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Direct Detection of the Acetate-forming Activity  of the Enzyme Acetate Kinase

Acetate kinase, a member of the acetate and sugar kinase-Hsp70-actin (ASKHA) enzyme superfamily1-5, is responsible for the reversible phosphorylation of ...

Clemson University

&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x5BF9;&#x5BC4;&#x751F;&#x6027;&#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x6B64;&#x4EE3;&#x8C22;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B65;&#x662F;&#x7531;&#x5DF1;&#x7CD6;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x7CD6;&#x7684; ATP &#x7684; &gamma; &#x78F7;&#x9178;&#x7684;&#x9176;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x3002;T.&#x9525;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; &#xFF08;TREU927/4 GUTat10.1) &#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x4E00;&#x7EA7;&#x76F8;&#x540C;&#x7684; 98%&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A; hexokinases &#xFF08;TbHK1 &#x548C; TbHK2&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5148;&#x524D;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x8868;&#x660E; TbHK2 &#x662F; TbHK1 procyclic &#x7A97;&#x4F53;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x5728;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x901A;&#x8FC7; RNAi TbHK1 &#x5230;&#x8840;&#x6DB2;&#x91CC;&#x7A97;&#x4F53;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;4 &#x5929;&#x6C89;&#x9ED8;&#x57FA;&#x56E0;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EA6; 60%&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5DF1;&#x7CD6;&#x6FC0;&#x9176;&#x548C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x79CD;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9176;&#xFF0C;&#x6545; lonidamine (IC (50) = 850 microM&#xFF09;&#xFF0C;&#x80BF;&#x7624; hexokinases &#x4E3A;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x6297;&#x764C;&#x836F;&#x7269;&#x3002;&#x8BE5;&#x4EE3;&#x7406;&#x8FD8;&#x6291;&#x5236;&#x6E2F;&#x5143;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4ECE;&#x6574;&#x4E2A;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x88C2;&#x89E3; (IC (50) = 965 microM&#xFF09;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;lonidamine &#x662F;&#x6709;&#x6BD2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x7A97;&#x4F53;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; (LD (50) = 50 microM&#xFF09; &#x548C; procyclic &#x7A97;&#x4F53;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; (LD (50) = 180 microM&#xFF09;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; TbHK1 lonidamine &#x4ECE;&#x4FDD;&#x62A4; PF &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x9057;&#x4F20;&#x8BC1;&#x636E;&#x540C;&#x65F6;&#x67E5;&#x660E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9776;&#x7684;&#x6297;&#x514B;&#x9C81;&#x65AF;&#x4EE3;&#x7406; lonidamine TbHK1 &#x662F;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x6297;&#x514B;&#x9C81;&#x65AF;&#x4EE3;&#x7406; lonidamine &#x6291;&#x5236;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x5DF1;&#x7CD6;&#x6FC0;&#x9176; 1&#x3002;

Glycolysis is essential to the parasitic protozoan Trypanosoma brucei. The first step in this metabolic pathway is mediated by hexokinase, an enzyme that transfers the gamma-phosphate of ATP to a hexose. The T. brucei genome (TREU927/4 GUTat10.1) encodes two hexokinases (TbHK1 and TbHK2) that are 98% identical at the amino acid level. Our previous efforts have revealed that TbHK2 is an important regulator of TbHK1 in procyclic form parasites. Here, we have found through RNAi that TbHK1 is essential to the bloodstream form parasite. Silencing the gene for 4 days reduces cellular hexokinase approximately 60% and leads to parasite death. Additionally, we have found that the recombinant enzyme is inhibited by lonidamine (IC(50)=850 microM), an anti-cancer drug that targets tumor hexokinases. This agent also inhibits HK activity from whole parasite lysate (IC(50)=965 microM). Last, lonidamine is toxic to cultured bloodstream form parasites (LD(50)=50 microM) and procyclic form parasites (LD(50)=180 microM). Interestingly, overexpression of TbHK1 protects PF parasites from lonidamine. These studies provide genetic evidence that TbHK1 is a valid therapeutic target while identifying a potential molecular target of the anti-trypanosomal agent lonidamine.

The anti-trypanosomal agent lonidamine inhibits Trypanosoma brucei hexokinase 1.

La glycolyse est essentielle pour le protozoaire parasite Trypanosoma brucei. La premi&egrave;re &eacute;tape de cette voie m&eacute;tabolique est m&eacute;di&eacute;e par l&#39;hexokinase, une enzyme qui transf&egrave;re le gamma-phosphate de l&#39;ATP pour un hexose. Le T. brucei g&eacute;nome (GUTat10.1 TREU927/4) encode deux hexokinase (TbHK1 et TbHK2) qui est identique &agrave; 98 % au niveau de l&#39;acide amin&eacute;. Nos efforts ant&eacute;rieurs ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que le TbHK2 est un r&eacute;gulateur important de TbHK1 les parasites de forme procycliques. Ici, nous avons trouv&eacute; par le biais de RNAi que TbHK1 est essentiel au parasite de forme de circulation sanguine. Silencing du g&egrave;ne pendant 4 jours r&eacute;duit l&#39;hexokinase cellulaire environ 60 % et conduit &agrave; la mort du parasite. En outre, nous avons trouv&eacute; que l&#39;enzyme recombinante est inhib&eacute;e par le lonidamine (IC (50) = 850 microM), un m&eacute;dicament anticanc&eacute;reux qui cible tumorale hexokinase. Cet agent inhibe &eacute;galement l&#39;activit&eacute; de tout parasite de lysat de HK (IC (50) = 965 microM). Enfin, lonidamine est toxique pour les parasites forme cultiv&eacute;e de circulation sanguine (LD (50) = 50 microM) et procycliques forme parasites (LD (50) = 180 microM). Fait int&eacute;ressant, la surexpression de TbHK1 prot&egrave;ge parasites PF lonidamine. Ces &eacute;tudes fournissent des preuves g&eacute;n&eacute;tiques que TbHK1 est une cible th&eacute;rapeutique valable tout en identifiant une cible mol&eacute;culaire potentielle de la lonidamine de l&#39;agent anti-trypanosomes.

Le lonidamine de l&#39;agent anti-trypanosomes inhibe Trypanosoma brucei hexokinase 1.

Glykolyse ist entscheidend f&uuml;r die Parasit&auml;re Protozoen Trypanosoma Brucei. Der erste Schritt in dieser Stoffwechselweg ist durch Hexokinase, ein Enzym vermittelt, das die Gamma-Phosphat von ATP auf eine Hexose &uuml;bertr&auml;gt. T. Brucei Genom (TREU927/4 GUTat10.1) kodiert f&uuml;r zwei Hexokinases (TbHK1 und TbHK2), die 98 % identisch auf die Aminos&auml;ure-Niveau sind. Unsere bisherigen Bem&uuml;hungen haben ergeben, dass TbHK2 ein wichtiger Regulator des TbHK1 im prozyklischen Form Parasiten. Hier fanden wir durch RNAi, dass TbHK1 der Blutstrom Form Parasit wesentlich ist. Unterdr&uuml;ckender das Gen f&uuml;r 4 Tage reduziert zellulare Hexokinase ca. 60 % und f&uuml;hrt zum Tod des Parasiten. Dar&uuml;ber hinaus haben wir festgestellt, dass das rekombinante Enzym durch Lonidamine gehemmt (IC (50) = 850 MicroM), ein Krebsmedikament, das Ziel der Tumor Hexokinases. Dieser Agent hemmt auch HK-Aktivit&auml;t von ganzen Parasiten lysate (IC (50) = 965 MicroM). Lonidamine ist giftig f&uuml;r kultivierten Blutstrom Form Parasiten (LD (50) = 50 MicroM) und prozyklische Form Parasiten (LD (50) = 180 MicroM). Interessant ist, sch&uuml;tzt eine &Uuml;berexpression von TbHK1 PF Parasiten von Lonidamine. Diese Studien liefern genetischen Beweis, dass TbHK1 ein g&uuml;ltiges therapeutische Ziel ist gleichzeitig eine m&ouml;gliche Molekulare Zielgruppen der Anti-trypanosomale-Agent-Lonidamine kennzeichnen.

Die Anti-trypanosomale-Agent-Lonidamine hemmt Trypanosoma Brucei Hexokinase 1.

La glicolisi &egrave; essenziale per il parassita protozoo Trypanosoma brucei. Il primo passo in questa via metabolica &egrave; mediato dall&#39;esochinasi, un enzima che trasferisce il fosfato gamma dell&#39;ATP ad un esoso. Il T. brucei genoma (TREU927/4 GUTat10.1) codifica due esochinasi (TbHK1 e TbHK2) che sono il 98% identico a livello dell&#39;amminoacido. Nostri sforzi precedenti hanno rivelato che il TbHK2 &egrave; un regolatore importante del TbHK1 in parassiti forma prociclici. Qui, abbiamo trovato attraverso la RNAi che TbHK1 &egrave; essenziale per il parassita di forma del flusso sanguigno. Silenziamento del gene per 4 giorni riduce esochinasi cellulare circa il 60% e conduce alla morte del parassita. Inoltre, abbiamo trovato che l&#39;enzima ricombinante &egrave; inibito da lonidamine (IC (50) = 850 microM), un farmaco anti-cancro che gli obiettivi di tumore esochinasi. Questo agente inibisce anche l&#39;attivit&agrave; HK da parassita intero lisato (IC (50) = 965 microM). Ultima, &egrave; tossico al flusso sanguigno colta forma parassiti lonidamine (LD (50) = 50 microM) e prociclico forma parassiti (LD (50) = 180 microM). &Egrave; interessante notare, sovraespressione di TbHK1 protegge parassiti PF da lonidamine. Questi studi forniscono prove genetiche che TbHK1 &egrave; un valido obiettivo terapeutico durante l&#39;identificazione di un potenziale bersaglio molecolare di lonidamine l&#39;agente anti-trypanosomal.

L&#39;agente anti-trypanosomal lonidamine inibisce Trypanosoma brucei esochinasi 1.

&#x89E3;&#x7CD6;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x5BC4;&#x751F;&#x539F;&#x866B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;ATP &#x306E; &gamma; &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x30D8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x8EE2;&#x9001;&#x9175;&#x7D20;&#x30D8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;T. brucei &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; (TREU927/4 GUTat10.1) &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067; 98 &#xFF05; &#x540C;&#x3058;&#x3044;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30D8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (TbHK1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; TbHK2) &#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x306F;&#x3001;TbHK2 &#x306F; TbHK1 &#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50; procyclic &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; TbHK1 &#x304C;&#x8840;&#x6D41;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; RNAi &#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;4 &#x65E5;&#x9593;&#x30B8;&#x30FC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30FC; &#x30D8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D04; 60 &#xFF05; &#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x6B7B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; lonidamine &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F; &#xFF08;IC (50) = 850 microM&#xFF09;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x30D8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x6297;&#x304C;&#x3093;&#x5264;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x307E;&#x305F; HK &#x6D3B;&#x52D5;&#x5168;&#x4F53;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; lysate &#x304B;&#x3089;&#x6291;&#x5236; (IC (50) = 965 microM&#xFF09;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;lonidamine &#x306F;&#x57F9;&#x990A;&#x8840;&#x6D41;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306B;&#x6709;&#x6BD2;&#x3067;&#x3042;&#x308B; (LD (50) = 50 microM&#xFF09; &#x3068; procyclic &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; (LD (50) = 180 microM&#xFF09;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;TbHK1 &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F; PF &#x5BC4;&#x751F;&#x866B; lonidamine &#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x53CD;&#x83CC;&#x985E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; lonidamine &#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A19;&#x7684;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x4E2D; TbHK1 &#x6709;&#x52B9;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E0A;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x53CD;&#x83CC;&#x985E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; lonidamine &#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE; brucei &#x30D8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 1 &#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBD84;&#xD574; &#xAE30;&#xC0DD; protozoan Trypanosoma brucei&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB300;&#xC0AC; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; hexokinase&#xB97C; hexose&#xB97C; ATP&#xC758; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. T. brucei &#xAC8C;&#xB188; (TREU927/4 GUTat10.1) 98% &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; hexokinases&#xB97C; (TbHK1 &#xBC0F; TbHK2)&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xB178;&#xB825; TbHK2 procyclic &#xC591;&#xC2DD; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; Tbhk1&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC870;&#xC808;&#xAE30; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; Tbhk1&#xC740; &#xD608; &#xB958; &#xD615;&#xD0DC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; Rnai&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 4 &#xC77C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xCE68;&#xBB35; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; hexokinase &#xC57D; 60%&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xACE0; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; lonidamine&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC800;&#xD574;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC; (IC (50) = 850 microM), &#xC885;&#xC591; hexokinases&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xC554; &#xC57D;&#xBB3C;. &#xC774; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; lysate&#xC5D0;&#xC11C; &#xD64D;&#xCF69; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC5B5;&#xC81C; (IC (50) = 965 microM). &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, lonidamine&#xB294; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xD608; &#xB958; &#xD615;&#xD0DC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xB3C5;&#xC131; (LD (50) = 50 microM) &#xBC0F; procyclic &#xC591;&#xC2DD; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; (LD (50) = 180 microM). &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Tbhk1&#xC758; overexpression lonidamine&#xC5D0;&#xC11C; PF &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC744; &#xBCF4;&#xD638; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; Tbhk1&#xB294; &#xC548;&#xD2F0; trypanosomal &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; lonidamine&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC790; &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xD6A8;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBAA9;&#xD45C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC548;&#xD2F0; trypanosomal &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; lonidamine Trypanosoma brucei hexokinase&#xB97C; 1&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

Gluc&oacute;lisis es esencial para el protozoo par&aacute;sito Trypanosoma brucei. El primer paso en este camino metab&oacute;lico est&aacute; mediado por la hexoquinasa, una enzima que transfiere la gamma-fosfato de ATP a una hexosa. T. brucei genoma (TREU927/4 GUTat10.1) codifica dos hexokinases (TbHK1 y TbHK2) que son 98% id&eacute;ntico al nivel del amino&aacute;cido. Nuestros esfuerzos anteriores han revelado que TbHK2 es un importante regulador de TbHK1 en par&aacute;sitos de forma proc&iacute;clicas. Aqu&iacute;, hemos encontrado a trav&eacute;s de ARNi que TbHK1 es esencial para el par&aacute;sito de la forma de circulaci&oacute;n sangu&iacute;nea. Silenciamiento del gen durante 4 d&iacute;as reduce la hexoquinasa celular aproximadamente el 60% y lleva a la muerte del par&aacute;sito. Adem&aacute;s, hemos encontrado que la enzima recombinante es inhibida por lonidamine (IC (50) = 850 microM), un f&aacute;rmaco contra el c&aacute;ncer que se dirige a tumor hexokinases. Este agente tambi&eacute;n inhibe la actividad de HK de lisado entero par&aacute;sito (IC (50) = 965 microM). Finalmente, lonidamine es t&oacute;xico para los par&aacute;sitos de forma culta torrente sangu&iacute;neo (LD (50) = 50 microM) y par&aacute;sitos de forma proc&iacute;clicas (LD (50) = 180 microM). Curiosamente, la sobreexpresi&oacute;n de TbHK1 protege par&aacute;sitos PF de lonidamine. Estos estudios proporcionan evidencia gen&eacute;tica que TbHK1 es una diana terap&eacute;utica v&aacute;lida mientras que identificar una potencial diana molecular de la lonidamine agente anti-trypanosomal.

Matthew L. Fowler

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