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Modified Yeast-Two-Hybrid System to Identify Proteins Interacting with the Growth Factor Progranulin

Progranulin (PGRN), also known as granulin epithelin precursor (GEP), is a 593-amino-acid autocrine growth factor. PGRN is known to play a critical role ...

NYU Hospital for Joint Diseases

&#xFF08;&#xFF1A; PGRN) &#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x9897;&#x7C92;&#x86CB;&#x767D;&#x524D;&#x4F53;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x4FEE;&#x590D;&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x3001; &#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53CA;&#x5176;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x4ECD;&#x7136;&#x4E0D;&#x660E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#xFF1A; PGRN &#x76F4;&#x63A5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; (TNFRs) &#x548C;&#x4E0D;&#x5B89; TNF&alpha; &#x4F53;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#xFF1A; PGRN &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x90FD;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x80F6;&#x539F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#xFF0C;&#x548C;&#x7BA1;&#x7406;&#xFF1A; PGRN &#x626D;&#x8F6C;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#x3002;Atsttrin&#xFF0C;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#xFF1A; PGRN &#x7247;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#xFF1A; PGRN &#x548C; Atsttrin &#x963B;&#x6B62;&#x591A;&#x4E2A;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x708E;&#x75C7;&#x548C;&#x6291;&#x5236; TNF&alpha; &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF1A; PGRN &#x662F;&#x4F53;&#xFF0C;&#x62EE;&#x6297;&#x5242; TNF&alpha; &#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x914D;&#x4F53;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x708E;&#x6027;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x65B0;&#x5404;&#x79CD; TNF&alpha; &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x75C5;&#x75C7;&#x548C;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x7C7B;&#x98CE;&#x6E7F;&#x6027;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E72;&#x9884;&#x3002;

&#x9897;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x524D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x662F;&#x5BF9;&#x5C0F;&#x9F20;&#x708E;&#x6027;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;

The growth factor progranulin (PGRN) has been implicated in embryonic development, tissue repair, tumorigenesis, and inflammation, but its receptors remain unidentified. We report that PGRN bound directly to tumor necrosis factor receptors (TNFRs) and disturbed the TNFÎ±-TNFR interaction. PGRN-deficient mice were susceptible to collagen-induced arthritis, and administration of PGRN reversed inflammatory arthritis. Atsttrin, an engineered protein composed of three PGRN fragments, exhibited selective TNFR binding. PGRN and Atsttrin prevented inflammation in multiple arthritis mouse models and inhibited TNFÎ±-activated intracellular signaling. Collectively, these findings demonstrate that PGRN is a ligand of TNFR, an antagonist of TNFÎ± signaling, and plays a critical role in the pathogenesis of inflammatory arthritis in mice. They also suggest new potential therapeutic interventions for various TNFÎ±-mediated pathologies and conditions, including rheumatoid arthritis.

The growth factor progranulin binds to TNF receptors and is therapeutic against inflammatory arthritis in mice.

Le facteur de croissance progranuline (PGRN) a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; dans le d&#xE9;veloppement embryonnaire, la r&#xE9;paration des tissus, la tumorigen&#xE8;se, et de l&#x26;#39;inflammation, mais ses r&#xE9;cepteurs restent non identifi&#xE9;s. Nous signalons que PGRN li&#xE9; directement &#xE0; la tumeur r&#xE9;cepteurs du facteur de n&#xE9;crose (TNFR) et perturb&#xE9; l&#x26;#39;interaction TNF-TNFR. PGRN-souris d&#xE9;ficientes &#xE9;taient sensibles &#xE0; l&#x26;#39;arthrite induite par le collag&#xE8;ne, et l&#x26;#39;administration de PGRN invers&#xE9;e arthrite inflammatoire. Atsttrin, une prot&#xE9;ine d&#x26;#39;ing&#xE9;nierie compos&#xE9;e de trois fragments PGRN, expos&#xE9; contraignant TNFR s&#xE9;lective. PGRN et Atsttrin emp&#xEA;ch&#xE9; l&#x26;#39;inflammation dans de multiples mod&#xE8;les de souris atteints de polyarthrite et inhib&#xE9; TNF-activ&#xE9;s signalisation intracellulaire. Collectivement, ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que PGRN est un ligand de TNFR, un antagoniste de la signalisation TNFa, et joue un r&#xF4;le critique dans la pathogen&#xE8;se de l&#x26;#39;arthrite inflammatoire chez les souris. Ils sugg&#xE8;rent &#xE9;galement de nouvelles interventions th&#xE9;rapeutiques potentielles pour diverses TNF-m&#xE9;di&#xE9;es par les pathologies et les conditions, y compris l&#x26;#39;arthrite rhumato&#xEF;de.

Le facteur de croissance progranuline se lie aux r&#xE9;cepteurs du TNF et th&#xE9;rapeutique contre l&#x26;#39;arthrite inflammatoire chez les souris

Der Wachstumsfaktor Progranulin (PGRN) hat in der Embryonalentwicklung, Reparatur von Gewebe, Tumorentstehung und Entz&uuml;ndung verwickelt worden, aber seine Rezeptoren bleiben nicht identifizierten. Wir berichten, dass PGRN direkt an den Tumor-Nekrose-Faktor-Rezeptoren (TNFRs) gebunden und die TNF&alpha;-TNFR-Interaktion gest&ouml;rt. PGRN-defizienten M&auml;usen waren anf&auml;llig f&uuml;r Kollagen-induzierte Arthritis und Administration des PGRN revidierte entz&uuml;ndliche Arthritis. Atsttrin, ein ver&auml;nderter Protein, bestehend aus drei PGRN Fragmente, ausgestellt selektive TNFR-Bindung. PGRN und Atsttrin verhindert Entz&uuml;ndungen in mehrere Arthritis Mausmodelle und TNF&alpha;-aktiviert intrazellul&auml;ren Signalling gehemmt. Zusammenfassend zeigen diese Ergebnisse, dass PGRN ein Ligand TNFR, ein Antagonist TNF&alpha; zu signalisieren ist, und eine wichtige Rolle in der Pathogenese der entz&uuml;ndlichen Arthritis in den M&auml;usen spielt. Sie schlagen auch neue potentielle therapeutische Interventionen f&uuml;r verschiedene TNF&alpha;-vermittelte Krankheiten und Bedingungen, einschlie&szlig;lich der rheumatoiden Arthritis.

Der Wachstumsfaktor Progranulin an TNF-Rezeptoren bindet und ist therapeutisch gegen entz&uuml;ndliche Arthritis in den M&auml;usen.

Il fattore di crescita progranulin (PGRN) &egrave; stato implicato in sviluppo embrionale, riparazione dei tessuti, tumorigenesi e infiammazione, ma i suoi recettori rimangono non identificati. Segnaliamo che PGRN legato direttamente ai recettori del fattore di necrosi tumorale (TNFRs) e disturbato l&#39;interazione TNF&alpha;-TNFR. PGRN-deficient mice erano suscettibili di artrite collageno-indotta, e amministrazione di PGRN invertito artrite infiammatoria. Atsttrin, una proteina di ingegneria composta da tre frammenti PGRN, esposto selettiva associazione TNFR. PGRN e Atsttrin impedito l&#39;infiammazione in pi&ugrave; modelli di mouse di artrite e inibito attivati dal TNF&alpha; di segnalazione intracellulare. Collettivamente, questi risultati dimostrano che PGRN &egrave; un ligand del TNFR, un antagonista del TNF&alpha; segnalazione e svolge un ruolo critico nella patogenesi dell&#39;artrite infiammatoria nei topi. Essi suggeriscono anche nuovi potenziali interventi terapeutici per diverse patologie TNF&alpha;-mediata e condizioni, tra cui l&#39;artrite reumatoide.

Il fattore di crescita progranulin si lega ai recettori TNF ed &egrave; terapeutico contro l&#39;artrite infiammatoria nei topi.

&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;progranulin&#x306E;&#xFF08;PGRN&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x3001;&#x708E;&#x75C7;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;PGRN&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x58CA;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TNFRs&#xFF09;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;TNF&#x3B1;-TNFR&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3002; PGRN&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x95A2;&#x7BC0;&#x708E;&#x306B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x3068;PGRN&#x306E;&#x6295;&#x4E0E;&#x306F;&#x3001;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x95A2;&#x7BC0;&#x708E;&#x3092;&#x9006;&#x8EE2;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; Atsttrin&#x3001;3 PGRN&#x306E;&#x65AD;&#x7247;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306A;TNFR&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; PGRN&#x3068;Atsttrin&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x95A2;&#x7BC0;&#x30EA;&#x30A6;&#x30DE;&#x30C1;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x708E;&#x75C7;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;TNF&#x3B1;&#x6D3B;&#x200B;&#x200B;&#x6027;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;PGRN&#x306F;&#x3001;TNF&#x3B1;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;TNFR&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x95A2;&#x7BC0;&#x708E;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x95A2;&#x7BC0;&#x30EA;&#x30A6;&#x30DE;&#x30C1;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;TNF&#x3B1;&#x4ECB;&#x5728;&#x75C5;&#x72B6;&#x3068;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x4ECB;&#x5165;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;progranulin&#x306E;&#x306F;&#x3001;TNF&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x95A2;&#x7BC0;&#x708E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; progranulin (PGRN) &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;, &#xC870;&#xC9C1; &#xBCF5;&#xAD6C;, tumorigenesis, &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB0A8;&#xC544; &#xC815;&#xCCB4; &#xBD88;&#xBA85;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; PGRN &#xC885;&#xC591; &#xAD34; &#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TNFRs)&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; TNF&alpha; TNFR &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PGRN &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC720;&#xBC1C; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; PGRN&#xC758; &#xBC18;&#xC804; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC;. Atsttrin, 3 PGRN &#xC870;&#xAC01;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC870;&#xC791;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; TNFR &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC804;&#xC2DC;. PGRN &#xBC0F; Atsttrin &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC2E0;&#xD638; TNF&alpha; &#xD65C;&#xC131; &#xC800;&#xD574;. &#xC0E8; &#xB2E4;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; PGRN ligand&#xC758; TNFR, TNF&alpha; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC774;&#xBA70;, &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; TNF&alpha; &#xC911;&#xC7AC; pathologies &#xBC0F; &#xB958; &#xB9C8;&#xD2F0;&#xC2A4; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; progranulin TNF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El factor de crecimiento progranulina (PGRN) ha sido implicado en el desarrollo embrionario, la reparaci&#xF3;n de tejidos, tumorig&#xE9;nesis, y la inflamaci&#xF3;n, pero sus receptores permanecen sin identificar. Nos informan de que PGRN vinculado directamente a los receptores del factor de necrosis tumoral (RTNF) y perturbado la interacci&#xF3;n TNF-TNFR. PGRN ratones deficientes fueron susceptibles a la artritis inducida por col&#xE1;geno, y la administraci&#xF3;n de PGRN invertido artritis inflamatoria. Atsttrin, una prote&#xED;na de ingenier&#xED;a compuesta por tres fragmentos de PGRN, exhibi&#xF3; vinculante TNFR selectiva. PGRN y Atsttrin previno la inflamaci&#xF3;n en varios modelos de rat&#xF3;n de artritis y se inhibe TNF activadas por la se&#xF1;alizaci&#xF3;n intracelular. En conjunto, estos hallazgos demuestran que PGRN es un ligando de TNFR, un antagonista de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de TNF, y desempe&#xF1;a un papel cr&#xED;tico en la patog&#xE9;nesis de la artritis inflamatoria en ratones. Tambi&#xE9;n sugieren nuevas intervenciones terap&#xE9;uticas potenciales para diversas patolog&#xED;as mediadas por TNF-y condiciones, incluyendo la artritis reumatoide.

Qing-Yun Tian

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