efficient-gene-delivery-into-multiple-cns-territories-using-utero

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using <em>In Utero</em> Electroporation

The ability to manipulate gene expression is the cornerstone of modern day experimental embryology, leading to the elucidation of multiple developmental ...

University of Calgary 

&#x7531;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x65B0;&#x8840;&#x7BA1;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5468;&#x56F4;&#x58C1;&#x753B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x62DB;&#x8058;&#x7531;&#x5176;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7684;&#x3001; &#x5C1A;&#x672A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC6;&#x522B;&#x5206;&#x5B50;&#x901A;&#x8FC7; &beta;Pix &#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; &alpha;(v)&beta;(8) &#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;&#x6CE1;&#x6CE1; (&#x767E;) &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x9057;&#x4F20;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684; &beta;Pix &#x663E;&#x793A;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&Beta;Pix &#x662F;&#x9E1F;&#x560C;&#x5464;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4EA4;&#x6362;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5305;&#x62EC; Git1&#xFF0C;&#x5BF9;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x5728;&#x7126;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7684;&#x6865;&#x6881; &beta;Pix &#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; &beta;Pix &#x80FD;&#x591F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x8239;&#x53EA;&#x9700;&#x8981; Git1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x3002;&#x2477; Git1 &#x5BFC;&#x81F4;&#x51FA;&#x8840;&#x8868;&#x578B;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&#xFF0C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x635F;&#x5931; &beta;(8) &#x6216; &beta;Pix&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x901A;&#x8FC7; &beta;Pix &#x8840;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6D89;&#x53CA;&#x4E0E;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x53CC;&#x91CD;&#x635F;&#x5931;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; &beta;Pix &#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v) &#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x51FA;&#x8840;&#x7387;&#x3002;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x65B0;&#x578B; &beta;Pix &#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(8) &#x5728;&#x8111;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4E0B;&#x8C03;&#x7684; &beta;Pix &#x6216;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(8) &#x7ED3;&#x679C;&#x8F83;&#x5C11;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x5F02;&#x5E38;&#x8111;&#x52A8;&#x8109;&#x7A7F;&#x900F;&#x4E86;&#x540E;&#x8111;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x52A0;&#x4E0A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x767E;&#x7A81;&#x53D8;&#x6216;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(8) morphants &#x5927;&#x4E3A;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x6D89;&#x53CA; &beta;Pix&#x3001; GIT1 &#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(8) &#x53EF;&#x8C03;&#x8282;&#x8840;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3001; &#x8111;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x3002;

&Beta;Pix &#x5728;&#x8111;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x53CC;&#x91CD;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0E;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(8) &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

The growth of new blood vessels by angiogenesis and their stabilization by the recruitment of perivascular mural cells are thought to be two sequential, yet independent events. Here we identify molecular links between both processes through the Î²Pix and integrin Î±(v)Î²(8) proteins. Bubblehead (bbh) mutants with a genetic mutation in Î²Pix show defective vascular stabilization. Î²Pix is a guanine nucleotide exchange factor and scaffold protein that binds many proteins including Git1, which bridges Î²Pix to integrins at focal adhesions. Here we show that the ability of Î²Pix to stabilize vessels requires Git1 binding residues. Knockdown of Git1 leads to a hemorrhage phenotype similar to loss of integrin Î±(v), integrin Î²(8) or Î²Pix, suggesting that vascular stabilization through Î²Pix involves interactions with integrins. Furthermore, double loss of function of Î²Pix and integrin Î±(v) shows enhanced hemorrhage rates. Not only is vascular stability impaired in these embryos, but we also uncover a novel role of both Î²Pix and integrin Î±(v)Î²(8) in cerebral angiogenesis. Downregulation of either Î²Pix or integrin Î±(v)Î²(8) results in fewer and morphologically abnormal cerebral arteries penetrating the hindbrain. We show that this is coupled with a significant reduction in endothelial cell proliferation in bbh mutants or integrin Î±(v)Î²(8) morphants. These data suggest that a complex involving Î²Pix, GIT1 and integrin Î±(v)Î²(8) may regulate vascular stability, cerebral angiogenesis and endothelial cell proliferation in the developing embryo.

