nano-fem-protein-localization-using-photo-activated-localization

Nano-fEM: Protein Localization Using Photo-activated Localization Microscopy and Electron Microscopy

Mapping the distribution of proteins is essential for understanding the function of proteins in a cell. Fluorescence microscopy is extensively used for ...

University of Utah 

&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x54E8;&#x5175;&#x3002;&#x540E;&#x635F;&#x4F24;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x6216;&#x6269;&#x5C55;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x8FBE;&#x5230;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x635F;&#x4F24;&#x88AB;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6216;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x51E0;&#x4E2A; purinoceptors&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; (i) G-&#x518D;&#x52A0;&#x4E0A;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684; ATP &#x548C; ADP &#x4ECB;&#x5BFC;&#x4F53;&#x5916;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7F3A;&#x4E4F; G (i) &#x663E;&#x793A;&#x4E86;&#x8BE5;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53; P2Y(12) &#x8026;&#x5408;&#x8868;&#x73B0;&#x6B63;&#x5E38;&#x57FA;&#x7EBF;&#x79FB;&#x52A8;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x6216;&#x6269;&#x5C55;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x8FBE;&#x5230;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4F53;&#x5916;&#x6216;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728; P2ry(12)(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x653E;&#x6620;&#x4E2D;&#x7684;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5F31;&#x5B9A;&#x5411;&#x5206;&#x652F;&#x6269;&#x5C55;&#x8D70;&#x5411;&#x751F;&#x6D3B;&#x9F20;&#x6807;&#x76AE;&#x5C42;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E; P2Y(12) &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x662F;&#x5F3A;&#x52B2;&#x7684;&#x4F11;&#x7720;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x610F;&#x5473;&#x7740; P2Y(12) &#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x884C;&#x4E8B;&#xFF0C;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x5BF9;&#x672C;&#x5730;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7684;&#x4E3B;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;

P2Y12 &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x8C03;&#x8282;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

Microglia are primary immune sentinels of the CNS. Following injury, these cells migrate or extend processes toward sites of tissue damage. CNS injury is accompanied by release of nucleotides, serving as signals for microglial activation or chemotaxis. Microglia express several purinoceptors, including a G(i)-coupled subtype that has been implicated in ATP- and ADP-mediated migration in vitro. Here we show that microglia from mice lacking G(i)-coupled P2Y(12) receptors exhibit normal baseline motility but are unable to polarize, migrate or extend processes toward nucleotides in vitro or in vivo. Microglia in P2ry(12)(-/-) mice show significantly diminished directional branch extension toward sites of cortical damage in the living mouse. Moreover, P2Y(12) expression is robust in the 'resting' state, but dramatically reduced after microglial activation. These results imply that P2Y(12) is a primary site at which nucleotides act to induce microglial chemotaxis at early stages of the response to local CNS injury.

The P2Y12 receptor regulates microglial activation by extracellular nucleotides.

Les microglies sont des sentinelles immunitaires primaires du SNC. &Agrave; la suite de blessures, ces cellules migrent ou &eacute;tendent les processus vers les sites des l&eacute;sions tissulaires. L&eacute;sion de CNS est accompagn&eacute;e d&#39;une lib&eacute;ration des nucl&eacute;otides, servant de signaux pour activation microgliale ou chimiotactisme. La microglie exprimer plusieurs r&eacute;cepteurs purinergiques, y compris un G (i)-coupl&eacute; sous-type qui a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute; dans la migration induite par l&#39;ATP et l&#39;ADP in vitro. Ici, nous montrons que la microglie de souris d&eacute;pourvues de G (i)-r&eacute;cepteurs coupl&eacute;s de P2Y(12) pi&egrave;ce de motilit&eacute; de la ligne de base normale mais sont incapables de polariser, migrer ou &eacute;tendre les processus vers nucl&eacute;otides in vitro ou in vivo. La microglie dans spectacle de souris P2ry(12)(-/-) consid&eacute;rablement amoindri extension direction directionnel vers les sites des l&eacute;sions corticales chez la souris vivante. En outre, expression P2Y(12) est robuste dans l&#39;&eacute;tat de &laquo; repos &raquo;, mais consid&eacute;rablement r&eacute;duite apr&egrave;s activation microgliale. Ces r&eacute;sultats impliquent que le P2Y(12) est un site principal au cours de laquelle les nucl&eacute;otides agissent pour induire le chimiotactisme des microglies aux premiers stades de la r&eacute;ponse &agrave; une l&eacute;sion locale de CNS.

Le r&eacute;cepteur P2Y12 r&eacute;gule l&#39;activation microgliale de nucl&eacute;otides extracellulaires.

Mikroglia sind prim&auml;re immun W&auml;chter des ZNS. Nach Verletzungen diese Zellen migrieren oder erweitern Prozesse auf Seiten von Gewebesch&auml;den. CNS Verletzung wird durch Freisetzung von Nukleotiden, dienen als Signale f&uuml;r Microglial Aktivierung oder Chemotaxis begleitet. Mikroglia express mehrere Purinoceptors, darunter eine G (i)-Subtyp, der in in-vitro-ATP und ADP-vermittelten Migration verwickelt hat gekoppelt. Hier zeigen wir, dass Mikroglia von M&auml;usen fehlt G (i)-gekoppelte P2Y(12)-Rezeptoren aufweisen normalen Basislinie Motilit&auml;t aber nicht polarisieren, migrieren oder Prozesse in Richtung Nukleotide in vitro noch in vivo zu erweitern. Mikroglia in P2ry(12)(-/-) M&auml;use zeigen vermindert deutlich gerichtete Verzweigung Erweiterung in Richtung Websites der kortikalen Sch&auml;den in der lebenden Maus. Dar&uuml;ber hinaus ist P2Y(12) Ausdruck robust in den Ruhezustand, aber deutlich geringere nach Microglial Aktivierung. Diese Ergebnisse bedeuten, dass P2Y(12) ein prim&auml;rer Standort an dem Nukleotide, die handeln ist, um Microglial Chemotaxis in fr&uuml;hen Stadien der Reaktion auf lokale CNS Verletzungen hervorzurufen.

Der P2Y12-Rezeptor reguliert Microglial Aktivierung durch extrazellul&auml;re Nukleotide.

Le microglia sono sentinelle immune primarie del sistema nervoso centrale. A seguito di infortunio, queste cellule migrano o estendono i processi verso siti di danno tissutale. Lesioni del CNS sono accompagnata dal rilascio di nucleotidi, che serve come segnali per l&#39;attivazione della microglia o chemiotassi. Le microglia esprimono diversi purinoceptors, tra cui un G (i)-accoppiato sottotipo che &egrave; stato implicato nella migrazione di ATP e ADP-mediata in vitro. Qui vi mostriamo che le microglia da topi privi di G (i)-accoppiati P2Y(12) recettori esibiscono motilit&agrave; basale normale ma sono in grado di polarizzare, migrare o estendere i processi verso nucleotidi in vitro o in vivo. Le microglia in Visualizza topi P2ry(12)(-/-) diminuito significativamente estensione del ramo direzionale verso siti di danno corticale in vita mouse. Inoltre, P2Y(12) espressione &egrave; robusto, nello stato di &#39;riposo&#39;, ma drasticamente ridotta dopo l&#39;attivazione della microglia. Questi risultati implicano che P2Y(12) &egrave; un sito primario al quale nucleotidi agiscono per indurre chemiotassi microgliali alle fasi iniziali della risposta alle lesioni locali di CNS.

Il recettore P2Y12 regola microgliali attivazione di nucleotidi extracellulari.

&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306F;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x4E00;&#x6B21;&#x514D;&#x75AB;&#x6B69;&#x54E8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x50B7;&#x5BB3;&#x3001;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x884C;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x3066;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x50B7;&#x5BB3;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x8868;&#x73FE;&#x306B; G (i) &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;-ATP &#x3068; ADP &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4F53;&#x5916;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F; G &#xFF08;&#x79C1;&#xFF09; &#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x306E;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x3092;&#x793A;&#x3059;-&#x7D50;&#x5408; P2Y(12) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6A19;&#x6E96;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x904B;&#x52D5;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4E8C;&#x6975;&#x5316;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; in vitro &#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F; in vivo &#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2; P2ry(12)(-/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x3067;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x65B9;&#x5411;&#x652F;&#x5E97;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;P2Y(12) &#x5F0F;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5F8C;&#x306F;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A; &#39;&#x4F11;&#x61A9;&#39; &#x72B6;&#x614B;&#x304C;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3067;&#x3059;&#x3002;P2Y(12) &#x3067;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x50B7;&#x5BB3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x884C;&#x70BA;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

P2Y12 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Microglia CNS&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC13C;&#xD2F0;&#xB110;&#xC740;. &#xBD80;&#xC0C1;, &#xB2E4;&#xC74C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xC870;&#xC9C1; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD655;&#xC7A5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. CNS &#xBD80;&#xC0C1; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;, &#xC2E0;&#xD638; microglial &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xB294; chemotaxis&#xB85C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD568;&#xAED8; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Microglia &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; (i) G&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; purinoceptors-ATP&#xB97C; ADP &#xC911;&#xC7AC; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xD558;&#xC704; &#xC720;&#xD615;&#xC744; &#xACB0;&#xD569;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; (i) G &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; microglia &#xD45C;&#xC2DC;-&#xACB0;&#xD569; &#xB41C; P2Y(12) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC77C;&#xBC18; &#xAE30;&#xC900; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBD84;&#xADF9; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCCB4; &#xC678; &#xB610;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC73C;&#xB85C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD655;&#xC7A5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. P2ry(12)(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC1FC;&#xC5D0;&#xC11C; Microglia &#xD06C;&#xAC8C; &#xC0DD;&#xD65C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD53C; &#xC9C8; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xBC29;&#xD5A5; &#xBD84;&#xAE30; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB610;&#xD55C;, P2Y(12) &#xC2DD;&#xC740; microglial &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D; &#xD6C4; &#39;&#xD734;&#xC2DD;&#39; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC15;&#xB825; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; P2Y(12) &#xC8FC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB85C;&#xCEEC; CNS &#xBD80;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; microglial chemotaxis &#xC720;&#xB3C4; &#xD589;&#xB3D9; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xB294; &#xC554;&#xC2DC;.

P2Y12 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC5EC; microglial &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Microgl&iacute;a son centinelas inmunes primarias del SNC. Despu&eacute;s de lesi&oacute;n, estas c&eacute;lulas migran o ampliar los procesos hacia sitios de da&ntilde;o tisular. Lesiones CNS es acompa&ntilde;ado por la liberaci&oacute;n de nucle&oacute;tidos, que sirven como se&ntilde;ales para la activaci&oacute;n microglial o quimiotaxis. Microglia expresar varios purinoceptors, incluyendo un G (i)-juntado el subtipo que se ha implicado en migraci&oacute;n mediada por ATP y ADP in vitro. Aqu&iacute; mostramos que microgl&iacute;a de ratones que carecen de G (i)-receptores acoplados de P2Y(12) exhiben motilidad basal normal pero son incapaces de polarizar, migrar o ampliar los procesos hacia nucle&oacute;tidos in vitro o in vivo. Microglia en show de ratones P2ry(12)(-/-) disminuci&oacute;n significativa de la extensi&oacute;n de la rama direccional hacia sitios de da&ntilde;o cortical en el rat&oacute;n de la vida. Por otra parte, P2Y(12) expresi&oacute;n es robusto en el estado de &#39;descanso&#39;, pero dram&aacute;ticamente reducido despu&eacute;s de la activaci&oacute;n microglial. Estos resultados implican que P2Y(12) es un sitio primario en el que los nucle&oacute;tidos act&uacute;an para inducir quimiotaxis microgliales en las primeras etapas de la respuesta a la lesi&oacute;n local del CNS.

El receptor P2Y12 regula la activaci&oacute;n microglial por nucle&oacute;tidos extracelulares.

&#x800C;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x88AB;&#x52A8;&#x5730;&#x4F20;&#x64AD;&#x7535;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x5206;&#x7EA7;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x91CA;&#x653E;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x88AB;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5C55;&#x793A;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x63A5;&#x5934;&#x91CA;&#x653E;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x68AF;&#x5EA6;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x5F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x88AB;&#x5149;&#x6D3B;&#x5316;&#x79BB;&#x5B50;-2&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x7F29;&#x653E;&#x7684;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x3002;&#x5F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8D85;&#x6781;&#x5316;&#x5149;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; halorhodopsin &#x65F6;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x8865;&#x54C1;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4E24;&#x8005;&#x8BF1;&#x53D1;&#x548C;&#x8865;&#x54C1;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x5206;&#x7EA7;&#x54CD;&#x5E94;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x3002;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F88;&#x90C1;&#x95F7;&#x7684;&#x9AD8;&#x9891;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x7531;&#x4E8E;&#x5C3C;&#x53E4;&#x4E01;&#x654F;&#x611F; ACR 16 &#x53D7;&#x4F53;&#x8131;&#x654F;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;GABA &#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x4FBF;&#x5229;&#x4E4B;&#x524D;&#x53D8;&#x5F97;&#x5FE7;&#x90C1;&#x3002;&#x5206;&#x7EA7;&#x7684;&#x4F20;&#x8F93;&#x548C;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x8D4B;&#x4E88;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x8303;&#x56F4;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x89E6;&#x3002;&#x5206;&#x7EA7;&#x7684;&#x53D1;&#x5E03;&#x51C6;&#x786E;&#x5730;&#x4F20;&#x8F93;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F3A;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x8D85;&#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x6295;&#x5165;&#x3002;&#x7A81;&#x89E6;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x6539;&#x53D8;&#x5E73;&#x8861;&#x7684;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x6295;&#x5165;&#x5230;&#x808C;&#x8089;&#x4E2D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;

&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x63A5;&#x5934;&#x5904;&#x7684;&#x68AF;&#x5EA6;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;

Most neurotransmission is mediated by action potentials, whereas sensory neurons propagate electrical signals passively and release neurotransmitter in a graded manner. Here, we demonstrate that Caenorhabditis elegans neuromuscular junctions release neurotransmitter in a graded fashion. When motor neurons were depolarized by light-activation of channelrhodopsin-2, the evoked postsynaptic current scaled with the strength of the stimulation. When motor neurons were hyperpolarized by light-activation of halorhodopsin, tonic release of synaptic vesicles was decreased. These data suggest that both evoked and tonic neurotransmitter release is graded in response to membrane potential. Acetylcholine synapses are depressed by high-frequency stimulation, in part due to desensitization of the nicotine-sensitve ACR-16 receptor. By contrast, GABA synapses facilitate before becoming depressed. Graded transmission and plasticity confer a broad dynamic range to these synapses. Graded release precisely transmits stimulation intensity, even hyperpolarizing inputs. Synaptic plasticity alters the balance of excitatory and inhibitory inputs into the muscle in a use-dependent manner.

Graded synaptic transmission at the Caenorhabditis elegans neuromuscular junction.

La plupart de la neurotransmission est m&eacute;di&eacute;e par les potentiels d&#39;action, tandis que les neurones sensoriels propagent passivement les signaux &eacute;lectriques et lib&eacute;rer des neurotransmetteurs de fa&ccedil;on gradu&eacute;e. Ici, nous d&eacute;montrons que Caenorhabditis elegans jonctions neuromusculaires lib&egrave;rent des neurotransmetteurs de fa&ccedil;on gradu&eacute;e. Quand motoneurones ont &eacute;t&eacute; d&eacute;polaris&eacute;s par lumi&egrave;re-activation de channelrhodopsin-2, le courant postsynaptique &eacute;voqu&eacute; avec l&#39;intensit&eacute; de la stimulation. Lorsque les neurones moteurs &eacute;taient hyperpolaris&eacute;s de lumi&egrave;re-activation de halorhodopsin, sortie tonique des v&eacute;sicules synaptiques est diminu&eacute;e. Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que les deux &eacute;voqu&eacute;s et la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs tonique est class&eacute;e en r&eacute;ponse au potentiel de membrane. L&#39;ac&eacute;tylcholine synapses sont d&eacute;prim&eacute;es par stimulation haute fr&eacute;quence, en partie en raison de la d&eacute;sensibilisation du r&eacute;cepteur de la nicotine-sensitve ACR-16. En revanche, les synapses GABA facilitent avant de devenir d&eacute;prim&eacute;. Plasticit&eacute; et transmission gradu&eacute;e conf&egrave;rent une large plage dynamique &agrave; ces synapses. Lib&eacute;ration gradu&eacute;e transmet pr&eacute;cis&eacute;ment intensit&eacute; de stimulation, m&ecirc;me hyperpolarisant entr&eacute;es. La plasticit&eacute; synaptique modifie l&#39;&eacute;quilibre des apports excitatrices et inhibitrices dans le muscle de mani&egrave;re d&eacute;pendant de l&#39;utilisation.

Transmission synaptique gradu&eacute;e &agrave; la jonction neuromusculaire de Caenorhabditis elegans.

Die meisten Neurotransmission ist durch Aktionspotentiale, vermittelt, w&auml;hrend die sensorische Neuronen elektrische Signale passiv propagieren und Neurotransmitter in einer geordneten Weise freizugeben. Hier zeigen wir, dass Caenorhabditis Elegans neuromuskul&auml;re Kreuzungen Neurotransmitter in einer geordneten Weise freizugeben. Wann wurden die Motoneuronen durch Licht-Aktivierung von Channelrhodopsin-2, evozierte skaliert mit der St&auml;rke der Stimulation Myasthenische aktuellen ersch&uuml;tterten. Wenn Motoneuronen durch Licht-Aktivierung von Halorhodopsin hyperpolarized waren, wurde Tonikum Freisetzung von synaptische Vesikel abgenommen. Diese Daten legen nahe, dass beide beschworen und Tonika-Neurotransmitter-Freisetzung ist als Reaktion auf die Membran potenzielle benotet. Acetylcholin Synapsen sind teilweise durch Desensibilisierung des Nikotin-Sensitve ACR-16-Rezeptors durch hochfrequente Stimulation, deprimiert. Im Gegensatz dazu erleichtern GABA Synapsen vor immer deprimiert. Abgestuften Getriebe und Plastizit&auml;t verleihen einen breiten Dynamikbereich f&uuml;r diese Synapsen. Abgestufte Freisetzung &uuml;bertr&auml;gt pr&auml;zise Anregung Intensit&auml;t, sogar hyperpolarizing Eing&auml;nge. Synaptische Plastizit&auml;t ver&auml;ndert die Balance der erregenden und hemmenden Eing&auml;nge in den Muskel in gewissem Sinne Verwendung abh&auml;ngig.

Synaptische &Uuml;bertragung an der Fadenwurm Caenorhabditis Elegans neuromuskul&auml;ren Synapse benotet.

La maggior parte dei neurotrasmettitori sono mediato da potenziali d&#39;azione, mentre i neuroni sensoriali propagano segnali elettrici passivamente e rilasciare il neurotrasmettitore in maniera graduata. Qui, ci dimostrano che Caenorhabditis elegans giunzioni neuromuscolari rilasciano neurotrasmettitori in maniera graduata. Quando i motoneuroni erano depolarized di luce-attivazione di channelrhodopsin-2, la corrente postsynaptic evocata in scala con la forza dello stimolo. Quando i motoneuroni sono stati hyperpolarized di luce-attivazione di halorhodopsin, era diminuito rilascio tonico di vescicole sinaptiche. Questi dati suggeriscono che sia evocato e rilascio di neurotrasmettitore tonico &egrave; classificato in risposta al potenziale di membrana. Acetilcolina sinapsi sono depresso da stimolazione ad alta frequenza, in parte a causa di desensibilizzazione del recettore nicotina-sensitve ACR-16. Al contrario, facilitano la sinapsi GABA prima di diventare depressi. Plasticit&agrave; e trasmissione graduata conferiscono un&#39;ampia gamma dinamica di queste sinapsi. Rilascio graduato precisamente trasmette intensit&agrave; di stimolazione, anche hyperpolarizing ingressi. Plasticit&agrave; sinaptica altera l&#39;equilibrio di fattori inibitori ed eccitatori nel muscolo in modo uso-dipendente.

Trasmissione sinaptica graduata alla giunzione neuromuscolare Caenorhabditis elegans.

&#x611F;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x53D7;&#x52D5;&#x7684;&#x96FB;&#x6C17;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x4F1D;&#x9054;&#x3057;&#x3001;&#x50BE;&#x659C;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x795E;&#x7D4C;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;.&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x50BE;&#x659C;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x3092;&#x89E3;&#x653E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3068;&#x304D;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x5F37;&#x3055;&#x3068;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x8A98;&#x767A;&#x5F8C;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x96FB;&#x6D41;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3; 2 &#x306E;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x504F;&#x5149;&#x89E3;&#x6D88;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; &#x30CF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9AD8;&#x504F;&#x6975;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;.&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3001;&#x30C8;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x7B49;&#x7D1A;&#x5225;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x9AD8;&#x983B;&#x5EA6;&#x523A;&#x6FC0;&#x3067;&#x306F;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x3051;&#x305F; ACR 16 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x843D;&#x3061;&#x8FBC;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;GABA &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x843D;&#x3061;&#x8FBC;&#x3093;&#x3067;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x50BE;&#x659C;&#x4F1D;&#x9054;&#x30FB;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x3044;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF; &#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x50BE;&#x659C;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x3082;&#x5165;&#x529B;&#x6775;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x9001;&#x4FE1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306E;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x5165;&#x529B;&#x306E;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x7B4B;&#x8089;&#x306B;&#x3001;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x3067;&#x306E;&#x50BE;&#x659C;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x4F1D;&#x9054;&#x3002;

&#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; neurotransmission&#xB294; &#xAC10;&#xAC01; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC804;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC218; &#xB3D9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xD30C; &#xACE0; &#xB4F1;&#xAE09;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC744; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC791;&#xC5C5; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; Caenorhabditis elegans &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xC811;&#xD569; &#xB4F1;&#xAE09;&#xB41C; &#xD328;&#xC158;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC744; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB54C; &#xBAA8;&#xD130; &#xB274;&#xB7F0; evoked postsynaptic &#xC804;&#xB958; &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xAC15;&#xB3C4; &#xAC00;&#xC9C4; &#xD655;&#xC7A5; channelrhodopsin 2&#xC758; &#xBE5B;-&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; depolarized &#xD588;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xD130; &#xB274;&#xB7F0;&#xC740; halorhodopsin&#xC758; &#xBE5B;-&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; hyperpolarized &#xD588;&#xB2E4;, &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC;&#xC758; &#xD1A0; &#xB2C9; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xBAA8;&#xB450; &#xAC16;&#xB294; &#xD1A0; &#xB2C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB4F1;&#xAE09; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC6B0;&#xC6B8;-&#xACE0;&#xC8FC;&#xD30C; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2C8;&#xCF54;&#xD2F4; sensitve ACR 16 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xB454;&#xAC10; &#xB54C;&#xBB38;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, GABA &#xB0C5; &#xC6B0;&#xC6B8; &#xD574;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC804;&#xC5D0; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB4F1;&#xAE09;&#xB41C; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC0F;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131;&#xC774;&#xC774; &#xB0C5; &#xB113;&#xC740; &#xB3D9;&#xC801; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC810;&#xC218; &#xB9E4;&#xAE38;&#xB41C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC790;&#xADF9; &#xAC15;&#xB3C4;, &#xC2EC;&#xC9C0;&#xC5B4; hyperpolarizing &#xC785;&#xB825;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; &#xBC0F; &#xAE08;&#xC9C0; &#xC785;&#xB825;&#xC758; &#xADE0;&#xD615;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; Caenorhabditis elegans &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xAD50;&#xCC28;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC44; &#xC810; &#xB428;.

La mayor&iacute;a de la neurotransmisi&oacute;n es mediada por potenciales de acci&oacute;n, mientras que neuronas sensoriales propagan se&ntilde;ales el&eacute;ctricas pasivamente y liberaci&oacute;n de neurotransmisores en forma gradual. Aqu&iacute;, demostramos que el Caenorhabditis elegans uniones neuromusculares liberan neurotransmisor de manera gradual. Cuando las neuronas motoras fueron depolarized por la luz-activaci&oacute;n de channelrhodopsin-2, la corriente postsin&aacute;ptica evocada escalada con la fuerza de la estimulaci&oacute;n. Cuando las neuronas motoras fueron hyperpolarized por la luz-activaci&oacute;n de halorodopsina, se redujo la liberaci&oacute;n t&oacute;nica de ves&iacute;culas sin&aacute;pticas. Estos datos sugieren que ambos evocaban y liberaci&oacute;n de neurotransmisores t&oacute;nico se clasifican en respuesta al potencial de membrana. Sinapsis de acetilcolina est&aacute;n deprimidas por la estimulaci&oacute;n de alta frecuencia, en parte debido a la desensibilizaci&oacute;n de los receptores de nicotina-sensitve ACR-16. Por el contrario, las sinapsis GABA facilitan antes de sentirse deprimido. Plasticidad y transmisi&oacute;n gradual confieren un amplio rango din&aacute;mico para estas sinapsis. Liberaci&oacute;n gradual precisamente transmite la intensidad de la estimulaci&oacute;n, incluso hyperpolarizing entradas. Plasticidad sin&aacute;ptica altera el balance de entradas excitatorios y el inhibitorios en el m&uacute;sculo en una forma dependiente de uso.

Transmisi&oacute;n sin&aacute;ptica gradual en la Uni&oacute;n neuromuscular de Caenorhabditis elegans.

&#x86C7;&#x7C7B;&#x62E5;&#x6709;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x611F;&#x5B98;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7EA2;&#x5916;&#x8F90;&#x5C04;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x751F;&#x6210;&#x98DF;&#x8089;&#x52A8;&#x7269;&#x70ED;&#x56FE;&#x50CF;&#x6216;&#x730E;&#x7269;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x7531;&#x57FA;&#x5751;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E13;&#x4E1A;&#x5316;&#x7684;&#x9762;&#x90E8;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x7531;&#x4F53;&#x611F;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x652F;&#x914D;&#x63A5;&#x6536;&#x7EA2;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5668;&#x5B98;&#x5982;&#x4F55;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x51B2;&#x52A8;&#x5230;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x7EA2;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E0D;&#x5E26;&#x504F;&#x89C1;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5206;&#x6790;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x6807;&#x8BC6; TRPA1 &#x6E20;&#x9053;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x652F;&#x914D;&#x57FA;&#x5751;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EA2;&#x5916;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;TRPA1 orthologues &#x4ECE;&#x57FA;&#x5751;&#x8F74;&#x627F;&#x86C7; &#xFF08;&#x6BD2;&#x86C7;&#x3001; &#x87D2;&#x86C7;&#x548C;&#x87D2;&#x86C7;&#xFF09; &#x662F;&#x6700;&#x70ED;&#x654F;&#x611F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x5DF2;&#x67E5;&#x660E;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x5176;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x7684;&#x7EA2;&#x5916;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x86C7;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D89;&#x53CA;&#x8F90;&#x5C04;&#x91C7;&#x6696;&#x7684;&#x57FA;&#x5751;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5149;&#x5316;&#x5B66;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x673A;&#x5236;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7EA2;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BF4;&#x660E;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x8C03;&#x6574;&#x77AC;&#x65F6;&#x53D7;&#x4F53;&#x6F5C;&#x5728; (TRP) &#x6E20;&#x9053;&#x4F5C;&#x4E3A; thermosensors &#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;

&#x86C7;&#x7C7B;&#x7684;&#x7EA2;&#x5916;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

Snakes possess a unique sensory system for detecting infrared radiation, enabling them to generate a 'thermal image' of predators or prey. Infrared signals are initially received by the pit organ, a highly specialized facial structure that is innervated by nerve fibres of the somatosensory system. How this organ detects and transduces infrared signals into nerve impulses is not known. Here we use an unbiased transcriptional profiling approach to identify TRPA1 channels as infrared receptors on sensory nerve fibres that innervate the pit organ. TRPA1 orthologues from pit-bearing snakes (vipers, pythons and boas) are the most heat-sensitive vertebrate ion channels thus far identified, consistent with their role as primary transducers of infrared stimuli. Thus, snakes detect infrared signals through a mechanism involving radiant heating of the pit organ, rather than photochemical transduction. These findings illustrate the broad evolutionary tuning of transient receptor potential (TRP) channels as thermosensors in the vertebrate nervous system.

Molecular basis of infrared detection by snakes.

Serpents poss&egrave;dent un syst&egrave;me sensoriel unique pour d&eacute;tecter les rayons infrarouges, leur permettant de g&eacute;n&eacute;rer une image &laquo; thermique &raquo; de pr&eacute;dateurs ou de proies. Les signaux infrarouges sont initialement re&ccedil;us par l&#39;organe de la fosse, une structure du visage hautement sp&eacute;cialis&eacute;e qui est innerv&eacute;e par des fibres nerveuses du syst&egrave;me somatosensoriel. Comment cet organe d&eacute;tecte et transduit signaux infrarouges en impulsions nerveuses ne sont pas connus. Ici, nous utilisons une approche impartiale de profilage transcriptionnelle pour identifier les canaux TRPA1 comme r&eacute;cepteurs infrarouges sur les fibres nerveuses sensorielles qui innervent l&#39;orgue de la fosse. TRPA1 orthologues de fosse-roulement de serpents (vip&egrave;res, pythons et boas) sont des canaux ioniques vert&eacute;br&eacute;s plus sensibles &agrave; la chaleur jusqu&#39;&agrave; pr&eacute;sent identifi&eacute;s, conform&eacute;ment &agrave; leur r&ocirc;le primaires transducteurs de stimuli infrarouges. Ainsi, serpents d&eacute;tectent des signaux infrarouges par un m&eacute;canisme impliquant le chauffage par rayonnement de l&#39;orgue de la fosse, plut&ocirc;t que de transduction photochimique. Ces constatations illustrent le large tuning &eacute;volutionnaire des canaux (TRP) potentiel de r&eacute;cepteur transitoire comme thermosensors dans le syst&egrave;me nerveux des vert&eacute;br&eacute;s.

Bases mol&eacute;culaires de d&eacute;tection infrarouge par les serpents.

Schlangen besitzen ein einzigartiges sensorischen System zum Erkennen von Infrarot-Strahlung, eine &#39;thermische Bild&#39; von Raubtieren zu generieren oder Beute. Infrarot-Signale werden zun&auml;chst von der Grube Organ eine hochspezialisierte Gesichtsform &uuml;bermittelt, die von Nervenfasern des somatosensorischen Systems innerviert ist. Wie diese Orgel erkennt und transduces Infrarotsignale in Nervenimpulse ist nicht bekannt. Hier verwenden wir einen unvoreingenommenen transkriptionelle Profilerstellung Ansatz TRPA1 Kan&auml;le als Infrarot-Rezeptoren auf sensorische Nervenfasern zu identifizieren, die die Grube-Orgel anregen. TRPA1 Orthologues aus Grube-Haltung Schlangen (Viper, Pythons und Boas) sind die meisten hitzeempfindlichen-vertebrate Ionenkan&auml;le bisher identifizierte, mit ihrer Rolle als prim&auml;re Schallk&ouml;pfe Infrarot Reize. So erkennen die Schlangen Infrarot-Signale durch einen Mechanismus Strahlungsheizung die Grube Orgel, anstatt photochemische Transduktion. Diese Erkenntnisse verdeutlichen das breite evolution&auml;ren tuning der transienten Rezeptor potenzielle (TRP) Kan&auml;le als Thermosensors im vertebrate Nervensystem.

Molekulare Grundlage der Infrarot-Erkennung von Schlangen.

Serpenti possiedono un unico sistema sensoriale per la rilevazione di radiazione infrarossa, che consente di generare una &#39;immagine termica&#39; di predatori o prede. Segnali a raggi infrarossi sono inizialmente ricevuti dall&#39;organo pit, una struttura altamente specializzata facciale che &egrave; innervata da fibre nervose del sistema somatosensoriale. Non &egrave; noto come questo organo rileva e transduces segnali a raggi infrarossi in impulsi nervosi. Qui usiamo un approccio imparziale di profilatura trascrizionale per identificare TRPA1 canali come recettori ad infrarossi su fibre nervose sensoriali che innervano l&#39;organo pit. TRPA1 orthologues dal pozzo-cuscinetto serpenti (vipere, pitoni e boa) sono i canali di ioni vertebrati pi&ugrave; sensibili al calore finora identificati, coerenti con il loro ruolo come trasduttori primari di stimoli a raggi infrarossi. Cos&igrave;, serpenti rilevano i segnali a infrarossi attraverso un meccanismo di riscaldamento radiante di organo pit, piuttosto che la trasduzione fotochimica. Questi risultati illustrano ampio evolutivo sintonizzazione dei canali (TRP) potenziale transitorio del ricevitore come termosensori vertebrati del sistema nervoso.

Basi molecolari di rilevamento a raggi infrarossi di serpenti.

&#x30D8;&#x30D3;&#x8D64;&#x5916;&#x7DDA;&#x653E;&#x5C04;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x611F;&#x899A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7372;&#x7269;&#x3084;&#x6355;&#x98DF;&#x8005;&#x306E; &#39;&#x71B1;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#39; &#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8D64;&#x5916;&#x7DDA;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x3001;&#x5F53;&#x521D;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x5668;&#x5B98;&#x306F;&#x3001;&#x4F53;&#x6027;&#x611F;&#x899A;&#x7CFB;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x3055;&#x308C;&#x5C02;&#x9580;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x9854;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53D7;&#x4FE1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x8D64;&#x5916;&#x7DDA;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x795E;&#x7D4C;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x306E;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x5668;&#x5B98;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x899A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x4E0A;&#x306E;&#x8D64;&#x5916;&#x7DDA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066; TRPA1 &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x516C;&#x5E73;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;TRPA1 &#x7B2C;&#x30AA;&#x30FC;&#x30BD;&#x30ED;&#x30AC;&#x30B9; &#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x8EF8;&#x53D7;&#x30D8;&#x30D3; (&#x6BD2;&#x86C7;&#x3001;&#x30CB;&#x30B7;&#x30AD;&#x30D8;&#x30D3;&#x3068;&#x30DC;&#x30A2;) &#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x71B1;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x4E00;&#x6B21;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x8D64;&#x5916;&#x7DDA;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30D8;&#x30D3;&#x8D64;&#x5916;&#x7DDA;&#x4FE1;&#x53F7;&#x653E;&#x5C04;&#x6696;&#x623F;&#x306E;&#x5149;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x4F1D;&#x9054;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x5668;&#x5B98;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x904E;&#x6E21;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A; &#xFF08;TRP&#xFF09; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D8;&#x30D3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8D64;&#x5916;&#x691C;&#x77E5;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x76E4;&#x3002;

