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Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

The Scripps Research Institute 

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Recent landmark experiments have shown that transient overexpression of a small number of transcription factors can reprogram differentiated cells into induced pluripotent stem (iPS) cells that resemble embryonic stem (ES) cells. These iPS cells hold great promise for medicine because they have the potential to generate patient-specific cell types for cell replacement therapy and produce in vitro models of disease, without requiring embryonic tissues or oocytes. Although current iPS cell lines resemble ES cells, they have not passed the most stringent test of pluripotency by generating full-term or adult mice in tetraploid complementation assays, raising questions as to whether they are sufficiently potent to generate all of the cell types in an organism. Whether this difference between iPS and ES cells reflects intrinsic limitations of direct reprogramming is not known. Here we report fertile adult mice derived entirely from iPS cells that we generated by inducible genetic reprogramming of mouse embryonic fibroblasts. Producing adult mice derived entirely from a reprogrammed fibroblast shows that all features of a differentiated cell can be restored to an embryonic level of pluripotency without exposure to unknown ooplasmic factors. Comparing these fully pluripotent iPS cell lines to less developmentally potent lines may reveal molecular markers of different pluripotent states. Furthermore, mice derived entirely from iPS cells will provide a new resource to assess the functional and genomic stability of cells and tissues derived from iPS cells, which is important to validate their utility in cell replacement therapy and research applications.

Adult mice generated from induced pluripotent stem cells.

Exp&#xE9;riences historiques r&#xE9;centes ont montr&#xE9; que la surexpression transitoire d&#x26;#39;un petit nombre de facteurs de transcription peut reprogrammer des cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es en cellules souches pluripotentes induites (iPS) qui ressemblent &#xE0; des cellules souches embryonnaires (ES) des cellules. Ces cellules iPS sont tr&#xE8;s prometteuses pour la m&#xE9;decine parce qu&#x26;#39;ils ont le potentiel pour g&#xE9;n&#xE9;rer des types cellulaires sp&#xE9;cifiques au patient pour la th&#xE9;rapie de remplacement cellulaire et de produire des mod&#xE8;les in vitro de la maladie, sans n&#xE9;cessiter de tissus embryonnaires ou des ovocytes. Bien que les lignes actuelles iPS cellules ressemblent &#xE0; des cellules ES, ils n&#x26;#39;ont pas pass&#xE9; le test le plus rigoureux de la pluripotence en g&#xE9;n&#xE9;rant des souris &#xE0; terme ou d&#x26;#39;un adulte dans des essais de compl&#xE9;mentation t&#xE9;traplo&#xEF;des, ce qui soul&#xE8;ve des questions quant &#xE0; savoir si elles sont suffisamment puissants pour g&#xE9;n&#xE9;rer tous les types de cellules dans un organisme. Que cette diff&#xE9;rence entre les iPS et les cellules ES refl&#xE8;te les limites intrins&#xE8;ques de reprogrammation directe n&#x26;#39;est pas connue. Nous rapportons ici les souris adultes fertiles provenant enti&#xE8;rement de cellules iPS que nous g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s par reprogrammation g&#xE9;n&#xE9;tique inductible de fibroblastes embryonnaires de souris. Produire des souris adultes issues enti&#xE8;rement &#xE0; partir d&#x26;#39;un fibroblaste reprogramm&#xE9; montre que toutes les caract&#xE9;ristiques d&#x26;#39;une cellule diff&#xE9;renci&#xE9;e peut &#xEA;tre restaur&#xE9;e &#xE0; un niveau embryonnaire de la pluripotence, sans exposition &#xE0; des facteurs inconnus ovoplasmique. En comparant ces lignes totalement pluripotentes iPS cellules &#xE0; des lignes de d&#xE9;veloppement moindre puissants peuvent r&#xE9;v&#xE9;ler des marqueurs mol&#xE9;culaires des Etats pluripotentes diff&#xE9;rents. En outre, les souris issues enti&#xE8;rement &#xE0; partir de cellules iPS fournira une nouvelle ressource pour &#xE9;valuer la stabilit&#xE9; fonctionnelle et g&#xE9;nomique des cellules et des tissus obtenus &#xE0; partir de cellules iPS, ce qui est important de valider leur utilit&#xE9; dans la th&#xE9;rapie de remplacement cellulaire et applications de la recherche.

Souris adultes produites &#xE0; partir de cellules souches pluripotentes induites

Den letzten Wahrzeichen-Experimente haben gezeigt, dass vor&uuml;bergehend eine &Uuml;berexpression von einer kleinen Anzahl von Transkriptionsfaktoren kann differenzierte Zellen umzuprogrammieren, in induzierte pluripotente Stammzellen (iPS) Zellen, die embryonale Stammzellen (ES) &auml;hneln. Diese iPS-Zellen halten viel versprechend f&uuml;r Medizin, weil sie das Potenzial haben, Patienten-spezifischen Zelltypen f&uuml;r Zelle-Ersatz-Therapie zu generieren und in-vitro-Modelle der Krankheit, ohne embryonalen Gewebe oder Eizellen zu produzieren. Obwohl aktuelle iPS-Zelllinien ES Zellen &auml;hneln, haben sie nicht den strengsten Test der Pluripotenz &uuml;bergeben, durch die Generierung von endg&uuml;ltigen oder adulte M&auml;use bei tetraploide Komplementation-Assays, wirft Fragen auf, ob sie ausreichend stark, um all die Zelltypen im Organismus zu generieren sind. Ob dieser Unterschied zwischen iPS und ES Zellen immanente Grenzen der direkte Reprogrammierung widerspiegelt, ist nicht bekannt. Hier berichten wir fruchtbare Erwachsene M&auml;usen abgeleitet iPS-Zellen, die wir durch Induktion erh&auml;ltliche genetische Umprogrammierung der M&auml;useembryonalen generiert. Herstellung von Erwachsene M&auml;usen abgeleitet eine umprogrammiert Fibroblast zeigt, dass alle Funktionen einer differenzierten Zelle zu einem embryonalen Niveau von Pluripotenz ohne Belastung durch unbekannte Ooplasmic Faktoren wiederhergestellt werden k&ouml;nnen. Vergleicht man diese vollst&auml;ndig pluripotente iPS Zelllinien zu weniger entwicklungspolitisch kannst potente Linien molekulare Marker der verschiedenen pluripotenten Staaten aufdecken. Dar&uuml;ber hinaus bieten M&auml;usen abgeleitet iPS-Zellen eine neue Ressource, um die funktionale und genomische Stabilit&auml;t der Zellen und Gewebe abgeleitet von iPS-Zellen, die ihren Nutzen in der Zelle-Ersatz-Therapie und Forschungsanwendungen validieren wichtig ist zu beurteilen.

Erwachsene M&auml;use aus induzierten pluripotenten Stammzellen erzeugt.

Recenti esperimenti di riferimento hanno dimostrato che transitori sovraespressione di un piccolo numero di fattori di trascrizione pu&ograve; riprogrammare le cellule differenziate in cellule staminali (iPS) pluripotenti indotte che ricordano le cellule staminali embrionali (ES). Queste cellule iPS promettono grande per medicina perch&eacute; hanno il potenziale per generare tipi di cellule del paziente-specifici per la terapia di sostituzione cellulare e producono modelli in vitro di malattia, senza la necessit&agrave; di tessuti embrionali o ovociti. Anche se le attuali linee di cellule iPS assomigliano cellule ES, essi non sono passati i pi&ugrave; rigorosi test di pluripotenza tramite la generazione di topi adulti o di pieno-termine in dosaggi di complementazione tetraploidi, alzando i dubbi sul fatto che siano sufficientemente potenti per generare tutti i tipi di cellule in un organismo. Non &egrave; noto se questa differenza tra iPS e cellule ES riflette limitazioni intrinseche della riprogrammazione diretta. Qui riportiamo fertili topi adulti derivati interamente da cellule iPS che abbiamo generato da inducibile genetica riprogrammazione dei fibroblasti embrionali del mouse. Produzione di topi adulti derivati interamente da un rifacimento del fibroblasto dimostra che tutte le caratteristiche di una cellula differenziata possono essere ripristinate ad un livello embrionale di pluripotenza senza esposizione a fattori di ooplasmic sconosciuto. Confrontando questi completamente pluripotenti iPS linee di cellule meno inerente allo sviluppo linee potenti possono rivelare marcatori molecolari di Stati diversi pluripotenti. Inoltre, topi derivati interamente da cellule iPS fornir&agrave; una nuova risorsa per valutare la stabilit&agrave; genomica e funzionale di cellule e tessuti derivati da cellule iPS, che &egrave; importante per convalidare la loro utilit&agrave; nella terapia sostitutiva delle cellule e applicazioni di ricerca.

Topi adulti generati da cellule staminali pluripotenti indotte.

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iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x5DEE;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x9650;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x80A5;&#x6C83;&#x306A;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x66F8;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x5375;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x56E0;&#x5B50;&#x3078;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x200B;&#x200B;&#x3089;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x88DC;&#x5145;&#x7642;&#x6CD5;&#x3084;&#x7814;&#x7A76;&#x7528;&#x9014;&#x3067;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xD68D;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xADF8; &#xACFC;&#xB3C4; overexpression &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC801;&#xC740; &#xC218;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB2EE;&#xC740; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; (iPS) &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC7AC; &#xC124; &#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; iPS &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB300;&#xCCB4; &#xC694;&#xBC95; &#xD658;&#xC790; &#xD2B9;&#xC815; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xBC0F; &#xBC30;&#xC544; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; oocytes&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0;, &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC758;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD070; &#xC57D;&#xC18D;&#xC744; &#xC7A1;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xD604;&#xC7AC; iPS &#xC138;&#xD3EC; &#xC120;&#xC744; &#xB2EE;&#xC740; ES &#xC138;&#xD3EC;, &#xBE44;&#xB85D; tetraploid &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xC5EC;&#xBD80; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC744; &#xC81C;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC804;&#xCCB4; &#xC6A9;&#xC5B4;&#xB098; &#xC131;&#xC778; &#xC950;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; pluripotency&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD558;&#xC9C0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740;. Ips&#xC640; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758;&#xC774; &#xCC28;&#xC774;&#xC774; &#xC9C1;&#xC811; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xD55C;&#xACC4;&#xB97C; &#xBC18;&#xC601; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; iPS &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBE44;&#xC625;&#xD55C; &#xC131;&#xC778; &#xC950; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC7AC;&#xC124;&#xC815;&#xB41C; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC131;&#xC778; &#xC0DD;&#xC950; &#xC0DD;&#xC0B0; ooplasmic &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xC5C6;&#xC774; pluripotency&#xC758; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC644;&#xC804;&#xD788; pluripotent iPS &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC791;&#xAC8C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xBE44;&#xAD50; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB77C;&#xC778; &#xB2E4;&#xB978; pluripotent &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xBC1D;&#xD790; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, iPS &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC950; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC870;&#xC9C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB300;&#xCCB4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC0F; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; iPS &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0C8; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC778; &#xC0DD;&#xC950; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Recientes experimentos hist&#xF3;ricos han demostrado que la sobreexpresi&#xF3;n transitoria de un peque&#xF1;o n&#xFA;mero de factores de transcripci&#xF3;n pueden reprogramar las c&#xE9;lulas diferenciadas en madre pluripotentes inducidas (iPS) que se asemejan a las c&#xE9;lulas madre embrionarias (ES) las c&#xE9;lulas. Estas c&#xE9;lulas iPS son una gran promesa para la medicina debido a que tienen el potencial de generar en el paciente tipos espec&#xED;ficos de c&#xE9;lulas para la terapia de reemplazo celular y la producci&#xF3;n de los modelos in vitro de la enfermedad, sin necesidad de tejidos de embriones u ovocitos. Aunque las actuales l&#xED;neas de c&#xE9;lulas iPS se parecen a las c&#xE9;lulas madre embrionarias, que no han pasado la prueba m&#xE1;s estricta de pluripotencia por la generaci&#xF3;n de ratones a t&#xE9;rmino o un adulto en ensayos de complementaci&#xF3;n tetraploide, que plantea interrogantes en cuanto a si son lo suficientemente potentes para generar todos los tipos de c&#xE9;lulas en un organismo. Si esta diferencia entre iPS y las c&#xE9;lulas ES refleja las limitaciones intr&#xED;nsecas de reprogramaci&#xF3;n directa no se conoce. Aqu&#xED; mostramos los ratones adultos f&#xE9;rtiles derivados enteramente de c&#xE9;lulas iPS que generaron por la reprogramaci&#xF3;n inducida gen&#xE9;tica de fibroblastos embrionarios de rat&#xF3;n. La producci&#xF3;n de ratones adultos totalmente derivadas de fibroblastos reprogramados una muestra que todas las caracter&#xED;sticas de una c&#xE9;lula diferenciada puede ser restaurado a un nivel embrionario de la pluripotencia sin exposici&#xF3;n a factores desconocidos ooplasmic. Comparando estas l&#xED;neas iPS totalmente de c&#xE9;lulas pluripotentes a las l&#xED;neas de desarrollo menos potentes pueden revelar los marcadores moleculares de los estados pluripotentes diferentes. Adem&#xE1;s, los ratones totalmente derivadas de las c&#xE9;lulas iPS proporcionar&#xE1; un nuevo recurso para evaluar la estabilidad funcional y gen&#xF3;mica de las c&#xE9;lulas y los tejidos derivados de c&#xE9;lulas iPS, lo cual es importante para validar su utilidad en la terapia de reemplazo celular y aplicaciones de investigaci&#xF3;n.

Los ratones adultos creadas a partir de c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducidas

&#x8D28;&#x91CF;&#x63A7;&#x5236;&#x5728;&#x57FA;&#x7840;&#x7814;&#x7A76;&#x3001; &#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x8FEB;&#x5207;&#x9700;&#x8981;&#x9694;&#x79BB;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (hPSC) &#x4EBA;&#x53E3;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x53EF;&#x9760;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x9635;&#x5217;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x4ECE; 26 hPSC &#x6837;&#x672C;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6;&#x7684;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; 22 &#x5206;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E26;&#x6709;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x7684;&#x7B7E;&#x540D;&#x7684;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x975E;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x533A;&#x5206; hPSCs &#x786E;&#x5B9A;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x4E00;&#x5C0F;&#x7FA4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x88AB;&#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x6240;&#x6709; 12 &#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; 14 &#x4EBA;&#x7C7B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8BBA;&#x51FA;&#x8EAB;&#x3001; &#x6587;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x3001; &#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x6216;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x7F16;&#x7A0B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x5B9E;&#x9645;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x51DD;&#x96C6;&#x68C0;&#x6D4B; hPSCs &#x5185;&#x4E00;&#x5B9A;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x67D3;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x4E0E;&#x6D41;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E30;&#x5BCC;&#x548C;&#x6E05;&#x9664;&#x53EF;&#x884C; hPSCs &#x4ECE;&#x6DF7;&#x5408;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x4F7F;&#x7528;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x5168;&#x7403;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x8BC4;&#x9009;&#x76F8;&#x5173;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; fucosyltransferases &#x548C; sialyltransferases&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x5C31;&#x662F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x548C;&#x51DD;&#x96C6;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x86CB;&#x767D;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x548C;&#x975E;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6709;&#x5F88;&#x5927;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x548C;&#x8BC1;&#x660E;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x76D1;&#x6D4B;&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x4E2D;&#x548C;&#x53BB;&#x9664;&#x7684;&#x53EF;&#x884C; hPSCs &#x4ECE;&#x6DF7;&#x5408;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9635;&#x5217;&#x7684; glycomic &#x5206;&#x6790;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x6807;&#x5FD7;&#x3002;

Rapid and dependable methods for isolating human pluripotent stem cell (hPSC) populations are urgently needed for quality control in basic research and in cell-based therapy applications. Using lectin arrays, we analyzed glycoproteins extracted from 26 hPSC samples and 22 differentiated cell samples, and identified a small group of lectins with distinctive binding signatures that were sufficient to distinguish hPSCs from a variety of non-pluripotent cell types. These specific biomarkers were shared by all the 12 human embryonic stem cell and the 14 human induced pluripotent stem cell samples examined, regardless of the laboratory of origin, the culture conditions, the somatic cell type reprogrammed, or the reprogramming method used. We demonstrated a practical application of specific lectin binding by detecting hPSCs within a differentiated cell population with lectin-mediated staining followed by fluorescence microscopy and flow cytometry, and by enriching and purging viable hPSCs from mixed cell populations using lectin-mediated cell separation. Global gene expression analysis showed pluripotency-associated differential expression of specific fucosyltransferases and sialyltransferases, which may underlie these differences in protein glycosylation and lectin binding. Taken together, our results show that protein glycosylation differs considerably between pluripotent and non-pluripotent cells, and demonstrate that lectins may be used as biomarkers to monitor pluripotency in stem cell populations and for removal of viable hPSCs from mixed cell populations.

Specific lectin biomarkers for isolation of human pluripotent stem cells identified through array-based glycomic analysis.

Les m&#xE9;thodes rapides et fiables pour isoler les cellules souches humaines pluripotentes (HPSC) les populations sont n&#xE9;cessaires d&#x26;#39;urgence pour le contr&#xF4;le de la qualit&#xE9; dans la recherche fondamentale et dans des applications de th&#xE9;rapie cellulaire &#xE0; base de. Utilisation des tableaux de lectine, nous avons analys&#xE9; les glycoprot&#xE9;ines extraites &#xE0; partir de 26 &#xE9;chantillons et 22 &#xE9;chantillons HPSC de cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es, et a identifi&#xE9; un petit groupe de lectines avec distinctifs signatures valables qui ont &#xE9;t&#xE9; suffisantes pour distinguer hPSCs &#xE0; partir d&#x26;#39;une vari&#xE9;t&#xE9; de types de cellules non pluripotentes. Ces biomarqueurs sp&#xE9;cifiques ont &#xE9;t&#xE9; partag&#xE9;s par tous les 12 cellules souches embryonnaires humaines et les 14 &#xE9;chantillons d&#x26;#39;origine humaine de cellules souches pluripotentes examin&#xE9;s, quelle que soit le laboratoire d&#x26;#39;origine, les conditions de culture, le type de cellules somatiques reprogramm&#xE9;es, ou la m&#xE9;thode de reprogrammation utilis&#xE9;. Nous avons d&#xE9;montr&#xE9; une application pratique de la liaison lectine sp&#xE9;cifique en d&#xE9;tectant hPSCs sein d&#x26;#39;une population de cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es de la lectine &#xE0; m&#xE9;diation coloration suivie par microscopie par fluorescence et la cytom&#xE9;trie en flux, et en enrichissant et purge hPSCs viables &#xE0; partir de populations de cellules mixtes &#xE0; l&#x26;#39;aide de s&#xE9;paration des cellules lectine-m&#xE9;diation. Mondial analyse d&#x26;#39;expression g&#xE9;nique ont montr&#xE9; une expression diff&#xE9;rentielle pluripotence-associ&#xE9; de fucosyltransf&#xE9;rases sp&#xE9;cifiques et sialyltransf&#xE9;rases, ce qui peut sous-tendent ces diff&#xE9;rences dans la glycosylation des prot&#xE9;ines et la lectine. Pris dans leur ensemble, nos r&#xE9;sultats montrent que la glycosylation des prot&#xE9;ines diff&#xE8;re consid&#xE9;rablement entre les pluripotentes et les cellules non pluripotentes, et d&#xE9;montrer que les lectines peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s comme biomarqueurs pour surveiller la pluripotence dans les populations de cellules souches et pour l&#x26;#39;enl&#xE8;vement de hPSCs viables &#xE0; partir de populations de cellules mixtes.

Biomarqueurs sp&#xE9;cifiques de lectines pour l&#x26;#39;isolement des cellules souches pluripotentes humaines identifi&#xE9;s &#xE0; travers le tableau Analyse fond&#xE9;e sur Glycomic

Schnelle und zuverl&auml;ssige Methoden f&uuml;r die Isolierung von menschlichen pluripotenten Stammzellen (hPSC) Populationen sind vordringlich f&uuml;r die Qualit&auml;tskontrolle in Grundlagenforschung und zellbasierte Therapie-Anwendungen. Mithilfe von Lektin-Arrays, wir analysierten Glykoproteine aus 26 hPSC Proben extrahiert und 22 differenzierte Zellenproben und identifiziert eine kleine Gruppe der Lektine mit unverwechselbaren Bindung-Signaturen, die ausreichend waren, um hPSCs aus einer Vielzahl von nicht-pluripotenten Zellen-Typen zu unterscheiden. Diese spezifischen Biomarkern wurden geteilt durch alle die 12 menschlichen embryonalen Stammzellen und die 14 menschliche induzierten pluripotenten Stammzellen Proben untersucht, unabh&auml;ngig vom Labor des Ursprungs, die Kulturbedingungen, den Typ des somatischen Zellen umprogrammiert oder die Neuprogrammierung Methode verwendet. Wir bewiesen eine praktische Anwendung der spezifischen Lektin-Bindung durch die Erkennung von hPSCs innerhalb einer differenzierten Zellpopulation mit Lektin-vermittelten F&auml;rbung gefolgt von Fluoreszenz-Mikroskopie und Flow Cytometry und bereichern und tragf&auml;hige hPSCs gemischte Zelle Bev&ouml;lkerungen mit Lektin-vermittelte Zellseparation aufr&auml;umen. Globale Genexpressionsanalyse zeigte Pluripotenz-assoziierte differenzielle Ausdruck der spezifischen Fucosyltransferase und Sialyltransferases, die diese Unterschiede in der Glykosylierung und Lektin-Bindung zugrunde liegen k&ouml;nnen. Zusammengenommen zeigen unsere Ergebnisse, dass Glykosylierung unterscheidet sich erheblich zwischen pluripotenten und nicht-pluripotenten Zellen und zeigen, dass Lektine als Biomarker verwendet werden d&uuml;rfen, Pluripotenz Stammzell-Bev&ouml;lkerung und zur Entfernung von lebensf&auml;higen hPSCs gemischte Zelle Bev&ouml;lkerungen zu &uuml;berwachen.

Spezifischen Lektin-Biomarker f&uuml;r die Isolierung von menschlichen pluripotenten Stammzellen durch Array-basierte Glycomic-Analyse identifiziert.

Metodi rapidi e affidabili per l&#39;isolazione delle popolazioni (hPSC) sulle cellule staminali pluripotenti umane sono urgentemente necessari per controllo di qualit&agrave; nella ricerca di base e nelle applicazioni di terapia cellulare. Utilizzando matrici lectina, abbiamo analizzato glicoproteine estratte dai campioni di hPSC 26 e 22 differenziato campioni di cellule e individuato un piccolo gruppo di lectine con le firme di associazione distintivo che erano sufficienti per distinguere hPSCs da una variet&agrave; di tipi di cellule pluripotenti non. Questi biomarcatori specifici sono stati condivisi da tutti i 12 human embryonic stem cell ed esaminato i campioni di cellule staminali umane pluripotenti indotte 14, indipendentemente dal laboratorio di origine, le condizioni di coltura, il tipo di cellule somatiche riprogrammate o riprogrammazione metodo utilizzato. Abbiamo dimostrato un&#39;applicazione pratica del binding lectin specifico rilevando hPSCs all&#39;interno di una popolazione di cellule differenziate con lectina-mediata colorazione seguita da citometria a flusso e microscopia di fluorescenza e di arricchimento e spurgo hPSCs praticabile da popolazioni di cellule miste mediante separazione lectina-mediata delle cellule. Analisi di espressione genica globale ha mostrato espressione differenziale associata pluripotenza specifico fucosyltransferases e sialyltransferases, che pu&ograve; essere alla base di queste differenze nella proteina glycosylation e binding lectin. Presi insieme, i nostri risultati mostrano che glicosilazione della proteina differisce considerevolmente tra le cellule pluripotenti e non pluripotenti e dimostrare che le lectine possono essere utilizzate come biomarker per monitorare la pluripotenza in popolazioni di cellule staminali e per la rimozione di vitali hPSCs da popolazioni di cellule miste.

Biomarcatori di lectin specifico per l&#39;isolamento di cellule staminali pluripotenti umane identificati attraverso analisi basata su array glycomic.

&#x30D2;&#x30C8;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;hPSC&#xFF09;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x4FE1;&#x983C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x65E9;&#x6025;&#x306B;&#x57FA;&#x790E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x7BA1;&#x7406;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;26 hPSC&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3068;22&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x304B;&#x3089;hPSCs&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x72EC;&#x7279;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CD;&#x30C1;&#x30E3;&#x3067;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x5168;12&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;14&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304C;&#x5171;&#x6709;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x8D77;&#x6E90;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x306E;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x6761;&#x4EF6;&#x3001;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x4ECB;&#x5728;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6DF7;&#x5408;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x304B;&#x3089;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;hPSCs&#x3092;&#x8C4A;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x30D1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x5185;hPSCs&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x5316;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D5;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x95A2;&#x9023;&#x5DEE;&#x6B21;&#x7684;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x975E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6DF7;&#x5408;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x304B;&#x3089;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;hPSCs&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B3;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; pluripotent &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hPSC) &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xAE34;&#xAE09; &#xD558; &#xAC8C; &#xD488;&#xC9C8; &#xAD00;&#xB9AC; &#xAE30;&#xCD08; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xBC18; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lectin &#xBC30;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xC6A9; glycoproteins 26 hPSC &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; 22 &#xC140; &#xC0D8;&#xD50C;, &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB418; &#xACE0; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC11C;&#xBA85;&#xC774; &#xC544;&#xB2CC; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; Hpscs&#xB97C; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD588;&#xB2E4; lectins &#xC18C;&#xADF8;&#xB8F9; &#xC2DD;&#xBCC4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; 12 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACF5;&#xC720; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xBC0F; 14 &#xC778;&#xAC04; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC758; &#xAE30;&#xC6D0;, &#xBB38;&#xD654; &#xC870;&#xAC74;, &#xC7AC;&#xC124;&#xC815;, &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xC2DD; &#xB610;&#xB294; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC0F; &#xD750;&#xB984; cytometry&#xB85C; &#xACE0; &#xB18D;&#xCD95; &#xBC0F; &#xD63C;&#xD569;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C; lectin &#xC911;&#xC7AC; &#xC140; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; Hpscs&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5BC;&#xB8E9; lectin &#xC911;&#xC7AC;&#xACFC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140; &#xC778;&#xAD6C; &#xB0B4;&#xC758; Hpscs&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xC5EC; &#xD2B9;&#xC815; lectin &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0;&#xC758; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xD2B9;&#xC815; fucosyltransferases&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; glycosylation lectin &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xAE30;&#xCD08; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; sialyltransferases &#xCC28;&#xB3D9; &#xC2DD; pluripotency&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xADF8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; glycosylation pluripotent &#xBE44; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; lectins pluripotency &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xD63C;&#xD569;&#xB41C; &#xC140; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; Hpscs&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC744; &#xC0DD;&#xCCB4;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Glycomic &#xC5B4;&#xB808;&#xC774; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; pluripotent &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; lectin &#xC0DD;&#xCCB4;.

Los m&#xE9;todos r&#xE1;pidos y fiables para el aislamiento de c&#xE9;lulas madre pluripotentes humanas (hPSC) las poblaciones se necesitan con urgencia para el control de la calidad en la investigaci&#xF3;n b&#xE1;sica y en aplicaciones de terapia a base de c&#xE9;lulas. El uso de matrices de lectina, se analizaron las glicoprote&#xED;nas extra&#xED;das de 26 muestras hPSC y 22 muestras de c&#xE9;lulas diferenciadas, e identific&#xF3; un peque&#xF1;o grupo de lectinas con distintivos de firmas obligatorias que eran suficientes para distinguir hPSCs de una variedad de tipos de c&#xE9;lulas no pluripotentes. Estos biomarcadores espec&#xED;ficos eran compartidos por todos los 12 de c&#xE9;lulas madre de embriones humanos y de las 14 muestras humanas pluripotentes inducidas de c&#xE9;lulas madre analizadas, independientemente del laboratorio de origen, las condiciones de cultivo, el tipo de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas reprogramadas, o el m&#xE9;todo de reprogramaci&#xF3;n utilizado. Hemos demostrado una aplicaci&#xF3;n pr&#xE1;ctica de lectina de uni&#xF3;n espec&#xED;ficos mediante la detecci&#xF3;n de hPSCs dentro de una poblaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas diferenciadas con lectina mediada por tinci&#xF3;n seguido por microscop&#xED;a de fluorescencia y citometr&#xED;a de flujo, y por enriquecer y purga hPSCs viables a partir de poblaciones de c&#xE9;lulas mixtas utilizando lectina mediada por separaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas. An&#xE1;lisis global de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica mostraron pluripotencia asociada a la expresi&#xF3;n diferencial de fucosyltransferases espec&#xED;ficos y sialiltransferasas, que puede ser la base de estas diferencias en la glicosilaci&#xF3;n de prote&#xED;nas y la lectina de uni&#xF3;n a. En conjunto, nuestros resultados muestran que la glicosilaci&#xF3;n de prote&#xED;nas difiere considerablemente entre pluripotentes y c&#xE9;lulas no pluripotentes, y demostrar que las lectinas pueden ser utilizados como biomarcadores para monitorear la pluripotencia de las poblaciones de c&#xE9;lulas madre y para la eliminaci&#xF3;n de hPSCs viables de poblaciones de c&#xE9;lulas mixtas.

Los biomarcadores espec&#xED;ficos de lectina para aislamiento de c&#xE9;lulas madre pluripotentes identificados a trav&#xE9;s de matriz basada en el an&#xE1;lisis Glycomic

&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#x76EE;&#x524D;&#x96BE;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x75C5;&#x4EBA;&#x548C;&#x6A21;&#x578B;&#x96F6;&#x661F;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x4E0D;&#x80FD;&#x83B7;&#x5F97;&#x6D3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D7;&#x5230;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x8981;&#x91CD;&#x65B0;&#x5C0F;&#x5B66;&#x4ECE;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x4E3A;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x9B54;&#x9B3C;) &#x514B;&#x670D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6027;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x539F;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E24;&#x8005;&#x9020;&#x6210;&#x7684;-&beta; &#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x590D; (APP &#xFF1B; &#x79F0;&#x4E3A;&#x7684; APP(Dp))&#xFF0C;&#x4E24;&#x6B21;&#x4E0E;&#x6563;&#x53D1;&#x6027;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5; (&#x79F0;&#x4E3A; sAD1 sAD2) &#x548C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x975E;&#x75F4;&#x5446;&#x6210;&#x673A;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x884C;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x3002;&#x6765;&#x81EA;&#x4E0D;&#x540C;&#x6587;&#x5316;&#x80CC;&#x666F;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x51C0;&#x5316;&#x4E0E;&#x8367;&#x5149;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6392;&#x5E8F;&#x548C;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x51C0;&#x5316;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x5305;&#x542B;&#x8D85;&#x8FC7; 90%&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x805A;&#x96C6;&#x4E0E;&#x80CE;&#x513F;&#x8111;&#x4FE1;&#x4F7F; RNA &#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x6807;&#x51C6;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x548C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x7A81;&#x89E6;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x673A;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x6D3E;&#x751F;&#x3001; &#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E24;&#x4E2A; APP(Dp) &#x75C5;&#x4EBA;&#x548C;&#x75C5;&#x4EBA; sAD2 &#x5C55;&#x51FA;&#x75C5;&#x7406;&#x6807;&#x8BB0; amyloid-&beta;(1-40)&#x3001; &#x78F7; tau(Thr 231) &#x548C;&#x79EF;&#x6781;&#x7CD6;&#x539F;&#x5408;&#x9176;&#x6FC0;&#x9176;-3&beta; (aGSK-3&beta;) &#x663E;&#x8457;&#x8F83;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x4ECE; APP(Dp) &#x548C; sAD2 &#x75C5;&#x4EBA;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E5F;&#x79EF;&#x7D2F;&#x5927; RAB5 &#x9633;&#x6027;&#x65E9;&#x671F; endosomes &#x63A7;&#x4EF6;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x7EAF;&#x51C0;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E0E; &beta;-secretase &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; &gamma;-secretase &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4;&#x78F7; Tau(Thr 231) &#x548C; aGSK 3&beta; &#x6C34;&#x5E73;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x524A;&#x51CF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; APP &#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x5904;&#x7406;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D;-&beta; &#x5728; GSK 3&beta; &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x9A6C;&#x5934;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x60B2;&#x75C5;&#x4EBA;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6027;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x7684;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x770B;&#x5230;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x66F4;&#x4E00;&#x822C;&#x5730;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x673A;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x578B;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x91C7;&#x53D6;&#x516C;&#x5F00;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x60A3;&#x8005;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x51E0;&#x5341;&#x5E74;&#x3002;

&#x63A2;&#x8BA8;&#x6563;&#x53D1;&#x6027;&#x548C;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6027;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x4F7F;&#x7528;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Our understanding of Alzheimer's disease pathogenesis is currently limited by difficulties in obtaining live neurons from patients and the inability to model the sporadic form of the disease. It may be possible to overcome these challenges by reprogramming primary cells from patients into induced pluripotent stem cells (iPSCs). Here we reprogrammed primary fibroblasts from two patients with familial Alzheimer's disease, both caused by a duplication of the amyloid-Î² precursor protein gene (APP; termed APP(Dp)), two with sporadic Alzheimer's disease (termed sAD1, sAD2) and two non-demented control individuals into iPSC lines. Neurons from differentiated cultures were purified with fluorescence-activated cell sorting and characterized. Purified cultures contained more than 90% neurons, clustered with fetal brain messenger RNA samples by microarray criteria, and could form functional synaptic contacts. Virtually all cells exhibited normal electrophysiological activity. Relative to controls, iPSC-derived, purified neurons from the two APP(Dp) patients and patient sAD2 exhibited significantly higher levels of the pathological markers amyloid-Î²(1-40), phospho-tau(Thrâ€‰231) and active glycogen synthase kinase-3Î² (aGSK-3Î²). Neurons from APP(Dp) and sAD2 patients also accumulated large RAB5-positive early endosomes compared to controls. Treatment of purified neurons with Î²-secretase inhibitors, but not Î³-secretase inhibitors, caused significant reductions in phospho-Tau(Thrâ€‰231) and aGSK-3Î² levels. These results suggest a direct relationship between APP proteolytic processing, but not amyloid-Î², in GSK-3Î² activation and tau phosphorylation in human neurons. Additionally, we observed that neurons with the genome of one sAD patient exhibited the phenotypes seen in familial Alzheimer's disease samples. More generally, we demonstrate that iPSC technology can be used to observe phenotypes relevant to Alzheimer's disease, even though it can take decades for overt disease to manifest in patients.

Probing sporadic and familial Alzheimer's disease using induced pluripotent stem cells.

Notre compr&eacute;hension de la pathogen&egrave;se de la maladie d&#39;Alzheimer est actuellement limit&eacute;e par les difficult&eacute;s &agrave; obtenir des neurones vivants des patients et l&#39;incapacit&eacute; de mod&eacute;liser la forme sporadique de la maladie. Il peut &ecirc;tre possible de surmonter ces d&eacute;fis en reprogrammant des cellules primaires de patients sur les cellules souches pluripotentes induites (CISP). Ici nous avons reprogramm&eacute; les fibroblastes primaires de deux patients atteints de la maladie d&#39;Alzheimer familiale, toutes deux caus&eacute;es par une duplication de la g&egrave;ne de la prot&eacute;ine &beta;-amylo&iuml;de pr&eacute;curseur (APP; APP(Dp)) appel&eacute;s, deux avec la maladie d&#39;Alzheimer sporadique (appel&eacute;s sAD1, sAD2) et deux non d&eacute;ments commande individus en lignes de l&#39;iPSC. Les neurones de cultures diff&eacute;renci&eacute;es ont &eacute;t&eacute; purifi&eacute;s avec fluorescence-lanc&eacute;e de cellules tri et caract&eacute;ris&eacute;. Cultures purifi&eacute;es contient plus de 90 % neurones, group&eacute;s avec des &eacute;chantillons d&#39;ARN messager cerveau foetal par crit&egrave;res de microarray et pourraient constituer des contacts synaptiques fonctionnelles. Presque toutes les cellules expos&eacute;es normale activit&eacute; &eacute;lectrophysiologique. Par rapport aux contr&ocirc;les, neurones d&eacute;riv&eacute;s iPSC, purifi&eacute;es des deux APP(Dp) les patients et patients sAD2 pr&eacute;sentaient des taux significativement plus &eacute;lev&eacute;s des marqueurs pathologiques amyloid-&beta;(1-40), phospho-tau(Thr 231) et active de glycog&egrave;ne synthase kinase-3&beta; (aGSK-3&beta;). Les neurones provenant de patients APP(Dp) et sAD2 a &eacute;galement accumulent grand RAB5 positif d&eacute;but endosomes compar&eacute;e aux t&eacute;moins. Traitement des neurones purifi&eacute;es avec des inhibiteurs de la &beta;-secretase, mais pas les inhibiteurs de la &gamma;-secretase, entra&icirc;ne des r&eacute;ductions significatives dans les niveaux phospho-Tau(Thr 231) et aGSK-3&beta;. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent une relation directe entre le traitement prot&eacute;olytique APP, mais non amylo&iuml;de-&beta;, phosphorylation de GSK-3&beta; activation et tau dans les neurones humains. En outre, nous avons constat&eacute; que les neurones avec le g&eacute;nome d&#39;un patient triste expose les ph&eacute;notypes observ&eacute;es dans des &eacute;chantillons de la maladie d&#39;Alzheimer familiale. Plus g&eacute;n&eacute;ralement, nous d&eacute;montrons qu&#39;iPSC technologie permet d&#39;observer des ph&eacute;notypes pertinents &agrave; la maladie d&#39;Alzheimer, m&ecirc;me s&#39;il peut prendre des d&eacute;cennies pour maladie patente &agrave; se manifester chez les patients.

Sondage sporadique et familiale de l&#39;Alzheimer &agrave; l&#39;aide de cellules souches pluripotentes induites.

Unser Verst&auml;ndnis der Pathogenese der Alzheimer-Krankheit ist derzeit durch Schwierigkeiten bei der Beschaffung von Leben Neurons von Patienten und die Unf&auml;higkeit, die sporadische Form der Krankheit model begrenzt. Es kann diese Herauforderungen durch Neuprogrammierung Prim&auml;rzellen von Patienten in induzierte pluripotente Stammzellen (iPSCs) m&ouml;glich. Hier wir umprogrammiert prim&auml;re Fibroblasten von zwei Patienten mit famili&auml;ren Alzheimer-Krankheit, beide, die durch eine Vervielf&auml;ltigung der Amyloid-&beta;-Vorl&auml;ufer-Protein-gen (APP, genannt APP(Dp)), zwei mit sporadischen Alzheimer-Krankheit (genannt sAD1, sAD2) und zwei nicht-demented Steuern Einzelpersonen in iPSC-Linien. Neuronen aus differenzierten Kulturen wurden mit Fluoreszenz-aktivierte Zelle Sortieren und charakterisiert gereinigt. Gereinigte Kulturen enthalten mehr als 90 % Neuronen, Cluster mit fetalen Gehirns Boten-RNA-Proben von Microarray-Kriterien, und funktionelle synaptischen Kontakte bilden k&ouml;nnte. Praktisch alle Zellen ausgestellt normalen elektrophysiologischen Aktivit&auml;t. Relativ zur steuert, iPSC-abgeleitet, gereinigte Neuronen aus den beiden APP(Dp) Patienten und Patienten sAD2 ausgestellt deutlich h&ouml;here Ebenen der pathologischen Marker amyloid-&beta;(1-40), Phospho-tau(Thr 231) und aktive Glykogen-Synthase Kinase-3&beta; (aGSK-3&beta;). Neuronen aus APP(Dp) und sAD2 Patienten gesammelt auch gro&szlig;e RAB5-positivem fr&uuml;he Endosomen im Vergleich zu Kontrollen. Behandlung von gereinigtem Neuronen mit &beta;-Sekretase-Inhibitoren, aber nicht die &gamma;-Sekretase-Inhibitoren, verursachte erhebliche Reduzierung Phospho-Tau(Thr 231) und aGSK-3&beta; Ebene. Diese Ergebnisse legen nahe, eine direkte Beziehung zwischen APP proteolytische Verarbeitung, aber nicht Amyloid-&beta;, der GSK-3&beta; Aktivierung und Tau Phosphorylierung in menschlichen Neuronen. Zus&auml;tzlich beobachteten wir, dass Neuronen mit Genom eine traurige Patientin die Ph&auml;notypen in famili&auml;ren Alzheimer-Krankheit-Beispiele gesehen ausgestellt. Generell zeigen wir iPSC-Technologie kann verwendet werden, Phenotypen relevant f&uuml;r Alzheimer-Krankheit, zu beobachten, obwohl es Jahrzehnte offenkundige Krankheit bei Patienten manifestieren dauern kann.

Sondieren sporadisch und famili&auml;re Alzheimer-Krankheit mit induzierten pluripotenten Stammzellen.

La nostra comprensione della patogenesi della malattia di Alzheimer &egrave; attualmente limitato dalla difficolt&agrave; nell&#39;ottenere i neuroni dal vivo dai pazienti e l&#39;incapacit&agrave; di modellare la forma sporadica della malattia. &Egrave; possibile superare queste sfide riprogrammando le cellule primarie da pazienti in cellule staminali pluripotenti indotte (iPSCs). Qui abbiamo riprogrammato fibroblasti primari da due pazienti con la malattia di Alzheimer familiare, entrambi causati da una duplicazione del gene per la proteina del precursore &beta;-amiloide (APP; chiamato APP(Dp)), due sporadici di malattia di Alzheimer (definito sAD1, sAD2) e due non demente controllare gli individui nelle linee di iPSC. Neuroni da culture differenziate furono purificati con fluorescenza-attivato delle cellule ordinamento e caratterizzata. Culture purificate contenevano pi&ugrave; di 90% di neuroni, cluster con campioni di RNA messaggero del cervello fetale da criteri di microarray e potrebbero formare contatti sinaptici funzionali. Virtualmente tutte le cellule esposte normale attivit&agrave; elettrofisiologica. Relativa ai controlli, neuroni iPSC-derivato, purificati da due pazienti APP(Dp) e paziente sAD2 esposte significativamente pi&ugrave; elevati livelli di marcatori patologici amyloid-&beta;(1-40), fosfo-tau(Thr 231) e attiva glicogeno sintasi chinasi-3beta (aGSK-3beta). Neuroni di pazienti APP(Dp) e sAD2 anche accumulano grandi endosomes primi RAB5-positivi rispetto ai controlli. Trattamento dei neuroni purificati con inibitori &beta;-secretasi, ma non inibitori della &gamma;-secretasi, causato significative riduzioni nei livelli di fosfo-Tau(Thr 231) e aGSK-3beta. Questi risultati suggeriscono un rapporto diretto tra trattamento proteolitico APP, ma non amiloide-&beta;, GSK-3beta attivazione e tau della fosforilazione in neuroni umani. Inoltre, abbiamo osservato che i neuroni con il genoma di un paziente triste esposto i fenotipi visti nei campioni della malattia di Alzheimer familiare. Pi&ugrave; in generale, ci dimostrano che iPSC tecnologia pu&ograve; essere utilizzata per osservare fenotipi rilevanti per la malattia di Alzheimer, anche se pu&ograve; richiedere decenni per malattia conclamata a manifestarsi nei pazienti.

Sondaggio sporadica e familiare della malattia di Alzheimer utilizzando cellule staminali pluripotenti indotte.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x60A3;&#x8005;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x6563;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x5F62;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x56F0;&#x96E3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x7D30;&#x80DE;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; (ips &#x7D30;&#x80DE;) &#x306B;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8AB2;&#x984C;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6027;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005; 2 &#x75C7;&#x4F8B;&#x304B;&#x3089;&#x4E00;&#x6B21;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9; &beta; &#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B; (APP; &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; APP(Dp))&#x3001;&#x6563;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5; &#xFF08;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; sAD1&#x3001;sad2 &#x3092;&#xFF09; 2 &#x3064;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x975E;&#x75F4;&#x5446;&#x8001;&#x5E74; iPSC &#x884C;&#x306B;&#x500B;&#x4EBA;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x5206;&#x5316;&#x57F9;&#x990A;&#x304B;&#x3089;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7279;&#x5FB4;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3088;&#x308A;&#x3082; 90% &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3001;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC; RNA &#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5316;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x3092;&#x5F62;&#x4F5C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9F;&#x4E0A;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x3001;iPSC &#x7531;&#x6765;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304B;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E; APP(Dp) &#x60A3;&#x8005;&#x3068;&#x60A3;&#x8005;&#x306E; sad2 &#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; amyloid-&beta;(1-40)&#x3001;&#x30EA;&#x30F3; tau(Thr 231) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 3 &beta; (aGSK 3 &beta;&#xFF09; &#x306E;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;APP(Dp) &#x3068; sad2 &#x3092;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3082;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x5927;&#x304D;&#x3044; RAB5 &#x967D;&#x6027;&#x65E9;&#x671F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3002;&Beta; &#x30BB;&#x30AF;&#x30EC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x304C;&#x306A;&#x3044; &gamma; &#x30BB;&#x30AF;&#x30EC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9; Tau(Thr 231) &#x3068; aGSK 3 &beta; &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x89E3;&#x51E6;&#x7406;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &beta;&#x3001;GSK 3 &beta; &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x30BF;&#x30A6;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x4EBA;&#x9593;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x95A2;&#x4FC2;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;1 &#x3064;&#x306E;&#x60B2;&#x3057;&#x3044;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3068;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6027;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x30DE;&#x30CB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x6570;&#x5341;&#x5E74;&#x3092;&#x53D6;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B; iPSC &#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6563;&#x767A;&#x7684;&#x3067;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6027;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;

&#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC; &#xD658;&#xC790;&#xC640; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC0B0;&#xBC1C;&#xC801; &#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC744; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC5BB;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (iPSCs)&#xB85C; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC11C; 1 &#xCC28; &#xC140;&#xC744; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB450; &#xAC00;&#xC871; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; 1 &#xCC28; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xB97C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;, &#xB458; &#xB2E4; &#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &beta; &#xC804;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC911;&#xBCF5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; (APP; 2 &#xC0B0;&#xBC1C;&#xC801; &#xC778; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; (&#xBD88;&#xB9B0;&#xB41C; sAD1, sAD2)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBD88;&#xB9B0;&#xB41C; APP(Dp)) &#xB450; &#xC544;&#xB2CC; &#xBBF8;&#xCE5C; iPSC &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xC778;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xAD11; &#xD65C;&#xC131; &#xC140;&#xC774; &#xC815;&#xB82C; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC815;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xBB38;&#xD654;&#xC640; microarray &#xAE30;&#xC900;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD0DC;&#xC544; &#xB1CC; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; RNA &#xC0D8;&#xD50C; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xB41C; 90 &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; % &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC591;&#xC2DD; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; electrophysiological &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC5D0; &#xBE44;&#xB840;&#xD558;&#xC5EC; &#xC81C;&#xC5B4;, iPSC &#xD30C;&#xC0DD;, &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xB274;&#xB7F0; &#xB450; APP(Dp) &#xD658;&#xC790;&#xC640; &#xD658;&#xC790; Sad2&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; &#xB9C8;&#xCEE4; amyloid-&beta;(1-40), &#xC778; tau(Thr 231), &#xD65C;&#xC131; glycogen synthase &#xB2C8; 3&beta; (aGSK-3&beta;). APP(Dp) &#xBC0F; sAD2 &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD070; RAB5 &#xC591;&#xC131; &#xCD08;&#xAE30; endosomes &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xCD95;&#xC801; &#xB41C;. &Beta;-secretase &#xC800; &#xD574;&#xC81C;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC548; &gamma;-secretase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC640; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC778; tau(thr 231)&#xC640; aGSK 3&beta; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC808;&#xAC10;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;-&beta;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; GSK 3&beta; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xD0C0;&#xC6B0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC2AC;&#xD508; &#xD658;&#xC790; &#xAC8C;&#xB188;&#xACFC; &#xB274;&#xB7F0; &#xACE0;&#xAE30; &#xAC00;&#xC871;&#xC131; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF8; &#xC804;&#xC2DC; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA85;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC2ED; &#xB144;&#xC774; &#xAC78;&#xB9B4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBE44;&#xB85D; iPSC &#xAE30;&#xC220; &#xAD00;&#xB828; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1;, &#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0B0;&#xBC1C;&#xC801; &#xC778; &#xBC0F; &#xAC00;&#xC871; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1;&#xC744; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nuestra comprensi&oacute;n de la patogenesia de la enfermedad de Alzheimer est&aacute; actualmente limitada por dificultades en la obtenci&oacute;n de neuronas vivos de pacientes y la incapacidad para modelar la forma espor&aacute;dica de la enfermedad. Es posible superar estos desaf&iacute;os por la reprogramaci&oacute;n de c&eacute;lulas primarias de pacientes en c&eacute;lulas pluripotentes inducidas (iPSCs). Aqu&iacute; hemos reprogramado fibroblastos primarios de dos pacientes con la enfermedad de Alzheimer familiar, causados por una duplicaci&oacute;n del gene de la prote&iacute;na &beta;-amiloide precursora (APP, llamado APP(Dp)), dos con la enfermedad de Alzheimer espor&aacute;dica (llamado sAD1, sAD2) y dos no dementes los individuos de control en l&iacute;neas de iPSC. Las neuronas de culturas diferenciadas se purificaron con c&eacute;lulas activado por fluorescencia clasificaci&oacute;n y caracterizado. Culturas purificadas contienen m&aacute;s de 90% neuronas, agrupadas con muestras de ARN mensajero del cerebro del feto por criterios microarrays y podr&iacute;an formar contactos sin&aacute;pticos funcionales. Pr&aacute;cticamente todas las c&eacute;lulas exhiben actividad electrofisiol&oacute;gica normal. En relaci&oacute;n a controles, las neuronas derivadas de iPSC, purificadas de los dos pacientes de APP(Dp) y sAD2 pacientes exhiben niveles significativamente m&aacute;s elevados de los marcadores patol&oacute;gicos amyloid-&beta;(1-40), fosfo-tau(Thr 231) y activo de la gluc&oacute;geno sintasa quinasa-3&beta; (aGSK-3&beta;). Las neuronas de pacientes APP(Dp) y sAD2 tambi&eacute;n acumulan grandes endosomas tempranos RAB5 positivo comparado con controles. Tratamiento de las neuronas purificadas con inhibidores de &beta;-secretasa, pero no los inhibidores de la &gamma;-secretasa, caus&oacute; una considerable reducci&oacute;n en los niveles de fosfo-Tau(Thr 231) y aGSK-3&beta;. Estos resultados sugieren una relaci&oacute;n directa entre el procesamiento proteol&iacute;tico de la APP, pero no amiloide-&beta;, en GSK-3&beta; fosforilaci&oacute;n de activaci&oacute;n y tau en las neuronas humanas. Adem&aacute;s, observamos que las neuronas con el genoma de un paciente triste exhibieron los fenotipos en muestras de la enfermedad de Alzheimer familiar. M&aacute;s generalmente, demostramos que iPSC tecnolog&iacute;a puede utilizarse para observar fenotipos correspondientes a la enfermedad de Alzheimer, a pesar de que puede tomar d&eacute;cadas para enfermedad abierta a manifestar en pacientes.

Sondeo espor&aacute;dico y familiar de Alzheimer usando c&eacute;lulas madre pluripotentes inducidas.

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (hPSCs) &#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5EFA;&#x6A21;&#x75BE;&#x75C5;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x3001; &#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F; hPSCs &#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5728;&#x65E0;&#x504F; 205 hPSC &#x548C; 130 &#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x672C;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E; hPSC &#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7578;&#x53D8;&#x4E2D; X &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5931;&#x6D3B; (XCI) &#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5370;&#x8BB0;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x6539;&#x6B63;&#x4E86;&#x5728;&#x5B9A;&#x5411;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7531; DNA &#x53BB;&#x7532;&#x57FA;&#x4F53;&#x5916;&#x5B9A;&#x5411;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6982;&#x62EC;&#x6765;&#x533A;&#x5206;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x51C6;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x662F;&#x57FA;&#x4E8E; hPSC &#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x578B;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x9002;&#x5F53; XCI &#x6216;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x5B9A;&#x5411;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x7684; hPSCs&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x5B58;&#x5728; XCI &#x6216;&#x5370;&#x8FF9;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x51C6;&#x786E;&#x5730;&#x5EFA;&#x6A21;&#x5370;&#x8FF9;&#x548C;&#x8BE5;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

&#x5728; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x7684;&#x884D;&#x751F;&#x54C1;&#x7684;&#x7ECF;&#x5E38;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

Human pluripotent stem cells (hPSCs) are potential sources of cells for modeling disease and development, drug discovery, and regenerative medicine. However, it is important to identify factors that may impact the utility of hPSCs for these applications. In an unbiased analysis of 205 hPSC and 130 somatic samples, we identified hPSC-specific epigenetic and transcriptional aberrations in genes subject to X chromosome inactivation (XCI) and genomic imprinting, which were not corrected during directed differentiation. We also found that specific tissue types were distinguished by unique patterns of DNA hypomethylation, which were recapitulated by DNA demethylation during in vitro directed differentiation. Our results suggest that verification of baseline epigenetic status is critical for hPSC-based disease models in which the observed phenotype depends on proper XCI or imprinting and that tissue-specific DNA methylation patterns can be accurately modeled during directed differentiation of hPSCs, even in the presence of variations in XCI or imprinting.

Recurrent variations in DNA methylation in human pluripotent stem cells and their differentiated derivatives.

Les cellules souches pluripotentes humaines (hPSCs) sont des sources potentielles de cellules pour la mod&eacute;lisation des maladies et le d&eacute;veloppement, d&eacute;couverte de m&eacute;dicaments et la m&eacute;decine r&eacute;g&eacute;n&eacute;rative. Cependant, il est important d&#39;identifier les facteurs qui peuvent influer sur l&#39;utilit&eacute; de hPSCs pour ces applications. Dans une analyse impartiale des 205 hPSC et 130 &eacute;chantillons somatiques, nous avons identifi&eacute; des aberrations &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques et transcriptionnelles de hPSC sp&eacute;cifiques dans les g&egrave;nes soumis &agrave; l&#39;inactivation du chromosome X (XCI) et l&#39;empreinte g&eacute;nomique, qui n&#39;&eacute;taient pas corrig&eacute;es durant la diff&eacute;renciation dirig&eacute;e. Nous avons &eacute;galement constat&eacute; que les types de tissus sp&eacute;cifiques sont distinguaient par des mod&egrave;les uniques de l&#39;hypom&eacute;thylation de l&#39;ADN, qui ont &eacute;t&eacute; r&eacute;capitul&eacute;s par d&eacute;m&eacute;thylation de l&#39;ADN au cours de la diff&eacute;renciation dirig&eacute;e in vitro. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que la v&eacute;rification du statut &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques de base est critique pour les mod&egrave;les de maladies hPSC dans lequel le ph&eacute;notype observ&eacute; d&eacute;pend XCI correcte ou empreinte et cette m&eacute;thylation de l&#39;ADN sp&eacute;cifique des tissus peut &ecirc;tre fid&egrave;lement mod&eacute;lis&eacute;s durant la diff&eacute;renciation dirig&eacute;e de hPSCs, m&ecirc;me en pr&eacute;sence de variations XCI ou empreinte.

Variations r&eacute;currentes de m&eacute;thylation de l&#39;ADN dans les cellules souches pluripotentes humaines et leurs d&eacute;riv&eacute;s diff&eacute;renci&eacute;s.

Menschliche pluripotenten Stammzellen (hPSCs) sind m&ouml;gliche Quellen von Zellen zur Modellierung von Krankheit und Entwicklung, Drogeentdeckung und regenerative Medizin. Jedoch ist es wichtig, Faktoren zu identifizieren, die den Nutzen der hPSCs f&uuml;r diese Anwendungen beeintr&auml;chtigen k&ouml;nnten. Im Rahmen einer unvoreingenommenen Analyse von 205 hPSC und 130 somatische Proben wir identifiziert hPSC-spezifische epigenetische und transkriptionelle Aberrationen in Genen x-Chromosom Inaktivierung (XCI) und genomische Pr&auml;gung unterworfen, die wurden nicht korrigiert, w&auml;hrend gerichtete Differenzierung. Wir fanden auch, dass bestimmte Gewebearten durch einzigartige Muster von DNA-Hypomethylierung, voneinander unterschieden wurden, die durch DNA-Demethylierung w&auml;hrend der in-vitro-gesteuerte Differenzierung abgewogen wurden. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass des Grundlinie epigenetischen Status f&uuml;r hPSC-basierte Krankheitsmodelle entscheidend ist, in dem die beobachteten Ph&auml;notyp h&auml;ngt von der richtigen XCI oder Pr&auml;gung und die Gewebe-spezifischen DNA-Methylierungsmuster w&auml;hrend gerichtete Differenzierung der hPSCs, auch in Gegenwart von Variationen XCI oder Pr&auml;gung genau modelliert werden k&ouml;nnen.

Wiederkehrende Variationen in der DNA-Methylierung in menschlichen pluripotenten Stammzellen und ihre differenzierte Derivate.

Le cellule staminali pluripotenti umane (hPSCs) sono potenziali fonti di cellule per la modellazione di malattia e di sviluppo, scoperta della droga e della medicina rigenerativa. Tuttavia, &egrave; importante identificare i fattori che possono influenzare l&#39;utilit&agrave; di hPSCs per queste applicazioni. In un&#39;analisi imparziale di hPSC 205 e 130 campioni somatici, abbiamo identificato hPSC specifiche aberrazioni epigenetiche e trascrizionale dei geni soggetti a inattivazione del cromosoma X (XCI) e imprinting genomico, che non sono stati corretti durante la differenziazione diretto. Abbiamo anche trovato che tipi di tessuto specifici sono stati distinti dai modelli unici di ipometilazione del DNA, che sono state ricapitolate di demetilazione del DNA durante la differenziazione in vitro diretto. I nostri risultati suggeriscono che la verifica dello status epigenetico baseline &egrave; critica per i modelli basati su hPSC malattia in cui il fenotipo osservato dipende dalla corretta XCI o imprinting e che schemi di metilazione del DNA di tessuto-specifici possono essere modellati con precisione durante la differenziazione regia di hPSCs, anche in presenza di variazioni di XCI o imprinting.

Variazioni ricorrenti nella metilazione del DNA in cellule staminali pluripotenti umane e loro derivati differenziati.

&#x3072;&#x3068;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; (hPSCs) &#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x75C5;&#x3068;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x5275;&#x85AC;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x7528;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6E90;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; hPSCs &#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;205 HPSC &#x3068; 130 &#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x516C;&#x5E73;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; hPSC &#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x53CE;&#x5DEE;&#x3092;&#x8B58;&#x5225; X &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; (XCI) &#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x5BFE;&#x8C61;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x306B;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x4F53;&#x5916;&#x3067;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D; DNA &#x8131;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x518D;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E; DNA &#x4F4E;&#x3044;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x533A;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; &#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x304C;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x9069;&#x5207;&#x306A; XCI &#x4F9D;&#x5B58;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x56FA;&#x6709;&#x306E; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B; XCI &#x3084;&#x5237;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x5909;&#x52D5;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3082; hPSCs &#x306E;&#x76E3;&#x7763;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x904E;&#x7A0B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; hPSC &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x75BE;&#x60A3;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x3072;&#x3068;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x518D;&#x767A;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; pluripotent &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hPSCs) &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559;, &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC140;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC18C;&#xC2A4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; hPSCs &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 205 HPSC 130 &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xD3B8;&#xACAC;&#xB41C; &#xBD84;&#xC11D;, &#xC6B0;&#xB9AC; hPSC &#xD2B9;&#xC815; epigenetic &#xBC0F; transcriptional aberrations &#xD655;&#xC778; &#xB41C; X &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; (XCI) &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188; &#xAC01; &#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xB294; &#xC5C6;&#xB294; &#xAC10;&#xB3C5;&#xB41C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC218;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC870;&#xC9C1; &#xC720;&#xD615; &#xCCB4; &#xC678; &#xAC10;&#xB3C5;&#xB41C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; DNA demethylation&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; recapitulated &#xD588;&#xB2E4; DNA hypomethylation&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xCD08;&#xAE30; epigenetic &#xC0C1;&#xD0DC; &#xD655;&#xC778;&#xC740; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; XCI &#xC758;&#xC874; &#xAD00;&#xCC30;&#xB41C; &#xD615; &#xB610;&#xB294; &#xAC01; &#xC778; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; XCI &#xB610;&#xB294; &#xAC01; &#xC778;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBCC0;&#xC774; &#xC874;&#xC7AC;&#xB3C4; Hpscs&#xC758; &#xAC10;&#xB3C5;&#xB41C; &#xBD84;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC218; hPSC &#xAE30;&#xBC18; &#xC9C8;&#xD658; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; pluripotent &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xBC1C; &#xC131; &#xBCC0;&#xD654;.

Las c&eacute;lulas de v&aacute;stago pluripotent humana (hPSCs) son fuentes potenciales de c&eacute;lulas para el modelado de la enfermedad y el desarrollo, descubrimiento de f&aacute;rmacos y medicina regenerativa. Sin embargo, es importante identificar los factores que pueden afectar la utilidad de hPSCs para estas aplicaciones. En un an&aacute;lisis imparcial de 205 hPSC y 130 muestras som&aacute;ticas, identificamos hPSC espec&iacute;ficos epigen&eacute;ticas y transcripcionales aberraciones en genes sujeta a la inactivaci&oacute;n del cromosoma X (XCI) e impresi&oacute;n gen&oacute;mica, que no fueron corregidos durante la diferenciaci&oacute;n dirigida. Tambi&eacute;n encontramos que tipos de tejidos espec&iacute;ficos fueron distinguidos por patrones &uacute;nicos de la hipometilaci&oacute;n del ADN, que fueron recapitulados por desmetilaci&oacute;n del ADN durante la diferenciaci&oacute;n dirigida in vitro. Nuestros resultados sugieren que la verificaci&oacute;n de estado epigen&eacute;tico de l&iacute;nea de base es cr&iacute;tica para modelos hPSC enfermedad en la cual el fenotipo observado depende XCI adecuada o impresi&oacute;n y eso patrones de metilaci&oacute;n de ADN de tejidos espec&iacute;ficos se pueden modelar con precisi&oacute;n durante la diferenciaci&oacute;n dirigida de hPSCs, incluso en presencia de variaciones en el XCI o impresi&oacute;n.

Variaciones recurrentes en la metilaci&oacute;n del ADN en c&eacute;lulas madre pluripotentes humanas y sus derivados diferenciados.

&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x3067;&#x3059;&#xFF1F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x653E;&#x68C4;&#x6B63;&#x5F53;&#x5316;&#xFF1F;

&#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C;? &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC01; &#xD654; &#xC138;&#xD3EC; &#xC7AC;&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xC815;&#xB2F9;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xAE4C;?

&iquest;Igualmente potente? &iquest;Reprogramaci&oacute;n Celular justifica el abandono de c&eacute;lulas madre embrionarias humanas?

&#x540C;&#x6837;&#x5F3A;&#x5927;&#x5417;&#xFF1F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x8BF4;&#x660E;&#x653E;&#x5F03;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7406;&#x7531;&#x4E86;&#x5417;&#xFF1F;

Article	Year
Adult mice generated from induced pluripotent stem cells. Nature\| PubMed ID: 19672243	2009
Specific lectin biomarkers for isolation of human pluripotent stem cells identified through array-based glycomic analysis. Cell research\| PubMed ID: 21894191	2011
Probing sporadic and familial Alzheimer's disease using induced pluripotent stem cells. Nature\| PubMed ID: 22278060	2012
Recurrent variations in DNA methylation in human pluripotent stem cells and their differentiated derivatives. Cell stem cell\| PubMed ID: 22560082	2012
Equally potent? Does cellular reprogramming justify the abandonment of human embryonic stem cells? EMBO reports\| PubMed ID: 22986548	2012

Kristopher L. Nazor

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