quantifying-agonist-activity-at-g-protein-coupled-receptors

Quantifying Agonist Activity at G Protein-coupled Receptors

When an agonist activates a population of G protein-coupled receptors (GPCRs), it elicits a signaling pathway that culminates in the response of the cell ...

Chapman University

&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x548C;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;oxotremorine-M&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; M(2) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x3002;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8; (5.0 &#x5FAE; M) &#x9020;&#x6210;&#x5927;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x5728; oxotremorine &#x7C73;&#x7684;&#x56DE;&#x80A0;&#x3001; &#x6C14;&#x7BA1;&#x3001; &#x8180;&#x80F1;&#x6536;&#x7F29;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; M(2) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x51CF;&#x5C11;&#x6536;&#x7F29;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x6548;&#x4EF7;&#x6216;&#x6700;&#x5927;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x4E0D;&#x603B;&#x662F;&#x90FD;&#x8DCC;&#x5E45;&#x3002;&#x4E0E;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20; (1.0 &#x5FAE; M&#xFF09; &#x5F97;&#x5230;&#x4E86;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x56DE;&#x80A0;&#x3001; &#x6C14;&#x7BA1;&#x548C;&#x4ECE; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8180;&#x80F1;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x7684;&#x677E;&#x5F1B;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x5927;&#x7EA6; 3-&#x5230; 9 &#x500D;&#x5927;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x540C;&#x4E00;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x4E0E;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x5728;&#x56DE;&#x80A0;&#x548C;&#x8180;&#x80F1;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x6572;&#x9664;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5C0F;&#x4E8E;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x4E0E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5F97;&#x5230;&#x4E86;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6709;&#x8212;&#x5F20;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x6C14;&#x7BA1;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;Oxotremorine-M &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6536;&#x7F29;&#x5242;&#x4E0E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x800C;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x548C;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x4E5F;&#x6CA1;&#x6709;&#x5448;&#x73B0;&#x66F4;&#x677E;&#x5F1B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5BF9;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x76F8;&#x6BD4;&#x7684; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6C2F;&#x5316;&#x94BE;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5BF9;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x6D89;&#x53CA; M(2) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x63D0;&#x9AD8;&#x8425;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x5546;&#x7684;&#x8212;&#x7F29;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x589E;&#x52A0;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x548C;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x5BF9;&#x4ECE; M2 &#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6536;&#x7F29;&#x8212;&#x5F20;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;

The ability of forskolin and isoproterenol to inhibit the contractile action of the muscarinic agonist, oxotremorine-M, was investigated in smooth muscle from wild-type and M(2) muscarinic receptor knockout mice. Forskolin (5.0 micro M) caused a significant reduction in the contractile activity of oxotremorine-M in ileum, trachea, and urinary bladder from both wild-type and M(2) muscarinic receptor knockout mice. This reduction in contractile activity was characterized by decreases in potency or maximal response, but not always both. Similar results were obtained with isoproterenol (1.0 micro M). The relaxant effects of forskolin in ileum, trachea, and urinary bladder from M(2) receptor knockout mice were approximately 3- to 9-fold greater than those observed in the same tissues from wild-type mice. Similar results were obtained with isoproterenol in ileum and urinary bladder, although the differences between wild-type and M(2) receptor knockout tissues were less than those observed with forskolin. In contrast, there was no significant difference between the relaxant effect of isoproterenol in trachea from wild-type and M(2) receptor knockout mice. In contrast to the results observed with oxotremorine-M as the contractile agent, forskolin and isoproterenol did not exhibit greater relaxant activity against KCl-induced contractions in M(2) receptor knockout mice compared with wild-type mice. These results suggest that a component of the contractile response to muscarinic agonists in smooth muscle involves an M(2) muscarinic receptor-mediated inhibition of the relaxant effects of agents that increase cAMP levels.

Increased relaxant action of forskolin and isoproterenol against muscarinic agonist-induced contractions in smooth muscle from M2 receptor knockout mice.

La capacit&#xE9; de la forskoline et de l&#x26;#39;isoprot&#xE9;r&#xE9;nol pour inhiber l&#x26;#39;action contractile de l&#x26;#39;agoniste muscarinique, oxotr&#xE9;morine-M, a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;e dans le muscle lisse de type sauvage et M (2) muscariniques souris knock-out des r&#xE9;cepteurs. La forskoline (5,0 micro M) a provoqu&#xE9; une r&#xE9;duction significative de l&#x26;#39;activit&#xE9; contractile du oxotr&#xE9;morine-M dans l&#x26;#39;il&#xE9;on, de la trach&#xE9;e, et de la vessie &#xE0; partir de deux de type sauvage et M (2) muscariniques souris knock-out des r&#xE9;cepteurs. Cette r&#xE9;duction de l&#x26;#39;activit&#xE9; contractile a &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9; par une diminution de la puissance ou de la r&#xE9;ponse maximale, mais pas toujours &#xE0; la fois. Des r&#xE9;sultats similaires ont &#xE9;t&#xE9; obtenus avec de l&#x26;#39;isoprot&#xE9;r&#xE9;nol (1,0 M micro). Les effets relaxants de la forskoline dans l&#x26;#39;il&#xE9;on, de la trach&#xE9;e, et de la vessie &#xE0; partir de M (2) des r&#xE9;cepteurs de souris knock-out ont &#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;environ 3 - &#xE0; 9 fois sup&#xE9;rieures &#xE0; celles observ&#xE9;es dans les m&#xEA;mes tissus de souris de type sauvage. Des r&#xE9;sultats similaires ont &#xE9;t&#xE9; obtenus avec de l&#x26;#39;isoprot&#xE9;r&#xE9;nol dans la vessie et des voies urinaires il&#xE9;on, bien que les diff&#xE9;rences entre les sauvages et M (2) les tissus &#xE0; &#xE9;limination directe des r&#xE9;cepteurs &#xE9;taient inf&#xE9;rieurs &#xE0; ceux observ&#xE9;s avec de la forskoline. En revanche, il n&#x26;#39;y avait pas de diff&#xE9;rence significative entre l&#x26;#39;effet relaxant de l&#x26;#39;isoprot&#xE9;r&#xE9;nol dans la trach&#xE9;e de type sauvage et M (2) des r&#xE9;cepteurs de souris knock-out. Contrairement aux r&#xE9;sultats observ&#xE9;s avec l&#x26;#39;oxotr&#xE9;morine-M que l&#x26;#39;agent contractile, la forskoline et de l&#x26;#39;isoprot&#xE9;r&#xE9;nol ne pr&#xE9;sente pas d&#x26;#39;activit&#xE9; plus relaxant contre les contractions induites par KCl dans M (2) souris knock-out des r&#xE9;cepteurs par rapport &#xE0; souris de type sauvage. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;une composante de la r&#xE9;ponse contractile aux agonistes muscariniques dans le muscle lisse implique un M (2) des r&#xE9;cepteurs muscariniques-inhibition m&#xE9;di&#xE9;e par des effets relaxants des agents qui augmentent les taux d&#x26;#39;AMPc.

Augmentation de l&#x26;#39;action de la forskoline et Relaxant isoprot&#xE9;r&#xE9;nol contre muscariniques induit par un agoniste contractions dans le muscle lisse de M2 &#x200B;&#x200B;souris knock-out des r&#xE9;cepteurs

Erh&#xF6;hte relaxierende Wirkung von Forskolin und Isoproterenol gegen Muskarinagonisten-induzierten Kontraktionen der glatten Muskulatur von M2-Rezeptor-Knockout-M&#xE4;usen.

La capacit&agrave; di forskolina e isoproterenolo per inibire l&#39;azione contrattile dell&#39;agonista muscarinico, Oxotremorina-M, &egrave; stato studiato nel muscolo liscio da wild-type e topi knockout M(2) del recettore muscarinico. La forskolina (micro 5,0 M) causato una significativa riduzione dell&#39;attivit&agrave; contrattile del Oxotremorina-M nell&#39;ileo, la trachea e la vescica urinaria wild-type sia del recettore muscarinico M(2) dai topi knockout. Questa riduzione di attivit&agrave; contrattile &egrave; stata caratterizzata da diminuzioni nella risposta di potenza o di massima, ma non sempre entrambi. Risultati simili sono stati ottenuti con isoproterenolo (1,0 micro M). Gli effetti miorilassanti di forskolina nell&#39;ileo, la trachea e la vescica urinaria da topi knockout M(2) recettore erano circa 3 - a 9 volte maggiore rispetto a quelli osservati nei tessuti stessi da topi wild-type. Risultati simili sono stati ottenuti con isoproterenolo nell&#39;ileo e vescica urinaria, anche se le differenze tra wild-type e M(2) del recettore knockout tessuti erano inferiori a quelli osservati con la forskolina. Al contrario, non c&#39;era alcuna differenza significativa tra l&#39;effetto rilassante di isoproterenolo in trachea da wild-type e topi knockout M(2) del recettore. In contrasto con i risultati osservati con Oxotremorina-M come l&#39;agente contrattile, forskolina e isoproterenolo non ha esibito una maggiore attivit&agrave; miorilassante contro contrazioni KCl-indotta in topi knockout di recettore M(2) rispetto ai topi wild-type. Questi risultati suggeriscono che un componente della risposta contrattile per agonisti muscarinici nel muscolo liscio comporta un&#39;inibizione M(2) muscarinico mediata dal recettore degli effetti rilassanti di agenti che aumentano i livelli di campi.

Maggiore azione miorilassante di forskolina e isoproterenolo contro contrazioni indotta da agonista muscarinico nel muscolo liscio da topi knockout di M2 del recettore.

&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53CA;&#x3073;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;5.0&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;M&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304B;&#x3089;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x56DE;&#x8178;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3001;&#x6C17;&#x7BA1;&#x3001;&#x8180;&#x80F1;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x53CE;&#x7E2E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;&#x5E38;&#x306B;&#x52B9;&#x529B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6700;&#x5927;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;1.0&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;M&#xFF09;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x540C;&#x3058;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3088;&#x308A;9&#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306B; - &#x56DE;&#x8178;&#x3001;&#x6C17;&#x7BA1;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5F1B;&#x7DE9;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x7D04;3&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x56DE;&#x8178;&#x3068;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x304C;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x6C17;&#x7BA1;&#x306B;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5F1B;&#x7DE9;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x53CE;&#x7E2E;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53CA;&#x3073;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;M&#x306E;KCl&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F1B;&#x7DE9;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;cAMP&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x85AC;&#x5264;&#x306E;&#x5F1B;&#x7DE9;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

M2&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53CA;&#x3073;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x5F1B;&#x7DE9;&#x4F5C;&#x7528;

&#xB2A5;&#xB825; forskolin isoproterenol muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC758; &#xC218;&#xCD95; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC758; oxotremorine M &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; M(2) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Forskolin (5.0 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M) oxotremorine-M &#xC11C;, &#xAE30;&#xB3C4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBC29;&#xAD11;&#xC758; &#xC218;&#xCD95; &#xC131; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; M(2) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC950;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xCD95; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C;&#xB294; &#xD798; &#xB610;&#xB294; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD56D;&#xC0C1; &#xB458; &#xB2E4; &#xAC10;&#xC18C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Isoproterenol (1.0 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M)&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC11C;, &#xAE30;&#xAD00;, &#xBC0F; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC29;&#xAD11; forskolin&#xC758; &#xC774;&#xC644; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD588;&#xB2E4; &#xC57D; 3-&#xB97C; 9 &#xBC30; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC04;&#xC758; &#xCC28;&#xC774;&#xC810; forskolin&#xC640; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB35C; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC11C; &#xBC0F; &#xC624; &#xC90C; &#xBC29;&#xAD11;, isoproterenol&#xC744; &#xD68D;&#xB4DD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xAD00;&#xC9C0;&#xC5D0; isoproterenol&#xC758; &#xC774;&#xC644; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC0F; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC950; &#xC0AC;&#xC774; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. Oxotremorine-m &#xC218;&#xCD95; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2EC;&#xB9AC; forskolin &#xBC0F; isoproterenol &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; KCl &#xC720;&#xBC1C; &#xB41C; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD070; &#xC774;&#xC644; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; muscarinic agonists &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xCD95; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; M(2) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xCEA0;&#xD504; &#xC218;&#xCE58;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC758; &#xC774;&#xC644; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3EC;&#xD568; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC774;&#xC644; &#xB3D9;&#xC791; forskolin&#xC758; isoproterenol muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC720;&#xB3C4; &#xC218;&#xCD95; M2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9E4;&#xB044;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;.

La capacidad de forskolina y isoproterenol para inhibir la acci&#xF3;n contr&#xE1;ctil del agonista muscar&#xED;nico, oxotremorina-M, se investig&#xF3; en el m&#xFA;sculo liso de tipo salvaje y M (2) los ratones receptores muscar&#xED;nicos knockout. Forskolin (5,0 micro M) provoc&#xF3; una reducci&#xF3;n significativa en la actividad contr&#xE1;ctil de oxotremorina-M en el &#xED;leon, la tr&#xE1;quea y la vejiga urinaria de ambos de tipo salvaje y M (2) ratones knockout de los receptores muscar&#xED;nicos. Esta reducci&#xF3;n en la actividad contr&#xE1;ctil se caracteriza por una disminuci&#xF3;n en la potencia o respuesta m&#xE1;xima, pero no siempre ambos. Se obtuvieron resultados similares con isoproterenol (1,0 micro M). Los efectos relajantes de la forskolina en el &#xED;leon, la tr&#xE1;quea y la vejiga urinaria a partir de M (2) ratones knockout de los receptores fueron de aproximadamente 3 - a 9 veces mayores que los observados en los mismos tejidos de ratones de tipo salvaje. Se obtuvieron resultados similares con isoproterenol en la vejiga urinaria y el &#xED;leo, aunque las diferencias entre la naturaleza y tipo M (2) los tejidos del receptor de knock-out eran inferiores a los observados con la forskolina. En contraste, no hubo diferencia significativa entre el efecto relajante de isoproterenol en la tr&#xE1;quea de ratones con el gen de tipo salvaje y M (2) del receptor. En contraste con los resultados observados con oxotremorina-M como el agente contr&#xE1;ctil, forskolina y el isoproterenol no exhiben mayor actividad relajante contra las contracciones inducidas por KCl en M (2) los ratones receptores knockout en comparaci&#xF3;n con ratones de tipo salvaje. Estos resultados sugieren que un componente de la respuesta contr&#xE1;ctil a los agonistas muscar&#xED;nicos en el m&#xFA;sculo liso implica un M (2) del receptor muscar&#xED;nico mediada por la inhibici&#xF3;n de los efectos relajantes de los agentes que aumentan los niveles de AMPc.

El aumento de la acci&#xF3;n relajante de forskolina y el isoproterenol contra muscar&#xED;nicos inducidas por los agonistas-Las contracciones en el m&#xFA;sculo liso de los ratones receptores M2 Knockout

&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x4E0E;&#x6297;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53CD;&#x5E94;&#x8868;&#x793A; M(2) &#x548C; M(3) &#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x7EC4;&#x5408;&#x548C;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x4E2D;&#x56FD;&#x4ED3;&#x9F20;&#x5375;&#x5DE2; (CHO) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x5176;&#x6548;&#x529B;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x5F53;&#x6D4B;&#x5B9A; [3 H] N methylscopolamine &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE; M(2) &#x548C; M(3) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;CHO M(2)+M(3) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF09; &#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x4F4D;&#x79FB;&#xFF0C;&#x7ADE;&#x4E89;&#x66F2;&#x7EBF;&#x7684;&#x4E9A;&#x578B;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x7B26;&#x5408;&#x5176;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5C55;&#x793A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5C5E;&#x6027;&#x76F8;&#x540C;&#x7684; CHO M(2) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x800C;&#x53E6;&#x4E00;&#x5E45;&#x5C55;&#x793A;&#x50CF;&#x90A3;&#x4E9B; CHO M(3) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;Oxotremorine-M&#x3001; &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x4FC3;&#x6548;&#x5242;&#xFF0C;&#x5F15;&#x8D77;&#x4E86;&#x5F3A;&#x5065;&#x7684;&#x3001; &#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#x6C34;&#x89E3; CHO M(3) &#x548C; M(2)+M(3) CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728; M(2) CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x836F;&#x7406;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5C55;&#x793A; CHO M(3) &#x548C; M(2)+M(3) CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;Oxotremorine-M &#x5F15;&#x8D77;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x523A;&#x6FC0;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7; &#xFF08;cAMP&#xFF09; &#x79EF;&#x7D2F;&#x65E2; CHO M(2) &#x548C; M(2)+M(3) CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#x654F;&#x611F;&#x3001; &#x9C81;&#x68D2;&#x6291;&#x5236;&#x548C;&#x5F3A;&#x5065; CHO M(3) &#x7EC6;&#x80DE;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5F88;&#x9AD8;&#xFF0C;oxotremorine M &#x4EE5;&#x4E0A;&#x6307;&#x51FA;&#x5728; CHO M(3) &#x548C; M(2)+M(3) CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x6291;&#x5236;&#x5F15;&#x8D77;&#x8425;&#x5730;&#x79EF;&#x7D2F;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x7EE7;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x53EA;&#x5230; oxotremorine M &#x7684; cAMP &#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x9636;&#x6BB5;&#x6709;&#x4EBA; CHO M(2)&#x3001; CHO M(3) &#x548C; M(2)+M(3) CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;CHO M(2)+M(3) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684; cAMP &#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x836F;&#x7406;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x76F8;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684; M(2) &#x548C; M(3) &#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x9884;&#x671F;&#x3002;

M2 &#x548C; M3 &#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x7EC4;&#x5408;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x836F;&#x7406;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;

We compared the binding properties of selective muscarinic antagonists with their potencies for antagonizing muscarinic responses in Chinese hamster ovary (CHO) cells expressing M(2) and M(3) muscarinic receptors in combination and in isolation. When measured by the competitive displacement of [3H]N-methylscopolamine binding to CHO cells expressing both M(2) and M(3) muscarinic receptors (CHO M(2)+M(3) cells), the competition curves of the subtype-selective muscarinic antagonists were consistent with a two-site model. One site exhibited binding properties identical to those of CHO M(2) cells, whereas the other site exhibited properties like those of CHO M(3) cells. Oxotremorine-M, a muscarinic agonist, elicited a robust, pertussis toxin-insensitive stimulation of phosphoinositide hydrolysis in both CHO M(3) and CHO M(2)+M(3) cells, but not in CHO M(2) cells. The pharmacological antagonism of the phosphoinositide response exhibited similar properties in both CHO M(3) and CHO M(2)+M(3) cells. Oxotremorine-M elicited a pertussis toxin-sensitive, robust inhibition of forskolin-stimulated cyclic AMP (cAMP) accumulation in both CHO M(2) and CHO M(2)+M(3) cells and a less robust inhibition in CHO M(3) cells. At higher concentrations, oxotremorine-M elicited an increase in cAMP accumulation over the maximal inhibition noted at lower concentrations in both CHO M(3) and CHO M(2)+M(3) cells. Following pertussis toxin treatment, only the stimulatory phase of the cAMP response to oxotremorine-M was observed in CHO M(2), CHO M(3), and CHO M(2)+M(3) cells. The pharmacological antagonism of the cAMP response in CHO M(2)+M(3) cells resembled that expected for a response mediated independently by both M(2) and M(3) receptors.

Comparison of the pharmacological antagonism of M2 and M3 muscarinic receptors expressed in isolation and in combination.

Nous avons compar&#xE9; les propri&#xE9;t&#xE9;s de liaison de s&#xE9;lectifs antagonistes muscariniques avec leurs puissances pour antagoniser les r&#xE9;ponses muscariniques dans l&#x26;#39;ovaire de hamster chinois (CHO) exprimant M (2) et M (3) des r&#xE9;cepteurs muscariniques, en combinaison et dans l&#x26;#39;isolement. Lorsqu&#x26;#39;elle est mesur&#xE9;e par le d&#xE9;placement comp&#xE9;titif de [3H]-N-m&#xE9;thylscopolamine liaison aux cellules CHO exprimant &#xE0; la fois M (2) et M (3) des r&#xE9;cepteurs muscariniques (CHO M (2) + m (3) des cellules), les courbes de la concurrence de la sous-type -s&#xE9;lectifs antagonistes muscariniques sont compatibles avec un mod&#xE8;le &#xE0; deux sites. Un site a montr&#xE9; des propri&#xE9;t&#xE9;s de liaison identiques &#xE0; celles de CHO M (2) des cellules, tandis que l&#x26;#39;autre site a montr&#xE9; des propri&#xE9;t&#xE9;s semblables &#xE0; celles de CHO M (3) des cellules. Oxotr&#xE9;morine-M, un agoniste muscarinique, a suscit&#xE9; un solide, la toxine pertussique insensible stimulation de l&#x26;#39;hydrolyse des phosphoinositides dans les deux CHO M (3) et CHO M (2) + M (3) des cellules, mais pas dans CHO M (2) des cellules. L&#x26;#39;antagonisme pharmacologique de la r&#xE9;ponse phosphoinositide a montr&#xE9; des propri&#xE9;t&#xE9;s similaires &#xE0; la fois dans CHO M (3) et CHO M (2) + m (3) des cellules. Oxotr&#xE9;morine-M a suscit&#xE9; une coqueluche sensibles &#xE0; la toxine, l&#x26;#39;inhibition de la forskoline robuste stimul&#xE9;e par l&#x26;#39;AMP cyclique (AMPc), accumulation dans les deux CHO M (2) et CHO M (2) + m (3) les cellules et une inhibition moins robuste dans des cellules CHO M ( 3) des cellules. &#xC0; des concentrations plus &#xE9;lev&#xE9;es, oxotr&#xE9;morine-M a suscit&#xE9; une augmentation de l&#x26;#39;accumulation d&#x26;#39;AMPc sur l&#x26;#39;inhibition maximale a not&#xE9; &#xE0; des concentrations inf&#xE9;rieures &#xE0; la fois dans CHO M (3) et CHO M (2) + m (3) des cellules. Apr&#xE8;s traitement par la toxine pertussis, seule la phase de stimulation de la r&#xE9;ponse de l&#x26;#39;AMPc &#xE0; oxotr&#xE9;morine-M a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e dans des cellules CHO M (2), CHO M (3), et CHO M (2) + m (3) des cellules. L&#x26;#39;antagonisme pharmacologique de la r&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;AMPc dans des cellules CHO M (2) + m (3) cellules ressemblait &#xE0; celui attendu pour une r&#xE9;ponse m&#xE9;di&#xE9;e par les deux ind&#xE9;pendamment M (2) et M (3) r&#xE9;cepteurs.

Comparaison de l&#x26;#39;antagonisme pharmacologique de M2 &#x200B;&#x200B;et M3 r&#xE9;cepteurs muscariniques Exprim&#xE9; en isolement et en association

Vergleich der pharmakologischen Antagonismus der Klassen M2 und M3 Muscarin-Rezeptoren isoliert und in Kombination zum Ausdruck gebracht.

Abbiamo confrontato le propriet&agrave; di associazione degli antagonisti muscarinici selettivi con loro potenze per inimicarsi muscarinico risposte nelle cellule di ovaio (CHO) criceto cinese che esprimono i recettori muscarinici M(2) e M(3) nella combinazione e nell&#39;isolamento. Quando misurata dallo spostamento competitivo di [3h] N-methylscopolamine associazione a CHO le cellule che esprimono i recettori muscarinici sia M(2) e M(3) (cellule CHO M(2)+M(3)), le curve di concorso degli antagonisti muscarinici selettivi sottotipo erano coerenti con un modello di due-sito. Un sito esposto associazione propriet&agrave; identiche a quelle delle cellule CHO M(2), mentre l&#39;altro sito esposto propriet&agrave; come quelli delle cellule CHO M(3). Oxotremorina-M, un agonista muscarinico, ha suscitato una robusto, stimolazione di pertosse tossina-insensibile di phosphoinositide idrolisi in cellule CHO M(3) sia M(2)+M(3) CHO, ma non nelle cellule CHO M(2). L&#39;antagonismo farmacologico della risposta phosphoinositide esposte propriet&agrave; simili nelle cellule CHO M(3) sia M(2)+M(3) CHO. Oxotremorina-M ha suscitato un&#39;inibizione di pertosse tossina sensibile, robusto di forskolina stimola l&#39;AMP ciclico (cAMP) accumulo nelle cellule CHO M(2) e CHO M(2)+M(3) sia e un&#39;inibizione meno robusta in cellule CHO M(3). A concentrazioni pi&ugrave; elevate, Oxotremorina-M ha suscitato un aumento di cAMP accumulo sopra l&#39;inibizione massima osservato a concentrazioni inferiori nelle cellule CHO M(3) sia M(2)+M(3) CHO. Pertosse a seguito di trattamento con tossina, solo la fase stimolante della risposta cAMP a Oxotremorina-M &egrave; stata osservata nelle cellule CHO M(2), CHO M(3) e CHO M(2)+M(3). L&#39;antagonismo farmacologico della risposta cAMP nelle cellule CHO M(2)+M(3) ha assomigliato a quello previsto per una risposta indipendente mediata da recettori sia M(2) e M(3).

