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Slice Preparation, Organotypic Tissue Culturing and Luciferase Recording of Clock Gene Activity in the Suprachiasmatic Nucleus

A central circadian (~24 hr) clock coordinating daily rhythms in physiology and behavior resides in the suprachiasmatic nucleus (SCN) located in the ...

Karolinska Institutet

&#x975E;&#x6D32;&#x660F;&#x7761;&#x75C5;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x8282;&#x594F;&#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x3002;&#x4E0D;&#x662F;&#x5982;&#x679C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x65F6;&#x949F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8282;&#x594F;&#x4EE3;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x6162;&#x6027;&#x5927;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x660F;&#x7761;&#x75C5;&#xFF0C;&#x81F4;&#x80DE;&#x5916;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x9525;&#x4F53; &#xFF08;Tb &#x9525;&#x4F53;)&#xFF0C;&#x4EE5;&#x7814;&#x7A76;&#x5BF9;&#x65F6;&#x949F;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4ECE;&#x611F;&#x67D3;&#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x9525;&#x4F53;&#x7684; Period1-&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176; (&#x7B2C; 1-&#x5415;&#x514B;) &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5927;&#x9F20;&#x5782;&#x4F53;&#x817A;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5728;&#x7B2C; 1 &#x5415;&#x514B;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x65F6;&#x671F;&#x662F;&#x5927;&#x5927;&#x7F29;&#x77ED;&#x3002;&#x5728;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x542B;&#x89C6;&#x4EA4;&#x53C9;&#x4E0A;&#x6838; (SCN)&#xFF0C;&#x7B2C; 1-&#x5415;&#x514B;&#x8282;&#x594F;&#x5355;&#x4F4D;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684; 21%&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7B2C; 1&#x3001; &#x65F6;&#x949F;&#x548C; Bmal1 SCN&#x3001; &#x677E;&#x679C;&#x817A;&#x53CA;&#x4ECE;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528; qPCR &#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x813E;&#x810F; mRNA&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65F6;&#x949F;&#x548C;&#x677E;&#x679C;&#x817A;&#x548C;&#x813E;&#x7ED3;&#x6838;&#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x540E;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; Bmal1 &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x662F;&#x5B9A;&#x671F;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6E29;&#x548C;&#x81EA;&#x53D1;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8; &#xFF1B;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x65E9;&#x671F;&#x540E;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x663E;&#x8457;&#x4E0B;&#x964D;&#x81EA;&#x53D1;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8282;&#x594F;&#x7684;&#x632F;&#x5E45;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x8EAB;&#x4F53;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8282;&#x594F;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E0B;&#x964D;&#x7684;&#x89C4;&#x5F8B;&#x548C;&quot;&#x5065;&#x5168;&#x6027;&quot;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4EE5;&#x524D;&#x5DF2;&#x8BC1;&#x660E;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x514B;&#x6C0F;&#x9525;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x5BFC;&#x81F4; SCN &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7D0A;&#x4E71;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709; 21%&#x7684; SCN &#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x5E72;&#x6270;&#x4E86;&#x7B2C; 1 &#x5415;&#x514B;&#x8282;&#x594F;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x6574;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x6539;&#x53D8;&#x5206;&#x5B50;&#x65F6;&#x949F;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5916;&#x8BBE;&#x65F6;&#x949F;&#x5305;&#x62EC;&#x8111;&#x5782;&#x4F53;&#x3001; &#x677E;&#x679C;&#x817A;&#x548C;&#x813E;&#x3002;

&#x65F6;&#x949F;&#x5728;&#x5927;&#x9F20;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x6240;&#x81F4;&#x7684;&#x6162;&#x6027;&#x708E;&#x75C7;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

African sleeping sickness is characterized by alterations in rhythmic functions. It is not known if the disease affects the expression of clock genes, which are the molecular basis for rhythm generation. We used a chronic rat model of experimental sleeping sickness, caused by the extracellular parasite Trypanosoma brucei brucei (Tb brucei), to study the effects on clock gene expression. In tissue explants of pituitary glands from Period1-luciferase (Per1-luc) transgenic rats infected with Tb brucei, the period of Per1-luc expression was significantly shorter. In explants containing the suprachiasmatic nuclei (SCN), the Per1-luc rhythms were flat in 21% of the tissues. We also examined the relative expression of Per1, Clock, and Bmal1 mRNA in the SCN, pineal gland, and spleen from control and infected rats using qPCR. Both Clock and Bmal1 mRNA expression was reduced in the pineal gland and spleen following Tb brucei infection. Infected rats were periodic both in core body temperature and in locomotor activity; however, early after infection, we observed a significant decline in the amplitude of the locomotor activity rhythm. In addition, both activity and body temperature rhythms exhibited decreased regularity and "robustness." In conclusion, although experimental trypanosome infection has previously been shown to cause functional disturbances in SCN neurons, only 21% of the SCN explants had disturbed Per1-luc rhythms. However, our data show that the infection overall alters molecular clock function in peripheral clocks including the pituitary gland, pineal gland, and spleen.

Clock gene expression during chronic inflammation induced by infection with Trypanosoma brucei brucei in rats.

La maladie du sommeil africaine est caract&#xE9;ris&#xE9;e par des alt&#xE9;rations de fonctions rythmiques. On ne sait pas si la maladie affecte l&#x26;#39;expression de g&#xE8;nes de l&#x26;#39;horloge, qui sont la base mol&#xE9;culaire pour la g&#xE9;n&#xE9;ration de rythme. Nous avons utilis&#xE9; un mod&#xE8;le de rat chronique de la maladie du sommeil exp&#xE9;rimentale, caus&#xE9;e par le parasite extracellulaire Trypanosoma brucei brucei (Tb brucei), pour &#xE9;tudier les effets sur l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes d&#x26;#39;horloge. Dans des explants de tissus de glandes pituitaires de p&#xE9;riode1-lucif&#xE9;rase (Per1-luc) chez les rats transg&#xE9;niques infect&#xE9;es par la tuberculose brucei, la p&#xE9;riode de Per1-luc expression &#xE9;tait significativement plus courte. Dans des explants contenant le noyau suprachiasmatique (SCN), les rythmes Per1-luc ont &#xE9;t&#xE9; stables dans 21% des tissus. Nous avons &#xE9;galement examin&#xE9; l&#x26;#39;expression relative de Per1, horloge, et BMAL1 ARNm dans le SCN, la glande pin&#xE9;ale, et de la rate du contr&#xF4;le et de rats infect&#xE9;s en utilisant qPCR. Les deux Horloge et expression de l&#x26;#39;ARNm BMAL1 a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duit dans la glande pin&#xE9;ale et de la rate &#xE0; la suite Tb brucei. Rats infect&#xE9;s &#xE9;taient &#xE0; la fois p&#xE9;riodique de la temp&#xE9;rature centrale du corps et de l&#x26;#39;activit&#xE9; locomotrice, mais, au d&#xE9;but apr&#xE8;s l&#x26;#39;infection, nous avons observ&#xE9; une baisse significative de l&#x26;#39;amplitude du rythme de l&#x26;#39;activit&#xE9; locomotrice. En outre, &#xE0; la fois l&#x26;#39;activit&#xE9; et les rythmes de la temp&#xE9;rature corporelle ont montr&#xE9; une diminution de r&#xE9;gularit&#xE9; et de la &#xAB;robustesse&#xBB;. En conclusion, m&#xEA;me si une infection exp&#xE9;rimentale du trypanosome a d&#xE9;j&#xE0; &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour causer des troubles fonctionnels dans les neurones du SCN, seulement 21% des explants SCN avait troubl&#xE9; Per1-luc rythmes. Cependant, nos donn&#xE9;es montrent que l&#x26;#39;infection modifie la fonction globale horloge mol&#xE9;culaire dans les horloges p&#xE9;riph&#xE9;riques, y compris l&#x26;#39;hypophyse, la glande pin&#xE9;ale, et de la rate.

Expression g&#xE8;nes de l&#x26;#39;horloge pendant l&#x26;#39;inflammation chronique induite par l&#x26;#39;infection &#xE0; Trypanosoma brucei brucei chez les rats

Afrikanischen Schlafkrankheit zeichnet sich durch &Auml;nderungen in rhythmische Funktionen. Es ist nicht bekannt, ob die Krankheit die Expression von Genen Uhr, betrifft die molekulare Grundlage f&uuml;r Rhythmus-Generation sind. Wir verwendeten eine chronische Rattenmodell f&uuml;r experimentelle Schlafkrankheit, verursacht durch die extrazellul&auml;re Parasiten Trypanosoma Brucei Brucei (Tb Brucei), um die Auswirkungen auf die Uhr-Genexpression zu studieren. Im Gewebe Explantaten der Hypophyse aus Dauer1-Luciferase (Per1-Luc) transgenen Ratten mit Tb Brucei infiziert war der Zeitraum Per1-Luc Ausdrucks deutlich k&uuml;rzer. Explantaten, enth&auml;lt die gefundenes Kerne (SCN) waren die Rhythmen Per1-Luc Wohnung in 21 % der Gewebe. Wir untersucht auch den relativen Ausdruck Per1, Taktgeber und Bmal1 mRNA in der SCN, Zirbeldr&uuml;se und Milz von Kontrolle und infizierte Ratten mit qPCR. Beide Uhren und Bmal1-mRNA Ausdruck in der Zirbeldr&uuml;se und Milz nach Tb Brucei-Infektion reduziert. Infizierte Ratten wurden regelm&auml;&szlig;ige, sowohl in der K&ouml;rperkerntemperatur lokomotorische Aktivit&auml;t; jedoch fr&uuml;h nach Infektion beobachteten wir einen signifikanten R&uuml;ckgang in der Amplitude der lokomotorischen T&auml;tigkeit-Rhythmus. Dar&uuml;ber hinaus stellte sowohl Aktivit&auml;t als auch K&ouml;rper-Temperatur-Rhythmen, verminderte Regelm&auml;&szlig;igkeit und &quot;Robustheit.&quot; Obwohl experimentelle gei&szlig;eltragenden Infektion zuvor zu Funktionseinbu&szlig;en SCN Neuronen f&uuml;hren gezeigt wurde, hatte nur 21 % der SCN-Explantaten abschlie&szlig;end Per1-Luc Rhythmen gest&ouml;rt. Unsere Daten zeigen jedoch, dass die Infektion allgemeine Molekulare Uhr Funktion in peripheren Uhren einschlie&szlig;lich der Hypophyse, Zirbeldr&uuml;se und Milz &auml;ndert.

Uhr-Genexpression w&auml;hrend der chronischen Entz&uuml;ndung, hervorgerufen durch eine Infektion mit Trypanosoma Brucei Brucei bei Ratten.

&#x4E19;&#x620A;&#x9178;&#x94A0; (VPA) &#x662F;&#x7528;&#x6765;&#x6CBB;&#x7597;&#x8E81;&#x90C1;&#x75C7;&#xFF0C;&#x663C;&#x591C;&#x8282;&#x5F8B;&#x6027;&#x4E0E;&#x9A9A;&#x4E71;&#x6709;&#x5173;&#x7CBE;&#x795E;&#x79D1;&#x75BE;&#x75C5;&#x6297;&#x60CA;&#x53A5;&#x3002;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11; VPA &#x5982;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD;&#x751F;&#x7406;&#x8282;&#x5F8B;&#x3002;&#x4F5C;&#x8005;&#x57F9;&#x517B;&#x5305;&#x542B;&#x4E3B;&#x8111;&#x8D77;&#x640F;&#x5668;&#x7684;&#x663C;&#x591C;&#x8282;&#x5F8B;&#x6027;&#x3001; &#x89C6;&#x4EA4;&#x53C9;&#x4E0A;&#x6838; (SCN) &#x548C; PERIOD2::LUCIFERASE (PER2::LUC) &#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x76AE;&#x80A4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x7814;&#x7A76; PER2::LUC &#x8282;&#x5F8B;&#x5BF9; VPA &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;VPA &#xFF08;1 &#x6BEB;&#x7C73;&#xFF09; &#x663E;&#x8457;&#x9636;&#x6BB5;&#x5148;&#x8FDB;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x6700;&#x4F4E;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x65F6;&#x7684; PER2::LUC &#x8282;&#x594F; (&#x69FD;&#xFF0C;~ ZT 0) PER2::LUC &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76F8;&#x4F4D;&#x5EF6;&#x8FDF; PER2::LUC &#x8282;&#x594F;&#x65F6;&#x8FD9;&#x79CD;&#x836F;&#x7269;&#x7BA1;&#x7406;&#x7684;&#x6700;&#x9AD8;&#x65F6;&#x5019; &#xFF08;&#x5CF0;&#x503C;&#xFF0C;~ ZT 12) &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x6574;&#x4F53;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x6216;&#x63A5;&#x8FD1; ZT 12 PER2::LUC &#x632F;&#x8361;&#x632F;&#x5E45;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5BF9;&#x671F;&#x95F4;&#x5E76;&#x65E0;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x9F20;&#x6807;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B9E;&#x65F6; PCR &#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x5176;&#x4ED6;&#x65F6;&#x949F;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86; VPA 2 h &#x5904;&#x7406;&#x540E;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;VPA &#x5DF2;&#x77E5;&#x6291;&#x5236;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x8131;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4F5C;&#x8005;&#x7684;&#x5BF9;&#x5F85;&#x6587;&#x5316;&#x4E0E;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x8131;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x66F2;&#x53E4;&#x6291;&#x83CC;&#x7D20; A &#xFF08;TSA &#xFF1B; 20 ng/mL&#xFF09;&#xFF0C;&#x8981;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x5B50;&#x8282;&#x5F8B;&#x5BF9; VPA &#x548C; TSA &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E13;&#x533A;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4F5C;&#x4E3A; VPA &#x7684; PER2::LUC &#x8282;&#x594F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;VPA &#x548C; TSA &#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H3 &#x4E0A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H4&#x3002;&#x9502;&#x662F;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E38;&#x7528;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x8E81;&#x90C1;&#x75C7;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x8005;&#x8FD8;&#x7814;&#x7A76;&#x7684; PER2::LUC &#x8282;&#x594F;&#x6C2F;&#x5316;&#x9502; (&#x6C2F;&#x5316;&#x9502; &#xFF1B; 10 &#x6BEB;&#x7C73;) &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6C2F;&#x5316;&#x9502;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0E; VPA &#x548C;&#x8F7B;&#x4FBF;&#xFF0C;&#x6C2F;&#x5316;&#x9502; PER2::LUC &#x5EF6;&#x957F;&#x548C;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x5BF9;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; VPA &#x53EF;&#x4EE5;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6216;&#x63A8;&#x8FDB;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x589E;&#x52A0;&#x5E45;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x6839;&#x636E;&#x663C;&#x591C;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684; PERIOD2::LUCIFERASE &#x8282;&#x594F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x8005;&#x8868;&#x660E;&#x6C2F;&#x5316;&#x9502;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x671F;&#x548C;&#x5EF6;&#x957F;&#x4F7F;&#x7528;&#x671F;&#x7684; PER2::LUC &#x8282;&#x594F;&#xFF0C;&#x786E;&#x8BA4;&#x5148;&#x524D;&#x5173;&#x4E8E;&#x663C;&#x591C;&#x8282;&#x5F8B;&#x9502;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x6548;&#x679C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x5FAE;&#x5206; chronotherapeutic &#x5F71;&#x54CD; VPA &#x548C;&#x9502;&#x7684;&#x4F9D;&#x636E;&#x3002;

&#x4E19;&#x620A;&#x9178;&#x76F8;&#x79FB; Period2::Luciferase &#x8282;&#x594F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Valproic acid (VPA) is an anticonvulsant used to treat bipolar disorder, a psychiatric disease associated with disturbances in circadian rhythmicity. Little is known about how VPA affects circadian rhythms. The authors cultured tissues containing the master brain pacemaker for circadian rhythmicity, the suprachiasmatic nuclei (SCN), and skin fibroblasts from transgenic PERIOD2::LUCIFERASE (PER2::LUC) mice and studied the effect of VPA on the circadian PER2::LUC rhythm by measuring bioluminescence. VPA (1 mM) significantly phase advanced the PER2::LUC rhythm when applied at a time point corresponding to the lowest (trough, ~ZT 0) PER2::LUC expression but phase delayed the PER2::LUC rhythm when the drug was administered at the time of highest (peak, ~ZT 12) protein expression. In addition, it significantly increased the overall amplitude of PER2::LUC oscillations at time points at or close to ZT 12 but had no effect on period. Real-time PCR analyses on mouse and human fibroblasts revealed that expressions of other clock genes were increased after 2 h treatment with VPA. Because VPA is known to inhibit histone deacetylation, the authors treated cultures with an established histone deacetylation inhibitor, trichostatin A (TSA; 20 ng/mL), to compare the effect of VPA and TSA on molecular rhythmicity. They found that TSA had similar effects on the PER2::LUC rhythm as VPA. Furthermore, VPA and TSA significantly increased acetylation on histone H3 but in comparison little on histone H4. Lithium is another commonly used treatment for bipolar disorder. Therefore, the authors also studied the impact of lithium chloride (LiCl; 10 mM) on the PER2::LUC rhythm. LiCl delayed the phase, but in contrast to VPA and TSA, LiCl lengthened the PER2::LUC period and had no effect on histone acetylation. These results demonstrate that VPA can delay or advance the phase, as well as increase the amplitude, of the PERIOD2::LUCIFERASE rhythm depending on the circadian time of application. Furthermore, the authors show that LiCl delays the phase and lengthens the period of the PER2::LUC rhythm, confirming previous reports on circadian lithium effects. These different molecular effects may underlie differential chronotherapeutic effects of VPA and lithium.

Valproic acid phase shifts the rhythmic expression of Period2::Luciferase.