&#xBC40;&#xC774; &#xC721; &#xC2DD; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#39;&#xC5F4; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#39;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xBA39;&#xC774;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xAC10;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBCF4;&#xC720;. &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xC2E0;&#xD638; &#xAD6C; &#xB369;&#xC774; &#xC624;&#xB974;&#xAC04; somatosensory &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC12C;&#xC720;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; innervated &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC804;&#xBB38;&#xD654; &#xB41C; &#xC5BC;&#xAD74; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xCC98;&#xC74C; &#xBC1B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC624;&#xB974;&#xAC04;&#xC774; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC790;&#xADF9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; transduces &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xD3B8;&#xACAC;&#xB41C; transcriptional &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; innervate &#xAD6C; &#xB369;&#xC774; &#xAE30;&#xAD00; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC12C;&#xC720;&#xC5D0; &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB85C; TRPA1 &#xCC44;&#xB110; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;. TRPA1 orthologues &#xD54F; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xBC40; (&#xB3C5; &#xC0AC;, &#xD30C;&#xC774; &#xD1A4; &#xC2A4; &#xBC0F; boas)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xD655;&#xC778; &#xB41C;, &#xC77C;&#xAD00;&#xC131; &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBCC0;&#xD658;&#xAE30;&#xB85C; &#xC11C; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC5F4;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xCC99;&#xCD94; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC740;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xBC40;&#xC774; &#xAD11;&#xD654;&#xD559; &#xBCC0;&#xD658; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xAD6C; &#xB369;&#xC774; &#xC624;&#xB974;&#xAC04;&#xC758; &#xBE5B; &#xB09C; &#xB09C;&#xBC29; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC9C4;&#xD654;&#xC758; &#xD29C;&#xB2DD; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; (TRP) &#xCC44;&#xB110; &#xCC99;&#xCD94; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; thermosensors&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC40;&#xC73C;&#xB85C; &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xD0D0;&#xC9C0;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xAE30;&#xC900;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Serpientes poseen un sistema sensorial &uacute;nico para detectar radiaci&oacute;n infrarroja, permiti&eacute;ndoles generar una &quot;imagen termal&quot; de depredadores o presas. Las se&ntilde;ales infrarrojas son recibidas inicialmente por el &oacute;rgano del hoyo, una estructura facial altamente especializada que es inervada por fibras nerviosas del sistema somatosensorial. Se desconocen c&oacute;mo este &oacute;rgano detecta y transmite las se&ntilde;ales infrarrojas en impulsos nerviosos. Aqu&iacute; utilizamos un enfoque imparcial de perfilamiento transcripcional para identificar canales TRPA1 como receptores de infrarrojos en fibras nerviosas sensoriales que inervan el &oacute;rgano del hoyo. TRPA1 orthologues de serpientes de pozo-cojinete (v&iacute;boras, pitones y boas) son los canales de iones vertebrados de m&aacute;s sensibles al calor identificados hasta el momento, de conformidad con su papel como principales transductores de est&iacute;mulos infrarrojos. As&iacute;, serpientes detectan se&ntilde;ales infrarrojas a trav&eacute;s de un mecanismo que implica la calefacci&oacute;n radiante el &oacute;rgano del hoyo, en lugar de transducci&oacute;n fotoqu&iacute;mica. Estos resultados ilustran la afinaci&oacute;n evolutivo amplio de canales (TRP) potenciales de receptor transitoria como termosensores en el sistema nervioso vertebrado.

Bases moleculares de detecci&oacute;n infrarroja por serpientes.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;MosDEL&#xFF0C;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5728;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x6316;&#x7A7A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x52A8;&#x6BD7;&#x90BB;&#x5730;&#x533A;&#x88AB;&#x5220;&#x9664; &#xFF1B; &#x6216; Mos1 &#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x4EA7;&#x751F;&#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x4FEE;&#x590D;&#x4F7F;&#x7528;&#x6CE8;&#x5165;&#x7684; DNA &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x677F;&#x3002;&#x4FEE;&#x590D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5220;&#x9664;&#x8FBE; 25 kb &#x7684; DNA&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x63D2;&#x5165;&#x9633;&#x6027;&#x9009;&#x62E9;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;

&#x9488;&#x5BF9;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x5207;&#x9664; C.&#x7EBF;&#x866B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x5931;&#x3002;

We developed a method, MosDEL, to generate targeted knockouts of genes in Caenorhabditis elegans by injection. We generated a double-strand break by mobilizing a Mos1 transposon adjacent to the region to be deleted; the double-stranded break is repaired using injected DNA as a template. Repair can delete up to 25 kb of DNA and simultaneously insert a positive selection marker.

Targeted gene deletions in C. elegans using transposon excision.

Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une m&#xE9;thode, MosDEL, pour g&#xE9;n&#xE9;rer des knock-out cibl&#xE9;es de g&#xE8;nes chez Caenorhabditis elegans par injection. Nous avons g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; une rupture double brin par la mobilisation d&#x26;#39;un transposon Mos1 adjacente &#xE0; la r&#xE9;gion doit &#xEA;tre supprim&#xE9;; la pause double brin d&#x26;#39;ADN est r&#xE9;par&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;aide inject&#xE9;e comme un mod&#xE8;le. R&#xE9;paration pouvez supprimer jusqu&#x26;#39;&#xE0; 25 kb d&#x26;#39;ADN et, simultan&#xE9;ment, d&#x26;#39;ins&#xE9;rer un marqueur de s&#xE9;lection positive.

D&#xE9;l&#xE9;tions de g&#xE8;nes cibl&#xE9;s dans l&#x26;#39;aide de C. Elegans Excision Transposon

Wir entwickelten eine Methode, MosDEL, gezielte Aussparungen von Genen in Caenorhabditis Elegans durch Injektion zu generieren. Wir generiert eine Doppel-Strang-Pause durch die Mobilisierung einer Mos1 Transposon neben der Region gel&ouml;scht werden; die Doppelstrang-Pause ist mit injizierten DNA als Vorlage repariert. Reparatur kann bis zu 25 kb DNA l&ouml;schen und gleichzeitig eine positive Auswahl Markierungsfaden.

Gezielte gen Streichungen in C. Elegans mit Transposon Exzision.

Abbiamo sviluppato un metodo, MosDEL, per generare knockouts mirata dei geni in Caenorhabditis elegans di iniezione. Abbiamo generato un double-strand break mobilitando una trasposone Mos1 adiacente alla regione per essere eliminata; la rottura di double-stranded &egrave; riparata utilizzando DNA iniettato come un modello. Riparazione pu&ograve; eliminare fino a 25 kb di DNA e contemporaneamente inserire un marcatore di selezione positiva.

Mirati delezioni del gene in c. elegans mediante escissione trasposone.

&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3001;MosDEL&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;MOS1&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x3092;&#x52D5;&#x54E1;&#x3057;&#x3066;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#x304C;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30AF;&#x304C;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;DNA&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306F;&#x3001;DNA&#x306E;25 kb&#x307E;&#x3067;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x6B63;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x633F;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x5207;&#x9664;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x7DDA;&#x866B;C. elegans&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; Mosdel&#xB97C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; Caenorhabditis elegans&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC; Mos1 transposon &#xC0AD;&#xC81C;&#xD560;; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC778;&#xC811; &#xD55C;&#xC744; &#xB3D9;&#xC6D0; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; &#xB098;&#xB204;&#xAE30; &#xC0DD;&#xC131; &#xB354;&#xBE14;-&#xC88C;&#xCD08; &#xD734;&#xC2DD;&#xC744; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; DNA&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xB9AC; &#xC218; DNA&#xC758; &#xCD5C;&#xB300; 25 kb&#xB97C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC120;&#xD0DD; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xC0BD;&#xC785; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C. elegans transposon &#xC808;&#xB2E8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos desarrollado un m&#xE9;todo, MosDEL, para generar nocauts espec&#xED;ficas de los genes en Caenorhabditis elegans por inyecci&#xF3;n. Hemos generado una ruptura de doble cadena mediante la movilizaci&#xF3;n de un transpos&#xF3;n MOS1 adyacente a la regi&#xF3;n que se suprime la rotura de doble cadena se repara utilizando el ADN inyectado como una plantilla. Reparaci&#xF3;n puede eliminar hasta 25 kb de ADN y al mismo tiempo insertar un marcador de selecci&#xF3;n positiva.

Dirigida supresiones de genes en C. elegans mediante escisi&#xF3;n Transpos&#xF3;n

&#x4E00;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x8096;&#x50CF;&#x8981;&#x6C42;&#x5176;&#x5206;&#x5B50;&#x5730;&#x5F62;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x8BF4;&#x660E;&#xFF1A; &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5FC5;&#x987B;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x7535;&#x955C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63ED;&#x793A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53D7;&#x9650;&#x4E8E;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x3001; &#x7F3A;&#x4E4F;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x548C;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x4E0D;&#x4FBF;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x76F8;&#x5173;&#x8367;&#x5149;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5BF9;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x7167;&#x7247;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6807;&#x8BB0;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x9EC4;&#x6676;&#x6216; tdEos &#x548C;&#x8868;&#x793A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5728;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x3001; &#x56FA;&#x5B9A;&#x8815;&#x866B;&#x548C;&#x5D4C;&#x5165;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5728;&#x5851;&#x6599;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62CD;&#x6444;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4ECE;&#x4F7F;&#x7528;&#x53D7;&#x6FC0;&#x7684;&#x8F90;&#x5C04;&#x635F;&#x8017; (&#x5F97;&#x94A2;) &#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6216;&#x5149;&#x6D3B;&#x5316;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; (&#x68D5;&#x6988;) &#x8D85;&#x8584;&#x5207;&#x7247;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x7167;&#x7247;&#x4ECE;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x8282;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x8D77;&#x6765;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x5BC6;&#x6295;&#x5F71;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x7167;&#x7247;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x7167;&#x7247;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149; nanoscopy &#x4E2D;&#x7684;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3002;

A complete portrait of a cell requires a detailed description of its molecular topography: proteins must be linked to particular organelles. Immunocytochemical electron microscopy can reveal locations of proteins with nanometer resolution but is limited by the quality of fixation, the paucity of antibodies and the inaccessibility of antigens. Here we describe correlative fluorescence electron microscopy for the nanoscopic localization of proteins in electron micrographs. We tagged proteins with the fluorescent proteins Citrine or tdEos and expressed them in Caenorhabditis elegans, fixed the worms and embedded them in plastic. We imaged the tagged proteins from ultrathin sections using stimulated emission depletion (STED) microscopy or photoactivated localization microscopy (PALM). Fluorescence correlated with organelles imaged in electron micrographs from the same sections. We used these methods to localize histones, a mitochondrial protein and a presynaptic dense projection protein in electron micrographs.

Protein localization in electron micrographs using fluorescence nanoscopy.

Un portrait complet d&#39;une cellule n&eacute;cessite une description d&eacute;taill&eacute;e de sa topographie mol&eacute;culaire : prot&eacute;ines doivent &ecirc;tre li&eacute;es &agrave; des organites particuli&egrave;res. Microscopie &eacute;lectronique immunocytochimiques peut r&eacute;v&eacute;ler les emplacements des prot&eacute;ines avec une r&eacute;solution nanom&eacute;trique mais est limit&eacute;e par la qualit&eacute; de la fixation, la raret&eacute; des anticorps et l&#39;inaccessibilit&eacute; des antig&egrave;nes. Nous d&eacute;crivons ici la microscopie &eacute;lectronique corr&eacute;lative de fluorescence pour la localisation des prot&eacute;ines dans les micrographies de la nanoscopiques. Nous tag prot&eacute;ines avec les prot&eacute;ines fluorescentes Citrine ou tdEos et eux exprim&eacute; chez Caenorhabditis elegans, fixe les vers et eux incorpor&eacute; dans du plastique. Nous avons photographi&eacute; les prot&eacute;ines &eacute;tiquet&eacute;es de coupes ultrafines utilisant l&#39;&eacute;mission stimul&eacute;e &eacute;puisement (STED) microscopie ou microscopie de localisation photoactiv&eacute;es (PALM). Fluorescence en corr&eacute;lation avec les organites imag&eacute;s dans les micrographies provenant des m&ecirc;mes sections. Nous avons utilis&eacute; ces m&eacute;thodes pour localiser les histones, une prot&eacute;ine mitochondriale et une prot&eacute;ine de projection dense pr&eacute;synaptique dans les micrographies.

Localisation des prot&eacute;ines dans les micrographies utilisant la fluorescence nanoscopy.

Ein vollst&auml;ndiges Portr&auml;t einer Zelle erfordert eine detaillierte Beschreibung der seine Molekulare Topographie: Proteine m&uuml;ssen mit bestimmten Organellen verkn&uuml;pft werden. Des Prozesses Immunocytochemical Elektronenmikroskopie k&ouml;nnen Standorte von Proteinen mit Nanometer-Aufl&ouml;sung enth&uuml;llen aber wird durch die Qualit&auml;t der Aufzeichnung, der Mangel an Antik&ouml;rpern und die Unzug&auml;nglichkeit der Antigene begrenzt. Hier beschreiben wir die Korrelative Fluoreszenz-Elektronenmikroskopie f&uuml;r die Lokalisierung nanoskopische Proteine in Elektron-Aufnahmen. Wir markiert Proteine mit der fluoreszierende Proteine Citrin oder TdEos und sie in Caenorhabditis Elegans ausgedr&uuml;ckt, fixiert die W&uuml;rmer und ihnen in Kunststoff eingebettet. Wir abgebildet die markierte Proteine aus ultrad&uuml;nne Schnitte mit stimulierte Emission Depletion (STED) Mikroskopie oder Photoactivated Lokalisationsmikroskopie (PALM). Fluoreszenz korreliert mit Organellen in Elektron-Aufnahmen von den gleichen Abschnitten abgebildet. Wir haben diese Methoden um Histone, eine mitochondriale Protein und ein pr&auml;synaptischen dichten Projektion-Protein in Elektron-Aufnahmen zu lokalisieren.

Proteinlokalisation in Elektron-Aufnahmen mit Fluoreszenz Nanoskopie.

Un ritratto completo di una cellula richiede una descrizione dettagliata della sua topografia molecolare: le proteine devono essere collegate a particolari organuli. Microscopia elettronica immunocitochimica pu&ograve; rivelare la localit&agrave; delle proteine con risoluzione nanometrica, ma &egrave; limitata dalla qualit&agrave; della fissazione, la scarsit&agrave; degli anticorpi e l&#39;inaccessibilit&agrave; degli antigeni. Qui descriviamo microscopia di fluorescenza correlativo per la localizzazione nanoscopica delle proteine nel microscopio. Tagged proteine con proteine fluorescenti citrino o tdEos e li espresse in Caenorhabditis elegans, fissa i vermi e li incorporato in materiale plastico. Abbiamo fotografato le proteine contrassegnate da sezioni ultrasottili mediante emissione stimolata deplezione (STED) microscopia o microscopia di localizzazione photoactivated (PALM). Fluorescenza correlato con organelli fotografati in microscopio dalle stesse sezioni. Abbiamo usato questi metodi per localizzare gli istoni, una proteina mitocondriale e una proteina presinaptica proiezione denso nel microscopio.

Localizzazione della proteina nel microscopio usando fluorescenza nanoscopy.

&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x8096;&#x50CF;&#x753B;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5730;&#x5F62;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x8AAC;&#x660E;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#xFF1A; &#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5668;&#x5B98;&#x306B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x56FA;&#x5B9A;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x3068;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x5230;&#x9054;&#x4E0D;&#x80FD;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x76F8;&#x95A2;&#x86CD;&#x5149;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x30CA;&#x30CE;&#x5C40;&#x5728;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5199;&#x771F;&#x7528;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30B7;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F; tdEos &#x3068;&#x306E;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3001;&#x30EF;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8A98;&#x5C0E;&#x653E;&#x51FA;&#x67AF;&#x6E07; &#xFF08;STED&#xFF09; &#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x5C40;&#x5728;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; &#xFF08;&#x30D1;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8D85;&#x8584;&#x5207;&#x7247;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5199;&#x771F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30BB;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x3067;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x305F;.&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x306E;&#x5BC6;&#x306A;&#x6295;&#x5F71;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5199;&#x771F;&#x3067;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x86CD;&#x5149; nanoscopy &#x306B;&#x3002;

&#xC140;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xCD08;&#xC0C1;&#xD654;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C0;&#xD615;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC124;&#xBA85;&#xC774; &#xD544;&#xC694;: &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2B9;&#xC815; organelles&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Immunocytochemical &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xB098;&#xB178;&#xBBF8;&#xD130; &#xBD84;&#xD574;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xBC1D;&#xD790; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACE0;&#xC815; &#xD488;&#xC9C8;, &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC18C;&#xC218;&#xC640; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC758; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xD638; &#xD615;&#xAD11; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB808;&#xBAAC; &#xB610;&#xB294; tdEos &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0DC;&#xADF8;&#xC640; Caenorhabditis elegans &#xD45C;&#xD604;, &#xBC8C;&#xB808;&#xB97C; &#xACE0;&#xC815; &#xBC0F; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC29;&#xCD9C; &#xACE0;&#xAC08; (STED) &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xB610;&#xB294; photoactivated &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; (&#xD31C;)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; ultrathin &#xC139;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0DC;&#xADF8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBA87; &#xAD70;&#xB370;. &#xD615;&#xAD11; organelles &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC139;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA87; &#xAD70;&#xB370;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; presynaptic &#xBC00;&#xB3C4; &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xC158; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9C0; &#xBC29;&#xD654; &#xD615;&#xAD11; nanoscopy&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Un retrato completo de una c&eacute;lula requiere una descripci&oacute;n detallada de su topograf&iacute;a molecular: prote&iacute;nas deben estar ligadas a organelos particulares. Microscopia electr&oacute;nica de immunocytochemical puede revelar ubicaciones de prote&iacute;nas con resoluci&oacute;n del nan&oacute;metro pero est&aacute; limitada por la calidad de la fijaci&oacute;n, la escasez de anticuerpos y la inaccesibilidad de los ant&iacute;genos. Aqu&iacute; describimos la microscop&iacute;a de fluorescencia correlativo para la localizaci&oacute;n de nanosc&oacute;picas de prote&iacute;nas en micrograf&iacute;as electr&oacute;nicas. Hab&iacute;a etiquetado prote&iacute;nas con las prote&iacute;nas fluorescentes citrino o tdEos y hab&iacute;a expresado en Caenorhabditis elegans, fija los gusanos y los incrustados en pl&aacute;stico. Nos va a examinar las prote&iacute;nas etiquetas de secciones ultrafinas usando microscopia de agotamiento (STED) emisi&oacute;n estimulada o microscop&iacute;a de localizaci&oacute;n fotoactivado (PALM). Fluorescencia correlacionados con organelos reflejados en micrograf&iacute;as electr&oacute;nicas de las mismas secciones. Utilizamos estos m&eacute;todos para localizar las histonas, una prote&iacute;na mitocondrial y una prote&iacute;na presin&aacute;ptica proyecci&oacute;n denso en micrograf&iacute;as electr&oacute;nicas.

Localizaci&oacute;n de la prote&iacute;na en micrograf&iacute;as electr&oacute;nicas mediante fluorescencia Nanoscop&iacute;a.

&#x8BB8;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x8FDB;&#x884C;&#x722C;&#x7F51;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x86CB;&#x767D;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x63A8;&#x9001;&#x524D;&#x7F18;&#x819C;&#x7684;&#x5730;&#x65B9;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x957F;&#x4E1D;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x969C;&#x788D;&#x819C;&#x5F20;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x6765;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x819C;&#x7D27;&#x5F20;&#x5982;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD;&#x8FD0;&#x52A8;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x542F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x521B;&#x5EFA;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8815;&#x866B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x643A;&#x5E26;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x4E0E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6E17;&#x900F;&#x6027;&#x4F11;&#x514B;&#x548C;&#x8131;&#x6C27;&#x80C6;&#x9178;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x653E;&#x677E;&#x6216;&#x7D27;&#x5F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x548C;&#x819C;&#x7CFB;&#x7EF3;&#x6CD5;&#x91CF;&#x5316;&#x660E;&#x663E;&#x819C;&#x5F20;&#x529B;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x819C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7D27;&#x5F20;&#x76F8;&#x5173;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4F4D;&#x79FB;&#x901F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x800C;&#x589E;&#x52A0;&#x819C;&#x5F20;&#x529B;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x901F;&#x7387;&#x9075;&#x5FAA;&#x540C;&#x6837;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8D8B;&#x52BF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x819C;&#x5F20;&#x529B;&#x51CF;&#x5C11;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6563;&#x4E71;&#x3001; &#x7C97;&#x7CD9;&#x7684; lamellipodium&#xFF0C;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x77ED;&#x4E1D;&#x659C;&#x65B9;&#x5411;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x7D27;&#x5F20;&#x5C40;&#x52BF;&#x52A0;&#x5267;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; lamellipodium&#xFF0C;&#x5728;&#x5916;&#x4FA7;&#x819C;&#x7A81;&#x8D77;&#x548C;&#x4E1D;&#x662F;&#x66F4;&#x957F;&#x548C;&#x66F4;&#x9762;&#x5411;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x65B9;&#x5411;&#x3002;&#x6574;&#x4F53;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x819C;&#x5F20;&#x529B;&#x4F18;&#x5316;&#x52A8;&#x529B;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x7CBE;&#x7B80;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x65B9;&#x5411;&#x8FD0;&#x52A8;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x589E;&#x52A0;&#x819C;&#x7D27;&#x5F20;&#x5982;&#x4F55;&#x8FDB;&#x5165;&#x52A8;&#x529B;&#x65B9;&#x7A0B;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x4E86;&#x89E3;&#x5230;&#x7684;&#x4E00;&#x5C42;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x3002;

&#x819C;&#x5F20;&#x529B;&#x8C03;&#x8282;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236; lamellipodium &#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; &#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3069;&#x3053;&#x3046;&#x3061;&#x524D;&#x7E01;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x30D7;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x9032;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x5F35;&#x529B;&#x306F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x52D5;&#x306B;&#x969C;&#x5BB3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x819C;&#x5F35;&#x529B;&#x304C;&#x904B;&#x52D5;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x52D5;&#x614B;&#x306B;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#x7DDA;&#x866B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9AA8;&#x683C;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30EF;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x7DCA;&#x5F35;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6D78;&#x900F;&#x885D;&#x6483;&#x3084;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7; &#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x6CBB;&#x7642;&#x3001;&#x30EA;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x304C;&#x7DCA;&#x5F35;&#x3057;&#x3001;&#x898B;&#x304B;&#x3051;&#x819C;&#x5F35;&#x529B;&#x5909;&#x5316;&#x819C;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x819C;&#x5F35;&#x529B;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x819C;&#x5F35;&#x529B;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x30BB;&#x30EB;&#x5909;&#x4F4D;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x91CD;&#x5408;&#x7387;&#x304C;&#x540C;&#x3058;&#x306E;&#x52D5;&#x5411;&#x306B;&#x5F93;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x819C;&#x5F35;&#x529B;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x304C;&#x77ED;&#x3044;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x96E2;&#x308C;&#x308B;&#x52D5;&#x304D;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x89D2;&#x5EA6;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3001;&#x672A;&#x7D44;&#x7E54;&#x3001;&#x30E9;&#x30D5; lamellipodium &#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x819C;&#x7A81;&#x8D77;&#x3001;lamellipodium &#x3067;&#x306E;&#x7DCA;&#x5F35;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x9577;&#x304F;&#x3088;&#x308A;&#x52D5;&#x304D;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x6307;&#x5411;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x5408;&#x7406;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x819C;&#x5F35;&#x529B;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x306E;&#x5C64;&#x3092;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x819C;&#x5F35;&#x529B;&#x904B;&#x52D5;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F;&#x306B;&#x5165;&#x308B;&#x306E;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x819C;&#x5F35;&#x529B; lamellipodium &#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Many cell movements proceed via a crawling mechanism, where polymerization of the cytoskeletal protein actin pushes out the leading edge membrane. In this model, membrane tension has been seen as an impediment to filament growth and cell motility. Here we use a simple model of cell motility, the Caenorhabditis elegans sperm cell, to test how membrane tension affects movement and cytoskeleton dynamics. To enable these analyses, we create transgenic worm strains carrying sperm with a fluorescently labeled cytoskeleton. Via osmotic shock and deoxycholate treatments, we relax or tense the cell membrane and quantify apparent membrane tension changes by the membrane tether technique. Surprisingly, we find that membrane tension reduction is correlated with a decrease in cell displacement speed, whereas an increase in membrane tension enhances motility. We further demonstrate that apparent polymerization rates follow the same trends. We observe that membrane tension reduction leads to an unorganized, rough lamellipodium, composed of short filaments angled away from the direction of movement. On the other hand, an increase in tension reduces lateral membrane protrusions in the lamellipodium, and filaments are longer and more oriented toward the direction of movement. Overall we propose that membrane tension optimizes motility by streamlining polymerization in the direction of movement, thus adding a layer of complexity to our current understanding of how membrane tension enters into the motility equation.

Membrane tension regulates motility by controlling lamellipodium organization.

Beaucoup de mouvements cellulaires continuer via un m&eacute;canisme rampant, o&ugrave; la polym&eacute;risation de l&#39;actine du cytosquelette prot&eacute;ines pousse sur la bord d&#39;attaque de membrane. Dans ce mod&egrave;le, tension de la membrane a &eacute;t&eacute; consid&eacute;r&eacute;e comme un obstacle &agrave; la croissance des filaments et la motilit&eacute; cellulaire. Ici, nous utilisons un mod&egrave;le simple de la motilit&eacute; cellulaire, la cellule de sperme Caenorhabditis elegans, pour tester la tension membranaire influence mouvement et dynamique du cytosquelette. Pour activer ces analyses, nous cr&eacute;ons des souches ver transg&eacute;niques porteuses de sperme avec un cytosquelette fluorescent &eacute;tiquet&eacute;. Via un choc osmotique et traitements d&eacute;soxycholate, nous d&eacute;tendre ou tendu de la membrane cellulaire et quantifier les changements de tension de membrane apparente par la technique d&#39;attache de membrane. &Eacute;tonnamment, nous trouvons que la r&eacute;duction de tension de membrane est corr&eacute;l&eacute;e avec une diminution de la vitesse de d&eacute;placement de cellules, alors qu&#39;une augmentation de la tension de la membrane am&eacute;liore la motilit&eacute;. Par ailleurs, nous d&eacute;montrent que le taux apparent de polym&eacute;risation suivent les m&ecirc;mes tendances. Nous observons que la r&eacute;duction de tension de membrane conduit &agrave; un lamellipodium inorganis&eacute;, rugueux, compos&eacute; de courts filaments d&#39;angle de la direction du mouvement. En revanche, une augmentation de tension r&eacute;duit saillies lat&eacute;rales de membrane dans le lamellipodium et les filaments sont plus longs et plus orient&eacute; vers la direction du mouvement. Dans l&#39;ensemble, nous proposons que tension membranaire optimise la motilit&eacute; en rationalisant la polym&eacute;risation dans le sens du mouvement, ce qui ajoute une couche de complexit&eacute; &agrave; notre compr&eacute;hension de comment la tension membranaire entre dans l&#39;&eacute;quation de la motilit&eacute;.

Tension de la membrane r&eacute;glemente la motilit&eacute; en contr&ocirc;lant l&#39;organisation lamellipodium.

Viele Bewegungen der Zelle gehen &uuml;ber einen kriechenden, wo dr&uuml;ckt das Zytoskelett Protein Aktin-Polymerisation heraus die Vorderkante-Membran. In diesem Modell hat Membrane Spannung als ein Hindernis f&uuml;r Filament Wachstum und Zelle Motilit&auml;t gesehen worden. Hier verwenden wir ein einfaches Modell der Zelle Motilit&auml;t, die Samenzelle Caenorhabditis Elegans, um Auswirkungen von Bewegung und Dynamik des Zytoskeletts in Membrane Spannung zu testen. Um diese Analysen zu erm&ouml;glichen, erstellen wir transgene Wurm-St&auml;mme, die Durchf&uuml;hrung von Samenzellen mit einem fluorescently beschriftete Zytoskeletts. Durch osmotischen Schock und deoxycholat Behandlungen wir entspannen oder anspannen der Zellmembran und offensichtliche Membrane Spannung &Auml;nderungen durch die Membran-Leine-Technik zu quantifizieren. &Uuml;berraschenderweise finden wir, dass die Membrane Spannung Reduktion korreliert sind, mit einem R&uuml;ckgang der Zelle Verstellgeschwindigkeit, w&auml;hrend eine Zunahme der Membrane Spannung erh&ouml;ht die Motilit&auml;t. Weiter zeigen wir, dass die scheinbare Polymerisation Preise die gleichen Trends folgen. Wir beobachten, dass die Membrane Spannung Reduktion zu einem unorganisierten, grobe Lamellipodium, bestehend aus kurzen Filamenten gewinkelt, Weg von der Richtung der Bewegung f&uuml;hrt. Auf der anderen Seite eine Zunahme der Spannung verringert seitliche Membrane Vorspr&uuml;nge in der Lamellipodium und Filamente sind l&auml;nger und mehr auf die Richtung der Bewegung ausgerichtet. Insgesamt schlagen wir vor, die Membrane Spannung optimiert die Motilit&auml;t durch Straffung der Polymerisation in die Richtung der Bewegung, unser gegenw&auml;rtiges Verst&auml;ndnis der Membrane Spannung wie in der Gleichung Motilit&auml;t tritt somit eine Ebene der Komplexit&auml;t hinzuf&uuml;gen.

Membrane Spannung reguliert Motilit&auml;t durch controlling Lamellipodium Organisation.

Molti movimenti di cella procedono tramite un meccanismo di indicizzazione, dove la polimerizzazione dell&#39;actina proteine citoscheletriche spinge fuori la membrana leading edge. In questo modello, la tensione di membrana &egrave; stato visto come un impedimento alla crescita di filamento e la motilit&agrave; cellulare. Qui usiamo un semplice modello di motilit&agrave; cellulare, la cellula dello sperma Caenorhabditis elegans, per testare come tensione di membrana influisce sul movimento e la dinamica del citoscheletro. Per attivare queste analisi, creiamo ceppi transgenici worm che trasportano lo sperma con un citoscheletro fluorescente contrassegnato. Via osmotica shock e desossicolato trattamenti, relax o tesa la membrana cellulare e quantificare le modifiche di membrana evidente tensione mediante la tecnica per legare membrana. Sorprendentemente, troviamo che riduzione tensione membrana &egrave; correlata con una diminuzione della velocit&agrave; di spostamento delle cellule, mentre un aumento della tensione di membrana aumenta la motilit&agrave;. Noi dimostrare ulteriormente che tassi di polimerizzazione apparente seguano le tendenze della stesse. Osserviamo che riduzione tensione membrana conduce ad un lamellipodium disorganizzati, ruvido, composto da brevi filamenti angolati lontano dalla direzione del movimento. D&#39;altra parte, un aumento della tensione riduce la membrana laterale protrusioni nella lamellipodium, e i filamenti sono pi&ugrave; lunghi e pi&ugrave; orientato verso la direzione del movimento. Nel complesso proponiamo che tensione membrana ottimizza la motilit&agrave; di razionalizzazione polimerizzazione nella direzione del movimento, aggiungendo cos&igrave; un livello di complessit&agrave; alla nostra attuale comprensione di come tensione di membrana entra nell&#39;equazione motilit&agrave;.

Tensione di membrana regola la motilit&agrave; controllando lamellipodium organizzazione.

&#xB9CE;&#xC740; &#xC140; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC911; &#xD569; cytoskeletal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xCCA8;&#xB2E8; &#xB9C9; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xBABB; &#xC0B4;&#xAC8C; &#xAD74;&#xC9C0; &#xD06C;&#xB864;&#xB9C1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C9; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC740; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC7A5;&#xC560;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC544; &#xC654;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC140; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, Caenorhabditis elegans &#xC815;&#xC790; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9C9; &#xAE34;&#xC7A5; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xACFC; cytoskeleton &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBD99;&#xC77C; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xB41C; cytoskeleton&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC790;&#xB97C; &#xC6B4;&#xBC18; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC6DC; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4ED;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0BC; &#xD22C; &#xCDA9;&#xACA9;&#xACFC; deoxycholate &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC774; &#xAE34;&#xC7A5; &#xAE34;&#xC7A5;&#xACFC; &#xB9C9; &#xBC27;&#xC904; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xB9C9; &#xC7A5;&#xB825; &#xBCC0;&#xD654; &#xCC99;&#xB3C4;. &#xB9C9; &#xC7A5;&#xB825; &#xC99D;&#xAC00; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB9C9; &#xAE34;&#xC7A5; &#xAC10;&#xC18C; &#xC140; &#xBCC0;&#xC704; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xCC3E;&#xC744;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xC911; &#xD569; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC19;&#xC740; &#xD2B8;&#xB80C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9C9; &#xAE34;&#xC7A5; &#xAC10;&#xC18C; &#xC9E7;&#xC740; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xAC01;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4; unorganized, &#xAC70;&#xCE5C; lamellipodium&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xAD00;&#xCC30;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; lamellipodium&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xBA74; &#xB9C9; &#xB3CC;&#xCD9C; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xACE0; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xB294; &#xAE38;&#xACE0; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xB354; &#xC9C0;&#xD5A5;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xB9C9; &#xAE34;&#xC7A5;, &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911; &#xD569;&#xC744; &#xAC04;&#xC18C;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB9C9; &#xAE34;&#xC7A5; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC29;&#xC815;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC785;&#xB825; &#xB418;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131;&#xC758; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB97C; &#xCD94;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C9; &#xAE34;&#xC7A5; lamellipodium &#xC870;&#xC9C1; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808;.

Muchos movimientos celulares proceder&aacute;n mediante un mecanismo de arrastre, donde la polimerizaci&oacute;n de la actina prote&iacute;nas citoesquel&eacute;ticas empuja hacia fuera de la membrana de la vanguardia. En este modelo, la tensi&oacute;n de la membrana se ha visto como un impedimento para el crecimiento de filamento y motilidad celular. Aqu&iacute; utilizamos un modelo simple de la motilidad de la c&eacute;lula, la c&eacute;lula de la esperma Caenorhabditis elegans, para probar c&oacute;mo afecta la tensi&oacute;n de la membrana movimiento y din&aacute;mica del citoesqueleto. Para habilitar estos an&aacute;lisis, creamos cepas transg&eacute;nicas gusano llevar esperma con un citoesqueleto fluorescencia etiquetada. Trav&eacute;s de choque osm&oacute;tico y tratamientos de desoxicolato, nos relajamos o tensa la membrana celular y cuantificar los cambios de tensi&oacute;n aparente membrana mediante la t&eacute;cnica de anclaje de la membrana. Sorprendentemente, encontramos que la reducci&oacute;n de la tensi&oacute;n de la membrana se correlaciona con una disminuci&oacute;n en la velocidad de desplazamiento de la c&eacute;lula, mientras que un aumento en la tensi&oacute;n de la membrana aumenta la motilidad. Adem&aacute;s, demostramos que tipos de polimerizaci&oacute;n aparente sigan las mismas tendencias. Observamos que la reducci&oacute;n de la tensi&oacute;n de la membrana conduce a un lamellipodium estructura, &aacute;spera, compuesto de filamentos cortos en &aacute;ngulo de la direcci&oacute;n del movimiento. Por otro lado, un incremento en la tensi&oacute;n reduce protuberancias laterales de la membrana en la lamellipodium y filamentos son m&aacute;s largas y m&aacute;s orientada hacia la direcci&oacute;n del movimiento. En general se propone que la tensi&oacute;n de la membrana optimiza motilidad por la racionalizaci&oacute;n de polimerizaci&oacute;n en la direcci&oacute;n del movimiento, a&ntilde;adiendo una capa de complejidad a nuestra actual comprensi&oacute;n de c&oacute;mo la tensi&oacute;n de la membrana entra en la ecuaci&oacute;n de la motilidad.

Article	Year
The P2Y12 receptor regulates microglial activation by extracellular nucleotides. Nature neuroscience\| PubMed ID: 17115040	2006
Graded synaptic transmission at the Caenorhabditis elegans neuromuscular junction. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 19528650	2009
Molecular basis of infrared detection by snakes. Nature\| PubMed ID: 20228791	2010
Targeted gene deletions in C. elegans using transposon excision. Nature methods\| PubMed ID: 20418868	2010
Protein localization in electron micrographs using fluorescence nanoscopy. Nature methods\| PubMed ID: 21102453	2011
Membrane tension regulates motility by controlling lamellipodium organization. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 21709265	2011

Gunther Hollopeter

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