labview-operated-novel-nanoliter-osmometer-for-ice-binding-protein

LabVIEW-operated Novel Nanoliter Osmometer for Ice Binding Protein Investigations

Ice-binding proteins (IBPs), including antifreeze proteins, ice structuring proteins, thermal hysteresis proteins, and ice recrystallization inhibition ...

determining-ice-binding-planes-antifreeze-proteins-fluorescence-based

Determining the Ice-binding Planes of Antifreeze Proteins by Fluorescence-based Ice Plane Affinity

Antifreeze proteins (AFPs) are expressed in a variety of cold-hardy organisms to prevent or slow internal ice growth. AFPs bind to specific planes of ice ...

The Hebrew University of Jerusalem

Ohio University

&#xC778;&#xAC04; &#xAC8C;&#xB188; &#xCD08;&#xC548; &#xC644;&#xC131; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xCD2C;&#xC601; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC591;&#xC758; DNA&#xC5D0; &#xAE30;&#xAC04;&#xC758; &#xC2DC;&#xC791;&#xC5D0; &#xBC0F; RNA &#xC21C;&#xC11C; &#xC815;&#xBCF4;&#xAC00; &#xB9CE;&#xC740; &#xAC1C;&#xC778;&#xACFC; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC694;&#xAD6C; &#xB420; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xAE30;&#xC220; &#xBE44;&#xC6A9;&#xACFC; &#xC18D;&#xB3C4;, &#xAC10;&#xB3C4;, &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC815;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC694;&#xAC00; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC804;&#xB958; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xB2A5;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xACB0;&#xACFC; &#xD55C;&#xACC4;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xC77C; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xBB34;&#xB3C4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC785;&#xC99D; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E8;&#xC77C; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC18;&#xBCF5;&#xB41C; &#xC5C6;&#xC774; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC640; &#xAC1C;&#xBCC4; DNA &#xAC00;&#xB2E5;&#xC5D0; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC758; 5 &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC9C0;&#xBB38; &#xACB0;&#xC815; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xAE38;&#xC774; &#xD608;&#xC555;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC1FC; &#xD558;&#xB098; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC640; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xBCD1;&#xB82C;&#xD654;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xC77C; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8349;&#x6848;&#x5B8C;&#x6210;&#x4E86;&#x51E0;&#x5E74;&#x65F6;&#x95F4;&#x53EA;&#x662F;&#x5F00;&#x59CB;&#x7684;&#x4E00;&#x6BB5;&#x65F6;&#x671F;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x7684; DNA &#x548C; RNA &#x5E8F;&#x5217;&#x4FE1;&#x606F;&#x5C06;&#x9700;&#x8981;&#x4ECE;&#x5F88;&#x591A;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x548C;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;&#x5E38;&#x89C4;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x6280;&#x672F;&#x6709;&#x5176;&#x5C40;&#x9650;&#x6027;&#xFF0C;&#x5728;&#x6210;&#x672C;&#x3001; &#x901F;&#x5EA6;&#x548C;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5E8F;&#x5217;&#x4FE1;&#x606F;&#x7684;&#x9700;&#x6C42;&#x8FDC;&#x8FDC;&#x8D85;&#x8FC7;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5DF2;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x8981;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x5728;&#x5BF9;&#x5355;&#x4E2A; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F97;&#x5230;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x660E;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x4ECE;&#x5355;&#x4E2A; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x83B7;&#x53D6;&#x5E8F;&#x5217;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76D1;&#x6D4B;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x7EB3;&#x5165;&#x4E2A;&#x4EBA; DNA &#x94FE;&#x4E0E;&#x5355;&#x4E2A;&#x57FA;&#x51B3;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x5230; 5 &#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x6307;&#x7EB9;&#x56FE;&#x8C31;&#x6D4B;&#x5B9A; bp &#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0E;&#x5355;&#x4E2A;&#x57FA;&#x51B3;&#x8BAE;&#x548C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x5E76;&#x884C;&#x5316;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4E3A;&#x5B9E;&#x9645;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x6280;&#x672F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x7EA7;&#x7684; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x5355;&#x4E2A; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x83B7;&#x5F97;&#x5E8F;&#x5217;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;

The completion of the human genome draft has taken several years and is only the beginning of a period in which large amounts of DNA and RNA sequence information will be required from many individuals and species. Conventional sequencing technology has limitations in cost, speed, and sensitivity, with the result that the demand for sequence information far outstrips current capacity. There have been several proposals to address these issues by developing the ability to sequence single DNA molecules, but none have been experimentally demonstrated. Here we report the use of DNA polymerase to obtain sequence information from single DNA molecules by using fluorescence microscopy. We monitored repeated incorporation of fluorescently labeled nucleotides into individual DNA strands with single base resolution, allowing the determination of sequence fingerprints up to 5 bp in length. These experiments show that one can study the activity of DNA polymerase at the single molecule level with single base resolution and a high degree of parallelization, thus providing the foundation for a practical single molecule sequencing technology.

Sequence information can be obtained from single DNA molecules.

L&#39;ach&egrave;vement du projet g&eacute;nome humain a pris plusieurs ann&eacute;es et n&#39;est que le d&eacute;but d&#39;une p&eacute;riode dans les grandes quantit&eacute;s d&#39;ADN et les informations de s&eacute;quence de RNA il faudra de nombreuses esp&egrave;ces et individus. Technologie de s&eacute;quen&ccedil;age classique a ses limites dans le co&ucirc;t, la vitesse et la sensibilit&eacute;, de sorte que la demande d&#39;information de la s&eacute;quence est bien sup&eacute;rieure &agrave; la capacit&eacute; actuelle. Il y a eu plusieurs propositions pour r&eacute;soudre ces probl&egrave;mes en d&eacute;veloppant la capacit&eacute; de mol&eacute;cules d&#39;ADN unique s&eacute;quence, mais aucun n&#39;a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute;e exp&eacute;rimentalement. Nous rapportons ici l&#39;utilisation de l&#39;ADN polym&eacute;rase pour obtenir des informations de s&eacute;quence de mol&eacute;cules d&#39;ADN unique &agrave; l&#39;aide de la microscopie &agrave; fluorescence. Nous avons suivi r&eacute;p&eacute;t&eacute;e d&#39;incorporation de nucl&eacute;otides fluorescent &eacute;tiquet&eacute;s dans des brins d&#39;ADN individuels avec une r&eacute;solution de base unique, permettant la d&eacute;termination des empreintes digitales de s&eacute;quence jusqu&#39;&agrave; 5 bp en longueur. Ces exp&eacute;riences d&eacute;montrent qu&#39;on peut &eacute;tudier l&#39;activit&eacute; de l&#39;ADN polym&eacute;rase au niveau de la mol&eacute;cule unique avec une r&eacute;solution de base unique et un haut degr&eacute; de parall&eacute;lisation, fournissant ainsi la Fondation d&#39;une technologie de s&eacute;quen&ccedil;age pratique seule mol&eacute;cule.