L&#x26;#39;acide valpro&#xEF;que (VPA) est un anticonvulsivant utilis&#xE9; pour traiter le trouble bipolaire, une maladie psychiatrique associ&#xE9;e &#xE0; des troubles dans la rythmicit&#xE9; circadienne. On sait peu de savoir comment APV affecte les rythmes circadiens. Les auteurs des tissus de culture contenant le stimulateur c&#xE9;r&#xE9;bral ma&#xEE;tre pour la rythmicit&#xE9; circadienne, le noyau suprachiasmatique (SCN), et les fibroblastes de peau de souris transg&#xE9;niques p&#xE9;riode2 :: lucif&#xE9;rase (LUC PER2 ::) et a &#xE9;tudi&#xE9; l&#x26;#39;effet du VPA sur la PER2 circadien :: rythme LUC en mesurant la bioluminescence. VPA (1 mM) de mani&#xE8;re significative la phase avanc&#xE9;e de la PER2 :: rythme LUC lorsqu&#x26;#39;il est appliqu&#xE9; &#xE0; un moment correspondant &#xE0; la plus faible (creux, ~ ZT 0) :: PER2 expression LUC, mais la phase retard&#xE9;e au rythme PER2 :: LUC lorsque le m&#xE9;dicament a &#xE9;t&#xE9; administr&#xE9; au moment de la plus haute (pic, ~ ZT 12) expression de la prot&#xE9;ine. En outre, il a augment&#xE9; de mani&#xE8;re significative l&#x26;#39;amplitude globale du PER2 :: oscillations LUC &#xE0; points dans le temps &#xE0; ou pr&#xE8;s de ZT 12, mais n&#x26;#39;a eu aucun effet sur la p&#xE9;riode. En temps r&#xE9;el des analyses de PCR sur la souris et de fibroblastes humains a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que les expressions de g&#xE8;nes de l&#x26;#39;horloge d&#x26;#39;autres ont &#xE9;t&#xE9; augment&#xE9;s apr&#xE8;s 2 h de traitement avec l&#x26;#39;acide valpro&#xEF;que. Parce que l&#x26;#39;APV est connu pour inhiber la d&#xE9;sac&#xE9;tylation des histones, les auteurs ont trait&#xE9; les cultures avec un inhibiteur de la d&#xE9;sac&#xE9;tylation des histones &#xE9;tablie, trichostatine A (TSA; 20 ng / ml), pour comparer l&#x26;#39;effet de l&#x26;#39;APV et la TSA sur la rythmicit&#xE9; mol&#xE9;culaire. Ils ont constat&#xE9; que la TSA a eu des effets similaires sur le rythme PER2 :: LUC que l&#x26;#39;APV. En outre, l&#x26;#39;APV et la TSA augment&#xE9; de fa&#xE7;on significative sur l&#x26;#39;ac&#xE9;tylation des histones H3, mais en comparaison peu de l&#x26;#39;histone H4. Le lithium est un autre traitement couramment utilis&#xE9; pour le trouble bipolaire. Par cons&#xE9;quent, les auteurs ont &#xE9;galement &#xE9;tudi&#xE9; l&#x26;#39;impact de chlorure de lithium (LiCl; 10 mM) sur la PER2 :: rythme LUC. LiCl retard&#xE9; la phase, mais contrairement &#xE0; l&#x26;#39;APV et la TSA, LiCl a allong&#xE9; la p&#xE9;riode de PER2 :: LUC et n&#x26;#39;a eu aucun effet sur l&#x26;#39;ac&#xE9;tylation des histones. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que le VPA peut retarder ou avancer la phase, ainsi que d&#x26;#39;augmenter l&#x26;#39;amplitude, de la p&#xE9;riode2 :: rythme LUCIFERASE selon le rythme circadien de la demande. En outre, les auteurs montrent que les retards de la phase de LiCl et allonge la dur&#xE9;e de la PER2 :: rythme LUC, confirmant les pr&#xE9;c&#xE9;dents rapports sur les effets circadiens au lithium. Ces diff&#xE9;rents effets mol&#xE9;culaires peuvent sous-tendre les effets diff&#xE9;rentiels de l&#x26;#39;APV chronoth&#xE9;rapeutiques et le lithium.

Phase acide valpro&#xEF;que D&#xE9;cale l&#x26;#39;expression rythmique de la p&#xE9;riode2 :: lucif&#xE9;rase

Valproins&auml;ure (VPA) ist ein Antikonvulsiva zur Behandlung der bipolaren St&ouml;rung, eine psychiatrische Erkrankung mit St&ouml;rungen in circadiane Rhythmik. Wenig ist bekannt &uuml;ber den Einfluss VPA Tagesrhythmus. Die Autoren Geweben mit der Meister-Gehirn-Schrittmacher f&uuml;r circadiane Rhythmik, gefundenes Kerne (SCN) und Fibroblasten aus transgenen M&auml;usen in PERIOD2::LUCIFERASE (PER2::LUC) kultiviert und untersucht die Auswirkungen von VPS auf den circadianen Rhythmus der PER2::LUC durch Messung der Biolumineszenz. VPA (1 mM) deutlich erweiterte Phase im PER2::LUC-Rhythmus wird auf einem Zeitpunkt entspricht der niedrigsten angewendet (Trog, ~ ZT 0) PER2::LUC Ausdruck aber Phase verz&ouml;gert den PER2::LUC Rhythmus, wenn das Medikament, zum Zeitpunkt der h&ouml;chsten verabreicht wurde (Gipfel ~ ZT 12) Proteinexpression. Zus&auml;tzlich es deutlich erh&ouml;ht die Gesamtamplitude PER2::LUC Schwingungen zu Zeitpunkten entspricht oder nahekommt, ZT 12 aber hatte keinen Einfluss auf die Periode. Echtzeit-PCR-Analysen auf Maus und menschlichen Fibroblasten ergab, dass Ausdr&uuml;cke anderer Gene Uhr nach 2 h Behandlung mit VPA erh&ouml;ht wurden. Da VPA bekannt ist, dass Histon-Deacetylierung hemmen, behandelt die Autoren Kulturen mit einem etablierten Histon-Deacetylierung-Hemmer, Trichostatin A (TSA; 20 ng/mL), um die Wirkung von VPS und TSA auf molekulare Rhythmik zu vergleichen. Sie fanden, dass die TSA &auml;hnliche Auswirkungen auf den PER2::LUC-Rhythmus als VPA hatte. Dar&uuml;ber hinaus, VPS und TSA deutlich erh&ouml;ht Acetylierung auf Histon H3, sondern im Vergleich wenig auf Histon H4. Lithium ist ein weiteres h&auml;ufig verwendete Behandlung der bipolaren St&ouml;rung. Auf den PER2::LUC-Rhythmus studierte die Autoren daher auch die Auswirkungen von Lithiumchlorid (LiCl; 10 mM). LiCl verz&ouml;gert die Phase, aber im Gegensatz zu VPA und TSA, LiCl verl&auml;ngert die PER2::LUC Periode und hatte keine Auswirkungen auf Histon-Acetylierung. Diese Ergebnisse zeigen, dass VPA kann verz&ouml;gern oder voraus die Phase, als auch die Amplitude, der den PERIOD2::LUCIFERASE-Rhythmus abh&auml;ngig von circadian der Anwendung zu erh&ouml;hen. Dar&uuml;ber hinaus zeigen die Autoren, dass LiCl die Phase verz&ouml;gert und die Zeit der PER2::LUC Rhythmus verl&auml;ngert, best&auml;tigen fr&uuml;here Berichte &uuml;ber circadian Lithium Auswirkungen. Diese verschiedenen molekularen Effekte m&ouml;glicherweise differenziellen Chronotherapeutic Effekte von VPA und Lithium zugrunde liegen.

