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Isolation of Fidelity Variants of RNA Viruses and Characterization of Virus Mutation Frequency

RNA viruses use RNA dependent RNA polymerases to replicate their genomes. The intrinsically high error rate of these enzymes is a large contributor to the ...

Institut Pasteur 

&#x5355;&#x58F0;&#x9053;&#x548C;&#x987A;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53C8;&#x8FDE;&#x7ED3;&#x800C;&#x5174;&#x5EFA;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8868;&#x8FBE;&#x6D41;&#x611F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8840;&#x51DD;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x7559;&#x5176;&#x4FE1;&#x53F7;&#x80BD;&#x548C;&#x8DE8;&#x819C;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x80A0;&#x9053;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x548C;&#x590D;&#x5236;&#x53EA;&#x987A;&#x533A;&#xFF0C;&#x5916;&#x56FD;&#x548C;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5E8F;&#x5217;&#x88AB;&#x9694;&#x5F00;&#x8111;&#x5FC3;&#x808C;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5185;&#x90E8;&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x5165;&#x53E3;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x590D;&#x5236;&#x5E76;&#x8868;&#x793A;&#x7CD6;&#x5316;&#x8840;&#x51DD;&#x7D20;&#x3002;

&#x5B9A;&#x4F4D;&#x819C;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6D41;&#x611F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8840;&#x51DD;&#x7D20;&#xFF0C;&#x7531;&#x987A;&#x53C8;&#x8FDE;&#x7ED3;&#x6240;&#x5F97;&#x7684;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;

Mono- and dicistronic poliovirus replicons were constructed to express the influenza virus hemagglutinin, retaining its signal peptide and transmembrane region. Picornavirus genomes do not normally encode glycoproteins, and only the dicistronic replicon, in which the foreign and poliovirus sequences were separated by the encephalomyocarditis virus internal ribosomal entry site, replicated and expressed glycosylated hemagglutinin.

Expression of a membrane-anchored glycoprotein, the influenza virus hemagglutinin, by dicistronic replicons derived from the poliovirus genome.

Mono-et r&#xE9;plicons poliovirus dicistroniques ont &#xE9;t&#xE9; construits pour exprimer l&#x26;#39;h&#xE9;magglutinine du virus de la grippe, tout en conservant son peptide signal et la r&#xE9;gion transmembranaire. G&#xE9;nomes picornavirus ne sont normalement pas encoder glycoprot&#xE9;ines, et seul le r&#xE9;plicon dicistronique, dans lequel les s&#xE9;quences &#xE9;trang&#xE8;res et du poliovirus ont &#xE9;t&#xE9; s&#xE9;par&#xE9;s par le virus de l&#x26;#39;enc&#xE9;phalomyocardite entr&#xE9;e du site interne du ribosome, r&#xE9;pliqu&#xE9; et exprim&#xE9; glycosyl&#xE9;e h&#xE9;magglutinine.

Expression d&#x26;#39;une glycoprot&#xE9;ine membranaire ancr&#xE9;e, l&#x26;#39;h&#xE9;magglutinine du virus influenza, par r&#xE9;plicons dicistronique D&#xE9;riv&#xE9; du g&#xE9;nome du poliovirus

Die Expression eines Membran-verankertes Glycoprotein, das Influenzavirus-H&#xE4;magglutinin von dicistronischen Replikons vom Poliovirus-Genom abgeleitet.

Mono - e dicistronic replicons poliovirus sono stati costruiti per esprimere l&#39;emoagglutinina del virus dell&#39;influenza, mantenendo il peptide segnale e la regione transmembrana. Genomi picornavirus non codificano normalmente glicoproteine, e solo il replicone dicistronic, in cui le sequenze poliovirus e straniere sono state separate dal sito voce ribosomiale interno virus dell&#39;encefalomiocardite, replicati ed espresso glicosilata emoagglutinina.

Espressione di una glicoproteina di membrana ancorate, l&#39;emoagglutinina virus influenzale, da dicistronic replicons derivato dal genoma del poliovirus.

&#x30E2;&#x30CE;&#x3068;dicistronic&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D4;&#x30B3;&#x30EB;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;&#x5916;&#x56FD;&#x4EBA;&#x3068;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x8133;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x708E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5185;&#x90E8;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x4FB5;&#x5165;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3060;&#x3051;dicistronic&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x7531;&#x6765;&#x306E;Dicistronic&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x819C;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x578B;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D8;&#x30DE;&#x30B0;&#x30EB;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;

Dicistronic &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB178;-&#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; replicons&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC640; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC601;&#xC5ED; &#xC720;&#xC9C0; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC870;&#xB958;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xAC74;&#xC124; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Picornavirus &#xAC8C;&#xB188;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; glycoproteins, &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xB9CC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; dicistronic replicon, &#xC678;&#xAD6D; &#xBC0F; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; encephalomyocarditis &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB0B4;&#xBD80; ribosomal &#xD56D;&#xBAA9; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xB2F9;&#xD654; &#xC870;&#xB958;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604;.

&#xB9C9; &#xC815;&#xBC15; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC870;&#xB958; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; dicistronic replicons&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604;.

Mono y replicones dicistr&#xF3;nico poliovirus fueron construidos para expresar la hemaglutinina del virus de la gripe, conservando su p&#xE9;ptido se&#xF1;al y la regi&#xF3;n transmembrana. Genomas picornavirus normalmente no codifican glicoprote&#xED;nas, y s&#xF3;lo el replic&#xF3;n dicistr&#xF3;nico, en el que las secuencias for&#xE1;neas y poliovirus fueron separados por el virus de la encefalomiocarditis interna sitio de entrada ribosomal, replican y expresan glicosilada hemaglutinina.

Expresi&#xF3;n de una glicoprote&#xED;na de membrana anclada, la hemaglutinina del virus de la influenza, por replicones dicistr&#xF3;nico derivadas del genoma del poliovirus

Positifs des populations de virus &#xE0; ARN brin sont une collection de virus similaires, mais g&#xE9;n&#xE9;tiquement diff&#xE9;rente. Elles existent comme quasi-esp&#xE8;ce virale due &#xE0; des taux &#xE9;lev&#xE9;s de mutation de la fid&#xE9;lit&#xE9; de faible virale ARN polym&#xE9;rase ARN-d&#xE9;pendante (RdRp). On pense que cette h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE9;n&#xE9;it&#xE9; g&#xE9;nomique est avantageux pour la population, permettant une adaptation &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;volution rapide des environnements qui pr&#xE9;sentent divers types et degr&#xE9;s de pression s&#xE9;lective. Toutefois, une cons&#xE9;quence de cette grande diversit&#xE9; est la susceptibilit&#xE9; aux agents mutag&#xE8;nes que les autres variations de s&#xE9;quence augmentation. Depuis des virus &#xE0; ARN vivre au bord de la variabilit&#xE9; maximale, soit une augmentation du taux de mutation est susceptible de forcer le virus au-del&#xE0; de la fr&#xE9;quence des mutations tol&#xE9;rables dans une &#xAB;catastrophe d&#x26;#39;erreur&#xBB;. Un mutag&#xE8;ne telle, la ribavirine, est un analogue de nucl&#xE9;oside antiviral qui est mutag&#xE8;ne pour plusieurs virus &#xE0; ARN. La ribavirine est incorpor&#xE9; dans le g&#xE9;nome viral provoquant mutagen&#xE8;se l&#xE9;tale et une diminution subs&#xE9;quente de l&#x26;#39;infectivit&#xE9; sp&#xE9;cifique. M&#xEA;me si, repiquage du poliovirus dans la pr&#xE9;sence de concentrations faibles &#xE0; interm&#xE9;diaires de la drogue conduit &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;mergence d&#x26;#39;une population virale r&#xE9;sistante aux effets de la ribavirine. Ces virus ont une mutation ponctuelle dans le RdRp qui augmente la fid&#xE9;lit&#xE9; polym&#xE9;rase globale. Fait int&#xE9;ressant, tel que pr&#xE9;dit par la th&#xE9;orie quasi-esp&#xE8;ces, la ribavirine virus r&#xE9;sistants sont moins adaptables, car ils sont plus sensibles &#xE0; d&#x26;#39;autres non-mutag&#xE8;nes m&#xE9;dicaments antiviraux et sont fortement att&#xE9;nu&#xE9;es in vivo. Ici, nous passons en revue le m&#xE9;canisme d&#x26;#39;action de la ribavirine sur le poliovirus et d&#x26;#39;autres virus &#xE0; ARN, la possibilit&#xE9; d&#x26;#39;&#xE9;vasion par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire d&#x26;#39;une fid&#xE9;lit&#xE9; accrue de la polym&#xE9;rase virale, les cons&#xE9;quences de cette r&#xE9;ponse sur la dynamique des populations virales, et les implications biologiques pour l&#x26;#39;usage th&#xE9;rapeutique des m&#xE9;dicaments antiviraux mutag&#xE8;ne agents.

La ribavirine et mutagen&#xE8;se l&#xE9;tale de poliovirus: M&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires, de la r&#xE9;sistance et implications biologiques

&#x79EF;&#x6781;&#x94FE; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x4EBA;&#x53E3;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0D;&#x540C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x96C6;&#x5408;&#x3002;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9AD8;&#x7A81;&#x53D8;&#x7387;&#x7684;&#x4F4E;&#x4FDD;&#x771F;&#x75C5;&#x6BD2; RNA &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; (RdRp) &#x7531;&#x4E8E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51C6;&#x79CD;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x5B83;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x975E;&#x5747;&#x8D28;&#x6027;&#x662F;&#x6709;&#x5229;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x4E3A;&#x9002;&#x5E94;&#x8FC5;&#x901F;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x53CA;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x538B;&#x529B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x5BF9;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x589E;&#x52A0;&#x5E8F;&#x5217;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5242;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x751F;&#x6D3B;&#x5728;&#x8FB9;&#x7F18;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x8FEB;&#x4F7F;&#x8D85;&#x51FA;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5FCD;&#x53D7;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x9891;&#x7387;&#x9519;&#x8BEF;&#x7A81;&#x53D8;&#x6210;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7A81;&#x53D8;&#x7387;&#x6709;&#x6240;&#x4E0A;&#x5347;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5242;&#xFF0C;&#x4E09;&#x6C2E;&#x5511;&#x6838;&#x82F7;&#xFF0C;&#x662F;&#x662F;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5BF9;&#x51E0;&#x79CD; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x7C7B;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6A21;&#x62DF;&#x3002;&#x4E09;&#x6C2E;&#x5511;&#x6838;&#x82F7;&#x88AB;&#x7EB3;&#x5165;&#x9020;&#x6210;&#x81F4;&#x547D;&#x8BF1;&#x53D8;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x51CF;&#x5C11;&#x7279;&#x5B9A;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x3002;&#x5373;&#x4FBF;&#x5982;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4F20;&#x4E0B;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x5230;&#x4E2D;&#x95F4;&#x7684;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51FA;&#x73B0;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x6297;&#x6027;&#x7684;&#x5229;&#x5DF4;&#x97E6;&#x6797;&#x5F71;&#x54CD;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x589E;&#x52A0;&#x6574;&#x4F53;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#x7684; RdRp &#x57FA;&#x56E0;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51C6;&#x79CD;&#x7406;&#x8BBA;&#xFF0C;&#x6240;&#x9884;&#x8BA1;&#x7684;&#x4E09;&#x6C2E;&#x5511;&#x6838;&#x82F7;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x662F;&#x4E0D;&#x592A;&#x9002;&#x5E94;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x66F4;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x5176;&#x4ED6;&#x975E;&#x8BF1;&#x53D8;&#x7684;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x53CA;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x5F31;&#x6BD2;&#x75AB;&#x82D7;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53CD;&#x5E94;&#x5BF9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4EBA;&#x53E3;&#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x8BF1;&#x53D8;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x8F6C;&#x4E49;&#x7684;&#x4E09;&#x6C2E;&#x5511;&#x6838;&#x82F7;&#x5BF9;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; &#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x5229;&#x5DF4;&#x97E6;&#x6797;&#x548C;&#x81F4;&#x547D;&#x8BF1;&#x53D8;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#xFF1A; &#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x3001; &#x62B5;&#x6297;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;

Positive strand RNA virus populations are a collection of similar but genetically different viruses. They exist as viral quasispecies due to the high mutation rates of the low fidelity viral RNA-dependent RNA polymerase (RdRp). It is thought that this genomic heterogeneity is advantageous to the population, allowing for adaptation to rapidly changing environments that present varying types and degrees of selective pressure. However, one consequence of this extensive diversity is the susceptibility to mutagens that further increase sequence variation. Since RNA viruses live at the edge of maximal variability, an increase in the mutation rate is likely to force the virus beyond the tolerable mutation frequency into 'error catastrophe'. One such mutagen, ribavirin, is an antiviral nucleoside analog that is mutagenic to several RNA viruses. Ribavirin is incorporated into the viral genome causing lethal mutagenesis and a subsequent decrease in the specific infectivity. Even so, passaging poliovirus in the presence of low to intermediate concentrations of the drug leads to the emergence of a viral population resistant to the effects of ribavirin. These viruses have a point mutation in the RdRp that increases the overall polymerase fidelity. Interestingly, as predicted by the quasispecies theory, ribavirin resistant viruses are less adaptable, as they are more susceptible to other non-mutagenic antiviral drugs and are highly attenuated in vivo. Here, we review the mechanism of action of ribavirin on poliovirus and other RNA viruses, the possibility for escape via increased fidelity of the viral polymerase, the consequences of this response on viral population dynamics, and the biological implications for the therapeutic use of mutagenic antiviral agents.

Ribavirin and lethal mutagenesis of poliovirus: molecular mechanisms, resistance and biological implications.

Ribavirin und t&#xF6;dliche Mutagenese des Poliovirus: molekulare Mechanismen, Best&#xE4;ndigkeit und biologische Auswirkungen.

Positive strand RNA virus popolazioni sono una raccolta di simili ma geneticamente diversi virus. Esistono come quasispecie virale a causa dei tassi di mutazione alta della bassa fedelt&agrave; virale RNA polimerasi RNA dipendente (RdRp). Si pensa che questa eterogeneit&agrave; genomica &egrave; vantaggiosa per la popolazione, permettendo di adattamento ad ambienti che presentano vari tipi e gradi di pressione selettiva in rapido mutamento. Tuttavia, una conseguenza di questa vasta diversit&agrave; &egrave; la suscettibilit&agrave; agli agenti mutageni che aumentano ulteriormente la variazione di sequenza. Poich&eacute; virus a RNA viva ai margini di variabilit&agrave; massima, un aumento del tasso di mutazione &egrave; probabile forzare il virus oltre la frequenza di mutazione tollerabile in &#39;catastrofe errore&#39;. Una tale sostanza mutagena, Ribavirina, &egrave; un analogo di antivirali nucleosidici che &egrave; mutageno a diversi virus a RNA. Ribavirina &egrave; incorporato nel genoma virale causando mutagenesi letale e una successiva diminuzione dell&#39;infettivit&agrave; specifiche. Anche cos&igrave;, seminando poliovirus in presenza di concentrazioni basse di intermedi del farmaco conduce all&#39;emersione di un virale popolazione resistente agli effetti della ribavirina. Questi virus hanno una mutazione puntiforme in RdRp che aumenta la fedelt&agrave; della polimerasi complessiva. &Egrave; interessante notare che, come previsto dalla teoria delle quasispecie, Ribavirina resistenti al virus sono meno adattabili, come sono pi&ugrave; sensibili di altri farmaci antivirali non mutagene e sono altamente attenuati in vivo. Qui, passiamo in rassegna il meccanismo d&#39;azione di ribavirina su poliovirus e altri virus a RNA, la possibilit&agrave; per fuggire via maggiore fedelt&agrave; della polimerasi virale, le conseguenze di questa risposta sulla dinamica di popolazione virale e le implicazioni biologiche per l&#39;uso terapeutico di agenti antivirali mutageni.

Ribavirina e mutagenesi letale del poliovirus: meccanismi molecolari, resistenza e implicazioni biologiche.

&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x9396;RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306F;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RNA&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;RDRP&#xFF09;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x7387;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6E96;&#x7A2E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x7570;&#x8CEA;&#x6027;&#x304C;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x5727;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306B;&#x6709;&#x5229;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x914D;&#x5217;&#x5909;&#x7570;&#x305D;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x7269;&#x8CEA;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3067;&#x3059;&#x3002; RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304C;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x306E;&#x7AEF;&#x306B;&#x4F4F;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x7387;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001; &#x26;#39;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x306E;&#x5927;&#x60E8;&#x4E8B;&#x26;#39;&#x306B;&#x8A31;&#x5BB9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x3066;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x5F37;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x3001;&#x30EA;&#x30D0;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6027;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30B7;&#x30C9;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30EA;&#x30D0;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x305D;&#x3046;&#x3060;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3082;&#x3001;&#x85AC;&#x5264;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x7D99;&#x4EE3;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30D0;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;RDRP&#x306E;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x975E;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x85AC;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x3068;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F31;&#x6BD2;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x6E96;&#x7A2E;&#x7406;&#x8AD6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30EA;&#x30D0;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x8010;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x9806;&#x5FDC;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3084;&#x4ED6;&#x306E;RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3067;&#x30EA;&#x30D0;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x6A5F;&#x5E8F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30A8;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x52D5;&#x614B;&#x4E0A;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x3068;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x85AC;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x5F71;&#x97FF;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3002;

&#x30EA;&#x30D0;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#xFF1A;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3001;&#x62B5;&#x6297;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x610F;&#x5473;

&#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAC00;&#xB2E5; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC778;&#xAD6C;&#xB294; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC720;&#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB0AE;&#xC740; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RNA &#xC885;&#xC18D; RNA &#xD6A8;&#xC18C; (RdRp)&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; quasispecies&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC8C;&#xB188;&#xC774; &#xC778;&#xAD6C;, &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCC0;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD615;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC555;&#xB825;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xAC01;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC758; &#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCD94;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xD615; &#xC99D;&#xAC00; mutagens&#xC5D0; &#xC790;&#xD654; &#xC728; &#xC774;&#xB2E4;. RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xAC00;&#xBCC0;&#xC131;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5;&#xC790;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xBBC0;&#xB85C;, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC728; &#xC99D;&#xAC00; &#39;&#xC624;&#xB958; &#xC7AC;&#xC559;&#39;&#xC73C;&#xB85C; &#xCF8C;&#xD65C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBE48;&#xB3C4; &#xB118;&#xC5B4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC15;&#xC81C;&#xB85C; &#xB192;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xADF8;&#xB7EC;&#xD55C; mutagen ribavirin, &#xC5EC;&#xB7EC; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB274; &#xD074;&#xB808; &#xC624; &#xC2DC;&#xB4DC; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xC774;&#xB2E4;. Ribavirin &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; mutagenesis &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD2B9;&#xC815; infectivity &#xD6C4;&#xC18D; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; &#xC57D;&#xC758; &#xC911;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC; passaging ribavirin&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAD6C;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xCD9C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD6A8;&#xC18C; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; Rdrp&#xC5D0; &#xC810; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, quasispecies &#xC774;&#xB860;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC608;&#xCE21; ribavirin &#xB0B4;&#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xC544;&#xB2CC; &#xB2E4;&#xB978; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB354; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD558; &#xACE0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC1E0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC801;&#xC740; &#xC801;&#xC751;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4;, &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC778;&#xAD6C; &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0;&#xC774; &#xC751;&#xB2F5; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB300;&#xB9AC;&#xC778;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC758;&#xBBF8;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD1B5;&#xD574; &#xD0C8;&#xCD9C; ribavirin &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;, &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC758; &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xAC80;&#xD1A0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ribavirin&#xC640; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;&#xC758; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; mutagenesis: &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;, &#xC800;&#xD56D; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC601;&#xD5A5;.

Cadena positiva poblaciones de virus de ARN son una colecci&#xF3;n de virus similares pero gen&#xE9;ticamente diferentes. Ellos existen como cuasiespecies virales, debido a las altas tasas de mutaci&#xF3;n de la baja fidelidad viral ARN polimerasa dependiente de ARN (RDRP). Se cree que esta heterogeneidad gen&#xF3;mica es ventajoso para la poblaci&#xF3;n, permitiendo la adaptaci&#xF3;n a los cambiantes entornos que presentan diversos tipos y grados de presi&#xF3;n selectiva. Sin embargo, una consecuencia de esta gran diversidad es la susceptibilidad a los mut&#xE1;genos que la variaci&#xF3;n m&#xE1;s secuencia de incremento. Dado que los virus de ARN viven en el borde de la variabilidad m&#xE1;xima, un aumento en la tasa de mutaci&#xF3;n es probable que la fuerza del virus m&#xE1;s all&#xE1; de la frecuencia de mutaci&#xF3;n en tolerable &#x26;#39;cat&#xE1;strofe de error&#x26;#39;. Un mut&#xE1;geno tal, la ribavirina, es un an&#xE1;logo de nucle&#xF3;sido antiviral que es mutag&#xE9;nico de varios virus de ARN. La ribavirina se incorpora en el genoma viral que causa mutag&#xE9;nesis letal y una posterior disminuci&#xF3;n en la infectividad espec&#xED;fica. Aun as&#xED;, passaging poliovirus en la presencia de baja a concentraciones intermedias de la droga conduce a la aparici&#xF3;n de una poblaci&#xF3;n viral resistente a los efectos de la ribavirina. Estos virus tienen una mutaci&#xF3;n puntual en el RDRP que aumenta la fidelidad de la polimerasa en general. Curiosamente, seg&#xFA;n lo predicho por la teor&#xED;a de cuasiespecies, la ribavirina virus resistentes son menos adaptables, ya que son m&#xE1;s susceptibles a otras organizaciones no mutag&#xE9;nicos medicamentos antivirales y son altamente atenuado in vivo. En este art&#xED;culo examinamos el mecanismo de acci&#xF3;n de la ribavirina en el virus de la polio y otros virus de ARN, la posibilidad de escapar a trav&#xE9;s de la fidelidad cada vez mayor de la polimerasa viral, las consecuencias de esta respuesta en la din&#xE1;mica de las poblaciones virales, y las implicaciones biol&#xF3;gicas para el uso terap&#xE9;utico de un potencial antiviral agentes.

La ribavirina y mutag&#xE9;nesis letal de poliovirus: Mecanismos moleculares de resistencia e implicaciones biol&#xF3;gicas

&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#x7684;&#x8131;&#x6C27;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3001; &#x70ED;&#x529B;&#x5B66;&#x3001; &#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x57FA;&#x7840;&#x4ECD;&#x6709;&#x4E89;&#x8BAE;&#x3002;&#x4E86;&#x89E3;&#x75C5;&#x6BD2; RNA &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; (RdRp) &#x5BCC;&#x8FBE;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x56E0;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x5BCC;&#x8FBE;&#x4E8C;&#x6298;&#x589E;&#x52A0;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x53CA;&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#x4E8C;&#x6298;&#x8DCC;&#x5E45;&#x51CF;&#x5C11;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x5065;&#x8EAB;&#x76F8;&#x5F53;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x8BDD;&#x9898;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x524D;&#x78F7;&#x9170;&#x5316;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x6B65;&#x9AA4;&#x662F;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2; (3Dpol) RdRp &#x5173;&#x952E;&#x4FDD;&#x771F;&#x68C0;&#x67E5;&#x70B9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x4E00;&#x6B65;&#x662F;&#x5230;&#x9002;&#x5408;&#x50AC;&#x5316;&#xFF0C;&#x6784;&#x8C61;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x7684;&#x65B9;&#x5411;&#x6697;&#x793A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5916;&#x63A8;&#x81F3;&#x5176;&#x5B83;&#x7C7B;&#x522B;&#x7684;&#x8131;&#x6C27;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x805A;&#x5408;&#x9176; RdRp &#x4FDD;&#x771F;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4ECE;&#x50AC;&#x5316;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x8FDC;&#x7A0B;&#x7AD9;&#x70B9;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63A7;&#x5236;&#x6B64;&#x68C0;&#x67E5;&#x70B9;&#xFF0C;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x8FDE;&#x63A5;&#x8FDC;&#x7A0B;&#x7AD9;&#x70B9;&#x548C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5B58;&#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2; RdRps&#x3002;&#x4ECE;&#x50AC;&#x5316;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x8FDC;&#x7A0B;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x6539;&#x53D8;&#x5BCC;&#x8FBE;&#x8868;&#x660E;&#x9488;&#x5BF9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027; RdRp &#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x7814;&#x53D1;&#x7684;&#x65B0;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

&#x8FDC;&#x7A0B;&#x7AD9;&#x70B9;&#x63A7;&#x5236;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E2D;&#x75C5;&#x6BD2; RNA &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x4FDD;&#x771F;&#x68C0;&#x67E5;&#x70B9;&#x3002;

The kinetic, thermodynamic, and structural basis for fidelity of nucleic acid polymerases remains controversial. An understanding of viral RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) fidelity has become a topic of considerable interest as a result of recent experiments that show that a 2-fold increase in fidelity attenuates viral pathogenesis and a 2-fold decrease in fidelity reduces viral fitness. Here we show that a conformational change step preceding phosphoryl transfer is a key fidelity checkpoint for the poliovirus RdRp (3Dpol). We provide evidence that this conformational change step is orientation of the triphosphate into a conformation suitable for catalysis, suggesting a kinetic and structural model for RdRp fidelity that can be extrapolated to other classes of nucleic acid polymerases. Finally, we show that a site remote from the catalytic center can control this checkpoint, which occurs at the active site. Importantly, similar connections between a remote site and the active site exist in a wide variety of viral RdRps. The capacity for sites remote from the catalytic center to alter fidelity suggests new possibilities for targeting the viral RdRp for antiviral drug development.

Remote site control of an active site fidelity checkpoint in a viral RNA-dependent RNA polymerase.

La base cin&#xE9;tique, thermodynamique et structurale de la fid&#xE9;lit&#xE9; des polym&#xE9;rases d&#x26;#39;acides nucl&#xE9;iques reste controvers&#xE9;e. Une bonne compr&#xE9;hension de l&#x26;#39;ARN viral d&#xE9;pendante de l&#x26;#39;ARN polym&#xE9;rase (RdRp) la fid&#xE9;lit&#xE9; est devenue un sujet d&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t consid&#xE9;rable &#xE0; la suite d&#x26;#39;exp&#xE9;riences r&#xE9;centes montrent qu&#x26;#39;une augmentation de 2 fois dans la fid&#xE9;lit&#xE9; att&#xE9;nue la pathogen&#xE8;se virale et une diminution de 2 fois dans la fid&#xE9;lit&#xE9; r&#xE9;duit de remise en forme virale . Nous montrons ici que d&#x26;#39;une &#xE9;tape pr&#xE9;c&#xE9;dant le transfert changement de conformation de phosphoryle est un point de contr&#xF4;le cl&#xE9; de la fid&#xE9;lit&#xE9; pour le poliovirus (3Dpol) RdRp. Nous fournir la preuve que cette &#xE9;tape changement de conformation est l&#x26;#39;orientation de l&#x26;#39;triphosphate dans une conformation appropri&#xE9;e pour la catalyse, ce qui sugg&#xE8;re un mod&#xE8;le cin&#xE9;tique et structurale pour RdRp fid&#xE9;lit&#xE9; qui peuvent &#xEA;tre extrapol&#xE9;s &#xE0; d&#x26;#39;autres classes de polym&#xE9;rases d&#x26;#39;acides nucl&#xE9;iques. Enfin, nous montrons que sur un site distant du centre catalytique peut contr&#xF4;ler ce point de contr&#xF4;le, qui se produit sur le site actif. Il est important, des connexions similaires entre un site distant et le site actif existent dans une grande vari&#xE9;t&#xE9; de RdRps virales. La capacit&#xE9; pour les sites distants du centre catalytique de modifier la fid&#xE9;lit&#xE9; sugg&#xE8;re de nouvelles possibilit&#xE9;s pour le ciblage de la RdRp virale pour le d&#xE9;veloppement de m&#xE9;dicaments antiviraux.

Contr&#xF4;le &#xE0; distance du site d&#x26;#39;un point de contr&#xF4;le la fid&#xE9;lit&#xE9; au site actif dans un ARN viral polym&#xE9;rase ARN-d&#xE9;pendante

Remote-Ort-Steuerung eines aktiven Zentrums Treue Kontrollpunkt in einem viralen RNA-abh&#xE4;ngigen RNA-Polymerase.

La base cinetica, termodinamica e strutturale per la fedelt&agrave; delle polimerasi dell&#39;acido nucleico rimane controversa. Comprensione della fedelt&agrave; di RNA polimerasi (RdRp) virali RNA-dipendente &egrave; diventata un argomento di notevole interesse come risultato di esperimenti recenti che mostrano che un aumento di 2 volte nella fedelt&agrave; attenua la patogenesi virale e una diminuzione di 2 volte nella fedelt&agrave; riduce fitness virale. Qui vi mostriamo che un cambiamento conformazionale passo prima del trasferimento del fosforile &egrave; un checkpoint chiave fedelt&agrave; per il poliovirus RdRp (3Dpol). Forniamo prove che questa fase di cambiamento conformazionale &egrave; orientamento del trifosfato in una conformazione adatta per la catalisi, suggerendo un modello cinetico e strutturale per RdRp fedelt&agrave; che possono essere estrapolati alle altre classi della polimerasi dell&#39;acido nucleico. Infine, ci mostra che un sito remoto dal centro catalitico pu&ograve; controllare questo checkpoint, che si verifica presso il sito attivo. Soprattutto, collegamenti simili tra un sito remoto e il sito attivo esistono in una vasta gamma di RdRps virale. La capacit&agrave; per i siti remoti dal centro catalitico per alterare la fedelt&agrave; suggerisce nuove possibilit&agrave; per il targeting del RdRp virale per lo sviluppo di farmaci antivirali.

Controllo del sito remoto di un checkpoint di fedelt&agrave; del sito attivo in una RNA-dipendente RNA polimerasi virale.

&#x6838;&#x9178;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x57FA;&#x6E96;&#x306F;&#x8B70;&#x8AD6;&#x306E;&#x4F59;&#x5730;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RNA&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;RDRP&#xFF09;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x306B;2&#x500D;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3068;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x9069;&#x5FDC;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x306E;2&#x500D;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x6E1B;&#x8870;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x8208;&#x5473;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x8A71;&#x984C;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x8EE2;&#x79FB;&#x306E;&#x524D;&#x306B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RDRP&#xFF08;3Dpol&#xFF09;&#x306E;&#x30AD;&#x30FC;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x9178;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306B;&#x5916;&#x633F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;RDRP&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3068;&#x69CB;&#x9020;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x89E6;&#x5A92;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x5411;&#x304D;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x89E6;&#x5A92;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x304C;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x63A5;&#x7D9A;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RdRps&#x591A;&#x7A2E;&#x591A;&#x69D8;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x3092;&#x5909;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x89E6;&#x5A92;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x85AC;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RDRP&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

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&#xD575; &#xC0B0; &#xD3F4;&#xC758; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC6B4;&#xB3D9;, &#xC5F4;&#xC5ED;&#xD559;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB17C;&#xB780;&#xC774; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RNA &#xC885;&#xC18D; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (RdRp) &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xD574; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; 2-fold &#xC99D;&#xAC00; &#xC57D;&#xD654; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; pathogenesis &#xBC0F; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; 2-fold &#xAC10;&#xC18C; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD53C;&#xD2B8; &#xB2C8;&#xC2A4; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC; &#xC8FC;&#xC81C; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC55E;&#xC5D0; phosphoryl &#xC804;&#xC1A1; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; RdRp (3Dpol)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. RdRp &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xCD94;&#xC815; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD575; &#xC0B0; &#xD3F4;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC870; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xC548; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; &#xCD09;&#xB9E4;, &#xC801;&#xD569; &#xD615;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xB294; &#xC0BC;&#xC778;&#xC0B0;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC13C;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xACA9; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294;&#xC774; &#xCCB4;&#xD06C; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC6D0;&#xACA9; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; Rdrps&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC874;&#xC7AC;. &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xACBD;&#xD560; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC13C;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xACA9; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6A9;&#xB7C9; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC57D;&#xBB3C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RdRp &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RNA &#xC885;&#xC18D; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC6D0;&#xACA9; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;.

La base cin&#xE9;tica, termodin&#xE1;mica, estructural y de la fidelidad de las polimerasas de &#xE1;cidos nucleicos que sigue siendo controvertido. La comprensi&#xF3;n de ARN viral dependiente de la RNA polimerasa (RDRP) la fidelidad se ha convertido en un tema de considerable inter&#xE9;s como resultado de los experimentos recientes que muestran que un aumento de 2 veces en la fidelidad aten&#xFA;a la patog&#xE9;nesis viral y una disminuci&#xF3;n de 2 veces en la fidelidad de la replicaci&#xF3;n viral se reduce . Aqu&#xED; nos muestran que un cambio conformacional paso anterior a la transferencia de fosforilo es un elemento clave puesto de control de la fidelidad para el virus de la polio RDRP (3Dpol). Se proporcionan evidencia de que este paso cambio conformacional es la orientaci&#xF3;n del trifosfato en una conformaci&#xF3;n adecuada para la cat&#xE1;lisis, lo que sugiere un modelo cin&#xE9;tico y estructural para RDRP fidelidad que pueden ser extrapolados a otras clases de polimerasas de &#xE1;cido nucleico. Finalmente, se muestra que un sitio alejado del centro catal&#xED;tico puede controlar este punto de verificaci&#xF3;n, que se produce en el sitio activo. Es importante destacar que las conexiones similares entre un sitio remoto y el sitio activo existir en una amplia variedad de RdRPs virales. La capacidad de lugares alejados del centro catal&#xED;tico de alterar la fidelidad sugiere nuevas posibilidades para la orientaci&#xF3;n de la RDRP viral para el desarrollo de medicamentos antivirales.

Control remoto de un sitio web de Checkpoint fidelidad activa en un viral ARN-polimerasa dependiente de ARN

RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E0D;&#x662F;&#x7531;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B; &#xFF1B; &#x6240;&#x7EC4;&#x6210;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x96C6;&#x6210;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x51C6;&#x79CD;&#x3002;&#x51C6;&#x79CD;&#x6E90;&#x4E8E;&#x5FEB;&#x901F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x9AD8;&#x7A81;&#x53D8;&#x7387;&#x7531;&#x4F9B;&#x7535;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x9AD8;&#x7A81;&#x53D8;&#x7387;&#x662F;&#x5371;&#x9669;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8D70;&#x4E0B;&#x5761;&#x4E2A;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x5047;&#x8BBE;&#x9AD8;&#x7A81;&#x53D8;&#x7387;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E00;&#x7EA7;&#x521B;&#x5EFA;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x76CA;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E91;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x8D77;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51C6;&#x79CD;&#x8FDB;&#x5316;&#x548C;&#x9002;&#x5E94;&#x65B0;&#x73AF;&#x5883;&#x548C;&#x6311;&#x6218;&#x66F4;&#x5927;&#x6982;&#x7387;&#x671F;&#x95F4;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x6570;&#x5B66;&#x6A21;&#x578B;&#x9884;&#x6D4B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51C6;&#x79CD;&#x4E0D;&#x53EA;&#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E00;&#x7EC4;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5F0F;&#x7684;&#x53D8;&#x79CD;&#xFF0C;&#x4E00;&#x8D77;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7279;&#x5F81;&#x7684;&#x96C6;&#x5408;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x6B64;&#x89C6;&#x56FE;&#x3001; &#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E2A;&#x522B;&#x7684;&#x53D8;&#x79CD;&#xFF0C;&#x662F;&#x8FDB;&#x5316;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#x901A;&#x8FC7;&#x68C0;&#x67E5;&#x9650;&#x5236;&#x5BF9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4EBA;&#x53E3;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x643A;&#x5E26;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x590D;&#x5236;&#x4E00;&#x7EA7;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4F46;&#x751F;&#x6210;&#x5C11;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x65E0;&#x6CD5;&#x9002;&#x5E94;&#x4E0D;&#x826F;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x75C5;&#x6BD2;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E86;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x548C;&#x51CF;&#x6BD2;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x5316;&#x5B66;&#x8BF1;&#x53D8;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x6269;&#x5927;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51C6;&#x79CD;&#x7684;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x4E4B;&#x524D;&#x611F;&#x67D3;&#x6062;&#x590D;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x53CA;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x4ECE;&#x8111;&#x5206;&#x79BB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5206;&#x6790;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BC1;&#x636E;&#x4E3A;&#x51C6;&#x79CD;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x786E;&#x53D1;&#x751F;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E00;&#x7EA7;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5355;&#x4E2A;&#x53D8;&#x91CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x8865;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BC1;&#x636E;&#x51C6;&#x79CD;&#x7406;&#x8BBA;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x672C;&#x9884;&#x6D4B;&#x548C;&#x7A81;&#x53D8;&#x7387;&#x3001; &#x4EBA;&#x53E3;&#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x94FE;&#x63A5;&#x3002;

&#x51C6;&#x79CD;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x786E;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7;&#x5408;&#x4F5C;&#x4E92;&#x52A8;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4EBA;&#x7FA4;&#x4E2D;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

An RNA virus population does not consist of a single genotype; rather, it is an ensemble of related sequences, termed quasispecies. Quasispecies arise from rapid genomic evolution powered by the high mutation rate of RNA viral replication. Although a high mutation rate is dangerous for a virus because it results in nonviable individuals, it has been hypothesized that high mutation rates create a 'cloud' of potentially beneficial mutations at the population level, which afford the viral quasispecies a greater probability to evolve and adapt to new environments and challenges during infection. Mathematical models predict that viral quasispecies are not simply a collection of diverse mutants but a group of interactive variants, which together contribute to the characteristics of the population. According to this view, viral populations, rather than individual variants, are the target of evolutionary selection. Here we test this hypothesis by examining the consequences of limiting genomic diversity on viral populations. We find that poliovirus carrying a high-fidelity polymerase replicates at wild-type levels but generates less genomic diversity and is unable to adapt to adverse growth conditions. In infected animals, the reduced viral diversity leads to loss of neurotropism and an attenuated pathogenic phenotype. Notably, using chemical mutagenesis to expand quasispecies diversity of the high-fidelity virus before infection restores neurotropism and pathogenesis. Analysis of viruses isolated from brain provides direct evidence for complementation between members in the quasispecies, indicating that selection indeed occurs at the population level rather than on individual variants. Our study provides direct evidence for a fundamental prediction of the quasispecies theory and establishes a link between mutation rate, population dynamics and pathogenesis.

Quasispecies diversity determines pathogenesis through cooperative interactions in a viral population.

Un virus &#xE0; ARN de la population ne consiste pas en un seul g&#xE9;notype, mais plut&#xF4;t, c&#x26;#39;est un ensemble de s&#xE9;quences connexes, quasi-esp&#xE8;ces appel&#xE9;es. Quasi-esp&#xE8;ces proviennent de l&#x26;#39;&#xE9;volution du g&#xE9;nome rapide aliment&#xE9; par le taux de mutation &#xE9;lev&#xE9; de la r&#xE9;plication virale ARN. M&#xEA;me si un taux de mutation &#xE9;lev&#xE9; est dangereux pour un virus, car il en r&#xE9;sulte chez les individus non viables, il a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;mis l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que les taux de mutation &#xE9;lev&#xE9; de cr&#xE9;er un &#xAB;nuage&#xBB; de mutations potentiellement b&#xE9;n&#xE9;fiques au niveau de la population, qui offrent des quasi-esp&#xE8;ces virales une plus grande probabilit&#xE9; d&#x26;#39;&#xE9;voluer et de s&#x26;#39;adapter &#xE0; des environnements nouveaux et des d&#xE9;fis au cours de l&#x26;#39;infection. Les mod&#xE8;les math&#xE9;matiques pr&#xE9;disent que quasi-esp&#xE8;ces virales ne sont pas simplement une collection de mutants divers, mais un groupe de variantes interactives qui, ensemble, contribuent &#xE0; les caract&#xE9;ristiques de la population. Selon ce point de vue, les populations virales, plut&#xF4;t que des variantes individuelles, sont la cible de la s&#xE9;lection de l&#x26;#39;&#xE9;volution. Ici, nous testons cette hypoth&#xE8;se en examinant les cons&#xE9;quences de la limitation de la diversit&#xE9; g&#xE9;nomique sur les populations virales. Nous trouvons que le poliovirus portant une polym&#xE9;rase haute fid&#xE9;lit&#xE9; r&#xE9;plique &#xE0; des niveaux de type sauvage, mais g&#xE9;n&#xE8;re moins de diversit&#xE9; g&#xE9;nomique et est incapable de s&#x26;#39;adapter &#xE0; des conditions de croissance d&#xE9;favorables. Chez les animaux infect&#xE9;s, la diversit&#xE9; virale r&#xE9;duite entra&#xEE;ne une perte de neurotropisme et un ph&#xE9;notype pathog&#xE8;ne att&#xE9;nu&#xE9;. Notamment, en utilisant la mutagen&#xE8;se chimique pour &#xE9;largir la diversit&#xE9; des quasi-esp&#xE8;ces du virus haute-fid&#xE9;lit&#xE9; avant l&#x26;#39;infection et la pathogen&#xE8;se restaure neurotropisme. L&#x26;#39;analyse des virus isol&#xE9;s &#xE0; partir du cerveau fournit une preuve directe pour la compl&#xE9;mentation entre les membres dans les quasi-esp&#xE8;ces, indiquant que la s&#xE9;lection se produit en effet au niveau de la population plut&#xF4;t que sur des variantes individuelles. Notre &#xE9;tude fournit une preuve directe d&#x26;#39;une pr&#xE9;diction fondamentale de la th&#xE9;orie quasi-esp&#xE8;ces et &#xE9;tablit un lien entre les taux de mutation, la dynamique des populations et la pathogen&#xE8;se.

La diversit&#xE9; des quasi-esp&#xE8;ces D&#xE9;termine Pathogen&#xE8;se travers les interactions coop&#xE9;ratives dans une population virale

Eine RNA-Virus-Bev&ouml;lkerung besteht nicht aus einem einzigen Genotyp; Es ist vielmehr ein Ensemble von verwandte Sequenzen, Quasispezies genannt. Quasispezies entstehen aus rasche genomische Evolution angetrieben durch die hohe Mutationsrate der viralen RNA-Replikation. Obwohl eine hohe Mutationsrate f&uuml;r ein Virus gef&auml;hrlich ist, weil es nicht lebensf&auml;higes Einzelpersonen f&uuml;hrt, hat wurde vermutet, dass hohe Mutation Preise eine &#39;Wolke&#39; potentiell vorteilhafte Mutationen auf Bev&ouml;lkerungsebene, die leisten die viraler Quasispezies einer gr&ouml;&szlig;eren Wahrscheinlichkeit erstellen zu entwickeln und zur Anpassung an neue Umgebungen und Herausforderungen w&auml;hrend der Infektion. Mathematische Modelle sagen voraus, dass viraler Quasispezies sind nicht einfach eine Sammlung von verschiedenen Mutanten sondern eine Gruppe von interaktiven Varianten, die zusammen auf die Merkmale der Bev&ouml;lkerung beitragen. Nach dieser sind Ansicht, viralen Populationen, anstatt die einzelnen Varianten, das Ziel der evolution&auml;ren Selektion. Hier testen wir diese Hypothese durch untersuchen die Folgen der genomischen Vielfalt auf viralen Populationen zu begrenzen. Wir finden, Polioviren, die Durchf&uuml;hrung einer High Fidelity Polymerase repliziert Wildtyp Ebenen aber weniger genomische Vielfalt generiert und kann keine Anpassung an ung&uuml;nstige Wachstumsbedingungen. Bei infizierten Tieren f&uuml;hrt die reduzierte virale Vielfalt zum Verlust des Neurotropismus und eine abgeschw&auml;chte Krankheitserreger Ph&auml;notyp. Insbesondere mithilfe chemische Mutagenese um Quasispezies Vielfalt des High-Fidelity-Virus zu erweitern, bevor die Infektion Neurotropismus und Pathogenese wird wiederhergestellt. Analyse von Viren, die vom Gehirn isoliert kann direkte Beweise f&uuml;r Erg&auml;nzung zwischen den Mitgliedern in der Quasispezies darauf hinweist, dass die Auswahl in der Tat nicht auf einzelne Varianten, sondern auf Bev&ouml;lkerungsebene stattfindet. Unsere Studie liefert direkte Beweise f&uuml;r eine grundlegende Vorhersage der Theorie Quasispezies und stellt eine Verkn&uuml;pfung zwischen Mutationsrate, Populationsdynamik und Pathogenese.

Quasispezies Vielfalt bestimmt Pathogenese durch kooperative Interaktionen in einer viralen Population.

Una popolazione di virus a RNA non consiste in un unico genotipo; si tratta piuttosto di un insieme di sequenze correlate, definito delle quasispecie. Quasispecie derivano dalla rapida evoluzione genomica powered by il tasso di mutazione alta della replicazione virale RNA. Anche se un tasso di mutazione alto &egrave; pericoloso per un virus perch&eacute; si traduce in individui non vitali, si &egrave; ipotizzato che tariffe alta mutazione creano una &#39;nuvola&#39; di mutazioni potenzialmente benefiche a livello della popolazione, che permettere la quasispecie virale una maggiore probabilit&agrave; di evolvere e di adattarsi a nuovi ambienti e sfide durante l&#39;infezione. Modelli matematici prevedono che la quasispecie virale non sono semplicemente un insieme di diversi mutanti ma un gruppo di varianti interattivi, che insieme contribuiscono alle caratteristiche della popolazione. Secondo questa vista, popolazioni virali, piuttosto che singole varianti, sono il bersaglio di selezione evolutiva. Qui ci prova questa ipotesi esaminando le conseguenze di limitare la diversit&agrave; genomic sulle popolazioni virali. Troviamo che poliovirus portando una polimerasi ad alta fedelt&agrave; replica a livelli di selvaggio-tipo ma genera diversit&agrave; genomic meno e non &egrave; in grado di adattarsi alle condizioni di crescita negativi. In animali infetti, la ridotta diversit&agrave; virale comporta perdita di neurotropism e un fenotipo patogeno attenuato. In particolare, mediante mutagenesi chimica per espandere la diversit&agrave; delle quasispecie del virus ad alta fedelt&agrave; prima infezione Ripristina neurotropism e patogenesi. Analisi di virus isolato dal cervello forniscono la prova diretta per complementazione tra membri di quasispecie, che indica che la selezione avviene infatti a livello di popolazione piuttosto che su singole varianti. Il nostro studio fornisce la prova diretta di una fondamentale previsione della teoria delle quasispecie e stabilisce un collegamento tra il tasso di mutazione, dinamica di popolazione e patogenesi.

Diversit&agrave; delle quasispecie determina patogenesi attraverso interazioni cooperative in una popolazione virale.

RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3080;&#x3057;&#x308D;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x7591;&#x4F3C;&#x7A2E;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6E96;&#x7A2E;&#x306F;&#x3001;RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x7387;&#x3092;&#x642D;&#x8F09;&#x3057;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x9032;&#x5316;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x751F;&#x80B2;&#x4E0D;&#x80FD;&#x306E;&#x500B;&#x4EBA;&#x306B;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5371;&#x967A;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x9AD8;&#x3044;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6E96;&#x7A2E;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x4EBA;&#x53E3;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x6709;&#x76CA;&#x306A;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E; &#x26;quot;&#x96F2;&#x26;quot;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3001;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x304C;&#x7ACB;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x74B0;&#x5883;&#x3084;&#x8AB2;&#x984C;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6570;&#x5B66;&#x7684;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6E96;&#x7A2E;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x306B;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x898B;&#x89E3;&#x306B;&#x3088;&#x308C;&#x3070;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x306F;&#x3001;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x8907;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x6761;&#x4EF6;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306F;&#x5411;&#x795E;&#x7D4C;&#x6027;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3068;&#x6E1B;&#x8870;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6E96;&#x7A2E;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3092;&#x62E1;&#x5927;&#x3057;&#x3066;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x6027;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8133;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x306F;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x96C6;&#x56E3;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x6E96;&#x7A2E;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6E96;&#x7A2E;&#x7406;&#x8AD6;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x7387;&#x3001;&#x500B;&#x4F53;&#x7FA4;&#x52D5;&#x614B;&#x3068;&#x75C5;&#x614B;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x78BA;&#x200B;&#x200B;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6E96;&#x7A2E;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x96C6;&#x56E3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5354;&#x540C;&#x7D44;&#x5408;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC778;&#xAD6C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD615;; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC624;&#xD788;&#xB824;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; quasispecies &#xB418; &#xB098; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC559;&#xC0C1;&#xBE14;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Quasispecies&#xB294; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBE44;&#xC728;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xBE60;&#xB978; &#xAC8C;&#xB188; &#xC9C4;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xB2EC; &#xAC1C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC704;&#xD5D8; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC00;&#xC124; &#xADF8; &#xB192;&#xC740; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBE44;&#xC728; &#xC778;&#xAD6C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xB294; &#xAC10;&#xB2F9;&#xD560; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; quasispecies &#xB3C4;&#xC804;&#xACFC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C4;&#xD654;&#xC5D0; &#xB354; &#xD070; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC775;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#39;&#xD074;&#xB77C;&#xC6B0;&#xB4DC;&#39; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xC218;&#xD559;&#xC801; &#xBAA8;&#xB378; &#xC608;&#xCE21; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; quasispecies &#xD558;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xC21C;&#xD788; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD568;&#xAED8; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xD654;&#xD615; &#xBCC0;&#xC885;&#xC758; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158;. &#xC774; &#xB530;&#xB77C; &#xBCF4;&#xAE30;, &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC778;&#xAD6C; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBCC0;&#xD615; &#xC9C4;&#xD654; &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xAC8C;&#xB188; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB192;&#xC740;-&#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xB4E4;&#xACE0; &#xADF8; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB35C; &#xAC8C;&#xB188; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xBD88;&#xB9AC; &#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xC218; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; neurotropism &#xBC0F; &#xAC10;&#xC1E0; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xD654;&#xD559; mutagenesis &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC10;&#xC5FC; neurotropism &#xBC0F; pathogenesis &#xBCF5;&#xC6D0; &#xC804;&#xC5D0; &#xD558;&#xC774;&#xD30C;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; quasispecies &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC120;&#xD0DD; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xC778;&#xAD6C; &#xC218;&#xC900; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBCC0;&#xD615; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; quasispecies&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xAC04;&#xC758; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; quasispecies &#xC774;&#xB860;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC728;, &#xC778;&#xAD6C; &#xC5ED;&#xD559; &#xBC0F; &#xBCD1; &#xC778; &#xC0AC;&#xC774; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Quasispecies &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; pathogenesis&#xB97C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD611;&#xB825; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xACB0;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Una poblaci&#xF3;n de virus ARN no consiste en un solo genotipo, sino que es un conjunto de secuencias relacionadas, denominadas cuasiespecies. Quasiespecies surgen de la r&#xE1;pida evoluci&#xF3;n gen&#xF3;mica impulsado por la alta tasa de mutaci&#xF3;n de la replicaci&#xF3;n del ARN viral. A pesar de una alta tasa de mutaci&#xF3;n es peligroso para un virus, ya que da lugar a individuos no viables, se ha planteado la hip&#xF3;tesis de que las altas tasas de mutaci&#xF3;n crear una &#x26;quot;nube&#x26;quot; de las mutaciones potencialmente beneficiosos a nivel de poblaci&#xF3;n, las cuales ofrecen las cuasiespecies virales una mayor probabilidad de evolucionar y adaptarse a nuevos ambientes y desaf&#xED;os durante la infecci&#xF3;n. Los modelos matem&#xE1;ticos predicen que cuasiespecies virales no son simplemente una colecci&#xF3;n de mutantes de diversas pero un grupo de variantes interactivos, que en conjunto contribuyen a las caracter&#xED;sticas de la poblaci&#xF3;n. De acuerdo con este punto de vista, las poblaciones virales, en lugar de variantes individuales, son el blanco de la selecci&#xF3;n evolutiva. Aqu&#xED; ponemos a prueba esta hip&#xF3;tesis mediante el examen de las consecuencias de la limitaci&#xF3;n de la diversidad gen&#xF3;mica en las poblaciones virales. Encontramos que el poliovirus llevar una polimerasa de alta fidelidad, se replica a nivel de tipo salvaje, pero genera una menor diversidad gen&#xF3;mica y es incapaz de adaptarse a las condiciones adversas de crecimiento. En los animales infectados, la reducci&#xF3;n de la diversidad viral lleva a la p&#xE9;rdida de neurotropismo y un fenotipo patog&#xE9;nico atenuado. Cabe destacar que, mediante t&#xE9;cnicas de mutag&#xE9;nesis qu&#xED;mica para ampliar la diversidad de cuasiespecies del virus de alta fidelidad antes de la infecci&#xF3;n restaura neurotropismo y patogenia. El an&#xE1;lisis de los virus aislados de cerebro proporciona una evidencia directa de la complementaci&#xF3;n entre los miembros de las cuasiespecies, lo que indica que la selecci&#xF3;n se produce de hecho a nivel de poblaci&#xF3;n m&#xE1;s que en variantes individuales. Nuestro estudio proporciona evidencia directa de una predicci&#xF3;n fundamental de la teor&#xED;a quasiespecies y establece un v&#xED;nculo entre la tasa de mutaci&#xF3;n, la din&#xE1;mica demogr&#xE1;fica y la patogenia.

Diversidad Quasiespecies Determina Patog&#xE9;nesis A trav&#xE9;s de interacciones cooperativas en una poblaci&#xF3;n viral

RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x5141;&#x8BB8;&#x5FEB;&#x901F;&#x9002;&#x5E94;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x4E0D;&#x5229;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9003;&#x7684;&#x9488;&#x5BF9;&#x4EFB;&#x4E00;&#x6700;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x6216;&#x4E3B;&#x673A;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x5FEB;&#x901F;&#x9002;&#x5E94;&#x63A2;&#x7D22;&#x4F34;&#x4FA3;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x7EA6;&#x675F;&#x7684; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x7684;&#x5C06;&#x8FEB;&#x4F7F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FDB;&#x5316;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x6298;&#x53E0;&#x5F0F;&#x7B56;&#x7565;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x5206;&#x5B50;&#x4F34;&#x4FA3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 90 &#x4F34;&#x4FA3;&#x6298;&#x53E0;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x80A0;&#x9053;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8863;&#x58F3;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 90 &#x6291;&#x5236;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x53D7;&#x635F;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; &#x9F3B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; &#x67EF;&#x8428;&#x5947;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x53CD;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 90 &#x6CBB;&#x7597;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x6297;&#x836F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; &#x6697;&#x793A;&#x7684;&#x8863;&#x58F3;&#x6298;&#x53E0;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x6392;&#x9664;&#x5907;&#x7528;&#x6298;&#x53E0;&#x8DEF;&#x5F84;&#x7684;&#x51FA;&#x73B0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x8FDB;&#x5316;&#x7D27;&#x5F20;&#x4F34;&#x4FA3;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4F9B;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6291;&#x5236;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 90 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5927;&#x5E45;&#x51CF;&#x5C11;&#x9003;&#x51FA;&#x8010;&#x836F;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x51FA;&#x73B0;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x9488;&#x5BF9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6298;&#x53E0;&#x53EF;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x662F;&#x96BE;&#x6CBB;&#x6027;&#x8010;&#x836F;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x5BF9;&#x4F34;&#x4FA3;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6298;&#x53E0;&#x8FDB;&#x5316;&#x7EA6;&#x675F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8010;&#x836F;&#x53D1;&#x5C55;&#x96BE;&#x6CBB;&#x6027;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

The genome diversity of RNA viruses allows for rapid adaptation to a wide variety of adverse conditions. Accordingly, viruses can escape inhibition by most antiviral compounds targeting either viral or host factors. Here we exploited the capacity of RNA viruses for rapid adaptation to explore the evolutionary constraints of chaperone-mediated protein folding. We hypothesized that inhibiting a host molecular chaperone required for folding of a viral protein would force the virus to evolve an alternate folding strategy. We identified the chaperone Hsp90 as an essential factor for folding and maturation of picornavirus capsid proteins. Pharmacological inhibition of Hsp90 impaired the replication of poliovirus, rhinovirus, and coxsackievirus in cell culture. Strikingly, anti-Hsp90 treatment did not yield drug-resistant viruses, suggesting that the complexity of capsid folding precludes the emergence of alternate folding pathways. These results reveal tight evolutionary constraints on chaperone-mediated protein folding, which may be exploited for viral inhibition in vivo. Indeed, Hsp90 inhibitors drastically reduced poliovirus replication in infected animals without the emergence of drug-resistant escape mutants. We propose that targeting folding of viral proteins may provide a general antiviral strategy that is refractory to development of drug resistance.

