methods-to-assess-beta-cell-death-mediated-by-cytotoxic-t-lymphocytes

Methods to Assess Beta Cell Death Mediated by Cytotoxic T Lymphocytes

Type 1 diabetes (T1D) is a T cell mediated autoimmune disease.  During the pathogenesis, patients become progressively more insulinopenic as 
insulin ...

University of Florida

&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x662F;&#x9884;&#x7559;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x53D1;&#x751F;&#x5B8C;&#x5168;&#x5185;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5217;&#x5165;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6CE1;&#x7684;&#x53CC;&#x76F8;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#x3002;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5217;&#x5165;&#x975E;&#x878D;&#x5408;&#x4E0E; endosomal &#x6216;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x8F66;&#x53A2;&#x4F46;&#x76F8;&#x4EA4;&#x901A;&#x8DEF;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x4ECE;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x7684;&#x3002;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5217;&#x5165;&#x5185;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BA1;&#x91CF;&#x6210;&#x50CF;&#x819C; permeant&#x3001; &#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x73AF;&#x5883;&#x5185;&#x5217;&#x5165; microanalyis&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; CFDA (&#x7FA7;&#x57FA;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x4E8C;&#x4E59;&#x9178;&#x916F;) &#x6216; BCECF AM H +&#x3001; Na +&#x3001; K + &#x548C;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x5B9A; (2&#39;&#x3001; 7&#39;-&#x53CC; (2-carboxyethyl&#xFF09;-5&#x3001; 6-carboxyfluorescein acetoxymethyl &#x916F;&#x3001; &#x4FDD;&#x4E0A;&#x5348;&#x3001; PBFI AM &#x548C; fura-PE3-acetomethoxyester (Fura-PE3-AM)&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x8868;&#x793A;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x80A0;&#x58C1;&#x5217;&#x5165;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5185;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x79BB;&#x5B50;&#x90FD;&#x8FD1;&#x4F3C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5185;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x560C;&#x5464;&#x53D7;&#x4F53;&#x80DE;&#x5916; ATP &#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x523A;&#x6FC0;&#x89E6;&#x53D1;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x7ECF;&#x53CD;&#x5E94;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x548C;&#x5217;&#x5165;&#x5185;&#x653F;&#x5185;&#x540C;&#x65F6;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5217;&#x5165;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x81EA;&#x7531;&#x5730;&#x6E17;&#x900F;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x7531;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6709;&#x517B;&#x5206;&#x4E60;&#x5F97;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x975E; fusogenicity &#x541E;&#x7684;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x5939;&#x6742;&#x3002;

&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6C99;&#x773C;&#x5217;&#x5165;&#x4F7F;&#x7528;&#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x8BA1;&#x91CF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x5185;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;

Chlamydia trachomatis is an obligate intracellular bacterium with a biphasic life cycle that takes place entirely within a membrane-bound vacuole termed an inclusion. The chlamydial inclusion is non-fusogenic with endosomal or lysosomal compartments but intersects a pathway involved in transport of sphingomyelin from the Golgi apparatus to the plasma membrane. The physical conditions within the mature chlamydial inclusion are unknown. We used ratiometric imaging with membrane-permeant, ion-selective fluorescent dyes for microanalyis of the physical environment within the inclusion. Determination of H+, Na+, K+ and Ca(2+) concentrations using CFDA (carboxy fluorescein diacetate) or BCECF-AM (2',7'-bis (2-carboxyethyl)-5,6-carboxyfluorescein acetoxymethyl ester, SBFI-AM, PBFI-AM and fura-PE3-acetomethoxyester (Fura-PE3-AM), respectively, indicated that all ions assayed within the lumenal space of the inclusion approximated the concentrations within the cytoplasm. Stimulation of purinergic receptors by addition of extracellular ATP triggered a dynamic Ca(2+) response that occurred simultaneously within the cytoplasm and interior of the inclusion. The chlamydial inclusion thus appears to be freely permeable to cytoplasmic ions. These results have implications for nutrient acquisition by chlamydiae and may contribute to the non-fusogenicity of the inclusion with endocytic compartments.

Determination of the physical environment within the Chlamydia trachomatis inclusion using ion-selective ratiometric probes.

Chlamydia trachomatis est une bact&eacute;rie intracellulaire obligatoire avec un cycle de vie biphasique qui se d&eacute;roule enti&egrave;rement dans une vacuole membranaires appel&eacute;e une inclusion. L&#39;inclusion de chlamydiale est non-coniques avec les endosomes ou compartiments lysosomes mais croise une voie impliqu&eacute;e dans le transport de la sphingomy&eacute;line de l&#39;appareil de Golgi vers la membrane plasmique. Les conditions physiques au sein de l&#39;inclusion de chlamydiale mature sont inconnues. Nous avons utilis&eacute; ratiom&eacute;trique imagerie avec membranes perm&eacute;able, s&eacute;lectives des colorants fluorescents pour microanalyis de l&#39;environnement physique au sein de l&#39;inclusion. D&eacute;termination de la concentration de H +, Na +, K + et Ca(2+) &agrave; l&#39;aide de la CFDA (carboxy fluoresc&eacute;ine diac&eacute;tate) ou BCECF-AM (2&#39;, 7&#39;-bis (2-carboxyethyl) - 5,6 - carboxyfluoresc&eacute;ine ac&eacute;toxym&eacute;thyl ester, SBFI-AM, PBFI-AM et fura-EP3-acetomethoxyester (Fura-EP3-AM), respectivement, indiquent que tous les ions test&eacute;es au sein de l&#39;espace lumi&egrave;re d&#39;inclusion rapprochait les concentrations dans le cytoplasme. La stimulation des r&eacute;cepteurs purinergiques par addition d&#39;ATP extracellulaire a d&eacute;clench&eacute; une r&eacute;ponse dynamique de Ca(2+) qui ont eu lieu simultan&eacute;ment dans le cytoplasme et l&#39;int&eacute;rieur de l&#39;inclusion. L&#39;inclusion de chlamydiale semble donc &ecirc;tre librement perm&eacute;able aux ions cytoplasmiques. Ces r&eacute;sultats ont des implications pour l&#39;acquisition de nutriments par les chlamydiae et peuvent contribuer &agrave; la non-fusog&eacute;nicit&eacute; de l&#39;inscription avec compartiments endocytose.

D&eacute;termination de l&#39;environnement physique au sein de l&#39;inclusion de trachomatis de Chlamydia &agrave; l&#39;aide de sondes ratiom&eacute;trique s&eacute;lectives.

Die Bestimmung der physischen Umwelt innerhalb der Chlamydia-trachomatis-Aufnahme mit ionenselektiven Sonden ratiometrisch.

La Chlamydia trachomatis &egrave; un batterio intracellulare obligato con un ciclo vitale bifasico che si svolge interamente all&#39;interno di un vacuolo membrana-limiti definito un&#39;inclusione. L&#39;inclusione da clamidia &egrave; non-fusogena con endosomal o compartimenti lisosomiali ma interseca un pathway coinvolte nel trasporto di sfingomielina dall&#39;apparato di Golgi alla membrana del plasma. Le condizioni fisiche all&#39;interno l&#39;inclusione maturo da clamidia sono sconosciute. Abbiamo usato raziometrici imaging con le tinture fluorescenti membrana permeant, iono selettivi per microanalyis dell&#39;ambiente fisico all&#39;interno dell&#39;inclusione. Determinazione delle concentrazioni di H +, Na +, K + e Ca(2+) CFDA (carboxy Diacetato di fluoresceina) o BCECF-AM (2&#39;, 7&#39;-bis (2-carbossietil) - 5,6 - chetone di fluoromethyl acetossimetil ester, SBFI-AM, PBFI-AM e fura-PE3-acetomethoxyester (Fura-PE3-AM), rispettivamente, indicato che tutti gli ioni analizzati all&#39;interno dello spazio lumenal dell&#39;inclusione approssimata delle concentrazioni all&#39;interno del citoplasma. Stimolazione dei recettori purinergici mediante aggiunta di ATP extracellulare innescato una risposta dinamica di Ca(2+) che si sono verificati contemporaneamente all&#39;interno del citoplasma e degli interni dell&#39;inclusione. L&#39;inclusione da clamidia sembra quindi essere liberamente permeabile agli ioni citoplasmatici. Questi risultati hanno implicazioni per l&#39;acquisizione dei nutrienti da Chlamydia e possono contribuire per il non-fusogenicity dell&#39;inclusione con compartimenti endocitico.

Determinazione dell&#39;ambiente fisico all&#39;interno di inclusione Chlamydia trachomatis mediante sonde raziometriche iono selettivi.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30FB; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306F; &#xFF05;30 &#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x7D30;&#x83CC;&#x5185;&#x4ECB;&#x5728;&#x7269;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x6DB2;&#x80DE;&#x5B8C;&#x5168;&#x884C;&#x308F;&#x4E8C;&#x76F8;&#x6027;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x5305;&#x542B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3001;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x304C;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x88C5;&#x7F6E;&#x304B;&#x3089;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6210;&#x719F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x4ECB;&#x5728;&#x7269;&#x5185;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x6761;&#x4EF6;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x819C;&#x4E0B;&#x6D41;&#x5074;&#x3078;&#x3001;- &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x3068;&#x5305;&#x542B;&#x5185;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x74B0;&#x5883;&#x306E; microanalyis &#x306E;&#x30EC;&#x30B7;&#x30AA; &#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;CFDA &#xFF08;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7; &#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30EC;&#x30BB;&#x30A4;&#x30F3; &#x30FB; &#x30B8;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C8;) &#x307E;&#x305F;&#x306F; BCECF AM &#x3092;&#x4F7F;&#x7528; H +&#x3001;Na +, K + &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF; (2&#39;&#x3001;7&#39;-&#x30D3;&#x30B9; (2-carboxyethyl) - 5, 6 - carboxyfluorescein &#x30A2;&#x30BB;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3; &#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x3001;SBFI &#x5348;&#x524D;&#x3001;PBFI AM &#x304B;&#x3089;&#x30D5;&#x30E9;-PE3-acetomethoxyester &#x3060; &#xFF08;&#x30D5;&#x30E9; PE3 &#x5348;&#x524D;&#x3060;&#xFF09;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x5305;&#x542B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x5185;&#x8154;&#x5074;&#x7A7A;&#x9593;&#x5185;&#x8A66;&#x91D1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5168;&#x3066;&#x306E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5185;&#x3092;&#x8FD1;&#x4F3C;&#x793A;&#x3055;&#x3002;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916; ATP &#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3068;&#x4ECB;&#x5728;&#x7269;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x5185;&#x306B;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x52D5;&#x7684;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x81EA;&#x7531;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3092;&#x900F;&#x904E;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6804;&#x990A;&#x5869;&#x306E;&#x8CB7;&#x53CE;&#x306E;&#x610F;&#x5473;&#x5408;&#x3044;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x4ECB;&#x5728;&#x7269;&#x306E;&#x975E; fusogenicity &#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x30EC;&#x30B7;&#x30AA; &#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x2010; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B9;&#x4ECB;&#x5728;&#x7269;&#x5185;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3002;

&#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis&#xB294; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418; &#xB098; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xACF5;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xB098;&#xC544;&#xC84C;&#xB2E4; &#xC218;&#xBA85; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xBB34; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;. Chlamydial &#xD3EC;&#xD568; endosomal &#xB610;&#xB294; lysosomal &#xAD6C;&#xD68D; fusogenic &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; Golgi &#xAE30;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; sphingomyelin&#xC758; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xACBD;&#xB85C; &#xAD50;&#xCC28;. &#xC131;&#xC219;&#xD55C; chlamydial &#xD3EC;&#xD568; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Microanalyis &#xD3EC;&#xD568; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xC728; &#xAE30;&#xC900; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xB9C9; permeant, &#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xD615;&#xAD11; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. CFDA (carboxy fluorescein diacetate) &#xB610;&#xB294; BCECF &#xC624;&#xC804; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; H +, Na +, K +&#xC640; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; (2&#39;, &#xB450;&#xBC88;&#xC9F8; (2-carboxyethyl)-7&#39;--5, 6 carboxyfluorescein acetoxymethyl &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;, SBFI &#xC624;&#xC804;, PBFI &#xC624;&#xC804; fura PE3 acetomethoxyester (Fura-PE3-&#xC624;&#xC804;) &#xAC01;&#xAC01; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD3EC;&#xD568;&#xC758; lumenal &#xACF5;&#xAC04; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC774;&#xC628; &#xB18D;&#xB3C4;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC811;&#xADFC;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; ATP&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC758;&#xD574; purinergic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC790;&#xADF9; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xD568;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC801; Ca(2+) &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; chlamydial &#xD3EC;&#xD568; &#xC790;&#xC720;&#xB86D;&#xAC8C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC774;&#xC628;&#xC744; &#xD22C;&#xACFC; &#xB420; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; chlamydiae&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xC591;&#xC18C; &#xC218;&#xC9D1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xBBF8;&#xB97C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xACE0; endocytic &#xAD6C;&#xD68D; &#xD3EC;&#xD568; fusogenicity &#xBE44;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xBE44;&#xC728; &#xAE30;&#xC900; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544; trachomatis &#xD3EC;&#xD568; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xD658;&#xACBD;&#xC758; &#xACB0;&#xC815;.

Chlamydia trachomatis es una bacteria intracelular obligan con un ciclo de vida de bif&aacute;sico que se lleva a cabo enteramente dentro de una vacuola de membrana-limitan como una inclusi&oacute;n. La inclusi&oacute;n por clamidia es no-fusog&eacute;nica con endosomal o compartimientos lysosomal pero cruza un camino implicado en el transporte de esfingomielina desde el aparato de Golgi a la membrana plasm&aacute;tica. Se desconocen las condiciones f&iacute;sicas dentro de la inclusi&oacute;n de clamidia madura. Utilizamos la proyecci&oacute;n de imagen radiom&eacute;trica con tintes fluorescentes membrana-Florescente, iones-selectivos para microanalyis del entorno f&iacute;sico dentro de la inclusi&oacute;n. Determinaci&oacute;n de las concentraciones de H +, Na +, K + y CA con CFDA (carboxy fluoresce&iacute;na diacetato) o BCECF-AM (2&#39;, 7&#39;-bis (2-carboxietil) carboxyfluorescein - 5,6 - acetoxymethyl &eacute;ster, SBFI-AM, PBFI-AM y fura-PE3-acetomethoxyester (Fura-PE3-AM), respectivamente, indicaron que todos los iones analizados dentro del espacio lumenal de la inclusi&oacute;n aproximaron las concentraciones dentro del citoplasma. Estimulaci&oacute;n de los receptores purin&eacute;rgicos por la adici&oacute;n de ATP extracelular desencaden&oacute; una respuesta din&aacute;mica de la CA que ocurrieron simult&aacute;neamente en el citoplasma y el interior de la inclusi&oacute;n. La inclusi&oacute;n por clamidia as&iacute; parece ser libremente permeable a los iones citopl&aacute;smicos. Estos resultados tienen implicaciones para la adquisici&oacute;n de nutriente por clamidias y pueden contribuir a la no-fusogenicity de la inclusi&oacute;n con compartimentos endoc&iacute;ticos.

Determinaci&oacute;n del medio f&iacute;sico en la inclusi&oacute;n de Chlamydia trachomatis mediante sondas de ion-selectivo radiom&eacute;trica.

&#x6F84;&#x6E05;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x4FB5;&#x5165;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5229;&#x7528;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x7684;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x57FA;&#x7840;&#x6559;&#x80B2;&#x673A;&#x6784; (EBs) &#x91CC;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Cytochalasin D HeLa &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53; C.&#x6C99;&#x773C; L2 &#x548C; D EBs &#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x3002;EBs &#x4E0E;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x534F;&#x4F1A;&#x81F4;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E0A;&#x7684;&#x9644;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5982;&#x7531;&#x4EFB;&#x4E00; phalloidin &#x67D3;&#x8272;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x79EF;&#x6781;&#x62DB;&#x52DF;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x3002;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x7279;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x9644;&#x4EF6;&#x62DB;&#x8058;&#x966A;&#x540C;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x5FAE;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x7684;&#x620F;&#x5267;&#x6027;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x8D85;&#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; C.&#x6C99;&#x773C;&#x9644;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; EBs&#xFF0C;&#x548C; cytochalasin D &#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x77AC;&#x6001; microvillar &#x80A5;&#x539A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x652F;&#x6301;&#x6761;&#x76EE;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53; C.&#x6C99;&#x773C; L2 &#x7684;&#x7A81;&#x53D8; CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x793A; L2 EBs&#xFF0C;&#x8FDD;&#x80CC;&#x4E86;&#x611F;&#x67D3;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53; D&#xFF0C;&#x5B83;&#x5BB9;&#x6613;&#x63A5;&#x89E6;&#x4E4B;&#x540E;&#x8FD9;&#x79CD; microvillar &#x80A5;&#x539A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; C.&#x6C99;&#x773C;&#x6761;&#x76EE;&#x901A;&#x8FC7;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x5851;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x83CC;&#x7684;&#x9644;&#x4EF6;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x548C;&#x9644;&#x4EF6;&#x548C;&#x8FDB;&#x5165;&#x7ACB;&#x5373;&#x73B0;&#x573A;&#x5EA7;&#x6837;&#x7ED3;&#x6784;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x7684; microvillar &#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;

&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x671F;&#x95F4;&#x9644;&#x4EF6;&#x548C;&#x8FDB;&#x5165;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x91CD;&#x6784;&#x3002;

To elucidate the host cell machinery utilized by Chlamydia trachomatis to invade epithelial cells, we examined the role of the actin cytoskeleton in the internalization of chlamydial elementary bodies (EBs). Treatment of HeLa cells with cytochalasin D markedly inhibited the internalization of C. trachomatis serovar L2 and D EBs. Association of EBs with HeLa cells induced localized actin polymerization at the site of attachment, as visualized by either phalloidin staining of fixed cells or the active recruitment of GFP-actin in viable infected cells. The recruitment of actin to the specific site of attachment was accompanied by dramatic changes in the morphology of cell surface microvilli. Ultrastructural studies revealed a transient microvillar hypertrophy that was dependent upon C. trachomatis attachment, mediated by structural components on the EBs, and cytochalasin D sensitive. In addition, a mutant CHO cell line that does not support entry of C. trachomatis serovar L2 did not display such microvillar hypertrophy following exposure to L2 EBs, which is in contrast to infection with serovar D, to which it is susceptible. We propose that C. trachomatis entry is facilitated by an active actin remodeling process that is induced by the attachment of this pathogen, resulting in distinct microvillar reorganization throughout the cell surface and the formation of a pedestal-like structure at the immediate site of attachment and entry.

Chlamydia trachomatis induces remodeling of the actin cytoskeleton during attachment and entry into HeLa cells.

Afin d&#39;&eacute;lucider les m&eacute;canismes de cellule h&ocirc;te utilis&eacute; par Chlamydia trachomatis pour envahir les cellules &eacute;pith&eacute;liales, nous avons examin&eacute; le r&ocirc;le du cytosquelette d&#39;actine dans l&#39;internalisation des corps &eacute;l&eacute;mentaires Chlamydiales (EBs). Traitement des cellules HeLa avec la cytochalasine D inhib&eacute;e de fa&ccedil;on marqu&eacute;e l&#39;internalisation de c. trachomatis serovar L2 et D EBs. Association d&#39;EBs avec cellules HeLa induite par la polym&eacute;risation de l&#39;actine localis&eacute;s sur le site de fixation, comme mise en &eacute;vidence par la coloration des cellules fixes ou le recrutement actif de GFP-actine dans les cellules infect&eacute;es viables soit la phallo&iuml;dine. Le recrutement d&#39;actine &agrave; l&#39;endroit sp&eacute;cifique s&#39;est accompagn&eacute; d&#39;importants changements dans la morphologie des microvillosit&eacute;s de surface cellulaire. Des &eacute;tudes ultrastructurales ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; une hypertrophie transitoire de microvillosit&eacute;s qui d&eacute;pend de l&#39;attachement de c. trachomatis, m&eacute;di&eacute;e par des composantes structurelles sur l&#39;EBs et sensibles &agrave; la cytochalasine D. En outre, une lign&eacute;e cellulaire CHO mutante qui ne supporte pas l&#39;entr&eacute;e de c. trachomatis serovar L2 ne pr&eacute;sentaient pas ce microvillosit&eacute;s hypertrophie apr&egrave;s une exposition &agrave; la L2 EBs, qui s&#39;oppose &agrave; une infection par le s&eacute;rotype D, auxquels il est sensible. Nous proposons que les entr&eacute;e de c. trachomatis est facilit&eacute;e par une actine active remodelage des processus qui est induite par l&#39;apposition de ce pathog&egrave;ne, entra&icirc;nera une r&eacute;organisation de microvillosit&eacute;s distincte tout au long de la surface des cellules et la formation d&#39;une structure en forme de pi&eacute;destal au site d&#39;attachement et entr&eacute;e imm&eacute;diate.

Chlamydia trachomatis induit le remodelage du cytosquelette d&#39;actine durant la fixation et l&#39;entr&eacute;e dans les cellules HeLa.

Chlamydia trachomatis verursacht Umbau des Aktin-Zytoskeletts w&#xE4;hrend der Befestigung und dem Eintritt in HeLa-Zellen.

Per chiarire il macchinario cell host utilizzato da Chlamydia trachomatis di invadere le cellule epiteliali, abbiamo esaminato il ruolo del citoscheletro di actina nell&#39;interiorizzazione dei corpi elementari da clamidia (EBs). Trattamento delle cellule HeLa con citocalasina D marcatamente inibito l&#39;interiorizzazione del sierotipo c. trachomatis L2 e D EBs. Associazione di EBs con cellule HeLa indotta da polimerizzazione actina localizzata presso il sito di attaccamento, come visualizzate macchiando o phalloidin di celle fisse o il reclutamento attivo del GFP-actina nelle cellule infette vitali. L&#39;assunzione di actina al sito specifico di attaccamento &egrave; stato accompagnato da drammatici cambiamenti nella morfologia della superficie microvilli delle cellule. Studi ultrastrutturali hanno rivelato un&#39;ipertrofia microvillare transitoria che era dipendente da c. trachomatis attaccamento, mediata da componenti strutturali su EBs e citocalasina D sensibili. Inoltre, una linea di cellule CHO mutante che non supporta l&#39;ingresso del sierotipo c. trachomatis L2 non ha visualizzato tale ipertrofia microvillare dopo esposizione a L2 EBs, che &egrave; in contrasto con l&#39;infezione con sierotipo D, di cui &egrave; suscettibile. Proponiamo che voce di c. trachomatis &egrave; facilitato da un attivo dell&#39;actina rimodellamento processo che &egrave; indotta dal sequestro di questo agente patogeno, con conseguente riorganizzazione microvillare distinti in tutta la superficie della cellula e la formazione di una piedistallo-come la struttura presso il sito immediato di attaccamento e voce.

Chlamydia trachomatis induce il rimodellamento del citoscheletro di actina durante l&#39;attacco e l&#39;ingresso in cellule HeLa.

