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Transmembrane Domain Oligomerization Propensity determined by ToxR Assay

The oversimplified view of protein transmembrane domains as merely anchors in phospholipid bilayers has long since been disproven.  In many cases ...

University of Colorado at Boulder

Bisindolylmaleimides &#x306F;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x30B8;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DE; &#xFF08;syn &#x3068;&#x53CD;&#xFF09; &#x30B3;&#x30F3;&#x30DB;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7F6E;&#x63DB;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x7684;&#x306A;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x5927;&#x74B0;&#x72B6; bisindolylmaleimides &#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5236;&#x7D04;&#x306E;&#x306A;&#x3044; bisindolylmaleimides &#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA; 2-&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30EB;&#x7F6E;&#x63DB;&#x57FA;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x7684;&#x306A;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x5341;&#x5206;&#x306B; atropisomeric bisindolylmaleimides &#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x8A31;&#x53EF;&#x304C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5834;&#x6240; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x7A92;&#x7D20;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x3067; 2-&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30EB;&#x7F6E;&#x63DB;&#x57FA;&#x306E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x7684;&#x306A;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x8A87;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;20 &#x4EE5;&#x4E0A;&#x898F;&#x6A21;&#x5927;&#x74B0;&#x72B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5185;&#x306B;&#x5236;&#x7D04;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F; bisindolylmaleimide &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x69D8;&#x3005; &#x306A; syn &#x3068;&#x53CD;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x5909;&#x63DB;&#x7387;&#x3002;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x3001;&#x300D;7 &#x4EF6;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F; atropisomeric bisindolylmaleimides &#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x4F8B;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x5BA4;&#x6E29;&#x3067;&#x306E; epimerisation &#x306E;&#x534A;&#x6E1B;&#x671F;&#x3068;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x76EE; 10 (7) &#x5E74;&#x3002;

Bisindolylmaleimide &#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x985E;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x7684;&#x306A;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;: &#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x6700;&#x521D;&#x300D;7 &#x4EF6;&#x5B89;&#x5B9A; atropisomeric bisindolylmaleimides &#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3089;&#x3002;

Bisindolylmaleimides&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC81C;&#xD55C; diastereomeric (syn &#xBC0F; &#xC548;&#xD2F0;) conformations &#xCC44;&#xD0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;. &#xBC94;&#xC704;&#xC758; configurational &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xB300;&#xCCB4; &#xD558; &#xACE0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; macrocyclic bisindolylmaleimides. &#xBB34;&#xC81C;&#xD55C; bisindolylmaleimides&#xC640; 2 indolyl &#xCE58;&#xD658;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30; configurational &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xD558;&#xC9C0; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; atropisomeric bisindolylmaleimides&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; indole &#xC9C8;&#xC18C; &#xC6D0;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBC27;&#xC904;&#xACFC; 2 indolyl &#xCE58;&#xD658;&#xC758; &#xC785;&#xCCB4; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xACFC;&#xC7A5;, configurational &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xD070; &#xCC28;&#xC774;&#xB97C; &#xC120;&#xB3C4;. Macrocyclic &#xB9C1; &#xB0B4; &#xC81C;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4; bisindolylmaleimide &#xB9C1; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB300;&#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; 20 &#xC99D;&#xAC00;&#xD560; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; syn &#xBC0F; &#xC548;&#xD2F0; conformers&#xC758; interconversion&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4;. &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C;, configurationally &#xC548;&#xC815; &#xB41C; atropisomeric bisindolylmaleimides&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC608;&#xC81C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0;; &#xC2E4; &#xC628;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; epimerisation&#xC758; &#xBC18;&#xAC10;&#xAE30;&#xB294; &#xCD94;&#xC815; &amp;gt; 10(7) &#xB144;.

Bisindolylmaleimide cyclophanes configurational &#xC548;&#xC815;&#xC131;: &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; configurationally &#xC548;&#xC815; atropisomeric bisindolylmaleimides conformers&#xC5D0;&#xC11C;.

Bisindolylmaleimides &#x662F;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x53EF;&#x91C7;&#x7528;&#x4E24;&#x79CD;&#x9650;&#x5236;&#x5185; (syn &#x548C;&#x53CD;) &#x6784;&#x3002;&#x6784;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x66FF;&#x4EE3;&#x548C;&#x5927;&#x73AF; bisindolylmaleimides &#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x4E0E;&#x65E0;&#x7EA6;&#x675F;&#x7684; bisindolylmaleimides&#xFF0C;2 &#x5432;&#x53D6;&#x4EE3;&#x57FA;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x5F71;&#x54CD;&#x6784;&#x578B;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5141;&#x8BB8; atropisomeric bisindolylmaleimides &#x83B7;&#x5F97;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5730;&#x65B9;&#x4E2D;&#x5432;&#x54DA;&#x6C2E;&#x539F;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x9501;&#x94FE;&#xFF0C;2 &#x5432;&#x53D6;&#x4EE3;&#x57FA;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4F4D;&#x963B;&#x6548;&#x5E94;&#x88AB;&#x5927;&#x5927;&#x5938;&#x5927;&#x4E86;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6784;&#x578B;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x5DE8;&#x5927;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x4E2A; bisindolylmaleimide &#x73AF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x88AB;&#x9650;&#x5236;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5927;&#x73AF;&#x5708;&#x5185;&#x66FF;&#x4EE3;&#x4E8C;&#x5341;&#x591A;&#x6570;&#x91CF;&#x7EA7;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#x7684; syn &#x548C;&#x6297;&#x4EBA;&#x4E91;&#x4EA6;&#x4E91;&#x7684;&#x6362;&#x7B97;&#x7387;&#x3002;&#x5B9E;&#x9645;&#x4E0A;&#xFF0C;configurationally &#x7A33;&#x5B9A; atropisomeric bisindolylmaleimides &#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F8B;&#x5B50;&#x88AB;&#x62A5;&#x544A; &#xFF1B;epimerisation &#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5728;&#x5BA4;&#x6E29;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x534A;&#x8870;&#x671F;&#x4F30;&#x8BA1;&#x4E3A; &gt; 10(7) &#x5E74;&#x3002;

Bisindolylmaleimide cyclophanes &#x6784;&#x578B;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#xFF1A; &#x4ECE;&#x5230;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A; configurationally &#x662F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684; atropisomeric bisindolylmaleimides &#x4EBA;&#x4E91;&#x4EA6;&#x4E91;&#x3002;

The bisindolylmaleimides are selective protein kinase inhibitors that can adopt two limiting diastereomeric (syn and anti) conformations. The configurational stability of a range of substituted and macrocyclic bisindolylmaleimides was investigated by using appropriate techniques. With unconstrained bisindolylmaleimides, the size of the 2-indolyl substituents was found to affect configurational stability, though not sufficiently to allow atropisomeric bisindolylmaleimides to be obtained. However, with a tether between the two indole nitrogen atoms in place, the steric effect of 2-indolyl substituents was greatly exaggerated, leading to large differences in configurational stability. The rate of interconversion of the syn and anti conformers varied by over twenty orders of magnitude through substitution of a bisindolylmaleimide ring system, which was constrained within a macrocyclic ring. Indeed, the first examples of configurationally stable atropisomeric bisindolylmaleimides are reported; the half-life for epimerisation of these compounds at room temperature was estimated to be >10(7) years.

Configurational stability of bisindolylmaleimide cyclophanes: from conformers to the first configurationally stable, atropisomeric bisindolylmaleimides.

Les bisindolylmaleimides sont des inhibiteurs de kinase de prot&eacute;ine s&eacute;lective qui peuvent adopter deux conformations limitantes diast&eacute;r&eacute;oisom&egrave;res (syn et anti). La stabilit&eacute; configurationnelle d&#39;une gamme de substitu&eacute;s et macrocyclique bisindolylmaleimides a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e en utilisant des techniques appropri&eacute;es. Bisindolylmaleimides sans contrainte, la taille des substituants indolyl-2 a &eacute;t&eacute; jug&eacute;e &agrave; affecter la stabilit&eacute; configurationnelle, si pas suffisamment pour permettre &agrave; bisindolylmaleimides d&#39;atropisomeric d&#39;obtenir. Cependant, avec une sangle entre les deux atomes d&#39;azote d&#39;indole en place, l&#39;effet st&eacute;rique des substituants indolyl-2 a &eacute;t&eacute; grandement exag&eacute;r&eacute;, menant &agrave; grandes diff&eacute;rences de stabilit&eacute; configurationnelle. Le taux de l&#39;interconversion des conform&egrave;res syn et anti vari&eacute; de plus de vingt ordres de grandeur par la substitution d&#39;un syst&egrave;me bisindolylmal&eacute;imide, qui a &eacute;t&eacute; contrainte au sein d&#39;un macrocycle. En effet, les premiers exemples de configuration stable atropisomeric bisindolylmaleimides sont signal&eacute;s ; la demi-vie de l&#39;&eacute;pim&eacute;risation de ces compos&eacute;s &agrave; la temp&eacute;rature ambiante a &eacute;t&eacute; estim&eacute;e &agrave; &gt; 10 (7) ans.

Stabilit&eacute; configurationnelle des cyclophanes bisindolylmal&eacute;imide : de conform&egrave;res &agrave; la premi&egrave;re configuration stable, bisindolylmaleimides d&#39;atropisomeric.

Konfigurative Stabilit&#xE4;t von Bisindolylmaleimid Cyclophane: von Konformeren zu den ersten konfigurativ stabil, atropisomere bisindolylmaleimides.

I bisindolylmaleimides sono gli inibitori della chinasi di proteina selettiva che possono adottare due limitanti stereoisomere (syn e anti) conformazioni. La stabilit&agrave; configurazionale di una gamma di sostituito e macrociclici bisindolylmaleimides &egrave; stato studiato mediante tecniche appropriate. Con bisindolylmaleimides non vincolato, la dimensione dei sostituenti indolil-2 &egrave; stata trovata a influire sulla stabilit&agrave; configurazionale, anche se non sufficientemente per consentire atropisomeric bisindolylmaleimides essere ottenuto. Tuttavia, con una cavezza tra i due atomi di azoto indolo in luogo, l&#39;effetto sterico di 2-indolil sostituenti &egrave; stata molto esagerata, che porta a grandi differenze di stabilit&agrave; configurazionale. Il tasso di interconversione dei syn e anti conformisti variata da pi&ugrave; di venti ordini di grandezza tramite la sostituzione di un sistema ad anello bisindolylmaleimide, che era vincolato all&#39;interno di un anello Macrociclico. Infatti, vengono segnalati i primi esempi di bisindolylmaleimides atropisomeric configurationally stabile; l&#39;emivita per epimerisation di questi composti a temperatura ambiente &egrave; stata stimata per essere &amp;gt; 10 anni.

Stabilit&agrave; configurazionale di bisindolylmaleimide cyclophanes: da conformisti per il primo configurationally stabile, atropisomeric bisindolylmaleimides.

Los bisindolylmaleimides son inhibidores de la cinasa de prote&iacute;na selectivo que pueden adoptar dos diastereomeric (syn y anti) conformaciones limitantes. La estabilidad basada en la configuraci&oacute;n de una gama de sustituir y macroc&iacute;clicos bisindolylmaleimides fue investigado utilizando t&eacute;cnicas apropiadas. Con bisindolylmaleimides sin restricciones, el tama&ntilde;o de los sustitutos de 2-indolyl se encontr&oacute; que afectan la estabilidad basada en la configuraci&oacute;n, aunque no lo suficiente como para permitir atropisomeric bisindolylmaleimides obtener. Sin embargo, con una atadura entre los dos &aacute;tomos de nitr&oacute;geno de indol en su lugar, el efecto est&eacute;rico de sustituyentes 2-indolyl fue muy exagerado, conduce a grandes diferencias en la estabilidad basada en la configuraci&oacute;n. La tasa de interconversi&oacute;n de los conformadores syn y anti variadas en &oacute;rdenes de magnitud m&aacute;s de veinte a trav&eacute;s de la sustituci&oacute;n de un sistema de anillo de bisindolylmaleimide, que estaba limitado dentro de un anillo de lactonas macroc&iacute;clicas. De hecho, los primeros ejemplos de bisindolylmaleimides de atropisomeric configurationally estable se divulgan; la vida media para epimerisation de estos compuestos a temperatura ambiente se estimaba &gt; 10 a&ntilde;os.

Estabilidad basada en la configuraci&oacute;n de cyclophanes de bisindolylmaleimide: de conformadores para la primera configurationally estable, bisindolylmaleimides de atropisomeric.

&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A; SAM mimetics &#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7684;&#x963B;&#x904F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x86CB;&#x6C28;&#x9178;&#x7269; (MetJ) &#x7684; DNA&#xFF0C;&#x5176;&#x8FD0;&#x7B97;&#x7B26;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x5408;&#x6210;&#x3002;

&#x7A33;&#x5B9A; (SAM) S-&#x817A;&#x82F7;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269; derivatised &#x4E0E; bioorthogonal &#x6807;&#x8BB0;&#x8BC6;&#x522B;&#xFF1A; &#x5BF9;&#x7684;&#x963B;&#x904F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x86CB;&#x6C28;&#x9178;&#x7269;&#xFF0C;MetJ&#xFF0C;&#x5176;&#x8FD0;&#x7B97;&#x7B26; DNA &#x4EB2;&#x548C;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

The efficient synthesis of a range of stable SAM mimetics, and their ability to promote the binding of the E. coli methionine repressor (MetJ) to its operator DNA, is described.

Identification of stable S-adenosylmethionine (SAM) analogues derivatised with bioorthogonal tags: effect of ligands on the affinity of the E. coli methionine repressor, MetJ, for its operator DNA.

La synth&egrave;se efficace d&#39;une gamme de stable mim&eacute;tiques de SAM et leur capacit&eacute; &agrave; promouvoir la liaison du r&eacute;presseur de m&eacute;thionine d&#39;e. coli (MetJ) &agrave; son op&eacute;rateur ADN, est d&eacute;crite.

Identification des stable S-ad&eacute;nosylm&eacute;thionine (SAM) analogues d&eacute;rivatis&eacute;s avec bioorthogonal tags : effet de ligands sur l&#39;affinit&eacute; du r&eacute;presseur de m&eacute;thionine e. coli, MetJ, pour son op&eacute;rateur ADN.

Die effiziente Synthese von eine Reihe von stabilen SAM Mimetics und ihre F&auml;higkeit zur F&ouml;rderung der Bindung von E. Coli Methionin Verdr&auml;nger (MetJ) zu seinem Betreiber DNA, wird beschrieben.

Identifizierung von stabilen S-Adenosylmethionine (SAM)-Analoga derivatisierte mit Bioorthogonal Tags: Wirkung der Liganden auf die Affinit&auml;t der E. Coli-Methionin Verdr&auml;nger, MetJ, f&uuml;r seine DNA-Operator.

La sintesi efficace di una gamma di stabile SAM mimetico e la loro capacit&agrave; di promuovere il legame del repressor di metionina di e. coli (MetJ) al suo operatore DNA, &egrave; descritto.

Identificazione di S-adenosilmetionina (SAM) stabile analoghi derivatised con bioorthogonal Tag: effetto dei leganti sull&#39;affinit&agrave; del repressor di metionina e. coli, MetJ, per l&#39;operatore del DNA.

&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F; SAM &#x30DF;&#x30E1;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3068;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x30E1;&#x30C1;&#x30AA;&#x30CB;&#x30F3; &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC; (MetJ) &#x305D;&#x306E;&#x30AA;&#x30DA;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; DNA &#x3078;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Bioorthogonal &#x30BF;&#x30B0;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F; s-&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30EB;&#x30E1;&#x30C1;&#x30AA;&#x30CB;&#x30F3; (SAM) &#x985E;&#x7E01;&#x4F53; derivatised &#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#xFF1A; &#x306F;&#x30A8;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EA;&#x30D2;&#x30A2;&#x5C5E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30AA;&#x30CB;&#x30F3; &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3001;MetJ&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30AA;&#x30DA;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; DNA &#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x3002;

&#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD569;&#xC131; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC0D8; mimetics&#xC758; &#xBC94;&#xC704; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC790;&#xC0AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xC0B0;&#xC790; DNA &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xBA54;&#xD2F0;&#xC624;&#xB2CC; &#xC9C4;&#xC555; (MetJ)&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; S-adenosylmethionine (SAM) analogues derivatised bioorthogonal &#xD0DC;&#xADF8; &#xC2DD;&#xBCC4;: &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xBA54;&#xD2F0;&#xC624;&#xB2CC; &#xC9C4;&#xC555; MetJ&#xB97C; DNA&#xC758; &#xC5F0;&#xC0B0;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC5D0; ligands&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;.

La s&iacute;ntesis eficaz de una gama de an&aacute;logos de SAM estable y su capacidad para promover a la Uni&oacute;n del represor de la metionina de e. coli (MetJ) a su operador de ADN, se describe.

Identificaci&oacute;n de derivatised de an&aacute;logos de la S-adenosilmetionina (SAM) estable con las etiquetas bioorthogonal: efecto de ligandos en la afinidad del represor de metionina de e. coli, MetJ, su operador de ADN.

Un nombre croissant de structures de prot&#xE9;ines cibles disponibles pour des &#xE9;tudes de calcul rend le paradigme de d&#xE9;pistage bas&#xE9; sur la structure plus attrayante pour les indentification coup initial. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une nouvelle m&#xE9;thodologie dans le criblage in silico int&#xE9;grant la m&#xE9;canique mol&#xE9;culaire (MM) / implicite des m&#xE9;thodes de solvants pour &#xE9;valuer contraignantes &#xE9;nergies libres et appliqu&#xE9; cette technologie &#xE0; l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;inhibiteurs de l&#x26;#39;interaction TLR4/MD-2.

Application d&#x26;#39;un roman en Silico &#xE0; haut d&#xE9;bit d&#x26;#39;&#xE9;cran pour identifier des inhibiteurs s&#xE9;lectifs de interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine

Steigende Zahl von Zielstrukturen f&uuml;r computational Studien Protein macht das Struktur-basiertes Screening-Paradigma f&uuml;r ersten hit Identifizierung attraktiver. Haben wir entwickelt, einen Roman in Silico screening-Methodik zur molekularen Mechanik (MM) / implizite L&ouml;sungsmittel Methoden auswerten Bindung freie Energien und diese Technologie zur Identifizierung von Inhibitoren der Interaktion TLR4/MD-2 angewendet.

Anwendung eines Romans in Silico Hochdurchsatz Schirm selektive Inhibitoren f&uuml;r Protein-Protein Interaktionen zu identifizieren.

Un numero crescente di strutture della proteina target disponibili per studi computazionali rende pi&ugrave; attraente per identificazione iniziale ha colpito il paradigma di screening basati sulla struttura. Abbiamo sviluppato un romanzo in silico di screening metodologia incorporando meccanica molecolare (MM) / metodi solvente impliciti per valutare l&#39;associazione libero energie e applicato questa tecnologia per l&#39;identificazione di inibitori dell&#39;interazione TLR4/MD-2.

Applicazione di un romanzo in silico schermo high-throughput per identificare inibitori selettivi per le interazioni della proteina-proteina.

Increasing numbers of target protein structures available for computational studies makes the structure-based screening paradigm more attractive for initial hit indentification. We have developed a novel in silico screening methodology incorporating Molecular Mechanics (MM)/implicit solvent methods to evaluate binding free energies and applied this technology to the identification of inhibitors of the TLR4/MD-2 interaction.

Application of a novel in silico high-throughput screen to identify selective inhibitors for protein-protein interactions.

&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x53EF;&#x4F9B;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x4F7F;&#x5F97;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x7B5B;&#x67E5;&#x8303;&#x5F0F;&#x5BF9;&#x521D;&#x59CB;&#x547D;&#x4E2D;&#x9274;&#x5B9A;&#x66F4;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x7845;&#x7B5B;&#x9009;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7EB3;&#x5165;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x5B66; (MM) &#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;/&#x9690;&#x5F0F;&#x6EB6;&#x5242;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x91CA;&#x653E;&#x80FD;&#x91CF;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x5242; TLR4/MD-2 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x5E94;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7845;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6765;&#x8BC6;&#x522B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;

&#x8A08;&#x7B97;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x3068;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30D2;&#x30C3;&#x30C8;&#x9886;&#x57DF;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x3088;&#x308A;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7D50;&#x5408;&#x81EA;&#x7531;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x5B66;&#xFF08;MM&#xFF09;/&#x6697;&#x9ED9;&#x7684;&#x306A;&#x6EB6;&#x5264;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5165;&#x308C;&#x305F;in silico&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x624B;&#x6CD5;&#x3067;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;TLR4/MD-2&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xB300;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC870; &#xACC4;&#xC0B0; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218;&#xC758; &#xC22B;&#xC790;&#xB97C; &#xB298;&#xB824; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2A4;&#xD06C;&#xB9AC;&#xB2DD; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784; &#xCD08;&#xAE30; &#xD788;&#xD2B8; &#xC2E0;&#xBD84;&#xC99D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xB825;. Silico &#xC0C1;&#xC601; &#xBD84;&#xC790; &#xC5ED;&#xD559; (MM)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC124;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;/&#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC6A9; &#xB9E4; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC554;&#xC2DC;&#xC801; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xBB34;&#xB8CC; TLR4/MD-2 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0;&#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC801;&#xC6A9;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; silico &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC124;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9;.

Un n&#xFA;mero creciente de estructuras de prote&#xED;nas diana disponibles para los estudios computacionales hace que el paradigma de detecci&#xF3;n basado en la estructura m&#xE1;s atractiva para su identificaci&#xF3;n golpe inicial. Hemos desarrollado un novedoso m&#xE9;todo de detecci&#xF3;n in silico la incorporaci&#xF3;n de Mec&#xE1;nica Molecular (mm) / impl&#xED;citas m&#xE9;todos solventes para evaluar las energ&#xED;as de uni&#xF3;n y se aplica esta tecnolog&#xED;a para la identificaci&#xF3;n de inhibidores de la interacci&#xF3;n TLR4/MD-2.

Aplicaci&#xF3;n de un nuevo in silico de alto rendimiento de la pantalla para identificar inhibidores selectivos de interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na

&#x7231;&#x6CFC;&#x65AF;&#x5766;-&#x5DF4;&#x5C14;&#x75C5;&#x6BD2; (EBV) &#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684; &gamma; &#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x9488;&#x5BF9;&#x4E3B;&#x673A;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BB0;&#x5FC6; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7EC8;&#x8EAB;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x901A;&#x5E38;&#x662F;&#x826F;&#x6027;&#x7684; EBV &#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x548C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x589E;&#x751F;&#x6027;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x8005;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x6F5C;&#x4F0F;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; 1 (LMP-1) &#x5BF9;&#x4E8E;&#x7531; EBV B &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;LMP 1 &#x672C;&#x6784;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6D3B;&#x52A8;&#x662F;&#x76F4;&#x7ACB;&#x4EBA;&#x9F50;&#x805A;&#x5176;&#x8DE8;&#x8D8A;&#x516D;&#x4E2A;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF; (TMD) &#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x9A7E;&#x9A76; LMP 1 &#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x673A;&#x7406;&#x662F;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x7B2C;&#x4E94;&#x5C4A;&#x8DE8;&#x819C;&#x87BA;&#x65CB; &#xFF08;TM5&#xFF09; &#x7684;&#x56ED;&#x666F;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x603B;&#x56FE; 1 &#x5F3A;&#x70C8; self-associates&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x590D;&#x6742;&#x7684; homotrimeric &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6781;&#x5730;&#x6B8B;&#x7559;&#x5728;&#x819C;&#x3001; D150 &#x5D4C;&#x5165;&#x3002;&#x66F4;&#x6362;&#x6B64;&#x5929;&#x95E8;&#x51AC;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x4E0E;&#x4E19;&#x6C28;&#x9178;&#x6270;&#x4E71; TM5 &#x81EA;&#x7F14;&#x5408;&#x6D17;&#x6DA4;&#x5242;&#x80F6;&#x675F;&#x548C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x3002;&#x5168;&#x957F; LMP 1 variant &#x7A9D;&#x85CF; D150A &#x66FF;&#x4EE3;&#x90FD;&#x7F3A;&#x4E4F; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x6784;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7531;&#x672C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E94;&#x5C4A;&#x8DE8;&#x819C;&#x87BA;&#x65CB;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x8DE8;&#x819C;&#x80BD;&#x7528;&#x4E8E;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x5BE1;&#x805A;&#x63A5;&#x53E3;&#x548C;&#x6F5C;&#x4F0F;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; 1 &#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x70ED;&#x70B9;&#x3002;

Epstein-Barr virus (EBV), a human Î³-herpesvirus, establishes lifelong infection by targeting the adaptive immune system of the host through memory B cells. Although normally benign, EBV contributes to lymphoid malignancies and lymphoproliferative syndromes in immunocompromised individuals. The viral oncoprotein latent membrane protein 1 (LMP-1) is essential for B lymphocyte immortalization by EBV. The constitutive signaling activity of LMP-1 is dependent on homo-oligomerization of its six-spanning hydrophobic transmembrane domain (TMD). However, the mechanism driving LMP-1 intermolecular interaction is poorly understood. Here, we show that the fifth transmembrane helix (TM5) of LMP-1 strongly self-associates, forming a homotrimeric complex mediated by a polar residue embedded in the membrane, D150. Replacement of this aspartic acid residue with alanine disrupts TM5 self-association in detergent micelles and bacterial cell membranes. A full-length LMP-1 variant harboring the D150A substitution is deficient in NFÎºB activation, supporting the key role of the fifth transmembrane helix in constitutive activation of signaling by this oncoprotein.

Transmembrane peptides used to investigate the homo-oligomeric interface and binding hotspot of latent membrane protein 1.

Virus Epstein-Barr (EBV), un &#xEA;tre humain &#x3B3;-herp&#xE8;svirus, &#xE9;tablit une infection &#xE0; vie, en ciblant le syst&#xE8;me immunitaire adaptatif de l&#x26;#39;h&#xF4;te par les cellules B m&#xE9;moires. Bien que normalement b&#xE9;nigne, EBV contribue &#xE0; tumeurs malignes lympho&#xEF;des et les syndromes lymphoprolif&#xE9;ratifs chez les sujets immunod&#xE9;prim&#xE9;s. La prot&#xE9;ine virale latente oncoprot&#xE9;ine membrane 1 (LMP-1) est essentiel pour l&#x26;#39;immortalisation des lymphocytes B par l&#x26;#39;EBV. L&#x26;#39;activit&#xE9; de signalisation constitutive de LMP-1 est d&#xE9;pendante de l&#x26;#39;homo-oligom&#xE9;risation de son domaine transmembranaire &#xE0; six s&#x26;#39;&#xE9;tendant hydrophobe (DMT). Cependant, le m&#xE9;canisme d&#x26;#39;entra&#xEE;nement LMP-1 &#x26;#39;interaction intermol&#xE9;culaire est mal comprise. Ici, nous montrons que l&#x26;#39;h&#xE9;lice transmembranaire cinqui&#xE8;me (TM5) de LMP-1 fortement auto-associ&#xE9;s, formant une m&#xE9;diation homotrim&#xE9;rique complexe par un r&#xE9;sidu polaire incorpor&#xE9; dans la membrane, D150. Le remplacement de ce r&#xE9;sidu d&#x26;#39;acide aspartique par une alanine perturbe TM5 auto-association en micelles de d&#xE9;tergent et des membranes cellulaires bact&#xE9;riennes. Une pleine longueur LMP-1 variante abriter la substitution D150A est d&#xE9;ficiente dans l&#x26;#39;activation de NFkB, en soutenant le r&#xF4;le cl&#xE9; de l&#x26;#39;h&#xE9;lice transmembranaire cinqui&#xE8;me activation constitutive de la signalisation par cette oncoprot&#xE9;ine.

Peptides transmembranaires occasion d&#x26;#39;&#xE9;tudier l&#x26;#39;interface Homo-oligom&#xE8;res et Hotspot liaison de la prot&#xE9;ine membranaire latente 1

Epstein - Barr-Virus (EBV), eine menschliche &gamma;-Herpesvirus, schafft lebenslange Infektion durch gezielte das adaptive Immunsystem des Wirtes durch B-Ged&auml;chtniszellen. Obwohl normalerweise gutartig, tr&auml;gt EBV lymphoide Malignome und Lymphoproliferative Syndrome bei immungeschw&auml;chten Personen. Das virale OIT3 latentes Membranprotein 1 (LMP-1) ist f&uuml;r B-Lymphozyte Immortalization von EBV. Die konstitutive Signalling Aktivit&auml;t der LMP-1 ist abh&auml;ngig von Homo-Oligomerisierung von seiner sechs-spanning hydrophobe Transmembranegebiet (TMD). Jedoch ist der Mechanismus, der LMP-1 intermolekulare Interaktion fahren oft missverstanden. Hier zeigen wir, dass die f&uuml;nfte transmembrane-Helix (TM5) LMP-1 stark self-associates, bilden eine komplexe homotrimeres, vermittelt durch einen polar R&uuml;ckstand in der Membran, D150 eingebettet. Ersatz von diesem Asparagins&auml;ure R&uuml;ckstand mit Alanin st&ouml;rt TM5 Self-association in Waschmitteln Micellen und bakteriellen Zellmembranen. Eine in LMP-1-Variante beherbergen die D150A Substitution ist mangelhaft NF&kappa;B-Aktivierung, die Schl&uuml;sselrolle der f&uuml;nfte Transmembran-Helix in konstitutiven Aktivierung der Signalisierung durch dieses OIT3 unterst&uuml;tzen.

Transmembran-Peptide verwendet, um die Homo-Oligomere Schnittstelle und Bindung Hotspot latentes Membrane Protein 1 zu untersuchen.

Virus Epstein - Barr (EBV), &gamma;-herpesvirus umano, stabilisce infezione permanente di mira il sistema immunitario adattativo dell&#39;ospite attraverso le cellule di B di memoria. Anche se normalmente benigna, EBV contribuisce a neoplasie linfoidi e sindromi linfoproliferative negli individui immunocompromessi. La proteina di membrana latente oncoproteina virale dei tipo 1 (LMP-1) &egrave; essenziale per immortalization dei linfociti B da EBV. L&#39;attivit&agrave; di segnalazione costitutiva di LMP-1 &egrave; dipendente da homo-oligomerizzazione del suo sei-spanning idrofobico transmembrana dominio (TMD). Tuttavia, il meccanismo guida interazione intermolecolare LMP-1 &egrave; scarsamente compreso. Qui, ci mostrano che la quinta elica transmembrana (TM5) di LMP-1 fortemente self-associates, formando un complesso homotrimeric mediata da un residuo polare incorporato nella membrana, D150. Sostituzione di questo residuo di acido aspartico con alanina sconvolge TM5 moltiplicava in detergenti micelle e le membrane delle cellule batteriche. Una variante di LMP-1 Full-length harboring la sostituzione D150A &egrave; carenza nell&#39;attivazione di NF&kappa;B, sostenendo il ruolo chiave dell&#39;elica del transmembrane quinto in attivazione costitutiva dell&#39;oncoproteina di questo tipo di segnalazione.

Transmembrane peptidi utilizzati per indagare l&#39;interfaccia oligomerica homo e hotspot di associazione della proteina latente di membrana 1.

Epstein-Barr&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;EBV&#xFF09;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x3B3;-&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x8A18;&#x61B6;B&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x751F;&#x6DAF;&#x611F;&#x67D3;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x901A;&#x5E38;&#x306F;&#x826F;&#x6027;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;EBV&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x500B;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7CFB;&#x60AA;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x5897;&#x6B96;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;1&#xFF08;LMP-1&#xFF09;EBV&#x306B;&#x3088;&#x308B;B&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; LMP-1&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x7684;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;6&#x3064;&#x306E;&#x30B9;&#x30D1;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;TMD&#xFF09;&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;LMP-1&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x304F;LMP-1&#x306E;&#x7B2C;&#x4E94;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;TM5&#xFF09;&#x819C;&#x3001;D150&#x306B;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x6975;&#x6027;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;homotrimeric&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30B9;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x200B;&#x200B;&#x306F;&#x3001;&#x754C;&#x9762;&#x6D3B;&#x6027;&#x5264;&#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x3068;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;TM5&#x81EA;&#x5DF1;&#x4F1A;&#x5408;&#x3092;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; D150A&#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3092;&#x4FDD;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577;&#x306E;LMP-1&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x200B;&#x200B;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;5&#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x306B;&#x6B20;&#x640D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;1&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30DB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;

&#xC5E1; &#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778;-&#xBC14; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EBV) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &gamma; herpesvirus &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; B &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC801;&#xC751;&#xC131; &#xBA74;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xACC4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3C9;&#xC0DD; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC591;&#xC131;, EBV &#xC545;&#xC131; &#xB9BC;&#xD504; &#xC885;&#xC591; &#xBC0F; immunocompromised &#xAC1C;&#xC778; lymphoproliferative syndromes&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; oncoprotein &#xC7A0;&#xC7AC; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 (LMP-1), EBV B &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; immortalization &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. LMP-1 &#xC81C;&#xC815; &#xC2E0;&#xD638; &#xD65C;&#xB3D9; 6 &#xC2A4;&#xD328;&#xB2DD; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (TMD)&#xC758; &#xD638;&#xBAA8;-oligomerization&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC6B4;&#xC804; LMP 1 intermolecular &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; LMP-1&#xC758; &#xB2E4;&#xC12F; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB098;&#xC120; (TM5) &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; self-associates, &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;, d 150&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xADF9; &#xC9C0; &#xCC0C; &#xAEBC; &#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; homotrimeric &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC54C;&#xB77C;&#xB2CC;&#xACFC; aspartic &#xC0B0; &#xC131; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC774; &#xAD50;&#xCCB4; TM5 self-association &#xC138;&#xC81C; micelles &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xBC29;&#xD574;. D150A &#xB300;&#xCCB4; &#xC740;&#xB2C9; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; LMP 1 &#xBCC0;&#xC885;&#xC774;&#xC774; oncoprotein &#xC5EC; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xC81C;&#xC815; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC12F; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB098;&#xC120;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC2DC;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD54D;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xD638;&#xBAA8; oligomeric &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC640; &#xC7A0;&#xC7AC; &#xB41C; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD56B;&#xC2A4;&#xD31F; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Virus de Epstein-Barr (VEB), un ser humano &#x3B3;-herpesvirus, establece una infecci&#xF3;n cr&#xF3;nica por el objetivo la adaptaci&#xF3;n del sistema inmune del hu&#xE9;sped a trav&#xE9;s de c&#xE9;lulas B de memoria. Aunque normalmente benigna, EBV contribuye a neoplasias linfoides y s&#xED;ndromes linfoproliferativos en los individuos inmunocomprometidos. La oncoprote&#xED;na viral latente prote&#xED;na de membrana 1 (LMP-1) es esencial para la inmortalizaci&#xF3;n de linfocitos B por el VEB. La actividad de se&#xF1;alizaci&#xF3;n constitutiva de la LMP-1 es dependiente de la homo-oligomerizaci&#xF3;n de su dominio de transmembrana que abarca seis hidrof&#xF3;bico (TTM). Sin embargo, el mecanismo de accionamiento LMP-1 interacci&#xF3;n intermolecular es poco conocida. En este caso, nos muestran que la h&#xE9;lice transmembrana quinto (TM5) de la LMP-1 con fuerza de auto-asociados, formando un complejo homotrim&#xE9;rico mediada por un residuo polar embebido en la membrana, D150. La sustituci&#xF3;n de este residuo de &#xE1;cido asp&#xE1;rtico con alanina interrumpe TM5 auto-asociaci&#xF3;n en micelas detergentes y las membranas celulares de las bacterias. Una de cuerpo entero LMP-1 variante de albergar la sustituci&#xF3;n D150A es deficiente en la activaci&#xF3;n de NFkB, apoyando el papel clave de la h&#xE9;lice transmembrana quinto en la activaci&#xF3;n constitutiva de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de esta oncoprote&#xED;na.

Los p&#xE9;ptidos transmembrana utilizados para investigar la interfaz Homo-oligom&#xE9;rica y Hotspot uni&#xF3;n de la prote&#xED;na latente de membrana 1

ToxR-based reporter transcriptional dosaggi permettono la forza delle interazioni del transmembrane helix in membrane biologiche deve essere misurata. In precedenza, questi dosaggi sono stati utilizzati solo per lo studio del transmembrane sistemi single-pass. Per facilitare l&#39;indagine di oligomerizzazione dominio transmembrana (TMD) polytopic, abbiamo applicato la metodologia ToxR allo studio del multi-pass oligomerizzazione TMD a dare &#39;Multi-Tox&#39;. Propensioni associazione l&#39;oncoproteina dei tipo virale, latente di membrana proteina-1 (LMP-1) e l&#39;e. coli integrale di membrana diacilglicerolo chinasi (DAGK) sono stati studiati da Multi-Tox, evidenziando i residui di particolare importanza meccanicistica. Sono stati studiati sia homo - ed etero-oligomerizations.

Multi-Tox: applicazione del dosaggio ToxR-transcriptional reporter allo studio di oligomerizzazione dominio transmembrana proteine multi-pass.

ToxR&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x819C;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;1&#x56DE;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x578B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x9762;&#x4F53;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;TMD&#xFF09;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F; &#x26;quot;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;Tox&#x306E;&#x26;quot;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30D1;&#x30B9;TMD&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;ToxR&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x816B;&#x760D;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x6027;&#x5411;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;-1&#xFF08;LMP-1&#xFF09;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x819C;&#x7A4D;&#x5206;&#x30B8;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;DAGK&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6A5F;&#x5E8F;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3001;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;Tox&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DB;&#x30E2; - &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;oligomerizations&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;Tox&#x306E;&#xFF1A;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30D1;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;ToxR&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;

&#x57FA;&#x4E8E; ToxR &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8BB0;&#x8005;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x8981;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E2D;&#x5141;&#x8BB8;&#x8DE8;&#x819C;&#x87BA;&#x65CB;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x9A8C;&#x7814;&#x7A76;&#x5355;&#x901A;&#x9053;&#x8DE8;&#x819C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x4E3A;&#x65B9;&#x4FBF;&#x8C03;&#x67E5;&#x591A;&#x9762;&#x4F53;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF; (TMD) &#x9F50;&#x805A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x591A;&#x7A0B; TMD &#x9F50;&#x805A;&#x7ED9; &#39; &#x591A; Tox&#39; &#x91C7;&#x7528; ToxR &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x534F;&#x4F1A;&#x503E;&#x5411;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x6F5C;&#x4F0F;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;-1 (LMP-1&#xFF09; &#x548C;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x819C;&#x79EF;&#x5206;&#x7518;&#x6CB9;&#x4E8C;&#x916F;&#x6FC0;&#x9176; (DAGK) &#x7814;&#x7A76;&#x4E86;&#x591A; Tox&#xFF0C;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x7279;&#x5B9A;&#x673A;&#x68B0;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x540C;&#x6E90;-&#x548C;&#x5F02;&#x8D28;-oligomerizations &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x591A;-Tox&#xFF1A; ToxR &#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x86CB;&#x767D;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF;&#x9F50;&#x805A;&#x3002;

ToxR-based transcriptional reporter assays allow the strength of transmembrane helix interactions in biological membranes to be measured. Previously, these assays have only been used to study single-pass transmembrane systems. To facilitate investigation of polytopic transmembrane domain (TMD) oligomerization, we applied the ToxR methodology to the study of multi-pass TMD oligomerization to give 'Multi-Tox'. Association propensities of the viral oncoprotein, latent membrane protein-1 (LMP-1), and the E. coli membrane-integral diacylglycerol kinase (DAGK) were studied by Multi-Tox, highlighting residues of particular mechanistic importance. Both homo- and hetero-oligomerizations were studied.

Multi-Tox: application of the ToxR-transcriptional reporter assay to the study of multi-pass protein transmembrane domain oligomerization.

ToxR des essais &#xE0; base de transcription reporteurs permettre la force d&#x26;#39;interactions h&#xE9;lice transmembranaires dans les membranes biologiques &#xE0; mesurer. Auparavant, ces tests ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s uniquement pour &#xE9;tudier les syst&#xE8;mes transmembranaires un seul passage. Pour faciliter les enqu&#xEA;tes de domaine transmembranaire polytopique (TMD) oligom&#xE9;risation, nous avons appliqu&#xE9; la m&#xE9;thodologie ToxR &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tude des multi-pass oligom&#xE9;risation TMD pour donner &#xAB;Multi-Tox&#xBB;. Association propensions de l&#x26;#39;oncoprot&#xE9;ine virale, membrane latente prot&#xE9;ine-1 (LMP-1), et E. coli de la membrane int&#xE9;grante diacylglyc&#xE9;rol kinase (DAGK) ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9; par multi-Tox, mettant en &#xE9;vidence les r&#xE9;sidus d&#x26;#39;importance m&#xE9;canique particuli&#xE8;re. Les deux homo-et h&#xE9;t&#xE9;ro-oligom&#xE9;risations ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;s.

Multi-Tox: Application du dosage Reporter ToxR-transcriptionnelle de l&#x26;#39;&#xE9;tude de la Multi-pass oligom&#xE9;risation domaine prot&#xE9;ine transmembranaire

Transkriptionelle Reporter ToxR basierende Assays erm&ouml;glichen die St&auml;rke der Transmembran-Helix-Wechselwirkungen in biologischen Membranen gemessen werden. Fr&uuml;her wurden diese Proben nur Untersuchung Einschritt-Transmembran-Systeme verwendet. Zur Erleichterung der Untersuchung von polytopischen Transmembranegebiet (TMD) Oligomerisierung angewendet wir die ToxR Methodik zum Studium der Multipass TMD Oligomerisierung, &#39;Multi-Tox&#39; zu geben. Verein Neigungen die virale OIT3, latentes Membrane Protein-1 (LMP-1) und das E. Coli membranst&auml;ndiger Diacylglycerol Kinase (DAGK) von Multi-Tox, Hervorhebung R&uuml;ckst&auml;nde von besonderer Bedeutung der mechanistischen studiert wurden. Beide Homo und Hetero-Oligomerizations wurden untersucht.

Multi-Tox: Anwendung des ToxR-transkriptionelle Reporter Assays zum Studium der Multipass Protein Transmembranegebiet Oligomerisierung.

Transcriptional &#xAE30;&#xC790; ToxR &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xCE21;&#xC815; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB098;&#xC120; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xAC15;&#xB3C4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xB9CC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD328;&#xC2A4; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. Polytopic &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (TMD) oligomerization&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#39; &#xBA40;&#xD2F0;-Tox&#39; &#xC8FC;&#xACE0; multi-pass TMD oligomerization&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; ToxR &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xC801;&#xC6A9;. &#xD611;&#xD68C; &#xACBD;&#xD5A5; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; oncoprotein, &#xC7A0;&#xC7AC; &#xB41C; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-1 (LMP-1)&#xB294; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC815;&#xC218; diacylglycerol &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (DAGK) &#xBA40;&#xD2F0;-Tox, &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xAE30;&#xACC4; &#xB860;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB450; &#xD638;&#xBAA8;-&#xBC0F; hetero-oligomerizations &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xBA40;&#xD2F0;-Tox: &#xBA40;&#xD2F0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; oligomerization&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; ToxR transcriptional &#xAE30;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;.

ToxR basados &#x200B;&#x200B;en ensayos de reportero transcripcional permitir que la fuerza de las interacciones h&#xE9;lice transmembrana en las membranas biol&#xF3;gicas a medir. Anteriormente, estos ensayos s&#xF3;lo se han utilizado para estudiar los sistemas de un solo paso transmembrana. Para facilitar la investigaci&#xF3;n del dominio transmembrana polit&#xF3;pica (TMD) de oligomerizaci&#xF3;n, se aplic&#xF3; la metodolog&#xED;a toxR al estudio de la multi-pass oligomerizaci&#xF3;n DTM para dar &#x26;#39;Multi-Tox&#x26;#39;. Propensiones de Asociaci&#xF3;n de la oncoprote&#xED;na viral, la membrana latente prote&#xED;na-1 (LMP-1), y la E. coli membrana integral quinasa diacilglicerol (DAGK) fueron estudiados en un Multi-Tox, destacando los residuos de importancia mecanicista en particular. Tanto la homo-y hetero oligomerizaciones se estudiaron.

Multi-Tox: Aplicaci&#xF3;n del reportero de ensayo toxR-transcripcional para el Estudio de la Multi-pass oligomerizaci&#xF3;n de prote&#xED;nas dominio transmembrana

In optimalen F&auml;llen k&ouml;nnen bivalenten Liganden mit au&szlig;ergew&ouml;hnlich hoher Affinit&auml;t zu ihren Zielen Protein binden. Entwerfen optimierte Verkn&uuml;pfungsprogramme, die die Bindung der beiden Gruppen perfekt zu orientieren, ist jedoch anspruchsvoll und doch entscheidend in beiden Fragment-basierte Ligand-Design und in der Entdeckung der Bisubstrate-Enzym-Hemmer. S-Adenosylmethionine (SAM)-Analoga wurden mit dem Ziel der Interaktion mit dem MetJ-Dimer in einem bivalenten Sinn (1:1 Ligand/MetJ Dimer) entwickelt, um unser Verst&auml;ndnis der Linker-Design, eine Reihe von neuartigen hergestellten weiter. Eine Reihe von Liganden wurde synthetisiert und F&auml;higkeit zur F&ouml;rderung der Bindung der Escherichia coli Methionin Verdr&auml;nger, MetJ, zu seinem Betreiber DNA analysiert. Von zweiwertigem SAM-Analoga zu den MetJ Homodimer in Anwesenheit von Operator binden DNA wurde durch Fluoreszenz Anisotropie und der Effekt der Linker ausgewertet und Struktur wurde untersucht. Die effektivste bivalenten Ligand identifiziert hatte einen flexiblen Linker und bef&ouml;rdert die DNA-Protein-Interaktion bei 21-mal niedriger Konzentration als das entsprechende monovalenten Steuerelement-Compound.

Design, Synthese und in-vitro-Auswertung von Roman bivalenten S-Adenosylmethionine-Analoga.

&#x5728;&#x6700;&#x4F73;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x53CC;&#x4EF7;&#x914D;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5176;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x6781;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3001; &#x4F18;&#x5316;&#x7684;&#x8FDE;&#x63A5;&#x5668;&#xFF0C;&#x5B8C;&#x5168;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x7684;&#x65B9;&#x5411;&#xFF0C;&#x662F;&#x6781;&#x5177;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x548C;&#x5C1A;&#x672A;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7247;&#x6BB5;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C; bisubstrate &#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4E86;&#x89E3;&#x94FE;&#x63A5;&#x5668;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x53CC;&#x4EF7; (SAM) S-&#x817A;&#x82F7;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x5728;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x4E0E; MetJ &#x53CC;&#x4EF7;&#x7684;&#x610F;&#x4E49; (1:1 &#x914D;&#x4F53;/MetJ &#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;) &#x4E0A;&#x7684;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x3002;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x662F;&#x7EFC;&#x5408;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x80FD;&#x529B;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x963B;&#x904F;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x86CB;&#x6C28;&#x9178;&#x7269;&#xFF0C;MetJ&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5176;&#x7ECF;&#x8425;&#x8005; DNA &#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; MetJ homodimer &#x8FD0;&#x7B97;&#x7B26;&#x4E0B;&#x7684;&#x53CC;&#x4EF7; SAM &#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269; DNA &#x7531;&#x8367;&#x5149;&#x5404;&#x5411;&#x5F02;&#x6027;&#x548C;&#x94FE;&#x63A5;&#x5668;&#x957F;&#x5EA6;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x6700;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x4E8C;&#x4EF7;&#x914D;&#x4E86;&#x7075;&#x6D3B;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x5668;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63A8;&#x52A8;&#x5728; 21 &#x500D;&#x6BD4;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x5355;&#x4EF7;&#x63A7;&#x5236;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x7684; DNA-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3001; &#x5408;&#x6210;&#x53CA;&#x4F53;&#x5916;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x53CC;&#x4EF7; S-&#x817A;&#x82F7;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x3002;

In optimal cases, bivalent ligands can bind with exceptionally high affinity to their protein targets. However, designing optimised linkers, that orient the two binding groups perfectly, is challenging, and yet crucial in both fragment-based ligand design and in the discovery of bisubstrate enzyme inhibitors. To further our understanding of linker design, a series of novel bivalent S-adenosylmethionine (SAM) analogues were designed with the aim of interacting with the MetJ dimer in a bivalent sense (1:1 ligand/MetJ dimer). A range of ligands was synthesised and analyzed for ability to promote binding of the Escherichia coli methionine repressor, MetJ, to its operator DNA. Binding of bivalent SAM analogues to the MetJ homodimer in the presence of operator DNA was evaluated by fluorescence anisotropy and the effect of linker length and structure was investigated. The most effective bivalent ligand identified had a flexible linker, and promoted the DNA-protein interaction at 21-times lower concentration than the corresponding monovalent control compound.

Design, synthesis and in vitro evaluation of novel bivalent S-adenosylmethionine analogues.

Dans le cas optimales, ligands bivalents peuvent lier avec exceptionnellement haute affinit&eacute; &agrave; leurs cibles prot&eacute;iques. Cependant, la conception linkers optimis&eacute;es, qui orientent les groupes de deux liaison parfaitement, est difficile et pourtant essentielles &agrave; conception bas&eacute;e sur des fragments de ligand et la d&eacute;couverte d&#39;inhibiteurs de l&#39;enzyme bisubstrate. Pour approfondir notre compr&eacute;hension de la conception de l&#39;&eacute;diteur de liens, une s&eacute;rie de roman bivalent analogues de la S-ad&eacute;nosylm&eacute;thionine (SAM) ont &eacute;t&eacute; con&ccedil;us dans le but d&#39;interagir avec le dim&egrave;re MetJ dans un sens bivalent (1:1 ligand/MetJ dim&egrave;re). Une vari&eacute;t&eacute; de ligands a &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute;e et analys&eacute;e pour la capacit&eacute; de promouvoir la liaison de l&#39;Escherichia coli m&eacute;thionine r&eacute;presseur, MetJ, &agrave; son op&eacute;rateur ADN. Liaison de bivalents analogues de SAM pour l&#39;homodim&egrave;re MetJ en pr&eacute;sence de l&#39;op&eacute;rateur ADN a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e par l&#39;anisotropie de fluorescence et l&#39;effet de la longueur de l&#39;&eacute;diteur de liens et structure a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e. Le ligand bivalent plus efficace identifi&eacute; avait un linker flexible et promu l&#39;interaction ADN-prot&eacute;ines &agrave; faible concentration de 21-fois que le compos&eacute; de contr&ocirc;le monovalent correspondant.

Conception, synth&egrave;se et &eacute;valuation in vitro de nouveaux analogues de S-ad&eacute;nosylm&eacute;thionine bivalents.

Nei casi ottimali, possono legare ligandi bivalenti con eccezionalmente elevata affinit&agrave; alle destinazioni della proteina. Tuttavia, progettazione ottimizzata linker, che orientano i gruppi due associazione perfettamente, &egrave; impegnativo e ancora cruciale nella progettazione sia basata su frammento legante e alla scoperta di inibitori enzimatici bisubstrate. Ulteriormente la nostra comprensione del design del linker, una serie di romanzo forma bivalente S-adenosilmetionina (SAM) analoghi sono stati progettati con l&#39;obiettivo di interagire con il dimero MetJ in un certo senso bivalente (1:1 ligando/MetJ dimero). Una gamma di ligandi &egrave; stata sintetizzata e analizzata per la capacit&agrave; di promuovere il legame dell&#39;Escherichia coli metionina repressor, MetJ, al suo operatore DNA. Associazione degli analoghi SAM bivalente per l&#39;omodimero MetJ in presenza di operatore DNA &egrave; stato valutato da anisotropia di fluorescenza e l&#39;effetto della lunghezza del linker e struttura &egrave; stata studiata. Il pi&ugrave; efficacia ligando bivalente identificato aveva un linker flessibile e promosso l&#39;interazione DNA-proteina a concentrazione inferiore 21 volte rispetto il residuo monovalente controllo corrispondente.

Progettazione, sintesi e valutazione in vitro del romanzo bivalente S-adenosilmetionina analoghi.

&#x6700;&#x9069;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x89AA;&#x548C;&#x6027; 2&#x4FA1;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x5411;&#x304D;&#x3001;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x3001;&#x8A2D;&#x8A08;&#x6311;&#x6226;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x307E;&#x3060;&#x4E21;&#x65B9;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3068;&#x81D3;&#x5668;&#x79FB;&#x690D;&#x9175;&#x7D20;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC; &#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x65B0;&#x898F; 2&#x4FA1;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081; s-&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30EB;&#x30E1;&#x30C1;&#x30AA;&#x30CB;&#x30F3; (SAM) &#x985E;&#x7E01;&#x4F53; MetJ &#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x4E8C;&#x4FA1;&#x611F;&#x899A; (1:1 &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;/MetJ &#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;) &#x3068;&#x306E;&#x3084;&#x308A;&#x53D6;&#x308A;&#x3092;&#x76EE;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x5408;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x30E1;&#x30C1;&#x30AA;&#x30CB;&#x30F3; &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3001;MetJ&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30AA;&#x30DA;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; DNA &#x3078;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53; SAM &#x4E8C;&#x4FA1;&#x6F14;&#x7B97;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067; MetJ &#x30DB;&#x30E2;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x7D50;&#x5408; DNA &#x86CD;&#x5149;&#x7570;&#x65B9;&#x6027;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x8B58;&#x5225;&#x304C;&#x6700;&#x3082;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x4E8C;&#x4FA1;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x67D4;&#x8EDF;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x4FA1;&#x5236;&#x5FA1;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E; 21 &#x500D;&#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067; DNA &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A2D;&#x8A08;&#x30FB;&#x5408;&#x6210;&#x30FB;&#x65B0;&#x898F;&#x4E8C;&#x4FA1; s-&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30EB;&#x30E1;&#x30C1;&#x30AA;&#x30CB;&#x30F3;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x306E; in vitro &#x8A55;&#x4FA1;&#x3002;

&#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC81C; ligands &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xC608;&#xC678;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC640; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB450; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC744; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xB9C1;&#xCEE4; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC740; &#xB3C4;&#xC804;&#xACFC; &#xC544;&#xC9C1; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB450; &#xC870;&#xAC01; &#xAE30;&#xBC18; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xC124;&#xACC4; &#xBC0F; bisubstrate &#xD6A8;&#xC18C; &#xC800; &#xD574;&#xC81C;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB9C1;&#xCEE4; &#xB514;&#xC790;&#xC778;, &#xC18C;&#xC124; bivalent &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC2EC;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; S-adenosylmethionine (SAM) analogues MetJ dimer&#xAC00; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; (1:1 &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;/MetJ dimer)&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBAA9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; ligands synthesised &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xD64D;&#xBCF4;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xBA54;&#xD2F0;&#xC624;&#xB2CC; &#xC9C4;&#xC555;, MetJ, &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;. MetJ homodimer &#xC5F0;&#xC0B0;&#xC790;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xB0B8;&#xB2E4; &#xC0D8; analogues&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; DNA &#xD615;&#xAD11; &#xC774;&#xBC29;&#xC131; &#xB9C1;&#xCEE4; &#xAE38;&#xC774;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC870; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC81C; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;&#xAC00; &#xC720;&#xC5F0;&#xD55C; &#xB9C1;&#xCEE4; &#xC84C;&#xACE0; &#xD574;&#xB2F9; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xCC28;&#xB840; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; &#xBCF4;&#xB2E4; 21 &#xBC30; &#xB354; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC2B9;&#xC9C4;.

&#xC124;&#xACC4;, &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xC18C;&#xC124; &#xB0B8;&#xB2E4; S adenosylmethionine analogues&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xD3C9;&#xAC00;.

En casos &oacute;ptimos, ligandos bivalentes pueden enlazar con excepcionalmente alta afinidad a sus objetivos de prote&iacute;na. Sin embargo, dise&ntilde;o optimizados enlazadores, que orientan a los grupos de dos enlace perfectamente, es desafiante y sin embargo crucial en ambos dise&ntilde;os basadas en el fragmento del ligando y en el descubrimiento de los inhibidores de la enzima bisubstrate. Para mejorar nuestra comprensi&oacute;n del dise&ntilde;o del vinculador, una serie de novela bivalente an&aacute;logos de la S-adenosilmetionina (SAM) fueron dise&ntilde;ados con el objetivo de interactuar con el d&iacute;mero MetJ en un sentido bivalente (dimero ligando/MetJ de 1:1). Una gama de ligandos fue sintetizada y analizada por capacidad para promover la Uni&oacute;n del Escherichia coli metionina represor, MetJ, su operador ADN. Atascamiento del bivalentes an&aacute;logos de SAM para el homod&iacute;mero MetJ en presencia de operador ADN fue evaluado por la anisotrop&iacute;a de la fluorescencia y el efecto de la longitud de la m&aacute;quina para hacer chorizos y estructura fue investigada. El ligando bivalente m&aacute;s efectivo identificado ten&iacute;a un enlazador flexible y promueve la interacci&oacute;n DNA-prote&iacute;na en menor concentraci&oacute;n de 21 veces que el compuesto monovalente de control correspondiente.

Article	Year
Configurational stability of bisindolylmaleimide cyclophanes: from conformers to the first configurationally stable, atropisomeric bisindolylmaleimides. Chemistry (Weinheim an der Bergstrasse, Germany)\| PubMed ID: 16075446	2005
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Design, synthesis and in vitro evaluation of novel bivalent S-adenosylmethionine analogues. Bioorganic & medicinal chemistry letters\| PubMed ID: 22137339	2012

Catherine Joce

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