immuno-fluorescence-assay-of-leptospiral-surface-exposed-proteins

Immuno-fluorescence Assay of Leptospiral Surface-exposed Proteins

Bacterial surface proteins are involved in direct contact with host cells and in uptake of nutrients from the environment 1. For this reason, cellular ...

University of California, Los Angeles

Veterans Affairs Greater Los Angeles Healthcare System

P13 &#x662F;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x4EE3;&#x7406;&#xFF0C;&#x4F2F;&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; 13 kDa &#x79EF;&#x5206;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8C03;&#x67E5; P13 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x706D;&#x6D3B; p13 &#x57FA;&#x56E0;&#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x8BF1;&#x53D8;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x8102;&#x8D28;&#x53CC;&#x5C42;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8C03;&#x67E5;&#x5B54;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8FF7;&#x5931;&#x5728; p13 &#x7A81;&#x53D8;&#x76F8;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; B.&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A; P13 &#x53EF;&#x80FD;&#x5145;&#x5F53;&#x5B54;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5FEB;&#x901F;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x7EAF;&#x5316;&#x672C;&#x673A; P13 &#x5747;&#x5300;&#x6027;&#x548C;&#x8868;&#x660E;&#x7EAF; P13 &#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5728; 1 M &#x6C2F;&#x5316;&#x94BE; 3.5 &#x7684;&#x5355;&#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x5BFC;&#x4E0E; nS&#xFF0C;&#x8FF7;&#x5931;&#x5728; p13 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x5B54;&#x6D3B;&#x52A8;&#x76F8;&#x540C;&#x3002;&#x7531; P13 &#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x901A;&#x9053;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x5F81;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x7535;&#x538B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x589E;&#x957F;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x706D;&#x6D3B;&#x7684; p13 &#x57FA;&#x56E0;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x6548;&#x5E94;&#x3002;P13 &#x706D;&#x6D3B;&#x662F;&#x7F16;&#x7801; B.&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x79EF;&#x5206;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x706D;&#x6D3B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x9057;&#x4F20;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; P13 &#x4E2D; B.&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x5B54;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

&#x6D88;&#x9664;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7531;&#x4F2F;&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684; p13 &#x57FA;&#x56E0;&#x63D2;&#x5165;&#x5931;&#x6D3B;&#x3002;

P13 is a chromosomally encoded 13-kDa integral outer membrane protein of the Lyme disease agent, Borrelia burgdorferi. The aim of this study was to investigate the function of the P13 protein. Here, we inactivated the p13 gene by targeted mutagenesis and investigated the porin activities of outer membrane proteins by using lipid bilayer experiments. Channel-forming activity was lost in the p13 mutant compared to wild-type B. burgdorferi, indicating that P13 may function as a porin. We purified native P13 to homogeneity by fast performance liquid chromatography and demonstrated that pure P13 has channel-forming activity with a single-channel conductance in 1 M KCl of 3.5 nS, the same as the porin activity that was lost in the p13 mutant. Further characterization of the channel formed by P13 suggested that it is cation selective and voltage independent. In addition, no major physiological effects of the inactivated p13 gene could be detected under normal growth conditions. The inactivation of p13 is the first reported inactivation of a gene encoding an integral outer membrane protein in B. burgdorferi. Here, we describe both genetic and biophysical experiments indicating that P13 in B. burgdorferi is an outer membrane protein with porin activity.

Elimination of channel-forming activity by insertional inactivation of the p13 gene in Borrelia burgdorferi.

P13 est une prot&eacute;ine de membrane externe int&eacute;grante de 13 kDa cod&eacute;e sur un chromosome de l&#39;agent de la maladie de Lyme, Borrelia burgdorferi. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;&eacute;tudier la fonction de la prot&eacute;ine P13. Ici, nous avons d&eacute;sactiv&eacute; le p13 g&egrave;ne par cibl&eacute;es de mutagen&egrave;se et &eacute;tudi&eacute; les activit&eacute;s porines des prot&eacute;ines de la membrane externe &agrave; l&#39;aide d&#39;exp&eacute;riences de la bicouche lipidique. L&#39;activit&eacute; formant le chenal est perdue dans le mutant p13 par rapport au type sauvage de b. burgdorferi, indiquant que P13 peut fonctionner comme une porine. Nous purifi&eacute;e P13 natif jusqu&#39;&agrave; homog&eacute;n&eacute;it&eacute; par chromatographie liquide rapide et d&eacute;montr&eacute; que P13 pure a une activit&eacute; formant le chenal avec une conductance monocanal 1 m KCl 3,5 nS, identique &agrave; l&#39;activit&eacute; porine qui a &eacute;t&eacute; perdue dans le mutant p13. Une caract&eacute;risation plus pouss&eacute;e de la cha&icirc;ne form&eacute;e par P13 sugg&eacute;r&eacute; qu&#39;il cation s&eacute;lective et tension ind&eacute;pendante. En outre, aucun effet physiologique majeur du g&egrave;ne inactiv&eacute; p13 ne pourrait &ecirc;tre d&eacute;tect&eacute; dans des conditions de croissance normales. L&#39;inactivation de p13 est premier signal&eacute;e inactivation d&#39;un g&egrave;ne codant pour une prot&eacute;ine int&eacute;grale de membrane externe de b. burgdorferi. Ici, nous d&eacute;crivons des exp&eacute;riences g&eacute;n&eacute;tiques et biophysiques indiquant que P13 &agrave; b. burgdorferi est une prot&eacute;ine de membrane externe avec activit&eacute; porine.

&Eacute;limination des canaux formant l&#39;activit&eacute; de l&#39;inactivation par insertion du g&egrave;ne p13 &agrave; Borrelia burgdorferi.

Beseitigung von Kanal-bildenden Aktivit&#xE4;t von Insertionsinaktivierung des p13-Gens in Borrelia burgdorferi.

P13 &egrave; una proteina integrale di membrana esterna 13-kDa cromosomicamente codificato l&#39;agente della malattia di Lyme, Borrelia burgdorferi. Lo scopo di questo studio era di indagare la funzione della proteina P13. Qui, abbiamo inattivato il p13 gene da mirati mutagenesi e indagato il porin attivit&agrave; delle proteine della membrana esterna tramite esperimenti di doppio strato lipidico. Attivit&agrave; di formazione di canale era perso in mutante p13 rispetto al wild-type b. burgdorferi, indicando che P13 pu&ograve; funzionare come un porin. Abbiamo purificato P13 nativo di omogeneit&agrave; di cromatografia liquida velocemente e ha dimostrato che P13 puro ha canale formando un&#39;attivit&agrave; con una singolo canale conduttanza in 1 M KCl di 3.5 nS, la stessa attivit&agrave; porin che &egrave; stato perso in mutante p13. Ulteriore caratterizzazione del canale formato da P13 ha suggerito che &egrave; cationico selettivo e tensione indipendente. Inoltre, grandi effetti fisiologici del gene inattivato p13 non potrebbero essere rilevati in condizioni di crescita normale. L&#39;inattivazione di p13 &egrave; il primo segnalato inattivazione di un gene che codifica per una proteina integrale di membrana esterna in b. burgdorferi. Qui, descriviamo gli esperimenti di genetici e biofisici indicando che P13 in b. burgdorferi &egrave; una proteina della membrana esterna con attivit&agrave; porin.

Eliminazione della formazione di canale attivit&agrave; di inattivazione inserzionale del gene p13 nella Borrelia burgdorferi.

P13 &#x67D3;&#x8272;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; 13 kDa &#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA; &#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x75C5;&#x5264;&#x3067;&#x3059;&#x3002;P13 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x305F;.&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; p13 &#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3057;&#x3001;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F; P13 &#x306F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066; p13 &#x5909;&#x7570;&#x3067;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5747;&#x4E00;&#x306B;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; P13 &#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306A; P13 &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068; 3.5 &#x306E; 1 M &#x306E; KCl &#x306E;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C; nS&#x3001;p13 &#x5909;&#x7570;&#x3067;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x3002;P13 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3068;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x96FB;&#x5727;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316; p13 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x52B9;&#x679C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;P13 &#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316; B. &#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x75C5;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;P13 B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x306B;&#x306F;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA; p13 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A19;&#x7684;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3002;

P13 Borrelia burgdorferi &#xB77C;&#xC784; &#xBCD1; &#xC81C;&#xC758; chromosomally &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; 13 kDa &#xACC4;&#xC5F4; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; P13 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; p13 inactivated &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5EC; mutagenesis &#xD45C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xC9C8; bilayer &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9;&#xC758; porin &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131; &#xD65C;&#xB3D9; p13&#xB294; porin&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; B. burgdorferi&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; p13 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE38;&#xC744; &#xC783; &#xC5C8;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBE60;&#xB978; &#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; P13 &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC131;&#xC744; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC21C;&#xC218;&#xD55C; P13 1m Kcl&#xC758; 3.5&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;&#xC640; &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC774; &#xC2DC;&#xC5F0; nS p13 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC2E4; &#xB41C; porin &#xD65C;&#xB3D9;&#xC640; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. P13&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xC555; &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC784;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC0AC; p13 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5C6;&#xC774; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xCD9C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. P13&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; B. burgdorferi&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF4;&#xACE0; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC720;&#xC804; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xC2E4;&#xD5D8; B. burgdorferi&#xC5D0; P13 porin &#xD65C;&#xB3D9; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70; Borrelia burgdorferi p13 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; insertional &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC;.

P13 es una prote&iacute;na de membrana externa integral cromos&oacute;mico codificado 13-kDa de la agente de la enfermedad de Lyme, Borrelia burgdorferi. El objetivo de este estudio era investigar la funci&oacute;n de la prote&iacute;na P13. Aqu&iacute;, inactiva la p13 gene por dirigida mutag&eacute;nesis e investig&oacute; las actividades porin de prote&iacute;nas de membrana externa utilizando experimentos de bicapa lip&iacute;dica. Actividad de formaci&oacute;n de canal se perdi&oacute; en el mutante p13 en comparaci&oacute;n con el salvaje-tipo B. burgdorferi, indicando que P13 puede funcionar como un porin. Nos purificando P13 nativo a homogeneidad de cromatograf&iacute;a l&iacute;quida de r&aacute;pida y demostr&oacute; que el puro P13 tiene actividad de formaci&oacute;n de canal con una conductancia monocanal en 1 M KCl de 3.5 nS, lo mismo que la actividad porin que se perdi&oacute; en el mutante p13. La caracterizaci&oacute;n adicional del canal formado por P13 sugiri&oacute; que es selectivo de cationes y voltaje independiente. Adem&aacute;s, no se pudieran detectar ninguna efectos fisiol&oacute;gicos importantes del gen inactivado p13 bajo condiciones de crecimiento normal. La inactivaci&oacute;n de p13 es la primera inactivaci&oacute;n inform&oacute; de un gen que codifica una prote&iacute;na de membrana externa integral en B. burgdorferi. Aqu&iacute;, describimos los experimentos gen&eacute;ticos y biof&iacute;sicos indicando que P13 en B. burgdorferi es una prote&iacute;na de membrana externa con actividad porin.

Eliminaci&oacute;n de canal-formando la actividad insertional inactivaci&oacute;n del gen p13 en Borrelia burgdorferi.

&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x5B66;&#x4EE3;&#x7406;&#xFF0C;&#x4F2F;&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x5468;&#x671F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5176;&#x523B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x77E2;&#x91CF;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x611F;&#x89C9;&#x5230;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x66F4;&#x6539;&#x7F16;&#x7801;&#x51E0;&#x4E2A;&#x8868;&#x9762;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x5E94;&#x53D8; B.&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53; B31 &#x900F;&#x9732;&#x4E86; 175 &#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x3002;P13 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x7F16;&#x7801;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF; 48 &#x6240;&#x5C5E;&#x7684;&#x516B;&#x4E2A;&#x989D;&#x5916; paralogous &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x83CC;&#x682A; P13 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5F02;&#x8D28;&#x6027;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x57DF;&#x662F;&#x6700;&#x5F02;&#x7C7B;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5305;&#x542B; P13 &#x53EF;&#x80FD;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x3002;P13 &#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x7ED3;&#x6784;&#x51B3;&#x5FC3;&#x4E0E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x5916;&#x819C;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x63D0;&#x4EA4;&#x3002;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF; 48 paralogues &#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x611F;&#x67D3;&#x6A21;&#x578B;&#x4E5F;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5206;&#x6790;&#x3002;Bba01 &#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x57FA;&#x56E0;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x7684;&#x79CD; &#xFF1B; &#x53EA;&#x6709; p13 paralogue&#x6B63;&#x662F;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C; BBA01 &#x86CB;&#x767D;&#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x83CC;&#x682A;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;paralogues bbi31&#x3001; bbq06 &#x548C; bbh41 &#x53EA;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5728; B.&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x548C;&#x7A9D;&#x85CF; bbi31 &#x548C; bbh41 &#x7684;&#x76F8;&#x5E94;&#x8D28;&#x7C92;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x901A;&#x8FC7;&#x671F;&#x95F4;&#x4E22;&#x5931;&#x4E86;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;p13 &#x548C; bbi31 &#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x7684; 48&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x611F;&#x67D3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

P13 &#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5B83;&#x7684; paralogue &#x5BB6;&#x65CF; 48 &#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

The aetiological agent of Lyme disease, Borrelia burgdorferi cycles between its tick vector and mammalian hosts, implying that it can sense different environments and consequently change the expression of genes encoding several surface-associated proteins. The genome of the type strain B. burgdorferi B31 has revealed 175 different gene families. The p13 gene, situated on the chromosome, encodes a channel-forming protein that belongs to the gene family 48 consisting of eight additional paralogous genes. The heterogeneity of the P13 protein from different Lyme disease Borrelia strains was investigated. The predicted surface-exposed domains are the most heterogeneous regions and contain probable epitopes of P13. The membrane-spanning architecture of P13 was determined and a model for the location of this protein in the outer membrane is presented. The transcription of the paralogues of gene family 48 during in vitro culturing and in a mouse infection model was also analysed. The bba01 gene is the only p13 paralogue present in all three Lyme-disease-causing genospecies; it is stable during cultivation in vitro and the BBA01 protein was expressed in all Borrelia strains investigated. Conversely, paralogues bbi31, bbq06 and bbh41 were only detected in B. burgdorferi and the corresponding plasmids harbouring bbi31 and bbh41 were lost during in vitro passage. Finally, p13 and bbi31 are the only members of gene family 48 that are transcribed in mice, suggesting their importance during mammalian infection.

Molecular analysis of the channel-forming protein P13 and its paralogue family 48 from different Lyme disease Borrelia species.

L&#39;agent &eacute;tiologique de la maladie de Lyme, Borrelia burgdorferi cycles entre les tiques vectrices et les h&ocirc;tes mammif&egrave;res, ce qui implique qu&#39;il peut d&eacute;tecter des environnements diff&eacute;rents et par cons&eacute;quent de modifier l&#39;expression des g&egrave;nes codant pour des prot&eacute;ines de surface associ&eacute;es &agrave; plusieurs. Le g&eacute;nome de la souche de type b. burgdorferi B31 a r&eacute;v&eacute;l&eacute; 175 familles de g&egrave;nes diff&eacute;rents. Le g&egrave;ne p13, situ&eacute; sur le chromosome, code pour une prot&eacute;ine formant le chenal qui appartient &agrave; la famille de g&egrave;nes 48 compos&eacute; de huit g&egrave;nes paralogues suppl&eacute;mentaires. Les auteurs avait &eacute;tudi&eacute; l&#39;h&eacute;t&eacute;rog&eacute;n&eacute;it&eacute; de la prot&eacute;ine P13 de diff&eacute;rentes souches de Borrelia la maladie de Lyme. Les domaines expos&eacute;s &agrave; la surface pr&eacute;vus sont les r&eacute;gions les plus h&eacute;t&eacute;rog&egrave;nes et contiennent des &eacute;pitopes probables de P13. L&#39;architecture transmembranaire de P13 a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute; et nous pr&eacute;sentons un mod&egrave;le pour l&#39;emplacement de cette prot&eacute;ine dans la membrane externe. La transcription de la paralogues de famille de g&egrave;nes 48 au cours de la mise en culture in vitro et chez la souris une infection a &eacute;t&eacute; &eacute;galement analys&eacute;e. Le g&egrave;ne bba01 est le paralogue p13 seuls pr&eacute;sent dans toutes les trois genospecies qui causent la maladie de Lyme ; Il est stable pendant la culture in vitro et la prot&eacute;ine de BBA01 a &eacute;t&eacute; exprim&eacute;e dans toutes les souches de Borrelia &eacute;tudi&eacute;es. &Agrave; l&#39;inverse, bbh41, bbq06 et bbi31 paralogues ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s seulement &agrave; b. burgdorferi et les plasmides correspondants abriter des bbi31 et des bbh41 ont &eacute;t&eacute; perdus au cours du passage in vitro. Enfin, p13 et bbi31 sont les seuls membres de la famille de g&egrave;nes 48 sont transcrits chez la souris, sugg&eacute;rant leur importance lors de l&#39;infection chez les mammif&egrave;res.

Analyse mol&eacute;culaire de la prot&eacute;ine formant le chenal P13 et sa famille paralogue 48 de la maladie de Lyme diff&eacute;rente esp&egrave;ces de Borrelia.

Die molekulare Analyse der Kanal-bildenden Proteins P13 und ihre Familie Paralog 48 aus verschiedenen Lyme-Borreliose Borrelia-Spezies.

L&#39;agente eziologico della malattia di Lyme, Borrelia burgdorferi cicli fra il suo vettore di tick e ospita mammiferi, implicando che pu&ograve; percepire diversi ambienti e di conseguenza modificare l&#39;espressione dei geni che codificano per diverse proteine di superficie-associati. Il genoma del ceppo di tipo b. burgdorferi B31 ha rivelato 175 famiglie diverse gene. Il gene p13, situato sul cromosoma, codifica una proteina formando canale che appartiene alla famiglia genica 48 composto da otto geni paralogous supplementari. L&#39;eterogeneit&agrave; della proteina P13 da diversi ceppi di Borrelia malattia di Lyme &egrave; stata studiata. I predetti domini superficie esposta sono le regioni pi&ugrave; eterogenee e contengono epitopi probabili di P13. L&#39;architettura di P13 membrana spanning &egrave; stato determinato e viene presentato un modello per la posizione di questa proteina nella membrana esterna. La trascrizione del paralogues della famiglia genica 48 durante la coltura in vitro e in un modello di infezione del mouse &egrave; stato anche analizzata. Il gene bba01 &egrave; il solo p13 paralogue presente in tutte le tre genospecies che causano malattia di Lyme; &egrave; stabile durante la coltivazione in vitro e la proteina di BBA01 &egrave; stata espressa in tutti i ceppi di Borrelia indagati. Al contrario, bbh41, bbq06 e paralogues bbi31 sono stati rilevati solo in b. burgdorferi e i corrispondenti plasmidi che ospita bbi31 e bbh41 sono stati persi durante il passaggio in vitro. Infine, p13 e bbi31 sono gli unici membri della famiglia genica 48 che sono trascritti nel topo, suggerendo loro importanza durante l&#39;infezione dei mammiferi.

Analisi molecolare della proteina canale formando P13 e la sua famiglia paralogue 48 da diversa specie di Borrelia la malattia di Lyme.

&#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x75C5;&#x306E;&#x56E0;&#x679C;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x306F;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x611F;&#x3058;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x304C;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x9593;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x578B;&#x3072;&#x305A;&#x307F; B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA; B31 &#x306E; 175 &#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;P13 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0A;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC; 48 &#x306B;&#x5C5E;&#x3057;&#x3066;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; 8 &#x3064;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0; paralogous &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x3002;P13 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x75C5;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x682A;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x9732;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x6700;&#x3082;&#x7570;&#x7A2E;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x304A;&#x3088;&#x3073; P13 &#x306E;&#x3042;&#x308A;&#x305D;&#x3046;&#x306A;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;P13 &#x306E;&#x819C;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x304C;&#x308B;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x304C;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;In vitro &#x57F9;&#x990A;&#x6642;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC; 48 paralogues &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3082;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Bba01 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;3 &#x3064;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x75C5;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059; genospecies &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x552F;&#x4E00; p13 paralogue &#x3067;&#x3059;;in vitro &#x57F9;&#x990A;&#x6642;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A; BBA01 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x682A;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x9006;&#x306B;&#x3001;paralogues bbi31&#x3001;bbq06&#x3001;bbh41 B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C; bbi31 &#x3068; bbh41 &#x3092;&#x304D;&#x3087;&#x304F;&#x3072;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x9053;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;.&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;p13 &#x3068; bbi31 &#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC; 48 &#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; P13 &#x3068;&#x305D;&#x306E; paralogue &#x5BB6;&#x65CF; 48 &#x304B;&#x3089;&#x5225;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x75C5;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x7A2E;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x89E3;&#x6790;

&#xB77C;&#xC784; &#xBCD1;&#xC758; aetiological &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; Borrelia burgdorferi &#xD2F1; &#xBCA1;&#xD130;&#xC640; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;, &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD658;&#xACBD; &#xAC10;&#xC9C0; &#xACE0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xC744; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xC815;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD;&#xD560; &#xC218; &#xC554;&#xC2DC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xC2DD; &#xBCC0;&#xD615; B. burgdorferi B31 &#xAC8C;&#xB188; 175 &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. P13 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871; 48&#xC5D0; &#xC18D;&#xD558;&#xB294; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; paralogous &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C;. &#xB2E4;&#xB978; &#xB77C;&#xC784; &#xC9C8;&#xBCD1; Borrelia &#xAE34;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; P13 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xCE21; &#xB41C; &#xD45C;&#xBA74; &#xB178;&#xCD9C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC774;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xC5ED; &#xBC0F; p13&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; epitopes&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;. P13 &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCE5C; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xC2DC;. &#xCCB4; &#xC678; &#xBC30;&#xC591; &#xC911; &#xACE0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871; 48 paralogues &#xC804;&#xC0AC;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. Bba01 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xBAA8;&#xB450; &#xC138; &#xB77C;&#xC784; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC720;&#xBC1C; genospecies;&#xC5D0; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; p13 paralogue &#xADF8;&#xAC83;&#xC774; &#xCCB4; &#xC678; &#xBC30;&#xC591; &#xC911; &#xC548;&#xC815; &#xBC0F; BBA01 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC870;&#xC0AC; &#xBAA8;&#xB4E0; Borrelia &#xAE34;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, paralogues bbi31, bbq06 &#xBC0F; bbh41 B. burgdorferi&#xC5D0;&#xB9CC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB41C; &#xBC0F; bbi31 &#xBC0F; bbh41&#xB97C; &#xC624; &#xD574;&#xB2F9; plasmids &#xCCB4; &#xC678; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBD84;&#xC2E4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, p13 &#xBC0F; bbi31 &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xBA64;&#xBC84;&#xC5D0;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871; 48 &#xC950;, &#xBCF5;&#xC0AC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; P13 &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xB77C;&#xC784; &#xC9C8;&#xBCD1; Borrelia &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; paralogue &#xAC00;&#xC871; 48&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D;.

El agente etiol&oacute;gico de la enfermedad de Lyme, Borrelia burgdorferi ciclos entre su vector garrapata y anfitriones mam&iacute;feros, lo que implica que puede detectar diferentes ambientes y en consecuencia cambiar la expresi&oacute;n de genes que codifican varias prote&iacute;nas asociadas a superficie. El genoma de la cepa de tipo B. burgdorferi B31 ha revelado 175 familias de genes diferentes. El gen p13, situado en el cromosoma, codifica una prote&iacute;na de canal-formaci&oacute;n que pertenece a la familia de gene 48 que consta de ocho genes par&aacute;logo adicionales. Se investig&oacute; la heterogeneidad de la prote&iacute;na P13 de diferentes cepas de Borrelia de la enfermedad de Lyme. Los dominios de superficie expuesta previstos son las regiones m&aacute;s heterog&eacute;neas y contienen epitopos probable de P13. Se determin&oacute; la arquitectura que atraviesan la membrana de P13 y se presenta un modelo para la ubicaci&oacute;n de esta prote&iacute;na en la membrana externa. Tambi&eacute;n se analiz&oacute; la transcripci&oacute;n de la defendieron de familia del gene 48 durante el cultivo in vitro y en un modelo murino de infecci&oacute;n. El gen de la bba01 es el &uacute;nico p13 paralogue presente en los tres genospecies que causan la enfermedad de Lyme; es estable durante el cultivo in vitro y la prote&iacute;na BBA01 se expres&oacute; en todas las cepas de Borrelia investigadas. Por el contrario, bbh41, bbq06 y bbi31 defendieron, s&oacute;lo se detectaron en B. burgdorferi y la correspondiente pl&aacute;smidos dan cobijo a bbi31 y bbh41 se perdieron durante el paso in vitro. Finalmente, p13 y bbi31 son los &uacute;nicos miembros de la familia de genes 48 que se transcriben en ratones, sugiriendo su importancia durante la infecci&oacute;n mam&iacute;fera.

An&aacute;lisis molecular de la prote&iacute;na de canal-formando P13 y su familia paralogue 48 de la enfermedad de Lyme diferente especies de Borrelia.

&#x5047;&#x5B9A;&#x7FA7;&#x57FA;&#x672B;&#x7AEF;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; &#xFF08;CtpA&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53; B31 &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;B.&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53; CtpA &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x5C55;&#x54C1;&#x5230;&#x591A;&#x79CD;&#x682A; PCC 6803 &#x84DD;&#x85FB; CtpA &#x9176;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x548C;&#x9AD8;&#x7B49;&#x690D;&#x7269;&#x548C;&#x8FD8;&#x5C55;&#x89C8;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x4E2D;&#x7684;&#x5047;&#x5B9A; CtpA &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x7684; ctpA &#x57FA;&#x56E0;&#x706D;&#x6D3B; B.&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x603B; B.&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x88AB;&#x5206;&#x5F00;&#x7684;&#x53CC;&#x5411;&#x51DD;&#x80F6;&#x7535;&#x6CF3;&#x548C;&#x63ED;&#x793A; ctpA &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E0D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x516D;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C;&#x4E5D;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; ctpA &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4E86;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4E2D;&#x65E0;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x79EF;&#x5206;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; P13 &#x662F;&#x66F4;&#x5927;&#x548C;&#x66F4;&#x52A0;&#x9178;&#x6027; pI ctpA &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x7B26;&#x5408; pI P13 &#x7684;&#x7406;&#x8BBA;&#x6539;&#x53D8;&#x4E86;&#x672A;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x7FA7;&#x57FA;&#x603B;&#x7AD9;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x8F85;&#x52A9;&#x6FC0;&#x5149;&#x89E3;&#x5438;&#x7535;&#x79BB;-&#x98DE;&#x884C;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x9664;&#x4E86; P13&#xFF0C;BB0323 &#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x7FA7;&#x57FA;&#x672B;&#x7AEF;&#x5904;&#x7406;&#x7684; CtpA&#x3002;CtpA &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E92;&#x8865;&#x5206;&#x6790;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x89C2;&#x6D4B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5355;&#x72EC;&#x7684; ctpA &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5931;&#x6D3B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; B.&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684; CtpA &#x53C2;&#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; P13 &#x548C; BB0323 &#x7B49;&#x7684;&#x5904;&#x7406;&#x548C;&#x90A3;&#x4E2A;&#x706D;&#x6D3B;&#x7684; ctpA &#x6709; borrelial &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x591A;&#x6548;&#x6027;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5C31;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x77E5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x9996;&#x6B21;&#x5206;&#x6790; CtpA &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3002;

&#x706D;&#x6D3B;&#x7FA7;&#x57FA;&#x672B;&#x7AEF;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;CtpA&#xFF0C;&#x5728;&#x4F2F;&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

A gene encoding a putative carboxyl-terminal protease (CtpA), an unusual type of protease, is present in the Borrelia burgdorferi B31 genome. The B. burgdorferi CtpA amino acid sequence exhibits similarities to the sequences of the CtpA enzymes of the cyanobacterium Synechocystis sp. strain PCC 6803 and higher plants and also exhibits similarities to the sequences of putative CtpA proteins in other bacterial species. Here, we studied the effect of ctpA gene inactivation on the B. burgdorferi protein expression profile. Total B. burgdorferi proteins were separated by two-dimensional gel electrophoresis, and the results revealed that six proteins of the wild type were not detected in the ctpA mutant and that nine proteins observed in the ctpA mutant were undetectable in the wild type. Immunoblot analysis showed that the integral outer membrane protein P13 was larger and had a more acidic pI in the ctpA mutant, which is consistent with the theoretical change in pI for P13 not processed at the carboxyl terminus. Matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight data indicated that in addition to P13, the BB0323 protein may serve as a substrate for carboxyl-terminal processing by CtpA. Complementation analysis of the ctpA mutant provided strong evidence that the observed effect on proteins depended on inactivation of the ctpA gene alone. We show that CtpA in B. burgdorferi is involved in the processing of proteins such as P13 and BB0323 and that inactivation of ctpA has a pleiotropic effect on borrelial protein synthesis. To our knowledge, this is the first analysis of both a CtpA protease and different substrate proteins in a pathogenic bacterium.

Pleiotropic effects of inactivating a carboxyl-terminal protease, CtpA, in Borrelia burgdorferi.

Un g&egrave;ne codant une prot&eacute;ase de carboxyl terminal putative (CPAF), un type inhabituel de la prot&eacute;ase, est pr&eacute;sent dans le g&eacute;nome de B31 de burgdorferi de Borrelia. La s&eacute;quence d&#39;acides amin&eacute;s CPAF de b. burgdorferi pr&eacute;sente des similitudes avec les s&eacute;quences des enzymes de la cyanobact&eacute;rie souche Synechocystis PCC 6803 CPAF et plantes sup&eacute;rieures et pr&eacute;sente &eacute;galement des similitudes avec les s&eacute;quences des prot&eacute;ines putatives de CPAF chez d&#39;autres esp&egrave;ces bact&eacute;riennes. Ici, nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;effet de l&#39;inactivation de g&egrave;nes CPAF sur le profil d&#39;expression de prot&eacute;ine b. burgdorferi. Total de b. burgdorferi prot&eacute;ines ont &eacute;t&eacute; s&eacute;par&eacute;es par &eacute;lectrophor&egrave;se sur gel en deux dimensions et les r&eacute;sultats ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que six prot&eacute;ines du type sauvage n&#39;ont pas d&eacute;tect&eacute;s dans le mutant CPAF et que neuf prot&eacute;ines chez le mutant CPAF &eacute;taient ind&eacute;tectables chez le type sauvage. Immunobuvardage ont montr&eacute; que la prot&eacute;ine int&eacute;grale de membrane externe P13 &eacute;tait plus grande et avait une pI plus acide chez le mutant CPAF, qui concorde avec le changement th&eacute;orique de pI pour P13 pas trait&eacute;e &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; carboxyle. Laser assist&eacute;e par matrice d&eacute;sorption ionisation-temps de vol, les donn&eacute;es indiquent qu&#39;outre P13, la prot&eacute;ine BB0323 peut-&ecirc;tre servir de substrat pour carboxyl terminal de traitement de la CPAF. Analyse de compl&eacute;mentation du mutant CPAF a fourni des preuves solides que l&#39;effet observ&eacute; sur les prot&eacute;ines d&eacute;pendait de l&#39;inactivation du g&egrave;ne CPAF seul. Nous montrons que la CPAF &agrave; b. burgdorferi est impliqu&eacute; dans la transformation des prot&eacute;ines telles que P13 et BB0323 et que l&#39;inactivation de la CPAF a un effet pl&eacute;iotropique sur la synth&egrave;se prot&eacute;ique borrelial. &Agrave; notre connaissance, il s&#39;agit de la premi&egrave;re analyse d&#39;une prot&eacute;ase CPAF et diff&eacute;rents substrats prot&eacute;iques dans une bact&eacute;rie pathog&egrave;ne.

Effets pl&eacute;iotropiques d&#39;inactiver une prot&eacute;ase carboxyl terminal, CPAF, Borrelia burgdorferi.

Pleiotrope Effekte zur Inaktivierung eines Carboxyl-terminalen Protease, CTPA, Borrelia burgdorferi.

Un gene che codifica per una putativa proteasi carbossi-terminale (CtpA), un tipo insolito di proteasi, &egrave; presente nel genoma Borrelia burgdorferi B31. La b. burgdorferi CtpA sequenza aminoacidica presenta analogie con le sequenze degli enzimi CtpA del cyanobacterium struttura ceppo SP. PCC 6803 e piante superiori e presenta anche analogie con le sequenze delle proteine CtpA putative in altre specie batteriche. Qui, abbiamo studiato l&#39;effetto di inattivazione genica ctpA sul profilo di espressione della proteina b. burgdorferi. Totale b. burgdorferi proteine sono state separate da elettroforesi bidimensionale e i risultati hanno rivelati che sei proteine del wild type non sono state rilevate nel mutante ctpA e che nove proteine osservate nel mutante ctpA erano rilevabili in wild type. Immunoblot analisi ha mostrato che la proteina integrale di membrana esterna P13 era grande e aveva un pI pi&ugrave; acido in ctpA mutante, che &egrave; coerente con il cambiamento teorico in pI per P13 non elaborato presso il terminus carbossilico. Matrix-assisted laser desorbimento ionizzazione-tempo di volo dati hanno indicato che, oltre a P13, la proteina BB0323 pu&ograve; servire come substrato per l&#39;elaborazione di carbossi-terminale da CtpA. Analisi di complementazione del mutante ctpA fornito forti prove che l&#39;effetto osservato sulle proteine dipendeva dalla inattivazione del gene ctpA da solo. Mostriamo che CtpA in b. burgdorferi &egrave; coinvolto nell&#39;elaborazione delle proteine quali P13 e BB0323 e che l&#39;inattivazione del ctpA ha un effetto pleiotropico sulla sintesi proteica borrelial. A nostra conoscenza, questa &egrave; la prima analisi di una proteasi CtpA e di proteine differenti del substrato in un batterio patogeno.

Effetti pleiotropici di inattivare una proteasi carbossi-terminale, CtpA, nella Borrelia burgdorferi.

