;rie d&#x26;#39;&#xE9;tapes morphologiques autant qu&#x26;#39;elles adh&#xE8;rent et m&#xFB;rir. Ces transitions de sc&#xE8;ne morphologiques peuvent &#xEA;tre surveill&#xE9;s en fonction du temps pour &#xE9;valuer la sant&#xE9; relative et le d&#xE9;veloppement de cultures de neurones dans des conditions diff&#xE9;rentes. Bien que le d&#xE9;veloppement morphologique est habituellement tout &#xE0; fait &#xE9;vident &#xE0; l&#x26;#39;&#x153;il exp&#xE9;riment&#xE9;, il peut souvent &#xEA;tre difficile &#xE0; quantifier d&#x26;#39;une mani&#xE8;re significative. Morphologie quantification repose g&#xE9;n&#xE9;ralement sur la mesure d&#x26;#39;image manuel et peut donc &#xEA;tre fastidieux, chronophage et sujet aux erreurs humaines. Nous rapportons ici le succ&#xE8;s du d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un processus automatis&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;aide disponible dans le commerce d&#x26;#39;analyse d&#x26;#39;image programme MetaMorph (&#xAE;) pour analyser la morphologie et de quantifier la croissance de neurones moteurs spinaux embryonnaires in vitro. Notre processus s&#x26;#39;est appuy&#xE9; sur l&#x26;#39;excroissance des neurites et des modules de notation cellulaires incluses dans MetaMorph (&#xAE;) et sur l&#x26;#39;analyse des donn&#xE9;es export&#xE9;es avec un algorithme &#xE9;crit en MATLAB (&#xAE;). Nous avons d&#x26;#39;abord adopt&#xE9; une s&#xE9;rie de stades de d&#xE9;veloppement des motoneurones in vitro. Neurones ont &#xE9;t&#xE9; class&#xE9;s dans ces &#xE9;tapes directement &#xE0; partir de la sortie de la disposition MetaMorph (&#xAE;) en utilisant l&#x26;#39;algorithme &#xE9;crite dans MATLAB (&#xAE;). Nous avons valid&#xE9; les r&#xE9;sultats de l&#x26;#39;analyse automatis&#xE9;e contre une analyse manuelle des m&#xEA;mes images et n&#x26;#39;a trouv&#xE9; aucune diff&#xE9;rence statistiquement significative entre les deux m&#xE9;thodes. Lorsqu&#x26;#39;il est correctement configur&#xE9;, l&#x26;#39;analyse d&#x26;#39;image automatis&#xE9;e avec MetaMorph (&#xAE;) est une alternative rapide et fiable &#xE0; la mesure manuelle et a le potentiel pour acc&#xE9;l&#xE9;rer le processus de recherche.

Les &#xE9;tapes du d&#xE9;veloppement morphologique neuronale in vitro - un dosage automatis&#xE9;

Nach der Beschichtung in Vitro, Neuronen Pass durch eine Reihe von morphologischen Stadien, wie sie halten und &auml;ltere. Diese morphologische Phase &Uuml;berg&auml;nge k&ouml;nnen als Funktion der Zeit, die relative Gesundheit auszuwerten und Entwicklung neuronaler Kulturen unter verschiedenen Bedingungen &uuml;berwacht werden. Morphologische Entwicklung zwar in der Regel ganz offensichtlich f&uuml;r das erfahrene Auge ist, kann es oft schwierig zu quantifizieren sinnvoll sein. Morphologie Quantifizierung in der Regel beruht auf manuelle Imagemessung werden kann und daher langwierig, zeitaufwendig und anf&auml;llig f&uuml;r menschliche Fehler. Hier berichten wir die erfolgreiche Entwicklung eines automatisierten Prozesses mithilfe des kommerziell verf&uuml;gbaren Image-Analyse-Programms MetaMorph(&reg;) analysieren die Morphologie und das Wachstum der embryonale spinalen Motorneuronen in-vitro zu quantifizieren. Unser Prozess st&uuml;tzte sich auf die Zelle Zeitnahme- und Neurit Auswuchs Basismodulen in MetaMorph(&reg;) und Analyse der exportierten Daten mit einem Algorithmus in MATLAB(&reg;) geschrieben. Wir zun&auml;chst eine Reihe von Entwicklungsstufen Motoneuron in-vitro-angenommen. Neuronen wurden in diesen Phasen direkt aus der verf&uuml;gbaren Ausgabe des MetaMorph(&reg;) mit dem Algorithmus geschrieben in MATLAB(&reg;) eingestuft. Wir validiert die Ergebnisse der automatischen Analyse gegen eine manuelle Analyse der gleichen Bilder und fand keinen statistisch signifikanten Unterschied zwischen den beiden Methoden. Bei ordnungsgem&auml;&szlig;er Konfiguration automatisierter Bildanalyse mit MetaMorph(&reg;) ist eine schnelle und zuverl&auml;ssige Alternative zu manuellen Messung und hat das Potenzial, den Forschungsprozess zu beschleunigen.

