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Processing of Primary Brain Tumor Tissue for Stem Cell Assays and Flow Sorting

Brain tumors are typically comprised of morphologically diverse cells that express a variety of neural lineage markers. Only a relatively small fraction ...

McMaster University 

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&#x5927;&#x7D2B;&#x8346;&#x52CB;&#x8D24; secretome &#x8BF1;&#x5BFC;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x795E;&#x7ECF;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8F6C;&#x6362;&#x3002;

Glioblastoma (GBM) is the most aggressive primary brain tumor in humans, with a uniformly poor prognosis. The tumor microenvironment is composed of both supportive cellular substrates and exogenous factors. We hypothesize that exogenous factors secreted by brain tumor initiating cells (BTICs) could predispose normal neural precursor cells (NPCs) to transformation. When NPCs are grown in GBM-conditioned media, and designated as "tumor-conditioned NPCs" (tcNPCs), they become highly proliferative and exhibit increased stem cell self-renewal, or the unique ability of stem cells to asymmetrically generate another stem cell and a daughter cell. tcNPCs also show an increased transcript level of stem cell markers such as CD133 and ALDH and growth factor receptors such as VEGFR1, VEGFR2, EGFR and PDGFRÎ±. Media analysis by ELISA of GBM-conditioned media reveals an elevated secretion of growth factors such as EGF, VEGF and PDGF-AA when compared to normal neural stem cell-conditioned media. We also demonstrate that tcNPCs require prolonged or continuous exposure to the GBM secretome in vitro to retain GBM BTIC characteristics. Our in vivo studies reveal that tcNPCs are unable to form tumors, confirming that irreversible transformation events may require sustained or prolonged presence of the GBM secretome. Analysis of GBM-conditioned media by mass spectrometry reveals the presence of secreted proteins Chitinase-3-like 1 (CHI3L1) and H2A histone family member H2AX. Collectively, our data suggest that GBM-secreted factors are capable of transiently altering normal NPCs, although for retention of the transformed phenotype, sustained or prolonged secretome exposure or additional transformation events are likely necessary.

GBM secretome induces transient transformation of human neural precursor cells.

Glioblastome (GBM) est la tumeur au cerveau primaire plus agressive chez les humains, avec un uniforme de mauvais pronostic. Le microenvironnement de la tumeur se compose des substrats cellulaires favorables tant de facteurs exog&egrave;nes. Nous &eacute;mettons l&#39;hypoth&egrave;se que les facteurs exog&egrave;nes, s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es par la tumeur au cerveau initiant des cellules (CITC) pourraient pr&eacute;disposer des cellules pr&eacute;curseurs neurales normal (PNJ) &agrave; la transformation. Quand les PNJs sont cultiv&eacute;es dans un milieu conditionn&eacute; GBM et d&eacute;sign&eacute;s comme &laquo; tumeur-conditionn&eacute; PNJs &raquo; (tcNPCs), ils deviennent tr&egrave;s prolif&eacute;ratives et exposer l&#39;autorenouvellement des cellules souches une augmentation, ou la capacit&eacute; unique de cellules souches asym&eacute;triquement g&eacute;n&eacute;rer une autre cellule de tige et une cellule fille. tcNPCs montrent aussi un niveau accru de transcription des marqueurs de cellules souches comme CD133 et ALDH et des r&eacute;cepteurs des facteurs de croissance tels que VEGFR1, VEGFR2, EGFR et PDGFR&alpha;. Analyse des m&eacute;dias m&eacute;dias conditionn&eacute; par ELISA de GBM r&eacute;v&egrave;le une s&eacute;cr&eacute;tion &eacute;lev&eacute;e de facteurs de croissance tels que l&#39;EGF, VEGF et PDGF-AA par rapport aux m&eacute;dias de conditionn&eacute; par cellules souches neurales normal. Nous d&eacute;montrons &eacute;galement que tcNPCs n&eacute;cessitent une exposition prolong&eacute;e ou continue au secretome GBM in vitro afin de conserver les caract&eacute;ristiques de GBM BTIC. Nos &eacute;tudes in vivo r&eacute;v&egrave;lent que les tcNPCs sont incapables de former des tumeurs, confirmant que les &eacute;v&eacute;nements de transformation irr&eacute;versible peuvent exiger une pr&eacute;sence soutenue ou prolong&eacute;e de la secretome GBM. Analyse des m&eacute;dias GBM conditionn&eacute;e par spectrom&eacute;trie de masse r&eacute;v&egrave;le la pr&eacute;sence de prot&eacute;ines s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es Chitinase-3 type 1 (CHI3L1) et membre de la famille H2A histone H2AX. Collectivement, nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que GBM-s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e facteurs sont susceptibles de modifier transitoirement les PNJs normales, bien que pour la r&eacute;tention du ph&eacute;notype transform&eacute;, subis ou secretome exposition prolong&eacute;e ou &eacute;v&eacute;nements de transformation suppl&eacute;mentaires sont probablement n&eacute;cessaires.

GBM secretome induit la transformation passag&egrave;re de cellules pr&eacute;curseurs neurales humaines.

Glioblastom (GBM) ist die aggressivsten prim&auml;ren Hirntumoren bei Menschen mit einer gleichm&auml;&szlig;ig schlechte Prognose. Der Tumor Mikromilieu besteht aus unterst&uuml;tzende zellul&auml;re Substrate und exogenen Faktoren. Wir vermuten, dass exogene Faktoren abgesondert von Gehirntumor initiiert Zellen (BTICs) normale neuronalen Vorl&auml;uferzellen (NPCs) f&uuml;r Transformation pr&auml;disponieren k&ouml;nnte. Wenn NPCs in GBM konditionierten Medien gewachsen sind, und als &quot;Tumor konditionierten NPCs&quot; (TcNPCs), sie werden stark proliferativ und weisen erh&ouml;hte Stammzell-Selbsterneuerung oder die einzigartige F&auml;higkeit von Stammzellen asymmetrisch eine andere Stammzelle und eine Tochter-Zelle zu erzeugen. TcNPCs zeigen auch eine erh&ouml;hte Abschrift der Stammzell-Marker wie CD133 und ALDH und Wachstumsfaktor-Rezeptoren wie VEGFR1, VEGFR2, EGFR und PDGFR&alpha;. Media-Analyse von ELISA von GBM konditionierten Medien zeigt eine erh&ouml;hte Sekretion von Wachstumsfaktoren wie PDGF-AA im Vergleich zu normalen neuronale Stammzellen konditionierten Medien, EGF und VEGF. Wir zeigen auch, dass TcNPCs erfordern l&auml;ngere oder st&auml;ndige Exposition gegen&uuml;ber der GBM-Secretome in-vitro GBM BTIC Merkmale beibehalten. Unsere in-vivo-Studien zeigen, dass TcNPCs nicht in der Lage zu Form-Tumoren sind, best&auml;tigt, dass die unumkehrbare Umwandlung Ereignisse erfordern nachhaltige oder verl&auml;ngerte Anwesenheit von der GBM-Secretome. Analyse der GBM konditionierten Medien durch Massenspektrometrie zeigt das Vorhandensein der sekretierten Proteine Chitinase-3-wie 1 (CHI3L1) und Histon H2A-Familienmitglied H2AX. Zusammenfassend empfehlen unsere Daten GBM-abgesondert Faktoren sind in der Lage, normale NPCs, vor&uuml;bergehend zu ver&auml;ndern, obwohl f&uuml;r die Aufbewahrung des transformierten Ph&auml;notyps, aufrechterhalten oder intensiver Nutzung Secretome oder zus&auml;tzliche Transformation Ereignisse wahrscheinlich notwendig sind.

GBM Secretome induziert transient Transformation des menschlichen neuronalen Vorl&auml;uferzellen.