&#x63A8;&#x5B9A;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x672B;&#x7AEF;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; (CtpA) &#x7279;&#x6B8A;&#x578B;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2; &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA; B31 &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA; CtpA &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x30B7;&#x30A2;&#x30CE; &#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x691C;&#x7D22;&#x682A;&#x306E; PCC 6803 CtpA &#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3068;&#x9AD8;&#x7B49;&#x690D;&#x7269;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3082;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x7A2E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x63A8;&#x5B9A; CtpA &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306B; ctpA &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5B66;&#x3093;&#x3060;&#x3002;&#x5408;&#x8A08; B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 2&#x6B21;&#x5143;&#x30B2;&#x30EB;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B; ctpA &#x5909;&#x7570;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3068; ctpA &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F; 9 &#x3064;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x7A4D;&#x5206;&#x306E;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; P13 &#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x9178;&#x6027;&#x306E; pI P13 &#x306E; pI &#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; ctpA &#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x57FA;&#x5074;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x652F;&#x63F4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8131;&#x96E2;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x6642;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8; &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; P13 &#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066; BB0323 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; CtpA &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x672B;&#x7AEF;&#x51E6;&#x7406;&#x7528;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x89E3;&#x6790; ctpA &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5358;&#x72EC;&#x3067; ctpA &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x5F37;&#x3044;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x306B; CtpA &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; P13 &#x3084; BB0323 &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E; ctpA &#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x591A;&#x9762; borrelial &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306B;&#x3053;&#x308C; CtpA &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x57FA;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x672B;&#x7AEF;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;CtpA&#x3001;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x3067;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x591A;&#x9762;&#x52B9;&#x679C;&#x3002;

&#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; putative carboxyl &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (CtpA)&#xB294; &#xD2B9;&#xC774; &#xD55C; &#xC720;&#xD615;&#xC758; protease, &#xC778;&#xCF54;&#xB529; Borrelia burgdorferi B31 &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. B. burgdorferi CtpA &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; cyanobacterium Synechocystis sp. &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; PCC 6803 CtpA &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xACFC; &#xB192;&#xC740; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xADE0; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1; CtpA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xAE30;&#xB3C4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; ctpA &#xC720;&#xC804;&#xC790; B. burgdorferi &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD1D; B. burgdorferi &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC824; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785;&#xC758; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; ctpA &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; ctpA &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; 9 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Immunoblot &#xBD84;&#xC11D; &#xD1B5;&#xD569; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; p13&#xB294; &#xD070; p13&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Pi&#xC5D0; &#xC774;&#xB860;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; ctpA &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xB354; &#xC0B0; &#xC131; &#xD30C;&#xC774; &#xD558;&#xC9C0; carboxyl &#xC2EC;&#xD50C;&#xD558;&#xAC8C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; &#xB808;&#xC774;&#xC800; desorption &#xC774;&#xC628;&#xD654;-&#xC2DC;&#xAC04;&#xC758; &#xBE44;&#xD589; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD45C;&#xC2DC; P13, &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; BB0323 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Ctpa&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; carboxyl &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. CtpA &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD63C;&#xC790; ctpA &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xAC15;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; B. burgdorferi&#xC758; CtpA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; P13, BB0323 &#xB4F1;&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; Ctpa&#xC758; &#xADF8; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; borrelial &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xB2E4; &#xBA74; &#xBC1C;&#xD604; &#xC131; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC744; &#xD558;&#xB824;&#xBA74;&#xC774; CtpA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBD84;&#xC11D; &#xC774;&#xB2E4;.

&#xB2E4; &#xBA74; &#xBC1C;&#xD604; &#xC131; &#xD6A8;&#xACFC; carboxyl &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; protease, CtpA, Borrelia burgdorferi&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;.

Un gen que codifica una supuesta carboxilo-terminal proteasa (CtpA), un tipo inusual de proteasa, est&aacute; presente en el genoma de Borrelia burgdorferi B31. La secuencia de amino&aacute;cidos CtpA B. burgdorferi presenta similitudes con las secuencias de las enzimas CtpA de la cianobacteria cepa SP de Synechocystis PCC 6803 y plantas superiores y tambi&eacute;n exhibe semejanzas a las secuencias de prote&iacute;nas de CtpA putativas en otras especies bacterianas. Aqu&iacute;, se estudi&oacute; el efecto de la inactivaci&oacute;n del gen de ctpA en el perfil de expresi&oacute;n de prote&iacute;nas B. burgdorferi. Total de B. burgdorferi prote&iacute;nas se separaron por electroforesis bidimensional y los resultados revelaron que no se detectaron seis prote&iacute;nas del tipo salvaje en el mutante ctpA y que nueve prote&iacute;nas observadas en el mutante ctpA eran imperceptibles en el tipo salvaje. An&aacute;lisis de Immunoblot demostr&oacute; que la prote&iacute;na de membrana externa integral P13 era m&aacute;s grande y ten&iacute;a una pI m&aacute;s &aacute;cido en el mutante ctpA, que concuerda con el cambio te&oacute;rico en pI para P13 no procesado en el terminal de carboxilo. L&aacute;ser asistida por matriz desorci&oacute;n de ionizaci&oacute;n-tiempo de vuelo, los datos indicaron que adem&aacute;s P13, la prote&iacute;na BB0323 puede servir como sustrato para el procesamiento de carboxilo-terminal por CtpA. An&aacute;lisis de la complementaci&oacute;n del mutante ctpA proporcionan pruebas s&oacute;lidas de que el efecto observado en prote&iacute;nas depende de la inactivaci&oacute;n del gen ctpA solo. Demostramos que CtpA en B. burgdorferi participa en el procesamiento de prote&iacute;nas como P13 y BB0323 y la inactivaci&oacute;n del ctpA tiene un efecto pleiotr&oacute;pico sobre la s&iacute;ntesis de prote&iacute;nas borrelial. A nuestro conocimiento, &eacute;ste es el primer an&aacute;lisis de una proteasa CtpA tanto prote&iacute;nas sustrato diferentes en una bacteria pat&oacute;gena.

Efectos pleiotr&oacute;picos de inactivar una proteasa carboxilo-terminal, CtpA, en Borrelia burgdorferi.

&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5C55;&#x54C1;&#x5197;&#x4F59;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x8BB8;&#x591A;&#x8D28;&#x7C92;&#x8FDB;&#x884C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C5E;&#x4E8E; paralogous &#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x3002;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x67D0;&#x4E9B; paralogs &#x53EF;&#x80FD;&#x9700;&#x8981;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0D;&#x540C;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7801;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x7684; p13 &#x5C5E;&#x4E8E; paralog &#x5BB6;&#x65CF; 48&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC; 8 &#x4E2A;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x4ECE;&#x5BB6;&#x5EAD; 48 paralogous &#x57FA;&#x56E0;&#x7684; BBA01 &#x57FA;&#x56E0;&#x5DF2;&#x5230; p13 &#x6700;&#x9AD8;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x706D;&#x6D3B; B.&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x83CC; BBA01 &#x57FA;&#x56E0; B31 A.&#x6B64;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6CA1;&#x6709;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5206;&#x6790; BBA01 C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; A &#xFF08;CtpA&#xFF09;-&#x7F3A;&#x4E4F;&#x80CC;&#x666F;&#x663E;&#x793A;&#x50CF; P13&#xFF0C;BBA01 posttranslationally &#x5728;&#x5904;&#x7406;&#x5176; C &#x603B;&#x7AD9;&#x3002;&#x9AD8;&#x67B6;&#x7684; BBA01 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x662F;&#x4E0E; BBA01 &#x57FA;&#x56E0;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x83CC;&#x682A;&#x76F8;&#x6BD4;&#x7A7F;&#x68AD;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4E0A;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x83B7;&#x5F97;&#x682A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BC1;&#x660E; BBA01 &#x5C5E;&#x6027;&#x60CA;&#x4EBA;&#x76F8;&#x4F3C; P13 &#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5355;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x7535;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x5927;&#x7EA6;&#x662F; 3.5 &#x7684; nS&#xFF0C;&#x7531; BBA01 &#x7EC4;&#x6210;&#xFF0C;&#x662F;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E; P13&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x8868;&#x660E;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x548C;&#x4E92;&#x6362;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x52A0;&#x5F3A; BBA01 &#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5176;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316; p13 &#x6316;&#x7A7A;&#x5E94;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7; BBA01 &#x53D6;&#x4EE3; P13 &#x7684;&#x5916;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;

BBA01 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5927;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458; paralog 48 &#x4ECE;&#x4F2F;&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#xFF0C;&#x662F;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E92;&#x6362;&#x7684; P13 &#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;

The Borrelia burgdorferi genome exhibits redundancy, with many plasmid-carried genes belonging to paralogous gene families. It has been suggested that certain paralogs may be necessary in various environments and that they are differentially expressed in response to different conditions. The chromosomally located p13 gene which codes for a channel-forming protein belongs to paralog family 48, which consists of eight additional genes. Of the paralogous genes from family 48, the BBA01 gene has the highest homology to p13. Herein, we have inactivated the BBA01 gene in B. burgdorferi strain B31-A. This mutant shows no apparent phenotypic difference compared to the wild type. However, analysis of BBA01 in a C-terminal protease A (CtpA)-deficient background revealed that like P13, BBA01 is posttranslationally processed at its C terminus. Elevated BBA01 expression was obtained in strains with the BBA01 gene introduced on the shuttle vector compared to the wild-type strain. We could further demonstrate that BBA01 is a channel-forming protein with properties surprisingly similar to those of P13. The single-channel conductance, of about 3.5 nS, formed by BBA01 is comparable to that of P13, which together with the high degree of sequence similarity suggests that the two proteins may have similar and interchangeable functions. This is further strengthened by the up-regulation of the BBA01 protein and its possible localization in the outer membrane in a p13 knockout strain, thus suggesting that P13 can be replaced by BBA01.

The BBA01 protein, a member of paralog family 48 from Borrelia burgdorferi, is potentially interchangeable with the channel-forming protein P13.

Le g&eacute;nome de burgdorferi de Borrelia expose redondance, avec de nombreux g&egrave;nes de plasmide-transportait appartenant &agrave; des familles de g&egrave;nes paralogues. Il a &eacute;t&eacute; sugg&eacute;r&eacute; que certaines paralogues peut &ecirc;tre n&eacute;cessaire dans des environnements vari&eacute;s et qu&#39;ils sont exprim&eacute;s en r&eacute;ponse &agrave; des conditions diff&eacute;rentes. Le g&egrave;ne chromosomique p13 qui code pour une prot&eacute;ine formant le chenal appartient &agrave; la famille de paralogue 48, qui se compose de huit g&egrave;nes suppl&eacute;mentaires. Des g&egrave;nes paralogues de famille 48, le g&egrave;ne BBA01 a la plus forte homologie avec p13. Ici, nous avons inactiv&eacute; le g&egrave;ne BBA01 chez la souche de b. burgdorferi B31-A. Ce mutant ne montre aucune diff&eacute;rence ph&eacute;notypique apparent par rapport &agrave; la souche sauvage. Toutefois, analysis of BBA01 dans une prot&eacute;ase de C-terminal A (CtpA)-fond d&eacute;ficient a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que comme P13, BBA01 apr&egrave;s traitement &agrave; son extr&eacute;mit&eacute; C terminale. Expression BBA01 &eacute;lev&eacute;e a &eacute;t&eacute; obtenue chez les souches avec le g&egrave;ne BBA01, introduit sur le vecteur navette par rapport &agrave; la souche sauvage. Nous pourrions encore d&eacute;montrer que BBA01 est une prot&eacute;ine formant le chenal avec propri&eacute;t&eacute;s &eacute;tonnamment semblables &agrave; celles de P13. La conductance monocanal, d&#39;environ 3,5 nS, form&eacute;s par BBA01 est comparable &agrave; celle de P13, qui, avec le haut degr&eacute; de similarit&eacute; de s&eacute;quence, sugg&egrave;re que les deux prot&eacute;ines peuvent avoir des fonctions semblables et interchangeables. Ceci est encore renforc&eacute; par la r&eacute;gulation de la prot&eacute;ine de BBA01 et de sa localisation possible dans la membrane externe dans une souche de p13, sugg&eacute;rant ainsi que P13 peut &ecirc;tre remplac&eacute; par BBA01.

La prot&eacute;ine BBA01, un membre de la famille 48 de paralogue de Borrelia burgdorferi, est potentiellement interchangeable avec la prot&eacute;ine formant le chenal P13.

Das Borrelia Burgdorferi Genom Exponate Redundanz, mit vielen Plasmid-getragene Genen paralogen gen Familien geh&ouml;ren. Es wurde vermutet, dass bestimmte Paralogs in den verschiedenen Umgebungen erforderlich ist und dass sie als Reaktion auf verschiedene Bedingungen differentiell exprimiert werden. Das bei liegt p13-gen, das f&uuml;r ein Kanal-bildende Protein codes geh&ouml;rt zu Paralog Familie 48, bestehend aus acht zus&auml;tzliche Gene. Der paralogen Gene aus 48-Familie hat das BBA01-gen die h&ouml;chste Homologie zu p13. Hier haben wir das BBA01-gen in B. Burgdorferi Stamm inaktiviert B31-A. Diese Mutante zeigt keine sichtbaren ph&auml;notypische Unterschied im Vergleich zu den Wild-Typ. Jedoch, Analyse der BBA01 in einer C-terminalen Protease A (CtpA)-mangelhafte Hintergrund ergab, dass wie P13, BBA01 seine C-Terminus posttranslational verarbeitet wird. Erh&ouml;hten BBA01 Ausdruck bekam bei den St&auml;mmen mit dem BBA01-gen auf den Shuttle zum Vektor im Vergleich zu der Wildtyp-Stamm eingef&uuml;hrt. Wir k&ouml;nnten weiter zeigen, dass BBA01 ein Kanal-bildende Protein mit Eigenschaften der P13 &uuml;berraschend &auml;hnlich. Den Einkanal-Leitwert von ca. 3.5 nS, gebildet durch BBA01 ist vergleichbar mit der P13, die zusammen mit der hohe Grad an &Auml;hnlichkeit der Sequenz legt nahe, dass die beiden Proteine &auml;hnliche und austauschbare Funktionen haben k&ouml;nnen. Dies wird weiter verst&auml;rkt, der bis-Verordnung &uuml;ber das BBA01-Protein und seine m&ouml;gliche Lokalisierung in die &auml;u&szlig;ere Membran in eine p13 k.o.-Stamm, das P13 durch BBA01 ersetzt werden kann.

Das BBA01-Protein, ein Mitglied der Paralog Familie 48 von Borrelia Burgdorferi, ist potenziell austauschbar mit dem Kanal-bildende Protein P13.

Il genoma di Borrelia burgdorferi esibisce ridondanza, con molti geni del plasmide-trasportato appartenendo a famiglie di paralogous gene. &Egrave; stato suggerito che alcuni paralogs pu&ograve; essere necessario in vari ambienti e che essi sono differenzialmente espressi in risposta a diverse condizioni. Il p13 cromosomicamente trova gene che codifica per una proteina formando canale appartiene alla famiglia paralog 48, che consiste di otto geni supplementari. Dei geni paralogous dalla famiglia 48, il gene BBA01 ha la pi&ugrave; alta omologia p13. Qui, noi abbiamo inattivato il gene BBA01 nel ceppo di b. burgdorferi B31-A. Questa mutante non mostrato alcuna differenza fenotipica apparente rispetto al wild type. Tuttavia, analisi di BBA01 in una proteasi C-terminal A (CtpA)-sfondo deficiente ha rivelato che come P13, BBA01 posttranslationally &egrave; elaborato al suo capolinea C. Elevata espressione di BBA01 &egrave; stata ottenuta in ceppi con il gene BBA01 introdotto sul vettore navetta rispetto al ceppo wild-type. Noi potremmo dimostrare ulteriormente che BBA01 &egrave; una proteina canale formando con propriet&agrave; sorprendentemente simili a quelle di P13. La conduttanza del singolo canale, di circa 3.5 nS, formata da BBA01 &egrave; paragonabile a quella di P13, che insieme con l&#39;alto grado di somiglianza di sequenza suggerisce che le due proteine possono avere funzioni simili e intercambiabili. Ci&ograve; &egrave; ulteriormente rafforzato con la up-regolazione della proteina BBA01 e la possibile localizzazione in membrana esterna in un ceppo di knockout p13, suggerendo cos&igrave; che P13 pu&ograve; essere sostituito da BBA01.

La proteina BBA01, un membro della famiglia paralog 48 da Borrelia burgdorferi, &egrave; potenzialmente intercambiabile con la proteina canale formando P13.

&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2; &#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x75C5;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5197;&#x9577;&#x6027;&#x3001;paralogous &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x5C5E;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x904B;&#x3093;&#x3060;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x7279;&#x5B9A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F4D;&#x7F6E; p13 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; 8 &#x3064;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306B; 48&#x3001;&#x5C5E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;48 &#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x304B;&#x3089;&#x306E; paralogous &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; BBA01 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; p13 &#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005; B. &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; BBA01 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x304C; B31 A.&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;BBA01 &#x306E;&#x89E3;&#x6790; (CtpA) &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; A-&#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F; P13 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; BBA01 posttranslationally &#x305D;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x9AD8;&#x67B6; BBA01 &#x5F0F;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3067;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x682A;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30E3;&#x30C8;&#x30EB; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165; BBA01 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x5F97;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3055;&#x3089;&#x306B; BBA01 &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; P13 &#x306B;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x4F3C;&#x3066;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D04; 3.5 &#x306E; BBA01 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B; nS &#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x985E;&#x4F3C;&#x9AD8;&#x5EA6; 2 &#x3064;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3001;&#x4EA4;&#x63DB;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x95A2;&#x6570;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; P13 &#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B; BBA01 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066; P13 BBA01 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3001;p13 &#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x819C;&#x3067;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x898F;&#x5236;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

BBA01 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x5BB6;&#x65CF; 48 &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; P13 &#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x4EA4;&#x63DB;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Borrelia burgdorferi &#xAC8C;&#xB188; paralogous &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC18D;&#xD558;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC911;&#xBCF5;, &#xC804;&#xC2DC;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD2B9;&#xC815; paralogs &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC694;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCF54;&#xB4DC;&#xB294; chromosomally&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; p13 &#xC720;&#xC804;&#xC790; paralog &#xAC00;&#xC871; 48, 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0; &#xC18D;&#xD55C;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xC871; 48&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; paralogous &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; BBA01 &#xC720;&#xC804;&#xC790; p13 &#xCD5C;&#xACE0; &#xC0C1; &#xB3D9;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; B. burgdorferi &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; BBA01 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; B31-1. &#xC774; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; phenotypic &#xCC28;&#xC774; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBD84;&#xC11D; bba01&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; A (CtpA)-&#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xBC30;&#xACBD; &#xBC1D;&#xD600; &#xADF8; P13, &#xCC98;&#xB7FC; BBA01 posttranslationally &#xCC98;&#xB9AC;&#xB294; C &#xC885;&#xC810;&#xC5D0;. &#xB192;&#xC740; BBA01 &#xC2DD; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC154;&#xD2C0; &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785; &#xB41C; BBA01 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC885;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4;. BBA01 P13 &#xB180;&#xB77C;&#xC6B8; &#xC815;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xCD94;&#xAC00; &#xC218; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xC57D; 3.5 nS, bba01&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; P13 &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xD559;&#xC704;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xAD50;&#xD658;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC554;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xBE44;&#xAD50;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; BBA01 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; P13 bba01&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xCCB4; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; p13 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB354;&#xC6B1; &#xAC15;&#xD654; &#xB41C;&#xB2E4;.

Paralog &#xC81C;&#xD488;&#xAD70; 48 Borrelia burgdorferi&#xC5D0;&#xC11C; BBA01 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; p13&#xACFC; &#xC0C1;&#xD638; &#xAD50;&#xD658;.

El genoma de Borrelia burgdorferi exhibe redundancia, con muchos genes de pl&aacute;smido-llevado pertenecientes a familias de gene par&aacute;logo. Se ha sugerido que ciertos paralogs pueden ser necesarios en varios ambientes y que se expresan diferencialmente en respuesta a condiciones diferentes. El gen cromos&oacute;mico situado p13 que codifica una prote&iacute;na de canal-formaci&oacute;n pertenece a la familia de paralog 48, que consta de ocho genes adicionales. De los genes par&aacute;logo de familia 48, el gen de la BBA01 tiene la m&aacute;s alta homolog&iacute;a a p13. Aqu&iacute;, nos hemos desactivado el gen de la BBA01 en la cepa B. burgdorferi B31-A. Este mutante muestra diferencias fenot&iacute;picas evidente en comparaci&oacute;n con el tipo salvaje. Sin embargo, an&aacute;lisis de BBA01 en una proteasa C-terminal A (CtpA)-Fondo deficiente revel&oacute; que como P13, BBA01 posttranslationally se procesa en su terminal C. Expresi&oacute;n elevada de BBA01 se obtuvo en cepas con el gen BBA01 introducido en el vector de transporte en comparaci&oacute;n con la cepa de tipo salvaje. Adem&aacute;s podr&iacute;amos demostrar que BBA01 es una prote&iacute;na de canal-formando con caracter&iacute;sticas sorprendentemente similares a los de P13. La conductancia de un canal, de unos 3.5 nS, formados por BBA01 es comparable a la de P13, que junto con el alto grado de semejanza de la secuencia sugiere que ambas prote&iacute;nas pueden tener funciones similares e intercambiables. Esto es reforzado por la para arriba-regulaci&oacute;n de la prote&iacute;na de BBA01 y su posible localizaci&oacute;n en la membrana externa en una cepa de nocaut p13, sugiriendo con ello que P13 puede sustituirse por BBA01.

La prote&iacute;na BBA01, miembro de la familia de paralog 48 de Borrelia burgdorferi, es potencialmente intercambiable con la prote&iacute;na de canal-formando P13.

P66 &#x67D3;&#x8272;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; 66 kDa &#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x51FA;&#x5C55;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x75C5;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; &#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x660E;&#x7D30;&#x66F8;&#x3067;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C; p66 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; B31-A (WT) &#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;P66 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x307E;&#x305F; 2 &#x3064;&#x4ED6;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x3067;&#x3001;P13-18 (Deltap13) &#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068; Deltabba01&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;&#x69D8;&#x3005; &#x306A; p66 &#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3001;P66 &#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A19;&#x7684;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316; P66 &#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x88DC;&#x5B8C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B0;&#x30C9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA; p66 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A19;&#x7684;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3002;

P66 &#x662F;&#x80CE;&#x513F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; 66 kDa &#x79EF;&#x5206;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x4EE3;&#x7406;&#x4F2F;&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x53C2;&#x5C55;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x706D;&#x6D3B;&#x548C;&#x540E;&#x6765;&#x8865;&#x5145; p66 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728; B31-A (WT) &#x5E94;&#x53D8;&#x3002;P66 &#x86CB;&#x767D;&#x4E5F;&#x706D;&#x6D3B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#x7A81;&#x53D8;&#x682A;&#xFF0C;P13-18 (Deltap13) &#x548C; Deltabba01&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C;&#x5404;&#x79CD; p66 &#x7A81;&#x53D8;&#x682A;&#x7684;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x672C;&#x673A;&#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x3001; &#x51C0;&#x5316; P66&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; P66 &#x7684;&#x5B54;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6D88;&#x9664;&#x4E86;&#x63D2;&#x5165;&#x5931;&#x6D3B;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E4B;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6551;&#x51FA;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E92;&#x8865;&#x3002;

&#x6D88;&#x9664;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7531;&#x4F2F;&#x6C0F;&#x758F;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684; p66 &#x57FA;&#x56E0;&#x63D2;&#x5165;&#x5931;&#x6D3B;&#x3002;

P66 is a chromosomally encoded 66-kDa integral outer membrane protein of the Lyme disease agent Borrelia burgdorferi exhibiting channel-forming activity. Herein, we inactivated and subsequently complemented the p66 gene in the B31-A (WT) strain. The P66 protein was also inactivated in two other channel-forming protein mutant strains, P13-18 (Deltap13) and Deltabba01, and then compared with the channel-forming activities of wild-type and various p66 mutant strains. We further investigated the ion-selectivity of native, purified P66. In conclusion, we show that the porin activity of P66 is eliminated by insertional inactivation and that this activity can be rescued by gene complementation.

Elimination of channel-forming activity by insertional inactivation of the p66 gene in Borrelia burgdorferi.

P66 est une prot&eacute;ine de membrane externe integral chromosomiquement cod&eacute;e 66 kDa de l&#39;agent de la maladie de Lyme Borrelia burgdorferi pr&eacute;sentant une activit&eacute; formant le chenal. Dans les pr&eacute;sentes, nous inactiv&eacute; et compl&eacute;t&eacute;e par la suite le g&egrave;ne p66 chez la souche B31-A (WT). La prot&eacute;ine P66 est inactiv&eacute;e &eacute;galement dans deux autres formant le chenal prot&eacute;ine souches mutantes, P13-18 (Deltap13) et Deltabba01 et puis par rapport aux activit&eacute;s de type sauvage et les souches mutantes p66 diverses formant le chenal. Nous encore &eacute;tudi&eacute; l&#39;ion-s&eacute;lectivit&eacute; d&#39;indig&egrave;ne, purifi&eacute; P66. En conclusion, nous montrons que l&#39;activit&eacute; porine de P66 est &eacute;limin&eacute;e par inactivation insertionnelle et que cette activit&eacute; peut &ecirc;tre sauv&eacute;e par compl&eacute;mentation de g&egrave;ne.

&Eacute;limination des formant le chenal activit&eacute; par une inactivation du g&egrave;ne p66 &agrave; Borrelia burgdorferi.

P66 ist ein bei codierten 66-kDa-integral &auml;u&szlig;ere Membran-Protein von der Lyme-Borreliose Agent Borrelia Burgdorferi Kanal-bildenden T&auml;tigkeit ausstellen. Hierin, wir inaktiviert und anschlie&szlig;end erg&auml;nzt das p66-gen in der B31-A (WT)-Stamm. Das P66-Protein wurde auch in zwei anderen Kanal-bildende Protein mutant St&auml;mmen, P13-18 (Deltap13) inaktiviert und Deltabba01, und dann verglichen mit der Kanal-bildenden T&auml;tigkeit der Wildtyp und verschiedenen p66-mutant-St&auml;mme. Wir weiter untersucht die Ion-Selektivit&auml;t von Native, P66 gereinigt. Abschlie&szlig;end zeigen wir, dass die porin Aktivit&auml;t der P66 durch Inaktivierung muss beseitigt werden und dass diese Aktivit&auml;t gen Komplementation gerettet werden kann.

Beseitigung von Kanal-bildenden T&auml;tigkeit durch muss Inaktivierung des Gens p66 in Borrelia Burgdorferi.

P66 &egrave; una proteina integrale di membrana esterna codificati cromosomicamente 66-kDa la malattia di Lyme agente Borrelia burgdorferi espositrici formando canale attivit&agrave;. Nel presente documento, abbiamo inattivato e successivamente completato il gene p66 nel ceppo di B31-A (WT). La proteina P66 &egrave; stata inattivata anche in due altri canali formando proteine ceppi mutanti, P13-18 (Deltap13) e Deltabba01 e poi confrontato con le attivit&agrave; che formano canali del selvaggio-tipo e vari ceppi mutanti p66. Abbiamo ulteriormente indagato la selettivit&agrave; dello ione del nativo, purificato P66. In conclusione, ci mostrano che l&#39;attivit&agrave; di P66 porin &egrave; eliminato da inattivazione inserzionale e che questa attivit&agrave; pu&ograve; essere salvata da complementazione genica.

Eliminazione della formazione di canale attivit&agrave; di inattivazione inserzionale del gene p66 in Borrelia burgdorferi.

P66 &#xB77C;&#xC784; &#xBCD1; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; Borrelia burgdorferi &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC2DC;&#xC758; chromosomally &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; 66 kDa &#xACC4;&#xC5F4; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; B31-A (WT) &#xD53C;&#xB85C; p66 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC644;. P66 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAE34;&#xC7A5;, P13-18 (Deltap13)&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; Deltabba01, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; p66 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354; &#xBCF8;&#xD1A0;&#xC758; &#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xC870;&#xC0AC;, P66 &#xC815;&#xD654;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; P66 porin &#xD65C;&#xB3D9; insertional &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xB420; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70; Borrelia burgdorferi p66 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; insertional &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC;.

P66 es una prote&iacute;na de membrana externa integral cromos&oacute;mico codificado 66 kDa de la agente de la enfermedad de Lyme Borrelia burgdorferi actividad de formaci&oacute;n de canal. Adjunto, inactivado y hab&iacute;a complementada posteriormente el gen p66 en la cepa B31-A (WT). La prote&iacute;na P66 tambi&eacute;n fue inactivada en dos otros canales-formando prote&iacute;nas estirpes mutantes, P13-18 (Deltap13) y Deltabba01 y luego en comparaci&oacute;n con las actividades de formaci&oacute;n de canal de tipo salvaje y varias cepas mutantes de p66. Tenemos m&aacute;s hab&iacute;a investigado el ion-selectividad de nativos, hab&iacute;a purificada P66. En conclusi&oacute;n, nos muestran que la actividad porin de P66 se elimina mediante la inactivaci&oacute;n de insertional y que esta actividad puede ser rescatada por complementaci&oacute;n g&eacute;nica.

Eliminaci&oacute;n de canal-formando la actividad insertional inactivaci&oacute;n del gen p66 en Borrelia burgdorferi.

&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x5728;&#x5176;&#x4E3B;&#x673A;&#x901A;&#x8FC7;&#x8840;&#x6D41;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6574;&#x4E2A;&#x4F20;&#x64AD;&#x7136;&#x540E;&#x4FB5;&#x5165;&#x548C;&#x4ED6;&#x56FD;&#x5404;&#x79CD;&#x4E3B;&#x673A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x5BF9;&#x7531;&#x5176;&#x4E3B;&#x673A;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x9014;&#x5F84;&#x8865;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6740;&#x5BB3;&#x6709;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x7684;&#x4F20;&#x67D3;&#x75C5; leptospires &#x6740;&#x5BB3;&#x3001; &#x548C;&#x4E0E;&#x5404;&#x79CD;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28; (ECM) &#x7EC4;&#x4EF6;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x8389;&#x5A1C;&#x7684;&#x5916;&#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x4EE5;&#x524D;&#x79F0;&#x4E3A; LfhA &#x548C; Lsa24&#xFF09; &#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x793A;&#x8981;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E3B;&#x673A; ECM &#x7EC4;&#x4EF6;&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x8865;&#x4F53;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50;&#x56E0;&#x5B50; H &#x548C; H &#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;-1 &#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x8BC1;&#x660E;&#x4F20;&#x67D3;&#x75C5; L.&#x95EE;&#x53F7;&#x5305;&#x542B;&#x4E94;&#x4E2A;&#x989D;&#x5916; paralogs &#x7684;&#x8389;&#x5A1C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6307;&#x5B9A; lenB&#xFF0C;lenC&#x3001; &#x51FA;&#x501F;&#x3001; &#x604B;&#x7231;&#x548C; lenF&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x516D;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x57DF;&#x9884;&#x8BA1;&#x4E0E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; endostatins &#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5730;&#x65B9;&#x3002;&#x4ECE;&#x4E03;&#x4E2A;&#x4F20;&#x67D3;&#x75C5; L.&#x95EE;&#x53F7;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x68C0;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x5E8F;&#x5217;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7;&#x91CD;&#x7EC4;&#x548C;&#x7247;&#x6BB5;&#x91CD;&#x590D;&#x5E8F;&#x5217;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;LenB &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x8981;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x56E0;&#x7D20; H&#xFF0C;&#x548C;&#x6240;&#x6709;&#x65B0;&#x63CF;&#x8FF0; Len &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;LenB&#x3001; LenC&#x3001; &#x501F;&#x8D37;&#x3001; &#x604B;&#x7231;&#x548C; LenF &#x6240;&#x6709;&#x5C55;&#x51FA;&#x7684;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4EB2;&#x7F18;&#x5173;&#x7CFB;&#x3001; &#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7279;&#x5F81;&#x8868;&#x660E; Len &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E00;&#x8D77;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5165;&#x4FB5;&#x548C;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x4E3B;&#x673A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x9632;&#x6B62;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x95EE;&#x53F7;&#x5185;&#x76AE;&#x6291;&#x7D20;&#x6837;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E3B;&#x673A;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x8865;&#x5145;&#x3002;

The pathogenic spirochete Leptospira interrogans disseminates throughout its hosts via the bloodstream, then invades and colonizes a variety of host tissues. Infectious leptospires are resistant to killing by their hosts' alternative pathway of complement-mediated killing, and interact with various host extracellular matrix (ECM) components. The LenA outer surface protein (formerly called LfhA and Lsa24) was previously shown to bind the host ECM component laminin and the complement regulators factor H and factor H-related protein-1. We now demonstrate that infectious L. interrogans contain five additional paralogs of lenA, which we designated lenB, lenC, lenD, lenE and lenF. All six genes encode domains predicted to bear structural and functional similarities with mammalian endostatins. Sequence analyses of genes from seven infectious L. interrogans serovars indicated development of sequence diversity through recombination and intragenic duplication. LenB was found to bind human factor H, and all of the newly-described Len proteins bound laminin. In addition, LenB, LenC, LenD, LenE and LenF all exhibited affinities for fibronectin, a distinct host extracellular matrix protein. These characteristics suggest that Len proteins together facilitate invasion and colonization of host tissues, and protect against host immune responses during mammalian infection.

Leptospira interrogans endostatin-like outer membrane proteins bind host fibronectin, laminin and regulators of complement.

Le pathog&#xE8;ne spiroch&#xE8;te Leptospira interrogans diffuse tout au long de ses h&#xF4;tes via la circulation sanguine, envahit et colonise ensuite une vari&#xE9;t&#xE9; de tissus de l&#x26;#39;h&#xF4;te. Leptospires infectieuses sont r&#xE9;sistants &#xE0; la destruction par voie de leurs h&#xF4;tes alternative du compl&#xE9;ment m&#xE9;di&#xE9;e par meurtre, et d&#x26;#39;interagir avec diff&#xE9;rents h&#xF4;tes de la matrice extracellulaire (ECM) des composants. La prot&#xE9;ine Lena surface ext&#xE9;rieure (anciennement appel&#xE9; LfhA et Lsa24) a d&#xE9;j&#xE0; &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; pour lier l&#x26;#39;h&#xF4;te composante ECM laminine et le facteur du compl&#xE9;ment r&#xE9;gulateurs H et le facteur H-related protein-1. Nous avons maintenant d&#xE9;montrer que infectieuses L. interrogans contiennent cinq paralogues suppl&#xE9;mentaires de Lena, dont nous d&#xE9;sign&#xE9;es LenB, Lenc, pr&#xEA;ter, Lene et lenF. Tous les six g&#xE8;nes codent pour des domaines pr&#xE9;vus &#xE0; supporter similitudes structurales et fonctionnelles avec endostatins mammif&#xE8;res. Des analyses de s&#xE9;quences de g&#xE8;nes provenant de sept s&#xE9;rotypes infectieuses L. interrogans a indiqu&#xE9; le d&#xE9;veloppement de la diversit&#xE9; des s&#xE9;quences par recombinaison et la duplication intrag&#xE9;nique. LenB &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;e pour lier facteur humain H, et la totalit&#xE9; des prot&#xE9;ines d&#xE9;crites Len nouvellement li&#xE9; laminine. En outre, LenB, Lenc, pr&#xEA;ter, Lene et LenF pr&#xE9;sentaient toutes des affinit&#xE9;s pour la fibronectine, une prot&#xE9;ine de l&#x26;#39;h&#xF4;te distincte de la matrice extracellulaire. Ces caract&#xE9;ristiques sugg&#xE8;rent que les prot&#xE9;ines Len, ensemble, facilitent l&#x26;#39;invasion et la colonisation de tissus de l&#x26;#39;h&#xF4;te, et de prot&#xE9;ger contre les r&#xE9;ponses immunitaires de l&#x26;#39;h&#xF4;te lors de l&#x26;#39;infection chez les mammif&#xE8;res.

Leptospira interrogans endostatine-comme prot&#xE9;ines de membrane externe lier la fibronectine h&#xF4;te, la laminine et les r&#xE9;gulateurs de compl&#xE9;ment

Die pathogenen Spirochete Leptospira Interrogans verbreitet im ganzen seine Hosts &uuml;ber die Blutbahn, dann dringt und kolonisiert eine Vielzahl von Host-Gewebe. Infekti&ouml;se Leptospiren sind best&auml;ndig gegen T&ouml;tung durch ihre Gastgeber alternativer Weg zur Erg&auml;nzung-vermittelte T&ouml;tung und interagieren mit verschiedenen Host extrazellul&auml;ren Matrix (ECM) Komponenten. Das LenA &auml;u&szlig;ere Oberfl&auml;che Protein (fr&uuml;her LfhA und Lsa24) wurde zuvor gezeigt, dass der Host ECM Komponente Laminin binden und die Erg&auml;nzung-Regulatoren Faktor H und H-related Protein 1-Faktor. Wir zeigen nun, dass infekti&ouml;se L. Interrogans enth&auml;lt f&uuml;nf zus&auml;tzliche Paralogs Lena, die wir LenB, LenC benannt, leihen, LenE und LenF. Alle sechs Gene codieren Dom&auml;nen vorhergesagt, um strukturelle und funktionelle &Auml;hnlichkeiten mit S&auml;ugetier-Endostatins zu tragen. Analysen der Sequenz von Genen, die aus sieben infekti&ouml;se L. Interrogans Serovare angegeben Entwicklung der Sequenz Vielfalt durch Rekombination und intragenic Vervielf&auml;ltigung. LenB wurde festgestellt, dass der menschliche Faktor H binden, und alle die neu beschriebenen Len Proteine gebunden Laminin. Dar&uuml;ber hinaus LenB, LenC, LenD, LenE und LenF ausgestellt Affinit&auml;ten f&uuml;r Fibronektin, einer eindeutigen Host extrazellul&auml;ren Matrixprotein. Diese Eigenschaften empfehlen Len Proteine erleichtern Invasion und Kolonisation der Host Gewebe zusammen und sch&uuml;tzen vor Host Immunantworten bei S&auml;ugetieren-Infektion.

Leptospira Interrogans Endostatin-&auml;hnliche &auml;u&szlig;ere Membranproteine binden Host Fibronektin, Laminin und Regulatoren des erg&auml;nzen.

Le spirochete patogene Leptospira interrogans diffonde in tutta la suo host attraverso il circolo ematico, poi invade e colonizza una variet&agrave; di tessuti dell&#39;ospite. Le leptospire infettive sono resistenti alla uccisione di via alternativa loro padroni di casa del complemento-mediato uccidendo e interagire con i vari componenti di matrice extracellulare (ECM) host. La proteina di superficie esterna LenA (precedentemente chiamato LfhA e Lsa24) precedentemente &egrave; stata indicata per associare l&#39;host ECM componente laminina e regolatori del complemento fattore H e fattore H-related protein-1. Dimostriamo ora che infettiva L. interrogans contengono cinque paralogs supplementari di lenA, che abbiamo indicato lenB, lenC, prestare, lenE e lenF. Tutti e sei i geni codificano domini predisse a sopportare le somiglianze strutturali e funzionali con endostatins dei mammiferi. Analisi delle sequenze dei geni da sette infettiva L. interrogans serovar indicano lo sviluppo della diversit&agrave; di sequenza attraverso ricombinazione e duplicazione intragenic. LenB &egrave; stato trovato per associare il fattore umano H, e tutte le proteine di Len appena descritte legate laminina. Inoltre, LenB, LenC, LenD, LenE e LenF esposta un&#39;affinit&agrave; per la fibronectina, una proteina della matrice extracellulare host distinti. Queste caratteristiche suggeriscono che le proteine Len insieme facilitano l&#39;invasione e la colonizzazione dei tessuti dell&#39;ospite e proteggono contro la risposta immunitaria ospite durante l&#39;infezione dei mammiferi.

Leptospira interrogans proteine della membrana esterna endostatina come associare ospitante fibronectina, laminina e regolatori del complemento.

&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30ED;&#x30D8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;interrogans&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6D41;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x5E83;&#x3081;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x4FB5;&#x5165;&#x3068;&#x5B9A;&#x7740;&#x3002;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306F;&#x3001;&#x88DC;&#x4F53;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x306E;&#x6BBA;&#x5BB3;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6BBA;&#x50B7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;ECM&#xFF09;&#x6210;&#x5206;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30CA;&#x5916;&#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;&#x65E7;LfhA&#x3068;Lsa24&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#xFF09;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;ECM&#x6210;&#x5206;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;&#x3068;&#x88DC;&#x4F53;H&#x56E0;&#x5B50;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;H&#x56E0;&#x5B50;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;-1&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;L. interrogans&#x6211;&#x3005;&#x306F;lenB&#x3001;lenC&#x304C;&#x3001;&#x30EC;&#x30CD;&#x3068;lenF&#x3092;&#x8CB8;&#x3057;&#x3066;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EC;&#x30CA;&#x306E;5&#x3064;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;6&#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;endostatins&#x3068;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x3092;&#x8CA0;&#x62C5;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x4E88;&#x6E2C;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 7&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;L. interrogans&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x304B;&#x3089;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5185;&#x91CD;&#x8907;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; LenB&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;H&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x898B;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;LenB&#x3001;LenC&#x3001;&#x8CB8;&#x4E0E;&#x3001;&#x30EC;&#x30CD;&#x3068;LenF&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3001;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x3068;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304B;&#x3089;&#x5B88;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;Interrogans&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x88DC;&#x306E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC2A4;&#xD53C;&#xB85C; Leptospira interrogans, &#xD608; &#xB958;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD574;&#xB2F9; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xC2E0; &#xCE68;&#xACF5; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xC9C1; colonizes. &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; leptospires &#xAC15;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC644;-&#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xC0B4;&#xD574; &#xC0B4;&#xC778;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; (ECM) &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294;. &#xB808;&#xB098; &#xC678;&#xBD80; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (LfhA &#xBC0F; Lsa24 &#xC774;&#xC804;&#xC758; &#xD568;)&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC74C; id&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; ECM &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; laminin &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC218; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; H &#xBC0F; &#xACC4;&#xC218; H &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; L. interrogans &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; lenB, Lenc&#xB97C; &#xC9C0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB808;&#xB098;&#xC758; 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; paralogs&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;, &#xBE4C;&#xB824;, &#xB808;&#xB124; &#xBC0F; Lenf&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; endostatins&#xC640; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xACF0; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC608;&#xC0C1;. &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC11D; 7 &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; L. interrogans serovars&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; intragenic &#xC911;&#xBCF5; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD45C;&#xC2DC;. Lenb&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC694;&#xC18C; H, &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xCC3E;&#xC558;&#xACE0; laminin &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC0C8;&#xB85C; &#xC124;&#xBA85; &#xB80C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xB610;&#xD55C;, LenB, LenC, &#xBE4C;&#xB824;, &#xB808;&#xB124; &#xBC0F; LenF &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC804;&#xC2DC; fibronectin&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;, &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131; &#xB80C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD568;&#xAED8; &#xCE68;&#xACF5;&#xACFC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF4;&#xD638; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Leptospira interrogans endostatin &#xAC19;&#xC740; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; fibronectin, laminin &#xBCF4;&#xC644;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;.

La espiroqueta Leptospira interrogans pat&#xF3;gena difunde a trav&#xE9;s de sus ej&#xE9;rcitos a trav&#xE9;s del torrente sangu&#xED;neo, y luego invade y coloniza una gran variedad de tejidos del hu&#xE9;sped. Leptospiras infecciosas son resistentes a la destrucci&#xF3;n por v&#xED;a de sus anfitriones alternativa del complemento mediada por el asesinato, e interactuar con diversos receptores de la matriz extracelular (ECM) componentes. La prote&#xED;na de la superficie exterior de Lena (antes llamado LfhA y Lsa24) se hab&#xED;a demostrado que obligar a la serie ECM componente de la laminina y el complemento de los reguladores de factor H y el factor H relacionados con la prote&#xED;na-1. Ahora demuestran que L. interrogans infecciosas contienen cinco paralogs adicionales de Lena, que LenB designados, lenC, prestar, Lene y lenF. Los seis genes codifican dominios prev&#xE9; que tienen similitudes estructurales y funcionales con endostatins mam&#xED;feros. An&#xE1;lisis de secuencias de genes de los siete serotipos de L. interrogans infecciosas indican el desarrollo de la secuencia de la diversidad a trav&#xE9;s de la recombinaci&#xF3;n y la duplicaci&#xF3;n intrag&#xE9;nica. LongitudB se encontr&#xF3; que se unen humano factor H, y todos los reci&#xE9;n descritos prote&#xED;nas Len enlazados laminina. Adem&#xE1;s, LongitudB, LenC, prestar, Lene y LenF exhibieron afinidad por la fibronectina, una prote&#xED;na de acogida distinta de la matriz extracelular. Estas caracter&#xED;sticas sugieren que las prote&#xED;nas Len junto facilitar la invasi&#xF3;n y colonizaci&#xF3;n de los tejidos del hu&#xE9;sped, y proteger contra las respuestas inmunitarias del hu&#xE9;sped durante la infecci&#xF3;n de mam&#xED;feros.

Leptospira interrogans endostatina-como prote&#xED;nas de membrana externa Enlazar fibronectina anfitri&#xF3;n, laminina y reguladores de complemento

&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x75C5;&#x662F;&#x4E0E;&#x5168;&#x4E16;&#x754C;&#x5206;&#x5E03;&#x7531;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x5C5E;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x4EBA;&#x517D;&#x5171;&#x60A3;&#x75C5;&#x3002;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#x5305;&#x62EC;&#x4F20;&#x8F93;&#x901A;&#x8FC7;&#x65B0;&#x9C9C;&#x6C34;&#x548C;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x5176;&#x6C34;&#x5E93;&#x4E3B;&#x673A;&#x7684;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x6216;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#xFF09;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4E0E;&#x8868;&#x9762;&#x63A5;&#x89E6;&#x7684;&#x5730;&#x533A;&#xFF0C;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x548C;&#x9002;&#x5E94;&#x5404;&#x79CD;&#x73AF;&#x5883;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x81F4;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5173;&#x4E8E;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x5728;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x3001; &#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4E0E;&#x5916;&#x819C;&#x8DE8;&#x57DF;&#x77E5;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x53CA;&#x7279;&#x5F81;&#x5168;&#x9762;&#x6218;&#x7565;&#x8DE8;&#x819C;&#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#x7BA1;&#x7406;&#x8BA1;&#x5212;&#x3002;&#x95EE;&#x53F7;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53; L.Fiocruz L1 130 Copenhageni &#x83CC;&#x682A;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x5141;&#x8BB8;&#x6211;&#x4EEC;&#x96C7;&#x7528;&#x7684; beta &#x6876;&#x9884;&#x6D4B;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7814;&#x7A76; TMBB &#x548C; TMBETA &#x7F51;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x627E;&#x51FA;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#x7BA1;&#x7406;&#x8BA1;&#x5212;&#x3002;&#x8865;&#x5145;&#x7684;&#x51E0;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x63CF;&#x7ED8;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#x7BA1;&#x7406;&#x8BA1;&#x5212;&#xFF0C;&#x6307;&#x5B9A; OmpL36&#x3001; OmpL37&#x3001; OmpL47 &#x548C; OmpL54&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x6CD5;&#x548C;&#x8868;&#x9762;&#x751F;&#x7269;&#x7D20;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x7684;&#x5B8C;&#x597D; leptospires &#x4F5C;&#x4E3A;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x7684;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6539;&#x8FDB;&#x3002;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x53BB;&#x9664;&#x5916;&#x56F4;&#x7684;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86;&#x7279;&#x91CC;&#x987F; X 114 &#x5206;&#x998F;&#x6CD5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5916;&#x819C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#x7BA1;&#x7406;&#x8BA1;&#x5212;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x9002;&#x7528;&#x6218;&#x7565;&#x4E3A;&#x6F84;&#x6E05;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x5916;&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8BCA;&#x65AD;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x5019;&#x9009;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;

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Leptospirosis is a zoonosis with worldwide distribution caused by pathogenic spirochetes belonging to the genus Leptospira. The leptospiral life cycle involves transmission via fresh water and colonization of the renal tubules of their reservoir hosts or infection of accidental hosts, including humans. Bacterial outer membrane proteins (OMPs), particularly those with surface-exposed regions, play crucial roles in virulence mechanisms of pathogens and the adaptation to various environmental conditions, including those of the mammalian host. Little is known about the surface-exposed OMPs in Leptospira, particularly those with outer membrane-spanning domains. Herein, we describe a comprehensive strategy for identification and characterization of leptospiral transmembrane OMPs. The genomic sequence of L. interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130 allowed us to employ the beta-barrel prediction programs, PRED-TMBB and TMBETA-NET, to identify potential transmembrane OMPs. Several complementary methods were used to characterize four novel OMPs, designated OmpL36, OmpL37, OmpL47 and OmpL54. In addition to surface immunofluorescence and surface biotinylation, we describe surface proteolysis of intact leptospires as an improved method for determining the surface exposure of leptospiral proteins. Membrane integration was confirmed using techniques for removal of peripheral membrane proteins. We also demonstrate deficiencies in the Triton X-114 fractionation method for assessing the outer membrane localization of transmembrane OMPs. Our results establish a broadly applicable strategy for the elucidation of novel surface-exposed outer membrane-spanning proteins of Leptospira, an essential step in the discovery of potential virulence factors, diagnostic antigens and vaccine candidates.

A comprehensive approach to identification of surface-exposed, outer membrane-spanning proteins of Leptospira interrogans.

La leptospirose est une zoonose avec une distribution mondiale provoqu&#xE9;e par des spiroch&#xE8;tes pathog&#xE8;nes appartenant &#xE0; l&#x26;#39;genre Leptospira. Le cycle de vie implique la transmission par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de leptospires de l&#x26;#39;eau fra&#xEE;che et de la colonisation des tubules r&#xE9;naux de leurs h&#xF4;tes r&#xE9;servoirs ou d&#x26;#39;infection des h&#xF4;tes accidentels, y compris les humains. Bact&#xE9;riennes prot&#xE9;ines de membrane externe (OMP), en particulier ceux avec des expos&#xE9;s en surface, les r&#xE9;gions jouent un r&#xF4;le crucial dans les m&#xE9;canismes de virulence des agents pathog&#xE8;nes et l&#x26;#39;adaptation &#xE0; diverses conditions environnementales, y compris ceux de l&#x26;#39;h&#xF4;te mammif&#xE8;re. Peu de choses sont connues sur les OMP expos&#xE9;s en surface dans Leptospira, en particulier celles avec la membrane externe couvrant des domaines. Ici, nous d&#xE9;crivons une strat&#xE9;gie globale pour l&#x26;#39;identification et la caract&#xE9;risation des OMP transmembranaires leptospires. La s&#xE9;quence g&#xE9;nomique de L. interrogans s&#xE9;rovar copenhageni Fiocruz souche L1-130 nous a permis d&#x26;#39;employer des programmes de pr&#xE9;diction de b&#xEA;ta-tonneau, PRED-TMBB et TMBETA-NET, afin d&#x26;#39;identifier OMP transmembranaires potentiels. Plusieurs m&#xE9;thodes compl&#xE9;mentaires ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;es pour caract&#xE9;riser les quatre nouvelles OMP, d&#xE9;sign&#xE9;s OmpL36, OmpL37, OmpL47 et OmpL54. En plus de l&#x26;#39;immunofluorescence surface et biotinylation de surface, nous d&#xE9;crivons la prot&#xE9;olyse surface de leptospires intactes comme une m&#xE9;thode am&#xE9;lior&#xE9;e pour d&#xE9;terminer l&#x26;#39;exposition surface des prot&#xE9;ines de leptospires. L&#x26;#39;int&#xE9;gration membrane a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9;e en utilisant des techniques pour l&#x26;#39;&#xE9;limination des prot&#xE9;ines membranaires p&#xE9;riph&#xE9;riques. On d&#xE9;montre &#xE9;galement des lacunes dans le proc&#xE9;d&#xE9; de Triton X-114 fractionnement pour &#xE9;valuer la localisation de la membrane externe de OMP transmembranaires. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent une strat&#xE9;gie largement applicable pour l&#x26;#39;&#xE9;lucidation du roman expos&#xE9; en surface de la membrane externe couvrant prot&#xE9;ines de leptospires, une &#xE9;tape essentielle dans la d&#xE9;couverte de facteurs de virulence potentiels, des antig&#xE8;nes de diagnostic et des vaccins candidats.

Une approche globale &#xE0; l&#x26;#39;identification de la surface-expos&#xE9;e, la membrane externe couvrant prot&#xE9;ines de Leptospira interrogans

Leptospirose ist eine Zoonose mit weltweiter durch Krankheitserreger der Gattung Leptospira Spirochetes verursacht. Lebenszyklus der Leptospiral umfasst die &Uuml;bertragung &uuml;ber S&uuml;&szlig;wasser und Kolonisierung der Nierentubuli ihren Reservoir-Wirten oder Infektion der versehentlichen Hosts, einschlie&szlig;lich des Menschen. Bakterielle &auml;u&szlig;ere Membranproteine (OMPs), insbesondere solche mit Oberfl&auml;che exponierten Regionen spielen wichtige Rollen in Mechanismen der Virulenz von Krankheitserregern und die Anpassung an verschiedene Umweltbedingungen, einschlie&szlig;lich derjenigen der S&auml;ugetier-Host. &Uuml;ber die Oberfl&auml;che exponierten OMPs in Leptospira, insbesondere solche mit &auml;u&szlig;eren Membran-spanning Dom&auml;nen ist wenig bekannt. Hier beschreiben wir eine umfassende Strategie zur Identifizierung und Charakterisierung von Leptospiral transmembrane OMPs. Die genomische Sequenz von L. Interrogans Serovar Copenhageni Stamm Fiocruz L1-130 konnten wir die Beta-Fass-Vorhersage Programme, PRED-TMBB und TMBETA-NET, identifizieren m&ouml;gliche Transmembran OMPs besch&auml;ftigen. Verschiedene erg&auml;nzende Methoden wurden verwendet, um vier Roman OMPs, benannt OmpL36, OmpL37, OmpL47 und OmpL54 zu charakterisieren. Neben Oberfl&auml;che Immunfluoreszenz und Oberfl&auml;che Biotinylierung beschreiben wir Oberfl&auml;che Proteolyse von intakten Leptospiren als eine verbesserte Methode zur Bestimmung der Oberfl&auml;chen Exposition der Leptospiral Proteine. Membran-Integration wurde mit Techniken zur Entfernung von peripheren Membranproteinen best&auml;tigt. Wir zeigen auch M&auml;ngel in der Triton X-114-Fraktionierung-Methode f&uuml;r die Bewertung der Au&szlig;enmembran Lokalisierungs von Transmembran-OMPs. Unsere Ergebnisse stellen eine allgemein anwendbare Strategie f&uuml;r die Aufkl&auml;rung der neuartigen Oberfl&auml;che exponierten &auml;u&szlig;ere Membran-spanning Proteine von Leptospira, ein wesentlicher Schritt zur Entdeckung der potenziellen Virulenzfaktoren, diagnostischen Antigenen und Impfstoff Kandidaten.

Ein umfassender Ansatz zur Ermittlung der Oberfl&auml;che ausgesetzt, &auml;u&szlig;ere Membran-spanning Proteine von Leptospira Interrogans.

Leptospirosi sono una zoonosi con distribuzione in tutto il mondo, causata da spirochete patogene appartenenti al genere Leptospira. Il ciclo di vita di Leptospira comporta la trasmissione via acqua fresca e colonizzazione dei tubuli renali dei loro ospiti serbatoio o infezione accidentale padroni di casa, inclusi gli esseri umani. Proteine della membrana esterna batterica (OMPs), particolarmente quelli con superficie esposta regioni, giocare ruoli cruciali nei meccanismi di virulenza degli agenti patogeni e l&#39;adattamento alle diverse condizioni ambientali, compresi quelli dell&#39;host dei mammiferi. Poco si sa circa la superficie esposta OMPs di Leptospira, particolarmente quelli con domini che attraversa membrana esterne. Qui, descriviamo una strategia globale per l&#39;identificazione e caratterizzazione di Leptospira OMPs transmembrana. La sequenza genomica di L. interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130 ci ha permesso di impiegare i programmi beta-barilotto previsione, PRED-TMBB e TMBETA-NET, per identificare potenziali OMPs transmembrana. Diversi metodi complementari sono state utilizzate per caratterizzare quattro romanzo OMPs, designato OmpL36, OmpL37, OmpL47 e OmpL54. Oltre alla superficie immunofluorescenza e superficie biotinylation, descriviamo superficie proteolisi delle leptospire intatte come un metodo migliore per determinare l&#39;esposizione superficiale delle proteine di Leptospira. Integrazione di membrana &egrave; stata confermata usando tecniche per la rimozione delle proteine di membrana periferici. Dimostriamo anche carenze nel metodo di frazionamento Triton X-114 per valutare la localizzazione della membrana esterna di OMPs transmembrana. I nostri risultati stabiliscono una strategia ampiamente applicabile per la delucidazione del romanzo esposti in superficie esterne membrana spanning proteine di Leptospira, un passo essenziale nella scoperta di potenziali fattori di virulenza, antigeni diagnostici e vaccini candidati.

Un approccio globale alla identificazione delle proteine che attraversa membrana esterne, superficie esposta di Leptospira interrogans.

&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x75C7;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x5C5E;&#x306B;&#x5C5E;&#x3059;&#x308B;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30ED;&#x30D8;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E16;&#x754C;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x4EBA;&#x7363;&#x5171;&#x901A;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5076;&#x7136;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8CAF;&#x6C34;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3084;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x306E;&#x65B0;&#x9BAE;&#x306A;&#x6C34;&#x3068;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x3092;&#x7D4C;&#x7531;&#x3057;&#x3066;&#x4F1D;&#x9001;&#x3092;&#x4F34;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;OMPS&#xFF09;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x9732;&#x51FA;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3082;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x74B0;&#x5883;&#x6761;&#x4EF6;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30EA;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x9732;&#x51FA;&#x306E;OMP&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x8CAB;&#x901A;&#x306E;OMP&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; L. interrogans&#x8840;&#x6E05;&#x578B;Copenhageni&#x3072;&#x305A;&#x307F;Fiocruz L1-130&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x578B;&#x306E;OMP&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;PRED-TMBB&#x3068;TMBETA-NET&#x3B2;-&#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x88DC;&#x5B8C;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;OmpL36&#x3001;OmpL37&#x3001;OmpL47&#x3068;OmpL54&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;4&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;OMP&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8868;&#x9762;&#x30D3;&#x30AA;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6539;&#x826F;&#x6CD5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x819C;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x5468;&#x8FBA;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x8CAB;&#x901A;&#x306E;OMP&#x306E;&#x5916;&#x819C;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C8;&#x30F3;X-114&#x5206;&#x753B;&#x6CD5;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x75C7;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x8A3A;&#x65AD;&#x7528;&#x6297;&#x539F;&#x3001;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x5019;&#x88DC;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x8868;&#x9762;&#x9732;&#x51FA;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x89E3;&#x660E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5E83;&#x304F;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8868;&#x9762;&#x9732;&#x51FA;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3078;&#x306E;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3001;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;Interrogans&#x306E;&#x5916;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;

&#xB819; &#xC18D; Leptospira&#xC5D0; &#xC18D;&#xD558;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; spirochetes&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xC804;&#xC138;&#xACC4; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC640; zoonosis &#xC774;&#xB2E4;. Leptospiral &#xC218;&#xBA85; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; &#xBB3C;&#xACFC; &#xC800;&#xC218;&#xC9C0; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC2E0;&#xC7A5; tubules &#xB610;&#xB294; &#xC2E4;&#xC218;&#xB85C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;, &#xC778;&#xAC04;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (OMPs), &#xD2B9;&#xD788; &#xD45C;&#xBA74; &#xB178;&#xCD9C; &#xC601;&#xC5ED;, &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD658;&#xACBD; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xD558; &#xACE0; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758;. &#xC57D;&#xAC04;&#xC740; &#xD45C;&#xBA74; &#xB178;&#xCD9C; OMPs Leptospira&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC678;&#xBD80; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCE5C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; leptospiral&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xB7B5; &#xC124;&#xBA85; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; OMPs. L. interrogans serovar Copenhageni &#xBCC0;&#xD615; Fiocruz L1-130&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC30;&#xB7F4; &#xC608;&#xCE21; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;, PRED TMBB&#xC640; TMBETA &#xADF8;&#xBB3C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; Omps&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBCF4;&#xC644; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; OMPs, OmpL36, OmpL37, OmpL47 &#xBC0F; OmpL54 &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD45C;&#xBA74; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC640; &#xD45C;&#xBA74; biotinylation, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; leptospiral &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xB178;&#xCD9C;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; leptospires&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C9; &#xD1B5;&#xD569; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; Omps&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9;&#xC744; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; Triton X-114 &#xBD84;&#xB958; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xB294; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC18C;&#xC124; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xC678;&#xBD80; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCE5C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Leptospira, &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC778;, &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC790;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC758; &#xD574;&#xBA85;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC801;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC218;&#xB9BD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Leptospira interrogans&#xC758;, &#xD45C;&#xBA74; &#xB178;&#xCD9C;, &#xC678;&#xBD80; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCE5C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC;.

La leptospirosis es una zoonosis de distribuci&#xF3;n mundial con la causada por espiroquetas pat&#xF3;genas pertenecientes al g&#xE9;nero Leptospira. El ciclo de vida de leptospira implica la transmisi&#xF3;n a trav&#xE9;s de agua dulce y la colonizaci&#xF3;n de los t&#xFA;bulos renales de los reservorios o infecci&#xF3;n de hu&#xE9;spedes accidentales, incluidos los humanos. Bacterianas prote&#xED;nas de membrana externa (OMP), en particular los expuestos en la superficie, las regiones desempe&#xF1;an un papel crucial en los mecanismos de virulencia de los pat&#xF3;genos y la adaptaci&#xF3;n a diversas condiciones ambientales, incluidas las de la hu&#xE9;sped mam&#xED;fero. Poco se sabe sobre los planes de gesti&#xF3;n expuestas en la superficie de la Leptospira, en particular los que atraviesan la membrana exterior-dominios. Aqu&#xED; se describe una estrategia integral para la identificaci&#xF3;n y caracterizaci&#xF3;n de los planes de gesti&#xF3;n de la transmembrana de leptospiras. La secuencia gen&#xF3;mica de L. interrogans serovar Copenhageni cepa Fiocruz L1-130 nos permite emplear los programas de predicci&#xF3;n de la beta-barril, Pred-TMBB y TMBETA NET-, para identificar los posibles planes de gesti&#xF3;n de transmembrana. Varios m&#xE9;todos complementarios se utilizaron para caracterizar cuatro OMP nuevos, designados OmpL36, OmpL37, OmpL47 y OmpL54. Adem&#xE1;s de inmunofluorescencia superficie y biotinilaci&#xF3;n superficie, se describe la prote&#xF3;lisis superficie de leptospiras intactas como un m&#xE9;todo mejorado para la determinaci&#xF3;n de la exposici&#xF3;n de la superficie de las prote&#xED;nas leptospiras. Integraci&#xF3;n de membrana se confirm&#xF3; utilizando t&#xE9;cnicas para la eliminaci&#xF3;n de prote&#xED;nas de membrana perif&#xE9;ricos. Tambi&#xE9;n demuestran deficiencias en el m&#xE9;todo de Triton X-114 de fraccionamiento para evaluar la localizaci&#xF3;n de membrana externa de OMPs transmembrana. Nuestros resultados establecen una estrategia de aplicaci&#xF3;n general para el esclarecimiento de la novela de la superficie expuesta exteriores que abarcan la membrana de prote&#xED;nas de Leptospira, un paso esencial en el descubrimiento de posibles factores de virulencia, los ant&#xED;genos de diagn&#xF3;stico y vacunas.

Un enfoque integral de la identificaci&#xF3;n de la superficie expuesta, la membrana externa-que abarca las prote&#xED;nas de Leptospira interrogans

&#x5230;&#x6DE1;&#x6C34;&#x4E2D;&#x68DA;&#x6C34;&#x5E93;&#x4E3B;&#x673A;&#x7684;&#x5C3F;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x83CC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4EA4;&#x7ED9;&#x6613;&#x4E3B;&#x673A;&#x901A;&#x8FC7;&#x76AE;&#x80A4;&#x64E6;&#x4F24;&#x6216;&#x9ECF;&#x819C;&#x9020;&#x6210;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x75C5;&#x3002;&#x611F;&#x67D3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6D89;&#x53CA;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x4E3B;&#x673A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C; leptospires &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x575A;&#x6301;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x6210;&#x5206;&#x3001; &#x4F20;&#x64AD;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6F84;&#x6E05;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x8C03;&#x89E3;&#x5458;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;--&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x75C5;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x89D2;&#x8272;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; OmpL36 (LIC13166) OmpL37 (LIC12263) &#x548C; OmpL47 (LIC13050)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4E3B;&#x673A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x9176;&#x8054;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;OmpL37 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x4F18;&#x5148;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x3001; &#x9971;&#x548C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4EBA;&#x4F53;&#x76AE;&#x80A4; &#xFF08;K(d)&#xFF0C;104&plusmn;19 nM&#xFF09; &#x548C;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; (K(d)&#xFF0C;152&plusmn;27 nM&#xFF09;&#x3002;&#x5B83;&#x8FD8;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F; &#xFF08;K(d)&#xFF0C;244&plusmn;15 nM&#xFF09;&#x3001; &#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7247;&#x6BB5; D &#xFF08;K(d)&#xFF0C;132&plusmn;30 nM&#xFF09;&#xFF0C;&#x8840;&#x6D46;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D; (K(d)&#xFF0C;359&plusmn;68 nM) &#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;K(d)&#xFF0C;410&plusmn;81 nM&#xFF09;&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4EBA;&#x4F53;&#x76AE;&#x80A4;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; OmpL37 &#x548C;&#x6D3B;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x4E13;&#x95E8;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x5154;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x7684; OmpL37&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5BF9;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x8FD8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x4E3B;&#x673A;&#x751F;&#x6210;&#x6297;&#x4F53;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5BF9;&#x5BCC;&#x542B;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6291;&#x5236;&#x7C98;&#x9644;&#x7684; leptospires OmpL37 &#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; OmpL37 &#x627F;&#x8BA4;&#x6025;&#x6027;&#x548C;&#x6062;&#x590D;&#x671F;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x8840;&#x6E05;&#x548C;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x9F20;&#x8840;&#x6E05;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5728;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x68C0;&#x5B9A;&#x548C;&#x4E0D;&#x8150;&#x751F;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; OmpL37 &#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;OmpL37 &#x662F;&#x65B0;&#x578B;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x75C5;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5BF9;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x7684;&#x4F9D;&#x604B;&#x3002;

OmpL37 &#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x86CB;&#x767D;&#x7531;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x76AE;&#x80A4;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

Pathogenic Leptospira spp. shed in the urine of reservoir hosts into freshwater can be transmitted to a susceptible host through skin abrasions or mucous membranes causing leptospirosis. The infection process involves the ability of leptospires to adhere to cell surface and extracellular matrix components, a crucial step for dissemination and colonization of host tissues. Therefore, the elucidation of novel mediators of host-pathogen interaction is important in the discovery of virulence factors involved in the pathogenesis of leptospirosis. In this study, we assess the functional roles of transmembrane outer membrane proteins OmpL36 (LIC13166), OmpL37 (LIC12263), and OmpL47 (LIC13050), which we recently identified on the leptospiral surface. We determine the capacity of these proteins to bind to host tissue components by enzyme-linked immunosorbent assay. OmpL37 binds elastin preferentially, exhibiting dose-dependent, saturating binding to human skin (K(d), 104Â±19 nM) and aortic elastin (K(d), 152Â±27 nM). It also binds fibrinogen (K(d), 244Â±15 nM), fibrinogen fragment D (K(d), 132Â±30 nM), plasma fibronectin (K(d), 359Â±68 nM), and murine laminin (K(d), 410Â±81 nM). The binding to human skin elastin by both recombinant OmpL37 and live Leptospira interrogans is specifically enhanced by rabbit antiserum for OmpL37, suggesting the involvement of OmpL37 in leptospiral binding to elastin and also the possibility that host-generated antibodies may promote rather than inhibit the adherence of leptospires to elastin-rich tissues. Further, we demonstrate that OmpL37 is recognized by acute and convalescent leptospirosis patient sera and also by Leptospira-infected hamster sera. Finally, OmpL37 protein is detected in pathogenic Leptospira serovars and not in saprophytic Leptospira. Thus, OmpL37 is a novel elastin-binding protein of pathogenic Leptospira that may be promoting attachment of Leptospira to host tissues.

The OmpL37 surface-exposed protein is expressed by pathogenic Leptospira during infection and binds skin and vascular elastin.

Pathog&#xE8;ne Leptospira spp. vers&#xE9; dans l&#x26;#39;urine des h&#xF4;tes r&#xE9;servoirs d&#x26;#39;eau douce dans peut &#xEA;tre transmis &#xE0; un h&#xF4;te sensible par des l&#xE9;sions de la peau ou les muqueuses causant la leptospirose. Le processus d&#x26;#39;infection implique la capacit&#xE9; de leptospires &#xE0; adh&#xE9;rer &#xE0; la surface cellulaire et les composants de la matrice extracellulaire, une &#xE9;tape cruciale pour la diffusion et la colonisation de tissus de l&#x26;#39;h&#xF4;te. Par cons&#xE9;quent, l&#x26;#39;&#xE9;lucidation des m&#xE9;diateurs de nouvelles de l&#x26;#39;interaction h&#xF4;te-pathog&#xE8;ne est important dans la d&#xE9;couverte de facteurs de virulence impliqu&#xE9;s dans la pathog&#xE9;nie de la leptospirose. Dans cette &#xE9;tude, nous &#xE9;valuons les r&#xF4;les fonctionnels des prot&#xE9;ines transmembranaires membrane externe OmpL36 (LIC13166), les OmpL37 (LIC12263), et OmpL47 (LIC13050), que nous avons r&#xE9;cemment identifi&#xE9; sur la surface de leptospires. Nous d&#xE9;terminons la capacit&#xE9; de ces prot&#xE9;ines &#xE0; se lier &#xE0; accueillir des &#xE9;l&#xE9;ments du tissu par l&#x26;#39;enzyme-linked immunosorbent assay. OmpL37 lie pr&#xE9;f&#xE9;rentiellement &#xE9;lastine, pr&#xE9;sentant dose-d&#xE9;pendante, saturant la liaison &#xE0; la peau humaine (K (d), 104 &#xB1; 19 nM) et aortique &#xE9;lastine (K (d), 152 &#xB1; 27 nM). Il se lie &#xE9;galement le fibrinog&#xE8;ne (K (d), 244 &#xB1; 15 nM), le fibrinog&#xE8;ne fragment D (K (d), 132 &#xB1; 30 nM), le plasma fibronectine (K (d), 359 &#xB1; 68 nM), et murin laminine (K (d), 410 &#xB1; 81 nM). La liaison &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;lastine la peau humaine &#xE0; la fois par OmpL37 recombinant et en direct Leptospira interrogans est sp&#xE9;cifiquement renforc&#xE9;e par un antis&#xE9;rum de lapin pour OmpL37, sugg&#xE9;rant l&#x26;#39;implication de OmpL37 dans la liaison &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;lastine et leptospires aussi la possibilit&#xE9; que l&#x26;#39;h&#xF4;te g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;es par anticorps peut favoriser plut&#xF4;t que de l&#x26;#39;inhiber l&#x26;#39;adh&#xE9;rence des leptospires &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;lastine les tissus riches. En outre, nous d&#xE9;montrons que OmpL37 est reconnue par les s&#xE9;rums des patients leptospirose aigu&#xEB; et de convalescence et aussi par Leptospira infect&#xE9; par des s&#xE9;rums de hamster. Enfin, OmpL37 prot&#xE9;ine est d&#xE9;tect&#xE9;e dans s&#xE9;rovars de Leptospira pathog&#xE8;nes et non pas dans saprophyte Leptospira. Ainsi, OmpL37 est une nouvelle prot&#xE9;ine de liaison d&#x26;#39;&#xE9;lastine de Leptospira pathog&#xE8;ne qui peut &#xEA;tre promouvoir la fixation de tissus de l&#x26;#39;h&#xF4;te &#xE0; Leptospira.

Peau La prot&#xE9;ine OmpL37 expos&#xE9; en surface est exprim&#xE9;e par Leptospira pathog&#xE8;nes pendant l&#x26;#39;infection et se lie et vasculaire &#xE9;lastine

Pathogenen Leptospira spp., Schuppen im Urin von Reservoir Gastgeber in S&uuml;&szlig;wasser kann zu einem empf&auml;nglichen Host durch Hautabsch&uuml;rfungen oder Schleimh&auml;ute verursacht Leptospirose &uuml;bertragen werden. Der Infektion-Prozess beinhaltet die F&auml;higkeit der Leptospiren, halten an der Zelloberfl&auml;che und Komponenten der extrazellul&auml;ren Matrix, ein entscheidender Schritt f&uuml;r die Verbreitung und die Kolonisation der Host-Gewebe. Daher ist die Aufkl&auml;rung der neuartige Mediatoren der Host-Erreger-Interaktion in der Entdeckung der Virulenzfaktoren in der Pathogenese von Leptospirose wichtig. In dieser Studie bewerten wir die Funktionsrollen Transmembran &auml;u&szlig;ere Membrane Proteine OmpL36 (LIC13166), OmpL37 (LIC12263), und OmpL47 (LIC13050), die wir vor kurzem in der Leptospiral-Oberfl&auml;che gekennzeichnet. Wir bestimmen die Kapazit&auml;t dieser Proteine binden an Host-Gewebe-Komponenten durch Enzyme-linked Immunosorbent Assay. OmpL37 bindet Elastin bevorzugt, dosisabh&auml;ngige, saturating Bindung an menschliche Haut (K(d), 104&plusmn;19 nM) und Aorta Elastin (K(d), 152&plusmn;27 nM) ausstellen. Es bindet auch Fibrinogen (K(d), 244&plusmn;15 nM), Fibrinogen Fragment D (K(d), 132&plusmn;30 nM), Plasma-Fibronectin (K(d), 359&plusmn;68 nM) und murinen Laminin (K(d), 410&plusmn;81 nM). Die Bindung an menschliche Haut Elastin durch rekombinante OmpL37 und Leben Leptospira Interrogans wird speziell durch Kaninchen Antiserum f&uuml;r OmpL37, verbessert, was auf die Einbeziehung der OmpL37 in Leptospiral Bindung an Elastin und auch die M&ouml;glichkeit, dass Host erzeugten Antik&ouml;rper kannst f&ouml;rdern anstatt die Einhaltung von Leptospiren Elastin-reiche Gewebe hemmen. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass OmpL37 durch akute und Rekonvaleszenten Leptospirose Patientenserum und auch durch Leptospira-infizierten Zwerghamster Seren erkannt wird. Schlie&szlig;lich ist OmpL37 in pathogenen Leptospira Serovare und nicht in saprophytischen Leptospira nachgewiesen. OmpL37 ist also ein neues Protein Elastin-Bindung von pathogenen Leptospira, die Anlage von Leptospira Host Gewebe f&ouml;rdern kann.

Das OmpL37 Oberfl&auml;che exponierten Protein w&auml;hrend der Infektion durch pathogene Leptospira ausgedr&uuml;ckt und bindet Haut und vaskul&auml;re Elastin.

Patogeni Leptospira spp, versato nelle urine di host serbatoio in acqua dolce pu&ograve; essere trasmessa ad un ospite suscettibile attraverso abrasioni della pelle o le mucose provocando la leptospirosi. Il processo di infezione comporta la possibilit&agrave; di aderire alla superficie cellulare e componenti della matrice extracellulare, un passo fondamentale per la diffusione le leptospire e colonizzazione dei tessuti dell&#39;ospite. Pertanto, la delucidazione del romanzo mediatori dell&#39;interazione ospite-patogeno &egrave; importante per l&#39;individuazione dei fattori di virulenza coinvolti nella patogenesi della leptospirosi. In questo studio, valutiamo i ruoli funzionali delle proteine della membrana esterna del transmembrane OmpL36 (LIC13166), OmpL37 (LIC12263) e OmpL47 (LIC13050), che abbiamo recentemente individuato sulla superficie Leptospira. Determinare la capacit&agrave; di queste proteine da associare ai componenti del tessuto ospite da analisi enzima-collegata dell&#39;immunosorbente. OmpL37 associa elastina preferenzialmente, esibendo associazione dose-dipendente, saturante di pelle umana (K(d), 104&plusmn;19 nM) ed elastina aortica (K(d), 152&plusmn;27 nM). Esso si lega anche il fibrinogeno (K(d), 244&plusmn;15 nM), fibrinogeno frammento D (K(d), 132&plusmn;30 nM), plasma fibronectina (K(d), 359&plusmn;68 nM) e laminina murina (K(d), 410&plusmn;81 nM). L&#39;associazione di elastina della pelle umana ricombinante OmpL37 sia vivo Leptospira interrogans &egrave; specificamente rafforzata dall&#39;antisiero di coniglio per OmpL37, suggerendo il coinvolgimento di OmpL37 nell&#39;associazione di Leptospira di elastina ed anche la possibilit&agrave; che gli anticorpi generati da host possono promuovere piuttosto che inibiscono l&#39;aderenza delle leptospire ai tessuti ricchi di elastina. Ulteriormente, ci dimostrano che OmpL37 &egrave; riconosciuta dai sieri acuti e convalescenti leptospirosi e anche da sieri infetti Leptospira criceto. Infine, OmpL37 proteina viene rilevata in sierotipi di Leptospira patogena e non in saprofiti Leptospira. Cos&igrave;, OmpL37 &egrave; un romanzo elastina-binding protein di Leptospira patogena che possa promuovere l&#39;attaccamento della Leptospira ai tessuti dell&#39;ospite.

La proteina di superficie esposta OmpL37 &egrave; espressa da Leptospira patogena durante l&#39;infezione e si lega la pelle ed elastina vascolare.

&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x5C5E;&#x3002;&#x6DE1;&#x6C34;&#x8CAF;&#x6C34;&#x6C60;&#x3078;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x5C3F;&#x4E2D;&#x306B;&#x5C0F;&#x5C4B;&#x304C;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x75C7;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x76AE;&#x819A;&#x306E;&#x64E6;&#x904E;&#x50B7;&#x3084;&#x7C98;&#x819C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x9001;&#x4FE1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x611F;&#x67D3;&#x904E;&#x7A0B;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6210;&#x5206;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x3068;&#x5B9A;&#x7740;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x4ED8;&#x7740;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B; - &#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x89E3;&#x660E;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x75C7;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x8CAB;&#x901A;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;OmpL36&#xFF08;LIC13166&#xFF09;&#x3001;OmpL37&#xFF08;LIC12263&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;OmpL47&#xFF08;LIC13050&#xFF09;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x514D;&#x75AB;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; OmpL37&#x306F;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306A;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x76AE;&#x819A;&#x3078;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x98FD;&#x548C;&#x3055;&#x305B;&#xFF08;K&#xFF08;d&#xFF09;&#x306F;&#x3001;104&#xB1;19 nM&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;K&#xFF08;d&#xFF09;&#x306F;&#x3001;152&#xB1;27 nM&#xFF09;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;D&#xFF08;K&#xFF08;d&#xFF09;&#x306F;&#x3001;132&#xB1;30 nM&#xFF09;&#x3092;&#x3001;&#x8840;&#x6F3F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;K&#xFF08;d&#xFF09;&#x306F;&#x3001;359&#xB1;68 nm&#xFF09;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;&#xFF08;K&#x3001;&#xFF08;K&#xFF08;d&#xFF09;&#x306F;&#x3001;244&#xB1;15 nM&#xFF09;&#x3092;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#xFF08;d&#xFF09;&#x306F;&#x3001;410&#xB1;81 Nm&#xFF09;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;OmpL37&#x3084;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;interrogans&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x76AE;&#x819A;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;OmpL37&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;OmpL37&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x304C;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;OmpL37&#x306F;&#x6025;&#x6027;&#x671F;&#x3068;&#x56DE;&#x5FA9;&#x671F;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x75C7;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x3067;&#x3082;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x611F;&#x67D3;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x8840;&#x6E05;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;OmpL37&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x8150;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;OmpL37&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

OmpL37&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x9732;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x76AE;&#x819A;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; Leptospira &#xC885;&#xC73C;&#xB85C; &#xBBFC;&#xBB3C; &#xC800;&#xC218;&#xC9C0; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC18C;&#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC3D; &#xACE0; &#xD53C;&#xBD80; &#xCC30;&#xACFC;&#xC0C1; &#xB610;&#xB294; &#xB819;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xC810; &#xB9C9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC804;&#xC1A1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC5FC; &#xACFC;&#xC815; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, &#xBCF4;&#xAE09;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xACE0;&#xCC29; &#xD558;&#xB294; leptospires&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790;&#xC758; &#xD574;&#xBA85; &#xB819;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC678;&#xBD80; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; OmpL36 (LIC13166), OmpL37 &#xD3C9;&#xAC00; (LIC12263) &#xBC0F; OmpL47 (LIC13050), &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; leptospiral &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; immunosorbent &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. OmpL37 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;-&#xC758;&#xC874;, saturating &#xBC14;&#xC778;&#xB529; (K(d), 104&plusmn;19 nM) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD53C;&#xBD80;&#xC640; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4; (K(d), 152&plusmn;27 nM)&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; (K(d), 244&plusmn;15 nM) &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;, &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xB2E8;&#xD3B8; D (K(d), 132&plusmn;30 nM), &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; fibronectin (K(d), 359&plusmn;68 nM), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; murine laminin (K(d), 410&plusmn;81 nM)&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; OmpL37 &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; Leptospira interrogans&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD53C;&#xBD80; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4;&#xC744; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD2B9;&#xD788; leptospiral &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xAC00; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; leptospires&#xC758; &#xBD80;&#xCC29;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC218; &#xC788;&#xC74C;&#xC744; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; Ompl37&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC; &#xC81C;&#xC548; OmpL37&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD1A0;&#xB07C; &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xAE09;&#xC131;&#xACFC; &#xD68C;&#xBCF5; &#xB819; &#xD658;&#xC790; &#xC138;&#xB77C;&#xC640; Leptospira&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xC138;&#xB77C; OmpL37 &#xC778;&#xC2DD; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, OmpL37 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9C8;&#xC800; Leptospira &#xC544;&#xB2CC; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; Leptospira serovars&#xC5D0; &#xC778;&#xC2DD; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, OmpL37 &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; Leptospira &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xC9C1; Leptospira&#xC758; &#xCCA8;&#xBD80;&#xB97C; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;.

OmpL37 &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; Leptospira&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xD53C;&#xBD80;&#xC640; &#xD608;&#xAD00; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Pat&#xF3;gena Leptospira spp. elimina en la orina de los reservorios de agua dulce en puede ser transmitido a un hu&#xE9;sped susceptible a trav&#xE9;s de abrasiones de la piel o las membranas mucosas que causan la leptospirosis. El proceso de infecci&#xF3;n consiste en la capacidad de las leptospiras que se adhieren a la superficie celular y los componentes de la matriz extracelular, un paso crucial para la difusi&#xF3;n y la colonizaci&#xF3;n de los tejidos del hu&#xE9;sped. Por lo tanto, la elucidaci&#xF3;n de los mediadores novedosos de interacci&#xF3;n hu&#xE9;sped-pat&#xF3;geno es importante en el descubrimiento de factores de virulencia implicados en la patog&#xE9;nesis de la leptospirosis. En este estudio, evaluamos los roles funcionales de las prote&#xED;nas de membrana externa de la transmembrana OmpL36 (LIC13166), los OmpL37 (LIC12263), y OmpL47 (LIC13050), que recientemente hemos identificado en la superficie de la leptospirosis. Se determinar&#xE1; la capacidad de estas prote&#xED;nas que se unen a albergar los componentes del tejido por la enzima-inmunoensayo. OmpL37 une preferentemente elastina, exhibiendo dependiente de la dosis, saturando la uni&#xF3;n a la piel humana (K (d), 104 &#xB1; 19 nM) y a&#xF3;rtica elastina (K (d), 152 &#xB1; 27 nM). Tambi&#xE9;n se une al fibrin&#xF3;geno (K (D), 244 &#xB1; 15 nM), fibrin&#xF3;geno fragmento D (K (d), 132 &#xB1; 30 nM), fibronectina de plasma (K (d), 359 &#xB1; 68 nM), y murino laminina (K (d), 410 &#xB1; 81 nM). La uni&#xF3;n a la elastina piel humana tanto por recombinante OmpL37 interrogans y Leptospira en vivo est&#xE1; especialmente reforzada por antisuero de conejo para la OmpL37, lo que sugiere la participaci&#xF3;n de OmpL37 leptospira en la uni&#xF3;n a la elastina y tambi&#xE9;n la posibilidad de que los anticuerpos generados por el host puede promover m&#xE1;s que inhibir la adhesi&#xF3;n de leptospiras en tejidos ricos en elastina. Adem&#xE1;s, demostramos que OmpL37 es reconocido por los sueros de los pacientes de leptospirosis aguda y de convalecencia y tambi&#xE9;n por Leptospira infectada con sueros de h&#xE1;mster. Por &#xFA;ltimo, OmpL37 prote&#xED;na se detecta en serovares de Leptospira pat&#xF3;genas y no en saprof&#xED;tica Leptospira. Por lo tanto, es una novela OmpL37 elastina-prote&#xED;na de uni&#xF3;n de las especies pat&#xF3;genas de Leptospira que se puede promover la uni&#xF3;n de Leptospira a los tejidos del hu&#xE9;sped.

La prote&#xED;na OmpL37 superficie expuesta se expresa por leptospiras pat&#xF3;genas durante la infecci&#xF3;n y liga de la piel y Vascular Elastina

Recenti studi hanno rivelato che la metilazione proteica batterica &egrave; una diffusa modifica alberino-di traduzione che &egrave; richiesta per la virulenza dei batteri patogeni selezionati. In particolare, l&#39;alterata metilazione delle proteine della membrana esterna ha dimostrata a modulare l&#39;efficacia della risposta immunitaria dell&#39;ospite. In questo studio, elettroforesi bidimensionale combinato con matrix-assisted laser desorption/ionizzazione-tempo di volo spettrometria di massa identificata una Leptospira interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130 proteina, corrispondente per aprire reading frame (ORF) LIC11848, che subisce metilazione vasta e differenziata di residui di acido glutammico. Microscopia di immunofluorescenza implicata LIC11848 come una proteina di membrana esterna superficie esposta, spingendo l&#39;indicazione OmpL32. Microscopia di immunofluorescenza indiretta delle sezioni di fegato e rene d&#39;oro criceto siriano ha rivelato espressione di OmpL32 durante la colonizzazione di questi organi. Identificazione delle proteine di membrana esterna superficie esposta metilato, come OmpL32, fornisce una base per delineare il ruolo di questa modifica alberino-di traduzione nella virulenza di Leptospira.

Metilazione ed espressione in vivo della superficie esposta Leptospira interrogans membrana esterna proteina OmpL32.

&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x662F;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4E2D;&#x6240;&#x9009;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x3002;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#xFF0C;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x660E;&#x8C03;&#x8282;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x57FA;&#x8D28;&#x8F85;&#x52A9;&#x6FC0;&#x5149;&#x89E3;&#x5438;&#x7535;&#x79BB;-&#x7684;/&#x65F6;&#x95F4;&#x98DE;&#x884C;&#x8D28;&#x8C31;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x53CC;&#x5411;&#x51DD;&#x80F6;&#x7535;&#x6CF3;&#x53D1;&#x73B0;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x95EE;&#x53F7;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x83CC;&#x682A; Copenhageni Fiocruz L1 130 &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x6253;&#x5F00;&#x9605;&#x8BFB;&#x6846;&#x67B6; (&#x53E3;&#x75AE;) LIC11848&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x7ECF;&#x5386;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x548C;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7275;&#x8FDE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x7684;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x63D0;&#x793A;&#x6307;&#x5B9A; OmpL32 LIC11848&#x3002;&#x95F4;&#x63A5;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x53D9;&#x5229;&#x4E9A;&#x91D1;&#x9EC4;&#x809D;&#x810F;&#x548C;&#x80BE;&#x810F;&#x79D1;&#x900F;&#x9732;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x673A;&#x5173;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D; OmpL32 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x7684;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5982; OmpL32&#xFF0C;&#x9274;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x6BD2;&#x529B;&#x5728;&#x5212;&#x5B9A;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x4F5C;&#x7528;&#x5960;&#x5B9A;&#x4E86;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x95EE;&#x53F7;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; OmpL32 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Recent studies have revealed that bacterial protein methylation is a widespread post-translational modification that is required for virulence in selected pathogenic bacteria. In particular, altered methylation of outer membrane proteins has been shown to modulate the effectiveness of the host immune response. In this study, two-dimensional gel electrophoresis combined with matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry identified a Leptospira interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130 protein, corresponding to open reading frame (ORF) LIC11848, which undergoes extensive and differential methylation of glutamic acid residues. Immunofluorescence microscopy implicated LIC11848 as a surface-exposed outer membrane protein, prompting the designation OmpL32. Indirect immunofluorescence microscopy of golden Syrian hamster liver and kidney sections revealed expression of OmpL32 during colonization of these organs. Identification of methylated surface-exposed outer membrane proteins, such as OmpL32, provides a foundation for delineating the role of this post-translational modification in leptospiral virulence.