Confronto tra l&#39;antagonismo farmacologico dei recettori muscarinici M2 e M3, espresso in isolamento e in combinazione.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x3068;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x53CA;&#x3073;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30A4;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5375;&#x5DE3;&#xFF08;CHO&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x62EE;&#x6297;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002; M&#xFF08;2&#xFF09;&#x3068;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;+ M&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;CHO&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;[3H] N-methylscopolamine&#x3001;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x66F2;&#x7DDA;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x3092;&#x5909;&#x4F4D;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;CHO M&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x3001;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;CHO M&#xFF08;3&#xFF09;&#x3068;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;+ M&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x3001;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3068;&#x5C0F;&#x6587;&#x5B57;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;CHO M&#xFF08;3&#xFF09;&#x3068;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;+ M&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x540C;&#x3058;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306F;&#x3001;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;&#x3068;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;+ M&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;CHO M&#xFF08;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;AMP&#xFF08;cAMP&#xFF09;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;cAMP&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;CHO M&#xFF08;3&#xFF09;&#x3068;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;+ M&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x3044;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x6307;&#x6458;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#x51E6;&#x7406;&#x5F8C;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x3078;&#x306E;cAMP&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x306F;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;&#x3001;CHO M&#xFF08;3&#xFF09;&#x3001;CHO M&#xFF08;2&#xFF09;+ M&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; CHO M&#xFF08;2&#xFF09;+ M&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;cAMP&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x3068;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x671F;&#x5F85;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;

&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3084;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;M2&#x304A;&#x3088;&#x3073;M3&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;

&#xC6B0;&#xB9AC; antagonizing muscarinic &#xC751;&#xB2F5; &#xC911;&#xAD6D; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xB09C;&#xC18C; (&#xC870;) &#xC140; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; M(2) &#xBC0F; M(3) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xC870;&#xD569; &#xBC0F; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; potencies&#xC640; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; muscarinic antagonists&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC870; &#xC140; M(2) &#xBC0F; M(3) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; (&#xC870; M(2)+M(3) &#xC140;) &#xD45C;&#xD604; [3h] N methylscopolamine &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xACBD;&#xC7C1; &#xBCC0;&#xC704;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD558;&#xC704; &#xC120;&#xD0DD; muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xADFC;&#xC758; &#xACBD;&#xC7C1; &#xACE1;&#xC120; 2-&#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBAA8;&#xB378;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74; &#xC870; M(3) &#xC140;&#xC758; &#xADF8; &#xAC19;&#xC740; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xC131; &#xC870; M(2) &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB3D9;&#xC77C; &#xC804;&#xC2DC;. Oxotremorine M muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, phosphoinositide&#xAC00; &#xC218; &#xBD84;&#xD574; &#xC870; M(3) &#xBC0F; &#xC870; M(2)+M(3) &#xC140;&#xB9CC; &#xC870; M(2) &#xC140;&#xC758; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xACE0;, &#xBC31; &#xC77C; &#xD574; &#xB3C5; &#xC18C;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; elicited. Phosphoinositide &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559; &#xC801;&#xC778; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC; &#xC870; M(3) &#xBC0F; &#xC870; M(2)+M(3) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. Oxotremorine-M &#xBAA8;&#xB450; &#xC870; M(2) &#xBC0F; &#xC870; M(2)+M(3) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB204;&#xC801; &#xB41C; &#xC21C;&#xD658; &#xC570;&#xD504; forskolin &#xC790;&#xADF9; (&#xCEA0;&#xD504;)&#xC758; &#xBC31; &#xC77C; &#xD574; &#xB3C5; &#xC18C; &#xAD6C;&#xBD84;, &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC800;&#xD574; &#xBC0F; &#xC870; M(3) &#xC140;&#xC758; &#xB35C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC800;&#xD574; elicited. &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; oxotremorine M &#xC870; M(3) &#xBC0F; &#xC870; M(2)+M(3) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xCEA0;&#xD504; &#xCD95;&#xC801; &#xC99D;&#xAC00; elicited. &#xBC31; &#xC77C; &#xD574;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB3C5; &#xC18C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xB85C; oxotremorine m &#xCEA0;&#xD504; &#xC751;&#xB2F5; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB9CC; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC870; M(2), &#xC870; M(3) &#xC870; M(2)+M(3) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC870; M(2)+M(3) &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCEA0;&#xD504; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559; &#xC801;&#xC778; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC; &#xB2EE;&#xC740; M(2) &#xBC0F; M(3) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC7AC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xC0C1; &#xB418;&#xB294;.

M2 &#xBC0F; M3 muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xACB0;&#xD569;&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559; &#xC801;&#xC778; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;.

Se compararon las propiedades de uni&#xF3;n de antagonistas selectivos muscar&#xED;nicos con sus potencias para antagonizar las respuestas muscar&#xED;nicos en el ovario de h&#xE1;mster chino (CHO) c&#xE9;lulas que expresan M (2) y M (3) los receptores muscar&#xED;nicos en combinaci&#xF3;n y en el aislamiento. Cuando se mide por el desplazamiento competitivo de [3H]-N-metilescopolamina uni&#xF3;n a las c&#xE9;lulas CHO que expresan tanto M (2) y M (3) los receptores muscar&#xED;nicos (CHO M (2) + m (3) c&#xE9;lulas), las curvas de competencia del subtipo selectivos antagonistas muscar&#xED;nicos fueron consistentes con un modelo de dos sitios. Un sitio exhiben propiedades de uni&#xF3;n id&#xE9;nticos a los de CHO M (2) c&#xE9;lulas, mientras que el otro sitio exhiben propiedades como las de CHO M (3) c&#xE9;lulas. Oxotremorina-H, un agonista muscar&#xED;nico, provoc&#xF3; una tos ferina robusto, toxina-insensible estimulaci&#xF3;n de hidr&#xF3;lisis fosfoinositida en tanto CHO M (3) y CHO M (2) + M (3) las c&#xE9;lulas, pero no en CHO M (2) c&#xE9;lulas. El antagonismo de la respuesta farmacol&#xF3;gica fosfoinositida exhiben propiedades similares en ambos CHO M (3) y CHO M (2) + m (3) c&#xE9;lulas. Oxotremorina-M provoc&#xF3; una toxina pertussis sensible inhibici&#xF3;n, robusto de forskolina estimulada por AMP c&#xED;clico (AMPc) acumulaci&#xF3;n en tanto CHO M (2) y CHO M (2) + m (3) las c&#xE9;lulas y una inhibici&#xF3;n menos robusta en CHO M ( 3) c&#xE9;lulas. A concentraciones m&#xE1;s altas, oxotremorina-M provoc&#xF3; un aumento en la acumulaci&#xF3;n de AMPc sobre la inhibici&#xF3;n m&#xE1;xima observ&#xF3; a concentraciones m&#xE1;s bajas en ambos CHO M (3) y CHO M (2) + m (3) c&#xE9;lulas. Despu&#xE9;s del tratamiento toxina pertussis, s&#xF3;lo la fase estimuladora de la respuesta a AMPc oxotremorina-M se observ&#xF3; en CHO M (2), CHO M (3), y CHO M (2) + m (3) c&#xE9;lulas. El antagonismo de la respuesta farmacol&#xF3;gica de cAMP en c&#xE9;lulas CHO M (2) + m (3) las c&#xE9;lulas se asemejaba que espera una respuesta mediada separado de los dos M (2) y los receptores M (3).

Comparaci&#xF3;n del antagonismo farmacol&#xF3;gico de los receptores muscar&#xED;nicos M2 y M3 Expresado de forma aislada y en combinaci&#xF3;n

&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x8C03;&#x89E3;&#x5728;&#x79BB;&#x4F53;&#x56DE;&#x80A0;&#x7684;&#x77ED;&#x671F;&#x5916;&#x6E90;&#x8131;&#x654F;&#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x7684;&#x578B;&#x3002;&#x4ECE;&#x4E0E;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1; &#xFF08;30 microM&#xFF09; 20 &#x5206;&#x949F; C57BL/6 &#x5C0F;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#x6CBB;&#x7597;&#x81F4;&#x6536;&#x7F29;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x7D20; F2alpha (PGF2alpha) &#x548C;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x4FC3;&#x6548;&#x5242;&#xFF0C;oxotremorine-M &#x968F;&#x540E;&#x6709;&#x6240;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x6B64; subsensitivity &#x7279;&#x70B9;&#x662F; 7 &#x548C; 3 &#x500D;&#x5347;&#x5E45;&#x7684; EC50 &#x503C;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x54CD;&#x5E94;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;PGF2alpha &#x5230; subsensitivity &#x65E0;&#x6CD5;&#x5728; M2 &#x548C; M3 &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;&#x5230; oxotremorine M subsensitivity &#x65E0;&#x6CD5;&#x5728; M2 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8131;&#x654F;&#x7684;&#x8C5A;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#x7EC4;&#x80FA;&#x6536;&#x7F29;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x4E24;&#x79CD; M2 &#x548C; M3 &#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x70C8;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4ED4;&#x7EC6;&#x5206;&#x6790;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x66F4;&#x7B26;&#x5408; M2 &#x62EE;&#x6297;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x5EFA;&#x6A21;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x54CD;&#x5E94;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x5E94;&#x5C55;&#x73B0;&#x836F;&#x7406;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x6700;&#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x7684;&#x80A0;&#x9053;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x77ED;&#x671F;&#x5916;&#x6E90;&#x8131;&#x654F;&#x662F;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; M2 &#x548C; M3 &#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4EFB;&#x4E00;&#x53D7;&#x4F53;&#x672C;&#x8EAB;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8131;&#x654F;&#x3002;

&#x5728;&#x79BB;&#x4F53;&#x56DE;&#x80A0;&#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5916;&#x6E90;&#x8131;&#x654F;&#x9700;&#x8981;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x7684; M2 &#x548C; M3 &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

We investigated the subtypes of the muscarinic receptor mediating short-term heterologous desensitization in the isolated ileum. Treatment of the ileum from C57BL/6 mice with acetylcholine (30 microM) for 20 min caused a subsequent decrease in contractile sensitivity to both prostaglandin F2alpha (PGF2alpha) and the muscarinic agonist, oxotremorine-M. This subsensitivity was characterized by 7- and 3-fold increases in the EC50 values of the agonists, respectively, with no significant effect on the maximal response. The subsensitivity to PGF2alpha was prevented in both M2 and M3 muscarinic receptor knockout mice. Similarly, the subsensitivity to oxotremorine-M was prevented in M2 knockout mice. Acetylcholine-mediated desensitization of histamine-induced contractions in the guinea pig ileum was inhibited by both M2- and M3-selective muscarinic antagonists with high potency, although careful analysis of the data suggested behavior more consistent with an M2 antagonistic profile. Modeling studies showed that the competitive antagonism of response contingent upon activation of two receptor subtypes should exhibit a pharmacological profile similar to that of the least sensitive signaling pathway. Our results demonstrate that muscarinic agonist-mediated short-term heterologous desensitization of intestinal smooth muscle is contingent upon activation of both M2 and M3 muscarinic receptors and that activation of either receptor by itself is insufficient to cause desensitization.

Muscarinic agonist-mediated heterologous desensitization in isolated ileum requires activation of both muscarinic M2 and M3 receptors.

Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les sous-types de r&#xE9;cepteurs muscariniques de m&#xE9;diation &#xE0; court terme d&#xE9;sensibilisation h&#xE9;t&#xE9;rologue dans l&#x26;#39;il&#xE9;on isol&#xE9;. Traitement de l&#x26;#39;il&#xE9;on de souris C57BL / 6 avec l&#x26;#39;ac&#xE9;tylcholine (30 microM) pour 20 min a entra&#xEE;n&#xE9; une diminution ult&#xE9;rieure de la sensibilit&#xE9; contractile &#xE0; la fois de la prostaglandine F2alpha (PGF2alpha) et l&#x26;#39;agoniste muscarinique, oxotr&#xE9;morine-M. Cette hyposensibilit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9;e par 7 - et 3-une multiplication dans les valeurs de la CE50 des agonistes, respectivement, avec aucun effet significatif sur la r&#xE9;ponse maximale. Le hyposensibilit&#xE9; &#xE0; PGF2alpha a &#xE9;t&#xE9; emp&#xEA;ch&#xE9; dans les deux M2 et M3 muscariniques souris knock-out des r&#xE9;cepteurs. De m&#xEA;me, l&#x26;#39;hyposensibilit&#xE9; &#xE0; oxotr&#xE9;morine-M a &#xE9;t&#xE9; emp&#xEA;ch&#xE9; de souris knock-out M2. L&#x26;#39;ac&#xE9;tylcholine induite par la d&#xE9;sensibilisation de l&#x26;#39;histamine induites par les contractions de l&#x26;#39;il&#xE9;on de porc Guin&#xE9;e a &#xE9;t&#xE9; inhib&#xE9;e par les deux antagonistes M2 et M3-s&#xE9;lectif muscariniques avec une puissance &#xE9;lev&#xE9;e, bien que l&#x26;#39;analyse minutieuse des donn&#xE9;es sugg&#xE8;re un comportement plus conforme &#xE0; un profil M2 antagonistes. Des &#xE9;tudes de mod&#xE9;lisation ont montr&#xE9; que l&#x26;#39;antagonisme comp&#xE9;titif du contingent de r&#xE9;ponse lors de l&#x26;#39;activation de deux types de r&#xE9;cepteurs doivent pr&#xE9;senter un profil pharmacologique similaire &#xE0; celle de la voie de signalisation moins sensible. Nos r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que muscarinique agoniste &#xE0; m&#xE9;diation &#xE0; court terme d&#xE9;sensibilisation h&#xE9;t&#xE9;rologue du muscle lisse intestinal est subordonn&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;activation des deux M2 et M3 r&#xE9;cepteurs muscariniques et que l&#x26;#39;activation du r&#xE9;cepteur soit par lui-m&#xEA;me est insuffisante pour provoquer une d&#xE9;sensibilisation.

Muscarinic agoniste &#xE0; m&#xE9;diation d&#xE9;sensibilisation h&#xE9;t&#xE9;rologue dans il&#xE9;on isol&#xE9; n&#xE9;cessite l&#x26;#39;activation de deux r&#xE9;cepteurs muscariniques M2 et M3

Muskarinagonisten-vermittelten heterologen Desensibilisierung in isolierten Ileum erfordert die Aktivierung beider Muskarin M2 und M3-Rezeptoren.

Abbiamo studiato i sottotipi del recettore muscarinico desensibilizzazione eterologa a breve termine nell&#39;ileo isolato di mediazione. Trattamento dell&#39;ileo da topi C57BL/6 con acetilcolina (microM 30) per 20 min causava un calo successivo contrattile sensibilit&agrave; di entrambi prostaglandina F2alpha (PGF2alpha) e l&#39;agonista muscarinico, Oxotremorina-M. Questo subsensitivity &egrave; stato caratterizzato da aumenti di 7 - 3 volte i valori di EC50 di agonisti, rispettivamente, con nessun effetto significativo sulla risposta massima. Il subsensitivity di PGF2alpha &egrave; stato evitato sia M2 e M3 topi knockout del recettore muscarinico. Allo stesso modo, la subsensitivity a Oxotremorina-M &egrave; stato evitato in topi knockout M2. Acetilcolina-mediata desensibilizzazione delle contrazioni indotta da istamina nell&#39;ileo di cavia &egrave; stato inibito da entrambi antagonisti muscarinici M2 e M3-selettivo con potenza elevata, anche se un&#39;attenta analisi dei dati suggerito il comportamento pi&ugrave; coerenza con un profilo antagonistico M2. Modellazione studi hanno mostrato che l&#39;antagonismo competitivo del contingente di risposta all&#39;attivazione di due sottotipi di recettore deve esibire un profilo farmacologico simile a che di meno sensibili signaling pathway. I nostri risultati dimostrano che il muscarinico mediata da agonista a breve termine eterologa desensibilizzazione della muscolatura liscia intestinale &egrave; condizionato all&#39;attivazione dei recettori muscarinici sia M2 e M3 e che l&#39;attivazione di o recettore di per s&eacute; &egrave; insufficiente per causare desensibilizzazione.

Muscarinico desensibilizzazione eterologa agonista-mediata nell&#39;ileo isolato richiede l&#39;attivazione di entrambi recettori muscarinici M2 e M3.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6458;&#x51FA;&#x56DE;&#x8178;&#x306E;&#x77ED;&#x671F;&#x7570;&#x7A2E;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 20&#x5206;&#x9593;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;30&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF09;&#x3092;C57BL / 6&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x56DE;&#x8178;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30F3;F2alpha&#xFF08;PGF2alpha&#xFF09;&#x3068;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5927;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;EC50&#x5024;&#x306E;3&#x500D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0; - &#x3053;&#x306E;subsensitivity&#x306F;7&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002; PGF2alpha&#x3078;subsensitivity&#x306F;&#x3001;M2&#x304A;&#x3088;&#x3073;M3&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x963B;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306B;subsensitivity&#x306F;M2&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x614E;&#x91CD;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x304C;M2&#x62EE;&#x6297;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x305F;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;&#x30E2;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C3;&#x30C8;&#x56DE;&#x8178;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x8A98;&#x767A;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x52B9;&#x529B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;M2&#x3068;M3-&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x5076;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3079;&#x304D;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x306B;&#x306F;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x8178;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x85AC;&#x4ECB;&#x5728;&#x6027;&#x306E;&#x77ED;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x7570;&#x7A2E;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x306F;&#x3001;M2&#x304A;&#x3088;&#x3073;M3&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x81EA;&#x4F53;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x8D77;&#x52D5;&#x6642;&#x306B;&#x5076;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x6458;&#x51FA;&#x56DE;&#x8178;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x85AC;&#x4ECB;&#x5728;&#x6027;&#x7570;&#x7A2E;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x306F;&#x3001;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;M2&#x3068;M3&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xAE30; heterologous &#xB454;&#xAC10; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC11C; &#xC911;&#xC7AC; muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC720;&#xD615; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; (30 microM) 20 &#xBD84; &#xB41C; C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; &#xC218;&#xCD95; &#xC131; &#xAC10;&#xB3C4; &#xB450; &#xC2A4;&#xD0C0; &#xAE00;&#xB780; &#xB518; F2alpha (PGF2alpha)&#xC640; muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, oxotremorine M &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; subsensitivity &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xAC01;&#xAC01; 7&#xACFC; 3 &#xBC30; &#xC99D;&#xAC00; agonists EC50 &#xAC12;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xD588;&#xB2E4;. Subsensitivity pgf2alpha&#xC5D0;&#xB294; M2 &#xBC0F; M3 muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, oxotremorine m subsensitivity M2 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0; &#xBC29;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xB2C8; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xCD95; &#xD788; &#xC2A4;&#xD0C0; &#xBBFC; &#xC720;&#xBC1C;&#xC758; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC911;&#xC7AC; &#xB454;&#xAC10; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xC8FC;&#xC758; &#xAE4A;&#xC740; &#xBD84;&#xC11D; &#xC81C;&#xC548; &#xB3D9;&#xC791; M2 &#xB300;&#xB9BD; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB192;&#xC740; &#xD798;&#xACFC; &#xB450; M2 &#xBC0F; M3 &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xB450; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD558;&#xC704;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC751;&#xB2F5; &#xBD88;&#xD655;&#xC815;&#xC758; &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xC788;&#xB294; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC57D;&#xB9AC; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC911;&#xC7AC; &#xB2E8;&#xAE30; heterologous &#xB454;&#xAC10; &#xC7A5; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC;&#xC758; M2 &#xBC0F; M3 muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD30C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC790;&#xCCB4;&#xB85C; &#xC5B4;&#xB290; &#xAC83;&#xC774; &#xB4E0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xB454;&#xAC10; &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC11C;&#xC5D0; muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC911;&#xC7AC; heterologous &#xB454;&#xAC10; &#xB450; muscarinic M2 &#xBC0F; M3 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD55C;&#xB2E4;.

Se investigaron los subtipos de los receptores muscar&#xED;nicos de mediaci&#xF3;n a corto plazo la desensibilizaci&#xF3;n heter&#xF3;loga en el &#xED;leon aislado. El tratamiento del &#xED;leo de ratones C57BL / 6 con acetilcolina (30 microM) durante 20 min caus&#xF3; una disminuci&#xF3;n posterior de la sensibilidad a la prostaglandina contr&#xE1;ctil F2alfa ambos (PGF2alpha) y el agonista muscar&#xED;nico, oxotremorina-M. Este subsensibilidad se caracteriz&#xF3; por 7 - y 3-veces los aumentos de los valores de EC50 de los agonistas, respectivamente, sin ning&#xFA;n efecto significativo sobre la respuesta m&#xE1;xima. El subsensibilidad de PGF2alpha fue impedida en ambos M2 y M3 ratones knockout de los receptores muscar&#xED;nicos. Del mismo modo, el subsensibilidad de oxotremorina-M se evit&#xF3; en ratones knockout M2. La acetilcolina mediada por la desensibilizaci&#xF3;n de las contracciones inducidas por la histamina en el &#xED;leon de cobayo fue inhibida por los antagonistas muscar&#xED;nicos M2 y M3-selectiva-con alta potencia, a pesar de un cuidadoso an&#xE1;lisis de los datos sugiere un comportamiento m&#xE1;s coherente con un perfil hostil M2. Los estudios de simulaci&#xF3;n mostr&#xF3; que el antagonismo competitivo de contingente respuesta a la activaci&#xF3;n de dos subtipos de receptores debe exhibir un perfil farmacol&#xF3;gico similar a la de la v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n al menos sensible. Nuestros resultados demuestran que muscar&#xED;nico agonista mediada a corto plazo desensibilizaci&#xF3;n heter&#xF3;loga de m&#xFA;sculo liso intestinal depende de la activaci&#xF3;n de ambos receptores muscar&#xED;nicos M2 y M3 y que la activaci&#xF3;n de los receptores ya sea por s&#xED; solo es insuficiente para causar la desensibilizaci&#xF3;n.

Agonista muscar&#xED;nico mediada desensibilizaci&#xF3;n heter&#xF3;loga en ileon aislado requiere la activaci&#xF3;n de dos receptores muscar&#xED;nicos M2 y M3

&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x62EE;&#x6297;&#x5242; p-fluorohexahydrosiladifenidol &#x6291;&#x5236;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6536;&#x7F29;&#x548C;&#x8C5A;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#x548C;&#x6C14;&#x7BA1;&#x4E2D;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#x6C34;&#x89E3;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6B64;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x963B;&#x6B62; oxotremorine-M &#x81F4;&#x6536;&#x7F29;&#x7684;&#x56DE;&#x80A0;&#x4E0E;&#x6C14;&#x7BA1;&#x76F8;&#x6BD4;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x6548;&#x80FD;&#x3002;&#x5F53;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x4E3A;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4F30;&#x8BA1;&#xFF0C;p fluorohexahydrosiladifenidol &#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x89E3;&#x79BB;&#x5E38;&#x6570;&#x5C55;&#x51FA;&#x56DE;&#x80A0;&#x4E0E;&#x6C14;&#x7BA1;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5927;&#x7EA6; 12-fold &#x9AD8;&#x6548;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86; p fluorohexahydrosiladifenidol &#x80FD;&#x591F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7531;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x963F;&#x6258;&#x54C1;&#x5F15;&#x8D77;&#x6536;&#x7F29;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x7ED3;&#x679C;&#x5206;&#x6790;&#x6765;&#x5206;&#x6790;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4E92;&#x52A8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; p fluorohexahydrosiladifenidol &#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x62EE;&#x6297; oxotremorine-M &#x81F4;&#x56DE;&#x80A0;&#x6536;&#x7F29;&#x7684;&#x771F;&#x6B63;&#x89E3;&#x79BB;&#x5E38;&#x6570;&#x5C55;&#x793A;&#x663E;&#x8457;&#x8F83;&#x4F4E;&#x70C8;&#x5EA6;&#x6BD4;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8BA1;&#x7B97;&#x5047;&#x5B9A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; p fluorohexahydrosiladifenidol &#x6297; oxotremorine-M &#x81F4;&#x6C14;&#x7BA1;&#x6536;&#x7F29;&#x771F;&#x5B9E;&#x548C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6548;&#x529B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5DEE;&#x522B;&#x4E0D;&#x5927;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x5DEE;&#x522B;&#x4E0D;&#x5927;&#xFF0C;&#x5728;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x89E3;&#x79BB;&#x5E38;&#x6570;&#x7684; p fluorohexahydrosiladifenidol &#x62EE;&#x6297;&#x8C5A;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#x548C;&#x725B;&#x6C14;&#x7BA1; oxotremorine-M &#x8BF1;&#x5BFC;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#x6C34;&#x89E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#xFF0C;p fluorohexahydrosiladifenidol (0.3-1.0 microM&#xFF09; &#x9002;&#x5EA6;&#x6291;&#x5236;&#x7EC4;&#x80FA;&#x6536;&#x7F29;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x7684;&#x56DE;&#x80A0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;p fluorohexahydrosiladifenidol &#x4E0D;&#x533A;&#x522B;&#x660E;&#x663E; M(3) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x56DE;&#x80A0;&#x53CA;&#x6C14;&#x7BA1;&#x548C;&#x5B83; 5 &#x6708;&#x62E5;&#x6709;&#x66F4;&#x5F3A;&#x5927;&#x3001; nonmuscarinic &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x56DE;&#x80A0;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;

Antimuscarinic p fluorohexahydrosiladifenidol &#x56DE;&#x80A0;&#x548C;&#x6C14;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;

We investigated the ability of the muscarinic antagonist p-fluorohexahydrosiladifenidol to inhibit muscarinic agonist-induced contractions and phosphoinositide hydrolysis in the guinea pig ileum and trachea. This antagonist displayed higher potency at blocking oxotremorine-M-induced contractions of the ileum compared with those of the trachea. When estimated using a simple model for competitive antagonism, the observed dissociation constant of p-fluorohexahydrosiladifenidol exhibited approximately 12-fold higher potency in the ileum compared with the trachea. We also investigated the ability of p-fluorohexahydrosiladifenidol to affect the inhibition of contraction caused by the known competitive muscarinic antagonist atropine. Using resultant analysis to analyze this interaction, we found that the true dissociation constant of p-fluorohexahydrosiladifenidol for competitively antagonizing oxotremorine-M-induced contractions in the ileum exhibited significantly lower potency than when calculated assuming a simple competitive model. In contrast, resultant analysis showed little difference between the true and observed potencies of p-fluorohexahydrosiladifenidol for antagonizing oxotremorine-M-induced contractions in the trachea. Using a simple competitive model, we found little difference in the observed dissociation constant of p-fluorohexahydrosiladifenidol for antagonizing oxotremorine-M-induced phosphoinositide hydrolysis in guinea pig ileum and bovine trachea. We also noted that p-fluorohexahydrosiladifenidol (0.3-1.0 microM) moderately inhibited histamine-induced contractions of ileum but not of trachea. Our results suggest that p-fluorohexahydrosiladifenidol does not discriminate markedly between M(3) muscarinic receptors in the ileum and trachea and that it may posses a more potent, nonmuscarinic inhibitory effect on contraction in the ileum.