Glioblastoma (GBM) &egrave; il pi&ugrave; aggressivo tumore cerebrale primario negli esseri umani, con una prognosi uniformemente. Il microambiente tumorale &egrave; composta sia solidale substrati cellulari e fattori esogeni. Si ipotizza che fattori esogeni secernuti dal tumore al cervello avvio cellule (BTICs) potrebbero predisporre cellule precursori neurali normale (NPC) alla trasformazione. Quando sono cresciuti in media condizionata GBM NPC e designati come &quot;tumore-condizionata NPC&quot; (tcNPCs), diventano altamente proliferative e presentano cellule staminali aumento auto-rinnovamento, o la capacit&agrave; unica di cellule staminali per generare asimmetricamente un&#39;altra cellula staminale e una cellula figlia. tcNPCs mostrano anche un livello di trascrizione aumento dei marcatori delle cellule staminali CD133 e ALDH e i recettori del fattore di crescita come VEGFR1, VEGFR2, EGFR e PDGFR&alpha;. Analisi dei media da media condizionata ELISA di GBM rivelano un aumento della secrezione di fattori di crescita come EGF, VEGF e PDGF-AA rispetto alla normale media neural stem cell-condizionato. Abbiamo anche dimostrare che tcNPCs richiedono una esposizione prolungata o continua per la secretome GBM in vitro per mantenere le caratteristiche di GBM BTIC. I nostri studi in vivo rivelano che tcNPCs sono in grado di tumori forma, confermando che eventi di trasformazione irreversibile possono richiedere la presenza sostenuta o prolungato del secretome GBM. Analisi dei media GBM-condizionato dalla spettrometria di massa rivela la presenza di proteine secrete chitinasi-3-come 1 (CHI3L1) e membro della famiglia dell&#39;istone H2A H2AX. Collettivamente, i nostri dati suggeriscono che secreto GBM fattori sono in grado di alterare transitoriamente NPC normale, anche se per il mantenimento del fenotipo trasformato, sostenuta o prolungata esposizione secretome o ulteriore trasformazione eventi sono probabilmente necessarie.

GBM secretome induce la trasformazione transiente di cellule precursori neurali umane.

&#x81A0;&#x82BD;&#x816B; &#xFF08;GBM&#xFF09; &#x306F;&#x6700;&#x3082;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x539F;&#x767A;&#x6027;&#x8133;&#x816B;&#x760D;&#x3068;&#x4E00;&#x69D8;&#x306B;&#x4E88;&#x5F8C;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x816B;&#x760D;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x652F;&#x6301;&#x7D30;&#x80DE;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3068;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x4EEE;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE; (BTICs) &#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x8133;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x901A;&#x5E38;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; (Npc) &#x5909;&#x63DB;&#x306B;&#x3057;&#x5411;&#x3051;&#x308B;&#x3002;Npc &#x306E; GBM &#x30A8;&#x30A2;&#x30B3;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x3067;&#x683D;&#x57F9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&quot;NPCs &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x816B;&#x760D;&#x6761;&#x4EF6;&quot;&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3068;&#x304D; &#xFF08;tcNPCs&#xFF09;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x9AD8;&#x3044;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x5225;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5A18;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;tcNPCs &#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; CD133 ALDH &#x306A;&#x3069;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; VEGFR2&#x3001;egfr &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; VEGFR1&#x3001;PDGFR&alpha; &#x306A;&#x3069;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;GBM ELISA &#x30A8;&#x30A2;&#x30B3;&#x30F3;&#x306E;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;&#x9AD8;&#x67B6;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC; EGF&#x3001;VEGF PDGF AA &#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x306A;&#x3069;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F; tcNPCs &#x9577;&#x6642;&#x9593;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9023;&#x7D9A;&#x66DD;&#x9732; GBM secretome in vitro &#x7CF8;&#x7403;&#x4F53;&#x57FA;&#x5E95;&#x819C;&#x306E; BTIC &#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x7814;&#x7A76; tcNPCs &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x5909;&#x63DB;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8; GBM secretome &#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9577;&#x671F;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x5FC5;&#x8981;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;GBM &#x30A8;&#x30A2;&#x30B3;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x6CCC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-3 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; 1 &#x306E;&#x5B58;&#x5728; &#xFF08;CHI3L1&#xFF09; &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E00;&#x54E1; H2A &#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3; H2AX &#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x3001;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;GBM &#x5206;&#x6CCC;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9577;&#x671F;&#x306E; secretome &#x9732;&#x51FA;&#x304C;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x901A;&#x5E38; Npc &#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