Methylation and in vivo expression of the surface-exposed Leptospira interrogans outer membrane protein OmpL32.

Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la m&#xE9;thylation des prot&#xE9;ines bact&#xE9;riennes est un tr&#xE8;s r&#xE9;pandue modification post-traductionnelle qui est requis pour la virulence chez les bact&#xE9;ries pathog&#xE8;nes s&#xE9;lectionn&#xE9;s. En particulier, la m&#xE9;thylation alt&#xE9;r&#xE9;e des prot&#xE9;ines de membrane externe a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; &#xE0; moduler l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de la r&#xE9;ponse immunitaire de l&#x26;#39;h&#xF4;te. Dans cette &#xE9;tude, l&#x26;#39;&#xE9;lectrophor&#xE8;se sur gel bidimensionnelle combin&#xE9;e avec au laser assist&#xE9;e par matrice d&#xE9;sorption / ionisation temps de spectrom&#xE9;trie de masse vol identifi&#xE9; une Leptospira interrogans s&#xE9;rovar copenhageni souche Fiocruz L1-130 prot&#xE9;ine, correspondant &#xE0; cadre de lecture ouvert (ORF) LIC11848, qui subit un m&#xE9;thylation diff&#xE9;rentielle et de r&#xE9;sidus d&#x26;#39;acide glutamique. La microscopie en immunofluorescence impliqu&#xE9; LIC11848 comme un expos&#xE9; en surface prot&#xE9;ine de membrane externe, ce qui incite l&#x26;#39;OmpL32 d&#xE9;signation. Immunofluorescence indirecte du foie hamster dor&#xE9; syrien et coupes de reins a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;OmpL32 pendant la colonisation de ces organes. Identification des m&#xE9;thyl&#xE9;s expos&#xE9;s en surface des prot&#xE9;ines de membrane externe, comme OmpL32, fournit une base pour d&#xE9;limiter le r&#xF4;le de cette modification post-traductionnelle de la virulence des leptospires.

M&#xE9;thylation et l&#x26;#39;expression in vivo de la prot&#xE9;ine de surface expos&#xE9;e au Leptospira interrogans Outer Membrane OmpL32

Neuere Studien haben gezeigt, dass bakterielle Protein-Methylierung eine weit verbreitete post-translationale Modifikation f&uuml;r Virulenz in ausgew&auml;hlten pathogenen Bakterien erforderlich ist. Insbesondere hat sich ver&auml;nderte Methylierung der &auml;u&szlig;eren Membranproteine, die Wirksamkeit der Host Immunantwort modulieren gezeigt. In dieser Studie identifizierten zweidimensionale Gelelektrophorese kombiniert mit Matrix assisted Laser Desorption/Ionisierung-Zeit von Flug-Massenspektrometrie ein Leptospira Interrogans Serovar Copenhageni Stamm Fiocruz L1-130-Protein, entsprechend zum Lesen &ouml;ffnen Bildfrequenz (ORF) LIC11848, die umfangreiche und differenzierte Methylierung von Glutamins&auml;ure R&uuml;ckst&auml;nde erf&auml;hrt. Immunfluoreszenz-Mikroskopie verwickelt LIC11848 als Oberfl&auml;che exponierten Au&szlig;enmembran Protein, woraufhin die Bezeichnung OmpL32. Indirekte Immunfluoreszenz-Mikroskopie der Syrische Goldhamster Leber und Niere Abschnitte offenbart Ausdruck des OmpL32 w&auml;hrend der Kolonisierung dieser Organe. Identifizierung von methylierte Oberfl&auml;che exponierten &auml;u&szlig;ere Membranproteine, wie OmpL32, bietet eine Grundlage f&uuml;r die Abgrenzung der Rolle dieser Post-translationale Modifikation in Leptospiral Virulenz.

Methylierung und in-vivo-Ausdruck des Oberfl&auml;che exponierten Leptospira Interrogans Au&szlig;enmembran Proteins OmpL32.

&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x305F;&#x75C5;&#x539F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6539;&#x5909;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x98DB;&#x884C;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x652F;&#x63F4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8131;&#x96E2;/&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x6642;&#x9593;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;&#x30B2;&#x30EB;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x308B;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;ORF&#xFF09;LIC11848&#x3092;&#x958B;&#x304D;&#x3001;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;interrogans&#x8840;&#x6E05;Copenhageni&#x3072;&#x305A;&#x307F;Fiocruz L1-130&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x306E;&#x5DEE;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x6307;&#x5B9A;OmpL32&#x3092;&#x4FC3;&#x3057;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x9732;&#x51FA;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;LIC11848&#x3092;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3002;&#x30B4;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B7;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x809D;&#x81D3;&#x3068;&#x814E;&#x81D3;&#x5207;&#x7247;&#x306E;&#x9593;&#x63A5;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306E;&#x9593;&#x306B;OmpL&#x200B;&#x200B;32&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;OmpL32&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x8868;&#x9762;&#x9732;&#x51FA;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x8F2A;&#x90ED;&#x3092;&#x63CF;&#x304F;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x76E4;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x9732;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;Interrogans&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;OmpL32&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D3;&#x30DC;&#x767A;&#x73FE;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xADF8; &#xC138;&#xADE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB294; &#xC120;&#xD0DD; &#xB41C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xB2E2; &#xC218;&#xC815; &#xBC1D;&#xD600; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xBA54; &#xD2F8; &#xBCC0;&#xC870; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC918; &#xC654;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC824; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD0C8; &#xCC29;/&#xC774;&#xC628;&#xD654;-&#xC2DC;&#xAC04;&#xC758; &#xBE44;&#xD589; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xD568;&#xAED8; &#xC2DD;&#xBCC4; Leptospira interrogans serovar Copenhageni &#xBCC0;&#xD615; Fiocruz L1-130 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB3C5;&#xC11C; &#xC5F4;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xACE0; &#xCC28;&#xB3D9; &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0D0;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB97C; &#xACAA; &#xC2B5; (ORF) LIC11848. &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xC9C0;&#xC815; OmpL32 &#xB77C;&#xB294; &#xC678;&#xBD80; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; LIC11848 &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xD669;&#xAE08; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC544; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xAC04; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC139;&#xC158;&#xC758; &#xAC04;&#xC811; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xC911; Ompl32&#xC758; &#xD45C;&#xD604;. Methylated &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, OmpL32, &#xB4F1;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; leptospiral &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218;&#xC815;&#xC774;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBB18;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBC0F; &#xD45C;&#xBA74; &#xB178;&#xCD9C; Leptospira interrogans &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Ompl32&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC2DD;.

Estudios recientes han revelado que la metilaci&#xF3;n es una prote&#xED;na bacteriana generalizada modificaci&#xF3;n post-traduccional que se requiere para la virulencia en bacterias pat&#xF3;genas seleccionadas. En particular, la metilaci&#xF3;n alterada de prote&#xED;nas de membrana externa se ha demostrado que modulan la eficacia de la respuesta inmune del hu&#xE9;sped. En este estudio, la electroforesis bidimensional en gel combinado con desorci&#xF3;n por l&#xE1;ser asistida por matriz / ionizaci&#xF3;n tiempo de espectrometr&#xED;a de masas identificado un vuelo de Leptospira interrogans serovar Copenhageni cepa Fiocruz L1-130 prote&#xED;na, que corresponde al marco de lectura abierto (ORF) LIC11848, que sufre un extenso y diferenciado metilaci&#xF3;n de residuos de &#xE1;cido glut&#xE1;mico. La inmunofluorescencia implicados LIC11848 como superficie expuesta prote&#xED;na de membrana externa, lo que provoc&#xF3; la OmpL32 designaci&#xF3;n. Microscopio de inmunofluorescencia indirecta de h&#xED;gado de oro h&#xE1;mster sirio y las secciones de ri&#xF1;&#xF3;n revel&#xF3; expresi&#xF3;n de OmpL32 durante la colonizaci&#xF3;n de estos &#xF3;rganos. Identificaci&#xF3;n de los expuestos en la superficie de quemar prote&#xED;nas de membrana externa, como OmpL32, proporciona una base para delinear el papel de esta modificaci&#xF3;n post-translacional en la virulencia de leptospiras.

La metilaci&#xF3;n y la expresi&#xF3;n in vivo de la prote&#xED;na de superficie expuesta al Leptospira interrogans membrana exterior OmpL32

Lo screening di una libreria di espressione di Leptospira interrogans con fluidi occhio da uveitic cavalli ha portato nell&#39;identificazione di una proteina novella, LruC. LruC si trova nell&#39;opuscolo interno della membrana esterna di Leptospira e un gene lruC &egrave; stato rilevato in tutti i patogeni testati L. interrogans. Livelli di anticorpi specifici di LruC sono stati sensibilmente superiori nell&#39;occhio fluidi e sieri di cavalli uveitic cavalli sani. Questi risultati suggeriscono che LruC pu&ograve; svolgere un ruolo nella uveite equina Leptospira.

Anticorpi di una proteina di Leptospira romanzo, LruC, nell&#39;occhio fluidi e sieri di cavalli con uveite associata di Leptospira.

&#x4ECE;&#x8461;&#x8404;&#x819C;&#x708E;&#x9A6C;&#x773C;&#x6D41;&#x4F53;&#x4E0E;&#x95EE;&#x53F7;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE;&#x6587;&#x5E93;&#x7B5B;&#x9009;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;LruC&#x3002;LruC &#x4F4D;&#x4E8E;&#x5185;&#x90E8;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5355;&#x5F20;&#x7684;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x5916;&#x819C;&#x548C; lruC &#x57FA;&#x56E0;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x81F4;&#x75C5; L.&#x95EE;&#x53F7;&#x3002;LruC &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x6C34;&#x5E73;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x5927;&#x5927;&#x773C;&#x775B;&#x6DB2;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x7684;&#x8461;&#x8404;&#x819C;&#x708E;&#x9A6C;&#x5065;&#x5EB7;&#x9A6C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; LruC &#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x9A6C;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x8461;&#x8404;&#x819C;&#x708E;&#x3002;

&#x65B0;&#x578B;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;LruC&#xFF0C;&#x773C;&#x6D41;&#x4F53;&#x548C;&#x94A9;&#x7AEF;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F53;&#x5173;&#x8054;&#x708E;&#x9A6C;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;

Screening of an expression library of Leptospira interrogans with eye fluids from uveitic horses resulted in identification of a novel protein, LruC. LruC is located in the inner leaflet of leptospiral outer membrane and an lruC gene was detected in all tested pathogenic L. interrogans. LruC-specific antibody levels were significantly higher in eye fluids and sera of uveitic horses than healthy horses. These findings suggest that LruC may play a role in equine leptospiral uveitis.

Antibodies to a novel leptospiral protein, LruC, in the eye fluids and sera of horses with Leptospira-associated uveitis.

Projection d&#x26;#39;un banque d&#x26;#39;expression de Leptospira interrogans avec des fluides oculaires des chevaux uv&#xE9;ite abouti &#xE0; l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;une nouvelle prot&#xE9;ine, LruC. LruC est situ&#xE9; dans le feuillet interne de la membrane externe leptospire et un g&#xE8;ne lruC &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9; dans tous interrogans test&#xE9;e pathog&#xE8;ne L.. Taux d&#x26;#39;anticorps sp&#xE9;cifiques LruC &#xE9;taient significativement plus &#xE9;lev&#xE9;s dans les fluides oculaires et des s&#xE9;rums de chevaux uv&#xE9;ite que les chevaux sains. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que LruC peut jouer un r&#xF4;le dans l&#x26;#39;uv&#xE9;ite &#xE9;quine leptospires.

Les anticorps dirig&#xE9;s contre une prot&#xE9;ine nouvelle leptospires, LruC, dans les fluides oculaires et s&#xE9;rum de chevaux avec Leptospira associ&#xE9;e &#xE0; une uv&#xE9;ite

Screening von einem Ausdruck-Bibliothek von Leptospira f&uuml;hrte Interrogans mit Auge Fl&uuml;ssigkeiten aus uveitic Pferde Identifizierung ein neues Protein, LruC. LruC befindet sich im Inneren Merkblatt Leptospiral &auml;u&szlig;ere Membran und ein LruC-Gen wurde bei allen getesteten pathogenen L. Interrogans ermittelt. LruC-spezifische Antik&ouml;rper Ebenen waren signifikant h&ouml;her in Auge Fl&uuml;ssigkeiten und Sera uveitic Pferde als gesunde Pferde. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass LruC bei Pferden Leptospiral Uveitis eine Rolle spielen kann.

Antik&ouml;rper gegen ein neuartiges Leptospiral Protein, LruC, im Auge Fl&uuml;ssigkeiten und Serum von Pferden mit Leptospira-assoziierter Uveitis.

uveitic&#x99AC;&#x304B;&#x3089;&#x76EE;&#x6D41;&#x4F53;&#x3068;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;interrogans&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;LruC&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; LruC&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x5916;&#x819C;&#x306E;&#x5185;&#x5C64;&#x306B;&#x914D;&#x7F6E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;lruC&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;L. interrogans&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; LruC&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x99AC;&#x3088;&#x308A;&#x773C;&#x306E;&#x4F53;&#x6DB2;&#x3068;uveitic&#x99AC;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;LruC&#x306F;&#x99AC;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30E9;&#x3076;&#x3069;&#x3046;&#x819C;&#x708E;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

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Leptospira&#xC758; &#xC2DD; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC758; &#xC0C1;&#xC601; interrogans uveitic &#xB9D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB208; &#xCCB4;&#xC561;&#xACFC; &#xC18C;&#xC124; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Lruc&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;. Lruc&#xB294; leptospiral &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC804;&#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB41C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; L. interrogans&#xC5D0; lruC &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. LruC &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB208; &#xCCB4;&#xC561;&#xACFC; uveitic &#xB9D0; &#xC138;&#xB77C; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xB9D0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB192;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; LruC &#xB9D0; leptospiral &#xD3EC;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB208; &#xC720;&#xCCB4;&#xC640; &#xC138;&#xB77C; Leptospira &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xD3EC;&#xB3C4;&#xC640; &#xB9D0;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; leptospiral &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, LruC, &#xD558; &#xD56D; &#xCCB4;.

Proyecci&#xF3;n de una biblioteca de expresi&#xF3;n de Leptospira interrogans con los fluidos del ojo de los caballos uve&#xED;tis como resultado la identificaci&#xF3;n de una nueva prote&#xED;na, LruC. LruC est&#xE1; localizado en la pared interna de la membrana externa leptospira y un gen lruC se detect&#xF3; en todas las bandas pat&#xF3;gena L. interrogans. LruC niveles de anticuerpos espec&#xED;ficos fueron significativamente mayores en los fluidos del ojo y el suero de los caballos de uve&#xED;tis que los caballos sanos. Estos hallazgos sugieren que LruC puede jugar un papel en la uve&#xED;tis leptospirosis equina.

Article	Year
Elimination of channel-forming activity by insertional inactivation of the p13 gene in Borrelia burgdorferi. Journal of bacteriology\| PubMed ID: 12446631	2002
Molecular analysis of the channel-forming protein P13 and its paralogue family 48 from different Lyme disease Borrelia species. Microbiology (Reading, England)\| PubMed ID: 14993304	2004
Pleiotropic effects of inactivating a carboxyl-terminal protease, CtpA, in Borrelia burgdorferi. Journal of bacteriology\| PubMed ID: 15028692	2004
The BBA01 protein, a member of paralog family 48 from Borrelia burgdorferi, is potentially interchangeable with the channel-forming protein P13. Journal of bacteriology\| PubMed ID: 16740927	2006
Elimination of channel-forming activity by insertional inactivation of the p66 gene in Borrelia burgdorferi. FEMS microbiology letters\| PubMed ID: 17233736	2007
Leptospira interrogans endostatin-like outer membrane proteins bind host fibronectin, laminin and regulators of complement. PloS one\| PubMed ID: 18000555	2007
A comprehensive approach to identification of surface-exposed, outer membrane-spanning proteins of Leptospira interrogans. PloS one\| PubMed ID: 19562037	2009
The OmpL37 surface-exposed protein is expressed by pathogenic Leptospira during infection and binds skin and vascular elastin. PLoS neglected tropical diseases\| PubMed ID: 20844573	2010
Methylation and in vivo expression of the surface-exposed Leptospira interrogans outer membrane protein OmpL32. Microbiology (Reading, England)\| PubMed ID: 22174381	2011
Antibodies to a novel leptospiral protein, LruC, in the eye fluids and sera of horses with Leptospira-associated uveitis. Clinical and vaccine immunology : CVI\| PubMed ID: 22237897	2012

Marija Pinne

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