preparation-of-quality-inositol-pyrophosphates

Preparation of Quality Inositol Pyrophosphates

Myo-inositol is present in nature either unmodified or in more complex phosphorylated derivates. Of the latest, the two most abundant in eukaryotic cells ...

University College London

Genes de resistencia (R) de la enfermedad de planta desencadenan la respuesta inmune innata al ataque de pat&oacute;genos. RAR1 es el punto de convergencia de principios en una v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n de m&uacute;ltiples genes R. A continuaci&oacute;n, os mostramos que RAR1 interact&uacute;a con planta ort&oacute;logos de la prote&iacute;na de levadura SGT1, un regulador esencial en el ciclo celular. Silenciamiento del gen de la cebada Sgt1 revela su papel en la resistencia a las enfermedades Rar1-dependiente, activadas por gene R. SGT1 asocia SKP1 y CUL1, las subunidades de la ligasa de ubiquitina SCF (Skp1-Cullin-F-box) complejo. Adem&aacute;s, el complejo RAR1-SGT1 tambi&eacute;n interact&uacute;a con dos componentes de signalosome de la COP9. Las interacciones entre RAR1, SGT1, SCF y subunidades signalosome indican un v&iacute;nculo entre la resistencia a las enfermedades y la ubiquitinaci&oacute;n.

El interactor RAR1 SGT1, un componente esencial de la resistencia a las enfermedades activadas por gene R.

&#x690D;&#x7269;&#x6297;&#x75C5; (R) &#x57FA;&#x56E0;&#x89E6;&#x53D1;&#x540E;&#x75C5;&#x539F;&#x653B;&#x51FB;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;RAR1 &#x662F;&#x7531;&#x591A;&#x4E2A; R &#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x6536;&#x655B;&#x70B9;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; RAR1 &#x4EA4;&#x4E92;&#x690D;&#x7269; orthologs &#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D; SGT1&#xFF0C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x5927;&#x9EA6;&#x57FA;&#x56E0; Sgt1 R &#x57FA;&#x56E0;&#x89E6;&#x53D1;&#x3001; Rar1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x6297;&#x75C5;&#x4E2D;&#x63ED;&#x793A;&#x5176;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;SGT1 &#x5C06;&#x4E0E; SKP1 &#x548C; CUL1&#xFF0C;&#x590D;&#x6742;&#x7684; SCF &#xFF08;Skp1-&#x5C48;&#x5170;-F-&#x6846;&#xFF09; &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;RAR1 SGT1 &#x590D;&#x6742;&#x8FD8;&#x4E0E;&#x4E24;&#x4E2A; COP9 signalosome &#x7EC4;&#x4EF6;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;RAR1&#x3001; SGT1&#x3001; &#x8D85;&#x4E34;&#x754C;&#x6D41;&#x4F53;&#x548C; signalosome &#x4E9A;&#x57FA;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8868;&#x660E;&#x6297;&#x75C5;&#x6027;&#x548C;&#x6CDB;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x3002;

RAR1 &#x4EA4;&#x4E92;&#x65B9; SGT1&#xFF0C;R &#x57FA;&#x56E0;&#x89E6;&#x53D1;&#x6297;&#x75C5;&#x6027;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;

Plant disease resistance (R) genes trigger innate immune responses upon pathogen attack. RAR1 is an early convergence point in a signaling pathway engaged by multiple R genes. Here, we show that RAR1 interacts with plant orthologs of the yeast protein SGT1, an essential regulator in the cell cycle. Silencing the barley gene Sgt1 reveals its role in R gene-triggered, Rar1-dependent disease resistance. SGT1 associates with SKP1 and CUL1, subunits of the SCF (Skp1-Cullin-F-box) ubiquitin ligase complex. Furthermore, the RAR1-SGT1 complex also interacts with two COP9 signalosome components. The interactions among RAR1, SGT1, SCF, and signalosome subunits indicate a link between disease resistance and ubiquitination.

The RAR1 interactor SGT1, an essential component of R gene-triggered disease resistance.

Plantes, g&egrave;nes de r&eacute;sistance (R) d&eacute;clenchent des r&eacute;ponses immunitaires inn&eacute;es &agrave; l&#39;attaque de pathog&egrave;nes. RAR1 est un point de convergence au d&eacute;but dans une voie de signalisation engag&eacute; par plusieurs g&egrave;nes R. Nous d&eacute;montrons ici que RAR1 interagit avec plante orthologues de la prot&eacute;ine de levure SGT1, un r&eacute;gulateur essentiel dans le cycle cellulaire. Silencing du g&egrave;ne de l&#39;orge Sgt1 r&eacute;v&egrave;le son r&ocirc;le dans la r&eacute;sistance &agrave; la maladie d&eacute;clench&eacute;s par un g&egrave;ne, d&eacute;pendant du Rar1, R. SGT1 associe SKP1 et CUL1, sous-unit&eacute;s de la SCF (Skp1-Cullin-F-box) ubiquitine ligase complexe. En outre, le complexe RAR1-SGT1 interagit &eacute;galement avec la COP9 signalosome bi-composant. Les interactions entre les sous-unit&eacute;s signalosome, SCF, RAR1 et SGT1 indiquent un lien entre la r&eacute;sistance aux maladies et l&#39;ubiquitination.

L&#39;interaction RAR1 SGT1, un &eacute;l&eacute;ment essentiel de la r&eacute;sistance &agrave; la maladie d&eacute;clench&eacute;e par le g&egrave;ne R.

Die RAR1 Interaktor SGT1, ein wesentlicher Bestandteil der R-Gen ausgel&#xF6;st, Resistenz gegen Krankheiten.

Geni di resistenza (R) malattia pianta attivano risposta immunitaria innata all&#39;attacco di agenti patogeni. RAR1 &egrave; un primo punto di convergenza in una via di segnalazione impegnato da pi&ugrave; geni R. Qui, ci mostra che RAR1 interagisce con impianto orthologs della proteina di lievito SGT1, un regolatore essenziale nel ciclo cellulare. Silenziamento del gene orzo Sgt1 rivela il suo ruolo nella resistenza di malattia genica innescata, Rar1-dipendente R. SGT1 associa SKP1 e CUL1, subunit&agrave; della ligasi di ubiquitin SCF (Skp1-Cullin-F-box) complessa. Inoltre, il complesso RAR1-SGT1 interagisce anche con due COP9 signalosome componenti. Le interazioni tra le subunit&agrave; signalosome, SGT1, SCF e RAR1 indicano un legame tra la resistenza alle malattie e ubiquitination.

L&#39;interazione RAR1 SGT1, una componente essenziale della resistenza attivata da gene malattia R.

&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x62B5;&#x6297;&#x6027; (R) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x653B;&#x6483;&#x306E;&#x6642;&#x306B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RAR1 &#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x53CE;&#x675F;&#x70B9;&#x3067;&#x5F93;&#x4E8B;&#x3057;&#x3066;&#x8907;&#x6570;&#x306E; R &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;RAR1 &#x5DE5;&#x5834;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0; &#x30A4;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50; SGT1 &#x306E;&#x3084;&#x308A;&#x53D6;&#x308A;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x9EA6;&#x306E;&#x30B8;&#x30FC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; Sgt1 &#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F; R &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;, Rar1 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x75C5;&#x5BB3;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SGT1 &#x306F;&#x3001;SKP1 &#x3068; CUL1&#x3001;SCF (Skp1-&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;-F &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;) &#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA; &#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;RAR1 SGT1 &#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3082; 2 &#x3064;&#x306E; COP9 &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30ED;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x306E;&#x3084;&#x308A;&#x53D6;&#x308A;&#x3002;RAR1&#x3001;SGT1&#x3001;SCF&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30ED;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x8010;&#x75C5;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

RAR1 interactor SGT1&#x3001;R &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x75C5;&#x5BB3;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3002;

&#xC2DD;&#xBB3C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D; (R) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xACF5;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rar1&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; R &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD08;&#xAE30; &#xCEE8;&#xBC84;&#xC804;&#xC2A4; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACF5;&#xC7A5; orthologs SGT1, &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC218; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; rar1&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC785;&#xC744; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Sgt1 R &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;, Rar1 &#xC885;&#xC18D; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. SGT1 SKP1 &#xBC0F; CUL1, SCF (Skp1-Cullin-F-&#xC0C1;&#xC790;) &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC758; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, RAR1-SGT1 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xB450; COP9 signalosome &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. RAR1, SGT1, SCF, &#xBC0F; signalosome &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D; &#xBC0F; ubiquitination &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RAR1 interactor SGT1, R &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D;&#xC758; &#xD544;&#xC218; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;.

&#x4E00;&#x79CD;&#x5229;&#x7528;&#x4E00;&#x6B65;&#x6CD5;&#x6DB2;&#x6DB2;&#x8403;&#x53D6; &#xFF08;LLE&#xFF09; &#x8DDF;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5; (HPLC) &#x4E0E;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x7535;&#x79BB;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31; (ESI-MS/MS) &#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x7B80;&#x5355;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x5F00;&#x53D1; bromazepam &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5185;&#x90E8;&#x6807;&#x51C6;&#x4F7F;&#x7528;&#x52B3;&#x62C9;&#x897F;&#x6CEE;&#x7684;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x7684;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x5728;&#x76D1;&#x6D4B;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x76D1;&#x6D4B;&#x8F6C;&#x6362;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x53CD;&#x5E94;&#x8FDB;&#x884C;&#x6536;&#x8D2D;&#xFF1A; m/z 316 &gt; 182 &#x53F7;&#x4E3A; bromazepam &#x548C; m/z 321 &gt; 275 &#x7684;&#x52B3;&#x62C9;&#x897F;&#x6CEE;&#x3002;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x7EBF;&#x6027;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8303;&#x56F4; &#xFF08;1-100 &#x5434; ml(-1))&#xFF0C;&#x4E0E; r(2) &gt; 0.98 &#x548C;&#x8FD0;&#x884C;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x662F; 2.5 &#x5206;&#x949F;&#x3002;Assay &#x95F4;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 2.7-14.6 &#x548C; 4.1 17.3%&#xFF0C;&#x4E0E; assay &#x95F4;&#x7684;&#x51C6;&#x786E;&#x5EA6;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 87-111 &#x548C; 75.8 109.5%&#x3002;&#x5E73;&#x5747;&#x6062;&#x590D;&#x4E3A; 73.7%&#xFF0C;64.5 &#x81F3; 79.7%&#x4E0D;&#x7B49;&#x3002;1 &#x5434; ml(-1) &#x7684;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5E73;&#x5747; assay &#x95F4;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 14.6 &#x548C; 7.1%&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5E73;&#x5747; assay &#x95F4;&#x51C6;&#x786E;&#x5EA6;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 102.5 &#x548C; 104%&#x3002;Bromazepam &#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x836F;&#x7269;&#x662F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x5728;&#x6807;&#x51C6;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x548C;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x5B58;&#x50A8;&#x548C;&#x5904;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x8840;&#x6D46;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x3002;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E; 27 &#x5065;&#x5EB7;&#x6210;&#x4EBA;&#x5FD7;&#x613F;&#x8005; (14 &#x4EBA;) &#x6536;&#x5230;&#x5355;&#x5242;&#x91CF;&#x53E3;&#x670D; &#xFF08;6 &#x6BEB;&#x514B;&#xFF09; &#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7B49;&#x6548;&#x6027;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x53C2;&#x8003;&#x548C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684; bromazepam &#x914D;&#x65B9;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F00;&#x653E;&#x3001; &#x4E24;&#x671F;&#x3001; &#x968F;&#x673A;&#x3001; &#x4EA4;&#x53C9;&#x534F;&#x8BAE;&#x3002;90%&#x7F6E;&#x4FE1;&#x533A;&#x95F4;&#x7684;&#x4E2A;&#x522B;&#x6BD4;&#x7387; &#xFF08;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5236;&#x5B9A;&#x53C2;&#x8003;&#x5236;&#x5B9A;) C(max) (&#x8840;&#x6D46;&#x5CF0;&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF09;&#x3001; AUC(0-96) &#x548C; AUC(0-inf) &#xFF08;&#x8840;&#x6D46;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E0E;&#x65F6;&#x95F4;&#x4E0B;&#x7684;&#x9762;&#x79EF;&#x66F2;&#x7EBF;&#x4ECE;&#x96F6;&#x65F6;&#x95F4;&#x81F3; 96 h &#x548C;&#x5230;&#x65E0;&#x7A77;&#x8FDC;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;) &#x5728;&#x8303;&#x56F4;&#x5185; 80-125%&#xFF0C;&#x6240;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x662F;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x914D;&#x65B9;&#x662F;&#x53C2;&#x8003;&#x5236;&#x5B9A;&#x751F;&#x7269;&#x7B49;&#x6548;&#x6027;&#x5C31;&#x7387;&#x548C; bromazepam &#x5438;&#x6536;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;

&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;-&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x7535;&#x79BB;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x7684; bromazepam&#xFF1A; &#x751F;&#x7269;&#x7B49;&#x6548;&#x6027;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;

A simple method using a one-step liquid-liquid extraction (LLE) followed by high-performance liquid chromatography (HPLC) with positive ion electrospray ionization tandem mass spectrometric (ESI-MS/MS) detection was developed for the determination of bromazepam in human plasma, using lorazepam as internal standard. The acquisition was performed in the multiple reaction monitoring mode, monitoring the transitions: m/z 316 > 182 for bromazepam and m/z 321 > 275 for lorazepam. The method was linear over the studied range (1-100 ng ml(-1)), with r(2) > 0.98, and the run time was 2.5 min. The intra- and inter-assay precisions were 2.7-14.6 and 4.1-17.3%, respectively and the intra- and inter-assay accuracies were 87-111 and 75.8-109.5%, respectively. The mean recovery was 73.7%, ranging from 64.5 to 79.7%. The limit of quantification was 1 ng ml(-1). At this concentration the mean intra- and inter-assay precisions were 14.6 and 7.1%, respectively, and the mean intra- and inter-assay accuracies were 102.5 and 104%, respectively. Bromazepam stability was evaluated and the results showed that the drug is stable in standard solution and in plasma samples under typical storage and processing conditions. The method was applied to a bioequivalence study in which 27 healthy adult volunteers (14 men) received single oral doses (6 mg) of reference and test bromazepam formulations, in an open, two-period, randomized, crossover protocol. The 90% confidence interval of the individual ratios (test formulation/reference formulation) for C(max) (peak plasma concentration), AUC(0-96) and AUC(0-inf) (area under the plasma concentration versus time curve from time zero to 96 h and to infinity, respectively) were within the range 80-125%, which supports the conclusion that the test formulation is bioequivalent to the reference formulation regarding the rate and extent of bromazepam absorption.

Determination of bromazepam in human plasma by high-performance liquid chromatography with electrospray ionization tandem mass spectrometric detection: application to a bioequivalence study.

Une m&eacute;thode simple &agrave; l&#39;aide d&#39;une extraction liquide-liquide en une seule &eacute;tape (LLE) qui suivie par chromatographie liquide &agrave; haute performance (CLHP) avec d&eacute;tection (ESI-MS/MS) par spectrom&eacute;trie de masse des ions positifs electrospray ionisation en tandem a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;e pour la d&eacute;termination du bromaz&eacute;pam dans le plasma humain, &agrave; l&#39;aide de loraz&eacute;pam comme &eacute;talon interne. L&#39;acquisition a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;e dans la r&eacute;action de plusieurs mode, surveiller les transitions de surveillance: m/z 316 &amp;gt; 182 pour bromazepam et m/z 321 &amp;gt; 275 de loraz&eacute;pam. La m&eacute;thode est lin&eacute;aire dans la gamme &eacute;tudi&eacute;e (1-100 ng ml(-1)), avec GaucheC &amp;gt; 0,98 et le moment de l&#39;ex&eacute;cution a &eacute;t&eacute; de 2,5 min. Les pr&eacute;cisions intra - et inter-essai respectivement 2,7-14,6 et 4.1-17,3 %, et les pr&eacute;cisions intra - et inter-essai ont &eacute;t&eacute; 87-111 et 109,5 75,8 %, respectivement. La r&eacute;cup&eacute;ration moyenne a &eacute;t&eacute; de 73,7 %, allant de 64,5 &agrave; 79,7 %. La limite de quantification est de 1 ng ml(-1). &Agrave; cette concentration les moyennes pr&eacute;cisions intra - et inter-essai respectivement 14,6 et 7,1 %, et les moyennes pr&eacute;cisions intra - et inter-essai ont &eacute;t&eacute; 102,5 et 104 %, respectivement. BROMAZEPAM stabilit&eacute; a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e et les r&eacute;sultats ont montr&eacute; que le m&eacute;dicament est stable en solution &eacute;talon et dans les &eacute;chantillons de plasma sous stockage typique et des conditions de traitement. La m&eacute;thode a &eacute;t&eacute; appliqu&eacute;e &agrave; une &eacute;tude de bio&eacute;quivalence dans lequel 27 volontaires adultes sains (14 hommes) ont re&ccedil;u des doses orales uniques (6 mg) de r&eacute;f&eacute;rence et essai formulations bromazepam, dans un protocole ouvert, deux p&eacute;riodes, randomis&eacute;e, crossover. L&#39;intervalle de confiance de 90 % des rapports individuels (formulation de formulation/r&eacute;f&eacute;rence test) pour pic (concentration plasmatique de pointe), AUC(0-96) et AUC(0-inf) (surface sous la concentration plasmatique versus le temps courbe de temps z&eacute;ro &agrave; 96 h et jusqu&#39;&agrave; l&#39;infini, respectivement) ont &eacute;t&eacute; dans la plage 80-125 %, ce qui appuie la conclusion que la formulation &agrave; l&#39;essai est bio&eacute;quivalente &agrave; la formulation de r&eacute;f&eacute;rence concernant le rythme et l&#39;&eacute;tendue de l&#39;absorption de bromazepam.

D&eacute;termination du bromaz&eacute;pam plasmatique par chromatographie liquide &agrave; haute performance avec d&eacute;tection par spectrom&eacute;trie de masse en tandem par ionisation d&#39;electrospray : application &agrave; une &eacute;tude de bio&eacute;quivalence.

Bestimmung von Bromazepam in menschlichem Plasma durch Hochleistungs-Fl&#xFC;ssigkeits-Chromatographie mit Elektrospray Tandem-massenspektrometrischer Detektion: Anwendung auf einer Bio&#xE4;quivalenz-Studie.

Un metodo semplice utilizzando un&#39;estrazione liquido-liquido di One-Step (LLE) seguita da cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) con ioni positivi electrospray ionizzazione tandem (ESI-MS/MS) rilevazione spettrometria &egrave; stato sviluppato per la determinazione di bromazepam in plasma umano, utilizzando lorazepam come standard interno. L&#39;acquisizione &egrave; stata eseguita nella reazione pi&ugrave; modalit&agrave;, monitoraggio le transizioni di monitoraggio: 316 m/z &amp;gt; 182 per bromazepam e m/z 321 &amp;gt; 275 per lorazepam. Il metodo &egrave; stato lineare nell&#39;intervallo studiato (1-100 ng ml(-1)), con r(2) &amp;gt; 0.98 e il tempo era 2,5 min. La precisione intra - ed inter - saggio sono stati 2,7-14,6 e 4.1-17,3%, rispettivamente e la precisione intra - ed inter - saggio sono stati 87-111 e 109,5 75,8%, rispettivamente. Il recupero medio era tipo 73.7%, che vanno da 64,5 al 79,7%. Il limite di quantificazione &egrave; stato 1 ng ml(-1). A questa concentrazione la media precisione intra - ed inter - saggio sono 14,6 e 7.1%, rispettivamente, e la medie precisione intra ed inter - saggio sono stati 102.5 e 104%, rispettivamente. Bromazepam stabilit&agrave; &egrave; stata valutata e i risultati hanno mostrato che il farmaco &egrave; stabile in soluzione standard e in campioni di plasma sotto archiviazione tipiche e condizioni di trasformazione. Il metodo &egrave; stato applicato ad uno studio di bioequivalenza in cui 27 volontari sani adulti (14 uomini) ricevuto dosi orali singole (6 mg) di riferimento e test di formulazioni di bromazepam, in un protocollo aperto, due-periodo, randomizzato, crossover. L&#39;intervallo di confidenza del 90% dei rapporti individuali (test di riferimento formulazione formulazione) per C(max) (concentrazioni plasmatiche di picco), AUC(0-96) e AUC(0-inf) (zona sotto la concentrazione del plasma contro il tempo curva da tempo zero a 96 h e all&#39;infinito, rispettivamente) sono stati all&#39;interno della gamma 80-125%, che sostiene la conclusione che la formulazione di test &egrave; bioequivalente alla formulazione di riferimento riguardanti la frequenza e la misura dell&#39;assorbimento di bromazepam.

Determinazione di bromazepam in plasma umano mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni con rilevazione spettrometria per il tandem ionizzazione electrospray: applicazione ad uno studio di bioequivalenza.