Comparison of the antimuscarinic action of p-fluorohexahydrosiladifenidol in ileal and tracheal smooth muscle.

Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; la capacit&#xE9; de l&#x26;#39;antagoniste muscarinique p-fluorohexahydrosiladifenidol pour inhiber muscariniques agoniste contractions provoqu&#xE9;es par l&#x26;#39;hydrolyse des phosphoinositides et dans l&#x26;#39;il&#xE9;on de porc Guin&#xE9;e et de la trach&#xE9;e. Cet antagoniste affich&#xE9;e plus grande puissance &#xE0; bloquer oxotr&#xE9;morine-M-contractions induites de l&#x26;#39;il&#xE9;on par rapport &#xE0; ceux de la trach&#xE9;e. Lorsque estim&#xE9; en utilisant un mod&#xE8;le simple pour l&#x26;#39;antagonisme comp&#xE9;titif, la dissociation observ&#xE9;e constante de p-fluorohexahydrosiladifenidol expos&#xE9; d&#x26;#39;environ 12 fois plus puissant dans l&#x26;#39;il&#xE9;on par rapport &#xE0; la trach&#xE9;e. Nous avons &#xE9;galement &#xE9;tudi&#xE9; la capacit&#xE9; de p-fluorohexahydrosiladifenidol d&#x26;#39;affecter l&#x26;#39;inhibition de la contraction provoqu&#xE9;e par l&#x26;#39;comp&#xE9;titif connu antagoniste muscarinique atropine. En utilisant l&#x26;#39;analyse r&#xE9;sultante d&#x26;#39;analyser cette interaction, nous avons constat&#xE9; que la dissociation vraie constante de p-fluorohexahydrosiladifenidol pour la concurrence antagonistes oxotr&#xE9;morine-M-contractions induites dans l&#x26;#39;il&#xE9;on a montr&#xE9; une puissance nettement plus faible que lorsque calcul&#xE9;es en supposant un mod&#xE8;le simple concurrentiel. En revanche, l&#x26;#39;analyse qui en r&#xE9;sulte a montr&#xE9; peu de diff&#xE9;rence entre les puissances r&#xE9;elles et observ&#xE9;e de p-fluorohexahydrosiladifenidol pour antagoniser oxotr&#xE9;morine-M-contractions induites dans la trach&#xE9;e. En utilisant un mod&#xE8;le simple concurrentiel, nous avons trouv&#xE9; peu de diff&#xE9;rence dans la dissociation observ&#xE9;e constante de p-fluorohexahydrosiladifenidol pour l&#x26;#39;hydrolyse des phosphoinositides antagoniser oxotr&#xE9;morine-M-induite en Guin&#xE9;e porc il&#xE9;on et la trach&#xE9;e bovine. Nous avons &#xE9;galement not&#xE9; que le p-fluorohexahydrosiladifenidol (de 0.3 &#xE0; 1.0 microM) mod&#xE9;r&#xE9;ment inhib&#xE9;e par l&#x26;#39;histamine contractions induites par de l&#x26;#39;il&#xE9;on, mais pas de la trach&#xE9;e. Nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que p-fluorohexahydrosiladifenidol ne discrimine pas de fa&#xE7;on marqu&#xE9;e entre M (3) des r&#xE9;cepteurs muscariniques dans l&#x26;#39;il&#xE9;on et de la trach&#xE9;e et qu&#x26;#39;elle peut poss&#xE9;der un plus puissant, l&#x26;#39;effet inhibiteur sur la contraction nonmuscarinic dans l&#x26;#39;il&#xE9;on.

Comparaison de l&#x26;#39;action antimuscarinique de la P-fluorohexahydrosiladifenidol dans le muscle lisse il&#xE9;al et la trach&#xE9;e

Vergleich der antimuskarinischen Aktion von p-fluorohexahydrosiladifenidol in Ileum und trachealen glatten Muskulatur.

Abbiamo studiato la capacit&agrave; di inibire le contrazioni indotte da agonista muscarinico e idrolisi di phosphoinositide nell&#39;ileo di cavia e trachea l&#39;antagonista muscarinico p-fluorohexahydrosiladifenidol. Questo antagonista visualizzato potenza superiore a bloccare le contrazioni Oxotremorina-M-indotta dell&#39;ileo rispetto a quelli della trachea. Quando stimato utilizzando un semplice modello per antagonismo competitivo, la costante di dissociazione osservati di p-fluorohexahydrosiladifenidol esposte circa conduttori potenza superiore nell&#39;ileo confrontato con la trachea. Abbiamo anche studiato la possibilit&agrave; di influenzare l&#39;inibizione della contrazione causata dall&#39;atropina noto competitivo antagonista muscarinico p-fluorohexahydrosiladifenidol. Utilizzando l&#39;analisi risultante per analizzare questa interazione, abbiamo trovato che la costante di dissociazione vera di p-fluorohexahydrosiladifenidol per inimicarsi competitivamente contrazioni Oxotremorina-M-indotta nell&#39;ileo esposte potenza significativamente inferiore rispetto a quando calcolata assumendo un semplice modello competitivo. Al contrario, l&#39;analisi risulta ha mostrato poca differenza tra il vera e osservate potenze di p-fluorohexahydrosiladifenidol per inimicarsi le contrazioni Oxotremorina-M-indotta nella trachea. Utilizzando un semplice modello competitivo, abbiamo trovato poca differenza la costante di dissociazione osservati di p-fluorohexahydrosiladifenidol per inimicarsi idrolisi di phosphoinositide Oxotremorina-M-indotta in guinea pig trachea ileo e bovini. Abbiamo anche notato che p-fluorohexahydrosiladifenidol (0,3-1,0 microM) moderatamente inibiti indotta da istamina contrazioni dell&#39;ileo, ma non della trachea. I nostri risultati suggeriscono che p-fluorohexahydrosiladifenidol non discrimina nettamente tra M(3) recettori muscarinici nell&#39;ileo e trachea e che maggio possiede un effetto inibitorio pi&ugrave; potente, nonmuscarinic sulla contrazione nell&#39;ileo.

Confronto tra l&#39;azione della p-fluorohexahydrosiladifenidol nel muscolo liscio ileale e trachea antimuscarinici.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C3;&#x30C8;&#x56DE;&#x8178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6C17;&#x7BA1;&#x5185;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3068;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306E;p-fluorohexahydrosiladifenidol&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306F;&#x3001;&#x6C17;&#x7BA1;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x56DE;&#x8178;&#x306E;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M-&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3067;&#x9AD8;&#x3044;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7AF6;&#x5408;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3001;P-fluorohexahydrosiladifenidol&#x306E;&#x5B9A;&#x6570;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x89E3;&#x96E2;&#x306F;&#x6C17;&#x7BA1;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x56DE;&#x8178;&#x306B;&#x7D04;12&#x500D;&#x9AD8;&#x3044;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x30A2;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x306E;p-fluorohexahydrosiladifenidol&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x56DE;&#x8178;&#x3067;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M-&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;p-fluorohexahydrosiladifenidol&#x306E;&#x5B9A;&#x6570;&#x771F;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x7AF6;&#x4E89;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x8A08;&#x7B97;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6C17;&#x7BA1;&#x5185;&#x62EE;&#x6297;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M-&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;p-fluorohexahydrosiladifenidol&#x306E;&#x771F;&#x3068;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52B9;&#x529B;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x7AF6;&#x4E89;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30E2;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C3;&#x30C8;&#x56DE;&#x8178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A6;&#x30B7;&#x6C17;&#x7BA1;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M-&#x8A98;&#x5C0E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;P-fluorohexahydrosiladifenidol&#x306E;&#x5B9A;&#x6570;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x89E3;&#x96E2;&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x5DEE;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;P-fluorohexahydrosiladifenidol&#xFF08;0.3&#x304B;&#x3089;1.0&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF09;&#x304C;&#x9069;&#x5EA6;&#x306B;&#x56DE;&#x8178;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x6C17;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x8A98;&#x767A;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x6307;&#x6458;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;p-fluorohexahydrosiladifenidol&#x306F;&#x3001;&#x56DE;&#x8178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6C17;&#x7BA1;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x6B66;&#x88C5;&#x968A;&#x56DE;&#x8178;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x3001;nonmuscarinic&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x5DEE;&#x5225;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x56DE;&#x8178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6C17;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;P-fluorohexahydrosiladifenidol&#x306E;&#x6297;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;

&#xC6B0;&#xB9AC; muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC720;&#xB3C4; &#xC218;&#xCD95; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2C8; &#xD53C;&#xADF8; &#xC11C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xAD00;&#xC9C0; phosphoinositide &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xC5B5;&#xC81C; muscarinic &#xC801;&#xC5D0; &#xAC8C; p-fluorohexahydrosiladifenidol&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC774; &#xC801;&#xC5D0;&#xC774; &#xAC8C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB3C4;&#xC758; &#xC0AC;&#xB78C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC11C;&#xC758; oxotremorine M &#xC720;&#xB3C4; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xD798;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xC788;&#xB294; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD94;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; p-fluorohexahydrosiladifenidol&#xC758; &#xAD00;&#xCE21;&#xB41C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC11C; &#xC57D; 12-fold &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xD798; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; p fluorohexahydrosiladifenidol &#xC218; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xACBD;&#xC7C1; muscarinic &#xC801;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC544;&#xD2B8;&#xB85C; &#xD540;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xC218;&#xCD95; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xACBD;&#xC7C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; antagonizing&#xB294; &#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; oxotremorine M &#xC720;&#xB3C4; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; p-fluorohexahydrosiladifenidol&#xC758; &#xC9C4;&#xC815;&#xD55C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xC218; &#xC804;&#xC2DC; &#xB54C; &#xB2E8;&#xC21C; &#xACBD;&#xC7C1; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAC00;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xACC4;&#xC0B0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB0AE;&#xC740; &#xD798; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xACB0;&#xACFC; &#xBD84;&#xC11D; antagonizing &#xAE30;&#xB3C4;&#xC5D0; oxotremorine M &#xC720;&#xB3C4; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; p-fluorohexahydrosiladifenidol&#xC758; &#xC0AC;&#xC2E4;&#xACFC; &#xAD00;&#xCC30; potencies &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; antagonizing &#xAE30;&#xB2C8; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC11C; &#xBC0F; &#xC18C; &#xAE30;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; phosphoinositide oxotremorine M &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; p-fluorohexahydrosiladifenidol&#xC758; &#xAD00;&#xCE21;&#xB41C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xC218;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xCC28;&#xC774; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB2E8;&#xC21C; &#xACBD;&#xC7C1; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC801; &#xADF8; p fluorohexahydrosiladifenidol (0.3-1.0 microM) &#xC801;&#xB2F9;&#xD788; &#xC11C;&#xC758; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAE30;&#xAD00;&#xC9C0;&#xC758; &#xC218;&#xCD95; &#xD788; &#xC2A4;&#xD0C0; &#xBBFC; &#xC720;&#xBC1C; &#xC800;&#xD574;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; p fluorohexahydrosiladifenidol &#xCC28;&#xBCC4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xACE0; &#xC11C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xAD00;&#xC9C0;&#xC5D0; M(3) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xADF8; &#xC0AC;&#xC774; 5 &#xC6D4; &#xBCF4;&#xC720;&#xB294; &#xC11C; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xB354; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C;, nonmuscarinic &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ileal tracheal &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; p-fluorohexahydrosiladifenidol antimuscarinic &#xC791;&#xC5C5;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;.

Hemos investigado la posibilidad de la antagonista muscar&#xED;nico p-fluorohexahydrosiladifenidol para inhibir muscar&#xED;nicos inducidas por agonistas contracciones e hidr&#xF3;lisis fosfoinositida en el &#xED;leon de cobaya y la tr&#xE1;quea. Este antagonista muestran una mayor potencia en el bloqueo de oxotremorina-M-inducidas contracciones del &#xED;leon en comparaci&#xF3;n con los de la tr&#xE1;quea. Cuando se calcula utilizando un modelo simple para el antagonismo competitivo, la disociaci&#xF3;n observada constante de p-fluorohexahydrosiladifenidol exhibieron aproximadamente 12 veces mayor potencia en el &#xED;leon en comparaci&#xF3;n con la tr&#xE1;quea. Tambi&#xE9;n se investig&#xF3; la capacidad de p-fluorohexahydrosiladifenidol afectar a la inhibici&#xF3;n de la contracci&#xF3;n causada por el conocido competitivo antagonista muscar&#xED;nico atropina. Utilizando el an&#xE1;lisis resultante para analizar esta interacci&#xF3;n, se encontr&#xF3; que la disociaci&#xF3;n verdadera constante de p-fluorohexahydrosiladifenidol para antagonizar competitivamente oxotremorina-M-contracciones inducidas en el &#xED;leon mostr&#xF3; una potencia significativamente menor que cuando se calcula suponiendo un modelo competitivo simple. En contraste, el an&#xE1;lisis resultante mostr&#xF3; una peque&#xF1;a diferencia entre las potencias reales y observados de p-fluorohexahydrosiladifenidol para antagonizar oxotremorina-M-las contracciones inducidas en la tr&#xE1;quea. El uso de un modelo competitivo simple, encontramos poca diferencia en la disociaci&#xF3;n observada constante de p-fluorohexahydrosiladifenidol para la hidr&#xF3;lisis de antagonizar phosphoinositide oxotremorina-M-inducida en &#xED;leon de cobaya y la tr&#xE1;quea bovina. Tambi&#xE9;n se&#xF1;al&#xF3; que el p-fluorohexahydrosiladifenidol (0.3-1.0 microM) moderadamente inhibida histamina inducida por las contracciones del &#xED;leon, pero no de la tr&#xE1;quea. Nuestros resultados sugieren que el p-fluorohexahydrosiladifenidol no discrimina notablemente entre M (3) los receptores muscar&#xED;nicos en el &#xED;leon y la tr&#xE1;quea y que puede poseer una m&#xE1;s potente, el efecto inhibidor sobre la contracci&#xF3;n nonmuscarinic en el &#xED;leon.

Comparaci&#xF3;n de la acci&#xF3;n de la P-antimuscar&#xED;nica fluorohexahydrosiladifenidol en el m&#xFA;sculo liso traqueal ileal y

&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5; M2 &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8180;&#x80F1;&#x6536;&#x7F29;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5F53;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x5176;&#x4ED6;&#x4EE3;&#x7406;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6536;&#x7F29;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242; oxotremorine-M &#x5C55;&#x793A;&#x5C5E;&#x6027;&#x4E0E; M3 &#x54CD;&#x5E94;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x8180;&#x80F1;&#x548C; M2 (KO) &#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x9884;&#x671F;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x7684; M2 &#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6536;&#x7F29;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x63ED;&#x53D1;&#x53CD;&#x5E94; M3 &#x6316;&#x7A7A;&#x548C; M2/M3 &#x53CC;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; diphenylacetate N-2-&#x6C2F;&#x4E59;&#x57FA;-4-&#x5576; (4 &#x6E7F;&#x82A5;&#x672B;) M2 &#x6316;&#x7A7A;&#x8180;&#x80F1;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x9020;&#x6210;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6536;&#x7F29;&#x53CD;&#x5E94;&#x5927;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6B8B;&#x4F59;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x4E86; M2 &#x6316;&#x7A7A;&#x8180;&#x80F1;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; M2 &#x53D7;&#x4F53;&#x62EF;&#x6551;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x8180;&#x80F1;&#x540E; 4 &#x6E7F;&#x82A5;&#x672B; M3 &#x53D7;&#x4F53;&#x706D;&#x6D3B;&#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6536;&#x7F29;&#x53CD;&#x5E94;&#x76F8;&#x6BD4;&#x8981;&#x5C0F;&#x5F97;&#x591A;&#x3002;&#x5F53;&#x8861;&#x91CF;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x7D20; F2alpha &#x548C;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x6216;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#xFF0C;oxotremorine-M &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; M3 KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x8180;&#x80F1;&#x70C8;&#x6027;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53CD;&#x5E94;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x7814;&#x7A76; M2 &#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x548C;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E0D;&#x5B58;&#x5728; M2/M3 KO &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;4 &#x6E7F;&#x82A5;&#x6CBB;&#x7597;&#x540E; oxotremorine M &#x5F15;&#x8D77;&#x6536;&#x7F29;&#x53CD;&#x5E94;&#x5728;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x8180;&#x80F1;&#x6C2F;&#x5316;&#x94BE;&#x548C;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x6216;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53CD;&#x5E94;&#x51CF;&#x5C11; M2 KO &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A; M2 &#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x95F4;&#x63A5;&#x5728;&#x8180;&#x80F1;&#x6536;&#x7F29;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x52A0;&#x5F3A; M3 &#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x548C;&#x653E;&#x677E;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A;&#x5F88;&#x96BE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x7684; M2 &#x53D7;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; M2 &#x548C; M3 &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3002;

M2 &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x901A;&#x8FC7;&#x95F4;&#x63A5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x9F20;&#x6807;&#x8180;&#x80F1;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;

We investigated the contractile role of M2 muscarinic receptors in mouse urinary bladder. When measured in the absence of other agents, contractions elicited to the muscarinic agonist oxotremorine-M exhibited properties consistent with that expected for an M3 response in urinary bladder from wild-type and M2 knockout (KO) mice. Evidence for a minor M2 receptor-mediated contraction was revealed by a comparison of responses in M3 knockout and M2/M3 double knockout mice. Treatment of wild-type and M2 knockout urinary bladder with N-2-chloroethyl-4-piperidinyl diphenylacetate (4-DAMP mustard) caused a large inhibition of the muscarinic contractile response. The residual contractions were much smaller in M2 knockout bladder compared with wild type, suggesting that M2 receptors rescue the muscarinic contractile response in wild-type bladder following inactivation of M3 receptors with 4-DAMP mustard. When measured in the presence of prostaglandin F2alpha and isoproterenol or forskolin, oxotremorine-M mediated a potent contractile response in urinary bladder from M3 KO mice. This response exhibited an M2 profile in competitive antagonism studies and was completely absent in M2/M3 KO mice. Following 4-DAMP mustard treatment, oxotremorine-M elicited a contractile response in wild-type urinary bladder in the presence of KCl and isoproterenol or forskolin, and this response was diminished in M2 KO mice. Our results show that the M2 receptor mediates contractions indirectly in the urinary bladder by enhancing M3 receptor-mediated contractions and inhibiting relaxation. We also show that it is difficult to detect M2 receptor function in competitive antagonism studies under conditions where a simultaneous activation of M2 and M3 receptors occurs.

The M2 muscarinic receptor mediates contraction through indirect mechanisms in mouse urinary bladder.

Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; le r&#xF4;le contractile des r&#xE9;cepteurs muscariniques M2 dans la vessie de la souris. Lorsqu&#x26;#39;ils sont mesur&#xE9;s en l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;autres agents, les contractions suscit&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;agoniste muscarinique oxotr&#xE9;morine-M a montr&#xE9; des propri&#xE9;t&#xE9;s compatibles avec celui attendu pour une r&#xE9;ponse M3 dans la vessie de knock-out de type sauvage et M2 (KO) chez la souris. Preuve d&#x26;#39;un mineur M2 m&#xE9;di&#xE9;e par le r&#xE9;cepteur de contraction a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; par la comparaison des r&#xE9;ponses en KO M3 et M2/M3 souris knock-out doubles. Traitement de la vessie urinaire masquage de type sauvage et M2 avec du N-2-chloro&#xE9;thyl-4-pip&#xE9;ridinyl diphenylacetate (4-DAMP moutarde) provoque une inhibition de la r&#xE9;ponse grande muscarinique contractile. Les contractions r&#xE9;siduelles &#xE9;taient beaucoup plus petits dans la vessie KO M2 par rapport au type sauvage, sugg&#xE9;rant que les r&#xE9;cepteurs M2 sauver la r&#xE9;ponse muscarinique contractile de type sauvage de la vessie &#xE0; la suite d&#x26;#39;inactivation des r&#xE9;cepteurs M3 avec 4-DAMP moutarde. Lorsque mesur&#xE9;e en pr&#xE9;sence de la prostaglandine F2alpha et de l&#x26;#39;isoprot&#xE9;r&#xE9;nol ou la forskoline, oxotr&#xE9;morine-M m&#xE9;di&#xE9;e une puissante r&#xE9;ponse contractile de la vessie chez des souris KO M3. Cette r&#xE9;ponse pr&#xE9;sentait un profil M2 dans les &#xE9;tudes antagonisme comp&#xE9;titif et &#xE9;tait totalement absent chez les souris KO M2/M3. Apr&#xE8;s le traitement de moutarde 4-DAMP, oxotr&#xE9;morine-M a suscit&#xE9; une r&#xE9;ponse contractile dans la vessie de type sauvage en pr&#xE9;sence de KCl et de l&#x26;#39;isoprot&#xE9;r&#xE9;nol ou la forskoline, et cette r&#xE9;ponse a &#xE9;t&#xE9; diminu&#xE9; chez les souris KO M2. Nos r&#xE9;sultats montrent que les r&#xE9;cepteurs M2 sert de m&#xE9;diateur contractions indirectement dans la vessie par l&#x26;#39;am&#xE9;lioration M3 m&#xE9;di&#xE9;s par les r&#xE9;cepteurs des contractions et de relaxation. Inhibant Nous montrons &#xE9;galement qu&#x26;#39;il est difficile de d&#xE9;tecter la fonction du r&#xE9;cepteur M2 dans les &#xE9;tudes antagonisme comp&#xE9;titif dans des conditions o&#xF9; une activation simultan&#xE9;e des r&#xE9;cepteurs M2 et M3 se produit.

Le M2 r&#xE9;cepteurs muscariniques Contraction m&#xE9;diation par des m&#xE9;canismes indirects de la vessie chez la souris

Die M2-Muskarin-Rezeptor vermittelt Kontraktion durch indirekte Mechanismen in Maus Harnblase.

Abbiamo studiato il ruolo dei recettori muscarinici M2 nella vescica urinaria del mouse contrattile. Quando misurata in assenza di altri agenti, le contrazioni hanno suscitate per l&#39;agonista muscarinico Oxotremorina-M esposte propriet&agrave; coerenti con quanto previsto per una risposta M3 nella vescica urinaria da wild-type e topi knockout (KO) M2. Prove per una minore contrazione mediata dal recettore M2 &egrave; stata rivelata da un confronto delle risposte in knockout M3 e M2/M3 doppia eliminazione topi. Trattamento di wild-type e M2 knockout vescica urinaria con N-2-cloroetil-4-piperidinil diphenylacetate (senape 4-umido) ha causato una grande inibizione della risposta contrattile muscarinico. Le contrazioni residue erano molto pi&ugrave; piccole in vescica knockout M2 rispetto al wild type, suggerendo che i recettori M2 salvare la risposta contrattile muscarinico nel selvaggio-tipo vescica dopo inattivazione dei recettori M3 con senape 4-umido. Quando misurata in presenza di prostaglandina F2alpha e isoproterenolo o forscolina, Oxotremorina-M mediata da una potente risposta contrattile nella vescica urinaria da topi KO M3. Questa risposta esposto un profilo M2 negli studi di antagonismo competitivo ed &egrave; stata completamente assente nei topi KO M2/M3. A seguito di trattamento senapa 4-umido, Oxotremorina-M ha suscitato una risposta contrattile nella vescica urinaria selvaggio-tipo in presenza di KCl e isoproterenolo o forscolina, e questa risposta &egrave; stata diminuita in topi KO M2. I nostri risultati mostrano che il recettore M2 da intermediario contrazioni indirettamente nella vescica urinaria migliorando contrazioni mediata dal recettore M3 e inibendo il rilassamento. Mostriamo anche che &egrave; difficile rilevare la funzione del recettore M2 negli studi di antagonismo competitivo in condizioni dove si verifica una simultanea attivazione dei recettori M2 e M3.

Il recettore muscarinico M2 Media contrazione attraverso meccanismi indiretti nella vescica urinaria del mouse.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;M2&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x85AC;&#x5264;&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x53CE;&#x7E2E;&#x304C;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x8A98;&#x767A;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;M2&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#xFF08;KO&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;M3&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x671F;&#x5F85;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3059;&#x308B;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;M2&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;M3&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3068;M2/M3&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; N-2-&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;-4  - &#x30D4;&#x30DA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30CB;&#x30EB;diphenylacetate&#xFF08;4-DAMP&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C9;&#xFF09;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;M2&#x8180;&#x80F1;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x53CE;&#x7E2E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6B8B;&#x7559;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306F;M2&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;4-DAMP&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;M3&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x5F8C;&#x306B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x8180;&#x80F1;&#x306E;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x53CE;&#x7E2E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;M2&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x8180;&#x80F1;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30F3;F2alpha&#x3068;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306F;&#x3001;M3 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x53CE;&#x7E2E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x7AF6;&#x5408;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;M2&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;M2/M3 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6B20;&#x5E2D;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 4-DAMP&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C9;&#x51E6;&#x7406;&#x5F8C;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306F;KCl&#x53CA;&#x3073;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x8180;&#x80F1;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;M2 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;M3&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3068;&#x5F1B;&#x7DE9;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306B;M2&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;M2&#x3068;M3&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;M2&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8180;&#x80F1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;M2&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x53CE;&#x7E2E;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC0AC; muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; M2 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC624; &#xC90C; &#xBC29;&#xAD11;&#xC758; &#xC218;&#xCD95; &#xC131; &#xC5ED;&#xD560;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815;&#xD560; &#xB54C; &#xC218;&#xCD95; muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; oxotremorine-M&#xC744; elicited &#xC18D;&#xC131; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC624; &#xC90C; &#xBC29;&#xAD11;, M2 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; (KO) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; M3 &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB300;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC0AC;&#xC18C;&#xD55C; M2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70; &#xC751;&#xB2F5; M3 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3;, M2/M3 &#xB354;&#xBE14; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1D;&#xD600;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; N-2-chloroethyl-4-piperidinyl diphenylacetate (4-&#xC2B5;&#xAE30; &#xACA8;&#xC790;)&#xC73C;&#xB85C; M2 16 &#xAC15; &#xC624; &#xC90C; &#xBC29;&#xAD11;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; muscarinic &#xC218;&#xCD95; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xD070; &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC794;&#xC5EC; &#xC218;&#xCD95; M2 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xBC29;&#xAD11; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785;, M2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 4 &#xC2B5;&#xAE30;&#xAC00; &#xACA8;&#xC790;&#xC640; M3 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC29;&#xAD11;&#xC5D0; muscarinic &#xC218;&#xCD95; &#xBC18;&#xC751; &#xAD6C;&#xC870; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC791;&#xACE0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xD0C0; &#xAE00;&#xB780; &#xB518; F2alpha &#xBC0F; isoproterenol &#xB610;&#xB294; forskolin &#xC874;&#xC7AC;&#xD560; &#xB54C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; oxotremorine M m 3 &#xCF54; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC29;&#xAD11;&#xC5D0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC218;&#xCD95; &#xC751;&#xB2F5; &#xC911;&#xC7AC;. &#xC774; &#xC751;&#xB2F5; &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; M2 &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC644;&#xC804; &#xD558; &#xAC8C; &#xACB0; &#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; M2/M3 &#xCF54; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C;. 4 &#xC2B5;&#xAE30;&#xAC00; &#xACA8;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4; oxotremorine M Kcl&#xACFC; isoproterenol &#xB610;&#xB294; forskolin, &#xC874;&#xC7AC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC624; &#xC90C; &#xBC29;&#xAD11;&#xC5D0; &#xC218;&#xCD95; &#xBC18;&#xC751; elicited &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC774; &#xC751;&#xB2F5; M2 &#xCF54; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; M2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; M3 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC; &#xC218;&#xCD95; &#xBC0F; &#xC774;&#xC644;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC04;&#xC811;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC29;&#xAD11;&#xC758; &#xC218;&#xCD95;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xCD9C; M2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; M2 &#xBC0F; M3 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

M2 muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC624; &#xC90C; &#xBC29;&#xAD11;&#xC5D0; &#xAC04;&#xC811; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC218;&#xCD95; &#xC911;&#xC7AC;.

Hemos investigado el papel de contracci&#xF3;n de los receptores muscar&#xED;nicos M2 en la vejiga urinaria del rat&#xF3;n. Cuando se mide en ausencia de otros agentes, las contracciones provocados al agonista muscar&#xED;nico oxotremorina-M exhiben propiedades consistentes con la esperada para una respuesta M3 en la vejiga urinaria de nocaut de tipo salvaje y M2 (KO) ratones. La evidencia de un menor de edad mediada por los receptores M2 contracci&#xF3;n fue revelado por una comparaci&#xF3;n de las respuestas en el golpe de gracia M3 y M2/M3 doble knockout mice. Tratamiento de la vejiga urinaria nocaut de tipo salvaje y M2 con N-2-cloroetil-4-piperidinil diphenylacetate (4-DAMP mostaza) caus&#xF3; una inhibici&#xF3;n importante de la respuesta contr&#xE1;ctil muscar&#xED;nico. Las contracciones residuales eran mucho m&#xE1;s peque&#xF1;as en la vejiga por nocaut M2 en comparaci&#xF3;n con el tipo salvaje, lo que sugiere que los receptores M2 rescatar a la respuesta contr&#xE1;ctil muscar&#xED;nico de tipo salvaje la vejiga despu&#xE9;s de la inactivaci&#xF3;n de los receptores M3 con 4-DAMP mostaza. Cuando se mide en la presencia de la prostaglandina y F2alpha isoproterenol o forskolina, oxotremorina-M mediado una potente respuesta contr&#xE1;ctil de la vejiga urinaria de M3 ratones KO. Esta respuesta exhibi&#xF3; un perfil M2 en estudios antagonismo competitivo y estaba completamente ausente en M2/M3 ratones KO. Despu&#xE9;s del tratamiento de mostaza 4-DAMP, oxotremorina-M provoc&#xF3; una respuesta contr&#xE1;ctil de la vejiga urinaria de tipo salvaje en presencia de KCl y isoproterenol o forskolina, y esta respuesta se redujo en los ratones KO M2. Nuestros resultados muestran que los media en las contracciones de los receptores M2 indirectamente en la vejiga urinaria mediante la mejora de M3 mediadas por los receptores de la inhibici&#xF3;n de las contracciones y relajaci&#xF3;n. Tambi&#xE9;n muestran que es dif&#xED;cil detectar la funci&#xF3;n del receptor M2 en estudios antagonismo competitivo bajo condiciones donde una activaci&#xF3;n simult&#xE1;nea de los receptores M2 y M3 se produce.

El M2 media la contracci&#xF3;n receptor muscar&#xED;nico trav&#xE9;s de mecanismos indirectos en la vejiga urinaria del rat&#xF3;n

&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x65B0;&#x578B;&#x5206;&#x6790;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x54CD;&#x5E94;&#x66F2;&#x7EBF;&#x7684;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6765;&#x4F30;&#x8BA1;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x548C;&#x5185;&#x5728;&#x529F;&#x6548;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6807;&#x51C6;&#x4FC3;&#x6548;&#x5242;&#x7684;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;&#x6B64;&#x53C2;&#x6570;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5185;&#x5728;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6D3B;&#x52A8; &#xFF08;RA(i))&#xFF0C;&#x662F;&#x6700;&#x9002;&#x5408;&#x7528;&#x4E8E;&#x5728; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;RA(i) &#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5B8C;&#x5168;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#xFF0C;&#x5373;&#x4FBF;&#x662F;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5C0F;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x529F;&#x6548;&#x8868;&#x73B0;&#x5F97;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#x3001; &#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6548;&#x80FD;&#x6BD4;&#x7387;&#x76F8;&#x5F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x5728; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5728;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B; 293T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#x6C34;&#x89E3;&#x901A;&#x8FC7; G(alpha15) &#x901A;&#x8FC7; G(i) &#x5728;&#x4E2D;&#x56FD;&#x4ED3;&#x9F20;&#x5375;&#x5DE2; (CHO) &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8425;&#x5730;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x8425;&#x5730;&#x79EF;&#x7D2F;&#x901A;&#x8FC7; G(s) CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x80C6;&#x78B1;&#x3001; oxotremorine-M &#x548C; aceclidine &#x7684;&#x5BF9;&#x6620;&#x4F53;&#x7684; RA(i) &#x503C;&#x5927;&#x81F4;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;4-[[N-[3-chlorophenyl]carbamoy]oxy-2-butynyl]trimethylammonium &#x6C2F; (&#x7F8E;&#x601D;-A-343) &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x662F;&#x5927;&#x7EA6; 10 &#x500D;&#x66F4;&#x5927;&#xFF0C;&#x8026;&#x5408;&#x5230;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B; 293T &#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x6BD4;&#x8026;&#x5408;&#x5230; G(i) &#x4E2D;&#x7684;&#x540C;&#x4E00;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x6216;&#x5728; CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; M(2) &#x53D7;&#x4F53; G(alpha15) &#x7684; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A; RA(i) &#x4F30;&#x8BA1;&#x662F;&#x4E00;&#x9879;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x63AA;&#x65BD;&#x91CF;&#x5316;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8DE8;&#x4E0D;&#x540C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x548C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6307;&#x793A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F30;&#x8BA1;&#xFF1A; M2 &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7; Gi/o&#x3001; Gs &#x548C; G15 &#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

We developed novel methods for analyzing the concentration-response curve of an agonist to estimate the product of observed affinity and intrinsic efficacy, expressed relative to that of a standard agonist. This parameter, termed intrinsic relative activity (RA(i)), is most applicable for the analysis of responses at G protein-coupled receptors. RA(i) is equivalent to the potency ratios that agonists would exhibit in a hypothetical, highly sensitive assay in which all agonists behave as full agonists, even those with little intrinsic efficacy. We investigated muscarinic responses at the M(2) receptor, including stimulation of phosphoinositide hydrolysis through G(alpha15) in HEK 293T cells, inhibition of cAMP accumulation through G(i) in Chinese hamster ovary (CHO) cells, and stimulation of cAMP accumulation through G(s) in CHO cells treated with pertussis toxin. The RA(i) values of carbachol, oxotremorine-M, and the enantiomers of aceclidine were approximately the same in the three assay systems. In contrast, the activity of 4-[[N-[3-chlorophenyl]carbamoy]oxy-2-butynyl]trimethylammonium chloride (McN-A-343) was approximately 10-fold greater at M(2) receptors coupled to G(alpha15) in HEK 293T cells compared with M(2) receptors coupled to G(i) in the same cells or in CHO cells. Our results show that the RA(i) estimate is a useful measure for quantifying agonist activity across different assay systems and for detecting agonist directed signaling.

Estimation of agonist activity at G protein-coupled receptors: analysis of M2 muscarinic receptor signaling through Gi/o,Gs, and G15.

On d&#xE9;velopp&#xE9;e nouveaux proc&#xE9;d&#xE9;s d&#x26;#39;analyse de la courbe de concentration en r&#xE9;ponse d&#x26;#39;un agoniste pour estimer le produit d&#x26;#39;affinit&#xE9; observ&#xE9;e et l&#x26;#39;efficacit&#xE9; intrins&#xE8;que, exprim&#xE9; par rapport &#xE0; celle d&#x26;#39;un agoniste standard. Ce param&#xE8;tre, appel&#xE9; activit&#xE9; intrins&#xE8;que relative (RA (i)), est la plus pertinente pour l&#x26;#39;analyse des r&#xE9;ponses au G r&#xE9;cepteurs coupl&#xE9;s aux prot&#xE9;ines. RA (i) est &#xE9;quivalente &#xE0; des rapports de puissance que les agonistes serait pr&#xE9;sentent dans un hypoth&#xE9;tique, test tr&#xE8;s sensible, dans lequel tous les agonistes se comportent comme des agonistes complets, m&#xEA;me ceux avec peu d&#x26;#39;efficacit&#xE9; intrins&#xE8;que. Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les r&#xE9;ponses muscariniques &#xE0; l&#x26;#39;M (2) du r&#xE9;cepteur, y compris la stimulation de l&#x26;#39;hydrolyse phosphoinositide &#xE0; G (alpha15) dans des cellules HEK 293T, l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;accumulation d&#x26;#39;AMPc &#xE0; G (i) dans ovariennes de hamster chinois (cellules CHO), et la stimulation de l&#x26;#39;accumulation d&#x26;#39;AMPc &#xE0; G (s) dans des cellules CHO trait&#xE9; avec la toxine de pertussis. Les RA (i) les valeurs de carbachol, oxotr&#xE9;morine-M, et les &#xE9;nantiom&#xE8;res de ac&#xE9;clidine &#xE9;taient approximativement les m&#xEA;mes dans les trois syst&#xE8;mes de dosage. En revanche, l&#x26;#39;activit&#xE9; de 4 - [[N-[3-chloroph&#xE9;nyl] carbamoy] oxy-2-butynyle] trim&#xE9;thylammonium (MCN-A-343) &#xE9;tait d&#x26;#39;environ 10 fois sup&#xE9;rieure &#xE0; M (2) les r&#xE9;cepteurs coupl&#xE9;s &#xE0; G ( alpha15) dans HEK 293T rapport &#xE0; M (2) r&#xE9;cepteurs coupl&#xE9;s &#xE0; G (i) dans les m&#xEA;mes cellules ou dans des cellules CHO. Nos r&#xE9;sultats montrent que le RA (i) estimation est une mesure utile pour quantifier l&#x26;#39;activit&#xE9; agoniste &#xE0; travers les syst&#xE8;mes de dosage diff&#xE9;rentes et pour d&#xE9;tecter agoniste dirig&#xE9; de signalisation.

Estimation de l&#x26;#39;activit&#xE9; agoniste &#xE0; G r&#xE9;cepteurs coupl&#xE9;s aux prot&#xE9;ines: analyse des r&#xE9;cepteurs muscariniques M2 signalisation par Gi / o, Gs, et G15

Wir entwickelt neuartige Methoden zur Analyse der Konzentration-Wirkungs-Kurve ein Agonist, das Produkt der beobachteten Affinit&auml;t und intrinsische Wirksamkeit, ausgedr&uuml;ckt im Verh&auml;ltnis zu dem von einer standard-Agonisten zu sch&auml;tzen. Dieser Parameter bezeichnet die systeminterne relative Aktivit&auml;t (RA(i)), ist am besten f&uuml;r die Analyse der Antworten auf G-Protein-gekoppelte Rezeptoren. RA(i) entspricht der Potenz-Verh&auml;ltnisse, die Agonisten in einem hypothetischen, hochsensible Probe aufweisen w&uuml;rde in denen alle Agonisten als volle Agonisten, auch solche mit wenig systeminterne Wirksamkeit zu Verhalten. Wir untersuchten muskarinische Antworten auf den m Rezeptor, einschlie&szlig;lich Stimulation der Phosphoinositid-Hydrolyse durch G(alpha15) in HEK 293T Zellen, Hemmung der cAMP-Akkumulation durch G(i) in chinesischen Hamsterzellen Eierstock (CHO) und Stimulation der cAMP-Akkumulation durch G(s) in CHO-Zellen, die mit Pertussis-Toxin behandelt. Die RA(i)-Werte der Carbachol, Oxotremorine-M und die Enantiomere des Aceclidine waren die gleichen etwa in den drei Test-Systemen. Im Gegensatz dazu war die Aktivit&auml;t der 4-[[N-[3-chlorophenyl]carbamoy]oxy-2-butynyl]trimethylammonium Chlorid (McN-A-343) ca. 10-fache gr&ouml;&szlig;er an m-Rezeptoren gekoppelt mit G(alpha15) in HEK 293T Zellen verglichen mit m-Rezeptoren gekoppelt, G(i) in denselben Zellen oder in CHO-Zellen. Unsere Ergebnisse zeigen, dass die RA(i)-Sch&auml;tzung ist eine n&uuml;tzliche Ma&szlig;nahme zur Quantifizierung von Agonist T&auml;tigkeit in verschiedenen Assay-Systemen und zum Erkennen von Agonist gerichtet signalisieren.

Absch&auml;tzung der Agonist-Aktivit&auml;t bei G-Protein-gekoppelte Rezeptoren: Analyse der Muskarinischer M2-Rezeptor Signalgebung durch Gi/o, Gs und G15.

Abbiamo sviluppato nuovi metodi per analizzare la curva concentrazione-risposta di un agonista per stimare il prodotto osservato affinit&agrave; e intrinseca efficacia, espressa rispetto a quello di un agonista standard. Questo parametro, definito intrinseca attivit&agrave; relativa (RA(i)), &egrave; pi&ugrave; applicabile per l&#39;analisi delle risposte a recettori accoppiati a proteine G. RA(i) equivale ai rapporti di potenza agonisti si esibiscono in un&#39;analisi ipotetica, altamente sensibile, in cui tutti gli agonisti si comportano come agonisti pieni, anche quelli con poca efficacia intrinseca. Abbiamo studiato muscarinico risposte presso il recettore M(2), tra cui la stimolazione di phosphoinositide idrolisi attraverso G(alpha15) in cellule HEK 293T inibizione di accumulo cAMP attraverso G(i) in cellule di criceto cinese (CHO) dell&#39;ovaio e la stimolazione del campo accumulo attraverso g nelle cellule CHO trattate con tossina pertosse. I valori di RA(i) di Carbacolo, Oxotremorina-M e gli enantiomeri di aceclidine erano approssimativamente lo stesso nei sistemi di tre dosaggio. Al contrario, l&#39;attivit&agrave; di 4-[[N-[3-chlorophenyl]carbamoy]oxy-2-butynyl]trimethylammonium cloruro (McN-A-343) era circa 10 volte maggiore a M(2) recettori accoppiati a G(alpha15) HEK 293T cellule rispetto ai M(2) recettori accoppiati a G(i) nelle stesse cellule o in cellule CHO. I nostri risultati mostrano che la stima di RA(i) &egrave; una misura utile per quantificare l&#39;attivit&agrave; agonista attraverso sistemi di dosaggio differenti e per la rilevazione di agonista diretto di segnalazione.

Stima dell&#39;attivit&agrave; agonista di recettori accoppiati a proteine G: analisi del recettore muscarinico M2 segnalazione attraverso Gi/o, Gs e G15.

&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x7A4D;&#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6; - &#x5FDC;&#x7B54;&#x66F2;&#x7DDA;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306B;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF08;RA&#xFF08;I&#xFF09;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3082;&#x5B8C;&#x5168;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x5C11;&#x3057;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x67B6;&#x7A7A;&#x306E;&#x3001;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x52B9;&#x529B;&#x6BD4;&#x306B;&#x76F8;&#x5F53;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;HEK 293T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;G&#xFF08;alpha15&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30A4;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5375;&#x5DE3;&#xFF08;CHO&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;G&#xFF08;i&#xFF09;&#x304B;&#x3089;cAMP&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;cAMP&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x3066;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;CHO&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;G&#xFF08;S&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D0;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30BB;&#x30AF;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x30A8;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x7D04;3&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x7CFB;&#x3067;&#x540C;&#x3058;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;4&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5; -  [[N-[3  - &#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;] carbamoy]&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;-2  - &#x30D6;&#x30C1;&#x30CB;&#x30EB;]&#x30C8;&#x30EA;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30A2;&#x30F3;&#x30E2;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x30AF;&#x30ED;&#x30EA;&#x30C9;&#xFF08;MCN-343&#xFF09;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304C;G&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#xFF08;&#x3067;&#x7D04;10&#x500D;&#x5927;&#x304D;&#x304B;&#x3063;&#x305F;HEK 293T&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;alpha15&#xFF09;&#x304C;&#x540C;&#x3058;&#x7D30;&#x80DE;&#x307E;&#x305F;&#x306F;CHO&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;G&#xFF08;I&#xFF09;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x5024;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x9593;&#x3067;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5411;&#x3051;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x6307;&#x6A19;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#xFF1A;GI / O&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;M2&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;GS&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;G15

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAD00;&#xCC30;&#xB41C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xB294; &#xD45C;&#xC900; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB97C; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC758; &#xC81C;&#xD488; &#xACAC;&#xC801;&#xC744; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC751;&#xB2F5; &#xACE1;&#xC120;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC774; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xB418; &#xB098; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xB300; &#xD65C;&#xB3D9; (RA(i)), G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC801;&#xC6A9; &#xC774;&#xB2E4;. RA(i) &#xD798; &#xBE44;&#xC728; agonists &#xAC00;&#xC0C1;, &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC804;&#xCCB4; agonists &#xC2EC;&#xC9C0;&#xC5B4; &#xADF8; &#xC791;&#xC740; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB4E0; agonists &#xB3D9;&#xC791;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xB294; &#xAC83; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC0AC; &#xC218;&#xC6A9; M(2) &#xCCB4;, HEK 293T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; G(alpha15) &#xD1B5;&#xD574; phosphoinositide &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xC758; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC911;&#xAD6D; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xB09C;&#xC18C; (&#xC870;) &#xC140;&#xC5D0; G(i) &#xD1B5;&#xD574; &#xCEA0;&#xD504; &#xCD95;&#xC801; &#xC800;&#xD574; &#xBC0F; &#xBC31; &#xC77C; &#xD574; &#xB3C5; &#xC18C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC870; &#xC140;&#xC5D0; G(s) &#xD1B5;&#xD574; &#xCEA0;&#xD504; &#xCD95;&#xC801;&#xC758; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; muscarinic &#xC751;&#xB2F5; &#xD588;&#xB2E4;. Carbachol, oxotremorine M aceclidine&#xC758; enantiomers&#xC758; RA(i) &#xAC12;&#xC740; &#xC57D; &#xAC19;&#xC740; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xBC18;&#xBA74;, 4-[[N-[3-chlorophenyl]carbamoy]oxy-2-butynyl]trimethylammonium &#xC5FC;&#xD654; (McN-A-343)&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; G(alpha15) G(i) &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC140; &#xB610;&#xB294; &#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; HEK 293T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC57D; 10 &#xBC30; &#xD070; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; RA(i) &#xACAC;&#xC801; &#xB2E4;&#xB978; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC04;&#xC5D0; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xCE21;&#xC815;&#xAC12;&#xC740; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xCD94;&#xC815;: M2 muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;/o, Gs, G15 &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC11D;.

Hemos desarrollado nuevos m&#xE9;todos para el an&#xE1;lisis de la curva de concentraci&#xF3;n-respuesta de un agonista de estimar el producto de afinidad observada y la eficacia intr&#xED;nseca, expresada en relaci&#xF3;n a la de un agonista est&#xE1;ndar. Este par&#xE1;metro, denominado actividad relativa intr&#xED;nseca (AR (i)), es m&#xE1;s aplicable para el an&#xE1;lisis de las respuestas a G receptores acoplados a prote&#xED;nas. AR (i) es equivalente a las proporciones de potencia que los agonistas se exhiben en un ensayo hipot&#xE9;tico, muy sensible en la que todos los agonistas se comportan como agonistas totales, incluso aquellos con poca eficacia intr&#xED;nseca. Se investigaron las respuestas muscar&#xED;nicos en la M (2) del receptor, incluyendo la estimulaci&#xF3;n de la hidr&#xF3;lisis fosfoinositida a G (alpha15) en HEK 293T c&#xE9;lulas, la inhibici&#xF3;n de la acumulaci&#xF3;n de AMPc a trav&#xE9;s de G (i) en ovario de h&#xE1;mster chino (CHO), y la estimulaci&#xF3;n de la acumulaci&#xF3;n de AMPc a trav&#xE9;s de G (s) en c&#xE9;lulas CHO tratadas con la toxina pertussis. Los RA (i) los valores de carbacol, oxotremorina-M, y los enanti&#xF3;meros de aceclidina fueron aproximadamente los mismos en los tres sistemas de ensayo. En contraste, la actividad de 4 - [[N-[3-clorofenil] carbamoy] oxi-2-butinil] cloruro de trimetilamonio (McN-A-343) fue aproximadamente 10 veces mayor en M (2) receptores acoplados a G ( alpha15) en HEK 293T c&#xE9;lulas en comparaci&#xF3;n con M (2) receptores acoplados a G (i) en las mismas c&#xE9;lulas o en c&#xE9;lulas CHO. Nuestros resultados muestran que el RA (i) estimaci&#xF3;n es una medida &#xFA;til para cuantificar la actividad agonista a trav&#xE9;s de diferentes sistemas de ensayo y para detectar agonista dirigida se&#xF1;alizaci&#xF3;n.

Estimaci&#xF3;n de la actividad agonista en G receptores acoplados a prote&#xED;nas: An&#xE1;lisis de los receptores muscar&#xED;nicos M2 se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de Gi / o, G, y G15

&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x529F;&#x80FD;&#x53CD;&#x5E94;&#x5BF9; gallamine &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x548C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5C5E;&#x6027;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x5728; M(2) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x548C;&#x53D8;&#x6784;&#x4E09;&#x5143;&#x590D;&#x6742;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;gallamine &#x4FEE;&#x6539;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x4EB2;&#x548C;&#x800C;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x7597;&#x6548;&#x3002;&#x8981;&#x89E3;&#x91CA;&#x8FD9;&#x79CD;&#x884C;&#x4E3A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8BC4;&#x4F30; allosterism &#x7684; gallamine &#x4E2A;&#x5730;&#x9762;&#x548C;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x5FAE;&#x5206;&#x5173;&#x7CFB;&#x66F4;&#x6DF1;&#x4E00;&#x5C42;&#x7684;&#x53D8;&#x6784;&#x4E09;&#x5143;&#x590D;&#x6742;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6A21;&#x62DF;&#x663E;&#x793A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E24;&#x56FD;&#x6A21;&#x578B;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230; gallamine &#x4E3A;&#x53D8;&#x6784;&#x7F51;&#x7AD9;&#x6FC0;&#x52A8;&#x7684;&#x5355;&#x4E00; orthosteric &#x7F51;&#x7AD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x53EA;&#x4EB2;&#x548C;&#x8C03;&#x5236;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x591A;&#x4E2A;&#x6784;&#x8C61;&#x7684;&#x5730;&#x9762;&#x548C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6269;&#x5927;&#x4E86;&#x4E32;&#x8054;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6A21;&#x578B; (J &#x5DE5;&#x4E1A;&#x56ED;&#x6D77;&#x535A; Chem 275:18836-18844&#xFF0C;2000 &#x5E74;&#xFF09; &#x53D8;&#x6784;&#x4E09;&#x5143;&#x590D;&#x6742;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x548C;&#x53D7;&#x4F53;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E00;&#x7EA7;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x6A21;&#x578B;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x5047;&#x8BBE;&#x4FC3;&#x6548;&#x5242;&#x5148;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x5F80;&#x8FD4;&#x5230;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4EE5;&#x6253;&#x5F00;&#x8BE5;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x5982;&#x679C;&#x5047;&#x5B9A; allosterism &#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x7AD9;&#x70B9;&#x548C;&#x4E0D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89E3;&#x91CA;&#x53EA;&#x4EB2;&#x548C;&#x8C03;&#x5236;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7B26;&#x5408;&#x53D8;&#x6784;&#x4E09;&#x5143;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

&#x4E24;&#x56FD;&#x6A21;&#x578B;&#x548C; gallamine &#x5728; M2 &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x53D8;&#x6784;&#x6548;&#x5E94;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

We measured the influence of gallamine on the functional responses and binding properties of selected agonists at the M(2) muscarinic receptor and analyzed the data within the context of the allosteric ternary complex model. Our analysis showed that gallamine modified agonist affinity without influencing efficacy. To explain this behavior, we investigated the allosteric ternary complex model at a deeper level of analysis to assess allosterism in terms of the differential affinity of gallamine for ground and active states of the receptor. Our simulations showed that two-state models based on a single orthosteric site for the agonist linked to an allosteric site for gallamine could not account for affinity-only modulation, even if multiple conformations of ground and active states were considered. We also expanded the tandem two-site model (J Biol Chem 275:18836-18844, 2000) within the context of the allosteric ternary complex model and analyzed the resulting hybrid model at the level of receptor states. This model posits that the agonist first binds to a relay site and then shuttles to the activation site to turn on the receptor. If it is assumed that allosterism occurs at the relay site and not the activation site, then this model can account for affinity-only modulation in a manner consistent with the allosteric ternary complex model.

Two-state models and the analysis of the allosteric effect of gallamine at the M2 muscarinic receptor.

Nous avons mesur&#xE9; l&#x26;#39;influence de la gallamine sur les r&#xE9;ponses fonctionnelles et les propri&#xE9;t&#xE9;s de liaison des agonistes s&#xE9;lectionn&#xE9;s &#xE0; la M (2) des r&#xE9;cepteurs muscariniques et analys&#xE9; les donn&#xE9;es dans le contexte du mod&#xE8;le ternaire allost&#xE9;rique complexe. Notre analyse a montr&#xE9; que la gallamine modifi&#xE9;e affinit&#xE9; agoniste sans influencer l&#x26;#39;efficacit&#xE9;. Pour expliquer ce comportement, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; le mod&#xE8;le ternaire allost&#xE9;rique complexe &#xE0; un niveau plus profond de l&#x26;#39;analyse pour &#xE9;valuer allosterism en termes de l&#x26;#39;affinit&#xE9; diff&#xE9;rentielle de la gallamine pour sol et les &#xE9;tats actifs du r&#xE9;cepteur. Nos simulations ont montr&#xE9; que deux &#xE9;tats des mod&#xE8;les bas&#xE9;s sur un seul site orthost&#xE9;rique pour l&#x26;#39;agoniste li&#xE9; &#xE0; un site allost&#xE9;rique pour gallamine ne pouvait pas rendre compte de l&#x26;#39;affinit&#xE9; uniquement la modulation, m&#xEA;me si plusieurs conformations de terrain et les &#xE9;tats actifs ont &#xE9;t&#xE9; pris en consid&#xE9;ration. Nous avons &#xE9;galement &#xE9;largi le tandem &#xE0; deux sites de mod&#xE8;le (J Biol Chem 275:18836-18844, 2000) dans le cadre du mod&#xE8;le ternaire allost&#xE9;rique complexe et analys&#xE9; le mod&#xE8;le hybride qui en r&#xE9;sulte au niveau des Etats r&#xE9;cepteurs. Ce mod&#xE8;le pose que l&#x26;#39;agoniste se lie d&#x26;#39;abord &#xE0; une station de relais, puis navettes vers le site d&#x26;#39;activation pour activer le r&#xE9;cepteur. Si l&#x26;#39;on suppose que allosterism se produit au niveau du site de relais et pas le site d&#x26;#39;activation, puis ce mod&#xE8;le peut repr&#xE9;senter par affinit&#xE9; uniquement la modulation d&#x26;#39;une mani&#xE8;re compatible avec le mod&#xE8;le ternaire allost&#xE9;rique complexe.

Deux mod&#xE8;les d&#x26;#39;&#xE9;tats et de l&#x26;#39;analyse de l&#x26;#39;effet allost&#xE9;rique de gallamine au niveau du r&#xE9;cepteur muscarinique M2

Wir messen den Einfluss der Gallamine auf die funktionalen Antworten und Bindungseigenschaften des Agonisten an den m-Muskarinischer-Rezeptor ausgew&auml;hlt und die Daten im Rahmen der allosterische tern&auml;ren komplexes Modell analysiert. Unsere Analyse ergab, dass Gallamine Agonist Affinit&auml;t ohne Beeinflussung der Wirksamkeit ge&auml;ndert. Um dieses Verhalten zu erkl&auml;ren, untersuchten wir das allosterische tern&auml;re komplexe Modell auf einer tieferen Ebene der Analyse zur Bewertung von Allosterism in Bezug auf die differenzielle Affinit&auml;t des Gallamine f&uuml;r Boden und aktiven Status des Rezeptors. Unsere Simulationen zeigte, dass die zwei-Staaten-Modelle basieren auf eine einzigen Orthosteric-Website f&uuml;r den Agonisten verkn&uuml;pft ein allosterischer Standort f&uuml;r Gallamine nicht f&uuml;r nur-Affinit&auml;t-Modulation, verantwortlich sei, auch wenn mehrere Konformationen Boden und aktive Staaten galten. Wir erweitert auch das Tandem-zwei Standorte-Modell (J Biol Chem 275:18836-18844, 2000) im Rahmen der allosterische tern&auml;ren komplexes Modell und das resultierende Hybridmodell auf der Ebene der Rezeptor Staaten analysiert. Dieses Modell postuliert, dass der Agonist zuerst an ein Relais-Website bindet und dann springt zum Ortsbild Aktivierung des Rezeptors aktivieren. Wenn davon ausgegangen wird, dass Allosterism bei dem Relais und nicht die Aktivierung-Standort auftritt, kann dann dieses Modell nur-Affinit&auml;t-Modulation in gewissem Sinne konsistent mit dem allosterischer tern&auml;ren komplexes Modell ausmachen.

Zwei-Staaten-Modelle und die Analyse der allosterische Wirkung des Gallamine auf den Muskarinischer M2-Rezeptor.

Abbiamo misurato l&#39;influenza di gallamine sulle risposte funzionali e propriet&agrave; di associazione di selezionati agonisti presso il recettore muscarinico M(2) ed analizzati i dati all&#39;interno del contesto del modello complesso ternario allosterico. La nostra analisi ha mostrato che gallamine modificato affinit&agrave; agonista senza influenzare l&#39;efficacia. Per spiegare questo comportamento, abbiamo studiato allosteric modello complesso ternario ad un livello pi&ugrave; profondo di analisi per valutare la allosterism in termini l&#39;affinit&agrave; differenziale di gallamine per terra e stati attivi del recettore. Nostre simulazioni hanno dimostrato che due stati modelli basati su un sito orthosteric solo per l&#39;agonista collegato ad un sito allosterico per gallamine non pot&eacute; modulazione solo affinit&agrave;, anche se sono stati considerati pi&ugrave; conformazioni del terreno e stati attivi. Abbiamo ampliato anche il modello di due-sito tandem (J Biol Chem 275:18836-18844, 2000) nell&#39;ambito del modello allosterico complesso ternario e analizzato il modello ibrido risultante a livello degli Stati del recettore. Questo modello postula che l&#39;agonista prima si lega ad un sito di rel&egrave; e poi navette per il sito di attivazione per attivare il recettore. Se si presume che allosterism si verifica presso il rel&egrave; e non il sito di attivazione, quindi questo modello pu&ograve; rappresentare solo affinit&agrave; modulazione in maniera coerenza con il modello complesso ternario allosterico.

Modelli di due Stati e l&#39;analisi dell&#39;effetto allosterico di gallamine presso il recettore muscarinico M2.

&#x6211;&#x4EEC;&#x8861;&#x91CF;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x6D3B;&#x52A8; &#xFF08;RA(i)) &#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x53EF;&#x80FD;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x578B;&#x548C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;RA(i) &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5C3A;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x955C;&#x4EB2;&#x548C;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8868;&#x793A;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F30;&#x8BA1;&#x884C;&#x4E8B;&#x8026;&#x5408;&#x5230;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; G &#x86CB;&#x767D;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684; M(4) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x9762;&#x677F;&#x7684; RA(i) &#x503C;&#xFF1A; G(i) &#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3001; G(s) &#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x79EF;&#x7D2F;&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x548C;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#x6C34;&#x89E3; G alpha(15) &#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684; RA(i) &#x503C;&#x4E3A;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6FC0;&#x52A8;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A; M(4) &#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x89E6;&#x53D1;&#x7684;&#x4E09; G &#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x4F30;&#x8BA1; RA(i) &#x503C;&#x4E3A;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8DE8; M(1) &#x5230; M(4) &#x8548;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x5728;&#x4E2D;&#x56FD;&#x4ED3;&#x9F20;&#x5375;&#x5DE2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x7F8E;&#x601D;-A-343 [4-I-[3-chlorophenyl]carbamoyloxy)-2-butynyltrimethylammnonium &#x6C2F;] M(1) &#x548C; M(4) &#x4E9A;&#x578B;&#x548C;&#x6BDB;&#x679C;&#x82B8;&#x9999;&#x78B1;&#x4E3A; M(1) &#x548C; M(3) &#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6D4B;&#x8BD5; M(4) &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027; M(1) &#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F30;&#x8BA1;&#x4ECE;&#x516C;&#x5F00;&#x53D1;&#x8868;&#x7684;&#x6587;&#x732E;&#xFF0C;&#x5BF9; M(1)&#x3001; M(2) &#x548C; M(3) &#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684; RA(i) &#x503C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x83B7;&#x5F97;&#x7B26;&#x5408;&#x6211;&#x4EEC;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x6210;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A; RA(i) &#x4F30;&#x8BA1;&#x662F;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6D3B;&#x6027;&#x53D7;&#x4F53;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x8861;&#x91CF;&#x6807;&#x51C6;&#x3002;

&#x4E3A;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684; M1 &#x5230; M4 &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x578B;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x3002;

We measured the intrinsic relative activity (RA(i)) of muscarinic agonists to detect possible selectivity for receptor subtypes and signaling pathways. RA(i) is a relative measure of the microscopic affinity constant of an agonist for the active state of a GPCR expressed relative to that of a standard agonist. First, we estimated RA(i) values for a panel of agonists acting at the M(4) muscarinic receptor coupled to three distinct G-protein pathways: G(i) inhibition of cAMP accumulation, G(s) stimulation of cAMP accumulation, and G alpha(15) stimulation of phosphoinositide hydrolysis. Our results show similar RA(i) values for each agonist, suggesting that the same active state of the M(4) receptor triggers the activation of the three G proteins. We also estimated RA(i) values for agonists across M(1) to M(4) muscarinic subtypes stably transfected in Chinese hamster ovary cells. Our results show selectivity of McN-A-343 [4-I-[3-chlorophenyl]carbamoyloxy)-2-butynyltrimethylammnonium chloride] for the M(1) and M(4) subtypes and selectivity of pilocarpine for the M(1) and M(3) subtypes. The other agonists tested lacked marked selectivity among M(1) to M(4) receptors. Finally, we estimated RA(i) values from published literature on M(1), M(2), and M(3) muscarinic responses and obtained results consistent with our own studies. Our results show that the RA(i) estimate is a useful receptor-dependent measure of agonist activity.

Selectivity of agonists for the active state of M1 to M4 muscarinic receptor subtypes.

Nous avons mesur&#xE9; l&#x26;#39;activit&#xE9; intrins&#xE8;que relative (RA (i)) des agonistes muscariniques pour d&#xE9;tecter s&#xE9;lectivit&#xE9; possible des sous-types de r&#xE9;cepteurs et des voies de signalisation. RA (i) est une mesure relative de la constante d&#x26;#39;affinit&#xE9; microscopique d&#x26;#39;un agoniste de l&#x26;#39;&#xE9;tat actif d&#x26;#39;un GPCR exprim&#xE9; par rapport &#xE0; celle d&#x26;#39;un agoniste standard. Tout d&#x26;#39;abord, nous avons estim&#xE9; RA (i) des valeurs pour un panneau d&#x26;#39;agonistes agissant &#xE0; la M (4) des r&#xE9;cepteurs muscariniques coupl&#xE9;e &#xE0; trois distinctes aux prot&#xE9;ines G voies: G (i) l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;accumulation d&#x26;#39;AMPc, G (s) de stimulation de l&#x26;#39;accumulation d&#x26;#39;AMPc, et G alpha (15) la stimulation de l&#x26;#39;hydrolyse des phosphoinositides. Nos r&#xE9;sultats montrent similaires RA (i) des valeurs pour chaque agoniste, ce qui sugg&#xE8;re que le m&#xEA;me &#xE9;tat actif de la M (4) r&#xE9;cepteur d&#xE9;clenche l&#x26;#39;activation des prot&#xE9;ines G trois. Nous avons &#xE9;galement estim&#xE9; RA (i) des valeurs pour les agonistes &#xE0; travers M (1) &#xE0; M (4) sous-types muscariniques transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable dans ovariennes de hamster chinois. Nos r&#xE9;sultats montrent une s&#xE9;lectivit&#xE9; de McN-A-343 [4-I-[3-chloroph&#xE9;nyl] carbamoyloxy chlorure)-2-butynyltrimethylammnonium] pour le M (1) et M (4) sous-types et la s&#xE9;lectivit&#xE9; de la pilocarpine pour le M (1) et M (3) sous-types. Les autres agonistes test&#xE9;s manquait s&#xE9;lectivit&#xE9; marqu&#xE9;e chez M (1) &#xE0; M (4) r&#xE9;cepteurs. Enfin, nous avons estim&#xE9; RA (i) les valeurs de la litt&#xE9;rature publi&#xE9;e sur M (1), M (2), et M (3) r&#xE9;ponses muscariniques et les r&#xE9;sultats obtenus en accord avec nos propres &#xE9;tudes. Nos r&#xE9;sultats montrent que le RA (i) est une estimation utile d&#xE9;pendante du r&#xE9;cepteur de mesure de l&#x26;#39;activit&#xE9; agoniste.

S&#xE9;lectivit&#xE9; des agonistes de l&#x26;#39;&#xE9;tat actif de M1 &#xE0; M4 types de r&#xE9;cepteurs muscariniques

Wir messen die systeminterne relative Aktivit&auml;t (RA(i)) Muskarinischer Agonisten um m&ouml;gliche Selektivit&auml;t f&uuml;r Rezeptor-Subtypen und Signalwege zu erkennen. RA(i) ist ein relatives Ma&szlig; f&uuml;r die mikroskopische Affinit&auml;t Konstante der ein Agonist f&uuml;r den aktiven Status von einem GPCR, ausgedr&uuml;ckt im Verh&auml;ltnis zu dem von einer standard-Agonist. Zun&auml;chst sch&auml;tzten wir RA(i) Werte f&uuml;r ein Gremium von Agonisten Schauspielunterricht an der muskarinische M(4)-Rezeptor an drei unterschiedliche Wege der G-Protein gekoppelt: G(i) Hemmung der cAMP-Akkumulation, G(s) Stimulation der cAMP-Akkumulation und G alpha(15) Stimulation der Phosphoinositid-Hydrolyse. Unsere Ergebnisse zeigen &auml;hnliche RA(i) Werte f&uuml;r jede Agonist, was darauf hindeutet, dass der gleiche aktive Zustand des M(4)-Rezeptors die Aktivierung der drei G-Proteine l&ouml;st. Wir voraussichtlich auch RA(i) Werte f&uuml;r Agonisten &uuml;ber Zusammenlegung M(4) Muskarinischer Subtypen stabil transfected in chinesischen Hamsterzellen Eierstock. Unsere Ergebnisse zeigen die Selektivit&auml;t der McN-A-343 [4-I-[3-chlorophenyl]carbamoyloxy)-2-butynyltrimethylammnonium Chlorid] f&uuml;r die Subtypen Zusammenlegung und M(4) und Selektivit&auml;t von Pilocarpin f&uuml;r die Zusammenlegung und M(3) Untertypen. Die anderen Agonisten getestet ermangelte markierte Selektivit&auml;t unter Zusammenlegung an M(4) Rezeptoren. Schlie&szlig;lich gesch&auml;tzte RA(i) Werte aus der ver&ouml;ffentlichten Literatur auf Zusammenlegung und m M(3) Muskarinischer Antworten und erzielten Ergebnisse mit unseren eigenen Studien. Unsere Ergebnisse zeigen, dass die RA(i)-Sch&auml;tzung eine n&uuml;tzliche Ma&szlig;nahme der Rezeptor-abh&auml;ngige Agonist T&auml;tigkeit.

Selektivit&auml;t Agonisten f&uuml;r den aktiven Status von M1 M4 Muskarinischer-Rezeptor-Subtypen.

Abbiamo misurato l&#39;attivit&agrave; relativa intrinseca (RA(i)) degli agonisti muscarinici per rilevare possibili selettivit&agrave; per i sottotipi di recettori e vie di segnalazione. RA(i) &egrave; una misura relativa della costante di affinit&agrave; microscopica di un agonista per lo stato attivo di un GPCR espresso rispetto a quello di un agonista standard. In primo luogo, abbiamo stimato i valori RA(i) per un pannello di agonisti agendo presso il recettore muscarinico M(4) accoppiato a tre distinti percorsi G-proteina: inibizione G(i) di accumulo cAMP, stimolazione g di accumulo cAMP e stimolazione alpha(15) G di phosphoinositide idrolisi. I nostri risultati mostrano valori simili RA(i) per ogni agonista, suggerendo che lo stesso stato attivo del recettore M(4) innesca l&#39;attivazione delle proteine G tre. Abbiamo anche stimato RA(i) valori per agonisti in tutta M(1) a M(4) sottotipi muscarinici stabile transfected nelle cellule di ovaio di criceto cinese. I nostri risultati mostrano selettivit&agrave; di McN-A-343 [4-I-[3-chlorophenyl]carbamoyloxy)-2-butynyltrimethylammnonium cloruro] per i sottotipi di M(1) e M(4) e selettivit&agrave; di Pilocarpina per i sottotipi M(1) e M(3). Gli altri agonisti testato mancava marcata selettivit&agrave; tra M(1) ai recettori M(4). Infine, abbiamo stimato i valori RA(i) dalla letteratura pubblicata su M(1), M(2) e M(3) risposte muscarinico e ottenuto risultati coerenti con i nostri propri studi. I nostri risultati mostrano che la stima di RA(i) &egrave; una misura utile di recettore-dipendente di attivit&agrave; agonista.