Phasen der neuronalen morphologische Entwicklung in-vitro--ein automatisiertes Assay.

Seguito di placcatura in vitro, i neuroni passano attraverso una serie di stadi morfologici come aderiscono e maturo. Queste transizioni di fase morfologica possono essere monitorate in funzione del tempo per valutare la relativa salute e lo sviluppo di colture neuronali in condizioni diverse. Mentre lo sviluppo morfologico di solito &egrave; abbastanza ovvio per l&#39;occhio esperto, pu&ograve; spesso essere difficile da quantificare in modo significativo. Morfologia quantificazione in genere si basa sulla misurazione dell&#39;immagine manuale e pu&ograve; quindi essere noioso, che richiede tempo e incline all&#39;errore umano. Qui riportiamo il positivo sviluppo di un processo automatizzato utilizzando il programma di analisi di immagine disponibili in commercio MetaMorph(&reg;) per analizzare la morfologia e quantificare la crescita dell&#39;embrione motoneuroni spinali in vitro. Il nostro processo si basava sui moduli dei neuriti escrescenza e segnando Cell inclusi in MetaMorph(&reg;) e sull&#39;analisi dei dati esportati con un algoritmo scritto in MATLAB(&reg;). Abbiamo adottato una serie di fasi di sviluppo del motoneurone in vitro. I neuroni sono stati classificati in queste fasi direttamente dall&#39;uscita disponibile di MetaMorph(&reg;) utilizzando l&#39;algoritmo scritto in MATLAB(&reg;). Abbiamo convalidato i risultati dell&#39;analisi automatizzata contro un&#39;analisi manuale delle immagini stesse e non trovato alcuna differenza statisticamente significativa tra i due metodi. Quando correttamente configurato, analisi di immagine automatizzato con MetaMorph(&reg;) sono un&#39;alternativa rapida e affidabile di misurazione manuale e ha il potenziale per accelerare il processo di ricerca.

Fasi di un neurone sviluppo morfologico in vitro - un test automatizzato.

&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x304C;&#x4ED8;&#x7740;&#x3057;&#x3001;&#x6210;&#x719F;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30AD;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x901A;&#x904E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x9077;&#x79FB;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x5065;&#x5EB7;&#x3068;&#x767A;&#x9054;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x7D4C;&#x9A13;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x76EE;&#x306B;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x660E;&#x767D;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x610F;&#x5473;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x304C;&#x56F0;&#x96E3;&#x306A;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x30DE;&#x30CB;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x753B;&#x50CF;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x9000;&#x5C48;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x304C;&#x304B;&#x304B;&#x308A;&#x3001;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3082;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x810A;&#x9AC4;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5E02;&#x8CA9;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#x89E3;&#x6790;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;MetaMorph&#xFF08;&#xAE;&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#x304A;&#x3088;&#x3073;MetaMorph&#xFF08;&#xAE;&#xFF09;&#x3068;MATLAB&#xFF08;&#xAE;&#xFF09;&#x3067;&#x66F8;&#x304B;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;MATLAB&#xFF08;&#xAE;&#xFF09;&#x3067;&#x66F8;&#x304B;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;MetaMorph&#xFF08;&#xAE;&#xFF09;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x51FA;&#x529B;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x753B;&#x50CF;&#x306E;&#x624B;&#x52D5;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x306F;&#x7D71;&#x8A08;&#x7684;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5DEE;&#x304C;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; MetaMorph&#xFF08;&#xAE;&#xFF09;&#x3092;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x81EA;&#x52D5;&#x753B;&#x50CF;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x624B;&#x52D5;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x4EE3;&#x66FF;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x52A0;&#x901F;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A66;&#x9A13;&#x7BA1;&#x5185;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x6BB5;&#x968E; - &#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;

&#xB2E4;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xC900;&#xC218; &#xD558; &#xACE0; &#xC131;&#xC219; &#xCCB4; &#xC678;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD615;&#xD0DC;&#xC18C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C4;&#xAE08;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBB34;&#xB300; &#xC804;&#xD658; &#xC0C1;&#xB300; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD568;&#xC218;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBB38;&#xD654;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC740; &#xBCF4;&#xD1B5; &#xC544;&#xC8FC; &#xACBD;&#xD5D8; &#xC788;&#xB294; &#xB208;&#xC5D0; &#xBD84;&#xBA85;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC885;&#xC885; &#xC758;&#xBBF8; &#xC788;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xACC4;&#xB7C9; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xC815;&#xB7C9;&#xD654;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xB3D9; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC9C0;&#xB8E8;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC18C;&#xBAA8; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC2E4;&#xC218; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0C1;&#xC5C5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; Metamorph(&reg;)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xACC4;&#xB7C9; &#xBC30;&#xC544; &#xCC99;&#xC218; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCCB4; &#xC678; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; MATLAB(&reg;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC131; &#xB41C; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; &#xB0B4;&#xBCF4;&#xB0B8;&#xB41C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; Metamorph(&reg;)&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; Neurite &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xC140; &#xB4DD;&#xC810; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBA3C;&#xC800; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xB97C; &#xCC44;&#xD0DD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; MetaMorph(&reg;) MATLAB(&reg;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC131; &#xB41C; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCD9C;&#xB825;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xBD84;&#xB958; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC19;&#xC740; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC218;&#xB3D9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95; &#xC0AC;&#xC774; &#xD1B5;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC758; &#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC801;&#xC808; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; MetaMorph(&reg;) &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB300;&#xCCB4; &#xC218;&#xB3D9; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xAC00;&#xC18D; &#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;.

&#xC2E0;&#xACBD; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCCB4; &#xC678;-&#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xB2E8;&#xACC4;.

Despu&#xE9;s de la siembra en vitro, las neuronas pasar a trav&#xE9;s de una serie de etapas morfol&#xF3;gicas que acepten y madurar. Estas transiciones etapa morfol&#xF3;gicas se puede controlar como una funci&#xF3;n del tiempo para evaluar la salud relativa y el desarrollo de cultivos neuronales en diferentes condiciones. Si bien el desarrollo morfol&#xF3;gico suele ser bastante obvio para el ojo experto, a menudo puede ser dif&#xED;cil de cuantificar de una manera significativa. Cuantificaci&#xF3;n de la morfolog&#xED;a general se basa en la medici&#xF3;n manual de la imagen y por lo tanto puede ser tedioso, lento y propenso a errores humanos. Aqu&#xED; mostramos el desarrollo exitoso de un proceso automatizado utilizando el disponible en el mercado de an&#xE1;lisis de im&#xE1;genes del programa MetaMorph (&#xAE;) para analizar la morfolog&#xED;a y cuantificar el crecimiento de las neuronas motoras espinales embrionarias in vitro. Nuestro proceso se bas&#xF3; en el crecimiento de las neuritas y los m&#xF3;dulos de c&#xE9;lulas de puntuaci&#xF3;n incluidos en MetaMorph (&#xAE;) y en el an&#xE1;lisis de los datos exportados con un algoritmo escrito en MATLAB (&#xAE;). En primer lugar, adopt&#xF3; una serie de etapas de la neurona motora desarrollo in vitro. Las neuronas se clasifican en estas etapas directamente de la salida disponible de MetaMorph (&#xAE;) utilizando el algoritmo escrito en MATLAB (&#xAE;). Hemos validado los resultados del an&#xE1;lisis automatizado en contra de un an&#xE1;lisis manual de las mismas im&#xE1;genes y no encontr&#xF3; diferencias estad&#xED;sticamente significativas entre los dos m&#xE9;todos. Cuando est&#xE1; debidamente configurado, el an&#xE1;lisis de imagen automatizado con MetaMorph (&#xAE;) es una alternativa r&#xE1;pida y fiable para la medici&#xF3;n manual y tiene el potencial para acelerar el proceso de investigaci&#xF3;n.

Youssef Naim

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications