organotypic-collagen-i-assay-malleable-platform-to-assess-cell

Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context

Cell migration is fundamental to many aspects of biology, including development, wound healing, the cellular responses of the immune system, and ...

University of Glasgow

Pten &#x57FA;&#x56E0;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6545;&#x969C;&#x5728; ras (Ha)-&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x76AE;&#x80A4;&#x764C;&#x53D8;&#x7684;&#x4EA4;&#x914D;&#x5230;&#x8868;&#x793A; RU486 &#x8BF1;&#x5BFC; cre (K14.creP) &#x7684; HK1.ras &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x5916;&#x663E;&#x5B50; 5 floxed-pten &#x57FA;&#x56E0; (Delta5PTEN) &#x5C0F;&#x9F20;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;K14.cre/PTEN(flx/flx) &#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE; pten &#x57FA;&#x56E0;&#x5931;&#x6D3B;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8868;&#x76AE;&#x589E;&#x751F;/&#x89D2;&#x5316;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x548C;&#x65B0;&#x578B; 12-O-&#x4F5B;-13-&#x918B;&#x9178; (TPA)-&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E73;&#x5934;&#x72B6;&#xFF0C;&#x800C; HK1.ras/K14.cre/PTEN(flx/flx) &#x7EC4;&#x7FA4;&#x663E;&#x793A;&#x7531;&#x4E8E;&#x589E;&#x6548;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; AKT &#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x8282;&#x6FC0;&#x9176; (ERK) &#x6D77;&#x62D4; papillomatogenesis &#x7A81;&#x53D1;&#x6027;&#x3002;Delta5PTEN &#x4E73;&#x5934;&#x72B6;&#x9AD8; 5-&#x6EB4;-4-deoxyuridine &#x6807;&#x7B7E;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x5931;&#x8BEF;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x664B;&#x5347;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x63D0;&#x5347;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x662F;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; HK1.ras/ERK &#x548C; Delta5PTEN &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; AKT &#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x800C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; E2 &#x8868;&#x8FBE;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; PTEN &#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x81EA;&#x53D1; HK1.ras/Delta5PTEN &#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x6362;&#x662F;&#x7F55;&#x89C1;&#xFF0C;&#x800C; TPA &#x4FC3;&#x8FDB;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9AD8;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x8F6C;&#x6362;&#x3002;&#x4E0E;&#x6240;&#x6709;&#x4EE5;&#x524D; HK1.ras &#x764C;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7C7B; TPA &#x8BF1;&#x53D1;&#x764C;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x89D2;&#x86CB;&#x767D; K1 &#x975E;&#x5178;&#x578B;&#x4FDD;&#x7559;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F; K13&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x8FD8;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; c-ras(Ha) &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; TPA &#x8BF1;&#x5BFC; K14.cre/PTEN(flx/flx) &#x4E73;&#x5934;&#x72B6;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x6807;&#x8BB0;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; PTEN null&#xFF0C;ras (Ha) &#x6C34;&#x5E73;-&#x76F8;&#x5173;&#x603B; ERK &#x86CB;&#x767D;&#x6210;&#x4E3A;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x800C;&#x5728;&#x540E;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x4E73;&#x5934;&#x72B6;&#x56DE;&#x5230;&#x6C34;&#x5E73;&#x5347;&#x9AD8;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; ERK &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1&#x3001; &#x65C1;&#x8FB9;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; E2 &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;TPA &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x764C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x7684; papillomatogenesis&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4; PTEN &#x635F;&#x5931;&#x4FC3;&#x8FDB; ras(Ha) &#x5F00;&#x59CB;&#x901A;&#x8FC7; AKT &#x6D3B;&#x6027;&#x53CA;&#x534F;&#x540C;&#x6545;&#x969C;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x9AD8;&#x7A0B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; ras (Ha)-TPA &#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x7684;&#x72EC;&#x7279; K1/K13 &#x6982;&#x51B5; Delta5PTEN &#x76F8;&#x5173;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; E2 &#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53CA;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; ERK &#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5; PTEN &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F; ras(Ha) &#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x5F15;&#x8D77;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x6F5C;&#x529B;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;

&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; PTEN &#x635F;&#x5931;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x62C9;&#x8428;&#x4ECB;&#x5BFC; papillomatogenesis &#x901A;&#x8FC7; AKT &#x6D3B;&#x6027;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x653E;&#x677E;&#x7BA1;&#x5236;&#x7684;&#x53CC;&#x4E0A;&#x8C03;&#x4F46;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x6536;&#x76CA;&#x901A;&#x8FC7; pten &#x57FA;&#x56E0;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x8DEF;&#x5F84;&#x3002;

PTEN tumor suppressor gene failure in ras(Ha)-activated skin carcinogenesis was investigated by mating exon 5 floxed-PTEN (Delta5PTEN) mice to HK1.ras mice that expressed a RU486-inducible cre recombinase (K14.creP). PTEN inactivation in K14.cre/PTEN(flx/flx) keratinocytes resulted in epidermal hyperplasia/hyperkeratosis and novel 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)-promoted papillomas, whereas HK1.ras/K14.cre/PTEN(flx/flx) cohorts displayed a rapid onset of papillomatogenesis due to a synergism of increased AKT activity and extracellular signal-regulated kinase (ERK) elevation. High 5-bromo-4-deoxyuridine labeling in Delta5PTEN papillomas showed that a second promotion mechanism centered on failures in cell cycle control. Elevated cyclin D1 was associated with both HK1.ras/ERK- and Delta5PTEN-mediated AKT signaling, whereas cyclin E2 overexpression seemed dependent on PTEN loss. Spontaneous HK1.ras/Delta5PTEN malignant conversion was rare, whereas TPA promotion resulted in conversion with high frequency. On comparison with all previous HK1.ras carcinomas, such TPA-induced carcinomas expressed atypical retention of keratin K1 and lack of K13, a unique marker profile exhibited by TPA-induced K14.cre/PTEN(flx/flx) papillomas that also lacked endogenous c-ras(Ha) activation. Moreover, in all PTEN-null tumors, levels of ras(Ha)-associated total ERK protein became reduced, whereas phosphorylated ERK and cyclin D1 were lowered in late-stage papillomas returning to elevated levels, alongside increased cyclin E2 expression, in TPA-derived carcinomas. Thus, during early papillomatogenesis, PTEN loss promotes ras(Ha) initiation via elevation of AKT activity and synergistic failures in cyclin regulation. However, in progression, reduced ras(Ha)-associated ERK protein and activity, increased Delta5PTEN-associated cyclin E2 expression, and unique K1/K13 profiles following TPA treatment suggest that PTEN loss, rather than ras(Ha) activation, gives rise to a population of cells with greater malignant potential.

PTEN loss promotes rasHa-mediated papillomatogenesis via dual up-regulation of AKT activity and cell cycle deregulation but malignant conversion proceeds via PTEN-associated pathways.

D&eacute;faillance g&egrave;ne PTEN tumor suppressor ras (Ha)-peau activ&eacute;s canc&eacute;rogen&egrave;se a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e par l&#39;accouplement de souris (Delta5PTEN) floxed-PTEN exon 5 HK1.ras chez la souris qui expriment une recombinase RU486 inductible de cre (K14.creP). Inactivation du g&egrave;ne PTEN dans les k&eacute;ratinocytes K14.cre/PTEN(flx/flx) a donn&eacute; lieu &agrave; une hyperplasie &eacute;pidermique/hyperk&eacute;ratose et Roman 12-O-t&eacute;trad&eacute;canoylphorbol-13-ac&eacute;tate (TPA)-promotion des papillomes, tandis que les cohortes HK1.ras/K14.cre/PTEN(flx/flx) affichent une apparition rapide de papillomatogenesis gr&acirc;ce &agrave; une synergie de l&#39;augmentation de l&#39;activit&eacute; AKT et l&#39;&eacute;l&eacute;vation de la kinase de signal-r&eacute;gl&eacute;e extracellulaire (ERK). Haut 5-bromo-4-d&eacute;oxyuridine &eacute;tiquetage dans les papillomes Delta5PTEN ont montr&eacute; qu&#39;un second m&eacute;canisme de promotion centr&eacute; sur les d&eacute;faillances dans le contr&ocirc;le du cycle cellulaire. &Eacute;lev&eacute;es de cycline D1 &eacute;tait associ&eacute; &agrave; deux signalisation AKT par HK1.ras/ERK et Delta5PTEN, tandis que cycline E2 surexpression semblait d&eacute;pend de la perte du g&egrave;ne PTEN. Conversion maligne spontan&eacute;e de HK1.ras/Delta5PTEN &eacute;tait rare, consid&eacute;rant que la promotion de TPA a donn&eacute; lieu &agrave; la conversion de haute fr&eacute;quence. La comparaison avec tous les carcinomes de HK1.ras pr&eacute;c&eacute;dentes, ces carcinomes induite par le TPA exprim&eacute; r&eacute;tention atypique de k&eacute;ratine K1 et le manque de K13, un profil de marqueur unique expos&eacute; par K14.cre/PTEN(flx/flx) induite par le TPA papillomes qui manquaient &eacute;galement l&#39;activation endog&egrave;ne c-ras(Ha). En outre, dans toutes les tumeurs PTEN null, niveaux de ras (Ha)-associ&eacute; prot&eacute;ines totales de ERK a &eacute;t&eacute; r&eacute;duite, alors que ERK phosphoryl&eacute; et cycline D1 ont &eacute;t&eacute; r&eacute;duits au papillomes de stade revenant &agrave; des niveaux &eacute;lev&eacute;s, c&ocirc;t&eacute; augment&eacute; cycline expression E2, carcinomes d&eacute;riv&eacute; de TPA. Ainsi, au cours de la papillomatogenesis d&eacute;but, perte PTEN favorise ras(Ha) initiation par l&#39;&eacute;l&eacute;vation de l&#39;activit&eacute; de l&#39;AKT et &eacute;checs synergiques dans R&egrave;glement cycline. Cependant, dans la progression, r&eacute;duit ras (Ha)-prot&eacute;ine associ&eacute;e de ERK et activit&eacute;, accrue associ&eacute;e &agrave; Delta5PTEN cycline E2 expression et uniques K1/K13 profils apr&egrave;s un traitement de TPA sugg&egrave;rent que perte PTEN, plut&ocirc;t que l&#39;activation de ras(Ha), donne naissance &agrave; une population de cellules avec un plus grand potentiel malin.

Favorise la perte PTEN papillomatogenesis rasHa-m&eacute;di&eacute;e par l&#39;interm&eacute;diaire de double r&eacute;gulation de l&#39;activit&eacute; de l&#39;AKT et d&eacute;r&eacute;gulation du cycle cellulaire, mais maligne conversion proc&egrave;de par PTEN associ&eacute;es aux voies.