&#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; (HPLC) &#x6B63;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790; (ESI-MS/MS) &#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x30EF;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x6DB2;-&#x6DB2;&#x62BD;&#x51FA; (LLE) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9; &#x30ED;&#x30E9;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0;&#x5185;&#x90E8;&#x6A19;&#x6E96;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8CB7;&#x53CE;&#x306E;&#x9077;&#x79FB;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;: m/z 316 &#x76EE; 182 &#x30D6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0;&#x7528;&#x3068; m/z 321 &#x76EE; 275 &#x30ED;&#x30E9;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9; (1-100 ng ml(-1)) r(2) &#x76EE; 0.98 &#x3067;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B9F;&#x884C;&#x6642;&#x9593;&#x3060;&#x3063;&#x305F; 2.5 &#x5206;&#x3002; &#x52C9;&#x5F37;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x30EA;&#x30CB;&#x30A2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x9593;&#x7CBE;&#x5EA6; 2.7 14.6 &#x3068; 4.1 17.3 &#xFF05;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x9593;&#x7CBE;&#x5EA6; 87-111 &#x3068; 75.8 109.5 &#xFF05;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5E73;&#x5747;&#x56DE;&#x53CE; 73.7 &#xFF05; &#x304B;&#x3089; 64.5 79.7 &#xFF05; &#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x306E;&#x9650;&#x754C; 1 ng &#x306E; ml(-1) &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x5E73;&#x5747;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x9593;&#x7CBE;&#x5EA6; 14.6 &#x3068; 7.1 &#xFF05;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x5E73;&#x5747;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x9593;&#x7CBE;&#x5EA6; 102.5 &#x3068; 104% &#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x304C;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x6DB2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x51E6;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x85AC;&#x304C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F; 27 &#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x6210;&#x4EBA;&#x30DC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2; (14 &#x4EBA;) &#x3092;&#x5358;&#x56DE;&#x7D4C;&#x53E3;&#x6295;&#x4E0E; (6 mg) &#x53D7;&#x4FE1;&#x751F;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x3001;2 &#x671F;&#x3001;&#x7121;&#x4F5C;&#x70BA;&#x5316;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB; &#x30EA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0;&#x88FD;&#x5264;&#x306E;&#x9069;&#x7528;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;90% &#x4FE1;&#x983C;&#x533A;&#x9593; C(max) (&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x6FC3;&#x5EA6;)&#x3001;AUC(0-96) &#x304A;&#x3088;&#x3073; AUC(0-inf) &#x500B;&#x3005; &#x6BD4; (&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316;/&#x53C2;&#x7167;&#x88FD;&#x5264;) &#x306E; (&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x5BFE;&#x6642;&#x9593;&#x66F2;&#x7DDA;&#x4E0B;&#x9762;&#x7A4D;&#x66F2;&#x7DDA;&#x6642;&#x9593;&#x30BC;&#x30ED;&#x304B;&#x3089; 96 h&#x3001;&#x7121;&#x9650;&#x5927;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#xFF09; &#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x3067;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316; bioequivalent &#x53C2;&#x7167;&#x3092;&#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B; 80-125 &#xFF05; &#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x30D6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0;&#x5438;&#x53CE;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;

&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x691C;&#x51FA;&#x3068;&#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;: &#x540C;&#x7814;&#x7A76;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x3002;

Lorazepam &#xB0B4;&#xBD80; &#xD45C;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0; bromazepam&#xC758; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95; 1 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC561;&#xCCB4;-&#xC561;&#xCCB4; &#xCD94;&#xCD9C; (LLE) &#xB4A4;&#xC5D0; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xC628; &#xBD84;&#xBB34; &#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; spectrometric (ESI MS/MS) &#xAC80;&#xCD9C; &#xB418;&#xB294; &#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (HPLC)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xC218; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBC18;&#xC751; &#xBAA8;&#xB4DC;, &#xC601;&#xC0C1; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xAC10;&#xC2DC; &#xC218;&#xD589;: bromazepam&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; m/z 316 &amp;gt; 182&#xC640; lorazepam&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; m/z 321 &amp;gt; 275. &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xC120;&#xD615; &#xACF5;&#xBD80; &#xBC94;&#xC704; (&#xC2E4;&#xD589; &#xC2DC;&#xAC04;&#xACFC;, r(2) &amp;gt; 0.98, 1-100 ng ml(-1))&#xB294; 2.5 &#xBD84;. &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC0F; &#xB610;&#xB294; assay &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; 2.7 14.6 &#xBC0F; 4.1 17.3%&#xB97C; &#xAC01;&#xAC01; &#xAE30;&#xB85D; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xB0B4;&#xACFC; &#xB610;&#xB294; assay &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; 87-111&#xACFC; 75.8 109.5%&#xB97C; &#xAC01;&#xAC01; &#xAE30;&#xB85D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD3C9;&#xADE0; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB294; 73.7%, 64.5&#xC5D0;&#xC11C; 79.7%&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAE30;&#xAE4C;&#xC9C0;. &#xBD80; &#xB7C9;&#xC758; &#xD55C;&#xB3C4; 1 &#xAE30; ml(-1)&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD3C9;&#xADE0; &#xB0B4; &#xACE0; &#xB610;&#xB294; assay &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; 14.6 7.1%, &#xAC01;&#xAC01;,&#xACFC; &#xD3C9;&#xADE0; &#xB0B4; &#xACE0; &#xB610;&#xB294; assay &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; 102.5&#xC640; 104%&#xB97C; &#xAC01;&#xAC01; &#xAE30;&#xB85D; &#xD588;&#xB2E4;. Bromazepam &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC900; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xBC0F; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC2A4;&#xD1A0;&#xB9AC;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC57D; &#xC548;&#xC815; &#xB418;&#xC5B4; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xCC38;&#xC870; &#xBC0F; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; bromazepam &#xACF5;&#xC2DD; &#xC624;&#xD508;, 2 &#xAE30;&#xAC04;, &#xBB34;&#xC791;&#xC704;, &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; 27 &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC131;&#xC778; &#xC790;&#xC6D0; &#xBD09;&#xC0AC;&#xC790; (14 &#xB0A8;&#xC790;) &#xB2E8;&#xC77C; &#xACBD;&#xAD6C; &#xD22C;&#xC5EC; (6mg)&#xC744; &#xBC1B;&#xC740; bioequivalence &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. C(max) (&#xD53C;&#xD06C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB18D;&#xB3C4;), AUC(0-96) &#xBC0F; auc(0-inf)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBE44;&#xC728; (&#xC2DC;&#xD5D8; &#xBC30;&#xD569;/&#xCC38;&#xC870; &#xBC30;&#xD569;)&#xC758; 90% &#xC2E0;&#xB8B0; &#xAD6C;&#xAC04; (&#xC601;&#xC5ED; &#xC544;&#xB798; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xB300; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACE1;&#xC120; &#xC2DC;&#xAC04; 0&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; 96 h&#xC640; &#xBB34;&#xD55C;&#xB300;, &#xAC01;&#xAC01;)&#xC740; &#xBC94;&#xC704; &#xB0B4;&#xC5D0; 80-125% &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC30;&#xD569; bioequivalent &#xCC38;&#xC870; &#xACF5;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xACB0;&#xB860;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xAD00;&#xB828; &#xC18D;&#xB3C4; bromazepam &#xD761;&#xC218;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4;.

&#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xCC29; &#xC0C9; &#xC778;&#xC1C4;&#xAE30; &#xBD84;&#xBB34; &#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; spectrometric &#xAC80;&#xCD9C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0; bromazepam&#xC758; &#xACB0;&#xC815;: bioequivalence &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;.

Se desarroll&oacute; un m&eacute;todo simple, con una extracci&oacute;n de l&iacute;quidos de un solo paso (LLE) seguida por cromatograf&iacute;a l&iacute;quida de alto rendimiento (HPLC) con detecci&oacute;n de ionizaci&oacute;n (ESI-MS/MS) t&aacute;ndem espectrometr&iacute;a de masa de electrospray de iones positivos para la determinaci&oacute;n de bromazepam en plasma humano, utilizando lorazepam como est&aacute;ndar interno. La adquisici&oacute;n fue realizada en la reacci&oacute;n m&uacute;ltiples modo, monitoreo de las transiciones de monitoreo: m/z 316 &gt; 182 para bromazepam y m/z 321 &gt; 275 de lorazepam. El m&eacute;todo fue lineal en el rango estudiado (1-100 ng ml(-1)), con r &gt; 0.98 y el tiempo de ejecuci&oacute;n fue 2,5 min. Las precisiones de intra - e inter - ensayo fueron 2.7-14,6 y 4.1-17.3%, respectivamente y las exactitudes de intra - e inter - ensayo fueron 87-111 y 75,8-109.5%, respectivamente. La recuperaci&oacute;n media fue 73,7%, desde 64,5 a 79,7%. El l&iacute;mite de cuantificaci&oacute;n fue 1 ng ml. En esta concentraci&oacute;n las medias intra e inter - ensayo precisiones fueron 14,6 y 7,1%, respectivamente, y las medias intra e inter - ensayo precisiones fueron 102.5 y 104%, respectivamente. Se evalu&oacute; la estabilidad de Bromazepam y los resultados mostraron que la droga es estable en soluci&oacute;n y en muestras de plasma bajo t&iacute;pico de almacenamiento y las condiciones de procesamiento. Un estudio de bioequivalencia, en el que 27 voluntarios adultos sanos (14 hombres) recibieron dosis orales &uacute;nicas (6 mg) se aplic&oacute; el m&eacute;todo de referencia y formulaciones de bromazepam, en un protocolo abierto, dos per&iacute;odos, aleatorizado y cruzado. El intervalo de confianza del 90% de las relaciones individuales (formulaci&oacute;n de formulaci&oacute;n/referencia de prueba) para C(max) (concentraci&oacute;n plasm&aacute;tica de pico), AUC(0-96) y AUC(0-inf) (&aacute;rea bajo la concentraci&oacute;n plasm&aacute;tica versus tiempo curva de tiempo cero a 96 h y hasta el infinito, respectivamente) fueron dentro de la gama 80-125%, lo que apoya la conclusi&oacute;n de que la formulaci&oacute;n de la prueba es bioequivalente a la formulaci&oacute;n de referencia acerca de la tasa y grado de absorci&oacute;n de bromazepam.

Determinaci&oacute;n de bromazepam en plasma humano por cromatograf&iacute;a l&iacute;quida de alto rendimiento con detecci&oacute;n de espectrometr&iacute;a de masa de electrospray ionizaci&oacute;n t&aacute;ndem: aplicaci&oacute;n a un estudio de bioequivalencia.

Una prote&iacute;na altamente conservada de eucariota SGT1 se une espec&iacute;ficamente a las chaperonas moleculares, HSP90. En las plantas, SGT1 regula positivamente resistencia a las enfermedades atribuida por muchas prote&iacute;nas de resistencia (R) y el desarrollo a la fitohormona, auxina. Mostramos que silenciamiento de SGT1 en Nicotiana benthamiana provoca una reducci&oacute;n en los niveles de estado estacionario de la prote&iacute;na R, Rx. Estos datos apoyan un papel de SGT1 en la acumulaci&oacute;n de la prote&iacute;na R, posiblemente a nivel de Asamblea complejo. En Arabidopsis, dos prote&iacute;nas de SGT1, AtSGT1a y AtSGT1b, son funcionalmente redundantes temprano en el desarrollo. AtSGT1a y AtSGT1b son inducidos en hojas sobre infecci&oacute;n y cualquier prote&iacute;na puede funcionar en resistencia una vez que se alcanza un cierto nivel, dependiendo de la prote&iacute;na R probada. En tejidos indiscutidos, niveles de AtSGT1b de estado estacionario son al menos cuatro veces mayores que AtSGT1a. Mientras que los dominios de repetici&oacute;n (TPR) tetratricopeptide respectivos de SGT1a y SGT1b controlan la acumulaci&oacute;n de la prote&iacute;na, son prescindibles para funciones intr&iacute;nsecas de SGT1 en las respuestas de resistencia y auxina.

Papel de SGT1 en la acumulaci&oacute;n de la prote&iacute;na de resistencia en la inmunidad de la planta.

&#x4E00;&#x79CD;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x771F;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; SGT1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5177;&#x4F53;&#x5230;&#x5206;&#x5B50;&#x4F34;&#x4FA3;&#xFF0C;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 90&#x3002;&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x91CC;&#xFF0C;SGT1 &#x79EF;&#x6781;&#x89C4;&#x5B9A;&#x6240;&#x8D4B;&#x4E88;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x7535;&#x963B; (R) &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E;&#x6FC0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x53D1;&#x5C55;&#x5BF9;&#x7B56;&#x7684;&#x6297;&#x75C5;&#x6027;&#x751F;&#x957F;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x70DF;&#x8349;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684; SGT1 R &#x86CB;&#x767D;&#x3001; Rx &#x7684;&#x7A33;&#x6001;&#x6C34;&#x5E73;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x5728; R &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x7684;&#x4E00;&#x7EA7;&#x652F;&#x6301; SGT1 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;SGT1 &#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;AtSGT1a &#x548C; AtSGT1b&#xFF0C;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x529F;&#x80FD;&#x5197;&#x4F59;&#x3002;AtSGT1a &#x548C; AtSGT1b&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x540E;&#x7684;&#x53F6;&#x5B50;&#x548C;&#x4EFB;&#x4E00;&#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x963B;&#x529B;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4E00;&#x65E6;&#x8FBE;&#x5230;&#x67D0;&#x4E00;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x5177;&#x4F53;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684; R &#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x65E0;&#x53EF;&#x4E89;&#x8BAE;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5728;&#x81F3;&#x5C11;&#x56DB;&#x6B21;&#x5927;&#x4E8E; AtSGT1a &#x7A33;&#x6001; AtSGT1b &#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5404;&#x81EA; tetratricopeptide &#x91CD;&#x590D; &#xFF08;TPR&#xFF09; &#x57DF;&#x7684; SGT1a &#x548C; SGT1b &#x63A7;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x662F;&#x53EF;&#x6709;&#x53EF;&#x65E0;&#x7684; SGT1 &#x7535;&#x963B;&#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x7D20;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;

SGT1 &#x7684;&#x5728;&#x62B5;&#x6297;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x514D;&#x75AB;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

A highly conserved eukaryotic protein SGT1 binds specifically to the molecular chaperone, HSP90. In plants, SGT1 positively regulates disease resistance conferred by many Resistance (R) proteins and developmental responses to the phytohormone, auxin. We show that silencing of SGT1 in Nicotiana benthamiana causes a reduction in steady-state levels of the R protein, Rx. These data support a role of SGT1 in R protein accumulation, possibly at the level of complex assembly. In Arabidopsis, two SGT1 proteins, AtSGT1a and AtSGT1b, are functionally redundant early in development. AtSGT1a and AtSGT1b are induced in leaves upon infection and either protein can function in resistance once a certain level is attained, depending on the R protein tested. In unchallenged tissues, steady-state AtSGT1b levels are at least four times greater than AtSGT1a. While the respective tetratricopeptide repeat (TPR) domains of SGT1a and SGT1b control protein accumulation, they are dispensable for intrinsic functions of SGT1 in resistance and auxin responses.

Role of SGT1 in resistance protein accumulation in plant immunity.

Une prot&eacute;ine hautement conserv&eacute;e eucaryote SGT1 se lie sp&eacute;cifiquement &agrave; la chaperon mol&eacute;culaire, HSP90. Chez les plantes, SGT1 r&eacute;gule positivement conf&eacute;r&eacute; de nombreuses prot&eacute;ines de r&eacute;sistance (R) et les r&eacute;ponses du d&eacute;veloppement &agrave; la phytohormone, la r&eacute;sistance aux maladies auxine. Nous montrons que silencing of SGT1 dans Nicotiana benthamiana entra&icirc;ne une r&eacute;duction des niveaux d&#39;&eacute;quilibre de la prot&eacute;ine R, Rx. Ces donn&eacute;es confirment le r&ocirc;le de SGT1 dans l&#39;accumulation de prot&eacute;ines R, possiblement au niveau de l&#39;assemblage complexe. Chez Arabidopsis, deux prot&eacute;ines de SGT1, AtSGT1a et AtSGT1b, sont fonctionnellement redondantes au d&eacute;but du d&eacute;veloppement. AtSGT1a et AtSGT1b sont induites dans les feuilles infect&eacute;es et autre prot&eacute;ine peut fonctionner en r&eacute;sistance une fois un certain niveau est atteint, en fonction de la prot&eacute;ine R test&eacute;e. Dans les tissus non contest&eacute;s, stationnaire AtSGT1b niveaux sont au moins quatre fois sup&eacute;rieur &agrave; AtSGT1a. Les domaines de r&eacute;p&eacute;tition (TPR) tetratricopeptide respectifs de SGT1a et SGT1b contr&ocirc;lent accumulation de prot&eacute;ines, mais elles sont dispensables pour les fonctions intrins&egrave;ques de SGT1 dans les r&eacute;ponses de r&eacute;sistance et d&#39;auxine.

R&ocirc;le de SGT1 dans l&#39;accumulation de prot&eacute;ines de r&eacute;sistance &agrave; l&#39;immunit&eacute; de la plante.

Ein stark konservierten eukaryotic Protein SGT1 bindet spezifisch an den molekularen Chaperon HSP90. In Pflanzen, SGT1 positiv reguliert Krankheitsresistenz, aus der viele Widerstand (R) Proteine und Entwicklungsst&ouml;rungen Reaktionen auf die Phytohormone Auxin. Wir zeigen, dass eine Reduzierung des SGT1 in Nicotiana Benthamiana Unterdr&uuml;ckender in station&auml;ren Niveaus des Proteins R, Rx verursacht werden. Diese Daten unterst&uuml;tzen eine Rolle der SGT1 in R Protein Akkumulation, m&ouml;glicherweise auf der Ebene der komplexen Baugruppe. In Arabidopsis sind zwei SGT1 Proteine, AtSGT1a und AtSGT1b, funktional redundanten fr&uuml;h in der Entwicklung. AtSGT1a und AtSGT1b sind in Bl&auml;tter nach Infektion induziert und entweder Protein kann im Widerstand funktionieren, sobald ein bestimmtes Niveau erreicht ist, je nach R Protein getestet. In unangefochten Gewebe sind die station&auml;ren AtSGT1b Ebene mindestens viermal gr&ouml;&szlig;er als AtSGT1a. W&auml;hrend die jeweiligen Tetratricopeptide Wiederholung (TPR) Dom&auml;nen SGT1a und SGT1b Protein Akkumulation kontrollieren, sind sie entbehrlich f&uuml;r systeminterne Funktionen von SGT1 in Widerstand und Auxin Antworten.

Die Rolle der SGT1 in Widerstand Protein Akkumulation Pflanze-Festigkeit.

Una proteina eucariotica altamente conservata SGT1 si lega in modo specifico per il chaperone molecolare, HSP90. Nelle piante, SGT1 positivamente regola la resistenza alle malattie, conferita da molte proteine resistenza (R) e le risposte dello sviluppo phytohormone, auxina. Mostriamo che tacere di SGT1 in Nicotiana benthamiana causa una riduzione nei livelli di steady-state della proteina R, Rx. Questi dati supportano un ruolo di SGT1 nell&#39;accumulo di proteina R, possibilmente a livello di insieme complesso. In Arabidopsis, due proteine SGT1, AtSGT1a e AtSGT1b, sono funzionalmente ridondanti presto nello sviluppo. AtSGT1a e AtSGT1b sono indotte in foglie su infezione e sia della proteina pu&ograve; funzionare in resistenza una volta raggiunto un certo livello, a seconda della proteina R testata. Nei tessuti incontrastati, livelli di steady-state AtSGT1b sono almeno quattro volte maggiori di AtSGT1a. Mentre i rispettivi tetratricopeptide ripetizione (TPR) domini di SGT1a e SGT1b controllano l&#39;accumulo di proteine, sono dispensabili per funzioni intrinseche del SGT1 nelle risposte di resistenza e di auxina.

Ruolo di SGT1 nell&#39;accumulo della proteina resistenza nell&#39;immunit&agrave; pianta.

&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x7BC0;&#x7D04;&#x3055;&#x308C;&#x305F; eukaryotic &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; SGT1 &#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; HSP90 &#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x690D;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SGT1 &#x306F;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x62B5;&#x6297; (R) &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x767A;&#x9054;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x3067;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x75C5;&#x5BB3;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; SGT1 &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D9;&#x30F3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30A2;&#x30FC;&#x30CA;&#x3067;&#x524A;&#x6E1B; Rx R &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F; R &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E; SGT1 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E; SGT1 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;AtSGT1a &#x304A;&#x3088;&#x3073; AtSGT1b&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5197;&#x9577;&#x3067;&#x3059;&#x3002;AtSGT1a &#x304A;&#x3088;&#x3073; AtSGT1b &#x611F;&#x67D3;&#x8449;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; R &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E00;&#x5EA6;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x62B5;&#x6297;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD4;&#x985E;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x5B9A;&#x5E38; AtSGT1b &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F; AtSGT1a &#x3088;&#x308A;&#x306E; 4 &#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B3;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057; (TPR) &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; SGT1a &#x3068; SGT1b &#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F;&#x95A2;&#x6570; SGT1 &#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3068;&#x30AA;&#x30FC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x62B5;&#x6297;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x84C4;&#x7A4D;&#x690D;&#x7269;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; SGT1 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;

&#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC9C4; &#xD575; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; SGT1 &#xBD84;&#xC790; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; HSP90 &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD;&#xBB3C;, SGT1 &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9CE;&#xC740; &#xC800;&#xD56D; (R) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; phytohormone, &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218; &#xC5EC; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D; &#xC870;&#xC808; auxin. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rx R &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xBA74; Nicotiana benthamiana&#xC5D0;&#xC11C; sgt1&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xB9C8; R &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801;&#xC5D0; sgt1&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;. Arabidopsis&#xC5D0; &#xB450; SGT1 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, AtSGT1a &#xBC0F; AtSGT1b, &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xBCF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. AtSGT1a &#xBC0F; AtSGT1b &#xAC10;&#xC5FC; &#xC78E;&#xC5D0; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B4;&#xB290; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; R &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xB418; &#xBA74; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2F9;&#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC; AtSGT1b &#xB808;&#xBCA8; AtSGT1a &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 4 &#xBC30; &#xD070; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD574;&#xB2F9; tetratricopeptide &#xBC18;&#xBCF5; (TPR) &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; sgt1a&#xACFC; sgt1b&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC800;&#xD56D;&#xACFC; auxin &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; sgt1&#xC758; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;.

&#xC2DD;&#xBB3C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC800;&#xD56D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801;&#xC5D0; sgt1&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x808C;&#x9187;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x8BB8;&#x591A;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x672C;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66;&#x4EE5;&#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x808C;&#x9187;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x5206;&#x5F00;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x5206;&#x4E3A;&#x4E09;&#x4E2A;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF1A; &#x8D34;&#x6807;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001; &#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x808C;&#x9187;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x548C;&#x8272;&#x8C31;&#x5206;&#x79BB;&#x63D0;&#x53D6;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B75;&#x5316;&#x4E0E;&#x6C1A;&#x808C;&#x9187;&#xFF0C;&#x800C;&#x662F;&#x91C7;&#x53D6;&#x548C;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6210;&#x4E0D;&#x540C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3002;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x808C;&#x9187;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x7136;&#x540E;&#x662F;&#x9178;&#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x5206;&#x5272;&#x7684;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3002;&#x7531;&#x95EA;&#x70C1;&#x8BA1;&#x6570;&#x786E;&#x5B9A;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5206;&#x6570;&#x7684;&#x653E;&#x5C04;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x3001; &#x53EF;&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x808C;&#x9187;&#x805A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x5141;&#x8BB8;&#x7684;&#x7EC6;&#x5FAE;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x51C6;&#x786E;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x82B1;&#x5C11;&#x4E8E; 48 &#x5C0F;&#x65F6;&#x3002;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8F7B;&#x677E;&#x5730;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x628A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6539;&#x7F16;&#x7684;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66; &#x300B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F18;&#x5316;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x3002;

&#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x4ECE;&#x9175;&#x6BCD;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x808C;&#x9187;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x3002;

Soluble inositol polyphosphates are implicated in the regulation of many important cellular functions. This protocol to extract and separate inositol polyphosphates from Saccharomyces cerevisiae is divided into three steps: labeling of yeast, extraction of soluble inositol polyphosphates and chromatographic separation. Yeast cells are incubated with tritiated inositol, which is taken up and metabolized into different phosphorylated forms. Soluble inositol polyphosphates are then acid-extracted and fractionated by high-performance liquid chromatography. The radioactivity of each fraction is determined by scintillation counting. This highly sensitive and reproducible method allows the accurate detection of subtle changes in the inositol polyphosphate profile and takes less than 48 h. It can easily be applied to other systems and we have included two adaptations of the protocol, one optimized for mammalian cells and the other for Arabidopsis thaliana.