Valproins&auml;ure saure Phase verschiebt den rhythmischen Ausdruck des Period2::Luciferase.

Acido valproico (VPA) &egrave; un anticonvulsivante usato per trattare il disturbo bipolare, una malattia psichiatrica associata a disturbi nella ritmicit&agrave; circadiano. Poco &egrave; noto sugli effetti VPA sui ritmi circadiani. Gli autori hanno colto tessuti contenenti il pacemaker cerebrale master per circadiano ritmicit&agrave;, il nucleo soprachiasmatico (SCN) e nei fibroblasti della pelle da topi transgenici PERIOD2::LUCIFERASE (PER2::LUC) e ha studiato l&#39;effetto di VPA sul ritmo circadiano PER2::LUC misurando bioluminescenza. VPA (1 mM) significativamente fase avanzata il ritmo PER2::LUC quando applicato a un punto di tempo corrispondente al pi&ugrave; basso (trogolo, ~ ZT 0) espressione PER2::LUC ma fase ritardata al ritmo PER2::LUC quando il farmaco &egrave; stato somministrato al momento della massima (picco, ~ ZT 12) l&#39;espressione della proteina. Inoltre, significativamente aumentato l&#39;ampiezza complessiva delle oscillazioni PER2::LUC in punti temporali vicino ZT 12 o ma ha avuto alcun effetto sul periodo. Analisi PCR in tempo reale su mouse e fibroblasti umani ha rivelato che le espressioni di altri geni dell&#39;orologio erano aumentate dopo il trattamento con VPA 2 h. Perch&eacute; VPA &egrave; noto per inibire la deacetilazione istoni, gli autori trattati culture con un inibitore di deacetilazione istoni stabilito, trichostatin A (TSA; 20 ng/mL), per confrontare l&#39;effetto di VPA e TSA sulla ritmicit&agrave; molecolare. Hanno trovato che TSA ha avuto effetti simili sul ritmo PER2::LUC come VPA. Inoltre, VPA e TSA significativamente aumentato acetilazione dell&#39;istone H3, ma nel confronto poco su istone H4. Il litio &egrave; un altro trattamento comunemente usato per il disturbo bipolare. Pertanto, gli autori hanno studiato anche l&#39;impatto di cloruro di litio LiCl (10 mM) sul ritmo PER2::LUC. LiCl ritardato la fase, ma in contrasto con VPA e TSA, LiCl allungato il periodo PER2::LUC e ha avuto alcun effetto su acetilazione dell&#39;istone. Questi risultati dimostrano che VPA pu&ograve; ritardare o far avanzare la fase, come pure aumentare l&#39;ampiezza del ritmo PERIOD2::LUCIFERASE a seconda del periodo circadiano dell&#39;applicazione. Inoltre, gli autori mostrano che LiCl ritarda la fase e allunga il periodo del ritmo PER2::LUC, confermando precedenti relazioni sugli effetti del litio circadiano. Questi diversi effetti molecolari possono essere alla base di effetti chronotherapeutic differenziale di VPA e litio.

Fase di acido valproico sposta l&#39;espressione ritmica del Period2::Luciferase.