&#x6D3B;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4FB5;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x2010; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x5C0F;&#x5B66;&#x6821;&#x4F53; (EBs) &#x306E;&#x5185;&#x9762;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30E9;&#x30B7;&#x30F3; D &#x3068; HeLa &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F; C. &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; L2 &#x3068; D EBs &#x306E;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x3092;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;.HeLa &#x7D30;&#x80DE;&#x3068; EBs &#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x9593;&#x56FA;&#x5B9A;&#x30BB;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; GFP &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x52DF;&#x96C6;&#x306E;&#x6C5A;&#x640D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8996;&#x899A;&#x5316;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x5FAE;&#x7D68;&#x6BDB;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x5287;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x4F34;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x9855;&#x3067;&#x306F; EBs &#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30E9;&#x30B7;&#x30F3; D &#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; C. &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x904E;&#x6E21;&#x306E; microvillar &#x80A5;&#x5927;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;C. &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; L2 &#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x5909;&#x7570;&#x753A;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x9732;&#x51FA;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; D, &#x3068;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B; L2 EBs &#x3092;&#x6B21;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; microvillar &#x306E;&#x80A5;&#x5927;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;C &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x6539;&#x9020;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x5373;&#x6642;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x53F0;&#x5EA7;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x5168;&#x57DF;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B; microvillar &#x518D;&#x7DE8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4FC3;&#x9032;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30FB; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x4E2D;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068; HeLa &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5165;&#x308B;&#x306B;&#x6539;&#x9020;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xCE68;&#xBC94; &#xD558; &#xC5EC; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xAE30;&#xACC4; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC; chlamydial &#xCD08;&#xB4F1;&#xD559;&#xAD50; &#xC2DC;&#xCCB4; (EBs)&#xC758; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. Cytochalasin D&#xC640; HeLa &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB294; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xAC8C; C. trachomatis serovar L2 &#xBC0F; D Ebs&#xC758; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xC800;&#xD574;. &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xC140; &#xB610;&#xB294; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; GFP-&#xB9D0;&#xB77C; &#xBA85; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC5D0; &#xB450; phalloidin &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xAC01;&#xC73C;&#xB85C; HeLa &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; Ebs&#xC758; &#xD611;&#xD68C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD569; &#xC720;&#xBC1C;. &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74; microvilli &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xADF9;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB3D9;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4;. Ultrastructural &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; C. trachomatis &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;, EBs, &#xBC0F; cytochalasin D&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; microvillar &#xBE44; &#xB300; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xB610;&#xD55C;, C. trachomatis serovar l 2&#xC758; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC870; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xB178;&#xCD9C; serovar D, &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xAE30; &#xB2EC;&#xB9AC; L2 Ebs&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; microvillar &#xBE44; &#xB300;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. C. trachomatis &#xD56D;&#xBAA9;&#xC774; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xC774; &#xCCB4;&#xC758; &#xBD80;&#xCC29;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB41C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;, &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C; &#xBC0F; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xC989;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD398; &#xB370; &#xC2A4;&#xD0C8; &#xAC19;&#xC740; &#xAD6C;&#xC870; &#xD615;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; microvillar &#xC870;&#xC9C1; &#xAC1C;&#xD3B8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xD65C;&#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis &#xCCA8;&#xBD80; &#xBC0F; &#xC785;&#xAD6D; &#xD5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC911; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton&#xC758; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Para aclarar la maquinaria de la c&eacute;lula hu&eacute;sped utilizada por Chlamydia trachomatis para invadir las c&eacute;lulas epiteliales, examinamos el papel del citoesqueleto de actina en la internalizaci&oacute;n de los cuerpos elementales por clamidia (EBs). Tratamiento de las c&eacute;lulas HeLa con Citocalasina D marcado inhibe la internalizaci&oacute;n de C. trachomatis serotipo L2 y D EBs. Asociaci&oacute;n de EBs con c&eacute;lulas HeLa inducida por la polimerizaci&oacute;n de la actina localizadas en el sitio del accesorio, como visualizado por cualquier Faloidina tinci&oacute;n de c&eacute;lulas fijas o la contrataci&oacute;n activa de la GFP-actina en c&eacute;lulas infectadas viables. La contrataci&oacute;n de la actina al sitio espec&iacute;fico del accesorio fue acompa&ntilde;ada por cambios dram&aacute;ticos en la morfolog&iacute;a de las microvellosidades superficial de la c&eacute;lula. Los estudios ultraestructurales revelaron una hipertrofia microvillar transitoria que era dependiente de accesorio de C. trachomatis, mediada por elementos estructurales en la EBs y Citocalasina D sensible. Adem&aacute;s, una l&iacute;nea de c&eacute;lulas CHO mutante que no permite entrada de C. trachomatis serovar L2 no se mostraban tan hipertrofia microvillar despu&eacute;s de la exposici&oacute;n a L2 EBs, que contrasta con la infecci&oacute;n con un serotipo D, que es susceptible. Proponemos que entrada de C. trachomatis es facilitada por un activo actina remodelaci&oacute;n proceso que es inducida por el accesorio de este pat&oacute;geno, dando por resultado la reorganizaci&oacute;n microvillar distinta a lo largo de la superficie celular y la formaci&oacute;n de una estructura de tipo pedestal en el sitio inmediato del apego y la entrada.

Chlamydia trachomatis induce la remodelaci&oacute;n del citoesqueleto de actina durante la fijaci&oacute;n y entrada en c&eacute;lulas HeLa.

FSH &#x8C03;&#x8282;&#x5375;&#x6CE1;&#x9897;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x5375;&#x6CE1;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;FSH &#x53CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;&#x90FD;&#x662F;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F46;&#x53EA;&#x6709;&#x5375;&#x6CE1;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5C11;&#x4E86;&#x89E3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5982;&#x7AA6;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x91CC;&#x7A0B;&#x7891;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;FSH &#x4E5F;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x4E0D;&#x6210;&#x719F;&#x800C;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x5375;&#x5DE2;&#x9897;&#x7C92; &#xFF08;ROG&#xFF09; &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A; FSH &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4F53;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5F62;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x5E9E;&#x5927;&#x800C;&#x53C8;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x54CD;&#x5E94; FSH&#xFF0C;ROG &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0A;&#x6267;&#x884C;&#x5DEE;&#x5F02;&#x663E;&#x793A;&#x3002;80 FSH &#x53CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0; (I &#x7C7B; &beta;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x539F;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; 4 &#x548C;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x94FE;&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6001;&#x3001; &#x8FD0;&#x8F93;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x5317;&#x90E8;&#x7684;&#x6C61;&#x70B9;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8A8A;&#x672C;&#x7EA7;&#x522B; FSH &#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x8FBE;&#x5230;&#x5CF0;&#x503C;&#x5728; 6 h &#x548C;&#x5E73;&#x606F;&#x5728; 24 h.FSH &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x65F6;&#x6001;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x5728;&#x9694;&#x79BB;&#x4ECE;&#x5E7C;&#x9F20;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD8;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5375;&#x6CE1;&#x9897;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x663E;&#x793A; &beta;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D; mRNA &#x6682;&#x6001;&#x4E0E;&#x4F1A;&#x8005;&#x5927;&#x8154;&#x524D;&#x548C;&#x65E9;&#x671F;&#x7AA6;&#x5375;&#x6CE1;&#x7684;&#x9897;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x540C;&#x4E00;&#x65F6;&#x95F4;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x660E;&#x663E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F8B;&#x5B50;&#xFF0C;&#x653E;&#x7EBF;&#x83CC;&#x916E;&#x963B;&#x6B62; &beta;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x800C;&#x5B83;&#x589E;&#x52A0;&#x539F;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;-4 &#xFF08;TM4&#xFF09; mRNA&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x94FE; &#xFF08;Khc&#xFF09; mRNA&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;FSH &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4F53;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x91CD;&#x6392; ROG &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x5177;&#x4F53;&#x5375;&#x6CE1;&#x9897;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x6CD5;&#x89C4;&#x3002;

&#x5375;&#x6CE1;&#x523A;&#x6FC0;&#x7D20;&#x654F;&#x611F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x5927;&#x9F20;&#x9897;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF1A; &#x4E00;&#x7C7B; &beta;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x539F;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;-4 &#x548C;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x94FE;&#x3002;

FSH regulates gene expression for granulosa cell differentiation and follicular development. Therefore, FSH-responsive genes are crucial, but only a few genes have been identified for the early stage of follicular development. In particular, little is known about cytoskeletal genes, which likely play essential roles in the morphological changes such as the antrum formation, a major landmark. FSH is also known to induce the differentiation of an immature, undifferentiated rat ovary granulosa (ROG) cell line. Our data show that FSH induced massive yet distinct reorganization of microtubules and the actin cytoskeletons as well as morphological changes. To identify those genes responding to FSH during the differentiation, differential display was performed on ROG cells. Of the 80 FSH-responsive genes identified, there were three cytoskeleton-related genes (class I beta-tubulin, tropomyosin 4, and kinesin heavy chain), which are crucial for intracellular morphogenesis, transport, and differentiation. Northern blots show that the level of these gene transcripts reached a peak at 6 h after FSH treatment and subsided at 24 h. FSH induced the similar temporal expression not only in granulosa cells isolated from immature rats, but also in vivo. For instance, in situ hybridization showed that beta-tubulin mRNA was transiently expressed in the granulosa cells of large preantral and early antral follicles. Despite the same temporal expression, the regulatory mechanisms of the three genes were strikingly different. As an example, cycloheximide blocked the beta-tubulin mRNA expression, whereas it increased tropomyosin-4 (TM4) mRNA. Yet, it did not impact kinesin heavy chain (Khc) mRNA. In conclusion, FSH induces the massive reorganization of the cytoskeletons and morphological changes by the selective regulation of the gene expression, protein synthesis, and rearrangement of the cytoskeletal proteins in the ROG cells and probably, specific follicles and granulosa cells.

Follicle-stimulating hormone-responsive cytoskeletal genes in rat granulosa cells: class I beta-tubulin, tropomyosin-4, and kinesin heavy chain.

FSH r&eacute;gule l&#39;expression des g&egrave;nes de diff&eacute;renciation des cellules granuleuses et d&eacute;veloppement folliculaire. FSH-g&egrave;nes sont donc cruciales, mais seulement quelques g&egrave;nes ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s pour les premiers stades du d&eacute;veloppement folliculaire. En particulier, on conna&icirc;t peu les g&egrave;nes du cytosquelette, qui probablement jouent un r&ocirc;le essentiel dans les modifications morphologiques tels que la formation de l&#39;antre, un &eacute;v&eacute;nement marquant. FSH est &eacute;galement connue pour induire la diff&eacute;renciation d&#39;une lign&eacute;e de cellules de la granulosa (ROG) ovaire rat immature, indiff&eacute;renci&eacute;. Nos donn&eacute;es montrent que la FSH induite r&eacute;organisation massive mais distincte des microtubules du cytosquelette d&#39;actine ainsi et les changements morphologiques. Afin d&#39;identifier les g&egrave;nes r&eacute;pond aux FSH durant la diff&eacute;renciation, affichage diff&eacute;rentiel a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;e sur des cellules ROG. Les 80 FSH g&egrave;nes identifi&eacute;s, il y avait trois cytosquelette g&egrave;nes (cha&icirc;ne lourde b&ecirc;ta-tubuline et la tropomyosine 4 kin&eacute;sine de classe I), qui sont cruciaux pour la diff&eacute;renciation, le transport et la morphogen&egrave;se intracellulaire. Taches nordiques montrent que le niveau de ces transcriptions de g&egrave;ne atteint un pic &agrave; 6 h apr&egrave;s le traitement de la FSH et disparu &agrave; 24 h. FSH induit l&#39;expression temporelle similaire non seulement dans les cellules de la granulosa isol&eacute;es des rats immatures, mais &eacute;galement in vivo. Par exemple, hybridation in situ ont montr&eacute; que l&#39;ARNm b&ecirc;ta-tubuline est transitoirement exprim&eacute;e dans les cellules de la granulosa de gros follicules antrums preantral et au d&eacute;but. En d&eacute;pit de la m&ecirc;me expression temporelle, les m&eacute;canismes de r&eacute;gulation des trois g&egrave;nes ont &eacute;t&eacute; remarquablement diff&eacute;rents. Par exemple, cycloheximide bloque l&#39;expression de l&#39;ARNm de la b&ecirc;ta-tubuline, alors qu&#39;il a augment&eacute; l&#39;ARNm tropomyosine-4 (TM4). Pourtant, il n&#39;a pas influ&eacute; kin&eacute;sine cha&icirc;ne lourde (Khc) ARNm. En conclusion, FSH induit la r&eacute;organisation massive du cytosquelette et les changements morphologiques de la r&eacute;glementation s&eacute;lective de l&#39;expression des g&egrave;nes, la synth&egrave;se des prot&eacute;ines et r&eacute;arrangement des prot&eacute;ines du cytosquelette dans les cellules ROG et probablement, follicules sp&eacute;cifiques et les cellules de la granulosa.

Hormone folliculo - stimulante g&egrave;nes du cytosquelette dans les cellules de la granulosa de rat : b&ecirc;ta-tubuline et la kin&eacute;sine tropomyosine-4 de la cha&icirc;ne lourde de la classe I.

Follikel-stimulierendes Hormon-responsiven Zytoskelett-Gene in Ratten-Granulosazellen: Klasse I beta-Tubulin, Tropomyosin-4, und Kinesin schweren Kette.

FSH regola l&#39;espressione del gene per la differenziazione delle cellule di granulosa e sviluppo follicolare. Pertanto, i geni FSH-sensibli a reagire sono cruciali, ma solo alcuni geni sono stati identificati per la fase iniziale di sviluppo follicolare. In particolare, poco &egrave; noto sui geni del citoscheletro, che probabilmente svolgono un ruolo essenziale nei cambiamenti morfologici come la formazione di antro, un importante punto di riferimento. FSH &egrave; noto anche per indurre la differenziazione di una linea di cellule immature, indifferenziate ratto ovaio granulosa (ROG). I nostri dati mostrano che FSH induce massiccia ancora distinte riorganizzazione dei microtubuli e la cytoskeletons di actina, nonch&eacute; cambiamenti morfologici. Per identificare tali geni rispondendo a FSH durante la differenziazione, visualizzazione differenziale &egrave; stata eseguita su cellule ROG. Di 80 FSH-reattiva geni identificati, c&#39;erano tre citoscheletro relativi geni (catena pesante della beta-tubulina, tropomiosina 4 e chinesina di classe I), che sono cruciali per la differenziazione, trasporto e morfogenesi intracellulare. Northern blot mostrano che il livello di queste trascrizioni del gene ha raggiunto un picco a 6 h dopo trattamento di FSH e placata a 24 h. FSH induce l&#39;espressione temporale simile non solo in cellule di granulosa isolate da topi immaturi, ma anche in vivo. Per esempio, l&#39;ibridazione in situ ha mostrato che beta-tubulina mRNA transitoriamente &egrave; stato espresso nelle cellule granulosa dei follicoli grandi preantral e primi antrale. Nonostante la stessa espressione temporale, i meccanismi di regolamentazione dei tre geni sono stati sorprendentemente diversi. Ad esempio, cicloeximide bloccato l&#39;espressione del mRNA di beta-tubulina, mentre &egrave; aumentata la tropomiosina-4 (TM4) mRNA. Ancora, non ha impatto catena pesante chinesina (Khc) mRNA. In conclusione, FSH induce la massiccia riorganizzazione dei cambiamenti morfologici e cytoskeletons con la regolazione selettiva dell&#39;espressione genica, la sintesi proteica e la riorganizzazione delle proteine citoscheletriche nelle cellule ROG e, probabilmente, specifici follicoli e cellule di granulosa.

Ormone follicolo - stimolante-sensibli a reagire del citoscheletro geni in cellule di granulosa del ratto: classe I beta-tubulina, tropomiosina-4 e chinesina catena pesante.

FSH &#x9846;&#x7C92;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x5375;&#x80DE;&#x767A;&#x80B2;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;FSH &#x5FDC;&#x7B54;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x552F;&#x4E00;&#x3067;&#x3059;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x5375;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x80B2;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x306A;&#x3069;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5E7D;&#x9580;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x5909;&#x5316;&#x3067;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;FSH &#x306F;&#x672A;&#x719F;&#x3067;&#x3001;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x5375;&#x5DE3;&#x9846;&#x7C92;&#x819C; &#xFF08;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F4;&#x30A9;&#x30ED;&#x30B0;&#xFF09; &#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;FSH &#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3001;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x307E;&#x3060;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x518D;&#x7DE8;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x898B;&#x308B;&#x3002;FSH &#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5DEE;&#x52D5;&#x8868;&#x793A; ROG &#x30BB;&#x30EB;&#x4E0A;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x305F; 80 FSH &#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059; &#xFF08;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; I &beta;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30FB; &#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; 4&#x3001;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x9396;&#xFF09; 3 &#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5317;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; 6 h &#x3067;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x305F; FSH &#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C; 24 &#x6642;&#x9593;&#x3067;&#x6C88;&#x9759;&#x5316; FSH &#x8A98;&#x8D77;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6642;&#x7A7A;&#x9593;&#x8868;&#x73FE;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306F;&#x9846;&#x7C92;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5E7C;&#x82E5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;in situ &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &beta;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; mRNA &#x5927;&#x524D;&#x3068;&#x521D;&#x671F;&#x304B;&#x3089;&#x80DE;&#x72B6;&#x5375;&#x80DE;&#x306E;&#x9846;&#x7C92;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x3058;&#x6642;&#x7A7A;&#x9593;&#x8868;&#x73FE;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;-4 &#xFF08;TM4) mRNA &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x4F8B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E; &beta;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; mRNA &#x767A;&#x73FE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3002;&#x307E;&#x3060;&#x3001;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x91CD;&#x9396; (Khc) &#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F; mRNA&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;FSH &#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; ROG &#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5375;&#x80DE;&#x9846;&#x7C92;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x4F4D;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3068;&#x5F62;&#x614B;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x518D;&#x7DE8;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5375;&#x80DE;&#x523A;&#x6FC0;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x9846;&#x7C92;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;: &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; I &#x306E; &beta;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30FB; &#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; 4 &#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x9396;&#x3002;

FSH follicular &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; granulosa &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC870;&#xC808;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, FSH &#xBC18;&#xC751;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC77C;&#xC5D0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; follicular &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xC791;&#xC740; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; antrum &#xD615;&#xC131;, &#xC8FC;&#xC694; &#xB79C;&#xB4DC;&#xB9C8;&#xD06C; &#xAC19;&#xC740; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; cytoskeletal &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. FSH &#xBBF8; &#xC219;, undifferentiated &#xC950; &#xB09C;&#xC18C; granulosa (&#xB85C;&#xC800;) &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; FSH microtubules&#xC640;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeletons&#xB85C; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC544;&#xC9C1; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xAC1C;&#xD3B8; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xBD84;&#xD654; &#xC911; FSH&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xB294; &#xADF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCC28;&#xB3D9; &#xB514;&#xC2A4;&#xD50C;&#xB808;&#xC774; &#xB85C;&#xC800; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC2DD;&#xBCC4; 80 FSH &#xBC18;&#xC751;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; 3 cytoskeleton &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790; (&#xD074;&#xB798;&#xC2A4; I &#xBCA0;&#xD0C0; tubulin tropomyosin 4, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; kinesin &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778;), &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; morphogenesis, &#xC804;&#xC1A1; &#xBC0F; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD81;&#xBD80; &#xC624; &#xC810; &#xC9C4; &#xB179;&#xCDE8; &#xB85D;&#xC774; &#xC218;&#xC900;&#xC758; FSH &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4;&#xC5D0; 6 h &#xD53C;&#xD06C; &#xB3C4;&#xB2EC; 24 h.&#xC5D0;&#xC11C; subsided FSH &#xC720;&#xB3C4; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBBF8; &#xC219; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; granulosa &#xC140;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBCA0;&#xD0C0; tubulin Mrna&#xB294; transiently &#xB300;&#xD615; preantral&#xACFC; antral &#xBAA8; &#xB0AD;&#xC758; granulosa &#xC140; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xAE30; &#xB9C9;&#xD788;&#xAC8C; &#xB2EC;&#xB790;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, cycloheximide tropomyosin-4 (TM4) mRNA &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xBCA0;&#xD0C0; tubulin mRNA &#xC2DD; &#xCC28;&#xB2E8;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; kinesin &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; (&#xC790;)&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; mRNA. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, FSH &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB85C;&#xC800; &#xC140; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; cytoskeletal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xD2B9;&#xC815; &#xB0AD; &#xBC0F; granulosa &#xC140;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; cytoskeletons&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC1C;&#xD3B8;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5EC; &#xD3EC;-&#xC790;&#xADF9; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xBC18;&#xC751; cytoskeletal &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC950; granulosa &#xC140;: &#xB0B4;&#xAC00; &#xBCA0;&#xD0C0; tubulin, tropomyosin 4 &#xBC0F; kinesin &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;.

FSH regula la expresi&oacute;n del gen de diferenciaci&oacute;n de las c&eacute;lulas granulosas y desarrollo folicular. Por lo tanto, genes sensibles al FSH son cruciales, pero s&oacute;lo unos cuantos genes han sido identificados para la etapa temprana de desarrollo folicular. En particular, poco se sabe sobre genes citoesqueleto, que probablemente desempe&ntilde;an un papel esencial en los cambios morfol&oacute;gicos como la formaci&oacute;n del antro, un hito. Tambi&eacute;n es conocida la FSH para inducir la diferenciaci&oacute;n de una l&iacute;nea de c&eacute;lulas de granulosa (ROG) de ovario de rata inmadura, no diferenciadas. Nuestros datos muestran que la FSH induce reorganizaci&oacute;n masiva pero distinta de los microt&uacute;bulos y los citoesqueletos de actina as&iacute; como cambios morfol&oacute;gicos. Para identificar los genes que responden a FSH durante la diferenciaci&oacute;n, despliegue diferencial fue realizada en c&eacute;lulas ROG. De los 80 genes sensibles al FSH identificados, hab&iacute;a tres citoesqueleto genes relacionados con (beta-tubulina y tropomiosina 4 kinesin cadena pesada clase I), que son cruciales para la diferenciaci&oacute;n, el transporte y morfog&eacute;nesis intracelular. Las manchas blancas /negras Norte muestran que el nivel de estas transcripciones del gene alcanz&oacute; un pico a las 6 h despu&eacute;s del tratamiento de FSH y se desplom&oacute; en 24 h. FSH indujo la expresi&oacute;n temporal similar no s&oacute;lo en las c&eacute;lulas de la granulosa aisladas de ratas inmaduras, pero tambi&eacute;n en vivo. Por ejemplo, hibridaci&oacute;n in situ demostraron que el mRNA de beta-tubulina transitoriamente expres&oacute; en las c&eacute;lulas de la granulosa de fol&iacute;culos antrales preantral y principios grandes. A pesar de la misma expresi&oacute;n temporal, los mecanismos de regulaci&oacute;n de los tres genes eran notablemente diferentes. Como ejemplo, cicloheximida hab&iacute;a bloqueado la expresi&oacute;n del mRNA de beta-tubulina, mientras que aument&oacute; tropomiosina-4 (TM4) mRNA. Sin embargo, no impacto kinesin cadena pesada (Khc) mRNA. En conclusi&oacute;n, FSH induce la reorganizaci&oacute;n masiva del citoesqueletos y cambios morfol&oacute;gicos por la regulaci&oacute;n selectiva de la expresi&oacute;n g&eacute;nica, s&iacute;ntesis de prote&iacute;nas y reordenamiento de la prote&iacute;nas citoesquel&eacute;ticas en las c&eacute;lulas ROG y probablemente, los fol&iacute;culos espec&iacute;ficos y c&eacute;lulas de la granulosa.

Hormona fol&iacute;culo-estimulante sensible al citoesqueleto genes en c&eacute;lulas de la granulosa de rata: clase I beta-tubulina y tropomiosina-4 kinesin cadena pesada.