Î²Pix plays a dual role in cerebral vascular stability and angiogenesis, and interacts with integrin Î±(v)Î²(8).

La croissance de nouveaux vaisseaux sanguins de l&#39;angiogen&egrave;se et leur stabilisation par le recrutement de cellules murales p&eacute;rivasculaires sont consid&eacute;r&eacute;s comme deux &eacute;v&eacute;nements s&eacute;quentiels, encore ind&eacute;pendantes. Ici, nous identifions des liens mol&eacute;culaires entre les deux processus par le biais de le &beta;Pix et l&#39;int&eacute;grine &alpha;(v)&beta;(8) prot&eacute;ines. Des mutants pr&eacute;sentant une mutation g&eacute;n&eacute;tique dans &beta;Pix Bubblehead (bbh) montrent une stabilisation vasculaire d&eacute;fectueuse. &Beta;Pix est une guanine nucl&eacute;otide &eacute;change facteur et &eacute;chafaudage prot&eacute;ine qui se lie &agrave; plusieurs prot&eacute;ines dont Git1, qui &beta;Pix des ponts aux int&eacute;grines &agrave; focales. Ici, nous montrons que la capacit&eacute; des &beta;Pix &agrave; stabiliser les navires exige des r&eacute;sidus de liaison Git1. Pr&eacute;cipitation de Git1 m&egrave;ne &agrave; un ph&eacute;notype d&#39;h&eacute;morragie similaire &agrave; la perte de l&#39;int&eacute;grine &alpha;(v), int&eacute;grine &beta;(8) ou &beta;Pix, sugg&eacute;rant que la stabilisation vasculaire par l&#39;interm&eacute;diaire de &beta;Pix implique des interactions avec les int&eacute;grines. En outre, double perte de fonction de &beta;Pix et l&#39;int&eacute;grine &alpha;(v) montre taux d&#39;h&eacute;morragie am&eacute;lior&eacute;e. Non seulement est vasculaire stabilit&eacute; alt&eacute;r&eacute;e chez ces embryons, mais nous aussi de d&eacute;couvrir un nouveau r&ocirc;le de &alpha;(v)&beta;(8) les &beta;Pix et les int&eacute;grines dans l&#39;angiogen&egrave;se c&eacute;r&eacute;brale. Downregulation de &beta;Pix ou l&#39;int&eacute;grine &alpha;(v)&beta;(8) r&eacute;sultats dans les art&egrave;res c&eacute;r&eacute;brales moins et morphologiquement anormaux p&eacute;n&eacute;trant le rhombenc&eacute;phale. Nous montrons que cela va de pair avec une r&eacute;duction significative de la prolif&eacute;ration des cellules endoth&eacute;liales de bbh mutants ou int&eacute;grine &alpha;(v)&beta;(8) morphants. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent qu&#39;un complexe &alpha;(v)&beta;(8) de &beta;Pix, GIT1 et int&eacute;grine impliquant peut r&eacute;glementer stabilit&eacute; vasculaire, angiogen&egrave;se c&eacute;r&eacute;brale et la prolif&eacute;ration des cellules endoth&eacute;liales dans l&#39;embryon en d&eacute;veloppement.

&Beta;Pix joue un double r&ocirc;le dans l&#39;angiogen&egrave;se et stabilit&eacute; vasculaire c&eacute;r&eacute;brale et interagit avec l&#39;int&eacute;grine &alpha;(v)&beta;(8).