Selettivit&agrave; degli agonisti per lo stato attivo della M1 a sottotipi del recettore muscarinico M4.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3068;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x5BFE;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF08;RA&#xFF08;I&#xFF09;&#xFF09;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x5024;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x3055;GPCR&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x5FAE;&#x8996;&#x7684;&#x306A;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; cAMP&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;G&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;cAMP&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;G&#xFF08;s&#xFF09;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF1A;&#x307E;&#x305A;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;M&#xFF08;4&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30B4;&#x200B;&#x200B;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;G&#x3B1;&#xFF08;15&#xFF09;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;M&#xFF08;4&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x304C;3 G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x5404;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30C1;&#x30E3;&#x30A4;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5375;&#x5DE3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;M&#xFF08;4&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;M&#xFF08;1&#xFF09;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;MCN-A-343 [4-I-[3  - &#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;]&#x30AB;&#x30EB;&#x30D0;&#x30E2;&#x30A4;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#xFF09;-2  -  butynyltrimethylammnonium&#x5869;&#x5316;]&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;M&#xFF08;1&#xFF09;&#x3068;M&#xFF08;4&#xFF09;M&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3068;&#x30D4;&#x30ED;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D4;&#x30F3;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#xFF08;1&#xFF09;&#x306E;&#x3068;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3002;&#x8A66;&#x9A13;&#x3057;&#x305F;&#x4ED6;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;M&#xFF08;4&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;M&#xFF08;1&#xFF09;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;M&#xFF08;1&#xFF09;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x3001;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6211;&#x3005;&#x81EA;&#x8EAB;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x516C;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6587;&#x732E;&#x304B;&#x3089;RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;RA&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x5024;&#x306F;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

M4&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;M1&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x9078;&#x629E;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCE21;&#xC815; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xB300; &#xD65C;&#xB3D9; (muscarinic agonists &#xAC10;&#xC9C0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD558;&#xC704; &#xC720;&#xD615; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4;&#xB97C; RA(i)). Ra(i)&#xB294; &#xD45C;&#xC900; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB97C; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; GPCR&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC758; &#xBBF8;&#xC138;&#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; &#xCE21;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. &#xCCAB;&#xC9F8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACBD;&#xB85C;&#xB97C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; M(4) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC6A9; agonists&#xC758; &#xD328;&#xB110;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; RA(i) &#xAC12; &#xCD94;&#xC815;: G(i) &#xC5B5;&#xC81C; &#xCEA0;&#xD504; &#xCD95;&#xC801;, &#xCEA0;&#xD504; &#xCD95;&#xC801;&#xC758; G(s) &#xC790;&#xADF9; &#xBC0F; phosphoinositide &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xC758; G alpha(15) &#xC790;&#xADF9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC01; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, M(4) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC720;&#xBC1C; 3 G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; RA(i) &#xAC12;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xCD94;&#xC815; RA(i) &#xAC12; agonists&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; M(1)&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xAD6D; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xB09C;&#xC18C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD398; M(4) muscarinic &#xD558;&#xC704;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; M(1) &#xBC0F; M(4) &#xD558;&#xC704; &#xC720;&#xD615; &#xBC0F; pilocarpine M(1) &#xBC0F; M(3) &#xD558;&#xC704; &#xC720;&#xD615;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; McN-A-343 [4-I-[3-chlorophenyl]carbamoyloxy)-2-butynyltrimethylammnonium &#xC5FC;&#xD654;]&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; agonists M(4) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; M(1) &#xC911; &#xBD80;&#xC871;&#xB41C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; M(1), M(2), &#xBC0F; M(3) muscarinic &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xCD9C;&#xD310;&#xB41C; &#xBB38;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; RA(i) &#xAC12;&#xC744; &#xCD94;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5BB;&#xC740;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; RA(i) &#xCD94;&#xC815;&#xC740; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC758;&#xC874; &#xCE21;&#xC815; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

M4 muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD558;&#xC704; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; m 1&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; agonists&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Se midi&#xF3; la actividad relativa intr&#xED;nseca (AR (i)) de los agonistas muscar&#xED;nicos para detectar selectividad posible para subtipos de receptores y v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. AR (i) es una medida relativa de la afinidad microsc&#xF3;pico constante de un agonista para el estado activo de un GPCR expres&#xF3; en relaci&#xF3;n a la de un agonista est&#xE1;ndar. En primer lugar, se estim&#xF3; RA (i) valores para un panel de agonistas que act&#xFA;a en la M (4) de los receptores muscar&#xED;nicos acoplado a tres distintas prote&#xED;nas G-v&#xED;as: G (i) la inhibici&#xF3;n de la acumulaci&#xF3;n de AMPc, G (s) la estimulaci&#xF3;n de la acumulaci&#xF3;n de AMPc, y G alfa (15) la estimulaci&#xF3;n de la hidr&#xF3;lisis de fosfoinos&#xED;tidos. Nuestros resultados muestran similares RA (i) valores para cada agonista, lo que sugiere que el mismo estado activo de la M (4) del receptor desencadena la activaci&#xF3;n de las tres prote&#xED;nas G. Tambi&#xE9;n estima que la AR (i) los valores de los agonistas a trav&#xE9;s de M (1) a M (4) subtipos muscar&#xED;nicos transfectadas de forma estable en c&#xE9;lulas de ovario de h&#xE1;mster chino. Nuestros resultados muestran la selectividad de McN-A-343 [4-I-[3-clorofenil] carbamoiloxi cloruro)-2-butynyltrimethylammnonium] para el M (1) y M (4) subtipos y la selectividad de la pilocarpina para el M (1) y M (3) subtipos. Los otros agonistas de la prueba carec&#xED;a de selectividad marcada entre M (1) a M (4) receptores. Por &#xFA;ltimo, se estima que la AR (i) los valores de la literatura publicada en M (1), M (2) y M (3) las respuestas muscar&#xED;nicos y los resultados obtenidos en consonancia con nuestros propios estudios. Nuestros resultados muestran que el RA (i) es una estimaci&#xF3;n &#xFA;til del receptor dependiente de medida de la actividad agonista.

La selectividad de los agonistas para el estado activo de la M1 a M4 subtipos de receptores muscar&#xED;nicos

&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x8BA8;&#x662F;&#x5426; M(2) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x8C5A;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#x54CD;&#x5E94;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x70C8;&#x6027;&#x3001; &#x76F4;&#x63A5;&#x6536;&#x7F29;&#xFF0C;&#x50CF;&#x8FD9;&#x6837;&#x4ECE; M(3) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x5254;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x70B9; 4 &#x6E7F;&#x82A5;&#x5B50;&#x6C14;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x5176; M(3) &#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4ECE;&#x56DE;&#x80A0;&#x7684;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x8F6C;&#x53D7;&#x4F53;&#x963B;&#x65AD;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; 4 &#x6E7F;&#x82A5;&#x672B;&#x706D;&#x6D3B; M(3) &#x8C5A;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#xFF0C;&#x8BD5;&#x56FE;&#x63ED;&#x793A;&#x76F4;&#x63A5;&#xFF0C;M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x4FC3;&#x6548;&#x5242;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3001; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x6316;&#x7A7A;&#x548C; M(3) &#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0; oxotremorine M&#x3001; &#x8BF1;&#x53D1;&#x70C8;&#x6027;&#x6536;&#x7F29;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x6D88;&#x6781;&#x65E5;&#x5FD7; EC(50) + /-+ /-0.03&#xFF0C;+ /-0.05 &#x548C; + /-0.08&#xFF0C;6.99 6.26 6.75 &#x7684;&#x626B;&#x63CF;&#x7535;&#x955C; (pEC &#xFF08;50&#xFF09;&#xFF09; &#x503C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x76F8;&#x5E94; E (max) &#x503C;&#x5927;&#x81F4;&#x76F8;&#x540C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728; M(3) &#x53D7;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x5254;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x662F;&#x53EA;&#x6709; 36%&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3002;4 &#x6E7F;&#x82A5;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E4B;&#x540E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x54CD;&#x5E94;&#x66F2;&#x7EBF;&#x7684; oxotremorine M &#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x56DE;&#x80A0;&#x7684;&#x72B6;&#x51B5;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x4F69;&#x5947; (50)&#x3001; E (max) &#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x6291;&#x5236; M(3) &#x57FA;&#x56E0;&#x5254;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;4 &#x6E7F;&#x82A5;&#x6CBB;&#x7597;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x7981;&#x7528; M(3) &#x54CD;&#x5E94;&#x5E76;&#x5448;&#x73B0;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x56DE;&#x80A0;&#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x6536;&#x7F29;&#x884C;&#x4E3A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; M(3) &#x57FA;&#x56E0;&#x5254;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;4 &#x6E7F;&#x82A5;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E4B;&#x540E; oxotremorine M &#x5BF9;&#x8C5A;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x53CD;&#x5E94;&#x5C55;&#x51FA;&#x4F4E;&#x70C8;&#x5EA6;&#x548C;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x4E0E; M(3) &#x53CD;&#x5E94;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x8C5A;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001; &#x9AD8;&#x5EA6;&#x70C8;&#x6027;&#xFF0C;M (2)-&#x6536;&#x7F29;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x3001; &#x4F4E;&#x6548;&#x80FD;&#x7684; M(2) &#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;

&#x8C5A;&#x9F20;&#x56DE;&#x80A0;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4E86;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x3001; &#x9AD8;&#x7684;&#x6548;&#x80FD;&#xFF0C;M (2)-&#x7279;&#x6027;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x56DE;&#x80A0;&#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x3001; &#x6536;&#x7F29;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

We explored whether the M(2) muscarinic receptor in the guinea pig ileum elicits a highly potent, direct-contractile response, like that from the M(3) muscarinic receptor knockout mouse. First, we characterized the irreversible receptor-blocking activity of 4-DAMP mustard in ileum from muscarinic receptor knockout mice to verify its M(3) selectivity. Then, we used 4-DAMP mustard to inactivate M(3) responses in the guinea pig ileum to attempt to reveal direct, M(2) receptor-mediated contractions. The muscarinic agonist, oxotremorine-M, elicited potent contractions in ileum from wild-type, M(2) receptor knockout, and M(3) receptor knockout mice characterized by negative log EC(50) (pEC (50)) values +/- SEM of 6.75 +/- 0.03, 6.26 +/- 0.05, and 6.99 +/- 0.08, respectively. The corresponding E (max) values in wild-type and M(2) receptor knockout mice were approximately the same, but that in the M(3) receptor knockout mouse was only 36% of wild type. Following 4-DAMP mustard treatment, the concentration-response curve of oxotremorine-M in wild-type ileum resembled that of the M(3) knockout mouse in terms of its pEC (50), E (max), and inhibition by selective muscarinic antagonists. Thus, 4-DAMP mustard treatment appears to inactivate M(3) responses selectively and renders the muscarinic contractile behavior of the wild-type ileum similar to that of the M(3) knockout mouse. Following 4-DAMP mustard treatment, the contractile response of the guinea pig ileum to oxotremorine-M exhibited low potency and a competitive-antagonism profile consistent with an M(3) response. The guinea pig ileum, therefore, lacks a direct, highly potent, M(2)-contractile component but may have a direct, lower potency M(2) component.

The guinea pig ileum lacks the direct, high-potency, M(2)-muscarinic, contractile mechanism characteristic of the mouse ileum.

Nous avons explor&#xE9; si le M (2) des r&#xE9;cepteurs muscariniques dans l&#x26;#39;il&#xE9;on de porc Guin&#xE9;e suscite une tr&#xE8;s puissante, directe-contractile r&#xE9;ponse, comme celle de la M (3) de la souris knock-out du r&#xE9;cepteur muscarinique. Tout d&#x26;#39;abord, nous avons caract&#xE9;ris&#xE9; l&#x26;#39;irr&#xE9;versible des r&#xE9;cepteurs bloquant l&#x26;#39;activit&#xE9; de la 4-DAMP la moutarde dans l&#x26;#39;il&#xE9;on de souris knock-out muscariniques r&#xE9;cepteurs pour v&#xE9;rifier son M (3) la s&#xE9;lectivit&#xE9;. Puis, nous avons utilis&#xE9; 4-DAMP la moutarde pour inactiver M (3) r&#xE9;ponses dans la Guin&#xE9;e de porc il&#xE9;on pour tenter de r&#xE9;v&#xE9;ler directs, M (2) m&#xE9;di&#xE9;s par les r&#xE9;cepteurs des contractions. L&#x26;#39;agoniste muscarinique, oxotr&#xE9;morine-M, a suscit&#xE9; des contractions puissantes dans l&#x26;#39;il&#xE9;on de type sauvage, KO M r&#xE9;cepteur (2), et M (3) souris knock-out r&#xE9;cepteurs caract&#xE9;ris&#xE9; par log n&#xE9;gatif CE (50) (PEC (50)) des valeurs + / - SEM de 6,75 + / - 0,03, 6,26 + / - 0,05, et 6,99 + / - 0,08, respectivement. Les correspondants E (max) de type sauvage et M (2) des r&#xE9;cepteurs de souris knock-out &#xE9;taient &#xE0; peu pr&#xE8;s le m&#xEA;me, mais que dans le M (3) souris knock-out du r&#xE9;cepteur n&#x26;#39;est que de 36% de type sauvage. Apr&#xE8;s le traitement de moutarde 4-DAMP, la courbe de concentration-r&#xE9;ponse de l&#x26;#39;oxotr&#xE9;morine-M de type sauvage il&#xE9;on ressemblait &#xE0; celle de la souris knock-out M (3) en termes de Pec (50), E (max), et l&#x26;#39;inhibition s&#xE9;lective par muscariniques antagonistes. Ainsi, le traitement de moutarde 4-DAMP appara&#xEE;t pour inactiver M (3) des r&#xE9;ponses de mani&#xE8;re s&#xE9;lective et rend le comportement muscarinique contractile de l&#x26;#39;il&#xE9;on de type sauvage similaire &#xE0; celle de la souris knock-out M (3). Apr&#xE8;s le traitement de moutarde 4-DAMP, la r&#xE9;ponse contractile de l&#x26;#39;il&#xE9;on de porc Guin&#xE9;e &#xE0; oxotr&#xE9;morine-M a montr&#xE9; une puissance faible et un profil concurrentiel-antagonisme compatible avec un M (3) la r&#xE9;ponse. La Guin&#xE9;e porc il&#xE9;on, par cons&#xE9;quent, n&#x26;#39;a pas un lien direct, tr&#xE8;s puissant, M (2)-contractile composant, mais peut avoir un effet direct, la puissance inf&#xE9;rieure M (2) composant.

La Guin&#xE9;e Pig il&#xE9;on Manque Direct, haute puissance, M (2)-muscariniques, caract&#xE9;ristique m&#xE9;canisme contractile de l&#x26;#39;il&#xE9;on de souris

Wir untersuchten, ob der muskarinische m-Rezeptor in den Meerschweinchen-Ileum eine hochwirksame, direkte kontraktilen Antwort, wie die aus den M(3) Muskarinischer Rezeptor-Knockout-Maus entlockt. Erstens charakterisiert wir die irreversible Rezeptor blockierende Aktivit&auml;t 4-DAMP Senf im Ileum muskarinische Rezeptoren Knockout M&auml;use seine M(3) Selektivit&auml;t &uuml;berpr&uuml;fen. Dann haben wir 4-DAMP Senf um M(3) Antworten im Meerschweinchen Ileum versucht, direkten, offenbaren m-Rezeptor-vermittelten Kontraktionen zu inaktivieren. Den Muskarinischer-Agonisten, charakterisiert Oxotremorine-M, noch starke Kontraktionen im Ileum von Wildtyp und m-Rezeptor-ko M(3) Rezeptor Knockout M&auml;use durch negative Log EC(50) (pEC (50)) Werte +/-SEM der 6,75 +/-0,03, 6.26 +/-0,05 und 6.99 +/-0,08, beziehungsweise. Die entsprechenden E (max) Werte in Wildtyp und m-Rezeptor-Knockout-M&auml;use waren ungef&auml;hr gleich, aber, dass die M(3)-Rezeptor-Knockout-Maus nur 36 % der Wildtyp war. Nach der 4-DAMP Senf Behandlung &auml;hnelte die Konzentration-Wirkungs-Kurve der Oxotremorine-M in Wildtyp Ileum dem der M(3)-Knockout-Maus hinsichtlich seiner pEC (50), E (max) und Hemmung durch selektive Muskarinischer Antagonisten. Also 4-DAMP Senf Behandlung scheint M(3) Antworten selektiv zu inaktivieren und rendert das muskarinische KONTRAKTILER Verhalten der Wildtyp Ileum &auml;hnlich der M(3)-Knockout-Maus. Nach der 4-DAMP Senf Behandlung ausgestellt die kontraktilen Antwort des Ileum Meerschweinchen auf Oxotremorine-M niedrige Potenz und ein wettbewerbsf&auml;hig-Antagonismus-Profil mit einer M(3) Reaktion. Meerschweinchen Ileum, daher fehlt eine direkte, hochwirksames, M (2)-KONTRAKTILER Komponente aber m&ouml;glicherweise eine direkte, niedrigere Potenz-m-Komponente.

Meerschweinchen Ileum fehlt die direkte, High Potency, M (2)-Muskarinischer, kontraktiler Mechanismus, die charakteristisch f&uuml;r die Maus-Ileum.

Abbiamo esplorato se il recettore muscarinico M(2) nell&#39;ileo di cavia provoca una risposta diretta-contrattile, altamente potente, come quello dal topo knockout M(3) del recettore muscarinico. In primo luogo, abbiamo caratterizzato l&#39;attivit&agrave; di blocco del recettore irreversibile di senape 4-umido nell&#39;ileo da topi knockout del recettore muscarinico per verificare la sua selettivit&agrave; M(3). Quindi, abbiamo usato senape 4-umido per inattivare le risposte M(3) nell&#39;ileo di cavia per tentare di rivelare diretto, M(2) mediata dal recettore contrazioni. L&#39;agonista muscarinico, Oxotremorina-M, raccolse le contrazioni potenti nell&#39;ileo da wild-type, M(2) knockout del recettore e topi knockout M(3) recettore caratterizzato da registro negativo EC(50) valori (pEC (50)) + /-SEM di 6,75 + /-0,03, 6,26 + /-0.05 e 6,99 + /-0.08, rispettivamente. I corrispondenti valori (max) E nel wild-type e topi knockout M(2) recettore erano approssimativamente lo stesso, ma che nel recettore M(3) topo knockout fu solo il 36% di tipo selvatico. A seguito di trattamento senapa 4-umido, la curva concentrazione-risposta di Oxotremorina-M nel selvaggio-tipo ileo assomigliava a quella del mouse di knockout M(3) in termini di pEC (50), E (max) e l&#39;inibizione da antagonisti muscarinici selettivi. Cos&igrave;, 4-umide trattamento senapa appare per inattivare le risposte M(3) selettivamente e rende il comportamento muscarinico contrattile dell&#39;ileo selvaggio-tipo simile a quello del mouse di knockout M(3). A seguito di trattamento senapa 4-umido, la risposta contrattile dell&#39;ileo di cavia a Oxotremorina-M esposto bassa potenza e un profilo di antagonismo competitivo coerenza con una risposta M(3). L&#39;ileo di cavia, quindi, manca una diretta, altamente potente, M (2)-componente contrattile, ma possono avere una componente M(2) diretta, bassa potenza.

L&#39;ileo di cavia manca il diretta, ad alta potenza, M (2)-meccanismo contrattile, muscarinico caratteristico dell&#39;ileo del mouse.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C3;&#x30C8;&#x56DE;&#x8178;&#x3067;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x53CE;&#x7E2E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x60F9;&#x8D77;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x306E;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x56DE;&#x8178;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;4-DAMP&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x906E;&#x65AD;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x56DE;&#x8178;&#x3001;&#x30E2;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;4-DAMP&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x56DE;&#x8178;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x3001;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8CA0;&#x306E;&#x5BFE;&#x6570;EC&#xFF08;50&#xFF09;&#xFF08;PEC&#xFF08;50&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;+ / -  6.75&#x306E;SEM + /  -  0.03&#x3001;6.26 + /  -  0.05&#x3001;6.99 + /  -  0.08&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002; &#xFF08;2&#xFF09;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;M&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;E&#xFF08;max&#xFF09;&#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x3058;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x308F;&#x305A;&#x304B;36&#xFF05;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; 4-DAMP&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C9;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x56DE;&#x8178;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x5FDC;&#x7B54;&#x66F2;&#x7DDA;&#x306F;&#x3001;PEC&#xFF08;&#x200B;&#x200B;50&#xFF09;&#x3001;E&#xFF08;max&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;4-DAMP&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C9;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x56DE;&#x8178;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x53CE;&#x7E2E;&#x6319;&#x52D5;&#x3092;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 4-DAMP&#x30DE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C9;&#x51E6;&#x7406;&#x5F8C;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30F3;-M&#x3078;&#x306E;&#x30E2;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C3;&#x30C8;&#x56DE;&#x8178;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x52B9;&#x529B;&#x3068;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x62EE;&#x6297;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E2;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C3;&#x30C8;&#x56DE;&#x8178;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53CE;&#x7E2E;&#x6210;&#x5206;&#x3092;&#x6301;&#x305F;&#x305A;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001;&#x4E0B;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E2;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C3;&#x30C8;&#x56DE;&#x8178;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x56DE;&#x8178;&#x306E;M&#xFF08;2&#xFF09; - &#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x3001;&#x53CE;&#x7E2E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001;&#x9AD8;&#x52B9;&#x529B;&#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x308B;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xAE30;&#xB2C8; &#xD53C;&#xADF8; &#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; M(2) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; elicits M(3) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C;, &#xC9C1;&#xC811; &#xC218;&#xCD95; &#xBC18;&#xC751;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB7F0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#xCCAB;&#xC9F8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB3CC;&#xC774;&#xD0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; M(3) &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xD655;&#xC778; &#xC11C;&#xC5D0; 4 &#xC2B5;&#xAE30;&#xAC00; &#xACA8;&#xC790;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC74C;, M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC; &#xC218;&#xCD95; &#xC9C1;&#xC811; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xB824;&#xACE0; &#xAE30;&#xB2C8; &#xD53C;&#xADF8;&#xC758; &#xC11C;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; M(3)&#xC744; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; 4 &#xC2B5;&#xAE30;&#xAC00; &#xACA8;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, oxotremorine M, &#xC774;&#xB04C;&#xB824; &#xC11C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;, M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xBC0F; M(3) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC218;&#xCD95;&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB85C;&#xADF8; EC(50) &plusmn; 0.03, 6.26 0.05&#xC640; 0.08, + 6.99 + + 6.75 SEM (pEC (50)) &#xAC12; &#xAC01;&#xAC01;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xD574;&#xB2F9; &#xC804;&#xC790; (&#xCD5C;&#xB300;) &#xAC12;&#xC740; &#xC57D; &#xB3D9;&#xC77C;, M(3) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785;&#xC758; 36%&#xB294;. 4 &#xC2B5;&#xAE30;&#xAC00; &#xACA8;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xC11C;&#xC5D0; oxotremorine-M&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC751;&#xB2F5; &#xACE1;&#xC120;&#xC744; &#xB2EE;&#xC740; pEC (50), E (&#xCD5C;&#xB300;) &#xBC0F; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; muscarinic &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B5;&#xC81C; M(3) &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, 4 &#xC2B5;&#xAE30;&#xAC00; &#xACA8;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; M(3) &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; M(3) &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC11C; muscarinic &#xC218;&#xCD95; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xB80C;&#xB354;&#xB9C1;. 4 &#xC2B5;&#xAE30;&#xAC00; &#xACA8;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4; oxotremorine m&#xC758; &#xAE30;&#xB2C8; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC11C; &#xC218;&#xCD95; &#xC751;&#xB2F5; &#xB0AE;&#xC740; &#xD798; &#xBC0F; &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xC788;&#xB294; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; M(3) &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xC804;&#xC2DC;. &#xAE30;&#xB2C8; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC11C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBD80;&#xC871; &#xC9C1;&#xC811;, &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; M (2)-&#xC218;&#xCD95; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB354; &#xB0AE;&#xC740; &#xD798; M(2) &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE30;&#xB2C8; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC11C; &#xBD80;&#xC871; &#xC9C1;&#xC811;, &#xB192;&#xC740; &#xD798;, M (2)-muscarinic, &#xC218;&#xCD95; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC11C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;.

Hemos estudiado si la M (2) de los receptores muscar&#xED;nicos en el &#xED;leon de cobaya provoca una muy potente, directo-contr&#xE1;ctil de respuesta, al igual que desde la M (3) del rat&#xF3;n knockout de receptores muscar&#xED;nicos. En primer lugar, hemos caracterizado la irreversible los receptores de bloquear la actividad de la 4-DAMP de mostaza en el &#xED;leon de los ratones receptores muscar&#xED;nicos knockout para verificar su M (3) la selectividad. Luego, se utiliz&#xF3; 4-DAMP de mostaza para inactivar M (3) las respuestas en el conejillo de indias &#xED;leon para intentar revelar directos, M (2) mediados por receptores contracciones. El agonista muscar&#xED;nico, oxotremorina-M, provoc&#xF3; contracciones potentes en el &#xED;leon de tipo salvaje nocaut, M receptor (2) y M (3) ratones knockout de receptores se caracteriza por registro negativo de CE (50) (PEC (50)) los valores de + / - SEM de 6,75 + / - 0,03, 6,26 + / - 0,05 y 6,99 + / - 0,08, respectivamente. Las correspondientes E (max) los valores de la naturaleza y tipo M (2) del receptor de los ratones knock-out eran aproximadamente las mismas, pero que en la M (3) rat&#xF3;n knock-out del receptor era s&#xF3;lo el 36% de tipo salvaje. Despu&#xE9;s del tratamiento mostaza 4-DAMP, la curva de concentraci&#xF3;n-respuesta de oxotremorina-M en tipo salvaje &#xED;leon se asemejaba al de la rat&#xF3;n knockout M (3) en t&#xE9;rminos de su pEC (50), E (max) y la inhibici&#xF3;n por muscar&#xED;nicos selectivos antagonistas. Por lo tanto, 4-DAMP tratamiento mostaza aparece para inactivar M (3) las respuestas de manera selectiva y hace que el comportamiento muscar&#xED;nico contr&#xE1;ctil del &#xED;leon de tipo salvaje similar a la del rat&#xF3;n nocaut M (3). Despu&#xE9;s del tratamiento de mostaza 4-DAMP, la respuesta contr&#xE1;ctil del &#xED;leon conejillo de indias para oxotremorina-M mostr&#xF3; una potencia baja y un perfil competitivo-el antagonismo coherente con una M (3) la respuesta. El &#xED;leon de cobaya, por lo tanto, carece de un particular, muy potente, H (2)-contr&#xE1;ctil componente pero puede tener un efecto directo, menor potencia M (2) del componente.

El &#xED;leon de cobaya Carece de la directa, de alta potencia, M (2)-muscar&#xED;nico T&#xED;pico, mecanismo de la contracci&#xF3;n del &#xED;leon rat&#xF3;n

On d&#xE9;crit une modification de la th&#xE9;orie des r&#xE9;cepteurs pour l&#x26;#39;estimation des affinit&#xE9;s observ&#xE9;es (K (obs)) et l&#x26;#39;efficacit&#xE9; relative de ligands dans des dosages orthost&#xE9;riques fonctionnels qui pr&#xE9;sentent une activit&#xE9; constitutive. Notre th&#xE9;orie inclut des param&#xE8;tres pour les fractions de la population de r&#xE9;cepteurs occup&#xE9;s &#xE0; la population active (efficacit&#xE9; intrins&#xE8;que, e) et inactif (&#x3B5; (i)) des &#xC9;tats et des param&#xE8;tres analogues pour les fractions de la population de r&#xE9;cepteurs libres dans la population active (&#x3B5; (syst&#xE8;me)) et inactifs (&#x3B5; (i-sys)) stipule. Le stimulus total repr&#xE9;sente la somme des &#xE9;tats actifs des populations de r&#xE9;cepteurs libres et occup&#xE9;s. Un mod&#xE8;le modifi&#xE9; op&#xE9;rationnelle est d&#xE9;velopp&#xE9;e qui exprime la r&#xE9;ponse en fonction logistique de l&#x26;#39;impulsion totale. Cette fonction comprend les param&#xE8;tres normalis&#xE9;s relatifs &#xE0; affinit&#xE9; et l&#x26;#39;efficacit&#xE9; (K (obs) et &#x3C4;) ainsi que d&#x26;#39;un param&#xE8;tre proportionnel &#xE0; l&#x26;#39;activit&#xE9; du complexe r&#xE9;cepteur libre, &#x3C4; (syst&#xE8;me). Deux param&#xE8;tres sont li&#xE9;s proportionnelle &#xE0; la fraction de la libert&#xE9; (&#x3C4; (i-sys)) et occup&#xE9; (&#x3C4; (i)) populations de r&#xE9;cepteurs &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tat inactif. Nous montrons que les estimations des constantes d&#x26;#39;affinit&#xE9; de ligands pour les actifs orthost&#xE9;riques (K (b)) et inactifs (K (a)) des &#xE9;tats de le r&#xE9;cepteur sont &#xE9;quivalents &#xE0; &#x3C4;K (obs) / &#x3C4; (sys) et &#x3C4; (i) K (obs) / &#x3C4; (i-sys), respectivement. Nous v&#xE9;rifions notre m&#xE9;thode avec les techniques de simulation par ordinateur et de l&#x26;#39;appliquer &#xE0; l&#x26;#39;analyse de M (2) et M (3) les r&#xE9;cepteurs muscariniques. Notre m&#xE9;thode est applicable dans l&#x26;#39;analyse des biais ligand dans les programmes de d&#xE9;couverte de m&#xE9;dicaments.

Analyse des agonisme et agonisme inverse dans les essais fonctionnels avec une activit&#xE9; constitutive: Estimation des constantes orthost&#xE9;riques ligand d&#x26;#39;affinit&#xE9; pour les &#xC9;tats r&#xE9;cepteur actif et inactif

Se describe una modificaci&#xF3;n de la teor&#xED;a del receptor para la estimaci&#xF3;n de las afinidades observadas (K (OBS)) y la eficacia relativa de los ligandos orthosteric en ensayos funcionales que muestran actividad constitutiva. Nuestra teor&#xED;a incluye par&#xE1;metros para las fracciones de la poblaci&#xF3;n ocupada en el receptor de la sustancia activa (eficacia intr&#xED;nseca, &#x3B5;) e inactiva (Estados &#x3B5; (i)) y par&#xE1;metros an&#xE1;logos para las fracciones de la poblaci&#xF3;n receptora libre en el activo (&#x3B5; (sistema)) y los inactivos (&#x3B5; (i-sis)) estados. El est&#xED;mulo total representa la suma de los estados activos de las poblaciones de receptores libres y ocupadas. Un modelo modificado operativo se desarrolla, que expresa la respuesta como una funci&#xF3;n log&#xED;stica del est&#xED;mulo total. Esta funci&#xF3;n incluye los par&#xE1;metros est&#xE1;ndar relacionados con la afinidad y la eficacia (K (obs) y &#x3C4;), as&#xED; como un par&#xE1;metro proporcional a la actividad del complejo receptor libre, &#x3C4; (sistema). Dos par&#xE1;metros relacionados son proporcionales a la fracci&#xF3;n de los libres (&#x3C4; (i-sis)) y ocupados (&#x3C4; (i)) poblaciones de receptores en el estado inactivo. Se demuestra que las estimaciones de las constantes de afinidad de los ligandos para los orthosteric activos (K (b)) e inactivos (K (a)) estados de los receptores son equivalentes a &#x3C4;K (OBS) / &#x3C4; (sistema) y &#x3C4; (i) K (OBS) / &#x3C4; (i-sis), respectivamente. Comprobamos nuestro m&#xE9;todo con las t&#xE9;cnicas de simulaci&#xF3;n por ordenador y aplicarlo al an&#xE1;lisis de M (2) y M (3) los receptores muscar&#xED;nicos. Nuestro m&#xE9;todo es aplicable en el an&#xE1;lisis de sesgo ligando en los programas de descubrimiento de f&#xE1;rmacos.

An&#xE1;lisis de los ag&#xF3;nicos y agonismo inverso en ensayos funcionales con actividad constitutiva: Estimaci&#xF3;n de Orthosteric constantes de afinidad de ligando para los Estados receptores activos e inactivos

&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x7406;&#x8BBA;&#x4F30;&#x7B97;&#x89C2;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x4EB2;&#x7F18;&#x5173;&#x7CFB; &#xFF08;K(obs)) &#x548C; orthosteric &#x4E2D;&#x914D;&#x4F53;&#x5C55;&#x793A;&#x672C;&#x6784;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7406;&#x8BBA;&#x5728;&#x4E3B;&#x52A8; &epsilon; &#x5185;&#x5728;&#x529F;&#x6548;&#xFF09; &#x5305;&#x62EC;&#x88AB;&#x5360;&#x9886;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5206;&#x6570;&#x7684;&#x53C2;&#x6570;&#x548C;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8; &#xFF08;&epsilon;(i)) &#x56FD;&#x5BB6;&#x548C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x81EA;&#x7531;&#x53D7;&#x4F53;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x5206;&#x6570; &#xFF08;&epsilon;(sys)) &#x548C;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8; &#xFF08;&epsilon;(i-sys)) &#x56FD;&#x5BB6;&#x3002;&#x603B;&#x7684;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x523A;&#x6FC0;&#x65B9;&#x6848;&#x8868;&#x793A;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x548C;&#x88AB;&#x5360;&#x9886;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x603B;&#x548C;&#x3002;&#x4FEE;&#x6539;&#x540E;&#x7684;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x6A21;&#x5F0F;&#x88AB;&#x5F00;&#x53D1;&#x8868;&#x793A;&#x54CD;&#x5E94;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x603B;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x7269;&#x6D41;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6B64;&#x51FD;&#x6570;&#x5305;&#x542B;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x548C;&#x6548;&#x679C; &#xFF08;K(obs) &#x548C; &tau;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x81EA;&#x7531;&#x53D7;&#x4F53;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&tau;(sys) &#x6210;&#x6B63;&#x6BD4;&#x7684;&#x6807;&#x51C6;&#x53C2;&#x6570;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x53C2;&#x6570;&#x662F;&#x6210;&#x6B63;&#x6BD4;&#x7684;&#x514D;&#x8D39;&#x5206;&#x6570; &#xFF08;&tau;(i-sys)) &#x548C;&#x5360;&#x9886; (&tau;(i)) &#x53D7;&#x4F53;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x6D3B;&#x52A8; orthosteric &#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x4F30;&#x8BA1;&#x6570; &#xFF08;K(b)) &#x548C;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8; &#xFF08;&#x53D7;&#x4F53; K(a)) &#x56FD;&#x5BB6;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E; &tau;K(obs)/&tau;(sys) &#x548C; &tau;(i)K(obs)/&tau;(i-sys)&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x662F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x673A;&#x4EFF;&#x771F;&#x6280;&#x672F;&#x4E0E;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06;&#x5B83;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E; M(2) &#x548C; M(3) &#x7684;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x504F;&#x89C1;&#x7684;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x5728;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x3002;

Agonism &#x4E0E;&#x9006; agonism &#x5728;&#x540C;&#x6784;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x5206;&#x6790;&#xFF1A; &#x4F30;&#x8BA1;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53D7;&#x4F53;&#x56FD;&#x5BB6; orthosteric &#x914D;&#x4F53;&#x4EB2;&#x548C;&#x5E38;&#x6570;&#x3002;

We describe a modification of receptor theory for the estimation of observed affinities (K(obs)) and relative efficacies of orthosteric ligands in functional assays that exhibit constitutive activity. Our theory includes parameters for the fractions of the occupied receptor population in the active (intrinsic efficacy, Îµ) and inactive (Îµ(i)) states and analogous parameters for the fractions of the free receptor population in the active (Îµ(sys)) and inactive (Îµ(i-sys)) states. The total stimulus represents the summation of the active states of the free and occupied receptor populations. A modified operational model is developed that expresses the response as a logistic function of the total stimulus. This function includes the standard parameters related to affinity and efficacy (K(obs) and Ï„) as well as a parameter proportional to the activity of the free receptor complex, Ï„(sys). Two related parameters are proportional to the fraction of the free (Ï„(i-sys)) and occupied (Ï„(i)) receptor populations in the inactive state. We show that the estimates of the affinity constants of orthosteric ligands for the active (K(b)) and inactive (K(a)) states of the receptor are equivalent to Ï„K(obs)/Ï„(sys) and Ï„(i)K(obs)/Ï„(i-sys), respectively. We verify our method with computer simulation techniques and apply it to the analysis of M(2) and M(3) muscarinic receptors. Our method is applicable in the analysis of ligand bias in drug discovery programs.

Analysis of agonism and inverse agonism in functional assays with constitutive activity: estimation of orthosteric ligand affinity constants for active and inactive receptor states.

Wir beschreiben eine Modifikation der Rezeptor-Theorie f&uuml;r die Sch&auml;tzung der beobachteten Affinit&auml;ten (K(obs)) und relative Leistungsnachteile Orthosteric Liganden bei funktionelle Assays, die konstitutive Aktivit&auml;t aufweisen. Unsere Theorie enth&auml;lt Parameter f&uuml;r die Teile der Bev&ouml;lkerung besetzten Rezeptor in den aktiven (intrinsische Wirksamkeit, &epsilon;) und inaktive (&epsilon;(i)) Staaten und Analog Parameter f&uuml;r die Br&uuml;che der freien Rezeptor-Bev&ouml;lkerung in den aktiven (&epsilon;(sys)) und inaktiv (&epsilon;(i-sys)) Staaten. Der gesamte Reiz stellt die Summe der aktiven Status der freien und besetzten Rezeptor Bev&ouml;lkerungen. Ein ver&auml;nderter funktionsf&auml;higes Modell entwickelt, das die Antwort als logistische Funktion des gesamten Stimulus ausdr&uuml;ckt. Diese Funktion umfasst die standard-Parameter mit Bezug zu Affinit&auml;t und Wirksamkeit (K(obs) und &tau;) sowie einen Parameter proportional auf die T&auml;tigkeit der freien Rezeptor-Komplex, &tau;(sys). Zwei verwandte Parameter sind proportional zu den Bruch der freien (&tau;(i-sys)) und besetzte (&tau;(i))-Rezeptor-Populationen in den inaktiven Zustand. Wir zeigen, dass die Sch&auml;tzungen der Affinit&auml;t Konstanten der Orthosteric Liganden f&uuml;r das aktive (K(b)) und inaktiv (K(a)) Staaten des Rezeptors entsprechen dem &tau;K(obs)/&tau;(sys) und &tau;(i)K(obs)/&tau;(i-sys), beziehungsweise. Wir &uuml;berpr&uuml;fen unsere Methode mit Computer-Simulation-Techniken und wenden sie die Analyse von m und M(3) muskarinische Rezeptoren. Unsere Methode ist anwendbar bei der Analyse der Ligand Bias in der Droge-Entdeckung-Programme.

Analyse der Agonismus und inverse Agonismus bei funktionelle Assays mit konstitutiven Aktivit&auml;t: Absch&auml;tzung der Orthosteric Ligand Affinit&auml;t Konstanten f&uuml;r aktive und inaktive Rezeptor Staaten.

Descriviamo una modificazione della teoria del recettore per la stima delle affinit&agrave; osservati (K(obs)) e relativa efficacia di ligandi orthosteric in analisi funzionale che presentano attivit&agrave; costitutiva. Nostra teoria include i parametri per le frazioni della popolazione occupata del recettore (efficacia intrinseca, &epsilon;): attivo e inattivo (analoghi parametri per le frazioni della popolazione libera recettore attivo e &epsilon;(i)) Stati (&epsilon;(sys)) e inattivo (Stati &epsilon;(i-sys)). Lo stimolo totale rappresenta la sommatoria degli stati attivi delle popolazioni dei recettori liberi e occupati. Viene sviluppato un modello operativo modificato che esprime la risposta come una funzione logistica dello stimolo totale. Questa funzione include i parametri standard correlati per affinit&agrave; ed efficacia (K(obs) e &tau;) cos&igrave; come un parametro proporzionale all&#39;attivit&agrave; del recettore libero complesso, &tau;(sys). Due relativi parametri sono proporzionali alla frazione dei liberi (&tau;(i-sys)) e occupato (popolazioni delle &tau;(i)) del recettore nello stato inattivo. Mostriamo che le stime delle costanti di affinit&agrave; di ligandi orthosteric per attivo (K(b)) e inattivo (Stati K(a)) del recettore sono equivalenti a &tau;K(obs)/&tau;(sys) e &tau;(i)K(obs)/&tau;(i-sys), rispettivamente. Verifichiamo il nostro metodo con tecniche di simulazione al computer e si applicano per l&#39;analisi dei recettori muscarinici M(2) e M(3). Il nostro metodo &egrave; applicabile nell&#39;analisi di bias ligando nei programmi di drug discovery.

Analisi di agonismo e agonismo inverso in analisi funzionale con attivit&agrave; costitutiva: stima delle costanti di affinit&agrave; ligando orthosteric per gli Stati del recettore attivi e inattivi.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#xFF08;K&#xFF08;OBS&#xFF09;&#xFF09;&#x3068;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;orthosteric&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7406;&#x8AD6;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#xFF08;&#x3B5;&#xFF08;SYS&#xFF09;&#xFF09;&#x3067;&#x7121;&#x6599;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x5206;&#x753B;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5360;&#x6709;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x753B;&#x5206;&#xFF08;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3001;&#x3B5;&#xFF09;&#x3068;&#x975E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#xFF08;&#x3B5;&#xFF08;i&#xFF09;&#xFF09;&#x3092;&#x72B6;&#x614B;&#x3068;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#xFF08;&#x3B5;&#xFF08;I-SYS&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3002;&#x5408;&#x8A08;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;&#x7121;&#x6599;&#x3067;&#x3001;&#x5360;&#x6709;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x7DCF;&#x548C;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x904B;&#x7528;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x30ED;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#xFF08;K&#xFF08;OBS&#xFF09;&#x3001;&#x3C4;&#xFF09;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x81EA;&#x7531;&#x306A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3057;&#x305F;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x3001;&#x3C4;&#xFF08;SYS&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3064;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#xFF08;&#x3C4;&#xFF08;I-SYS&#xFF09;&#xFF09;&#x3068;&#x5360;&#x6709;&#xFF08;&#x3C4;&#xFF08;i&#xFF09;&#xFF09;&#x306F;&#x975E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x500B;&#x4F53;&#x6570;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;i&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF08;K&#xFF08;b&#xFF09;&#xFF09;&#x3068;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF08;K&#xFF08;a&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;orthosteric&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x5024;&#x306F;&#x3C4;K&#x306B;&#x76F8;&#x5F53;&#x3059;&#x308B;&#xFF08;OBS&#xFF09;/&#x3C4;&#xFF08;sys&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x3C4;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;K&#xFF08;OBS&#xFF09;/&#x3C4;&#xFF08;I-sys&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x63D0;&#x6848;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x3068;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x63D0;&#x6848;&#x624B;&#x6CD5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5275;&#x85AC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9006;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#xFF1A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;Orthosteric&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC131; (K(obs)) &#xBC0F; orthosteric ligands &#xC81C;&#xC815; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; &#xC804;&#xAC1C;&#xAC00; &#xCD94;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC774;&#xB860; &#xC218;&#xC815; &#xC124;&#xBA85;. (&#xB0B4;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xB2A5;, &epsilon;) &#xD65C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC810;&#xB839;&#xB41C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xBD84;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xB860; &#xBC0F; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; (&epsilon;(i)) &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB34;&#xB8CC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xBD84;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; (&epsilon;(sys)) &#xBC0F; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; (&epsilon;(i-sys)) &#xC0C1;&#xD0DC;. &#xCD1D; &#xC790;&#xADF9; &#xC790;&#xC720;&#xB86D;&#xACE0; &#xC810;&#xB839; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xD569;&#xACC4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xB41C; &#xC6B4;&#xC601; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xCD1D; &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xB85C;&#xC9C0;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC774; &#xD568;&#xC218; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xBB34;&#xB8CC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0;, &tau;(sys)&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840;&#xD558;&#xC5EC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xB2A5; (k(obs)&#xC640; &tau;)&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD45C;&#xC900; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB294; &#xC790;&#xC720;&#xC758; &#xBD84; &#xC728;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840; &#xAD00;&#xB828; (&tau;(i-sys)) &#xC810;&#xB839; (&tau;(i)) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAD6C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD65C;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; orthosteric ligands&#xC758; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218; &#xCD94;&#xC815; &#xD45C;&#xC2DC; (K(b)) &#xBC0F; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; (&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; K(a)) &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; &Tau;k(obs)/&tau;(sys)&#xC640; &tau;(i)K(obs)/&tau;(i-sys), &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCEF4;&#xD4E8;&#xD130; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; M(2) &#xBC0F; M(3) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Agonism &#xBC0F; &#xC81C;&#xC815; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC5ED; agonism&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;: orthosteric ligand &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218; &#xD65C;&#xC131; &#xBC0F; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD94;&#xC815;.

&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x7406;&#x8BBA;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4EB2;&#x548C;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x4F30;&#x8BA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5305;&#x62EC;&#x4F20;&#x7EDF;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4EB2;&#x548C;&#x53C2;&#x6570; &#xFF08;K(obs)) &#x548C;&#x6548;&#x679C; &#xFF08;&#x5728;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&epsilon; &#x914D;&#x4F53;-&#x53D7;&#x4F53;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x5206;&#x6570;) &#x548C;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x914D;&#x4F53;-&#x53D7;&#x4F53;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001; &#xFF08;&#x5185;&#x90E8;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&epsilon;(i)) &#x5206;&#x6570;&#x7684;&#x6982;&#x5FF5;.&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x914D;&#x4F53;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x79F0;&#x4E3A;&#x523A;&#x6FC0;&#x548C;&#x4E1A;&#x52A1;&#x6A21;&#x578B;&#x8868;&#x793A;&#x54CD;&#x5E94;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x7269;&#x6D41;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x540E;&#x8005;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5305;&#x62EC; K(obs) &#x548C;&#x53C2;&#x6570; &tau;&#xFF0C;&#x540E;&#x8005;&#x662F; &epsilon; &#x6210;&#x6B63;&#x6BD4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F15;&#x5165;&#x53C2;&#x6570; &tau;(i)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F; &epsilon;(i) &#x6210;&#x6B63;&#x6BD4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x4EA7;&#x54C1;&#xFF0C;K (obs) &tau;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6FC0;&#x52A8;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7684; &#xFF08;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;RA(i))&#xFF0C;&#x662F;&#x4E3A;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x7684;&#x4EA7;&#x54C1;&#xFF0C;K(obs)&tau;(i)&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x53E6;&#x4E00; &#xFF08;&#x5185;&#x5728;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;RI(i))&#xFF0C;&#x662F;&#x4E3A;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x8BA1;&#x7B97;&#x673A;&#x6A21;&#x62DF;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x5BF9;&#x5728; M(3) &#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x5DF2;&#x53D1;&#x5E03;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5E94;&#x8BE5;&#x6709;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x5728;&#x5206;&#x6790;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x504F;&#x89C1;&#x5728;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x548C;&#x4F30;&#x8BA1;&#x7684;&#x66F4;&#x57FA;&#x672C;&#x91CF;&#x7684;&#x6548;&#x679C; &#xFF08;RA(i)/RI(i))&#x3002;

&#x5728; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF1A; &#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53D7;&#x4F53;&#x72B6;&#x6001;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4EB2;&#x548C;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x4F30;&#x8BA1;&#x3002;

We describe a modification of receptor theory that enables the estimation of relative affinity constants for the inactive state of a G protein-coupled receptor. Our approach includes the traditional parameters of observed affinity (K(obs)) and efficacy (fraction of ligand-receptor complex in the active state, Îµ) and introduces the concept of the fraction of the ligand-receptor complex in the inactive state (intrinsic inactivity, Îµ(i)). The relationship between receptor activation and the ligand concentration is known as the stimulus, and the operational model expresses the response as a logistic function of the stimulus. The latter function includes K(obs) and the parameter Ï„, which is proportional to Îµ. We introduce the parameter Ï„(i), which is proportional to Îµ(i). We have previously shown that the product, K(obs)Ï„, of one agonist, expressed relative to that of another (intrinsic relative activity, RA(i)), is a relative measure of the affinity constant for the active state of the receptor. In this report, we show that the product, K(obs)Ï„(i), of one agonist, expressed relative to that of another (intrinsic relative inactivity, RI(i)), is a relative measure of the affinity constant for the inactive state of the receptor. We use computer simulation techniques to verify our analysis and apply our method to the analysis of published data on agonist activity at the M(3) muscarinic receptor. Our method should have widespread application in the analysis of agonist bias in drug discovery programs and in the estimation of a more fundamental relative measure of efficacy (RA(i)/RI(i)).

Analysis of functional responses at G protein-coupled receptors: estimation of relative affinity constants for the inactive receptor state.

On d&#xE9;crit une modification de la th&#xE9;orie de r&#xE9;cepteur qui permet &#xE0; l&#x26;#39;estimation de constantes d&#x26;#39;affinit&#xE9; relative pour l&#x26;#39;&#xE9;tat inactif d&#x26;#39;un U r&#xE9;cepteur coupl&#xE9; aux prot&#xE9;ines. Notre approche comprend les param&#xE8;tres traditionnels de l&#x26;#39;affinit&#xE9; observ&#xE9;e (K (obs)) et l&#x26;#39;efficacit&#xE9; (fraction de complexe ligand-r&#xE9;cepteur &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tat actif, &#x3B5;) et introduit le concept de la fraction du complexe ligand-r&#xE9;cepteur &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tat inactif (intrins&#xE8;que l&#x26;#39;inactivit&#xE9;, &#x3B5; (i)). La relation entre l&#x26;#39;activation du r&#xE9;cepteur et de la concentration en ligand est connu sous le nom de relance, et le mod&#xE8;le op&#xE9;rationnel exprime la r&#xE9;ponse comme une fonction logistique du stimulus. La fonction ci comprend K (obs) et l&#x26;#39;&#x3C4; param&#xE8;tre, qui est proportionnelle &#xE0; &#x3B5;. On introduit le param&#xE8;tre &#x3C4; (i), qui est proportionnelle &#xE0; &#x3B5; (i). Nous avons pr&#xE9;c&#xE9;demment montr&#xE9; que le produit, K (obs) &#x3C4;, d&#x26;#39;un agoniste, exprim&#xE9;e par rapport &#xE0; celle d&#x26;#39;un autre (activit&#xE9; relative intrins&#xE8;que, RA (i)), est une mesure relative de la constante d&#x26;#39;affinit&#xE9; pour l&#x26;#39;&#xE9;tat actif du r&#xE9;cepteur . Dans ce rapport, nous montrons que le produit, K (obs) &#x3C4; (i), d&#x26;#39;un agoniste, exprim&#xE9;e par rapport &#xE0; celle d&#x26;#39;un autre (l&#x26;#39;inactivit&#xE9; par rapport intrins&#xE8;que, RI (i)), est une mesure relative de la constante d&#x26;#39;affinit&#xE9; pour la &#xE9;tat inactif du r&#xE9;cepteur. Nous utilisons des techniques de simulation par ordinateur afin de v&#xE9;rifier notre analyse et d&#x26;#39;appliquer notre m&#xE9;thode &#xE0; l&#x26;#39;analyse des donn&#xE9;es publi&#xE9;es sur l&#x26;#39;activit&#xE9; agoniste &#xE0; la M (3) des r&#xE9;cepteurs muscariniques. Notre m&#xE9;thode doit avoir une large application dans l&#x26;#39;analyse des biais agoniste dans les programmes de d&#xE9;couverte de m&#xE9;dicaments et dans l&#x26;#39;estimation d&#x26;#39;une mesure plus fondamentale relative de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; (RA (i) / RI (i)).