&#xC2E0;&#xACBD; Wiskott-&#xC62C;&#xB4DC; &#xB9AC;&#xCE58; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (N-&#xB9D0; &#xBC8C;)&#xC640; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 2/3 (Arp2/3) &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xB5A0;&#xC624;&#xB974;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB9D0;&#xB77C; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; Listeria monocytogenes&#xC5D0; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; Arp2/3 &#xBCF5;&#xD569;&#xCCB4;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; N-&#xB9D0; &#xBC8C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBB34;&#xC2DC;. Shigella flexneri vaccinia &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; N-&#xB9D0; &#xBC8C; &#xBC0F; Arp2/3 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9AC;&#xCF00;&#xCC28; rickettsii&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC5D0;&#xC774; cytoskeletal &#xADDC;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560; &#xC124;&#xB9BD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; N-&#xB9D0; &#xBC8C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD0DC;&#xADF8;&#xB85C; &#xC774;&#xC9C8;&#xADE0;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC788;&#xB294; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; vaccinia &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; ectopically rickettsial &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; R. rickettsii&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; HeLa &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. S. flexneri &#xAC10;&#xC5FC; &#xC140; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; N WASP &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; R. rickettsii &#xB610;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB9D0; &#xBC8C; N N-&#xB9D0; &#xBC8C;&#xC758; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; (&quot;verprolin homology, cofilin &#xD638;&#xBAB0;&#xB85C;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xC0B0; &#xC131; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xC704;&#xD55C;&quot;), VCA &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB204;&#xB77D;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC644;&#xC804;&#xD788;&#xB9CC; &#xC801;&#xB2F9;&#xD788; R. rickettsii&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; S. flexneri&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; &#xC800;&#xD574;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, VCA &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; Arp2/3 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC2EC;&#xD558;&#xAC8C; S. flexneri (&#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;)&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC801;&#xB2F9;&#xD788; R. rickettsii &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xC800;&#xD574;. &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC2DD; &#xB2E4;&#xB978; N-&#xB9D0; &#xBC8C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0; &#xCC28;&#xB3D9; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;&#xC774; &#xACB0;&#xACFC; R. rickettsii&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC740; N-&#xB9D0; &#xBC8C; &#xBC0F; Arp2/3 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9AC;&#xCF00;&#xCC28; rickettsii &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; ectopically &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; Wiskott-&#xC62C;&#xB4DC; &#xB9AC;&#xCE58; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;.

&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EF4;&#x65AF;&#x79D1;&#x7279;-&#x5965;&#x5C14;&#x5FB7;&#x91CC;&#x5947;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x86CB;&#x767D; (N-&#x9EC4;&#x8702;) &#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; 2/3 (Arp2/3) &#x590D;&#x6742;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x5173;&#x952E;&#x4E3B;&#x673A;&#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x63A7;&#x75C5;&#x539F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5C3E;&#x5DF4;&#x5F62;&#x6210;&#x53CA;&#x674E;&#x65AF;&#x7279;&#x83CC;&#x80C3;&#x9700;&#x8981; Arp2/3 &#x590D;&#x6742;&#x4F46;&#x7ED5;&#x8FC7; N &#x9EC4;&#x8702;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x75E2;&#x75BE;&#x6746;&#x83CC;&#x798F;&#x6C0F;&#x548C;&#x75D8;&#x82D7;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x9700;&#x8981; N &#x9EC4;&#x8702;&#x548C; Arp2/3 &#x590D;&#x6742;&#x3002;&#x7528;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x7ACB;&#x514B;&#x6B21;&#x4F53;&#x8367;&#x5149;&#x529F;&#x80FD;&#x89D2;&#x8272;&#x5C1A;&#x672A;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7528;&#x6709;&#x7279;&#x70B9;&#x5BF9;&#x5FD7;&#x8D3A;&#x83CC;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x57DF;&#x7684; N &#x9EC4;&#x8702;&#x548C;&#x75D8;&#x82D7;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x5BF9; ectopically &#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x67D3;&#x94A2;&#x7B4B;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5176;&#x5BF9;&#x7ACB;&#x514B;&#x6B21;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;S.&#x798F;&#x6C0F;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x8868;&#x793A;&#x7684; N &#x9EC4;&#x8702;&#x57DF;&#x4E0D;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x94A2;&#x7B4B;&#x8367;&#x5149;&#x6216;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5C3E;&#x5DF4;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F; N &#x9EC4;&#x8702;&#x7F3A;&#x5C11;&#x7684;&#x5B89;&#x5168;&#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF; &#xFF08;&quot;verprolin &#x540C;&#x6E90;&#x3001; cofilin &#x540C;&#x6E90;&#x548C;&#x9178;&#x6027;&#x57DF;&quot;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; N &#x9EC4;&#x8702;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5B8C;&#x5168;&#x53EA;&#x4F1A;&#x9002;&#x5EA6;&#x6291;&#x5236;&#x94A2;&#x7B4B;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x6291;&#x5236; S.&#x798F;&#x6C0F;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5B89;&#x5168;&#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A; Arp2/3 &#x590D;&#x53D8;&#x51FD;&#x6570;&#x5BF9;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#xFF0C;&#x4E25;&#x91CD;&#x6291;&#x5236;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x4E8E;&#x52A8;&#x529B; S.&#x798F;&#x6C0F; &#xFF08;&#x6CA1;&#x6709;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x8868;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EA;&#x4F1A;&#x9002;&#x5EA6;&#x6291;&#x5236;&#x94A2;&#x7B4B;&#x8367;&#x5149;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x8FDE;&#x540C;&#x5BF9;&#x52A8;&#x529B;&#x540E;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6; N &#x9EC4;&#x8702;&#x57DF;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#x5F71;&#x54CD;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x94A2;&#x7B4B;&#x8367;&#x5149;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684; N &#x9EC4;&#x8702;&#x548C; Arp2/3 &#x590D;&#x6742;&#x3002;

&#x7ACB;&#x514B;&#x6B21;&#x4F53;&#x8367;&#x5149;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5BF9; ectopically &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EF4;&#x65AF;&#x79D1;&#x7279;-&#x5965;&#x5C14;&#x5FB7;&#x91CC;&#x5947;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x86CB;&#x767D;&#x57DF;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Neuronal Wiskott-Aldrich syndrome protein (N-WASP) and the actin-related protein 2/3 (Arp2/3) complex have emerged as critical host proteins that regulate pathogen actin-based motility. Actin tail formation and motility in Listeria monocytogenes require the Arp2/3 complex but bypasses N-WASP signaling. Motility of Shigella flexneri and vaccinia virus requires both N-WASP and the Arp2/3 complex. Functional roles for these cytoskeletal regulatory proteins in actin-based motility of Rickettsia rickettsii have not been established. In this study, functional domains of N-WASP tagged with green fluorescent protein that have characterized effects on Shigella and vaccinia virus actin-based motility were ectopically expressed in HeLa cells infected with R. rickettsii to assess their effects on rickettsial motility. S. flexneri-infected cells were used as a control. Expressed N-WASP domains did not localize to R. rickettsii or their actin tails. Expression of N-WASP missing the VCA domain (for "verprolin homology, cofilin homology, and acidic domains"), which acts as a dominant-negative form of N-WASP, completely inhibited actin-based motility of S. flexneri while only moderately inhibiting motility of R. rickettsii. Similarly, expression of the VCA domain, which acts as a dominant-negative with respect to Arp2/3 complex function, severely inhibited actin-based motility of S. flexneri (no motility observed in the majority of expressing cells) but only moderately inhibited R. rickettsii motility. These results, taken together with the differential effects on motility observed upon expression of other N-WASP domains, suggest that actin-based motility of R. rickettsii is independent of N-WASP and the Arp2/3 complex.

Effects of ectopically expressed neuronal Wiskott-Aldrich syndrome protein domains on Rickettsia rickettsii actin-based motility.

Prot&eacute;ine neuronale Wiskott - Aldrich syndrome (N-WASP) et la prot&eacute;ine li&eacute;e &agrave; l&#39;actine 2/3 (Arp2/3) complexes sont apparus comme les prot&eacute;ines de l&#39;h&ocirc;te critique qui r&eacute;gulent la motilit&eacute; d&#39;actine pathog&egrave;ne. Formation d&#39;une queue l&#39;actine et la motilit&eacute; chez Listeria monocytogenes n&eacute;cessitent le complexe Arp2/3 mais ignore N-WASP de signalisation. La motilit&eacute; de Shigella flexneri et vaccinia virus n&eacute;cessite N-WASP et le complexe Arp2/3. R&ocirc;les fonctionnels pour ces prot&eacute;ines de r&eacute;gulation du cytosquelette dans la motilit&eacute; actine de Rickettsia rickettsii n&#39;ont pas &eacute;t&eacute; &eacute;tablies. Dans cette &eacute;tude, les domaines fonctionnels de la N-WASP tag prot&eacute;ine fluorescente verte qui ont caract&eacute;ris&eacute; les effets sur les Shigella et la motilit&eacute; vaccinia virus actine &eacute;taient ectopique exprim&eacute;s dans les cellules HeLa infect&eacute;es par r. rickettsii afin d&#39;&eacute;valuer leurs effets sur la motilit&eacute; des rickettsies. Cellules de S. flexneri infect&eacute;s ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s comme contr&ocirc;le. Expresses des domaines N-WASP ne pas localiser r.rickettsii ou leur queue d&#39;actine. Expression du manque le domaine VCA (pour &quot;homologie verprolin cofilin homologie et domaines acides&quot;), qui agit comme une forme dominante n&eacute;gative de gu&ecirc;pe-N, N-WASP compl&egrave;tement inhib&eacute; la motilit&eacute; actine de S. flexneri tout en emp&ecirc;chant que mod&eacute;r&eacute;ment la motilit&eacute; de r. rickettsii. De m&ecirc;me, l&#39;expression du domaine VCA, qui agit comme un dominant n&eacute;gatif en ce qui concerne la fonction complexe Arp2/3, s&eacute;v&egrave;rement inhib&eacute; la motilit&eacute; actine de S. flexneri (pas observ&eacute;e dans la majorit&eacute; des cellules exprimant la motilit&eacute;) mais que mod&eacute;r&eacute;ment inhib&eacute; la motilit&eacute; r. rickettsii. Ces r&eacute;sultats, conjugu&eacute;s aux effets diff&eacute;rentiels sur la motilit&eacute; observ&eacute; lors de l&#39;expression des autres domaines N-WASP, sugg&egrave;rent que la motilit&eacute; actine de r. rickettsii est ind&eacute;pendante de N-WASP et le complexe Arp2/3.

Effets de domaines de prot&eacute;ines exprim&eacute;es de fa&ccedil;on ectopique neuronale Wiskott - Aldrich syndrome sur la motilit&eacute; Rickettsia rickettsii ax&eacute;e sur l&#39;actine.

Auswirkungen von ektopisch exprimierten neuronale Wiskott-Aldrich Syndrom Protein-Dom&#xE4;nen auf Rickettsia rickettsii Aktin-basierte Motilit&#xE4;t.

Proteina neuronale Wiskott - Aldrich-Syndroms (N-WASP) e la proteina actina 2/3 (Arp2/3) complesso sono emersi come proteine critiche host che regolano la motilit&agrave; actina-based agente patogeno. Formazione della coda actina e motilit&agrave; in Listeria monocytogenes richiedono il complesso Arp2/3 ma bypassa N-WASP di segnalazione. Motilit&agrave; della Shigella flexneri e vaccinia virus richiede sia N-WASP e il Arp2/3 complessi. Ruoli funzionali per queste proteine citoscheletriche normative nella motilit&agrave; actina-basato del Rickettsia rickettsii non sono stati stabiliti. In questo studio, domini funzionali della N-WASP taggati con proteina verde fluorescente che hanno caratterizzato gli effetti su Shigella e motilit&agrave; actina-basati di vaccinia virus ectopically sono stati espressi in cellule HeLa infettate con r. rickettsii per valutare gli effetti sulla motilit&agrave; rickettsie. S. flexneri-cellule infette sono state utilizzate come controllo. Espressi domini N-WASP non ha fatto localizzare r. rickettsii o le loro code di actina. Espressione di N-WASP manca il dominio VCA (per &quot;verprolin omologia, omologia cofilin e domini acide&quot;), che agisce come una forma dominante negativa di N-WASP, completamente inibito motilit&agrave; actina-sede di S. flexneri mentre solo moderatamente inibendo la motilit&agrave; di r. rickettsii. Allo stesso modo, espressione del dominio VCA, che agisce come un dominante-negativo rispetto alla funzione complesso Arp2/3, severamente inibito motilit&agrave; actina-sede di S. flexneri (no motilit&agrave; osservata nella maggior parte delle cellule di esprimere) ma solo moderatamente inibiti motilit&agrave; r. rickettsii. Questi risultati, insieme con i differenziali effetti sulla motilit&agrave; osservato all&#39;espressione di altri domini N-WASP, suggeriscono che la motilit&agrave; actina-basato di r. rickettsii &egrave; indipendente da N-WASP e il complesso Arp2/3.

Effetti dei domini della proteina espressa ectopically neuronale Wiskott - Aldrich-Syndroms sulla motilit&agrave; actina-basato di Rickettsia rickettsii.

&#x795E;&#x7D4C; Wiskott-Aldrich &#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; &#xFF08;N-WASP) &#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 2/3 (Arp2/3) &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x5C3E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x83CC;&#x306E;&#x904B;&#x52D5; Arp2/3 &#x8907;&#x5408;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x304C; N &#x30EF;&#x30B9;&#x30D7; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8D64;&#x75E2;&#x83CC; flexneri &#x3068;&#x30EF;&#x30AF;&#x30B7;&#x30CB;&#x30A2; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x306B;&#x306F;&#x3001;N &#x30EF;&#x30B9;&#x30D7;&#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; Arp2/3 &#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x7D05;&#x6591;&#x71B1;&#x30EA;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30A2;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x5236;&#x5FA1;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;, &#x8D64;&#x75E2;&#x83CC;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x7279;&#x5FB4;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x7DD1;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; N &#x30EF;&#x30B9;&#x30D7;&#x304C;&#x4ED8;&#x3044;&#x305F;&#x3001;&#x30EF;&#x30AF;&#x30B7;&#x30CB;&#x30A2; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x30EA;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30A2;&#x904B;&#x52D5;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B; r. &#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D5;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3; HeLa &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x57F9;&#x990A;&#x3002;S. flexneri &#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8868;&#x660E;&#x306E;&#x30EF;&#x30B9;&#x30D7; N &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;R. &#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D5;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5C3E;&#x306B;&#x306F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;N &#x30EF;&#x30B9;&#x30D7; N &#x30EF;&#x30B9;&#x30D7;&#x306E;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3001;VCA &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; (&quot;verprolin &#x76F8;&#x540C;&#x6027;, &#x30B3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3; &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x3068;&#x9178;&#x6027;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&quot;&#xFF09;&#x3001;&#x884C;&#x65B9;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x9069;&#x5EA6;&#x306B; r. &#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D5;&#x30B9;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089; S. flexneri &#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x904B;&#x52D5;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x5F0F; Arp2/3 &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;VCA &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; S. flexneri (&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306A;&#x3044;&#x904B;&#x52D5;&#xFF09; &#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x53B3;&#x3057;&#x304F;&#x6291;&#x5236;&#x3001;R. &#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D5;&#x30B9;&#x904B;&#x52D5;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x9069;&#x5EA6;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;N &#x30EF;&#x30B9;&#x30D7;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x6642;&#x306B;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x3066;&#x64AE;&#x5F71;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;r. &#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D5;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x904B;&#x52D5;&#x304C; N &#x30EF;&#x30B9;&#x30D7;&#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; Arp2/3 &#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30EA;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30A2; &#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D5;&#x30B9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x57F9;&#x990A;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C; Wiskott-Aldrich &#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x3002;

Prote&iacute;na neuronal del s&iacute;ndrome de Wiskott &ndash; Aldrich (N-avispa) y la prote&iacute;na relacionada con la actina 2/3 (Arp2/3) complejo han surgido como prote&iacute;nas de acogida cr&iacute;tica que regulan la motilidad de pat&oacute;geno basadas en la actina. Formaci&oacute;n de cola de actina y la motilidad en Listeria monocytogenes requieren el complejo Arp2/3 pero omite N-avispa de se&ntilde;alizaci&oacute;n. Motilidad de Shigella flexneri y vaccinia virus requiere N-avispa y el complejo Arp2/3. Papeles funcionales de estas prote&iacute;nas reguladoras del citoesqueleto en movilidad basadas en actina de Rickettsia rickettsii no han sido establecidas. En este estudio, dominios funcionales de N-avispa etiquetados de la prote&iacute;na verde fluorescente que han caracterizado a efectos de Shigella y motilidad de actina-base de virus vaccinia expresaron ect&oacute;picamente en c&eacute;lulas HeLa infectadas con r. rickettsii para evaluar sus efectos sobre la motilidad rickettsial. C&eacute;lulas de S. flexneri infectados fueron utilizadas como control. Expresados los dominios N-avispa no localizar a r. rickettsii o sus colas de actina. Expresi&oacute;n de falta el dominio de VCA (de &quot;homolog&iacute;a Verprolina cofilin homolog&iacute;a y dominios &aacute;cidos&quot;), que act&uacute;a como una forma dominante negativo de avispa-N, N-avispa inhibi&oacute; completamente basadas en actina motilidad de S. flexneri mientras que s&oacute;lo moderadamente inhibe la motilidad de r. rickettsii. Del mismo modo, expresi&oacute;n del dominio VCA, que act&uacute;a como un dominante negativo con respecto a la funci&oacute;n complejo Arp2/3, severamente inhibe motilidad basadas en actina de S. flexneri (no observada en la mayor&iacute;a de las c&eacute;lulas de expresar la motilidad) pero s&oacute;lo moderadamente inhibe la motilidad r. rickettsii. Estos resultados, junto con los efectos diferenciales sobre motilidad observada sobre la expresi&oacute;n de otros dominios de la N-avispa, sugieren que la motilidad basadas en actina de r. rickettsii es independiente de N-avispa y el complejo Arp2/3.

Efectos de los dominios de la prote&iacute;na expresada ect&oacute;picamente neuronal &ndash; s&iacute;ndrome de Wiskott Aldrich en base de actina motilidad de Rickettsia rickettsii.

&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x662F;&#x9884;&#x7559;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x4E0E;&#x53CC;&#x76F8;&#x53D1;&#x80B2;&#x5468;&#x671F;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x80DE;&#x5916;&#x751F;&#x5B58; (&#x521D;&#x7EA7;&#x673A;&#x6784; EBs) &#x548C;&#x80DE;&#x5185;&#x4E58;&#x6CD5; (&#x7F51;&#x7EB9;&#x673A;&#x6784;&#xFF0C;RBs&#xFF09;&#x3002;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x53D1;&#x5C55;&#x53D1;&#x751F;&#x5B8C;&#x5168;&#x5185;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5217;&#x5165;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6CE1;&#x3002;2 &#x5C0F;&#x65F6;&#x5185;&#x8FDB;&#x5165;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x540E;&#xFF0C;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53; EBs &#x88AB;&#x8D29;&#x8FD0;&#x5230;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6838;&#x5468;&#x533A;&#x57DF;&#x548C;&#x4FDD;&#x6301;&#x5728;&#x63A5;&#x8FD1;&#x7684;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x54EA;&#x91CC;&#x5F00;&#x59CB;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;&#x4E0E;&#x4E3B;&#x673A;&#x56CA;&#x6CE1;&#x542B;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x56F4;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x533A;&#x57DF;&#x4ECE;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FB9;&#x7F18;&#x7684;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C34;&#x75B1;&#x8D29;&#x8FD0;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x51CF;&#x53F7;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x8D70;&#x5411;&#x548C;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5FC3; &#xFF08;MTOC&#xFF09;&#x3002;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x51CF;&#x53F7;&#x7ED3;&#x675F;&#x9488;&#x5BF9;&#x5FAE;&#x7535;&#x673A;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x808C;&#x3002;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x808C;&#x6297;&#x4F53;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6291;&#x5236;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8; MTOC&#xFF0C;&#x800C;&#x52A0;&#x53F7;&#x5B9A;&#x5411;&#x5FAE;&#x7535;&#x673A;&#x3001; &#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6297;&#x4F53;&#x6CE8;&#x5C04;&#x4E86;&#x6CA1;&#x6709;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x86CB;&#x767D; p50 dynamitin&#xFF0C;dynactin &#x590D;&#x6742;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x808C;&#x7535;&#x673A;&#x5728;&#x51CF;&#x53BB;&#x5B9A;&#x5411;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x8D29;&#x8FD0;&#x3001; &#x6C34;&#x75B1;&#x8D27;&#x7269;&#x7684;&#x4E9A;&#x57FA;&#x786E;&#x5B9E;&#x4E0D;&#x5E9F;&#x9664;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5373;&#x4F7F;&#x4E3B;&#x673A;&#x56CA;&#x6CE1;&#x8FD0;&#x8F93;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x65B0;&#x751F;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5939;&#x6742;&#x7269;&#x505A;&#x7684;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;colocalize &#x4E0E; p150(Glued) dynactin &#x4E9A;&#x57FA;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;p150(Glued) &#x53EF;&#x80FD;&#x9700;&#x8981;&#x808C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6216; processivity&#xFF0C;&#x4F46;&#x7684;&#x8D27;&#x7269;&#x7ED3;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; dynactin&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684; p50 dynamitin &#x4E9A;&#x57FA;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E9A;&#x57FA;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x90FD;&#x9700;&#x8981;&#x6B64;&#x80DE;&#x5185;&#x8D29;&#x5356;&#xFF0C;&#x4FEE;&#x6539;&#x5217;&#x5165;&#x819C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x8138;&#x7684;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x5C65;&#x884C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x804C;&#x80FD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;

&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53; p50 dynamitin &#x72EC;&#x7ACB;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x808C;&#x7684;&#x4EA4;&#x901A;&#x3002;

Chlamydiae are pathogenic obligate intracellular bacteria with a biphasic developmental cycle that involves cell types adapted for extracellular survival (elementary bodies, EBs) and intracellular multiplication (reticulate bodies, RBs). The intracellular development of chlamydiae occurs entirely within a membrane-bound vacuole termed an inclusion. Within 2 hours after entry into host cells, Chlamydia trachomatis EBs are trafficked to the perinuclear region of the host cell and remain in close proximity to the Golgi apparatus, where they begin to fuse with a subset of host vesicles containing sphingomyelin. Here, we provide evidence that chlamydial migration from the cell periphery to the peri-Golgi region resembles host cell vesicular trafficking. Chlamydiae move towards the minus end of microtubules and aggregate at the microtubule-organizing center (MTOC). In mammalian cells the most important minus-end-directed microtubule motor is cytoplasmic dynein. Microinjection of antibodies to a subunit of cytoplasmic dynein inhibited movement of chlamydiae to the MTOC, whereas microinjection of antibodies to the plus-directed microtubule motor, kinesin, had no effect. Surprisingly, overexpression of the protein p50 dynamitin, a subunit of the dynactin complex that links vesicular cargo to the dynein motor in minus directed vesicle trafficking, did not abrogate chlamydial migration even though host vesicle transport was inhibited. Nascent chlamydial inclusions did, however, colocalize with the p150(Glued) dynactin subunit, which suggests that p150(Glued) may be required for dynein activation or processivity but that the cargo-binding activity of dynactin, supplied by p50 dynamitin subunits and possibly other subunits, is not. Because chlamydial transcription and translation were required for this intracellular trafficking, chlamydial proteins modifying the cytoplasmic face of the inclusion membrane are probable candidates for proteins fulfilling this function.

Chlamydia trachomatis uses host cell dynein to traffic to the microtubule-organizing center in a p50 dynamitin-independent process.

Chlamydiae est des bact&eacute;ries pathog&egrave;nes intracellulaires obligatoires avec un cycle de d&eacute;veloppement biphasique qui implique des types de cellules adapt&eacute;es pour survie extracellulaire (corps &eacute;l&eacute;mentaires, EBs) et la multiplication intracellulaire (corps r&eacute;ticul&eacute;s, RBs). Le d&eacute;veloppement intracellulaire des chlamydiae a lieu enti&egrave;rement dans une vacuole membranaires appel&eacute;e une inclusion. Dans les 2 heures apr&egrave;s l&#39;entr&eacute;e dans les cellules h&ocirc;tes, Chlamydia trachomatis EBs sont victimes de la traite dans la r&eacute;gion p&eacute;rinucl&eacute;aire de la cellule h&ocirc;te et rester dans la proximit&eacute; &agrave; l&#39;appareil de Golgi, o&ugrave; ils commencent &agrave; fusionner avec un sous-ensemble des v&eacute;sicules h&ocirc;te contenant la sphingomy&eacute;line. Ici, nous d&eacute;montrons que la chlamydiale migration de la p&eacute;riph&eacute;rie de la cellule vers la r&eacute;gion peri-Golgi ressemble &agrave; trafic v&eacute;siculaire de cellule h&ocirc;te. Chlamydiae se d&eacute;placent vers l&#39;extr&eacute;mit&eacute; n&eacute;gative des microtubules et agr&eacute;ger au centre organisateur des microtubules (MTOC). Dans les cellules de mammif&egrave;res le plus important moteur de microtubule minus-fin-r&eacute;alis&eacute; est dyn&eacute;ine cytoplasmique. La microinjection d&#39;anticorps dirig&eacute;s contre une sous-unit&eacute; de la dyn&eacute;ine cytoplasmique inhibe mouvement des chlamydiae le MTOC, tandis que la microinjection d&#39;anticorps dirig&eacute;s contre le moteur r&eacute;alis&eacute; en plus des microtubules, la kin&eacute;sine, n&#39;a aucun effet. &Eacute;tonnamment, la surexpression de la prot&eacute;ine p50 dynamitin, une sous-unit&eacute; de la DCTN1 complexe qui relie v&eacute;siculaire cargo vers le moteur de la dyn&eacute;ine dans moins de trafic de v&eacute;sicules dirig&eacute;e, abrogent pas chlamydiale migration m&ecirc;me si le transport v&eacute;siculaire h&ocirc;te est inhib&eacute;e. Inclusions chlamydiennes naissantes a fait, cependant, colocalis&eacute;es avec la sous-unit&eacute; DCTN1 de p150(Glued), qui donne &agrave; penser que p150(Glued) peut &ecirc;tre requis pour l&#39;activation de la dyn&eacute;ine ou processivity mais que l&#39;activit&eacute; de liaison cargo de DCTN1, fourni par p50 sous-unit&eacute;s dynamitin et probablement d&#39;autres sous-unit&eacute;s, n&#39;est pas. Traduction et transcription chlamydiale &eacute;tant requis pour ce trafic intracellulaire, prot&eacute;ines chlamydiales modifiant la face cytoplasmique de la membrane de l&#39;inclusion sont des candidats probables pour les prot&eacute;ines qui remplissent cette fonction.

Chlamydia trachomatis utilise la dyn&eacute;ine cellule h&ocirc;te pour le trafic vers le centre organisateur des microtubules dans un processus ind&eacute;pendant de la dynamitin de p50.

Chlamydia trachomatis verwendet Wirtszelle Dynein, um Traffic auf die Mikrotubuli-organisierende Zentrum in einer p50-unabh&#xE4;ngigen Dynamitin Prozess.

Chlamydia &egrave; patogeni batteri intracellulari obbligati con un ciclo di sviluppo bifasico che coinvolge tipi cellulari adattati per la sopravvivenza extracellulare (corpi elementari, EBs) e moltiplicazione intracellulare (corpi reticolari, RBs). Lo sviluppo intracellulare di Chlamydia avviene interamente all&#39;interno di un vacuolo membrana-limiti definito un&#39;inclusione. Entro 2 ore dopo l&#39;entrata in cellule ospiti, Chlamydia trachomatis EBs sono trafficate alla regione perinucleare della cellula ospite e restano prossimit&agrave; all&#39;apparato del Golgi, dove cominciano a fondersi con un sottoinsieme delle vescicole host contenenti sfingomielina. Qui, forniamo prove che da clamidia migrazione dalla periferia delle cellule nella regione peri-Golgi assomiglia a host cell traffico vescicolare. Chlamydia sposta verso la fine meno dei microtubuli e di aggregazione presso il centro di organizzazione dei microtubuli (MTOC). In cellule di mammifero, il pi&ugrave; importante motore di minus-fine-diretto microtubule &egrave; dineina citoplasmatica. Microiniezione di anticorpi contro la subunit&agrave; della dineina citoplasmatica inibisce movimento di Chlamydia da MTOC, considerando che la microiniezione degli anticorpi al motore plus-diretto microtubule, chinesina, non aveva alcun effetto. Sorprendentemente, sovraespressione di p50 la proteina dynamitin, una subunit&agrave; della DCTN1 complessa che collega vescicolare carico al motore dineina in meno della vescicola diretta il traffico, non ha fatto abrogare migrazione da clamidia anche se trasporto vescicola host &egrave; stato inibito. Inclusioni da clamidia nascente, tuttavia, colocalize con la subunit&agrave; DCTN1 p150(Glued), che suggerisce che p150(Glued) pu&ograve; essere richiesto per attivazione dynein o processivity ma che l&#39;attivit&agrave; di carico-associazione di DCTN1, fornito da dynamitin subunit&agrave; p50 e possibilmente altre subunit&agrave;, non &egrave;. Perch&eacute; la traduzione e trascrizione da clamidia sono stati richiesti per questo traffico intracellulare, proteine da clamidia modificando la faccia citoplasmatica della membrana inclusione sono probabili candidati per adempiere a questa funzione di proteine.

Chlamydia trachomatis utilizza dineina cellula ospite per il traffico al centro Organizzatore dei microtubuli in un processo di dynamitin-indipendente p50.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#xFF05;30 &#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x7D30;&#x83CC;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x751F;&#x5B58; (&#x5C0F;&#x5B66;&#x6821;&#x4F53;&#x3001;EBs) &#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5897;&#x6B96; (&#x7DB2;&#x72B6;&#x4F53;&#x3001;RBs&#xFF09; &#x9069;&#x5FDC;&#x30BB;&#x30EB;&#x578B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4E8C;&#x76F8;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x80B2;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x958B;&#x767A;&#x4ECB;&#x5728;&#x7269;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5165;&#x308B;&#x5F8C; 2 &#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x3001;EBs &#x3092;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6838;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3057;&#x3001;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x2010; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B9;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30D9;&#x30B7;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x59CB;&#x3081;&#x308B;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306B;&#x8FD1;&#x63A5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x8FBA;&#x304B;&#x3089;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x79FB;&#x884C;&#x30DA;&#x30EA; &#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x6574;&#x7406;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC; (&#x958B;&#x653E;&#x7AEF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;) &#x3092;&#x96C6;&#x8A08;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x65B9;&#x5411;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x76E3;&#x7763;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x958B;&#x653E;&#x7AEF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x8F38;&#x9001;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x8CA8;&#x7269;&#x5411;&#x5C0F;&#x80DE;&#x8F38;&#x9001;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9; &#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3; &#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3001;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8907;&#x5408;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; dynamitin &#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; p50 &#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Nascent &#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x4ECB;&#x5728;&#x7269;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x8CA8;&#x7269;&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027; p50 dynamitin &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F9B;&#x7D66;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E; p150(Glued) &#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30AF;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; p150(Glued) &#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068; colocalize&#x3001;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x5305;&#x542B;&#x819C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x9854;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x306E;&#x3042;&#x308A;&#x305D;&#x3046;&#x306A;&#x5019;&#x88DC;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30FB; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9; p50 dynamitin &#x72EC;&#x7ACB;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x6574;&#x7406;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30BB;&#x30EB; &#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Chlamydiae&#xB294; &#xB098;&#xC544;&#xC84C;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC0DD;&#xC874; (&#xCD08;&#xB4F1;&#xD559;&#xAD50; &#xC2DC;&#xCCB4;, EBs) &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xACF1;&#xC148; (reticulate &#xC2DC;&#xCCB4;, RBs)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC751;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC758;&#xBB34; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC138;&#xADE0;. Chlamydiae&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xACF5;&#xD3EC;&#xB294; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418; &#xB098; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xC785;&#xAD6D; &#xD6C4; 2 &#xC2DC;&#xAC04; &#xC774;&#xB0B4;&#xC5D0; &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis EBs &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140;&#xC758; perinuclear &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4; &#xBC0F;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xC544; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; sphingomyelin&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; vesicles&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xD4E8;&#xC988; &#xC2DC;&#xC791; Golgi &#xAE30;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; peri Golgi &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC140; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; chlamydial &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; &#xBC00;&#xB9E4; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Chlamydiae microtubules &#xBE7C;&#xAE30; &#xB05D; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xC13C;&#xD130; (MTOC) &#xC9D1;&#xACC4;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4; &#xC5D4;&#xB4DC; &#xAC10;&#xB3C5; microtubule &#xBAA8;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD68C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD68C;&#xC758; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0;&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; microinjection &#xBC18;&#xBA74; kinesin, &#xB354;&#xD558;&#xAE30; &#xAC10;&#xB3C5; microtubule &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; microinjection &#xC788; &#xC5C8; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; MTOC&#xC5D0; chlamydiae&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xC800;&#xD574;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, dynamitin, &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; &#xD654;&#xBB3C; &#xAC10;&#xB3C5;&#xB41C; &#xAE30; &#xB9E4;&#xB9E4;, &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD68C; &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; dynactin&#xC758; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; p50&#xC758; overexpression &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAE30; &#xAD50;&#xD1B5; &#xC800;&#xD574;&#xB294; &#xBE44;&#xB85D; chlamydial &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC744; &#xD30C;&#xAE30; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xCD08;&#xAE30; chlamydial &#xD3EC;&#xD568;, p50 dynamitin subunits &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xB2E4;&#xB978; &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; dynactin&#xC758; &#xD654;&#xBB3C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB294; p150(Glued) &#xD68C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xB294; processivity &#xD544;&#xC694;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC554;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; p150(Glued) dynactin &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC640; colocalize. &#xC65C;&#xB0D0;&#xD558;&#xBA74; chlamydial &#xC804;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;, chlamydial &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD3EC;&#xD568; &#xB9C9;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC5BC;&#xAD74; &#xC218;&#xC815;&#xC774; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xB294;.

&#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D;&#xC744; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xD68C; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xC13C;&#xD130; p50 dynamitin &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;.

Clamidias son bacterias intracelulares obligadas pat&oacute;genas con un ciclo de desarrollo de bif&aacute;sico que implica tipos celulares adaptados para la supervivencia extracelular (cuerpos elementales, EBs) y multiplicaci&oacute;n intracelular (cuerpos reticulares, RBs). El desarrollo intracelular de Chlamydia se produce enteramente dentro de una vacuola de membrana-limitan como una inclusi&oacute;n. Dentro de 2 horas despu&eacute;s de la entrada en las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped, Chlamydia trachomatis EBs son traficadas para la regi&oacute;n perinuclear de la c&eacute;lula hu&eacute;sped y permanecer en las proximidades el aparato de Golgi, donde comienzan a fusionarse con un subconjunto de las ves&iacute;culas de host que contiene la esfingomielina. Aqu&iacute; proporcionamos evidencia que por migraci&oacute;n de la periferia de la c&eacute;lula a la regi&oacute;n peri-Golgi se asemeja a tr&aacute;fico vesicular del c&eacute;lula anfitri&oacute;n. Clamidias avanzar hacia el extremo negativo de microt&uacute;bulos y agregan en el centro de organizaci&oacute;n de microt&uacute;bulos (MTOC). En c&eacute;lulas de mam&iacute;feros, el m&aacute;s importante motor de microt&uacute;bulos menos-final-dirigida es dine&iacute;na citoplasm&aacute;tica. Microinyecci&oacute;n de anticuerpos a una subunidad de dine&iacute;na citoplasm&aacute;tica hab&iacute;a inhibida movimiento de Chlamydia a la COMT, mientras que la microinyecci&oacute;n de anticuerpos contra el motor de microt&uacute;bulos plus-dirigido, kinesin, no tuvo ning&uacute;n efecto. Sorprendentemente, la sobreexpresi&oacute;n de la prote&iacute;na p50 dynamitin, una subunidad del complejo dinactina que une carga vesicular con el motor de la dine&iacute;na en menos tr&aacute;fico dirigida de la ves&iacute;cula, no derogar por migraci&oacute;n a pesar de que el transporte de ves&iacute;culas anfitri&oacute;n fue inhibida. Inclusiones por clamidia nacientes hicieran, sin embargo, colocalize con la p150(Glued) dinactina subunidad, que sugiere que P150(glued) puede ser necesario para la activaci&oacute;n de la dine&iacute;na o procesividad pero que no es la actividad de uni&oacute;n a cargo de dinactina, suministrado por subunidades dynamitin p50 y posiblemente otras subunidades. Porque por transcripci&oacute;n y traducci&oacute;n fueron requeridas para este tr&aacute;fico intracelular, prote&iacute;nas por modificar la cara citoplasm&aacute;tica de la membrana de inserci&oacute;n son probables candidatos para cumplir esta funci&oacute;n de prote&iacute;nas.

Chlamydia trachomatis utiliza host cell dynein al tr&aacute;fico para el centro de organizaci&oacute;n de microt&uacute;bulos en un proceso de dynamitin-independiente de p50.

Chlamydiae est Gram-n&eacute;gatives pathog&egrave;nes intracellulaires obligatoires auxquels l&#39;acc&egrave;s &agrave; un milieu intracellulaire est primordial pour leur survie et leur r&eacute;plication. &Agrave; cette fin, les chlamydiae ont &eacute;volu&eacute; un moyen extr&ecirc;mement efficace d&#39;envahir les cellules non phagocytaires. Afin d&#39;&eacute;lucider les m&eacute;canismes de cellule h&ocirc;te utilis&eacute; par Chlamydia trachomatis dans l&#39;invasion, nous avons examin&eacute; les r&ocirc;les des membres de la famille Rho GTPase dans l&#39;internalisation des corps &eacute;l&eacute;mentaires chlamydiales. Sur la base des corps &eacute;l&eacute;mentaires sur la surface de la cellule, actine est rapidement recrut&eacute; aux sites d&#39;internalisation. Membres de la famille Rho GTPase sont fr&eacute;quemment impliqu&eacute;s dans le recrutement localis&eacute; de l&#39;actine. Clostridiales toxine B, qui est un inhibiteur enzymatique connu du Rac, Cdc42 et GTPases Rho, r&eacute;duit significativement la chlamydiale invasion des cellules HeLa. Expression des dominantes constructions n&eacute;gatives dans les cellules HeLa a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que l&#39;absorption du chlamydiale d&eacute;pendait de la Rac, mais pas sur Cdc42 ou RhoA. RAC mais pas Cdc42 s&#39;est av&eacute;r&eacute; &ecirc;tre activ&eacute;s par fixation de chlamydiale. L&#39;effet de l&#39;expression dominante de Rac n&eacute;gative sur l&#39;absorption de la chlamydiale se manifeste par l&#39;interm&eacute;diaire de l&#39;inhibition du recrutement d&#39;actine vers les sites d&#39;entr&eacute;e de chlamydiale. Des &eacute;tudes utilisant des constructions de fusion de prot&eacute;ine fluorescente verte de Rac, Cdc42 et RhoA, a montr&eacute; le Rac &agrave; &ecirc;tre le seul membre de la famille Rho GTPase recrutement au site d&#39;entr&eacute;e de Chlamydia.

Exigence de la Rac GTPase &agrave; &#39; Chlamydia trachomatis invasion de cellules non phagocytaires.

Voraussetzung f&#xFC;r die GTPase Rac in Chlamydia-trachomatis-Invasion von nicht-Fresszellen.

&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x662F;&#x9769;&#x5170;&#x9634;&#x6027;&#x9884;&#x7559;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x662F;&#x9996;&#x8981;&#x7ED9;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x548C;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x4E3A;&#x6B64;&#x76EE;&#x7684;&#xFF0C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x9010;&#x6E10;&#x5165;&#x4FB5; nonphagocytic &#x7EC6;&#x80DE;&#x6781;&#x4E3A;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;&#x6F84;&#x6E05;&#x5229;&#x7528;&#x5165;&#x4FB5;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86; Rho &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x56FD;&#x9645;&#x5316;&#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x8FC5;&#x901F;&#x62DB;&#x52DF;&#x5230;&#x5185;&#x5316;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;Rho &#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x4E5F;&#x7ECF;&#x5E38;&#x53C2;&#x4E0E;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x62DB;&#x8058;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x68AD;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20; B&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; Rac&#x3001; Cdc42 &#x548C; Rho &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5BAB;&#x9888;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5165;&#x4FB5;&#x3002;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x6784;&#x9020;&#x5728;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x900F;&#x9732;&#xFF0C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; Rac&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x5173;&#x4E8E; Cdc42 &#x6216; RhoA&#x3002;Rac &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; Cdc42 &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x7531;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x9644;&#x4EF6;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#x5230;&#x7AD9;&#x70B9;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6761;&#x76EE;&#x7684;&#x8868;&#x73B0;&#x662F;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; Rac &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5BF9;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6027;&#x5438;&#x6536;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x5229;&#x7528;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x878D;&#x5408;&#x6784;&#x9020;&#x7684; Rac&#x3001; Cdc42 &#x548C; RhoA&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; Rac &#x662F; Rho &#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x6210;&#x5458;&#x62DB;&#x52DF;&#x5230;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x5165;&#x53E3;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3002;

Rac GTPase &#x4E2D;&#x975E;&#x541E;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6C99;&#x773C;&#x4FB5;&#x88AD;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#x3002;

Chlamydiae are gram-negative obligate intracellular pathogens to which access to an intracellular environment is paramount to their survival and replication. To this end, chlamydiae have evolved extremely efficient means of invading nonphagocytic cells. To elucidate the host cell machinery utilized by Chlamydia trachomatis in invasion, we examined the roles of the Rho GTPase family members in the internalization of chlamydial elementary bodies. Upon binding of elementary bodies on the cell surface, actin is rapidly recruited to the sites of internalization. Members of the Rho GTPase family are frequently involved in localized recruitment of actin. Clostridial Toxin B, which is a known enzymatic inhibitor of Rac, Cdc42 and Rho GTPases, significantly reduced chlamydial invasion of HeLa cells. Expression of dominant negative constructs in HeLa cells revealed that chlamydial uptake was dependent on Rac, but not on Cdc42 or RhoA. Rac but not Cdc42 was found to be activated by chlamydial attachment. The effect of dominant negative Rac expression on chlamydial uptake is manifested through the inhibition of actin recruitment to the sites of chlamydial entry. Studies utilizing Green Fluorescent Protein fusion constructs of Rac, Cdc42 and RhoA, showed Rac to be the sole member of the Rho GTPase family recruited to the site of chlamydial entry.

Requirement for the Rac GTPase in Chlamydia trachomatis invasion of non-phagocytic cells.

Chlamydia &egrave; Gram-negativi patogeni intracellulari obbligati a cui accedere ad un ambiente intracellulare &egrave; fondamentale per la sopravvivenza e la replica. A tal fine, Chlamydia &egrave; evoluti mezzo estremamente efficiente per invadere le cellule nonphagocytic. Per chiarire il macchinario cell host utilizzato da Chlamydia trachomatis in invasione, abbiamo esaminato i ruoli dei membri della famiglia di GTPasi Rho nell&#39;interiorizzazione dei corpi elementari di clamidia. Dell&#39;associazione dei corpi elementari sulla superficie delle cellule, actina &egrave; reclutato rapidamente ai siti di interiorizzazione. Membri della famiglia Rho GTPasi sono frequentemente coinvolti nel reclutamento localizzato di actina. Clostridiale tossina B, che &egrave; un noto inibitore enzimatico del Rac, Cdc42 e Rho GTPases, ridotto significativamente da clamidia invasione delle cellule HeLa. Espressione di costrutti negativi dominante nelle cellule HeLa ha rivelato che assorbimento da clamidia dipendeva dal Rac, ma non su Cdc42 o RhoA. RAC ma non Cdc42 &egrave; stato trovato per essere attivato da un attaccamento da clamidia. L&#39;effetto dominante negativo Rac espressione su assorbimento da clamidia si manifesta attraverso l&#39;inibizione del reclutamento di actina ai siti di entrata da clamidia. Gli studi che utilizzano costrutti fusione proteina fluorescente verde di Rac, Cdc42 e RhoA, ha mostrato Rac per essere l&#39;unico membro della famiglia Rho GTPasi reclutarono per il sito di entrata da clamidia.

Requisito per la Rac GTPase in invasione di Chlamydia trachomatis di cellule non fagocitiche.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8907;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x504F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x672B;&#x5C3E;&#x306B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; nonphagocytic &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4FB5;&#x5165;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30FB; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;&#x4FB5;&#x7565;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5229;&#x7528;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x5C0F;&#x5B66;&#x6821;&#x4F53;&#x306E;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Rho gtp &#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5C0F;&#x5B66;&#x6821;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x5185;&#x9762;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rho GTPase &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x3067;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x4FB5;&#x7565; HeLa &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x963B;&#x5BB3; Rac&#x3001;Cdc42&#x3001;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Rho gtp &#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x5C5E;&#x6BD2;&#x7D20; B &#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3002;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x8CA0;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8; HeLa &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F; Rac&#x3001;Cdc42 &#x307E;&#x305F;&#x306F; RhoA &#x305D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Rac&#x3001;Cdc42 &#x306A;&#x3044;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x5206;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x306B;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x5426;&#x5B9A; Rac &#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x660E;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x878D;&#x5408;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E; Rac&#x3001;Cdc42 &#x3068; Rac Rho GTPase &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; RhoA &#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x7814;&#x7A76;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#x3002;

Rac GTPase &#x975E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x2010; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B9;&#x4FB5;&#x7565;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x3002;

Chlamydiae&#xB294; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xC758;&#xBB34; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xACFC; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC704;&#xD574; chlamydiae nonphagocytic &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCE68;&#xC785; &#xD558;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xB2E8;&#xC744; &#xC9C4;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis &#xCE68;&#xACF5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xAE30;&#xACC4; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC; chlamydial &#xCD08;&#xB4F1;&#xD559;&#xAD50; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xC758; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xC5D0; Rho GTPase &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xCD08;&#xB4F1;&#xD559;&#xAD50; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB294; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xCDA9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rho GTPase &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC740; &#xC790;&#xC8FC; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xCC44;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;. Rac, Cdc42 &#xBC0F; Gtpases&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC778; clostridial &#xB3C5; &#xC18C; B&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; chlamydial &#xCE68;&#xACF5; &#xD5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;. &#xD5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815; &#xAD6C;&#xBB38; &#xD45C;&#xD604; &#xBC1D;&#xD600; chlamydial &#xAE00;&#xADC0;&#xB294; Rac&#xC5D0; Cdc42 &#xB610;&#xB294; Rhoa&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4;. Rac&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; Cdc42 chlamydial &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB420; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. Chlamydial &#xAE00;&#xADC0;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Rac &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; chlamydial &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB85C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC01; &#xC131;. Rac, Cdc42 &#xBC0F; RhoA, Rho GTPase &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; Rac &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD4E8;&#xC804; &#xAD6C;&#xBB38;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5F0;&#xAD6C; chlamydial &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xCDA9;.

Rac GTPase &#xBE44; phagocytic &#xC140;&#xC758; &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis &#xCE68;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Clamidias son bacterias Gram negativas pat&oacute;genos intracelulares obligados a que el acceso a un ambiente intracelular es fundamental para su supervivencia y la replicaci&oacute;n. Para ello, clamidias han evolucionado medios extremadamente eficientes de invadir las c&eacute;lulas nonphagocytic. Para aclarar la maquinaria de la c&eacute;lula hu&eacute;sped utilizada por Chlamydia trachomatis en invasi&oacute;n, examinamos los roles de los miembros de la familia Rho GTPasa en la internalizaci&oacute;n de los cuerpos elementales por clamidia. Sobre la Uni&oacute;n de cuerpos elementales en la superficie celular, actina es reclutado r&aacute;pidamente a los sitios de internalizaci&oacute;n. Miembros de la familia Rho GTPasa participan con frecuencia en reclutamiento localizada de la actina. Clostridial toxina B, que es un inhibidor enzim&aacute;tico conocido de Rac, Cdc42 y GTPasas Rho, redujo significativamente por invasi&oacute;n de c&eacute;lulas HeLa. Expresi&oacute;n de construcciones negativas dominantes en c&eacute;lulas HeLa revel&oacute; que la absorci&oacute;n por clamidia depend&iacute;a de la Rac, pero no en Cdc42 o RhoA. RAC pero no Cdc42 fue encontrado para ser activado por clamidia accesorio. El efecto de la expresi&oacute;n de Rac negativo dominante en la aceptaci&oacute;n de la clamidia se manifiesta a trav&eacute;s de la inhibici&oacute;n de reclutamiento de la actina a los sitios de entrada por clamidia. Estudios utilizando construcciones de fusi&oacute;n de prote&iacute;na verde fluorescente de Rac, Cdc42 y RhoA, demostrada Rac para ser el &uacute;nico miembro de la familia Rho GTPasa reclutaron en el sitio de entrada por clamidia.

Requisito para el Rac GTPase en invasi&oacute;n de Chlamydia trachomatis de c&eacute;lulas no fagoc&iacute;ticas.

&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x662F;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x541E;&#x7684;&#x6613;&#x771F;&#x6838;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9884;&#x7559;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6C99;&#x773C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x5206;&#x6CCC;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;tarp &#x8BA1;&#x5212;&#xFF0C;&#x8981;&#x628A;&#x548C;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5728;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6761;&#x76EE;&#x548C;&#x4E0E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x662F;&#x541E;&#x62DB;&#x8058;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;C.&#x6C99;&#x773C; tarp &#x8BA1;&#x5212;&#x62E5;&#x6709;&#x516D;&#x4E2A;&#x76F4;&#x63A5;&#x5230;&#x5927;&#x7EA6; 50 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x91CD;&#x590D;&#x3002;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x662F;&#x5728;&#x6B64;&#x91CD;&#x590D;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709; ectopically &#x8868;&#x793A;&#x4E0D;&#x540C;&#x57DF;&#x7684; Tarp HeLa 229 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x8BC1;&#x660E;&#x8BE5;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x65F6;&#x53D1;&#x751F;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5728;&#x91CD;&#x590D;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x5185;, &#x62DB;&#x8058;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D; C &#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x5DF2;&#x7F16;&#x5E8F;&#x7684;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8868;&#x660E;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x90FD;&#x5305;&#x542B; ortholog tarp &#x8BA1;&#x5212;&#x7684;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x8863;&#x539F;&#x4F53; muridarum&#x3001; Chlamydophila caviae &#x548C; Chlamydophila &#x80BA;&#x708E;&#x95EE;&#x9898;&#x8D44;&#x4EA7;&#x6551;&#x52A9;&#x8BA1;&#x5212;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5927;&#x578B;&#x7684;&#x91CD;&#x590D;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x6CD5;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528; antiphosphotyrosine &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x663E;&#x793A;&#x916A;&#x6C28;&#x9178; C.muridarum&#x3001; C.caviae &#x548C; C.&#x80BA;&#x708E;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x5165;&#x73B0;&#x573A;&#x7684;&#x6CA1;&#x6709;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6BCF;&#x4E00;&#x7269;&#x79CD;&#x540C;&#x6837;&#x65B0;&#x5175;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5168;&#x957F; C.&#x6C99;&#x773C;&#x548C; C.caviae Tarp &#x7684;&#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x62DB;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4F46;&#x53EA;&#x6709; C.&#x6C99;&#x773C; tarp &#x8BA1;&#x5212;&#x662F;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; Tarp &#x7684; C &#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x662F;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x662F;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x660E;&#x5177;&#x4F53;&#x5173;&#x8054; C.&#x6C99;&#x773C;&#x7684;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x3001; &#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;

&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D; tarp &#x8BA1;&#x5212;&#x662F;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x548C;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;

Chlamydiae are obligate intracellular pathogens that efficiently induce their endocytosis by susceptible eukaryotic host cells. Recently, a Chlamydia trachomatis type III secreted effector protein, Tarp, was found to be translocated and tyrosine phosphorylated at the site of entry and associated with the recruitment of actin that coincides with endocytosis. C. trachomatis Tarp possesses up to six direct repeats of approximately 50 amino acids each. The majority of the tyrosine residues are found within this repeat region. Here we have ectopically expressed distinct domains of Tarp in HeLa 229 cells and demonstrated that tyrosine phosphorylation occurs primarily within the repeat region, while recruitment of actin is mediated by the C-terminal domain of the protein. A comparison of other sequenced chlamydial genomes revealed that each contains an ortholog of Tarp, although Chlamydia muridarum, Chlamydophila caviae, and Chlamydophila pneumoniae Tarp lack the large repeat region. Immunofluorescence and immunoblotting using an antiphosphotyrosine antibody show no evidence of phosphotyrosine at the site of entry of C. muridarum, C. caviae, and C. pneumoniae, although each species similarly recruits actin. Ectopic expression of full-length C. trachomatis and C. caviae Tarp confirmed that both recruit actin but only C. trachomatis Tarp is tyrosine phosphorylated. The data indicate that the C-terminal domain of Tarp is essential for actin recruitment and that tyrosine phosphorylation may not be an absolute requirement for actin recruitment. The results further suggest the potential for additional, unknown signal transduction pathways associated specifically with C. trachomatis.

Tyrosine phosphorylation of the chlamydial effector protein Tarp is species specific and not required for recruitment of actin.

Les Chlamydiae sont des pathog&egrave;nes intracellulaires obligatoires qui induisent efficacement leur endocytose par des cellules h&ocirc;tes eucaryotes sensibles. R&eacute;cemment, un Chlamydia trachomatis type III s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e prot&Atilde;, b&acirc;che de protection, s&#39;est av&eacute;r&eacute; &ecirc;tre transloqu&eacute; et tyrosine phosphoryl&eacute;es au site d&#39;entr&eacute;e et associ&eacute; au recrutement de l&#39;actine qui co&iuml;ncide avec l&#39;endocytose. Chlamydia trachomatis que TARP poss&egrave;de jusqu&#39;&agrave; six direct r&eacute;p&egrave;te chaque environ 50 acides amin&eacute;s. La majorit&eacute; des r&eacute;sidus tyrosine se trouvent dans cette r&eacute;gion de r&eacute;p&eacute;tition. Ici nous avons de fa&ccedil;on ectopique exprim&eacute; des domaines distincts de b&acirc;che de protection dans les cellules HeLa 229 et d&eacute;montr&eacute; que la phosphorylation de tyrosine se produit principalement dans la r&eacute;gion de r&eacute;p&eacute;tition, alors que le recrutement de l&#39;actine est m&eacute;di&eacute;e par le domaine C-terminal de la prot&eacute;ine. Une comparaison des autres g&eacute;nomes s&eacute;quenc&eacute;s chlamydiales a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que chacun contient un orthologue de b&acirc;che de protection, bien que Chlamydia muridarum, Chlamydophila caviae et Chlamydophila pneumoniae Tarp manquent de la grande r&eacute;gion de r&eacute;p&eacute;tition. Immunofluorescence et immunoblotting utilisant un anticorps antiphosphotyrosine ne montrent aucun signe de la phosphotyrosine au site d&#39;entr&eacute;e de c. muridarum, c. caviae, c. pneumoniae, bien que chaque esp&egrave;ce de m&ecirc;me recrute actine. L&#39;expression ectopique de Chlamydia trachomatis pleine longueur et c. caviae Tarp a confirm&eacute; que les deux recrutent actine mais seulement c. trachomatis Tarp est tyrosine phosphoryl&eacute;e. Les donn&eacute;es indiquent que le domaine C-terminal de b&acirc;che de protection est indispensable pour le recrutement de l&#39;actine et que la phosphorylation de tyrosine peut ne pas &ecirc;tre une exigence absolue pour le recrutement de l&#39;actine. De plus, les r&eacute;sultats sugg&egrave;rent le potentiel pour des voies de transduction de signal suppl&eacute;mentaire, inconnus li&eacute;s sp&eacute;cifiquement &agrave; c. trachomatis.

La phosphorylation de tyrosine des prot&eacute;ines effectrices Chlamydia Tarp est esp&egrave;ces sp&eacute;cifiques et non requis pour le recrutement de l&#39;actine.

Tyrosinphosphorylierung des Chlamydien-Effektor-Protein Tarp ist artspezifisch und nicht notwendig f&#xFC;r die Rekrutierung von Aktin.

Chlamydia &egrave; obligati patogeni intracellulari che inducono in modo efficiente la loro endocitosi dalle cellule ospiti eucarioti sensibili. Recentemente, una Chlamydia trachomatis tipo III secernuto proteina, Tarp, &egrave; stato trovato per essere traslocata e tirosina fosforilata presso il sito di entrata e associati con l&#39;assunzione di actina che coincide con l&#39;endocitosi. C. trachomatis che TARP possiede fino a sei diretta ripete di circa 50 gli amminoacidi. La maggior parte dei residui di tirosina si trova all&#39;interno di questa regione di ripetizione. Qui abbiamo ectopically espresso distinti domini di Tarp nelle cellule HeLa 229 e dimostrato tale fosforilazione della tirosina avviene principalmente all&#39;interno della regione di ripetizione, mentre l&#39;assunzione di actina &egrave; mediata dal dominio C-terminale della proteina. Un confronto di altri genomi sequenziati da clamidia ha rivelato che ognuno contiene un ortholog del Tarp, sebbene Chlamydia muridarum, Chlamydophila caviae e Chlamydophila pneumoniae Tarp manca la grande regione di ripetizione. Immunofluorescenza e immunoblotting utilizzando un anticorpo antiphosphotyrosine non mostrare alcuna prova di phosphotyrosine presso il sito di entrata del c. muridarum, c. caviae e c. pneumoniae, anche se ogni specie similmente reclute dell&#39;actina. Espressione ectopica di full-length c. trachomatis e c. caviae Tarp ha confermato che entrambi reclutare actina ma solo c. trachomatis Tarp &egrave; tirosina fosforilata. I dati indicano che il dominio C-terminale del Tarp &egrave; essenziale per l&#39;assunzione di actina e tale fosforilazione della tirosina pu&ograve; non essere un requisito assoluto per l&#39;assunzione di actina. Ulteriormente i risultati suggeriscono il potenziale di vie di trasduzione del segnale supplementare, sconosciuto associati in particolare con la Chlamydia trachomatis.

La fosforilazione della tirosina della proteina effettrice da clamidia Tarp &egrave; specie specifico e non richiesti per l&#39;assunzione di actina.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x771F;&#x6838;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3092;&#x7FA9;&#x52D9;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x2010; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B9; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x5206;&#x6CCC;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3057;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C. &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x6240;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x307E;&#x3067;&#x7D04; 50 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x5404;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x3092;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; 229 HeLa &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x305D;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x578B;&#x306E;&#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; muridarum&#x3001;Chlamydophila &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3001;Chlamydophila &#x80BA;&#x708E;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x304C;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4ED6;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x7A2E;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x65B0;&#x5175;&#x304C;&#x86CD;&#x5149;&#x6297;&#x4F53;&#x6CD5;&#x3068; antiphosphotyrosine &#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x514D;&#x75AB;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; c. muridarum&#x3001;C. &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x304A;&#x3088;&#x3073; C. &#x80BA;&#x708E;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9; C. &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073; C. &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x4E21;&#x65B9;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8; &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x307F; C. &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x52DF;&#x96C6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D76;&#x5BFE;&#x8981;&#x4EF6;&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5177;&#x4F53;&#x7684; C. &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3001;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x7A2E;&#x7279;&#x5B9A;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Chlamydiae&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; endocytosis &#xCDE8;&#xC57D; &#xC9C4; &#xD575; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xC758;&#xBB34; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;. &#xCD5C;&#xADFC;, &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544; trachomatis &#xC720;&#xD615; III &#xBD84; &#xBE44; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xBC29;&#xC218; &#xD3EC;, translocated &#xB420; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4; &#xACE0; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; &#xB9D0;&#xB77C; endocytosis&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xCC44;&#xC6A9;. C. trachomatis &#xBC29;&#xC218; &#xD3EC; &#xCD5C;&#xB300; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC18C;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xAC01; &#xC57D; 50 &#xAC1C;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; &#xBC18;&#xBCF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC601;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; ectopically &#xD5EC;&#xB7EC; 229 &#xC140;&#xC5D0; &#xBC29;&#xC218; &#xD3EC;&#xC758; &#xACE0;&#xC720; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC601;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; chlamydial &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xBE44;&#xB85D; &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544; muridarum, Chlamydophila caviae, &#xBC0F; Chlamydophila &#xADE0; &#xBC29;&#xC218; &#xBD80;&#xC871; &#xD070; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC601;&#xC5ED; &#xAC01;&#xAC01; &#xBC29;&#xC218;&#xC758; ortholog &#xD3EC;&#xD568; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC640; immunoblotting antiphosphotyrosine &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC01; &#xC885; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558; &#xAC8C; &#xC2E0;&#xBCD1; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; phosphotyrosine C. muridarum, C. caviae, C. &#xADE0;&#xC758; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; C. trachomatis C. caviae &#xBC29;&#xC218; &#xD3EC;&#xC758; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD; &#xBAA8;&#xB450; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xB9CC; C. trachomatis &#xBC29;&#xC218; &#xD3EC;&#xB294; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated &#xD655;&#xC778;. &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xBC29;&#xC218; &#xC2DC;&#xD2B8;&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; &#xADF8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC808;&#xB300;&#xC801; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC5D0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC744; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xCD94;&#xAC00; C. trachomatis&#xC640; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xCD94;&#xAC00;, &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC29;&#xC218; &#xD3EC; chlamydial effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xD558;&#xC9C0; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC885;.

Clamidias son pat&oacute;genos intracelulares obligados que inducen eficientemente su endocitosis por las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped susceptible de eucariotas. Recientemente, un Chlamydia trachomatis tipo III secretada efectoras prote&iacute;na, lona, fue encontrado para ser trasladadas y tirosina fosforilados en el sitio de entrada y asociados con la contrataci&oacute;n de la actina que coincide con la endocitosis. C. trachomatis que lona posee hasta seis directo repite de aproximadamente 50 amino&aacute;cidos cada. La mayor&iacute;a de los residuos tirosina se encuentra en esta regi&oacute;n de repetici&oacute;n. Aqu&iacute; tenemos ect&oacute;picamente expres&oacute; distintos dominios del Tarp en c&eacute;lulas HeLa 229 y demostr&oacute; la fosforilaci&oacute;n de la tirosina que ocurre principalmente en la regi&oacute;n de repetici&oacute;n, mientras que la contrataci&oacute;n de la actina es mediada por el dominio c-terminal de la prote&iacute;na. Una comparaci&oacute;n de otros genomas secuenciados de clamidia revel&oacute; que cada uno contiene un ort&oacute;logo de lona, aunque muridarum Chlamydia y Chlamydophila caviae Chlamydophila pneumoniae Tarp carecen de la gran regi&oacute;n de repetici&oacute;n. Inmunofluorescencia e immunoblotting usando un anticuerpo antiphosphotyrosine no muestran evidencia de fosfotirosina en el sitio de entrada de C. muridarum, C. caviae y C. pneumoniae, aunque cada especie igualmente recluta actina. La expresi&oacute;n ect&oacute;pica de larga duraci&oacute;n C. trachomatis y C. caviae Tarp confirm&oacute; que ambos reclutan actina pero s&oacute;lo C. trachomatis Tarp es tirosina fosforilado. Los datos indican que el dominio c-terminal de lona es esencial para el reclutamiento de la actina y la fosforilaci&oacute;n de la tirosina no sea un requisito absoluto para el reclutamiento de actina. Los resultados m&aacute;s sugieren la posibilidad de v&iacute;as de transducci&oacute;n de se&ntilde;al adicional, desconocido asociada espec&iacute;ficamente con C. trachomatis.

Fosforilaci&oacute;n de la tirosina de la prote&iacute;na efectora por clamidia Tarp es especie espec&iacute;fica y no es necesario para la contrataci&oacute;n de la actina.

&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x57FA;&#x7840;&#x6559;&#x80B2;&#x673A;&#x6784; (EBs) &#x662F;&#x7531;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x4E3A;&#x771F;&#x6838; H1 &#x7A33;&#x5B9A;&#x4E0B;&#x6765;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; Hc1 &#x548C; Hc2&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x53EA;&#x5728;&#x4F34;&#x7F51;&#x7EB9;&#x673A;&#x6784; (RBs) &#x5C06;&#x6539;&#x7EC4;&#x4E3A;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684; EBs &#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x540E;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;Hc1 &#x548C; Hc2 &#x4E3B;&#x8981;&#x5728;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x5EFA;&#x7ACB; nucleoid &#x7ED3;&#x6784;&#x4EE5;&#x53CA;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0B;&#x8C03; RBs &#x56DE; EBs &#x533A;&#x5206;&#x5F00;&#x6765;&#x3002;&#x5BF9;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684; Hc1 &#x5F71;&#x54CD;&#x9700;&#x8981;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x4E25;&#x683C;&#x63A7;&#x5236; Hc1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;Hc1 &#x8868;&#x8FBE;&#x53CA;&#x6D3B;&#x6027;&#x8C03;&#x8282;&#x4ECE;&#x800C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4E3A; post-transcriptionally&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6B64;&#x5904;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x68C0;&#x67E5;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6D88;&#x6781;&#x89C4;&#x7BA1; Hc1 &#x5408;&#x6210;&#x5C0F;&#x76D1;&#x7BA1; RNA (&#x8428;&#x6469;&#x4E9A;)&#x3002;&#x65AF;&#x5C14;&#x7EB3;&#x4E0E; hctA&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6709; Hc1&#xFF0C;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684;&#x5171;&#x8868;&#x8FBE;&#x6291;&#x5236; Hc1 &#x7FFB;&#x8BD1;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD; hctA mRNA &#x8F6C;&#x5F55;&#x6216;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;IhtA (&#x6291;&#x5236;&#x5242; hctA &#x7FFB;&#x8BD1;) &#x53EA;&#x6709;&#x5728;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; RBs &#x5728;&#x573A;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136; Hc1 &#x5728;&#x573A;&#x53EA;&#x6709;&#x5728;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; EBs&#x3002;&#x671F;&#x95F4;&#x611F;&#x67D3; IhtA&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; Hc1&#xFF0C;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5728; RBs &#x548C;&#x662F;&#x7F16;&#x7801;&#xFF0C;&#x800C; Hc1 &#x5219;&#x662F; EB &#x5206;&#x5316;&#x540E; RB &#x589E;&#x9AD8;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; IhtA &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5168;&#x7403;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7535;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x63A7;&#x5236;&#x5230; EBs RBs &#x5728;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;

&#x5C0F; RNA &#x6291;&#x5236;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x6837;&#x86CB;&#x767D; Hc1 &#x4E2D;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;

The chromatin of chlamydial elementary bodies (EBs) is stabilized by proteins with sequence homology to eukaryotic H1. These histone homologues, termed Hc1 and Hc2, are expressed only during the late stages of the chlamydial life cycle concomitant with the reorganization of reticulate bodies (RBs) into metabolically inactive EBs. Hc1 and Hc2 play a major role in establishment of nucleoid structure as well as in downregulation of gene expression as RBs differentiate back to EBs. The effects of Hc1 on gene expression patterns requires that chlamydiae strictly control Hc1 activity. Hc1 expression and activity are thus regulated transcriptionally as well as post-transcriptionally. We describe here a small regulatory RNA (sRNA) that acts as an additional checkpoint to negatively regulate Hc1 synthesis. Coexpression of the sRNA with hctA, the gene that encodes Hc1, in Escherichia coli inhibited Hc1 translation but did not affect hctA mRNA transcription or stability. IhtA (inhibitor of hctA translation) was present only in purified RBs while Hc1 was present only in purified EBs. During infection IhtA, but not Hc1, was present in RBs and was downregulated while Hc1 was upregulated upon RB to EB differentiation. Thus, we propose that IhtA is part of a global regulatory circuit that controls differentiation of RBs to EBs during the chlamydial life cycle.

A small RNA inhibits translation of the histone-like protein Hc1 in Chlamydia trachomatis.

La chromatine des corps &eacute;l&eacute;mentaires chlamydiales (EBs) est stabilis&eacute;e par des prot&eacute;ines avec une homologie de s&eacute;quence &agrave; H1 eucaryotes. Ces homologues d&#39;histone, appel&eacute;s Hc1 et Hc2, sont exprim&eacute;s uniquement durant les derni&egrave;res phases du cycle de vie Chlamydia concomitant avec la r&eacute;organisation des corps r&eacute;ticul&eacute;s (RBs), EBs m&eacute;taboliquement inactives. Hc1 et Hc2 jouent un r&ocirc;le majeur dans la mise en place d&#39;une structure de nucl&eacute;o&iuml;de ainsi qu&#39;une diminution de l&#39;expression g&eacute;nique comme RBs diff&eacute;rencient &agrave; l&#39;EBs. Les effets de Hc1 sur les profils d&#39;expression g&eacute;nique requiert que les chlamydiae contr&ocirc;lent strictement l&#39;activit&eacute; de Hc1. Activit&eacute; et Hc1 expression sont r&eacute;glement&eacute;es ainsi transcriptionnellement ainsi que post-traductionnelle. Nous d&eacute;crivons ici un petit ARN r&eacute;glementaire (sRNA) qui agit comme un point de contr&ocirc;le suppl&eacute;mentaire pour r&eacute;guler n&eacute;gativement la synth&egrave;se Hc1. Coexpression de la sRNA avec hctA, le g&egrave;ne qui code la Hc1, chez Escherichia coli inhibe la traduction Hc1 mais n&#39;affecte pas la transcription des ARNm hctA ou la stabilit&eacute;. IhtA (inhibiteur de la traduction de hctA) &eacute;tait pr&eacute;sent uniquement dans la purifi&eacute; RBs alors que Hc1 &eacute;tait pr&eacute;sent uniquement dans la purifi&eacute; EBs. Au cours de l&#39;infection IhtA, mais pas de Hc1, &eacute;tait pr&eacute;sent dans RBs et diminu&eacute;e tandis que Hc1 a augment&eacute; &agrave; RB &agrave; la diff&eacute;renciation de l&#39;EB. Ainsi, nous proposons que IhtA fait partie d&#39;un circuit de r&eacute;gulation global qui contr&ocirc;le la diff&eacute;renciation de RBs &agrave; l&#39;EBs au cours du cycle de vie Chlamydia.

Un petit ARN inhibe la traduction de la prot&eacute;ine histone Hc1 &agrave; Chlamydia trachomatis.

Das Chromatin der Chlamydien elementaren stellen (EBs) wird durch Proteine mit Sequenz-Homologie zu eukaryotischen H1 stabilisiert. Diese Histon-Homologen, genannt Hc1 und Hc2, werden nur w&auml;hrend der sp&auml;ten Stadien der Chlamydien Lebenszyklus der damit einhergehende mit der Reorganisation der EB stellen (RBs) in metabolisch inaktive EBs ausgedr&uuml;ckt. Hc1 und Hc2 spielen eine wichtige Rolle im Aufbau Kern&auml;quivalent Struktur ebenso wie in Heraufregulation des Genausdrucks RBs zur&uuml;ck zu EBs zu unterscheiden. Die Auswirkungen der Hc1 auf Genausdruck Muster erfordert, dass Chlamydien streng Hc1-Aktivit&auml;ten zu kontrollieren. Hc1 Ausdruck und Aktivit&auml;t sind somit transcriptionally sowie als post-transcriptionally geregelt. Wir beschreiben hier eine kleine regulatorische RNA (sRNA), die als ein zus&auml;tzlicher Pr&uuml;fpunkt negativ regulieren Hc1-Synthese dient. Coexpression von sRNA mit HctA, das Gen, das Hc1, in Escherichia coli kodiert gehemmt Hc1 &Uuml;bersetzung aber hatte keine Auswirkungen auf die HctA-mRNA-Transkription oder Stabilit&auml;t. IhtA (Inhibitor der HctA &Uuml;bersetzung) war nur im gereinigten RBs Hc1 nur in gereinigtem EBs vorhanden. W&auml;hrend der Infektion IhtA, aber nicht Hc1, war im RBs und Downregulated w&auml;hrend Hc1 herraufreguliert auf RB zu EB Differenzierung war. Daher schlagen wir vor, dass IhtA ist Teil einer globalen Regulierung-Schaltung, die Differenzierung der RBs zu EBs den Chlamydien Lebenszyklus steuert.

