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Visualizing Dengue Virus through Alexa Fluor Labeling

The early events in the interaction between virus and cell can have profound influence on the outcome of infection. Determining the factors 
that ...

DSO National Laboratories

&#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7531;&#x8C03;&#x89E3;&#x4E4B;&#x95F4;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E0E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x6761;&#x76EE;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x53E3;&#x888B; &#xFF08;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x4E00;&#x548C;&#x4E8C;&#xFF09;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x914D;&#x4F53; n-&#x8F9B;&#x57FA;-&beta;-D-&#x82F7; (betaOG) &#x88AB;&#x5360;&#x9886;&#x7684;&#x57DF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&quot;&#x67A2;&#x7EBD;&quot;&#x3002;&#x963B;&#x6B62; betaOG &#x53E3;&#x888B;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x5E72;&#x6270;&#x4FE1;&#x5C01;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x6240;&#x5FC5;&#x5907;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E24;&#x79CD;&#x878D;&#x5408;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x68C0;&#x67E5; anti-fusion &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x63AA;&#x65BD;&#x7898;&#x5316;&#x4E19;&#x952D;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x540E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6B21;&#x68C0;&#x6D4B;&#x63AA;&#x65BD;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x5BF9;&#x767B;&#x9769;&#x70ED; virions &#x548C;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6267;&#x884C;&#x865A;&#x62DF;&#x7B5B;&#x9009;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x53EF;&#x80FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; betaOG &#x53E3;&#x888B;&#x548C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x878D;&#x5408;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5728;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5019;&#x9009;&#x5206;&#x5B50;&#x5728;&#x7845;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236; 6.8 microM &#x4E0E; IC(50) &#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5316;&#x9A8C;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x5E76;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E0E; EC(50) &#x7684; 9.8 microM &#x75C5;&#x6BD2;&#x6EF4;&#x5EA6;&#x3002;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x52A0;&#x6CD5;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x5927;&#x9662;&#x90A3;&#x53EA;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x65F6;&#x5728;&#x573A;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x6DFB;&#x52A0;&#x65F6; 1 h &#x540E;&#xFF0C;&#x540C;&#x610F;&#x901A;&#x8FC7;&#x878D;&#x5408;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x7406;&#x3002;

&#x4E00;&#x79CD;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3002;

The dengue virus envelope protein plays an essential role in viral entry by mediating fusion between the viral and host membranes. The crystal structure of the envelope protein shows a pocket (located at a "hinge" between Domains I and II) that can be occupied by ligand n-octyl-beta-D-glucoside (betaOG). Compounds blocking the betaOG pocket are thought to interfere with conformational changes in the envelope protein that are essential for fusion. Two fusion assays were developed to examine the anti-fusion activities of compounds. The first assay measures the cellular internalization of propidium iodide upon membrane fusion. The second assay measures the protease activity of trypsin upon fusion between dengue virions and trypsin-containing liposomes. We performed an in silico virtual screening for small molecules that can potentially bind to the betaOG pocket and tested these candidate molecules in the two fusion assays. We identified one compound that inhibits dengue fusion in both assays with an IC(50) of 6.8 microM and reduces viral titers with an EC(50) of 9.8 microM. Time-of-addition experiments showed that the compound was only active when present during viral infection but not when added 1h later, in agreement with a mechanism of action through fusion inhibition.

A small molecule fusion inhibitor of dengue virus.

La prot&eacute;ine d&#39;enveloppe de virus dengue joue un r&ocirc;le essentiel dans l&#39;entr&eacute;e virale par m&eacute;diation de fusion entre les membranes virales et h&ocirc;te. La structure cristalline de la prot&eacute;ine d&#39;enveloppe montre une poche (situ&eacute; &agrave; une &laquo; charni&egrave;re &raquo; entre les domaines I et II) qui peut &ecirc;tre occup&eacute; par le ligand n-octyl-b&ecirc;ta-D-glucoside (betaOG). Compos&eacute;s bloquant la poche betaOG semblent interf&eacute;rer avec des changements conformationnels dans la prot&eacute;ine de l&#39;enveloppe qui sont essentiels pour la fusion. Deux essais de fusion ont &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;s afin d&#39;examiner les activit&eacute;s anti-fusion de compos&eacute;s. Le premier essai mesure l&#39;internalisation cellulaire de l&#39;iodure de propidium &agrave; la fusion membranaire. Le deuxi&egrave;me essai mesure l&#39;activit&eacute; de la prot&eacute;ase de trypsine &agrave; la fusion entre des virions de la dengue et liposomes contenant de la trypsine. Nous avons effectu&eacute; une in silico virtuel de d&eacute;pistage pour les petites mol&eacute;cules qui peuvent potentiellement se lient &agrave; la poche betaOG et test&eacute; ces mol&eacute;cules de candidat dans la fusion de deux des essais. Nous avons identifi&eacute; un compos&eacute; qui inhibe la fusion de la dengue dans les deux &eacute;preuves avec un IC (50) de 6,8 microM et r&eacute;duit des titres viraux avec un EC(50) de 9,8 microM. Temps-de-l&#39;addition des exp&eacute;riences ont montr&eacute; que ce compos&eacute; n&#39;active lorsqu&#39;il est pr&eacute;sent au cours de l&#39;infection virale mais ne pas quand ajout&eacute; 1 h plus tard, en accord avec un m&eacute;canisme d&#39;action par inhibition de la fusion.

Un inhibiteur de fusion de petites mol&eacute;cules du virus de la dengue.

Das Dengue-Virus-Umschlag-Protein spielt eine wesentliche Rolle im viral-Eintrag durch Vermittlung der Fusion zwischen der viralen und Host-Membranen. Die Kristallstruktur des Proteins Umschlag zeigt eine Tasche (am ein &quot;Scharnier&quot; zwischen Dom&auml;nen I und II), die von Ligand n-Octyl-Beta-D-Glucoside (BetaOG) belegt werden k&ouml;nnen. Verbindungen blockieren die BetaOG Tasche werden gedacht, um Konformationsver&auml;nderungen im Umschlag Protein beeintr&auml;chtigen, die f&uuml;r die Fusion von wesentlicher Bedeutung sind. Zwei Fusion Proben wurden entwickelt, um die anti-fusion Aktivit&auml;ten der Verbindungen zu untersuchen. Der erste Test misst die zellul&auml;re Internalisierung der Propidium Jodid auf Membrane Fusion. Der zweite Test misst die Protease-Aktivit&auml;t von Trypsin auf Verschmelzung von Dengue Virionen und Trypsin-haltigen Liposomen. Wir spielten ein virtuelles screening f&uuml;r kleine Molek&uuml;le, die k&ouml;nnen potenziell an der BetaOG-Tasche binden und diese Kandidaten-Molek&uuml;le in die zwei Fusion-Assays getestet in Silico. Wir haben eine Substanz, die verhindert die Dengue-Fusion in beiden Tests mit einem IC (50) von 6,8 MicroM und reduziert virale Titer mit einer EC(50) von 9,8 MicroM identifiziert. Zeit-von-Zusatz Experimente zeigte, dass die Verbindung nur aktiv, wenn bei Virusinfektion anwesend, aber nicht, wenn hinzugef&uuml;gt 1 h sp&auml;ter im Einvernehmen mit einem Wirkmechanismus durch Verschmelzung Hemmung.

Ein kleines Molek&uuml;l-Fusionshemmer des Denguevirus.

La proteina di busta del virus dengue gioca un ruolo essenziale nella voce virale di mediazione della fusione tra le membrane virali e host. La struttura di cristallo della proteina busta dimostra una tasca (situato presso una &quot;cerniera&quot; tra domini I e II) che pu&ograve; essere occupato dal ligando n-octyl-beta-D-glucoside (betaOG). Composti bloccando la tasca betaOG pensa che interferiscono con i cambiamenti conformazionali della proteina della busta che sono essenziali per la fusione. Due saggi di fusione sono stati sviluppati per esaminare le attivit&agrave; anti-fusion di composti. La prima misura l&#39;internalizzazione cellulare di ioduro di propidium sulla fusione di membrana. Il secondo test misura l&#39;attivit&agrave; di proteasi della tripsina sulla fusione tra virioni dengue e liposomi contenenti tripsina. Abbiamo eseguito un in silico virtuale per piccole molecole che potenzialmente possono associare a tasca betaOG e testato queste molecole candidato la fusione di due dosaggi di screening. Abbiamo identificato un composto che inibisce la fusione di dengue in entrambe le analisi con un IC(50) di 6,8 microM e riduce i titoli virali con un EC(50) di 9,8 microM. Tempo di aggiunta esperimenti hanno mostrato che il composto era solo attivo quando presenti durante l&#39;infezione virale, ma non quando aggiunto 1 h dopo, d&#39;accordo con un meccanismo d&#39;azione attraverso l&#39;inibizione della fusione.

Un inibitore di fusione piccola molecola del virus della dengue.

&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x86CB;&#x767D;&#x878D;&#x5408;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3068;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x819C;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8; &#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; (I &#x304A;&#x3088;&#x3073; II) &#x306F;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; n-&#x30AA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30EB;-&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;-D-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B7;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; (betaOG) &#x5360;&#x9818;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x300C;&#x30D2;&#x30F3;&#x30B8;&#x300D;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;BetaOG &#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DB;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x5316;&#x5408;&#x7269;-&#x6297;&#x30D5;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Propidium &#x30E8;&#x30A6;&#x5316;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x6642;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; &#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3; &#x30C7;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7C92;&#x5B50;&#x3068;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x542B;&#x6709;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x878D;&#x5408;&#x6642;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;in silico &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684; betaOG &#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x5206;&#x5B50;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4EEE;&#x60F3;&#x5B9F;&#x884C;&#x3002;6.8 MicroM &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;ic50 &#x5024; &#xFF08;50 &#x3067;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x6838;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6297;&#x4F53;&#x4FA1;&#x306F; 9.8 microM &#x306E; EC(50) &#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059; 1 &#x3064;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x307F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093; 1 h &#x5F8C;&#x3001;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x306E;&#x5408;&#x610F;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x5264;&#x306E;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3002;

&#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBD09;&#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD4E8;&#xC804; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC640; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC0AC;&#xC774; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBD09;&#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xC8FC;&#xBA38;&#xB2C8;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; (&quot;&#xD78C;&#xC9C0;&quot; I &#xBC0F; II)&#xB294; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; n-octyl-&#xBCA0;&#xD0C0;-D-glucoside (betaOG)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC810;&#xC720; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774; &#xC788;&#xB294;. BetaOG &#xD3EC;&#xCF13; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; &#xC735;&#xD569;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBD09;&#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574;&#xD560; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC735;&#xD569; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; anti-fusion &#xD65C;&#xB3D9; &#xAC80;&#xC0AC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; propidium &#xC694;&#xC624;&#xB4DC; &#xD654; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xC2DC;&#xC758; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; virions &#xBC0F; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD2B8;&#xB9BD; &#xC2E0; &#xB9AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC735;&#xD569;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; trypsin&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCE21;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xB0B4; silico &#xAC00;&#xC0C1; betaOG &#xD3EC;&#xCF13;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB450; &#xD4E8;&#xC804; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xBD84;&#xC790; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2EC;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC218;&#xD589;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 6.8 Microm&#xB294; IC(50)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB450; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; 9.8 Microm&#xC758; EC(50)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; titers &#xAC10;&#xC18C; &#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xCD94;&#xAC00; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;&#xB294; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xB9CC; &#xB54C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC911;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD94;&#xAC00; &#xB54C; &#xD65C;&#xC131; 1 &#xC2DC;&#xAC04; &#xD6C4;, &#xD4E8;&#xC804; &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;.

&#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xC735;&#xD569; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La prote&iacute;na de envoltura del virus de dengue juega un papel esencial en la entrada viral por mediaci&oacute;n de fusi&oacute;n entre las membranas virales y anfitri&oacute;n. La estructura cristalina de la prote&iacute;na muestra un bolsillo (ubicado en una &quot;bisagra&quot; entre los dominios I y II) que puede ser ocupado por ligando n-octil-beta-D-gluc&oacute;sido (betaOG). Compuestos bloqueando el bolsillo betaOG se piensan para interferir con los cambios conformacionales de la prote&iacute;na que son esenciales para la fusi&oacute;n. Se realizaron dos ensayos de fusi&oacute;n para examinar las actividades anti-fusi&oacute;n de compuestos. El primer ensayo mide la internalizaci&oacute;n celular de propidio sobre fusi&oacute;n de membrana. El segundo ensayo mide la actividad de la proteasa de la tripsina sobre fusi&oacute;n entre dengue viriones y liposomas que contienen tripsina. Realizamos un in silico virtual de peque&ntilde;as mol&eacute;culas que potencialmente pueden enlazar al bolsillo betaOG y probaron estas mol&eacute;culas de candidato en la fusi&oacute;n de dos ensayos. Se identificaron un compuesto que inhibe la fusi&oacute;n del dengue en ambos ensayos con un IC(50) de 6,8 microM y reduce t&iacute;tulos virales con un EC(50) de 9,8 microM. Tiempo-de-adem&aacute;s de experimentos demostraron que el compuesto era s&oacute;lo activa cuando se presenta durante la infecci&oacute;n viral pero no cuando se agrega 1 h m&aacute;s tarde, de acuerdo con un mecanismo de acci&oacute;n mediante la inhibici&oacute;n de la fusi&oacute;n.

Un inhibidor de la fusi&oacute;n de la mol&eacute;cula peque&ntilde;a del virus del dengue.

&#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6574;&#x4E2A;&#x70ED;&#x5E26;&#x5730;&#x533A;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x7387;&#x7684;&#x9891;&#x7E41;&#x548C;&#x5468;&#x671F;&#x6027;&#x6D41;&#x884C;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x65E2;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E00;&#x79CD;&#x75AB;&#x82D7;&#x6765;&#x9632;&#x6B62;&#x75AB;&#x60C5;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x4E86;&#x89E3;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4F7F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x52AA;&#x529B;&#x53D8;&#x5F97;&#x590D;&#x6742;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x5C06;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x63A2;&#x6D4B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E0E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x76F4;&#x63A5;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5C06;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E2D;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x3002;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x63CF;&#x8FF0; Alexa &#x6C1F; succinimidyl &#x916F;&#x67D3;&#x6599;&#x6EB6;&#x89E3;&#x5728;&#x6807;&#x7B7E;&#x540E;&#x4EA7;&#x751F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x53EF;&#x884C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x78B3;&#x9178;&#x6C22;&#x94A0;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x4E2D;&#x76F4;&#x63A5;&#x4E0E;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;Alexa &#x6C1F;&#x67D3;&#x6599;&#x5177;&#x6709;&#x4F18;&#x8D8A;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x4F1A;&#x6BD4;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x67D3;&#x6599;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x548C;&#x7F57;&#x4E39;&#x660E;&#xFF0C;&#x7B49;&#x5C11; pH &#x654F;&#x611F;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5438;&#x6536;&#x548C; endosomal &#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7406;&#x60F3;&#x9009;&#x62E9;&#x3002;Alexa &#x6C1F;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x5171;&#x8F6D;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x8BC6;&#x522B;&#x6807;&#x7B7E;&#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x548C;&#x5176;&#x6307;&#x8BA4;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5728;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

Alexa &#x6C1F;&#x67D3;&#x6599;&#x6807;&#x7B7E;&#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7B80;&#x5355;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Dengue virus causes frequent and cyclical epidemics throughout the tropics, resulting in significant morbidity and mortality rates. There is neither a specific antiviral treatment nor a vaccine to prevent epidemic transmission. The lack of a detailed understanding of the pathogenesis of the disease complicates these efforts. The development of methods to probe the interaction between the virus and host cells would thus be useful. Direct fluorescence labelling of virus would facilitate the visualization of the early events in virus-cell interaction. This report describes a simple method of labelling of dengue virus with Alexa Fluor succinimidyl ester dye dissolved directly in the sodium bicarbonate buffer that yielded highly viable virus after labelling. Alexa Fluor dyes have superior photostability and are less pH-sensitive than the common dyes, such as fluorescein and rhodamine, making them ideal for studies on cellular uptake and endosomal transport of the virus. The conjugation of Alexa Fluor dye did not affect the recognition of labelled dengue virus by virus-specific antibody and its putative receptors in host cells. This method could have useful applications in virological studies.

A simple method for Alexa Fluor dye labelling of dengue virus.

Virus de la dengue provoque de fr&#xE9;quentes &#xE9;pid&#xE9;mies et cyclique &#xE0; travers les tropiques, ce qui entra&#xEE;ne une morbidit&#xE9; significative et les taux de mortalit&#xE9;. Il n&#x26;#39;est ni un traitement antiviral sp&#xE9;cifique ni vaccin pour pr&#xE9;venir la transmission &#xE9;pid&#xE9;mique. L&#x26;#39;absence d&#x26;#39;une compr&#xE9;hension d&#xE9;taill&#xE9;e de la pathogen&#xE8;se de la maladie complique ces efforts. Le d&#xE9;veloppement de m&#xE9;thodes pour sonder l&#x26;#39;interaction entre les cellules de virus et l&#x26;#39;h&#xF4;te serait donc utile. Direct marquage fluorescent du virus serait de faciliter la visualisation des &#xE9;v&#xE9;nements pr&#xE9;coces de l&#x26;#39;interaction virus-cellule. Ce rapport d&#xE9;crit une m&#xE9;thode simple de l&#x26;#39;&#xE9;tiquetage des virus de la dengue avec Alexa Fluor succinimidyle colorant ester dissous directement dans le tampon de bicarbonate de sodium qui a rapport&#xE9; le virus hautement viable apr&#xE8;s l&#x26;#39;&#xE9;tiquetage. Alexa Fluor colorants ont photostabilit&#xE9; sup&#xE9;rieure et sont moins sensibles au pH que les colorants communs, tels que la fluoresc&#xE9;ine et la rhodamine, ce qui les rend id&#xE9;al pour les &#xE9;tudes sur l&#x26;#39;absorption cellulaire et le transport endosomal du virus. La conjugaison de Alexa Fluor colorant n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;incidence sur la reconnaissance des virus de la dengue marqu&#xE9;e par le virus de l&#x26;#39;anticorps sp&#xE9;cifique et de ses r&#xE9;cepteurs putatifs dans des cellules h&#xF4;tes. Cette m&#xE9;thode pourrait avoir des applications utiles dans les &#xE9;tudes virologiques.

Une m&#xE9;thode simple pour Alexa Fluor &#xE9;tiquetage Dye des virus de la dengue

Dengue-Virus f&uuml;hrt zu h&auml;ufige und zyklische Epidemien &uuml;berall in den Tropen, was zu erheblichen Morbidit&auml;t und Mortalit&auml;t Preise. Es gibt weder eine spezifische antivirale Behandlung noch einen Impfstoff, epidemische &Uuml;bertragung zu verhindern. Der Mangel an ein tief greifendes Verst&auml;ndnis der Pathogenese der Krankheit erschwert diese Bem&uuml;hungen. Die Entwicklung von Methoden, um die Interaktion zwischen dem Virus und Host-Zellen zu untersuchen w&auml;re daher sinnvoll. Direkte Fluoreszenz Kennzeichnung des Virus w&uuml;rde die Visualisierung der fr&uuml;hen Ereignisse in Virus-Zell-Interaktion erleichtern. Dieser Bericht beschreibt eine einfache Methode der Kennzeichnung des Denguevirus mit Alexa Fluor-Succinimidyl-Ester-Farbstoff direkt in der Natrium Bicarbonat-Puffer, der sehr lebensf&auml;hige Viren nach Kennzeichnung ergab aufgel&ouml;st. Alexa Fluor Farbstoffe haben &uuml;berlegene Photostabilit&auml;t und sind weniger pH-Sensitive als die gemeinsame Farbstoffe, wie z. B. Fluoreszein und Rhodamin, macht sie ideal f&uuml;r Studien &uuml;ber Aufnahme und Endosomen Transport des Virus. Die Konjugation von Alexa Fluor Dye hatte keine Auswirkungen auf, die Anerkennung der beschriftete Dengue-Virus Virus-spezifische Antik&ouml;rper und seine vermeintlichen Rezeptoren in Wirtszellen. Diese Methode k&ouml;nnte n&uuml;tzliche Anwendungen in virologischen Untersuchungen haben.

Eine einfache Methode zur Kennzeichnung von Alexa Fluor-Farbstoff des Denguevirus.

Virus dengue provoca frequenti e cicliche epidemie in tutto dei tropici, con conseguente tassi di morbilit&agrave; e mortalit&agrave; significativi. Non c&#39;&egrave; un trattamento antivirale specifico n&eacute; un vaccino per prevenire la trasmissione epidemica. La mancanza di una dettagliata comprensione della patogenesi della malattia complica questi sforzi. Lo sviluppo di metodi per l&#39;interazione tra le cellule virus e ospite della sonda sarebbe cos&igrave; utile. Fluorescenza diretta etichettatura dei virus faciliterebbe la visualizzazione dei primi eventi in interazione virus-cellula. Questo rapporto descrive un semplice metodo di etichettatura del virus dengue con Alexa Fluor succinimidil estere colorante sciolto direttamente nel buffer di bicarbonato di sodio che ha reso il virus altamente vitale dopo l&#39;etichettatura. Tinture di Alexa Fluor sono superior fotostabilit&agrave; e &egrave; meno pH-sensibile rispetto le tinture comuni, come ad esempio la fluoresceina e rodamina, rendendoli ideali per studi sull&#39;assorbimento cellulare e trasporto endosomal del virus. La coniugazione della tintura di Alexa Fluor non influenzava il riconoscimento dei virus della dengue etichettati da anticorpi specifici per il virus e suoi putativi recettori nelle cellule ospiti. Questo metodo potrebbe avere applicazioni utili negli studi virologici.

Un metodo semplice per l&#39;etichettatura tintura di Alexa Fluor di virus della dengue.

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El virus del dengue causa epidemias frecuentes y c&#xED;clica a lo largo de los tr&#xF3;picos, dando lugar a una significativa morbilidad y mortalidad. No hay ni un tratamiento espec&#xED;fico antiv&#xED;rico ni una vacuna para prevenir la transmisi&#xF3;n epid&#xE9;mica. La falta de un conocimiento detallado de la patog&#xE9;nesis de la enfermedad complica estos esfuerzos. El desarrollo de m&#xE9;todos para investigar la interacci&#xF3;n entre las c&#xE9;lulas hu&#xE9;sped y del virus tanto, ser&#xED;a &#xFA;til. Marcaje directo de fluorescencia de virus podr&#xED;a facilitar la visualizaci&#xF3;n de los primeros acontecimientos en la interacci&#xF3;n virus-c&#xE9;lula. Este informe describe un m&#xE9;todo simple de etiquetado de los virus del dengue con Alexa Fluor succinimidil &#xE9;ster tinte disuelto directamente en el tamp&#xF3;n de bicarbonato de sodio que produjo el virus altamente viable despu&#xE9;s del marcaje. Alexa Fluor colorantes tienen fotoestabilidad superior y son menos sensible al pH de los tintes comunes, tales como fluoresce&#xED;na y rodamina, haci&#xE9;ndolos ideales para los estudios sobre la captaci&#xF3;n celular y el transporte endosomal del virus. La conjugaci&#xF3;n de Alexa Fluor colorante no afect&#xF3; el reconocimiento de virus del dengue marcado por el virus-anticuerpo espec&#xED;fico y sus receptores putativos en las c&#xE9;lulas hu&#xE9;sped. Este m&#xE9;todo podr&#xED;a tener aplicaciones &#xFA;tiles en los estudios virol&#xF3;gicos.

Un m&#xE9;todo simple para Alexa Fluor Dye Etiquetado de los virus dengue

&#x6297;&#x4F53;&#x3001; &#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;DENV&#xFF09; &#x4E0E;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4EA7;&#x751F;&#x514D;&#x75AB;&#x6216;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5BF9;&#x7ACB;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x6297;&#x4F53;&#x963B;&#x788D;&#x4E86;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75AB;&#x82D7;&#x7814;&#x5236;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x6297;&#x4F53;&#x62B5;&#x6D88; DENV&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x9632;&#x6B62;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9644;&#x4EF6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x6216;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x878D;&#x5408;&#x819C;&#x5C42;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x6297;&#x4F53;&#x963B;&#x6B62;&#x9644;&#x4EF6;&#x6216;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x514D;&#x75AB;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x9884;&#x8BA1;&#x5C06;&#x4F1A;&#x541E;&#x566C;&#x540E;&#x7684; Fc &gamma; &#x53D7;&#x4F53; (Fc&gamma;R)-&#x8F74;&#x627F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x4ECE;&#x5FAA;&#x73AF;&#x4E2D;&#x6E05;&#x9664;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x90A3;&#x4E9B;&#x80FD;&#x591F;&#x963B;&#x6B62;&#x878D;&#x5408;&#x819C;&#x5C42;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x5C06;&#x80FD;&#x591F;&#x62B5;&#x6D88; DENV Fc&gamma;R &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x540E;&#x7531;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x800C;&#x5176;&#x4ED6;&#x6297;&#x4F53;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4; DENV &#x590D;&#x5236;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4ECE;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x60A3;&#x8005;&#x6062;&#x590D;&#x671F;&#x8840;&#x6E05;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5931;&#x6548;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x79CD;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x53D1;&#x751F;&#x5C3D;&#x7BA1; Fc&gamma;R &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Fc&gamma;R &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E2D;&#x6027;&#x5916;&#x6E90; DENV &#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x6B64;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x53D1;&#x751F;&#x901A;&#x8FC7;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x805A;&#x5408;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x805A;&#x5408;&#x542F;&#x7528;&#x6297;&#x4F53;&#x4EA4;&#x8054;&#x6291;&#x5236; Fc&gamma;RIIB&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6291;&#x5236; Fc&gamma;R &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62; DENV &#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x4F53;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;

&#x7ED3;&#x624E;&#x672F; IIB Fc &gamma; &#x53D7;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;

The interaction of antibodies, dengue virus (DENV), and monocytes can result in either immunity or enhanced virus infection. These opposing outcomes of dengue antibodies have hampered dengue vaccine development. Recent studies have shown that antibodies neutralize DENV by either preventing virus attachment to cellular receptors or inhibiting viral fusion intracellularly. However, whether the antibody blocks attachment or fusion, the resulting immune complexes are expected to be phagocytosed by Fc gamma receptor (FcÎ³R)-bearing cells and cleared from circulation. This suggests that only antibodies that are able to block fusion intracellularly would be able to neutralize DENV upon FcÎ³R-mediated uptake by monocytes whereas other antibodies would have resulted in enhancement of DENV replication. Using convalescent sera from dengue patients, we observed that neutralization of the homologous serotypes occurred despite FcÎ³R-mediated uptake. However, FcÎ³R-mediated uptake appeared to be inhibited when neutralized heterologous DENV serotypes were used instead. We demonstrate that this inhibition occurred through the formation of viral aggregates by antibodies in a concentration-dependent manner. Aggregation of viruses enabled antibodies to cross-link the inhibitory FcÎ³RIIB, which is expressed at low levels but which inhibits FcÎ³R-mediated phagocytosis and hence prevents antibody-dependent enhancement of DENV infection in monocytes.

Ligation of Fc gamma receptor IIB inhibits antibody-dependent enhancement of dengue virus infection.

L&#x26;#39;interaction des anticorps, virus de la dengue (DENV), et les monocytes peuvent se traduire soit par une immunit&#xE9; ou une infection virale accrue. Ces r&#xE9;sultats oppos&#xE9;s d&#x26;#39;anticorps contre la dengue ont entrav&#xE9; le d&#xE9;veloppement de vaccins contre la dengue. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes ont montr&#xE9; que les anticorps neutralisent le MENV soit par l&#x26;#39;attachement du virus &#xE0; des r&#xE9;cepteurs cellulaires emp&#xEA;cher ou inhiber la fusion virale intracellulaire. Toutefois, si les anticorps bloque l&#x26;#39;attachement ou la fusion, les complexes r&#xE9;sultant immunitaires sont cens&#xE9;s &#xEA;tre phagocyt&#xE9;s par Fc receptor gamma (Fc&#x3B3;R)-cellules porteuses et &#xE9;limin&#xE9; de la circulation. Ceci sugg&#xE8;re que les anticorps seuls qui sont capables de bloquer la fusion intracellulaire serait capable de neutraliser le MENV sur Fc&#x3B3;R m&#xE9;di&#xE9;e par les monocytes, tandis que l&#x26;#39;absorption d&#x26;#39;autres anticorps aurait abouti &#xE0; l&#x26;#39;am&#xE9;lioration de la r&#xE9;plication du MENV. En utilisant des s&#xE9;rums de convalescence des patients contre la dengue, nous avons observ&#xE9; que la neutralisation des s&#xE9;rotypes homologues s&#x26;#39;est produite en d&#xE9;pit Fc&#x3B3;R m&#xE9;di&#xE9;e absorption. Toutefois, Fc&#x3B3;R m&#xE9;di&#xE9;e absorption semble &#xEA;tre inhib&#xE9;e lorsque neutralis&#xE9; s&#xE9;rotypes DENV h&#xE9;t&#xE9;rologue ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s &#xE0; la place. Nous d&#xE9;montrons que cette inhibition se produit &#xE0; la formation d&#x26;#39;agr&#xE9;gats viraux par les anticorps d&#x26;#39;une mani&#xE8;re d&#xE9;pendante de la concentration. L&#x26;#39;agr&#xE9;gation des virus permis anticorps pour r&#xE9;ticuler l&#x26;#39;FcyRIIB inhibitrice, qui est exprim&#xE9;e &#xE0; faibles niveaux, mais qui inhibe Fc&#x3B3;R-phagocytose et donc emp&#xEA;che d&#xE9;pendante des anticorps am&#xE9;lioration de l&#x26;#39;infection du MENV dans les monocytes.

La ligature de r&#xE9;cepteur Fc gamma IIB Inhibe d&#xE9;pendante des anticorps Am&#xE9;lioration des maladies infectieuses virus de la dengue

Das Zusammenspiel von Antik&ouml;rpern, Dengue-Virus (DENV) und Monozyten kann entweder Immunit&auml;t oder verbesserter Virusinfektion f&uuml;hren. Diese gegens&auml;tzliche Ergebnisse Dengue-Antik&ouml;rper haben Dengue-Impfstoff-Entwicklung behindert. Neuere Studien haben gezeigt, dass Antik&ouml;rper DENV neutralisieren durch Virus Anhaftung an zellul&auml;ren Rezeptoren verhindert oder hemmt virale Verschmelzung intrazellul&auml;r. Jedoch, ob der Antik&ouml;rper Anlage oder Fusion blockiert, die resultierende Immunkomplexe werden voraussichtlich durch Fc-Gamma-Rezeptor (Fc&gamma;R) phagozytierte werden-wobei Zellen und aus dem Verkehr abgewickelt. Dies deutet darauf hin, dass nur die Antik&ouml;rper, die Verschmelzung intrazellul&auml;r blockieren k&ouml;nnen w&auml;re in der Lage, DENV auf Fc&gamma;R-vermittelte Aufnahme von Monozyten zu neutralisieren, w&auml;hrend andere Antik&ouml;rper in der Erweiterung der DENV Replikation gef&uuml;hrt h&auml;tte. Verwendung von Rekonvaleszenten Seren von Dengue-Patienten beobachteten wir, dass Neutralisierung der homologen Serotypen trotz Fc&gamma;R-vermittelte Aufnahme aufgetreten ist. Jedoch schien Fc&gamma;R-vermittelte Aufnahme gehemmt werden, wenn neutralisierte heterologe DENV-Serotypen stattdessen verwendet wurden. Wir zeigen, dass diese Hemmung durch die Bildung von viralen Aggregate durch Antik&ouml;rper Konzentration-abh&auml;ngigen Weise aufgetreten. Aggregation von Viren aktiviert Antik&ouml;rper gegen die hemmenden Fc&gamma;RIIB, sich vernetzen, die dr&uuml;ckt sich auf niedrigem Niveau, aber die Fc&gamma;R-vermittelte Phagozytose hemmt und somit verhindert Antik&ouml;rper-abh&auml;ngige Verst&auml;rkung der DENV Infektion in Monozyten.

Verbindung der Fc-Gamma-Rezeptor IIB hemmt Antik&ouml;rper-abh&auml;ngige Verst&auml;rkung der Dengue-Virus-Infektion.

Immunit&agrave; o enhanced virus infezione pu&ograve; causare l&#39;interazione di anticorpi, virus dengue (DENV) e monociti. Questi risultati opposti degli anticorpi anti-dengue hanno ostacolato lo sviluppo del vaccino dengue. Recenti studi hanno dimostrato che gli anticorpi neutralizzano DENV impedendo l&#39;attacco di virus ai recettori cellulari o inibizione virale fusione intracellularly. Tuttavia, se l&#39;anticorpo blocca attaccamento o fusion, i risultanti complessi immuni sono tenuti a essere phagocytosed dai recettori gamma Fc (Fc&gamma;R)-cuscinetto cellule e cancellata dalla circolazione. Questo suggerisce che solo gli anticorpi che sono in grado di bloccare la fusione intracellularly sarebbe in grado di neutralizzare DENV su assorbimento Fc&gamma;R-mediata dai monociti considerando che avrebbero comportato altri anticorpi nella valorizzazione della replica DENV. Utilizzando sieri convalescenti di dengue pazienti, abbiamo osservato che neutralizzazione dei sierotipi omologhi si &egrave; verificato nonostante l&#39;assorbimento di Fc&gamma;R-mediata. Tuttavia, Fc&gamma;R-mediated assorbimento sembrava essere inibito quando eterologo DENV neutralizzati sierotipi sono stati utilizzati invece. Dimostriamo che questa inibizione si verificato attraverso la formazione di aggregati virali da anticorpi in modo concentrazione-dipendente. Abilitata l&#39;opzione aggregazione dei virus anticorpi cross-link l&#39;inibitoria Fc&gamma;RIIB, che &egrave; espressa a livelli bassi ma che inibisce la fagocitosi mediata da Fc&gamma;R e quindi impedisce la valorizzazione anticorpo-dipendente dell&#39;infezione DENV nei monociti.

Legatura dei recettori Fc gamma IIB inibisce la valorizzazione anticorpo-dipendente dell&#39;infezione del virus dengue.

&#x6297;&#x4F53;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;DENV&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x53CD;&#x3059;&#x308B;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x9632;&#x6B62;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;DENV&#x4E2D;&#x548C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x878D;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x514D;&#x75AB;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;Fc&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;Fc&#x3B3;R&#x3068;&#xFF09;&#x6709;&#x5229;&#x5B50;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8CAA;&#x98DF;&#x3068;&#x5FAA;&#x74B0;&#x304B;&#x3089;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x6838;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x6297;&#x4F53;&#x304C;&#x4ED6;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;DENV&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x5897;&#x5F37;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x5358;&#x7403;&#x306E;Fc&#x3B3;R&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;DENV&#x4E2D;&#x548C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x671F;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Fc&#x3B3;R&#x3068;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x76F8;&#x540C;&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x4E2D;&#x548C;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Fc&#x3B3;R&#x3068;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x548C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7570;&#x7A2E;&#x306E;DENV&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x6297;&#x4F53;&#x304C;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;Fc&#x3B3;R&#x3068;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x98DF;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x7403;&#x306B;DENV&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5897;&#x5F37;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x963B;&#x5BB3;&#x305F;Fc&#x3B3;RIIB&#x3092;&#x67B6;&#x6A4B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x306E;Fc&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;IIB&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B2;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5411;&#x4E0A;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;

&#xD56D; &#xCCB4;, &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (DENV), monocytes&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB610;&#xB294; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xBC18;&#xB300; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC31;&#xC2E0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB974;&#xBA74; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xCE68; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC; DENV&#xB97C; &#xBB34;&#xB825;&#xD654; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD56D; &#xCCB4; &#xC735;&#xD569; &#xCCA8;&#xBD80;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8;, &#xC5EC;&#xBD80; &#xACB0;&#xACFC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC608;&#xC0C1; &#xB41C;&#xB2E4; Fc &#xAC10;&#xB9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (Fc&gamma;R)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; phagocytosed-&#xC140; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1;&#xACFC; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC6CC;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCE68; &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB978; &#xD56D; &#xCCB4; DENV &#xBCF5;&#xC81C;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC758;&#xD574; monocytes DENV Fc&gamma;R &#xC911;&#xC7AC; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;&#xC5D0; &#xBB34;&#xB825;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xC744; &#xAC83; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD68C;&#xBCF5; &#xC138;&#xB77C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xB3D9;&#xC885; serotypes&#xC758; &#xC911;&#xD654; Fc&gamma;R &#xC911;&#xC7AC; &#xD638;&#xC751;&#xC744; &#xC5BB; &#xC5C8;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, Fc&gamma;R &#xC911;&#xC7AC; &#xAE00;&#xADC0; &#xBB34;&#xB825;&#xD654; heterologous DENV serotypes &#xB300;&#xC2E0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC800;&#xD574; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xC800;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD56D; &#xCCB4; &#xAD50;&#xCC28; &#xAE08;&#xC9C0; Fc&gamma;riib&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5B4;&#xB5A4; Fc&gamma;R &#xC911;&#xC7AC; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC758;&#xC874; &#xD5A5;&#xC0C1; monocytes&#xC5D0; DENV &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xBC29;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;.

Fc &#xAC10;&#xB9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; IIB&#xC758; &#xACB0; &#xCC30; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC758;&#xC874; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

La interacci&#xF3;n de los anticuerpos, el virus del dengue (DENV), y los monocitos pueden resultar en la inmunidad o infecci&#xF3;n por el virus mejorada. Estos resultados opuestos de anticuerpos contra dengue han obstaculizado el desarrollo del dengue vacuna. Estudios recientes han demostrado que los anticuerpos neutralizan DENV por cualquiera de prevenci&#xF3;n de la fijaci&#xF3;n del virus a los receptores celulares o virales de fusi&#xF3;n inhibir intracelularmente. Sin embargo, si la uni&#xF3;n de anticuerpos bloques o de fusi&#xF3;n, los complejos inmunes resultantes se espera que sean fagocitados por el receptor de Fc gamma (Fc&#x3B3;R)-c&#xE9;lulas portadoras y borra de la circulaci&#xF3;n. Esto sugiere que los anticuerpos que son s&#xF3;lo capaces de bloquear la fusi&#xF3;n intracelularmente ser&#xED;a capaz de neutralizar DENV sobre Fc&#x3B3;R mediada por monocitos, mientras que la absorci&#xF3;n de otros anticuerpos que se han traducido en la mejora de la replicaci&#xF3;n DENV. Utilizando suero de convalecientes de pacientes con dengue, se observ&#xF3; que la neutralizaci&#xF3;n de los serotipos hom&#xF3;logos se produjo a pesar Fc&#x3B3;R mediada por absorci&#xF3;n. Sin embargo, mediada por la captaci&#xF3;n de Fc&#x3B3;R parec&#xED;a ser inhibida cuando se neutralizan los serotipos de DENV heter&#xF3;loga se utilizaron en su lugar. Se demuestra que esta inhibici&#xF3;n se produjo a trav&#xE9;s de la formaci&#xF3;n de agregados virales por los anticuerpos de una manera dependiente de la concentraci&#xF3;n. Agregaci&#xF3;n de virus activado anticuerpos para reticular la Fc&#x3B3;RIIB inhibitoria, que se expresa a niveles bajos pero que inhibe Fc&#x3B3;R mediada por fagocitosis y por lo tanto evita la mejora dependiente de anticuerpos de la infecci&#xF3;n por DENV en monocitos.

Article	Year
A small molecule fusion inhibitor of dengue virus. Antiviral research\| PubMed ID: 19800368	2009
A simple method for Alexa Fluor dye labelling of dengue virus. Journal of virological methods\| PubMed ID: 20399231	2010
Ligation of Fc gamma receptor IIB inhibits antibody-dependent enhancement of dengue virus infection. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 21746897	2011

Summer Zhang

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