&#x30D0;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x9178;&#xFF08;VPA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x53CC;&#x6975;&#x6027;&#x969C;&#x5BB3;&#x3001;&#x6982;&#x65E5;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x4E71;&#x308C;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7CBE;&#x795E;&#x75BE;&#x60A3;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6297;&#x3051;&#x3044;&#x308C;&#x3093;&#x85AC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;VPA&#x306F;&#x3001;&#x6982;&#x65E5;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x8457;&#x8005;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#xFF08;PER2 :: LUC&#xFF09;PERIOD2 ::&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x6982;&#x65E5;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3001;&#x8996;&#x4EA4;&#x53C9;&#x4E0A;&#x6838;&#xFF08;SCN&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x76AE;&#x819A;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8133;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306F;&#x3001;&#x6982;&#x65E5;PER2&#x306B;VPA&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;:: LUC&#x306E;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002; VPA&#xFF08;1 mm&#xFF09;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;PER2&#x3092;&#x9032;&#x76F8;:: LUC&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;PER2 :: LUC&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x85AC;&#x304C;&#x6295;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9045;&#x5EF6;&#x6700;&#x5C0F;&#xFF08;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x301C;ZT 0&#xFF09;PER2 :: LUC&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x3001;&#x4F4D;&#x76F8;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x305F;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x6700;&#x9AD8;&#xFF08;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x3001;&#x301C;ZT 12&#xFF09;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6642;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;12&#x6642;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;ZT&#x3059;&#x308B;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;PER2&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x632F;&#x5E45;:: LUC&#x632F;&#x52D5;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x671F;&#x9593;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;PCR&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x6642;&#x8A08;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306F;VPA&#x3067;2&#x6642;&#x9593;&#x51E6;&#x7406;&#x5F8C;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; VPA&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8457;&#x8005;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3;A&#x3068;&#x6587;&#x5316;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#xFF08;TSA&#x3001;20 ng / mL&#xFF09;&#x3092;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;VPA&#x3068;TSA&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;TSA&#x304C;PER2&#x4E0A;&#x3067;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;:: VPA&#x3068;&#x3057;&#x3066;LUC&#x306E;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5206;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;VPA&#x3068;TSA&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H3&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x5C11;&#x3057;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H4&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x306F;&#x53CC;&#x6975;&#x6027;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x3067;&#x3059;&#x3002; PER2&#x3067;:: LUC&#x306E;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8457;&#x8005;&#x3089;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5869;&#x5316;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#xFF08;10mM&#x306E;LiCl&#x3092;&#xFF09;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5869;&#x5316;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x4F4D;&#x76F8;&#x304C;&#x9045;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;VPA&#x3068;TSA&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;LiCl&#x3068;&#x306F;&#x3001;PER2 :: LUC&#x671F;&#x9593;&#x3092;&#x9577;&#x304F;&#x3057;&#x3001;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;VPA&#x304C;PERIOD2&#x306E;&#x4F4D;&#x76F8;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x632F;&#x5E45;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x3001;::&#x3001;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6982;&#x65E5;&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x9045;&#x3089;&#x305B;&#x305F;&#x308A;&#x3001;&#x9032;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x8457;&#x8005;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x5869;&#x5316;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x76F8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PER2&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x3092;&#x9577;&#x304F;:: LUC&#x306E;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x3001;&#x6982;&#x65E5;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;VPA&#x3068;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x5DEE;chronotherapeutic&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D0;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x9178;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;Period2 ::&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;