Ein kleines RNA hemmt &Uuml;bersetzung des Histon-&auml;hnlichen Proteins Hc1 Chlamydia Trachomatis.

La cromatina di corpi elementari da clamidia (EBs) &egrave; stabilizzata da proteine con omologia di sequenza per H1 eucariotica. Questi cromosomi omologhi dell&#39;istone, definiti Hc1 e Hc2, sono espressi solo durante le fasi del ciclo di vita da clamidia concomitante con la riorganizzazione dei corpi reticolari (RBs) in EBs metabolicamente inattivi. Hc1 e Hc2 svolgono un ruolo importante nella creazione della struttura del nucleoide cos&igrave; come in downregulation of gene expression come RBs differenziare torna a EBs. Gli effetti di Hc1 sul pattern di espressione genica richiede che Chlamydia controlla rigorosamente Hc1 attivit&agrave;. Attivit&agrave; e Hc1 espressione cos&igrave; sono regolati transcriptionally cos&igrave; come post-transcriptionally. Descriviamo qui un piccolo regulatory RNA (sRNA) che agisce come un&#39;ulteriore checkpoint di regolare negativamente Hc1 sintesi. Coexpression di sRNA con hctA, il gene che codifica Hc1, in Escherichia coli inibito Hc1 traduzione ma non incidano sulla trascrizione di mRNA hctA o stabilit&agrave;. IhtA (inibitore della traduzione hctA) era presente solo nel RBs purificata mentre Hc1 era presente solo in EBs purificato. Durante l&#39;infezione IhtA, ma non Hc1, fu presente in RBs e downregolata mentre Hc1 era sovraregolati su RB alla differenziazione di EB. Cos&igrave;, noi proponiamo che IhtA fa parte di un circuito di regolamentazione globale che controlla la differenziazione di RBs a EBs durante il ciclo di vita da clamidia.

Un piccolo RNA inibisce la traduzione della proteina Hc1 histone-come in Chlamydia trachomatis.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x5C0F;&#x5B66;&#x6821;&#x4F53; (EBs) &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x914D;&#x5217;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E; H1 &#x3068;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Hc1 &#x3068; Hc2 &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x306E;&#x7DB2;&#x72B6;&#x4F53; (RBs) &#x306E;&#x518D;&#x7DE8;&#x306B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7684;&#x306B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027; EBs &#x3067;&#x4ED8;&#x968F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x6BB5;&#x968E;&#x4E2D;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Hc1 &#x3068; Hc2 &#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;RBs EBs &#x306B;&#x623B;&#x3063;&#x3066;&#x533A;&#x5225;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x6838;&#x69D8;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3067;&#x518D;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059; Hc1 &#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306F; Hc1 &#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Hc1 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3084;&#x6D3B;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3001;post-transcriptionally &#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF; Hc1 &#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5C0F;&#x578B;&#x898F;&#x5236; RNA (&#x30B9;&#x30EB;&#x30CA;) &#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30EB;&#x30CA;&#x3068; hctA&#x3001;Hc1&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5171;&#x767A;&#x73FE; Hc1 &#x7FFB;&#x8A33;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;hctA mRNA &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;Hc1 &#x7CBE;&#x88FD; EBs &#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x304C; IhtA &#xFF08;hctA &#x7FFB;&#x8A33;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#xFF09; &#x7CBE;&#x88FD; RBs &#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x611F;&#x67D3; IhtA&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x3044; Hc1 &#x4E2D;&#x306B;&#x306F;&#x3001;RBs &#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3001;Hc1 RB &#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x4EA2;&#x9032; EB &#x5206;&#x5316;&#x4E2D; downregulated &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;IhtA &#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x4E2D;&#x306B; RBs EBs &#x3078;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x898F;&#x5236;&#x56DE;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x5C0F;&#x3055;&#x306A; RNA &#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30FB; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x69D8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; Hc1 &#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Chromatin chlamydial &#xCD08;&#xB4F1;&#xD559;&#xAD50; &#xC2DC;&#xCCB4; (EBs)&#xC758; &#xC9C4; &#xD575; H1 &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; homology&#xB85C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC548;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. Hc1 &#xBC0F; Hc2, &#xB418; &#xB098; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; homologues&#xC740; metabolically &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; Ebs&#xB85C; reticulate &#xC2DC;&#xCCB4; (RBs)&#xC758; &#xAC1C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; chlamydial &#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC758; &#xD6C4;&#xBC18; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hc1 &#xBC0F; Hc2 RBs Ebs&#xB85C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xAD6C;&#xBD84;&#xC73C;&#xB85C; &#xD575;&#xC591;&#xCCB4; &#xAD6C;&#xC870; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; downregulation&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xD070; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560;. &#xC9C4; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; Hc1 &#xD6A8;&#xACFC; chlamydiae Hc1 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hc1 &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; transcriptionally&#xC73C;&#xB85C; post-transcriptionally &#xADDC;&#xC81C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC791;&#xC740; &#xADDC;&#xC81C; RNA (sRNA) &#xC5ED;&#xD560; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Hc1 &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xCD94;&#xAC00;&#xC801;&#xC778; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. HctA, &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; Hc1, &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; Srna&#xC758; coexpression Hc1 &#xBC88;&#xC5ED;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; hctA mRNA &#xC804;&#xC0AC; &#xB610;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. IhtA (hctA &#xBC88;&#xC5ED;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C;)&#xB294; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; Rbs&#xC5D0;&#xB9CC; hc1&#xB294; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; Ebs&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xAC10;&#xC5FC; IhtA, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; Hc1 &#xB3D9;&#xC548; Rbs&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; Hc1 EB &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; RB upregulated &#xB3D9;&#xC548; downregulated &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; IhtA chlamydial &#xC218;&#xBA85; &#xC8FC;&#xAE30; &#xB3D9;&#xC548; RBs Ebs&#xB85C;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xADDC;&#xC81C; &#xD68C;&#xB85C;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC791;&#xC740; RNA &#xAC19;&#xC740; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Hc1 &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis&#xC5D0;&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

La cromatina de cuerpos elementales por clamidia (EBs) es estabilizada por prote&iacute;nas con homolog&iacute;a de secuencia H1 eucariotas. Estos hom&oacute;logos de histona, denominados Hc1 y Hc2, expresan s&oacute;lo durante las &uacute;ltimas etapas del ciclo vital por clamidia concomitante con la reorganizaci&oacute;n de los cuerpos reticulares (RBs) en EBs metab&oacute;licamente inactivo. Hc1 y Hc2 juegan un papel importante en el establecimiento de la estructura del nucleoide, as&iacute; como en la regulaci&oacute;n a la baja de la expresi&oacute;n g&eacute;nica como RBs distinguen a EBs. Los efectos de Hc1 sobre patrones de expresi&oacute;n g&eacute;nica requiere que clamidias controlan estrictamente Hc1 actividad. Actividad y expresi&oacute;n de Hc1 as&iacute; se regulan transcripcionalmente as&iacute; como post-transcriptionally. Aqu&iacute; describimos un peque&ntilde;o arn regulador (sRNA) que act&uacute;a como un punto de control adicional para regular negativamente la s&iacute;ntesis de Hc1. Coexpresi&oacute;n de la sRNA con hctA, el gen que codifica Hc1, en Escherichia coli inhibe Hc1 traducci&oacute;n pero no afect&oacute; hctA transcripci&oacute;n de mRNA o estabilidad. IhtA (inhibidor de la traducci&oacute;n hctA) estaba presente solamente en RBs purificadas mientras Hc1 estaba presente solamente en EBs purificada. Durante la infecci&oacute;n IhtA, pero no de Hc1, estaba presente en RBs y estaba regulada mientras Hc1 se alza sobre RB para diferenciaci&oacute;n EB. Por lo tanto, proponemos que el IhtA es parte de un circuito regulador global que controla la diferenciaci&oacute;n de RBs a EBs durante el ciclo de vida por clamidia.

Un peque&ntilde;o arn inhibe la traducci&oacute;n de la prote&iacute;na histona Hc1 en Chlamydia trachomatis.

Tr&aacute;fico de clamidias a lo largo de los microt&uacute;bulos a los microt&uacute;bulos organizaci&oacute;n Centro (COMT) para establecer un nicho intracelular dentro de la c&eacute;lula hu&eacute;sped. Trata a la COMT es dependiente de la dine&iacute;na aunque la funci&oacute;n de activaci&oacute;n y carga vinculaci&oacute;n del complejo dinactina es suplantada por desconocidos por igual. Demostramos que una vez localizado el MTOC, la inclusi&oacute;n de clamidia mantiene una estrecha asociaci&oacute;n con celulares centrosomas. Esta asociaci&oacute;n se sustenta a trav&eacute;s de la mitosis y conduce a un aumento significativo en los centrosomas supernumerarios, polos de huso anormales y defectos de la segregaci&oacute;n cromos&oacute;mica. Clamidiasis as&iacute; pueden conducir a la inestabilidad del cromosoma en las c&eacute;lulas que recuperarse de la infecci&oacute;n.

Chlamydia trachomatis causa centros&oacute;micas defectos resultantes en anormalidades de la segregaci&oacute;n cromos&oacute;mica.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x4EA4;&#x901A;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x958B;&#x653E;&#x7AEF;&#x306E; &#xFF08;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#xFF09; &#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8907;&#x5408;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x8CA8;&#x7269;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x6A5F;&#x80FD;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53D6;&#x3063;&#x3066;&#x4EE3;&#x308F;&#x3089;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x958B;&#x653E;&#x7AEF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x958B;&#x653E;&#x7AEF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30C8;&#x306A;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x305F;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x3057;&#x3001;&#x904E;&#x5270;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3084;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB; &#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x306B; &#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x304B;&#x3089;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30FB; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x4F34;&#x3046; centrosomal &#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Chlamydiae &#xAD50;&#xD1B5; microtubules microtubule &#xC13C;&#xD130; (MTOC) &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD2C8;&#xC0C8; &#xC124;&#xC815; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;. &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; dynactin&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xD654;&#xBB3C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; chlamydial protein(s) &#xBC14; &#xB00C;&#xB294; &#xC885;&#xC18D; &#xD68C;&#xB294; MTOC&#xC5D0; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; MTOC &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;, &#xC77C;&#xB2E8; chlamydial &#xD3EC;&#xD568; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; centrosomes&#xC640; &#xAF49; &#xD611;&#xD68C;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD611;&#xD68C;&#xB294; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;&#xACFC; supernumerary centrosomes, &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE30;&#xB465;&#xACFC; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00;&#xB97C; &#xB048;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; chlamydial &#xAC10;&#xC5FC; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis centrosomal &#xACB0;&#xD568; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xBA74;.

&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6CBF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5411;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5FC3; &#xFF08;MTOC&#xFF09; &#x5EFA;&#x7ACB;&#x5728;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6E38;&#x79BB;&#x7684;&#x5229;&#x57FA;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x590D;&#x6742; dynactin &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x8D27;&#x7269;&#x94FE;&#x63A5;&#x529F;&#x80FD;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x8863;&#x539F;&#x4F53; protein(s) &#x88AB;&#x53D6;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x8D29;&#x8FD0;&#x5230; MTOC &#x662F;&#x808C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x4E00;&#x65E6;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A; MTOC&#xFF0C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5217;&#x5165;&#x4ECD;&#x7EF4;&#x6301;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7684;&#x7D27;&#x5BC6;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x672C;&#x534F;&#x4F1A;&#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x6301;&#x7EED;&#x548C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7F16;&#x5916;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3001; &#x5F02;&#x5E38;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7535;&#x6746;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x9694;&#x79BB;&#x7F3A;&#x9677;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x53EF;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6062;&#x590D;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;

&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x5BFC;&#x81F4; centrosomal &#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x5F02;&#x5E38;&#x800C;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;

Chlamydiae traffic along microtubules to the microtubule organizing center (MTOC) to establish an intracellular niche within the host cell. Trafficking to the MTOC is dynein dependent although the activating and cargo-linking function of the dynactin complex is supplanted by unknown chlamydial protein(s). We demonstrate that once localized to the MTOC, the chlamydial inclusion maintains a tight association with cellular centrosomes. This association is sustained through mitosis and leads to a significant increase in supernumerary centrosomes, abnormal spindle poles, and chromosomal segregation defects. Chlamydial infection thus can lead to chromosome instability in cells that recover from infection.

Chlamydia trachomatis causes centrosomal defects resulting in chromosomal segregation abnormalities.

Trafic le long des microtubules de l&#39;organisation center (MTOC) d&#39;&eacute;tablir un cr&eacute;neau intracellulaire au sein de la cellule h&ocirc;te des microtubules chlamydies. Traite de la MTOC est d&eacute;pendante de dyn&eacute;ine bien que la fonction activation et fret-lier de la DCTN5 complexe est supplant&eacute;e par l&#39;inconnu ou des prot&eacute;ines chlamydiales. Nous d&eacute;montrons que, une fois localis&eacute;s &agrave; la MTOC, l&#39;inclusion de chlamydiale maintienne une association &eacute;troite avec les centrosomes cellulaires. Cette association est soutenue par mitose et conduit &agrave; une augmentation significative des centrosomes surnum&eacute;raires, p&ocirc;les Broche anormale et d&eacute;fauts de s&eacute;gr&eacute;gation chromosomique. Infection &agrave; Chlamydia ainsi peut entra&icirc;ner l&#39;instabilit&eacute; chromosomique dans les cellules qui recouvrent d&#39;une infection.

Chlamydia trachomatis entra&icirc;ne des centrosomes d&eacute;fauts qui entra&icirc;nent des anomalies de la s&eacute;gr&eacute;gation chromosomique.

Chlamydien-Verkehr entlang der Mikrotubuli, die Microtubule organizing Center (MTOC) Herstellen einer intrazellul&auml;ren Nischen innerhalb der Wirtszelle. Menschenhandel zu den MTOC ist Dynein angewiesen, obwohl die aktivierende und Fracht-Verkn&uuml;pfung-Funktion von der komplexen DCTN3 von unbekannten Chlamydien Proteine verdr&auml;ngt wird. Wir zeigen, dass sobald die MTOC lokalisiert, die Chlamydien Aufnahme eine enge Zusammenarbeit mit zellul&auml;ren Centrosomes unterh&auml;lt. Diese Zuordnung wird durch Mitose aufrechtzuerhalten und f&uuml;hrt zu einer erheblichen Zunahme der &uuml;berz&auml;hligen Centrosomes, abnorme Spindel St&ouml;cke und chromosomalen Segregation M&auml;ngel. Chlamydieninfektionen kann daher zu Chromosomen-Instabilit&auml;t in Zellen f&uuml;hren, die von der Infektion zu erholen.

Chlamydia Trachomatis verursacht centrosomal M&auml;ngeln in Trennung der Chromosomen-Anomalien.

Traffico di Chlamydia lungo microtubuli al microtubulo organizzando center (MTOC) per stabilire una nicchia intracellulare all&#39;interno della cellula ospite. Il traffico per il MTOC &egrave; dineina dipendente anche se la funzione di attivazione e collegamento a carico del complesso DCTN1 &egrave; soppiantata da proteine sconosciute da clamidia. Dimostriamo che, una volta localizzato il MTOC, l&#39;inclusione da clamidia mantiene una stretta associazione con cntrosome cellulare. Questa associazione &egrave; sostenuta attraverso mitosi e porta ad un aumento significativo di cntrosome soprannumerari, mandrino anormale polacchi e difetti cromosomici segregazione. Infezione da Clamidia pu&ograve; cos&igrave; portare a instabilit&agrave; cromosomica nelle cellule che recuperare dall&#39;infezione.

Chlamydia trachomatis causa difetti centrosomal che risultano in anomalie cromosomiche segregazione.

&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x662F;&#x9769;&#x5170;&#x9634;&#x6027;&#x9884;&#x7559;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x662F;&#x5176;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x6839;&#x672C;&#x3002;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x9644;&#x4EF6;&#x5230;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; Rac &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; WAVE2 &#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5165;&#x5883;&#x5730;&#x70B9;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#x3002;Co &#x6C89;&#x6DC0;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x4FC3;&#x8FDB; Rac WAVE2 &#x548C; Abi-1&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0E; IRSp53 &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;siRNA &#x67AF;&#x7AED; WAVE2 &#x548C; Abi 1 &#x5E9F;&#x9664;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x7684;&#x8D2B;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5438;&#x6536;&#x3002;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5165;&#x4FB5;&#x8FD8;&#x9700;&#x8981; Arp2/3 &#x590D;&#x6742;&#x8BC1;&#x660E;&#x5176;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x518D;&#x5230;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x9644;&#x4EF6;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x548C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5165;&#x4FB5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EF4;&#x65AF;&#x79D1;&#x7279;-&#x5965;&#x5C14;&#x5FB7;&#x91CC;&#x5947;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5B89;&#x5168;&#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;C.&#x6C99;&#x773C;&#x6FC0;&#x6D3B; Rac&#xFF0C;&#x5E76;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E0E; WAVE2 &#x548C; Abi 1 &#x6765;&#x6FC0;&#x6D3B; Arp2/3 &#x590D;&#x6742;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x91CD;&#x6392;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x3002;

Rac &#x4E0E; Abi 1 &#x548C; WAVE2 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Arp2/3 &#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x4FB5;&#x534E;&#x671F;&#x95F4;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

Chlamydiae are Gram-negative obligate intracellular pathogens to which access to an intracellular environment is fundamental to their development. Chlamydial attachment to host cells induces the activation of the Rac GTPase, which is required for the localization of WAVE2 at the sites of chlamydial entry. Co-immunoprecipitation experiments demonstrated that Chlamydia trachomatis infection promoted the interaction of Rac with WAVE2 and Abi-1, but not with IRSp53. siRNA depletion of WAVE2 and Abi-1 abrogated chlamydia-induced actin recruitment and significantly reduced the uptake of the pathogen by the depleted cells. Chlamydia invasion also requires the Arp2/3 complex as demonstrated by its localization to the sites of chlamydial attachment and the reduced efficiency of chlamydial invasion in cells overexpressing the VCA domain of the neural Wiskott-Aldrich syndrome protein. Thus, C. trachomatis activates Rac and promotes its interaction with WAVE2 and Abi-1 to activate the Arp2/3 complex resulting in the induction of actin cytoskeletal rearrangements that are required for invasion.

Rac interacts with Abi-1 and WAVE2 to promote an Arp2/3-dependent actin recruitment during chlamydial invasion.

Les Chlamydiae sont Gram-n&eacute;gatives pathog&egrave;nes intracellulaires obligatoires auxquels l&#39;acc&egrave;s &agrave; un environnement intracellulaire est essentielle &agrave; leur d&eacute;veloppement. Chlamydiale fixation aux cellules h&ocirc;tes induit l&#39;activation de la Rac GTPase, qui est requis pour la localisation de WAVE2 sur les sites d&#39;entr&eacute;e chlamydiale. Co-immunopr&eacute;cipitation exp&eacute;riences ont d&eacute;montr&eacute; que l&#39;infection &agrave; Chlamydia trachomatis promu l&#39;interaction du Rac WAVE2 et Abi-1, mais pas avec IRSp53. siARN appauvrissement de WAVE2 et Abi-1 abrog&eacute; recrutement chlamydiose induite par l&#39;actine et r&eacute;duit significativement l&#39;absorption de l&#39;agent pathog&egrave;ne par les cellules appauvris. Invasion de chlamydiose exige &eacute;galement le complexe, comme en t&eacute;moigne sa localisation aux sites d&#39;attachement de Chlamydia et de l&#39;efficacit&eacute; r&eacute;duite du chlamydiale invasion dans les cellules surexprimant le domaine VCA de la prot&eacute;ine neuronale Wiskott - Aldrich, syndrome Arp2/3. Ainsi, c. trachomatis active Rac et favorise son interaction avec WAVE2 et Abi-1 pour activer l&#39;Arp2/3 complexes r&eacute;sultant dans l&#39;induction de r&eacute;arrangements du cytosquelette d&#39;actine qui sont requis pour l&#39;invasion.

RAC interagit avec Abi- 1et WAVE2 visant &agrave; favoriser un recrutement d&#39;actine Arp2/3-personnes &agrave; charge au cours de l&#39;invasion de chlamydiale.

Chlamydien sind Gramnegative obligat intrazellul&auml;re Erreger, dem Zugang zu einer intrazellul&auml;ren Umgebung f&uuml;r ihre Entwicklung von grundlegender Bedeutung ist. Chlamydien Anhaftung an Wirtszellen induziert die Aktivierung der Rac GTPase, die f&uuml;r die Lokalisierung von WAVE2 an den Standorten der Chlamydien Eintrag erforderlich ist. Co-Immunopr&auml;zipitation Experimente zeigten, dass Chlamydia-Trachomatis-Infektion das Zusammenspiel von Rac mit WAVE2 und Abi-1, aber nicht mit IRSp53 gef&ouml;rdert. SiRNA Ersch&ouml;pfung WAVE2 und Abi-1 geabschafft Aktin Chlamydien-induzierte Rekrutierung und deutlich reduziert die Aufnahme des Erregers durch die ersch&ouml;pften Zellen. Chlamydien Einmarsch erfordert auch die Arp2/3 komplex wie seine Lokalisierung zu den St&auml;tten der Chlamydien Anlage sowie die geringere Effizienz Chlamydien Invasion in die VCA-Dom&auml;ne des neuronalen Wiskott - Aldrich Syndrom Proteins &uuml;berexprimierenden Zellen belegt. So C. Trachomatis Rac aktiviert und f&ouml;rdert dessen Interaktion mit WAVE2 und Abi-1 Arp2/3-Komplex, wodurch die Induktion von Aktin-Zytoskelett-Umlagerungen, die Invasion erforderlich sind zu aktivieren.

RAC interagiert mit Abi-1 und WAVE2 ein Arp2/3-abh&auml;ngige-Aktin-Einstellung w&auml;hrend Chlamydien Invasion zu f&ouml;rdern.

Chlamydia &egrave; Gram-negativi patogeni intracellulari obbligati a cui accedere ad un ambiente intracellulare &egrave; fondamentale per il loro sviluppo. Da clamidia attaccamento alle cellule ospiti induce l&#39;attivazione del Rac GTPase, che &egrave; necessaria per la localizzazione di WAVE2 presso i siti di entrata da clamidia. Co-immunoprecipitazione esperimenti hanno dimostrato che l&#39;infezione da Chlamydia trachomatis promosso l&#39;interazione di Rac con WAVE2 e Abi-1, ma non con IRSp53. siRNA deplezione di WAVE2 e Abi-1 abrogato reclutamento indotta da clamidia actina e significativamente ridotto la diffusione del patogeno dalle cellule impoverite. Invasione di Clamidia richiede anche il Arp2/3 complessi come dimostrato dalla sua localizzazione per i siti di attacco da clamidia e la ridotta efficienza dell&#39;invasione da clamidia nelle cellule con sovraesprimono relativa dominio della proteina neurale Wiskott - Aldrich-Syndroms VCA. Cos&igrave;, la Chlamydia trachomatis attiva Rac e promuove la sua interazione con il WAVE2 e Abi-1 per attivare il Arp2/3 complessi con conseguente induzione di riarrangiamenti del citoscheletro di actina che sono richiesti per l&#39;invasione.

RAC interagisce con Abi-1 e WAVE2 per promuovere un&#39;assunzione di actina Arp2/3-dipendente durante invasione da clamidia.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x504F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x57FA;&#x790E;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB; WAVE2 &#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A; Rac GTPase &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Co &#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7; WAVE2 &#x3068; Abi-1, &#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;IRSp53 &#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;Rac &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;WAVE2 &#x3068; Abi 1 &#x306E; siRNA &#x67AF;&#x6E07;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x8A98;&#x8D77;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x52DF;&#x96C6; abrogated &#x3057;&#x3001;&#x52A3;&#x5316;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6E1B;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52B9;&#x7387; VCA &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E9;&#x30EB; Wiskott-Aldrich &#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x4FB5;&#x7565;&#x306E;&#x793A;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; Arp2/3 &#x3082;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;c &#x306F;&#x3001;Rac &#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x3001;WAVE2 &#x3068; Abi 1 &#x4FB5;&#x7565;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; Arp2/3 &#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Rac Abi 1 &#x3068; WAVE2 &#x306F; Arp2/3 &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x52DF;&#x96C6;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x4FB5;&#x7565;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Chlamydiae&#xB294; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xC758;&#xBB34; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; chlamydial &#xCCA8;&#xBD80; WAVE2 chlamydial &#xD56D;&#xBAA9; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; Rac Gtpase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;. Co immunoprecipitation &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2B9;&#xC9C4; IRSp53 &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; wave2&#xC640; Abi-1, Rac&#xC758; &#xC0C1;&#xD638;. siRNA &#xACE0;&#xAC08; wave2&#xC640; Abi-1 &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xACE0;&#xAC08; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544; &#xCE68;&#xACF5;&#xC5D0;&#xB294; Arp2/3 chlamydial &#xCCA8;&#xBD80;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; Wiskott-&#xC62C;&#xB4DC; &#xB9AC;&#xCE58; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; VCA &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; overexpressing &#xC140; chlamydial &#xCE68;&#xACF5;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, C. trachomatis Rac&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Arp2/3 &#xCE68;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeletal &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; wave2&#xC640; Abi-1&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4;.

Rac Abi-1 &#xBC0F; WAVE2 chlamydial &#xCE68;&#xACF5; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; Arp2/3 &#xC885;&#xC18D; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD64D;&#xBCF4;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Clamidias son gramnegativas pat&oacute;genos intracelulares obligados a que el acceso a un ambiente intracelular es fundamental para su desarrollo. Por apego a las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped induce la activaci&oacute;n de la Rac GTPase, que se requiere para la localizaci&oacute;n de WAVE2 en los sitios de entrada por clamidia. Co-inmunoprecipitaci&oacute;n experimentos demostraron que la infecci&oacute;n por Clamidia trachomatis promueve la interacci&oacute;n de Rac con WAVE2 y Abi-1, pero no con IRSp53. agotamiento de siRNA de WAVE2 y Abi-1 derog&oacute; el reclutamiento de actina inducida por clamidia y redujo significativamente la absorci&oacute;n del pat&oacute;geno por las c&eacute;lulas agotadas. Invasi&oacute;n de clamidia tambi&eacute;n requiere el complejo, como lo demuestra su localizaci&oacute;n a los sitios de fijaci&oacute;n por clamidia y la eficacia reducida de invasi&oacute;n por Chlamydia en c&eacute;lulas overexpressing el dominio VCA de la prote&iacute;na neuronal del s&iacute;ndrome de Wiskott &ndash; Aldrich Arp2/3. As&iacute;, C. trachomatis activa Rac y promueve su interacci&oacute;n con WAVE2 y Abi-1 para activar el complejo resultante en la inducci&oacute;n de cambios citoesqueleto de actina que se requieren para la invasi&oacute;n de Arp2/3.

RAC interact&uacute;a con Abi-1 y WAVE2 para promover un reclutamiento de actina Arp2/3-dependiente durante la invasi&oacute;n por clamidia.

&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6C99;&#x773C;&#x9644;&#x4EF6;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x521D;&#x7B49;&#x4F53;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; TARP (&#x518D;&#x8F6C;&#x79FB;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#x86CB;&#x767D;) &#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;TARP &#x4EA4;&#x53C9;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x7ACB;&#x5373;&#x78F7;&#x9178;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x5728;&#x7531;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x6FC0;&#x9176;&#x3002;Rac &#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x9644;&#x4EF6;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D; WAVE2 &#x548C; Arp2/3 &#x4F9D;&#x8D56;&#x62DB;&#x52DF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x95EE;&#x9898;&#x8D44;&#x4EA7;&#x6551;&#x52A9;&#x8BA1;&#x5212;&#x76F4;&#x63A5;&#x53C2;&#x4E0E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4F9D;&#x8D56; Rac &#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7EA7;&#x8054;&#x62DB;&#x8058;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5165;&#x4FB5;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; Rac &#x9E1F;&#x560C;&#x5464;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7684; TARP &#x51FD;&#x6570;&#x4EA4;&#x6362;&#x56E0;&#x7D20; (GEFs) Sos1 &#x548C; Vav2&#xFF0C;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6; YEPISTENIYESI &#xFF08;tarp&#xFF09; &#x4EE5;&#x53CA;&#x77AC;&#x6001;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3 &#x6FC0;&#x9176; (PI3-K) &#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x51FA;&#x73B0;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x54EA;&#x4E9B;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;&#x7528;&#x6765;&#x6FC0;&#x6D3B; Rac&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6B21;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#xFF0C;&#x5F53;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528; Sos1/Abi1/Eps8 &#x548C; Vav2&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4E0E;&#x540E;&#x8005;&#x9700;&#x8981;&#x8102;&#x8D28;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3,4,5 &#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50; siRNA &#x7684;&#x67AF;&#x7AED;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5197;&#x4F59;&#x6027;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9014;&#x5F84;&#x4E0D;&#x540C;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x5728;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x91CD;&#x6784;&#x673A;&#x68B0;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5176;&#x4E2D; C.trachomatis &#x4FB5;&#x5165;&#x975E;&#x541E;&#x566C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x7275;&#x8FDE;&#x95EE;&#x9898;&#x8D44;&#x4EA7;&#x6551;&#x52A9;&#x8BA1;&#x5212;&#x3002;

&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x6761;&#x76EE;&#x6D89;&#x53CA; TARP &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x9E1F;&#x560C;&#x5464;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x6C47;&#x7387;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

Chlamydia trachomatis attachment to cells induces the secretion of the elementary body-associated protein TARP (Translocated Actin Recruiting Protein). TARP crosses the plasma membrane where it is immediately phosphorylated at tyrosine residues by unknown host kinases. The Rac GTPase is also activated, resulting in WAVE2 and Arp2/3-dependent recruitment of actin to the sites of chlamydia attachment. We show that TARP participates directly in chlamydial invasion activating the Rac-dependent signaling cascade to recruit actin. TARP functions by binding two distinct Rac guanine nucleotide exchange factors (GEFs), Sos1 and Vav2, in a phosphotyrosine-dependent manner. The tyrosine phosphorylation profile of the sequence YEPISTENIYESI within TARP, as well as the transient activation of the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3-K), appears to determine which GEF is utilized to activate Rac. The first and second tyrosine residues, when phosphorylated, are utilized by the Sos1/Abi1/Eps8 and Vav2, respectively, with the latter requiring the lipid phosphatidylinositol 3,4,5-triphosphate. Depletion of these critical signaling molecules by siRNA resulted in inhibition of chlamydial invasion to varying degrees, owing to a possible functional redundancy of the two pathways. Collectively, these data implicate TARP in signaling to the actin cytoskeleton remodeling machinery, demonstrating a mechanism by which C.trachomatis invades non-phagocytic cells.

Chlamydial entry involves TARP binding of guanine nucleotide exchange factors.

Fixation trachomatis de Chlamydia aux cellules induit la s&eacute;cr&eacute;tion des prot&eacute;ines associ&eacute;es aux corps &eacute;l&eacute;mentaire TARP (transloqu&eacute; actine recruter des prot&eacute;ines). B&Acirc;CHE traverse la membrane plasmique o&ugrave; il est phosphoryl&eacute; imm&eacute;diatement aux r&eacute;sidus de tyrosine par des kinases h&ocirc;te inconnu. La Rac GTPase est &eacute;galement activ&eacute;, r&eacute;sultant dans le recrutement de WAVE2 et Arp2/3-d&eacute;pendante de l&#39;actine vers les sites de fixation de la chlamydiose. Nous montrons que b&acirc;che participe directement &agrave; chlamydiale invasion, activation de la cascade de signalisation de Rac-d&eacute;pendante pour recruter l&#39;actine. Fonctions de b&acirc;che en liant deux distincts nucl&eacute;otide guanine de Rac &eacute;changent des facteurs (circulation), Sos1 et Vav2, en fonction de la phosphotyrosine. Le profil de phosphorylation de tyrosine de la s&eacute;quence YEPISTENIYESI dans la b&acirc;che de protection, ainsi que l&#39;activation transitoire de la phosphatidylinositol 3-kinase (PI3-K), appara&icirc;t pour d&eacute;terminer quel FEM est utilis&eacute;e pour activer le Rac. Les r&eacute;sidus de tyrosine de premier et deuxi&egrave;me, lorsque phosphoryl&eacute;e, sont utilis&eacute;s par le Sos1/Abi1/Eps8 et Vav2, respectivement, avec la derni&egrave;re exigeant le lipides phosphatidylinositol 3,4,5-triphosphate. &Eacute;puisement de ces mol&eacute;cules de signalisation critiques de siARN a abouti &agrave; l&#39;inhibition de l&#39;invasion de Chlamydia trachomatie &agrave; des degr&eacute;s divers, en raison d&#39;une redondance fonctionnelle possible des deux voies. Collectivement, ces donn&eacute;es indiquent que le TARP dans la signalisation au cytosquelette d&#39;actine transformant des machines, ce qui d&eacute;montre un m&eacute;canisme par lequel C.trachomatis envahit les cellules non phagocytaires.

Chlamydiale entr&eacute;e implique la b&acirc;che liaison des facteurs de guanine nucleotide exchange.

Chlamydia Trachomatis Bindung an Zellen induziert die Sekretion des elementaren K&ouml;rper-assoziierten Proteins TARP (systemisch Actin Recruiting-Protein). TARP &uuml;berquert die Plasmamembran, wo ist es sofort auf Tyrosin R&uuml;ckst&auml;nde von unbekannter Host Kinasen phosphoryliert. Die Rac GTPase wird auch aktiviert, was zu WAVE2 und Arp2/3-abh&auml;ngigen Rekrutierung von Aktin zu den Sites der Chlamydien-Anlage. Wir zeigen, dass TARP direkt bei Chlamydien Invasion, die Aktivierung der Rac-abh&auml;ngige signalisierende Kaskade zur Rekrutierung von Aktin beteiligt ist. TARP-Funktionen durch die Bindung von zwei eindeutige Rac-Guanin-Nukleotid tauschen Faktoren (GEFs), Sos1 und Vav2, in gewissem Sinne Phosphotyrosine abh&auml;ngig. Das Tyrosin-Phosphorylierung-Profil der Sequenz erscheint YEPISTENIYESI in TARP, sowie die vor&uuml;bergehende Aktivierung der Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3-K), bestimmen welche GEF genutzt wird, um Rac zu aktivieren. Die erste und zweite Tyrosin-R&uuml;ckst&auml;nde, wenn phosphoryliert, werden durch die Sos1/Abi1/Eps8 und Vav2, bzw. mit Bedarf der Lipid Phosphatidylinositol 3,4,5-Triphosphat eingesetzt. Ersch&ouml;pfung dieser kritischen signalisierende Molek&uuml;le von SiRNA f&uuml;hrte Hemmung der Chlamydien Invasion in unterschiedlichem Ausma&szlig; durch eine m&ouml;gliche funktionelle Redundanz der zwei Wege. Kollektiv, implizieren diese Daten TARP in Signalisierung des Aktin-Zytoskeletts Umbau Maschinen, demonstriert einen Mechanismus, mit dem C.trachomatis nicht phagozytische Zellen eindringt.

Chlamydien Aufnahme beinhaltet TARP Bindung Guanin-Nukleotid-Austausch-Faktoren.

Attacco di Chlamydia trachomatis alle cellule induce la secrezione di elementare corpo-associated protein TARP (traslocata actina reclutando proteine). TARP attraversa la membrana plasmatica, dove viene immediatamente fosforilato a residui di tirosina da chinasi host sconosciuto. Il Rac GTPase &egrave; anche attivato, con conseguente assunzione WAVE2 e Arp2/3-dipendente dell&#39;actina per i siti di attacco clamidia. Mostriamo che TARP partecipa direttamente da clamidia invasione attivando la cascata di segnalazione Rac-dipendente per reclutare actina. Funzioni TARP da due distinti Rac guanina nucleotide exchange fattori leganti (GEFs), Sos1 e Vav2, in modo phosphotyrosine-dipendente. Il profilo di fosforilazione della tirosina della sequenza YEPISTENIYESI nell&#39;ambito del TARP, come pure l&#39;attivazione transitoria del fosfatidilinositolo 3-chinasi (PI3-K), compare per determinare quale GEF &egrave; utilizzato per attivare Rac. I residui di tirosina prima e la seconda, quando fosforilato, sono utilizzati dal Sos1/Abi1/Eps8 e Vav2, rispettivamente, con il quest&#39;ultimo che richiedono i lipidi fosfatidilinositolo 3, 4,5-trifosfato. Deplezione di queste molecole di segnalazione critiche di siRNA ha provocato l&#39;inibizione dell&#39;invasione da clamidia a vari gradi, a causa di una possibile ridondanza funzionale dei due percorsi. Collettivamente, questi dati implicano TARP nella segnalazione al citoscheletro di actina rimodellamento macchinari, dimostrando un meccanismo mediante il quale SeroCP_IgG_Quant invade le cellule non fagocitiche.

Entrata da clamidia comporta associazione TARP dei fattori di scambio nucleotide guanina.

&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x2010; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B9;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x5C0F;&#x5B66;&#x6821;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; TARP &#xFF08;, &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x52DF;&#x96C6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF09; &#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x3069;&#x3053;&#x305D;&#x308C;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3067;&#x4E0D;&#x660E;&#x306A;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3067;&#x3059;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x819C;&#x3092;&#x6A2A;&#x5207;&#x308B;&#x3002;Rac GTPase &#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E; WAVE2 &#x3068; Arp2/3 &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x3067;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x52DF;&#x96C6;&#x3059;&#x308B; Rac &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x4FB5;&#x7565;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; 2 &#x3064;&#x7570;&#x306A;&#x308B; Rac &#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3; &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;)&#x3001;Sos1&#x3001;Vav2&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3002;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5185;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB; 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (PI3-K) &#x306E;&#x904E;&#x6E21;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; YEPISTENIYESI &#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3069;&#x306E; GEF &#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066; Rac &#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x3068; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x6B8B;&#x4F59;&#x3001;Sos1/Abi1/Eps8 &#x3068; Vav2&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x8102;&#x8CEA;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB; 3,4,5-&#x4E09;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5F8C;&#x8005;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; siRNA &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x4FB5;&#x653B;&#x306B;&#x3088;&#x308A; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5197;&#x9577;&#x6027;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5DEE;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63A8;&#x79FB;&#x975E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4FB5;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x6A5F;&#x68B0;&#x3092;&#x6539;&#x9020;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x5DFB;&#x304D;&#x8FBC;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306B;&#x306F;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3; &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x9632;&#x6C34;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544;&#xC758; trachomatis &#xCCA8;&#xBD80; &#xC140; &#xCD08;&#xB4F1;&#xD559;&#xAD50; &#xC2E0;&#xCCB4; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC29;&#xC218; (Translocated &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;)&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBC29;&#xC218; &#xD3EC; &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC989;&#xC2DC; phosphorylated &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; kinases &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xAD50;&#xCC28;. Rac GTPase &#xB610;&#xD55C; &#xD074; &#xB77C; &#xBBF8;&#xB514; &#xC544; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB9D0;&#xB77C; WAVE2 &#xBC0F; Arp2/3 &#xC885;&#xC18D; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC29;&#xC218; chlamydial &#xCE68;&#xACF5; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBAA8;&#xC9D1; Rac &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xD638; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; Rac guanine &#xC5FC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xBC29;&#xC218; &#xAE30;&#xB2A5; phosphotyrosine &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC694;&#xC778; (&#xC870;&#xB2EC;), Sos1 &#xBC0F; Vav2, &#xAD50;&#xD658;. &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; YEPISTENIYESI phosphatidylinositol 3 &#xD0A4; (PI3-K) &#xACFC;&#xB3C4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB85C; &#xC11C; &#xBC29;&#xC218;, &#xB0B4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; GEF Rac&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Phosphorylated &#xC77C; &#xB54C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBC0F; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xD6C4;&#xC790; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC9C8; phosphatidylinositol 3,4,5-&#xC0BC;&#xC778;&#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC01;&#xAC01; Vav2, Sos1/Abi1/eps8&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sirna&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; &#xC5B5;&#xC81C; chlamydial &#xCE68;&#xACF5; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC911;&#xBCF5; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAC01;&#xB3C4;&#xC758; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC0E8; &#xB2E4;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; C.trachomatis &#xBE44; phagocytic &#xC140;&#xC744; &#xCE68;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xAE30;&#xACC4; &#xAC1C;&#xC870; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xBC29;&#xC218; &#xD3EC; &#xC5F0;&#xB8E8;.

Chlamydial &#xD56D;&#xBAA9; guanine &#xC5FC;&#xAE30; &#xAD50;&#xD658; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xBC29;&#xC218; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Accesorio de Chlamydia trachomatis a c&eacute;lulas induce la secreci&oacute;n de la prote&iacute;na asociada a cuerpo elemental TARP (transloca actina reclutamiento prote&iacute;na). LONA atraviesa la membrana plasm&aacute;tica donde es fosforilado inmediatamente en residuos tirosina por cinasas host desconocido. Tambi&eacute;n se activa el Rac GTPase, resultando en reclutamiento de WAVE2 y Arp2/3-dependiente de la actina a los sitios del accesorio de la clamidia. Mostramos que TARP participa directamente en la invasi&oacute;n por activaci&oacute;n de la cascada de se&ntilde;alizaci&oacute;n de Rac-dependiente para reclutar a actina. Funciones de lona por dos distintas Rac guanina nucle&oacute;tido intercambio factores vinculantes (GEFs), Sos1 y Vav2, en una forma dependiente de fosfotirosina. El perfil de fosforilaci&oacute;n de la tirosina de la secuencia YEPISTENIYESI en lona, as&iacute; como la activaci&oacute;n transitoria de la fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3-K), aparece para determinar que el FMAM se utiliza para activar Rac. Los residuos de tirosina primera y segunda, cuando fosforilada, son utilizados por el Sos1/Abi1/Eps8 y Vav2, respectivamente, con el &uacute;ltimo que requieren los l&iacute;pidos fosfatidilinositol 3,4,5-trifosfato. Agotamiento de estas mol&eacute;culas de se&ntilde;alizaci&oacute;n cr&iacute;ticos por siRNA dio lugar a la inhibici&oacute;n de la invasi&oacute;n por Chlamydia en diferentes grados, debido a una posible redundancia funcional de los dos caminos. Colectivamente, estos datos implican la lona en la se&ntilde;alizaci&oacute;n al remodelaci&oacute;n de la maquinaria, demostrando un mecanismo por el cual C.trachomatis invade c&eacute;lulas no fagoc&iacute;ticas del citoesqueleto de actina.

Entrada por clamidia implica a Uni&oacute;n de lona de factores de intercambio de guanina nucle&oacute;tido.

&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#xFF0C;Muc19/Smgc&#xFF0C;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x4E0D;&#x540C;&#x62FC;&#x63A5;&#x4E24;&#x79CD;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;Smgc &#xFF08;&#x988C;&#x4E0B;&#x817A;&#x86CB;&#x767D; C) &#x548C; Muc19 (&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D; 19&#xFF09;&#x3002;Muc19 &#x5927;&#x6210;&#x80F6;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x820C;&#x4E0B;&#x9ECF;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x817A;&#x5916;&#x5206;&#x6CCC;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;SMGC &#x662F;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x556E;&#x9F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x988C;&#x4E0B;&#x817A;&#x548C;&#x820C;&#x4E0B;&#x817A;&#x817A;&#x6682;&#x6001;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x4EA7;&#x7269;&#x3002;Muc19/Smgc &#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x542B;&#x6709;&#x9ECF;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x5176;&#x4ED6;&#x5C0F;&#x9F20;&#x553E;&#x6DB2;&#x53CA;&#x975E;&#x6D8E;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6240;&#x77E5;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;Muc19 &#x8868;&#x8FBE;&#x56E0;&#x6B64;&#x6700;&#x521D;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7531;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x8865;&#x5145;&#x505A;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A; knockin &#x9F20;&#x6807;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;Muc19 &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8868;&#x8FBE;&#x542B;&#x9996;&#x5148; 69 &#x6B8B;&#x7559;&#x7684; Muc19 &#x8DDF;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (EGFP) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; Muc19 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x4F18;&#x60E0; Muc19 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x548C;&#x6B21;&#x8981;&#x9ECF;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x817A;&#x4EE5;&#x53CA; tracheolarynx &#x548C;&#x7403;&#x90E8;&#x817A;&#x4F53;&#x7684;&#x9ECF;&#x6DB2;&#x3002;&#x8BC1;&#x636E;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4E2A;&#x522B;&#x9ECF;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D8E;&#x817A;&#x7684;&#x672A;&#x6210;&#x5E74;&#x4EBA;&#x548C;&#x7403;&#x90E8;&#x817A;&#x4F53;&#x4EA7;&#x751F;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x51DD;&#x80F6;&#x5F62;&#x6210;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x9664; Muc19 &#x4E4B;&#x5916;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x627E;&#x5230;&#x5168;&#x957F; Smgc &#x8A8A;&#x672C;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x4E3A; SMGC&#xFF0C;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x65B0;&#x751F;&#x513F; tracheolarynx &#x548C;&#x6240;&#x6709;&#x6D8E;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5E03;&#x5C40;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20; Muc19/Smgc &#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;

&#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Muc19/Smgc, &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xB450; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBD99;&#xC5EC; &#xC11C; &#xBCC0;&#xC885;, Smgc (submandibular &#xB3D9;&#xB9E5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; C) &#xBC0F; Muc19 (mucin 19). Muc19 &#xB300;&#xD615; &#xC824; &#xD615;&#xC131; mucin &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC774; &#xBA70; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0; &#xC124; &#xD558; &#xC810; &#xB9C9; &#xCE68; &#xC0D8;&#xC758; exocrine &#xC81C;&#xD488; &#xC774;&#xB2E4;. SMGC&#xC740; &#xC124;&#xCE58;&#xB958; submandibular &#xBC0F; &#xC124; &#xD558; &#xC120; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; transiently &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xBD84; &#xBE44; &#xC81C;&#xD488;. &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xC810; &#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB2E4;&#xB978; murine &#xCE68;&#xACFC; &#xBE44; &#xCE68; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; Muc19/Smgc &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. Muc19 &#xC2DD;&#xC740; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xCC98;&#xC74C; RT-PCR &#xBC0F; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xD638; &#xBCF4;&#xC644;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC1C;&#xBC1C; knockin &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;, Muc19-EGFP, &#xC950; Muc19 Muc19 &#xC2DD;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (EGFP)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; 69 &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD45C;&#xD604;. &#xB450; &#xBC29;&#xBC95; &#xBAA8;&#xB450; &#xACB0;&#xACFC; &#xC6B0;&#xC120; Muc19 &#xC2DD; &#xCE68; &#xC8FC; &#xB208;&#xAE08;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xC77C; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; tracheolarynx &#xBC0F; bulbourethral &#xC0D8; submucosal &#xC120; &#xB4E4;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58;. &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xBD80; &#xCE68;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC810; &#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; bulbourethral &#xC0D8; Muc19 &#xBFD0; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC824; &#xD615;&#xC131; mucin &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354; SMGC&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;, &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; tracheolarynx&#xC640; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xCE68; &#xC870;&#xC9C1; &#xD558;&#xB294; &#xB179;&#xCDE8; &#xB85D;&#xC744; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; Smgc&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xCC3E;&#xC744;.

Murine Muc19/Smgc&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; Distibution &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488;.