Das Wachstum neuer Blutgef&auml;&szlig;e durch Angiogenese und ihre Stabilisierung durch die Einstellung der perivaskul&auml;ren Wandbild Zellen sind vermutlich zwei sequentiell, noch unabh&auml;ngige Ereignisse. Hier erkennen wir Molekulare Verbindungen zwischen beiden Prozessen durch die &beta;Pix und Integrin-&alpha;(v)&beta;(8)-Proteine. Bubblehead (Bbh) Mutanten, die eine genetische Mutation in &beta;Pix zeigen defekte vaskul&auml;re Stabilisierung. &Beta;Pix ist ein Guanin-Nukleotid Exchange Faktor und Ger&uuml;st Protein, die viele Proteine einschlie&szlig;lich Git1, welche Br&uuml;cken &beta;Pix, Integrine bei fokalen Adh&auml;sionen bindet. Hier zeigen wir, dass die F&auml;higkeit des &beta;Pix zur Stabilisierung von Schiffen Git1 Bindung R&uuml;ckst&auml;nde erfordert. Niederschlag von Git1 f&uuml;hrt zu einer Blutung Ph&auml;notyp &auml;hnlich wie Verlust von Integrin &alpha;(v), Integrin &beta;(8) oder &beta;Pix, was darauf hindeutet, dass vaskul&auml;re Stabilisierung durch &beta;Pix Interaktionen mit Integrine beinhaltet. Au&szlig;erdem zeigt doppelte Verlust der Funktion des &beta;Pix und Integrin &alpha;(v) verst&auml;rkte Blutung Preise. Nicht nur ist vaskul&auml;re Stabilit&auml;t beeintr&auml;chtigt in dieser Embryonen, sondern wir entdecken auch eine neuartige Rolle von &beta;Pix und Integrin &alpha;(v)&beta;(8) in zerebralen Angiogenesis. Heraufregulation des &beta;Pix oder Integrin &alpha;(v)&beta;(8) f&uuml;hrt zu weniger und morphologisch ungew&ouml;hnliche Hirnarterien einzudringen das Hinterhirn. Wir zeigen, dass dies mit einem erheblichen R&uuml;ckgang der endothelialen Zellproliferation im Bbh Mutanten oder Integrin &alpha;(v)&beta;(8) Morphants gekoppelt ist. Diese Daten legen nahe, dass ein Komplex mit &beta;Pix, GIT1 und Integrin &alpha;(v)&beta;(8) vaskul&auml;re Stabilit&auml;t, zerebrale Angiogenese und endothelialen Zellproliferation im entwickelnden Embryo regulieren kann.

&Beta;Pix spielt eine Doppelrolle in zerebrale vaskul&auml;re Stabilit&auml;t und Angiogenese und interagiert mit Integrin &alpha;(v)&beta;(8).

La crescita di nuovi vasi sanguigni di angiogenesi e loro stabilizzazione con l&#39;assunzione di perivascolari cellule parietali si pensa siano due eventi sequenziali, ancora indipendenti. Qui noi identificare legami molecolari fra entrambi i processi attraverso le proteine &alpha;(v)&beta;(8) &beta;Pix e integrina. Mutanti Bubblehead (bbh) con una mutazione genetica in &beta;Pix mostrano stabilizzazione vascolare difettosi. &Beta;Pix &egrave; una guanina nucleotide exchange factor e scaffold proteina che lega molte proteine tra cui Git1, che &beta;Pix di ponti di integrine a focale aderenze. Qui vi mostriamo che la capacit&agrave; di &beta;Pix di stabilizzare i vasi richiede Git1 residui di associazione. Atterramento di Git1 conduce ad un fenotipo di emorragia simile alla perdita dell&#39;integrina &alpha;(v), integrina &beta;(8) o &beta;Pix, suggerendo che la stabilizzazione vascolare attraverso &beta;Pix coinvolge interazioni con le integrine. Inoltre, doppia perdita di funzione di &beta;Pix e dell&#39;integrina &alpha;(v) Mostra tassi di emorragia maggiore. Non solo &egrave; stabilit&agrave; vascolare compromessa in questi embrioni, ma abbiamo anche scoprire un ruolo romanzo di &alpha;(v)&beta;(8) sia &beta;Pix e integrina nella angiogenesi cerebrale. Downregulation del &beta;Pix o dell&#39;integrina &alpha;(v)&beta;(8) risultati nelle arterie cerebrali morfologicamente anormale e meno penetrante del hindbrain. Ci mostra che questo &egrave; accoppiato con una significativa riduzione nella proliferazione delle cellule endoteliali nel bbh mutanti o integrina &alpha;(v)&beta;(8) morphants. Questi dati suggeriscono che un complesso che coinvolge &beta;Pix, GIT1 e integrina &alpha;(v)&beta;(8) possono regolare la stabilit&agrave; vascolare, cerebrale angiogenesi e la proliferazione delle cellule endoteliali in embrione in via di sviluppo.