PTEN Tumorsuppressor Gen Scheitern in Ras (Ha)-aktivierten Haut Karzinogenese wurde untersucht durch Paarung Exon 5 Floxed-PTEN (Delta5PTEN) M&auml;use auf HK1.ras-M&auml;use, die eine RU486-inducible Cre Recombinase (K14.creP) ausgedr&uuml;ckt. PTEN Inaktivierung in K14.cre/PTEN(flx/flx) Keratinozyten f&uuml;hrte epidermalen Hyperplasie/Hyperkeratose und neuartige 12-O-Tetradecanoylphorbol-13-Acetat (TPA)-Papillome, gef&ouml;rdert, w&auml;hrend HK1.ras/K14.cre/PTEN(flx/flx) Kohorten einen raschen Beginn der Papillomatogenesis durch ein Synergismus der erh&ouml;hten Aktivit&auml;t der AKT und extrazellul&auml;re Signal-regulierte Kinase (ERK) H&ouml;he angezeigt. Hohe 5-Bromo-4-Deoxyuridine Kennzeichnung in Delta5PTEN Papillome haben gezeigt, dass einen zweiten F&ouml;rderung-Mechanismus auf Fehler im Zellzyklus-Steuerelement zentriert. Erh&ouml;hten cyclin D1 wurde mit beide HK1.ras/ERK - und Delta5PTEN-vermittelter AKT signalisieren, w&auml;hrend cyclin E2-&Uuml;berexpression PTEN Verlust abh&auml;ngig schien. Spontane HK1.ras/Delta5PTEN maligne Umwandlung war selten, w&auml;hrend Konvertierung mit Hochfrequenz TPA F&ouml;rderung gef&uuml;hrt. Im Vergleich mit allen vorherigen HK1.ras Karzinomen ausgedr&uuml;ckt solche TPA-induzierte Karzinome atypische Speicherung von Keratin K1 und mangelnde K13, eine eindeutige Markierung Profil ausgestellt von TPA-induzierte K14.cre/PTEN(flx/flx) Papillome, die auch die Aktivierung des endogenen c-ras(Ha) fehlten. Dar&uuml;ber hinaus in allen PTEN-Null Tumoren, Ebenen der Ras (Ha)-assoziierten Gesamtprotein ERK wurde reduziert, w&auml;hrend phosphorylierten ERK und cyclin D1 im Sp&auml;tstadium Papillome wieder auf erh&ouml;hte Niveaus gesenkt wurden, neben erh&ouml;ht cyclin E2 Ausdruck im TPA abgeleiteten Karzinomen. Somit f&ouml;rdert PTEN Verlust w&auml;hrend der fr&uuml;hen Papillomatogenesis, ras(Ha) Einleitung &uuml;ber H&ouml;he von AKT-Aktivit&auml;t und synergistische Versagen cyclin Verordnung. Jedoch im Fortschreiten, verringert Ras (Ha)-assoziierten ERK-Protein und Aktivit&auml;t, erh&ouml;hte Delta5PTEN-assoziierte cyclin E2 Expression und einzigartige K1/K13-Profilen nach TPA Behandlung vorschlagen, dass PTEN Verlust, sondern als ras(Ha)-Aktivierung, gibt Anlass zu einer Bev&ouml;lkerung der Zellen mit gr&ouml;&szlig;eren malignes Potenzial.

PTEN Verlust f&ouml;rdert RasHa-vermittelte Papillomatogenesis &uuml;ber dual-bis-Verordnung der AKT-Aktivit&auml;t und der Zellzyklus Deregulierung, aber b&ouml;sartige Umwandlung geht &uuml;ber PTEN-assoziierte Wege.

PTEN tumore soppressore gene guasto in ras (Ha)-attivato pelle cancerogenesi &egrave; stato studiato da corrispondersi topi floxed-PTEN (Delta5PTEN) esone 5 a HK1.ras topi che espresse una ricombinasi cre RU486-inducibile (K14.creP). Inattivazione di PTEN nei cheratinociti K14.cre/PTEN(flx/flx) ha provocato iperplasia epidermica/ipercheratosi e romanzo 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetato (TPA)-promosso papillomi, considerando che HK1.ras/K14.cre/PTEN(flx/flx) coorti visualizzata una rapida insorgenza di papillomatogenesis a causa di una sinergia di maggiore attivit&agrave; AKT e di elevazione chinasi segnale-regolata extracellulare (ERK). Alta 5-bromo-4-deossiuridina etichettatura in papillomi Delta5PTEN ha dimostrato che un secondo meccanismo di promozione centrato sui fallimenti nel controllo del ciclo cellulare. Elevata cyclin D1 &egrave; stato associato con entrambi signaling AKT HK1.ras/ERK - e Delta5PTEN-mediata, considerando che la sovraespressione di cyclin E2 sembrava dipendono dalla perdita PTEN. Spontanea conversione maligna HK1.ras/Delta5PTEN era raro, considerando che la promozione di TPA ha portato nella conversione con alta frequenza. Il confronto con tutti i carcinomi HK1.ras precedenti, tali carcinomi TPA-indotta espresso atipica ritenzione di cheratina K1 e la mancanza di K13, un profilo unico marcatore esibito da papillomi K14.cre/PTEN(flx/flx) TPA-indotta che mancava anche attivazione endogena c-ras(Ha). Inoltre, in tutti i tumori PTEN-null, livelli di ras (Ha)-associata proteina ERK totale &egrave; diventato ridotto, mentre ERK fosforilato e cyclin D1 sono stati abbassati in ritardo-fase papillomi tornando a livelli elevati, accanto aumentato cyclin E2 espressione, nei carcinomi derivati da TPA. Cos&igrave;, durante i primi papillomatogenesis, perdita PTEN promuove ras(Ha) iniziazione mediante elevazione dell&#39;attivit&agrave; AKT e sinergiche fallimenti nel regolamento cyclin. Tuttavia, in progressione, ridotto ras (Ha)-associata proteina ERK e attivit&agrave;, maggiore Delta5PTEN-associated cyclin E2 espressione e unici K1/K13 profili dopo il trattamento TPA suggeriscono che perdita PTEN, piuttosto che l&#39;attivazione ras(Ha), d&agrave; origine ad una popolazione di cellule con maggiore potenziale maligno.

Perdita PTEN promuove papillomatogenesis rasHa-mediata via dual up-regolazione di attivit&agrave; AKT e deregolazione del ciclo cellulare ma conversione maligna procede tramite vie PTEN-associati.

PTEN &#x816B;&#x760D;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x969C;&#x5BB3;&#x3067; ras (Ha)-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x76AE;&#x819A;&#x767A;&#x764C;&#x30A8;&#x30AF;&#x30BD;&#x30F3; 5 floxed-PTEN (Delta5PTEN) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; RU486 &#x8A98;&#x5C0E; cre recombinase &#xFF08;K14.creP&#xFF09; &#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F; HK1.ras &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x4EA4;&#x914D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;K14.cre/PTEN(flx/flx) &#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CE; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; PTEN &#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x904E;&#x89D2;&#x5316;&#x75C7;&#x4E0A;&#x76AE;&#x904E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x65B0;&#x898F; 12-O-&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C7;&#x30AB;&#x30CE;&#x30A4;&#x30EB;&#x30DB;&#x30EB; &#x30DC;&#x30FC;&#x30EB; 13-&#x30A2;&#x30BB;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C8; (TPA)-HK1.ras/K14.cre/PTEN(flx/flx) &#x306E;&#x30B3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30C8;&#x8868;&#x793A; AKT &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;ERK&#xFF09; &#x306E;&#x6A19;&#x9AD8;&#x306E;&#x76F8;&#x4E57;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x308B; papillomatogenesis &#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x4E73;&#x982D;&#x816B;&#x3001;&#x6607;&#x683C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8; 5-&#x30D6;&#x30ED;&#x30E2;-4-&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; &#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; Delta5PTEN &#x4E73;&#x982D;&#x816B;&#x3067;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3068;&#x3057;&#x305F; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x63A8;&#x9032;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9AD8;&#x67B6;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; D1 &#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE; E2 &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x640D; PTEN &#x4F9D;&#x5B58;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x4E21;&#x65B9; HK1.ras/ERK &#x3068; Delta5PTEN &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; AKT &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x81EA;&#x767A; HK1.ras/Delta5PTEN &#x60AA;&#x6027;&#x5909;&#x63DB;&#x304C;&#x73CD;&#x3057;&#x304B;&#x3063;&#x305F; TPA &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x5909;&#x63DB;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x4EE5;&#x524D; HK1.ras &#x764C;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; TPA &#x8A98;&#x767A;&#x764C;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3; K1 &#x306E;&#x975E;&#x5B9A;&#x578B;&#x306E;&#x4FDD;&#x6301;&#x3068; K13, &#x5185;&#x56E0;&#x6027; c-ras(Ha) &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3082;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x305F; TPA &#x8A98;&#x767A; K14.cre/PTEN(flx/flx) &#x4E73;&#x982D;&#x816B;&#x3067;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; PTEN null &#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306F;&#x3001;ras (Ha) &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;-&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x5408;&#x8A08; ERK &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; ERK &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; D1 &#x9AD8;&#x67B6;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x623B;&#x308B;&#x5F8C;&#x671F;&#x4E73;&#x982D;&#x816B;&#x306B;&#x5F15;&#x304D;&#x4E0B;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x6A2A; TPA &#x7531;&#x6765;&#x764C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E; E2 &#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E; papillomatogenesis &#x4E2D;&#x306B; PTEN &#x640D;&#x5931; ras(Ha) &#x958B;&#x59CB;&#x6A19;&#x9AD8; AKT &#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x76F8;&#x4E57;&#x7684;&#x5931;&#x6557;&#x306E;&#x7D4C;&#x7531;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x9032;&#x884C;&#x3067; ras (Ha) &#x524A;&#x6E1B;-&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066; ERK &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3001;&#x5897;&#x52A0; Delta5PTEN &#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; E2 &#x5F0F;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; TPA &#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A; K1/K13 &#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x305D;&#x306E; PTEN &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;ras(Ha) &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x60AA;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Papillomatogenesis &#x30E9;&#x30B7;&#x30E3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E; AKT &#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x898F;&#x5236;&#x7DE9;&#x548C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; PTEN &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x60AA;&#x6027;&#x5909;&#x63DB; PTEN &#x95A2;&#x9023;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x9032;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PTEN &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2E4;&#xD328; ras (Ha)-&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xD53C;&#xBD80; &#xBC1C;&#xC554; RU486 &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; cre recombinase (K14.creP) &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; HK1.ras &#xC950; exon 5 floxed-PTEN (Delta5PTEN) &#xC950;&#xB97C; &#xAD50;&#xBC30; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD45C; &#xD53C; &#xC99D;&#xC2DD;/hyperkeratosis &#xC18C;&#xC124; 12-O-tetradecanoylphorbol-13-&#xC544;&#xC138;&#xD14C;&#xC774;&#xD2B8; (TPA)&#xC5D0;&#xC11C; K14.cre/PTEN(flx/flx) keratinocytes&#xC5D0;&#xC11C; PTEN &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xACB0;&#xACFC;-HK1.ras/K14.cre/PTEN(flx/flx) &#xB3D9;&#xB8CC; &#xD45C;&#xC2DC; AKT &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (ERK) &#xC0C1;&#xC2B9;&#xC758; &#xC131;&#xBD84; &#xC778; papillomatogenesis&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC885;, &#xC2B9;&#xC9C4;. &#xB192;&#xC740; 5-&#xBE0C;&#xB85C; &#xBAA8;-4-deoxyuridine &#xB77C;&#xBCA8; Delta5PTEN &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xD328;&#xB97C; &#xC911;&#xC2EC;&#xC73C;&#xB85C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD504;&#xB85C; &#xBAA8;&#xC158; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xB192;&#xC740; cyclin D1 cyclin e 2 overexpression &#xB4EF; PTEN &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; HK1.ras/ERK Delta5PTEN &#xC911;&#xC7AC; AKT &#xC2E0;&#xD638; &#xBAA8;&#xB450;&#xC640; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. TPA &#xD504;&#xB85C; &#xBAA8;&#xC158; &#xACB0;&#xACFC; &#xB192;&#xC740; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC790;&#xC5F0; HK1.ras/Delta5PTEN &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658; &#xB4DC;&#xBB38; &#xC77C; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC774;&#xC804; HK1.ras carcinomas&#xC640; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0; TPA &#xC720;&#xB3C4; carcinomas &#xAC19;&#xC740; &#xAC01; &#xC9C8; K1 &#xBE44;&#xC815;&#xD615; &#xBCF4;&#xC874; K13, TPA &#xC720;&#xB3C4; K14.cre/PTEN(flx/flx) &#xC885; &#xC0DD; c-ras(Ha) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xD55C; &#xBD80;&#xC871; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC744; &#xD45C;&#xD604;. &#xB610;&#xD55C;, &#xBAA8;&#xB4E0; null&#xC774; PTEN &#xC885;&#xC591;, ras (Ha)&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C;-&#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xCD1D; ERK &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xAC10;&#xC18C;, phosphorylated ERK &#xBC0F; cyclin d1&#xC744; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3CC;&#xC544;&#xC624;&#xB294; &#xB2A6;&#xC740; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC885;&#xC5D0; &#xD558;&#xD5A5; &#xC870;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC18;&#xBA74; &#xD568;&#xAED8; carcinomas TPA &#xD30C;&#xC0DD;&#xC5D0;&#xC11C; cyclin e 2 &#xC2DD;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xCD08;&#xAE30; papillomatogenesis &#xB3D9;&#xC548; PTEN &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; AKT &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; cyclin &#xADDC;&#xC81C; &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0; &#xC2E4;&#xD328;&#xC758; &#xD574;&#xBC1C; &#xACE0;&#xB3C4; &#xD1B5;&#xD574; ras(Ha) &#xAC1C;&#xC2DC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC9C4;&#xD589;, ras (Ha) &#xAC10;&#xC18C;-&#xC99D;&#xAC00; Delta5PTEN &#xAD00;&#xB828; cyclin e 2 &#xC2DD;, &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; ERK &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; TPA &#xCE58;&#xB8CC; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; K1/K13 &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xC81C;&#xC548; ras(Ha) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xC624;&#xD788;&#xB824; &#xADF8; PTEN &#xC190;&#xC2E4;&#xC774; &#xD070; &#xC545;&#xC131; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC140;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xC2B9;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PTEN &#xC190;&#xC2E4; AKT &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xADDC;&#xC81C; &#xC644;&#xD654;&#xC758; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; papillomatogenesis rasHa &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658; PTEN &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Falta de gen PTEN tumor supresor en ras (Ha)-carcinog&eacute;nesis de la piel activa fue investigada por apareamiento ratones HK1.ras ratones que expresan un RU486-inducible Recombinasa cre (K14.creP) (Delta5PTEN) floxed-PTEN ex&oacute;n 5. Inactivaci&oacute;n de PTEN en queratinocitos K14.cre/PTEN(flx/flx) dio lugar a hiperplasia epid&eacute;rmica/hiperqueratosis y novela 12-O-Tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA)-promovido papilomas, mientras que HK1.ras/K14.cre/PTEN(flx/flx) cohortes muestran un inicio r&aacute;pido de papillomatogenesis debido a una sinergia de aumento de la actividad AKT y elevaci&oacute;n de la quinasa regulada por se&ntilde;ales extracelulares (ERK). 5-Bromo-4-desoxiuridina alta etiquetado en Delta5PTEN papilomas demostr&oacute; un segundo mecanismo de promoci&oacute;n centrado en fallas en el control del ciclo celular. Ciclina D1 elevado se asoci&oacute; con ambos se&ntilde;alizaci&oacute;n AKT HK1.ras/ERK - y Delta5PTEN-mediada, mientras que la sobreexpresi&oacute;n de ciclina E2 parec&iacute;a depende de la p&eacute;rdida PTEN. Espont&aacute;nea HK1.ras/Delta5PTEN malo conversi&oacute;n era raro, Considerando que la promoci&oacute;n de la TPA dio lugar a la conversi&oacute;n con alta frecuencia. En comparaci&oacute;n con anteriores todos los carcinomas HK1.ras, estos carcinomas inducida por TPA expresan retenci&oacute;n anormal de queratina K1 y falta de K13, un perfil &uacute;nico marcador expuesto por K14.cre/PTEN(flx/flx) inducida por TPA papilomas que tambi&eacute;n carec&iacute;an de activaci&oacute;n end&oacute;gena c-ras(Ha). Por otra parte, en todos los tumores PTEN null, niveles de ras (Ha)-asociada prote&iacute;na ERK total se convirti&oacute; en reducida, mientras que ERK fosforilado y ciclina D1 fueron bajados en etapa tard&iacute;a papilomas regresar a niveles elevados, aument&oacute; junto a la expresi&oacute;n de ciclina E2, en carcinomas derivados de TPA. As&iacute;, durante la papillomatogenesis temprana, p&eacute;rdida PTEN promueve ras(Ha) iniciaci&oacute;n mediante la elevaci&oacute;n de la actividad AKT y sin&eacute;rgicas fallas en la regulaci&oacute;n de la ciclina. Sin embargo, en progresi&oacute;n, reducido ras (Ha)-prote&iacute;na asociada de ERK y actividad, mayor expresi&oacute;n de ciclina E2 asociada a Delta5PTEN y perfiles de K1/K13 &uacute;nicos despu&eacute;s del tratamiento de la TPA sugieren esa p&eacute;rdida PTEN, en lugar de activaci&oacute;n de la ras(Ha), da lugar a una poblaci&oacute;n de c&eacute;lulas con mayor potencial maligno.

P&eacute;rdida PTEN promueve mediada por rasHa papillomatogenesis v&iacute;a doble para arriba-regulaci&oacute;n de la actividad AKT y desregulaci&oacute;n del ciclo celular, pero mala conversi&oacute;n procede mediante v&iacute;as asociadas PTEN.

&#x8C03;&#x67E5;&#x591A;&#x7EA7;&#x76AE;&#x80A4;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x534F;&#x540C;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;RU486 &#x8BF1;&#x5BFC; cre/lox &#x7CFB;&#x7EDF;&#x88AB;&#x91C7;&#x7528; ablate Pten &#x529F;&#x80FD; (K14.cre/Delta5Pten flx) &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8868;&#x76AE;&#x8868;&#x793A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; Fos (HK1&#x3002;Fos&#xFF09;&#x3002;RU486 &#x6CBB;&#x7597; HK1&#x3002;Fos/Delta5Pten flx &#x5C0F;&#x9F20;&#x5C55;&#x793A;&#x589E;&#x751F;&#x3001; &#x89D2;&#x5316;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x548C;&#x8FDB;&#x6B65;&#x5230;&#x9AD8;&#x5206;&#x5316; keratoacanthomas&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x764C;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x9AD8; p53 &#x548C; p21 WAF &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x9AD8;&#x67B6;&#x7684;&#x5730;&#x56FE;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; E2 &#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x589E;&#x6B96;&#x4E73;&#x5934;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; AKT &#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x66F4;&#x9AD8;&#x5C42;&#x6B21;&#x7684; GSK3beta &#x706D;&#x6D3B;&#x81F4;&#x65B0;&#x9896;&#x7684; p53/p21 WAF &#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#xFF0C;&#x968F;&#x540E;&#x505C;&#x6B62;&#x6269;&#x6563;&#x5E76;&#x52A0;&#x901F;&#x5206;&#x5316;&#x7ED9; keratoacanthomas &#x6807;&#x5FD7;&#x89D2;&#x3002;&#x5BF9;&#x6B64; GSK3beta &#x89E6;&#x53D1;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x96C6;&#x4E2D;&#x4E8E;&#x589E;&#x52A0;&#x57FA;&#x5E95;&#x56FE;&#x5C42;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE; p53 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x589E;&#x52A0;&#x5728;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x51CF;&#x5C11;&#x6FC0;&#x6D3B; akt &#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x91CA;&#x653E; p21 WAF&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x56FE;&#x5C42;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x7279;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D; K1 &#x4E00;&#x8D77;&#x8FC7;&#x65E9;&#x7684;&#x5FAE;&#x4E1D;&#x548C; loricrin &#x8868;&#x8FBE;&#x8868;&#x8FBE;&#x6240;&#x793A;&#x52A0;&#x901F;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;Fos &#x589E;&#x6548;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E; Pten &#x635F;&#x5931;&#x5F15;&#x8D77;&#x826F;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D; GSK3beta &#x8BF1;&#x5BFC; p53/p21 WAF &#x8868;&#x8FBE;&#x4E0D;&#x65AD;&#x5207;&#x6362; AKT &#x5173;&#x8054;&#x6269;&#x6563;&#x5230;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5047;&#x5B9A;&#x7684;&#x8865;&#x507F;&#x673A;&#x5236;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38; p53 &#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; p21 WAF &#x5173;&#x952E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3001; &#x653E;&#x677E;&#x7BA1;&#x5236; Fos&#x3001; Akt &#x548C; Gsk3beta &#x5426;&#x5219;&#x6076;&#x6027;&#x8FDB;&#x5C55;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; PTEN &#x635F;&#x5931;&#x4E0E; Fos &#x5408;&#x4F5C;&#x8BF1;&#x53D1;&#x68D8;&#x76AE;&#x7624;&#x4E0D;&#x662F;&#x764C;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E; p53/p21 WAF &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x5F15;&#x53D1;&#x7684; GSK3beta &#x706D;&#x6D3B;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11; AKT &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

To investigate gene synergism in multistage skin carcinogenesis, the RU486-inducible cre/lox system was employed to ablate Pten function (K14.cre/Delta5Pten flx) in mouse epidermis expressing activated Fos (HK1.Fos). RU486-treated HK1.Fos/Delta5Pten flx mice exhibited hyperplasia, hyperkeratosis and tumours that progressed to highly differentiated keratoacanthomas, rather than to carcinomas, owing to re-expression of high p53 and p21 WAF levels. Despite elevated MAP kinase activity, cyclin D1 and cyclin E2 overexpression, and increased AKT activity that produced areas of highly proliferative papillomatous keratinocytes, increasing levels of GSK3beta inactivation induced a novel p53/p21 WAF expression profile, which subsequently halted proliferation and accelerated differentiation to give the hallmark keratosis of keratoacanthomas. A pivotal facet to this GSK3beta-triggered mechanism centred on increasing p53 expression in basal layer keratinocytes. This increase in expression reduced activated AKT expression and released inhibition of p21 WAF, which accelerated keratinocyte differentiation, as indicated by unique basal layer expression of differentiation-specific keratin K1 alongside premature filaggrin and loricrin expression. Thus, Fos synergism with Pten loss elicited a benign tumour context where GSK3beta-induced p53/p21 WAF expression continually switched AKT-associated proliferation into differentiation, preventing further progression. This putative compensatory mechanism required the critical availability of normal p53 and/or p21 WAF, otherwise deregulated Fos, Akt and Gsk3beta associate with malignant progression.

Fos cooperation with PTEN loss elicits keratoacanthoma not carcinoma, owing to p53/p21 WAF-induced differentiation triggered by GSK3beta inactivation and reduced AKT activity.

Pour &eacute;tudier le synergisme de g&egrave;ne dans la canc&eacute;rogen&egrave;se multimodes de peau, le syst&egrave;me cre-lox RU486 inductible travaillait pour l&#39;ablation de la fonction de Pten (K14.cre/Delta5Pten flx) dans l&#39;&eacute;piderme de souris exprimant Fos activ&eacute;e (HK1.FOS). HK1 RU486-trait&eacute;s.Fos/Delta5Pten flx souris expos&eacute;es hyperplasie, hyperk&eacute;ratose et les tumeurs qui ont progress&eacute; &agrave; keratoacanthomas hautement diff&eacute;renci&eacute;es, plut&ocirc;t qu&#39;&agrave; des carcinomes, en raison de la r&eacute;expression de niveaux &eacute;lev&eacute;s de WAF p53 et p21. Malgr&eacute; &eacute;lev&eacute;e activit&eacute; kinase de carte, cycline D1 et cycline E2 surexpression et augmentation de l&#39;activit&eacute; AKT qui produit des zones de k&eacute;ratinocytes papillomateuses tr&egrave;s prolif&eacute;ratives, augmentant les niveaux de GSK3beta inactivation induit un roman p53/p21 WAF profil d&#39;expression, qui par la suite stopp&eacute; la prolif&eacute;ration et acc&eacute;l&eacute;r&eacute; la diff&eacute;renciation pour donner la k&eacute;ratose caract&eacute;ristique de keratoacanthomas. Une facette cruciale &agrave; ce m&eacute;canisme de d&eacute;clenchement GSK3beta centr&eacute;e sur l&#39;augmentation d&#39;expression de p53 dans les k&eacute;ratinocytes de la couche basale. Cette augmentation de l&#39;expression r&eacute;duite activ&eacute; expression AKT et lib&eacute;r&eacute; l&#39;inhibition de p21 WAF, ce qui a acc&eacute;l&eacute;r&eacute; la diff&eacute;renciation des k&eacute;ratinocytes, tel qu&#39;indiqu&eacute; par l&#39;expression de la couche basale unique de diff&eacute;renciation sp&eacute;cifique de k&eacute;ratine K1 aux c&ocirc;t&eacute;s d&#39;expression pr&eacute;matur&eacute;e de filaggrine et loricrin. Ainsi, synergie Fos avec perte de Pten a suscit&eacute; un contexte de tumeur b&eacute;nigne, o&ugrave; expression de WAF p53/p21 induite par le GSK3beta commut&eacute; continuellement AKT associ&eacute;e &agrave; la prolif&eacute;ration en diff&eacute;renciation, emp&ecirc;chant la progression suppl&eacute;mentaire. Ce m&eacute;canisme compensatoire putatif requis la disponibilit&eacute; critique de WAF normal de p53 et p21, sinon d&eacute;r&eacute;glement&eacute; Fos, Akt et Gsk3beta associent avec progression maligne.

Coop&eacute;ration Fos avec perte PTEN suscite K&eacute;ratoacanthome pas de carcinome, en raison de la p53/p21 diff&eacute;renciation induite par le WAF d&eacute;clench&eacute;e par inactivation de GSK3beta et r&eacute;duit l&#39;activit&eacute; de l&#39;AKT.

Um gen Synergismus in mehrstufigen Haut Karzinogenese zu untersuchen, wurde das RU486-inducible Cre/Lox-System eingesetzt, um entfernen Pten-Funktion (K14.cre/Delta5Pten Flx) in Maus Oberhaut Ausdr&uuml;cken aktivierte Fos (HK1.Fos). RU486 behandelten HK1.Fos/Delta5Pten Flx M&auml;use ausgestellt, Hyperkeratose, Hyperplasie und Tumore, die zu hoch differenzierte Keratoacanthomas anstatt zu Karzinome, aufgrund der Re-expression von hoher p53 und p21 WAF fortgeschritten. Trotz erh&ouml;hter MAP-Kinase-Aktivit&auml;t, cyclin D1 und cyclin E2-&Uuml;berexpression und erh&ouml;hte AKT-Aktivit&auml;t, die Bereiche der stark proliferativ papillomatous Keratinozyten produziert, induzierte vermehrter GSK3beta Inaktivierung eine neuartige p53/p21 WAF Ausdruck Profil, das sp&auml;ter Verbreitung gestoppt und beschleunigte Differenzierung zu geben, die Keratose Markenzeichen des Keratoacanthomas. Eine zentrale Facette zu diesem GSK3beta ausgel&ouml;ste Mechanismus erh&ouml;ht p53 Ausdruck in der basalen Schicht Keratinocytes standen. Dieser Anstieg der Ausdruck reduziert aktiviert AKT Ausdruck und Hemmung der p21 WAF, der Differenzierung der Keratinozyten, beschleunigt durch einzigartige basale Schicht Ausdruck der Differenzierung-spezifische Keratin K1 neben vorzeitiger Filaggrin und Loricrin Ausdruck freigegeben. So l&ouml;ste Fos Synergismus mit Pten Verlust einen gutartiger Tumor-Kontext, wo GSK3beta induziert p53/p21 WAF Ausdruck st&auml;ndig AKT-assoziierte Vermehrung in Differenzierung wechselte, weiteres Fortschreiten zu verhindern. Diese vermeintliche Ausgleichsmechanismus ben&ouml;tigt die kritische Verf&uuml;gbarkeit von normalen p53 bzw. p21 WAF, ansonsten deregulierten Fos, Akt und Gsk3beta ordnen maligne Progression.

Fos Zusammenarbeit mit PTEN Verlust entlockt Keratoakanthom nicht Karzinom, aufgrund p53/p21 induziert durch WAF Differenzierung durch Inaktivierung des GSK3beta ausgel&ouml;st und reduzierter Aktivit&auml;t AKT.

Per indagare il sinergismo gene nella carcinogenesi multistadio della pelle, il sistema cre/lox RU486-inducible fu impiegato per l&#39;ablazione Pten funzione (K14.cre/Delta5Pten flx) nell&#39;epidermide del mouse che esprimono attivato Fos (HK1.FOS). HK1 RU486-trattati.Fos/Delta5Pten flx topi esposti iperplasia, ipercheratosi e tumori che progredito a keratoacanthomas altamente differenziata, anzich&eacute; a carcinomi, a causa di riespressione di alti livelli di p53 e p21 WAF. Nonostante l&#39;elevata attivit&agrave; della chinasi di mappa, cyclin D1 e cyclin E2 sovraespressione e maggiore attivit&agrave; AKT che ha prodotto aree di cheratinociti papillomatous altamente proliferativi, aumentando i livelli di GSK3beta inattivazione indotta da una romanzo p53/p21 WAF expression profile, che successivamente fermato la proliferazione e differenziazione per dare la cheratosi segno distintivo dei keratoacanthomas ha accelerato. Un aspetto cruciale per questo meccanismo attivato GSK3beta centrato sull&#39;aumento di espressione di p53 nei cheratinociti strato basale. Questo aumento di espressione ridotta attiva espressione di AKT e rilasciato l&#39;inibizione della p21 WAF, che ha accelerato la differenziazione dei cheratinociti, come indicato dall&#39;espressione unica di strato basale di differenziazione specifica cheratina K1 a fianco prematura espressione filaggrin e loricrina. Cos&igrave;, sinergismo Fos con perdita di Pten ha suscitato un contesto tumorale benigna dove indotta da GSK3beta espressione di p53/p21 WAF continuamente acceso AKT-associata proliferazione nella differenziazione, impedendo l&#39;ulteriore progressione. Questo meccanismo compensatorio putativo necessaria la disponibilit&agrave; critica dei normali p53 e/o p21 WAF, altrimenti deregolamentato Fos, Akt e Gsk3beta associato con la progressione maligna.

Cooperazione Fos con perdita PTEN suscita Cheratoacantoma non carcinoma, a causa di p53/p21 WAF-indotto differenziazione innescato da GSK3beta inattivazione e ridotta attivit&agrave; AKT.

&#x591A;&#x6BB5;&#x76AE;&#x819A;&#x767A;&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E57;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;, RU486 &#x8A98;&#x5C0E; cre/&#x6DB2;&#x4F53;&#x9178;&#x7D20;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x6D3B;&#x6027; Fos (HK1&#x3002; &#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8868;&#x76AE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Pten &#x6A5F;&#x80FD; (K14.cre/Delta5Pten flx) &#x3092;&#x713C;&#x707C;&#x3059;&#x308B;&#x63A1;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;Fos)&#x3002;RU486 &#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x308B; HK1&#x3002;Fos/Delta5Pten flx &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x904E;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x904E;&#x89D2;&#x5316;&#x75C7;&#x3001;&#x764C;&#x3001;&#x9006;&#x8EE2; p53 &#x3068; p21 &#x306E; WAF &#x304C;&#x9AD8;&#x5024;&#x306E;&#x304A;&#x304B;&#x3052;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x533A;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30FC;&#x30DE;&#x9032;&#x884C;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9AD8;&#x67B6;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x4F5C;&#x696D;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; D1 &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; E2 &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x9AD8;&#x3044;&#x5897;&#x6B96;&#x6027;&#x306E;&#x4E73;&#x982D;&#x72B6;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CE; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x5206;&#x91CE;&#x751F;&#x7523; AKT &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;GSK3beta &#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x5897;&#x6B96;&#x505C;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30FC;&#x30DE; &#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x89D2;&#x5316;&#x75C7;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x52A0;&#x901F;&#x5C0F;&#x8AAC; p53/p21 WAF &#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3002;&#x57FA;&#x5E95;&#x5C64;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CE; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; p53 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3053;&#x306E; GSK3beta &#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC; &#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3002;&#x7C21;&#x7D04;&#x3057;&#x305F;&#x5F0F;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x5F0F; AKT &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x56FA;&#x6709;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3; K1 &#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068; loricrin &#x5F0F;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x57FA;&#x5E95;&#x5C64;&#x5F0F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CE; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x52A0;&#x901F; p21 WAF &#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;Fos &#x76F8;&#x4E57;&#x4F5C;&#x7528; Pten &#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x3069;&#x3053;&#x306E; GSK3beta &#x306B;&#x3088;&#x308B; p53/p21 WAF &#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x3066;&#x7D76;&#x3048;&#x305A; AKT &#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x6B96;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x826F;&#x6027;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6B63;&#x5E38; p53 &#x3068; p21 &#x306E; WAF &#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AB;&#x30EB;&#x306A;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3053;&#x306E;&#x4EE3;&#x511F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x898F;&#x5236;&#x7DE9;&#x548C;&#x306E; Fos&#x3001;Akt &#x304A;&#x3088;&#x3073; Gsk3beta &#x60AA;&#x6027;&#x9032;&#x5C55;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Fos &#x5354;&#x529B; PTEN &#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30FC;&#x30DE;&#x306A;&#x3044;&#x764C; p53/p21 &#x5206;&#x5316; WAF &#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x3088;&#x308A; GSK3beta &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3001;AKT &#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB2E4;&#xB2E8;&#xACC4; &#xD53C;&#xBD80; &#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC131;&#xBD84; &#xC870;&#xC0AC;, RU486 &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; cre/&#xCD94;&#xC9C4;&#xC81C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; Pten &#xD568;&#xC218; (K14.cre/Delta5Pten flx) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Fos (HK1 &#xD45C;&#xD604; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD45C; &#xD53C; &#xC808;&#xC81C;&#xB97C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;.Fos)&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. RU486 &#xCDE8;&#xAE09; hk1&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.Fos/Delta5Pten flx &#xC950; &#xC99D;&#xC2DD;, hyperkeratosis &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; keratoacanthomas &#xBCF4;&#xB2E4; carcinomas, &#xB192;&#xC740; p53 &#xBC0F; p21 WAF &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD45C;&#xC815; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;, cyclin D1 &#xBC0F; cyclin e 2 overexpression &#xBC0F; &#xB192;&#xC740; &#xC99D;&#xC2DD; papillomatous keratinocytes&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; AKT &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC18C;&#xC124; p53/p21 WAF &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;, &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xC911;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; keratoacanthomas&#xC758; &#xAC01; &#xC778; keratosis &#xC8FC;&#xACE0; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xAC00;&#xC18D; GSK3beta &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC774; GSK3beta &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xACFC; &#xAE30;&#xC800; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; keratinocytes&#xC758; p53 &#xC2DD; &#xC99D;&#xAC00; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC77C; &#xBA74;. &#xC2DD; &#xAC10;&#xC18C;&#xC774; &#xC99D;&#xAC00; AKT &#xC2DD; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xD654; &#xAD00;&#xB828; &#xAC01; &#xC9C8; K1 &#xC870; filaggrin&#xACFC; loricrin &#xC2DD; &#xD568;&#xAED8; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xAE30;&#xC800; &#xCE35; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; keratinocyte &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xAC00;&#xC18D; p21 WAF&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xBC1C;&#xD45C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Pten &#xC190;&#xC2E4; Fos &#xC131;&#xBD84; &#xC591;&#xC131; &#xC885;&#xC591; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; gsk3beta&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; p53/p21 WAF &#xC2DD;&#xC740; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB85C; &#xD655;&#xC0B0; AKT &#xAD00;&#xB828; &#xC804;&#xD658; elicited. &#xC774; &#xC0C1; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; p53 &#xBC0F; p21 WAF&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;, &#xADF8;&#xB807;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74; &#xADDC;&#xC81C; &#xC644;&#xD654; Fos, Akt&#xC640; Gsk3beta &#xC5F0;&#xACB0; &#xC545;&#xC131; &#xC9C4;&#xD589;.

Fos &#xD611;&#xB825; PTEN &#xC190;&#xC2E4; elicits keratoacanthoma p53/p21 WAF &#xC720;&#xB3C4; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB54C;&#xBB38; &#xC548; &#xC554; &#xC885; GSK3beta &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2E4;&#xD589; &#xBC0F; AKT &#xD65C;&#xB3D9; &#xAC10;&#xC18C;.

Para investigar el sinergismo de gene en la carcinog&eacute;nesis gradual de la piel, el sistema cre/lox RU486-inducible fue empleado para ablar funci&oacute;n Pten (K14.cre/Delta5Pten flx) en epidermis de rat&oacute;n expresando activado Fos (HK1.FOS). HK1 tratados con RU486.Fos/Delta5Pten flx ratones exhibieron hiperplasia, hiperqueratosis y tumores que progres&oacute; a queratoacantomas altamente diferenciada y no a los carcinomas, debido a la reexpresi&oacute;n de altos niveles de p53 y p21 WAF. A pesar de la elevada actividad de la cinasa del mapa, ciclina D1 y sobreexpresi&oacute;n de ciclina E2 y aumento de la actividad AKT que producen &aacute;reas de queratinocitos papilomatosa altamente proliferativas, aumentando los niveles de inactivaci&oacute;n de GSK3beta inducida por un nuevo perfil expresi&oacute;n de p53/p21 WAF, que posteriormente detiene la proliferaci&oacute;n y diferenciaci&oacute;n para dar el keratosis de sello de keratoacanthomas de acelerado. Una faceta fundamental a este mecanismo activadas GSK3beta centrado en aumentar la expresi&oacute;n de p53 en los queratinocitos de la capa basal. Este aumento en la expresi&oacute;n reducida activa la expresi&oacute;n de AKT y hab&iacute;a lanzado inhibici&oacute;n de p21 WAF, que aceler&oacute; la diferenciaci&oacute;n de los queratinocitos, seg&uacute;n lo indicado por la expresi&oacute;n &uacute;nica de la capa basal de la diferenciaci&oacute;n espec&iacute;fica queratina K1 junto a la expresi&oacute;n de filaggrin y loricrin. Por lo tanto, sinergia de Fos con p&eacute;rdida de Pten sacaron un contexto tumor benigno donde GSK3beta inducida por p53/p21 expresi&oacute;n de WAF cambiado continuamente proliferaci&oacute;n asociada a AKT en diferenciaci&oacute;n, prevenci&oacute;n de la progresi&oacute;n m&aacute;s. Este mecanismo compensatorio putativo requiere la disponibilidad cr&iacute;tica del normal p53 y p21 WAF, lo contrario desregulado Fos, Akt y Gsk3beta asociado con progresi&oacute;n maligna.

Cooperaci&oacute;n de Fos con p&eacute;rdida PTEN provoca Queratoacantoma no carcinoma, debido a p53/p21 WAF-inducida de la diferenciaci&oacute;n provocada por la inactivaci&oacute;n de la GSK3beta y disminuci&oacute;n de la actividad AKT.

&#x5358;&#x5C64;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x30AC;&#x30C9;&#x30EA;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x9020;&#x5F71;&#x5264; (GBCAs) &#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AC;&#x30C9;&#x30EA;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x9020;&#x5F71;&#x5264;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x7D30;&#x7BA1;&#x5168;&#x8EAB;&#x7531;&#x6765;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3002;

&#xB2E8;&#xCE35; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xB3CC;&#xB9AC;&#xB284; &#xAE30;&#xBC18; &#xB300;&#xBE44; &#xC694;&#xC6D0; (GBCAs)&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xACFC; nephrogenic &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xAC00;&#xB3CC;&#xB9AC;&#xB284; &#xAE30;&#xBC18; &#xB300;&#xBE44; &#xC694;&#xC6D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;.

Para determinar la capacidad de estimular la proliferaci&oacute;n de fibroblastos en cultivo celular de monocapa de diferentes tipos de agentes de contraste con gadolinio (GBCAs).

Efecto de diferentes clases de agentes de contraste con gadolinio en el control y la proliferaci&oacute;n de fibroblastos de derivados de la fibrosis sist&eacute;mica nefrog&eacute;nica.

&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x523A;&#x6FC0;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x5355;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9486;&#x9020;&#x5F71;&#x5242; &#xFF08;GBCAs&#xFF09; &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9486;&#x9020;&#x5F71;&#x5242;&#x5BF9;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x80BE;&#x6027;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x6E90;&#x6027;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

To determine the ability of different types of gadolinium-based contrast agents (GBCAs) to stimulate fibroblast proliferation in monolayer cell culture.

Effect of different classes of gadolinium-based contrast agents on control and nephrogenic systemic fibrosis-derived fibroblast proliferation.

Pour d&eacute;terminer la capacit&eacute; des diff&eacute;rents types d&#39;agents de contraste &agrave; base de gadolinium (GBCAs) pour stimuler la prolif&eacute;ration des fibroblastes en culture cellulaire monocouche.

Effet des diff&eacute;rentes cat&eacute;gories d&#39;agents de contraste &agrave; base de gadolinium sur le contr&ocirc;le et la prolif&eacute;ration des fibroblastes d&eacute;riv&eacute;s de fibrose syst&eacute;mique n&eacute;phrog&eacute;nique.

Um zu bestimmen, die F&auml;higkeit der verschiedenen Arten von Gadolinium-basierte Kontrastmittel (GBCAs), Fibroblasten-Proliferation im Monolage Zellkultur zu stimulieren.

Wirkung der verschiedenen Klassen Gadolinium-basierte Kontrastmittel auf Kontrolle und Nephrogene systemische Fibrose abgeleitete Fibroblasten-Proliferation.

Per determinare la capacit&agrave; dei diversi tipi di agenti di contrasto basati su gadolinio (GBCAs) per stimolare la proliferazione dei fibroblasti in coltura delle cellule dello strato monomolecolare.

Effetto di diverse classi di agenti di contrasto basati su gadolinio sul controllo e la proliferazione di nefrogenica sistemica fibroblasto derivato da fibrosi.

&#x89C2;&#x5BDF;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5206;&#x5B50;&#x884C;&#x4E3A;&#x671F;&#x95F4;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5165;&#x4FB5;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x6211;&#x4EEC;&#x7406;&#x89E3;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5C55;&#x793A; RhoA &#x6D3B;&#x52A8;&#x5728;&#x80F0;&#x817A;&#x764C;&#x7684;&#x6D3B;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x80F6;&#x7247;&#x97F3;&#x54C1; &#xFF08;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x6210;&#x50CF;&#x663E;&#x5FAE;&#x8367;&#x5149;&#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB;) &#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x9996;&#x6B21;&#x3002;&#x521B;&#x9F20;&#x6807;&#x5728;&#x80F0;&#x817A;&#x5BFC;&#x7BA1;&#x817A;&#x764C; (PDAC) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684; p53 &#x7684;&#x9A71;&#x52A8; &#xFF08;p53(R172H))&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5728;&#x524D;&#x7F18; RhoA &#x6D3B;&#x6027;&#x9AD8;&#x79BB;&#x6563;&#x5206;&#x6570;&#x548C;&#x80CC;&#x9762;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5185;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x5728;&#x4E8C;&#x7EF4;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x6C60;&#x7684;&#x79EF;&#x6781; RhoA &#x6CA1;&#x65E0;&#x521B; p53(fl) &#x6316;&#x7A7A; PDAC &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5173;&#x8054;&#x5176;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5DEE;&#x521B;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; dasatanib&#xFF0C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4E0A;&#x6838;&#x51C6;&#x7684;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#x4FB5;&#x88AD;&#x4EE3;&#x7406;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5904;&#x4E8E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x5728;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x4E86;&#x8BF4;&#x660E;&#x7A7A;&#x95F4;&#x8C03;&#x8282; RhoA &#x529F;&#x80FD;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;Dasatanib &#x6291;&#x5236; RhoA &#x5728; p53(R172H) &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5185;&#x4E24;&#x6781;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95; RhoA &#x6D3B;&#x52A8;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x4F53;&#x5185;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x6210;&#x50CF;&#x6240;&#x793A; RhoA &#x4E0D;&#x4EC5;&#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x8FD8;&#x8BE5;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE; RhoA &#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5176;&#x5168;&#x7403;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x89C4;&#x4F8B;&#xFF0C;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x63A7;&#x5236;&#x5165;&#x4FB5;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x7684;&#x80F6;&#x7247;&#x70E6;&#x607C;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5728;&#x836F;&#x7269;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E2D;&#x751F;&#x6D3B;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x5206;&#x6790;&#x52A8;&#x6001;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x548C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A;&#x5982;&#x4F55;&#x79BB;&#x6563;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5206;&#x5B50;&#x6C60;&#x53EF;&#x80FD;&#x5DEE;&#x5F02;&#x64CD;&#x7EB5;&#x7684;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#x4FB5;&#x88AD;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x524D;&#x666F;&#x3002;

&#x7A7A;&#x95F4;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684; p53 &#x7684;&#x80F0;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5165;&#x4FB5;&#x671F;&#x95F4;&#x8C03;&#x8282; RhoA &#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

The ability to observe changes in molecular behavior during cancer cell invasion in vivo remains a major challenge to our understanding of the metastatic process. Here, we demonstrate for the first time, an analysis of RhoA activity at a subcellular level using FLIM-FRET (fluorescence lifetime imaging microscopy-fluorescence resonance energy transfer) imaging in a live animal model of pancreatic cancer. In invasive mouse pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) cells driven by mutant p53 (p53(R172H)), we observed a discrete fraction of high RhoA activity at both the leading edge and rear of cells in vivo which was absent in two-dimensional in vitro cultures. Notably, this pool of active RhoA was absent in noninvasive p53(fl) knockout PDAC cells, correlating with their poor invasive potential in vivo. We used dasatanib, a clinically approved anti-invasive agent that is active in this model, to illustrate the functional importance of spatially regulated RhoA. Dasatanib inhibited the activity of RhoA at the poles of p53(R172H) cells in vivo and this effect was independent of basal RhoA activity within the cell body. Taken together, quantitative in vivo fluorescence lifetime imaging illustrated that RhoA is not only necessary for invasion, but also that subcellular spatial regulation of RhoA activity, as opposed to its global activity, is likely to govern invasion efficiency in vivo. Our findings reveal the utility of FLIM-FRET in analyzing dynamic biomarkers during drug treatment in living animals, and they also show how discrete intracellular molecular pools might be differentially manipulated by future anti-invasive therapies.

Spatial regulation of RhoA activity during pancreatic cancer cell invasion driven by mutant p53.

La capacit&#xE9; &#xE0; observer des changements dans le comportement mol&#xE9;culaire lors de l&#x26;#39;invasion des cellules canc&#xE9;reuses in vivo reste un d&#xE9;fi majeur pour notre compr&#xE9;hension du processus m&#xE9;tastatique. Ici, nous d&#xE9;montrons pour la premi&#xE8;re fois, une analyse de l&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA &#xE0; un niveau subcellulaire utilisant FLIM-FRET (fluorescence imagerie par microscopie de fluorescence &#xE0; vie Resonance Energy Transfer) d&#x26;#39;imagerie dans un mod&#xE8;le animal vivant d&#x26;#39;un cancer du pancr&#xE9;as. En envahissantes souris pancr&#xE9;atiques canalaires ad&#xE9;nocarcinome (PDAC) entra&#xEE;n&#xE9;s par les cellules p53 mutante (p53 (R172H)), nous avons observ&#xE9; une fraction discr&#xE8;te de RhoA de haute activit&#xE9; &#xE0; la fois l&#x26;#39;avant-garde et &#xE0; l&#x26;#39;arri&#xE8;re des cellules in vivo, qui &#xE9;tait absent en deux dimensions in vitro cultures. Notamment, ce bassin de RhoA actif &#xE9;tait absent dans p53 non invasive (fl) des cellules knock-out PDAC, en corr&#xE9;lation avec leur potentiel invasif in vivo les pauvres. Nous avons utilis&#xE9; dasatanib, une clinique a approuv&#xE9; un agent anti-invasif qui est actif dans ce mod&#xE8;le, pour illustrer l&#x26;#39;importance fonctionnelle de RhoA dans l&#x26;#39;espace r&#xE9;glement&#xE9;. Dasatanib inhib&#xE9; l&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA dans les p&#xF4;les de p53 (R172H) des cellules in vivo et cet effet &#xE9;tait ind&#xE9;pendant de l&#x26;#39;activit&#xE9; basale RhoA dans le corps de la cellule. Pris dans leur ensemble, quantitative l&#x26;#39;imagerie in vivo de vie de fluorescence montr&#xE9; que RhoA est non seulement n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;invasion, mais aussi que la r&#xE9;glementation subcellulaire spatiale de l&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA, par opposition &#xE0; son activit&#xE9; globale, est susceptible de r&#xE9;gir l&#x26;#39;efficacit&#xE9; in vivo l&#x26;#39;invasion. Nos r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent l&#x26;#39;utilit&#xE9; de FLIM-FRET dans l&#x26;#39;analyse de biomarqueurs dynamiques pendant le traitement chez les animaux vivants, et ils montrent aussi comment discrets intracellulaires piscines mol&#xE9;culaires pourraient &#xEA;tre diff&#xE9;rentiellement manipul&#xE9; par les futures th&#xE9;rapies anti-invasifs.

R&#xE8;glement spatiale de l&#x26;#39;activit&#xE9; de RhoA Pendant l&#x26;#39;invasion des cellules cancer du pancr&#xE9;as Pouss&#xE9; par la p53 mutante

Die M&ouml;glichkeit, &Auml;nderungen im molekularen Verhalten w&auml;hrend Krebs Zelle Invasion in-vivo zu beobachten bleibt eine gro&szlig;e Herausforderung f&uuml;r unser Verst&auml;ndnis des metastasierenden Prozesses. Hier zeigen wir zum ersten Mal, eine Analyse der RhoA Aktivit&auml;t auf eine subzellul&auml;re Ebene mithilfe von FLIM-FRET (Fluoreszenz Lifetime imaging Mikroskopie-Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer) Bildgebung in einem Leben Tiermodell von Bauchspeicheldr&uuml;senkrebs. Invasive Maus Zellen pankreatische duktale Adenokarzinom (PDAC) getrieben von mutierten p53 (p53(R172H)), wir beobachteten eine diskrete Bruchteil der hohe RhoA-Aktivit&auml;t an der Spitze und hinten von Zellen in-vivo die abwesend war in zweidimensionalen in-vitro-Kulturen. Vor allem, diesen Pool an aktiven RhoA fehlte in nicht-invasive p53(fl) k.o. PDAC Zellen, Korrelation mit ihren Armen invasive Potential in-vivo. Wir verwendeten Dasatanib, einen klinisch zugelassenen anti-invasive Agent, der in diesem Modell die funktionelle Bedeutung des r&auml;umlich geregelten RhoA veranschaulichen aktiv ist. Dasatanib gehemmt die Aktivit&auml;t von RhoA an den Polen der p53(R172H) Zellen in-vivo und dieser Effekt war unabh&auml;ngig von basalen RhoA-Aktivit&auml;t innerhalb der Zelle K&ouml;rper. Zusammengenommen, quantitative in Vivo illustriert Fluoreszenz-Lebensdauer-Bildgebung, dass RhoA ist nicht nur notwendig f&uuml;r Invasion, sondern auch subzellulare r&auml;umliche Verordnung RhoA Aktivit&auml;t, im Gegensatz zu ihrer weltweiten T&auml;tigkeit, ist wahrscheinlich zu regieren Einmarsch Effizienz in-vivo. Unsere Ergebnisse zeigen den Nutzen der FLIM-Bund bei der Analyse von dynamischen Biomarker w&auml;hrend medikament&ouml;se Behandlung bei lebenden Tieren, und sie zeigen auch wie diskrete intrazellul&auml;re Molekulare Becken k&ouml;nnte durch zuk&uuml;nftige anti-invasive Therapien differentiell manipuliert werden.

R&auml;umliche Regelung der RhoA T&auml;tigkeit w&auml;hrend Bauchspeicheldr&uuml;senkrebs Zelle Invasion von mutierten p53 getrieben.

La capacit&agrave; di osservare i cambiamenti nel comportamento molecolare durante l&#39;invasione delle cellule di cancro in vivo rimane una sfida importante per la nostra comprensione del processo metastatico. Qui, noi dimostrare per la prima volta, un&#39;analisi dell&#39;attivit&agrave; di RhoA a livello subcellulare utilizzando FLIM-FRET imaging (vita di fluorescenza imaging microscopia di fluorescenza resonance energy transfer) in un modello animale diretta del cancro del pancreas. In mouse invasivo adenocarcinoma pancreatico duttale (PDAC) cellule guidato da p53 mutante (p53(R172H)), abbiamo osservato una discreta frazione di alta attivit&agrave; RhoA leading edge e posteriore delle cellule in vivo, che era assente in colture in vitro bidimensionale. In particolare, questo pool di RhoA attivo era assente in cellule di PDAC ko p53(fl) non invasiva, correlazione con la loro scarsa potenzialit&agrave; invasiva in vivo. Abbiamo usato dasatanib, un agente anti-invasive clinicamente che &egrave; attivo in questo modello, per illustrare l&#39;importanza funzionale di RhoA spazialmente regolamentato. Dasatanib inibito l&#39;attivit&agrave; di RhoA ai poli del p53(R172H) cellule in vivo e questo effetto &egrave; stato indipendente del basale RhoA attivit&agrave; all&#39;interno del corpo cellulare. Presi insieme, quantitativa in vivo imaging di vita di fluorescenza illustrato che RhoA &egrave; non solo necessario per invasione, ma anche quello sottocellulare regolamento spaziale di attivit&agrave; RhoA, in contrasto con la sua attivit&agrave; globale, &egrave; probabile che governano l&#39;efficienza di invasione in vivo. I nostri risultati rivelano l&#39;utilit&agrave; dei FLIM-FRET nell&#39;analizzare i biomarcatori dinamici durante il trattamento farmacologico in animali viventi, e mostrano anche come discrete piscine molecolare intracellulare potrebbe essere manipolato differenzialmente da terapie future anti-invasive.

Regolamento spaziale di RhoA attivit&agrave; durante invasione di cellule cancro al pancreas guidato da p53 mutante.

in vivo&#x3067;&#x306E;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6319;&#x52D5;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x79FB;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3078;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x8AB2;&#x984C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x764C;&#x306E;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;FLIM-FRET&#xFF08;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#xFF09;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x578B;p53&#xFF08;p53&#x306E;&#xFF08;R172H&#xFF09;&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4F4E;&#x4FB5;&#x8972;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x81B5;&#x7BA1;&#x817A;&#x764C;&#xFF08;PDAC&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;in vitro&#x3067;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5148;&#x5C0E;&#x7AEF;&#x3068;&#x5F8C;&#x90E8;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x9AD8;&#x3044;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x96E2;&#x6563;&#x7684;&#x306A;&#x5272;&#x5408;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x6587;&#x5316;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;RhoA&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x4FB5;&#x8972;&#x6027;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x306A;p53&#x306E;&#xFF08;&#x30D5;&#x30ED;&#x30EA;&#x30C0;&#x5DDE;&#xFF09;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;PDAC&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x8ABF;&#x7BC0;RhoA&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;dasatanib&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x627F;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x6D78;&#x6F64;&#x5264;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Dasatanib&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;p53&#x306E;&#x6975;&#xFF08;R172H&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;RhoA&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x672C;&#x4F53;&#x5185;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x306F;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;RhoA&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x4FB5;&#x7565;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x53CD;&#x5BFE;&#x3057;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x4FB5;&#x5165;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4ECA;&#x56DE;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306E;&#x85AC;&#x7269;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E2D;&#x306B;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;FLIM-FRET&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x96E2;&#x6563;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x5DEE;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x6297;&#x4F4E;&#x4FB5;&#x8972;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5909;&#x7570;&#x578B;p53&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x81B5;&#x81D3;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x6642;&#x306E;RhoA&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x898F;&#x5236;

&#xBCC0;&#xACBD; &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xBD84;&#xC790; &#xD589;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE68;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xB2A5;&#xB825; &#xC804;&#xC774;&#xC131; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; &#xB3C4;&#xC804; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC98;&#xC74C; subcellular &#xC218;&#xC900;&#xC758; FLIM &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; (&#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xBA85; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xD615;&#xAD11; &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xB2EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;) &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCDCC;&#xC7A5;&#xC554;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; RhoA &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE68;&#xB7B5; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCDCC; &#xC7A5; ductal &#xC120; (PDAC) &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; p53&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; (p53(R172H)), &#xC55E; &#xAC00;&#xC7A5;&#xC790;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; RhoA &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBD84;&#xC218; &#xBC0F; &#xACB0; &#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC140;&#xC758; &#xD6C4;&#xBA74; &#xAD00;&#xCC30; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC678; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xD65C;&#xC131; Rhoa&#xC774;&#xC774; &#xD480; &#xACB0; &#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xD2B9;&#xD788;, vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBD88; &#xC30D; &#xD55C; &#xCE68;&#xB7B5; &#xC801; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xACFC; &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; p53(fl) &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; PDAC &#xC140;&#xC5D0;. Dasatanib, &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; Rhoa&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;&#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xC784;&#xC0C1; &#xC2B9;&#xC778;&#xB41C; anti-invasive &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Dasatanib p53(R172H) &#xC140; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; Rhoa&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC140; &#xBCF8;&#xBB38; &#xB0B4; &#xAE30;&#xC800; RhoA &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD588;&#xB2E4;. Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC591;&#xC801; &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xBA85; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC77C;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD2B8; RhoA, &#xCE68;&#xACF5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC18;&#xB300;&#xB85C; RhoA &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; subcellular &#xACF5;&#xAC04; &#xADDC;&#xC815;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;, &#xCE68;&#xACF5; &#xD6A8;&#xC728; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xBC30; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB192;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC57D;&#xBB3C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB3D9;&#xC801; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; FLIM-&#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBD84;&#xC790; &#xD480; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xCC28;&#xB3D9; &#xBBF8;&#xB798; anti-invasive &#xC694;&#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC791; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCDCC;&#xC7A5;&#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE68;&#xACF5; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; p53&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; RhoA &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xADDC;&#xC815;.

La capacidad de observar los cambios en el comportamiento molecular durante la invasi&#xF3;n de las c&#xE9;lulas cancerosas in vivo sigue siendo un reto importante para nuestra comprensi&#xF3;n del proceso metast&#xE1;sico. En este caso, hemos demostrado por primera vez, un an&#xE1;lisis de la actividad de RhoA a nivel subcelular utilizando Flim-FRET (microscop&#xED;a de fluorescencia de imagen de por vida-resonancia de fluorescencia la transferencia de energ&#xED;a) de im&#xE1;genes en un modelo animal en vivo de c&#xE1;ncer de p&#xE1;ncreas. En invasoras rat&#xF3;n de adenocarcinoma pancre&#xE1;tico ductal (PDAC) impulsados &#x200B;&#x200B;por c&#xE9;lulas mutantes de p53 (p53 (R172H)), se observ&#xF3; una fracci&#xF3;n discreta de alta actividad de RhoA, tanto en el borde delantero y trasero de las c&#xE9;lulas in vivo que estuvo ausente en dos dimensiones in vitro culturas. En particular, este grupo de activos RhoA estuvo ausente en p53 no invasiva (FL), las c&#xE9;lulas knockout PDAC, en correlaci&#xF3;n con su potencial pobres invasiva in vivo. Se utiliz&#xF3; dasatanib, una cl&#xED;nica aprobada anti-invasiva agente que est&#xE1; activa en este modelo, para ilustrar la importancia funcional de RhoA espacialmente regulado. Dasatanib inhiben la actividad de RhoA en los polos de p53 (R172H) las c&#xE9;lulas in vivo, y este efecto fue independiente de la actividad de RhoA basal dentro del cuerpo celular. Tomados en conjunto, cuantitativo de im&#xE1;genes in vivo de fluorescencia vida ilustra que RhoA no s&#xF3;lo es necesaria para la invasi&#xF3;n, sino tambi&#xE9;n que la regulaci&#xF3;n subcelular espacial de la actividad de RhoA, en oposici&#xF3;n a su actividad global, es probable que gobiernan la eficiencia invasi&#xF3;n in vivo. Nuestros resultados ponen de manifiesto la utilidad de Flim-FRET en el an&#xE1;lisis de biomarcadores din&#xE1;micos durante el tratamiento de drogas en animales vivos, y tambi&#xE9;n mostrar c&#xF3;mo discretos piscinas moleculares intracelulares podr&#xED;a ser diferente manipulados por el futuro de lucha contra la invasi&#xF3;n terapias.

Reglamento espacial de la actividad de RhoA Durante la invasi&#xF3;n de c&#xE9;lulas del c&#xE1;ncer pancre&#xE1;tico Impulsado por mutantes de p53

&#x75A4;&#x75D5;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5927;&#x9762;&#x79EF;&#x76AE;&#x80A4;&#x4F24;&#x53E3;&#x6108;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x6709;&#x5173;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x518D;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x6C34;&#x5E73;&#x5347;&#x9AD8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6291;&#x5236;&#x75A4;&#x75D5;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7531;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x76AE;&#x80A4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x6DB2; (&#x5065;) &#x56DE;&#x5E94;&#x8C03;&#x67E5;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C1D;&#x8BD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x57F9;&#x517B;&#x6DB2;&#x5185;&#x4EFB;&#x4F55;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x5065;&#x4E3A;&#x523A;&#x6FC0;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7CD6;&#x80FA;&#x805A;&#x7CD6;&#x548C;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x7684; (3) H-&#x6C28;&#x57FA;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x76D0;&#x9178;&#x76D0;&#x7EB3;&#x5165;&#x5176;&#x80FD;&#x529B;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x6761;&#x4EF6;&#x57F9;&#x517B;&#x6DB2;&#x7684;&#x4E2D;&#x4E3B;&#x8981;&#x96C6;&#x4E2D;&#x4E0E; 30 kDa &#x622A;&#x6B62;&#x8D85;&#x6EE4;&#x819C;&#x3002;Stratifin &#x88AB;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5176;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x5176;&#x5728;&#x5065;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5065;&#x523A;&#x6FC0;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CD6;&#x80FA;&#x805A;&#x7CD6;&#x5408;&#x6210;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86; 3.3-fold &#x548C; 6.5-fold &#x589E;&#x52A0;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x76F8;&#x6BD4;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x3002;&#x79EF;&#x6781;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x521D;&#x6B65;&#x9274;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x7531;&#x4FDD;&#x7559; &gt; 30 kDa &#x8D85;&#x6EE4;&#x819C;&#xFF0C;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x654F;&#x611F;&#x548C;&#x8010;&#x9AD8;&#x6E29;&#x3002;Emmprin &#x548C; stratifin &#x663E;&#x793A;&#x51FA;&#x523A;&#x6FC0;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5408;&#x6210;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#xFF0C;&#x548C;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x523A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x5065;&#x88AB;&#x5220;&#x9664;&#x4E4B;&#x540E; stratifin &#x67AF;&#x7AED;&#x548C;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A; emmprin &#x67AF;&#x7AED;&#x3002;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CA;&#x653E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; stratifin&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#xFF0C;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6291;&#x5236;&#x75A4;&#x75D5;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x523A;&#x6FC0;&#x901A;&#x8FC7; stratifin &#x91CA;&#x653E;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#xFF1A; &#x6291;&#x5236;&#x75A4;&#x75D5;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Scar tissue formation during healing of extensive skin wounds may be related to delayed reepithelialization, while elevated levels of hyaluronan may suppress scar tissue formation. This study investigates the expression of hyaluronan by human skin fibroblasts in response to keratinocyte-conditioned medium (KCM), and attempts to identify any active factors within the conditioned medium. Serum-free KCM was assessed for its ability to stimulate the incorporation of (3) H-glucosamine into fibroblast glycosaminoglycans, and hyaluronan synthesis. Conditioned medium was concentrated with an ultrafiltration membrane with a 30 kDa cutoff. Stratifin was assessed for its ability to stimulate hyaluronan synthesis and its role in KCM. KCM stimulated fibroblast glycosaminoglycan synthesis up to a 3.3-fold increase and a 6.5-fold increase in hyaluronan synthesis compared with serum-free controls. Preliminary characterization of the active factors showed that they are retained by a >30 kDa ultrafiltration membrane, and are protease sensitive and heat resistant. Emmprin and stratifin were shown to stimulate fibroblast hyaluronan synthesis, and the hyaluronan-stimulating activity of KCM was removed following stratifin depletion and to a lesser extent by emmprin depletion. Keratinocytes release soluble factors, including stratifin, that stimulate fibroblast hyaluronan synthesis, and this stimulation of fibroblast hyaluronan may contribute to the suppression of scar tissue formation.

Keratinocytes stimulate fibroblast hyaluronan synthesis through the release of stratifin: a possible role in the suppression of scar tissue formation.

La formation de tissu cicatriciel durant la cicatrisation des plaies cutan&eacute;es &eacute;tendue peut &ecirc;tre li&eacute;e &agrave; reepithelialization retard&eacute;e, tandis que des concentrations &eacute;lev&eacute;es d&#39;acide hyaluronique peuvent supprimer la formation de tissu cicatriciel. Cette &eacute;tude examine l&#39;expression d&#39;acide hyaluronique par les fibroblastes de peau humaine en r&eacute;ponse au milieu conditionn&eacute; par des k&eacute;ratinocytes (KCM) et tente d&#39;identifier des facteurs actifs dans le milieu conditionn&eacute;. KCM sans s&eacute;rum a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e pour sa capacit&eacute; &agrave; stimuler l&#39;int&eacute;gration de (3) H-glucosamine glycosaminoglycanes des fibroblastes et la synth&egrave;se de l&#39;acide hyaluronique. Milieu conditionn&eacute; &eacute;tait concentr&eacute; avec une membrane d&#39;ultrafiltration avec un seuil de 30 kDa. Stratifine a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e pour sa capacit&eacute; &agrave; stimuler la synth&egrave;se de l&#39;acide hyaluronique et son r&ocirc;le dans KCM. KCM stimule la synth&egrave;se de fibroblastes glycosaminoglycan jusqu&#39;&agrave; une augmentation de chez et dans la synth&egrave;se d&#39;acide hyaluronique par rapport aux t&eacute;moins sans s&eacute;rum 6.5-fold. La caract&eacute;risation pr&eacute;liminaire des facteurs actifs ont montr&eacute; qu&#39;ils sont retenus par un &gt; 30 membrane d&#39;ultrafiltration kDa, et prot&eacute;ase sensibles et r&eacute;sistants &agrave; la chaleur. Emmprin et stratifine ont &eacute;t&eacute; montr&eacute;s pour stimuler la synth&egrave;se de l&#39;acide hyaluronique des fibroblastes, et l&#39;activit&eacute; stimulant l&#39;acide hyaluronique de KCM a &eacute;t&eacute; retir&eacute;e suite &agrave; l&#39;appauvrissement de stratifine et dans une moindre mesure par l&#39;appauvrissement emmprin. K&eacute;ratinocytes lib&eacute;rer des facteurs solubles, y compris stratifine, qui stimulent la synth&egrave;se de l&#39;acide hyaluronique de fibroblastes, et cette stimulation des fibroblastes acide hyaluronique peut contribuer &agrave; la suppression de la formation de tissu cicatriciel.

K&eacute;ratinocytes stimulent la synth&egrave;se de l&#39;acide hyaluronique fibroblaste gr&acirc;ce &agrave; la lib&eacute;ration de stratifine : un r&ocirc;le possible dans la suppression de la formation de tissu cicatriciel.

Narbengewebe Bildung bei der Heilung von Wunden umfangreiche Haut kann zu verz&ouml;gerten Reepithelialization zusammenh&auml;ngen, w&auml;hrend erh&ouml;hte Konzentrationen von Hyaluronan Narbengewebe Bildung unterdr&uuml;cken k&ouml;nnen. Diese Studie untersucht den Ausdruck der Hyalurons&auml;ure bei den menschlichen Fibroblasten als Reaktion auf Keratinozyten konditionierten Medium (KCM), und versucht, alle aktiven Faktoren im konditionierten Medium zu identifizieren. Serumfreie KCM wurde f&uuml;r seine F&auml;higkeit, die Aufnahme (3) H-Glucosamin in Fibroblasten Glycosaminoglycans und Hyalurons&auml;ure-Synthese anregen bewertet. Konditionierten Medium konzentrierte sich mit einer Membran Ultrafiltration mit einer Grenzfrequenz von 30 kDa. Stratifin wurde f&uuml;r seine F&auml;higkeit zur F&ouml;rderung von Hyalurons&auml;ure-Synthese und ihre Rolle im KCM bewertet. KCM stimuliert Fibroblasten Glykosaminoglykane Synthese bis zu einer Erh&ouml;hung um 3.3-fold und 6.5-fold gegen&uuml;ber serumfreie Steuerelemente Hyalurons&auml;ure-Synthese. Vorl&auml;ufige Charakterisierung der aktiven Faktoren zeigte, dass sie, indem beibehalten werden ein &gt; 30 kDa-Ultrafiltration-Membran, und Protease sind, empfindlich und hitzebest&auml;ndig. Emmprin und Stratifin Fibroblasten Hyaluronan Synthese stimulieren gezeigt, und die Hyalurons&auml;ure-stimulierenden Aktivit&auml;t kcm entfernt wurde nach Stratifin Ersch&ouml;pfung und in geringerem Ma&szlig;e von Emmprin Ersch&ouml;pfung. Keratinozyten lassen l&ouml;sliche Faktoren, einschlie&szlig;lich Stratifin, die Hyalurons&auml;ure-Synthese von Fibroblasten zu stimulieren, und diese Stimulation der Fibroblasten Hyaluronan kann dazu beitragen, die Unterdr&uuml;ckung der Bildung von Narbengewebe.

Keratinozyten stimulieren Fibroblasten Hyalurons&auml;ure-Synthese durch die Freigabe von Stratifin: eine m&ouml;gliche Rolle bei der Unterdr&uuml;ckung der Bildung von Narbengewebe.

Formazione di tessuto cicatriziale durante la guarigione di ferite estese della pelle possa essere correlati a riepitelizzazione differita, mentre livelli elevati di acido ialuronico possono sopprimere la formazione di tessuto cicatriziale. Questo studio indaga l&#39;espressione di acido ialuronico da fibroblasti della pelle umana in risposta a mezzo dei cheratinociti-condizionato (KCM) e tenta di identificare eventuali fattori attivi all&#39;interno del mezzo condizionato. KCM serum-free &egrave; stato valutato per la sua capacit&agrave; di stimolare l&#39;incorporazione di (3) H-Glucosamina glicosaminoglicani dei fibroblasti e sintesi di acido ialuronico. Media condizionata era concentrata con una membrana di ultrafiltrazione con un taglio di 30 kDa. Stratifin &egrave; stato valutato per la sua capacit&agrave; di stimolare la sintesi di acido ialuronico e il suo ruolo in KCM. KCM stimolata sintesi glicosaminoglicano fibroblasto fino a un aumento di 3.3-fold e 6.5-fold nella sintesi di acido ialuronico rispetto ai controlli serum-free. Caratterizzazione preliminare dei fattori attivi ha dimostrato che essi sono conservati da un &amp;gt; 30 kDa membrana di ultrafiltrazione, e sono proteasi, sensibili e resistenti al calore. Emmprin e stratifin hanno dimostrati di stimolare la sintesi di acido ialuronico dei fibroblasti, e l&#39;acido ialuronico-stimolante attivit&agrave; di KCM &egrave; stato rimosso a seguito di esaurimento stratifin e in misura minore da deplezione di emmprin. Cheratinociti rilasciare fattori solubili, tra cui stratifin, che stimolano la sintesi di acido ialuronico dei fibroblasti, e questa stimolazione del fibroblasto hyaluronan pu&ograve; contribuire alla soppressione della formazione di tessuto cicatriziale.

Cheratinociti stimolano la sintesi di acido ialuronico dei fibroblasti attraverso il rilascio di stratifin: un possibile ruolo nella soppressione della formazione di tessuto cicatriziale.

&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x7622;&#x75D5;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x4E00;&#x65B9;&#x7622;&#x75D5;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30B9;&#x30AD;&#x30F3;&#x306E;&#x50B7;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E2D;&#x306B;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BE;&#x30C8;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3072;&#x3068;&#x76AE;&#x819A;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CE; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x8ABF;&#x6574;&#x57F9; &#xFF08;KCM&#xFF09; &#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x3001;&#x99B4;&#x5316;&#x57F9;&#x5730;&#x5185;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7121;&#x8840;&#x6E05; KCM &#x306F;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30CE;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x3068;&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x5408;&#x6210; (3) H-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x99B4;&#x5316;&#x57F9;&#x5730;&#x306F;&#x3001;&#x9650;&#x5916;&#x308D;&#x904E;&#x819C; 30 kDa &#x30AB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30AA;&#x30D5;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;Stratifin &#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x3068; KCM &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;KCM &#x306F;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30CE;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x5408;&#x6210;&#x6700;&#x5927; 571 &#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x8840;&#x6E05;&#x7121;&#x6599;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x306E; 6.5-fold &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x4E88;&#x5099;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x5F7C;&#x3089;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x76EE; 30 kDa &#x9650;&#x5916;&#x308D;&#x904E;&#x819C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x5BC6;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8010;&#x71B1;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x3067;&#x3002;Emmprin &#x3068; stratifin &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x6D3B;&#x52D5; KCM &#x306E;&#x6B21;&#x306E; stratifin &#x67AF;&#x6E07;&#x3057;&#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x7A0B;&#x5EA6; emmprin &#x67AF;&#x6E07;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x304C;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3001;stratifin &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CE; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x7622;&#x75D5;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CE; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306F;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x5408;&#x6210; stratifin &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#xFF1A; &#x7622;&#x75D5;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3067;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

Hyaluronan &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD749;&#xD130; &#xC870;&#xC9C1; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD53C;&#xBD80; &#xC0C1;&#xCC98;&#xC758; &#xCE58;&#xC720; &#xC2DC; &#xBC18; &#xD754; &#xC870;&#xC9C1; &#xD615;&#xC131; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; reepithelialization &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; keratinocyte &#xB2E8;&#xB828; &#xB9E4;&#xCCB4; (KCM)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xC778;&#xAC04; &#xD53C;&#xBD80; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; hyaluronan&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xBC14;&#xB978;&#xB41C; &#xB9E4;&#xCCB4; &#xB0B4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC694;&#xC778; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB824;&#xACE0;. &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC; KCM fibroblast glycosaminoglycans hyaluronan &#xD569;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; (3) H-&#xAE00;&#xB8E8;&#xCF54;&#xC0AC;&#xBBFC;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00;. &#xBC14;&#xB978;&#xB41C; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xB294; 30 kDa &#xC790;&#xB974;&#xAE30;&#xB85C; &#xD55C; &#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9D1;&#xC911;. Stratifin KCM&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xBC0F; hyaluronan &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00;. KCM 3.3-fold &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; hyaluronan &#xD569;&#xC131; 6.5-fold &#xC99D;&#xAC00; glycosaminoglycan &#xD569;&#xC131; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9;. &#xD65C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xC608;&#xBE44; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC9C0; &#xB418;&#xB294; &amp;gt; 30 kDa &#xD55C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;, protease &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC5F4; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xACE0;. Emmprin &#xBC0F; stratifin fibroblast hyaluronan &#xD569;&#xC131; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; KCM&#xC758; hyaluronan &#xC790;&#xADF9; &#xD65C;&#xB3D9; emmprin &#xACE0;&#xAC08;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; stratifin &#xACE0;&#xAC08; &#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xBC94;&#xC704; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Keratinocytes &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xB4F1; &#xC694;&#xC778; stratifin, fibroblast hyaluronan &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xB193;&#xACE0; fibroblast hyaluronan&#xC774;&#xC774; &#xC790;&#xADF9; &#xD749;&#xD130; &#xC870;&#xC9C1; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Keratinocytes stratifin &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; hyaluronan &#xD569;&#xC131; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9;: &#xBC18; &#xD754; &#xC870;&#xC9C1; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Formaci&oacute;n de tejido cicatricial durante la cicatrizaci&oacute;n de las heridas de la piel extensa puede deberse a la reepitelizaci&oacute;n retrasada, mientras que los niveles elevados de &aacute;cido hialur&oacute;nico pueden suprimir la formaci&oacute;n de tejido cicatricial. Este estudio investiga la expresi&oacute;n de &aacute;cido hialur&oacute;nico por los fibroblastos de la piel humana en respuesta al medio keratinocyte-condicionada (KCM) e intenta identificar cualquier factor activo en el medio condicionado. KCM libre de suero fue evaluada por su capacidad para estimular la incorporaci&oacute;n de (3) H-glucosamina glicosaminoglicanos de fibroblastos y la s&iacute;ntesis de &aacute;cido hialur&oacute;nico. Medio condicionado se concentr&oacute; con una membrana de ultrafiltraci&oacute;n con un corte de 30 kDa. Stratifin fue evaluada por su capacidad para estimular la s&iacute;ntesis de &aacute;cido hialur&oacute;nico y su papel en KCM. KCM estimula la s&iacute;ntesis de fibroblastos glycosaminoglycan hasta un aumento de 3.3-fold y un 6.5-fold aumento en la s&iacute;ntesis de &aacute;cido hialur&oacute;nico en comparaci&oacute;n con los controles de suero. Caracterizaci&oacute;n preliminar de los factores activos demostr&oacute; que se retienen por un &gt; 30 kDa membrana de ultrafiltraci&oacute;n, y son la proteasa sensibles y resistentes al calor. Emmprin y stratifin fueron demostradas para estimular la s&iacute;ntesis de &aacute;cido hialur&oacute;nico de fibroblastos, y la actividad estimulante de &aacute;cido hialur&oacute;nico de KCM fue quitada despu&eacute;s de agotamiento de la stratifin y en menor medida por el agotamiento de la emmprin. Queratinocitos liberan factores solubles, incluyendo stratifin, que estimulan la s&iacute;ntesis de &aacute;cido hialur&oacute;nico de fibroblastos, y esta estimulaci&oacute;n de fibroblastos &aacute;cido hialur&oacute;nico puede contribuir a la supresi&oacute;n de la formaci&oacute;n de tejido cicatricial.

Queratinocitos estimulan la s&iacute;ntesis de &aacute;cido hialur&oacute;nico de fibroblastos a trav&eacute;s del lanzamiento de stratifin: un posible papel en la supresi&oacute;n de la formaci&oacute;n de tejido cicatricial.

Article	Year
PTEN loss promotes rasHa-mediated papillomatogenesis via dual up-regulation of AKT activity and cell cycle deregulation but malignant conversion proceeds via PTEN-associated pathways. Cancer research\| PubMed ID: 16452183	2006
Fos cooperation with PTEN loss elicits keratoacanthoma not carcinoma, owing to p53/p21 WAF-induced differentiation triggered by GSK3beta inactivation and reduced AKT activity. Journal of cell science\| PubMed ID: 18445683	2008
Effect of different classes of gadolinium-based contrast agents on control and nephrogenic systemic fibrosis-derived fibroblast proliferation. Radiology\| PubMed ID: 20663970	2010
Spatial regulation of RhoA activity during pancreatic cancer cell invasion driven by mutant p53. Cancer research\| PubMed ID: 21266354	2011
Keratinocytes stimulate fibroblast hyaluronan synthesis through the release of stratifin: a possible role in the suppression of scar tissue formation. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society\| PubMed ID: 21518083	2011

Jean A. Quinn

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