Extraction and analysis of soluble inositol polyphosphates from yeast.

Solubles polyphosphates inositol sont impliqu&#xE9;s dans la r&#xE9;gulation de nombreuses et importantes fonctions cellulaires. Ce protocole d&#x26;#39;extraire et de s&#xE9;parer les polyphosphates inositol de Saccharomyces cerevisiae est divis&#xE9; en trois &#xE9;tapes: l&#x26;#39;&#xE9;tiquetage de la levure, l&#x26;#39;extraction de polyphosphates solubles inositol et la s&#xE9;paration chromatographique. Les cellules de levure sont incub&#xE9;es avec l&#x26;#39;inositol triti&#xE9;, qui est capt&#xE9; et m&#xE9;tabolis&#xE9; en diff&#xE9;rents formes phosphoryl&#xE9;es. Solubles polyphosphates inositol sont alors une extraction acide et fractionn&#xE9;s par chromatographie en phase liquide &#xE0; haute performance. La radioactivit&#xE9; de chaque fraction est d&#xE9;termin&#xE9;e par comptage &#xE0; scintillation. Cette m&#xE9;thode tr&#xE8;s sensible et reproductible permet la d&#xE9;tection pr&#xE9;cise des changements subtils dans le profil polyphosphate inositol et prend moins de 48 h. Il peut facilement &#xEA;tre appliqu&#xE9;e &#xE0; d&#x26;#39;autres syst&#xE8;mes et nous avons inclus deux adaptations du protocole, l&#x26;#39;une optimis&#xE9;e pour les cellules de mammif&#xE8;res et l&#x26;#39;autre pour Arabidopsis thaliana.

Extraction et analyse des polyphosphates solubles inositol &#xE0; partir de levure

L&ouml;sliche Inosit Polyphosphates sind in der Verordnung der viele wichtige Zellfunktionen beteiligt. Dieses Protokoll zum Extrahieren und Inosit Polyphosphates von Saccharomyces Cerevisiae trennen gliedert sich in drei Schritte: Kennzeichnung von Hefe, Abbau von l&ouml;slichen Inosit Polyphosphates und Chromatographische Trennung. Hefezellen werden mit tritiiertem-Inositol, ausgebr&uuml;tet, die aufgegriffen und in verschiedene Phosphorylierte Formen metabolisiert. L&ouml;sliche Inosit Polyphosphates sind dann S&auml;ure-extrahiert und fraktioniert durch Hochleistungs-Fl&uuml;ssigkeitschromatographie. Die Radioaktivit&auml;t der jeden Bruch bestimmt Szintillationsmessungen. Diese hochempfindliche und reproduzierbare Methode erm&ouml;glicht die genaue Bestimmung der subtile Ver&auml;nderungen im Profil Polyphosphate Inosit und dauert weniger als 48 h. Es kann leicht auf andere Systeme angewendet werden und wir haben zwei Anpassungen des Protokolls, einer optimiert f&uuml;r S&auml;ugetier-Zellen und die andere f&uuml;r Arabidopsis Thaliana aufgenommen.

Extraktion und Analyse der l&ouml;slichen Inosit Polyphosphates aus Hefe.

Solubile inositolo polifosfati sono implicati nella regolazione di molte funzioni cellulari importanti. Questo protocollo per estrarre e separare l&#39;inositolo polifosfati dal Saccharomyces cerevisiae &egrave; diviso in tre fasi: etichettatura del lievito, estrazione di solubile inositolo polifosfati e separazione cromatografica. Le cellule di lievito vengono incubate con inositolo trizio, che &egrave; preso e metabolizzato in diverse forme fosforilate. Solubile inositolo polifosfati sono poi estratti acido e frazionati mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni. La radioattivit&agrave; di ciascuna frazione &egrave; determinata dal conteggio a scintillazione. Questo metodo altamente sensibile e riproducibile permette la rilevazione accurata di sottili cambiamenti nel profilo di inositolo polifosfato e prende meno di 48 h. Pu&ograve; essere applicato facilmente ad altri sistemi e abbiamo incluso due adattamenti del protocollo, uno ottimizzato per le cellule di mammiferi e l&#39;altra per Arabidopsis thaliana.

Estrazione e analisi di solubile inositolo polifosfati da lievito.

&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x6A19;&#x8B58;&#x3001;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x96E2;&#xFF1A;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#xFF08;Saccharomyces cerevisiae&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x5206;&#x304B;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x4E0A;&#x3052;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F62;&#x306B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x62BD;&#x51FA;&#x3068;&#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5206;&#x753B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5404;&#x753B;&#x5206;&#x306E;&#x653E;&#x5C04;&#x80FD;&#x306F;&#x30B7;&#x30F3;&#x30C1;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x8A08;&#x6570;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x3068;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x5FAE;&#x5999;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x691C;&#x51FA;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x3001;48&#x6642;&#x9593;&#x672A;&#x6E80;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3068;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x3064;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x7528;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;1&#x3068;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;&#x4ED6;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x9175;&#x6BCD;&#x304B;&#x3089;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x3068;&#x5206;&#x6790;

&#xC218;&#xC6A9; &#xC131; inositol polyphosphates &#xB9CE;&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xD480;&#xACE0; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC11C; inositol polyphosphates&#xB97C; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xC138; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xB098;&#xB204;&#xC5B4;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;: &#xD6A8; &#xBAA8;, &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; inositol polyphosphates &#xBC0F; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8; &#xBD84;&#xB9AC; &#xCD94;&#xCD9C;&#xC758; &#xB77C;&#xBCA8;. &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; tritiated inositol &#xCC28;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; phosphorylated &#xBAA8;&#xC591;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; &#xC778; &#xD050;&#xBCA0;&#xC774; &#xD305;. &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; inositol polyphosphates &#xB2E4;&#xC74C; &#xC0B0; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD558; &#xACE0; &#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; fractionated. &#xAC01; &#xBD84;&#xC218;&#xC758; &#xBC29;&#xC0AC;&#xB2A5; &#xC12C;&#xAD11; &#xACC4;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD558;&#xACE0; &#xC7AC;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; inositol polyphosphate &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xBB18;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; 48 h &#xAC78;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; Arabidopsis thaliana&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC758; &#xB450; adaptations &#xD3EC;&#xD568;.

&#xCD94;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xB204; &#xB8E9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB179;&#xB294; inositol polyphosphates&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;.

Polifosfatos de inositol solubles est&#xE1;n implicadas en la regulaci&#xF3;n de muchas funciones celulares importantes. Este protocolo para extraer y separar polifosfatos de inositol de Saccharomyces cerevisiae se divide en tres pasos: etiquetado de levadura, la extracci&#xF3;n de solubles polifosfatos de inositol y la separaci&#xF3;n cromatogr&#xE1;fica. Las c&#xE9;lulas de levadura se incuban con inositol tritiada, que ha sido tomado y se metaboliza en diferentes formas fosforiladas. Polifosfatos solubles inositol son luego extra&#xED;da con &#xE1;cido y se fraccion&#xF3; por cromatograf&#xED;a l&#xED;quida de alto rendimiento. La radioactividad de cada fracci&#xF3;n se determin&#xF3; por recuento de centelleo. Este m&#xE9;todo altamente sensible y reproducible permite la detecci&#xF3;n precisa de los cambios sutiles en el perfil de inositol polifosfato y toma menos de 48 horas. Se puede aplicar f&#xE1;cilmente a otros sistemas y se han incluido dos adaptaciones del protocolo, un optimizado para c&#xE9;lulas de mam&#xED;fero y el otro para Arabidopsis thaliana.

Extracci&#xF3;n y an&#xE1;lisis de polifosfatos de inositol solubles de la levadura

&#x540C;&#x65F6;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x6C2F;&#x6C99;&#x5766; (LOS) &#x548C;&#x6C22;&#x6C2F;&#x567B;&#x55EA; (HCTZ) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5185;&#x90E8;&#x6807;&#x51C6;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4F7F;&#x7528;&#x7F2C;&#x6C99;&#x5766; (VAL) &#x548C;&#x567B;&#x916E; (&#x51A0;&#x5FC3;&#x75C5;) &#x7684;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x62DF;&#x8BA2;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x8D1F;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x7535;&#x79BB;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31; (&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;-ESI-MS/MS) &#x68C0;&#x6D4B;&#x9075;&#x5FAA;&#x7B80;&#x5355;&#x6DB2;&#x6DB2;&#x8403;&#x53D6; &#xFF08;LLE&#xFF09; &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x591A;&#x4E2A;&#x53CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x6D4B; (MRM) &#x8FDB;&#x884C;&#x6536;&#x8D2D;&#x548C;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x662F;&#x6D1B;&#x6749;&#x77F6;&#x548C; HCTZ 4 ng/mL&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x5728;&#x7814;&#x7A76;&#x8303;&#x56F4;&#x5185; (4 800 ng/mL &#x4E3A;&#x6D1B;&#x6749;&#x77F6;) &#x548C; 4 500 ng/mL HCTZ &#x4E3A;&#x7EBF;&#x6027;&#x3002;&#x4ECE;&#x6D1B;&#x6749;&#x77F6; 2.6-11.9%&#x548C; HCTZ&#xFF0C;&#x4E3A; 1.4-8.2%&#x4E0D;&#x7B49;&#xFF0C;&#x800C; inter-assay &#x7684;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x5219;&#x4ECB;&#x4E4E;&#x6D1B;&#x6749;&#x77F6; 1.0-8.0%&#x548C; 2.5-7.7%&#x4E3A; HCTZ &#x5185;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3002;&#x4ECB;&#x4E4E; 91.3 &#x81F3;&#x6D1B;&#x6749;&#x77F6;&#x7684; 107.6%&#x548C; 91.5 &#x5230; 105.8%&#x4E3A; HCTZ&#xFF0C;&#x800C;&#x4ECB;&#x4E4E; 99.9 &#x81F3;&#x6D1B;&#x6749;&#x77F6; 106.4%&#x548C; 97.4 &#x5230; 101.4%&#x4E3A; HCTZ inter-assay &#x7CBE;&#x5EA6;&#x5185;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3002;&#x5206;&#x6790;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x751F;&#x7269;&#x7B49;&#x6548;&#x6027;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D; 28 &#x5065;&#x5EB7;&#x6210;&#x4EBA;&#x5FD7;&#x613F;&#x8005; (14 &#x4EBA;) &#x6536;&#x5230;&#x5355;&#x5242;&#x91CF;&#x53E3;&#x670D; (100 &#x6BEB;&#x514B;&#x6D1B;&#x6749;&#x77F6; + 25 &#x6BEB;&#x514B; HCTZ) &#x53C2;&#x8003;&#x548C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x914D;&#x65B9;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5F00;&#x653E;&#x7684;&#x3001; &#x5728;&#x4E24;&#x671F;&#x3001; &#x5E73;&#x8861;&#x968F;&#x673A;&#x3001; &#x4EA4;&#x53C9;&#x534F;&#x8BAE;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x7684; 90%&#x7F6E;&#x4FE1;&#x533A;&#x95F4;&#x4E3A; Cmax &#x548C; AUC0-inf&#xFF0C;&#x7ED3;&#x675F;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x914D;&#x65B9;&#x662F;&#x5F15;&#x7528;&#x7387;&#x548C;&#x6D1B;&#x6749;&#x77F6;&#x548C; HCTZ &#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x6D77;&#x6377;&#x4E9A;&#x5236;&#x5B9A;&#x751F;&#x7269;&#x7B49;&#x6548;&#x6027;&#x3002;

&#x540C;&#x65F6;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x6C2F;&#x6C99;&#x5766;&#x548C;&#x6C22;&#x6C2F;&#x567B;&#x55EA; LC/MS/MS &#x4E0E;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x7535;&#x79BB;&#x548C;&#x836F;&#x4EE3;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x53CA;&#x5176;&#x5E94;&#x7528;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x3002;

A method based on a simple liquid-liquid extraction (LLE) followed by high-performance liquid chromatography with negative ion electrospray ionization tandem mass spectrometry (HPLC-ESI-MS/MS) detection was developed for the simultaneous determination of losartan (LOS) and hydrochlorothiazide (HCTZ) in human plasma, using valsartan (VAL) and chlorthalidone (CHTD) as an internal standard, respectively. The acquisition was performed in multiple reactions monitoring (MRM) and the limit of quantification was 4 ng/mL for both LOS and HCTZ. The method was linear in the studied range (4-800 ng/mL for LOS and 4-500 ng/mL for HCTZ). The intra-assay precisions ranged from 2.6-11.9% for LOS and 1.4-8.2% for HCTZ, while the inter-assay precisions ranged from 1.0-8.0% for LOS and 2.5-7.7% for HCTZ. The intra-assay accuracies ranged from 91.3 to 107.6% for LOS and 91.5 to 105.8% for HCTZ, while the inter-assay accuracies ranged from 99.9 to 106.4% for LOS and 97.4 to 101.4% for HCTZ. The analytical method was applied to a bioequivalence study, in which 28 healthy adult volunteers (14 men) received single oral doses (100 mg LOS + 25 mg HCTZ) of reference and test formulations, in an open, two-period, balanced randomized, crossover protocol. Based on the 90% confidence interval of the individual ratios for Cmax and AUC0-inf, it was concluded that the test formulation is bioequivalent to the reference Hyzaar formulation with respect to the rate and extent of absorption of both LOS and HCTZ.

Simultaneous determination of losartan and hydrochlorothiazide in human plasma by LC/MS/MS with electrospray ionization and its application to pharmacokinetics.

Une m&eacute;thode bas&eacute;e sur une simple extraction liquide-liquide (ell), suivie par chromatographie liquide &agrave; haute performance avec d&eacute;tection &agrave; ionisation electrospray spectrom&eacute;trie de masse (HPLC-ESI-MS/MS) de tandem ion n&eacute;gatif a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;e pour la d&eacute;termination simultan&eacute;e du losartan (LOS) et l&#39;hydrochlorothiazide (HCTZ) dans le plasma humain, en utilisant valsartan (VAL) et chlorthalidone (CHTD) comme &eacute;talon interne, respectivement. L&#39;acquisition a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;e dans plusieurs r&eacute;actions surveillance (MRM) et la limite de quantification est de 4 ng/mL pour LOS et HCTZ. La m&eacute;thode est lin&eacute;aire dans la gamme &eacute;tudi&eacute;e (4-800 ng/mL pour LOS) et 4 &agrave; 500 ng/mL pour HCTZ. Les pr&eacute;cisions intra-essai varies entre 2,6-11,9 % pour LOS et 1.4-8,2 % pour HCTZ, tandis que la pr&eacute;cision inter-essai variait entre 1.0-8,0 % pour LOS et 2,5-7,7 % pour HCTZ. La pr&eacute;cision intra-essai varie de 91,3 &agrave; 107,6 % pour LOS et 91,5 &agrave; 105,8 % pour HCTZ, tandis que la pr&eacute;cision inter-essai varie entre 99,9 et 106,4 % pour LOS et 97,4 &agrave; 101,4 % pour HCTZ. La m&eacute;thode d&#39;analyse a &eacute;t&eacute; appliqu&eacute;e &agrave; une &eacute;tude de bio&eacute;quivalence, dans laquelle 28 volontaires adultes sains (14 hommes) a re&ccedil;u doses orales uniques (100 mg de LOS + 25 mg HCTZ) des formulations de r&eacute;f&eacute;rence et d&#39;essai, &agrave; l&#39;air libre, deux p&eacute;riodes, &eacute;quilibr&eacute; randomis&eacute;e, protocole de liaison. Bas&eacute; sur l&#39;intervalle de confiance de 90 % des rapports individuels pour la Cmax et de l&#39;ASC0-inf, il a &eacute;t&eacute; conclu que la formulation du test est bio&eacute;quivalente &agrave; la r&eacute;f&eacute;rence, formulation de Hyzaar en ce qui concerne le taux et le degr&eacute; d&#39;absorption de LOS tant HCTZ.

D&eacute;termination simultan&eacute;e du losartan et hydrochlorothiazide dans le plasma humain par LC/MS/MS avec ionisation par &eacute;lectrospray et son application &agrave; la pharmacocin&eacute;tique.

Eine Methode, die auf der Grundlage einer einfachen Fl&uuml;ssig-Fl&uuml;ssig-Extraktion (LLE) gefolgt von Hochleistungs-Fl&uuml;ssigkeitschromatographie mit negative Ionen Elektrospray-Ionisation-Tandem Massenspektrometrie (HPLC-ESI-MS/MS) Erkennung wurde f&uuml;r die simultane Bestimmung von Losartan (LOS) und Hydrochlorothiazid (HCTZ) in humanem Plasma, mit Valsartan (VAL) und Chlortalidon (CHTD) als interner Standard, entwickelt. Die Akquisition erfolgte in mehreren Reaktionen &Uuml;berwachung (MRM) und der Bestimmungsgrenze war 4 ng/mL f&uuml;r LOS und HCTZ. Die Methode war im untersuchten Bereich (4-800 ng/mL f&uuml;r LOS) und 4-500 ng/mL f&uuml;r HCTZ linear. Die Intra-Assay-Genauigkeiten reichten von 2.6-11,9 % Los und 1.4-8,2 % f&uuml;r HCTZ, w&auml;hrend die Inter-Assay Genauigkeiten von 1,0-8,0 % f&uuml;r LOS und 2.5-7,7 % f&uuml;r HCTZ reichten. Die Intra-Assay-Genauigkeiten reichten von 91,3 auf 107,6 % LOS und 91,5 auf 105,8 % f&uuml;r HCTZ, w&auml;hrend die Inter-Assay Genauigkeiten reichten von 99,9 auf 106,4 % Los und 97,4 auf 101,4 % f&uuml;r HCTZ. Analytische Methode wurde angewendet, um eine Bio&auml;quivalenz-Studie, in welcher 28 gesunden Erwachsenen Probanden (14 M&auml;nner) empfangen einzelne Munddosen (100 mg LOS + 25 mg HCTZ) Referenz und Test-Formulierungen, in einem offenen, zwei-Punkt, ausgewogene randomisiert, Crossover-Protokoll. Basierend auf der individuellen Verh&auml;ltnisse das 90 %-Konfidenzintervall f&uuml;r Cmax und AUC0-inf, wurde der Schluss gezogen, dass die Test-Formulierung bio&auml;quivalente zur Referenz Hyzaar Formulierung im Hinblick auf die Bewertung und das Ausma&szlig; der Absorption von LOS und HCTZ ist.

Gleichzeitige Bestimmung von Losartan und Hydrochlorothiazid in humanem Plasma von LC/MS/MS mit Elektrospray-Ionisation und seine Anwendung auf Pharmakokinetik.

Per la determinazione simultanea di losartan (LOS) e idroclorotiazide (HCTZ) nel plasma umano, utilizzando rispettivamente valsartan (VAL) e clortalidone (CHTD) come standard interno, &egrave; stato sviluppato un metodo basato su una semplice estrazione liquido-liquido (LLE) seguita da cromatografia liquida ad alte prestazioni con rilevamento di ioni negativi electrospray ionizzazione tandem mass spectrometry (HPLC-ESI-MS/MS). L&#39;acquisizione &egrave; stata eseguita in molteplici reazioni di monitoraggio (MRM) ed il limite di quantificazione &egrave; stato 4 ng/mL per LOS sia HCTZ. Il metodo &egrave; lineare nell&#39;intervallo studiato (4-800 ng/mL per LOS) e 4-500 ng/mL per HCTZ. La precisione intra-dosaggio variava da 2,6-11,9% per LOS e 1.4-8,2% per HCTZ, mentre la precisione inter-variava da 1,0-8,0% per LOS e 2.5-7,7% per HCTZ. La precisione intra-saggio variava da 91,3% 107,6 per LOS e 91,5 a 105,8% per HCTZ, mentre l&#39;Inter esattezze variava da 99,9% 106.4 per LOS e % 97,4 a 101.4 per HCTZ. Il metodo analitico &egrave; stato applicato ad uno studio di bioequivalenza, in cui 28 volontari adulti sani (14 uomini) ha ricevuti singole dosi orali (LOS 100mg + 25mg HCTZ) delle formulazioni di prova e di riferimento, in modo aperto, randomizzati due-periodo, equilibrato, protocollo di crossover. Basato sull&#39;intervallo di confidenza del 90% dei singoli rapporti per Cmax e AUC0-inf, si &egrave; concluso che la formulazione di test &egrave; bioequivalente al riferimento Hyzaar formulazione per quanto riguarda la frequenza e la misura dell&#39;assorbimento di LOS e di HCTZ.

Determinazione simultanea di losartan e idroclorotiazide nel plasma umano di LC/MS/MS con ionizzazione elettrospray e sua applicazione alla farmacocinetica.

&#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8CA0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5; (HPLC-ESI MS/MS) &#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x6DB2;-&#x6DB2;&#x62BD;&#x51FA;&#x6CD5; (LLE) &#x624B;&#x6CD5;&#x30ED;&#x30B5;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3; (LOS) &#x3068;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30C1;&#x30A2;&#x30B8;&#x30C9; &#xFF08;HCTZ&#xFF09; &#x30D0;&#x30EB;&#x30B5;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3; (VAL) &#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30EB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30C9;&#x30F3; (CHTD) &#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x5185;&#x90E8;&#x6A19;&#x6E96;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x5B9A;&#x91CF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x53D6;&#x5F97; (MRM) &#x306E;&#x76E3;&#x8996;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8907;&#x6570;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x306E;&#x9650;&#x754C;&#x30ED;&#x30B9;&#x3068; HCTZ &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; 4 ng/mL &#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;.&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x7DDA;&#x5F62;&#x52C9;&#x5F37;&#x7BC4;&#x56F2; (4 800 &#x30ED;&#x30B9; ng/mL) &#x3068; HCTZ &#x306E; 4 500 ng/mL &#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;HCTZ&#x3001;&#x30ED;&#x30B5;&#x30F3;&#x30BC;&#x30EB;&#x30B9; 1.0 8.0% &#x3068; HCTZ 2.5 7.7% &#x304B;&#x3089;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x771F;&#x5EA6;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306A;&#x304C;&#x3089; 1.4 8.2% &#x3068;&#x30ED;&#x30B9; 2.6 11.9 &#xFF05; &#x304B;&#x3089;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3002;91.3 &#x304B;&#x3089;&#x30ED;&#x30B9; 107.6 &#xFF05; &#x3068; HCTZ&#x3001;99.9 &#x304B;&#x3089;&#x30ED;&#x30B5;&#x30F3;&#x30BC;&#x30EB;&#x30B9; 106.4 %101.4 &#x306B; 97.4 %hctz &#x306E;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x771F;&#x5EA6;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306A;&#x304C;&#x3089; 105.8 &#x306B; 91.5% &#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3002;&#x89E3;&#x6790;&#x7684;&#x3069;&#x306E;&#x53D7;&#x4FE1; 28 &#x5065;&#x5EB7;&#x6210;&#x4EBA;&#x30DC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2; (14 &#x4EBA;) &#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x7D4C;&#x53E3;&#x6295;&#x4E0E; &#xFF08;100 mg &#x30ED;&#x30B5;&#x30F3;&#x30BC;&#x30EB;&#x30B9; + 25 mg HCTZ&#xFF09; &#x88FD;&#x5264;&#x306E;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x3067;&#x306E; 2 &#x671F;&#x9593;&#x3001;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x53D6;&#x308C;&#x305F;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0; &#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B; 90% &#x4FE1;&#x983C;&#x533A;&#x9593;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x6BD4;&#x7387;&#x306E; Cmax &#x3068; AUC0 inf &#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316; bioequivalent Hyzaar &#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316;&#x7387;&#x3068;&#x30ED;&#x30B9;&#x3068; HCTZ &#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x305F;&#x3002;

&#x30ED;&#x30B5;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x3068;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30C1;&#x30A2;&#x30B8;&#x30C9; &#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x3068;&#x85AC;&#x7269;&#x52D5;&#x614B;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;/MS LC/MS &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x5B9A;&#x91CF;

&#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xCC29; &#xC0C9; &#xC778;&#xC1C4;&#xAE30; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xBD84;&#xBB34; &#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; (HPLC ESI-MS/MS) &#xAC80;&#xCD9C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC11C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC561;&#xCCB4;-&#xC561;&#xCCB4; &#xCD94;&#xCD9C; (LLE) &#xBC29;&#xC2DD;&#xC740; losartan (LOS) &#xBC0F; &#xAC01;&#xAC01;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; &#xD45C;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; valsartan (&#xBC1C;)&#xC640; chlorthalidone (CHTD)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C; hydrochlorothiazide (HCTZ)&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xC218; (MRM) &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589;&#xD55C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBD80; &#xB7C9;&#xC758; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; &#xB85C;&#xC2A4;&#xC640; HCTZ 4 ng/mL. &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; (4-800 ng/&#xB85C;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; mL) &#xBC0F; 4-500 ng/mL HCTZ &#xC704;&#xD55C; &#xACF5;&#xBD80; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD615;. &#xB0B4;&#xBD80; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; inter-assay &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; HCTZ &#xC704;&#xD55C; 2.5-7.7%&#xC640; &#xB85C;&#xC2A4; 1.0-8.0%&#xC5D0;&#xC11C; ranged &#xB3D9;&#xC548; HCTZ, 1.4-8.2%&#xC640; &#xB85C;&#xC2A4; 2.6-11.9%&#xC5D0;&#xC11C; ranged. &#xB0B4;&#xBD80; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; &#xB85C;&#xC2A4; 107.6% &#xBC0F; 91.5 105.8 %hctz, &#xB85C;&#xC2A4; 106.4%&#xC640; 97.4 101.4% HCTZ 99.9&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD588;&#xB2E4; inter-assay &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; &#xB3D9;&#xC548; 91.3&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC11D; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xB294; 28 &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC131;&#xC778; &#xC790;&#xC6D0; &#xBD09;&#xC0AC;&#xC790; (14 &#xB0A8;&#xC790;) &#xBC1B;&#xC740; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAD6C;&#xAC15; &#xD22C;&#xC5EC; (100mg &#xB85C;&#xC2A4; + 25 mg HCTZ) &#xCC38;&#xC870; &#xBC0F; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xACF5;&#xC2DD; &#xC624;&#xD508;&#xC5D0; &#xB450; &#xAE30;&#xAC04;, &#xADE0;&#xD615; &#xC7A1;&#xD78C; &#xBB34;&#xC791;&#xC704;, &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; bioequivalence &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. Cmax AUC0-inf&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBE44;&#xC728;&#xC758; 90% &#xC2E0;&#xB8B0; &#xAD6C;&#xAC04;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBC18; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC30;&#xD569; bioequivalent Hyzaar &#xBC30;&#xD569; &#xBE44;&#xC728; &#xBC0F; &#xB85C;&#xC2A4;&#xC640; HCTZ &#xD761;&#xC218;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4; &#xB300;&#xD574; &#xCC38;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xC885;&#xACB0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

Losartan hydrochlorothiazide pharmacokinetics&#xC5D0;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xBD84;&#xBB34; &#xC774;&#xC628;&#xD654;&#xC640; LC/MS/MS&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xACB0;&#xC815;.

Se desarroll&oacute; un m&eacute;todo basado en una simple extracci&oacute;n l&iacute;quido-l&iacute;quido (LLE) seguida por cromatograf&iacute;a l&iacute;quida de alto rendimiento con la detecci&oacute;n de iones negativos electrospray ionizaci&oacute;n t&aacute;ndem espectrometr&iacute;a de masas (HPLC-ESI-MS/MS) para la determinaci&oacute;n simult&aacute;nea de losart&aacute;n (LOS) e hidroclorotiazida (HCTZ) en plasma humano, utilizando el valsart&aacute;n (VAL) y clortalidona (CHTD) como est&aacute;ndar interno, respectivamente. La adquisici&oacute;n fue realizada en m&uacute;ltiples reacciones de monitoreo (MRM) y el l&iacute;mite de cuantificaci&oacute;n era 4 ng/mL para LOS tanto HCTZ. El m&eacute;todo fue lineal en el rango estudiado (4-800 ng/mL para LOS) y 4-500 ng/mL para HCTZ. Las precisiones de inter-ensayo que se extendieron de 2.6-11.9% para LOS y 1.4-8,2% para HCTZ, mientras que el Inter-an&aacute;lisis precisiones se extendieron de 1.0-8.0% para LOS y 2.5-7,7% para HCTZ. Las exactitudes intraensayo vari&oacute; de 91.3 y 107.6% para LOS 91,5 a 105.8% para HCTZ, mientras las Inter-an&aacute;lisis exactitudes oscil&oacute; 99.9 y 97.4 a 101,4% para HCTZ 106,4% para LOS. Se aplic&oacute; el m&eacute;todo anal&iacute;tico a un estudio de bioequivalencia, en que 28 voluntarios adultos sanos (14 hombres) recibidas sola dosis orales (LOS de 100 mg + 25 mg de hidroclorotiazida) de formulaciones de referencia y, en un abierto, aleatorizado dos per&iacute;odos, equilibrado, protocolo de cruce. Basado en el intervalo de confianza del 90% de las relaciones individuales para Cmax y AUC0-inf, se concluy&oacute; que la formulaci&oacute;n de la prueba es bioequivalente a la referencia Hyzaar formulaci&oacute;n con respecto a la velocidad y extensi&oacute;n de la absorci&oacute;n de LOS tanto HCTZ.

Determinaci&oacute;n simult&aacute;nea de losart&aacute;n e Hidroclorotiazida en plasma humano por LC/MS/MS con ionizaci&oacute;n por electrospray y su aplicaci&oacute;n a la farmacocin&eacute;tica.

&#x9AD8;&#x80FD;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates&#xFF0C;IP(7) &#xFF08;diphosphoinositol pentakisphosphate&#xFF09;&#xFF0C;&#x5982;&#x53EF;&#x4EE5;&#x76F4;&#x63A5;&#x6350;&#x8D60;&#x5230;&#x751F;&#x6210; pyrophosphorylated &#x86CB;&#x767D;&#x8D28; prephosphorylated &#x7684;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x7684; &beta;-&#x78F7;&#x9178;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; AP-3&#xFF0C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x7248;&#x672C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684; &beta; &#x4E9A;&#x57FA;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#x7684; IP (7)-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; pyrophosphorylation&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; Kif3A&#xFF0C;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A; AP3B1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x4F19;&#x4F34;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8868;&#x660E; Kif3A&#xFF0C;AP 3 &#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x50CF;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x538B;&#x5236;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;IP &#xFF08;7&#xFF09;-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; pyrophosphorylation AP3B1 &#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x4E0E; Kif3A &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5F71;&#x54CD;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;-&#x559C;&#x6B22;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x6807;&#x8BC6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x53D7; IP (7)-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; pyrophosphorylation&#x3002;

&#x808C;&#x9187;&#x7126;&#x78F7;&#x9178;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; pyrophosphorylation &#x7684; AP3B1 &#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x538B;&#x5236;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;

High-energy inositol pyrophosphates, such as IP(7) (diphosphoinositol pentakisphosphate), can directly donate a beta-phosphate to a prephosphorylated serine residue generating pyrophosphorylated proteins. Here, we show that the beta subunit of AP-3, a clathrin-associated protein complex required for HIV-1 release, is a target of IP(7)-mediated pyrophosphorylation. We have identified Kif3A, a motor protein of the kinesin superfamily, as an AP3B1-binding partner and demonstrate that Kif3A, like the AP-3 complex, is involved in an intracellular process required for HIV-1 Gag release. Importantly, IP(7)-mediated pyrophosphorylation of AP3B1 modulates the interaction with Kif3A and, as a consequence, affects the release of HIV-1 virus-like particles. This study identifies a cellular process that is regulated by IP(7)-mediated pyrophosphorylation.

Inositol pyrophosphate mediated pyrophosphorylation of AP3B1 regulates HIV-1 Gag release.

Haute &#xE9;nergie pyrophosphates inositol, tels que IP (7) (pentakisphosphate diphosphoinositol), peuvent directement faire don d&#x26;#39;un b&#xEA;ta-phosphate &#xE0; un r&#xE9;sidu s&#xE9;rine prephosphorylated g&#xE9;n&#xE9;rer des prot&#xE9;ines pyrophosphorylated. Ici, nous montrons que la sous-unit&#xE9; b&#xEA;ta de l&#x26;#39;AP-3, un complexe prot&#xE9;ique de clathrine qui sont exig&#xE9;s pour le VIH-1 communiqu&#xE9;, est une cible de la propri&#xE9;t&#xE9; intellectuelle (7)-m&#xE9;di&#xE9;e pyrophosphorylation. Nous avons identifi&#xE9; Kif3A, une prot&#xE9;ine motrice de la superfamille des kin&#xE9;sines, en tant que partenaire AP3B1-contraignant et d&#xE9;montrer que Kif3A, comme le complexe AP-3, est impliqu&#xE9; dans un processus intracellulaire n&#xE9;cessaire pour le VIH-1 Gag communiqu&#xE9;. Il est important, IP (7)-m&#xE9;di&#xE9;e pyrophosphorylation de AP3B1 module l&#x26;#39;interaction avec Kif3A et, par cons&#xE9;quent, affecte la lib&#xE9;ration de virus VIH-1-comme des particules. Cette &#xE9;tude identifie un processus cellulaire qui est r&#xE9;glement&#xE9;e par la propri&#xE9;t&#xE9; intellectuelle (7)-m&#xE9;di&#xE9;e pyrophosphorylation.

Inositol Pyrophosphorylation m&#xE9;diation pyrophosphate de AP3B1 R&#xE9;gule le VIH-1 Gag de sortie

Energiereiche Inosit Pyrophosphates, wie IP(7) (Diphosphoinositol Pentakisphosphate), k&ouml;nnen ein Beta-Phosphat zur Generierung von Pyrophosphorylated Proteinen prephosphorylated Serin R&uuml;ckst&auml;nde direkt Spenden. Hier zeigen wir, dass die Beta-Untereinheit des AP-3, eine Clathrin-assoziierte Protein-Komplex f&uuml;r die HIV-1-Version, ein Ziel von IP (7 ist)-vermittelte Pyrophosphorylation. Wir haben Kif3A, ein motor Protein Kinesin-Superfamilie, als AP3B1 und unverbindlich Partner und zeigen, dass Kif3A, wie der AP-3-Komplex, in einem intrazellul&auml;ren Prozess ben&ouml;tigt f&uuml;r HIV-1 Gag Release beteiligt ist. Vor allem IP (7) - vermittelte Pyrophosphorylation der AP3B1 moduliert die Interaktion mit Kif3A und wirkt sich folglich die Freigabe des HIV-1-Virus - wie Partikel. Diese Studie identifiziert einen zellul&auml;ren Prozess, der durch IP (7) geregelt wird-vermittelte Pyrophosphorylation.

Inosit Diphosphate vermittelte Pyrophosphorylation der AP3B1 regelt Gag von HIV-1-Version.

Pirofosfati inositolo ad alta energia, come IP(7) (diphosphoinositol pentakisphosphate), possono donare direttamente un fosfato beta per un residuo di serina prephosphorylated generando pyrophosphorylated proteine. Qui, ci mostrano che la subunit&agrave; beta dell&#39;AP-3, un complesso di clatrina-associated protein necessario per il rilascio di HIV-1, &egrave; una destinazione di IP (7)-mediata da pyrophosphorylation. Ci hanno identificato Kif3A, una proteina motore della superfamiglia chinesina, come un socio AP3B1-associazione e dimostrare che Kif3A, come il complesso di AP-3, &egrave; coinvolto in un processo intracellulare necessario per il rilascio di HIV-1 Gag. Soprattutto, IP (7) - mediata da pyrophosphorylation di AP3B1 modula l&#39;interazione con Kif3A e, di conseguenza, colpisce il rilascio del virus HIV-1 - come particelle. Questo studio identifica un processo cellulare che &egrave; regolato da IP (7)-mediata da pyrophosphorylation.

Inositolo pyrophosphorylation pirofosfato mediata del AP3B1 disciplina rilascio Gag di HIV-1.

IP&#x306A;&#x3069;&#xFF08;7&#xFF09;&#xFF08;diphosphoinositol pentakisphosphate&#xFF09;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;pyrophosphorylated&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;prephosphorylated&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306B;&#x3B2;-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x5BC4;&#x4ED8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;AP-3&#x3001;HIV-1&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x3B2;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;IP&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF08;7&#xFF09;&#x5A92;&#x4ECB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;AP3B1&#x7D50;&#x5408;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Kif3A&#x3001;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;Kif3A&#x306F;&#x3001;AP-3&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;HIV-1&#x306E;Gag&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;IP&#xFF08;7&#xFF09;&#x5A92;&#x4ECB;AP3B1&#x306E;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;Kif3A&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;HIV-1&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x69D8;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;IP&#xFF08;7&#xFF09;&#x5A92;&#x4ECB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

AP3B1&#x306E;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;HIV-1&#x306E;Gag&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

IP(7) (diphosphoinositol pentakisphosphate) &#xAC19;&#xC740; &#xACE0; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; inositol pyrophosphates prephosphorylated &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC794;&#xC5EC;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; pyrophosphorylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xAE30;&#xBD80; &#xC9C1;&#xC811; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC790;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; clathrin &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; HIV-1 &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; AP 3&#xC758; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; IP (7)&#xC758; &#xB300;&#xC0C1; &#xC784;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;-pyrophosphorylation &#xC911;&#xC7AC;. &#xC6B0;&#xB9AC; Kif3A, AP3B1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xB85C; kinesin superfamily&#xC758; &#xBAA8;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; Kif3A, AP 3 &#xB2E8;&#xC9C0; &#xAC19;&#xC740; &#xAD00;&#xB828; HIV 1 &#xAC1C; &#xADF8; &#xBC84;&#xC804;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, IP (7)-ap3b1&#xC758; &#xC911;&#xC7AC; pyrophosphorylation Kif3A &#xC0C1;&#xD638; &#xBCC0;&#xC870; &#xBC0F;, &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; h i V-1 &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294;-&#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC790;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; IP (7)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB418;&#xC5B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC2DD;&#xBCC4;-pyrophosphorylation &#xC911;&#xC7AC;.

&#xC774;&#xB178; &#xC2DC; &#xD1A8; &#xC778;&#xC0B0; &#xC911;&#xC7AC; pyrophosphorylation ap3b1&#xC758; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB97C; V 1 &#xAC1C; &#xADF8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

De alta energ&#xED;a pirofosfatos inositol, como IP (7) (pentaquifosfato diphosphoinositol), directamente se puede donar un beta-fosfato a un residuo de serina prephosphorylated la generaci&#xF3;n de prote&#xED;nas pyrophosphorylated. En este caso, nos muestran que la subunidad beta de la AP-3, un complejo de prote&#xED;nas clatrina asociada necesarios para el VIH-1 de liberaci&#xF3;n, es un objetivo de la propiedad intelectual (7)-mediada pyrophosphorylation. Hemos identificado KIF3A, una prote&#xED;na motora de la superfamilia quinesina, como un socio AP3B1 vinculante y demostrar que KIF3A, al igual que el complejo AP-3, est&#xE1; involucrado en un proceso intracelular necesario para la liberaci&#xF3;n de VIH-1 gag. Es importante destacar que, IP (7)-mediada pyrophosphorylation de AP3B1 modula la interacci&#xF3;n con KIF3A y, como consecuencia, afecta a la liberaci&#xF3;n de virus VIH-1-como part&#xED;culas. Este estudio identifica un proceso celular que se regula a trav&#xE9;s de IP (7)-mediada pyrophosphorylation.

Pyrophosphorylation inositol mediada por pirofosfato de AP3B1 Regula el VIH-1 gag de lanzamiento

L&ouml;sliche Inosit Polyphosphates repr&auml;sentieren eine Variegate-Klasse signalisieren der Molek&uuml;le notwendig f&uuml;r die Funktion unterschiedlicher zellul&auml;rer Prozesse. Vor kurzem die komplexbildenden S&auml;ure Derivat Inosit Diphosphate, InsP(7) (PP-IP(5) oder IP(7)) nachweislich Pyro-Proteine in einer Kinase phosphoryliert unabh&auml;ngigen Weg. Um zu beginnen, die funktionelle Bedeutung dieser neuen Phosphorylierung-Mechanismus zu verstehen, ist eine Quelle von kalt und radioaktiv markierten InsP(7) unverzichtbar. Jedoch kalt InsP(7) ist teuer zu kaufen, und beschriftete InsP(7) ist nicht im Handel erh&auml;ltlich. Hier bieten wir ein Protokoll zur Synthese und InsP(7) auf ein Niveau der Reinheit ben&ouml;tigt f&uuml;r in-vivo und in vitro-Experimente zu reinigen. Wir beginnen mit der Reinigung von rekombinanten Maus Inosit Hexakisphosphate Kinase (IP6K1) von Escherichia coli. Mit gereinigtem IP6K1, wir fertigen kalte InsP(7) und 5beta [(32) P] InsP(7), dass wir anschlie&szlig;end in-vitro-Experimente verwenden, um Proteine phosphoryliert Ausz&uuml;ge aus verschiedenen Arten.

Synthese von InsP7 durch das Inositol-Hexakisphosphate-Kinase 1 (IP6K1).

Solubile inositolo polifosfati rappresentano una classe di diversificare di molecole essenziali per la funzione di diversi processi cellulari di segnalazione. Recentemente, il pirofosfato di inositolo derivato acido fitico, InsP(7) (PP-IP(5) o IP(7)) ha dimostrato di pyro-fosforila proteine in una chinasi modo indipendente. Per cominciare a capire l&#39;importanza funzionale di questo nuovo meccanismo di fosforilazione, una fonte di freddo e radiomarcata InsP(7) &egrave; indispensabile. Tuttavia, InsP(7) freddo &egrave; costoso da comprare, e InsP(7) coniugati non &egrave; commercialmente disponibile. Qui forniamo un protocollo per sintetizzare e purificare InsP(7) ad un livello di purezza richiesto per gli esperimenti in vivo e in vitro. Iniziamo dalla purificazione della mouse ricombinante inositolo hexakisphosphate chinasi (IP6K1) da Escherichia coli. Con IP6K1 purificata, produciamo freddo InsP(7) e 5beta [(32) P] InsP(7) che usiamo successivamente gli esperimenti in vitro per fosforila proteine estratti da diverse specie.

Sintesi di InsP7 dall&#39;inositolo Hexakisphosphate chinasi 1 (IP6K1).

&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x808C;&#x9187;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x4EE3;&#x8868;&#x4E00;&#x4E2A; variegate &#x7C7B;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x690D;&#x9178;&#x9178;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x808C;&#x9187;&#x7126; InsP(7) (PP-IP(5) &#x6216; IP(7)) &#x5DF2;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x706B;-phosphorylate &#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x5728;&#x72EC;&#x7ACB;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x8981;&#x5F00;&#x59CB;&#x4E86;&#x89E3;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x51B7;&#x548C;&#x6C1F; InsP(7) &#x7684;&#x6765;&#x6E90;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x51B7; InsP(7) &#x662F;&#x8981;&#x82B1;&#x94B1;&#x6765;&#x4E70;&#xFF0C;&#x548C;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684; InsP(7) &#x4E0D;&#x662F;&#x5546;&#x4E1A;&#x4E0A;&#x53EF;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x9879;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66;&#xFF0C;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x51C0;&#x5316; InsP(7) &#x5230;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x7EAF;&#x5EA6;&#x7684;&#x7EA7;&#x522B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9996;&#x5148;&#x51C0;&#x5316;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5C0F;&#x9F20;&#x808C;&#x9187; hexakisphosphate &#x6FC0;&#x9176; (IP6K1)&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x3002;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; IP6K1&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x4EA7;&#x51B7; InsP(7) &#x548C; 5beta [(32) P] InsP(7) &#x6211;&#x4EEC;&#x968F;&#x540E;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6765; phosphorylate &#x86CB;&#x767D;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;

InsP7 &#x7531;&#x808C;&#x9187; Hexakisphosphate &#x6FC0;&#x9176; 1 (IP6K1) &#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x3002;

Soluble inositol polyphosphates represent a variegate class of signalling molecules essential for the function of disparate cellular processes. Recently, the phytic acid derivate inositol pyrophosphate, InsP(7) (PP-IP(5) or IP(7)) has been shown to pyro-phosphorylate proteins in a kinase independent way. To begin to understand the functional importance of this new phosphorylation mechanism, a source of cold and radiolabelled InsP(7) is indispensable. However, cold InsP(7) is expensive to buy, and labelled InsP(7) is not commercially available. Here we provide a protocol to synthesise and purify InsP(7) to a level of purity required for in vivo and in vitro experiments. We begin by purifying recombinant mouse inositol hexakisphosphate kinase (IP6K1) from Escherichia coli. With purified IP6K1, we produce cold InsP(7) and 5beta[(32)P] InsP(7) that we subsequently use in vitro experiments to phosphorylate proteins extracts from different species.

Synthesis of InsP7 by the Inositol Hexakisphosphate Kinase 1 (IP6K1).

Polyphosphates solubles inositol repr&#xE9;senter une classe de mol&#xE9;cules de signalisation variegata essentiels pour la fonction de processus cellulaires disparates. R&#xE9;cemment, l&#x26;#39;acide phytique d&#xE9;river pyrophosphate inositol, InsP (7) (PP-PI (5) ou IP (7)) a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; &#xE0; une pyro-phosphorylent des prot&#xE9;ines d&#x26;#39;une mani&#xE8;re ind&#xE9;pendante kinase. Pour commencer &#xE0; comprendre l&#x26;#39;importance fonctionnelle de ce m&#xE9;canisme de phosphorylation nouvelle, une source de froid et InsP radiomarqu&#xE9; (7) est indispensable. Cependant, le froid InsP (7) est cher &#xE0; l&#x26;#39;achat, et l&#x26;#39;inspecteur marqu&#xE9; (7) n&#x26;#39;est pas disponible dans le commerce. Ici, nous fournir un protocole de synth&#xE9;tiser et de purifier InsP (7) &#xE0; un niveau de puret&#xE9; requis pour in vivo et des exp&#xE9;riences in vitro. Nous commen&#xE7;ons par la purification recombinant kinase hexakisphosphate souris inositol (IP6K1) d&#x26;#39;Escherichia coli. Avec purifi&#xE9; IP6K1, nous produisons InsP froide (7) et 5beta [(32) P] InsP (7) que nous par la suite utiliser dans des exp&#xE9;riences in vitro de phosphoryler des extraits de prot&#xE9;ines de diff&#xE9;rentes esp&#xE8;ces.