&Beta;Pix svolge un ruolo doppio nella angiogenesi e stabilit&agrave; vascolare cerebrale e interagisce con l&#39;integrina &alpha;(v)&beta;(8).

&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x9AD8;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x8840;&#x7BA1;&#x58C1;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x601D;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; &beta;Pix &#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E; &alpha;(v)&beta;(8) &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30D6;&#x30EB;&#x30D8;&#x30C3;&#x30C9; (&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BA;) &#x5909;&#x7570;&#x4F53; &beta;Pix &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&Beta;Pix Git1&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x6A4B; &beta;Pix &#x7126;&#x70B9;&#x63A5;&#x7740;&#x6591;&#x3067;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3; &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x8DB3;&#x5834;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x80FD;&#x529B; &beta;Pix &#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3055;&#x305B;&#x308B; Git1 &#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Git1 &#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x51FA;&#x8840;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3; &alpha;(v)&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B; &beta;(8) &#x3084; &beta;Pix&#x3001;&beta;Pix &#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;&#x306E;&#x640D;&#x5931; &alpha;(v) &beta;Pix &#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x51FA;&#x8840;&#x7387;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x304C;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x3082; &beta;Pix &#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9; &alpha;(v)&beta;(8) &#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3067;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&Beta;Pix &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E; &alpha;(v)&beta;(8) &#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x9003;&#x907F;&#x8CAB;&#x901A;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x7570;&#x5E38;&#x306E;&#x8133;&#x52D5;&#x8108;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x3053;&#x306E; bbh &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3; &alpha;(v)&beta;(8) morphants &#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3067;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E; &beta;Pix&#x3001;GIT1&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3; &alpha;(v)&beta;(8) &#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3001;&#x8133;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x767A;&#x80B2;&#x4E2D;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&Beta;Pix &#x306F;&#x8133;&#x8840;&#x7BA1;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E; &alpha;(v)&beta;(8) &#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Perivascular &#xBCBD;&#xD654; &#xC140;&#xC758; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xD654; angiogenesis, &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC740; &#xB450; &#xC21C;&#xCC28;, &#xC544;&#xC9C1; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &beta;Pix &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &alpha;(v)&beta;(8) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB450; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &Beta;Pix &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC640; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; bubblehead (bbh) &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xD608;&#xAD00; &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xD45C;&#xC2DC;. &Beta;pix&#xB294; guanine &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xAD50;&#xD658; &#xBE44;&#xC728;&#xACFC; &#xBE44; &#xACC4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Git1 integrins &#xCD08;&#xC810; &#xC720;&#xCC29;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB9AC; &Beta;pix&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xC18D;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD608;&#xAD00;&#xC744; &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &Beta;pix&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; Git1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Git1 &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; integrin &alpha;(v), integrin &#xC190;&#xC2E4; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xCD9C;&#xD608; &#xD615; &#xB9AC;&#xB4DC; &beta;(8) &#xB610;&#xB294; &beta;Pix, &Beta;pix&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD608;&#xAD00; &#xC548;&#xC815;&#xD654; integrins&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xC81C;&#xC548;. &#xAC8C;&#xB2E4;&#xAC00;, &beta;Pix &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &alpha;(v)&#xC758; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC774;&#xC911; &#xC190;&#xC2E4; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xCD9C;&#xD608; &#xC728;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xC788;&#xB294; &#xD608;&#xAD00; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC740; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB300;&#xB1CC; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC5D0; &beta;Pix &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &alpha;(v)&beta;(8)&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBC1D;&#xD788;&#xAE30;. &Beta;Pix &#xB610;&#xB294; integrin &alpha;(v)&beta;(8) Downregulation &#xC801;&#xC740; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xB1CC; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC740; hindbrain &#xAD00;&#xD1B5; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; bbh &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB610;&#xB294; integrin &alpha;(v)&beta;(8) morphants&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB73B;&#xAE4A;&#xC740; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &beta;Pix, GIT1 &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &alpha;(v)&beta;(8) &#xB300;&#xB1CC; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xD608;&#xAD00; &#xC548;&#xC815;&#xACFC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&Beta;Pix &#xC774;&#xC911; &#xC5ED;&#xD560; &#xB300;&#xB1CC; &#xD608;&#xAD00; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xC2E0;&#xC0DD;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &alpha;(v)&beta;(8) &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294;.

