dna-fingerprinting-mycobacterium-leprae-strains-using-variable-number

DNA Fingerprinting of <em>Mycobacterium leprae</em> Strains Using Variable Number Tandem Repeat (VNTR) - Fragment Length Analysis (FLA)

The study of the transmission of leprosy is particularly difficult since the causative agent, Mycobacterium leprae, cannot be cultured in the laboratory.  ...

Colorado State University

&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x4EA4;&#x53C9;&#x6C61;&#x67D3;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x57FA;&#x56E0;&#x6F02;&#x53D8;&#x5728;&#x4F20;&#x4EE3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x666E;&#x904D;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#x81EA; 20 &#x4E16;&#x7EAA; 60 &#x5E74;&#x4EE3;&#x4EE5;&#x6765;&#x3002;&#x4E0D;&#x6B63;&#x786E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x6807;&#x8BC6;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x65E0;&#x6548;&#x7ED3;&#x679C;&#x548C;&#x5982;&#x679C;&#x672A;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x6C61;&#x67D3;&#x79D1;&#x5B66;&#x793E;&#x4F1A;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#xFF0C;&#x5176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5176;&#x836F;&#x7269;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x9700;&#x8981;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x9700;&#x8981;&#xFF0C;&#x548C;&#x95EE;&#x9898;&#x4F9D;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (PCR)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x77ED;&#x4E32;&#x8054;&#x91CD;&#x590D; (STR) &#x5206;&#x6790;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x68C0;&#x67E5;&#x7684;&#x56FD;&#x7C73;&#x6D41;&#x884C;-&#x548C;&#x83CC;&#x79CD;&#x5185;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EBF;&#x4E2D;&#x517D;&#x533B;&#x7814;&#x7A76;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x7684;&#x6C61;&#x67D3;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;60 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x4ECE; 6 &#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x4E0E;&#x7269;&#x79CD;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684; PCR &#x80FD;&#x8BC6;&#x522B;&#x5E38;&#x7528;&#x7684; 6 &#x79CD;&#x690D;&#x7269;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#xFF0C;3 &#x51B3;&#x5FC3;&#x5C06;&#x4E4B;&#x865E;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x72AC;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x83CC;&#x79CD;&#x5185;&#x7684;&#x6C61;&#x67D3;&#xFF0C;29 &#x72AC;&#x884C;&#x4ECE; 3 &#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x4E0E; STR &#x6307;&#x7EB9;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;3 &#x72AC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x6807;&#x8BC6;&#x9519;&#x8BEF;&#x6216;&#x4EA4;&#x53C9;&#x6C61;&#x67D3;&#x5176;&#x4ED6;&#x72AC;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x6F02;&#x79FB;&#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684; 1 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x5185;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5F3A;&#x8C03;&#xFF0C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&quot;&#x826F;&#x597D;&#x7684;&#x5C0F;&#x533A;&#x6587;&#x5316;&#x5B9E;&#x8DF5;&quot;&#x3002;&#x5F53;&#x524D;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684; STR &#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x5DF2;&#x4E3A;&#x5C06;&#x6765;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x548C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x72AC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7531;&#x7F8E;&#x56FD;&#x79D1;&#x7F57;&#x62C9;&#x591A;&#x5DDE;&#x5927;&#x5B66;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x4EBA;&#x5458;&#x3002;

&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x7814;&#x7A76;&#x6838;&#x67E5;&#x548C;&#x5FAE;&#x536B;&#x661F;&#x5206;&#x6790;&#x72AC;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x3002;

Cell line cross-contamination as well as genetic drift during passaging have been acknowledged as widespread problems since the 1960s. Improper cell line identification can invalidate results and, if not discovered, pollute the scientific community's body of knowledge with regard to cancer cell lines, their gene expression, and their drug susceptibilities. Despite the obvious need, validation of cell line identity is not yet widely required, and the problem persists. A highly sensitive polymerase chain reaction (PCR)-based approach and short tandem repeat (STR) profiling were used to examine the prevalence of inter- and intraspecies cell line contamination in a veterinary research setting. First, 60 cell lines from 6 laboratories were tested with multiplex species-specific PCR capable of identifying 6 commonly used species. Of these, 3 were determined to be misidentified by species. Second, to identify intraspecies contamination among canine cancer cell lines, 29 canine lines from 3 different laboratories were analyzed with STR fingerprinting. Using this methodology, 3 canine cell lines were determined to be misidentified or cross-contaminated by other canine cell lines. Finally, genetic drift was observed within 1 cell line obtained from different laboratories. These findings emphasize the importance of cell line validation as a critical component of "good cell culture practice." A database of the STR profiles obtained in the current study has been established for future comparison and validation of canine cell lines by investigators at Colorado State University and other institutions.

Polymerase chain reaction-based species verification and microsatellite analysis for canine cell line validation.

Cellule ligne la contamination crois&eacute;e ainsi que la d&eacute;rive g&eacute;n&eacute;tique pendant le passage ont &eacute;t&eacute; reconnue comme des probl&egrave;mes largement r&eacute;pandues depuis les ann&eacute;es 1960. Identification incorrecte de cellule de la ligne peut invalider les r&eacute;sultats et, si ne pas d&eacute;couvert, polluent le corps de la communaut&eacute; scientifique des connaissances en ce qui concerne les lign&eacute;es de cellules canc&eacute;reuses, leur expression des g&egrave;nes et leurs susceptibilit&eacute;s de drogue. Malgr&eacute; le besoin &eacute;vident, validation de l&#39;identit&eacute; des lign&eacute;es cellulaires n&#39;est pas encore largement requise, et le probl&egrave;me persiste. Un tr&egrave;s sensible polymerase chain reaction (PCR) - fond&eacute;e et short tandem profilage (STR) ont &eacute;t&eacute; employ&eacute;s afin d&#39;&eacute;tudier la pr&eacute;valence de l&#39;inter - et intra cellulaire ligne contamination dans un contexte de recherche v&eacute;t&eacute;rinaire. Tout d&#39;abord, cellule de 60 lignes de six laboratoires ont &eacute;t&eacute; test&eacute;s avec multiplex PCR sp&eacute;cifique &agrave; l&#39;esp&egrave;ce capable d&#39;identifier les 6 esp&egrave;ces couramment utilis&eacute;s. Parmi eux, 3 ont &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;es pour &ecirc;tre identifi&eacute;s par esp&egrave;ce. En second lieu, afin d&#39;identifier la contamination intrasp&eacute;cifique chez les lign&eacute;es cellulaires canc&eacute;reuses canine, 29 lignes canines de 3 laboratoires diff&eacute;rents ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;s avec les empreintes digitales STR. En utilisant cette m&eacute;thode, 3 lign&eacute;es canines &eacute;taient d&eacute;termin&eacute;es &agrave; &ecirc;tre mal identifi&eacute;s ou contamination crois&eacute;e par d&#39;autres lign&eacute;es cellulaires canine. Enfin, la d&eacute;rive g&eacute;n&eacute;tique a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e dans 1 lign&eacute;e cellulaire provenant de diff&eacute;rents laboratoires. Ces r&eacute;sultats soulignent l&#39;importance de la validation de ligne cellulaire comme un &eacute;l&eacute;ment essentiel de la &laquo; pratique de la culture cellulaire bon &raquo;. Une base de donn&eacute;es des profils STR obtenus dans cette &eacute;tude a &eacute;t&eacute; &eacute;tabli pour les comparer ult&eacute;rieurement et validation des lign&eacute;es cellulaires canin par les enqu&ecirc;teurs &agrave; la Colorado State University et d&#39;autres institutions.

Polym&eacute;rase ax&eacute;e sur la r&eacute;action en cha&icirc;ne de v&eacute;rification et microsatellites analyse des esp&egrave;ces pour la validation de ligne cellulaire canine.

Zelle Zeile eine Kreuzkontamination sowie genetische Drift w&auml;hrend passieren lassen, haben seit den 1960er Jahren als weit verbreitete Probleme anerkannt worden. Unsachgem&auml;&szlig;e Zelle Leitungskennzeichnung kann Ergebnisse f&uuml;r ung&uuml;ltig erkl&auml;ren und, wenn nicht entdeckt, verschmutzen der wissenschaftlichen Gemeinschaft K&ouml;rper des Wissens im Hinblick auf Krebs-Zelllinien, die Genexpression und ihre Droge-Empfindlichkeiten. Trotz der offensichtlichen Notwendigkeit Validierung der Zelle Zeile Identit&auml;t noch nicht allgemein erforderlich ist, und das Problem weiterhin besteht. Einen hochempfindlichen Polymerase-Kettenreaktion (PCR) - Ansatz und short Tandem, wiederholen Sie die Profilerstellung (STR) wurden verwendet, um die Pr&auml;valenz von Inter zu untersuchen- und intraspecies Zelle Linie Kontamination in einem Veterin&auml;rforschung. Erstens, 60 Zellen, die Linien aus 6 Labors mit multiplex artspezifische PCR identifizieren 6 h&auml;ufig verwendete Arten getestet wurden. Von diesen wurden 3 entschlossen, nach Tierarten f&auml;lschlicherweise werden. Zweitens um intraspecies Kontamination zwischen den eckzahn Krebszelllinien zu identifizieren, wurden 29 eckzahn Kan&auml;le aus 3 verschiedenen Labors mit STR fingerprinting analysiert. Mit dieser Methodik, wurden 3 Hunde Zellformen festgestellt erkannte oder Kreuz-belastetem durch andere Hunde Zelllinien. Schlie&szlig;lich wurde die Gendrift innerhalb 1 Zelllinie aus verschiedenen Labors gewonnen beobachtet. Diese Ergebnisse unterstreichen die Bedeutung der Zelle Zeile Validierung als eine wichtige Komponente der &quot;gute Zelle Kultur Praxis.&quot; Eine Datenbank mit den STR-Profilen erhalten in der aktuellen Studie wurde f&uuml;r zuk&uuml;nftige Vergleich und Validierung von eckzahn Zelllinien durch Forscher an der Colorado State University und anderen Institutionen gegr&uuml;ndet.

Polymerase Kettenreaktion-basierte Arten &Uuml;berpr&uuml;fung und Microsatellite Analyse f&uuml;r eckzahn Zelle Zeile Validierung.

Cella linea cross-contaminazione, cos&igrave; come la deriva genetica durante seminando sono stato riconosciuto come problemi diffusi dal 1960. Identificazione della linea cellulare improprio pu&ograve; invalidare i risultati e, se non scoperto, inquinare corpo della comunit&agrave; scientifica della conoscenza per quanto riguarda le linee di cellule di cancro, loro espressione genica e loro suscettibilit&agrave; di droga. Nonostante l&#39;evidente necessit&agrave;, convalida di identit&agrave; linea cellulare non &egrave; ancora ampiamente richiesto e il problema persiste. Un altamente sensibili polymerase chain reaction (PCR) - approccio basato e short tandem repeat (STR) di analisi sono stati utilizzati per esaminare la prevalenza dell&#39;inter - e intraspecie cella linea contaminazione in un ambiente di ricerca veterinaria. Prima cella 60 linee da 6 laboratori sono stati testati con multiplex PCR specie-specifici in grado di identificare 6 specie comunemente usate. Di questi, 3 sono state determinate per essere erroneamente identificato dalla specie. In secondo luogo, per identificare intraspecie contaminazione tra linee di cellule di cancro canino, 29 linee canini da 3 diversi laboratori sono stati analizzati con fingerprinting STR. Utilizzando questa metodologia, 3 linee cellulari canine erano determinati a essere erroneamente o cross-contaminazione da altre linee cellulari canine. Infine, la deriva genetica &egrave; stata osservata entro 1 linea cellulare ottenuto da laboratori diversi. Queste scoperte enfatizzano l&#39;importanza della convalida di linea cellulare come una componente critica di &quot;pratica di cultura cellulare buono.&quot; Un database dei profili STR ottenuti in questo studio &egrave; stato stabilito per il confronto in futuro e convalida delle variet&agrave; di cellula canina dagli investigatori presso la Colorado State University e di altre istituzioni.

Polimerasi specie basati su reazione a catena verifica dei microsatelliti analisi e per la convalida di linea cellulare canino.

&#x30BB;&#x30EB;&#x884C;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x6C5A;&#x67D3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x6D6E;&#x52D5;&#x7D99;&#x4EE3;&#x4E2D;&#x306B;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x554F;&#x984C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;1960 &#x5E74;&#x4EE3;&#x304B;&#x3089;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x4E0D;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x884C;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x7121;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x8B58;&#x306E;&#x79D1;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x4F53;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x85AC;&#x5264;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x6C5A;&#x67D3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x884C;&#x306E; id &#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x5E83;&#x304F;&#x5FC5;&#x8981;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3057;&#x3001;&#x554F;&#x984C;&#x304C;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC; (PCR) - &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x77ED;&#x3044;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0; (STR) &#x3092;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x9593;&#x306E;&#x6709;&#x75C5;&#x7387;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3092;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3059; - &#x7A2E;&#x65CF;&#x5185;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x6C5A;&#x67D3;&#x7363;&#x533B;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;60 &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; 6 &#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x304B;&#x3089;&#x591A;&#x91CD;&#x7279;&#x7570; PCR 6 &#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7A2E;&#x3092;&#x898B;&#x6975;&#x3081;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; 3 &#x7A2E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8AA4;&#x8A8D;&#x3092;&#x6C42;&#x3081;&#x305F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306B;&#x3001;&#x30A4;&#x30CC;&#x764C;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x7A2E;&#x65CF;&#x5185;&#x6C5A;&#x67D3;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;29 &#x306E;&#x30A4;&#x30CC;&#x884C; 3 &#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x304B;&#x3089; STR &#x306E;&#x6307;&#x7D0B;&#x63A1;&#x53D6;&#x3068;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;3 &#x72AC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x72AC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x8AA4;&#x8A8D;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x6C5A;&#x67D3;&#x3068;&#x5224;&#x65AD;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x6D6E;&#x52D5;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B; 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x300C;&#x826F;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x6587;&#x5316;&#x5B9F;&#x8DF5;&#x300D;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x691C;&#x8A3C;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F; STR &#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x5C06;&#x6765;&#x6BD4;&#x8F03;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30CC;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x5B98;&#x306F;&#x30B3;&#x30ED;&#x30E9;&#x30C9;&#x5DDE;&#x7ACB;&#x5927;&#x5B66;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x6A5F;&#x95A2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x7A2E;&#x691C;&#x8A3C;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30B5;&#x30C6;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x72AC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x3002;

Passaging &#xC911; &#xC720;&#xC804; &#xB4DC;&#xB9AC;&#xD504;&#xD2B8;&#xB85C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xAD50;&#xCC28; &#xC624;&#xC5FC;&#xC744; 1960 &#xB144;&#xB300; &#xC774;&#xD6C4; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD37C;&#xC9C4; &#xBB38;&#xC81C; &#xC778;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC798;&#xBABB; &#xB41C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC218; &#xACB0;&#xACFC; &#xBB34;&#xD6A8;&#xD654; &#xC2E0;&#xBD84;&#xC99D;&#xACFC;, &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xC9C0; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC624;&#xC5FC; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xAD00;&#xB828; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC758; &#xACFC;&#xD559;&#xACC4;&#xC758; &#xC2DC;&#xCCB4;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB9C8;&#xC57D; &#xAC10;&#xC815;. &#xBD84;&#xBA85; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC140; &#xC120; id&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB294; &#xC544;&#xC9C1; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD544;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xBB38;&#xC81C;&#xAC00; &#xC9C0;&#xC18D; &#xB418;. &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751; (PCR) &#xAE30;&#xBC18;&#xB41C; &#xC811;&#xADFC; &#xBC0F; &#xC9E7;&#xC740; &#xD0E0;&#xB364; &#xC778;&#xD14C;&#xB974;&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; (STR) &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xBC18;&#xBCF5; &#xBC0F; &#xACF5;&#xB7B5; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC218;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC624;&#xC5FC;. &#xCCAB;&#xC9F8;, 60 &#xC140; &#xB77C;&#xC778; 6 &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; 6 &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xC885;&#xC774; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBA40;&#xD2F0;&#xD50C;&#xB809;&#xC2A4; &#xC885;&#xC758; PCR &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB4E4;&#xC758; 3 &#xC885;&#xC73C;&#xB85C; &#xC624;&#xC778; &#xB420; &#xD558;&#xAE30;&#xB85C; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB458;&#xC9F8;, &#xAC1C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120; &#xC911; &#xACF5;&#xB7B5; &#xC624;&#xC5FC; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD560; 3 &#xB2E4;&#xB978; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; 29 &#xAC1C; &#xB77C;&#xC778; STR &#xC9C0;&#xBB38; &#xD568;&#xAED8; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, 3 &#xAC1C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xB2E4;&#xB978; &#xAC1C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC798;&#xBABB; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB610;&#xB294; &#xAD50;&#xCC28; &#xC624;&#xC5FC; &#xB420; &#xD558;&#xAE30;&#xB85C; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC720;&#xC804; &#xB4DC;&#xB9AC;&#xD504;&#xD2B8; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; 1 &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &quot;&#xC88B;&#xC740; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xC2E4;&#xCC9C;&quot;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB85C; &#xC11C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; STR &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4; &#xAC1C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xC870;&#xC0AC; &#xCF5C;&#xB85C;&#xB77C;&#xB3C4; &#xC8FC;&#xB9BD; &#xB300;&#xD559; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xC885; &#xD655;&#xC778; &#xBC0F; microsatellite &#xBD84;&#xC11D; &#xAC1C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

L&iacute;nea celular contaminaci&oacute;n cruzada como la deriva gen&eacute;tica durante pases han sido reconocida como problemas generalizados desde los a&ntilde;os sesenta. Identificaci&oacute;n de la l&iacute;nea celular inadecuada puede invalidar los resultados y, si no se descubre, contaminan el cuerpo de la comunidad cient&iacute;fica de conocimiento con respecto a l&iacute;neas celulares de c&aacute;ncer, su expresi&oacute;n g&eacute;nica y su susceptibilidad de drogas. A pesar de la obvia necesidad, validaci&oacute;n de identidad de l&iacute;nea celular a&uacute;n no es ampliamente requerido, y el problema persiste. Una reacci&oacute;n en cadena muy sensible de la polimerasa (PCR) - enfoque basado y t&aacute;ndem cortas repetir perfilado (STR) fueron utilizados para examinar la prevalencia de inter - y c&eacute;lula intraespec&iacute;ficas l&iacute;nea contaminaci&oacute;n en un entorno de investigaci&oacute;n veterinaria. En primer lugar, celular de 60 l&iacute;neas de 6 laboratorios fueron probadas con multiplex PCR espec&iacute;fica capaz de identificar especies com&uacute;nmente utilizadas 6. De estos, 3 estaban decididos a ser interpretada mal por especies. En segundo lugar, para identificar la contaminaci&oacute;n interespec&iacute;fica entre l&iacute;neas celulares de c&aacute;ncer canino, 29 l&iacute;neas caninas de 3 diferentes laboratorios analizaron con huellas dactilares STR. Con esta metodolog&iacute;a, 3 l&iacute;neas de canino de la c&eacute;lula estaban decididas a ser mal identificado o Cruz contaminados por otras l&iacute;neas celulares canina. Finalmente, la deriva gen&eacute;tica fue observada dentro de 1 l&iacute;nea celular obtenida de diferentes laboratorios. Estos resultados acent&uacute;an la importancia de la validaci&oacute;n de la l&iacute;nea celular como un componente cr&iacute;tico de &quot;pr&aacute;cticas de cultivo celular buena.&quot; Una base de datos de los perfiles de STR obtenidos en el estudio actual se ha establecido para futuras comparaciones o validaci&oacute;n de l&iacute;neas celulares canina por investigadores en la Universidad Estatal de Colorado y otras instituciones.

Polimerasa especies basadas en la reacci&oacute;n en cadena de verificaci&oacute;n microsat&eacute;lites an&aacute;lisis y validaci&oacute;n de la l&iacute;nea de canino de la c&eacute;lula.

Jason Rivest

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