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Method for the Isolation and Identification of mRNAs, microRNAs and Protein Components of Ribonucleoprotein Complexes from Cell Extracts using RIP-Chip

As a result of the development of high-throughput sequencing and efficient microarray analysis, global gene expression analysis has become an easy and ...

University of Missouri

&#x7A33;&#x6001;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x98CE;&#x6CE2;&#x88AB;&#x5F52;&#x4E8E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x6C34;&#x5E73;&#x63A7;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#x5F71;&#x54CD; mRNA &#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;&#x4F20;&#x7EDF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x5206;&#x6790;&#x7A33;&#x6001;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; mRNA&#xFF0C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x80FD;&#x7531; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x5546;&#x4E1A;&#x60EF;&#x4F8B;) &#x9519;&#x8FC7; mRNA &#x7531;&#x4E8E;&#x91CD;&#x5927;&#x8C03;&#x63A7;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6307;&#x6807;&#x3002;

RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x73E5;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8C03;&#x8282;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x96CC;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x9634;&#x6027;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x5B50;&#x96C6;&#x548C;&#x96CC;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x3002;

The discordance between steady-state levels of mRNAs and protein has been attributed to posttranscriptional control mechanisms affecting mRNA stability and translation. Traditional methods of genome wide microarray analysis, profiling steady-state levels of mRNA, may miss important mRNA targets owing to significant posttranscriptional gene regulation by RNA binding proteins (RBPs).

The RNA binding protein HuR differentially regulates unique subsets of mRNAs in estrogen receptor negative and estrogen receptor positive breast cancer.

La discordance entre l&#39;&eacute;quilibre des niveaux d&#39;ARNm et de prot&eacute;ines a &eacute;t&eacute; attribu&eacute;e &agrave; des m&eacute;canismes de contr&ocirc;le post-transcriptionnel affectant la stabilit&eacute; de l&#39;ARNm et la traduction. Les m&eacute;thodes traditionnelles de l&#39;analyse du g&eacute;nome large microarray, &eacute;quilibre des niveaux d&#39;ARNm, de profilage peuvent manquer cibles ARNm importantes en raison de la r&eacute;gulation g&eacute;nique post-transcriptionnel importante de prot&eacute;ines de liaison ARN (pratiques commerciales restrictives).

La prot&eacute;ine de liaison du RNA HuR r&eacute;glemente diff&eacute;rentiellement sous-ensembles uniques des ARNm dans le r&eacute;cepteur des oestrog&egrave;nes n&eacute;gatif et estrog&egrave;ne receptor positive le cancer du sein.

Die Diskordanz zwischen station&auml;ren mRNAs und Protein wurde auf Posttranscriptionale Kontrollmechanismen, die die Stabilit&auml;t der mRNA und &Uuml;bersetzung zur&uuml;ckgef&uuml;hrt. Traditionelle Methoden der Genom-breiten Microarray-Analyse, Profilerstellung station&auml;ren Ebenen der mRNA, k&ouml;nnen wichtige Ziele der mRNA aufgrund der erheblichen Posttranscriptionale Genregulation durch RNA-bindende Proteine (RBPs) verpasst.

Das RNA-verbindliches Protein HuR regelt differentiell eindeutigen Teilmengen von mRNAs &Ouml;strogen-Rezeptor-negativen und &Ouml;strogen-Rezeptor-positivem Brustkrebs.

La discordanza tra livelli di steady-state di mRNA e la proteina &egrave; stata attribuita ai meccanismi di controllo posttranscriptional che interessano la stabilit&agrave; mRNA e traduzione. Tradizionali metodi di analisi di microarray ampia del genoma, profilatura stazionario livelli di mRNA, possono perdere importanti obiettivi di mRNA a causa della regolazione genica posttranscriptional significativo da RNA binding proteins (RBPs).

Proteina obbligatoria del RNA HuR regola differenzialmente unici sottoinsiemi dei mRNAs in estrogeno recettore negativo e tumore al seno positivo di estrogeno recettore.

&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E; Mrna &#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x306F;&#x3001;mRNA &#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x7FFB;&#x8A33;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5E83;&#x3044;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E; mRNA &#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x91CD;&#x8981;&#x306A; mRNA &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (Rbp) &#x3092;&#x9003;&#x3059;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; HuR &#x7279;&#x7570;&#x7684; Mrna &#x30A8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B2;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF; &#x30FB; &#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B2;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x967D;&#x6027;&#x306E;&#x4E73;&#x304C;&#x3093;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Mrnas&#xC758; &#xC548;&#xC815; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC218;&#xC900;&#xACFC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBD80;&#xC870;&#xD654; mRNA &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; posttranscriptional &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC8C;&#xB188; &#xB113;&#xC740; microarray &#xBD84;&#xC11D;, mRNA, &#xC548;&#xC815; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1;&#xC758; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95; RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (RBPs)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; posttranscriptional &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; mRNA &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB193;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD5C8;&#xB294; &#xCC28;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC2A4; &#xD2B8;&#xB85C; &#xAC90; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Mrnas&#xC758; &#xACE0;&#xC720; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569; &#xBC0F; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB85C;&#xAC90; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xBC29;&#xC554;&#xC744; &#xC870;&#xC808;.

La discordancia entre los niveles de estado estacionario de mRNAs y prote&iacute;nas se ha atribuido a mecanismos de control postranscripcional que afectan a la estabilidad del ARNm y traducci&oacute;n. Los m&eacute;todos tradicionales de an&aacute;lisis de microarrays amplia de genoma, perfiles estacionaria niveles de mRNA, pueden pasar por alto los objetivos importantes del mRNA debido a la regulaci&oacute;n g&eacute;nica postranscripcional significativa por proteinas RNA (restrictivas).

La prote&iacute;na de uni&oacute;n a RNA HuR diferencialmente regula &uacute;nicos subconjuntos de mRNAs en receptor de estr&oacute;geno negativo y c&aacute;ncer de mama positivo de receptor de estr&oacute;geno.

Les interactions entre g&egrave;nes et prot&eacute;ines de liaison ARN (pratiques commerciales restrictives) ne sont pas bien comprises, en particulier dans la r&eacute;gulation de l&#39;angiogen&egrave;se. Le HuR RBP se lie aux r&eacute;gions riches en UA (ARE) des ARNm labile, facilitant leur traduction en prot&eacute;ine et a suppos&eacute; pour &ecirc;tre un g&egrave;ne de la tumeur-entretien. Des niveaux &eacute;lev&eacute;s de HuR cytoplasmique sont corr&eacute;l&eacute;s directement avec effraction accrue et de mauvais pronostic pour nombreux cancers, notamment ceux du sein. HuR contr&ocirc;le l&#39;expression de plusieurs g&egrave;nes impliqu&eacute;s dans l&#39;angiogen&egrave;se, y compris VEGF&alpha;, HIF1&alpha; et thrombospondine 1 (TSP1). Nous avons &eacute;tudi&eacute; le r&ocirc;le de HuR au r&eacute;cepteur des oestrog&egrave;nes n&eacute;gatif (ER(-)) le cancer du sein. Les cellules MDA-MB-231 avec des niveaux plus &eacute;lev&eacute;s de HuR ont des alt&eacute;rations dans la cin&eacute;tique du cycle cellulaire et la croissance plus rapide. Contre toute attente, HuR surexpression significativement perturb&eacute; la croissance tumorale dans des mod&egrave;les murins orthotopique. Le m&eacute;canisme pr&eacute;sum&eacute; semble &ecirc;tre un effet anti-ANGIOG&Eacute;N&Eacute;TIQUE en augmentant l&#39;expression de TSP1 mais aussi &eacute;tonnamment, Ciapin VEGF, une cible qui HuR augmente normalement. Nos r&eacute;sultats r&eacute;v&egrave;lent que HuR peut &ecirc;tre r&eacute;glementer un cluster de g&egrave;nes impliqu&eacute;s dans la formation de vaisseaux sanguins qui contr&ocirc;le l&#39;angiogen&egrave;se tumorale. Une approche permettant de moduler les niveaux de HuR peut surmonter les limitations associ&eacute;es aux monoth&eacute;rapies ciblant la formation de vaisseaux de tumeur.

La surexpression de la prot&eacute;ine de liaison du RNA HuR entrave la croissance tumorale dans le cancer du sein triple n&eacute;gatif associ&eacute; &agrave; l&#39;angiogen&egrave;se d&eacute;ficient.

RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x5546;&#x4E1A;&#x60EF;&#x4F8B;) &#x4E0E;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x592A;&#x6E05;&#x695A;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x5546;&#x4E1A;&#x60EF;&#x4F8B;&#x73E5;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x975E;&#x76DF;&#x5BCC; (&#x662F;) &#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x4E0D;&#x8010;&#x70ED;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5176;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6709;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x5047;&#x8BBE;&#x662F;&#x80BF;&#x7624;&#x7EF4;&#x62A4;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x73E5;&#x6C34;&#x5E73;&#x5347;&#x9AD8;&#x76F4;&#x63A5;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x4FB5;&#x88AD;&#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x764C;&#x75C7;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x9884;&#x540E;&#x4E0D;&#x826F;&#x3002;&#x73E5;&#x63A7;&#x5236;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x5305;&#x62EC; VEGF&alpha;&#x3001; HIF1&alpha; &#x548C;&#x51DD;&#x8840;&#x9176;&#x654F;&#x611F;&#x86CB;&#x767D; 1 (TSP1) &#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x591A;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x73E5;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x96CC;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x9634;&#x6027; (ER(-)) &#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x3002;&#x4E19;&#x4E8C;&#x919B;-MB-231 &#x7EC6;&#x80DE;&#x542B;&#x91CF;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x73E5;&#x6709;&#x6539;&#x5EFA;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x66F4;&#x5FEB;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x73E5;&#x8868;&#x8FBE;&#x663E;&#x8457;&#x5E72;&#x6270;&#x539F;&#x4F4D;&#x6A21;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x6297;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x4F5C;&#x7528;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; TSP1 &#x4F46;&#x4E5F;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x964D;&#x7CD6; VEGF &#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x5373;&#x73E5;&#x901A;&#x5E38;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x589E;&#x5927;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x73E5;&#x53EF;&#x89C4;&#x7BA1;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x63A7;&#x5236;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x7FA4;&#x96C6;&#x3002;&#x8C03;&#x5236;&#x73E5;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x514B;&#x670D;&#x4E0E;&#x5355;&#x4E00;&#x836F;&#x7269;&#x7597;&#x6CD5;&#x9776;&#x5411;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x5C40;&#x9650;&#x6027;&#x3002;

RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x8868;&#x8FBE;&#x73E5;&#x635F;&#x5BB3;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x4E09;&#x9634;&#x6027;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x4E2D;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x751F;&#x957F;&#x3002;

Interactions between RNA binding proteins (RBPs) and genes are not well understood, especially in regulation of angiogenesis. The RBP HuR binds to the AU-rich (ARE) regions of labile mRNAs, facilitating their translation into protein and has been hypothesized to be a tumor-maintenance gene. Elevated levels of cytoplasmic HuR directly correlate with increased invasiveness and poor prognosis for many cancers, including those of the breast. HuR controls the expression of multiple genes involved in angiogenesis including VEGFÎ±, HIF1Î± and thrombospondin 1 (TSP1). We investigated the role of HuR in estrogen receptor negative (ER(-)) breast cancer. MDA-MB-231 cells with higher levels of HuR have alterations in cell cycle kinetics and faster growth. Unexpectedly, HuR overexpression significantly interfered with tumor growth in orthotopic mouse models. The putative mechanism seems to be an anti-angiogenetic effect by increasing expression of TSP1 but also surprisingly, downregulating VEGF, a target which HuR normally increases. Our findings reveal that HuR may be regulating a cluster of genes involved in blood vessel formation which controls tumor angiogenesis. An approach of modulating HuR levels may overcome limitations associated with monotherapies targeting tumor vessel formation.

Overexpression of the RNA binding protein HuR impairs tumor growth in triple negative breast cancer associated with deficient angiogenesis.

Interaktionen zwischen RNA-bindende Proteine (RBPs) und Genen sind nicht gut, vor allem bei der Regulierung der Angiogenese verstanden. Die RBP-HuR bindet an den AU-Reich (ARE) Regionen zersetzliche mRNAs, erleichtern deren &Uuml;bersetzung in Proteine und hat um ein Tumor-Wartung-gen werden theoretisiert worden. Erh&ouml;hte Konzentrationen von zytoplasmatischen HuR korrelieren direkt mit erh&ouml;hter Invasivit&auml;t und schlechte Prognose bei vielen Krebsarten, einschlie&szlig;lich derjenigen der Brust. HuR steuert die Expression von mehreren Genen Angiogenese, einschlie&szlig;lich VEGF&alpha;, HIF1&alpha; und Thrombospondin 1 (TSP1) beteiligt. Wir untersuchten die Rolle der HuR &Ouml;strogen-Rezeptor-negativen (ER(-))-Brustkrebs. MDA-MB-231-Zellen mit h&ouml;herem HuR haben &Auml;nderungen in Zellzykluskinetik und schnelleres Wachstum. HuR &Uuml;berexpression mischte sich unerwartet deutlich mit Tumorwachstum in Orthotopic Mausmodelle. Der vermeintliche Mechanismus scheint eine Anti-Angiogenetic Wirkung durch die Erh&ouml;hung der Expression von TSP1 aber auch &uuml;berraschend Herunterregulierung VEGF, ein Ziel, das HuR normalerweise erh&ouml;ht. Unsere Ergebnisse zeigen, dass HuR einen Cluster von Genen, die bei Blutgef&auml;&szlig;-Bildung regulieren kann die Tumorangiogenese steuert. Ein Ansatz der modulierenden HuR Ebenen kann Einschr&auml;nkungen zugeordnet Monotherapies Zielgruppenadressierung Schiff Tumorbildung &uuml;berwinden.

Eine &Uuml;berexpression von der RNA verbindliches Protein beeintr&auml;chtigt HuR Tumorwachstum in Dreifach negativem Brustkrebs mangelhaft Angiogenese zugeordnet.

Interazioni tra geni e RNA binding proteins (RBPs) non sono ben compresi, soprattutto nella regolazione dell&#39;angiogenesi. Il HuR RBP si lega alle regioni AU-rich (sono) dei mRNAs labile, facilitando la loro traduzione in proteina ed &egrave; stato ipotizzato per essere un gene tumore-manutenzione. Livelli elevati di HuR citoplasmatica correlano direttamente con maggiore invasivit&agrave; e prognosi per molti tumori, compresi quelli del seno. HuR controlla l&#39;espressione di pi&ugrave; geni coinvolti nell&#39;angiogenesi, tra cui VEGF&alpha;, HIF1&alpha; e trombospondina 1 (TSP1). Abbiamo studiato il ruolo di HuR nel recettore estrogeno negativo (ER(-)) il cancro al seno. Cellule MDA-MB-231 con livelli pi&ugrave; elevati di HuR hanno alterazioni della cinetica del ciclo cellulare e la crescita pi&ugrave; veloce. Inaspettatamente, HuR sovraespressione significativamente interferito con la crescita tumorale in modelli murini ortotopico. Il meccanismo putativo sembra essere un effetto anti-angiogenetic aumentando l&#39;espressione di TSP1 ma anche sorprendentemente, riducono VEGF, una destinazione che HuR normalmente aumenta. I nostri risultati rivelano che HuR pu&ograve; regolamentare un cluster di geni coinvolti nella formazione del vaso sanguigno che controlla l&#39;angiogenesi tumorale. Un approccio di modulante HuR livelli possa superare i limiti associati monoterapie targeting tumorale nave.

Sovraespressione della proteina obbligatoria del RNA HuR altera la crescita del tumore in cancro seno triplo negativo associato a deficit dell&#39;angiogenesi.

RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (Rbp) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3082;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;RBP HuR &#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A; Mrna &#x306E; AU &#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A; &#xFF08;&#x3042;&#x308B;&#xFF09; &#x5730;&#x57DF;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30D9;&#x30F3;&#x30CF;&#x30FC;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x4E73;&#x623F;&#x3082;&#x542B;&#x3081;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x4E88;&#x5F8C;&#x304C;&#x4E0D;&#x826F;&#x3068;&#x5897;&#x52A0;&#x4FB5;&#x8972;&#x6027;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30CF;&#x30FC; VEGF&alpha;&#x3001;HIF1&alpha;&#x3001;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x30DC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B8;&#x30F3; 1 (TSP1) &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x8CA0;&#x306E;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B2;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (ER(-)) &#x4E73;&#x304C;&#x3093;&#x3002; &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D9;&#x30F3;&#x30CF;&#x30FC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x30D9;&#x30F3;&#x30CF;&#x30FC;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E; MDA MB 231 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3088;&#x308A;&#x901F;&#x3044;&#x6210;&#x9577;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E88;&#x671F;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x30D9;&#x30F3;&#x30CF;&#x30FC;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x6240;&#x6027;&#x540C;&#x7A2E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x5E72;&#x6E09;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3002;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6A5F;&#x69CB; TSP1 &#x306E;&#x5F0F;&#x304C; downregulating &#x3082;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069; VEGF&#x3001;&#x30D9;&#x30F3;&#x30CF;&#x30FC;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53CD; angiogenetic &#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C; HuR &#x816B;&#x760D;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x308F;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x8ABF; HuR &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x816B;&#x760D;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; monotherapies &#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9650;&#x754C;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x767A;&#x73FE; HuR &#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EB; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x4E73;&#x764C;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (RBPs)&#xC640; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC774; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;, &#xD2B9;&#xD788; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0;&#xC11C;. RBP &#xD5C8; &#xC815;&#xD55C; Mrnas&#xC758; AU &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; (&#xB294;) &#xC9C0;&#xC5ED; &#xCD09;&#xC9C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC885;&#xC591;-&#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC218; hypothesized &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD5C8;&#xC758; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xCE68;&#xC785; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC720;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; &#xC554;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE48;&#xC57D;&#xD55C; &#xC608; &#xC9C0;&#xC640; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5F0;&#xACB0;. &#xD5C8; VEGF&alpha;, HIF1&alpha;, thrombospondin 1 (TSP1) &#xB4F1; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC5D0; &#xC2A4; &#xD2B8;&#xB85C; &#xAC90; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C; (ER(-)) &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xD5C8;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC870;&#xC0AC;. &#xD5C8;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; MDA-MB-231 &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBC0F; &#xBE60;&#xB978; &#xC131;&#xC7A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xACBD;. &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C;, &#xD5C8; overexpression orthotopic &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xBC29;&#xD574; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; TSP1 downregulating &#xB610;&#xD55C; &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, VEGF, &#xB300;&#xC0C1; &#xD5C8;&#xB97C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xC548;&#xD2F0;-angiogenetic &#xD6A8;&#xACFC; &#xAC83; &#xAC19;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC1D;&#xD600; &#xD5C8; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC885;&#xC591; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC870;&#xC808; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCC0;&#xC870; &#xD5C8; &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xC811;&#xADFC; monotherapies &#xC885;&#xC591; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC81C;&#xD55C; &#xADF9;&#xBCF5; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; overexpression &#xD5C8; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;.

Interacciones entre genes y prote&iacute;nas de uni&oacute;n de la RNA (restrictivas) no son bien entendidas, especialmente en la regulaci&oacute;n de la angiog&eacute;nesis. La RBP HuR se une a las regiones ricas en AU (son) de mRNAs l&aacute;bil, facilitar su traducci&oacute;n a prote&iacute;na y ha planteado la hip&oacute;tesis de que un gen del tumor de mantenimiento. Niveles elevados de HuR citopl&aacute;smico correlacionan directamente con mayor invasividad y pron&oacute;stico para muchos c&aacute;nceres, los del pecho incluidos. HuR controla la expresi&oacute;n de varios genes involucrados en la angiog&eacute;nesis como VEGF&alpha;, HIF1&alpha; y Trombospondina 1 (TSP1). Investigamos el papel de HuR en receptor de estr&oacute;geno negativo (ER(-)) c&aacute;ncer de mama. Las c&eacute;lulas MDA-MB-231 con niveles m&aacute;s altos de HuR tienen alteraciones en la cin&eacute;tica del ciclo celular y un crecimiento m&aacute;s r&aacute;pido. Inesperadamente, la sobreexpresi&oacute;n de HuR significativamente interferidos crecimiento tumoral en modelos de rat&oacute;n ortot&oacute;pico. El supuesto mecanismo parece ser un efecto anti-angiogenetic mediante el aumento de expresi&oacute;n de TSP1 pero tambi&eacute;n sorprendentemente, disminuyendo VEGF, un objetivo que HuR normalmente aumenta. Nuestros resultados revelan que HuR puede estar regulando un grupo de genes implicados en la formaci&oacute;n de vasos sangu&iacute;neos que controla la angiog&eacute;nesis tumoral. Un enfoque de modulaci&oacute;n HuR niveles puede superar limitaciones asociadas con monoterapias dirigidos a la formaci&oacute;n de vasos del tumor.

La sobreexpresi&oacute;n de la prote&iacute;na de uni&oacute;n a RNA HuR deteriora el crecimiento del tumor en c&aacute;ncer de mama triple negativo asociado a la angiog&eacute;nesis deficiente.

&#x5373; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x5546;&#x4E1A;&#x60EF;&#x4F8B;) &#x8C03;&#x8282; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x673A;&#x5236;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x5546;&#x4E1A;&#x60EF;&#x4F8B;&#x534F;&#x8C03;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x8282;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x5982;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;-uridylate-&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x5143;&#x7D20; &#xFF08;&#x963F;&#x745E;&#x65AF;&#xFF09; 3&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x533A; &#xFF08;&#x7F16;&#x7801;&#xFF09; &#x7684; mRNA &#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x5546;&#x4E1A;&#x60EF;&#x4F8B;&#x73E5; posttranscriptionally &#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86; IL 4&#x3001; IL-13 &#x548C;&#x5176;&#x4ED6; Th2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x9650;&#x5236;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#x662F;&#x8F74;&#x627F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; 3 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;Th2 &#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x662F;&#x73E5;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5176;&#x5750;&#x6807;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x6C34;&#x5E73;&#x8C03;&#x63A7; Th2 &#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x5728;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x523A;&#x6FC0;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; 3 mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x5E73;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; 3 mRNA &#x534A;&#x8870;&#x671F;&#x589E;&#x52A0;&#x540E; restimulation Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#x884C;&#x4E2D;&#x3001; &#x5728;&#x4EBA;&#x7684;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x548C; Th2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; Th2 &#x503E;&#x659C;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x73E5;&#x5C06;&#x4E0E;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; 3 &#x4E2D;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x8C08;&#x8BDD;&#x5185;&#x5BB9;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x6C89;&#x6DC0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x7D20;&#x7684;&#x4E0B;&#x62C9;&#x5217;&#x8868;&#x4E2D;&#x5316;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x73E5;&#x4E13;&#x95E8;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5176; 3&#39;UTR&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x548C;&#x589E;&#x76CA;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x73E5;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; 3 mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x523A;&#x6FC0;&#x589E;&#x52A0;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x89E3;&#x548C;&#x5B83;&#x6B63;&#x9762;&#x5730;&#x5F71;&#x54CD;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; 3 mRNA &#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#xFF0C;&#x4E0E; Th2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5E76;&#x884C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x73E5;&#x9A71;&#x52A8;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x6C34;&#x5E73;&#x63A7;&#x5236;&#x626E;&#x6F14;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x5728; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x6548;&#x5E94;&#x529F;&#x80FD;&#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x73E5;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; Th2 &#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x7406;&#x89E3;&#x53EF;&#x80FD;&#x6539;&#x53D8;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x54EE;&#x5598;&#x60A3;&#x8005;&#x6C14;&#x9053;&#x708E;&#x75C7;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x7531; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x73E5;&#x534F;&#x8C03;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; 3 &#x548C; Th2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;

The posttranscriptional mechanisms whereby RNA-binding proteins (RBPs) regulate T cell differentiation remain unclear. RBPs can coordinately regulate the expression of functionally related genes via binding to shared regulatory sequences, such as the adenylate-uridylate-rich elements (AREs) present in the 3' untranslated region (UTR) of mRNA. The RBP HuR posttranscriptionally regulates IL-4, IL-13, and other Th2 cell-restricted transcripts. We hypothesized that the ARE-bearing GATA-3 gene, a critical regulator of Th2 polarization, is under HuR control as part of its coordinate posttranscriptional regulation of the Th2 program. We report that in parallel with stimulus-induced increase in GATA-3 mRNA and protein levels, GATA-3 mRNA half-life is increased after restimulation in the human T cell line Jurkat, in human memory and Th2 cells, and in murine Th2-skewed cells. We demonstrate by immunoprecipitation of ribonucleoprotein complexes that HuR associates with the GATA-3 endogenous transcript in human T cells and found, using biotin pulldown assay, that HuR specifically interacts with its 3'UTR. Using both loss-of-function and gain-of-function approaches in vitro and in animal models, we show that HuR is a critical mediator of stimulus-induced increase in GATA-3 mRNA and protein expression and that it positively influences GATA-3 mRNA turnover, in parallel with selective promotion of Th2 cytokine overexpression. These results suggest that HuR-driven posttranscriptional control plays a significant role in T cell development and effector function in both murine and human systems. A better understanding of HuR-mediated control of Th2 polarization may have utility in altering allergic airway inflammation in human asthmatic patients.

Coordinate regulation of GATA-3 and Th2 cytokine gene expression by the RNA-binding protein HuR.

Les m&eacute;canismes post-transcriptionnelle par lequel les prot&eacute;ines de liaison &agrave; l&#39;ARN (pratiques commerciales restrictives) r&eacute;glementent la diff&eacute;renciation des cellules T demeurent incertains. Pratiques commerciales restrictives peuvent coordonner r&eacute;gulent l&#39;expression de g&egrave;nes fonctionnellement li&eacute;s par la liaison &agrave; des s&eacute;quences r&eacute;gulatrices partag&eacute;es, telles que les &eacute;l&eacute;ments de l&#39;ad&eacute;nylate-uridylate-rich (AREs) pr&eacute;sents dans la r&eacute;gion 3&#39; non traduite (UTR) de l&#39;ARNm. Le HuR RBP r&eacute;gule posttranscriptionally IL-4, IL-13 et autres les transcriptions restreints aux cellules Th2. Nous avons &eacute;mis l&#39;hypoth&egrave;se que le g&egrave;ne sont porteuses GATA-3, un r&eacute;gulateur critique de polarisation Th2, est sous contr&ocirc;le de HuR dans le cadre de sa r&eacute;gulation post-transcriptionnelle coordonn&eacute;e du programme Th2. Les auteurs rapportent que parall&egrave;lement &agrave; l&#39;augmentation induite par la stimulation de GATA-3 niveaux d&#39;ARNm et de prot&eacute;ines, Half-Life 3-GATA ARNm est augment&eacute;e apr&egrave;s restimulation dans la lign&eacute;e humaine T Jurkat, dans la m&eacute;moire humaine et les cellules Th2 et dans des cellules Th2-biais&eacute;. Nous d&eacute;montrer par immunopr&eacute;cipitation des complexes ribonucl&eacute;oprot&eacute;iques qui HuR associe la transcription endog&egrave;ne GATA-3 dans les cellules T humaines et constat&eacute;, par dosage de pulldown biotine, qui HuR sp&eacute;cifiquement interagit avec ses 3&#39;UTR. &Agrave; l&#39;aide de tant de perte de fonction et de gain de fonction des approches in vitro et sur des mod&egrave;les animaux, nous montrons que HuR est un m&eacute;diateur critique d&#39;augmentation induite par la stimulation des expression ARNm et de prot&eacute;ines de GATA-3 et qu&#39;il influe positivement sur le chiffre d&#39;affaires-GATA-3 ARNm, en parall&egrave;le avec la promotion s&eacute;lective de la surexpression de cytokines Th2. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent qu&#39;actionnement post-transcriptionnel HuR joue un r&ocirc;le important dans la fonction de d&eacute;veloppement et d&#39;effecteur des cellules T dans les syst&egrave;mes murins et humains. Une meilleure compr&eacute;hension de la m&eacute;diation HuR contr&ocirc;le de polarisation Th2 peut avoir utilit&eacute; dans l&#39;alt&eacute;ration de l&#39;inflammation des voies respiratoires allergiques chez des patients asthmatiques humains.

Coordonn&eacute;e de la r&eacute;gulation de l&#39;expression des g&egrave;nes de cytokines GATA-3 et Th2 par la prot&eacute;ine de liaison &agrave; l&#39;ARN HuR.

Die Posttranscriptionale Mechanismen, die bei dem RNA-bindende Proteine (RBPs) T-Zell-Differenzierung regulieren bleiben unklar. RBPs kann coordinately regulieren die Expression von verwandeten Genen &uuml;ber Bindung an gemeinsame regulatorische Sequenzen, wie z. B. die Adenylat-Uridylate-Reich-Elemente (AREs) in der 3&#39; un&uuml;bersetzte Region (UTR) der mRNA. Die RBP-HuR regelt posttranscriptionally IL-4, IL-13 und andere Th2-Zelle-eingeschr&auml;nkte-Transkripte. Wir die Hypothese, dass das sind tragende GATA-3 gen, ein wichtiger Regulator der Th2-Polarisation, als Teil seiner Koordinaten Posttranscriptionale Regulation des Programms Th2 HuR Kontrolle unterliegt. Wir berichten, dass parallel zu den Reiz-induzierten Anstieg GATA-3 mRNA und Protein, GATA-3 mRNA-Halbwertszeit nach Restimulation in der menschlichen T-Zell-Linie Jurkat, im menschlichen Ged&auml;chtnis und Th2 Zellen und in murinen verzerrt, Th2 Zellen erh&ouml;ht wird. Wir demonstrieren durch Immunopr&auml;zipitation-Gebiets-komplexe, die die GATA-3 endogene Abschrift in den menschlichen T-Zellen HuR zuordnet und gefunden, Biotin-Pulldown-Probe, die HuR, die speziell mit interagiert mit seiner 3&#39;UTR. Anhand der Verlustfunktion und Gain of Function Ans&auml;tze in vitro und in Tiermodellen zeigen wir, dass HuR ein kritischer Vermittler von Reiz-induzierte Zunahme GATA-3-mRNA und Protein-Expression und GATA-3 mRNA Umsatz, parallel zu selektive F&ouml;rderung von Th2 Cytokine &Uuml;berexpression positiv beeinflusst. Diese Ergebnisse legen nahe, dass HuR-gesteuerte Posttranscriptionale Kontrolle eine bedeutende Rolle in T-Zell-Entwicklung und Effektor-Funktion sowohl murinen und menschliche Systeme spielt. Ein besseres Verst&auml;ndnis der HuR-vermittelte Kontrolle der Th2-Polarisierung m&ouml;glicherweise Dienstprogramm allergischen Atemwegsentz&uuml;ndung in menschlichen Asthma-Patienten zu &auml;ndern.

Verordnung der GATA-3 und Th2-Zytokin-Genexpression durch die RNS-bindene Protein HuR zu koordinieren.

I meccanismi di posttranscriptional per cui RNA-binding proteins (RBPs) regolano la differenziazione delle cellule T rimangono poco chiari. RBPs coordinately possono regolare l&#39;espressione di geni funzionalmente correlati tramite associazione di sequenze regolatrici condivise, come ad esempio gli elementi ricchi di adenilato-uridylate (AREs) presenti della regione 3&#39; non tradotte (UTR) del mRNA. Il HuR RBP regola posttranscriptionally IL-4, IL-13 e altre Th2 cellula-restricted trascrizioni. Abbiamo ipotizzato che il gene sono-cuscinetto GATA-3, un critico di regolazione della polarizzazione Th2, &egrave; sotto il controllo di HuR come parte del suo regolamento di posttranscriptional coordinata del programma Th2. Segnaliamo che in parallelo con indotta da stimolo aumento dei livelli di mRNA e proteine GATA-3, Half-Life GATA-3 mRNA &egrave; aumentato dopo restimulation nella linea di cellule T umane Jurkat, nella memoria umana e le cellule Th2 e nelle cellule Th2 distorta murine. Noi dimostrare di immunoprecipitazione dei complessi ribonucleoproteina che HuR associa con trascrizione GATA-3 endogena nelle cellule T umane e trovato, usando analisi di pulldown biotina, che HuR interagisce specificamente con il 3&#39;UTR. Utilizzando approcci sia della funzione di perdita e guadagno di funzione in vitro e in modelli animali, mostriamo che HuR &egrave; un mediatore critico di stimolo indotto aumento di espressione di mRNA e proteine GATA-3 e che esso influenza positivamente fatturato GATA-3 mRNA, in parallelo con la promozione selettiva della sovraespressione di citochine Th2. Questi risultati suggeriscono che controllo posttranscriptional HuR-driven gioca un ruolo significativo nella funzione sviluppo ed effettrici delle cellule T in sistemi murini e umani. Una migliore comprensione del controllo HuR-mediata della polarizzazione Th2 pu&ograve; avere utilit&agrave; nell&#39;alterare infiammazione allergica delle vie aeree nei pazienti asmatici umani.

Coordinare regolamento GATA-3 e Th2 cytokine espressione di gene RNA-binding protein HuR.

Whereby RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (Rbp) T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306A;&#x307E;&#x307E;&#x3002;Rbp &#x30EA;&#x30BA;&#x30DF;&#x30AB;&#x30EB; &#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178; &#xFF0D; &#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x8981;&#x7D20; (&#x30A2;&#x30EC;&#x30B9;)&#x3001;3&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x306E; mRNA &#x306E; (UTR) &#x5B58;&#x5728;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x898F;&#x5236;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RBP &#x30CF;&#x30FC; posttranscriptionally &#x30BB;&#x30EB;&#x5236;&#x9650; IL-4, IL-13, &#x3068;&#x4ED6;&#x306E; Th2 &#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30D9;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30AC;&#x30BF; 3 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF; Th2 &#x5206;&#x6975;&#x306E;&#x5EA7;&#x6A19;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x8ABF;&#x7BC0; Th2 &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x4E00;&#x74B0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30D9;&#x30F3;&#x30CF;&#x30FC;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3002;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BF; 3 mRNA &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x8A98;&#x8D77;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x4E26;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8; T &#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; Jurkat&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8A18;&#x61B6;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Th2 &#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE; Th2 &#x504F;&#x3063;&#x3066;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x518D;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BF; 3 mRNA &#x306E;&#x534A;&#x6E1B;&#x671F;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; HuR &#x30AC;&#x30FC;&#x30BF; 3 &#x5185;&#x751F;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x30EA;&#x30DC;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;HuR &#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x304C;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x30D3;&#x30AA;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D7;&#x30EB;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x305D;&#x306E; 3&#39;UTR&#x3002;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3068;&#x5229;&#x5F97;&#x95A2;&#x6570;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1; in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;HuR &#x30AC;&#x30FC;&#x30BF; 3 mRNA &#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x8A98;&#x8D77;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BF; 3 mRNA &#x306E;&#x58F2;&#x308A;&#x4E0A;&#x3052;&#x9AD8;&#x3001;&#x4E26;&#x5217; Th2 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x63A8;&#x9032;&#x306B;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HuR &#x99C6;&#x52D5;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Th2 &#x504F;&#x5149;&#x306E; HuR &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x6DF1;&#x3081;&#x308B;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3072;&#x3068;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x5598;&#x606F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6027;&#x6C17;&#x9053;&#x708E;&#x75C7;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AC;&#x30FC;&#x30BF; 3 &#x3068; Th2 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x308B; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; HuR &#x5EA7;&#x6A19;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Posttranscriptional &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (RBPs) T &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. RBPs 3&#39; &#xB9DE;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED; (UTR) Mrna&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC874;&#xC7AC; adenylate uridylate &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; (AREs) &#xAC19;&#xC740; &#xACF5;&#xC720; &#xADDC;&#xC81C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; coordinately &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. RBP &#xD5C8; posttranscriptionally IL-4, IL-13, &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; Th2 &#xC138;&#xD3EC; &#xC81C;&#xD55C; &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xB97C; &#xADDC;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Th2 &#xD3B8;&#xAD11;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB294; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; GATA-3 &#xC720;&#xC804;&#xC790; Th2 &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xC88C;&#xD45C;&#xB294; posttranscriptional &#xADDC;&#xC815;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xB85C; &#xD5C8; &#xD1B5;&#xC81C;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC138;&#xC6E0;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; GATA 3 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC790;&#xADF9; &#xC720;&#xBC1C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xBCD1;&#xB82C;&#xB85C; restimulation &#xC778;&#xAC04; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC120; Jurkat, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xC5B5;&#xACFC; Th2 &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; murine Th2 &#xBE44;&#xC6B0;&#xB294; &#xC140; &#xD6C4; GATA 3 mRNA &#xBC18;&#xAC10;&#xAE30; &#xC99D;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD5C8; GATA 3 &#xC0DD; &#xB300; &#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; ribonucleoprotein &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; immunoprecipitation&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACE0; &#xBC1C;&#xACAC;, biotin &#xD480; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xD5C8; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; 3&#39;UTR. &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xC774;&#xB4DD; &#xD568;&#xC218; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD5C8; GATA 3 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; &#xC99D;&#xAC00; &#xC790;&#xADF9; &#xC720;&#xBC1C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; GATA 3 mRNA &#xD68C;&#xC804;&#xC728; Th2 cytokine overexpression&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC2B9;&#xACA9;&#xACFC; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xD5C8; &#xC81C;&#xC5B4; posttranscriptional &#xC81C;&#xC5B4; T &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; murine &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xD55C;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Th2 &#xD3B8;&#xAD11;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD5C8; &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xC774;&#xD574; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCC9C;&#xC2DD; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xAE30;&#xB3C4; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC5D0; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD5C8; &#xC5EC; GATA 3 &#xBC0F; Th2 &#xC0AC;&#xC774;&#xD1A0;&#xCE74;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC744; &#xC870;&#xC815;.

Los mecanismos postranscripcional por el RNA-proteinas (restrictivas) regulan la diferenciaci&oacute;n de la c&eacute;lula T todav&iacute;a no est&aacute;n claros. Pr&aacute;cticas comerciales restrictivas coordinadamente pueden regular la expresi&oacute;n de genes funcionalmente relacionados mediante la Uni&oacute;n a secuencias reguladoras compartidas, como los elementos ricos en adenilato-uridylate (AREs) presentes en la regi&oacute;n 3&#39; no traducida (UTR) de ARNm. La RBP HuR regula posttranscriptionally IL-4, IL-13 y otras Th2 restringidos celular transcripciones. Presumimos que el gen GATA son-cojinete-3, un regulador cr&iacute;tico de polarizaci&oacute;n Th2, est&aacute; bajo control de HuR como parte de su regulaci&oacute;n postranscripcional coordinar del programa Th2. Se reporta que en paralelo con el aumento inducido por el est&iacute;mulo en los niveles de mRNA y prote&iacute;na de GATA-3, vida media del mRNA de la GATA-3 se incrementa despu&eacute;s de restimulation en la l&iacute;nea de c&eacute;lulas T humanas Jurkat, en la memoria humana y las c&eacute;lulas Th2 y en c&eacute;lulas Th2 asim&eacute;tricos murinas. Nosotros demostrar por inmunoprecipitaci&oacute;n de complejos de Ribonucleoprote&iacute;na que HuR asocia la transcripci&oacute;n end&oacute;gena de la GATA-3 en c&eacute;lulas T humanas y encontramos, usando an&aacute;lisis de telecine de la biotina, que HuR interact&uacute;a espec&iacute;ficamente con sus 3&#39;UTR. Utilizando los enfoques tanto de p&eacute;rdida de funci&oacute;n y de ganar-de-funci&oacute;n in vitro y en modelos animales, mostramos que HuR es un mediador cr&iacute;tico de aumento inducido por el est&iacute;mulo en la expresi&oacute;n de mRNA y prote&iacute;na de GATA-3 y que influye positivamente en facturaci&oacute;n de mRNA de la GATA-3, en paralelo con la promoci&oacute;n selectiva de sobreexpresi&oacute;n de citoquina Th2. Estos resultados sugieren que basadas en HuR postranscripcional control juega un papel importante en funci&oacute;n de desarrollo y efectoras de la c&eacute;lula de T en los sistemas humanos y murinos. Una mejor comprensi&oacute;n de HuR mediada por el control de polarizaci&oacute;n Th2 puede tener utilidad en la alteraci&oacute;n de la inflamaci&oacute;n al&eacute;rgica de las v&iacute;as respiratorias en pacientes asm&aacute;ticos humanos.

Article	Year
The RNA binding protein HuR differentially regulates unique subsets of mRNAs in estrogen receptor negative and estrogen receptor positive breast cancer. BMC cancer\| PubMed ID: 20370918	2010
Overexpression of the RNA binding protein HuR impairs tumor growth in triple negative breast cancer associated with deficient angiogenesis. Cell cycle (Georgetown, Tex.)\| PubMed ID: 20724828	2010
Coordinate regulation of GATA-3 and Th2 cytokine gene expression by the RNA-binding protein HuR. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)\| PubMed ID: 21613615	2011

Matthew M. Gubin

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