The recently identified gene, Muc19/Smgc, encodes two diverse splice variants, Smgc (submandibular gland protein C) and Muc19 (mucin 19). Muc19 is a member of the large gel-forming mucin family and is an exocrine product of sublingual mucous salivary glands in mice. SMGC is a transiently expressed secretion product of developing rodent submandibular and sublingual glands. Little is known of the expression of Muc19/Smgc gene products in other murine salivary and non-salivary tissues containing the mucous cell phenotype. Muc19 expression was therefore initially assessed by RT-PCR and immunohistochemistry. As a complementary approach, we developed a knockin mouse model, Muc19-EGFP, in which mice express a fusion protein containing the first 69 residues of Muc19 followed by enhanced green fluorescent protein (EGFP) as a marker of Muc19 expression. Results from both approaches are consistent, with preferential Muc19 expression in salivary major and minor mucous glands as well as submucosal glands of the tracheolarynx and bulbourethral glands. Evidence also indicates individual mucous cells of minor salivary and bulbourethral glands produce another gel-forming mucin in addition to Muc19. We further find tissue expression of full-length Smgc transcripts, which encode for SMGC, are restricted to neonatal tracheolarynx and all salivary tissues.

Tissue Distibution of Murine Muc19/Smgc Gene Products.

Le g&egrave;ne identifi&eacute; r&eacute;cemment, Muc19/Smgc, encode deux &eacute;pissure diverses variantes, Smgc (prot&eacute;ine C de la glande sous-maxillaire) et Muc19 (mucine 19). Muc19 est membre de la grande famille de mucine formant gel et est un produit exocrine de glandes salivaires sublinguales chez la souris. SMGC est un produit de s&eacute;cr&eacute;tion transitoirement expresse de mettre au point des glandes sous-maxillaires et sublinguales rongeurs. On sait peu de l&#39;expression des produits g&eacute;niques Muc19/Smgc dans d&#39;autres tissus salivaires et non-salivaires murines, contenant le ph&eacute;notype de cellules muqueuses. Muc19 expression &eacute;tait donc initialement &eacute;valu&eacute;e par RT-PCR et l&#39;immunohistochimie. Comme une approche compl&eacute;mentaire, nous avons d&eacute;velopp&eacute; un mod&egrave;le de souris knockin, Muc19-EGFP, o&ugrave; les souris expriment une prot&eacute;ine de fusion contenant les premier 69 r&eacute;sidus de Muc19 suivie de la prot&eacute;ine fluorescente verte am&eacute;lior&eacute;e (EGFP) comme marqueur d&#39;expression Muc19. Les r&eacute;sultats de ces deux approches sont compatibles, avec expression pr&eacute;f&eacute;rentielle de Muc19 dans les glandes salivaires principales et secondaires ainsi que des glandes sous-muqueuses des tracheolarynx et des glandes bulbourethral. Indiquent aussi les cellules muqueuses individuels de mineur salivaire et bulbourethral glandes produisent un autre gel formant la mucine en plus Muc19. Plus loin, nous trouvons expression tissulaire de pleine longueur Smgc transcrits, qui codent pour le SMGC, se limitent &agrave; tracheolarynx n&eacute;onatale et tous les tissus salivaires.

Distribution de tissu de murin Muc19/Smgc produits g&eacute;niques.

Das k&uuml;rzlich identifizierte gen, Muc19/Smgc, codiert zwei unterschiedliche Splei&szlig;-Varianten, Smgc (submandibular Dr&uuml;se Protein C) und Muc19 (Mucin 19). Muc19 ist Mitglied der gro&szlig;en Gel bildenden Mucin-Familie und ist eine exokrine Produkt der sublinguale Schleimhaut Speicheldr&uuml;sen in den M&auml;usen. SMGC ist ein Produkt vor&uuml;bergehend exprimierten Sekretion Nagetiere submandibular und sublinguale Dr&uuml;sen zu entwickeln. Der Ausdruck der Muc19/Smgc-Gen-Produkte in anderen murinen Speichel- und nicht-Speicheldr&uuml;sen Geweben, die mit der Schleimhaut Zelle-Ph&auml;notyp ist wenig bekannt. Muc19 Ausdruck wurde daher zun&auml;chst von RT-PCR und Immunhistochemie bewertet. Als erg&auml;nzenden Ansatz entwickelten wir eine knockin Mausmodell, Muc19-EGFP, in der M&auml;use ein Fusionsprotein, die die ersten 69 R&uuml;ckst&auml;nde von Muc19 gefolgt von erweiterten gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (EGFP) als eine Markierung der Muc19 Ausdruck Ausdr&uuml;cken. Ergebnisse aus beiden Ans&auml;tzen entsprechen, bevorzugte Muc19 Ausdruck in Speicheldr&uuml;sen Haupt- und Nebenversionen Schleimdr&uuml;sen sowie submuk&ouml;se Dr&uuml;sen der Tracheolarynx und Bulbourethral Dr&uuml;sen. Deutet auch die Schleimh&auml;ute Einzelzellen Minderj&auml;hrigen Speichel- und Bulbourethral Dr&uuml;sen produzieren ein weiteres Gel bildenden Mucin neben Muc19. Wir finden weitere Gewebe Ausdruck in Smgc Abschriften, die kodieren f&uuml;r SMGC, sind auf die neonatale Tracheolarynx und alle Speicheldr&uuml;sen Gewebe beschr&auml;nkt.

Gewebe-Distibution des murinen Muc19/Smgc Genprodukte.

Il gene recentemente identificato, Muc19/Smgc, codifica due splice diverse varianti, Smgc (proteina Ghiandola sottomandibolare C) e Muc19 (mucina 19). Muc19 &egrave; un membro della grande famiglia della mucina gelificanti ed &egrave; un prodotto esocrino sublinguale ghiandole salivari mucose nei topi. SMGC &egrave; un prodotto di secrezione transitoriamente espressa di sviluppare roditore ghiandole sottomandibolare e sottolinguale. Poco si sa dell&#39;espressione dei prodotti del gene di Muc19/Smgc in altri tessuti murini salivare e non salivari contenente il fenotipo delle cellule mucose. Muc19 espressione pertanto &egrave; stato inizialmente valutato da RT-PCR ed immunoistochimica. Come un approccio complementare, abbiamo sviluppato un modello murino knockin, Muc19-EGFP, in cui topi esprimono una proteina di fusione che contiene i primo 69 residui di Muc19 seguita da una maggiore proteina fluorescente verde (EGFP) come un marcatore di espressione Muc19. I risultati di entrambi gli approcci sono coerenti, con espressione Muc19 preferenziale in ghiandole salivari maggiori e minori mucose cos&igrave; come ghiandole sottomucosa del tracheolarynx e ghiandole di Cowper. Prova indica anche singole cellule mucose del minore salivare e ghiandole di Cowper producono mucina gelificanti un altro oltre a Muc19. Troviamo ulteriore espressione tessuto del full-length Smgc trascrizioni, che codifica per la SMGC, sono limitate a tracheolarynx neonatale e tutti i tessuti salivari.

Tessuto espansioni dei prodotti del Gene murino Muc19/Smgc.

&#x6700;&#x8FD1;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;Muc19/Smgc &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; 2 &#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x3001;Smgc (&#x984E;&#x4E0B;&#x817A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; C) &#x3068; Muc19 (&#x30E0;&#x30C1;&#x30F3; 19&#xFF09;&#x3002;Muc19 &#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30B2;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x30E0;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x820C;&#x4E0B;&#x817A;&#x7C98;&#x6DB2;&#x553E;&#x6DB2;&#x817A;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x88FD;&#x54C1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;SMGC &#x306E;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x984E;&#x4E0B;&#x817A;&#x3068;&#x820C;&#x4E0B;&#x817A;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x5206;&#x6CCC;&#x88FD;&#x54C1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5C11;&#x3057;&#x7C98;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4ED6;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x553E;&#x6DB2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x553E;&#x6DB2;&#x975E;&#x7D44;&#x7E54;&#x4E2D;&#x306E; Muc19/Smgc &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Muc19 &#x5F0F;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x5F53;&#x521D; RT-PCR &#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x88DC;&#x5B8C;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A4;&#x30F3; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3001;Muc19-EGFP &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Muc19 &#x5F37;&#x5316;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (EGFP) &#x306B;&#x3088;&#x308B; Muc19 &#x5F0F;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x6700;&#x521D; 69 &#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x553E;&#x6DB2;&#x306E;&#x30E1;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x7C98;&#x6DB2;&#x817A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7C98;&#x819C;&#x4E0B;&#x817A; tracheolarynx &#x3068;&#x5C3F;&#x9053;&#x7403;&#x817A;&#x306E;&#x512A;&#x9047; Muc19 &#x5F0F;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x304C;&#x3002;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x7C98;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x553E;&#x6DB2;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x5C3F;&#x9053;&#x7403;&#x817A; Muc19 &#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x5225;&#x306E;&#x30B2;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x7C98;&#x6DB2;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x5F0F; SMGC &#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3001;&#x65B0;&#x751F;&#x5150; tracheolarynx &#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x553E;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E; Smgc &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D44;&#x7E54;&#x30DD;&#x30A4;&#x30BE;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Muc19/Smgc &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x3002;

El gen recientemente identificado, Muc19/Smgc, codifica dos empalme diversas variantes, Smgc (prote&iacute;na C de la gl&aacute;ndula submaxilar) y Muc19 (mucina 19). Muc19 es un miembro de la gran familia de mucina gelificante y es un producto exocrino de las gl&aacute;ndulas salivales mucosas sublinguales en ratones. SMGC es un producto de secreci&oacute;n transitoriamente expresa de desarrollar roedores gl&aacute;ndulas submaxilar y sublinguales. Poco se sabe de la expresi&oacute;n de los productos del gen Muc19/Smgc en otros tejidos salivales y no-salivales murinos, que contiene el fenotipo de c&eacute;lulas mucosas. Muc19 expresi&oacute;n por lo tanto fue evaluado inicialmente mediante RT-PCR e inmunohistoqu&iacute;mica. Como un enfoque complementario, desarrollamos un modelo de rat&oacute;n knockin, Muc19-EGFP, en la que ratones expresan una prote&iacute;na de fusi&oacute;n que contiene los primeros 69 residuos de Muc19 seguido por mayor prote&iacute;na verde fluorescente (EGFP) como marcador de expresi&oacute;n Muc19. Los resultados de ambos enfoques son consistentes, con expresi&oacute;n de Muc19 preferencial en las gl&aacute;ndulas salivales mayores y menores mucosas as&iacute; como las gl&aacute;ndulas submucosal del tracheolarynx y gl&aacute;ndulas bulbouretrales. Evidencia tambi&eacute;n indica c&eacute;lulas mucosas individuales de menor salival y gl&aacute;ndulas bulbouretrales producen mucina gelificante otro adem&aacute;s de Muc19. Adem&aacute;s encontramos expresi&oacute;n del tejido de cuerpo entero Smgc transcritos, que codifican para SMGC, se limitan a tracheolarynx neonatal y todos los tejidos salivales.

Distribuci&oacute;n de tejido de murino Muc19/Smgc productos g&eacute;nicos.

&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x662F;&#x514B;&#x6D88;&#x6781;&#x3001; &#x9884;&#x7559;&#x80DE;&#x5185;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x662F;&#x75C5;&#x56E0;&#x6700;&#x5E38;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x6027;&#x4F20;&#x64AD;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5728;&#x7F8E;&#x56FD;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x3002;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x63A5;&#x53D7;&#x53CC;&#x76F8;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5217;&#x5165; parasitophorous &#x7A7A;&#x6CE1;&#x5185;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x6D41;&#x884C;&#x75C5;&#x5B66;&#x5DF2;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x4EE5;&#x524D;&#x7531;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x5934;&#x72B6;&#x7624;&#x75C5;&#x6BD2; (HPV) &#x611F;&#x67D3;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x5BAB;&#x9888;&#x764C;&#x3002;&#x5217;&#x5165;&#x5C06;&#x4E0E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#xFF0C;&#x975E;&#x5E38;&#x5BC6;&#x5207;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5173;&#x8054;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x4E3B;&#x673A;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x86CB;&#x767D;&#x808C;&#x3002;&#x6709;&#x5148;&#x524D;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x9053;&#x8FD9;&#x79CD;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F16;&#x5916;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x9886;&#x5BFC;&#x5230;&#x591A;&#x6781;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x8F74;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x51C6;&#x786E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EBA;&#x9524;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6269;&#x589E;&#x5BF9;&#x5176;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x589E;&#x52A0;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x8513;&#x5EF6;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5927;&#x4F1A;&#x68C0;&#x67E5;&#x70B9;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6270;&#x4E71;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x805A;&#x7C7B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x52A0;&#x5267;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5236;&#x6B62;&#x5BF9;&#x7EBA;&#x9524;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7F3A;&#x9677;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6269;&#x589E;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8054;&#x5408;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5BF9;&#x7EBA;&#x9524;&#x5EFA;&#x7B51;&#x6807;&#x8BC6;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4E3A;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x5BAB;&#x9888;&#x764C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x8F85;&#x52A9;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

&#x6C99;&#x773C;&#x8863;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EBA;&#x9524;&#x6781;&#x7F3A;&#x9677;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4ECE;&#x5176;&#x5BF9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6269;&#x589E;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Chlamydiae are Gram negative, obligate intracellular bacteria, and Chlamydia trachomatis is the etiologic agent of the most commonly reported sexually transmitted disease in the United States. Chlamydiae undergo a biphasic life cycle that takes place inside a parasitophorous vacuole termed an inclusion. Chlamydial infections have been epidemiologically linked to cervical cancer in patients previously infected by human papillomavirus (HPV). The inclusion associates very closely with host cell centrosomes, and this association is dependent upon the host motor protein dynein. We have previously reported that this interaction induces supernumerary centrosomes in infected cells, leading to multipolar mitotic spindles and inhibiting accurate chromosome segregation. Our findings demonstrate that chlamydial infection causes mitotic spindle defects independently of its effects on centrosome amplification. We show that chlamydial infection increases centrosome spread and inhibits the spindle assembly checkpoint delay to disrupt centrosome clustering. These data suggest that chlamydial infection exacerbates the consequences of centrosome amplification by inhibiting the cells' ability to suppress the effects of these defects on mitotic spindle organization. We hypothesize that these combined effects on mitotic spindle architecture identifies a possible mechanism for Chlamydia as a cofactor in cervical cancer formation.

Chlamydia trachomatis infection causes mitotic spindle pole defects independently from its effects on centrosome amplification.

Les Chlamydiae sont des bact&eacute;ries &agrave; Gram n&eacute;gatifs, obligatoires intracellulaires, et Chlamydia trachomatis est l&#39;agent &eacute;tiologique de l&#39;infection transmissible sexuellement plus souvent signal&eacute; aux &Eacute;tats-Unis. Les Chlamydiae subissent un cycle de vie biphasique qui se d&eacute;roule &agrave; l&#39;int&eacute;rieur d&#39;une vacuole parasitophore appel&eacute;e une inclusion. Infections &agrave; Chlamydia ont &eacute;t&eacute; &eacute;pid&eacute;miologiquement li&eacute;es au cancer du col ut&eacute;rin chez les patients d&eacute;j&agrave; infect&eacute;s par le virus du papillome humain (VPH). L&#39;inscription s&#39;associe tr&egrave;s &eacute;troitement les centrosomes cellule h&ocirc;te, et cette association d&eacute;pend la dyn&eacute;ine de prot&eacute;ine motrice h&ocirc;te. Nous avons d&eacute;j&agrave; rapport&eacute; que cette interaction induit des centrosomes surnum&eacute;raires dans les cellules infect&eacute;es, conduisant &agrave; des fuseaux mitotiques multipolaires et inhibant la s&eacute;gr&eacute;gation des chromosomes pr&eacute;cis. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent que la chlamydiose provoque d&eacute;fauts fuseau mitotique ind&eacute;pendamment de ses effets sur l&#39;amplification des centrosomes. Nous montrons qu&#39;infection &agrave; Chlamydia augmente la propagation du centrosome et inhibe le retard de checkpoint broche Assembl&eacute;e visant &agrave; d&eacute;sorganiser le centrosome clustering. Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que l&#39;infection &agrave; Chlamydia trachomatis exacerbe les cons&eacute;quences de l&#39;amplification des centrosomes en inhibant la capacit&eacute; des cellules &agrave; supprimer les effets de ces d&eacute;fauts sur l&#39;organisation du fuseau mitotique. Nous &eacute;mettons l&#39;hypoth&egrave;se que ces effets combin&eacute;s sur l&#39;architecture du fuseau mitotique identifie un m&eacute;canisme possible pour la Chlamydia comme cofacteur dans la formation du cancer du col ut&eacute;rin.

Infection &agrave; Chlamydia trachomatis provoque des d&eacute;fauts de p&ocirc;le du fuseau mitotique ind&eacute;pendamment de ses effets sur l&#39;amplification des centrosomes.

Chlamydien sind Gram-negative, obligat intrazellul&auml;re Bakterien und Chlamydia Trachomatis ist die &auml;tiologische Agent von den am h&auml;ufigsten gemeldeten sexuell &uuml;bertragbaren Krankheiten in den Vereinigten Staaten. Chlamydien durchlaufen einen biphasische-Lebenszyklus, der innerhalb einer Parasitophorous Vakuole bezeichnet eine Inklusion stattfindet. Chlamydieninfektionen wurden mit Geb&auml;rmutterhalskrebs bei Patienten, die zuvor von humanen Papillomavirus (HPV) infiziert epidemiologisch verkn&uuml;pft. Die Aufnahme sehr eng ordnet Host Zelle Centrosomes, und diese Zuordnung ist abh&auml;ngig von der Host motor Protein Dynein. Wir haben bereits berichtet, dass diese Interaktion &uuml;berz&auml;hligen Centrosomes in infizierten Zellen induziert zur multipolaren mitotischen Spindeln und Hemmung genaue Chromosome Segregation. Unsere Ergebnisse zeigen, dass die Chlamydieninfektion mitotische Spindel M&auml;ngel unabh&auml;ngig von deren Auswirkungen auf Zentrosom Verst&auml;rkung bewirkt. Wir zeigen, dass die Chlamydieninfektion erh&ouml;ht Zentrosom Ausbreitung und hemmt die Spindel Baugruppe Pr&uuml;fpunkt Verz&ouml;gerung Zentrosom Clusterbildung zu st&ouml;ren. Diese Daten legen nahe, dass Chlamydieninfektion die Folgen der Zentrosom Verst&auml;rkung versch&auml;rft durch die Hemmung der F&auml;higkeit der Zellen, die Auswirkungen dieser Defekte auf mitotische Spindel Organisation zu unterdr&uuml;cken. Wir vermuten, dass diese kombinierte Effekte auf mitotische Spindel Architektur kennzeichnet einen m&ouml;glichen Mechanismus f&uuml;r Chlamydien als Kofaktor in Geb&auml;rmutterhalskrebs-Formation.

Chlamydia-Trachomatis-Infektion mitotische Spindel Pol M&auml;ngel bewirkt, dass unabh&auml;ngig von deren Auswirkungen auf Zentrosom Verst&auml;rkung.

Chlamydiae sono batteri Gram negativi, obbligare intracellulare, e la Chlamydia trachomatis &egrave; l&#39;agente eziologico della malattia sessualmente trasmessa pi&ugrave; comunemente riportata negli Stati Uniti. Chlamydia sottoporsi ad un ciclo vitale bifasico che si svolge all&#39;interno di un vacuolo parasitophorous definito un&#39;inclusione. Infezioni da clamidia sono stati epidemiologicamente collegate al cancro cervicale in pazienti precedentemente infettate da papillomavirus umano (HPV). L&#39;inclusione associa strettamente cntrosome cellula ospite, e questa associazione dipende l&#39;host motore proteina dineina. In precedenza abbiamo segnalato che questa interazione induce cntrosome soprannumerari nelle cellule infette, portando a fusi mitotici multipolare e inibendo la segregazione del cromosoma accurata. I nostri risultati dimostrano che l&#39;infezione da clamidia provoca mitotico difetti indipendentemente dai suoi effetti sull&#39;amplificazione centrosoma. Mostriamo che infezione da clamidia aumenta la diffusione del centrosoma e inibisce il ritardo di checkpoint Assemblea mandrino perturbare centrosoma clustering. Questi dati suggeriscono che infezioni da clamidia aggravano le conseguenze dell&#39;amplificazione Centrosoma inibendo la capacit&agrave; delle cellule di sopprimere gli effetti di questi difetti sulla organizzazione del fuso mitotico. Ipotizziamo che questi effetti combinati su architettura mitotico identifica un possibile meccanismo per la clamidia come cofattore nella formazione del cancro cervicale.

Infezione da Chlamydia trachomatis causa mitotico Polo difetti indipendentemente dai suoi effetti sull&#39;amplificazione Centrosoma.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x8CA0;&#x306E;&#x7FA9;&#x52D9;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x7D30;&#x83CC;, &#x3068;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2; &#x2010; &#x30C8;&#x30E9;&#x30B3;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B9; &#x30A2;&#x30E1;&#x30EA;&#x30AB;&#x5408;&#x8846;&#x56FD;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x3088;&#x304F;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x5C01;&#x5165;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; parasitophorous &#x306E;&#x6DB2;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x4E8C;&#x76F8;&#x6027;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x75AB;&#x5B66;&#x4EE5;&#x524D;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x982D;&#x816B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#xFF08;HPV&#xFF09; &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x611F;&#x67D3;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5B50;&#x5BAE;&#x9838;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5305;&#x542B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x306F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x6642;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x4EE5;&#x524D;&#x3053;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x904E;&#x5270;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x591A;&#x6975;&#x5206;&#x88C2;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x914D;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x305D;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3068;&#x306F;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x666E;&#x53CA;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB; &#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA; &#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x9045;&#x5EF6;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x304C;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x60AA;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x52B9;&#x679C;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0; &#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x5B50;&#x5BAE;&#x9838;&#x764C;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x88DC;&#x8DB3;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B8;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x6B20;&#x9665;&#x539F;&#x56E0;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304B;&#x3089;&#x3002;

Article	Year
Determination of the physical environment within the Chlamydia trachomatis inclusion using ion-selective ratiometric probes. Cellular microbiology\| PubMed ID: 12027956	2002
Chlamydia trachomatis induces remodeling of the actin cytoskeleton during attachment and entry into HeLa cells. Infection and immunity\| PubMed ID: 12065523	2002
Follicle-stimulating hormone-responsive cytoskeletal genes in rat granulosa cells: class I beta-tubulin, tropomyosin-4, and kinesin heavy chain. Endocrinology\| PubMed ID: 12488327	2003
Effects of ectopically expressed neuronal Wiskott-Aldrich syndrome protein domains on Rickettsia rickettsii actin-based motility. Infection and immunity\| PubMed ID: 12595475	2003
Chlamydia trachomatis uses host cell dynein to traffic to the microtubule-organizing center in a p50 dynamitin-independent process. Journal of cell science\| PubMed ID: 12902405	2003
Requirement for the Rac GTPase in Chlamydia trachomatis invasion of non-phagocytic cells. Traffic (Copenhagen, Denmark)\| PubMed ID: 15117316	2004
Tyrosine phosphorylation of the chlamydial effector protein Tarp is species specific and not required for recruitment of actin. Infection and immunity\| PubMed ID: 15972471	2005
A small RNA inhibits translation of the histone-like protein Hc1 in Chlamydia trachomatis. Molecular microbiology\| PubMed ID: 16390448	2006
Chlamydia trachomatis causes centrosomal defects resulting in chromosomal segregation abnormalities. Traffic (Copenhagen, Denmark)\| PubMed ID: 16882039	2006
Rac interacts with Abi-1 and WAVE2 to promote an Arp2/3-dependent actin recruitment during chlamydial invasion. Cellular microbiology\| PubMed ID: 17501982	2007
Chlamydial entry involves TARP binding of guanine nucleotide exchange factors. PLoS pathogens\| PubMed ID: 18383626	2008
Tissue Distibution of Murine Muc19/Smgc Gene Products. The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society\| PubMed ID: 19826070	2009
Chlamydia trachomatis infection causes mitotic spindle pole defects independently from its effects on centrosome amplification. Traffic (Copenhagen, Denmark)\| PubMed ID: 21477082	2011

Scott Grieshaber

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications