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Protocol for Recombinant RBD-based SARS Vaccines: Protein Preparation, Animal Vaccination and Neutralization Detection

Based on their safety profile and ability to induce potent immune responses against infections, subunit vaccines have been used as candidates for a wide ...

New York Blood Center

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Three-color fluorescence detection methods are described based upon covalently coupling the dye 2-methoxy-2,4-diphenyl-2(2H)-furanone (MDPF) to proteins immobilized on poly(vinylidene difluoride) (PVDF) membranes, followed by detection of target proteins using alkaline-phosphatase-conjugated reporter molecules in combination with the fluorogenic substrate 9H-(1,3-dichloro-9,9-dimethylacridin-2-one-7-yl) phosphate (DDAO-phosphate) as well as horseradish peroxidase-conjugated reporter molecules in combination with the new fluorogenic substrate Amplex Gold reagent. This results in all proteins in the profile being visualized as fluorescent blue signal, those detected specifically with the alkaline phosphatase conjugate appearing as fluorescent red signal and those detected specifically with the horseradish peroxidase conjugate appearing as fluorescent yellow signal. Using conventional secondary antibodies, two different targets may be identified as long as primary antibodies generated from two different species are used in the analysis. However, Zenon antibody labeling technology eliminates this restriction, permitting the simultaneous use of two different mouse monoclonal antibodies or two different rabbit polyclonal antibodies in the same electroblotting experiment. The trichromatic detection system is broadly compatible with UV epi-illuminators combined with photographic or charge-coupled device (CCD) cameras, and xenon-arc sources equipped with appropriate excitation/emission filters. Alternatively, the enzyme conjugates may be detected using a laser-based gel scanner. The trichromatic method permits detection of low nanogram amounts of protein and allows for unambiguous identification of two different target proteins relative to the entire protein profile on a single electroblot, precluding any requirement for running replicate gels that would otherwise require separate visualization of total proteins and subsequent alignment with multiple chemiluminescent or colorimetric signals generated on different electroblots.

Simultaneous trichromatic fluorescence detection of proteins on Western blots using an amine-reactive dye in combination with alkaline phosphatase- and horseradish peroxidase-antibody conjugates.

D&eacute;tection de fluorescence trois couleurs sont d&eacute;crites les m&eacute;thodes fond&eacute;es sur leur couplage covalent le colorant 2-m&eacute;thoxy-2, 4-diph&eacute;nyl-2(2H)-furanone (MDPF) sur prot&eacute;ines immobilis&eacute;s sur des membranes de poly(vinylidene difluoride) (PVDF), suivies par la d&eacute;tection de prot&eacute;ines cibles &agrave; l&#39;aide de mol&eacute;cules alcalines conjugu&eacute; &agrave; la phosphatase journaliste en combinaison avec le phosphate de 9H-(1,3-dichloro-9,9-dimethylacridin-2-one-7-yl) de substrat fluorog&egrave;ne (DDAO-phosphate) ainsi que des mol&eacute;cules de journaliste conjugu&eacute;s &agrave; la peroxydase de raifort en combinaison avec le nouveau substrat fluorog&egrave;ne r&eacute;actif Amplex or. Cela se traduit par toutes les prot&eacute;ines dans le profil en cours de visualisation comme signal bleu fluorescent d&eacute;tect&eacute; plus pr&eacute;cis&eacute;ment avec le conjugu&eacute; de la phosphatase alcaline apparaissant en tant que signal rouge fluorescent et ceux d&eacute;tect&eacute;s plus pr&eacute;cis&eacute;ment avec le conjugu&eacute; de peroxydase de raifort apparaissant en tant que signal jaune fluorescent. &Agrave; l&#39;aide d&#39;anticorps secondaires classiques, deux cibles diff&eacute;rentes peuvent &ecirc;tre identifi&eacute;s dans la mesure des anticorps primaires produits de deux esp&egrave;ces diff&eacute;rentes sont utilis&eacute;es dans l&#39;analyse. Toutefois, les anticorps Zenon technologie d&#39;&eacute;tiquetage &eacute;limine cette restriction, permettant l&#39;utilisation simultan&eacute;e de deux anticorps monoclonaux de souris diff&eacute;rents ou deux anticorps polyclonaux de lapin diff&eacute;rents dans la m&ecirc;me exp&eacute;rience de face-&agrave;-face. Le syst&egrave;me de d&eacute;tection trichromatique est largement compatible avec UV epi-illuminateurs combin&eacute;s avec des cam&eacute;ras photographiques ou charge-coupled device (CCD) et les sources &agrave; arc au x&eacute;non &eacute;quip&eacute;s de filtres d&#39;excitation et d&#39;&eacute;mission appropri&eacute;s. Par ailleurs, les conjugu&eacute;s de l&#39;enzyme peuvent &ecirc;tre d&eacute;tect&eacute;s &agrave; l&#39;aide d&#39;un gel &agrave; base de laser scanner. La m&eacute;thode trichromatique permet la d&eacute;tection de quantit&eacute;s faibles nanogramme de prot&eacute;ines et permet une identification sans &eacute;quivoque des deux prot&eacute;ines cibles diff&eacute;rents par rapport &agrave; la profil de prot&eacute;ine enti&egrave;re sur un seul electroblot, excluant toute requise pour l&#39;ex&eacute;cution des gels r&eacute;p&eacute;t&eacute;s qui n&eacute;cessiteraient sinon visualisation distincte des prot&eacute;ines totales et alignement ult&eacute;rieur avec plusieurs signaux de chimiluminescence ou colorim&eacute;triques g&eacute;n&eacute;r&eacute;es electroblots diff&eacute;rents.

D&eacute;tection de fluorescence trichromatiques simultan&eacute;e des prot&eacute;ines sur Western blots en utilisant un colorant r&eacute;actif-amine &agrave; alcalines phosphatase - et raifort peroxydase-anticorps conjugu&eacute;s.

Gleichzeitige trichromatischen Fluoreszenzdetektion von Proteinen auf Western-Blots unter Verwendung eines Amin-reaktiven Farbstoff in Kombination mit alkalischer Phosphatase und Meerrettich-Peroxidase-Antik&#xF6;rper-Konjugate.

Rilevazione a fluorescenza a tre colori sono descritti metodi basato su accoppiamento covalentemente il colorante 2-metossi-2,4-difenil-2(2H)-furanone (MDPF) alle proteine immobilizzate su membrane poly(vinylidene difluoride) (PVDF), seguite dall&#39;individuazione di proteine bersaglio utilizzando molecole coniugato con fosfatasi alcalina reporter in combinazione con il fosfato di 9H-(1,3-dichloro-9,9-dimethylacridin-2-one-7-yl) substrato fluorogenic (DDAO-fosfato) cos&igrave; come molecole reporter coniugata con perossidasi di rafano in combinazione con il nuovo substrato fluorogenic reagente Amplex oro. Questo si traduce in tutte le proteine nel profilo visualizzato come segnale fluorescente blu, quelli rilevati in particolare con il coniugato di fosfatasi alcalina che appaiono come segnale fluorescente rosso e quelli rilevati in particolare con il coniugato perossidasi di rafano che appaiono come segnale giallo fluorescente. Utilizzando anticorpi secondari convenzionali, due diversi obiettivi possono essere identificati come gli anticorpi primari generati da due specie differenti sono usati nell&#39;analisi. Tuttavia, Zenon anticorpo etichettatura tecnologia elimina questa restrizione, permettendo l&#39;utilizzo simultaneo di due diversi anticorpi monoclonali o due anticorpi policlonali di coniglio diverso nell&#39;esperimento electroblotting stesso. Il sistema di rilevamento tricromatiche &egrave; largamente compatibile con UV epi-illuminatori combinati con macchine fotografiche fotografiche o charge-coupled device (CCD) e le fonti di arco allo xeno dotate di filtri di eccitazione/emissione appropriato. In alternativa, i coniugati di enzima possono essere rilevati utilizzando un gel a base di laser scanner. Il metodo tricromatiche consente la rilevazione della quantit&agrave; bassa nanogrammo di proteine e permette l&#39;identificazione univoca delle due proteine bersaglio diverso rispetto al profilo di proteina intera su un unico electroblot, precludendo qualsiasi requisito per l&#39;esecuzione di replicare gel che altrimenti richiederebbero visualizzazione separata delle proteine totali e successivo allineamento con molteplici segnali chemiluminescente o colorimetrici generati su diverse electroblots.

Rilevazione a fluorescenza tricromatiche simultanea di proteine su Western blots utilizzando un&#39;ammina-reattivo colorante in combinazione con alcalini fosfatasi e rafano perossidasi anticorpi coniugati.

3&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3001;&#x8272;&#x7D20; 2-&#x30E1;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;-2, 4-&#x30B8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;-2(2H)-furanone &#xFF08;MDPF&#xFF09; &#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x7D50;&#x5408;&#x6642;&#x306B;&#x897F;&#x6D0B;&#x308F;&#x3055;&#x3073;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x5171;&#x5F79;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x86CD;&#x5149;&#x57FA;&#x677F; Amplex &#x30B4;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x8A66;&#x85AC;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x5171;&#x5F79;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5206;&#x5B50;&#x86CD;&#x5149;&#x57FA;&#x677F; 9H-(1,3-dichloro-9,9-dimethylacridin-2-one-7-yl) &#x30EA;&#x30F3;&#x9178; &#xFF08;DDAO-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF09; &#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;poly(vinylidene difluoride) &#xFF08;PVDF&#xFF09; &#x819C;&#x4E0A;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x86CD;&#x5149;&#x9752;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x8D64;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x73FE;&#x308C;&#x308B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x5171;&#x5F79;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x9EC4;&#x8272;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x897F;&#x6D0B;&#x308F;&#x3055;&#x3073;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x5171;&#x5F79;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30D3;&#x30B8;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x5185;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E00;&#x6B21;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x9650;&#x308A;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x8B58;&#x5225;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30BC;&#x30CE;&#x30F3;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x985E;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x540C;&#x3058;&#x30A6;&#x30A7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE; &#x30DD;&#x30EA;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3053;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E09;&#x539F;&#x8272;&#x691C;&#x51FA;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x5E83;&#x304F;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B; UV epi &#x7167;&#x660E;&#x5199;&#x771F;&#x3084;&#x96FB;&#x8377;&#x7D50;&#x5408;&#x7D20;&#x5B50; (CCD) &#x30AB;&#x30E1;&#x30E9;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3068;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x52B1;&#x8D77;/&#x86CD;&#x5149;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x3066;&#x30AD;&#x30BB;&#x30CE;&#x30F3; &#x30A2;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x62B1;&#x5408;&#x4F53;&#x30B2;&#x30EB; &#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30CA;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E09;&#x539F;&#x8272;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x91CF;&#x306E;&#x4F4E;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3057;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306B;&#x5225;&#x3005; &#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x7DCF;&#x86CB;&#x767D;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x914D;&#x7F6E;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B; electroblots &#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x767A;&#x5149;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6BD4;&#x8272;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x30B2;&#x30EB;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x3092;&#x9664;&#x5916;&#x306F;&#x5358;&#x4E00;&#x306E; electroblot &#x57FA;&#x6E96;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x540C;&#x6642;&#x4E09;&#x539F;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x691C;&#x51FA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x897F;&#x90E8;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x67D3;&#x6599;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x897F;&#x6D0B;&#x308F;&#x3055;&#x3073;&#x306E;&#x904E;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x6297;&#x4F53;&#x62B1;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

3 &#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xCD9C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; poly(vinylidene difluoride) (PVDF) &#xB9C9;, &#xC591; &#xACE0;&#xCD94;&#xB0C9;&#xC774; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xAE30;&#xC790; &#xD568;&#xAED8; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; fluorogenic &#xAE30;&#xD310; Amplex &#xACE8;&#xB4DC; &#xC2DC; &#xC57D; &#xBD84;&#xC790; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xAE30;&#xC790; &#xBD84;&#xC790; fluorogenic &#xAE30;&#xD310; 9H-(1,3-dichloro-9,9-dimethylacridin-2-one-7-yl) &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; (&#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; DDAO)&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB300;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC77C; &#xC218; &#x70AD;&#xB294; &#xC5FC;&#xB8CC; 2-methoxy-2, 4-&#xB514; &#xD398; &#xB2D0;-2(2H)-furanone (MDPF) &#xCEE4;&#xD50C;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBC18; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xACB0;&#xACFC; &#xD615;&#xAD11; &#xD30C;&#xB780;&#xC0C9; &#xC2E0;&#xD638;, &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xACF5;&#xC561; &#xD615;&#xAD11; &#xC801;&#xC0C9; &#xC2E0;&#xD638;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xB294; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB41C; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xB178;&#xB780;&#xC0C9; &#xC2E0;&#xD638;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xB294; &#xC591; &#xACE0;&#xCD94;&#xB0C9;&#xC774; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xACF5;&#xC561; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB41C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xB418; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xAE30;&#xC874;&#xC758; 2 &#xCC28; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD56D; &#xCCB4; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xB85C; &#xC11C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBAA9;&#xD45C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC81C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xAE30;&#xC220; &#xB77C;&#xBCA8; &#xAC19;&#xC740; electroblotting &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4; &#xB610;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xD1A0;&#xB07C; polyclonal &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294;&#xC774; &#xC81C;&#xD55C;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Trichromatic &#xD0D0;&#xC9C0; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; UV&#xC5D0; &#xD53C; illuminators &#xC0AC;&#xC9C4; &#xB610;&#xB294; &#xCDA9;&#xC804; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58; (CCD) &#xCE74;&#xBA54;&#xB77C;&#xC640; &#xACB0;&#xD569; &#xBC0F; &#xD06C; &#xC138; &#xB17C; &#xC544;&#xD06C; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC5EC;&#xAE30;/&#xBC29;&#xCD9C; &#xD544;&#xD130;&#xB97C; &#xAC16;&#xCD94;&#xACE0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD638;&#xD658; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C; conjugates &#xC824; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2A4;&#xCE90;&#xB108;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC80;&#xC0C9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Trichromatic &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xB098;&#xB178; &#xADF8;&#xB7A8; &#xC591;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; electroblots&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; chemiluminescent &#xB610;&#xB294; &#xC0C9;&#xB3C4;&#xACC4; &#xC2E0;&#xD638; &#xCD1D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC815;&#xB82C;&#xC758; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD574;&#xC57C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC824;&#xC744; &#xC2E4;&#xD589; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC694;&#xAD6C; &#xB4E0; &#xC9C0; &#xD574;&#xC57C; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; electroblot&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB300;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBA85;&#xD655;&#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD5C8;&#xC6A9;.

&#xC11C; &#xBD80;&#xC5D0;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; trichromatic &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xCD9C; &#xBAB0;&#xC544;&#xB0B4;&#xACE0; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBC0F; &#xC591; &#xACE0;&#xCD94;&#xB0C9;&#xC774; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD56D; &#xCCB4; conjugates &#xD568;&#xAED8; &#xC544;&#xBBFC; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Se describen los m&eacute;todos de detecci&oacute;n de fluorescencia tricolor basado en acoplamiento covalente el tinte 2-metoxi-2, 4-difenil-2(2H)-furanona (MDPF) a las prote&iacute;nas inmovilizadas en las membranas de poly(vinylidene difluoride) (PVDF), seguidas por la detecci&oacute;n de prote&iacute;nas blanco con mol&eacute;culas de reportero conjugado de fosfatasa alcalina en combinaci&oacute;n con el fosfato de 9H-(1,3-dichloro-9,9-dimethylacridin-2-one-7-yl) sustrato fluorogenic (DDAO-fosfato) as&iacute; como mol&eacute;culas de reportero conjugado con peroxidasa de r&aacute;bano en combinaci&oacute;n con el nuevo fluorogenic sustrato reactivo Amplex oro. Esto da lugar a todas las prote&iacute;nas en el perfil que se visualizaba como se&ntilde;al azul fluorescente, los detecta espec&iacute;ficamente con el conjugado de fosfatasa alcalina que aparecen como se&ntilde;al fluorescente rojo y los detecta espec&iacute;ficamente con el conjugado de peroxidasa de r&aacute;bano que aparecen como se&ntilde;al amarilla fluorescente. Usando los anticuerpos secundarios convencionales, pueden identificarse dos objetivos diferentes como anticuerpos primarios generados a partir de dos especies diferentes se utilizan en el an&aacute;lisis. Sin embargo, Zenon anticuerpo etiquetado tecnolog&iacute;a elimina esta restricci&oacute;n, permitiendo el uso simult&aacute;neo de dos anticuerpos monoclonales de rat&oacute;n diferente o dos anticuerpos policlonales de conejo diferentes en el mismo experimento de electroblotting. El sistema de detecci&oacute;n tricrom&aacute;tico es ampliamente compatible con epi-ultravioletas combinados con c&aacute;maras de dispositivo fotogr&aacute;fico o acoplamiento de carga (CCD) y fuentes de arco de xen&oacute;n provistas de filtros adecuados excitaci&oacute;n/emisi&oacute;n. Alternativamente, los conjugados de enzima pueden detectarse mediante un esc&aacute;ner de gel base de l&aacute;ser. El m&eacute;todo tricrom&aacute;tico permite la detecci&oacute;n de cantidades bajas nanogramo de prote&iacute;na y permite la identificaci&oacute;n inequ&iacute;voca de dos prote&iacute;nas diferentes en relaci&oacute;n con el perfil de prote&iacute;na entera en una sola electroblot, imposibilitando cualquier requisito para correr geles replicados que de lo contrario requerir&iacute;a separado visualizaci&oacute;n de prote&iacute;nas totales y la posterior alineaci&oacute;n con m&uacute;ltiples se&ntilde;ales de quimioluminiscencia o colorim&eacute;tricas generadas en diferentes electroblots.

Detecci&oacute;n de fluorescencia tricrom&aacute;ticas simult&aacute;nea de prote&iacute;nas en Western blots usando un colorante reactivo amino en combinaci&oacute;n con conjugados de anticuerpos de la peroxidasa alcalinas fosfatasa - y r&aacute;bano picante.

&#x80FA;&#x65E0;&#x529F; N hydroxysuccinimidyl &#x916F; Alexa &#x6C1F;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5438;&#x6536;&#x6781;&#x5927;&#x503C;&#x5728;&#x7EA6; 555 nm&#xFF0C;633 nm&#xFF0C;647 nm&#xFF0C;660 nm&#xFF0C;680 nm&#xFF0C;700 nm &#x548C; 750 nm &#x5171;&#x8F6D;&#x6297;&#x4F53;&#x548C;&#x5176;&#x5B83;&#x6240;&#x9009;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x4E0E;&#x5149;&#x8C31;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684; Cy3&#x3001; Cy5&#x3001; Cy5.5&#x3001; Cy7&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E86;&#x6BD4;&#x8F83; DY 630&#x3001; DY 635&#x3001; DY-680&#xFF0C;&#x548C;&#x963F;&#x6258; 565 &#x67D3;&#x6599;&#x3002;N hydroxysuccinimidyl &#x916F;&#x67D3;&#x6599;&#xFF0C;Alexa &#x6C1F; 555 &#x67D3;&#x6599;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; Cy3 &#x67D3;&#x6599;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; Alexa &#x6C1F; 647 &#x67D3;&#x6599;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; Cy5 &#x67D3;&#x6599;&#x5438;&#x6536;&#x6781;&#x5927;&#x503C;&#x3001; &#x6392;&#x653E;&#x6781;&#x5927;&#x503C;&#x3001; &#x65AF;&#x6258;&#x514B;&#x65AF;&#x8F6E;&#x73ED;&#x548C;&#x6D88;&#x5149;&#x7CFB;&#x6570;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; Alexa &#x6C1F;&#x67D3;&#x6599;&#x662F;&#x5927;&#x5927;&#x66F4;&#x8010;&#x5149;&#x6F02;&#x767D;&#x6BD4;&#x540C;&#x884C; Cy &#x67D3;&#x6599;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7F16;&#x5199;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x5149;&#x8C31;&#x663E;&#x793A; Cy &#x67D3;&#x6599;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x4E3A;&#x7A81;&#x51FA;&#x84DD;&#x8272;&#x8F6C;&#x80A9;&#x5CF0;&#xFF0C;&#x4F46; Alexa &#x6C1F;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x53EA;&#x6709;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x80A9;&#x5CF0;&#x67D3;&#x6599;&#x3002;&#x53CD;&#x5E38;&#x7684;&#x5C71;&#x5CF0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x524D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684; Cy5 &#x67D3;&#x6599;&#xFF0C;&#x5927;&#x6982;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x67D3;&#x6599;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x67D3;&#x6599;&#x805A;&#x5408;&#x5BF9;&#x5149;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x524A;&#x5F31;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x3002;Alexa &#x6C1F; 555 Alexa &#x6C1F; 647 &#x67D3;&#x6599;&#x4E2D;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x8F83;&#x5C11;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E2A; self-quenching&#xFF0C;&#x662F;&#x4E0E;&#x548C;&#x56E0;&#x6B64; Alexa &#x6C1F;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x663E;&#x8457;&#x66F4;&#x8367;&#x5149;&#x6BD4;&#x90A3;&#x4E9B; Cy &#x67D3;&#x6599;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x9AD8;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x6807;&#x7B7E;&#x3002;&#x4ECE;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BC1;&#x660E;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5171;&#x8F6D;&#x3001; &#x957F;&#x6CE2;&#x957F; Alexa &#x6C1F;&#x67D3;&#x6599;&#x6709; Cy &#x67D3;&#x6599;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5178;&#x578B;&#x8367;&#x5149;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x7684;&#x957F;&#x6CE2;&#x957F;&#x67D3;&#x6599;&#x76F8;&#x6BD4;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;