Analyse des r&#xE9;ponses fonctionnelles &#xE0; G r&#xE9;cepteurs coupl&#xE9;s aux prot&#xE9;ines: Estimation des constantes d&#x26;#39;affinit&#xE9; relative pour l&#x26;#39;Etat r&#xE9;cepteur inactif

Wir beschreiben eine Modifikation der Rezeptor-Theorie, die Absch&auml;tzung der relativen Affinit&auml;t-Konstanten f&uuml;r den inaktiven Zustand von ein G-Protein-gekoppelter Rezeptor erm&ouml;glicht. Unser Ansatz umfasst die traditionelle Parameter der beobachteten Affinit&auml;t (K(obs)) und Wirksamkeit (Bruchteil der Ligand-Rezeptor-Komplex im aktiven Zustand, &epsilon;) und f&uuml;hrt das Konzept der Bruchteil der Ligand-Rezeptor-Komplex in den inaktiven Zustand (intrinsische Inaktivit&auml;t, &epsilon;(i)). Die Beziehung zwischen Rezeptor-Aktivierung und die Liganden-Konzentration ist bekannt als der Reiz und das operative Modell dr&uuml;ckt die Antwort als eine logistische Funktion des Konjunkturpakets. Die letztere Funktion enth&auml;lt K(obs) und die Parameter &tau;, die proportional zur &epsilon;. Wir f&uuml;hren die Parameter &tau;(i), die ist proportional zur &epsilon;(i). Wir haben bereits gezeigt, dass das Produkt, K (Obs) &tau;, der ein Agonist, ausgedr&uuml;ckt im Verh&auml;ltnis zu dem eines anderen (intrinsische relative Aktivit&auml;t, RA(i)), ist ein relatives Ma&szlig; f&uuml;r die Affinit&auml;t Konstante f&uuml;r den aktiven Zustand des Rezeptors. In diesem Bericht zeigen wir, dass das Produkt, K(obs)&tau;(i), der ein Agonist, ausgedr&uuml;ckt im Verh&auml;ltnis zu dem eines anderen (intrinsische relative Inaktivit&auml;t, RI(i)), ist ein relatives Ma&szlig; f&uuml;r die Affinit&auml;t Konstante f&uuml;r den inaktiven Zustand des Rezeptors. Wir verwenden Computer Simulationstechniken &uuml;berpr&uuml;fen unsere Analyse und unsere Methode zur Analyse der ver&ouml;ffentlichten Daten Agonist Aktivit&auml;ten am M(3) Muskarinischer Rezeptor anwenden. Unsere Methode h&auml;tte weit verbreitete Anwendung bei der Analyse der Agonist Voreingenommenheit in Droge-Entdeckung-Programmen und bei der Sch&auml;tzung eine grundlegendere relatives Ma&szlig; der Wirksamkeit (RA(i)/RI(i)).

Analyse von funktionalen Antworten beim G-Protein-gekoppelte Rezeptoren: Absch&auml;tzung der relativen Affinit&auml;t Konstanten f&uuml;r den inaktiven Rezeptor-Status.

Descriviamo una modificazione della teoria del ricevitore che consente la stima delle costanti relativa affinit&agrave; per lo stato inattivo di un recettori accoppiati a proteine G. Il nostro approccio include i tradizionali parametri di affinit&agrave; osservati (K(obs)) e l&#39;efficacia (frazione del complesso ligando-recettore nello stato attivo, &epsilon;) e introduce il concetto di frazione del complesso ligando-recettore nello stato inattivo (inattivit&agrave; intrinseca, &epsilon;(i)). Il rapporto tra l&#39;attivazione del recettore e la concentrazione del ligando &egrave; conosciuto come lo stimolo, e il modello operativo esprime la risposta come una funzione logistica dello stimolo. La funzione di quest&#39;ultima include K(obs) e il parametro &tau;, che &egrave; proporzionale a &epsilon;. Vi presentiamo il parametro &tau;(i), che &egrave; proporzionale alla &epsilon;(i). In precedenza abbiamo dimostrato che il prodotto, &tau; K (obs), di un agonista, espresso rispetto a quello di un altro (attivit&agrave; intrinseca relativa, RA(i)), &egrave; una misura relativa della costante di affinit&agrave; per lo stato attivo del recettore. In questa relazione, ci mostrano che il prodotto, K(obs)&tau;(i), di un agonista, espresso rispetto a quello di un altro (intrinseca relativa inattivit&agrave;, RI(i)), &egrave; una misura relativa della costante di affinit&agrave; per lo stato inattivo del recettore. Utilizziamo tecniche di simulazione al computer per verificare la nostra analisi e applicare il nostro metodo per l&#39;analisi dei dati pubblicati su attivit&agrave; agonista per il recettore muscarinico M(3). Il nostro metodo dovrebbe avere applicazione diffusa nell&#39;analisi di bias agonista in programmi di drug discovery e la stima di una misura relativa pi&ugrave; fondamentale di efficacia (RA(i)/RI(i)).

Analisi delle risposte funzionali a recettori accoppiati a proteine G: stima delle costanti relativa affinit&agrave; per lo stato del recettore inattivo.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7406;&#x8AD6;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#xFF08;K&#xFF08;OBS&#xFF09;&#xFF09;&#x3068;&#x52B9;&#x679C;&#xFF08;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; - &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x3001;&#x3B5;&#xFF09;&#x306E;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3001;&#x975E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; - &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x753B;&#x306E;&#x6982;&#x5FF5;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3001;&#x3B5;&#xFF08;i&#xFF09;&#xFF09;&#x3092;&#x3002;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x904B;&#x7528;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x30ED;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x3B5;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3057;&#x3066;K&#xFF08;OBS&#xFF09;&#x3068;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3C4;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3B5;&#xFF08;i&#xFF09;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3059;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3C4;&#xFF08;i&#xFF09;&#x3092;&#x3001;&#x3054;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#xFF08;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;RA&#xFF08;I&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x5024;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x3055;1&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;K&#xFF08;OBS&#xFF09;&#x3C4;&#x306F;&#x3001;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;1&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x3001;K&#xFF08;OBS&#xFF09;&#x306F;&#x3C4;&#xFF08;i&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x3001;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#xFF08;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3001;RI&#xFF08;I&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x5024;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x3055;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x516C;&#x958B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x672C;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x63D0;&#x6848;&#x624B;&#x6CD5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5275;&#x85AC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3068;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x6839;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x5C3A;&#x5EA6;&#xFF08;RA&#xFF08;I&#xFF09;/ RI&#xFF08;I&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#xFF1A;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x89AA;&#x548C;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xAE30;&#xC220; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC774;&#xB860; G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218; &#xCD94;&#xC815; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC218;&#xC815;. &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC758; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xBC95; (K(obs)) &#xBC0F; &#xD6A8;&#xB2A5; (&#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC778; &epsilon; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;-&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBCF5;&#xD569;&#xCCB4;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;)&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC; (&#xB0B4;&#xC7A5; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;, &epsilon;(i)) &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;-&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBD84;&#xC218;&#xC758; &#xAC1C;&#xB150;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD558; &#xACE0;. &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAD00;&#xACC4;&#xB294; &#xC790;&#xADF9; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B4;&#xC601; &#xBAA8;&#xB378; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xB85C;&#xC9C0;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C;. &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD3EC;&#xD568; K(obs) &#xBC0F; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &tau; &epsilon;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &epsilon;(i)&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &tau;(i)&#xB97C; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD488;, &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD55C; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC911; K (obs) &tau; &#xD45C;&#xC2DC; (&#xB0B4;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xB300; &#xD65C;&#xB3D9;, RA(i)), &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xCE21;&#xC815;&#xAC12;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xD55C; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, K(obs)&tau;(i) &#xBCF4;&#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; (&#xB0B4;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xB300; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;, RI(i)), &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xCE21;&#xC815;&#xAC12;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; M(3) muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xAC8C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558; &#xCEF4;&#xD4E8;&#xD130; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xB2A5; (ra(i)/ri(i))&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xB300; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD574;&#xC57C;.

G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;: &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218; &#xCD94;&#xC815;.

Se describe una modificaci&#xF3;n de la teor&#xED;a del receptor que permite la estimaci&#xF3;n de las constantes de afinidad relativa por el estado inactivo de una prote&#xED;na G-receptor acoplado. Nuestro m&#xE9;todo incluye los par&#xE1;metros tradicionales de afinidad observado (K (obs)) y eficacia (fracci&#xF3;n de complejo ligando-receptor en el estado activo, &#x3B5;) e introduce el concepto de la fracci&#xF3;n del complejo ligando-receptor en el estado inactivo (intr&#xED;nseca inactividad, &#x3B5; (i)). La relaci&#xF3;n entre la activaci&#xF3;n del receptor y la concentraci&#xF3;n de ligando que se conoce como el est&#xED;mulo, y el modelo operacional expresa la respuesta como una funci&#xF3;n log&#xED;stica del est&#xED;mulo. La funci&#xF3;n de este &#xFA;ltimo incluye K (obs) y el par&#xE1;metro &#x3C4;, que es proporcional a &#x3B5;. Se introduce el par&#xE1;metro &#x3C4; (i), que es proporcional a &#x3B5; (i). Anteriormente hemos demostrado que el producto, K (obs) &#x3C4;, de un agonista, expresada en relaci&#xF3;n con la de otro (actividad relativa intr&#xED;nseca, RA (i)), es una medida relativa de la constante de afinidad para el estado activo del receptor . En este informe, se muestra que el producto, K (obs) &#x3C4; (i), de un agonista, expresada en relaci&#xF3;n con la de otro (relativa inactividad intr&#xED;nseca, RI (i)), es una medida relativa de la constante de afinidad para el estado inactivo del receptor. Utilizamos t&#xE9;cnicas de simulaci&#xF3;n por ordenador para comprobar el an&#xE1;lisis y aplicar nuestro m&#xE9;todo para el an&#xE1;lisis de los datos publicados sobre la actividad agonista de la M (3) de los receptores muscar&#xED;nicos. Nuestro m&#xE9;todo debe tener una amplia aplicaci&#xF3;n en el an&#xE1;lisis del sesgo de agonista en los programas de descubrimiento de f&#xE1;rmacos y en la estimaci&#xF3;n de una medida relativa m&#xE1;s fundamental de la eficacia (AR (i) / RI (i)).

An&#xE1;lisis de las respuestas funcionales en el G receptores acoplados a prote&#xED;nas: Estimaci&#xF3;n de las constantes de afinidad relativa por el Estado receptor inactivo

&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x548C;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x7528;&#x4E8E;&#x6CBB;&#x7597;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053; (GI) &#x5C11;&#x6570;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x6761;&#x4EF6;&#x53D7;&#x635F;&#x553E;&#x6DB2;&#x5206;&#x6CCC;&#x6216;&#x6539;&#x53D8; GI &#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x5173;&#x4E8E;&#x5916;&#x5206;&#x6CCC;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x553E;&#x6DB2;&#x817A;&#x3001; &#x80F0;&#x817A;&#x548C;&#x80C3;&#xFF0C;&#x817A;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x662F; M(3) &#x4E0E; M(1) &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x5C0F;&#x5C0F;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;GI &#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#xFF0C;&#x5728; M(2) &#x548C; M(3) &#x4E0E; M(2) &#x7531;&#x81F3;&#x5C11;&#x56DB;&#x6BD4;&#x4E00;&#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x591A;&#x4E8E; M(3) &#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x901A;&#x5E38;&#x7B26;&#x5408; M(3) &#x53D7;&#x4F53;&#x673A;&#x5236;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x4E3B;&#x8981;&#x5B58;&#x5728; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x6536;&#x7F29;&#x548C;&#x5916;&#x5206;&#x6CCC;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x90FD;&#x7B26;&#x5408;&#x6761;&#x4EF6; M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4E5F;&#x5C31;&#x662F;&#x8BF4;&#xFF0C;M(2) &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x4F5C;&#x7528;&#x53D6;&#x51B3;&#xFF0C;M(3) &#x8FD9;&#x6837;&#x7684; M(3) &#x53D7;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x6D88;&#x9664;&#x4E86; M(2) &#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x4E2D;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6240;&#x8C13;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x9009;&#x62E9;&#x6027; M(3) &#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x53EF;&#x80FD;&#x6B20;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730; nonmuscarinic &#x53D7;&#x4F53;&#x76EE;&#x6807;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x70C8;&#x6027;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x548C;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#xFF1A; &#x5BF9;&#x80C3;&#x80A0;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Muscarinic agonists and antagonists are used to treat a handful of gastrointestinal (GI) conditions associated with impaired salivary secretion or altered motility of GI smooth muscle. With regard to exocrine secretion, the major muscarinic receptor expressed in salivary, gastric, and pancreatic glands is the M(3) with a small contribution of the M(1) receptor. In GI smooth muscle, the major muscarinic receptors expressed are the M(2) and M(3) with the M(2) outnumbering the M(3) by a ratio of at least four to one. The antagonism of both smooth muscle contraction and exocrine secretion is usually consistent with an M(3) receptor mechanism despite the major presence of the M(2) receptor in smooth muscle. These results are consistent with the conditional role of the M(2) receptor in smooth muscle. That is, the contractile role of the M(2) receptor depends on that of the M(3) so that antagonism of the M(3) receptor eliminates the response of the M(2). The physiological roles of muscarinic receptors in the GI tract are consistent with their known signaling mechanisms. Some so-called tissue-selective M(3) antagonists may owe their selectivity to a highly potent interaction with a nonmuscarinic receptor target.

Muscarinic agonists and antagonists: effects on gastrointestinal function.

Agonistes et des antagonistes muscariniques sont utilis&#xE9;s pour traiter une poign&#xE9;e de gastro-intestinaux (GI) les conditions associ&#xE9;es &#xE0; une s&#xE9;cr&#xE9;tion salivaire avec facult&#xE9;s affaiblies ou alt&#xE9;ration de la motilit&#xE9; du muscle lisse gastro-intestinal. En ce qui concerne la s&#xE9;cr&#xE9;tion exocrine, le r&#xE9;cepteur muscarinique majeure exprim&#xE9;e en salivaire, de l&#x26;#39;estomac, du pancr&#xE9;as et les glandes est le M (3) avec une petite contribution de l&#x26;#39;M (1) r&#xE9;cepteur. Dans le muscle lisse gastro-intestinal, les r&#xE9;cepteurs muscariniques principaux sont exprim&#xE9;es M (2) et M (3) avec le M (2) plus nombreux que les M (3) par un rapport d&#x26;#39;au moins quatre &#xE0; un. L&#x26;#39;antagonisme des deux contraction des muscles lisses et la s&#xE9;cr&#xE9;tion exocrine est g&#xE9;n&#xE9;ralement compatible avec un m&#xE9;canisme de M r&#xE9;cepteurs (3), malgr&#xE9; la pr&#xE9;sence importante de la M (2) du r&#xE9;cepteur dans le muscle lisse. Ces r&#xE9;sultats sont coh&#xE9;rents avec le r&#xF4;le conditionnelle de la M (2) du r&#xE9;cepteur dans le muscle lisse. Qui est, le r&#xF4;le de contraction de l&#x26;#39;M (2) r&#xE9;cepteur d&#xE9;pend de celle des M (3) de sorte que l&#x26;#39;antagonisme de l&#x26;#39;M (3) r&#xE9;cepteur &#xE9;limine la r&#xE9;ponse de l&#x26;#39;M (2). Les r&#xF4;les physiologiques des r&#xE9;cepteurs muscariniques dans le tractus gastro-intestinal sont compatibles avec leurs m&#xE9;canismes de signalisation connues. Certains soi-disant tissus s&#xE9;lectifs M (3) antagonistes peuvent doivent leur s&#xE9;lectivit&#xE9; &#xE0; une interaction tr&#xE8;s puissant avec un r&#xE9;cepteur cible nonmuscarinic.

Agonistes muscariniques et antagonistes: effets sur la fonction gastro-intestinale

Muskarinische Agonisten und Antagonisten werden zur Behandlung von einer Handvoll gastrointestinale (GI) Bedingungen im Zusammenhang mit Speichelsekretion beeintr&auml;chtigt oder ver&auml;ndert die Motilit&auml;t des GI Glatter Muskelzellen. Im Hinblick auf die exokrine Sekretion ist der gro&szlig;e muskarinische Rezeptor, ausgedr&uuml;ckt in Speichel-, Magen- und Bauchspeicheldr&uuml;senkrebs Dr&uuml;sen M(3) mit einem kleinen Beitrag die Zusammenlegung-Rezeptor. GI glatte Muskulatur sind die gro&szlig;en muskarinische Rezeptoren ausgedr&uuml;ckt die m und M(3) mit der zahlenm&auml;&szlig;igen die M(3) einem Verh&auml;ltnis von mindestens vier zu eins m. Der Antagonismus der glatten Muskulatur Kontraktion und exokrine Sekretion entspricht in der Regel ein M(3)-Rezeptor-Mechanismus trotz der gro&szlig;en Pr&auml;senz des m-Rezeptors in glatten Muskelzellen. Diese Ergebnisse stehen im Einklang mit der bedingte Rolle des m-Rezeptors in glatten Muskelzellen. D. h. h&auml;ngt die kontraktilen Rolle des m-Rezeptors, die von den M(3) so dass Antagonismus des Rezeptors M(3) die Reaktion der m beseitigt. Die physiologische Rolle von muskarinische Rezeptoren im GI-Trakt stehen im Einklang mit ihren bekannten Signalisierungsmechanismen. Einige so genannte Geweben-selektiven M(3) Antagonisten k&ouml;nnen ein hochwirksames Interaktion mit einem Nonmuscarinic-Rezeptor-Ziel ihrer Selektivit&auml;t verdanken.

Muskarinische Agonisten und Antagonisten: Auswirkungen auf die Magen-Darm-Funktion.

Muscarinici agonisti e antagonisti sono usati per trattare una manciata di gastrointestinale (GI) condizioni associate a ridotta secrezione salivare o alterata motilit&agrave; della muscolatura liscia GI. Per quanto riguarda la secrezione esocrina, il recettore muscarinico principale espresso nelle ghiandole salivari, gastriche e pancreatiche &egrave; il M(3) con un piccolo contributo del recettore M(1). Nel muscolo liscio GI, i principali recettori muscarinici espressi sono il M(2) e M(3) con il M(2) numero che la M(3) di un rapporto di almeno quattro a uno. L&#39;antagonismo di contrazione del muscolo liscio e di secrezione esocrina &egrave; solitamente coerenza con un meccanismo recettore M(3) nonostante la presenza importante del recettore M(2) nel muscolo liscio. Questi risultati sono coerenti con il ruolo condizionale del recettore M(2) nel muscolo liscio. Cio&egrave;, il ruolo del recettore M(2) contrattile dipende che la M(3) modo che antagonismo del recettore M(3) elimina la risposta della M(2). Il ruolo fisiologico dei recettori muscarinici nel tratto GI &egrave; coerente con i noti meccanismi di segnalazione. Alcuni cosiddetti antagonisti M(3) tessuti-selettivi possono dovere loro selettivit&agrave; per un&#39;interazione molto potente con un bersaglio del recettore nonmuscarinic.

Muscarinici agonisti e antagonisti: effetti sulla funzione gastrointestinale.

&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x553E;&#x6DB2;&#x5206;&#x6CCC;&#x3084;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x904B;&#x52D5;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x6D88;&#x5316;&#x5668;&#xFF08;GI&#xFF09;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E00;&#x63E1;&#x308A;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81B5;&#x5916;&#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x553E;&#x6DB2;&#x817A;&#x80C3;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x817A;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;M&#xFF08;1&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5C11;&#x984D;&#x306E;&#x5BC4;&#x4ED8;&#x3068;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; GI&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;4&#x3064;&#x306E;&#x6BD4;&#x7387;&#x3067;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x3092;&#x4E0A;&#x56DE;&#x3063;M&#xFF08;2&#xFF09;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3068;&#x5916;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x6574;&#x5408;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3001;&#x6761;&#x4EF6;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; M&#xFF08;3&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x306A;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x306E;&#x3067;&#x3001;M&#xFF08;2&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x3044;&#x308F;&#x3086;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306A;M&#xFF08;3&#xFF09;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;nonmuscarinic&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3092;&#x8CA0;&#x3046;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#xFF1A;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;

Muscarinic agonists &#xBC0F; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC704;&#xC7A5; (GI)&#xC758; &#xC18C;&#xC218;&#xB97C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC870;&#xAC74;&#xACFC; &#xC5F0;&#xAD00; &#xCE68; &#xBD84; &#xBE44; &#xC7A5;&#xC560; &#xB610;&#xB294; GI &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Exocrine &#xBD84; &#xBE44; &#xAD00;&#xB828; &#xC8FC;&#xC694; muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xCE68;, &#xC704;, &#xBC0F; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; M(1) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xAE30;&#xC5EC;&#xC640; M(3)&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xC8FC;&#xC694; muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; M(2)&#xC640; M(3)&#xC5D0;&#xC11C; M(3)&#xAE4C;&#xC9C0; 4 &#xB300; 1&#xC758; &#xBE44;&#xC728;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; outnumbering M(2)&#xC640; &#xD568;&#xAED8;. &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95;&#xACFC; exocrine &#xBD84; &#xBE44;&#xC758; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC740; &#xB9E4;&#xB044;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; M(3) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xCE58; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0;&#xC11C; M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xC5ED;&#xD560;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC989;, M(2) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC218;&#xCD95; &#xC131; &#xC5ED;&#xD560; M(3) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC740; M(2)&#xC758; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB294; M(3)&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30; &#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294;. &#xC77C;&#xBD80; &#xC18C;&#xC704; &#xC870;&#xC9C1; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; M(3) antagonists nonmuscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xBE5A;&#xC744;.

Muscarinic agonists &#xBC0F; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;: &#xC704;&#xC7A5; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;.

Agonistas y antagonistas muscar&#xED;nicos se utilizan para el tratamiento de un pu&#xF1;ado de gastrointestinal (GI) las condiciones asociadas a deficiencia en la secreci&#xF3;n salival o alteraci&#xF3;n de la motilidad del m&#xFA;sculo liso gastrointestinal. En lo que respecta a la secreci&#xF3;n exocrina, el receptor muscar&#xED;nico importante expresado en la saliva g&#xE1;strica, y las gl&#xE1;ndulas del p&#xE1;ncreas es la M (3) con una peque&#xF1;a contribuci&#xF3;n de la M (1) del receptor. En el m&#xFA;sculo liso gastrointestinal, los receptores muscar&#xED;nicos principales expresadas son la M (2) y M (3) con la M (2) superando en n&#xFA;mero a la M (3) en una proporci&#xF3;n de al menos cuatro a uno. El antagonismo de la contracci&#xF3;n del m&#xFA;sculo liso y la secreci&#xF3;n exocrina es generalmente consistente con un mecanismo receptor de M (3) a pesar de la presencia importante de la M (2) del receptor en el m&#xFA;sculo liso. Estos resultados son consistentes con la funci&#xF3;n condicional de la M (2) del receptor en el m&#xFA;sculo liso. Esto es, el papel contr&#xE1;ctil de la M (2) del receptor depende de la de la M (3) por lo que el antagonismo de la M (3) del receptor elimina la respuesta de la M (2). Las funciones fisiol&#xF3;gicas de los receptores muscar&#xED;nicos en el tracto gastrointestinal son coherentes con sus mecanismos de se&#xF1;alizaci&#xF3;n conocidas. Algunas llamadas selectivas de tejido m (3) los antagonistas pueden deber su selectividad a una interacci&#xF3;n de alta potencia con un receptor objetivo nonmuscarinic.

Article	Year
Increased relaxant action of forskolin and isoproterenol against muscarinic agonist-induced contractions in smooth muscle from M2 receptor knockout mice. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 12649358	2003
Comparison of the pharmacological antagonism of M2 and M3 muscarinic receptors expressed in isolation and in combination. Biochemical pharmacology\| PubMed ID: 12694864	2003
Muscarinic agonist-mediated heterologous desensitization in isolated ileum requires activation of both muscarinic M2 and M3 receptors. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 14563784	2004
Comparison of the antimuscarinic action of p-fluorohexahydrosiladifenidol in ileal and tracheal smooth muscle. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 15456838	2005
The M2 muscarinic receptor mediates contraction through indirect mechanisms in mouse urinary bladder. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 15608083	2005
Estimation of agonist activity at G protein-coupled receptors: analysis of M2 muscarinic receptor signaling through Gi/o,Gs, and G15. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 17392404	2007
Two-state models and the analysis of the allosteric effect of gallamine at the M2 muscarinic receptor. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 18305010	2008
Selectivity of agonists for the active state of M1 to M4 muscarinic receptor subtypes. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 18824613	2009
The guinea pig ileum lacks the direct, high-potency, M(2)-muscarinic, contractile mechanism characteristic of the mouse ileum. Naunyn-Schmiedeberg's archives of pharmacology\| PubMed ID: 19582435	2009
Analysis of agonism and inverse agonism in functional assays with constitutive activity: estimation of orthosteric ligand affinity constants for active and inactive receptor states. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 21576379	2011
Analysis of functional responses at G protein-coupled receptors: estimation of relative affinity constants for the inactive receptor state. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics\| PubMed ID: 21576380	2011
Muscarinic agonists and antagonists: effects on gastrointestinal function. Handbook of experimental pharmacology\| PubMed ID: 22222706	2012

Michael T. Griffin

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