GBM secretome &#x3072;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x5F62;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Glioblastoma (GBM) &#xADE0;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xBE48;&#xC57D;&#xD55C; &#xC608; &#xC9C0;&#xB97C; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xACF5;&#xACA9;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB1CC; &#xC885;&#xC591;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC885;&#xC591; microenvironment &#xC9C0;&#xC9C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xD310; &#xBC0F; &#xC678; &#xC778; &#xC131; &#xC694;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; exogenous &#xC694;&#xC778; &#xB1CC;&#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; (BTICs)&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84; &#xBE44; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC; (NPCs) predispose &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;. NPCs GBM &#xB2E8;&#xB828; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xB780; &#xACE0; &quot;&#xC885;&#xC591; &#xB2E8;&#xB828; NPCs&quot;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC815; (tcNPCs), &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xC99D;&#xC2DD; &#xB418; &#xACE0; &#xC99D;&#xAC00; &#xB41C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC790;&#xCCB4; &#xAC31;&#xC2E0; &#xB610;&#xB294; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB610; &#xB2E4;&#xB978; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB538; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. tcNPCs &#xB610;&#xD55C; CD133 ALDH &#xB4F1; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xC2DD; &#xBC0F; EGFR, VEGFR1, VEGFR2, PDGFR&alpha; &#xB4F1; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC131;&#xC801; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. GBM ELISA &#xB2E8;&#xB828; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; EGF, VEGF &#xB4F1; PDGF AA &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC870;&#xC808; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB192;&#xC740; &#xBD84; &#xBE44;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; tcNPCs GBM secretome GBM BTIC &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC2DC;&#xAC04; &#xB610;&#xB294; &#xC5F0;&#xC18D; &#xB178;&#xCD9C; &#xD574;&#xC57C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. In vivo &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACF5;&#xAC1C; tcNPCs &#xC591;&#xC2DD; &#xC885;&#xC591;, &#xB3CC;&#xC774;&#xD0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBCC0;&#xD654; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; GBM secretome&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D; &#xB610;&#xB294; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04; &#xC874;&#xC7AC; &#xD574;&#xC57C; &#xD655;&#xC778; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; GBM &#xB2E8;&#xB828;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; (CHI3L1) &#xBE44; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Chitinase 3 &#xAC19;&#xC740; 1&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; H2A &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; H2AX &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; GBM &#xBD84; &#xBE44; &#xC694;&#xC778; transiently &#xBCC0;&#xD658;&#xB41C; &#xD615;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;, &#xC720;&#xC9C0; &#xB610;&#xB294; &#xC5F0;&#xC7A5; secretome &#xB178;&#xCD9C; &#xBE44;&#xB85D; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; Npcs&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xCD94;&#xAC00; &#xBCC0;&#xD658; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB294; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

GBM secretome &#xC778;&#xAC04; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xACFC;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

Glioblastoma (GBM) es el tumor cerebral primario m&aacute;s agresivo en los seres humanos, con un pron&oacute;stico pobre uniformemente. El microambiente tumoral se compone de substratos celulares apoyo tanto a factores ex&oacute;genos. Presumimos que factores ex&oacute;genos secretados por tumor cerebral iniciar c&eacute;lulas (BTICs) podr&iacute;an predisponer a las c&eacute;lulas precursoras neuronales normal (PNJ) a la transformaci&oacute;n. Cuando son cultivadas en medios GBM-condicionada NPCs y se&ntilde;alados como &quot;tumor-condicionada NPCs&quot; (tcNPCs), se vuelven altamente proliferativas y exhiben la auto-renovaci&oacute;n aumento de c&eacute;lulas madre, o la capacidad &uacute;nica de c&eacute;lulas madre para generar asim&eacute;trico otra c&eacute;lula madre y una c&eacute;lula hija. tcNPCs tambi&eacute;n muestran un nivel de transcripci&oacute;n aumento de marcadores de c&eacute;lulas CD133 como ALDH y receptores de factor de crecimiento como VEGFR1 y VEGFR2, EGFR, PDGFR&alpha;. An&aacute;lisis de los medios por ELISA de GBM-condicionada medios revela una elevada secreci&oacute;n de factores de crecimiento como EGF, VEGF y PDGF-AA en comparaci&oacute;n con normales medios neurales de c&eacute;lulas madre-condicionada. Tambi&eacute;n demostramos que tcNPCs requieren una exposici&oacute;n prolongada o continua a la secretome GBM in vitro para conservar las caracter&iacute;sticas de GBM BTIC. Nuestros estudios in vivo revelan que tcNPCs son incapaces de tumores de forma, confirmando que los eventos de transformaci&oacute;n irreversible pueden requerir presencia sostenida o prolongada de la secretome GBM. An&aacute;lisis de medios de GBM-condicionada por espectrometr&iacute;a de masas revelan la presencia de prote&iacute;nas de secreci&oacute;n Chitinase-3-como 1 (CHI3L1) y miembro de la familia de la histona H2A H2AX. En conjunto, nuestros datos sugieren que GBM-secretan factores son capaces de alterar transitoriamente NPCs normales, aunque para la retenci&oacute;n del fenotipo transformado, sufra o secretome exposici&oacute;n prolongada o eventos de transformaci&oacute;n adicional son probablemente necesarias.

Sara Nolte

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