El crecimiento de nuevos vasos sangu&iacute;neos por angiog&eacute;nesis y su estabilizaci&oacute;n por el reclutamiento de c&eacute;lulas mural perivascular se cree que son dos eventos secuenciales, pero independientes. Aqu&iacute; identificamos enlaces moleculares entre ambos procesos a trav&eacute;s de las prote&iacute;nas de &alpha;(v)&beta;(8) &beta;Pix y la integrina. Mutantes bubblehead (bbh) con una mutaci&oacute;n gen&eacute;tica en &beta;Pix muestran estabilizaci&oacute;n vascular defectuoso. &Beta;Pix es una guanina nucle&oacute;tido intercambio factor y andamio prote&iacute;na que une muchas prote&iacute;nas incluyendo Git1, que &beta;Pix de puentes para integrinas en adherencias focales. Aqu&iacute; mostramos que la capacidad de &beta;Pix para estabilizar los vasos requiere Git1 residuos de enlace. Ca&iacute;da de Git1 conduce a un fenotipo de hemorragia similar a la p&eacute;rdida de la integrina &alpha;(v), integrina &beta;(8) o &beta;Pix, sugiriendo que la estabilizaci&oacute;n vascular a trav&eacute;s de &beta;Pix involucra interacciones con las integrinas. Adem&aacute;s, la doble p&eacute;rdida de funci&oacute;n del &beta;Pix y la integrina &alpha;(v) muestra las tasas de hemorragia mayor. No s&oacute;lo es la estabilidad vascular deteriorada en estos embriones, pero tambi&eacute;n descubrimos un nuevo papel de &beta;Pix tanto integrina &alpha;(v)&beta;(8) en angiog&eacute;nesis cerebral. Downregulation de &beta;Pix o integrina &alpha;(v)&beta;(8) resulta en arterias cerebrales menos y morfol&oacute;gicamente anormales penetran en el cerebelo. Mostramos que esto es acompa&ntilde;ado de una reducci&oacute;n significativa de la proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas endoteliales en bbh mutantes o integrina &alpha;(v)&beta;(8) morphants. Estos datos sugieren que un complejo &alpha;(v)&beta;(8) &beta;Pix, GIT1 e integrina que puede regular la estabilidad vascular cerebral angiog&eacute;nesis y proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas endoteliales en el embri&oacute;n en desarrollo.

&Beta;Pix desempe&ntilde;a un papel dual en la angiog&eacute;nesis y estabilidad vascular cerebral e interact&uacute;a con la integrina &alpha;(v)&beta;(8).

Nicole Gruenig

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications