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Isolation of Protoplasts from Tissues of 14-day-old Seedlings of <em>Arabidopsis thaliana</em>

Protoplasts are plant cells that have had their cell walls enzymatically removed. Isolation of protoplasts  from different plant tissues was first ...

Cornell University

&#x4E3A;&#x4E86;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x6D41;&#x884C;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x7684;&#x6269;&#x5C55;&#x9891;&#x8C31; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x548C;&#x9170;&#x80FA;&#x65B0;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; AmpC &beta;-&#x9176;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x9634;&#x6C9F;&#x7269;&#x79CD;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x836F;&#x654F;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x3001; pI &#x6D4B;&#x5B9A;&#x3001; &#x611F;&#x5E94;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3001; transconjugation&#x3001; &#x91C7;&#x7528;&#x91CD;&#x590D;&#x5171;&#x8BC6; (ERIC) &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3001; &#x6D4B;&#x5E8F;&#x548C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x95F4;&#x4ECE;&#x97E9;&#x56FD;&#x7684;&#x5927;&#x5B66;&#x533B;&#x9662;&#x6536;&#x96C6;&#x7684; 51 &#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x663E;&#x793A; 6 &#x682A;&#x4EA7;&#x751F;&#x9170;&#x80FA; SHV 12 &#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC; AmpC &beta;-&#x9176;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x8FD8;&#x5305;&#x62EC;&#x4E09;&#x682A;&#x751F;&#x4EA7;&#x900F;&#x5C04;&#x7535;&#x955C;-1b &#x548C;&#x643A;&#x5E26;&#x900F;&#x5C04;&#x7535;&#x955C;-1b &#x548C; CMY &#x578B; &beta;-&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x4E0E; pI 8.0 &#x7684;&#x4E00;&#x682A;&#x3002;&#x4ECE; ERIC PCR &#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x516D;&#x682A;&#x57FA;&#x56E0;&#x65E0;&#x5173;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x7684; SHV 12 &#x4F20;&#x64AD;&#x8D1F;&#x8D23;&#x6269;&#x5C55;&#x9891;&#x8C31; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x97E9;&#x56FD;&#x6297;&#x6027;&#x7684;&#x8513;&#x5EF6;&#x3002;&#x9170;&#x80FA;&#x8BF1;&#x5BFC; AmpC &beta;-&#x9176;&#x8D1F;&#x8D23; cephamycins (&#x5934;&#x5B62;&#x897F;&#x4E01;&#x548C;&#x5766;&#xFF09;&#x3001; &#x963F;&#x83AB;&#x897F;&#x6797;&#x3001; &#x8003;&#x67E5;&#x548C;&#x963F;&#x83AB;&#x897F;&#x6797;-&#x514B;&#x62C9;&#x7EF4;&#x9178;&#x6297;&#x6027;&#x7684;&#x516D;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x514B;&#x9686;&#x548C;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x542B; ampC &#x57FA;&#x56E0; 1,165 bp DNA &#x7247;&#x6BB5;&#x6D4B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709; 381 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x7F16;&#x7801;&#x5F00;&#x653E;&#x9605;&#x8BFB;&#x6846;&#x67B6;&#x3002;&#x56DB; ampC &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217; (bla(EcloK992004.1)&#x3001; bla(EcloK995120.1)&#x3001; bla(EcloK99230)&#x3001; bla(EareK9911729)) &#x5171;&#x4EAB;&#x76F8;&#x5F53;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x4E0E;&#x4EA7; AmpC &#x7C7B;&#x578B; C &#x7C7B; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9769;&#x5170;&#x9634;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; ampC &#x57FA;&#x56E0; (&#x9634;&#x6C9F;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; MHN1 bla(EcloMHN1)) (99.9&#x3001; 99.7 99.6&#xFF0C;&#x3001; 99.6%&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;)&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4EA7; ampC &#x57FA;&#x56E0;&#x5E8F;&#x5217; &#xFF08;bla(EcloK9973) &#x548C; bla(EcloK9914325)) &#x663E;&#x793A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; ampC &#x57FA;&#x56E0;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x4F3C; (E.&#x9634;&#x6C9F;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; Q908R bla(EcloQ908R)) &#xFF08;99.7%&#x8EAB;&#x4EFD;&#xFF09;&#x3002;&#x4ECE;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x5206;&#x6790;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x516D; ampC &#x57FA;&#x56E0;&#x53EF;&#x80FD;&#x6E90;&#x81EA; bla(EcloMHN1) &#x6216; bla(EcloQ908R)&#x3002;

SHV 12 &#x548C;&#x8868;&#x5F81;&#x65B0; AmpC &#x578B; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x9634;&#x6C9F;&#x7269;&#x79CD;&#x5728;&#x97E9;&#x56FD;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;

To determine the prevalence and genotype of an extended-spectrum beta-lactamase and new chromosomal AmpC beta-lactamases among clinical isolates of Enterobacter species, we performed antibiotic susceptibility testing, pI determination, induction tests, transconjugation, enterobacterial repetitive consensus (ERIC) PCR, sequencing, and phylogenetic analysis. Among the 51 clinical isolates collected from a university hospital in Korea, 6 isolates have been shown to produce SHV-12 and inducible AmpC beta-lactamases. These also included three isolates producing TEM-1b and one strain carrying TEM-1b and CMY-type beta-lactamases with a pI of 8.0. The results from ERIC PCR revealed that six isolates were genetically unrelated, suggesting that dissemination of SHV-12 was responsible for the spread of resistance to extended-spectrum beta-lactams in Korea. Six genes of inducible AmpC beta-lactamases that are responsible for the resistance to cephamycins (cefoxitin and cefotetan), amoxicillin, cephalothin, and amoxicillin-clavulanic acid were cloned and characterized. A 1,165-bp DNA fragment containing the ampC genes was sequenced and found to have an open reading frame coding for a 381-amino-acid beta-lactamase. The nucleotide sequence of four ampC genes (bla(EcloK992004.1), bla(EcloK995120.1), bla(EcloK99230), and bla(EareK9911729)) shared considerable homology with that of AmpC-type class C beta-lactamase genes of gram-negative bacteria, especially that of the chromosomal ampC gene (bla(EcloMHN1)) of Enterobacter cloacae MHN1 (99.9, 99.7, 99.6, and 99.6% identity, respectively). The sequences of two ampC genes (bla(EcloK9973) and bla(EcloK9914325)) showed close similarity to the chromosomal ampC gene (bla(EcloQ908R)) of E. cloacae Q908R (99.7% identity). The results from phylogenetic analysis suggested that six ampC genes could originate from bla(EcloMHN1) or bla(EcloQ908R).

Dissemination of SHV-12 and characterization of new AmpC-type beta-lactamase genes among clinical isolates of enterobacter species in Korea.

Pour d&eacute;terminer la pr&eacute;valence et le g&eacute;notype d&#39;une b&ecirc;ta-lactamase &agrave; spectre &eacute;tendu et nouveau chromosomiques AmpC b&ecirc;ta-lactamases chez les isolats cliniques d&#39;esp&egrave;ces Enterobacter, nous avons r&eacute;alis&eacute; l&#39;antibiogramme, d&eacute;termination de pI, essais d&#39;induction transconjugation, ent&eacute;robact&eacute;rie consensus r&eacute;p&eacute;titif (ERIC) PCR, s&eacute;quen&ccedil;age et analyse phylog&eacute;n&eacute;tique. Parmi les 51 isolats cliniques pr&eacute;lev&eacute;s dans un h&ocirc;pital universitaire en Cor&eacute;e, 6 isolats ont d&eacute;montr&eacute; que produit SHV-12 et inductibles par les b&ecirc;ta-lactamases AmpC. Il s&#39;agissait &eacute;galement trois isolats produisant des TEM-1 b et une souche TEM-1 b et les b&ecirc;ta-lactamases CMY-type avec un pI de 8.0. Les r&eacute;sultats de ERIC PCR a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que six isolats ont &eacute;t&eacute; g&eacute;n&eacute;tiquement diff&eacute;rent, ce qui sugg&egrave;re que la diffusion de SHV-12 &eacute;tait responsable de la propagation de la r&eacute;sistance aux b&ecirc;ta-lactamines &agrave; spectre &eacute;tendu en Cor&eacute;e. Six g&egrave;nes inductibles par b&ecirc;ta-lactamases de l&#39;AmpC qui sont responsables de la r&eacute;sistance &agrave; l&#39;acide clavulanique, amoxicilline et c&eacute;phalothine c&eacute;phamycines (c&eacute;foxitine et c&eacute;fot&eacute;tan), ont &eacute;t&eacute; clon&eacute;s et caract&eacute;ris&eacute;s. Un fragment d&#39;ADN de 1 165 PB contenant les g&egrave;nes ampC a &eacute;t&eacute; s&eacute;quenc&eacute; et av&eacute;r&eacute; &ecirc;tre un cadre de lecture ouvert codant pour une b&ecirc;ta-lactamase 381 acides amin&eacute;s. La s&eacute;quence nucl&eacute;otidique de quatre g&egrave;nes ampC (bla(EcloK992004.1), bla(EcloK995120.1), bla(EcloK99230) et bla(EareK9911729)) partag&eacute; une forte homologie avec celui des g&egrave;nes de b&ecirc;ta-lactamases de classe C de type AmpC des bact&eacute;ries &agrave; Gram n&eacute;gatif, en particulier celui du g&egrave;ne chromosomique ampC (bla(EcloMHN1)) de Enterobacter cloacae MHN1 (99,9, 99,7 99,6 et identit&eacute; de 99,6 %, respectivement). Les s&eacute;quences de deux g&egrave;nes ampC (bla(EcloK9973) et bla(EcloK9914325)) ont montr&eacute; la grande similitude avec le g&egrave;ne chromosomique ampC (bla(EcloQ908R)) de l&#39;e Q908R (99,7 % d&#39;identit&eacute;). Les r&eacute;sultats de l&#39;analyse phylog&eacute;n&eacute;tique sugg&egrave;rent que six g&egrave;nes ampC pourraient provenir de bla(EcloMHN1) ou bla(EcloQ908R).

Diffusion de SHV-12 et la caract&eacute;risation de nouveaux g&egrave;nes de b&ecirc;ta-lactamase de type AmpC parmi les isolats cliniques d&#39;esp&egrave;ces enterobacter en Cor&eacute;e.

Die Verbreitung von SHV-12 und Charakterisierung neuer AmpC-Typ Beta-Lactamase-Genen unter klinischen Isolaten von Enterobacter-Spezies in Korea.

Per determinare la prevalenza e il genotipo di un esteso-spettro beta-lattamasi e nuovi cromosomiche AmpC beta-lattamasi tra gli isolati clinici di specie Enterobacter, abbiamo eseguito test di suscettibilit&agrave; agli antibiotici, pI determinazione, prove di induzione, transconjugation, enterobacterial repetitive consenso (ERIC) PCR, sequenziamento e analisi filogenetica. Tra i 51 isolati clinici raccolti da un ospedale universitario in Corea, 6 isolati hanno dimostrati di produrre SHV-12 e viscoelastico AmpC beta-lattamasi. Tra questi anche tre isolati producendo uno sforzo trasportando TEM-1b e CMY-tipo beta-lattamasi con un pI di 8.0 e TEM-1b. I risultati da ERIC PCR ha rivelato che sei isolati sono stati geneticamente non correlati, suggerendo che la diffusione di SHV-12 fosse responsabile per la diffusione della resistenza di esteso-spettro beta-lattami in Corea. Sei geni di AmpC inducibile beta-lattamasi che sono responsabili della resistenza a cephamycins (Cefoxitina e cefotetan), amoxicillina, amoxicillina-clavulanico e cephalothin acido sono stati clonati e caratterizzate. Un frammento di DNA di 1.165-bp contenente i geni ampC &egrave; stato sequenziato e trovato per avere un open reading frame che codifica per una 381-amino-acido beta-lattamasi. La sequenza nucleotidica di quattro geni ampC (bla(EcloK992004.1), bla(EcloK995120.1), bla(EcloK99230) e bla(EareK9911729)) condiviso una notevole omologia con quella dei geni di beta-lattamasi AmpC-tipo classe C di batteri Gram-negativi, soprattutto quella del gene cromosomico ampC (bla(EcloMHN1)) di Enterobacter cloacae MHN1 (99,9, 99.7, 99,6 e identit&agrave; 99,6%, rispettivamente). Le sequenze di due geni ampC (bla(EcloK9973) e bla(EcloK9914325)) hanno mostrato la stretta somiglianza con il gene cromosomico ampC (bla(EcloQ908R)) di E. cloacae Q908R (99,7% identit&agrave;). I risultati di analisi filogenetica ha suggerito che sei geni ampC potrebbero provengono da bla(EcloMHN1) o bla(EcloQ908R).

Diffusione di SHV-12 e caratterizzazione di nuovi geni di beta-lattamasi AmpC-tipo tra isolati clinici di specie enterobacter in Corea.

&#x6709;&#x75C5;&#x7387;&#x3068;&#x3092;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &beta; &#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; AmpC &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5C5E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;pI &#x5B9A;&#x91CF;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;transconjugation&#x3001;&#x8178;&#x5185;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x53CD;&#x5FA9;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9; (&#x30A8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;) PCR&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CFB;&#x7D71;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x97D3;&#x56FD;&#x306E;&#x5927;&#x5B66;&#x75C5;&#x9662;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x96C6;&#x3057;&#x305F;&#x81E8;&#x5E8A; 51 &#x83CC;&#x682A;&#x9593;&#x3067; 6 &#x83CC;&#x682A;&#x306F; SHV 12 &#x53CA;&#x3073;&#x8A98;&#x5C0E; AmpC &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x3082; TEM 1b &#x3068; 1 &#x3064;&#x306E;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x3092; TEM 1b &#x3068; CMY &#x578B; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC; 8.0 pi &#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x306E;&#x751F;&#x7523; 3 &#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3002;&#x30A8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; PCR &#x306E;&#x7D50;&#x679C; 6 &#x83CC;&#x682A;&#x304C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x666E;&#x53CA; SHV 12 &#x306E;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x97D3;&#x56FD;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8A98;&#x5C0E; AmpC &beta; - cephamycins &#xFF08;&#x30B7;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068; cefotetan&#xFF09;&#x3001;&#x30A2;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x30A2;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3; &#x30FB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30D6;&#x30E9;&#x30F3;&#x9178;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x7279;&#x5FB4;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;AmpC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3080; 1,165 bp &#x306E; DNA &#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3057;&#x3001;381 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;4 AmpC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5869;&#x57FA;&#x914D;&#x5217; (bla(EcloK992004.1)&#x3001;bla(EcloK995120.1)&#x3001;bla(EcloK99230)&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; bla(EareK9911729)) &#x5171;&#x6709;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x3068; AmpC &#x578B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7279;&#x306B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; ampC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3053;&#x3068; (&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; cloacae MHN1 &#x306E; bla(EcloMHN1)) &#xFF08;99.9&#x3001;99.7&#x3001;99.6&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 99.6 &#xFF05; &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;)&#x3002;2 &#x3064;&#x306E; ampC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; (bla(EcloK9973) &#x3068; bla(EcloK9914325)) &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; ampC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027; (E. cloacae Q908R &#x306E; bla(EcloQ908R)) &#xFF08;99.7% &#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#xFF09;&#x3002;&#x516D;&#x3064;&#x306E; ampC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C; bla(EcloMHN1) &#x307E;&#x305F;&#x306F; bla(EcloQ908R) &#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x3089;&#x7CFB;&#x7D71;&#x89E3;&#x6790;&#x304B;&#x3089;&#x793A;&#x5506;&#x3002;

SHV 12 &#x3068;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; AmpC &#x578B; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x97D3;&#x56FD;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5C5E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x3002;

&#xC815;&#xB3C4;&#xC640; &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C;&#xC640; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; AmpC &#xBCA0;&#xD0C0;-lactamases Enterobacter &#xC885;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC911; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD615;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xC790;&#xD654; &#xC728; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;, pI, &#xC720;&#xB3C4; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;, transconjugation, enterobacterial &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC778; &#xD569;&#xC758; (&#xC5D0;&#xB9AD;) PCR, &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xACB0;&#xC815;&#xACFC; phylogenetic &#xBD84;&#xC11D; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD55C;&#xAD6D;&#xC5D0; &#xB300;&#xD559; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1;&#xD55C; 51 &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC911; 6 &#xACA9;&#xB9AC; SHV-12&#xC640; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; AmpC &#xBCA0;&#xD0C0; lactamases &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB4E4;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xD3B8;-1b&#xC640; &#xD55C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xB4E4;&#xACE0; &#xD3B8;-1b&#xC640; CMY &#xD615; &#xBCA0;&#xD0C0;-lactamases 8.0&#xC758; Pi&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0DD;&#xC0B0; 3 &#xACA9;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xD568;. &#xC5D0;&#xB9AD; PCR&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC1C;&#xD45C; 6 &#xACA9;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAD00;&#xB828; SHV-12&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBCA0;&#xD0C0;-lactams &#xD55C;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC758; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC740; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; AmpC &#xBCA0;&#xD0C0;-lactamases cephamycins (cefoxitin&#xACFC; cefotetan) amoxicillin, cephalothin, &#xBC0F; amoxicillin clavulanic &#xC0B0;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294;&#xC758; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. AmpC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; 1165 bp DNA &#xC870;&#xAC01;&#xC740; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; 381 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC131; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCF54;&#xB529; &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. 4 &#xAC1C;&#xC758; ampC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5FC;&#xAE30; &#xC21C;&#xC11C; (bla(EcloK992004.1), bla(EcloK995120.1), bla(EcloK99230), &#xBC0F; bla(EareK9911729)) &#xACF5;&#xC720; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; homology &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; AmpC &#xD615; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8; &#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; ampC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758;&#xB294; &#xD2B9;&#xD788; (Enterobacter cloacae MHN1 bla(EcloMHN1)) (99.9, 99.7, 99.6, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 99.6% &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;, &#xAC01;&#xAC01;). &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; ampC &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; (bla(EcloK9973) &#xBC0F; bla(EcloK9914325)) &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; ampC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4; (E. cloacae Q908R bla(EcloQ908R)) (99.7% &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;). Phylogenetic &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; 6 &#xAC1C;&#xC758; ampC &#xC720;&#xC804;&#xC790; bla(EcloMHN1) &#xB610;&#xB294; bla(ecloq908r)&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;.

SHV-12 &#xD55C;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; enterobacter &#xC885;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC911; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; AmpC &#xD615; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8; &#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09;.

Para determinar la prevalencia y el genotipo de un beta-lactamasas de espectro extendido y nuevos cromos&oacute;micas AmpC beta-lactamasas entre los aislados cl&iacute;nicos de especies de Enterobacter, realizamos pruebas de sensibilidad a los antibi&oacute;ticos, determinaci&oacute;n de pI, pruebas de inducci&oacute;n, transconjugation, enterobacterianas consenso repetitivo (ERIC) PCR, secuenciaci&oacute;n y an&aacute;lisis filogen&eacute;tico. Entre los 51 aislamientos cl&iacute;nicos recogidos de un hospital de la Universidad de Corea, 6 aislamientos han demostrado producir SHV-12 e inducible AmpC beta-lactamasas. Estos tambi&eacute;n incluyen tres aislamientos producir TEM-1b y una cepa TEM-1b y CMY-tipo beta-lactamasas con un pI de 8.0. Los resultados de ERIC PCR revelaron que seis aislantes eran gen&eacute;ticamente no emparentados, sugiriendo que la difusi&oacute;n de SHV-12 era responsable de la propagaci&oacute;n de la resistencia a beta-lact&aacute;micos de espectro extendido en Corea. Seis genes de AmpC beta-lactamasas inducibles que son responsables de la resistencia a la klebsiella (cefoxitina y cefotet&aacute;n), cefalotina, amoxicilina y amoxicilina-clavul&aacute;nico &aacute;cido fueron clonados y caracterizados. Un fragmento de ADN de 1.165-bp que contiene los genes de ampC fue secuenciado y encontrado para tener un marco de lectura abierto que codifica una beta-lactamasa de 381 amino&aacute;cidos. La secuencia de nucle&oacute;tido de cuatro genes de ampC (bla(EcloK992004.1), bla(EcloK995120.1), bla(EcloK99230) y bla(EareK9911729)) compartidos considerable homolog&iacute;a con eso de los genes de beta-lactamasa AmpC-tipo clase C de bacterias Gram-negativas, especialmente la del gen ampC cromos&oacute;mico (bla(EcloMHN1)) de Enterobacter cloacae MHN1 (99.9, 99.7, 99.6 e identidad de 99,6%, respectivamente). Las secuencias de dos genes de ampC (bla(EcloK9973) y bla(EcloK9914325)) demostraron una semejanza cercana al gen ampC cromos&oacute;mico (bla(EcloQ908R)) de Q908R de E. cloacae (99,7% de identidad). Los resultados de los an&aacute;lisis filogen&eacute;ticos sugieren que seis genes de ampC podr&iacute;an originar de bla(EcloMHN1) o bla(EcloQ908R).

Difusi&oacute;n de SHV-12 y caracterizaci&oacute;n de nuevos genes de beta-lactamasa AmpC-tipo entre aislados cl&iacute;nicos de especies de enterobacter en Corea.

&#x4ECE; Chonnam &#x7701;&#xFF0C;&#x97E9;&#x56FD;&#x7684;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x9E2D;&#x820C;&#x9634;&#x9053;&#x6EF4;&#x866B; Pres1 &#x52A0;&#x5165;&#x6297;&#x78FA;&#x9170;&#x8132;&#x7C7B;&#x9664;&#x8349;&#x5242;&#xFF0C;imazosulfuron&#xFF0C;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x690D;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x786E;&#x8BA4;&#x6240;&#x6709;&#x52A0;&#x5165;&#x4E86;&#x8010;&#x836F; (R) &#x5230; imazosulfuron&#x3002;(Imazosulfuron &#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x5C04;&#x5E72;&#x91CD; 50%) &#x7684; GR50 &#x503C; R &#x52A0;&#x5165;&#x4E86; 1112&#x5E74;-3172 &#xFF08;&#x52A0;&#x5165; #9) &#x500D;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x6807;&#x51C6;&#x6613; (S) &#x52A0;&#x5165;&#x3002;&#x52A0;&#x5165; #9 &#x5C55;&#x51FA;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x78FA;&#x9170;&#x8132;&#x7C7B;&#x9664;&#x8349;&#x5242;&#x3001; &#x5627;&#x78FA;&#x9686;&#x3001; cyclosulfamuron&#x3001; &#x5421;&#x5627;&#x78FA;&#x9686;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x5549;&#x916E;&#x7C7B;&#x9664;&#x8349;&#x5242;&#x3001; &#x54AA;&#x5511;&#x70DF;&#x9178;&#x548C; imazaquin &#x7684;&#x6297;&#x6027;&#x3002;R &#x578B;&#x53EF;&#x7531;&#x5176;&#x4ED6;&#x9664;&#x8349;&#x5242;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x64CD;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x82EF;&#x567B;&#x8349;&#x80FA;&#x53CA;&#x5421;&#x5511;&#x7279;&#xFF0C;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x571F;&#x58E4;&#x5728;&#x63A8;&#x8350;&#x7387;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;Foliar &#x5E94;&#x7528;&#x9664;&#x8349;&#x5242;&#xFF0C;4-d &#x548C;&#x706D;&#x8349;&#x677E;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x63A7;&#x5236;&#x751F;&#x7269;&#x7684; R &#x548C; S &#x578B;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x78FA;&#x9170;&#x8132;&#x7C7B;&#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x9664; ethoxysulfuron &#x52A0;&#x9632;&#x9664;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E0D;&#x63A7;&#x5236;&#x8010; M.&#x9634;&#x9053;&#x3002;&#x6C34;&#x7A3B;&#x4EA7;&#x91CF;&#x662F;&#x7531;&#x8F6C;&#x4E49;&#x5421;&#x5627;&#x52A0;&#x79BE;&#x8349;&#x654C;&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x624B;&#x9664;&#x8349;&#x76F4;&#x64AD;&#x7A3B;&#x4F5C;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x8010; M.&#x9634;&#x9053;&#x6EF4;&#x866B;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684; 70%&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6C34;&#x7A3B;&#x4EA7;&#x91CF;&#x662F;&#x7531;&#x5E78;&#x5B58;&#x5421;&#x5627;&#x52A0;&#x79BE;&#x8349;&#x654C;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5421;&#x5511;&#x7279;&#x52A0;&#x4E01;&#x8349;&#x80FA;&#x5728;&#x79E7;&#x7684;&#x7A3B;&#x6587;&#x5316;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7684;&#x8010; M.&#x9634;&#x9053;&#x6EF4;&#x866B;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684; 44%&#x3002;R &#x578B;&#x4F53;&#x5916;&#x6807;&#x4E59;&#x9170;&#x4E73;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x9176; &#xFF08;ALS&#xFF09; &#x6D3B;&#x52A8;&#x662F; 183&#xFF0C;35&#x3001; 130 &#x548C; 31 &#x500D;&#x66F4;&#x8010; imazosulfuron&#x3001; &#x5627;&#x78FA;&#x9686;&#x3001; cyclosulfamuron&#x3001; &#x5421;&#x5627;&#x78FA;&#x9686;-&#x4E59;&#x57FA;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x6BD4; S &#x578B;&#x3002;&#x5549;&#x916E;&#x7C7B;&#x9664;&#x8349;&#x5242;&#x3001; &#x54AA;&#x5511;&#x70DF;&#x9178;&#x548C; imazaquin &#x4E86;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684; ALS &#x4F53;&#x5916;&#x7684; R &#x548C; S &#x751F;&#x7269;&#x578B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x6BD4; S &#x578B;&#x8F83;&#x5C11;&#x53D7;&#x5230;&#x4E0E;&#x5421;&#x5627;&#x78FA;&#x9170;&#x8132;&#x7C7B;&#x9664;&#x8349;&#x5242; imazosulfuron R &#x578B;&#x7684;&#x4F53;&#x5185; ALS &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185; ALS &#x5316;&#x9A8C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8010;&#x836F;&#x673A;&#x5236;&#x5BF9;&#x78FA;&#x9170;&#x8132;&#x7C7B;&#x9664;&#x8349;&#x5242; M.&#x9634;&#x9053;&#x6EF4;&#x866B;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x539F;&#x56E0;&#xFF0C;&#x6539;&#x53D8;&#x9776;&#x6807;&#x9176;&#xFF0C;ALS&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x8010;&#x836F;&#x9176;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x8FDC;&#x8FDC;&#x4F4E;&#x4E8E;&#x6574;&#x5382;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x6D89;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x53CD;&#x6297;&#xFF0C;&#x5982;&#x9664;&#x8349;&#x5242;&#x4EE3;&#x8C22;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x78FA;&#x9170;&#x8132;&#x7C7B;&#x9664;&#x8349;&#x5242;&#x6297;&#x6027;&#x9E2D;&#x820C;&#x5728;&#x97E9;&#x56FD;&#x6C34;&#x7A3B;&#x683D;&#x57F9;&#x3002;

Nine Monochoria vaginalis Pres1 accessions from Chonnam province, Korea were tested for resistance to the sulfonylurea herbicide, imazosulfuron, in whole-plant response bioassay. All accessions were confirmed resistant (R) to imazosulfuron. The GR50 (imazosulfuron concentration that reduced shoot dry weight by 50%) values of R accessions were 1112-3172 (accession #9) times higher than that of the standard susceptible (S) accession. Accession #9 exhibited cross-resistance to other sulfonylurea herbicides, bensulfuron-methyl, cyclosulfamuron and pyrazosulfuron-ethyl, but not to the imidazolinone herbicides, imazapyr and imazaquin. The R biotype could be controlled by other herbicides with different modes of action, such as mefenacet and pyrazolate, applied to soil at recommended rates. Foliar-applied herbicides, 2,4-D and bentazone, also controlled both the R and S biotypes. Sulfonylurea-based mixtures, except ethoxysulfuron plus fentrazamide, did not control resistant M. vaginalis. Rice yield was reduced 70% by resistant M. vaginalis that escaped pyrazosulfuron-ethyl plus molinate, compared with hand weeding in direct-seeded rice culture. In contrast, rice yield was reduced 44% by resistant M. vaginalis that survived the pyrazosulfuron-ethyl plus molinate treatment, compared with pyrazolate plus butachlor in transplanted rice culture. In vitro acetolactate synthase (ALS) activity of the R biotype was 183, 35, 130 and 31 times more resistant to imazosulfuron, bensulfuron-methyl, cyclosulfamuron and pyrazosulfuron-ethyl, respectively, than the S biotype. Imidazolinone herbicides, imazapyr and imazaquin had similar effect on in vitro ALS activity of the R and S biotypes. The in vivo ALS activity of the R biotype was also less affected than the S biotype by the sulfonylurea herbicides imazosulfuron and pyrazosulfuron-ethyl. Results of in vitro and in vivo ALS assays indicate that the resistance mechanism of M. vaginalis to sulfonylurea herbicides may be due, in part, to an alteration in the target enzyme, ALS. Since the level of resistance in the enzyme assay was much lower than that in the whole-plant assay, other mechanisms of resistance, such as herbicide metabolism, may be involved.

Sulfonylurea herbicide-resistant Monochoria vaginalis in Korean rice culture.

Neuf Monochoria vaginalis Pres1 accessions provenant de la province de Chonnam, Cor&eacute;e ont &eacute;t&eacute; test&eacute;es pour leur r&eacute;sistance &agrave; l&#39;herbicide sulfonylur&eacute;e, imazosulfuron, en bio-essai de r&eacute;ponse de la plante enti&egrave;re. Toutes les accessions ont &eacute;t&eacute; confirm&eacute;es r&eacute;sistante (R) &agrave; imazosulfuron. Le GR50 (concentration imazosulfuron qui r&eacute;duit tirer le poids sec de 50 %) les valeurs d&#39;adh&eacute;sions R &eacute;taient 1112-3172 (adh&eacute;sion #9) fois sup&eacute;rieures &agrave; celle de l&#39;adh&eacute;sion standard de (S) sensible. Adh&eacute;sion #9 pr&eacute;sentaient une r&eacute;sistance crois&eacute;e &agrave; d&#39;autres herbicides de type sulfonylur&eacute;es, les bensulfuron-m&eacute;thyl, les cyclosulfamuron et les pyrazosulfuron-&eacute;thyl, mais non aux herbicides &agrave; l&#39;imidazolinone, imazapyr et imazaquine. Le biotype R pourrait d&eacute;pendre d&#39;autres herbicides avec diff&eacute;rents modes d&#39;action, tels que mefenacet et pyrazolate, appliqu&eacute;s au sol, aux doses recommand&eacute;es. Herbicides appliqu&eacute;s Foliar, 2, 4-D et le bentazone, contr&ocirc;lait aussi les biotypes fois le R et S. M&eacute;langes &agrave; base de sulfonylur&eacute;e, sauf l&#39;&eacute;thoxylsulfuron et fentrazamide, n&#39;ont pas contr&ocirc;le r&eacute;sistant M. vaginalis. Rendement en riz a &eacute;t&eacute; r&eacute;duite de 70 % de r&eacute;sistants vaginalis M. &eacute;chapp&eacute; pyrazosulfuron-&eacute;thyl et molinate, compar&eacute; avec le d&eacute;sherbage dans la culture du riz sem&eacute;s directement. En revanche, rendement en riz a &eacute;t&eacute; r&eacute;duite de 44 % par vaginalis de M. r&eacute;sistants qui ont surv&eacute;cu au traitement pyrazosulfuron-&eacute;thyl et molinate, compar&eacute; avec pyrazolate plus butachlor dans la culture du riz transplant&eacute;es. L&#39;activit&eacute; in vitro ac&eacute;tolactate synthase (ALS) du biotype R a 183, 35, 130 et 31 fois plus r&eacute;sistantes &agrave; l&#39;imazosulfuron, bensulfuron-m&eacute;thyl, cyclosulfamuron et pyrazosulfuron-&eacute;thyl, respectivement, que le biotype de S. Imazaquine, imazapyr et l&#39;Imidazolinone herbicides avaient un effet similaire sur l&#39;activit&eacute; in vitro de ALS de biotypes R et S. L&#39;activit&eacute; in vivo d&#39;ALS du biotype R &eacute;tait &eacute;galement moins touch&eacute;e que le biotype S sulfonylurea herbicides imazosulfuron et pyrazosulfuron-&eacute;thyl. R&eacute;sultats des tests de ALS in vitro et in vivo indiquent que le m&eacute;canisme de r&eacute;sistance de M. vaginalis aux herbicides de type sulfonylur&eacute;es peut &ecirc;tre due, en partie, &agrave; une alt&eacute;ration de l&#39;enzyme cible, ALS. &Eacute;tant donn&eacute; que le niveau de r&eacute;sistance dans le dosage de l&#39;enzyme a &eacute;t&eacute; beaucoup plus faible que dans l&#39;essai de la plante enti&egrave;re, les autres m&eacute;canismes de r&eacute;sistance, comme le m&eacute;tabolisme de l&#39;herbicide, peuvent &ecirc;tre impliqu&eacute;s.

Sulfonylur&eacute;e r&eacute;sistant aux herbicides Monochoria vaginalis dans la culture de riz cor&eacute;en.

Sulfonylharnstoff-Herbizid-resistente Monochoria vaginalis in der koreanischen Kultur Reis.

Nove Monochoria vaginalis Pres1 adesioni dalla provincia di Chonnam, Corea sono state testate per la resistenza all&#39;erbicida sulfonylurea, imazosulfuron, nell&#39;analisi biologica pianta intera risposta. Tutte le adesioni sono state confermate resistente (R) a imazosulfuron. GR50 (concentrazione di imazosulfuron ridotto sparare peso a secco del 50%) i valori di adesioni R erano 1112-3172 (adesione #9) volte superiore a quello dell&#39;adesione sensibile standard (S). Adesione #9 esposto resistenza crociata ad altri erbicidi sulfonylurea, bensulfuron-metile, cyclosulfamuron e pyrazosulfuron-etile, ma non al 7.9 erbicidi, imazapyr e imazaquin. Il biotipo R potrebbe essere controllato da altri erbicidi con diverse modalit&agrave; di azione, ad esempio mefenacet e pyrazolate, applicato al suolo a tariffe raccomandate. Applicato foliar erbicidi 2,4-D e bentazone, controllato anche biotipi R ed S. Miscele base sulfonylurea, tranne l&#39;etossisulfuron plus fentrazamide, fatto non controllo resistente M. vaginalis. Rendimento di riso era ridotto 70% da resistente M. vaginalis che sfuggito pyrazosulfuron etile plus molinate, confrontato con mano diserbo nella cultura diretta-seminato riso. Al contrario, rendimento di riso &egrave; stato ridotto 44% da resistente M. vaginalis che &egrave; sopravvissuto il trattamento pyrazosulfuron-etile plus molinate, confrontato con pyrazolate plus butachlor nella coltura del riso trapiantato. In vitro acetolattato sintasi (ALS) attivit&agrave; del biotipo R era 183, 35, 130 e 31 volte pi&ugrave; resistente di imazosulfuron, bensulfuron-metile, cyclosulfamuron e pyrazosulfuron-etile, rispettivamente, che il biotipo di S. Imazaquin, imazapyr e diserbanti 7.9 aveva effetto simile su attivit&agrave; ALS in vitro dei biotipi di R ed S. L&#39;attivit&agrave; di ALS in vivo del biotipo R era anche meno colpita rispetto al biotipo S dal sulfonylurea erbicidi imazosulfuron e pyrazosulfuron-etile. I risultati dei dosaggi ALS in vitro e in vivo indicano che il meccanismo di resistenza di M. vaginalis agli erbicidi sulfonylurea pu&ograve; essere dovuto, in parte, a un&#39;alterazione dell&#39;enzima bersaglio, ALS. Poich&eacute; il livello di resistenza nel dosaggio enzimatico era molto inferiore rispetto a quella del dosaggio di tutta la pianta, possono essere coinvolti altri meccanismi di resistenza, come il metabolismo di erbicida.

Sulfonylurea resistenti agli erbicidi Monochoria vaginalis nella cultura coreana riso.

&#x5168;&#x5357;&#x5927;&#x5B66;&#x6821;&#x7701;&#x3001;&#x97D3;&#x56FD;&#x304B;&#x3089; 9 &#x30B3;&#x30CA;&#x30AE; &#x30B3;&#x30CA;&#x30AE; &#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3; 1 &#x7CFB;&#x7D71;&#x30A4;&#x30DE;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB; &#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x500B;&#x4F53;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#x7CFB;&#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30DE;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB; &#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x8010;&#x6027; (R)&#x3002;&#xFF08;&#x6E1B;&#x5C11;&#x30A4;&#x30DE;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB; &#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F; 50 &#xFF05; &#x3067;&#x4E7E;&#x71E5;&#x91CD;&#x91CF;&#x3092;&#x6483;&#x3064;&#xFF09; GR50 R &#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x5024; 1112&#x5E74;-3172 &#xFF08;&#x52A0;&#x76DF; #9) &#x56DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x6A19;&#x6E96;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044; &#xFF08;S&#xFF09; &#x52A0;&#x76DF;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x52A0;&#x76DF; #9 &#x4EA4;&#x5DEE;&#x8010;&#x6027;&#x4ED6;&#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#x7CFB;&#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x3001;cyclosulfamuron&#x3001;&#x30D4;&#x30E9;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x304C; imidazolinone &#x306E;&#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x3001;imazapyr &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30DE;&#x30B6;&#x30AD;&#x30F3;&#x306B;&#x51FA;&#x5C55;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;R &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x4ED6;&#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x30E1;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CA; &#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x30D4;&#x30E9;&#x30BE;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x63A8;&#x5968;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x571F;&#x58CC;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3067;&#x5236;&#x5FA1;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8449;&#x9762;&#x6563;&#x5E03;&#x5264;&#x9069;&#x7528;&#x9664;&#x8349;&#x5264;, 4-d &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D9;&#x30F3;&#x30BF;&#x30BE;&#x30F3;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; R &#x3068; S &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x5236;&#x5FA1;&#x3002;&#x30A8;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B9;&#x30EB; &#x30D5;&#x30ED;&#x30F3; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9; &#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B6;&#x30DF;&#x30C9;&#x3001;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#x7CFB;&#x6DF7;&#x5408;&#x306A;&#x3044;&#x5236;&#x5FA1;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x30B3;&#x30CA;&#x30AE;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6C34;&#x7A32;&#x53CE;&#x91CF;&#x30D4;&#x30E9;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x624B;&#x76F4;&#x64AD;&#x683D;&#x57F9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9664;&#x8349;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x30E2;&#x30EA;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8; &#x30A8;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D7;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x30B3;&#x30CA;&#x30AE;&#x524A;&#x6E1B; 70 &#xFF05; &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x6C34;&#x7A32;&#x53CE;&#x91CF;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x3063;&#x305F;&#x30D4;&#x30E9;&#x30BE;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9; &#x30D6;&#x30BF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x79FB;&#x690D;&#x6C34;&#x7A32;&#x683D;&#x57F9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x30D4;&#x30E9;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9; &#x30E2;&#x30EA;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#x6CBB;&#x7642;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x30B3;&#x30CA;&#x30AE;&#x3067; 44 &#xFF05; &#x304C;&#x524A;&#x6E1B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;In vitro &#x3067;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C8;&#x4E73;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20; (ALS) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3; R &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x3042;&#x3063;&#x305F; 183&#x3001;35&#x3001;130&#x3001;31 &#x56DE;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C; S &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3088;&#x308A;&#x30A4;&#x30DE;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB; &#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;, &#x30D9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x3001;cyclosulfamuron&#x3001;&#x30D4;&#x30E9;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x3001;&#x62B5;&#x6297;&#x529B;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Imidazolinone &#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x3001;imazapyr &#x30A4;&#x30DE;&#x30B6;&#x30AD;&#x30F3; R &#x3068; S &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E; in vitro ALS &#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;R &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E; in vivo &#x306E; ALS &#x6D3B;&#x6027;&#x3082;&#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#x7CFB;&#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x30A4;&#x30DE;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB; &#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x30D4;&#x30E9;&#x30BE;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; S &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;.In vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vivo &#x306E; ALS &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30CA;&#x30AE; &#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#x7CFB;&#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x6A5F;&#x69CB;&#x304C;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3001;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;ALS &#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9175;&#x7D20;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C8; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x6A5F;&#x69CB;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#x7CFB;&#x9664;&#x8349;&#x5264;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x30B3;&#x30CA;&#x30AE;&#x97D3;&#x56FD;&#x306E;&#x7A32;&#x4F5C;&#x3002;

&#xC804;&#xB0A8;&#xB3C4;, &#xD55C;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; 9 &#xAC1C;&#xC758; Monochoria vaginalis Pres1 accessions sulfonylurea &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C;, &#xC804;&#xCCB4; &#xACF5;&#xC7A5; &#xC751;&#xB2F5; bioassay&#xC758; imazosulfuron&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; accessions &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; imazosulfuron&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; (R). (&#xAC10;&#xC18C; imazosulfuron &#xB18D;&#xB3C4; 50% &#xAC74;&#xC870; &#xC911;&#xB7C9; &#xCD2C;&#xC601;) GR50 R accessions&#xC758; &#xAC12;&#xC740; 1112-3172 (&#xC99D;&#xAC00; #9) &#xBC88; &#xD45C;&#xC900; &#xCDE8;&#xC57D; (S) &#xC7AC;&#xC0B0; &#xAC00;&#xCE58; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB192;&#xC740;. &#xC7AC;&#xC0B0; &#xAC00;&#xCE58; #9 cross-resistance imidazolinone &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C;, imazapyr &#xBC0F; imazaquin &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB978; sulfonylurea &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C;, bensulfuron-&#xBA54; &#xD2F8;, cyclosulfamuron &#xBC0F; pyrazosulfuron-&#xC5D0;&#xD2F8;&#xC5D0; &#xC804;&#xC2DC;. R biotype &#xC561;&#xC158;, mefenacet, pyrazolate, &#xAD8C;&#xC7A5; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xD1A0;&#xC591;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB4F1;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Foliar &#xC801;&#xC6A9; &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C;, 2, 4-D&#xC640; bentazone, R &#xBC0F; S biotypes &#xC81C;&#xC5B4;. Ethoxysulfuron &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; fentrazamide&#xB97C; &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; sulfonylurea &#xAE30;&#xBC18; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C; M. vaginalis&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC300; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xB7C9; pyrazosulfuron-&#xC5D0;&#xD2F8; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; molinate, &#xC190;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC528;&#xC557;&#xC744; &#xD488;&#xACE0; &#xC300; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A1; &#xCD08;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD0C8;&#xCD9C; &#xBC29;&#xC9C0; M. vaginalis &#xD558; &#xC5EC; 70% &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC300; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xB7C9; pyrazolate &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; &#xC300; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; butachlor&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; pyrazosulfuron-&#xC5D0;&#xD2F8; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; molinate &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC740; &#xB0B4;&#xC131; M. vaginalis &#xC5EC; 44% &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. R biotype&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; acetolactate synthase (ALS) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; 183, 35, 130&#xACFC; 31 &#xBC88; S biotype &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAC01;&#xAC01; imazosulfuron, bensulfuron-&#xBA54; &#xD2F8;, cyclosulfamuron &#xBC0F; pyrazosulfuron-&#xC5D0;&#xD2F8;&#xC5D0; &#xB354; &#xAC15; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Imidazolinone &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C;, imazapyr &#xBC0F; imazaquin R &#xBC0F; S biotypes&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB8E8; &#xAC8C; &#xB9AD; &#xBCD1; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCCE4;&#xB2E4;. R biotype&#xC758; in vivo ALS &#xD65C;&#xB3D9; &#xB610;&#xD55C; sulfonylurea &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C; imazosulfuron pyrazosulfuron-&#xC5D0;&#xD2F8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; S biotype &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB35C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xB8E8; &#xAC8C; &#xB9AD; &#xBCD1; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACB0;&#xACFC; M. vaginalis sulfonylurea &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;, &#xB300;&#xC0C1; &#xD6A8;&#xC18C;, &#xB8E8; &#xAC8C; &#xB9AD; &#xBCD1;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xB294; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6A8;&#xC18C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xC218;&#xC900; &#xC804;&#xCCB4; &#xACF5;&#xC7A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC774;&#xD6C4;, &#xC800;&#xD56D;, &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C; &#xB300;&#xC0AC; &#xB4F1;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD55C;&#xAD6D; &#xC300; &#xBB38;&#xD654;&#xC758; sulfonylurea &#xC81C; &#xCD08; &#xC81C; &#xB0B4;&#xC131; Monochoria vaginalis.

Nueve Monochoria vaginalis Pres1 adhesiones de Chonnam provincia, Corea fueron probados para la resistencia al herbicida sulfonilurea, imazosulfur&oacute;n, en la prueba biol&oacute;gica de la respuesta de toda la planta. Todos adhesiones fueron confirmados resistente (R) a imazosulfur&oacute;n. El GR50 (concentraci&oacute;n de imazosulfur&oacute;n que redujo disparar peso seco en un 50%) valores de adhesiones R fueron 1112-3172 (adhesi&oacute;n #9) veces mayores que el del est&aacute;ndar adhesi&oacute;n susceptible (S). Adhesi&oacute;n #9 exhibe resistencia cruzada a otros herbicidas sulfonilureas, benoxacor, cyclosulfamuron y pyrazosulfuron-etilo, pero no a los herbicidas Imidazolinonas, imazapyr y imazaquin. El biotipo R podr&iacute;a ser controlado por otros herbicidas con diferentes modos de acci&oacute;n, tales como mefenacet y tpy, aplicado al suelo en dosis recomendadas. Herbicidas de aplicaci&oacute;n foliar, 2, 4-D y bentazona, tambi&eacute;n hab&iacute;an controlada la R y S biotipos. Mezclas basadas en la sulfonilurea, excepto ethoxysulfuron y fentrazamide, hicieron no control resistentes M. vaginalis. Rendimiento de arroz fue reducido 70% por resistentes vaginalis M. que escap&oacute; pyrazosulfuron-etilo m&aacute;s molinato, en comparaci&oacute;n con desmalezado en cultivo de arroz de siembra directa. En contraste, la producci&oacute;n del arroz fue reducido 44% por vaginalis de M. resistentes que sobrevivi&oacute; el tratamiento pyrazosulfuron-etilo m&aacute;s molinato, en comparaci&oacute;n con tpy plus butaclor en cultivo de arroz trasplantado. In vitro acetolactato sintasa (ALS) actividad del biotipo R fue 183, 31, 35 y 130 veces m&aacute;s resistentes al imazosulfur&oacute;n, benoxacor, cyclosulfamuron y pyrazosulfuron-etilo, respectivamente, que el biotipo de S. Imazaquin, imazapyr y herbicidas Imidazolinonas tuvieron un efecto similar en la actividad de ALS in vitro de los biotipos de R y S. La actividad in vivo de ALS del biotipo R tambi&eacute;n fue menos afectada que el biotipo de S por el imazosulfur&oacute;n de herbicidas sulfonilureas y pyrazosulfuron-etilo. Resultados de ensayos de ALS in vitro e in vivo indican que el mecanismo de resistencia de M. vaginalis a herbicidas sulfonilureas puede ser debido, en parte, a una alteraci&oacute;n en la enzima blanco, ALS. Puesto que el nivel de resistencia en el an&aacute;lisis de enzima era mucho menor que en el an&aacute;lisis de toda la planta, otros mecanismos de resistencia, como el metabolismo de herbicida, pueden estar involucrados.

Vaginalis de Monochoria resistentes a los herbicidas sulfonilureas en cultivo de arroz Coreano.

&#x8D28;&#x7C92;&#x7F16;&#x7801;&#x7C7B; C &beta;-&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; CMY 1 &#x548C; CMY-10 &#x6C34;&#x89E3; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7C7B;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#xFF0C;&#x7531;&#x7B2C;&#x4E09;&#x4EE3;&#x5934;&#x5B62;&#x83CC;&#x7D20;&#x6216; cephamycins &#x8BF1;&#x5BFC;&#x6CBB;&#x7597;&#x5931;&#x8D25;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6D88;&#x9664;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7C7B;&#x503A;&#x5238;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x9176;&#x662F;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x836F;&#x7269;&#x5BF9;&#x60A3;&#x6709;&#x4F24;&#x53E3;&#x611F;&#x67D3;&#x3001; &#x5C3F;&#x8DEF;&#x611F;&#x67D3;&#x6216;&#x80BA;&#x708E;&#x60A3;&#x8005;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;CMY 1 CMY 10 &#x88AB;&#x7EAF;&#x5316;&#x548C;&#x5177;&#x4F53;&#x5316;&#x5728; 298 CMY 1 &#x548C; CMY 10 &#x6676;&#x4F53; K.x &#x5C04;&#x7EBF;&#x884D;&#x5C04;&#x6570;&#x636E;&#x5DF2;&#x6536;&#x96C6;&#x5230; 2.5 &#x548C; 1.5 &#x4E00;&#x9879;&#x51B3;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4F7F;&#x7528;&#x540C;&#x6B65;&#x8F90;&#x5C04;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x662F;&#x540C;&#x6676;&#x548C;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x539F;&#x59CB;&#x5355;&#x659C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7EC4; P2(1)&#x3002;

&#x7ED3;&#x6676;&#x548C; CMY 1 &#x548C; CMY 10&#x3001; plasmidic &#x7C7B; C &beta;-&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x4E0E;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x57FA;&#x677F;&#x8C31;&#x521D;&#x6B65; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Plasmid-encoded class C beta-lactamases, including CMY-1 and CMY-10, hydrolyze the lactam bonds of beta-lactam antibiotics, inducing therapeutic failure and a lack of eradication of clinical isolates by third-generation cephalosporins or cephamycins. Therefore, the enzymes are potential targets for developing agents against pathogens isolated from patients suffering from wound infection, urinary tract infection or pneumonia. CMY-1 and CMY-10 were purified and crystallized at 298 K. X-ray diffraction data from CMY-1 and CMY-10 crystals have been collected to 2.5 and 1.5 A resolution, respectively, using synchrotron radiation. The crystals of the two proteins are isomorphous and belong to the primitive monoclinic space group P2(1).

Crystallization and preliminary X-ray crystallographic analyses of CMY-1 and CMY-10, plasmidic class C beta-lactamases with extended substrate spectrum.

Plasmidique classe C b&ecirc;ta-lactamases, y compris CMY-1 et 10-CMY, hydrolysent les liaisons de lactame des b&ecirc;ta-lactamines, provoquant l&#39;&eacute;chec th&eacute;rapeutique et l&#39;absence d&#39;&eacute;radication des isolats cliniques de c&eacute;phalosporines de troisi&egrave;me g&eacute;n&eacute;ration ou c&eacute;phamycines. Par cons&eacute;quent, les enzymes sont des cibles potentielles pour le d&eacute;veloppement d&#39;agents pathog&egrave;nes isol&eacute;es de patients souffrant d&#39;infection de la plaie, infection des voies urinaires ou une pneumonie. CMY-1 et CMY-10 ont &eacute;t&eacute; purifi&eacute;es et cristallis&eacute; il y a 298 donn&eacute;es de diffraction de rayons x K. de CMY-1 et des cristaux de CMY-10 ont &eacute;t&eacute; recueillies &agrave; 2,5 et 1,5 une r&eacute;solution, respectivement, &agrave; l&#39;aide de rayonnement synchrotron. Les cristaux des deux prot&eacute;ines sont isomorphes et appartiennent au groupe d&#39;espace monoclinique primitif P2(1).

Cristallisation et diffraction pr&eacute;liminaire de CMY-1 et de classe 10-CMY, plasmidique C b&ecirc;ta-lactamases &agrave; spectre &eacute;tendu de substrat.

Kristallisation und vorl&#xE4;ufige r&#xF6;ntgenkristallographischen Analysen der CMY-1-und CMY-10, Plasmid-Klasse-C-Beta-Laktamasen mit erweitertem Substratspektrum.

Plasmide codifica classe C beta-lattamasi, comprese CMY-1 e CMY-10, idrolizzare i legami lattamici antibiotici beta-lattamici, inducendo il fallimento terapeutico e la mancanza di eradicazione degli isolati clinici di cefalosporine di terza generazione o cephamycins. Di conseguenza, gli enzimi sono potenziali bersagli per lo sviluppo di agenti patogeni isolati da pazienti affetti da infezione della ferita, infezioni del tratto urinario o polmonite. CMY-1 e CMY-10 sono stati purificati e cristallizzato a 298 dati diffrazione a raggi x K. CMY-1 e CMY-10 cristalli sono stati raccolti a 1,5 e 2,5 una risoluzione, rispettivamente, mediante radiazione di sincrotrone. I cristalli delle due proteine sono isomorfe e appartengono al gruppo spaziale monoclino primitivo P2(1).

Cristallizzazione e preliminare analisi cristallografiche ai raggi x di CMY-1 e beta-lattamasi CMY-10, plasmidico classe C con spettro esteso di substrato.

&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC; CMY 1 CMY 10 &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x50B5;&#x6CBB;&#x7642;&#x5931;&#x6557;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x83CC;&#x306E;&#x64B2;&#x6EC5;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E09;&#x4E16;&#x4EE3;&#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x3084; cephamycins &#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3001;&beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x7CFB;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x5275;&#x50B7;&#x611F;&#x67D3;&#x3001;&#x5C3F;&#x8DEF;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3084;&#x80BA;&#x708E;&#x306B;&#x82E6;&#x3057;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;CMY 1 &#x3068; CMY 10 &#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x653E;&#x5C04;&#x5149;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; k. &#x306E; x &#x7DDA;&#x56DE;&#x6298;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; CMY 1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; CMY 10 &#x7D50;&#x6676;&#x304B;&#x3089; 2.5 &#x3068; 1.5 &#x306F;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306B;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x53CE;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 298 &#x3067;&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x540C;&#x5F62;&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x59CB;&#x7684;&#x306A;&#x5358;&#x659C;&#x6676;&#x7CFB;&#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; P2(1) &#x306B;&#x5C5E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x3068;&#x4E88;&#x5099;&#x7684; x &#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790; CMY 1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; CMY 10, &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x62E1;&#x5F35;&#x57FA;&#x677F;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3002;

&#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C &#xBCA0;&#xD0C0;-lactamases, CMY 1 &#xB4F1; CMY 10 hydrolyze &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D;&#xD0D0; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;, &#xCE58;&#xB8CC; &#xC2E4;&#xD328; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC; &#xBC15;&#xBA78; &#xBD80;&#xC871; 3 &#xC138;&#xB300; cephalosporins &#xB610;&#xB294; cephamycins&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xB77D;&#xD0D0; &#xCC44;&#xAD8C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xC0C1;&#xCC98; &#xAC10;&#xC5FC;, &#xC694;&#xB85C; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC774; &#xB098; &#xD3D0; &#xB834;&#xC744; &#xC553;&#xACE0; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBAA9;&#xD45C;. CMY 1&#xC640; CMY-10 &#xC815;&#xD654; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; 298 K. x-&#xC120; &#xD68C;&#xC808; &#xB370;&#xC774;&#xD130; CMY 1&#xC640; CMY 10 &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD138;&#xC744; 2.5&#xC640; 1.5&#xB97C; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xB97C; &#xAC01;&#xAC01; &#xC218;&#xC9D1;&#xC5D0;&#xC11C; synchrotron &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACB0;&#xC815; &#xD654; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294;. &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; isomorphous &#xC774;&#xBA70; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB2E8;&#xC0AC; &#xACF5;&#xAC04; &#xADF8;&#xB8F9; P2(1)&#xC5D0; &#xC18D;&#xD574;.

&#xACB0;&#xC815; &#xD654;&#xC640; CMY 1&#xC640; CMY 10, plasmidic &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C &#xBCA0;&#xD0C0;-lactamases &#xD655;&#xC7A5;&#xB41C; &#xAE30;&#xD310; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC758; &#xC608;&#xBE44; &#xC120; crystallographic &#xBD84;&#xC11D;.

Plasm&iacute;dico clase C beta-lactamasas, incluyendo CMY-1 y CMY-10, hidrolizan los bonos lactama de antibi&oacute;ticos beta-lact&aacute;micos, induciendo fracaso terap&eacute;utico y la falta de erradicaci&oacute;n de aislamientos cl&iacute;nicos de cefalosporinas de tercera generaci&oacute;n o Klebsiella. Por lo tanto, las enzimas son objetivos potenciales para el desarrollo de agentes contra pat&oacute;genos aislados de pacientes que sufren de la infecci&oacute;n de la herida, infecci&oacute;n del tracto urinario o neumon&iacute;a. CMY-1 y CMY-10 fueron purificada y cristalizada en 298 datos de difracci&oacute;n de rayos x K. de CMY-1 y cristales de CMY-10 han sido recogidos a 2.5 y 1.5 una resoluci&oacute;n, respectivamente, utilizando radiaci&oacute;n de sincrotr&oacute;n. Los cristales de las dos prote&iacute;nas son isomorfas y pertenecen al grupo espacial monocl&iacute;nico primitivo P2(1).

Cristalizaci&oacute;n y preliminares an&aacute;lisis cristalogr&aacute;ficos de rayos x de CMY-1 y CMY-10, pl&aacute;smido clase C beta-lactamasas de espectro extendido de sustrato.

&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F20;&#x64AD;&#x548C; AmpC &beta;-&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x548C;&#x6269;&#x5C55;&#x9891;&#x8C31; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7684;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#xFF0C;&#x6267;&#x884C;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x836F;&#x654F;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x3001; pI &#x6D4B;&#x5B9A;&#x3001; &#x611F;&#x5E94;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3001; &#x8D28;&#x7C92;&#x8C31;&#x3001; transconjugation &#x6D4B;&#x8BD5;&#xFF0C;&#x91C7;&#x7528;&#x91CD;&#x590D;&#x5171;&#x8BC6; (ERIC)-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x548C; DNA &#x6D4B;&#x5E8F;&#x3002;&#x516D;&#x682A;&#x5F53;&#x4E2D; 51 &#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x4ECE;&#x97E9;&#x56FD;&#x7684;&#x5927;&#x5B66;&#x533B;&#x9662;&#x6536;&#x96C6;&#xFF0C;&#x8010; cephamycins&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x516D;&#x682A;&#x4EA7;&#x751F;&#x8D28;&#x7C92;&#x7F16;&#x7801; AmpC &#x578B; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#xFF0C;CMY 10&#x3002;&#x4E94;&#x682A;&#x4E5F;&#x4EA7;&#x751F;&#x9170;&#x80FA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6216;&#x591A;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6; &beta;-&#x9176;&#xFF1A; SHV-12&#xFF0C;&#x6269;&#x5C55;&#x9891;&#x8C31; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA; (&#x4E94;&#x682A;&#xFF09; &#xFF1B;&#x77AC;&#x53D8;&#x7535;&#x78C1;&#x6CD5;-1&#xFF0C;A &#x7C7B; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA; &#xFF08;&#x4E24;&#x682A;&#xFF09; &#xFF1B;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; AmpC &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA; &#xFF08;&#x4E00;&#x682A;&#xFF0C;&#x4E00;&#x682A;&#x4EA7;&#x6C14;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x6240;&#x6709;&#x56DB;&#x4E2A; &beta;-&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x88AB;&#x8BA4;&#x5B9A;&#xFF09;&#x3002;&#x516D;&#x682A;&#x4E4B;&#x4E00;&#x5236;&#x4F5C;&#x4EC5; CMY 10&#x3002;&#x57C3;&#x91CC;&#x514B;-PCR &#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x4F20;&#x64AD; CMY 10 &#x548C; SHV 12 &#x7531;&#x4E8E;&#x8010;&#x836F;&#x83CC;&#x682A;&#x7684;&#x548C;&#x5F02;&#x79CD;&#x8513;&#x5EF6;&#x6297; cephamycins &#x548C;&#x97E9;&#x56FD;&#x7684;&#x5E7F;&#x8C31; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7684;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x7206;&#x53D1;&#x3002;&#x8D1F;&#x8D23; cephamycins (&#x5934;&#x5B62;&#x897F;&#x4E01;&#x548C;&#x5766;&#xFF09;&#x3001; &#x963F;&#x83AB;&#x897F;&#x6797;&#x3001; &#x8003;&#x67E5;&#x548C;&#x963F;&#x83AB;&#x897F;&#x6797;-&#x514B;&#x62C9;&#x7EF4;&#x9178;&#x6297;&#x6027;&#x7684; CMY 10 &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4ECE;&#x516D;&#x4E2A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x4ECE; pSAL-1 &#x5230; In6 In7&#xFF0C;&#x3001; &#x65B0;&#x578B;&#x6574;&#x5408;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E0A;&#x6E38;&#x4ECE; blaCMY-10 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; 1 71&#x3002;&#x603B;&#x5171;&#x6709; 15 &#x4E2A;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; (&#x6211;-15&#xFF09; &#x6216; 18 &#x6838;&#x82F7;&#x9178; (&#x6211;-18&#xFF09; &#x4F4D;&#x7F6E; 71 &#x548C; 72 &#x4E4B;&#x95F4;&#x63D2;&#x5165;&#x5230; blaCMY-10 &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;BlaCMY-10 &#x57FA;&#x56E0;&#x53EF;&#x80FD;&#x7531;-15 &#x6216; 18 &#x63D2;&#x5165; sul1 &#x7C7B;&#x578B;&#x590D;&#x6742;&#x6574;&#x5408;&#x5B50;&#x3002;

&#x8F6C;&#x8BA9; AmpC &#x578B;&#x5185;&#x9170;&#x80FA; &#xFF08;CMY-10&#xFF09; &#x5728;&#x97E9;&#x56FD;&#x4E00;&#x5BB6;&#x533B;&#x9662;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;

To determine dissemination and genotype of AmpC beta-lactamases and an extended-spectrum beta-lactamase among clinical isolates of Enterobacteriaceae, we performed antibiotic susceptibility testing, pI determination, induction test, plasmid profiles, transconjugation test, enterobacterial repetitive consensus (ERIC)-PCR, and DNA sequencing. Among the 51 clinical isolates collected from a university hospital in Korea, six isolates were resistant to cephamycins. All six isolates produced a plasmid-encoded AmpC-type beta-lactamase, CMY-10. Five strains also produced one or more other beta-lactamases: SHV-12, an extended-spectrum beta-lactamase (five isolates); TEM-1, a class A beta-lactamase (two isolates); and a chromosomal AmpC beta-lactamase (one isolate, a strain of Enterobacter aerogenes, which produced all four of the beta-lactamases that were identified). One of six isolates produced only CMY-10. ERIC-PCR analysis revealed that dissemination of CMY-10 and SHV-12 was due to a clonal outbreak of a resistant strain and to the interspecies spread of resistance to cephamycins and broad-spectrum beta-lactams in Korea. CMY-10 beta-lactamase genes that are responsible for the resistance to cephamycins (cefoxitin and cefotetan), amoxicillin, cephalothin, and amoxicillin-clavulanic acid were cloned and characterized from six clinical isolates. A sequence identical to the common regions in In6, In7, and a novel integron from pSAL-1 was found upstream from blaCMY-10 gene at nucleotides 1-71. A total of 15 nucleotides (I-15) or 18 nucleotides (I-18) between position 71 and 72 were inserted into the blaCMY-10 gene. The blaCMY-10 gene might be inserted into a sul1-type complex integron by I-15 or I-18.

Dissemination of transferable AmpC-type beta-lactamase (CMY-10) in a Korean hospital.

Pour d&eacute;terminer la diffusion et le g&eacute;notype des b&ecirc;ta-lactamases AmpC et une b&ecirc;ta-lactamase &agrave; spectre &eacute;tendu parmi les isolats cliniques d&#39;Enterobacteriaceae, nous avons r&eacute;alis&eacute; l&#39;antibiogramme, d&eacute;termination de la pI, induction profils plasmidiques, transconjugation essai, ent&eacute;robact&eacute;rie consensus r&eacute;p&eacute;titif (ERIC)-PCR et s&eacute;quen&ccedil;age de l&#39;ADN. Parmi les 51 isolats cliniques pr&eacute;lev&eacute;s dans un h&ocirc;pital universitaire en Cor&eacute;e, six isolats &eacute;taient r&eacute;sistants &agrave; c&eacute;phamycines. Les six isolats produisent un cod&eacute;es par des plasmides de type AmpC b&ecirc;talactamase, CMY-10. Cinq souches a &eacute;galement produisent un ou plusieurs autres b&ecirc;ta-lactamases : SHV-12, une b&ecirc;ta-lactamase &agrave; spectre &eacute;tendu (cinq isolats) ; TEM-1, une b&ecirc;ta-lactamases de classe A (deux isolats) ; et un AmpC chromosomique b&ecirc;ta-lactamase (un isolat, une souche d&#39;Enterobacter aerogenes, qui produit tous les quatre des b&ecirc;ta-lactamases recens&eacute;s). L&#39;un des six isolats produit seulement CMY-10. ERIC-PCR l&#39;analyse a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la diffusion de CMY-10 et SHV-12 &eacute;tait due &agrave; une &eacute;closion clonale d&#39;une souche r&eacute;sistante et &agrave; la propagation entre les esp&egrave;ces de la r&eacute;sistance aux c&eacute;phamycines et b&ecirc;ta-lactamines &agrave; large spectre en Cor&eacute;e. CMY-10 b&ecirc;ta-lactamase les g&egrave;nes qui sont responsables de la r&eacute;sistance &agrave; l&#39;acide clavulanique, amoxicilline et c&eacute;phalothine c&eacute;phamycines (c&eacute;foxitine et c&eacute;fot&eacute;tan), ont &eacute;t&eacute; clon&eacute;s et caract&eacute;ris&eacute;s de six isolats cliniques. Une s&eacute;quence identique aux r&eacute;gions communes In6, In7 et un int&eacute;gron roman de pSAL-1 a &eacute;t&eacute; trouv&eacute;e en amont du g&egrave;ne blaCMY-10 &agrave; nucl&eacute;otides 1-71. Un total de 15 nucl&eacute;otides (I-15) ou 18 nucl&eacute;otides (18) entre les positions 71 et 72 ont &eacute;t&eacute; ins&eacute;r&eacute;s dans le g&egrave;ne blaCMY-10. Le g&egrave;ne blaCMY-10 peut-&ecirc;tre &ecirc;tre ins&eacute;r&eacute; dans un int&eacute;gron complexes de type sul1 en I-15 ou j&#39;ai-18.

Diffusion de transf&eacute;rable AmpC-type b&ecirc;ta-lactamase (CMY-10) dans un h&ocirc;pital cor&eacute;en.

Die Verbreitung von &#xFC;bertragbaren AmpC-Typ Beta-Lactamase (CMY-10) in einer koreanischen Krankenhaus.

Per determinare la diffusione e genotipo di beta-lattamasi AmpC e un esteso-spettro beta-lattamasi tra gli isolati clinici di Enterobacteriaceae, abbiamo eseguito test di suscettibilit&agrave; agli antibiotici, determinazione del pI, test di induzione, profili del plasmide, transconjugation test, enterobacterial repetitive consenso (ERIC)-PCR e sequenziamento del DNA. Tra i 51 isolati clinici raccolti da un ospedale universitario in Corea, sei isolati erano resistenti a cephamycins. Tutti e sei gli isolati prodotto un plasmide codifica AmpC-tipo beta-lattamasi, CMY-10. Cinque ceppi anche produssero uno o pi&ugrave; altri beta-lattamasi: SHV-12, un esteso-spettro beta-lattamasi (cinque isolati); TEM-1, una beta-lattamasi di classe A (due isolati); e un AmpC cromosomica beta-lattamasi (un isolato, un ceppo di Enterobacter aerogenes, che ha prodotto tutte e quattro le beta-lattamasi che sono stati identificati). Uno dei sei isolati prodotto solo CMY-10. Analisi di ERIC-PCR ha rivelato che la diffusione di CMY-10 e SHV-12 era a causa di un focolaio clonale di un ceppo resistente e alla diffusione della resistenza a cephamycins e beta-lattami ad ampio spettro in Corea interspecifica. Beta-lattamasi CMY-10 geni che sono responsabili della resistenza a cephamycins (Cefoxitina e cefotetan), amoxicillina, amoxicillina-clavulanico e cephalothin acido sono stati clonati e caratterizzate da sei isolati clinici. Una sequenza identica alle regioni comuni In6, In7 e un Integrone romanzo da pSAL-1 &egrave; stata trovata a Monte da gene blaCMY-10 nucleotidi 1-71. Un totale di 15 nucleotidi (I-15) o 18 nucleotidi (I-18) tra la posizione 71 e 72 sono stati inseriti nel gene della blaCMY-10. Il gene blaCMY-10 potrebbe essere inserito in un Integrone complesso sul1-tipo-15 o 18.

Diffusione di trasferibile AmpC-tipo beta-lattamasi (CMY-10) in un ospedale coreano.

&#x666E;&#x53CA;&#x3068; AmpC &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x62E1;&#x5F35;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E; &beta; &#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x8178;&#x5185;&#x7D30;&#x83CC;&#x79D1;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x5B9F;&#x884C;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;pI &#x5B9A;&#x91CF;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3001;transconjugation &#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x8178;&#x5185;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x53CD;&#x5FA9;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9; &#xFF08;&#x30A8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#xFF09;-PCR&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; DNA &#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3002;&#x97D3;&#x56FD;&#x306E;&#x5927;&#x5B66;&#x75C5;&#x9662;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x96C6;&#x3057;&#x305F;&#x81E8;&#x5E8A; 51 &#x83CC;&#x682A;&#x4E2D; 6 &#x83CC;&#x682A; cephamycins &#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;.&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x83CC;&#x682A;&#x306F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; AmpC &#x578B; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;CMY 10 &#x751F;&#x7523;&#x3002;5 &#x83CC;&#x682A;&#x3082; 1 &#x3064;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x4ED6; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x751F;&#x7523;: SHV-12 &#x65E5;&#x3001;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC; (5 &#x9694;&#x96E2;);&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; A &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC; (2 &#x3064;&#x306E;&#x9694;&#x96E2;); TEM 1&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; AmpC &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC; (1 &#x83CC;&#x682A;, &#x751F;&#x7523; 4 &#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x751F;&#x6210;&#x83CC;&#x306E;&#x3072;&#x305A;&#x307F;)&#x3002;1 &#x3064;&#x306E; 6 &#x83CC;&#x682A;&#x306E;&#x307F; CMY 10 &#x751F;&#x7523;&#x3002;&#x30A8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; PCR &#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;CMY 10 &#x3068; SHV 12 &#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6D41;&#x884C;&#x8010;&#x6027;&#x682A;&#x306E;&#x3068; cephamycins &#x3068;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x97D3;&#x56FD;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x7A2E;&#x9593;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;Cephamycins &#xFF08;&#x30B7;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068; cefotetan&#xFF09;&#x3001;&#x30A2;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x30A2;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3; &#x30FB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30D6;&#x30E9;&#x30F3;&#x9178;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x62C5;&#x5F53; CMY 10 &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3044;&#x305F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3057;&#x3001;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x83CC;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PSAL-1 &#x304B;&#x3089;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x306E;&#x3067;&#x3001;6&#x3001;In7&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; 1-71 &#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3067; blaCMY 10 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304B;&#x3089;&#x4E0A;&#x6D41;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;15 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; (&#x79C1;&#x306F; 15&#xFF09; &#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x307E;&#x305F;&#x306F; 18 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; (&#x79C1;&#x306F;-18&#xFF09; 71&#x3001;72 &#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306E;&#x9593;&#x306B; blaCMY 10 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x633F;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;BlaCMY 10 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; - 15 &#x307E;&#x305F;&#x306F; 18 sul1 &#x578B;&#x8907;&#x5408;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x633F;&#x5165;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8B72;&#x6E21; AmpC &#x578B; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC; (CMY-10&#xFF09;&#x3001;&#x97D3;&#x56FD;&#x306E;&#x75C5;&#x9662;&#x3067;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x3002;

&#xBCF4;&#xAE09; &#xBC0F; AmpC &#xBCA0;&#xD0C0; lactamases&#xC640; &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C; Enterobacteriaceae &#xC784;&#xC0C1; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC911;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD615; &#xACB0;&#xC815;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xC790;&#xD654; &#xC728; &#xC2DC;&#xD5D8;, pI &#xACB0;&#xC815;, &#xC720;&#xB3C4; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;, &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;, transconjugation &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;, enterobacterial &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC778; &#xD569;&#xC758; (&#xC5D0;&#xB9AD;) &#xC218;&#xD589;-PCR, &#xBC0F; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD55C;&#xAD6D;&#xC5D0; &#xB300;&#xD559; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1;&#xD55C; 51 &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC911; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC; cephamycins&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; AmpC &#xD615; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C;, CMY 10 &#xC0DD;&#xC0B0;. 5 &#xC885;&#xC790;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBCA0;&#xD0C0;-lactamases &#xC81C;&#xC791;: SHV-12, &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C; (5 &#xACA9;&#xB9AC;); &#xD3B8;-1, &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; A &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C; (&#xB450; &#xACA9;&#xB9AC;); &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; AmpC &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C; (&#xD55C; &#xBD84;&#xB9AC;, &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xBCA0;&#xD0C0; lactamases 4 &#xAC1C; &#xC0DD;&#xC0B0; Enterobacter aerogenes&#xC758; &#xBCC0;&#xD615;). 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB9CC; CMY 10 &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC5D0;&#xB9AD;-PCR &#xBD84;&#xC11D; CMY 10 SHV-12&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09; cephamycins &#xBC0F; lactams &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xD55C;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC800;&#xD56D;&#xC758; interspecies &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xD074;&#xB860; &#xBC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xD560; &#xC608;&#xC815; &#xC774;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. Cephamycins (cefoxitin&#xACFC; cefotetan) amoxicillin, cephalothin, &#xBC0F; amoxicillin clavulanic &#xC0B0;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; CMY 10 &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8; &#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; pSAL 1&#xC5D0;&#xC11C; In6, In7, &#xC18C;&#xC124; integron&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; 1-71&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; blaCMY-10 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xCD1D; 15 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; (&#xB09C; 15) &#xB610;&#xB294; 18 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; (&#xB09C; 18) &#xC0AC;&#xC774; &#xC704;&#xCE58; 71 &#xBC0F; 72 blaCMY-10 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C;. BlaCMY-10 &#xC9C4;-15 &#xB610;&#xB294;-18 sul1 &#xD615; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; integron&#xC5D0; &#xC0BD;&#xC785; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8; &#xC591;&#xB3C4; AmpC &#xD615; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C; (CMY-10) &#xD55C;&#xAD6D; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09;.

Para determinar la difusi&oacute;n y el genotipo de AmpC beta-lactamasas y un beta-lactamasas de espectro extendido entre aislamientos cl&iacute;nicos de enterobacterias, realizamos pruebas de sensibilidad a los antibi&oacute;ticos, determinaci&oacute;n de pI, prueba de inducci&oacute;n, perfiles de pl&aacute;smido, prueba transconjugation, enterobacterianas consenso repetitivo (ERIC)-PCR y secuenciaci&oacute;n del ADN. Entre los 51 aislamientos cl&iacute;nicos recogidos de un hospital de la Universidad de Corea, seis cepas eran resistentes a la klebsiella. Todos los seis aislamientos produjeron un plasm&iacute;dico tipo AmpC beta-lactamase, CMY-10. Cinco cepas tambi&eacute;n produjeron uno o varios otros beta-lactamasas: SHV-12, un beta-lactamasas de espectro extendido (cinco aislamientos); TEM-1, una clase A beta-lactamasa (dos aislantes); y un cromos&oacute;mica AmpC beta-lactamasa (un aislado, una cepa de Enterobacter aerogenes, que se produjo a las cuatro de la beta-lactamasas que fueron identificadas). Uno de los seis aislamientos hab&iacute;a producido s&oacute;lo CMY-10. An&aacute;lisis de ERIC-PCR revel&oacute; que la difusi&oacute;n de CMY-10 y SHV-12 era debido a un brote clonal de una cepa resistente y a la propagaci&oacute;n entre las especies de resistencia a la klebsiella y amplio espectro de beta-lact&aacute;micos en Corea. CMY-10 beta-lactamasa genes que son responsables de la resistencia a la klebsiella (cefoxitina y cefotet&aacute;n), cefalotina, amoxicilina y amoxicilina-clavul&aacute;nico &aacute;cido fueron clonados y caracterizados desde seis aislamientos cl&iacute;nicos. Una secuencia id&eacute;ntica a las regiones comunes In6 In7 y una novela integron de pSAL-1 fue encontrada del gene blaCMY-10 en nucle&oacute;tidos 1-71. Un total de 15 nucle&oacute;tidos (I-15) o 18 nucle&oacute;tidos (I-18) entre la posici&oacute;n 71 y 72 fueron insertados en el gen blaCMY-10. El gen blaCMY-10 puede insertarse un integron complejo sul1-tipo-15 o 18.

Difusi&oacute;n de transferible tipo AmpC beta-lactamasa (CMY-10) en un hospital de Coreano.

&#x51FA;&#x73B0;&#x548C;&#x4F20;&#x64AD;&#x6269;&#x5C55;&#x9891;&#x8C31; (ES) &beta;-&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6CBB;&#x7597;&#x5931;&#x8D25;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x6D88;&#x9664;&#x751A;&#x81F3;&#x7B2C;&#x4E09;&#x4EE3; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7C7B;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x5982;&#x5934;&#x5B62;&#x4ED6;&#x5576;&#x3002;CMY-10 &#x662F;&#x8D28;&#x7C92;&#x7F16;&#x7801;&#x7C7B; C &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7684;&#x4E0E;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x3002;&#x4E0D;&#x540C;&#x8D28;&#x91CF;&#x629B;&#x5C04;&#x7269;&#x7684;&#x7C7B; C ES &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA; GC1 &#x9634;&#x6C9F;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#xFF0C;&#x6B27;&#x7C73;&#x8304;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x6784;&#x8C61;&#x548C; CMY 10 &#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x5728; R2 &#x5FAA;&#x73AF;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5220;&#x9664;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x8D1F;&#x8D23;&#x7684; CMY 10 ES &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6309;&#x7167;&#x89E3;&#x51B3; 1.55 A &#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5220;&#x9664;&#x5927;&#x5927;&#x6269;&#x5927;&#x4E86; R2 &#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x53EF;&#x5BB9;&#x7EB3;&#x7684; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7C7B;&#x6297;&#x751F;&#x7D20; R2 &#x4FA7;&#x94FE;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x770B;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; CMY 10 &#x5BF9;&#x4E9A;&#x80FA;&#x57F9;&#x5357;&#x4E0E;&#x957F; R2 &#x53D6;&#x4EE3;&#x57FA;&#x7684; hydrolysing &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;P99 &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x7684;&#x5F3A;&#x8FEB;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x5F15;&#x5165;&#x5230; R2 &#x5FAA;&#x73AF;&#x7F3A;&#x5931;&#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x6269;&#x5C55;&#x57FA;&#x677F;&#x8C31;&#x7684; C &#x7C7B;&#x975E; ES &beta;-&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#xFF0C;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x81EA;&#x7136;&#x7C7B; C ES &#x9176;&#x7A9D;&#x85CF;&#x7F3A;&#x5931;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684; R2 &#x5FAA;&#x73AF;&#x4E2D;&#x7684;&#x9694;&#x79BB;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;R2 &#x5FAA;&#x73AF;&#x4E2D;&#x7684; R2 &#x6D3B;&#x52A8;&#x7AD9;&#x70B9;&#x901A;&#x8FC7;&#x5220;&#x9664;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x5F00;&#x653E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x7C7B; C &beta;-&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x624B;&#x672F;&#x7B56;&#x7565;&#x6765;&#x6269;&#x5C55;&#x5176;&#x57FA;&#x677F;&#x8C31;&#x3002;

&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x57FA;&#x677F;&#x8C31;&#x7684; CMY-10&#xFF0C;&#x8D28;&#x7C92;&#x7F16;&#x7801;&#x7C7B; C &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

The emergence and dissemination of extended-spectrum (ES) beta-lactamases induce therapeutic failure and a lack of eradication of clinical isolates even by third-generation beta-lactam antibiotics like ceftazidime. CMY-10 is a plasmid-encoded class C beta-lactamase with a wide spectrum of substrates. Unlike the well-studied class C ES beta-lactamase from Enterobacter cloacae GC1, the Omega-loop does not affect the active site conformation and the catalytic activity of CMY-10. Instead, a three-amino-acid deletion in the R2-loop appears to be responsible for the ES activity of CMY-10. According to the crystal structure solved at 1.55 A resolution, the deletion significantly widens the R2 active site, which accommodates the R2 side-chains of beta-lactam antibiotics. This observation led us to demonstrate the hydrolysing activity of CMY-10 towards imipenem with a long R2 substituent. The forced mutational analyses of P99 beta-lactamase reveal that the introduction of deletion mutations into the R2-loop is able to extend the substrate spectrum of class C non-ES beta-lactamases, which is compatible with the isolation of natural class C ES enzymes harbouring deletion mutations in the R2-loop. Consequently, the opening of the R2 active site by the deletion of some residues in the R2-loop can be considered as an operative molecular strategy of class C beta-lactamases to extend their substrate spectrum.

Structural basis for the extended substrate spectrum of CMY-10, a plasmid-encoded class C beta-lactamase.

L&#39;&eacute;mergence et la diffusion des b&ecirc;ta-lactamases &agrave; spectre &eacute;tendu (ES) induisent l&#39;&eacute;chec th&eacute;rapeutique et l&#39;absence d&#39;&eacute;radication des isolats cliniques m&ecirc;me en troisi&egrave;me g&eacute;n&eacute;ration b&ecirc;ta-lactamines comme la ceftazidime. CMY-10 est une b&ecirc;ta-lactamase de plasmide encod&eacute; classe C avec un large &eacute;ventail de substrats. Contrairement &agrave; la C ES bien &eacute;tudi&eacute;s classe b&ecirc;ta-lactamase de Enterobacter cloacae GC1, la boucle Omega n&#39;affecte pas la conformation du site actif et l&#39;activit&eacute; catalytique de CMY-10. Au lieu de cela, une d&eacute;l&eacute;tion de trois acides amin&eacute;s dans l&#39;arceau de R2 semble &ecirc;tre responsable de l&#39;activit&eacute; ES de CMY-10. Selon la structure cristalline est r&eacute;solue &agrave; 1,55 r&eacute;solution, la suppression &eacute;largit consid&eacute;rablement le site actif de R2, qui accueille les R2 les cha&icirc;nes lat&eacute;rales des b&ecirc;ta-lactamines. Ce constat nous a conduit &agrave; d&eacute;montrer l&#39;activit&eacute; hydrolysant de CMY-10 vers l&#39;imip&eacute;n&egrave;me avec un substituant R2 long. L&#39;analyse mutationnelle forc&eacute; de P99 b&ecirc;ta-lactamase r&eacute;v&egrave;le que l&#39;introduction de mutations de d&eacute;l&eacute;tion dans la boucle R2 est en mesure d&#39;&eacute;tendre le spectre de substrat de classe C non-ES b&ecirc;ta-lactamases, qui est compatible avec l&#39;isolement des enzymes de C ES classe naturelle comportant des mutations de suppression dans l&#39;arceau de R2. En cons&eacute;quence, l&#39;ouverture du site actif R2 par la suppression de certains r&eacute;sidus dans l&#39;arceau de R2 peut consid&eacute;rer comme une strat&eacute;gie du dispositif mol&eacute;culaire des b&ecirc;ta-lactamases de classe C &agrave; &eacute;tendre leur gamme de substrat.

Structure de base pour le spectre &eacute;tendu de substrat de CMY-10, un plasmide encod&eacute; classe C b&ecirc;ta-lactamase.

Die Entstehung und Verbreitung von ausgedehnt-Spektrum (ES) Beta-Laktamasen induzieren therapeutische Fehler und fehlende Tilgung der klinischen Isolate auch von Dritten Generation Beta-Lactam-Antibiotika wie Ceftazidim. CMY-10 ist ein Plasmid-kodierte Klasse C Beta-Lactamase mit einem breiten Spektrum von Substraten. Im Gegensatz zu den gut erforscht Klasse C ES Beta-Lactamase von Enterobacter Cloacae GC1 wirkt die Omega-Schleife nicht die aktive Website-Gestaltung und der katalytischen Wirkung des CMY-10. Stattdessen wird eine drei-Aminos&auml;ure-Deletion in der R2-Schleife f&uuml;r die ES-Aktivit&auml;t des CMY-10 verantwortlich. Nach der Kristallstruktur auf 1,55 A Aufl&ouml;sung gel&ouml;st weitet der L&ouml;schvorgang erheblich der R2-Active-Website, die die R2-Seitenketten von Beta-Lactam-Antibiotika beherbergt. Diese Beobachtung f&uuml;hrte uns zu die hydrolysing Aktivit&auml;t des CMY-10 gegen&uuml;ber Imipenem in Kombination mit einer langen R2-Substituenten zu demonstrieren. Die erzwungenen teilhabende Analysen der P99 Beta-Lactamase zeigen, dass die Einf&uuml;hrung der L&ouml;schung Mutationen in der R2-Schleife erweitern das Substrat-Spektrum der Klasse C nicht-ES Beta-Laktamasen ist, die mit der Isolierung der nat&uuml;rliche Klasse C ES Enzyme Beherbergung L&ouml;schung Mutationen in der R2-Schleife kompatibel ist. Folglich kann die Er&ouml;ffnung des Standortes aktiv R2 durch die Streichung von einige R&uuml;ckst&auml;nde in der R2-Schleife eine operative Molekulare Strategie der Klasse C Beta-Laktamasen als ihr Substrat-Spektrum zu erweitern.

Strukturelle Grundlage f&uuml;r das erweiterte Substrat-Spektrum der CMY-10, ein Plasmid-kodierte Klasse C Beta-Lactamase.

La nascita e la diffusione di spettro esteso (ES) beta-lattamasi indurre fallimento terapeutico e la mancanza di eradicazione degli isolati clinici anche di terza generazione beta-lattamici antibiotici come ceftazidime. CMY-10 &egrave; un plasmide codifica classe C beta-lattamasi con un ampio spettro di substrati. A differenza della classe ben studiata C ES beta-lattamasi da Enterobacter cloacae GC1, Omega-ciclo non influisce la conformazione del sito attivo e l&#39;attivit&agrave; catalitica di CMY-10. Invece, una delezione di 3-amino-acido in R2-ciclo sembra essere responsabile dell&#39;attivit&agrave; di ES di CMY-10. Secondo la struttura di cristallo risolta a 1,55 risoluzione, l&#39;eliminazione si allarga notevolmente il sito attivo R2, che accomoda la R2-catene laterali di antibiotici beta-lattamici. Questa osservazione ci ha portato a dimostrare l&#39;attivit&agrave; hydrolysing di CMY-10 verso imipenem con un lungo sostituente R2. L&#39;analisi mutazionale forzata della P99 beta-lattamasi rivelano che l&#39;introduzione di mutazioni di delezione nel R2-loop &egrave; in grado di estendere lo spettro di substrato di classe C non ES beta-lattamasi, che &egrave; compatibile con l&#39;isolamento degli enzimi ES C classe naturale che ospita le mutazioni di delezione in R2-loop. Di conseguenza, l&#39;apertura del sito attivo R2 dall&#39;eliminazione di alcuni residui in R2-loop pu&ograve; essere considerato come una strategia operativa molecolare di beta-lattamasi di classe C per estendere il loro spettro di substrato.

Base strutturale per lo spettro esteso substrato di CMY-10, una beta-lattamasi plasmide codifica classe C.

&#x51FA;&#x73FE;&#x3068;&#x666E;&#x53CA;&#x62E1;&#x5F35;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; (ES) &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x5931;&#x6557;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x83CC;&#x306E;&#x64B2;&#x6EC5;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x30BB;&#x30D5;&#x30BF;&#x30B8;&#x30B8;&#x30E0;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7B2C; 3 &#x4E16;&#x4EE3; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x7CFB;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CMY 10 &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3088;&#x304F;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C ES &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; cloacae GC1 &#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x30AA;&#x30E1;&#x30AC; &#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x89E6;&#x5A92;&#x6D3B;&#x6027; CMY 10 &#x306B;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;R2 &#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B; 3 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306F; CMY 10 &#x306E; ES &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x3092;&#x8CA0;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;1.55 &Aring; &#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3057;&#x305F;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x7CFB;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E; R2 &#x5074;&#x9396;&#x3092;&#x53CE;&#x5BB9;&#x3059;&#x308B; R2 &#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x5E83;&#x3052;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C; CMY 10 &#x9577;&#x3044; R2 &#x7F6E;&#x63DB;&#x57FA;&#x30A4;&#x30DF;&#x30DA;&#x30CD;&#x30E0;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066; hydrolysing &#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3092;&#x5C0E;&#x3044;&#x305F;&#x3002;P99 &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5F37;&#x5236;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x89E3;&#x6790; R2 &#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x524A;&#x9664;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x306F; R2 &#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5931;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x304D;&#x3087;&#x304F;&#x3072;&#x81EA;&#x7136;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C ES &#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x3068;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C - ES &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;R2 &#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x306B;&#x3088;&#x308B; R2 &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x958B;&#x696D;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x624B;&#x8853;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6226;&#x7565;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; C &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC; CMY 10 &#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x57FA;&#x677F;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x57FA;&#x76E4;

&#xB4F1;&#xC7A5;&#xACFC; &#xBCF4;&#xAE09; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; (ES) &#xBCA0;&#xD0C0;-lactamases&#xC758; ceftazidime&#xC640; &#xAC19;&#xC740; 3 &#xC138;&#xB300; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D;&#xD0D0; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC2E4;&#xD328;&#xC640; &#xC784;&#xC0C1; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC758; &#xADFC;&#xC808;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;. CMY 10 &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xC774;&#xC57C;&#xAE30;&#xB3C4; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C ES &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC81C; Enterobacter cloacae gc1&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC624;&#xBA54;&#xAC00; &#xB8E8;&#xD504; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; CMY 10&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, R2 &#xB8E8;&#xD504;&#xC5D0;&#xC11C; 3 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC0AD;&#xC81C; CMY-10 ES &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784; &#xAC83; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 1.55 A &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xD574;&#xACB0; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC0AD;&#xC81C;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC218;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D;&#xD0D0; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC758; R2 &#xC0AC;&#xC774;&#xB4DC; &#xCCB4;&#xC778; r 2 &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; widens. &#xC774; &#xAD00;&#xCC30; &#xC8FC;&#xB3C4;&#xD558; &#xAE34; R2 substituent&#xC640; imipenem &#xD5A5;&#xD574; CMY 10 hydrolysing &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. P 99 &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8; &#xC81C; &#xAC15;&#xC81C; mutational &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; R2 &#xB8E8;&#xD504;&#xB85C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC18C;&#xAC1C;&#xB294; R2 &#xB8E8;&#xD504;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC624; &#xC790;&#xC5F0; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C ES &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC640; &#xD638;&#xD658;&#xC740; lactamases-&#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C-ES &#xBCA0;&#xD0C0;, &#xAE30;&#xD310; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; R2 &#xB8E8;&#xD504;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBD80; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC; r 2 &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xAC1C;&#xD1B5; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xD310; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C &#xBCA0;&#xD0C0;-lactamases&#xC758; &#xC694;&#xC6D0; &#xBD84;&#xC790; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CMY 10&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;&#xB41C; &#xAE30;&#xD310; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; C &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8; &#xC81C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;.

La aparici&oacute;n y difusi&oacute;n de beta-lactamasas de espectro extendido (ES) inducen fracaso terap&eacute;utico y la falta de erradicaci&oacute;n de aislamientos cl&iacute;nicos incluso por tercera generaci&oacute;n beta-lact&aacute;micos como ceftazidima. CMY-10 es una beta-lactamasa de plasm&iacute;dico clase C con una amplia gama de sustratos. A diferencia de la orden de la clase C ES beta-lactamasa de Enterobacter cloacae GC1, el bucle Omega no afecta a la conformaci&oacute;n del sitio activo y la actividad catal&iacute;tica de CMY-10. En cambio, una canceladura de tres amino&aacute;cidos en el R2-lazo parece ser responsable de la actividad ES de CMY-10. Seg&uacute;n la estructura cristalina solucionada en 1.55 una resoluci&oacute;n, la supresi&oacute;n ampl&iacute;a significativamente el sitio activo de R2, que acomoda las cadenas laterales R2 de antibi&oacute;ticos beta-lact&aacute;micos. Esta observaci&oacute;n nos llev&oacute; a demostrar la actividad hydrolysing de CMY-10 hacia imipenem con un largo sustituto R2. Los an&aacute;lisis mutacionales forzadas de P99 beta-lactamase revelan que la introducci&oacute;n de mutaciones de la canceladura en el R2-lazo es capaz de ampliar el espectro de sustrato de clase C no ES beta-lactamasas, que es compatible con el aislamiento de las enzimas de C ES de clase natural dan cobijo a mutaciones de la canceladura en el R2-loop. En consecuencia, la apertura del sitio activo de R2 por la eliminaci&oacute;n de algunos restos en el R2-loop puede considerarse como una estrategia operativa molecular de beta-lactamasas de clase C para ampliar su espectro de sustrato.

Base estructural para el espectro extendido de sustrato de CMY-10, una clase plasm&iacute;dico C beta-lactamasa.

&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8C22;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x9176;&#x548C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x72B6;&#x6001;&#x4F9D;&#x8D56;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x9176;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A; IICB(Glc) &#xFF08;EIICB(Glc)) &#x4E0E;&#x5168;&#x7403;&#x7684;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x521A;&#x679C;&#x89E3;&#x653E;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;&#x5176;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x9176; IIB(Glc) (EIIB)&#xFF0C;EIICB(Glc) &#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF; tetrameric &#x521A;&#x679C;&#x89E3;&#x653E;&#x8FD0;&#x52A8;&#x5728;&#x4E00;&#x79CD;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x4F53;&#x7684;&#x521A;&#x679C;&#x89E3;&#x653E;&#x8FD0;&#x52A8;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684; EIIB &#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A; 1&#xFF1A; 1 &#x5316;&#x5B66;&#x8BA1;&#x91CF;&#x5B66;&#x3002;&#x754C;&#x9762;&#xFF0C;&#x542B;&#x6709;&#x786B;&#x9178;&#x6839;&#x79BB;&#x5B50;&#x5728;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;EIIB &#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x89C6;&#x56FE;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x963B;&#x548C;&#x6781;&#x6027;&#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x963B;&#x788D;&#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63ED;&#x793A; Mlc &#x5177;&#x6709;&#x5185;&#x5728;&#x7684;&#x7075;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x5176;&#x76EE;&#x6807; DNA &#x7ED3;&#x6784;&#x9002;&#x5E94;&#x548C;&#x521A;&#x679C;&#x89E3;&#x653E;&#x8FD0;&#x52A8;&#x4E0E; EIIB &#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x878D;&#x5408;&#x53EA;&#x5230;&#x4E8C;&#x805A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x5176; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x635F;&#x5931;&#x6697;&#x793A;&#x521A;&#x679C;&#x89E3;&#x653E;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x7075;&#x6D3B;&#x6027;&#x5176; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x3002;

&#x521A;&#x679C; IIBGlc &#x4E92;&#x52A8;&#x548C; Mlc &#x706D;&#x6D3B;&#x7684;&#x819C;&#x5C01;&#x5B58;&#x7684;&#x53EF;&#x4FE1;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

In Escherichia coli, glucose-dependent transcriptional induction of genes encoding a variety of sugar-metabolizing enzymes and transport systems is mediated by the phosphorylation state-dependent interaction of membrane-bound enzyme IICB(Glc) (EIICB(Glc)) with the global repressor Mlc. Here we report the crystal structure of a tetrameric Mlc in a complex with four molecules of enzyme IIB(Glc) (EIIB), the cytoplasmic domain of EIICB(Glc). Each monomer of Mlc has one bound EIIB molecule, indicating the 1:1 stoichiometry. The detailed view of the interface, along with the high-resolution structure of EIIB containing a sulfate ion at the phosphorylation site, suggests that the phosphorylation-induced steric hindrance and disturbance of polar intermolecular interactions impede complex formation. Furthermore, we reveal that Mlc possesses a built-in flexibility for the structural adaptation to its target DNA and that interaction of Mlc with EIIB fused only to dimeric proteins resulted in the loss of its DNA binding ability, suggesting that flexibility of the Mlc structure is indispensable for its DNA binding.

Analyses of Mlc-IIBGlc interaction and a plausible molecular mechanism of Mlc inactivation by membrane sequestration.

Chez Escherichia coli, glucose-d&eacute;pendant induction transcriptionnelle des g&egrave;nes codant pour des enzymes de m&eacute;tabolisation du sucre et des syst&egrave;mes de transport tr&egrave;s est m&eacute;di&eacute;e par l&#39;interaction de d&eacute;pendant de l&#39;&eacute;tat de phosphorylation de l&#39;enzyme li&eacute;e &agrave; la membrane IICB(Glc) (EIICB(Glc)) avec le r&eacute;presseur global du Mlc. Nous pr&eacute;sentons la structure cristalline d&#39;un t&eacute;tram&egrave;re Mlc dans un complexe avec quatre mol&eacute;cules d&#39;enzyme IIB(Glc) (PRAE), le domaine cytoplasmique de EIICB(Glc). Chaque monom&egrave;re du Mlc a une mol&eacute;cule PRAE li&eacute;e, indiquant la stoechiom&eacute;trie de 1:1. La vue d&eacute;taill&eacute;e de l&#39;interface, ainsi que la structure &agrave; haute r&eacute;solution du PRAE contenant une ion sulfate sur le site de phosphorylation, sugg&egrave;re que l&#39;emp&ecirc;chement st&eacute;rique induite par la phosphorylation et la perturbation des interactions intermol&eacute;culaires polaires font obstacle &agrave; la formation de complexes. En outre, nous r&eacute;v&eacute;lons que Mlc poss&egrave;de une flexibilit&eacute; d&#39;adaptation structurelle &agrave; sa cible ADN et que l&#39;interaction du Mlc avec PRAE ne fusionn&eacute;s qu&#39;aux prot&eacute;ines dim&eacute;riques a entra&icirc;n&eacute; la perte de sa capacit&eacute; de liaison de l&#39;ADN, ce qui sugg&egrave;re que la flexibilit&eacute; de la structure de la Mlc est indispensable pour sa liaison &agrave; l&#39;ADN.

Analyse de l&#39;interaction de la Mlc-IIBGlc et un m&eacute;canisme mol&eacute;culaire plausible d&#39;inactivation du Mlc par s&eacute;questration de la membrane.

In Escherichia coli ist Glukose-abh&auml;ngige transkriptionelle Induktion von Genen verschiedener Zucker-metabolisierenden Enzyme und Verkehrssysteme durch die Phosphorylierung Zustand-abh&auml;ngigen Interaktion membrangebundener Enzyms IICB(Glc) (EIICB(Glc)) mit der globalen Verdr&auml;nger Mlc. vermittelt. Hier berichten wir &uuml;ber die Kristallstruktur von einem tetrameren Mlc in einem Komplex mit vier Molek&uuml;le des Enzyms IIB(Glc) (EIIB), die zytoplasmatische Dom&auml;ne der EIICB(Glc). Jedes Monomer des Mlc hat einen gebundenen EIIB Molek&uuml;l, angibt, die 1:1-St&ouml;chiometrie. Die detaillierte Ansicht der Benutzeroberfl&auml;che sowie die hochaufl&ouml;sende Struktur der EIIB, enth&auml;lt ein Sulfat-Ion am Standort Phosphorylierung legt nahe, dass die sterische Hinderung induziert durch Phosphorylierung und St&ouml;rung des polar intermolekulare Wechselwirkungen Komplexbildung behindern. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass Mlc eine eingebaute Flexibilit&auml;t f&uuml;r die strukturelle Anpassung an ihr Ziel-DNA besitzt und die Interaktion von Mlc mit EIIB nur zu dimeren Proteine verschmolzen f&uuml;hrte zu den Verlust seiner DNA-Bindung-F&auml;higkeit, darauf hindeutet, dass die Flexibilit&auml;t der Mlc-Struktur f&uuml;r die DNA-Bindung unerl&auml;sslich ist.

Analysen der Mlc-IIBGlc-Interaktion und eine plausible Molekulare Mechanismen der Mlc-Inaktivierung von Membran-Sequestrierung.

In Escherichia coli, glucosio-dipendente induzione trascrizionale dei geni che codificano per una variet&agrave; di enzimi di metabolizzare lo zucchero e i sistemi di trasporto &egrave; mediata dall&#39;interazione dello stato-dipendente della fosforilazione della membrana-limiti enzima IICB(Glc) (EIICB(Glc)) con il repressore globale Mlc. Qui riportiamo la struttura cristallina di un Mlc tetramerica in un complesso con quattro molecole di enzima IIB(Glc) (EIIB), il dominio citoplasmico di EIICB(Glc). Ogni monomero di Mlc ha una molecola a EIIB associata, che indica la stechiometria 1:1. La vista dettagliata dell&#39;interfaccia, insieme con la struttura ad alta risoluzione di EIIB contenente un ione solfato presso il sito di fosforilazione, suggerisce che la fosforilazione indotta sterico e dispersione delle interazioni intermolecolari polare ostacolare la formazione dei complessi. Inoltre, vi sveliamo che Mlc possiede una flessibilit&agrave; incorporata per l&#39;adeguamento strutturale al proprio DNA bersaglio e che l&#39;interazione delle Mlc con EIIB fuso solo a proteine dimerica ha provocato la perdita della sua capacit&agrave; di legame del DNA, suggerendo che la flessibilit&agrave; della struttura Mlc &egrave; indispensabile per il grippaggio del DNA.

Analisi della Mlc-IIBGlc interazione e un plausibile meccanismo molecolare della Mlc inattivazione di sequestro di membrana.

&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x9175;&#x7D20;&#x3084;&#x4EA4;&#x901A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x9175;&#x7D20; IICB(Glc) (EIICB(Glc)) &#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB; &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC; Mlc&#x3002; &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x72B6;&#x614B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;4 &#x91CF;&#x4F53; Mlc &#x8907;&#x96D1;&#x3067; 4 &#x5206;&#x5B50;&#x9175;&#x7D20; IIB(Glc) (EIIB)&#x3001;EIICB(Glc) &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC; Mlc &#x306E; 1:1 &#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x91CF;&#x8AD6;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;1 &#x3064;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; EIIB &#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A73;&#x7D30;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x786B;&#x9178;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x542B;&#x6709; EIIB &#x306E;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x969C;&#x5BB3;&#x3068;&#x969C;&#x5BB3;&#x6975;&#x6027;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; Mlc &#x3092;&#x6240;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; DNA &#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4F5C;&#x308A;&#x4ED8;&#x3051;&#x306E;&#x67D4;&#x8EDF;&#x6027;&#x3068; Mlc &#x306E; EIIB &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3060;&#x3051;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x878D;&#x5408;&#x305D;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x80FD;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x305F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B; Mlc &#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x67D4;&#x8EDF;&#x6027;&#x304C;&#x305D;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Mlc IIBGlc &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068; Mlc &#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x819C;&#x9694;&#x96E2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x3063;&#x3068;&#x3082;&#x3089;&#x3057;&#x3044;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;

&#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;, &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC124;&#xD0D5; metabolizing &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xAD50;&#xD1B5; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; transcriptional &#xC720;&#xB3C4; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD6A8;&#xC18C; IICB(Glc) (&#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC9C4;&#xC555; Mlc&#xC640; eiicb(glc))&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C; IIB(Glc) (EIIB), eiicb(glc)&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790;&#xC640; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; tetrameric Mlc&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0;. Mlc&#xC758; &#xAC01; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4;&#xB294; 1:1 stoichiometry&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; EIIB &#xBD84;&#xC790;. &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD669;&#xC0B0; &#xC774;&#xC628;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; EIIB&#xC758; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xAD6C;&#xC870; &#xD568;&#xAED8; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0C1;&#xC138; &#xBCF4;&#xAE30; &#xC81C;&#xC548; &#xC785;&#xCCB4;&#xC801; &#xBC29;&#xD574; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xADF9; &#xC9C0; intermolecular &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xAD50;&#xB780; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xACF5;&#xAC1C; Mlc&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1; DNA &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC801;&#xC751;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xB41C; &#xC720;&#xC5F0;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; &#xBC0F; &#xC790;&#xC0AC;&#xC758; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; EIIB&#xC640; Mlc&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; dimeric &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC735;&#xD569; &#xC81C;&#xC548; Mlc &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xC720;&#xC5F0;&#xC131;&#xC740; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;.

Mlc-IIBGlc &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB9C9; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD558; &#xC5EC; Mlc &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xADF8;&#xB7F4;&#xB4EF;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;.

En Escherichia coli, dependiente de glucosa inducci&oacute;n transcripcional de genes que codifican una variedad de enzimas metabolizadoras de az&uacute;car y sistemas de transporte est&aacute; mediada por la interacci&oacute;n de estado-dependiente de fosforilaci&oacute;n de la enzima de membrana-limitan IICB(Glc) (EIICB(Glc)) con el represor global Mlc. Presentamos la estructura cristalina de un Mlc tetram&eacute;rica en un complejo con cuatro mol&eacute;culas de enzima IIB(Glc) (EIIB), el dominio citopl&aacute;smico de EIICB(Glc). Cada mon&oacute;mero de Mlc tiene una mol&eacute;cula EIIB encuadernada, indicando la estequiometr&iacute;a 1:1. La vista detallada de la interfaz, junto con la estructura de alta resoluci&oacute;n de EIIB que contiene un i&oacute;n sulfato en el sitio de fosforilaci&oacute;n, sugiere que el impedimento est&eacute;rico inducida por fosforilaci&oacute;n y perturbaci&oacute;n de las interacciones intermoleculares polares impiden la formaci&oacute;n de complejos. Adem&aacute;s, revelamos que Mlc posee una flexibilidad incorporada para la adaptaci&oacute;n estructural a su ADN diana y que interacci&oacute;n de Mlc con EIIB fundido s&oacute;lo a prote&iacute;nas dim&eacute;rica result&oacute; en la p&eacute;rdida de su capacidad de uni&oacute;n de ADN, lo que sugiere que la flexibilidad de la estructura del Mlc es indispensable para su uni&oacute;n de ADN.

An&aacute;lisis de la interacci&oacute;n de Mlc-IIBGlc y un mecanismo molecular plausible de Mlc inactivaci&oacute;n por secuestro de membrana.

DJ-1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x9690;&#x6027;&#x65E9;&#x53D1;&#x578B;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3002;DJ-1 &#x662F;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x4E8C;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EF4;&#x62A4;&#x5BF9;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x82E5;&#x5E72;&#x884C;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x65E0;&#x6CD5;&#x6B63;&#x5E38;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684; DJ-1 &#x7684;&#x60A3;&#x8005;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x65E0;&#x673A;&#x78F7;&#xFF0C;&#x5C55;&#x54C1;&#x6C34;&#x5E73;&#x5347;&#x9AD8;&#x4E0E;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x8F6C;&#x6362; DJ 1 &#x4E1D;&#x72B6;&#x805A;&#x5408;&#x3002;2.4 A &#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3001; DJ 1 &#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x662F; P (i) &#x901A;&#x8FC7;&#x7EBF;&#x6027;&#x5806;&#x79EF;-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5BF9;&#x539F;&#x7A97;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7136;&#x540E;&#x6346;&#x7ED1;&#x6210;&#x4E1D;&#x72B6;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x3002;

&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x4EBA; DJ-1 &#x4E1D;&#x72B6;&#x805A;&#x5408;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x65E0;&#x673A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;

Mutations in the DJ-1 gene have been implicated in the autosomal recessive early onset parkinsonism. DJ-1 is a soluble dimeric protein with critical roles in response to oxidative stress and in neuronal maintenance. However, several lines of evidence suggest the existence of a nonfunctional aggregated form of DJ-1 in the brain of patients with some neurodegenerative diseases. Here, we show that inorganic phosphate, an important anion that exhibits elevated levels in patients with Parkinson disease, transforms DJ-1 into filamentous aggregates. According to the 2.4-A crystal structure, DJ-1 dimers are linearly stacked through P(i)-mediated interactions to form protofilaments, which are then bundled into a filamentous assembly.

Crystal structure of filamentous aggregates of human DJ-1 formed in an inorganic phosphate-dependent manner.

Des mutations du g&egrave;ne DJ-1 ont &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;es dans l&#39;apparition pr&eacute;coce r&eacute;cessive autosomale parkinsonisme. DJ-1 est une prot&eacute;ine dim&eacute;rique soluble avec un r&ocirc;le important dans la r&eacute;ponse au stress oxydatif et en maintenance neuronale. Cependant, plusieurs sources de donn&eacute;es sugg&egrave;rent l&#39;existence d&#39;une forme agr&eacute;g&eacute;e non fonctionnelle de DJ-1 dans le cerveau des patients avec certaines maladies neurod&eacute;g&eacute;n&eacute;ratives. Ici, nous montrons que phosphate inorganique, un anion important qui pr&eacute;sente des concentrations &eacute;lev&eacute;es chez les patients atteints de la maladie de Parkinson, transforme DJ-1 agr&eacute;gats filamenteuses. Selon la structure cristalline de 2,4-A, DJ-1 dim&egrave;res sont lin&eacute;airement empil&eacute;s par P (i)-m&eacute;di&eacute;e par les interactions &agrave; forme protofilaments, qui sont ensuite regroup&eacute;s dans un assembly filamenteux.

Structure cristalline d&#39;agr&eacute;gats filamenteuses de DJ-1 humain form&eacute; d&#39;une mani&egrave;re d&eacute;pendante de phosphate inorganique.

Mutationen im DJ-1-Gen in die autosomal rezessive fr&uuml;h einsetzende verwickelt worden haben Parkinson-Syndrom. DJ-1 ist ein l&ouml;sliches dimeren Protein mit kritischen Rollen in Reaktion auf oxidativen Stress und neuronale Wartung. Jedoch schlagen mehrere Zeilen von beweisen die Existenz einer nicht funktionsf&auml;higen aggregierten Form des DJ-1 im Gehirn der Patienten mit einigen Neurodegenerative Krankheiten. Hier zeigen wir, dass anorganische Phosphat, eine wichtige Anion, das erh&ouml;hte Niveaus bei Patienten mit Parkinson-Krankheit aufweist DJ-1 verwandelt sich in faserigen Aggregaten. Nach der 2.4-A Kristallstruktur, DJ-1-Dimere werden linear gestapelt durch P (i)-vermittelte Interaktionen zur Form Protofilaments, die dann in eine filament&ouml;se Assembly geb&uuml;ndelt sind.

Kristallstruktur von faserigen Aggregaten des menschlichen DJ-1 gebildet in anorganischen Phosphat-abh&auml;ngigen Weise.

Le mutazioni del gene DJ-1 sono state implicate in ad esordio precoce autosomica recessiva parkinsonismo. DJ-1 &egrave; una proteina dimerica solubile con ruoli critici in risposta allo stress ossidativo e nella manutenzione di un neurone. Tuttavia, parecchie linee di prova suggeriscono l&#39;esistenza di una forma aggregata non funzionale di DJ-1 nel cervello dei pazienti con alcune malattie neurodegenerative. Qui, un importante anione che presenta livelli elevati nei pazienti con malattia di Parkinson, mostriamo quel fosfato inorganico, trasforma DJ-1 in aggregati filamentosi. Secondo la struttura di cristallo 2.4-A, DJ-1 dimeri sono impilati linearmente attraverso P (i)-mediata da interazioni di forma protofilamenti, che sono poi impacchettato in un assembly filamentose.

Struttura cristallina di aggregati filamentosi di DJ-1 umana formata in maniera dipendente dal fosfato inorganica.

DJ 1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x52A3;&#x6027;&#x65E9;&#x671F;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x3002;DJ 1 &#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x884C;&#x306E; DJ - 1 &#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x96C6;&#x8A08;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x7121;&#x6A5F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5869;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x9AD8;&#x5024;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5909;&#x63DB; DJ 1 &#x7CF8;&#x72B6;&#x306E;&#x96C6;&#x7D04;&#x3078;&#x3002;2.4 A &#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3068;&#x3001;DJ 1 &#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC; P (i) &#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x76F4;&#x7DDA;&#x7A4D;&#x307F;&#x4E0A;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x305F;-[&#x7CF8;&#x72B6;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306B;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; &#x30E6;&#x30E9;&#x30E6;&#x30E9;&#x3059;&#x308B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593; DJ 1 &#x306E;&#x7CF8;&#x72B6;&#x306E;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x7121;&#x6A5F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

DJ-1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0C1; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC5F4;&#xC131; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; parkinsonism. DJ-1 &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; dimeric &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC99D;&#xAC70;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC904; &#xC77C;&#xBD80; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; DJ-1&#xC758; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC9D1;&#xACC4; &#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xAC74;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xADF8; &#xBB34;&#xAE30; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;, &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xBCC0;&#xD658; DJ 1 filamentous &#xC9D1;&#xACC4;. DJ-1 &#xC774;&#xD569;&#xCCB4; P (i)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC120;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xB204;&#xC801; &#xD558; &#xC5EC; 2.4 A &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;-filamentous &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBC88;&#xB4E4; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC591;&#xC2DD;&#xC774; protofilaments &#xD558; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; DJ 1 filamentous &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870; &#xBB34;&#xAE30; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD615;&#xC131;.

Las mutaciones en el gen DJ-1 han sido implicadas en el inicio temprano recesivo de un autosoma parkinsonismo. DJ-1 es una prote&iacute;na dim&eacute;rica soluble con papeles cr&iacute;ticos en respuesta al estr&eacute;s oxidativo y mantenimiento neuronal. Sin embargo, varias l&iacute;neas de evidencia sugieren la existencia de una forma agregada no funcional de DJ-1 en el cerebro de pacientes con enfermedades neurodegenerativas. Aqu&iacute;, demostramos fosfato inorg&aacute;nico, un ani&oacute;n importante que exhibe niveles elevados en pacientes con enfermedad de Parkinson, transforma DJ-1 en agregados filamentosos. Seg&uacute;n la estructura de cristal de 2.4-A, DJ-1 d&iacute;meros son apiladas linealmente a trav&eacute;s de P (i)-mediada por interacciones de forma protofilaments, que luego se l&iacute;an en una Asamblea filamentosa.

Estructura cristalina de agregados filamentosos de DJ-1 humano formado de una manera dependiente de fosfato inorg&aacute;nica.

&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;-M-15 &#x65B0;&#x5174;&#x6269;&#x5C55;&#x9891;&#x8C31; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x4E16;&#x754C;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#xFF0C;hydrolyzes &#x7684; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7C7B;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x3001; &#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x73AF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6CBB;&#x7597;&#x5931;&#x8D25;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6D88;&#x706D;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E09;&#x4EE3; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x662F;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x836F;&#x7269;&#x5BF9;&#x60A3;&#x8005;&#x4ECE;&#x533B;&#x9662;&#x611F;&#x67D3;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;-M-15 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x7EAF;&#x5316;&#x548C;&#x5177;&#x4F53;&#x5316;&#x5728; 298 K.x &#x5C04;&#x7EBF;&#x884D;&#x5C04;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;-M-15 &#x6C34;&#x6676;&#x6536;&#x96C6;&#x4E86;&#x81F3; 1.46 &#x2460; &#x4F7F;&#x7528;&#x540C;&#x6B65;&#x8F90;&#x5C04;&#x7684;&#x51B3;&#x8BAE;&#x3002;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;-M-15 &#x6C34;&#x6676;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7EC4; P2(1)2(1)2(1)&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x53C2;&#x6570; = 45.50&#xFF0C;b = 44.23 &#x548C; c = 116.92 &#x57C3;.&#x5806;&#x79EF;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x975E;&#x5BF9;&#x79F0;&#x80A1;&#x53EF;&#x80FD;&#x542B;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x4E0E;&#x6EB6;&#x5242;&#x542B;&#x91CF;&#x7684; 41.26%&#x3002;

&#x7ED3;&#x6676;&#x548C;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;-M-15&#xFF0C;&#x6269;&#x5C55;&#x9891;&#x8C31; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x6388;&#x4E88;&#x5168;&#x7403;&#x65B0;&#x5174;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x8010;&#x836F;&#x7684;&#x521D;&#x6B65; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

CTX-M-15, an extended-spectrum Î²-lactamase emerging worldwide, hydrolyzes lactam ring of Î²-lactam antibiotics, and thus causes therapeutic failure and a lack of eradication of pathogenic bacteria by third-generation Î²-lactams. Therefore, the enzyme is a potential target for developing agents against pathogens isolated from patients suffering from nosocomial infections. The CTX-M-15 protein was purified and crystallized at 298 K. X-ray diffraction data from CTX-M-15 crystal have been collected to 1.46 Ã… resolution using synchrotron radiation. The crystal of CTX-M-15 belongs to space group P2(1)2(1)2(1), with unit-cell parameters a = 45.50, b = 44.23, and c = 116.92 Ã…. Analysis of the packing density shows that the asymmetric unit probably contains two molecules with a solvent content of 41.26%.

Crystallization and preliminary X-ray crystallographic analysis of CTX-M-15, an extended-spectrum Î²-lactamase conferring worldwide emerging antibiotic resistance.

CTX-M-15, une &beta;-lactamase &agrave; spectre &eacute;tendu &eacute;mergentes dans le monde entier, s&#39;hydrolyse lactame des &beta;-lactamines et donc cause &eacute;chec th&eacute;rapeutique et l&#39;absence d&#39;&eacute;radication des bact&eacute;ries pathog&egrave;nes par la troisi&egrave;me g&eacute;n&eacute;ration &beta;-lactames. L&#39;enzyme est donc une cible potentielle pour le d&eacute;veloppement d&#39;agents pathog&egrave;nes isol&eacute;es de patients souffrant d&#39;infections nosocomiales. La prot&eacute;ine de CTX-M-15 a &eacute;t&eacute; purifi&eacute;e et cristallis&eacute;e &agrave; 298 K. x-ray diffraction donn&eacute;es cristal CTX-M-15 ont &eacute;t&eacute; recueillies &agrave; 1,46 &Aring; r&eacute;solution utilisant le rayonnement synchrotron. Le cristal de CTX-M-15 appartient au groupe d&#39;espace P2(1)2(1)2(1), avec des param&egrave;tres de la maille unitaire a = 45,50, b = 44,23 et c = 116.92 &Aring;. analyse de la densit&eacute; indique que l&#39;unit&eacute; asym&eacute;trique contient probablement deux mol&eacute;cules avec une teneur en solvants de 41.26 %.

Cristallisation et pr&eacute;liminaire analyse cristallographique aux rayons x de CTX-M-15, une &beta;-lactamase &agrave; spectre &eacute;tendu qui conf&egrave;re la r&eacute;sistance aux antibiotiques &eacute;mergente dans le monde entier.

CTX-M-15, ein ausgedehnt-Spektrum &beta;-Lactamase aufstrebenden weltweit Spalten Lactam-Ring der &beta;-Lactam-Antibiotika und bewirkt somit therapeutische Fehler und fehlende Beseitigung der pathogenen Bakterien von Dritten Generation &beta;-Lactame. Daher ist das Enzym ein potenzielles Ziel f&uuml;r die Entwicklung von Agenten gegen Krankheitserreger, die von Patienten mit Nosokomialinfektionen isoliert. Das CTX-M-15-Protein wurde gereinigt und kristallisiert bei 298 K. R&ouml;ntgen Diffraktion Daten von CTX-M-15 Kristall, 1,46 &Aring; gesammelt wurden Aufl&ouml;sung mit Synchrotronstrahlung. Der Kristall der CTX-M-15 geh&ouml;rt zur Raumgruppe P2(1)2(1)2(1), Elementarzelle Parameter ein = 45.50, b = 44.23 und c = 116.92 &Aring;. Analyse der Packungsdichte zeigt, dass die asymmetrische Einheit wahrscheinlich zwei Molek&uuml;le mit einem L&ouml;semittelgehalt von 41,26 % enth&auml;lt.

Kristallisation und vorl&auml;ufige kristallographische R&ouml;ntgenanalyse der CTX-M-15, ein ausgedehnt-Spektrum &beta;-Lactamase eine weltweit aufstrebenden antibiotische Resistenz.

CTX-M-15, un esteso-spettro &beta;-lattamasi emergenti in tutto il mondo, idrolizza lactam ring di antibiotici &beta;-lattamici e cos&igrave; provoca il fallimento terapeutico e la mancanza di eradicazione dei batteri patogeni di terza generazione &beta;-lattami. Pertanto, l&#39;enzima &egrave; un potenziale bersaglio per lo sviluppo di agenti patogeni isolati da pazienti affetti da infezioni nosocomiali. La proteina di CTX-M-15 &egrave; stata purificata e cristallizzata a 298 K. raggi x diffrazione dati da crystal CTX-M-15 sono stati raccolti a 1,46 &Aring; risoluzione mediante radiazione di sincrotrone. Il cristallo di CTX-M-15 appartiene al gruppo di spazio P2(1)2(1)2(1), con i parametri di cella unitaria un = 45.50, b = 44.23 e c = 116.92 &Aring;. analisi della densit&agrave; d&#39;imballaggio dimostra che l&#39;unit&agrave; asimmetrica probabilmente contiene due molecole con un contenuto di solvente di 41,26%.

Cristallizzazione e preliminare analisi cristallografica dei raggi x di CTX-M-15, un esteso-spettro &beta;-lattamasi che conferiscono resistenza agli antibiotici emergente in tutto il mondo.

CTX-M-15&#x3001;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x65B0;&#x8208;&#x4E16;&#x754C;&#x4E2D;&#x3067;&#x3001;&beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x7CFB;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x74B0;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x7B2C;&#x4E09;&#x4E16;&#x4EE3; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6CBB;&#x7642;&#x5931;&#x6557;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x64B2;&#x6EC5;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x9662;&#x5185;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306B;&#x82E6;&#x3057;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;CTX M 15 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3044;&#x305F;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;k. &#x306E; x &#x7DDA;&#x56DE;&#x6298;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; CTX M 15 &#x7D50;&#x6676;&#x304B;&#x3089; 1.46 &Aring; &#x306B;&#x53CE;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 298 &#x3067;&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x653E;&#x5C04;&#x5149;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3002;CTX M 15 &#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x9818;&#x57DF;&#x5358;&#x4F4D;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x6301;&#x3064; P2(1)2(1)2(1)&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x7FA4;&#x306B;&#x5C5E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;45.50&#x3001;= b = 44.23 &#x3068; c = 116.92 &Aring;&#x3002; &#x30D1;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F; 41.26% &#x306E;&#x6EB6;&#x5264;&#x542B;&#x6709;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x3068;&#x4E88;&#x5099;&#x7684; x &#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30BC;&#x6388;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x4E16;&#x754C;&#x4E2D;&#x306E;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x65B0;&#x8208; CTX M 15 &#x306E;&#x3002;

CTX-M-15 &#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &beta;-&#xC81C; &#xC2E0;&#xD765; &#xC804;&#xC138;&#xACC4;, &beta;-&#xB77D;&#xD0D0; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC758; &#xB77D;&#xD0D0; &#xB9C1; hydrolyzes &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; 3 &#xC138;&#xB300; &beta;-lactams&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC2E4;&#xD328; &#xBC0F; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xBC15;&#xBA78;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xB0B4; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0;&#xD1B5; &#xBC1B;&#xC544; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xC774;&#xB2E4;. CTX M 15 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xD654; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; 298 CTX M 15 &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8;&#xC5D0;&#xC11C; K. x-&#xC120; &#xD68C;&#xC808; &#xB370;&#xC774;&#xD130; 1.46 &Aring; &#xC218;&#xC9D1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xC815; &#xD654; &#xB41C; synchrotron &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD655;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACF5;&#xAC04; &#xADF8;&#xB8F9; P2(1)2(1)2(1), &#xB2E8;&#xC704; &#xC140; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xAC00; &#xC18D;&#xD55C; CTX M 15&#xC758; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8;&#xC744; 45.50, = b 44.23, &#xBC0F; c = = 116.92 &Aring;. &#xD328;&#xD0B9; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xB2E8;&#xC704; &#xC544;&#xB9C8; 41.26%&#xC758; &#xC194;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xC640; 2 &#xAC1C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;.

&#xACB0;&#xC815; &#xD654; &#xBC0F; CTX M-15,-&#xB77D; &#xD0C0; &#xB9C8;&#xB294; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &beta;-&#xC81C; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xC800;&#xD56D; &#xC804;&#xC138;&#xACC4; &#xC2E0;&#xD765; &#xBD80;&#xC5EC;&#xC758; &#xC608;&#xBE44; &#xC120; crystallographic &#xBD84;&#xC11D;.

CTX-M-15, un &beta;-lactamasas de espectro extendido emergentes en todo el mundo, hidroliza el anillo betalact&aacute;mico de antibi&oacute;ticos &beta;-lact&aacute;micos y as&iacute; provoca fracaso terap&eacute;utico y la falta de eliminaci&oacute;n de bacterias pat&oacute;genas por tercera generaci&oacute;n &beta;-lact&aacute;micos. Por lo tanto, la enzima es un blanco potencial para el desarrollo de agentes contra pat&oacute;genos aislados de pacientes que sufren de infecciones nosocomiales. La prote&iacute;na de CTX-M-15 fue purificada y cristalizada en 298 se han recopilado datos de difracci&oacute;n de rayos x K. de CTX-M-15 cristal a 1.46 &Aring; resoluci&oacute;n utilizando radiaci&oacute;n de sincrotr&oacute;n. El cristal de CTX-M-15 pertenece al grupo P2(1)2(1)2(1), con par&aacute;metros de celda unidad un = 45.50, b = 44.23 y c = 116.92 &Aring;. An&aacute;lisis de la densidad de embalaje muestran que la unidad asim&eacute;trica probablemente contiene dos mol&eacute;culas con un contenido de solvente de 41.26%.

Cristalizaci&oacute;n y an&aacute;lisis cristalogr&aacute;fico de radiograf&iacute;a preliminar de CTX-M-15, un &beta;-lactamasas de espectro extendido que confieren resistencia a los antibi&oacute;ticos emergente en todo el mundo.

(Ds) &#x53CC;&#x94FE; RNA &#x5E72;&#x6270; (RNAi) &#x5E7F;&#x6CDB;&#x7528;&#x4F5C;&#x690D;&#x7269;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x53CD;&#x5411;&#x9057;&#x4F20;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x6210;&#x7A33;&#x5B9A;&#x690D;&#x682A;&#x8868;&#x793A; dsRNAs &#x6216;&#x4EBA;&#x5DE5; Microrna (amiRNAs) &#x8DB3;&#x5E95;&#x6216;&#x7531;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8; &#xFF08;VIGS&#xFF09; &#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x672C;&#x6784;&#x6216;&#x77AC;&#x6001; RNAi &#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5DE5;&#x5177;&#x4E3A;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5B66;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4F18;&#x79C0;&#x7684;&#x8D44;&#x6E90;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x9700;&#x8981;&#x8F7D;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE; dsRNAs &#x6216; amiRNAs &#x5BF9;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5316;&#x548C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x682A;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x6216;&#x591A;&#x4E2A; VIGS &#x7EBF;&#x8DEF;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x4E00;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x65BD;&#x52A0;&#x65F6;&#x95F4;&#x3001; &#x52B3;&#x52A8;&#x529B;&#x548C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x8981;&#x6C42;&#x3002;&#x6B63;&#x5982;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x6240;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x539F;&#x751F;&#x8D28;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x8F6C;&#x67D3;&#x4E0E;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x5408;&#x6210; dsRNAs RNAi &#x6548;&#x5E94;&#x89C4;&#x907F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7AE0;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x8BF4;&#x660E;&#x77AC;&#x6001;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x539F;&#x751F;&#x8D28;&#x4F53;&#x4F7F;&#x7528;&#x5408;&#x6210; dsRNAs &#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E3A;&#x540E;&#x7EED;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x63D0;&#x4F9B;&#x529E;&#x6CD5;&#x7684;&#x5B9E;&#x4F8B;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x53CC;&#x94FE; RNA &#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x539F;&#x751F;&#x8D28;&#x4F53;&#x3002;

Double-stranded (ds) RNA interference (RNAi) is widely used as a reverse genetic approach for functional analysis of plant genes. Constitutive or transient RNAi effects in plants have been achieved via generating stable transformants expressing dsRNAs or artificial microRNAs (amiRNAs) in planta or by viral-induced gene silencing (VIGS). Although these tools provide outstanding resources for functional genomics, they require generation of vectors expressing dsRNAs or amiRNAs against targeted genes, transformation and propagation of transformed plants, or maintenance of multiple VIGS lines and thus impose time, labor, and space requirements. As we showed recently, these limitations can be circumvented by inducing RNAi effects in protoplasts via transfecting them with in vitro-synthesized dsRNAs. In this chapter we detail the procedure for transient gene silencing in protoplasts using synthetic dsRNAs and provide examples of approaches for subsequent functional analyses.

Direct transfer of synthetic double-stranded RNA into protoplasts of Arabidopsis thaliana.

Double brin (ds) l&#x26;#39;interf&#xE9;rence ARN (ARNi) est largement utilis&#xE9; comme une approche de g&#xE9;n&#xE9;tique inverse pour l&#x26;#39;analyse fonctionnelle des g&#xE8;nes de plantes. Constitutifs ou transitoire des effets ARNi dans les usines ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;s par la g&#xE9;n&#xE9;ration des transformants stables exprimant ARNdb ou microARN artificiels (amiRNAs) in planta ou par gene silencing d&#x26;#39;origine virale (VIGS). Bien que ces outils offrent les meilleures ressources pour la g&#xE9;nomique fonctionnelle, dont ils ont besoin g&#xE9;n&#xE9;ration de vecteurs exprimant ARNdb ou amiRNAs contre g&#xE8;nes cibl&#xE9;s, la transformation et la propagation des plantes transform&#xE9;es, ou l&#x26;#39;entretien de lignes de VIGS multiples et imposent donc des temps, de travail, et les besoins en espace. Comme nous l&#x26;#39;avons montr&#xE9; r&#xE9;cemment, ces limitations peuvent &#xEA;tre contourn&#xE9;es par induire des effets ARNi dans des protoplastes par les transfecter avec ARNdb synth&#xE9;tis&#xE9;s in vitro. Dans ce chapitre, nous d&#xE9;taillons la proc&#xE9;dure d&#x26;#39;inactivation de g&#xE8;ne passag&#xE8;re dans les protoplastes en utilisant ARNdb synth&#xE9;tiques et des exemples d&#x26;#39;approches pour la suite des analyses fonctionnelles.

Transfert direct d&#x26;#39;synth&#xE9;tiques d&#x26;#39;ARN double brin dans des protoplastes d&#x26;#39;Arabidopsis thaliana

(Ds) doppelstr&auml;ngige RNA-Interferenz (RNAi) ist als umgekehrte genetischer Ansatz f&uuml;r Funktionsanalyse von Pflanzengene verbreitet. Konstitutive oder transiente RNAi-Effekte in Pflanzen wurden erreicht, &uuml;ber stabile Transformants DsRNAs oder k&uuml;nstlichen MicroRNAs (AmiRNAs) in Planta oder von viral-induzierte gen-silencing (VIGS) generieren. Obwohl diese Tools f&uuml;r funktionelle Genomik hervorragende Ressourcen bereitstellen, sie erfordern Generation von Vektoren Ausdr&uuml;cken, DsRNAs oder AmiRNAs gegen gezielte Gene, Transformation und Vermehrung der transformierte Pflanzen und Erhaltung der VIGS Mehrfachlinien und somit zu verh&auml;ngen, Zeit, Arbeit und Platzbedarf. Wie wir k&uuml;rzlich gezeigt hat, k&ouml;nnen diese Einschr&auml;nkungen umgangen werden, durch RNAi-Effekte in Urformen &uuml;ber transfecting mit in Vitro synthetisiert DsRNAs induzieren. In diesem Kapitel haben wir detailliert das Verfahren f&uuml;r transient-gen-silencing in Urformen mit synthetischen DsRNAs und geben Sie Beispiele f&uuml;r Ans&auml;tze f&uuml;r sp&auml;tere Funktionsanalysen.

Direkte &Uuml;bertragung von synthetischen doppelstr&auml;ngige RNA in Urformen von Arabidopsis Thaliana.

Double-stranded (ds) interferenza del RNA (RNAi) &egrave; ampiamente usato come un approccio di genetico inverso per l&#39;analisi funzionale dei geni della pianta. Costitutivi o transitori effetti di RNAi in piante sono stati raggiunti tramite generazione di stabili transformants esprimendo RNAds o microRNA artificiali (amiRNAs) in planta o dal gene virale indotta silenziamento (VIGS). Sebbene questi strumenti forniscono risorse eccezionali per la genomica funzionale, essi richiedono la generazione di vettori che esprimono RNAds o amiRNAs contro geni mirate, trasformazione e moltiplicazione delle piante trasformate, o manutenzione di linee multiple VIGS e quindi imporre requisiti di spazio tempo e manodopera. Come abbiamo mostrato recentemente, queste limitazioni possono essere aggirate da indurre RNAi effetti in protoplasti tramite loro con transfecting di RNAds sintetizzato in vitro. In questo capitolo abbiamo dettaglio la procedura per il silenziamento genico transitorio in protoplasti utilizzando RNAds sintetici e fornire esempi di approcci per successive analisi funzionale.

Trasferimento diretto di sintetico double-stranded RNA in protoplasti di Arabidopsis thaliana.

&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#xFF08;ds&#xFF09;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x304F;&#x690D;&#x7269;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9006;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x69CB;&#x6210;&#x7684;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;RNAi&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x690D;&#x7269;&#x4F53;&#x3084;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;VIGS&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;dsRNA&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#xFF08;amiRNAs&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30B2;&#x30CE;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x9396;dsRNA&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x4F1D;&#x64AD;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;amiRNAs&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;VIGS&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x6642;&#x9593;&#x3001;&#x52B4;&#x529B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x3092;&#x8AB2;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x6700;&#x8FD1;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x305F;dsRNA&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;RNAi&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8A73;&#x7D30;&#x5408;&#x6210;dsRNA&#x3092;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x4F8B;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;RNA&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x8EE2;&#x9001;

&#xB354;&#xBE14;-&#xC88C;&#xCD08; (ds) RNA &#xAC04;&#xC12D; (RNAi) &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; transformants dsRNAs &#xB610;&#xB294; &#xC778;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; microRNAs (amiRNAs) planta &#xB610;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC720;&#xB3C4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; (VIGS) &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xD604; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC815; &#xB610;&#xB294; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; RNAi &#xD6A8;&#xACFC; &#xB2EC;&#xC131;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC720;&#xC804;&#xCCB4;&#xD559;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB6F0;&#xC5B4;&#xB09C; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; dsRNAs &#xB610;&#xB294; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, &#xBCC0;&#xD658; &#xD558; &#xACE0; &#xBCC0;&#xD658; &#xB41C; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC804;&#xD30C; &#xB610;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; VIGS &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Amirnas&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC04;, &#xB178;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xACF5;&#xAC04; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xBD80;&#xACFC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00; &#xD569;&#xC131; Dsrnas&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; transfecting&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; protoplasts&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; RNAi &#xD6A8;&#xACFC; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD53C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD569;&#xC131; Dsrnas&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; protoplasts&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC808;&#xCC28;&#xC5D0; &#xC790;&#xC138;&#xD788; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xD6C4;&#xC18D; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC608;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Arabidopsis thaliana&#xC758; protoplasts&#xB85C; &#xD569;&#xC131; &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; RNA&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC804;&#xC1A1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

De doble cadena (ds) RNA de interferencia (ARNi) es ampliamente utilizado como un m&#xE9;todo de gen&#xE9;tica inversa para el an&#xE1;lisis funcional de genes de plantas. RNAi efectos constitutivos o transitoria en las plantas se han logrado a trav&#xE9;s de la generaci&#xF3;n de transformantes estables que expresan ARN de doble cadena o microRNAs artificiales amiRNAs) en la planta o por el silenciamiento g&#xE9;nico inducido por virus (VIGS). A pesar de estas herramientas proporcionan los recursos pendientes de la gen&#xF3;mica funcional, que requieren la generaci&#xF3;n de vectores que expresan ARN de doble cadena o amiRNAs contra determinados genes, la transformaci&#xF3;n y la propagaci&#xF3;n de las plantas transformadas, o el mantenimiento de las l&#xED;neas de VIGS m&#xFA;ltiples e imponer as&#xED; el tiempo, el trabajo y las necesidades de espacio. Como mostramos recientemente, estas limitaciones pueden ser evitados mediante la inducci&#xF3;n de los efectos de RNAi en protoplastos a trav&#xE9;s de la transfecci&#xF3;n con ARN de doble cadena in vitro de s&#xED;ntesis. En este cap&#xED;tulo se detalla el procedimiento para el silenciamiento del gen transitoria en protoplastos utilizando ARN de doble cadena sint&#xE9;tico y dar ejemplos de enfoques para los subsiguientes an&#xE1;lisis funcionales.

Transferencia directa de sint&#xE9;tico de doble cadena de ARN en protoplastos de Arabidopsis thaliana

&#x535F;&#x5549;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7269;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x6D41;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x5173;&#x63A7;&#x5236;&#x73AF;&#x5883;&#x80C1;&#x8FEB;&#x4E0B;&#x535F;&#x5549;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x6240;&#x77E5;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76D1;&#x6D4B;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C34;&#x7A3B; (&#x7A3B;) &#x690D;&#x7269;&#x5BF9;&#x5E72;&#x65F1;&#x80C1;&#x8FEB;&#x54CD;&#x5E94;&#x8868;&#x793A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x539F;&#x535F;&#x5549;&#x539F;&#x6C27;&#x5316;&#x9176; (PPO)&#x3002;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7684;&#x8010;&#x65F1;&#x6027;&#xFF0C;&#x5982;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x5C04;&#x6C34;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x548C;&#x66F4;&#x4F18;&#x60E0;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x5E73;&#x8861;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x690D;&#x7269;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x690D;&#x7269;&#x56DE;&#x5E94;&#x5E72;&#x65F1;&#x80C1;&#x8FEB;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x5728;&#x5C04;&#x6C34;&#x6F5C;&#x529B;&#x548C;&#x6C27;&#x5316;&#x4EE3;&#x8C22;&#x53D8;&#x5316;&#x4E4B;&#x524D;&#x53D1;&#x75C5;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x6E05;&#x7406;&#x535F;&#x5549;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x7684;&#x6811;&#x53F6;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x51CF;&#x8F7B;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x6FC0;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x539F;&#x535F;&#x5549; IX&#x3001; &#x539F;&#x53F6;&#x7EFF;&#x9178;&#x3001; &#x9541;-&#x539F;&#x535F;&#x5549; IX &#x548C;&#x5176;&#x7532;&#x57FA;&#x916F;&#x6CA1;&#x6709;&#x6216;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6CA1;&#x6709;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4E0E;&#x6C34;&#x538B;&#x529B;&#x7684;&#x52A0;&#x5267; (-3.1 MPa&#xFF09; &#x5728;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#xFF0C;&#x800C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x4FDD;&#x7559;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x5728;&#x67D0;&#x79CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x535F;&#x5549;&#x5408;&#x6210;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x53F6;&#x7EFF;&#x7D20;&#x5206;&#x652F;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x4E0B;&#x8C03;&#x4E0B;&#x8131;&#x6C34;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x66F4;&#x5F3A;&#x538B;&#x5236;&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3002;&#x6709;&#x5E72;&#x65F1;&#x5F3A;&#x8C03;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4F7F;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x4F7F;&#x5927;&#x6C60; 5-&#x6C28;&#x57FA;&#x4E59;&#x9170;&#x4E19;&#x9178;&#x548C;&#x539F;&#x535F;&#x5549; IX &#x7684;&#x8840;&#x7EA2;&#x7D20;&#x5206;&#x652F;&#x4E2D;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178; 1 &#x534A;&#x8F6C;&#x6C28;&#x9176;&#x3001; PPO1 &#x548C; Fe Chelatase2 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x591A;&#x915A;&#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6700;&#x7EC8;&#x53D7;&#x5E72;&#x65F1;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#xFF0C;&#x6E05;&#x695A;&#x8868;&#x660E;&#x64CD;&#x7EB5;&#x7684;&#x535F;&#x5549;&#x5408;&#x6210;&#x53EF;&#x4EA7;&#x751F;&#x8010;&#x65F1;&#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301; tetrapyrroles &#x4FE1;&#x53F7;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x72B6;&#x6001;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x5E72;&#x65F1;&#x80C1;&#x8FEB;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x3002;

&#x6C34;&#x5206;&#x80C1;&#x8FEB;&#x4E0B;&#x7684;&#x535F;&#x5549;&#x5408;&#x6210;&#x63A7;&#x5236;&#xFF1A; &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C34;&#x7A3B;&#x8010;&#x5E72;&#x65F1;&#x6301;&#x7EED;&#x535F;&#x5549;&#x72B6;&#x6001;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

A controlled flow of porphyrin metabolites is critical for organisms, but little is known about the control of porphyrin biosynthesis under environmental stress. We monitored transgenic rice (Oryza sativa) plants expressing Myxococcus xanthus protoporphyrinogen oxidase (PPO) for their response to drought stress. Transgenic plants showed significantly improved drought tolerance, as indicated by a higher shoot water potential, less oxidative damage, and a more favorable redox balance compared with wild-type plants. Both transgenic and wild-type plants responded to the onset of drought stress, even prior to changes in shoot water potential and oxidative metabolism, by drastically scavenging porphyrin intermediates in leaves, which was crucial for alleviating reactive oxygen species-induced stress. Protoporphyrin IX, protochlorophyllide, magnesium-protoporphyrin IX, and its methyl ester were absent or hardly detected with the intensification of water stress (-3.1 MPa) in the wild type, whereas transgenic plants retained these intermediates to some extent. Additionally, the expression and activity of most enzymes involved in porphyrin biosynthesis, particularly in the chlorophyll branch, were primarily down-regulated under dehydrating conditions, with stronger repression in the wild type than in transgenic plants. There was up-regulation of Glutamate 1-Semialdehyde Aminotransferase, PPO1, and Fe Chelatase2 transcripts in drought-stressed transgenic plants, enabling the transgenic plants to make larger pools of 5-aminolevulinic acid and protoporphyrin IX available for subsequent steps in the heme branch. Overexpression of PPO ultimately protected the transgenic plants from drought-induced cytotoxicity, demonstrating clearly that manipulation of porphyrin biosynthesis can produce drought-tolerant plants. Our results support a possible role for tetrapyrroles in signaling their metabolic state and in plant protection under drought stress conditions.

Porphyrin biosynthesis control under water stress: sustained porphyrin status correlates with drought tolerance in transgenic rice.

Un flux contr&ocirc;l&eacute; des m&eacute;tabolites de la porphyrine est essentiel pour les organismes, mais peu est connu sur le contr&ocirc;le de la biosynth&egrave;se de la porphyrine sous stress environnementaux. Nous avons suivi les plants de riz transg&eacute;niques (Oryza sativa) exprimant Myxococcus xanthus protoporphyrinog&egrave;ne oxydase (PPO) pour leur r&eacute;ponse au stress hydrique. Plantes transg&eacute;niques montrent tol&eacute;rance &agrave; la s&eacute;cheresse grandement am&eacute;lior&eacute;es, comme en t&eacute;moigne une eau sup&eacute;rieure &agrave; shoot potentiels, moins les dommages oxydatifs, et un &eacute;quilibre d&#39;oxydor&eacute;duction plus favorable par rapport aux plantes de type sauvage. Les plantes transg&eacute;niques et de type sauvage a r&eacute;pondu &agrave; l&#39;apparition du stress de s&eacute;cheresse, m&ecirc;me avant les changements dans le m&eacute;tabolisme oxydatif et potentiels des eau shoot, nettoyage drastique porphyrine interm&eacute;diaires dans les feuilles, qui &eacute;tait indispensable pour soulager le stress induit par les esp&egrave;ces r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne. Protoporphyrine IX, protochlorophyllide, magn&eacute;sium-protoporphyrine IX et son ester m&eacute;thylique &eacute;taient absents ou difficilement d&eacute;tect&eacute;s avec l&#39;intensification du stress hydrique (-3,1 MPa) dans le type sauvage, tandis que les plantes transg&eacute;niques conserv&eacute; ces interm&eacute;diaires dans une certaine mesure. En outre, l&#39;expression et l&#39;activit&eacute; de la plupart des enzymes impliqu&eacute;es dans la biosynth&egrave;se des porphyrines, particuli&egrave;rement dans la branche de la chlorophylle, &eacute;taient principalement diminu&eacute;es sous conditions, avec une r&eacute;pression plus forte chez le type sauvage que dans les plantes transg&eacute;niques de la d&eacute;shydratation. Il y avait une r&eacute;gulation de Glutamate 1-semiald&eacute;hyde aminotransf&eacute;rase, PPO1 et Chelatase2 Fe transcrits en stress hydrique des plantes transg&eacute;niques, permettant aux plantes transg&eacute;niques &agrave; mettre &agrave; la disposition pour les &eacute;tapes suivantes des plus grandes piscines de protoporphyrine IX et de l&#39;acide 5-aminol&eacute;vulinique dans la branche de l&#39;h&egrave;me. La surexpression de la PPO en fin de compte contre les plantes transg&eacute;niques cytotoxicit&eacute; induite par la s&eacute;cheresse, ce qui d&eacute;montre clairement que la manipulation de la biosynth&egrave;se de la porphyrine peut produire des plantes tol&eacute;rantes &agrave; la s&eacute;cheresse. Nos r&eacute;sultats pourraient jouer un r&ocirc;le en faveur t&eacute;trapyrroles dans la signalisation de l&#39;&eacute;tat m&eacute;tabolique et phytopharmaceutiques en conditions de stress de s&eacute;cheresse.

Contr&ocirc;le de la biosynth&egrave;se de porphyrine sous stress hydrique : subies porphyrine statut corr&eacute;lats avec tol&eacute;rance &agrave; la s&eacute;cheresse chez le riz transg&eacute;nique.

Ein kontrollierter Strom von Porphyrin-Metaboliten ist entscheidend f&uuml;r Organismen, sondern &uuml;ber die Kontrolle der Porphyrin-Biosynthese unter Umweltstress ist wenig bekannt. Wir &uuml;berwachten transgenen Reis (Oryza Sativa) Pflanzen Myxococcus Xanthus Protoporphyrinogen-Oxidase (PPO) f&uuml;r ihre Reaktion auf Trockenstress zum Ausdruck zu bringen. Transgene Pflanzen zeigte deutlich verbesserte D&uuml;rretoleranz, wie durch eine h&ouml;here schie&szlig;en Wasser potential, weniger oxidativen Schaden und eine g&uuml;nstigere Redox-Balance im Vergleich zu Wildtyp Pflanzen. Transgene sowohl Wildtyp Pflanzen reagierte auf das Auftreten von Trockenstress, sogar vor &Auml;nderungen der schie&szlig;en Wasser potentielle und oxidativen Stoffwechsel, mit drastisch Aufr&auml;umvorgang Porphyrin Zwischenprodukte in Bl&auml;ttern, die entscheidend zur Linderung von reaktive Sauerstoff Spezies-induzierte Spannung war. Porphyrine, Protochlorophyllide, Magnesium-Protoporphyrin IX und seine Methylester waren abwesend oder kaum erkannt, mit der Versch&auml;rfung der Wasserknappheit (3,1 MPa) im Wild-Typ w&auml;hrend transgene Pflanzen diese Zwischenprodukte in gewissem Umfang beibehalten. Dar&uuml;ber hinaus wurden der Ausdruck und die Aktivit&auml;ten der beteiligten Porphyrin-Biosynthese, besonders in der Chlorophyll-Verzweigung, die meisten Enzyme in erster Linie unten-geregelt, unter Bedingungen, mit st&auml;rkeren Repression in den Wildtyp als in transgenen Pflanzen austrocknen. Es gab bis-Regelung der Glutamat-1-Semialdehyd-Aminotransferase, PPO1 und Fe Chelatase2 Abschriften in D&uuml;rre-betonte transgener Pflanzen, aktivieren die transgenen Pflanzen zu gr&ouml;&szlig;eren Pools von 5-Aminolevulinic S&auml;ure und Porphyrine in den H&auml;m-Zweig f&uuml;r nachfolgende Schritte verf&uuml;gbar zu machen. Eine &Uuml;berexpression von PPO gesch&uuml;tzt letztlich die transgenen Pflanzen Trockenheit-induzierte Zytotoxizit&auml;t, zeigen deutlich, dass Manipulation der Porphyrin-Biosynthese d&uuml;rreresistente Pflanzen produzieren kann. Unsere Ergebnisse unterst&uuml;tzen eine m&ouml;gliche Rolle f&uuml;r Azol in ihren metabolischen Zustand signalisiert und im Pflanzenschutz unter Stressbedingungen D&uuml;rre.

Porphyrin-Biosynthese-Steuerelement unter Wasserstress: Porphyrin Status korreliert mit Trockenheitstoleranz transgenen Reis erlitten.

Un flusso controllato di metaboliti di porfirina &egrave; fondamentale per gli organismi, ma poco si sa circa il controllo della biosintesi di porfirina sotto stress ambientali. Abbiamo monitorato piante transgeniche riso (Oryza sativa) esprimendo Myxococcus xanthus protoporfirinogeno ossidasi (PPO) per la loro risposta allo stress siccit&agrave;. Piante transgeniche dimostr&ograve; tolleranza di siccit&agrave; significativamente migliorata, come indicato da un superiore sparare acqua potenziali, meno danni ossidativi e un equilibrio redox pi&ugrave; favorevole rispetto al wild-type piante. Piante transgeniche e selvaggio-tipo ha risposto per l&#39;insorgenza di stress siccit&agrave;, anche prima di modifiche a sparare acqua potenziali e ossidativa metabolismo, drasticamente lo scavenging porfirina intermedi nelle foglie, che &egrave; stato cruciale per alleviare stress indotta da specie reattive dell&#39;ossigeno. Protoporfirina IX, protoclorofillide, magnesio-protoporfirina IX e suo metilestere erano assenti o appena rilevate con l&#39;intensificazione dello stress idrico (-3,1 MPa) nel tipo selvatico, considerando che le piante transgeniche mantenuto questi prodotti intermedi in una certa misura. Inoltre, l&#39;espressione e l&#39;attivit&agrave; di molti enzimi coinvolti nella biosintesi di porfirina, particolarmente nel ramo di clorofilla, erano principalmente down-regolata sotto condizioni, con la repressione pi&ugrave; forte nel tipo selvatico che in piante transgeniche di disidratazione. C&#39;era in su-regolazione della glutammato 1-semialdeide aminotransferasi, PPO1 e Fe Chelatase2 trascrizioni in piante transgeniche siccit&agrave;-sollecitato, consentendo le piante transgeniche di rendere disponibili per i passi successivi pi&ugrave; grandi piscine di acido 5-aminolevulinico e protoporfirina IX nel ramo dell&#39;eme. Sovraespressione di PPO protetti in definitiva le piante transgeniche da citotossicit&agrave; indotta da siccit&agrave;, dimostrando chiaramente che la manipolazione della biosintesi di porfirina pu&ograve; produrre piante resistenti alla siccit&agrave;. I nostri risultati supportano un possibile ruolo per tetrapyrroles nel loro stato metabolico di segnalazione e nell&#39;impianto di protezione in condizioni di stress siccit&agrave;.

Controllo di porfirina biosintesi sotto stress idrico: sostenuta porfirina status correla con tolleranza alla siccit&agrave; in riso transgenico.

&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x304C;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x4E0B;&#x306E;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;Myxococcus &#x30B6;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20; &#xFF08;PPO&#xFF09; &#x4E7E;&#x71E5;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x30A4;&#x30CD;&#xFF09; &#x690D;&#x7269;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x690D;&#x7269;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6539;&#x826F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x8010;&#x6027;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x64AE;&#x5F71;&#x6C34;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x9178;&#x5316;&#x640D;&#x50B7;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x793A;&#x3057;&#x3088;&#x308A;&#x6709;&#x5229;&#x306A;&#x9178;&#x5316;&#x9084;&#x5143;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x6C34;&#x7A32;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x4E7E;&#x71E5;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9; &#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C8;&#x6C34;&#x30DD;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x3068;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x524D;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x306F;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x5927;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x8449;&#x306E;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x6E05;&#x6383;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x7B54;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3; IX&#x3001;protochlorophyllide&#x3001;&#x30DE;&#x30B0;&#x30CD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3; IX &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x6B20;&#x5E2D;&#x3057;&#x305F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x6C34;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x6FC0;&#x5316;&#x3068;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; &#xFF08;-3.1 MPa) &#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x690D;&#x7269;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3092;&#x3042;&#x308B;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4FDD;&#x6301;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5F0F;&#x3068;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x9175;&#x7D20;&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x652F;&#x5E97;&#x3067;&#x7279;&#x306B;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x4E3B;&#x306B;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;-&#x6761;&#x4EF6;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x6291;&#x5727;&#x3068;&#x8131;&#x6C34;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D8;&#x30E0;&#x652F;&#x5E97;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; 5-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30EC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3; IX &#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4EE5;&#x964D;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x690D;&#x7269;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x690D;&#x7269;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178; 1-&#x30BB;&#x30DF;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9; &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;PPO1&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Fe Chelatase2 &#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;PPO &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x8A98;&#x767A;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x304C;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x306B;&#x5F37;&#x3044;&#x690D;&#x7269;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x793A;&#x3059;&#x304B;&#x3089;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x690D;&#x7269;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x72B6;&#x614B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D4;&#x306B;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x4F5C;&#x7269;&#x4FDD;&#x8B77;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x3002;

&#x6C34;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x4E0B;&#x306E;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x5236;&#x5FA1;: &#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x30A4;&#x30CD;&#x306E;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x3082;&#x3064;&#x30DD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x72B6;&#x614B;&#x76F8;&#x95A2;&#x3092;&#x6301;&#x7D9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD3EC; &#xB974; &#xD53C; &#xB9B0;&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD750;&#xB984;, &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC791;&#xC740; &#xD3EC; &#xB974; &#xD53C; &#xB9B0;&#xC758; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xD658;&#xACBD; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC544;&#xB798; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC00;&#xBB44; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Myxococcus xanthus protoporphyrinogen &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; (PPO)&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC300; (Oryza sativa&#xB85C; &#xAD6C;&#xB098;) &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xAC00;&#xBB44; &#xB0B4;&#xC131;, &#xB192;&#xC740; &#xCD2C;&#xC601; &#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xB35C; &#xC8FC;&#xBA70; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB354; &#xC720;&#xB9AC;&#xD55C; redox &#xADE0;&#xD615;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBC0F; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xCD2C;&#xC601; &#xBB3C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xACFC; &#xC0B0;&#xD654; &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xAC00;&#xBB44; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xACFC;&#xAC10; &#xD558; &#xAC8C; &#xD588;&#xB358; &#xBC18;&#xC751; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; &#xC720;&#xBC1C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xACBD;&#xAC10;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD3EC; &#xB974; &#xD53C; &#xB9B0; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4;, &#xC78E;&#xC5D0; &#xCCAD;&#xC18C;&#xB85C; &#xB300;&#xC751; &#xD588;&#xB2E4;. Protoporphyrin IX, protochlorophyllide, &#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xC298; protoporphyrin IX &#xBC0F; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBA54; &#xD2F8; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xACB0; &#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xBB3C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC758; &#xC2EC;&#xD654; &#xB41C; &#xAC10;&#xC9C0; (-3.1 MPa) &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC720;&#xC9C0; &#xC5B4;&#xB290; &#xC815;&#xB3C4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4; &#xBC18;&#xBA74;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xD2B9;&#xD788; &#xC5FD;&#xB85D;&#xC18C; &#xC9C0;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC; &#xB974; &#xD53C; &#xB9B0;&#xC758; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xD0C8;&#xC218; &#xC870;&#xAC74;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xAC15;&#xD558;&#xAC8C; &#xC5B5;&#xC555; &#xC544;&#xB798; &#xADDC;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xBB44; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C; 5 aminolevulinic &#xC0B0;&#xACFC; protoporphyrin IX&#xC758; &#xD070; &#xD480; heme &#xBD84;&#xAE30;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0; &#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC; 1 Semialdehyde Aminotransferase, PPO1, &#xBC0F; Fe Chelatase2 &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC758; &#xCD5C;&#xB300;-&#xADDC;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4;. PPO&#xC758; overexpression&#xB294; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3EC; &#xB974; &#xD53C; &#xB9B0;&#xC758; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xC870;&#xC791; &#xAC00;&#xBB44; &#xAD00;&#xB300; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xAC00;&#xBB44; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xBCF4;&#xD638;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; tetrapyrroles&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558; &#xACE0; &#xAC00;&#xBB44; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xD638; &#xC2DD;&#xBB3C;.

&#xD3EC; &#xB974; &#xD53C; &#xB9B0;&#xC758; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBB3C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;: &#xD3EC; &#xB974; &#xD53C; &#xB9B0; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC300;&#xC5D0; &#xAC00;&#xBB44; &#xACF5;&#xCC28;&#xAC00; &#xC9C0;&#xC18D;.

Un flujo controlado de metabolitos de porfirina es fundamental para los organismos, pero poco se sabe sobre el control de la bios&iacute;ntesis de porfirinas bajo estr&eacute;s ambiental. Supervisamos las plantas transg&eacute;nicas de arroz (Oryza sativa) expresando oxidasa de protoporfirin&oacute;geno Myxococcus xanthus (PPO) por su respuesta a la sequ&iacute;a. Las plantas transg&eacute;nicas mostraron tolerancia a la sequ&iacute;a mejor&oacute; significativamente, seg&uacute;n lo indicado por un agua m&aacute;s alta del brote potencial, menos da&ntilde;o oxidativo, y un equilibrio redox m&aacute;s favorable en comparaci&oacute;n con las plantas de tipo salvaje. Plantas transg&eacute;nicas y salvaje-tipo respondieron al inicio de la sequ&iacute;a, incluso antes de cambios en disparar agua metabolismo oxidativo y potenciales, barrido dr&aacute;sticamente intermedios de la porfirina en hojas, que fue crucial para aliviar el estr&eacute;s inducido por especies de ox&iacute;geno reactivo. Protoporfirina IX, protochlorophyllide, magnesio-protoporfirina IX y su &eacute;ster met&iacute;lico estuvieron ausentes o apenas detectado con la intensificaci&oacute;n del estr&eacute;s h&iacute;drico (-3,1 MPa) en el tipo salvaje, mientras que las plantas transg&eacute;nicas conservan estos intermedios hasta cierto punto. Adem&aacute;s, la expresi&oacute;n y actividad de las enzimas m&aacute;s implicadas en la bios&iacute;ntesis de porfirinas, particularmente en la rama de la clorofila, fueron principalmente regula bajo condiciones, con una represi&oacute;n m&aacute;s fuerte en el tipo salvaje que en plantas transg&eacute;nicas de deshidrataci&oacute;n. Hubo para arriba-regulaci&oacute;n de transcripciones de aminotransferasa, PPO1 y Chelatase2 de la Fe de 1-Semialdehyde glutamato en plantas transg&eacute;nicas de sequ&iacute;a-tensionado, permitiendo a las plantas transg&eacute;nicas hacer piscinas m&aacute;s grandes de &aacute;cido 5-aminolevul&iacute;nico y protoporfirina IX disponibles para realizar los siguientes pasos en la rama de hemo. Sobreexpresi&oacute;n de PPO protegidos en &uacute;ltima instancia las plantas transg&eacute;nicas de citotoxicidad inducida por la sequ&iacute;a, demostrando claramente que la manipulaci&oacute;n de la bios&iacute;ntesis de porfirinas puede producir plantas tolerantes a la sequ&iacute;as. Nuestros resultados apoyan un papel posible para Tetrapirroles en la se&ntilde;alizaci&oacute;n de su estado metab&oacute;lico y en protecci&oacute;n bajo condiciones de estr&eacute;s de sequ&iacute;a de las plantas.

Control de la bios&iacute;ntesis de porfirinas bajo estr&eacute;s h&iacute;drico: sostenido porfirina estado correlativos con tolerancia a la sequ&iacute;a en arroz transg&eacute;nico.

&#x5965;&#x6C99;&#x5229;&#x94C2;-23&#xFF0C;D &#x7C7B;&#x78B3;&#x9752;&#x8D4B;&#x4E88;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x8010;&#x836F;&#x6027;&#x7684;&#x9709;&#x70EF; hydrolyzes &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x73AF;&#x7684; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7C7B;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#xFF0C;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#xFF0C;&#x611F;&#x67D3;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x6D88;&#x706D;&#x81F4;&#x75C5;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5982;&#x9C8D;&#x66FC;&#x4E0D;&#x52A8;&#x6746;&#x83CC;&#xFF0C;&#x516D;&#x4E2A;&#x6700;&#x4F18;&#x5148;&#x5371;&#x9669;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x662F;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x5BF9;&#x751F;&#x4EA7; carbapenemases &#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x7684;&#x6297;&#x83CC;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5965;&#x6C99;&#x5229;&#x94C2; 23 &#x662F;&#x7EAF;&#x5316;&#x548C;&#x5177;&#x4F53;&#x5316;&#x5728; 298 K &#x548C;&#x5965;&#x6C99;&#x5229;&#x94C2; 23 &#x6676;&#x4F53;&#x7684; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x884D;&#x5C04;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x6536;&#x96C6;&#x4E86; 2.03 &#x4F7F;&#x7528;&#x540C;&#x6B65;&#x8F90;&#x5C04;&#x7684;&#x4E00;&#x9879;&#x51B3;&#x8BAE;&#x3002;&#x5965;&#x6C99;&#x5229;&#x94C2;-23 &#x6C34;&#x6676;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7EC4; P4(1) &#x4E0E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x53C2;&#x6570; = 82.47&#xFF0C;b = 82.47 &#x548C; c = 172.01 A.&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x975E;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x53EF;&#x80FD;&#x5305;&#x542B; 73.64%&#x6EB6;&#x5242;&#x542B;&#x91CF;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5806;&#x79EF;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3002;

&#x5236;&#x5907;&#x3001; &#x7ED3;&#x6676;&#x53CA;&#x521D;&#x6B65;&#x5965;&#x6C99;&#x5229;&#x94C2;-23&#xFF0C;&#x8D4B;&#x4E88;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x8010;&#x78B3;&#x9752;&#x9709;&#x70EF; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

OXA-23, a class D carbapenemase that confers widespread antibiotic resistance hydrolyzes the beta-lactam rings of beta-lactam antibiotics, presenting an enormous challenge to infection control, particularly in the eradication of pathogenic bacteria such as Acinetobacter baumannii, one of six top-priority dangerous pathogens. Thus, the enzyme is a potential target for developing antimicrobial agents against pathogens producing carbapenemases. In this study, OXA-23 was purified and crystallized at 298 K and X-ray diffraction data from OXA-23 crystal were collected at 2.03 A resolution using synchrotron radiation. The crystal of OXA-23 belonged to space group P4(1) with unit cell parameters a = 82.47, b = 82.47 and c = 172.01 A. Analysis of the packing density showed that the asymmetric unit probably contained two molecules with a solvent content of 73.64%.

Preparation, crystallization and preliminary X-ray crystallographic analysis of OXA-23, a carbapenemase conferring widespread antibiotic resistance.

OXA-23, un carbapenemase de la classe D qui conf&egrave;re la r&eacute;sistance aux antibiotiques g&eacute;n&eacute;ralis&eacute;e hydrolyse les anneaux de b&ecirc;ta-lactame des b&ecirc;ta-lactamines, pr&eacute;sentant un &eacute;norme d&eacute;fi pour le contr&ocirc;le des infections, en particulier dans l&#39;&eacute;limination des bact&eacute;ries pathog&egrave;nes telles que Acinetobacter baumannii, un des six prioritaires des pathog&egrave;nes dangereux. Ainsi, l&#39;enzyme est une cible potentielle pour le d&eacute;veloppement d&#39;agents antimicrobiens contre les pathog&egrave;nes productrices de carbap&eacute;n&egrave;mases. Dans cette &eacute;tude, OXA-23 a &eacute;t&eacute; purifi&eacute; et cristallis&eacute; &agrave; 298 K et diffraction des rayons x de cristaux OXA-23 sont collect&eacute;es &agrave; 2,03 une r&eacute;solution &agrave; l&#39;aide de rayonnement synchrotron. Le cristal de OXA-23 appartenait au groupe d&#39;espace P4(1) avec unit&eacute; un = 82,47, b = 82,47 et c = 172.01 A. analyse de la densit&eacute; montre que l&#39;unit&eacute; asym&eacute;trique contenue probablement deux mol&eacute;cules avec une teneur en solvants de 73,64 %.

Pr&eacute;paration, cristallisation et pr&eacute;liminaire analyse cristallographique aux rayons x de OXA-23, un carbapenemase qui conf&egrave;re la r&eacute;sistance aux antibiotiques g&eacute;n&eacute;ralis&eacute;e.

OXA-23, Spalten ein Class-D-Carbapenemase, die weit verbreitete Antibiotika-Resistenz verleiht die Beta-Lactam-Ringe des Beta-Lactam-Antibiotika, eine enorme Herausforderung f&uuml;r die Infektionskontrolle, besonders in der Beseitigung der pathogenen Bakterien wie Acinetobacter Baumannii, einer der sechs Top-Priorit&auml;t gef&auml;hrliche Krankheitserreger zu pr&auml;sentieren. So ist das Enzym ein potenzielles Ziel f&uuml;r die Entwicklung von antimikrobieller Mitteln gegen Krankheitserreger, die Carbapenemasen produzieren. In dieser Studie OXA-23 wurde gereinigt und kristallisiert bei 298 K und R&ouml;ntgenbeugung von OXA-23 Kristall waren Datenerhebung bei 2,03 eine Aufl&ouml;sung mit Synchrotronstrahlung. Der Kristall von OXA-23 geh&ouml;rte zur Raumgruppe P4(1) mit Einheiten-Zelle-Parameter ein = 82.47, b = 82.47 und c = 172.01 A. Analyse der die Packungsdichte hat gezeigt, dass die asymmetrische Einheit wahrscheinlich zwei Molek&uuml;le mit einem L&ouml;semittelgehalt von 73,64 % enthalten.

Vorbereitung, Kristallisation und vorl&auml;ufige kristallographische R&ouml;ntgenanalyse OXA-23, ein Carbapenemase eine weit verbreitete Antibiotika-Resistenz.

OXA-23, una classe D carbapenemasi che conferisce una diffusa resistenza antibiotica idrolizza gli anelli beta-lattamici antibiotici beta-lattamici, presentando un&#39;enorme sfida per il controllo delle infezioni, particolarmente nell&#39;eradicazione dei batteri patogeni come Acinetobacter baumannii, uno dei sei priorit&agrave; pericolosi agenti patogeni. Cos&igrave;, l&#39;enzima &egrave; un potenziale bersaglio per lo sviluppo di agenti antimicrobici contro agenti patogeni producendo carbapenemases. In questo studio, OXA-23 &egrave; stato purificato e cristallizzato a 298 K e sono stati raccolti dati di diffrazione di raggi x da cristallo di OXA-23 a 2.03 una risoluzione mediante radiazione di sincrotrone. Il cristallo di OXA-23 apparteneva al gruppo spazio P4(1) con i parametri di cella unit&agrave; a = 82.47, b = 82.47 e c = 172.01 A. analisi della densit&agrave; ha mostrata che l&#39;unit&agrave; asimmetrica probabilmente conteneva due molecole con un solvente contenuto pari al 73,64%.

Preparazione, cristallizzazione e preliminare analisi cristallografica dei raggi x di OXA-23, un carbapenemasi che conferisce una diffusa resistenza agli antibiotici.

OXA 23 &#x3067;&#x306F;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x4ED8;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; D carbapenemase &#x30A2;&#x30B7;&#x30CD;&#x30C8;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; baumannii &#x306F;&#x3001;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x6700;&#x512A;&#x5148;&#x306E;&#x5371;&#x967A;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x64B2;&#x6EC5;&#x3067;&#x7279;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x81A8;&#x5927;&#x306A;&#x8AB2;&#x984C;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3001;&beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x7CFB;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x9175;&#x7D20; carbapenemases &#x751F;&#x7523;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x83CC;&#x85AC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, OXA 23 &#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;298 K &#x3067;&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x3057;&#x3001;OXA 23 &#x7D50;&#x6676;&#x304B;&#x3089;&#x306E; x &#x7DDA;&#x56DE;&#x6298;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; 2.03 &#x3067;&#x63A1;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x653E;&#x5C04;&#x5149;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3002;OXA 23 &#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EB; &#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x5358;&#x4F4D;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x6301;&#x3064; P4(1) &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5C5E;&#x3057;&#x305F;&#x306F; 82.47&#x3001;= b = 82.47 &#x3068; c = 172.01 A. &#x5206;&#x6790;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5206;&#x5B50; 73.64 &#xFF05; &#x306E;&#x6EB6;&#x5264;&#x542B;&#x6709;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3068;&#x5145;&#x586B;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x3002;

&#x6E96;&#x5099;&#x3001;&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x3068;&#x4E88;&#x5099;&#x7684; x &#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x6388;&#x4E0E; carbapenemase OXA 23&#x3002;

OXA 23 &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xB0B4; &#xC131;&#xC740; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC218; &#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; D carbapenemase hydrolyzes Acinetobacter baumannii &#xD558;&#xB098; 6 &#xCD5C;&#xC6B0;&#xC120; &#xC704;&#xD5D8;&#xD55C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC138;&#xADE0;&#xC758; &#xBC15;&#xBA78;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAC70; &#xB300; &#xD55C; &#xACFC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D;&#xD0D0; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC758; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xB77D;&#xD0D0; &#xACE0;&#xB9AC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD6A8;&#xC18C; carbapenemases&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xD56D;&#xADE0; &#xC131; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; OXA 23&#xB294; &#xC21C;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; 298 K&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xC815; &#xD654; &#xB41C;&#xC640; OXA 23 &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8;&#xC5D0;&#xC11C; x-&#xC120; &#xD68C;&#xC808; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; 2.03 &#xC218;&#xC9D1; synchrotron &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD655;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. OXA 23 &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xB2E8;&#xC704; &#xC140; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xAC16;&#xB294; &#xACF5;&#xAC04; &#xADF8;&#xB8F9; P4(1)&#xC5D0; &#xC18D;&#xD55C; &#xD55C; 82.47, = b 82.47&#xC640; c = = &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xB2E8;&#xC704; &#xC544;&#xB9C8; 73.64%&#xC758; &#xC194;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xC640; 2 &#xAC1C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC; &#xD328;&#xD0B9; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; 172.01 A. &#xBD84;&#xC11D;.

&#xC900;&#xBE44;, &#xACB0;&#xC815; &#xD654; &#xBC0F; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xBD80;&#xC5EC; carbapenemase OXA 23&#xC758; &#xC608;&#xBE44; x &#xC120; crystallographic &#xBD84;&#xC11D;.

OXA-23, un carbapenemase de clase D que confiere resistencia a los antibi&oacute;ticos generalizada hidroliza los beta-lact&aacute;micos anillos de antibi&oacute;ticos beta-lact&aacute;micos, que presenta un enorme desaf&iacute;o para el control de la infecci&oacute;n, particularmente en la erradicaci&oacute;n de las bacterias pat&oacute;genas como Acinetobacter baumannii, uno de los seis agentes pat&oacute;genos peligrosos de prioridad. As&iacute;, la enzima es un blanco potencial para el desarrollo de agentes antimicrobianos frente a pat&oacute;genos producir carbapenemasas. En este estudio, OXA-23 fue purificada y cristalizada a 298 K y obtuvieron los datos de difracci&oacute;n de rayos x de OXA-23 cristal en 2.03 una resoluci&oacute;n utilizando radiaci&oacute;n de sincrotr&oacute;n. El cristal de OXA-23 perteneci&oacute; al grupo del espacio P4(1) con los par&aacute;metros de la celda unidad un = 82.47, b = 82.47 y c = 172.01 an&aacute;lisis A. de la densidad de embalaje demostr&oacute; que la unidad asim&eacute;trica probablemente contuvo dos mol&eacute;culas con un contenido de solvente de 73.64%.

Preparaci&oacute;n, cristalizaci&oacute;n y an&aacute;lisis cristalogr&aacute;fico de radiograf&iacute;a preliminar de OXA-23, un carbapenemase confiriendo generalizada resistencia a los antibi&oacute;ticos.

Article	Year
Dissemination of SHV-12 and characterization of new AmpC-type beta-lactamase genes among clinical isolates of enterobacter species in Korea. Journal of clinical microbiology\| PubMed ID: 12791868	2003
Sulfonylurea herbicide-resistant Monochoria vaginalis in Korean rice culture. Pest management science\| PubMed ID: 12974347	2003
Crystallization and preliminary X-ray crystallographic analyses of CMY-1 and CMY-10, plasmidic class C beta-lactamases with extended substrate spectrum. Acta crystallographica. Section D, Biological crystallography\| PubMed ID: 14747733	2004
Dissemination of transferable AmpC-type beta-lactamase (CMY-10) in a Korean hospital. Microbial drug resistance (Larchmont, N.Y.)\| PubMed ID: 15383166	2004
Structural basis for the extended substrate spectrum of CMY-10, a plasmid-encoded class C beta-lactamase. Molecular microbiology\| PubMed ID: 16677302	2006
Analyses of Mlc-IIBGlc interaction and a plausible molecular mechanism of Mlc inactivation by membrane sequestration. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 18319344	2008
Crystal structure of filamentous aggregates of human DJ-1 formed in an inorganic phosphate-dependent manner. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 18922803	2008
Crystallization and preliminary X-ray crystallographic analysis of CTX-M-15, an extended-spectrum Î²-lactamase conferring worldwide emerging antibiotic resistance. Protein and peptide letters\| PubMed ID: 21443499	2011
Direct transfer of synthetic double-stranded RNA into protoplasts of Arabidopsis thaliana. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)\| PubMed ID: 21533689	2011
Porphyrin biosynthesis control under water stress: sustained porphyrin status correlates with drought tolerance in transgenic rice. Plant physiology\| PubMed ID: 22021420	2011
Preparation, crystallization and preliminary X-ray crystallographic analysis of OXA-23, a carbapenemase conferring widespread antibiotic resistance. Indian journal of biochemistry & biophysics\| PubMed ID: 22329241	2011

Ha-il Jung

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