Synth&#xE8;se de InsP7 par le kinase inositol hexakisphosphate 1 (IP6K1)

&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x7A2E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x3001;INSP&#xFF08;7&#xFF09;&#xFF08;PP-IP&#xFF08;5&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;IP&#xFF08;7&#xFF09;&#xFF09;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306E;pyro-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5BD2;&#x3055;&#x3068;&#x653E;&#x5C04;&#x6027;&#x6A19;&#x8B58;INSP&#xFF08;7&#xFF09;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x51B7;&#x305F;&#x3044;INSP&#xFF08;7&#xFF09;&#x3092;&#x8CFC;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9AD8;&#x4FA1;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;INSP&#xFF08;7&#xFF09;&#x306F;&#x5E02;&#x8CA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x7D14;&#x5EA6;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;INSP&#xFF08;7&#xFF09;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x516D;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;IP6K1&#xFF09;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;IP6K1&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;in vitro&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;[P&#xFF08;32&#xFF09;] INSP&#xFF08;7&#xFF09;&#x51B7;INSP&#xFF08;7&#xFF09;&#x3068;5beta&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x516D;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;1&#xFF08;IP6K1&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;InsP7&#x306E;&#x5408;&#x6210;

&#xC218;&#xC6A9; &#xC131; inositol polyphosphates &#xC774;&#xC885; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC790; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;&#xC758; variegate &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; phytic &#xC0B0; &#xC720;&#xB798; &#xC774;&#xB178; &#xC2DC; &#xD1A8; &#xC778;&#xC0B0;, InsP(7) (PP-IP(5) &#xB610;&#xB294; IP(7)) &#xB098; &#xC5D0;&#xAC90; &#xD654;&#xD559;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;-phosphorylate &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C;&#xB97C;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C;. &#xC774; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC778; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xCDA5;&#xACE0; radiolabelled Insp(7)&#xC758; &#xC18C;&#xC2A4; &#xBD88;&#xAC00;&#xACB0; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCC2C; Insp(7)&#xC640; &#xAD6C;&#xB9E4;, &#xBE44;&#xC2FC; &#xC774;&#xB77C;&#xB294; Insp(7)&#xC740; &#xC0C1;&#xC5C5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD558;&#xB294;&#xB370; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xD558; &#xACE0; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC21C;&#xB3C4; &#xC218;&#xC900;&#xC758; InsP(7) &#xC815;&#xD654; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; inositol hexakisphosphate &#xD0A4; (IP6K1)&#xC744; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC21C;&#xD654; ip6k1&#xC640; &#xC6B0;&#xB9AC; InsP(7) &#xCDA5;&#xACE0; 5beta &#xC0DD;&#xC0B0; [(32) P] InsP(7) &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; phosphorylate &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;.

Inositol Hexakisphosphate &#xD0A4; 1 (IP6K1)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Insp7&#xC758; &#xD569;&#xC131;.

Polifosfatos solubles inositol representan una clase de mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n variegata esenciales para la funci&#xF3;n de diferentes procesos celulares. Recientemente, el &#xE1;cido f&#xED;tico derivado pirofosfato de inositol, InsP (7) (PP-PI (5) o IP (7)) se ha demostrado que piro-fosforilan prote&#xED;nas en una forma independiente quinasa. Para comenzar a entender la importancia funcional de este mecanismo de fosforilaci&#xF3;n nuevo, una fuente de fr&#xED;o y InsP radiomarcado (7) es indispensable. Sin embargo, el fr&#xED;o InsP (7) es caro para comprar, y InsP marcado (7) no est&#xE1; disponible comercialmente. Aqu&#xED; se proporciona un protocolo para sintetizar y purificar InsP (7) a un nivel de pureza requerido para in vivo y experimentos in vitro. Comenzamos por la purificaci&#xF3;n de inositol recombinante del rat&#xF3;n quinasa hexakisfosfato (IP6K1) de Escherichia coli. Con purificada IP6K1, producimos InsP fr&#xED;a (7) y 5beta [P (32)] InsP (7) que se utiliza posteriormente en los experimentos in vitro con extractos de fosforilar las prote&#xED;nas de diferentes especies.

S&#xED;ntesis de InsP7 por la quinasa hexakisfosfato inositol 1 (IP6K1)

&#x63CF;&#x8FF0;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x548C;&#x8026;&#x5408;&#x5230;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE; (ES +) &#x7535;&#x79BB;&#x4E32;&#x8054;&#x4E09;&#x91CD;&#x56DB;&#x6781;&#x8D28;&#x8C31; (LC-ESI-MS/MS) &#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6069;&#x4E39;&#x897F;&#x916E;&#x91CF;&#x5316;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x7684;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x6837;&#x672C;&#x88AB;&#x63D0;&#x53D6;&#x6DB2;-&#x6DB2;&#x8403;&#x53D6; &#xFF08;LLE&#xFF09; &#x4F7F;&#x7528;&#x7532;&#x57FA;&#x53D4;&#x4E01;&#x57FA;&#x919A;&#x548C;&#x6309; LC--&#x8D28;&#x8C31;/&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x662F; 0.2 ng/mL&#xFF0C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x7EBF;&#x6027;&#x7684;&#x8303;&#x56F4; 0.2-60 ng/mL&#x3002;&#x4ECB;&#x4E4E; 1.6 &#x81F3; 7.7%&#xFF0C;&#x800C;&#x4ECB;&#x4E4E; 2.1 &#x81F3; 5.1 %inter-assay &#x7CBE;&#x5EA6;&#x5185;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3002;&#x4ECB;&#x4E4E; 97.5 108.2%&#xFF0C;&#x81F3;&#x5185;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x548C; 97.3 &#x81F3; 107.0%&#x4E0D;&#x7B49;&#x7684; inter-assay &#x7CBE;&#x5EA6;&#x3002;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x542B; 8 &#x6BEB;&#x514B;&#x7684;&#x6069;&#x4E39;&#x897F;&#x916E;&#x6BCF;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x968F;&#x673A;&#x7684;&#x3001; &#x4E24;&#x9636;&#x6BB5;&#x4EA4;&#x53C9;&#x8BBE;&#x8BA1; 25 &#x5065;&#x5EB7;&#x5FD7;&#x613F;&#x8005;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x533B;&#x836F;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x751F;&#x7269;&#x5229;&#x7528;&#x5EA6;&#x3002;&#x51E0;&#x4F55;&#x5E73;&#x5747;&#x6570;&#x548C;&#x5404;&#x81EA; 90%&#x7F6E;&#x4FE1;&#x533A;&#x95F4; (CI) &#x7684;&#x6069;&#x4E39;&#x897F;&#x916E;&#x6D4B;&#x8BD5;/&#x53C2;&#x8003;&#x767E;&#x5206;&#x6BD4;&#x6BD4;&#x7387;&#x662F; 90.15%(81.74 99.44%) &#x4E3A; C(max) &#x548C; AUC(&#x2080;-t) 93.11%(83.01 104.43%)&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x4E2A;&#x6BD4;&#x7387; &#xFF08;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5236;&#x5B9A;&#x53C2;&#x8003;&#x5236;&#x5B9A;) &#x7684; 90%&#x7F6E;&#x4FE1;&#x533A;&#x95F4;&#x4E3A; C(max) &#x548C; AUC(&#x2080;-inf)&#xFF0C;&#x7ED3;&#x675F;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x914D;&#x65B9;&#x662F;&#x7B49;&#x6548;&#x6027;&#x5411;&#x7684;&#x5F15;&#x7528;&#x7387;&#x548C;&#x6069;&#x4E39;&#x897F;&#x916E;&#x5438;&#x6536;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;

&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x654F;&#x611F; LC--&#x8D28;&#x8C31;/&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x5FEB;&#x901F;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x7684;&#x6069;&#x4E39;&#x897F;&#x916E;&#x91CF;&#x5316;&#x548C;&#x5176;&#x76F8;&#x5BF9;&#x751F;&#x7269;&#x5229;&#x7528;&#x5EA6;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;

The validation of a high throughput and specific method using a high-performance liquid chromatography coupled to electrospray (ES+) ionization tandem triple quadrupole mass spectrometric (LC-ESI-MS/MS) method for ondansetron quantification in human plasma is described. Human plasma samples were extracted by liquid-liquid extraction (LLE) using methyl tert-butyl ether and analyzed by LC-ESI-MS/MS. The limit of quantification was 0.2â€‰ng/mL and the method was linear in the range 0.2-60â€‰ng/mL. The intra-assay precisions ranged from 1.6 to 7.7%, while inter-assay precisions ranged from 2.1 to 5.1%. The intra-assay accuracies ranged from 97.5 to 108.2%, and the inter-assay accuracies ranged from 97.3 to 107.0%. The analytical method was applied to evaluate the relative bioavailability of two pharmaceutical formulations containing 8â€‰mg of ondansetron each in 25 healthy volunteers using a randomized, two-period crossover design. The geometric mean and respective 90% confidence interval (CI) of ondansetron test/reference percent ratios were 90.15% (81.74-99.44%) for C(max) and 93.11% (83.01-104.43%) for AUC(â‚€-t). Based on the 90% confidence interval of the individual ratios (test formulation/reference formulation) for C(max) and AUC(â‚€-inf), it was concluded that the test formulation is bioequivalent to the reference one with respect to the rate and extent of absorption of ondansetron.

Development and validation of a rapid and sensitive LC-ESI-MS/MS method for ondansetron quantification in human plasma and its application in comparative bioavailability study.

D&eacute;crit la validation d&#39;un haut d&eacute;bit et la m&eacute;thode sp&eacute;cifique &agrave; l&#39;aide d&#39;une chromatographie en phase liquide haute performance coupl&eacute;e &agrave; &eacute;lectrospray (ES +) d&#39;ionisation en tandem triple quadrip&ocirc;le par spectrom&eacute;trie de masse (LC-ESI-MS/MS) m&eacute;thode pour la quantification de l&#39;ondans&eacute;tron dans le plasma humain. Des &eacute;chantillons de plasma humain ont &eacute;t&eacute; extraites par extraction liquide-liquide (ell) &agrave; l&#39;aide de m&eacute;thyl tert-butyl &eacute;ther et analys&eacute;es par LC-ESI-MS/MS. La limite de quantification &eacute;tait de 0,2 ng/mL et la m&eacute;thode est lin&eacute;aire dans la gamme 0,2 &agrave; 60 ng/mL. Les pr&eacute;cisions intra-essai varies de 1,6 &agrave; 7,7 %, tandis que les pr&eacute;cisions inter-essai varies entre 2,1 et 5,1 %. La pr&eacute;cision intra-essai variait de 97,5 &agrave; 108,2 %, et la pr&eacute;cision inter-essai variait de 97,3 % de 107,0. La m&eacute;thode d&#39;analyse a &eacute;t&eacute; appliqu&eacute;e pour &eacute;valuer la biodisponibilit&eacute; relative de deux formulations pharmaceutiques contenant 8 mg d&#39;ondans&eacute;tron chaque 25 volontaires en bonne sant&eacute; &agrave; l&#39;aide d&#39;une &eacute;tude randomis&eacute;e, deux p&eacute;riodes crois&Theta;. La moyenne g&eacute;om&eacute;trique et respectifs intervalle de confiance de 90 % (IC) des ratios pourcentage de test/r&eacute;f&eacute;rence ondansetron &eacute;taient 90.15 (81,74-99,44 %) pour C(max) et 93.11 (83.01-104.43 %) &agrave; AUC(&#x2080;-t). Bas&eacute; sur l&#39;intervalle de confiance de 90 % des rapports individuels (formulation de formulation/r&eacute;f&eacute;rence test) pour C(max) et AUC(&#x2080;-inf), on a conclu que la formulation du test est bio&eacute;quivalente &agrave; la r&eacute;f&eacute;rence, l&#39;un en ce qui concerne le taux et le degr&eacute; d&#39;absorption de l&#39;ondans&eacute;tron.

D&eacute;veloppement et validation d&#39;une m&eacute;thode rapide et sensible de LC-ESI-MS/MS pour la quantification de l&#39;ondans&eacute;tron dans le plasma humain et de son application dans l&#39;&eacute;tude comparative de biodisponibilit&eacute;.

Die Validierung eines hohen Durchsatz und spezifische Methode mithilfe eine Hochleistungs-Fl&uuml;ssigkeitschromatographie gekoppelt an Elektrospray (ES +) Ionisation tandem triple Quadrupol massenspektrometrischen (LC-ESI-MS/MS) Methode f&uuml;r Ondansetron Quantifizierung in Blutplasma wird beschrieben. Menschlichem Blutplasma-Proben wurden durch Fl&uuml;ssig-Fl&uuml;ssig-Extraktion (LLE) mit Methyl-Tert-butylether extrahiert und analysiert von LC-ESI-MS/MS. Der Bestimmungsgrenze war 0,2 ng/mL und die Methode linear in der Reichweite 0.2-60 ng/mL. Die Intra-Assay-Genauigkeiten lag zwischen 1,6 und 7,7 %, w&auml;hrend die Inter-Assay Genauigkeiten zwischen 2.1 und 5.1 %. Die Intra-Assay-Genauigkeiten reichten von 97,5 auf 108,2 % und die Inter-Assay Genauigkeiten reichten von 97,3 auf 107,0 %. Die analytische Methode wurde angewendet, um die relative Bioverf&uuml;gbarkeit von zwei pharmazeutische Formulierungen mit 8 mg Ondansetron bei 25 gesunden Probanden mit einem randomisierten, zwei-Periode Crossover-Design zu bewerten. Das geometrische Mittel und jeweiligen 90 %-Konfidenzintervall (CI) Ondansetron Test/Referenz-Prozent-Verh&auml;ltnisse waren C(max) (81.74-99.44: 90.15 %) und AUC(&#x2080;-t) (83,01-104.43: 93,11 %). Basierend auf das 90 %-Konfidenzintervall der individuellen Verh&auml;ltnisse (Test Formulierung/Referenz Formulation) f&uuml;r C(max) und AUC(&#x2080;-inf), wurde der Schluss gezogen, dass die Test-Formulierung erbracht, um die auf eine im Hinblick auf die Bewertung und das Ausma&szlig; der Absorption von Ondansetron ist.

Entwicklung und Validierung einer schnellen und sensiblen LC-ESI-MS/MS-Methode f&uuml;r Ondansetron Quantifizierung in Blutplasma und ihrer Anwendung in vergleichende Bioverf&uuml;gbarkeit zu studieren.

Viene descritta la convalida di un metodo specifico utilizzando una cromatografia liquida ad alte prestazioni accoppiato ad elettrospray (ES +) ionizzazione tandem triplo quadrupolo spettrometria di massa (LC-ESI-MS/MS) metodo per la quantificazione di ondansetron nel plasma umano e ad alto rendimento. Campioni di plasma umano sono stati estratti mediante estrazione liquido-liquido (LLE) utilizzando t-butil etere metilico e analizzati da LC-ESI-MS/MS. Il limite di quantificazione era 0,2 ng/mL e il metodo era lineare nell&#39;intervallo 0.2-60 ng/mL. La precisione intra-saggio variava da 1.6 a 7,7%, mentre Inter-precisioni variava da 2.1 a 5,1%. La precisione intra-dosaggio variavano da 97,5 a 108.2%, e l&#39;Inter esattezze variavano da 97,3% 107.0. Il metodo analitico &egrave; stato applicato per valutare la biodisponibilit&agrave; relativa di due formulazioni farmaceutiche contiene 8 mg di ondansetron in 25 volontari sani utilizzando un disegno randomizzato, periodo di due crossover. La media geometrica e rispettivi 90% intervallo di confidenza (CI) di ondansetron rapporti di prova di riferimento per cento erano 90.15% (81.74-99,44%) per C(max) e 93.11% (% 83.01-104.43) per AUC(&#x2080;-t). Basato sull&#39;intervallo di confidenza del 90% dei rapporti individuali (test di riferimento formulazione formulazione) per C(max) e AUC(&#x2080;-inf), si &egrave; concluso che la formulazione di test &egrave; bioequivalente a quella di riferimento per quanto riguarda la frequenza e la misura dell&#39;assorbimento di ondansetron.

Sviluppo e validazione di un metodo rapido e sensibile di LC-ESI-MS/MS per la quantificazione di ondansetron nel plasma umano e la sua applicazione in studi comparativi di biodisponibilit&agrave;.

&#x691C;&#x8A3C;&#x306E;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#xFF08;ES +&#xFF09; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0; &#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EB;&#x56DB;&#x91CD;&#x6975;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790; (LC-ESI MS/MS) &#x6CD5;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB; t-&#x30D6;&#x30C1;&#x30EB; &#x30A8;&#x30FC;&#x30C6;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x6DB2;&#x6DB2;&#x62BD;&#x51FA;&#x306E;&#x6295;&#x7A3F; &#xFF08;LLE) &#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;LC-ESI MS/MS &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x306E;&#x9650;&#x754C;&#x306F; 0.2 ng/mL &#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E; 0.2 60 ng/mL &#x3067;&#x7DDA;&#x5F62;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;1.6 &#x304B;&#x3089; 7.7%, 5.1% &#x304B;&#x3089; 2.1 &#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x771F;&#x5EA6;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x304B;&#x3089; 97.5%&#x3001;108.2 &#x3067;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x771F;&#x5EA6;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x304B;&#x3089; 97.3 107.0% &#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x89E3;&#x6790;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x7121;&#x4F5C;&#x70BA;&#x5316;&#x3001;2 &#x671F;&#x9593;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC; &#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; 25 &#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x30DC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2;&#x3067;&#x306E; 8 mg &#x3092;&#x542B;&#x3080; 2 &#x3064;&#x306E;&#x533B;&#x85AC;&#x88FD;&#x5264;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30D9;&#x30A4;&#x30E9;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5E7E;&#x4F55;&#x5E73;&#x5747;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C; 90% &#x4FE1;&#x983C;&#x533A;&#x9593; (CI) &#x30AA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3; &#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;/&#x53C2;&#x7167;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x6BD4; 90.15% (81.74 99.44%) &#x306E; C(max) &#x3068; AUC(&#x2080;-t) &#x306E; 93.11 &#xFF05; &#xFF08;83.01 104.43 &#xFF05;&#xFF09; &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x6BD4; (&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316;/&#x53C2;&#x7167;&#x88FD;&#x5264;&#xFF09; &#x306E; 90 &#xFF05; &#x81EA;&#x4FE1;&#x9593;&#x9694;&#x306F;&#x3001;C(max) &#x3068; AUC(&#x2080;-inf) &#x306E;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316; bioequivalent &#x7387;&#x3068;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9; 1 &#x3064;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x305F;&#x3002;

&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30D9;&#x30A4;&#x30E9;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x30FB;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6; LC ESI-MS/MS &#x6CD5;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x3002;

&#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xBC0F; &#xBD84;&#xBB34; (ES +) &#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xD0E0;&#xB364; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; quadrupole &#xB300;&#xB7C9; spectrometric (LC-ESI-MS/MS) &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; ondansetron &#xC815;&#xB7C9;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC561;&#xCCB4;-&#xC561;&#xCCB4; &#xCD94;&#xCD9C; (LLE) &#xBA54; &#xD2F8; tert-&#xBD80; &#xD2F8; &#xC5D0;&#xD14C;&#xB974;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD558; &#xACE0; LC ESI MS/MS&#xB85C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC815;&#xB7C9;&#xD654; &#xD55C;&#xACC4; 0.2 ng/mL &#xC774;&#xC5C8;&#xACE0; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xBC94;&#xC704; 0.2 60 ng/Ml&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD615;. &#xB0B4;&#xBD80; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; 1.6&#xC5D0;&#xC11C; 2.1&#xC5D0;&#xC11C; 5.1%&#xC5D0; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD588;&#xB2E4; inter-assay &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; &#xB3D9;&#xC548; 7.7%&#xC5D0; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB0B4;&#xBD80; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; 108.2%, 97.5&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xAC70;&#xB9AC; &#xBC0F; inter-assay &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; 107.0 %97.3&#xC5D0;&#xC11C; ranged. Ondansetron &#xAC01; &#xBB34;&#xC791;&#xC704;, 2 &#xAE30;&#xAC04; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; 25 &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC790;&#xC6D0; &#xBD09;&#xC0AC;&#xC790;&#xC5D0; 8mg&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC81C;&#xC57D; &#xC81C;&#xD615;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; bioavailability&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC29;&#xBC95; &#xC801;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30; &#xD558; &#xD3C9;&#xADE0; &#xBC0F; ondansetron &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;/&#xCC38;&#xC870; % &#xBE44;&#xC728;&#xC758; &#xAC01;&#xAC01; 90% &#xC2E0;&#xB8B0; &#xAD6C;&#xAC04; (CI) 93.11% (83.01-104.43%) auc(&#x2080;-t)&#xC640; C(max) 90.15% (81.74 99.44%) &#xD588;&#xB2E4;. C(max) &#xBC0F; auc(&#x2080;-inf)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBE44;&#xC728; (&#xC2DC;&#xD5D8; &#xBC30;&#xD569;/&#xCC38;&#xC870; &#xBC30;&#xD569;)&#xC758; 90% &#xC2E0;&#xB8B0; &#xAD6C;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;, &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC30;&#xD569; &#xBE44;&#xC728;&#xACFC; ondansetron&#xC758; &#xD761;&#xC218;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD558;&#xC5EC; &#xCC38;&#xC870; &#xD55C; bioequivalent&#xC740; &#xC885;&#xACB0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; ondansetron &#xC815;&#xB7C9;&#xD654; &#xBC0F; &#xBE44;&#xAD50; bioavailability &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; LC ESI MS/MS &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Se describe la validaci&oacute;n de un m&eacute;todo espec&iacute;fico con una cromatograf&iacute;a l&iacute;quida de alto rendimiento juntada al electrospray (ES +) ionizaci&oacute;n t&aacute;ndem triple cuadrupolo espectrometr&iacute;a de masas (LC-ESI-MS/MS) m&eacute;todo cuantificaci&oacute;n de ondansetr&oacute;n en plasma humano y alto rendimiento. Las muestras de plasma humano fueron extra&iacute;das por extracci&oacute;n l&iacute;quido-l&iacute;quido (LLE) utilizando Metil tert-butil &eacute;ter y analizadas por LC-ESI-MS/MS. El l&iacute;mite de cuantificaci&oacute;n fue 0,2 ng/mL y el m&eacute;todo fue lineal en el rango 0.2-60 ng/mL. Las precisiones de intraensayo oscil&oacute; entre 1,6 y 7,7%, mientras que Inter precisiones entre 2.1 y 5.1%. La precisi&oacute;n intraensayo oscil&oacute; 97.5 y 108.2%, y las exactitudes Inter-an&aacute;lisis oscilan 97.3 y 107.0%. Se aplic&oacute; el m&eacute;todo anal&iacute;tico para evaluar la biodisponibilidad relativa de dos formulaciones farmac&eacute;uticas que contiene 8 mg de ondansetr&oacute;n en 25 voluntarios sanos mediante un dise&ntilde;o de cruce al azar, dos per&iacute;odos. La media geom&eacute;trica y respectivos 90% el intervalo de confianza (IC) de cocientes por ciento de la prueba/referencia de ondansetr&oacute;n fueron 90.15% (81.74-99.44%) para C(max) y 93.11% (83.01-104.43%) para AUC(&#x2080;-t). Basado en el intervalo de confianza del 90% de las relaciones individuales (formulaci&oacute;n de formulaci&oacute;n/referencia de prueba) para C(max) y AUC(&#x2080;-inf), se concluy&oacute; que la formulaci&oacute;n de la prueba es bioequivalente a la referencia con respecto a la velocidad y extensi&oacute;n de la absorci&oacute;n de ondansetr&oacute;n.

Desarrollo y validaci&oacute;n de un m&eacute;todo r&aacute;pido y sensible de la LC-ESI-MS/MS para cuantificaci&oacute;n de ondansetr&oacute;n en plasma humano y su aplicaci&oacute;n en el estudio comparativo de la biodisponibilidad.

&#x5728;&#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x5341;&#x5E74;&#x76EE;&#x7779;&#x8F7D;&#x7684;&#x7206;&#x70B8;&#x7684;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x3002;IP6Ks &#x548C;&#x6700;&#x8FD1;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684; PP-IP5Ks &#x65E9;&#x671F;&#x514B;&#x9686;&#x5F97;&#x4EE5;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5DE5;&#x5177;&#x6765;&#x8C03;&#x67E5;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x5174;&#x594B;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#xFF0C;&#x66F4;&#x7B80;&#x5355;&#x548C;&#x66F4;&#x53EF;&#x9760;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x534F;&#x8BAE;&#x9700;&#x8981;&#x5F97;&#x5230;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x80FD;&#x591F;&#x89E3;&#x51B3;&#x548C;&#x91CF;&#x5316;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x51DD;&#x80F6;&#x7535;&#x6CF3; (Losito et al&#xFF0C;2009&#x5E74;) &#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x6539;&#x53D8;&#x4E86;&#x6211;&#x4EEC;&#x6B63;&#x5728;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x7C7B;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5F00;&#x8F9F;&#x65B0;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x89E3;&#x51B3;&#x3001; &#x4FA6;&#x67E5;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x80AF;&#x5B9A;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EE5;&#x83B7;&#x5F97;&#x786E;&#x5207;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x65B0;&#x673A;&#x5236;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x65B9;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684; pyrophosphorylated serines&#x3002;&#x5E0C;&#x671B;&#x8FD9;&#x5C06;&#x4F1A;&#x5E26;&#x6765;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x65B0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4FEE;&#x6539;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x786E;&#x8BA4; pyrophosphorylated serines &#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;

&#x808C;&#x9187; hexakisphosphate &#x6FC0;&#x9176; (IP6Ks) &#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The past ten years have seen a contained explosion of interest in inositol pyrophosphates. The early cloning of the IP6Ks and the more recent identification of the PP-IP5Ks have allowed the development of essential experimental tools to investigate the physiological role of inositol pyrophosphates. However, for this exciting field of research to gain momentum, simpler and more reliable research protocols need to be further developed. The ability to resolve and quantify inositol pyrophosphates using gel electrophoresis (Losito et al., 2009) has dramatically altered the way we are studying this class of molecules, opening new avenues for research. The use of this technology to resolve, detect and characterize inositol pyrophosphates extracted from cells certainly represents one desirable aim. The most crucial objective, however, is to obtain definite proof of the new mechanism of post-translational modification by identifying with biophysical methods the presence in vivo of pyrophosphorylated serines. This will hopefully precipitate the development of new ways to detect this modification, for example through the production of antibodies that specifically recognize pyrophosphorylated serines.

The signaling role of inositol hexakisphosphate kinases (IP6Ks).

Les dix derni&#xE8;res ann&#xE9;es ont vu une explosion confin&#xE9;e de l&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t pour les pyrophosphates inositol. Le clonage pr&#xE9;coce des IP6Ks et l&#x26;#39;identification plus r&#xE9;cente de la PP-IP5Ks ont permis le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;outils essentiels exp&#xE9;rimentales pour &#xE9;tudier le r&#xF4;le physiologique de pyrophosphates inositol. Toutefois, dans ce domaine prometteur de la recherche pour prendre de l&#x26;#39;&#xE9;lan, les protocoles de recherche plus simples et plus fiables doivent &#xEA;tre encore d&#xE9;velopp&#xE9;s. La capacit&#xE9; de r&#xE9;soudre et de quantifier les pyrophosphates inositol en utilisant l&#x26;#39;&#xE9;lectrophor&#xE8;se sur gel (Losito et al., 2009) a consid&#xE9;rablement modifi&#xE9; la fa&#xE7;on dont nous &#xE9;tudions cette classe de mol&#xE9;cules, ouvrant de nouvelles avenues pour la recherche. L&#x26;#39;utilisation de cette technologie pour r&#xE9;soudre, de d&#xE9;tecter et de caract&#xE9;riser les pyrophosphates inositol extraits de cellules repr&#xE9;sente certainement un but souhaitable. L&#x26;#39;objectif le plus crucial, cependant, est d&#x26;#39;obtenir la preuve d&#xE9;finitive du nouveau m&#xE9;canisme de modification post-traductionnelle en s&#x26;#39;identifiant &#xE0; des m&#xE9;thodes biophysiques de la pr&#xE9;sence in vivo de s&#xE9;rines pyrophosphorylated. Nous esp&#xE9;rons que cela pr&#xE9;cipiter le d&#xE9;veloppement de nouveaux moyens de d&#xE9;tecter cette modification, par exemple par la production d&#x26;#39;anticorps qui reconnaissent sp&#xE9;cifiquement les s&#xE9;rines pyrophosphorylated.

Le r&#xF4;le de signalisation des kinases inositol hexakisphosphate (IP6Ks)

Die letzten zehn Jahren haben eine enthaltene Explosion des Interesses an Inosit Pyrophosphates gesehen. Das fr&uuml;he Klonen die IP6Ks und die neuere Bezeichnung des PP-IP5Ks zugelassen, dass die Entwicklung der wesentlichen experimentelle Werkzeuge, die physiologische Rolle von Inosit Pyrophosphates zu untersuchen. Allerdings m&uuml;ssen f&uuml;r dieses spannende Feld der Forschung an Dynamik gewinnen, einfacher und zuverl&auml;ssiger Forschungsprotokollen weiterentwickelt werden. Die M&ouml;glichkeit zum l&ouml;sen und quantifizieren Inosit Pyrophosphates mit Gel-Elektrophorese (Losito Et Al., 2009) hat sich dramatisch ver&auml;ndert die Art und Weise wir diese Klasse von Molek&uuml;len, studieren &ouml;ffnen neue Wege f&uuml;r die Forschung. Der Einsatz dieser Technologie zum Aufl&ouml;sen, erkennen und charakterisieren Inosit Pyrophosphates aus Zellen extrahiert stellt sicherlich eine w&uuml;nschenswerte Ziel dar. Das wichtigste Ziel ist jedoch, definitive Beweis des neuen Mechanismus des post-translationale Modifikation durch Identifikation mit biophysikalischen Methoden das Vorhandensein des Pyrophosphorylated Serinresten in-vivo zu erzielen. Dies wird hoffentlich st&uuml;rzen, die Entwicklung von neuen Wegen, um diese &Auml;nderung, zum Beispiel durch die Produktion von Antik&ouml;rpern zu erkennen, die speziell Pyrophosphorylated Serinresten erkennen.

Die signalisierende Rolle der Inosit Hexakisphosphate Kinasen (IP6Ks).

Ultimi dieci anni hanno visto un&#39;esplosione di contenuti di interesse Pirofosfati di inositolo. La clonazione presto il IP6Ks e il pi&ugrave; recente identificazione di PP-IP5Ks hanno permesso lo sviluppo di strumenti essenziali sperimentali per indagare il ruolo fisiologico di Pirofosfati di inositolo. Tuttavia, per questo interessante campo di ricerca a guadagnare slancio, devono essere ulteriormente sviluppati protocolli di ricerca pi&ugrave; semplice e pi&ugrave; affidabile. La capacit&agrave; di risolvere e quantificare pirofosfati inositolo tramite l&#39;elettroforesi del gel (Losito et al., 2009) ha drasticamente alterato il modo stiamo studiando questa classe di molecole, aprendo nuove vie per la ricerca. L&#39;uso di questa tecnologia per risolvere, individuare e caratterizzare Pirofosfati inositolo estratti dalle cellule rappresenta certamente un obiettivo auspicabile. L&#39;obiettivo pi&ugrave; importante, &egrave; tuttavia, per ottenere la prova definitiva del nuovo meccanismo di modifica alberino-di traduzione identificando con metodi biofisici della presenza in vivo del pyrophosphorylated serines. Speriamo che questo precipita lo sviluppo di nuovi modi per rilevare questa modifica, ad esempio attraverso la produzione di anticorpi che riconoscono specificamente pyrophosphorylated serines.

Il ruolo di segnalazione delle chinasi di inositolo hexakisphosphate (IP6Ks).

&#x904E;&#x53BB;10&#x5E74;&#x9593;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3078;&#x306E;&#x95A2;&#x5FC3;&#x306E;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7206;&#x767A;&#x3092;&#x898B;&#x3066;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; IP6Ks&#x3068;PP-IP5Ks&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x52E2;&#x3044;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30A8;&#x30AD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306A;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306B;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x7814;&#x7A76;&#xB7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B2;&#x30EB;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#xFF08;Losito&#x3089;&#x3001;2009&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3057;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x98DB;&#x8E8D;&#x7684;&#x306B;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x9053;&#x3092;&#x958B;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;1&#x3064;&#x306E;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x3044;&#x76EE;&#x7684;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306F;pyrophosphorylated&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x5165;&#x624B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x304C;&#x3046;&#x307E;&#x304F;&#x3044;&#x3051;&#x3070;&#x7279;&#x306B;pyrophosphorylated&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x6C88;&#x6BBF;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x516D;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#xFF08;IP6Ks&#xFF09;

&#xC9C0;&#xB09C; 10 &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; inositol pyrophosphates&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC758; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD3ED;&#xBC1C;&#xC744; &#xBCF4;&#xC558;&#xB2E4;. &#xCD08;&#xAE30; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB294; IP6Ks &#xBC0F; PP ip5ks&#xC758; &#xCD5C;&#xC2E0; &#xC2DD;&#xBCC4; inositol pyrophosphates&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xD560;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xD765;&#xBBF8; &#xC9C4; &#xC9C4;&#xD55C; &#xCD94;&#xC9C4;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB420; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. Inositol pyrophosphates &#xC824; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95; (Losito et al., 2009)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACC4;&#xB7C9;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC740; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xBC29;, &#xBD84;&#xC790;&#xC758;&#xC774; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xACF5;&#xBD80; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBC14;&#xAFE8;&#xB2E4;. &#xD655;&#xC2E4;&#xD788; &#xD574;&#xACB0;, &#xAC80;&#xC0C9; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xD55C; inositol pyrophosphates&#xC774;&#xC774; &#xAE30;&#xC220; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xBC14;&#xB78C;&#xC9C1;&#xD55C; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294;, pyrophosphorylated serines&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC874;&#xC7AC; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218; &#xC815;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC798;&#xD558;&#xBA74;&#xC774; &#xC218;&#xC815; &#xC608; pyrophosphorylated serines&#xB97C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xCE68;&#xC804; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Inositol hexakisphosphate kinases (IP6Ks)&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xC5ED;&#xD560;.

En los &#xFA;ltimos diez a&#xF1;os ha habido una explosi&#xF3;n de contenidos de inter&#xE9;s en pirofosfatos inositol. La clonaci&#xF3;n de los principios de IP6Ks y la identificaci&#xF3;n m&#xE1;s reciente de los PP-IP5Ks han permitido el desarrollo de herramientas esenciales experimentales para investigar el papel fisiol&#xF3;gico de pirofosfatos de inositol. Sin embargo, para este apasionante campo de la investigaci&#xF3;n a cobrar impulso, m&#xE1;s sencilla y fiable los protocolos de investigaci&#xF3;n deben seguir desarroll&#xE1;ndose. La capacidad de resolver y cuantificar pirofosfatos inositol mediante electroforesis en gel (Losito et al., 2009) ha cambiado radicalmente la forma en que est&#xE1;n estudiando este tipo de mol&#xE9;culas, la apertura de nuevas v&#xED;as para la investigaci&#xF3;n. El uso de esta tecnolog&#xED;a para resolver, detectar y caracterizar pirofosfatos inositol extra&#xED;dos de las c&#xE9;lulas sin duda representa un objetivo deseable. El objetivo m&#xE1;s importante, sin embargo, es obtener una prueba definitiva del nuevo mecanismo de modificaci&#xF3;n post-traduccional mediante la identificaci&#xF3;n con los m&#xE9;todos biof&#xED;sicos de la presencia en vivo de las serinas pyrophosphorylated. Se espera que esto precipitar el desarrollo de nuevas maneras de detectar esta modificaci&#xF3;n, por ejemplo, mediante la producci&#xF3;n de anticuerpos que reconocen espec&#xED;ficamente serinas pyrophosphorylated.

La funci&#xF3;n de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de quinasas hexakisfosfato inositol (IP6Ks)

&#x65E0;&#x673A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0; (&#x805A;-P) &#x7531;&#x521A;&#x94FE;&#x78F7;&#x9178;&#x7EC4;&#x9AD8;&#x80FD;&#x6E90;&#x503A;&#x5238;&#x7531;&#x94FE;&#x63A5;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x5B83;&#x5728;&#x6BCF;&#x4E00;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x5E76;&#x88AB;&#x5377;&#x5165;&#x4E86;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x5B58;&#x50A8;&#x3001; &#x51DD;&#x8840;&#x3001; &#x548C;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#xFF09;&#x3002;&#x5176;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E3B;&#x8981;&#x5728;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7814;&#x7A76;&#x5176;&#x4F59;&#x57FA;&#x672C;&#x4E0A;&#x65E0;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x6709;&#x4EBA;&#x63D0;&#x51FA;&#x8BE5;&#x805A;&#x78F7;&#x4EE3;&#x8C22;&#x76F8;&#x8FDE;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x78F7;&#x9178;&#x7684;&#x808C;&#x9187;&#x7269;&#x79CD; (&#x808C;&#x9187; pyrophosphates)&#x3002;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x662F;&#x5176;&#x4E2D;&#x78F7;&#x9178;&#x7FA4;&#x4F53;&#x4EBA;&#x6570;&#x8D85;&#x8FC7;&#x78B3;&#x539F;&#x5B50;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x591A;&#x6676;&#x7845;-P &#x50CF;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5305;&#x542B;&#x9AD8;&#x80FD;&#x6E90;&#x503A;&#x5238;&#x548C;&#x626E;&#x6F14;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x65E0;&#x6CD5;&#x51FA;&#x793A;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x90FD;&#x65E0;&#x6CD5;&#x5BDF;&#x89C9;&#x7684;&#x4FDD;&#x5229;&#x4F53;&#x80B2;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5206;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7A81;&#x51FA;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5E76;&#x884C;&#x3002;&#x66F4;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; DDP1&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; diadenosine &#x548C; diphosphoinositol phosphohydrolase&#xFF0C;&#x62E5;&#x6709;&#x5F3A;&#x5065;&#x7684;&#x591A;&#x6676;&#x7845; P endopolyphosphohydrolase &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FD9;&#x662F;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Nudix &#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;DIPP1&#xFF0C;DIPP2 &#x548C; DIPP3&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E09;&#x4E2A; Ddp1 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x4E5F;&#x662F;&#x964D;&#x89E3;&#x805A;&#x4F53;&#x80B2;

&#x65E0;&#x673A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0; endopolyphosphatases &#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

Inorganic polyphosphate (poly-P) consists of just a chain of phosphate groups linked by high energy bonds. It is found in every organism and is implicated in a wide variety of cellular processes (e.g. phosphate storage, blood coagulation, and pathogenicity). Its metabolism has been studied mainly in bacteria while remaining largely uncharacterized in eukaryotes. It has recently been suggested that poly-P metabolism is connected to that of highly phosphorylated inositol species (inositol pyrophosphates). Inositol pyrophosphates are molecules in which phosphate groups outnumber carbon atoms. Like poly-P they contain high energy bonds and play important roles in cell signaling. Here, we show that budding yeast mutants unable to produce inositol pyrophosphates have undetectable levels of poly-P. Our results suggest a prominent metabolic parallel between these two highly phosphorylated molecules. More importantly, we demonstrate that DDP1, encoding diadenosine and diphosphoinositol phosphohydrolase, possesses a robust poly-P endopolyphosphohydrolase activity. In addition, we prove that this is an evolutionarily conserved feature because mammalian Nudix hydrolase family members, the three Ddp1 homologues in human cells (DIPP1, DIPP2, and DIPP3), are also capable of degrading poly-P.

Identification of an evolutionarily conserved family of inorganic polyphosphate endopolyphosphatases.

Polyphosphate min&#xE9;ral (poly-P) se compose de seulement une cha&#xEE;ne de groupes phosphate li&#xE9;s par des liaisons &#xE0; haute &#xE9;nergie. Il se trouve dans chaque organisme et est impliqu&#xE9; dans une grande vari&#xE9;t&#xE9; de processus cellulaires (p. ex phosphate de stockage, la coagulation du sang, et la pathog&#xE9;nicit&#xE9;). Son m&#xE9;tabolisme a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9; principalement dans les bact&#xE9;ries tout en restant largement non caract&#xE9;ris&#xE9;s chez les eucaryotes. Il a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;cemment sugg&#xE9;r&#xE9; que le poly-P m&#xE9;tabolisme est li&#xE9; &#xE0; celui de tr&#xE8;s phosphoryl&#xE9;es esp&#xE8;ces inositol (pyrophosphates inositol). Pyrophosphates inositol sont des mol&#xE9;cules dans lesquelles les groupes phosphates sont plus nombreux que des atomes de carbone. Comme poly-P, ils contiennent des liaisons &#xE0; haute &#xE9;nergie et de jouer des r&#xF4;les importants dans la signalisation cellulaire. Ici, nous montrons que les mutants de levure en herbe incapables de produire pyrophosphates inositol ont des niveaux ind&#xE9;tectables de poly-P. Nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent un parall&#xE8;le m&#xE9;tabolique importante entre ces deux mol&#xE9;cules hautement phosphoryl&#xE9;s. Plus important encore, nous d&#xE9;montrons que DDP1, codant phosphohydrolase diad&#xE9;nosine et diphosphoinositol, poss&#xE8;de une activit&#xE9; endopolyphosphohydrolase robuste poly-P. En outre, nous montrons que cette fonctionnalit&#xE9; est &#xE9;volutif conserv&#xE9;e parce mammif&#xE8;res membres de la famille Nudix hydrolase, les trois DDP1 homologues dans les cellules humaines (DIPP1, DIPP2, et DIPP3), sont &#xE9;galement capables de d&#xE9;grader le poly-P.

Identification d&#x26;#39;une famille &#xE9;volutives conserv&#xE9;es de Endopolyphosphatases polyphosphate inorganique

Anorganische Polyphosphate (Poly-P) besteht aus nur einer Kette von Phosphatgruppen, die durch energiereiche Bindungen verkn&uuml;pft. Es findet sich in jedem Organismus und ist in einer Vielzahl zellul&auml;rer Prozesse (z.B. Phosphat Speicher, Blutgerinnung und Pathogenit&auml;t) verwickelt. Seinen Stoffwechsel wurde haupts&auml;chlich in Bakterien bleiben Sie weitgehend in den Eukaryotes uncharakterisiertes untersucht. Vor kurzem wurde vermutet, dass diese Poly-P-Stoffwechsel, die stark Phosphorylierte Inosit-Arten (Inosit Pyrophosphates) angeschlossen ist. Inosit Pyrophosphates sind Molek&uuml;le, die in denen Phosphatgruppen Kohlenstoffatome &uuml;berwiegen. Wie Poly-P sie enthalten energiereiche Bindungen und spielen eine wichtige Rolle in der Zelle zu signalisieren. Hier zeigen wir, dass angehende Hefe-Mutanten, die nicht in der Lage, Inosit Pyrophosphates zu produzieren haben nicht nachweisbar Poly-P. Unsere Ergebnisse legen nahe, eine prominente metabolische Parallele zwischen diese beiden stark phosphorylierte Molek&uuml;le. Noch wichtiger ist, beweisen wir, dass DDP1, Codierung Diadenosine und Diphosphoinositol-Phosphohydrolase, eine robuste Poly-P-Endopolyphosphohydrolase-Aktivit&auml;t besitzt. Dar&uuml;ber hinaus beweisen wir, dass dies eine evolution&auml;r konservierte Feature ist, weil S&auml;ugetier-Nudix Hydrolase Familienangeh&ouml;rigen, die drei Ddp1 Homologen in den menschlichen Zellen (DIPP1, DIPP2 und DIPP3), auch erniedrigender Poly-P. Lage sind

Kennung einer evolution&auml;r konservierte Familie anorganischer Polyphosphate Endopolyphosphatases.

Inorganico polifosfato (poly-P) &egrave; costituito da solo una catena di gruppi fosfato legati da legami ad alta energia. E si trova in ogni organismo ed &egrave; coinvolto in un&#39;ampia variet&agrave; di processi cellulari (ad esempio deposito di fosfato, la coagulazione del sangue e patogenicit&agrave;). Il metabolismo &egrave; stato studiato principalmente nei batteri, pur rimanendo in gran parte atipici negli eucarioti. Recentemente &egrave; stato suggerito che metabolismo poly-P &egrave; collegato a quello di specie altamente fosforilato inositolo (pirofosfati inositolo). Pirofosfati inositolo sono molecole in cui gruppi fosfato superano gli atomi di carbonio. Come poli-P che contengono legami ad alta energia e svolgono un ruolo importante nella segnalazione delle cellule. Qui, ci mostra che in erba mutanti lievito incapace di produrre pirofosfati inositolo hanno livelli rilevabili di poli-P. I nostri risultati suggeriscono un parallelo metabolico importante tra queste due molecole altamente fosforilate. Ancora pi&ugrave; importante, ci dimostrano che DDP1, codifica diadenosine e diphosphoinositol phosphohydrolase, possiede un&#39;attivit&agrave; di endopolyphosphohydrolase robusta poli-P. Inoltre, dimostriamo che questa &egrave; una caratteristica evolutivamente conservata perch&eacute; mammiferi Nudix idrolasi membri della famiglia, i tre omologhi Ddp1 nelle cellule umane (DIPP1, DIPP2 e DIPP3), sono anche in grado di degradare poly-P.

Identificazione di una famiglia evolutivamente conservata di inorganico polifosfato endopolyphosphatases.

&#x7121;&#x6A5F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;&#x30DD;&#x30EA;-P&#xFF09;&#x306F;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9023;&#x7D50;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x57FA;&#x306E;&#x3061;&#x3087;&#x3046;&#x3069;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x8CAF;&#x8535;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x51DD;&#x56FA;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x4E3B;&#x306B;&#x672A;&#x540C;&#x5B9A;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3092;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;-P&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x7A2E;&#xFF08;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF09;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x57FA;&#x306F;&#x3001;&#x70AD;&#x7D20;&#x539F;&#x5B50;&#x6570;&#x3092;&#x4E0A;&#x56DE;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;-P&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;-P&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5E73;&#x884C;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;DDP1&#x306F;&#x3001;diadenosine&#x3068;diphosphoinositol&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30DD;&#x30EA;-P endopolyphosphohydrolase&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;Nudix&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;3 Ddp1&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;DIPP1&#x3001;DIPP2&#x3001;&#x3068;DIPP3&#xFF09;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x5206;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;-P&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x7121;&#x6A5F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;Endopolyphosphatases&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;

&#xBB34;&#xAE30; polyphosphate (&#xD3F4; &#xB9AC;-P) &#xB192;&#xC740; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xCCB4;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; (&#xC608;: &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;, &#xD608;&#xC561; &#xC751;&#xACE0;, &#xACF5;&#xAC04;&#xACFC; pathogenicity)&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC;&#xB294; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC0C8;&#xB86D;&#xAC70;&#xB098; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xADF8; &#xD3F4; &#xB9AC; P &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC885; &#xB192;&#xC740; phosphorylated &#xC774;&#xB178; &#xC2DC; &#xD1A8; (inositol pyrophosphates)&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Inositol pyrophosphates&#xB294; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xADF8;&#xB8F9; &#xC22B; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD0C4;&#xC18C; &#xC6D0;&#xC790; &#xBD84;&#xC790;. &#xD3F4; &#xB9AC;-P &#xCC98;&#xB7FC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; &#xC140; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;. &#xC790;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xADF8; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; inositol pyrophosphates&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD3F4; &#xB9AC;-&#xD53C;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC218;&#xCE58;&#xAC00; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xC774; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB9E4;&#xC6B0; phosphorylated &#xBD84;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xBCD1;&#xB82C;&#xC744; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, DDP1, &#xC778;&#xCF54;&#xB529; diadenosine &#xBC0F; diphosphoinositol phosphohydrolase&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD3F4; &#xB9AC;-P endopolyphosphohydrolase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; Nudix &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;, 3 Ddp1 homologues (DIPP1, DIPP2, &#xBC0F; DIPP3), &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xD3F4; &#xB9AC;. &#xAD74;&#xC695;&#xC758; &#xC99D;&#xBA85;

&#xBB34;&#xAE30; polyphosphate endopolyphosphatases&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;.

Polifosfato inorg&#xE1;nico (poli-P) consta de s&#xF3;lo una cadena de grupos fosfato unidos por enlaces de alta energ&#xED;a. Se encuentra en todos los organismos y est&#xE1; implicado en una amplia variedad de procesos celulares (por ejemplo fosfato de almacenamiento, coagulaci&#xF3;n de la sangre, y la patogenicidad). Su metabolismo se ha estudiado principalmente en las bacterias sin dejar de ser en gran medida no caracterizados en las c&#xE9;lulas eucariotas. Recientemente se ha sugerido que la poli-P metabolismo est&#xE1; conectado a la de las especies altamente inositol fosforilado (pirofosfatos inositol). Pirofosfatos inositol son mol&#xE9;culas en las que los grupos fosfato son m&#xE1;s numerosos que los &#xE1;tomos de carbono. Como poli-P que contienen enlaces de alta energ&#xED;a y desempe&#xF1;an un papel importante en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular. Aqu&#xED;, mostramos que los mutantes de levadura en ciernes que no pueden producir pirofosfatos inositol tener niveles indetectables de poli-P. Nuestros resultados sugieren un paralelismo metab&#xF3;lica m&#xE1;s importante entre estas dos mol&#xE9;culas altamente fosforilados. M&#xE1;s importante a&#xFA;n, nos demuestran que DDP1, que codifica fosfohidrolasa diadenosine y diphosphoinositol, posee una s&#xF3;lida actividad de poli-P endopolyphosphohydrolase. Adem&#xE1;s, se demuestra que esta es una caracter&#xED;stica conservada evolutivamente, ya miembros de la familia de mam&#xED;feros NUDIX hidrolasa, los tres Ddp1 hom&#xF3;logos en las c&#xE9;lulas humanas (DIPP1, DIPP2 y DIPP3), tambi&#xE9;n son capaces de degradar poli-P.

La identificaci&#xF3;n de un familiar conservado evolutivamente de Endopolyphosphatases polifosfato inorg&#xE1;nico

Une rh&eacute;torique puissante quant &agrave; l&#39;importance de l&#39;engagement civique et participation politique des adolescents est fr&eacute;quente dans les soci&eacute;t&eacute;s contemporaines, tandis que les citoyens, les adolescents et les adultes, semblent exprimer un scepticisme croissant et l&#39;ali&eacute;nation au sujet de la politique. M&ecirc;me si ce d&eacute;sengagement est discutable, car il sont a des signes simultan&eacute;es d&#39;une implication croissante dans une vari&eacute;t&eacute; d&#39;activit&eacute;s civiques et politiques &eacute;mergentes et de sens large, nous croyons que les b&eacute;n&eacute;fices de ces exp&eacute;riences devraient &ecirc;tre examin&eacute;s &agrave; l&#39;aide de crit&egrave;res psychologiques fond&eacute;es sur des preuves. Nous reposer sur des contributions classiques de la psychologie d&eacute;veloppementale, de p&eacute;dagogie et de sciences politiques pour d&eacute;finir les crit&egrave;res qui pourraient informer la qualit&eacute; des exp&eacute;riences de participation et ensuite pr&eacute;senter deux &eacute;tudes qui explorent l&#39;&agrave;-propos. &Eacute;tude 1 est une &eacute;tude transversale qui observe que la qualit&eacute; sup&eacute;rieure civique et exp&eacute;riences politiques sont li&eacute;s &agrave; des modes plus complexes de la pens&eacute;e politique. L&#39;&eacute;tude 2, un dessin de deux ondes longitudinal, la qualit&eacute; des exp&eacute;riences de participation est un pr&eacute;dicteur significatif du changement des habitudes des attitudes politiques ; en outre, les r&eacute;sultats appuient l&#39;argument que la participation n&#39;est pas bonne en soi, et que certaines exp&eacute;riences, avec une qualit&eacute; moindre d&eacute;veloppement, pourraient avoir un effet n&eacute;faste sur l&#39;&eacute;volution politique des adolescents.

La qualit&eacute; du d&eacute;veloppement des exp&eacute;riences de participation : au-del&agrave; de la rh&eacute;torique que &laquo; la participation est toujours bonne! &raquo;

&#x5173;&#x4E8E;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x7684;&#x516C;&#x6C11;&#x53C2;&#x4E0E;&#x548C;&#x653F;&#x6CBB;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x7684;&#x5F3A;&#x5927;&#x8A00;&#x8BBA;&#x662F;&#x5171;&#x540C;&#x5728;&#x5F53;&#x4EE3;&#x793E;&#x4F1A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x516C;&#x6C11;&#x3001; &#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x548C;&#x6210;&#x5E74;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x8868;&#x793A;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x6000;&#x7591;&#x548C;&#x5BF9;&#x653F;&#x6CBB;&#x7684;&#x5F02;&#x5316;&#x3002;&#x5373;&#x4F7F;&#x6B64;&#x8131;&#x79BB;&#x63A5;&#x89E6;&#x662F;&#x503C;&#x5F97;&#x5546;&#x69B7;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x7684;&#x8FF9;&#x8C61;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x5730;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5404;&#x79CD;&#x65B0;&#x5174;&#x548C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x516C;&#x6C11;&#x548C;&#x653F;&#x6CBB;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x7684;&#x597D;&#x5904;&#x5E94;&#x4ED4;&#x7EC6;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4F7F;&#x7528;&#x4EE5;&#x8BC1;&#x636E;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x5FC3;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x53D1;&#x5C55;&#x5FC3;&#x7406;&#x5B66;&#x3001; &#x6559;&#x80B2;&#x7406;&#x8BBA;&#x548C;&#x653F;&#x6CBB;&#x79D1;&#x5B66;&#x5B9A;&#x4E49;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x544A;&#x77E5;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E24;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x63A2;&#x8BA8;&#x5176;&#x5145;&#x5206;&#x6027;&#x53E4;&#x5178;&#x4F1A;&#x8D39;&#x4F11;&#x606F;&#x3002;&#x7814;&#x7A76; 1 &#x662F;&#x6307;&#x51FA;&#x516C;&#x6C11;&#xFF0C;&#x66F4;&#x9AD8;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x6A2A;&#x65AD;&#x9762;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x653F;&#x6CBB;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x4E0E;&#x66F4;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x653F;&#x6CBB;&#x601D;&#x8003;&#x6A21;&#x5F0F;&#x76F8;&#x8FDE;&#x3002;&#x5728;&#x7814;&#x7A76; 2&#xFF0C;&#x4E24;&#x6CE2;&#x7684;&#x7EB5;&#x5411;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3001; &#x53C2;&#x4E0E;&#x4F53;&#x9A8C;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x662F;&#x653F;&#x6CBB;&#x6001;&#x5EA6; &#xFF1B; &#x53D8;&#x5316;&#x89C4;&#x5F8B;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x9884;&#x6D4B;&#x6307;&#x6807;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x8BBA;&#x70B9;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x597D;&#x672C;&#x8EAB;&#x548C;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5C55;&#x8D28;&#x91CF;&#x8F83;&#x5DEE;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x635F;&#x4E8E;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x7684;&#x653F;&#x6CBB;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x53D1;&#x5C55;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7ECF;&#x9A8C;&#xFF1A; &#x8A00;&#x8BCD;&quot;&#x53C2;&#x4E0E;&#x6C38;&#x8FDC;&#x662F;&#x597D;!&quot;

A powerful rhetoric regarding the importance of adolescents' civic engagement and political participation is common in contemporary societies, whilst citizens, both adolescent and adults, seem to express a growing scepticism and alienation regarding politics. Even if this disengagement is debatable, as there are simultaneous signs of an increasing involvement in a variety of emerging and broadly-defined civic and political activities, we argue that the benefits of these experiences should be scrutinized using psychological evidence-based criteria. We rest on classical contributions from developmental psychology, educational theory and political science to define criteria that could inform the quality of participation experiences, and then present two studies that explore its adequacy. Study 1 is a cross-sectional study that observes that higher quality civic and political experiences are connected with more complex modes of thinking about politics. In Study 2, a two-wave longitudinal design, the quality of participation experiences is a significant predictor of change patterns of political attitudes; moreover, results support the argument that participation is not good in itself and that some experiences, with lesser developmental quality, might have a detrimental effect on adolescents' political development.

The developmental quality of participation experiences: Beyond the rhetoric that "participation is always good!"

Ein kraftvoller Rhetorik zur Bedeutung von Jugendlichen b&uuml;rgerschaftliches Engagement und politische Partizipation ist h&auml;ufig in modernen Gesellschaften, w&auml;hrend B&uuml;rger, Jugendliche und Erwachsene, scheinen eine wachsende Skepsis und Entfremdung bez&uuml;glich Politik zum Ausdruck zu bringen. Auch wenn dieser R&uuml;ckzug strittig, da es gleichzeitige Anzeichen f&uuml;r eine zunehmende Einbeziehung in eine Vielzahl von Schwellenl&auml;ndern und im weitesten Sinne b&uuml;rgerlichen und politischen Aktivit&auml;ten gibt, behaupten wir, dass die Vorteile dieser Erfahrungen mit psychologische Evidenz-basierten Kriterien gepr&uuml;ft werden sollte. Wir ruhen auf den klassischen Beitr&auml;gen Entwicklungspsychologie, P&auml;dagogik und Politikwissenschaft, Kriterien zu definieren, die die Qualit&auml;t der Beteiligung Erfahrungen zu informieren, und stellen Sie anschlie&szlig;end zwei Studien, die ihre Eignung zu erforschen. Studie 1 ist eine Querschnitt-Studie, die den h&ouml;heren Qualit&auml;t staatsb&uuml;rgerlichen beobachtet und politische Erfahrungen mit komplexeren Modi des Denkens &uuml;ber Politik verbunden sind. In Studie 2, ein zwei-Wellen-L&auml;ngsschnitt-Design, ist die Qualit&auml;t der Beteiligung Erfahrungen einen wesentlichen Pr&auml;diktor f&uuml;r &Auml;nderung Muster der politischen Haltung; Dar&uuml;ber hinaus unterst&uuml;tzen die Ergebnisse das Argument, dass die Teilnahme ist nicht an sich gut und einige Erfahrungen mit geringerer Qualit&auml;t Entwicklungsst&ouml;rungen, Jugendlichen politische Entwicklung nachteilig auswirken k&ouml;nnte.

Die Entwicklungsbiologie Qualit&auml;t der Beteiligung Erfahrungen: jenseits der Rhetorik &quot;Teilnahme ist immer gut&quot;!

Una retorica potente per quanto riguarda l&#39;importanza dell&#39;impegno civico e la partecipazione politica degli adolescenti &egrave; comune nelle societ&agrave; contemporanee, mentre i cittadini, sia adolescenti e adulti, sembrano esprimere un crescente scetticismo e alienazione per quanto riguarda la politica. Anche se questo disimpegno &egrave; discutibile, in quanto vi sono segni simultanei di un crescente coinvolgimento in una variet&agrave; di attivit&agrave; civiche e politiche emergenti e ampiamente definito, ci sostengono che i benefici di queste esperienze dovrebbero essere esaminati utilizzando criteri basati su prove psicologici. Ci riposiamo su classici contributi dalla psicologia dello sviluppo, teoria pedagogica e scienze politiche per definire criteri che potrebbero informare la qualit&agrave; delle esperienze di partecipazione e quindi presentare due studi che esplorano la sua adeguatezza. Studio 1 &egrave; uno studio trasversale che osserva che la pi&ugrave; alta qualit&agrave; civica ed esperienze politiche sono collegate con i modi pi&ugrave; complessi di pensare la politica. In studio 2, un disegno di due onde longitudinale, la qualit&agrave; delle esperienze di partecipazione &egrave; un predittore significativo di modelli di cambiamento degli atteggiamenti politici; Inoltre, i risultati supportano l&#39;argomento che la partecipazione non &egrave; buona in s&eacute; e che alcune esperienze, con minore qualit&agrave; dello sviluppo, potrebbero avere un effetto negativo sullo sviluppo politico degli adolescenti.

La qualit&agrave; dello sviluppo delle esperienze di partecipazione: di l&agrave; della retorica che &quot;partecipazione &egrave; sempre buona!&quot;

&#x9752;&#x5E74;&#x306E;&#x653F;&#x6CBB;&#x53C2;&#x52A0;&#x3068;&#x5E02;&#x6C11;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30EC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x304C;&#x73FE;&#x4EE3;&#x793E;&#x4F1A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x3067;&#x3059;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x5E02;&#x6C11;&#x3001;&#x601D;&#x6625;&#x671F;&#x3084;&#x5927;&#x4EBA;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#x61D0;&#x7591;&#x4E3B;&#x7FA9;&#x3068;&#x653F;&#x6CBB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x758E;&#x5916;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x65B0;&#x8208;&#x3068;&#x5E83;&#x7FA9;&#x306E;&#x5E02;&#x6C11;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3084;&#x653F;&#x6CBB;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3067;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x306E;&#x5146;&#x5019;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x64A4;&#x9000;&#x306F;&#x30C7;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D6;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x5FC3;&#x7406;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x57FA;&#x6E96;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D4C;&#x9A13;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x7CBE;&#x67FB;&#x3059;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x5FC3;&#x7406;&#x5B66;&#x3001;&#x6559;&#x80B2;&#x8AD6;&#x3001;&#x653F;&#x6CBB;&#x53C2;&#x52A0;&#x306E;&#x7D4C;&#x9A13;&#x306E;&#x8CEA;&#x3092;&#x901A;&#x77E5;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x59A5;&#x5F53;&#x6027;&#x3092;&#x63A2;&#x691C;&#x3059;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x6761;&#x4EF6;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x79D1;&#x5B66;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x8CA2;&#x732E;&#x306B;&#x6B8B;&#x308A;&#x3002;&#x7814;&#x7A76; 1 &#x305D;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B7;&#x30D3;&#x30C3;&#x30AF;&#x89B3;&#x5BDF;&#x6A2A;&#x65AD;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3088;&#x308A;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x653F;&#x6CBB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x8003;&#x3048;&#x65B9;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x653F;&#x6CBB;&#x7D4C;&#x9A13;&#x304C;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7814;&#x7A76; 2, 2 &#x6CE2;&#x306E;&#x7E26;&#x65AD;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x53C2;&#x52A0;&#x7D4C;&#x9A13;&#x306E;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x653F;&#x6CBB;&#x7684;&#x614B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3067;&#x3059;;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x5F15;&#x6570;&#x3078;&#x306E;&#x53C2;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x81EA;&#x4F53;&#x3067;&#x826F;&#x3044;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x4F4E;&#x3044;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3068;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D4C;&#x9A13;&#x304C;&#x9752;&#x5E74;&#x306E;&#x653F;&#x6CBB;&#x7684;&#x306A;&#x767A;&#x5C55;&#x306B;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x53C2;&#x52A0;&#x7D4C;&#x9A13;&#x306E;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x9054;:&#x300C;&#x53C2;&#x52A0;&#x5E38;&#x306B;&#x826F;&#x3044;&#x3060; &#xFF01;&#x300D;&#x306E;&#x30EC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x3066;

&#xCCAD;&#xC18C;&#xB144;&#xC758; &#xC0AC;&#xD68C; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC640; &#xC815;&#xCE58; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC218;&#xC0AC;&#xD559;&#xC740; &#xD604;&#xB300; &#xC0AC;&#xD68C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2DC;&#xBBFC;, &#xCCAD;&#xC18C;&#xB144; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778;, &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; &#xBB34;&#xC2E0;&#xB860;&#xACFC; &#xC815;&#xCE58;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xC18C;&#xC678;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;. &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xC774; &#xD574;&#xBC29; &#xB17C;&#xC7C1;&#xC758; &#xC5EC;&#xC9C0;&#xAC00;, &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD765; &#xACE0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC815;&#xC758; &#xC2DC;&#xBBFC; &#xC815;&#xCE58; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC99D;&#xAC00; &#xAD00;&#xB828;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xD45C;&#xC2DC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC758; &#xD61C;&#xD0DD; &#xC2EC;&#xB9AC;&#xC801; &#xC99D;&#xAC70;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xAE30;&#xC900;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD574;&#xC57C; &#xC8FC;&#xC7A5; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACE0;&#xC804; &#xAE30;&#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC2EC;&#xB9AC;&#xD559;, &#xAD50;&#xC721; &#xC774;&#xB860; &#xBC0F; &#xC815;&#xCE58; &#xACFC;&#xD559; &#xCC38;&#xC5EC; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;&#xC744; &#xC54C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC218; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB450; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xD0C0;&#xB2F9;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xC5D0; &#xD734;&#xC2DD;. &#xC5F0;&#xAD6C; 1&#xC740; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xD488;&#xC9C8;&#xC744; &#xC2DC;&#xBBFC; &#xAD00;&#xCC30; &#xD6A1;&#xB2E8;&#xBA74; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC815;&#xCE58; &#xACBD;&#xD5D8; &#xC815;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xAC01;&#xC758; &#xB354; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xAD6C; 2, 2 &#xD30C; &#xC885; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xCC38;&#xC5EC; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;&#xC774;; &#xC815;&#xCE58;&#xC801; &#xD0DC;&#xB3C4;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC608;&#xCE21; &#xC778;&#xC790; &#xB610;&#xD55C;, &#xACB0;&#xACFC; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xC778;&#xC218; &#xCC38;&#xC5EC; &#xC790;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC88B;&#xC740; &#xACE0; &#xB35C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD488;&#xC9C8;&#xB85C; &#xC77C;&#xBD80; &#xACBD;&#xD5D8; &#xCCAD;&#xC18C;&#xB144; &#xC815;&#xCE58; &#xBC1C;&#xC804;&#xC5D0; &#xD574;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCC38;&#xC5EC; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD488;&#xC9C8;: &#xCC38;&#xC5EC;&#xB294; &quot;&#xD56D;&#xC0C1; &#xC88B;&#xC740;!&quot; &#xC218;&#xC0AC;&#xD559;&#xC744; &#xB118;&#xC5B4;

Una poderosa ret&oacute;rica sobre la importancia de la participaci&oacute;n ciudadana y participaci&oacute;n pol&iacute;tica de adolescentes es com&uacute;n en las sociedades contempor&aacute;neas, mientras que los ciudadanos, tanto adolescentes como adultos, parecen expresar un creciente escepticismo y alienaci&oacute;n con respecto a la pol&iacute;tica. Aunque esta separaci&oacute;n es discutible, ya que hay signos simult&aacute;neas de una participaci&oacute;n creciente en una variedad de actividades c&iacute;vicas y pol&iacute;ticas emergentes y ampliamente definida, argumentamos que los beneficios de estas experiencias deben examinarse utilizando criterios basados en pruebas psicol&oacute;gicas. Descansamos en cl&aacute;sicas contribuciones de la psicolog&iacute;a evolutiva, pedagog&iacute;a y ciencias pol&iacute;ticas para definir los criterios que podr&iacute;an informar la calidad de las experiencias de participaci&oacute;n y luego presentar dos estudios que exploran su adecuaci&oacute;n. Estudio 1 es un estudio transversal que observa que la m&aacute;s alta calidad c&iacute;vica y pol&iacute;ticas experiencias conectadas con modos m&aacute;s complejos de pensar sobre la pol&iacute;tica. En el estudio 2, un dise&ntilde;o longitudinal de dos ondas, la calidad de las experiencias de participaci&oacute;n es un predictor significativo de patrones de cambio de las actitudes pol&iacute;ticas; por otra parte, los resultados apoyan el argumento de que la participaci&oacute;n no es bueno en s&iacute; mismo y que algunas experiencias, con menor calidad del desarrollo, podr&iacute;an tener un efecto perjudicial sobre el desarrollo pol&iacute;tico de adolescentes.