&#x5B9A;&#x91CF;&#x6BD4;&#x8F83;&#x957F;&#x6CE2;&#x957F; Alexa &#x6C1F;&#x67D3;&#x6599;&#x5BF9; Cy &#x67D3;&#x6599;&#xFF1A; &#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x53CA;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

Amine-reactive N-hydroxysuccinimidyl esters of Alexa Fluor fluorescent dyes with principal absorption maxima at about 555 nm, 633 nm, 647 nm, 660 nm, 680 nm, 700 nm, and 750 nm were conjugated to antibodies and other selected proteins. These conjugates were compared with spectrally similar protein conjugates of the Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7, DY-630, DY-635, DY-680, and Atto 565 dyes. As N-hydroxysuccinimidyl ester dyes, the Alexa Fluor 555 dye was similar to the Cy3 dye, and the Alexa Fluor 647 dye was similar to the Cy5 dye with respect to absorption maxima, emission maxima, Stokes shifts, and extinction coefficients. However, both Alexa Fluor dyes were significantly more resistant to photobleaching than were their Cy dye counterparts. Absorption spectra of protein conjugates prepared from these dyes showed prominent blue-shifted shoulder peaks for conjugates of the Cy dyes but only minor shoulder peaks for conjugates of the Alexa Fluor dyes. The anomalous peaks, previously observed for protein conjugates of the Cy5 dye, are presumably due to the formation of dye aggregates. Absorption of light by the dye aggregates does not result in fluorescence, thereby diminishing the fluorescence of the conjugates. The Alexa Fluor 555 and the Alexa Fluor 647 dyes in protein conjugates exhibited significantly less of this self-quenching, and therefore the protein conjugates of Alexa Fluor dyes were significantly more fluorescent than those of the Cy dyes, especially at high degrees of labeling. The results from our flow cytometry, immunocytochemistry, and immunohistochemistry experiments demonstrate that protein-conjugated, long-wavelength Alexa Fluor dyes have advantages compared to the Cy dyes and other long-wavelength dyes in typical fluorescence-based cell labeling applications.

Quantitative comparison of long-wavelength Alexa Fluor dyes to Cy dyes: fluorescence of the dyes and their bioconjugates.

Amine r&eacute;agissant esters N-hydroxysuccinimidyl de colorants fluorescents Alexa Fluor avec des maxima d&#39;absorption principale &agrave; environ 555 nm, 633 nm, 647 nm, 660 nm, 680 nm, 700 nm et 750 nm ont &eacute;t&eacute; conjugu&eacute;s d&#39;anticorps et d&#39;autres choisis prot&eacute;ines. Ces conjugu&eacute;s ont &eacute;t&eacute; compar&eacute;es aux conjugu&eacute;s de prot&eacute;ines spectrale semblable de Cy3, Cy5, Cy5.5 Cy7, DY-630, DY-635, DY-680, et 565 Atto dyes. Ester N-hydroxysuccinimidyl colorants, le colorant Alexa Fluor 555 &eacute;tait semblable &agrave; la teinture de Cy3 et le colorant Alexa Fluor 647 &eacute;tait semblable &agrave; la teinture Cy5 en ce qui concerne les maxima d&#39;absorption, maxima d&#39;&eacute;mission, d&eacute;placements de Stokes et les coefficients d&#39;extinction. Toutefois, les deux colorants Alexa Fluor sont significativement plus r&eacute;sistants au photobleaching que leurs homologues de colorant de Cy. Spectres d&#39;absorption des prot&eacute;ines conjugu&eacute;s pr&eacute;par&eacute;s &agrave; partir de ces colorants a montr&eacute; des pics des &eacute;minents &eacute;paule bleu des conjugu&eacute;s des colorants des Cy mais pics mineurs &eacute;paule pour conjugu&eacute;s de l&#39;Alexa Fluor colorants. Les pics anormaux observ&eacute;s ant&eacute;rieurement pour des conjugu&eacute;s de prot&eacute;ines du colorant Cy5, sont sans doute en raison de la formation d&#39;agr&eacute;gats de colorant. Absorption de lumi&egrave;re par les agr&eacute;gats de colorant n&#39;entra&icirc;ne pas de fluorescence, diminuant ainsi la fluorescence des conjugu&eacute;s. L&#39;Alexa Fluor 555 et les colorants Alexa Fluor 647 en conjugu&eacute;s de prot&eacute;ines pr&eacute;sentaient significativement moins de cette autod&eacute;sactivation et, par cons&eacute;quent, les conjugu&eacute;s de prot&eacute;ine d&#39;Alexa Fluor colorants ont &eacute;t&eacute; significativement plus fluorescent que celles des colorants de la Cy, en particulier &agrave; des degr&eacute;s &eacute;lev&eacute;s d&#39;&eacute;tiquetage. Les r&eacute;sultats de nos exp&eacute;riences de flow cytometry, immunocytochimie et immunohistochimie d&eacute;montrent que conjugu&eacute; &agrave; la prot&eacute;ine, la longueur d&#39;onde des colorants Alexa Fluor avantages par rapport aux colorants de la Cy et d&#39;autres colorants de longueur d&#39;onde typique cellule bas&eacute;s sur la fluorescence des applications d&#39;&eacute;tiquetage.

Comparaison quantitative de la longueur d&#39;onde Alexa Fluor dyes aux colorants de la Cy: fluorescence des colorants et leur BIOCONJUGUES.

Quantitativen Vergleich der langwelligen Alexa Fluor-Farbstoffe sind Farbstoffe Cy: Fluoreszenz der Farbstoffe und deren Biokonjugate.

Esteri di N-hydroxysuccinimidyl ammina-reattivo di tinture fluorescenti Alexa Fluor con massimi di assorbimento principale a circa 555 nm, 633 nm, 647 nm, 660 nm, 680 nm, 700 nm e 750 nm erano coniugati di anticorpi e altre selezionate proteine. Questi coniugati sono stati confrontati con i coniugati proteina spettralmente simili del Cy3, Cy5, incubiamo, Cy7, DY-630, DY-635, DY-680, e Atto 565 coloranti. Come N-hydroxysuccinimidyl estere dei coloranti, la tintura di Alexa Fluor 555 era simile alla tintura Cy3, e la tintura di Alexa Fluor 647 era simile per la tintura di Cy5 rispetto ai massimi di assorbimento, emissione maxima, turni di Stokes e i coefficienti di estinzione. Tuttavia, entrambi tinture di Alexa Fluor sono stati significativamente pi&ugrave; resistente al photobleaching che erano le loro controparti di tintura Cy. Spettri di assorbimento di proteine coniugate preparate da questi coloranti hanno mostrato picchi prominente ha spostato blu spalla per coniugati delle tinture Cy ma picchi solo lievi spalla per coniugati dell&#39;Alexa Fluor coloranti. I picchi anomali, precedentemente osservati per coniugati proteina della tintura Cy5, sono presumibilmente a causa della formazione di aggregati di tintura. Assorbimento della luce da parte degli aggregati di colorante non causare fluorescenza, quindi diminuendo la fluorescenza dei coniugati. La Alexa Fluor 555 e le tinture di Alexa Fluor 647 in proteine coniugate esposte significativamente meno di questo self-quenching e quindi i coniugati proteina di tinture di Alexa Fluor sono stati significativamente pi&ugrave; fluorescenti rispetto a quelli dei coloranti Cy, specialmente ad alti gradi di etichettatura. I risultati dei nostri esperimenti di flusso cytometry, immunocitochimica e immunoistochimica dimostrano che coniugati alla proteina, la lunghezza d&#39;onda tinture di Alexa Fluor sono vantaggi rispetto ad altri coloranti lunghezza d&#39;onda tipica cella basata sulla fluorescenza applicazioni di etichettatura e le tinture di Cy.

Confronto quantitativo di lunghezza d&#39;onda Alexa Fluor coloranti per coloranti Cy: fluorescenza di tinture e loro bioconjugates.

Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x3092;&#x7D04; 555 &#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30D1;&#x30EB;&#x5438;&#x53CE;&#x6975;&#x5927;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027; N hydroxysuccinimidyl &#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB; nm, 633 nm, 647 660 nm 680 nm nm&#x3001;700 nm&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 750 nm &#x3044;&#x305F;&#x5171;&#x5F79;&#x6297;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x62B1;&#x5408;&#x4F53; Cy3&#x3001;Cy5&#x3001;Cy5.5&#x3001;Cy7 &#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x62B1;&#x5408;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F; DY 630, DY 635, DY 680 &#x3068;&#x30A2;&#x30C8; 565 &#x67D3;&#x6599;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x67D3;&#x6599;&#x306E; N hydroxysuccinimidyl &#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x3001;Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC; 555 &#x8272;&#x7D20; Cy3 &#x67D3;&#x6599;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3001;Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC; 647 &#x8272;&#x7D20; Cy5 &#x8272;&#x7D20;&#x5438;&#x53CE;&#x30DE;&#x30AD;&#x30B7;&#x30DE;&#x3001;&#x6392;&#x51FA;&#x30DE;&#x30AD;&#x30B7;&#x30DE;&#x3001;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF;&#x30B9; &#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3068;&#x5438;&#x5149;&#x4FC2;&#x6570;&#x3092;&#x57FA;&#x6E96;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9; Alexa &#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x306F; Cy &#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x76F8;&#x624B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9000;&#x8272;&#x306B;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;.&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x304B;&#x3089;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x62B1;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; Cy &#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x62B1;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x8457;&#x540D;&#x306A;&#x9752;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x80A9;&#x5CF0;&#x304C;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x306A;&#x80A9;&#x5CF0; Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC;&#x306E;&#x62B1;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x89B3;&#x5BDF;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79; Cy5 &#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8272;&#x7D20;&#x4F1A;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8272;&#x7D20;&#x4F1A;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5149;&#x5438;&#x53CE;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x86CD;&#x5149;&#x3067;&#x306F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC; 555 &#x3068;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x51FA;&#x5C55;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x3067; Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC; 647 &#x67D3;&#x6599;&#x3053;&#x306E;&#x7A4D;&#x5C64;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066; Alexa &#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3044;&#x305F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x86CD;&#x5149;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7279;&#x306B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x3067; Cy &#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3088;&#x308A;&#x3002;&#x6D41;&#x308C; cytometry, &#x514D;&#x75AB;&#x67D3;&#x8272;, &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x5B9F;&#x9A13;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x3001;&#x9577;&#x6CE2;&#x9577;&#x306E; Alexa &#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x6599; Cy &#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x3068;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x9577;&#x6CE2;&#x9577;&#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x4ED6;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x5229;&#x70B9;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9577;&#x6CE2;&#x9577; Alexa &#x5F17;&#x7D20;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6BD4;&#x8F03;&#x67D3;&#x6599; Cy &#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x306B;: &#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x57FA;&#x6750;&#x306E;&#x3002;

&#xC57D; 555&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC694; &#xD761;&#xC218; &#xB9E5;&#xC2DC; &#xB9C8;&#xC640; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; &#xD615;&#xAD11; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xC544;&#xBBFC; &#xBC18;&#xC751; N hydroxysuccinimidyl &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; nm, 633 nm, 647 nm, 660 nm, 680 nm, 700 nm &#xBC0F; 750 nm &#xD56D; &#xCCB4; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xC120;&#xD0DD; &#xB41C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; conjugates Cy3 Cy5, Cy5.5 Cy7&#xC758; spectrally &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; conjugates &#xBE44;&#xAD50; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; DY-630, DY-635, DY-680, Atto 565 &#xC5FC;&#xB8CC; &#xBC0F;. N hydroxysuccinimidyl &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; 555 &#xC5FC;&#xB8CC; Cy3 &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC788;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; 647 &#xC5FC;&#xB8CC;&#xB294; &#xB9E5;&#xC2DC; &#xB9C8; &#xD761;&#xC218;, &#xBC29;&#xCD9C; &#xB9E5;&#xC2DC; &#xB9C8;, &#xC2A4;&#xD1A1; &#xC2A4; &#xAD50;&#xB300; &#xBC0F; &#xC18C;&#xBA78; &#xACC4;&#xC218; Cy5 &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB450; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC800;&#xD56D; &#xD558; photobleaching &#xBCF4;&#xB2E4; Cy &#xC5FC;&#xB8CC; &#xB4E4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC900;&#xBE44;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; conjugates&#xC758; &#xD761;&#xC218; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBCF4;&#xC5EC; Cy &#xC5FC;&#xB8CC; conjugates&#xC758; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xBE14;&#xB8E8; &#xC2DC;&#xD504;&#xD2B8; &#xC5B4;&#xAE68; &#xBD09;&#xC6B0;&#xB9AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; conjugates &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D;&#xC758;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC0AC;&#xC18C;&#xD55C; &#xC5B4;&#xAE68; &#xBD09;&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5FC;&#xB8CC;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; conjugates Cy5 &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; &#xBCC0;&#xCE59;&#xC801; &#xC778; &#xBD09;&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xC9D1;&#xACC4; &#xD615;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB85C; &#xC778;&#xD558;&#xC5EC; &#xAC10;&#xC18C;&#xB294; conjugates&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xD615;&#xAD11; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xC9D1;&#xACC4; &#xD558; &#xC5EC; &#xBE5B;&#xC758; &#xD761;&#xC218; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; 555&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; conjugates &#xD06C;&#xAC8C; &#xC804;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; 647 &#xC5FC;&#xB8CC; self-quenching&#xC774; &#xB35C; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; conjugates Cy &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xD2B9;&#xD788; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC758; &#xACE0;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xD615;&#xAD11; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD750;&#xB984; cytometry, immunocytochemistry, &#xBC0F; &#xAE30;&#xC220; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC6A9;, &#xC7A5;&#xAE30; &#xD30C;&#xC7A5; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; &#xC5FC;&#xB8CC; Cy &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC640; &#xC77C;&#xBC18; &#xD615;&#xAD11; &#xAE30;&#xBC18; &#xC140; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE34; &#xD30C;&#xC7A5; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC7A5;&#xC810;&#xC744; &#xC785;&#xC99D;.

&#xAE34; &#xD30C;&#xC7A5; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D;&#xC758; &#xC591;&#xC801; &#xBE44;&#xAD50; Cy &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xB8CC;: &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; bioconjugates&#xC758; &#xD615;&#xAD11;.

Amina-reactiva &eacute;steres de N-hydroxysuccinimidyl de tintes fluorescentes Alexa Fluor con principal absorci&oacute;n m&aacute;xima a unos 555 nm, 633 nm, 647 nm, 660 nm, 680 nm, 700 nm y 750 nm fueron conjugados de anticuerpos y otros seleccionados prote&iacute;nas. Estos conjugados se compararon con conjugados de prote&iacute;na espectralmente similares del Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7, 630-DY, DY-635, DY-680, y tintes de Atto 565. Como tintes &eacute;ster N-hydroxysuccinimidyl, el tinte de Alexa Fluor 555 era similar a la tintura Cy3 y el tinte de Alexa Fluor 647 era similar al tinte Cy5 con respecto a la absorci&oacute;n m&aacute;xima, m&aacute;ximos de emisi&oacute;n, cambios de Stokes y coeficientes de extinci&oacute;n. Sin embargo, ambos colorantes Alexa Fluor eran significativamente m&aacute;s resistentes al photobleaching que eran sus contrapartes de tinte Cy. Espectros de absorci&oacute;n de prote&iacute;na conjugados preparados a partir de estos tintes demostr&oacute; picos de hombro azul puesto prominente para conjugados de los tintes de Cy pero picos de hombro s&oacute;lo menores de conjugados de la Alexa Fluor tintes. Los picos an&oacute;malos, observados previamente para conjugados prote&iacute;na del tinte Cy5, son presumiblemente debido a la formaci&oacute;n de agregados de tinte. Absorci&oacute;n de luz por los agregados de tinte no resulta en fluorescencia, disminuyendo as&iacute; la fluorescencia de los conjugados. La Alexa Fluor 555 y los tintes de Alexa Fluor 647 en conjugados prote&iacute;na exhibidos significativamente menos de este self-quenching y por lo tanto los conjugados de prote&iacute;na de Alexa Fluor tintes fueron significativamente m&aacute;s fluorescente que las de los tintes de Cy, especialmente en el alto grado de etiquetado. Los resultados de nuestros experimentos de inmunohistoqu&iacute;mica, inmunocitoqu&iacute;mica y citometr&iacute;a de flujo demuestran que los tintes de Alexa Fluor conjugados con prote&iacute;na, longitud de onda larga tienen ventajas en comparaci&oacute;n con los tintes de Cy y otros tintes de onda larga en la c&eacute;lula t&iacute;pica de fluorescencia basados en aplicaciones de etiquetado.

Comparaci&oacute;n cuantitativa de onda larga Alexa Fluor tintes a los tintes de Cy: fluorescencia de los tintes y su bioconjugates.

&#x63A2;&#x8BA8;&#x7ECF;&#x9F3B;&#x5185;&#x7AA5;&#x955C; CO2 &#x6FC0;&#x5149;&#x624B;&#x672F;&#x6CBB;&#x7597;&#x65E9;&#x671F;&#x58F0;&#x95E8;&#x764C;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x7597;&#x6548;&#x3002;

[&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x78B3;&#x6FC0;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x624B;&#x672F;&#x6CBB;&#x7597;&#x65E9;&#x671F;&#x58F0;&#x95E8;&#x764C;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x6210;&#x679C;]&#x3002;

To explore the oncologic efficacy of transoral endoscopic CO2 laser surgery in early glottic carcinoma.

[Oncologic outcome of carbon dioxide laser microsurgery for early glottic carcinoma].

Pour explorer l&#39;efficacit&eacute; oncologique de transorale chirurgie endoscopique laser CO2 en cancer glottique du d&eacute;but.

[R&eacute;sultats oncologiques de microchirurgie laser CO2 pour carcinome glottique d&eacute;but].

Die onkologischer Wirksamkeit der transorale endoskopische CO2 Laser-Chirurgie in fr&uuml;hen glottic Karzinom zu erkunden.

[Oncologic Ergebnis der CO2-Laser Mikrochirurgie f&uuml;r fr&uuml;he glottic Karzinom].

Per esplorare l&#39;efficacia oncologico di transorale chirurgia endoscopica laser CO2 nel carcinoma precoce glottide.

[Risultato oncologico di microchirurgia laser CO2 per carcinoma precoce glottide].

&#x7D4C;&#x53E3;&#x5185;&#x8996;&#x93E1; CO2 &#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x624B;&#x8853;&#x65E9;&#x671F;&#x58F0;&#x9580;&#x764C;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3002;

[&#x70AD;&#x9178;&#x30AC;&#x30B9; &#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC; &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B5;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30EA;&#x30FC;&#x521D;&#x671F;&#x58F0;&#x9580;&#x764C;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;]&#x3002;

Transoral &#xB0B4; &#xC2DC;&#xACBD; CO2 &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xC218;&#xC220; &#xCD08;&#xAE30; glottic &#xC554; &#xC885;&#xC591; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xD0D0;&#xD5D8;.

[&#xCD08;&#xAE30; glottic &#xC554; &#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0C4;&#xC18C;&#xAC00; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xBBF8;&#xC138; &#xC885;&#xC591; &#xACB0;&#xACFC;].

Para explorar la eficacia oncol&oacute;gica de cirug&iacute;a endosc&oacute;pica con l&aacute;ser CO2 transoral en carcinoma gl&oacute;tico temprano.

[Resultados oncol&oacute;gicos de microcirug&iacute;a l&aacute;ser de di&oacute;xido de carbono para el carcinoma gl&oacute;tico temprano].

&#x4EE5;&#x8C03;&#x67E5;&#x9700;&#x8981;&#x60AC;&#x96CD;&#x5782;&#x816D;&#x54BD;&#x6210;&#x5F62;&#x672F;&#x4E0E;&#x963B;&#x585E;&#x6027;&#x7761;&#x7720;&#x547C;&#x5438;&#x6682;&#x505C;&#x4F4E;&#x901A;&#x6C14;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x548C; 2 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x75C5;&#x4EBA;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x5BF9;&#x624B;&#x672F;&#x524D;&#x77ED;&#x65F6;&#x95F4;&#x6301;&#x7EED;&#x6C14;&#x9053;&#x6B63;&#x538B;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

[&#x77ED;&#x65F6;&#x95F4;&#x6301;&#x7EED;&#x6C14;&#x9053;&#x6B63;&#x538B;&#x6CBB;&#x7597;&#x5BF9;&#x963B;&#x585E;&#x6027;&#x7761;&#x7720;&#x547C;&#x5438;&#x6682;&#x505C;&#x4F4E;&#x901A;&#x6C14;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x548C; 2 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x6548;&#x679C;]&#x3002;

To investigate the effects of short-time continuous positive airway pressure treatment before the surgery on insulin sensitivity in patients with obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome and type 2 diabetes who need the operation of uvulopalatopharyngoplasty.

[The effect of short-time continuous positive airway pressure treatment on insulin sensitivity in patients with obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome and type 2 diabetes].

Pour &eacute;tudier les effets du traitement par pression positive continue de courte dur&eacute;e avant la chirurgie sur la sensibilit&eacute; &agrave; l&#39;insuline chez les patients avec le syndrome d&#39;apn&eacute;e / hypopn&eacute;e obstructive et diab&egrave;te de type 2 qui ont besoin de l&#39;op&eacute;ration d&#39;uvulopalatopharyngoplasty.

[L&#39;effet du traitement par pression positive continue de courte dur&eacute;e sur la sensibilit&eacute; &agrave; l&#39;insuline chez les patients atteints de syndrome d&#39;apn&eacute;e / hypopn&eacute;e obstructive et diab&egrave;te de type 2].

Die Auswirkungen der Kurzzeit-kontinuierliche positive Airway-Druck-Behandlung vor der Operation auf Insulinempfindlichkeit bei Patienten mit obstruktiver Schlaf-Apnoe-Hypopnoe-Syndrom und Typ 2 Diabetes untersuchen, die den Betrieb des Uvulopalatopharyngoplasty ben&ouml;tigen.

[Die Wirkung von Kurzzeit-kontinuierliche positive Airway Druck-Behandlung auf Insulinempfindlichkeit bei Patienten mit obstruktiver Schlaf-Apnoe-Hypopnoe-Syndrom und Typ-2-Diabetes].

Per studiare gli effetti del trattamento pressione breve tempo continua positiva delle vie aeree prima della chirurgia sulla sensibilit&agrave; all&#39;insulina nei pazienti con sindrome di sleep apnea-ipopnea ostruttiva e diabete di tipo 2 che hanno bisogno dell&#39;operazione di uvulopalatopharyngoplasty.

[L&#39;effetto del trattamento pressione breve tempo continua positiva delle vie aeree sulla sensibilit&agrave; all&#39;insulina nei pazienti con sindrome di sleep apnea-ipopnea ostruttiva e diabete di tipo 2].

&#x77ED;&#x6642;&#x9593;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x6C17;&#x9053;&#x967D;&#x5727;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x624B;&#x8853;&#x524D;&#x306B; uvulopalatopharyngoplasty &#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x9589;&#x585E;&#x6027;&#x7761;&#x7720;&#x6642;&#x7121;&#x547C;&#x5438;&#x4F4E;&#x547C;&#x5438;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3068; 2 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

[&#x77ED;&#x6642;&#x9593;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x6C17;&#x9053;&#x967D;&#x5727;&#x51E6;&#x7406;&#x9589;&#x585E;&#x6027;&#x7761;&#x7720;&#x6642;&#x7121;&#x547C;&#x5438;&#x4F4E;&#x547C;&#x5438;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3068; 2 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;]&#x3002;

Uvulopalatopharyngoplasty&#xC758; &#xC791;&#xB3D9; &#xD544;&#xC694; &#xBC29;&#xD574;&#xD55C; &#xC7A0; apnea hypopnea &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xACFC; &#xC81C; 2 &#xD615; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC218;&#xC220; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xC9E7;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB3C4; &#xC555;&#xB825; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC;.

[&#xBC29;&#xD574;&#xD55C; &#xC7A0; apnea hypopnea &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xACFC; &#xC81C; 2 &#xD615; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC9E7;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB3C4; &#xC555;&#xB825; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;].

Investigar los efectos del tratamiento con presi&oacute;n positiva continua v&iacute;a a&eacute;rea corto plazo antes de la cirug&iacute;a en la sensibilidad a la insulina en pacientes con el s&iacute;ndrome de la apnea-hipopnea obstructiva y diabetes tipo 2 que necesitan la operaci&oacute;n de uvulopalatopharyngoplasty.

[El efecto del tratamiento de presi&oacute;n positiva continua v&iacute;a a&eacute;rea a corto plazo en la sensibilidad a la insulina en pacientes con s&iacute;ndrome de la apnea-hipopnea obstructiva y diabetes tipo 2].

&#x8981;&#x5206;&#x6790;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EAF;&#x97F3;&#x542C;&#x529B;&#x9608;&#x503C;&#x60A3;&#x8005;&#x542C;&#x529B;&#x7684;&#x4E30;&#x6EE1;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65E9;&#x671F;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x8033;&#x8717;&#x635F;&#x5BB3;&#x8BF1;&#x53D1;&#x8033;&#x58F0;&#x53D1;&#x5C04;&#x3002;

[&#x8BF1;&#x53D1;&#x8033;&#x58F0;&#x53D1;&#x5C04;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EAF;&#x97F3;&#x542C;&#x529B;&#x9608;&#x503C;&#x4E0E;&#x60A3;&#x8005;&#x542C;&#x529B;&#x4E30;&#x6EE1;&#x5206;&#x6790;]&#x3002;

To analyze normal pure tone hearing thresholds patients with aural fullness using evoked otoacoustic emission in order to detect the early cochlear impairment.

[Analysis of evoked otoacoustic emission in normal pure tone hearing thresholds patients with aural fullness].

D&#39;analyser des patients de seuils audition normale ton pur avec pl&eacute;nitude sonore utilisant &eacute;voqu&eacute;e par des &eacute;missions oto-acoustiques afin de d&eacute;tecter l&#39;atteinte cochl&eacute;aire pr&eacute;coce.

[Analyse des &eacute;missions oto-acoustiques &eacute;voqu&eacute;es chez ton pur normal audition seuils de pl&eacute;nitude sonore].

Normale reiner Ton h&ouml;ren Schwellenwerte Patienten mit klanglichen F&uuml;lle analysieren beschworen mit Otoakustische Emissionen um die fr&uuml;he Cochlear-Beeintr&auml;chtigung zu erkennen.

[Analyse der evozierte Otoakustische Emissionen bei normalen reiner Ton h&ouml;ren Schwellenwerte Patienten mit klanglichen F&uuml;lle].

Per analizzare i pazienti delle soglie di udito normale tono puro con pienezza aural utilizzando evocato emissioni otoacustiche al fine di rilevare la precoce compromissione cocleare.

[Analisi delle emissioni otoacustiche evocate in pazienti di soglie dell&#39;udito normale tono puro con pienezza aural].

&#x8074;&#x899A;&#x306E;&#x81A8;&#x6E80;&#x611F;&#x3068;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x7D14;&#x97F3;&#x8074;&#x529B;&#x95BE;&#x5024;&#x60A3;&#x8005;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8033;&#x97F3;&#x97FF;&#x653E;&#x5C04;&#x521D;&#x671F;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x5185;&#x8033;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;

[&#x901A;&#x5E38;&#x7D14;&#x97F3;&#x8074;&#x529B;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8074;&#x899A;&#x306E;&#x81A8;&#x6E80;&#x611F;&#x306E;&#x8A98;&#x767A;&#x8033;&#x97F3;&#x97FF;&#x653E;&#x5C04;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;]&#x3002;

&#xCCAD;&#xAC01; &#xCDA9;&#xB9CC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xBC18; &#xC21C;&#xC218; &#xD1A4; &#xC2EC;&#xB9AC; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xD658;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774; &#xAD00; &#xC7A5;&#xC560;&#xB97C; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; otoacoustic &#xBC29;&#xCD9C; &#xAC16;&#xB294;.

&#xC77C;&#xBC18; &#xC21C;&#xC218; &#xD1A4; &#xC2EC;&#xB9AC; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xCCAD;&#xAC01; &#xCDA9;&#xB9CC; &#xAC16;&#xB294; otoacoustic &#xBC29;&#xCD9C; [&#xBD84;&#xC11D;].

Al analizar los pacientes de los umbrales de audici&oacute;n normal tono puro con plenitud aural usando evocado emisiones otoac&uacute;sticas para detectar la alteraci&oacute;n coclear temprana.

[An&aacute;lisis de emisiones otoac&uacute;sticas evocadas en pacientes de umbrales de audici&oacute;n normal tono puro con plenitud aural].

&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x533B;&#x9662;&#x7684; AB 7300 &#x5B9E;&#x65F6;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5DF2;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x77ED;&#x671F;&#x5185;&#x4E09;&#x6B21;&#x51FA;&#x73B0;&#x6545;&#x969C;&#x3002;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8868;&#x660E;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x5728;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x548C;&#x5E8F;&#x5217;&#x53F7; 4344490 D1 &#x76D6;&#x7684;&#x710A;&#x9521;&#x7684;&#x5BFC;&#x706B;&#x7D22;&#x7684;&#x6545;&#x969C;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x660E;&#x786E;&#x5730;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x5982;&#x4F55;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x6B64;&#x8BBE;&#x5907;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x540C;&#x4E8B;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5145;&#x5F53;&#x4E86;&#x5F88;&#x597D;&#x7684;&#x53C2;&#x8003;&#x3002;&#x540C;&#x65F6;&#x4F5C;&#x8005;&#x8FD8;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63A2;&#x7D22;&#x548C;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7684;&#x4E94;&#x4E2A;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;

[&#x6848;&#x4F8B;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E0E;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684; AB 7300PCR]&#x3002;

The AB 7300 Real-time PCR Systems in our hospital have been detected malfunction for three times in a short term. The detection indicated the major reason for the malfunction attributed to the fuse of the solder of the COVER at the same position with the serial number 4344490 D1. This article explicitly introduces how to detect and maintain this equipment. It serves as a good reference for colleagues. Meanwhile the author raises five issues for further exploration and discussion.

[Case study of detecting and maintenance of AB 7300PCR].

Les syst&egrave;mes AB 7300 Real-time PCR dans notre h&ocirc;pital ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s d&eacute;faillants pour trois fois de courte dur&eacute;e. La d&eacute;tection, a indiqu&eacute; la principale raison de la d&eacute;faillance attribu&eacute;e au fusible de la soudure du couvercle &agrave; la m&ecirc;me position avec le num&eacute;ro de s&eacute;rie 4344490 D1. Cet article introduit explicitement comment d&eacute;tecter et entretien du mat&eacute;riel. Il sert une bonne r&eacute;f&eacute;rence pour ses coll&egrave;gues. Dans le m&ecirc;me temps l&#39;auteur soul&egrave;ve cinq questions pour la poursuite de l&#39;exploration et la discussion.

[&Eacute;tude de cas de d&eacute;tecter et d&#39;entretien de 7300PCR AB].

Die AB 7300-Real-Time-PCR-Systeme in unserem Krankenhaus erkannt wurden in kurzer Zeit dreimal f&uuml;r Fehlfunktionen. Die Erkennung angegeben den wesentliche Grund f&uuml;r die Fehlfunktion zur&uuml;ckzuf&uuml;hren auf die Sicherung der das Lot der Abdeckung an der gleichen Stelle mit der Seriennummer 4344490 D1. Dieser Artikel stellt explizit wie erkannt und die Instandhaltung dieser Anlagen. Es dient als eine gute Referenz f&uuml;r Kollegen. Unterdessen wirft der Autor f&uuml;nf f&uuml;r weitere Exploration und Diskussion.

[Fallstudie zu erkennen und Wartung von AB-7300PCR].

L&#39;AB 7300 Real-Time PCR Systems nel nostro ospedale sono stati rilevati malfunzionamenti per tre volte in un breve termine. La rilevazione ha indicato il motivo principale per il malfunzionamento attribuito al fusibile di saldatura del coperchio nella stessa posizione con il numero di serie 4344490 D1. Questo articolo introduce in modo esplicito come rilevare e mantenere questa attrezzatura. Esso serve come un buon riferimento per i colleghi. Nel frattempo l&#39;autore pone cinque questioni per ulteriore esplorazione e discussione.

[Caso di studio di rilevazione e la manutenzione di AB 7300PCR].

&#x5F53;&#x9662;&#x3067;&#x306E; AB 7300 &#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; PCR &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 3 &#x56DE;&#x77ED;&#x671F;&#x3067;&#x306E;&#x8AA4;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3002;&#x691C;&#x51FA;&#x30B7;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x756A;&#x53F7; 4344490 D1 &#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x306F;&#x3093;&#x3060;&#x306E;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BA;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x306E;&#x6545;&#x969C;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x7406;&#x7531;&#x3092;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x660E;&#x793A;&#x7684;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x5668;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3082;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x826F;&#x3044;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x540C;&#x50DA;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x8457;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x63A2;&#x67FB;&#x3084;&#x8B70;&#x8AD6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; 5 &#x3064;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x767A;&#x751F;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

[&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C7;&#x30A3;] &#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3068; AB 7300PCR &#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C; AB 7300 &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC10;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9E7;&#xC740; &#xAE30;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC138; &#xBC88; &#xACE0;&#xC7A5;. &#xAC80;&#xC0C9; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC77C;&#xB828; &#xBC88;&#xD638; 4344490 d 1&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCEE4;&#xBC84;&#xC758; &#xB55C; &#xB0A9;&#xC758; &#xD4E8;&#xC988;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xACE0;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; &#xC774;&#xC720;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xB294; &#xBA85;&#xC2DC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC7A5;&#xBE44;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC88B;&#xC740; &#xCC38;&#xACE0; &#xC790;&#xB8CC;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD55C;&#xD3B8; &#xC800;&#xC790; &#xCD94;&#xAC00; &#xD0D0;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xD1A0;&#xB860;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xC81C;&#xAE30; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

[&#xAC80;&#xC0C9; &#xBC0F; AB 7300pcr&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC758; &#xC0AC;&#xB840; &#xC5F0;&#xAD6C;].

Los sistemas de PCR en tiempo real de AB 7300 en nuestro hospital se han detectado mal funcionamiento por tres veces en un corto plazo. La detecci&oacute;n indica la raz&oacute;n principal para el malfuncionamiento atribuido al fusible de la soldadura de la tapa en la misma posici&oacute;n con el n&uacute;mero de serie 4344490 D1. Este art&iacute;culo introduce expl&iacute;citamente c&oacute;mo detectar y mantener este equipo. Sirve como una buena referencia para colegas. Mientras tanto el autor plantea cinco cuestiones para mayor exploraci&oacute;n y discusi&oacute;n.

Article	Year
Simultaneous trichromatic fluorescence detection of proteins on Western blots using an amine-reactive dye in combination with alkaline phosphatase- and horseradish peroxidase-antibody conjug... Proteomics\| PubMed ID: 12872222	2003
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[Case study of detecting and maintenance of AB 7300PCR]. Zhongguo yi liao qi xie za zhi = Chinese journal of medical instrumentation\| PubMed ID: 20812657	2010

Jixiang Liu

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