Valproic &#xC0B0; (VPA)&#xB294; anticonvulsant &#xC591;&#xADF9;&#xC131; &#xC9C8;&#xD658;, circadian rhythmicity&#xC5D0; &#xBC29;&#xD574;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC815;&#xC2E0; &#xC9C8;&#xD658;&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC791;&#xC740; VPA circadian &#xB9AC;&#xB4EC;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC800;&#xC790; circadian rhythmicity, suprachiasmatic &#xD575; (SCN)&#xC640; &#xD53C;&#xBD80; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; PERIOD2::LUCIFERASE (PER2::LUC) &#xC950;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD130; &#xB1CC; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xBC15; &#xB3D9;&#xAE30;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC30;&#xC591; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; circadian PER2::LUC &#xB9AC;&#xB4EC;&#xC5D0; VPA&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. VPA (1mm) &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xACE0;&#xAE09;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xCD5C;&#xC800; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC9C0;&#xC810;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB420; &#xB54C; PER2::LUC &#xB9AC;&#xB4EC; (&#xAD6C; &#xC720;, ~ ZT 0) &#xC57D;&#xBB3C;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xD22C;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; PER2::LUC &#xC2DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC704;&#xC0C1; &#xC9C0;&#xC5F0; PER2::LUC &#xB9AC;&#xB4EC; (&#xD53C;&#xD06C;, ~ ZT 12) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xC815;. &#xB610;&#xD55C;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C; PER2::LUC &#xC9C4;&#xB3D9; &#xB610;&#xB294; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; ZT 12 &#xC2DC;&#xAC04; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD588;&#xB2E4; &#xAE30;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; VPA 2h &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xACC4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. VPA &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; deacetylation &#xC5B5;&#xC81C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC800;&#xC790; (TSA; 20 ng/mL), &#xBD84;&#xC790; rhythmicity VPA TSA&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xB3C4; &#xBE44;&#xAD50; &#xC124;&#xB9BD;&#xB41C; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; deacetylation &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, trichostatin A &#xBB38;&#xD654; &#xCDE8;&#xAE09;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBC1C;&#xACAC; TSA VPA&#xB85C; PER2::LUC &#xB9AC;&#xB4EC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, VPA &#xBC0F; TSA&#xC5D0;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; acetylation &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; H3 &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0; &#xC99D;&#xAC00; H4 &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740;. &#xB9AC;&#xD2AC;&#xC740; &#xC591;&#xADF9;&#xC131; &#xC7A5;&#xC560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB610; &#xB2E4;&#xB978; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC800;&#xC790; &#xB610;&#xD55C; PER2::LUC &#xB9AC;&#xB4EC;&#xC5D0; &#xB9AC;&#xD2AC; &#xC5FC;&#xD654; (LiCl; 10 m m)&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. LiCl &#xC9C0;&#xC5F0; &#xC704;&#xC0C1;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; VPA &#xBC0F; TSA&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; LiCl PER2::LUC &#xAE30;&#xAC04; &#xAE38;&#xC5B4; &#xACE0; histone acetylation&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; VPA &#xC9C0;&#xC5F0; &#xB610;&#xB294; &#xC704;&#xC0C1;, &#xC0AC;&#xC804; &#xBFD0; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; circadian &#xC2DC;&#xAC04; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; PERIOD2::LUCIFERASE &#xB9AC;&#xB4EC;&#xC758; &#xC9C4;&#xD3ED;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC785;&#xC99D;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC800;&#xC790; LiCl &#xC704;&#xC0C1; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xBC0F; circadian &#xB9AC;&#xD2AC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xC804; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; PER2::LUC &#xB9AC;&#xB4EC;&#xC758; &#xAE30;&#xAC04;&#xC744; &#xAE38;&#xAC8C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xD6A8;&#xACFC; VPA&#xC640; &#xB9AC;&#xD2AC;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; chronotherapeutic &#xD6A8;&#xACFC; &#xAE30;&#xCD08; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Valproic acid &#xC704;&#xC0C1; &#xC774;&#xB3D9; period2::luciferase&#xC758; &#xB9AC;&#xB4EC; &#xD45C;&#xD604; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El &#xE1;cido valproico (VPA) es un anticonvulsivo utilizado para tratar el trastorno bipolar, una enfermedad psiqui&#xE1;trica asociada con alteraciones en el ritmo circadiano. Poco se sabe acerca de c&#xF3;mo afecta a los ritmos circadianos de VPA. Los autores tejidos cultivados que contienen el marcapasos cerebral para el maestro de la ritmicidad circadiana, el n&#xFA;cleo supraquiasm&#xE1;tico (SCN), y fibroblastos de la piel de ratones transg&#xE9;nicos per&#xED;odo2 :: luciferasa (PER2 :: LUC) y se estudi&#xF3; el efecto del &#xE1;cido valproico en el ritmo circadiano PER2 :: LUC midiendo bioluminiscencia. VPA (1 mM) significativamente fase avanzada de la PER2 :: ritmo LUC cuando se aplica a un punto en el tiempo correspondiente a la menor (a trav&#xE9;s, ~ ZT 0) :: PER2 expresi&#xF3;n de LUC, pero un retraso de fase del ritmo LUC PER2 :: cuando el f&#xE1;rmaco se administr&#xF3; en el momento de m&#xE1;xima (pico, ~ ZT 12) expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na. Adem&#xE1;s, se aument&#xF3; significativamente la amplitud global de PER2 :: oscilaciones LUC en puntos de tiempo en o cerca ZT a 12 pero no tuvo efecto sobre per&#xED;odo. En tiempo real los an&#xE1;lisis de PCR en rat&#xF3;n y fibroblastos humanos revel&#xF3; que las expresiones de los genes del reloj otros se incrementaron despu&#xE9;s de las 2 h de tratamiento con VPA. Debido a VPA es conocida para inhibir la desacetilaci&#xF3;n de histonas, los autores trataron los cultivos con un inhibidor de la desacetilaci&#xF3;n de histonas establecida, tricostatina A (TSA, 20 ng / ml), para comparar el efecto del &#xE1;cido valproico y la TSA en la ritmicidad molecular. Ellos encontraron que la TSA tuvo efectos similares en el T&#xED;tulo de PER2 ritmo Luc VPA. Por otra parte, VPA y la TSA increment&#xF3; significativamente la acetilaci&#xF3;n de la histona H3, pero en comparaci&#xF3;n con poco en la histona H4. El litio es otro tratamiento com&#xFA;n para el trastorno bipolar. Por lo tanto, los autores tambi&#xE9;n estudiaron el impacto de cloruro de litio (LiCl, 10 mM) en el ritmo de PER2 :: LUC. LiCl retrasa la fase, pero en contraste con VPA y la TSA, LiCl alargado el per&#xED;odo de PER2 :: LUC y no tuvo ning&#xFA;n efecto en la acetilaci&#xF3;n de histonas. Estos resultados demuestran que el VPA puede retrasar o adelantar la fase, as&#xED; como aumentar la amplitud, de la periodo2 :: ritmo de luciferasa en funci&#xF3;n del tiempo circadiano de aplicaci&#xF3;n. Por otra parte, los autores muestran que los retrasos LiCl la fase y se alarga el per&#xED;odo de la PER2 :: ritmo LUC, lo que confirma informes anteriores sobre los efectos de litio circadianos. Estos efectos moleculares diferentes pueden ser la base diferencial efectos cronoterap&#xE9;uticos de VPA y el litio.

Article	Year
Clock gene expression during chronic inflammation induced by infection with Trypanosoma brucei brucei in rats. Journal of biological rhythms\| PubMed ID: 20348460	2010
Valproic acid phase shifts the rhythmic expression of Period2::Luciferase. Journal of biological rhythms\| PubMed ID: 22215612	2011

Gabriella B. S. Lundkvist

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