Evolutionary constraints on chaperone-mediated folding provide an antiviral approach refractory to development of drug resistance.

La diversit&#xE9; du g&#xE9;nome des virus &#xE0; ARN permet une adaptation rapide &#xE0; une grande vari&#xE9;t&#xE9; de conditions d&#xE9;favorables. Par cons&#xE9;quent, les virus peuvent &#xE9;chapper &#xE0; l&#x26;#39;inhibition par la plupart des compos&#xE9;s antiviraux ciblant soit virale ou facteurs de l&#x26;#39;h&#xF4;te. Ici, nous avons exploit&#xE9; la capacit&#xE9; des virus &#xE0; ARN d&#x26;#39;adaptation rapide &#xE0; explorer les contraintes &#xE9;volutives du repliement des prot&#xE9;ines chaperon m&#xE9;diation. On hypoth&#xE8;se que l&#x26;#39;inhibition d&#x26;#39;une chaperone h&#xF4;te mol&#xE9;culaire requise pour plier d&#x26;#39;une prot&#xE9;ine virale qui forcer le virus d&#x26;#39;&#xE9;voluer une strat&#xE9;gie de remplacement de pliage. Nous avons identifi&#xE9; le chaperon Hsp90 comme un facteur essentiel pour le pliage et la maturation des prot&#xE9;ines de la capside des picornavirus. Inhibition pharmacologique de Hsp90 port&#xE9; atteinte &#xE0; la r&#xE9;plication du poliovirus, les rhinovirus, virus Coxsackie et en culture cellulaire. &#xC9;tonnamment, le traitement anti-Hsp90 ne pas c&#xE9;der virus r&#xE9;sistant aux m&#xE9;dicaments, ce qui sugg&#xE8;re que la complexit&#xE9; de pliage capside emp&#xEA;che l&#x26;#39;&#xE9;mergence d&#x26;#39;autres voies de pliage. Ces r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent de fortes contraintes &#xE9;volutives sur le repliement des prot&#xE9;ines chaperon m&#xE9;diation, qui pourrait &#xEA;tre exploit&#xE9; pour l&#x26;#39;inhibition virale in vivo. En effet, des inhibiteurs de Hsp90 consid&#xE9;rablement r&#xE9;duit la r&#xE9;plication du poliovirus chez les animaux infect&#xE9;s, sans l&#x26;#39;&#xE9;mergence de mutants d&#x26;#39;&#xE9;chappement r&#xE9;sistantes aux m&#xE9;dicaments. Nous proposons que le ciblage repliement des prot&#xE9;ines virales pourrait constituer une strat&#xE9;gie g&#xE9;n&#xE9;rale antiviral qui est r&#xE9;fractaire au d&#xE9;veloppement de la r&#xE9;sistance aux m&#xE9;dicaments.

Des contraintes &#xE9;volutives sur l&#x26;#39;escorte &#xE0; m&#xE9;diation pliant fournir une approche antivirale r&#xE9;fractaire au d&#xE9;veloppement de la r&#xE9;sistance aux m&#xE9;dicaments

Die Genom-Vielfalt der RNA-Viren erm&ouml;glicht die rasche Anpassung an eine Vielzahl von widrigen Bedingungen. Dementsprechend k&ouml;nnen Viren Hemmung entgehen, indem die meisten antiviralen Substanzen gezielt entweder viralen oder Faktoren zu hosten. Hier nutzte wir die Kapazit&auml;t der RNA-Viren f&uuml;r die schnelle Anpassung an die evolution&auml;re Zw&auml;nge Chaperon-vermittelte Proteinfaltung zu erkunden. Wir die Hypothese, dass die Hemmung ein Host molekularen Chaperon erforderlich f&uuml;r ein virales Protein Falte das Virus zu eine Alternative Klapp-Strategie entwickeln zwingen w&uuml;rde. Wir identifizieren die Chaperon Hsp90 als wesentlichen Faktor f&uuml;r Falt- und Reifung der Picornaviridae Kapsid-Proteine. Pharmakologische Hemmung der Hsp90 beeintr&auml;chtigt die Replikation von Polioviren, Rhinovirus und Coxsackievirus in der Zellkultur. Auff&auml;llig ist, Anti-Hsp90 Behandlung nicht nachgeben Medikamenten-resistente Viren, was darauf hindeutet, dass die Komplexit&auml;t der Kapsid Faltung das Entstehen alternativer Faltreifen Pathways ausschlie&szlig;t. Diese Ergebnisse zeigen enge evolution&auml;re Einschr&auml;nkungen f&uuml;r Chaperon-vermittelte Proteinfaltung, die virale Hemmung in vivo ausgenutzt werden k&ouml;nnen. In der Tat reduziert Hsp90-Inhibitoren drastisch, Polioviren Replikation bei infizierten Tieren ohne die Entstehung von Medikamenten-resistenten Escape-Mutanten. Schlagen wir gezielt virale Proteine falten eine allgemeine antivirale Strategie liefern kann, die auf die Entwicklung von Resistenzen ist.

Evolution&auml;re Einschr&auml;nkungen f&uuml;r faltbare Chaperon-vermittelte bieten einen antiviralen Ansatz, die Entwicklung von Resistenzen feuerfest.

La diversit&agrave; del genoma del virus a RNA consente il rapido adattamento a un&#39;ampia variet&agrave; di condizioni avverse. Di conseguenza, virus pu&ograve; sfuggire l&#39;inibizione di composti antivirali pi&ugrave; targeting sia virale o ospitare fattori. Qui abbiamo sfruttato la capacit&agrave; del virus del RNA per rapido adattamento a esplorare i vincoli evolutivi della piegatura della proteina chaperone-mediata. Abbiamo ipotizzato che inibendo un chaperone molecolare host richiesti per ripiegamento di una proteina virale costringerebbe il virus a evolversi una strategia alternativa pieghevole. Abbiamo identificato il chaperone Hsp90 come un fattore essenziale per la piegatura e la maturazione delle proteine del capside Picornaviridae. L&#39;inibizione farmacologica della Hsp90 alterato la replicazione del virus polioendemico, rhinovirus e Coxsackie virus in coltura cellulare. Sorprendentemente, trattamento anti-Hsp90 non ha dato virus farmaco-resistenti, suggerendo che la complessit&agrave; del capside pieghevole preclude l&#39;emergere di percorsi alternativi pieghevole. Questi risultati rivelano stretti vincoli evolutivi sul ripiegamento proteico chaperone-mediata, che possono essere sfruttati per l&#39;inibizione virale in vivo. Infatti, Hsp90 inibitori riducono drasticamente replica di poliovirus in animali infetti senza la comparsa di mutanti farmaco-resistenti di fuga. Proponiamo che il targeting folding delle proteine virali pu&ograve; fornire una generale strategia antivirale che &egrave; refrattaria allo sviluppo della resistenza ai farmaci.

Evolutivi vincoli su chaperone-mediata pieghevole offrono un approccio antivirale refrattario allo sviluppo della resistenza ai farmaci.

RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306F;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x4E0D;&#x5229;&#x306A;&#x6761;&#x4EF6;&#x3078;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x9069;&#x5FDC;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x514D;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x4ECB;&#x5728;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x5236;&#x7D04;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304C;&#x5225;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x305F;&#x305F;&#x307F;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x767A;&#x5C55;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F37;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x7ACB;&#x3066;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D4;&#x30B3;&#x30EB;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;Hsp90&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Hsp90&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30CE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B3;&#x30AF;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AD;&#x30FC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x969C;&#x5BB3;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x6297;Hsp90&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x304C;&#x5225;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x60AA;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x3001;&#x4E0A;&#x306B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30C8;&#x306A;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x5236;&#x7D04;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x3001;Hsp90&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x30A8;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D7;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x306A;&#x3057;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x305F;&#x305F;&#x307F;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x96E3;&#x6CBB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x4ECB;&#x5728;&#x6027;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x305F;&#x305F;&#x307F;&#x306B;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x5236;&#x7D04;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x96E3;&#x6CBB;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;

RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBD88;&#xB9AC; &#xD55C; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xBE60;&#xB978; &#xC801;&#xC751;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xD53C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC694;&#xC778; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB610;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xC911;&#xC7AC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC811;&#xAE30;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xC81C;&#xC57D; &#xD0D0;&#xD5D8;&#xC744; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC801;&#xC751;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC545;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xB300;&#xCCB4; &#xC811;&#xB294; &#xC804;&#xB7B5; &#xC9C4;&#xD654; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC15;&#xC81C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD3F4;&#xB529;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBD84;&#xC790; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xC5B5;&#xC81C; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC138;&#xC6E0;&#xB2E4;. &#xC811;&#xB294; picornavirus capsid &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC131;&#xC219;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218; &#xC694;&#xC18C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; Hsp90 &#xD30C;&#xC545;. Hsp90&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC800;&#xD574; &#xC7A5;&#xC560; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;, &#xC774;&#xB178;, coxsackievirus &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;. &#xAE30; &#xB9C9;&#xD788;&#xAC8C;, &#xC548;&#xD2F0; Hsp90 &#xCE58;&#xB8CC; capsid &#xC811;&#xB294;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xB300;&#xCCB4; &#xC811;&#xB294; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xCD9C;&#xD604; precludes &#xC81C;&#xC548; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB0B4;&#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC545;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xC911;&#xC7AC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD3F4;&#xB529;&#xC5D0; &#xAF49; &#xC9C4;&#xD654; &#xC81C;&#xC57D; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C;, Hsp90 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB0B4;&#xC131; &#xD0C8;&#xCD9C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xCD9C;&#xD604; &#xC5C6;&#xC774; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xB300;&#xD3ED; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD3F4;&#xB529; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC800;&#xD56D;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB0B4; &#xD654;&#xBB3C;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC811;&#xB294; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C4;&#xD654; &#xC81C;&#xC57D; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC800;&#xD56D;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xB0B4; &#xD654; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La diversidad del genoma de los virus de ARN permite una r&#xE1;pida adaptaci&#xF3;n a una amplia variedad de condiciones adversas. En consecuencia, los virus pueden escapar la inhibici&#xF3;n por la mayor&#xED;a de los compuestos antivirales dirigidos virales o factores del hu&#xE9;sped. Aqu&#xED; se explota la capacidad de los virus de ARN para una r&#xE1;pida adaptaci&#xF3;n a explorar las limitaciones evolutivas de plegamiento de prote&#xED;nas mediada por acompa&#xF1;ante. La hip&#xF3;tesis de que la inhibici&#xF3;n de una chaperona molecular de acogida necesaria para el plegamiento de una prote&#xED;na viral obligar&#xED;a a que el virus evolucione de una estrategia alternativa de plegado. Se identific&#xF3; la chaperona Hsp90 como un factor esencial para el plegamiento y maduraci&#xF3;n de los picornavirus prote&#xED;nas de la c&#xE1;pside. La inhibici&#xF3;n farmacol&#xF3;gica de Hsp90 afectada la replicaci&#xF3;n del virus de la polio, rinovirus, virus Coxsackie y en cultivo celular. Sorprendentemente, el anti-Hsp90 tratamiento no di&#xF3; resistentes a los f&#xE1;rmacos virus, lo que sugiere que la complejidad de plegado c&#xE1;pside se opone a la aparici&#xF3;n de v&#xED;as alternativas de plegado. Estos resultados revelan limitaciones apretado evolutivas sobre el plegamiento de prote&#xED;nas chaperona mediada, que puede ser explotado para la inhibici&#xF3;n v&#xED;rica in vivo. De hecho, inhibidores de Hsp90 reducido dr&#xE1;sticamente la replicaci&#xF3;n del virus de la polio en los animales infectados, sin la aparici&#xF3;n de mutantes de escape resistentes a los medicamentos. Proponemos que la focalizaci&#xF3;n plegamiento de las prote&#xED;nas virales puede proporcionar una estrategia general antiviral que es refractario al desarrollo de resistencia a los medicamentos.

Limitaciones evolutivas sobre el plegamiento de acompa&#xF1;ante mediada por ofrecer un enfoque antiviral refractaria al desarrollo de resistencia a los medicamentos

Protecci&#xF3;n duradera contra la infecci&#xF3;n viral se consigue mejor mediante la vacunaci&#xF3;n con virus atenuados. La obtenci&#xF3;n de cepas de la vacuna atenuada de manera estable ha sido tradicionalmente un proceso emp&#xED;rico, lo que limita en gran medida el n&#xFA;mero de vacunas eficaces para las enfermedades virales. Aqu&#xED; se describe un enfoque racional para la ingenier&#xED;a de manera estable virus atenuados que pueden servir como vacunas seguras y eficaces. Nuestro enfoque se basa en la observaci&#xF3;n de que la restricci&#xF3;n de la diversidad de la poblaci&#xF3;n viral por la fidelidad de replicaci&#xF3;n reduce en gran medida cada vez mayor tropismo tisular viral y patogenicidad. Se demuestra que las variantes de virus de la poliomielitis con la diversidad gen&#xE9;tica reducida provocar una respuesta inmune protectora en un modelo animal de infecci&#xF3;n. De hecho, estas nuevas vacunas son comparables en eficacia a la cepa Sabin tipo disponibles en la actualidad la vacuna contra 1, pero tienen la ventaja adicional de ser m&#xE1;s estable, ya que su fidelidad aumento de la replicaci&#xF3;n previene la reversi&#xF3;n a la patogenicidad de tipo salvaje fenotipo. Proponemos que la restricci&#xF3;n de la diversidad de cuasiespecies virales ofrece un enfoque general para el dise&#xF1;o racional de vacunas atenuadas estables, para una amplia variedad de virus.

Ingenier&#xED;a de las vacunas atenuadas de virus por la fidelidad de replicaci&#xF3;n de Control

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Long-lasting protection against viral infection is best achieved by vaccination with attenuated viruses. Obtaining stably attenuated vaccine strains has traditionally been an empirical process, which greatly restricts the number of effective vaccines for viral diseases. Here we describe a rational approach for engineering stably attenuated viruses that can serve as safe and effective vaccines. Our approach exploits the observation that restricting viral population diversity by increasing replication fidelity greatly reduces viral tissue tropism and pathogenicity. We show that poliovirus variants with reduced genetic diversity elicit a protective immune response in an animal model of infection. Indeed, these novel vaccine candidates are comparable in efficacy to the currently available Sabin type 1 vaccine strain, but have the added advantage of being more stable, as their increased replication fidelity prevents reversion to the pathogenic wild-type phenotype. We propose that restricting viral quasispecies diversity provides a general approach for the rational design of stable, attenuated vaccines for a wide variety of viruses.

Engineering attenuated virus vaccines by controlling replication fidelity.

Une protection durable contre l&#x26;#39;infection virale est le mieux r&#xE9;alis&#xE9; par la vaccination avec des virus att&#xE9;nu&#xE9;s. Obtention de mani&#xE8;re stable les souches vaccinales att&#xE9;nu&#xE9;es a toujours &#xE9;t&#xE9; un processus empirique, ce qui limite consid&#xE9;rablement le nombre de vaccins efficaces pour les maladies virales. Nous d&#xE9;crivons ici une approche rationnelle pour l&#x26;#39;ing&#xE9;nierie de mani&#xE8;re stable des virus att&#xE9;nu&#xE9;s qui peuvent servir de vaccins s&#xFB;rs et efficaces. Notre approche exploite l&#x26;#39;observation que la limitation de la diversit&#xE9; de la population virale par la fid&#xE9;lit&#xE9; de r&#xE9;plication r&#xE9;duit consid&#xE9;rablement augmenter le tropisme tissulaire et de la pathog&#xE9;nicit&#xE9; virale. Nous montrons que les variantes du poliovirus avec la diversit&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;tique r&#xE9;duite susciter une r&#xE9;ponse immunitaire protectrice chez un mod&#xE8;le animal d&#x26;#39;infection. En effet, ces nouveaux candidats vaccins sont comparables en efficacit&#xE9; &#xE0; la souche Sabin de type vaccin actuellement disponible 1, mais ont l&#x26;#39;avantage suppl&#xE9;mentaire d&#x26;#39;&#xEA;tre plus stable, comme leur fid&#xE9;lit&#xE9; de r&#xE9;plication accrue emp&#xEA;che le retour &#xE0; l&#x26;#39;pathog&#xE8;ne de type sauvage ph&#xE9;notype. Nous proposons que la limitation de la diversit&#xE9; virale quasi-esp&#xE8;ces fournit une approche g&#xE9;n&#xE9;rale pour la conception rationnelle de vaccins att&#xE9;nu&#xE9;s stables, pour une grande vari&#xE9;t&#xE9; de virus.

Vaccins ing&#xE9;nierie virus att&#xE9;nu&#xE9; par Fidelity r&#xE9;plication Contr&#xF4;le

Dauerhaften Schutz gegen virale Infektion wird am besten durch Impfung mit attenuierten Viren erreicht. Einholung von stabil abgeschw&auml;chte Impfst&auml;mme ist ein empirischer Prozess, traditionell, der stark, die Anzahl der wirksame Impfstoffe f&uuml;r Viruserkrankungen einschr&auml;nkt. Hier beschreiben wir eine rationale Ann&auml;herung f&uuml;r technische stabil abgeschw&auml;chte Viren, die als sichere und wirksame Impfstoffe dienen kann. Unser Ansatz nutzt die Beobachtung, dass die Beschr&auml;nkung von viralen Bev&ouml;lkerung Vielfalt durch Replikation Treue stark erh&ouml;hen viral Gewebe Tropismus und Pathogenit&auml;t reduziert. Wir zeigen, dass Polioviren Varianten mit reduzierter genetische Vielfalt eine sch&uuml;tzende Immunreaktion in einem Tiermodell der Infektion hervorrufen. In der Tat, diese neuartigen Impfstoff Kandidaten sind derzeit verf&uuml;gbaren Sabin Typ 1 Vakzinstammes in der Wirksamkeit vergleichbar, aber haben den zus&auml;tzlichen Vorteil des Seins stabiler, da ihre Treue erh&ouml;hte Replikation R&uuml;ckfall in der pathogenen Wildtyp Ph&auml;notyp verhindert. Wir schlagen Beschr&auml;nkung viraler Quasispezies Vielfalt bietet ein allgemeines Konzept f&uuml;r das rationale Design von stabilen, abgeschw&auml;chte Impfstoffe f&uuml;r eine Vielzahl von Viren.

Ingenieur abgeschw&auml;cht Virus-Impfstoffe durch die Kontrolle der Replikation Treue.

Protezione duratura contro l&#39;infezione virale &egrave; meglio raggiunto dalla vaccinazione con virus attenuato. Ottenimento di ceppi di vaccino attenuato stabile &egrave; stata tradizionalmente un processo empirico, che limita notevolmente il numero di vaccini efficaci per malattie virali. Qui descriviamo un approccio razionale per ingegneria virus attenuato stabile che pu&ograve; servire come vaccini sicuri ed efficaci. Il nostro approccio sfrutta l&#39;osservazione che limitano la diversit&agrave; della popolazione virale aumentando notevolmente la fedelt&agrave; replica riduce la patogenicit&agrave; e trofismo tissutale virale. Mostriamo che varianti di poliovirus con ridotta diversit&agrave; genetica suscitano una risposta immunitaria protettiva in un modello animale di infezione. Infatti, questi nuovi vaccini candidati sono paragonabili in efficacia per il ceppo di 1 vaccino tipo Sabin attualmente disponibile, ma hanno il vantaggio di essere pi&ugrave; stabili, come loro fedelt&agrave; maggiore replica impedisce la reversione del fenotipo wild-type patogeni. Proponiamo che limitare la diversit&agrave; delle quasispecie virale fornisce un approccio generale per la progettazione razionale di vaccini attenuati, stabile per un&#39;ampia variet&agrave; di virus.

Ingegneria attenuato vaccini a virus controllando la fedelt&agrave; della replica.

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Mengovirus &#x6D3E;&#x751F; RNA &#x53C8;&#x8FDE;&#x7ED3;&#x6210;&#x4E5F;&#x809D;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x589E;&#x5F3A;&#x5916;&#x56F4;&#x57FA;&#x4E8E;&#x591A;&#x80BD;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x6548;&#x679C;&#x3002;

Hepatocellular carcinoma is a deadly cancer with growing incidence for which immunotherapy is one of the most promising therapeutic approach. Peptide-based vaccines designed to induce strong, sustained CD8+ T cell responses are effective in animal models and cancer patients. We demonstrated the efficacy of curative peptide-based immunisation against a unique epitope of SV40 tumour antigen, through the induction of a strong CD8+ T cell-specific response, in our liver tumour model. However, as in human clinical trials, most tumour antigen epitopes did not induce a therapeutic effect, despite inducing strong CD8+ T cell responses. We therefore modified the tumour environment to enhance peptide-based vaccine efficacy by delivering mengovirus (MV)-derived RNA autoreplicating sequences (MV-RNA replicons) into the liver. The injection of replication-competent RNA replicons into the liver converted partial tumour regression into tumour eradication, whereas non-replicating RNA had no such effect. Replicating RNA replicon injection induced local recruitment of innate immunity effectors (NK and NKT) to the tumour and did not affect specific CD8+ T cell populations or other myelolymphoid subsets. The local delivery of such RNA replicons into tumour stroma is therefore a promising strategy complementary to the use of peripheral peptide-based vaccines for treating liver tumours.

Delivery of mengovirus-derived RNA replicons into tumoural liver enhances the anti-tumour efficacy of a peripheral peptide-based vaccine.

Le carcinome h&#xE9;patocellulaire est un cancer mortel avec une incidence croissante de l&#x26;#39;immunoth&#xE9;rapie, qui est l&#x26;#39;un de l&#x26;#39;approche la plus prometteuse th&#xE9;rapeutique. Base de peptides vaccins con&#xE7;us pour induire de fortes r&#xE9;ponses CD8, soutenues + de lymphocytes T sont efficaces dans des mod&#xE8;les animaux et des patients canc&#xE9;reux. Nous avons d&#xE9;montr&#xE9; l&#x26;#39;efficacit&#xE9; des soins curatifs &#xE0; base de peptide d&#x26;#39;immunisation contre un &#xE9;pitope unique du SV40 antig&#xE8;ne tumoral, par l&#x26;#39;induction d&#x26;#39;une forte T CD8 + sp&#xE9;cifique des cellules de r&#xE9;ponse, dans notre mod&#xE8;le de tumeur du foie. Cependant, comme dans les essais cliniques humains, la plupart des &#xE9;pitopes antig&#xE9;niques tumorales n&#x26;#39;a pas induit un effet th&#xE9;rapeutique, en d&#xE9;pit de fortes CD8 + induisant les r&#xE9;ponses des cellules T. Nous avons donc modifi&#xE9; l&#x26;#39;environnement de la tumeur afin d&#x26;#39;am&#xE9;liorer l&#x26;#39;efficacit&#xE9; du vaccin &#xE0; base de peptides en livrant mengovirus (MV) d&#xE9;riv&#xE9; des s&#xE9;quences d&#x26;#39;ARN autoreplicating (MV-r&#xE9;plicons d&#x26;#39;ARN) dans le foie. L&#x26;#39;injection de r&#xE9;plicons d&#x26;#39;ARN comp&#xE9;tents pour la r&#xE9;plication dans le foie convertis r&#xE9;gression de la tumeur partielle dans l&#x26;#39;&#xE9;radication de la tumeur, tandis que les non-r&#xE9;plication des ARN n&#x26;#39;a pas eu un tel effet. R&#xE9;plication ARN r&#xE9;plicon d&#x26;#39;injection induit le recrutement local des effecteurs de l&#x26;#39;immunit&#xE9; inn&#xE9;e (cellules NK et NKT) &#xE0; la tumeur et n&#x26;#39;a pas affect&#xE9; CD8 sp&#xE9;cifiques des populations de cellules T + de sous-ensembles ou d&#x26;#39;autres myelolymphoid. La livraison locale de r&#xE9;plicons d&#x26;#39;ARN dans ces stroma tumoral est donc une strat&#xE9;gie prometteuse compl&#xE9;mentaire &#xE0; l&#x26;#39;utilisation de p&#xE9;riph&#xE9;riques &#xE0; base de peptides vaccins pour traiter les tumeurs du foie.

La livraison des r&#xE9;plicons ARN Mengovirus d&#xE9;riv&#xE9;s dans le foie tumoral am&#xE9;liore l&#x26;#39;efficacit&#xE9; anti-tumorale d&#x26;#39;un p&#xE9;riph&#xE9;rique &#xE0; base de peptides vaccins

Hepatozellul&auml;res Karzinom ist ein t&ouml;dlichen Krebs mit zunehmender Inzidenz f&uuml;r die Immuntherapie eines der vielversprechendsten therapeutischen Ansatz ist. Peptid-basierte Impfstoffe entwickelt, um starke, anhaltende CD8 + T Zelle Antworten induzieren sind wirksam in Tiermodellen und Krebspatienten. Wir bewiesen die Wirksamkeit von heilsamen Peptid-basierte Immunisierung gegen eine einzigartige Epitop des SV40 Tumor Antigens, durch die Induktion einer starken CD8 + T-Zell-spezifische Antwort, in unser Leber-Tumor-Modell. Jedoch die meisten Tumor Antigen Epitopes wie menschliche klinische Studien, keine therapeutische Wirkung, trotz starke CD8 + T Zelle Antworten induzieren induzieren. Wir haben deshalb ver&auml;ndert die Tumor-Umgebung um die Peptid-basierten Impfstoff Wirksamkeit zu verbessern durch die Bereitstellung von Mengovirus (MV)-abgeleitet von RNA-Replikation-Sequenzen (MV-RNA Replicons) in der Leber. Die Injektion von Replikations-zust&auml;ndigen RNA Replicons in der Leber wird Tumor Tilgung, teilweise Tumor-Regression umgebaut, w&auml;hrend nicht replizierende RNA keine solche Wirkung hatte. Replizieren von RNS Replikon Injektion induziert lokale Rekrutierung der angeborenen Immunit&auml;t Effektoren (NK und NKT) auf den Tumor und hatte keine Auswirkungen auf spezifische CD8 + T Zelle Bev&ouml;lkerungen oder andere Myelolymphoid Teilmengen. Die lokale Anlieferung der solche RNA-Replicons in Tumor-Stroma ist daher eine vielversprechende Strategie erg&auml;nzt die Verwendung von peripheren Peptid-basierte Impfstoffe zur Behandlung von Lebertumoren.

Lieferung von Mengovirus abgeleiteten RNA Replicons in tumoural Leber verbessert die zur antitumoralen Wirksamkeit von peripheren Peptid-basierten Impfstoff.

Carcinoma epatocellulare &egrave; un tumore mortale con crescente incidenza, per cui l&#39;immunoterapia &egrave; uno della pi&ugrave; promettente approccio terapeutico. I vaccini basati su peptide per indurre risposte di cellule T CD8 + forte, sostenute sono efficaci in modelli animali e pazienti affetti da cancro. Abbiamo dimostrato l&#39;efficacia curativa peptide-based immunizzazione contro un unico epitopo dell&#39;antigene tumorale SV40, attraverso l&#39;induzione di una risposta forte CD8 + T cell specifico, nel nostro modello di tumore epatico. Tuttavia, come nelle sperimentazioni cliniche umane, pi&ugrave; epitopi di antigeni tumore non hanno indotto un effetto terapeutico, nonostante che inducono risposte di cellule T CD8 + forte. Abbiamo quindi modificato l&#39;ambiente tumorale per migliorare l&#39;efficacia del vaccino peptide-based consegnando mengovirus (MV)-derivati autoreplicating sequenze di RNA (replicons MV-RNA) nel fegato. L&#39;iniezione di replica-competenti replicons RNA nel fegato convertito regressione parziale del tumore nell&#39;eradicazione del tumore, mentre non replicare RNA non ha avuto tale effetto. Replica di iniezione replicone RNA indotta reclutamento locale di effettori dell&#39;immunit&agrave; innata (NK e NKT) al tumore e non ha influito sulle popolazioni di cellule T CD8 + specifiche o altri sottoinsiemi di myelolymphoid. Il recapito locale di tale replicons RNA in stroma del tumore &egrave; pertanto una promettente strategia complementare all&#39;uso di vaccini basati su peptidi periferici per il trattamento di tumori epatici.

Consegna dei derivati mengovirus replicons RNA nel fegato tumorali migliora l&#39;efficacia antitumorale di un vaccino basato su peptide periferico.

&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x764C;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x7642;&#x6CD5;&#x304C;&#x6700;&#x3082;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x7387;&#x3068;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7684;&#x306A;&#x764C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5F37;&#x304F;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;CD8 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3001;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x6709;&#x52B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x809D;&#x816B;&#x760D;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;CD8 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;SV40&#x816B;&#x760D;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x6297;&#x539F;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;CD8 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x809D;&#x81D3;&#x306B;mengovirus&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#xFF08;MV&#xFF09;&#x7531;&#x6765;&#x306E;RNA autoreplicating&#x914D;&#x5217;&#xFF08;MV-RNA&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#xFF09;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x975E;&#x8907;&#x88FD;RNA&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x306B;&#x8907;&#x88FD;&#x80FD;RNA&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306E;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x6839;&#x7D76;&#x306B;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x9000;&#x7E2E;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x88FD;RNA&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306E;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x5148;&#x5929;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x73FE;&#x5730;&#x63A1;&#x7528;&#xFF08;NK&#x304A;&#x3088;&#x3073;NKT&#xFF09;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;CD8 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;myelolymphoid&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x816B;&#x760D;&#x9593;&#x8CEA;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;RNA&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x914D;&#x4FE1;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5468;&#x8FBA;&#x6A5F;&#x5668;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;&#x3067;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

Tumoural&#x809D;&#x306B;Mengovirus&#x7531;&#x6765;&#x306E;RNA&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x306F;&#x3001;&#x672B;&#x68A2;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;

&#xAC04;&#xC138;&#xD3EC; &#xC554; &#xC885; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xB960;&#xC774; &#xC5B4;&#xB5A4; immunotherapy&#xC740; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC29;&#xBC95; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xC554; &#xC774;&#xB2E4;. &#xAC15;&#xD55C;, &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC124;&#xACC4; &#xB41C; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xAE30;&#xBC18; &#xBC31;&#xC2E0; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378; &#xBC0F; &#xC554; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC04; &#xC885;&#xC591; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xAE30;&#xBC18; &#xC608;&#xBC29;&#xC811;&#xC885; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; epitope&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xD55C; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xB828; &#xC751;&#xB2F5;, &#xC720;&#xB3C4; &#xD1B5;&#xD574; SV40 &#xC885;&#xC591; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xD56D; &#xC6D0; epitopes&#xC740; &#xAC15;&#xD55C; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; mengovirus (&#xBBA4;&#xC9C1; &#xBE44;&#xB514;&#xC624;)&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xAE30;&#xBC18; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC885;&#xC591; &#xD658;&#xACBD;-RNA autoreplicating &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; (MV RNA replicons) &#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xD30C;&#xC0DD;. &#xAC04; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC720;&#xB2A5;&#xD55C; RNA replicons &#xC8FC;&#xC785; &#xBC18;&#xBA74; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBE44;-&#xBCF5;&#xC81C; RNA &#xC885;&#xC591; &#xD1F4;&#xCE58;&#xC5D0; &#xBD80;&#xBD84; &#xC885;&#xC591; &#xD68C;&#xADC0;&#xB97C; &#xBCC0;&#xD658;. &#xBCF5;&#xC81C; RNA replicon &#xC0AC;&#xCD9C; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC81C; &#xC774;&#xD399;&#xD130; (NK&#xC640; NKT)&#xC758; &#xD604;&#xC9C0; &#xCC44;&#xC6A9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B9;&#xC815; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C; &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; myelolymphoid &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC885;&#xC591; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC5D0; RNA replicons &#xAC19;&#xC740; &#xB85C;&#xCEEC; &#xBC30;&#xD3EC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC720;&#xB9DD; &#xC804;&#xB7B5; &#xAC04; &#xC885;&#xC591; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xAE30;&#xBC18; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC644;.

Tumoural &#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; RNA replicons mengovirus &#xD30C;&#xC0DD;&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC; anti-tumour &#xC8FC;&#xBCC0; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xAE30;&#xBC18; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El carcinoma hepatocelular es un c&#xE1;ncer mortal con una incidencia cada vez mayor de que la inmunoterapia es uno de los enfoques terap&#xE9;uticos m&#xE1;s prometedores. A base de p&#xE9;ptidos vacunas dise&#xF1;adas para inducir a s&#xF3;lidos y sostenidos, CD8 + respuestas de c&#xE9;lulas T son eficaces en modelos animales y pacientes con c&#xE1;ncer. Hemos demostrado la eficacia de curativo p&#xE9;ptido basado en la inmunizaci&#xF3;n contra un ep&#xED;topo &#xFA;nico de ant&#xED;geno tumoral SV40, a trav&#xE9;s de la inducci&#xF3;n de una fuerte CD8 + de c&#xE9;lulas T espec&#xED;ficos de la respuesta, en nuestro modelo de tumor de h&#xED;gado. Sin embargo, como en ensayos cl&#xED;nicos humanos, la mayor&#xED;a de los ep&#xED;topos del ant&#xED;geno del tumor no induce un efecto terap&#xE9;utico, a pesar de inducir fuertes respuestas CD8 + de c&#xE9;lulas T. Por lo tanto, modificada por el entorno del tumor para mejorar p&#xE9;ptido basado eficacia de la vacuna mediante la entrega de virus Mengo (MV)-derivado secuencias de ARN autoreplicating (MV-ARN replicones) en el h&#xED;gado. La inyecci&#xF3;n de aptos para la duplicaci&#xF3;n replicones de ARN en el h&#xED;gado convierte la regresi&#xF3;n parcial del tumor en la erradicaci&#xF3;n del tumor, mientras que los no-replicantes de ARN no tuvo ese efecto. Replicaci&#xF3;n del ARN replic&#xF3;n inducida por inyecci&#xF3;n de reclutamiento local de los efectores de inmunidad innata (NK y NKT) en el tumor y no afectan a las poblaciones espec&#xED;ficas de CD8 + T de c&#xE9;lulas u otros subconjuntos myelolymphoid. La aplicaci&#xF3;n local de estos replicones de ARN en el estroma del tumor es por lo tanto, una estrategia prometedora complementaria a la utilizaci&#xF3;n de perif&#xE9;ricos basados &#x200B;&#x200B;en p&#xE9;ptidos vacunas para el tratamiento de tumores en el h&#xED;gado.

Entrega de los derivados de virus Mengo-replicones de ARN en el h&#xED;gado Tumoral aumenta la eficacia antitumoral de un p&#xE9;ptido perif&#xE9;rica basada en la vacuna

&#x51CF;&#x6BD2;&#x6D3B;&#x75AB;&#x82D7;&#x4ECD;&#x7136;&#x5BF9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x6700;&#x5B89;&#x5168;&#x3001; &#x6700;&#x5177;&#x6210;&#x672C;&#x6548;&#x76CA;&#x7684;&#x5E72;&#x9884;&#x3002;&#x6D3B;&#x75AB;&#x82D7;&#x682A;&#x751F;&#x6210;&#x6839;&#x636E;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x548C;&#x8870;&#x51CF;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x662F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x901A;&#x5E38;&#x7684;&#x5B9A;&#x4E49;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8BB8;&#x591A;&#x91CD;&#x8981;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6D3B;&#x75AB;&#x82D7;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x5B89;&#x5168;&#x548C;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6D3B;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x5408;&#x7406;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E; microRNA &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x673A;&#x5236;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x603B;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5C0F;&#x7C73;&#x5C14;&#x540C;&#x6E90;&#x5E8F;&#x5217;&#x63D2;&#x5165;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9650;&#x5236;&#x5176;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x53D6;&#x5411;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x9632;&#x6B62;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x548C;&#x6536;&#x76CA;&#x7387;&#x51CF;&#x6BD2;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x3002;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x8981;&#x6210;&#x4E3A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7279;&#x5B9A; Mirna &#x5931;&#x53BB;&#x80FD;&#x529B;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x663E;&#x8457;&#x8870;&#x51CF;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4FDD;&#x7559; nonneuronal &#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x5176;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7C73;&#x5C14;&#x8C03;&#x8282;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x53D1;&#x5F3A;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;

&#x5229;&#x7528;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; Mirna &#x4F5C;&#x4E3A;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x63A7;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x55DC;&#x51CF;&#x6BD2;&#x75C5;&#x6BD2;&#x75AB;&#x82D7;&#x3002;

Live attenuated vaccines remain the safest, most cost-effective intervention against viral infections. Because live vaccine strains are generated empirically and the basis for attenuation is usually ill defined, many important viruses lack an efficient live vaccine. Here, we present a general strategy for the rational design of safe and effective live vaccines that harnesses the microRNA-based gene-silencing machinery to control viral replication. Using poliovirus as a model, we demonstrate that insertion of small miRNA homology sequences into a viral genome can restrict its tissue tropism, thereby preventing pathogenicity and yielding an attenuated viral strain. Poliovirus strains engineered to become targets of neuronal-specific miRNAs lost their ability to replicate in the central nervous system, leading to significant attenuation of neurovirulence in infected animals. Importantly, these viruses retained the ability to replicate in nonneuronal tissues. As a result, these engineered miRNA-regulated viruses elicited strong protective immunity in mice without producing disease.