La calidad del desarrollo de experiencias de participaci&oacute;n: m&aacute;s all&aacute; de la ret&oacute;rica que &quot;participaci&oacute;n siempre es bueno!&quot;

Con i suoi legami fosfato ad alta energia, l&#39;adenosina trifosfato (ATP) &egrave; il vettore principale di energia intracellulare. Funziona anche nelle vie pi&ugrave; segnalazione, come un donatore di fosfato o un precursore per l&#39;adenosina monofosfato ciclico. Mostriamo qui che pirofosfati inositolo partecipano al controllo della concentrazione intracellulare di ATP. Lieviti privo di pirofosfati inositolo hanno mitocondri disfunzionali ma, paradossalmente, contengono quattro volte pi&ugrave; ATP a causa della maggiore glicolisi. Dimostriamo che pirofosfati inositolo controllano l&#39;attivit&agrave; del fattore di trascrizione glicolitico principali GCR1. Cos&igrave;, pirofosfati inositolo regolano la concentrazione di ATP alterando il rapporto metabolico glicolitico/mitocondriale. Riprogrammazione metabolica attraverso Pirofosfati di inositolo &egrave; un meccanismo evolutivo conservato che &egrave; conservato anche nei sistemi dei mammiferi.

Influenza di pirofosfati inositolo sulle dinamiche di energia cellulare.

&#x305D;&#x306E;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x7D50;&#x5408;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E09;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;ATP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x62C5;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x4F9B;&#x4E0E;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x74B0;&#x72B6;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E00;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;ATP&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9175;&#x6BCD;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x9006;&#x8AAC;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;ATP&#x306A;&#x3069;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x89E3;&#x7CD6;&#x306E;4&#x56DE;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x304C;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x7CD6;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;GCR1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;/&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7387;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;ATP&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x3082;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

&#x5176;&#x9AD8;&#x80FD;&#x78F7;&#x9178;&#x503A;&#x5238;&#x4E0E;&#x817A;&#x82F7;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178; &#xFF08;ATP&#xFF09; &#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F7D;&#x4F53;&#x3002;&#x5B83;&#x8FD8;&#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x6700;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x78F7;&#x9178;&#x6350;&#x52A9;&#x6216;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x7684;&#x524D;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x9175;&#x6BCD;&#x83CC;&#x6709;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03;&#xFF0C;&#x4F46;&#x77DB;&#x76FE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x589E;&#x52A0;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x5305;&#x542B;&#x56DB;&#x500D; ATP&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x63A7;&#x5236; GCR1 &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x89C4;&#x7BA1;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6539;&#x53D8;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;/&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7387;&#x3002;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x901A;&#x8FC7;&#x4EE3;&#x8C22;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x662F;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x4FDD;&#x7559;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;

&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80FD;&#x91CF;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

With its high-energy phosphate bonds, adenosine triphosphate (ATP) is the main intracellular energy carrier. It also functions in most signaling pathways, as a phosphate donor or a precursor for cyclic adenosine monophosphate. We show here that inositol pyrophosphates participate in the control of intracellular ATP concentration. Yeasts devoid of inositol pyrophosphates have dysfunctional mitochondria but, paradoxically, contain four times as much ATP because of increased glycolysis. We demonstrate that inositol pyrophosphates control the activity of the major glycolytic transcription factor GCR1. Thus, inositol pyrophosphates regulate ATP concentration by altering the glycolytic/mitochondrial metabolic ratio. Metabolic reprogramming through inositol pyrophosphates is an evolutionary conserved mechanism that is also preserved in mammalian systems.

Influence of inositol pyrophosphates on cellular energy dynamics.

Avec ses liaisons phosphate haute &#xE9;nergie, l&#x26;#39;ad&#xE9;nosine triphosphate (ATP) est le vecteur d&#x26;#39;&#xE9;nergie principale intracellulaire. Il fonctionne &#xE9;galement dans la plupart des voies de signalisation, en tant que donneur de phosphate ou d&#x26;#39;un pr&#xE9;curseur pour l&#x26;#39;ad&#xE9;nosine monophosphate cyclique. Nous montrons ici que les pyrophosphates inositol participer au contr&#xF4;le de la concentration intracellulaire d&#x26;#39;ATP. Les levures d&#xE9;pourvues de pyrophosphates inositol ont dysfonctionnel mitochondries, mais, paradoxalement, contiennent quatre fois plus &#xE0; cause de l&#x26;#39;ATP augmentation de la glycolyse. Nous d&#xE9;montrons que les pyrophosphates inositol contr&#xF4;ler l&#x26;#39;activit&#xE9; de l&#x26;#39;GCR1 majeure de transcription glycolytique facteur. Ainsi, les pyrophosphates inositol r&#xE9;guler la concentration en ATP en modifiant le rapport m&#xE9;tabolique glycolytique / mitochondriale. M&#xE9;tabolique reprogrammation par pyrophosphates inositol est un m&#xE9;canisme &#xE9;volutif conserv&#xE9; qui est &#xE9;galement conserv&#xE9;e dans les syst&#xE8;mes mammaliens.

Influence de pyrophosphates inositol sur Cellular Dynamics &#xE9;nergie

Mit seinen energiereichen Phosphat-Anleihen ist Adenosintriphosphat (ATP) die wichtigste intrazellul&auml;re Energietr&auml;ger. Es funktioniert auch in den meisten Signalwege, als ein Phosphat-Spender oder ein Vorl&auml;ufer f&uuml;r zyklisches Adenosinmonophosphat. Hier zeigen wir, dass sich die Kontrolle der intrazellul&auml;re ATP-Konzentration Inosit Pyrophosphates an. Hefen Inosit Pyrophosphates haben gest&ouml;rte Mitochondrien, paradoxerweise allerdings vier Mal so viel ATP wegen erh&ouml;hter Glykolyse. Wir zeigen, dass Inosit Pyrophosphates die Aktivit&auml;t des gro&szlig;en glykolytischen Transkriptionsfaktors GCR1 zu steuern. So Regeln Inosit Pyrophosphates ATP-Konzentration durch &Auml;ndern des glykolytischen/mitochondriale metabolischen Verh&auml;ltnis. Metabolische Neuprogrammierung durch Inosit Pyrophosphates ist ein evolution&auml;r konservierte Mechanismus, der auch im S&auml;ugetier-Systeme beibehalten wird.

Einfluss der Inosit Pyrophosphates auf zellul&auml;re Energie Dynamik.

&#xACE0; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xCC44;&#xAD8C; &#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; &#xC0BC;&#xC778;&#xC0B0; (ATP)&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; monophosphate&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xC870;&#xB85C; &#xC11C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC791;&#xB3D9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xAE30; inositol pyrophosphates &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; ATP &#xB18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;. Inositol pyrophosphates &#xC5C6;&#xB294; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xB97C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xC5ED;&#xC124;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC99D;&#xAC00; &#xBD84;&#xD574; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; 4 &#xBC30;&#xB098; &#xB9CE;&#xC740; ATP&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;. Inositol pyrophosphates &#xC8FC;&#xC694; glycolytic &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; gcr1&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2DC;&#xC5F0;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC774;&#xB178; &#xC2DC; &#xD1A8; pyrophosphates &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; glycolytic/&#xC544; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xC5EC; ATP &#xB18D;&#xB3C4; &#xC870;&#xC808; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Inositol pyrophosphates&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB300;&#xC0AC; &#xC7AC;&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC874; &#xB610;&#xD55C; &#xC9C4;&#xD654; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0; &#xC774;&#xB178; &#xC2DC; &#xD1A8; pyrophosphates&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Con sus enlaces fosfato de alta energ&#xED;a, trifosfato de adenosina (ATP) es el principal portador de energ&#xED;a intracelular. Tambi&#xE9;n funciona en la mayor&#xED;a de las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, como un donador de fosfato o un precursor de monofosfato de adenosina c&#xED;clico. Mostramos aqu&#xED; que pirofosfatos inositol participar en el control de la concentraci&#xF3;n intracelular de ATP. Las levaduras que carecen de pirofosfatos de inositol tienen mitocondrias disfuncionales, pero, parad&#xF3;jicamente, contienen cuatro veces m&#xE1;s ATP por la gluc&#xF3;lisis aumentado. Se demuestra que pirofosfatos inositol controlar la actividad de la mayor GCR1 glicol&#xED;tica factor de transcripci&#xF3;n. As&#xED;, pirofosfatos inositol regular la concentraci&#xF3;n de ATP mediante la alteraci&#xF3;n de la relaci&#xF3;n metab&#xF3;lica glicol&#xED;tica / mitocondrial. Metab&#xF3;lico reprogramaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de pirofosfatos de inositol es un mecanismo evolutivo conservada que tambi&#xE9;n se conserva en sistemas de mam&#xED;feros.

Influencia de los pirofosfatos de inositol en la din&#xE1;mica celular de la Energ&#xED;a

&#x7B80;&#x4ECB;&#xFF1A; &#x5FC3;&#x7387;&#x6062;&#x590D;&#xFF0C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E3A;&#x5728;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x540E;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E00;&#x5206;&#x949F;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x5FC3;&#x7387;&#x662F;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6307;&#x6807;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x662F;&#x6025;&#x6027;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B;&#x540E;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x9884;&#x6D4B;&#x6307;&#x6807;&#x5DF2;&#x627E;&#x5230;&#x3002;&#x8FD0;&#x52A8;&#x8BAD;&#x7EC3;&#x540E;&#x6025;&#x6027;&#x51A0;&#x5FC3;&#x75C5;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x77E5;&#x540D;&#x7684;&#x597D;&#x5904;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5FC3;&#x80BA;&#x5065;&#x8EAB;&#x3001; &#x53EF;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x5371;&#x9669;&#x56E0;&#x7D20;&#x548C;&#x9884;&#x540E;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x8FD0;&#x52A8;&#x57F9;&#x8BAD;&#x672C;&#x8EAB;&#x3001; &#x63A7;&#x5236;&#x836F;&#x7269;&#x548C;&#x996E;&#x98DF;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5FC3;&#x7387;&#x6062;&#x590D;&#x4E2D;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x6587;&#x732E;&#x4E2D;&#x6CA1;&#x6709;&#x968F;&#x673A;&#x5BF9;&#x7167;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x65E8;&#x5728;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8FD0;&#x52A8;&#x8BAD;&#x7EC3;&#x5BF9;&#x5FC3;&#x810F;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x529F;&#x80FD;&#x6062;&#x590D;&#x4ECE;&#x6025;&#x6027;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B;&#x7684;&#x51A0;&#x72B6;&#x52A8;&#x8109;&#x75BE;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A; &#x540E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x6025;&#x6027;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B;&#x7684;&#x4E09;&#x5341;&#x516B;&#x4E2A;&#x60A3;&#x8005;&#x53C2;&#x52A0;&#x4E86;&#x8FD9;&#x79CD;&#x524D;&#x77BB;&#x6027;&#x7684;&#x968F;&#x673A;&#x5BF9;&#x7167;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x3002;&#x75C5;&#x4EBA;&#x88AB;&#x968F;&#x673A;&#x5206;&#x4E3A;&#x4E24;&#x7EC4;&#xFF1A; &#x57F9;&#x8BAD;&#x6216;&#x63A7;&#x5236;&#x884C;&#x4F7F;&#x3002;&#x884C;&#x4F7F;&#x96C6;&#x56E2;&#x53C2;&#x52A0;&#x4E86;&#x5728; 8 &#x5468;&#x7684;&#x6709;&#x6C27;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x63A7;&#x4EF6;&#x6536;&#x5230;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x533B;&#x7597;&#x62A4;&#x7406;&#x548C;&#x91C7;&#x53D6;&#x540E;&#x7EED;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;&#x5728;&#x4F11;&#x606F;&#x548C;&#x5CF0;&#x503C;&#x884C;&#x4F7F; &#xFF08;&#x5FC3;&#x7387;&#x3001; &#x6536;&#x7F29;&#x538B;&#x548C;&#x8212;&#x5F20;&#x8840;&#x538B;&#x3001; &#x548C;&#x7387;&#x538B;&#x529B;&#x4EA7;&#x54C1;&#xFF09;&#x3001; &#x81B3;&#x98DF;&#x6444;&#x5165;&#x91CF;&#x3001; &#x5FC3;&#x80BA;&#x5065;&#x8EAB;&#x548C;&#x5FC3;&#x7387;&#x6062;&#x590D;&#x7684;&#x8840;&#x6D41;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x53D8;&#x5316;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF1A; &#x836F;&#x7269;&#x548C;&#x996E;&#x98DF;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x5728;&#x7814;&#x7A76;&#x671F;&#x95F4;&#x3002;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x8BAD;&#x7EC3;&#x7EC4;&#x9759;&#x606F;&#x8840;&#x6D41;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x9759;&#x606F;&#x5FC3;&#x7387; &#xFF08;&#x4ECE; 68.0&plusmn;9.2 &#x5230; 62.6&plusmn;8.7bpm&#xFF0C;p = 0.030) &#x548C;&#x6536;&#x7F29;&#x671F;&#x8840;&#x538B; &#xFF08;&#x4ECE; 135&plusmn;7.1 &#x5230; 125.6&plusmn;11.3mmHg&#xFF0C;p = 0.012)&#xFF0C;&#x5FC3;&#x80BA;&#x5065;&#x8EAB; &#xFF08;&#x4ECE; 30.8&plusmn;7.8 &#x5230; 33.9&plusmn;8.3ml/min/kg&#xFF0C;p = 0.016)&#xFF0C;&#x548C;&#x5FC3;&#x7387;&#x6062;&#x590D; &#xFF08;&#x4ECE; 20&plusmn;6 &#x5230; 24&plusmn;5bpm&#xFF0C;p = 0.007)&#x3002;&#x5728;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D1;&#x751F;&#x91CD;&#x5927;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; &#x8FD0;&#x52A8;&#x8BAD;&#x7EC3;&#x6539;&#x5584;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5FC3;&#x7387;&#x6062;&#x590D;&#xFF0C;&#x9759;&#x606F;&#x5FC3;&#x7387;&#x548C;&#x8840;&#x538B;&#xFF0C;&#x996E;&#x98DF;&#x6216;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x6CA1;&#x6709;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;

&#x6025;&#x6027;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B;&#x540E;&#x8FD0;&#x52A8;&#x8BAD;&#x7EC3;&#x589E;&#x5F3A;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x529F;&#x80FD;&#xFF1A; &#x968F;&#x673A;&#x5BF9;&#x7167;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

INTRODUCTION: Heart rate recovery, defined as the fall in heart rate during the first minute after exercise, is an indicator of autonomic function, and has been found to be an independent predictor of mortality after acute myocardial infarction. Exercise training has several well-known benefits in terms of cardiorespiratory fitness, modifiable cardiovascular risk factors and prognosis after acute coronary events. However, there are no randomized controlled studies in the literature evaluating the effects of exercise training per se, controlling for changes in medication and diet, on heart rate recovery. Thus, this study aims to assess the effects of exercise training on autonomic function in coronary artery disease patients recovering from acute myocardial infarction. METHODS: Thirty-eight patients following a first acute myocardial infarction participated in this prospective randomized clinical trial. Patients were randomized into two groups: exercise training or control. The exercise group participated in an 8-week aerobic exercise program, while the control received standard medical care and follow-up. Changes in hemodynamics at rest and at peak exercise (heart rate, systolic and diastolic blood pressure, and rate pressure product), dietary intake, cardiorespiratory fitness, and heart rate recovery were assessed. RESULTS: Medication and diet remained unchanged in both groups during the study period. The exercise-training group improved resting hemodynamics, particularly resting heart rate (from 68.0Â±9.2 to 62.6Â±8.7bpm, p=0.030) and systolic blood pressure (from 135Â±7.1 to 125.6Â±11.3mmHg, p=0.012), cardiorespiratory fitness (from 30.8Â±7.8 to 33.9Â±8.3ml/min/kg, p=0.016), and heart rate recovery (from 20Â±6 to 24Â±5bpm, p=0.007). No significant changes were observed in the control group. CONCLUSIONS: Exercise training improved autonomic function, assessed by heart rate recovery, resting heart rate and systolic blood pressure, in the absence of changes in diet or medication.

Exercise training enhances autonomic function after acute myocardial infarction: A randomized controlled study.

INTRODUCTION : fr&eacute;quence cardiaque de r&eacute;cup&eacute;ration, d&eacute;finie comme la chute de fr&eacute;quence cardiaque au cours de la premi&egrave;re minute apr&egrave;s l&#39;effort, est un indicateur de fonction autonome et s&#39;est av&eacute;r&eacute;e pour &ecirc;tre un facteur pr&eacute;dictif ind&eacute;pendant de mortalit&eacute; apr&egrave;s l&#39;infarctus aigu du myocarde. Entra&icirc;nement physique pr&eacute;sente plusieurs avantages bien connus sur le plan cardiorespiratoire, facteurs de risque cardiovasculaires modifiables et pronostic apr&egrave;s des &eacute;v&eacute;nements coronariens aigus. Toutefois, il n&#39;y a pas d&#39;&eacute;tudes contr&ocirc;l&eacute;es randomis&eacute;es dans la litt&eacute;rature &eacute;valuant les effets de l&#39;exercice en soi de formation, de contr&ocirc;le des modifications dans les m&eacute;dicaments et l&#39;alimentation, sur la fr&eacute;quence cardiaque de r&eacute;cup&eacute;ration. Ainsi, cette &eacute;tude vise &agrave; &eacute;valuer les effets de l&#39;exercice sur la fonction autonome chez les patients atteints de maladie coronarienne remet d&#39;infarctus aigu du myocarde. M&eacute;thodes : Trente-huit patients suite &agrave; un premier infarctus aigu du myocarde ont particip&eacute; &agrave; cet essai clinique prospectif randomis&eacute;. Les patients ont &eacute;t&eacute; randomis&eacute;s en deux groupes : exercer le contr&ocirc;le ou la formation. Le groupe d&#39;exercice a particip&eacute; &agrave; un programme d&#39;exercices a&eacute;robies de 8 semaines, tandis que le contr&ocirc;le a re&ccedil;u de suivi et soins m&eacute;dicaux standard. Variations h&eacute;modynamiques au repos et &agrave; l&#39;effort maximal (fr&eacute;quence cardiaque, pression art&eacute;rielle systolique et diastolique et produit la pression taux), apport alimentaire, cardiorespiratoire et la fr&eacute;quence cardiaque de r&eacute;cup&eacute;ration ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;es. R&Eacute;SULTATS : Alimentation et les m&eacute;dicaments restent inchang&eacute;es dans les deux groupes au cours de la p&eacute;riode d&#39;&eacute;tude. Le groupe exercice-formation am&eacute;lior&eacute; h&eacute;modynamique de repos, en particulier la fr&eacute;quence cardiaque au repos (de 68.0&plusmn;9.2 &agrave; 62.6&plusmn;8.7bpm, p = 0,030) et la pression art&eacute;rielle systolique (de 135&plusmn;7.1 &agrave; 125.6&plusmn;11.3mmHg, p = 0,012), cardiorespiratoire (de 30.8&plusmn;7.8 &agrave; 33.9&plusmn;8.3ml/min/kg, p = 0,016) et la r&eacute;cup&eacute;ration de la fr&eacute;quence cardiaque (de 20&plusmn;6 &agrave; 24&plusmn;5bpm, p = 0,007). Pas de changements significatifs ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s dans le groupe t&eacute;moin. CONCLUSIONS : Entra&icirc;nement physique am&eacute;lior&eacute; la fonction autonome, &eacute;valu&eacute;e par la r&eacute;cup&eacute;ration de fr&eacute;quence cardiaque, fr&eacute;quence cardiaque et tension art&eacute;rielle systolique, de repos en l&#39;absence de changements dans le r&eacute;gime alimentaire ou de m&eacute;dicaments.

L&#39;entra&icirc;nement physique am&eacute;liore la fonction autonome apr&egrave;s infarctus du myocarde aigu: A randomized controlled study.

Einf&uuml;hrung: Herzfrequenz-Recovery, definiert als der R&uuml;ckgang der Herzfrequenz w&auml;hrend der ersten Minute nach dem Training, ist ein Indikator f&uuml;r autonome Funktion und ein unabh&auml;ngiger Pr&auml;diktor f&uuml;r die Mortalit&auml;t nach akutem Myokardinfarkt werden gefunden wurde. Trainings hat mehrere bekannte Vorteile in Bezug auf Kardio-Fitness, ver&auml;nderbare Kardiovaskul&auml;re Risikofaktoren und Prognose nach akute koronare Ereignisse. Allerdings gibt es keine randomisierten kontrollierten Studien in der Literatur, die Bewertung der Auswirkungen der &Uuml;bung training schlechthin, &Auml;nderungen der Medikation und Ern&auml;hrung, auf die Herzfrequenz Recovery controlling. Also will diese Studie die Auswirkungen Ihres Trainings auf autonome Funktion bei Patienten mit koronarer Wiederherstellen nach akutem Myokardinfarkt. Methoden: Achtunddrei&szlig;ig Patienten nach einen ersten akuten Myokardinfarkt in dieser prospektiven randomisierten klinischen Studie teilgenommen. Patienten wurden randomisiert in zwei Gruppen: Ausbildung oder Kontrolle auszu&uuml;ben. Die &Uuml;bung-Gruppe beteiligte sich an ein aerobic-&Uuml;bung 8-Wochen-Programm, w&auml;hrend das Steuerelement Norm medizinische Versorgung und Follow-up erhalten. &Auml;nderungen in der H&auml;modynamik in Ruhe und am Gipfel-&Uuml;bung (Herzfrequenz, systolische und diastolische Blutdruck und Satz-Druck-Produkt), Nahrungsaufnahme, Kardio-Fitness und Herzfrequenz Erholung wurden beurteilt. Ergebnisse: Medikamente und Ern&auml;hrung blieb unver&auml;ndert in beiden Gruppen w&auml;hrend des Studiums. Die Trainings Gruppe verbesserte H&auml;modynamik ruhelosigkeit, besonders Stoffwechselrate im Herzen (aus 68.0&plusmn;9.2, 62.6&plusmn;8.7bpm, p = 0.030) und Systolischer Blutdruck (aus 135&plusmn;7.1, 125.6&plusmn;11.3mmHg, p = 0,012), Kardio-Fitness (aus 30.8&plusmn;7.8, 33.9&plusmn;8.3ml/min/kg, p = 0,016), und Herzfrequenz-Recovery (aus 20&plusmn;6, 24&plusmn;5bpm, p = 0,007). In der Kontrollgruppe wurden keine wesentlichen Ver&auml;nderungen beobachtet. Schlussfolgerungen: Trainings verbessert autonome Funktion, beurteilt durch Herzfrequenz Erholung, Ruhe Puls und Systolischer Blutdruck, keine Ver&auml;nderungen in der Ern&auml;hrung oder Medikamente.

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Cristina Azevedo

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