Harnessing endogenous miRNAs to control virus tissue tropism as a strategy for developing attenuated virus vaccines.

Vaccins vivants att&#xE9;nu&#xE9;s restent le plus s&#xFB;r, l&#x26;#39;intervention la plus rentable contre les infections virales. Parce que les souches de vaccins vivants sont g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s de mani&#xE8;re empirique et la base pour l&#x26;#39;att&#xE9;nuation est en g&#xE9;n&#xE9;ral mal d&#xE9;fini, de nombreux virus importants manquent un vaccin efficace en live. Ici, nous pr&#xE9;sentons une strat&#xE9;gie g&#xE9;n&#xE9;rale pour la conception rationnelle de vaccins s&#xFB;rs et efficaces vivants qui exploite la base de microARN-g&#xE8;ne-silencing machines pour contr&#xF4;ler la r&#xE9;plication virale. Utilisation de poliovirus comme mod&#xE8;le, nous d&#xE9;montrons que l&#x26;#39;insertion de petites s&#xE9;quences d&#x26;#39;homologie miARN dans un g&#xE9;nome viral peut restreindre son tropisme tissulaire, ce qui emp&#xEA;che la pathog&#xE9;nicit&#xE9; et produisant une souche att&#xE9;nu&#xE9;e du virus. Des souches de poliovirus con&#xE7;us pour devenir des cibles de neuronale sp&#xE9;cifiques miARN ont perdu leur capacit&#xE9; &#xE0; se r&#xE9;pliquer dans le syst&#xE8;me nerveux central, conduisant &#xE0; une att&#xE9;nuation significative de neurovirulence chez les animaux infect&#xE9;s. Surtout, ces virus conserv&#xE9; la capacit&#xE9; de se r&#xE9;pliquer dans les tissus non neuronales. En cons&#xE9;quence, ces miARN d&#x26;#39;ing&#xE9;nierie-r&#xE9;glement&#xE9;s virus a suscit&#xE9; une forte immunit&#xE9; protectrice chez la souris, sans produire la maladie.

MiARN endog&#xE8;nes Exploiter pour contr&#xF4;ler le tropisme tissulaire du virus en tant que strat&#xE9;gie pour le d&#xE9;veloppement des vaccins att&#xE9;nu&#xE9;s virus

Lebende abgeschw&auml;chte Impfstoffe bleiben die sicherste und kosteng&uuml;nstigste Intervention gegen virale Infektionen. Weil Leben Impfst&auml;mme werden empirisch generiert und die Grundlage f&uuml;r die D&auml;mpfung ist in der Regel krank definiert, fehlen viele wichtige Viren eine effiziente Lebendimpfstoff. Hier pr&auml;sentieren wir eine allgemeine Strategie f&uuml;r die rationale Gestaltung von sicheren und wirksamen lebende Impfstoffe, die die MicroRNA-basierte gen-silencing Maschinen zum Steuern der viralen Replikation nutzbar macht. Mit Polioviren als Modell, zeigen wir, dass Einf&uuml;gung von kleinen MiRNA Homologie Sequenzen in das virale Genom seine Tropismus Gewebe einschr&auml;nken kann dadurch Pathogenit&auml;t zu verhindern und eine abgeschw&auml;chte virale Belastung nachgeben. Polioviren St&auml;mme entwickelt zur Zielscheibe der neuronalen-spezifische MiRNAs verloren ihre F&auml;higkeit zur Replikation in das zentrale Nervensystem, was zu erheblichen D&auml;mpfung des Neurovirulence bei infizierten Tieren werden. Wichtig ist, behielt diese Viren in nonneuronal Geweben zu replizieren. Infolgedessen entwickelt diese MiRNA-regulierten Viren noch starke sch&uuml;tzende Immunit&auml;t bei M&auml;usen ohne Krankheit zu erstellen.

Nutzung der endogenen MiRNAs Virus Gewebe Tropismus als Strategie f&uuml;r die Entwicklung steuern ged&auml;mpft Virus-Impfstoffe.

I vaccini vivi attenuati rimangono l&#39;intervento pi&ugrave; sicuro, pi&ugrave; efficacia contro le infezioni virali. Perch&eacute; vivo ceppi di vaccino sono generati empiricamente e la base per l&#39;attenuazione &egrave; di solito mal definiti, molti virus importante manca un efficace vaccino vivo. Qui di seguito, presentiamo una strategia generale per la progettazione razionale di vaccini vivi sicuri ed efficace che sfrutta la base di microRNA silenziamento genico macchine per controllare la replicazione virale. Utilizzando il poliovirus come un modello, dimostreremo che inserimento di miRNA piccole sequenze di omologia in un genoma virale pu&ograve; limitare il suo trofismo tissutale, quindi prevenire la patogenicit&agrave; e producendo un ceppo virale attenuato. Ceppi di poliovirus progettato per diventare obiettivi di miRNAs specifici neuronale perduto la loro capacit&agrave; di replicare nel sistema nervoso centrale, che conduce all&#39;attenuazione significativa del neurovirulence negli animali infetti. Soprattutto, questi virus ha mantenuto la capacit&agrave; di replicarsi nei tessuti nonneuronal. Come risultato, questi engineered immunit&agrave; protettiva forte raccolse virus miRNA-regolato nei topi senza produrre malattia.

Sfruttando i miRNAs endogeno per controllo trofismo tissutale virus come una strategia per lo sviluppo attenuato vaccini a virus.

&#x5F31;&#x6BD2;&#x5316;&#x751F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5B89;&#x5168;&#x3067;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x8CBB;&#x7528;&#x5BFE;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x4ECB;&#x5165;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x7D4C;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6E1B;&#x8870;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x75C5;&#x6C17;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x6D3B;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5B89;&#x5168;&#x304B;&#x3064;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;miRNA&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;&#x5F31;&#x6BD2;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x682A;&#x3092;&#x5F97;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x7279;&#x7570;&#x7684;miRNA&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x6E1B;&#x8870;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x5185;&#x3067;&#x8907;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#x3067;&#x8907;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4EBA;&#x5DE5;miRNA&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304C;&#x75C5;&#x6C17;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x9632;&#x5FA1;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5F31;&#x6BD2;&#x5316;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5411;&#x6027;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5185;&#x5728;&#x6027;&#x306E;miRNA&#x6D3B;&#x7528;

&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xAC10;&#xC1E0; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC5D0;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC548;&#xC804;&#xD55C;, &#xAC00;&#xC7A5; &#xBE44;&#xC6A9; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xC785; &#xC720;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xBC31;&#xC2E0; &#xBCC0;&#xC885; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418; &#xACE0; &#xAC10;&#xC1E0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xCD08;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCD1;&#xC774; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB9CE;&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xBD80;&#xC871; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC120;&#xBB3C;&#xC774; microRNA &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC785;&#xC744; &#xAE30;&#xACC4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC548;&#xC804; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC758; &#xD569;&#xB9AC;&#xC801;&#xC778; &#xC124;&#xACC4;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC77C;&#xBC18; &#xC804;&#xB7B5;. &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBAA8;&#xB378;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC791;&#xC740; miRNA homology &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC8C;&#xB188;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0BD;&#xC785;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; tropism&#xC744; &#xC81C;&#xD55C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; pathogenicity &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xAC10;&#xC1E0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;. &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; &#xBCC0;&#xC885; neurovirulence&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC1C4;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC783;&#xC5B4;&#xBC84;&#xB9B0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAD00;&#xB828; Mirnas&#xC758; &#xD45C;&#xC801; &#xB420; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; nonneuronal &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0;. &#xADF8; &#xACB0;&#xACFC;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; miRNA &#xADDC;&#xC81C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC774;&#xB04C;&#xB824; &#xAC15;&#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC124;&#xACC4;.

&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBC31;&#xC2E0; &#xAC10;&#xC1E0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC870;&#xC9C1; tropism&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD560; &#xC0DD; miRNAs &#xD65C;&#xC6A9;.

Las vacunas vivas atenuadas siguen siendo los m&#xE1;s seguros, la intervenci&#xF3;n m&#xE1;s costo-efectiva contra las infecciones virales. Debido a que las cepas de vacunas vivas se generan y la base emp&#xED;rica para la atenuaci&#xF3;n por lo general mal definidos, muchos de los virus importantes carecen de una vacuna viva eficiente. A continuaci&#xF3;n, presentamos una estrategia general para el dise&#xF1;o racional de vacunas vivas seguras y eficaces que aprovecha el microARN-basada en silenciamiento g&#xE9;nico de maquinaria para controlar la replicaci&#xF3;n viral. Uso de virus de la polio como modelo, nos demuestran que la inserci&#xF3;n de peque&#xF1;as secuencias de miRNA de homolog&#xED;a en el genoma viral se puede restringir su tropismo tisular, lo que impide la patogenicidad y la obtenci&#xF3;n de una cepa viral atenuada. Las cepas de poliovirus por ingenier&#xED;a gen&#xE9;tica para convertirse en blanco de neuronales espec&#xED;ficos miRNAs perdido su capacidad para replicarse en el sistema nervioso central, dando lugar a la atenuaci&#xF3;n significativa de neurovirulencia en los animales infectados. Es importante destacar que estos virus retenido la capacidad de replicarse en los tejidos no neuronales. Como resultado, estos ingenier&#xED;a regulados miRNA-virus provoc&#xF3; una fuerte inmunidad protectora en ratones sin producir enfermedad.

MiRNAs Aprovechamiento end&#xF3;genos para el control de tropismo del virus del tejido como una estrategia para el desarrollo de vacunas atenuadas de virus

&#x5176;&#x4E2D; RNA &#x866B;&#x5A92;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x57FA;&#x5B54;&#x80AF;&#x4E9A;&#x75C5;&#x75C5;&#x6BD2; (CHIKV)&#xFF0C;&#x8FDB;&#x5316;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x611F;&#x67D3;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x4E3B;&#x673A;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4E86;&#x89E3;&#x5F97;&#x5F88;&#x5C11;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x5F62;&#x72B6;&#x866B;&#x5A92;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269; &harr;) &#x6765;&#x6A21;&#x62DF;&#x81EA;&#x7136;&#x4EA4;&#x66FF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4EA4;&#x66FF; passaged CHIKV &#x4EBA;&#x53E3;&#x548C;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x91CA;&#x653E;&#x4ECE;&#x9A91;&#x81EA;&#x884C;&#x8F66;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; CHIKV &#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x9057;&#x4F20;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#xFF0C;&#x5065;&#x8EAB;&#x548C;&#x5BF9;&#x65B0;&#x578B;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x538B;&#x529B;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x6027;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x5065;&#x8EAB;&#x589E;&#x52A0;&#x5347;&#x5E45;&#x4EA4;&#x66FF;&#x4F20;&#x4EE3; CHIKV&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x79CD;&#x7FA4;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x6025;&#x5267;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x4E32;&#x884C;&#x901A;&#x9053;&#x540E;&#x53EF;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x9002;&#x5E94;&#x76F8;&#x5173;&#x9057;&#x4F20;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x5347;&#x5E45;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4FDD;&#x6301;&#x5065;&#x8EAB;&#x7684;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269; &harr; &#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FAA;&#x73AF;&#xFF0C;&#x54EA;&#x91CC;&#x53EF;&#x80FD;&#x53EA;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x52A0;&#x5F3A;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x548C;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x63A2;&#x7D22;&#x5E8F;&#x5217;&#x7A7A;&#x95F4;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x6027;&#x8FDB;&#x5316;&#x6743;&#x8861;&#x3002;

&#x4E3B;&#x673A;&#x4EA4;&#x66FF;&#x7684;&#x57FA;&#x5B54;&#x80AF;&#x4E9A;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x589E;&#x52A0;&#x5065;&#x8EAB;&#x540C;&#x65F6;&#x5411;&#x65B0;&#x578B;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x538B;&#x529B;&#x9650;&#x5236;&#x79CD;&#x7FA4;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x548C;&#x9002;&#x5E94;&#x6027;&#x3002;

The mechanisms by which RNA arboviruses, including chikungunya virus (CHIKV), evolve and maintain the ability to infect vertebrate and invertebrate hosts are poorly understood. To understand how host specificity shapes arbovirus populations, we studied CHIKV populations passaged alternately between invertebrate and vertebrate cells (invertebrate â†” vertebrate) to simulate natural alternation and contrasted the results with those for populations that were artificially released from cycling by passage in single cell types. These CHIKV populations were characterized by measuring genetic diversity, changes in fitness, and adaptability to novel selective pressures. The greatest fitness increases were observed in alternately passaged CHIKV, without drastic changes in population diversity. The greatest increases in genetic diversity were observed after serial passage and correlated with greater adaptability. These results suggest an evolutionary trade-off between maintaining fitness for invertebrate â†” vertebrate cell cycling, where maximum adaptability is possible only via enhanced population diversity and extensive exploration of sequence space.

Host alternation of chikungunya virus increases fitness while restricting population diversity and adaptability to novel selective pressures.

Les m&#xE9;canismes par lesquels les arbovirus &#xE0; ARN, y compris le virus chikungunya (CHIKV), &#xE9;voluer et &#xE0; maintenir la capacit&#xE9; d&#x26;#39;infecter les h&#xF4;tes vert&#xE9;br&#xE9;s et d&#x26;#39;invert&#xE9;br&#xE9;s sont mal comprises. Pour comprendre comment les populations d&#x26;#39;accueil sp&#xE9;cificit&#xE9; arbovirus formes, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les populations CHIKV passages en alternance entre les cellules d&#x26;#39;invert&#xE9;br&#xE9;s et de vert&#xE9;br&#xE9;s (invert&#xE9;br&#xE9;s vert&#xE9;br&#xE9; &#x2194;) pour simuler l&#x26;#39;alternance naturelle et contrast&#xE9;e des r&#xE9;sultats avec ceux des populations qui ont &#xE9;t&#xE9; artificiellement lib&#xE9;r&#xE9;s du cyclisme par passage dans des types cellulaires simples. Ces populations CHIKV ont &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9;es par la mesure de la diversit&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;tique, les changements dans la condition physique, et l&#x26;#39;adaptabilit&#xE9; &#xE0; de nouvelles pressions s&#xE9;lectives. Les plus fortes augmentations de remise en forme ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;es dans CHIKV alternativement un passage, sans des changements drastiques dans la diversit&#xE9; de la population. Les plus fortes hausses de la diversit&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;tique ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;s apr&#xE8;s le passage en s&#xE9;rie et en corr&#xE9;lation avec une plus grande adaptabilit&#xE9;. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent une &#xE9;volution compromis entre le maintien de l&#x26;#39;aptitude &#xE0; invert&#xE9;br&#xE9;s &#x2194; v&#xE9;lo cellule de vert&#xE9;br&#xE9;, o&#xF9; une adaptabilit&#xE9; maximale n&#x26;#39;est possible que par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de la diversit&#xE9; de la population accrue et &#xE0; l&#x26;#39;exploration approfondie de l&#x26;#39;espace de s&#xE9;quence.

Alternance h&#xF4;te du virus Chikungunya Augmente de remise en forme Bien que la restriction diversit&#xE9; de la population et l&#x26;#39;adaptabilit&#xE9; aux nouveaux pressions s&#xE9;lectives

Die Mechanismen, durch die RNA-Arboviruses, einschlie&szlig;lich Chikungunya-Virus (CHIKV), entwickeln und pflegen die F&auml;higkeit, vertebrate und Wirbellosen Hosts zu infizieren, sind oft missverstanden. Um zu verstehen wie die Wirtsspezifit&auml;t ARBO-Viren Populationen Formen, wir untersuchte CHIKV Bev&ouml;lkerung passaged abwechselnd zwischen Wirbellosen und Wirbeltieren Zellen (Wirbellosen &harr; Wirbeltiere), nat&uuml;rliche Wechsel zu simulieren und kontrastiert die Ergebnisse mit denen f&uuml;r die Bev&ouml;lkerung, die vom Radfahren k&uuml;nstlich ver&ouml;ffentlicht wurden, durch die Passage in einzelne Zelltypen. Diese Populationen CHIKV zeichneten sich durch Messung der genetischen Vielfalt, &Auml;nderungen im Fitness und Anpassungsf&auml;higkeit an neuartige selektive Druck. Die gr&ouml;&szlig;te Fitness in abwechselnd passaged CHIKV, ohne drastische Ver&auml;nderungen in der Bev&ouml;lkerung Vielfalt Anstiege. Der gr&ouml;&szlig;te Anstieg der genetischen Vielfalt wurden nach seriellen Durchgang beobachtet und mit Anpassungsf&auml;higkeit. Diese Resultate schlagen einen evolution&auml;ren Kompromiss zwischen Erhaltung Eignung f&uuml;r wirbellosen &harr; vertebrate Zelle Radfahren, wo maximale Anpassungsf&auml;higkeit nur &uuml;ber verbesserte Bev&ouml;lkerung Vielfalt und umfassende Erforschung der Folgenraum m&ouml;glich ist.

Host-Wechsel von Chikungunya-Virus erh&ouml;ht Eignung w&auml;hrend gleichzeitig der Bev&ouml;lkerung Vielfalt und Anpassungsf&auml;higkeit auf neuartige selektive Druck.

I meccanismi con cui gli arbovirus RNA, tra cui virus chikungunya (CHIKV), evolvono e mantengono la capacit&agrave; di infettare ospiti vertebrati e invertebrati sono capiti male. Per comprendere come le forme delle popolazioni arbovirus specificit&agrave; dell&#39;ospite, abbiamo studiato delle popolazioni CHIKV attraversate alternativamente tra invertebrate e vertebrate cellule (vertebrati invertebrati &harr;) per simulare l&#39;alternanza naturale e contrapposto i risultati con quelli delle popolazioni che sono stati rilasciati artificialmente da ciclismo dal brano di tipi di cellule singole. Queste popolazioni CHIKV sono state caratterizzate dalla misura di diversit&agrave; genetica, cambiamenti nel fitness e l&#39;adattabilit&agrave; a nuove pressioni selettive. I pi&ugrave; grandi aumenti di fitness sono stati osservati in alternativamente lo CHIKV, senza cambiamenti drastici nella diversit&agrave; della popolazione. I pi&ugrave; grandi aumenti nella diversit&agrave; genetica sono stati osservati dopo passaggio seriale e correlati con una maggiore adattabilit&agrave;. Questi risultati suggeriscono un trade-off evolutivo tra il mantenimento fitness per cella vertebrati invertebrati &harr; ciclismo, dove &egrave; possibile solo tramite la diversit&agrave; della popolazione maggiore e ampia esplorazione dello spazio sequenza massima adattabilit&agrave;.

Host alternanza di chikungunya virus aumenti fitness limitando la diversit&agrave; della popolazione e l&#39;adattabilit&agrave; a nuove pressioni selettive.

&#x30C1;&#x30AF;&#x30F3;&#x30B0;&#x30F3;&#x30E4;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;CHIKV&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;RNA&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x9032;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x89E3;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7279;&#x7570;&#x5F62;&#x72B6;&#x30A2;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;CHIKV&#x96C6;&#x56E3;&#x304C;&#x81EA;&#x7136;&#x306A;&#x4EA4;&#x4EE3;&#x3092;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x2194;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#xFF09;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x4EA4;&#x4E92;&#x306B;&#x7D99;&#x4EE3;&#x3057;&#x3001;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x7684;&#x306B;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x901A;&#x8DEF;&#x3067;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304B;&#x3089;&#x89E3;&#x653E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x5BFE;&#x6BD4;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;CHIKV&#x96C6;&#x56E3;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3001;&#x9069;&#x5FDC;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x5727;&#x529B;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5927;&#x9069;&#x5FDC;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306E;&#x629C;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x52A0;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x4EA4;&#x4E92;&#x306B;&#x7D99;&#x4EE3;&#x3057;CHIKV&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x7D99;&#x4EE3;&#x5F8C;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x9069;&#x5FDC;&#x6027;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x6027;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3068;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x7A7A;&#x9593;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x63A2;&#x67FB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x307F;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x2194;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30B9;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C9;&#x30AA;&#x30D5;&#x9032;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

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RNA arboviruses, chikungunya &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (CHIKV) &#xB4F1; &#xC9C4;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574;. &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; arbovirus &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC54C;&#xC544;&#xC57C; &#xC6B0;&#xB9AC; CHIKV &#xC778;&#xAD6C; &#xC790;&#xC5F0; &#xAD50;&#xCCB4; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xBC0F; &#xCC99;&#xCD94; &#xC138;&#xD3EC; (&#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &harr; &#xCC99;&#xCD94;) &#xC0AC;&#xC774; &#xB610;&#xB294; passaged&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xC704;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xC804;&#xAC70;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xD45C; &#xB41C; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xC870;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; CHIKV &#xC778;&#xAD6C; &#xD588;&#xB2E4; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;, &#xCCB4;&#xB825;&#xACFC; &#xC801;&#xC751;&#xC131; &#xC18C;&#xC124; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC555;&#xB825;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xD53C;&#xD2B8; &#xB2C8;&#xC2A4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC778;&#xAD6C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC758; &#xAE09;&#xACA9; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654; &#xC5C6;&#xC774; passaged CHIKV &#xAD50;&#xB300;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC774; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD070; &#xC99D;&#xAC00; &#xC9C1;&#xB82C; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD6C4; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xD070; &#xC801;&#xC751;&#xC131;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC9C4;&#xD654; &#xC808;&#xCDA9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xB9C1;, &#xCD5C;&#xB300; &#xC801;&#xC751;&#xC131; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC778;&#xAD6C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xACF5;&#xAC04;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD0D0;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;&#xC11C;&#xB9CC; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558;&#xB2E4; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &harr; &#xCC99;&#xCD94; &#xC140;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAD50;&#xCCB4; chikungunya &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD53C;&#xD2B8; &#xB2C8;&#xC2A4;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB2E4;&#xC591; &#xC131;&#xACFC; &#xC801;&#xC751;&#xC131; &#xC18C;&#xC124; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC555;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;.

Los mecanismos por los cuales los arbovirus ARN, incluyendo el virus de Chikungunya (CHICKV), evolucionar y mantener la capacidad de infectar a hospedadores vertebrados e invertebrados, son poco conocidos. Para entender c&#xF3;mo las poblaciones de acogida formas especificidad arbovirus, se estudiaron las poblaciones CHICKV pasaron alternativamente entre las c&#xE9;lulas de invertebrados y vertebrados (invertebrados vertebrados &#x2194;) para simular la alternancia natural y contrasta los resultados con los de las poblaciones que fueron liberados artificialmente de la bicicleta por el pasaje de los tipos de c&#xE9;lulas individuales. Estas poblaciones CHICKV se caracteriza por medir la diversidad gen&#xE9;tica, los cambios en la aptitud y capacidad de adaptaci&#xF3;n a nuevas presiones selectivas. Los mayores incrementos se observaron en la aptitud CHICKV alterna pasajes, sin cambios dr&#xE1;sticos en la diversidad de la poblaci&#xF3;n. Los mayores incrementos en la diversidad gen&#xE9;tica se observaron despu&#xE9;s de la aprobaci&#xF3;n de serie y se correlacion&#xF3; con una mayor adaptabilidad. Estos resultados sugieren una compensaci&#xF3;n evolutiva entre el mantenimiento de la aptitud para el ciclo celular &#x2194; invertebrados de vertebrados, donde la m&#xE1;xima adaptabilidad es posible s&#xF3;lo a trav&#xE9;s de una mayor diversidad de la poblaci&#xF3;n y la exploraci&#xF3;n extensa del espacio de secuencias.

La alternancia de host del virus de chikungunya aumenta la aptitud mientras se restringe la diversidad de poblaci&#xF3;n y capacidad de adaptaci&#xF3;n a nuevas presiones selectivas

RNA mutagen &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD654;&#xBA74;, &#xACE0;&#xD654;&#xC9C8; RNA &#xC885;&#xC18D; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (RdRp) &#xBCC0;&#xC885; &#xCF55; &#xC0AC;&#xD0A4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; b 3&#xC758; (CVB3) &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACE0;&#xB9BD;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;,&#xC774; &#xBCC0;&#xC885; a372v&#xC740; &#xB610;&#xD55C; amiloride&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC00;&#xC124; amiloride &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; undescribed &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C;, amiloride &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; cvb3&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; &#xBC0F; &#xB192;&#xC740; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xD615;&#xC774;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C; &#xB354; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB4F1; Mg&sup2; + Mn&sup2; + &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; RdRp &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBE48;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC774;&#xC628;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;. &#xB610;&#xD55C;, S299T, &#xC644;&#xC804;&#xD788;&#xC774; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xC628; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB2E4;&#xB978; amiloride &#xB0B4;&#xC131; RdRp variant&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; RdRp &#xBCC0;&#xC885; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; amiloride&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC800;&#xD56D;: 1) &#xD6A8;&#xC18C; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; divalent &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xAE30;&#xC800; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xB610;&#xB294; 2) &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC1D;&#xD788;&#xAE30; mutagenesis&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC811;&#xADFC;.

RNA &#xC885;&#xC18D; RNA &#xD3F4;&#xC758; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xC885;&#xC744; &#xBC1D;&#xD788;&#xAE30; amiloride &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xAC04;&#xC811;, &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xD65C;&#xB3D9;.

&#x5728;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E0A;&#x7684; RNA &#x8BF1;&#x53D8;&#x5242;&#x62B5;&#x6297;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B64;&#x7ACB;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F; RNA &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; (RdRp) &#x7684;&#x53D8;&#x4F53;&#x67EF;&#x8428;&#x5947;&#x75C5;&#x6BD2; B3 (CVB3)&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684; A372V &#x4E5F;&#x662F;&#x8010;&#x963F;&#x7C73;&#x6D1B;&#x5229;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x963F;&#x7C73;&#x6D1B;&#x5229;&#x5DF2;&#x4EE5;&#x524D;&#x53D8;&#x79CD;&#x7684;&#x81F4;&#x7A81;&#x53D8;&#x6027;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x963F;&#x7C73;&#x6D1B;&#x5229;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x589E;&#x52A0; CVB3 &#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x9891;&#x7387;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x548C;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F;&#x53D8;&#x79CD;&#x662F;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x62B5;&#x6297;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x6B64;&#x7A81;&#x53D8;&#x6D3B;&#x6027;&#x901A;&#x8FC7;&#x6539;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5982; Mg&sup2; + &#x548C; Mn&sup2; +&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x4F1A;&#x589E;&#x52A0;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7A81;&#x53D8;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD; RdRp &#x5BCC;&#x8FBE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x963F;&#x7C73;&#x6D1B;&#x5229;&#x8010; RdRp &#x53D8;&#x5F0F;&#xFF0C;S299T&#xFF0C;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x6297;&#x5230;&#x6B64;&#x81F4;&#x7A81;&#x53D8;&#x6027;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x53D7;&#x79BB;&#x5B50;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; RdRp &#x53D8;&#x79CD;&#x6297;&#x7A81;&#x53D8;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x963F;&#x7C73;&#x6D1B;&#x5229;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF1A; 1&#xFF09; &#x589E;&#x52A0;&#x751F;&#x6210;&#x66F4;&#x6539;&#x6F14;&#x793A;&#x57FA;&#x5E95;&#x7A81;&#x53D8;&#x9891;&#x7387;&#x8F83;&#x4F4E;&#xFF0C;&#x6216; 2&#xFF09; &#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5F71;&#x54CD;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#x7684;&#x4E8C;&#x4EF7;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;

RNA &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x4FDD;&#x771F;&#x53D8;&#x79CD;&#x53D1;&#x73B0;&#x963F;&#x7C73;&#x6D1B;&#x5229;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x95F4;&#x63A5;&#x3001; &#x8BF1;&#x53D8;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

In a screen for RNA mutagen resistance, we isolated a high fidelity RNA dependent RNA polymerase (RdRp) variant of Coxsackie virus B3 (CVB3). Curiously, this variant A372V is also resistant to amiloride. We hypothesize that amiloride has a previously undescribed mutagenic activity. Indeed, amiloride compounds increase the mutation frequencies of CVB3 and poliovirus and high fidelity variants of both viruses are more resistant to this effect. We hypothesize that this mutagenic activity is mediated through alterations in intracellular ions such as MgÂ²+ and MnÂ²+, which in turn increase virus mutation frequency by affecting RdRp fidelity. Furthermore, we show that another amiloride-resistant RdRp variant, S299T, is completely resistant to this mutagenic activity and unaffected by changes in ion concentrations. We show that RdRp variants resist the mutagenic activity of amiloride via two different mechanisms: 1) increased fidelity that generates virus populations presenting lower basal mutation frequencies or 2) resisting changes in divalent cation concentrations that affect polymerase fidelity. Our results uncover a new antiviral approach based on mutagenesis.

Fidelity variants of RNA dependent RNA polymerases uncover an indirect, mutagenic activity of amiloride compounds.

Dans un &#xE9;cran pour l&#x26;#39;ARN mutag&#xE8;ne de la r&#xE9;sistance, nous avons isol&#xE9; un haute-fid&#xE9;lit&#xE9; ARN polym&#xE9;rase d&#xE9;pendante de l&#x26;#39;ARN (RdRp) variante de virus Coxsackie B3 (CVB3). Curieusement, cette variante A372V est &#xE9;galement r&#xE9;sistant &#xE0; l&#x26;#39;amiloride. Nous &#xE9;mettons l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que l&#x26;#39;amiloride a une activit&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment non d&#xE9;crite mutag&#xE8;ne. En effet, les compos&#xE9;s amiloride augmenter les fr&#xE9;quences de mutation de CVB3 et poliovirus et les variantes de haute fid&#xE9;lit&#xE9; de ces deux virus sont plus r&#xE9;sistants &#xE0; cet effet. Nous &#xE9;mettons l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que cette activit&#xE9; mutag&#xE8;ne est m&#xE9;di&#xE9;e par des alt&#xE9;rations dans les ions intracellulaires tels que Mg &#xB2; + et Mn &#xB2; +, qui &#xE0; leur tour augmentent la fr&#xE9;quence mutation du virus en affectant RdRp fid&#xE9;lit&#xE9;. En outre, nous montrons que l&#x26;#39;amiloride une autre variante r&#xE9;sistante RdRp, S299T, est compl&#xE8;tement r&#xE9;sistant &#xE0; cette activit&#xE9; mutag&#xE8;ne et affect&#xE9;e par des changements dans les concentrations d&#x26;#39;ions. Nous montrons que les variantes RDRP r&#xE9;sister &#xE0; l&#x26;#39;activit&#xE9; mutag&#xE8;ne de l&#x26;#39;amiloride l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de deux m&#xE9;canismes diff&#xE9;rents: 1) une augmentation de fid&#xE9;lit&#xE9; qui g&#xE9;n&#xE8;re des populations de virus pr&#xE9;sentant des fr&#xE9;quences plus basses mutation basales ou 2) r&#xE9;sistant &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;volution des concentrations en cations divalents qui affectent la fid&#xE9;lit&#xE9; polym&#xE9;rase. Nos r&#xE9;sultats de d&#xE9;couvrir une nouvelle approche antivirale bas&#xE9;e sur la mutagen&#xE8;se.

Variantes Fidelity des ARN polym&#xE9;rases ARN d&#xE9;pendantes D&#xE9;couvrez indirecte, activit&#xE9; mutag&#xE8;ne des compos&#xE9;s amiloride

In einem Bildschirm f&uuml;r RNA Mutagen Widerstand isoliert wir eine High-Fidelity RNA-abh&auml;ngige RNA-Polymerase (RdRp)-Variante des Coxsackie-Virus B3 (CVB3). Merkw&uuml;rdigerweise ist diese Variante A372V auch resistent gegen Amilorids. Wir vermuten, dass Amilorids verf&uuml;gt &uuml;ber eine bisher unbeschriebene mutagene Aktivit&auml;t. In der Tat Amilorids Verbindungen erh&ouml;hen die Mutation-Frequenzen der CVB3 und Polioviren und High-Fidelity-Varianten beide Viren sind widerstandsf&auml;higer gegen diesen Effekt. Wir vermuten, die diese mutagene Aktivit&auml;t, durch &Auml;nderungen im intrazellul&auml;ren Ionen wie Mg&sup2; + und Mn&sup2; +, die wiederum Virus-Mutation-Frequenz erh&ouml;hen vermittelt wird, durch Einwirkung auf die RdRp Treue. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass eine andere Amilorids-resistenten RdRp Variante, S299T, ist v&ouml;llig resistent gegen diese mutagene Aktivit&auml;t und unbeeinflusst von &Auml;nderungen in Ionen-Konzentrationen. Wir zeigen, dass die RdRp Varianten widerstehen, die mutagene Aktivit&auml;t des Amilorids &uuml;ber zwei verschiedene Mechanismen: 1) erh&ouml;ht der Treue, die Virus-Populationen pr&auml;sentieren Niederfrequenz basale Mutation oder 2) widerstehen &auml;ndert im bivalente kationen Konzentrationen erzeugt, die Polymerase Treue zu beeinflussen. Unsere Ergebnisse entdecken Sie einen neuen antiviralen Ansatz basierend auf Mutagenese.

Wiedergabetreue Varianten von RNA-abh&auml;ngige RNA-Polymerasen entdecken Sie eine indirekte, mutagene Aktivit&auml;t Amilorids Verbindungen.

In uno schermo per resistenza mutageno RNA, abbiamo isolato un&#39;alta fedelt&agrave; RNA polimerasi RNA dipendente (RdRp) variante del virus Coxsackie B3 (CVB3). Curiosamente, questa variante A372V &egrave; anche resistente all&#39;amiloride. Ipotizziamo che amiloride ha una nuovo precedentemente attivit&agrave; mutagena. Infatti, amiloride composti aumentano le frequenze di mutazione di CVB3 e varianti poliovirus e ad alta fedelt&agrave; di entrambi i virus sono pi&ugrave; resistenti a questo effetto. Si ipotizza che questa attivit&agrave; mutagena &egrave; mediata attraverso alterazioni in ioni intracellulari come Mg&sup2; + e Mn&sup2; +, che a sua volta aumentare la frequenza di mutazione del virus interferendo RdRp fedelt&agrave;. Inoltre, ci mostrano che un&#39;altra variante RdRp amiloride-resistente, S299T, &egrave; completamente resistente a questa attivit&agrave; mutagena e influenzato dai cambiamenti nelle concentrazioni di ioni. Mostriamo che RdRp varianti resistono l&#39;attivit&agrave; mutagena di amiloride attraverso due meccanismi differenti: 1) maggiore fedelt&agrave; che genera popolazioni virus presentando basse frequenze di mutazione basale o 2) resistendo cambiamenti nelle concentrazioni di cationi divalenti che influiscono sulla fedelt&agrave; della polimerasi. I nostri risultati scoprono un nuovo approccio antivirale basato su mutagenesi.

Varianti di fedelt&agrave; delle polimerasi RNA dipendente RNA scoprono un&#39;attivit&agrave; indiretta, mutagenica di amiloride composti.

RNA&#x5909;&#x7570;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30AF;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AD;&#x30FC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;B3&#xFF08;CVB3&#xFF09;&#x306E;&#x9AD8;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;RNA&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;RDRP&#xFF09;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E0D;&#x601D;&#x8B70;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;A372V&#x3082;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x672A;&#x8A18;&#x8F09;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306F;CVB3&#x3068;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x4E21;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x9AD8;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3088;&#x308A;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6D3B;&#x6027;&#x304C;RDRP&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;Mg&#xB2;+&#x304A;&#x3088;&#x3073;Mn&#xB2;+&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5225;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30EA;&#x30C9;&#x8010;&#x6027;RDRP&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;S299T&#x306F;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x3068;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x4E8C;&#x4FA1;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#xFF09;&#x4F4E;&#x57FA;&#x5E95;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x983B;&#x5EA6;&#x307E;&#x305F;&#x306F;2&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x5897;&#x52A0;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#xFF1A;1&#xFF09;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;RDRP&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x305F;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x85AC;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

RNA&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;

En una pantalla para el ARN de resistencia mut&#xE1;geno, se aisl&#xF3; una alta fidelidad de la RNA polimerasa dependiente de ARN (RDRP) la variante del virus Coxsackie B3 (CVB3). Curiosamente, este A372V variante es tambi&#xE9;n resistente a la amilorida. Nuestra hip&#xF3;tesis es que la amilorida tiene actividad mutag&#xE9;nica no descrita anteriormente. En efecto, los compuestos amilorida aumentar las frecuencias de mutaci&#xF3;n de CVB3 y poliovirus y variantes de alta fidelidad de ambos virus son m&#xE1;s resistentes a este efecto. Nuestra hip&#xF3;tesis es que esta actividad mutag&#xE9;nica est&#xE1; mediado a trav&#xE9;s de alteraciones en los iones intracelulares tales como Mg &#xB2; + y Mn &#xB2; +, que a su vez la frecuencia de aumento de mutaci&#xF3;n del virus, afectando RDRP fidelidad. Por otra parte, nos muestran que una variante resistente a amilorida RDRP, S299T, es completamente resistente a esta actividad mutag&#xE9;nica y se ve afectada por cambios en las concentraciones de iones. Se demuestra que las variantes RDRP resistir la actividad mutag&#xE9;nica de amilorida a trav&#xE9;s de dos mecanismos diferentes: 1) aumento de la fidelidad que genera poblaciones de virus que presentan las frecuencias m&#xE1;s bajas de mutaci&#xF3;n basal o 2) resistir los cambios en las concentraciones de cationes divalentes que afectan a la fidelidad de la polimerasa. Nuestros resultados revelan un nuevo m&#xE9;todo antiviral basado en la mutag&#xE9;nesis.

Variantes fidelidad de las polimerasas de ARN dependiente de ARN Descubre una actividad indirecta, mutag&#xE9;nico de compuestos amilorida

RNA&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x7387;&#xFF08;RDRP&#xFF09;&#x304C;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RNA&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3067;&#x306F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x983B;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30AF;&#x30F3;&#x30B0;&#x30F3;&#x30E4;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;CHIKV&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x3001;&#x524A;&#x6E1B;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3068;&#x500B;&#x4F53;&#x7FA4;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;nsP4 RDRP&#x5185;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;C483Y&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x868A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;CHIKV&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4F4E;&#x3044;&#x611F;&#x67D3;&#x3068;&#x666E;&#x53CA;&#x306E;&#x529B;&#x4FA1;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;CHIKV&#x306F;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;viremias&#x3068;&#x4F4E;&#x3044;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x529B;&#x4FA1;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x8907;&#x88FD;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x3068;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306B;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30B9;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30CF;&#x30A4;&#x200B;&#x200B;&#xB7;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C7;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x868A;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30B9;&#x3092;&#x5931;&#x3046;

&#x8BEF;&#x7801;&#x7387;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56; RNA &#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; (RdRp&#xFF09; &#x5F71;&#x54CD;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027; RNAs &#x7A81;&#x53D8;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x5B54;&#x80AF;&#x4E9A;&#x75C5;&#x75C5;&#x6BD2; (CHIKV)&#xFF0C;&#x63CF;&#x8FF0; nsP4 RdRp&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x751F;&#x6210;&#x4EBA;&#x53E3;&#x51CF;&#x5C11;&#x9057;&#x4F20;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x4E0E;&#x5355;&#x4E2A; C483Y &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x53D8;&#x5316;&#x4E0E;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x866B;&#x5A92;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5BCC;&#x8FBE;&#x5907;&#x9009;&#x6848;&#x6587;&#x3002;&#x5728;&#x868A;&#x5B50;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F; CHIKV &#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x548C;&#x4F20;&#x64AD;&#x6548;&#x4EF7;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3002;&#x5728;&#x65B0;&#x751F;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F; CHIKV &#x4EA7;&#x751F;&#x622A;&#x65AD; viremias &#x548C;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x6D88;&#x957F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x9057;&#x4F20;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x4EA7;&#x751F;&#x6D88;&#x6781;&#x5F71;&#x54CD;&#x866B;&#x5A92;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5065;&#x8EAB;&#x4E2D;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x3002;

&#x866B;&#x5A92;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F;&#x53D8;&#x4F53;&#x5931;&#x53BB;&#x5BF9;&#x868A;&#x5B50;&#x3001; &#x8001;&#x9F20;&#x5065;&#x8EAB;&#x3002;

The error rate of RNA-dependent RNA polymerases (RdRp) affects the mutation frequency in a population of viral RNAs. Using chikungunya virus (CHIKV), we describe a unique arbovirus fidelity variant with a single C483Y amino acid change in the nsP4 RdRp that increases replication fidelity and generates populations with reduced genetic diversity. In mosquitoes, high fidelity CHIKV presents lower infection and dissemination titers than wild type. In newborn mice, high fidelity CHIKV produces truncated viremias and lower organ titers. These results indicate that increased replication fidelity and reduced genetic diversity negatively impact arbovirus fitness in invertebrate and vertebrate hosts.

Arbovirus high fidelity variant loses fitness in mosquitoes and mice.

Le taux d&#x26;#39;erreur des ARN polym&#xE9;rases ARN-d&#xE9;pendantes (RdRp) affecte la fr&#xE9;quence de mutation dans une population d&#x26;#39;ARN viraux. En utilisant le virus chikungunya (CHIKV), nous d&#xE9;crivons un arbovirus uniques variante fid&#xE9;lit&#xE9; avec un seul changement d&#x26;#39;acide amin&#xE9; dans la C483Y RdRp nsP4 qui augmente la fid&#xE9;lit&#xE9; de r&#xE9;plication et g&#xE9;n&#xE8;re des populations &#xE0; la diversit&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;tique r&#xE9;duite. Dans les moustiques, de haute fid&#xE9;lit&#xE9; CHIKV pr&#xE9;sente d&#x26;#39;infection plus faible et les titres de diffusion de type sauvage. Chez les souris nouveau-n&#xE9;s, de haute fid&#xE9;lit&#xE9; CHIKV produit vir&#xE9;mies tronqu&#xE9;s et les titres d&#x26;#39;organes inf&#xE9;rieurs. Ces r&#xE9;sultats indiquent que la r&#xE9;plication accrue fid&#xE9;lit&#xE9; et r&#xE9;duit la diversit&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;tique n&#xE9;gative de remise en forme arbovirus impact h&#xF4;tes invert&#xE9;br&#xE9;s et de vert&#xE9;br&#xE9;s.

Arbovirus High Fidelity Variante perd de remise en forme dans les moustiques et les souris

Die Fehlerquote der RNA-abh&auml;ngige RNA-Polymerasen (RdRp) betrifft die Mutation-Frequenz bei einer Gesamtbev&ouml;lkerung von viralen RNAs. Chikungunya-Virus (CHIKV) verwenden, beschreiben wir eine einzigartige ARBO-Viren Treue-Variante mit einer einzigen C483Y Aminos&auml;ure &Auml;nderung in der nsP4-RdRp, die Replikation Treue erh&ouml;ht und erzeugt Populationen mit reduzierten genetische Vielfalt. High-Fidelity CHIKV pr&auml;sentiert in M&uuml;cken niedrigere Infektion und Verbreitung Titer als Wildtyp. Von Neugeborenen abgeschnitten High-Fidelity, den CHIKV produziert Viremias und niedriger Titer der Orgel. Diese Ergebnisse zeigen, dass erh&ouml;hte Replikation Treue und geringere genetische Vielfalt ARBO-Viren Fitness von Wirbellosen und Wirbeltieren Hosts beeintr&auml;chtigen.

ARBO-Viren High-Fidelity Variante verliert Fitness von M&uuml;cken und M&auml;use.

Il tasso di errore delle polimerasi RNA-dipendente RNA (RdRp) colpisce la frequenza di mutazione in una popolazione di RNAs virale. Utilizzando virus chikungunya (CHIKV), descriviamo una variante di fedelt&agrave; da arbovirus unico con una singola modifica dell&#39;amminoacido C483Y nella RdRp nsP4 che aumenta la fedelt&agrave; di replicazione e genera delle popolazioni con ridotta diversit&agrave; genetica. Nelle zanzare, alta fedelt&agrave; CHIKV presenta infezione inferiore e titoli di disseminazione di tipo selvatico. Nei topi neonati, alta fedelt&agrave; che CHIKV produce troncato viremias e titoli organo inferiori. Questi risultati indicano che replica maggiore fedelt&agrave; e diversit&agrave; genetica ridotto impatto negativo fitness arbovirus in ospiti vertebrati e invertebrati.

Variante alta fedelt&agrave; da arbovirus perde fitness in zanzare e topi.

RNA &#xC885;&#xC18D; RNA &#xD3F4; (RdRp)&#xC758; &#xC624;&#xB958;&#xC728; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; Rnas&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBE48;&#xB3C4;&#xB97C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Chikungunya &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (CHIKV)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC81C; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAD6C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; nsP4 Rdrp&#xC5D0; &#xB2E8;&#xC77C; C483Y &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; &#xACE0;&#xC720; arbovirus &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xD615;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xAE30;, &#xB192;&#xC740; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; CHIKV &#xB0AE;&#xC740; &#xAC10;&#xC5FC; &#xBC0F; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xAE09; titers &#xC120;&#xBB3C;. &#xAC13; &#xD0DC;&#xC5B4;&#xB09C; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xD654;&#xC9C8; CHIKV &#xC0DD;&#xC0B0; viremias &#xBC0F; &#xB0AE;&#xC740; &#xAE30;&#xAD00; titers &#xC798;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF5;&#xC81C; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xC800;&#xD558; arbovirus &#xD53C;&#xD2B8; &#xB2C8;&#xC2A4; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xBC0F; &#xCC99;&#xCD94; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Arbovirus &#xACE0;&#xD654;&#xC9C8; &#xBCC0;&#xC885; &#xBAA8;&#xAE30;&#xC640; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD53C;&#xD2B8; &#xB2C8;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC783;&#xB294;&#xB2E4;.

La tasa de error de ARN-polimerasas dependientes de ARN (RDRP) afecta a la frecuencia de mutaci&#xF3;n en una poblaci&#xF3;n de RNAs virales. Usando chikungunya virus (CHICKV), se describe un arbovirus &#xFA;nica variante fidelidad con una sola cambio C483Y amino&#xE1;cido en la RDRP NSP4 que aumenta la fidelidad de replicaci&#xF3;n y genera poblaciones con diversidad gen&#xE9;tica reducida. En los mosquitos, de alta fidelidad CHICKV presenta una infecci&#xF3;n m&#xE1;s baja y los t&#xED;tulos de la difusi&#xF3;n que la de tipo salvaje. En los ratones reci&#xE9;n nacidos, de alta fidelidad CHICKV produce viremias inferiores truncados y los t&#xED;tulos de &#xF3;rganos. Estos resultados indican que la replicaci&#xF3;n del aumento de la fidelidad y la reducci&#xF3;n de la diversidad gen&#xE9;tica negativa de fitness impacto arbovirus en hospedadores invertebrados y vertebrados.

Arbovirus de alta fidelidad pierde Variante de Fitness en mosquitos y ratones

&#x706D;&#x706B;&#x7684;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4EBA;&#x53E3;&#x6240;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x7387;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x88AB;&#x79F0;&#x4E3A;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x7FA4;&#x4F53;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x7406;&#x8BBA;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5FC5;&#x7136;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x67EF;&#x8428;&#x5947;&#x75C5;&#x6BD2; B3 (CVB3) &#x5C55;&#x54C1;&#x51CF;&#x5C11;&#x7A81;&#x53D8;&#x9C81;&#x68D2;&#x6027;&#x4E0E;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x5728;&#x654F;&#x611F;&#x5EA6;&#x589E;&#x5F3A; CVB3 &#x5230;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5242;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x9C81;&#x68D2;&#x6027;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x8861;&#x91CF;&#x6807;&#x51C6;&#x5BF9;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7A81;&#x53D8;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;

RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x7A81;&#x53D8;&#x9C81;&#x68D2;&#x6027;&#x5F71;&#x54CD;&#x5BF9;&#x81F4;&#x547D;&#x8BF1;&#x53D8;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;

The ability to extinguish a viral population of fixed reproductive capacity by causing small changes in the mutation rate is referred to as lethal mutagenesis and is a corollary of population genetics theory. Here we show that coxsackievirus B3 (CVB3) exhibits reduced mutational robustness relative to poliovirus, manifesting in enhanced sensitivity of CVB3 to lethal mutagens that is dependent on the size of the viral population. We suggest that mutational robustness may be a useful measure of the sensitivity of a virus to lethal mutagenesis.

Mutational robustness of an RNA virus influences sensitivity to lethal mutagenesis.

La capacit&#xE9; d&#x26;#39;&#xE9;teindre une population virale de la capacit&#xE9; de reproduction fixe en provoquant de petits changements dans le taux de mutation est appel&#xE9;e mutag&#xE9;n&#xE8;se l&#xE9;tale et est un corollaire de la population de th&#xE9;orie de la g&#xE9;n&#xE9;tique. Ici, nous montrons que les coxsackievirus B3 (CVB3) pr&#xE9;sente r&#xE9;duite par rapport robustesse mutationnelle au poliovirus, manifestant de la sensibilit&#xE9; accrue des CVB3 aux agents mutag&#xE8;nes mortels qui d&#xE9;pend de la taille de la population virale. Nous sugg&#xE9;rons que la robustesse mutationnelle peut &#xEA;tre une mesure utile de la sensibilit&#xE9; d&#x26;#39;un virus &#xE0; la mutagen&#xE8;se l&#xE9;tale.

Robustesse mutationnelle d&#x26;#39;un virus &#xE0; ARN Influences Sensibilit&#xE9; &#xE0; la mutagen&#xE8;se l&#xE9;tale

Die F&auml;higkeit, eine virale Population von festen Fortpflanzungsf&auml;higkeit auszul&ouml;schen, durch kleine &Auml;nderungen in die Mutationsrate verursacht wird als t&ouml;dliche Mutagenese bezeichnet und ist eine logische Folge der Populationsgenetik Theorie. Hier zeigen wir, dass Coxsackievirus B3 (CVB3) Ausstellungsst&uuml;cke reduziert teilhabende Robustheit gegen&uuml;ber Polioviren, manifestiert sich in verbesserte Empfindlichkeit der CVB3 auf t&ouml;dliche Mutagene, die die virale Bev&ouml;lkerungsgr&ouml;&szlig;e abh&auml;ngig ist. Wir schlagen vor, da&szlig; Mutationszucht Robustheit eine n&uuml;tzliche Ma&szlig;nahme der Empfindlichkeit eines Virus zu t&ouml;dlichen Mutagenese sein kann.

Teilhabende Robustheit eines RNA-Virus beeinflusst die Sensibilit&auml;t f&uuml;r t&ouml;dliche Mutagenese.

La possibilit&agrave; di estinguere una popolazione virale della capacit&agrave; riproduttiva fissa causando piccole variazioni nel tasso di mutazione &egrave; indicata come mutagenesi letale ed &egrave; un corollario della teoria genetica di popolazione. Qui vi mostriamo che coxsackievirus B3 (CVB3) esposizioni ridotto mutazionale robustezza rispetto al poliovirus, che si manifesta in una maggiore sensibilit&agrave; di CVB3 agli agenti mutageni letale che dipende dalla dimensione della popolazione virale. Suggeriamo che robustezza mutazionale pu&ograve; essere una misura utile della sensibilit&agrave; di un virus di mutagenesi letale.

Mutational robustezza di un RNA virus influenza sensibilit&agrave; per mutagenesi letale.

&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x7387;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x56FA;&#x5B9A;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3092;&#x6D88;&#x6EC5;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x3001;&#x96C6;&#x56E3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7406;&#x8AD6;&#x306E;&#x5E30;&#x7D50;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30AF;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AD;&#x30FC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;B3&#xFF08;CVB3&#xFF09;&#x306F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x898F;&#x6A21;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x200B;&#x200B;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x306B;CVB3&#x306E;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x3067;&#x9855;&#x5728;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x5909;&#x7570;&#x5805;&#x7262;&#x6027;&#x3092;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306B;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x5805;&#x7262;&#x6027;&#x304C;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x751F;&#x6210;&#x3078;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x6307;&#x6A19;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

RNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x30ED;&#x30D0;&#x30B9;&#x30C8;&#x6027;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;

&#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC728;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xCD08;&#xB798; &#xD558; &#xC5EC; &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC778;&#xAD6C; &#xC18C;&#xD654; &#xB2A5;&#xB825; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; mutagenesis &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD558;&#xBA70; &#xC9D1;&#xB2E8; &#xC720;&#xC804;&#xD559; &#xC774;&#xB860; &#xCD94;&#xB860; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xB294; coxsackievirus b 3&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; (CVB3) &#xC804;&#xC2DC; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;, &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; mutagens&#xC5D0; cvb3&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4; &#xB0B8; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; mutational &#xACAC;&#xACE0;&#xC131;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;. Mutational &#xACAC;&#xACE0;&#xC131; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; mutagenesis &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC758; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xCE21;&#xC815; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; mutational &#xACAC;&#xACE0;&#xC131; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; mutagenesis &#xAC10;&#xB3C4;&#xB97C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE69;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La capacidad para extinguir una poblaci&#xF3;n viral de la capacidad reproductiva fijo haciendo peque&#xF1;os cambios en la tasa de mutaci&#xF3;n que se conoce como mutag&#xE9;nesis letal y es un corolario de la poblaci&#xF3;n de la teor&#xED;a de la gen&#xE9;tica. Aqu&#xED; nos muestran que el virus Coxsackie B3 (CVB3) muestra relativa robustez mutacional reduce al virus de la polio, que se manifiesta en una mayor sensibilidad a los mut&#xE1;genos de CVB3 letal que es dependiente del tama&#xF1;o de la poblaci&#xF3;n viral. Sugerimos que la robustez mutacional puede ser una medida &#xFA;til de la sensibilidad de un virus de la mutag&#xE9;nesis letal.

Article	Year
Expression of a membrane-anchored glycoprotein, the influenza virus hemagglutinin, by dicistronic replicons derived from the poliovirus genome. Journal of virology\| PubMed ID: 11967344	2002
Ribavirin and lethal mutagenesis of poliovirus: molecular mechanisms, resistance and biological implications. Virus research\| PubMed ID: 15649563	2005
Remote site control of an active site fidelity checkpoint in a viral RNA-dependent RNA polymerase. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 15878882	2005
Quasispecies diversity determines pathogenesis through cooperative interactions in a viral population. Nature\| PubMed ID: 16327776	2006
Evolutionary constraints on chaperone-mediated folding provide an antiviral approach refractory to development of drug resistance. Genes & development\| PubMed ID: 17234885	2007
Engineering attenuated virus vaccines by controlling replication fidelity. Nature medicine\| PubMed ID: 18246077	2008
Delivery of mengovirus-derived RNA replicons into tumoural liver enhances the anti-tumour efficacy of a peripheral peptide-based vaccine. Cancer immunology, immunotherapy : CII\| PubMed ID: 18256833	2008
Harnessing endogenous miRNAs to control virus tissue tropism as a strategy for developing attenuated virus vaccines. Cell host & microbe\| PubMed ID: 18779050	2008
Host alternation of chikungunya virus increases fitness while restricting population diversity and adaptability to novel selective pressures. Journal of virology\| PubMed ID: 21047966	2011
Fidelity variants of RNA dependent RNA polymerases uncover an indirect, mutagenic activity of amiloride compounds. PLoS pathogens\| PubMed ID: 21060812	2010
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Mutational robustness of an RNA virus influences sensitivity to lethal mutagenesis. Journal of virology\| PubMed ID: 22190724	2012

Marco Vignuzzi

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