Informations sur les s&eacute;quences peuvent &ecirc;tre obtenues &agrave; des mol&eacute;cules d&#39;ADN unique.

Die Fertigstellung des Entwurfs des menschlichen Genoms hat mehrere Jahre gedauert und ist nur der Anfang einer Periode, in denen gro&szlig;en Mengen von DNA und RNA-Sequenz-Informationen werden von vielen Individuen und Arten erforderlich. Konventionelle Sequenzierungstechnologie hat Einschr&auml;nkungen in Kosten, Geschwindigkeit und Empfindlichkeit, mit der Folge, dass die Nachfrage nach Sequenzinformationen Stromkapazit&auml;t weit &uuml;bertrifft. Es wurden mehrere Vorschl&auml;ge, diese Probleme zu l&ouml;sen, durch die Entwicklung der F&auml;higkeit zur Sequenz einzelner DNA-Molek&uuml;le, aber keiner experimentell nachgewiesen worden. Hier berichten wir &uuml;ber die Verwendung von DNA-Polymerase Sequenzinformationen von einzelner DNA-Molek&uuml;le zu beziehen, mithilfe von Fluoreszenzmikroskopie. Wir &uuml;berwachten wiederholter Aufnahme Leuchtstoff beschriftetem Nukleotide in einzelnen DNA-Str&auml;nge mit einzelnen Basis-Aufl&ouml;sung, erm&ouml;glicht die Bestimmung der Sequenz Fingerabdr&uuml;cke bis zu 5 bp lang. Diese Experimente zeigen, dass man die Aktivit&auml;t der DNA-Polymerase auf der Einzelmolek&uuml;l-Ebene mit einzelnen base Aufl&ouml;sung und ein hohes Ma&szlig; an Parallelisierung, liefert die Grundlage f&uuml;r eine praktische Einzelmolek&uuml;l-Sequenzierungstechnologie studieren kann.

Sequenzinformationen erhalten Sie bei einzelner DNA-Molek&uuml;le.

Il completamento del progetto genoma umano ha preso diversi anni ed &egrave; solo l&#39;inizio di un periodo in cui grandi quantit&agrave; di DNA e RNA sequenza informazioni saranno richiesti da molti individui e specie. Tecnologia di sequenziamento convenzionale ha limitazioni nei costi, velocit&agrave; e sensibilit&agrave;, con il risultato che la richiesta di informazioni di sequenza supera di gran lunga portata di corrente. Ci sono state diverse proposte per risolvere questi problemi, sviluppando la capacit&agrave; di singole molecole di DNA di sequenza, ma nessuno &egrave; stato dimostrato sperimentalmente. Qui riportiamo l&#39;uso di DNA polimerasi per ottenere informazioni di sequenza da singole molecole di DNA mediante microscopia di fluorescenza. Abbiamo monitorato ripetute incorporazione di nucleotidi fluorescente contrassegnati in singoli filamenti di DNA con risoluzione base unico, che permette la determinazione delle impronte digitali di sequenza fino a 5 bp in lunghezza. Questi esperimenti dimostrano che si pu&ograve; studiare l&#39;attivit&agrave; della polimerasi del DNA a livello di singola molecola con singola base risoluzione e un alto grado di parallelizzazione, fornendo cos&igrave; le basi per una tecnologia di sequenziamento pratica singola molecola.

Sequenza informazioni possono essere ottenute da singole molecole di DNA.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x30C9;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x306E;&#x5B8C;&#x4E86;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5E74;&#x3092;&#x53D6;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x91CF;&#x306E; DNA &#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x306E;&#x59CB;&#x3081;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;RNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x60C5;&#x5831;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x500B;&#x4EBA;&#x3084;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x5869;&#x57FA;&#x914D;&#x5217;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x901F;&#x5EA6;&#x3001;&#x611F;&#x5EA6;&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x60C5;&#x5831;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8981;&#x6C42;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x4E0A;&#x56DE;&#x3063;&#x3066;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x5358;&#x4E00; DNA &#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x3078;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3069;&#x308C;&#x3082;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4E16;&#x754C;&#x304B;&#x3089;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x5358;&#x4E00;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x500B;&#x3005; &#x306E; DNA &#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x86CD;&#x5149;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x6307;&#x7D0B; 5 &#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x76E3;&#x8996; bp &#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;1 &#x3064;&#x306E; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x5358;&#x4E00;&#x5869;&#x57FA;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3068;&#x3001;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306A;&#x4E26;&#x5217;&#x5316;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5B9F;&#x7528;&#x7684;&#x306A;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5869;&#x57FA;&#x914D;&#x5217;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x57FA;&#x76E4;&#x306E; 1 &#x5206;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x60C5;&#x5831;&#x306F; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4E16;&#x754C;&#x304B;&#x3089;&#x53D6;&#x5F97;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

La finalizaci&oacute;n del proyecto genoma humano ha tomado varios a&ntilde;os y es s&oacute;lo el comienzo de un per&iacute;odo en que grandes cantidades de DNA y RNA secuencia informaci&oacute;n ser&aacute; requiere de muchos individuos y especies. Tecnolog&iacute;a de secuenciaci&oacute;n convencional tiene limitaciones en coste, velocidad y sensibilidad, por lo que la demanda de informaci&oacute;n de la secuencia supera ampliamente la capacidad actual. Ha habido varias propuestas para abordar estas cuestiones mediante el desarrollo de la capacidad de las mol&eacute;culas de ADN individuales de secuencia, pero ninguno se ha demostrado experimentalmente. Aqu&iacute; divulgamos el uso de la ADN polimerasa para obtener informaci&oacute;n de la secuencia de las mol&eacute;culas individuales de ADN utilizando microscop&iacute;a de fluorescencia. Supervisamos repetida incorporaci&oacute;n de fluorescencia etiquetadas nucle&oacute;tidos individuales filamentos de la DNA con una sola resoluci&oacute;n base, permitiendo la determinaci&oacute;n de las huellas dactilares en la secuencia hasta 5 bp en longitud. Estos experimentos demuestran que uno puede estudiar la actividad de la ADN polimerasa nivel sola mol&eacute;cula con resoluci&oacute;n base &uacute;nica y un alto grado de paralelizaci&oacute;n, proporcionando as&iacute; la base para una tecnolog&iacute;a de secuenciaci&oacute;n pr&aacute;ctica sola mol&eacute;cula.

Puede obtenerse informaci&oacute;n de secuencia solas mol&eacute;culas de ADN.

&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#x4ECE;&#x51BB;&#x7ED3;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x517B;&#x8001;&#x91D1;&#xFF09;&#xFF0C;&#x54EA;&#x4E9B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x51B0;&#xFF0C;&#x4FEE;&#x6539;&#x5176;&#x5F62;&#x6001;&#xFF0C;&#x5B58;&#x5728;&#x53D7;&#x5230;&#x4FDD;&#x62A4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9632;&#x6B62;&#x5176;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x589E;&#x957F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x77FF;&#x5316;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6709;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5305;&#x62EC;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#xFF0C;&#x971C;&#x4FDD;&#x62A4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x5176;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x7406;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A81;&#x51FA;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x666E;&#x904D;&#x5438;&#x9644;&#x6291;&#x5236;&#x5047;&#x8BF4;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x5FC5;&#x987B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5730;&#x51B0;&#x902E;&#x6355;&#x5176;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7406;&#x8BBA;&#x8868;&#x660E;&#x6709;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4E2D;&#x7684;&#x514D;&#x8D39;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4EA4;&#x6362;&#x3002;&#x7531;&#x5171;&#x8F6D;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x5411;&#x6CD5;&#x65B0;&#x793E; &#xFF08;&#x7B2C; III &#x7C7B;&#xFF09; &#x7684;&#x4E00;&#x6761;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230; AFP &#x51B0;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x8FD9;&#x88AB;&#x901A;&#x8FC7;&#x76D1;&#x6D4B;&#x7684;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; AFP &#x5B58;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x76F4;&#x5F84;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5FAE;&#x7C73;&#x3002;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x5149;&#x6F02;&#x767D;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; AFP &#x663E;&#x793A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; AFP &#x6CA1;&#x6709;&#x5E73;&#x8861;&#x8868;&#x9762;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4EA4;&#x6362;&#x5E76;&#x56E0;&#x6B64;&#x652F;&#x6301;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x6025;&#x6027;&#x5F1B;&#x7F13;&#x6027;&#x9EBB;&#x75F9;&#x5438;&#x9644;&#x6291;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#x540E;&#x6062;&#x590D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x786E;&#x7ACB;&#x4E86;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8C03;&#x67E5;&#x6B64;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5DE5;&#x5177;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x6548;&#x7528;&#x3002;

&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x9971;&#x5C1D;&#x9644;&#x4EF6;&#x7684;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D;&#x51B0;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

Many organisms are protected from freezing by the presence of extracellular antifreeze proteins (AFPs), which bind to ice, modify its morphology, and prevent its further growth. These proteins have a wide range of applications including cryopreservation, frost protection, and as models in biomineralization research. However, understanding their mechanism of action remains an outstanding challenge. While the prevailing adsorption-inhibition hypothesis argues that AFPs must bind irreversibly to ice to arrest its growth, other theories suggest that there is exchange between the bound surface proteins and the free proteins in solution. By conjugating green fluorescence protein (GFP) to a fish AFP (Type III), we observed the binding of the AFP to ice. This was accomplished by monitoring the presence of GFP-AFP on the surface of ice crystals several microns in diameter using fluorescence microscopy. The lack of recovery of fluorescence after photobleaching of the GFP component of the surface-bound GFP-AFP shows that there is no equilibrium surface-solution exchange of GFP-AFP and thus supports the adsorption-inhibition mechanism for this type of AFP. Moreover, our study establishes the utility of fluorescently labeled AFPs as a research tool for investigating the mechanisms underlying the activity of this diverse group of proteins.

Fluorescence microscopy evidence for quasi-permanent attachment of antifreeze proteins to ice surfaces.

Beaucoup d&#39;organismes est prot&eacute;g&eacute;s du gel par la pr&eacute;sence de prot&eacute;ines d&#39;antigel extracellulaire (AFP), qui se lient &agrave; la glace, modifier sa morphologie, et emp&ecirc;che sa croissance. Ces prot&eacute;ines ont une large gamme d&#39;applications comprenant la cryoconservation, protection contre le gel et comme mod&egrave;les dans la recherche de la biomin&eacute;ralisation. Comprendre leur m&eacute;canisme d&#39;action reste toutefois un d&eacute;fi exceptionnel. Alors que l&#39;hypoth&egrave;se qui pr&eacute;vaut d&#39;inhibition de l&#39;adsorption soutient que AFPs doivent li&eacute;s de fa&ccedil;on irr&eacute;versible &agrave; la glace pour arr&ecirc;ter sa croissance, d&#39;autres th&eacute;ories sugg&egrave;rent qu&#39;il y a &eacute;change entre les prot&eacute;ines de surface li&eacute;s et les prot&eacute;ines libres en solution. En conjugant prot&eacute;ine de fluorescence verte (GFP) vis-&agrave;-vis d&#39;un poisson AFP (Type III), nous avons observ&eacute; la liaison de l&#39;AFP &agrave; la glace. Ceci a &eacute;t&eacute; accompli en surveillant la pr&eacute;sence de GFP-AFP sur la surface des cristaux de glace de quelques microns de diam&egrave;tre &agrave; l&#39;aide de la microscopie &agrave; fluorescence. L&#39;absence de r&eacute;cup&eacute;ration de fluorescence apr&egrave;s photoblanchiment de la composante de la GFP de la surface-bondissent GFP-AFP montre qu&#39;il n&#39;y a aucun &eacute;change de surface-solution d&#39;&eacute;quilibre de GFP-AFP et soutient ainsi le m&eacute;canisme d&#39;inhibition de l&#39;adsorption pour ce type de l&#39;AFP. De plus, notre &eacute;tude &eacute;tablit l&#39;utilit&eacute; des AFPs fluorescent &eacute;tiquet&eacute;s comme un outil de recherche pour &eacute;tudier les m&eacute;canismes qui sous-tendent l&#39;activit&eacute; de ce groupe diversifi&eacute; des prot&eacute;ines.

Preuve de microscopie par fluorescence pour fixation quasi permanente de prot&eacute;ines antigel &agrave; la surface de glace.

Viele Organismen sind durch das Vorhandensein von extrazellul&auml;ren Frostschutzmittel Proteine (AFPs), welche Bindung an Eis, &auml;ndern seine Morphologie, Frost gesch&uuml;tzt und ihr weitere Wachstum verhindern. Diese Proteine haben eine Vielzahl von Anwendungen einschlie&szlig;lich Kryokonservierung, Frostschutz, und als Modelle in der Biomineralisation Forschung. Verst&auml;ndnis ihrer Wirkmechanismus bleibt jedoch eine hervorragende Herausforderung. W&auml;hrend die vorherrschende Adsorption-Hemmung-Hypothese argumentiert, dass AFPs irreversibel binden m&uuml;ssen, um sein Wachstum zu verhaften Eis, zufolge andere Theorien gibt es Austausch zwischen der gebundenen Oberfl&auml;chen-Proteine und die freie Proteine in L&ouml;sung. Von konjugierenenzym gr&uuml;ne Fluoreszenz-Protein (GFP) zu einem Fisch AFP (Typ III), beobachteten wir die Bindung der AFP Eis. Dies wurde erreicht durch die &Uuml;berwachung des Vorhandensein von GFP-AFP auf der Oberfl&auml;che von Eiskristallen mehrere Mikrometer Durchmesser mit Fluoreszenzmikroskopie. Die fehlende F&auml;higkeit zur Wiederherstellung der Fluoreszenz nach Photobleaching der GFP-Komponente von der Oberfl&auml;che gebundene GFP-AFP zeigt, dass es kein Gleichgewicht-Oberfl&auml;che-L&ouml;sung-Austausch der GFP-AFP und unterst&uuml;tzt somit den Adsorption-Hemmung-Mechanismus f&uuml;r diese Art von AFP. Dar&uuml;ber hinaus richtet unsere Studie den Nutzen der Leuchtstoff beschriftetem AFPs als Forschungswerkzeug f&uuml;r die Untersuchung der Mechanismen der Aktivit&auml;t dieser vielf&auml;ltigen Gruppe der Proteine.

Fluoreszenz-Mikroskopie-Beweis f&uuml;r mehr oder weniger permanentes Anlage Frostschutzmittel Proteine Oberfl&auml;chen Eis.

Molti organismi sono protetti dal congelamento dalla presenza di proteine antigelo extracellulare (AFPs), che legano al ghiaccio, modificare la sua morfologia, e prevenire la sua crescita ulteriore. Queste proteine hanno una vasta gamma di applicazioni, tra cui la crioconservazione, protezione antigelo e come modelli nella ricerca biomineralization. Tuttavia, capire il loro meccanismo d&#39;azione rimane una sfida eccezionale. Mentre l&#39;ipotesi di adsorbimento-inibizione prevalente sostiene che AFPs deve legare irreversibilmente al ghiaccio per arrestare la sua crescita, altre teorie suggeriscono che non c&#39;&egrave; scambio tra le proteine di superficie vincolate e libere proteine in soluzione. Di coniugazione proteina fluorescenza verde (GFP) a un pesce AFP (tipo III), abbiamo osservato il legame dell&#39;AFP di ghiaccio. Questo &egrave; stato compiuto monitorando la presenza di GFP-AFP sulla superficie dei cristalli di ghiaccio alcuni micron di diametro utilizzando la microscopia di fluorescenza. La mancanza di recupero della fluorescenza dopo photobleaching del componente GFP di superficie associato GFP-AFP dimostra che non c&#39; non &egrave; nessun scambio di superficie-soluzione di equilibrio di GFP-AFP e supporta cos&igrave; il meccanismo di adsorbimento-inibizione per questo tipo di AFP. Inoltre, il nostro studio stabilisce l&#39;utilit&agrave; dell&#39;AFPs fluorescente contrassegnati come strumento di ricerca per indagare i meccanismi alla base dell&#39;attivit&agrave; di questo gruppo eterogeneo di proteine.

Prove di microscopia di fluorescenza per fissaggio permanente di proteine antigelo per superfici di ghiaccio.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x6C37;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (AFPs) &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x51CD;&#x7D50;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3001;&#x51CD;&#x5BB3;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DF;&#x30CD;&#x30E9;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x6A5F;&#x5E8F;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x512A;&#x79C0;&#x306A;&#x6311;&#x6226;&#x3067;&#x3059;&#x3002;AFPs &#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x6C37;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x73FE;&#x884C;&#x306E;&#x5438;&#x7740;&#x963B;&#x5BB3;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3068;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x306F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x9762;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9B5A; AFP (III &#x578B;) &#x306B;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (GFP) &#x306E;&#x6D3B;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6C37;&#x306B; AFP &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x76F4;&#x5F84;&#x6570;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30F3;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E; GFP afp &#x901A;&#x4FE1;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x9000;&#x8272;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x7D50;&#x5408; GFP AFP &#x306E; GFP &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306F;&#x3001;&#x5E73;&#x8861;&#x8868;&#x9762;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4EA4;&#x63DB; GFP AFP &#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5438;&#x7740;&#x963B;&#x5BB3;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x305F; AFPs &#x306E;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6C37;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x64EC;&#x4F3C;&#x6C38;&#x4E45;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3002;

&#xB9CE;&#xC740; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AFPs), &#xC5BC;&#xC74C;, bind&#xB294; &#xC218;&#xC815; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB3D9;&#xACB0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558; &#xACE0; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; biomineralization &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; cryopreservation, &#xC11C; &#xB9AC; &#xBCF4;&#xD638;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD55C; &#xB6F0;&#xC5B4;&#xB09C; &#xB3C4;&#xC804; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD761;&#xCC29; &#xC800;&#xD574; &#xAC00;&#xC124;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xC5BC;&#xC74C; AFPs irreversibly &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC8FC;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB2E4;&#xB978; &#xC774;&#xB860; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD50;&#xB958;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; AFP (&#xC720;&#xD615; III)&#xC5D0; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP)&#xB97C; &#xC5B4;&#xADFC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5BC;&#xC74C; AFP&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C1;&#xACBD;&#xC774; &#xBA87; &#xBBF8;&#xD06C;&#xB860; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; GFP AFP&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; GFP AFP&#xC758; GFP &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8;&#xC758; photobleaching &#xD6C4; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBD80;&#xC871; &#xD558; GFP AFP&#xC758; &#xD3C9;&#xD615; &#xD45C;&#xBA74; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xAD50;&#xD658; &#xC5C6;&#xB2E4; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; afp &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC758;&#xC774; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD761;&#xCC29; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xBD99;&#xC77C; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xB41C; AFPs &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xC5BC;&#xC74C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; quasi-permanent &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xBA85; &#xC815;&#xBCF4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Muchos organismos est&aacute;n protegidos de congelaci&oacute;n por la presencia de prote&iacute;nas extracelulares anticongelante (AFPs), que vinculan a hielo, modificar su morfolog&iacute;a, y previenen su crecimiento. Estas prote&iacute;nas tienen una amplia gama de aplicaciones incluyendo la criopreservaci&oacute;n, protecci&oacute;n contra las heladas y como modelos en la investigaci&oacute;n de biomineralizaci&oacute;n. Sin embargo, entender su mecanismo de acci&oacute;n sigue siendo un desaf&iacute;o excepcional. Mientras que la hip&oacute;tesis de adsorci&oacute;n-inhibici&oacute;n prevaleciente sostiene que AFP debe enlazar irreversiblemente con hielo para detener su crecimiento, otras teor&iacute;as sugieren que no existe intercambio entre las prote&iacute;nas de la superficie l&iacute;mite y las prote&iacute;nas libres en soluci&oacute;n. Por conjugar la prote&iacute;na de la fluorescencia verde (GFP) a un pez AFP (tipo III), observamos el atascamiento de las AFP al hielo. Esto se logr&oacute; mediante el control de la presencia de GFP-AFP en la superficie de los cristales de hielo varias micras de di&aacute;metro utilizando microscop&iacute;a de fluorescencia. La falta de recuperaci&oacute;n de fluorescencia tras fotoblanqueo del componente GFP de la superficie determinada GFP-AFP muestra que hay hay intercambio de superficie-soluci&oacute;n de equilibrio de GFP-AFP y por lo tanto apoya el mecanismo de inhibici&oacute;n de la adsorci&oacute;n para este tipo de AFP. Por otra parte, nuestro estudio establece la utilidad de AFPs fluorescencia etiquetadas como una herramienta de investigaci&oacute;n para investigar los mecanismos subyacentes a la actividad de este grupo diverso de prote&iacute;nas.

Pruebas de microscop&iacute;a de fluorescencia para accesorio semipermanente de prote&iacute;nas anticongelantes para superficies de hielo.

&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D; (&#x517B;&#x8001;&#x91D1;) &#x4FDD;&#x62A4;&#x67D0;&#x4E9B;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x4ECE;&#x51BB;&#x7ED3;&#x7531;&#x79C9;&#x627F;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x963B;&#x6B62;&#x5176;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x538B;&#x4F4E;&#x51BB;&#x7ED3;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x4E8E;&#x7194;&#x70B9; &#xFF1B; &#x975E;&#x5E73;&#x8861;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x4ECE;&#x8D8A;&#x51AC;&#x7684;&#x6606;&#x866B;&#xFF0C;&#x5982;&#x4E91;&#x6749;&#x869C;&#x866B; &#xFF08;&#x5317;&#x65B9;&#xFF09; &#x5374;&#x6BD4;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A; 10-100 &#x500D;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x3002;&#x63D0;&#x51FA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x7684;&#x7279;&#x6B8A;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62;&#x51B0;&#x5728;&#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684; sbwAFP &#x591A;&#x52A8;&#x7ED3;&#x679C;&#x4ECE;&#x76F4;&#x63A5;&#x5173;&#x8054;&#x5230;&#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0; sbwAFP &#x548C;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x5B83;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x3002;SbwAFP &#x79EF;&#x7D2F;&#x5728;&#x516D;&#x68F1;&#x955C;&#x5E73;&#x9762;&#x89D2;&#x548C;&#x516D;&#x89D2;&#x5F62;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x6CD5;&#x65B0;&#x793E;&#x6CA1;&#x6709;&#x9075;&#x5B88;&#x5355;&#x6676;&#x51B0;&#x534A;&#x7403;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x3002;&#x957F;&#x5927;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x662F;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x7532;&#x80CE;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; sbwAFP&#xFF0C;sbwAFP &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x7684;&#x622A;&#x65AD;&#x7684; bipyramidal &#x6676;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x6DF7;&#x5408;&#x6676;&#x4F53;&#x5F62;&#x72B6;&#x800C;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x7B26;&#x5408; c &#x8F74;&#x5411;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x51B0;&#x7531;&#x4E8E; sbwAFP &#x4E0E;&#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x5835;&#x585E;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x4E91;&#x6749;&#x869C;&#x866B;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x51B0;&#x6676;&#x4EA4;&#x4E92;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#xFF1A; &#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x4EB2;&#x548C;&#x8D4B;&#x4E88;&#x591A;&#x52A8;&#x3002;

Antifreeze proteins (AFPs) protect certain organisms from freezing by adhering to ice crystals, thereby preventing their growth. All AFPs depress the nonequilibrium freezing temperature below the melting point; however AFPs from overwintering insects, such as the spruce budworm (sbw) are 10-100 times more effective than most fish AFPs. It has been proposed that the exceptional activity of these AFPs depends on their ability to prevent ice growth at the basal plane. To test the hypothesis that the hyperactivity of sbwAFP results from direct affinity to the basal plane, we fluorescently tagged sbwAFP and visualized it on the surface of ice crystals using fluorescence microscopy. SbwAFP accumulated at the six prism plane corners and the two basal planes of hexagonal ice crystals. In contrast, fluorescently tagged fish type III AFP did not adhere to the basal planes of a single-crystal ice hemisphere. When ice crystals were grown in the presence of a mixture of type III AFP and sbwAFP, a hybrid crystal shape was produced with sbwAFP bound to the basal planes of truncated bipyramidal crystals. These observations are consistent with the blockage of c-axial growth of ice as a result of direct interaction of sbwAFP with the basal planes.

Direct visualization of spruce budworm antifreeze protein interacting with ice crystals: basal plane affinity confers hyperactivity.

Prot&eacute;ines antigel (AFP) prot&egrave;gent certains organismes du gel en adh&eacute;rant &agrave; la glace de cristaux, emp&ecirc;chant ainsi leur croissance. AFPs tous les enfoncer le non-&eacute;quilibre gel temp&eacute;rature au-dessous du point de fusion ; Cependant, AFPs des insectes hivernants, comme la tordeuse des bourgeons de l&#39;&eacute;pinette (TBE) sont 10 &agrave; 100 fois plus efficaces que la plupart des poissons AFPs. Il a &eacute;t&eacute; propos&eacute; que l&#39;activit&eacute; exceptionnelle de ces AFPs d&eacute;pend de leur capacit&eacute; &agrave; pr&eacute;venir la croissance de la glace sur le plan de base. Pour tester l&#39;hypoth&egrave;se que l&#39;hyperactivit&eacute; des sbwAFP r&eacute;sulte d&#39;affinit&eacute;s directes au plan basal, nous fluorescent sbwAFP le tag et il visualis&eacute;es sur la surface des cristaux de glace &agrave; l&#39;aide de la microscopie &agrave; fluorescence. SbwAFP accumul&eacute;s dans les six prisme avion angles ou sur les deux plans basales de cristaux de glace hexagonal. En revanche, poisson fluorescent marqu&eacute; type AFP III n&#39;a pas respect&eacute; les plans basales d&#39;un h&eacute;misph&egrave;re de la glace d&#39;un cristal unique. Lorsque des cristaux de glace ont &eacute;t&eacute; cultiv&eacute;es en pr&eacute;sence d&#39;un m&eacute;lange de type AFP III et sbwAFP, une forme de cristal hybride a &eacute;t&eacute; produite avec sbwAFP li&eacute; aux plans du basales de cristaux bipyramidale tronqu&eacute;. Ces observations sont en accord avec le blocage de croissance c-axial de la glace en raison d&#39;une interaction directe avec les plans basales de sbwAFP.

Diriger la visualisation de la prot&eacute;ine antigel de tordeuse interagissant avec des cristaux de glace : affinit&eacute; plan basal conf&egrave;re l&#39;hyperactivit&eacute;.

Frostschutzmittel Proteine (AFPs) verhindern, dass bestimmte Organismen Fortsetzung Kristalle, wodurch man ihr Wachstum zu Eis gefrieren. Alle AFPs Dr&uuml;cken der Nonequilibrium Einfrieren Temperatur unterhalb des Schmelzpunktes; AFPs von &uuml;berwinternden Insekten, wie die Fichte fumiferana (sbw) sind jedoch 10 - 100 mal wirksamer als die meisten Fische AFPs. Es wurde vorgeschlagen, dass die au&szlig;ergew&ouml;hnliche Aktivit&auml;t der diese AFPs h&auml;ngt von ihrer F&auml;higkeit, Eis Wachstum an der basalen Ebene zu verhindern. Um die Hypothese zu testen, die Hyperaktivit&auml;t der SbwAFP durch direkte Affinit&auml;t zur basalen Ebene entstehe, wir Leuchtstoff SbwAFP markiert und es auf der Oberfl&auml;che der Eiskristalle mit Fluoreszenzmikroskopie visualisiert. SbwAFP angesammelt an den sechs Prism-Flugzeug-Ecken und den beiden basalen Ebenen sechseckigen Eiskristalle. Im Gegensatz dazu Leuchtstoff markierte Fische Typ III AFP nicht die basalen Ebenen eine Einzel-Kristall-Eis-Halbkugel entsprechen. Wenn Eiskristalle in Anwesenheit einer Mischung aus Typ III AFP und SbwAFP gewachsen waren, wurde ein Hybrid-Kristallform mit SbwAFP gebunden, die basalen Ebenen der abgeschnittene bipyramidaler Kristalle produziert. Diese Beobachtungen sind konsistent mit der Blockade des c-axial Wachstum des Eises durch direkte Interaktion von SbwAFP mit den basalen Ebenen.

Direkte Visualisierung der Fichte fumiferana Frostschutzmittel Protein Interaktion mit Eiskristallen: basale Ebene Affinit&auml;t verleiht Hyperaktivit&auml;t.

Proteine antigelo (AFPs) proteggono determinati organismi dal congelamento aderendo per ghiaccio cristalli, impedendo cos&igrave; la loro crescita. AFPs tutti deprimere nonequilibrium congelamento temperatura di sotto del punto di fusione; Tuttavia AFPs da insetti lo svernamento, ad esempio il budworm spruce (sbw) sono 10 - 100 volte pi&ugrave; efficace della maggior parte dei pesci AFPs. &Egrave; stato proposto che l&#39;eccezionale attivit&agrave; di questi AFPs dipende dalla loro capacit&agrave; di prevenire la crescita di ghiaccio nel piano basale. Per testare l&#39;ipotesi che l&#39;iperattivit&agrave; di sbwAFP deriva dall&#39;affinit&agrave; diretta al piano basale, noi fluorescente messo sbwAFP e visualizzati sulla superficie dei cristalli di ghiaccio utilizzando la microscopia di fluorescenza. SbwAFP accumulato presso gli angoli del piano sei prisma e i due piani basali dei cristalli di ghiaccio esagonali. Al contrario, tipo pesce fluorescente contrassegnati AFP III non ader&igrave; ai piani basali di un emisfero del singolo-cristallo di ghiaccio. Quando i cristalli di ghiaccio sono stati coltivati in presenza di una miscela di tipo III AFP e sbwAFP, una forma di cristallo di ibrido &egrave; stato prodotto con sbwAFP legato ai piani basali del tronco bipiramide cristalli. Queste osservazioni sono coerenti con il blocco della crescita c-assiale di ghiaccio in seguito a interazione diretta di sbwAFP con gli aerei basali.

Diretta visualizzazione della proteina di antigelo spruce budworm interagendo con cristalli di ghiaccio: affinit&agrave; piano basale conferisce iperattivit&agrave;.

&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (AFPs) &#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5F93;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x51CD;&#x7D50;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; AFPs &#x306F;&#x51CD;&#x7D50;&#x878D;&#x89E3;&#x70B9;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x975E;&#x5E73;&#x8861;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057; AFPs &#x30B9;&#x30D7;&#x30EB;&#x30FC;&#x30B9;&#x5BFE;&#x8C61; &#xFF08;sbw&#xFF09; &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8D8A;&#x51AC;&#x6606;&#x866B;&#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x9B5A;&#x3088;&#x308A;&#x3082; AFPs 10-100 &#x56DE;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; AFPs &#x306E;&#x4F8B;&#x5916;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x306E;&#x6C37;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;.SbwAFP &#x306E;&#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149; sbwAFP &#x30BF;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SbwAFP &#x306F;&#x3001;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x9762;&#x56DB;&#x9685;&#x3068; 2 &#x3064;&#x306E;&#x516D;&#x89D2;&#x5F62;&#x306E;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x9B5A;&#x578B; III AFP &#x5358;&#x7D50;&#x6676;&#x6C37;&#x306E;&#x534A;&#x7403;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III AFP &#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x3068; sbwAFP &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x683D;&#x57F9;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30E2;&#x30EA;&#x30D6;&#x30C7;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x7D50;&#x6676;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066; sbwAFP &#x3068;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x5F62;&#x304C;&#x751F;&#x7523;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306F;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x3068; sbwAFP &#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6C37;&#x306E; c &#x8EF8;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x9589;&#x585E;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x304C;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EB;&#x30FC;&#x30B9;&#x5BFE;&#x8C61;&#x4E0D;&#x51CD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;: &#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AFPs) &#xC900;&#xC218; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;, &#xADF8;&#xB85C; &#xC778;&#xD558;&#xC5EC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xC5EC; &#xB3D9;&#xACB0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; AFPs &#xB3D9;&#xACB0; &#xC628;&#xB3C4; &#xB179;&#xB294;&#xC810;; &#xC544;&#xB798; nonequilibrium&#xC744; &#xC6B0;&#xC6B8; &#xD558; &#xAC8C; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; AFPs &#xC2A4;&#xD504;&#xB7EC;&#xC2A4; budworm (sbw) &#xAC19;&#xC740; overwintering &#xACE4;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC11C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; AFPs &#xBCF4;&#xB2E4; 10-100 &#xBC30; &#xB354; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; Afps&#xC758; &#xB6F0;&#xC5B4;&#xB09C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAE30;&#xC800; &#xD3C9;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BC;&#xC74C; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. Sbwafp&#xC758; &#xACFC;&#xB2E4; &#xAE30;&#xC800; &#xD3C9;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; sbwAFP &#xD0DC;&#xADF8; &#xD558; &#xACE0; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xAC01;. SbwAFP 6 &#xD504;&#xB9AC;&#xC998; &#xD3C9;&#xBA74; &#xBAA8;&#xC11C;&#xB9AC;&#xC640; &#xC721;&#xAC01;&#xD615; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xB450; &#xAE30;&#xC800; &#xD3C9;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD95;&#xC801; &#xB41C;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xB2E8;&#xC77C; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC18;&#xAD6C;&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xD0DC;&#xADF8; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xC885;&#xB958; III AFP &#xC900;&#xC218; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC720;&#xD615; III AFP&#xC758; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C; &#xBC0F; Sbwafp&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815; &#xC131;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xBAA8;&#xC591; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; bipyramidal &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8;&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; Sbwafp&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC81C;&#xC791; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21;&#xC740; &#xAE30;&#xC800; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xC640; Sbwafp&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC758; c &#xCD95; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC29;&#xD574;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;.

&#xC9C1;&#xC811; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xBB38;&#xBE44;&#xB098;&#xBB34; budworm &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;: &#xAE30;&#xC800; &#xD3C9;&#xBA74; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xACFC;&#xB2E4;&#xB97C; &#xC218; &#xC5EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Prote&iacute;nas anticongelantes (AFPs) protegen a ciertos organismos de congelaci&oacute;n adhiriendo a cristales, impidiendo su crecimiento de hielo. AFP todos Oprima el no-equilibrio congelaci&oacute;n temperatura por debajo del punto de fusi&oacute;n; sin embargo la AFP contra insectos sobreviven al invierno, como el abeto Gusano Bellotero (sbw) es 10 - 100 veces m&aacute;s eficaz que la mayor&iacute;a de los peces AFP. Se ha propuesto que la actividad excepcional de estas AFP depende de su capacidad para evitar la formaci&oacute;n de hielo en el plano basal. Para probar la hip&oacute;tesis que la hiperactividad de sbwAFP resulta de afinidad directa al plano basal, fluorescencia con la etiqueta sbwAFP y lo hab&iacute;a visualizado en la superficie de los cristales de hielo mediante microscop&iacute;a de fluorescencia. SbwAFP acumulado en las esquinas de plano seis prisma y los dos planos basales de cristales de hielo hexagonales. Por el contrario, peces marcados fluorescente tipo III AFP no adhiri&oacute; a los planos basales de un hemisferio de la solo-cristal de hielo. Cuando los cristales de hielo fueron cultivados en presencia de una mezcla de tipo III AFP y sbwAFP, una forma de cristal h&iacute;brido fue producida con sbwAFP a los planos basales de cristales bipiramidales truncado. Estas observaciones son constantes con la obstrucci&oacute;n de crecimiento c-axial de hielo como resultado de la interacci&oacute;n directa de sbwAFP con los planos basales.

Directa visualizaci&oacute;n de prote&iacute;na anticongelante de abeto budworm interactuando con cristales de hielo: afinidad del plano basal confiere hiperactividad.

&#x53EA;&#x6709;&#x5728;&#x6570;&#x5343;&#x4E2A;&#x4E2A;&#x4F53;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x884C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5C06;&#x5B9E;&#x73B0;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5168;&#x90E8;&#x7406;&#x60F3;&#x3002;&#x53C2;&#x8003;&#x5E8F;&#x5217;&#x5141;&#x8BB8;&#x4F7F;&#x7528;&#x77ED;&#x7684;&#x8BFB;&#x53D6;&#x957F;&#x5EA6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x540C;&#x65F6;&#x786E;&#x5B9A;&#x591A;&#x4E2A; 280,000 &#x5355;&#x4E2A; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x65E0;&#x653E;&#x5927;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x8868;&#x9762;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7684;&#x5E95;&#x6F06;&#x6A21;&#x677F;&#x53CC;&#x5DE5;&#x9010;&#x6B65;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5411;&#x6DFB;&#x52A0;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x548C;&#x5F02;&#x6B65;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x7531;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;&#x8BFB;&#x53D6;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6; &gt; &#x53D6;&#x5F97; 25 &#x57FA;&#x5730;&#x548C;&#x63A5;&#x8FD1; 30 &#x7684;&#x7B49;&#x6548; phred &#x8F6F;&#x4EF6;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x8D28;&#x91CF;&#x5206;&#x6570;&#x4E86;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x5E73;&#x5747;&#x6DF1;&#x5EA6;&#x7684; M13 &#x75C5;&#x6BD2; &gt; 150 x &#x548C; 100%&#x7684;&#x8986;&#x76D6;&#x7387; &#xFF1B;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x65B0;&#x6392;&#x961F; M13 &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x7A81;&#x53D8;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x4F4E;&#x6210;&#x672C;&#x91CD;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x670D;&#x52A1;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5355;&#x5206;&#x5B50; DNA &#x6D4B;&#x5E8F;&#x3002;

The full promise of human genomics will be realized only when the genomes of thousands of individuals can be sequenced for comparative analysis. A reference sequence enables the use of short read length. We report an amplification-free method for determining the nucleotide sequence of more than 280,000 individual DNA molecules simultaneously. A DNA polymerase adds labeled nucleotides to surface-immobilized primer-template duplexes in stepwise fashion, and the asynchronous growth of individual DNA molecules was monitored by fluorescence imaging. Read lengths of >25 bases and equivalent phred software program quality scores approaching 30 were achieved. We used this method to sequence the M13 virus to an average depth of >150x and with 100% coverage; thus, we resequenced the M13 genome with high-sensitivity mutation detection. This demonstrates a strategy for high-throughput low-cost resequencing.

Single-molecule DNA sequencing of a viral genome.

La promesse pleine de la g&eacute;nomique humaine se r&eacute;aliseront uniquement lorsque les g&eacute;nomes de milliers de personnes peuvent &ecirc;tre s&eacute;quenc&eacute;s pour l&#39;analyse comparative. Une s&eacute;quence de r&eacute;f&eacute;rence permet l&#39;utilisation de courte dur&eacute;e de lecture. Nous pr&eacute;sentons une m&eacute;thode sans amplification pour la d&eacute;termination de la s&eacute;quence nucl&eacute;otidique de plus de 280 000 mol&eacute;cules d&#39;ADN diff&eacute;rents simultan&eacute;ment. Une ADN polym&eacute;rase ajoute nucl&eacute;otides marqu&eacute;s au duplex surface immobilis&eacute;e amorce-mod&egrave;le de fa&ccedil;on progressive, et la croissance asynchrone des mol&eacute;cules d&#39;ADN individuels a &eacute;t&eacute; suivie par imagerie de fluorescence. Lire les longueurs de &gt; 25 bases et REDSP &eacute;quivalent logiciel programme qualit&eacute; scores approchant les 30 ont &eacute;t&eacute; atteints. Nous avons utilis&eacute; cette m&eacute;thode pour s&eacute;quencer le virus M13 &agrave; une profondeur moyenne de &gt; 150 x et avec une couverture de 100 % ; ainsi, nous res&eacute;quenc&eacute;es le g&eacute;nome M13 avec d&eacute;tection de mutations de haute sensibilit&eacute;. Cela d&eacute;montre une strat&eacute;gie &agrave; haut-d&eacute;bit bas prix &laquo; res&eacute;quen&ccedil;age &raquo;.

S&eacute;quen&ccedil;age de l&#39;ADN simple-mol&eacute;cule d&#39;un g&eacute;nome viral.

Das vollst&auml;ndige Versprechen der menschlichen Genomics wird realisiert werden, nur dann, wenn die Genome von Tausenden von Individuen f&uuml;r die vergleichende Analyse sequenziert werden k&ouml;nnen. Ein Bezugsfolge erm&ouml;glicht die Verwendung von kurzen lesen Sie L&auml;nge. Wir berichten eine Verst&auml;rkung-freie Methode zur Bestimmung der Nukleotidsequenz mehr als 280.000 einzelner DNA-Molek&uuml;le gleichzeitig. Eine DNA-Polymerase beschriftete Nukleotiden, Oberfl&auml;che immobilisiert Grundierung-Vorlage Duplices in schrittweise Mode hinzugef&uuml;gt, und das asynchrone Wachstum einzelner DNA-Molek&uuml;le wurde &uuml;berwacht durch Fluoreszenz-Bildgebung. Lesen Sie L&auml;ngen von &gt; 25 Basen und entsprechende Phred Software Programm Qualit&auml;tsfaktoren n&auml;hert sich 30 wurden erreicht. Wir diese Methode verwendet, um die Sequenz des M13-Virus zu einer durchschnittlichen Tiefe von &gt; 150 x und mit 100 % Abdeckung; so resequenced wir das M13-Genom mit hochempfindlichen Mutation-Erkennung. Dies zeigt eine Strategie f&uuml;r Hochdurchsatz-kosteng&uuml;nstige Neusequenzierung.

Einzelmolek&uuml;l-DNA-Sequenzierung eines viralen Genoms.

La promessa piena di genomica umana sar&agrave; realizzata solo quando i genomi di migliaia di individui possono essere sequenziati per analisi comparativa. Una sequenza di riferimento consente l&#39;utilizzo di breve lunghezza lettura. Riportiamo un metodo per determinare la sequenza nucleotidica di oltre 280.000 singole molecole di DNA contemporaneamente senza amplificazione. Una DNA polimerasi aggiunge nucleotidi etichettati ai duplex con primer-modello immobilizzato in superficie in modo graduale, e la crescita asincrona delle singole molecole di DNA &egrave; stata monitorata da imaging in fluorescenza. Leggere di lunghezza &amp;gt; 25 basi e punteggi di qualit&agrave; di phred equivalente software programma si avvicina 30 sono stati raggiunti. Abbiamo utilizzato questo metodo per sequenziare il virus M13 a una profondit&agrave; media di &amp;gt; 150 x e con copertura del 100%; cos&igrave;, abbiamo resequenced il genoma di M13 con rilevazione di mutazione ad alta sensibilit&agrave;. Questo dimostra una strategia per high-throughput risequenziazione di basso costo.

Sequenziamento del DNA di singola molecola di un genoma virale.

&#x500B;&#x4EBA;&#x306E;&#x4F55;&#x5343;&#x3082;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x5206;&#x6790;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x51E6;&#x7406;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x7D04;&#x675F;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x53C2;&#x7167;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x8AAD;&#x307F;&#x53D6;&#x308A;&#x306E;&#x77ED;&#x3044;&#x9577;&#x3055;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x540C;&#x6642;&#x306B; 280,000 &#x4EE5;&#x4E0A; 1 &#x5206;&#x5B50; DNA &#x306E;&#x5869;&#x57FA;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;.DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30E9;&#x30D9;&#x30EB; &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x8868;&#x9762;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC; &#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6BB5;&#x968E;&#x7684;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x6210;&#x9577; DNA 1 &#x5206;&#x5B50;&#x86CD;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x76E3;&#x8996;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9577;&#x3055;&#x3092;&#x8AAD;&#x3080;&#x76EE; 25 &#x62E0;&#x70B9;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x306E; phred &#x30BD;&#x30D5;&#x30C8;&#x30A6;&#x30A7;&#x30A2; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x54C1;&#x8CEA;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2; 30 &#x306B;&#x8FD1;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3001;M13 &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x6DF1;&#x3055;&#x306B;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x76EE; 150 x &#x3068; 100 &#xFF05; &#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; M13 &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x9AD8;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3068; resequenced&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x9806;&#x5E8F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E; 1 &#x5206;&#x5B50; DNA &#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC57D;&#xC18D; &#xAC1C;&#xC778;&#xC758; &#xC218;&#xCC9C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC21C;&#xCC28;&#xB97C; &#xC124;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xD604; &#xB420; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xCC38;&#xC870; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC9E7;&#xC740; &#xC77D;&#xAE30; &#xAE38;&#xC774; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; 280000 &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC99D;&#xD3ED; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC29;&#xBC95; &#xBCF4;&#xACE0;. DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD45C;&#xBA74; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC77C; &#xB1CC;&#xAD00; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; duplexes stepwise &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xAC1C;&#xBCC4; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30; &#xC131;&#xC7A5; &#xD615;&#xAD11; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE38;&#xC774; &#xC77D;&#xAE30; &amp;gt; 25 &#xAE30;&#xC9C0;&#xC640; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xD55C; phred &#xC18C;&#xD504;&#xD2B8;&#xC6E8;&#xC5B4; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xD488;&#xC9C8; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC810;&#xC218; 30 &#xC811;&#xADFC; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; M13 &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xAE4A;&#xC774;&#xB97C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &amp;gt; 150 x &#xBC0F; 100% &#xBCF4;&#xC0C1;; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xAC10;&#xB3C4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAC80;&#xCD9C; M13 &#xAC8C;&#xB188; resequenced. &#xC774; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xC800;&#xAC00; resequencing&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La promesa completa del genoma humano se realizar&aacute; s&oacute;lo cuando puede ser secuenciado el genoma de miles de personas para el an&aacute;lisis comparativo. Una secuencia de referencia permite el uso de longitud corta de leer. Divulgamos un m&eacute;todo libre de amplificaci&oacute;n para determinar la secuencia de nucle&oacute;tidos de m&aacute;s de 280.000 mol&eacute;culas de ADN individuales simult&aacute;neamente. Una ADN polimerasa agrega nucle&oacute;tidos etiquetados hasta d&uacute;plex superficie-inmovilizado cartilla-plantilla de manera gradual, y el crecimiento asincr&oacute;nico de mol&eacute;culas individuales de ADN fue supervisado por la proyecci&oacute;n de imagen de fluorescencia. Leer longitudes de &gt; 25 bases y puntuaciones de calidad de programa phred equivalente software treinta fueron alcanzados. Utilizamos este m&eacute;todo para secuenciar el virus M13 a una profundidad media de &gt; 150 x y con 100% de cobertura; as&iacute;, nos reordenar el genoma M13 con detecci&oacute;n de la mutaci&oacute;n de alta sensibilidad. Esto demuestra una estrategia de alto rendimiento bajo costo resecuenciaci&oacute;n.

Secuencia de la DNA de una sola mol&eacute;cula de un genoma viral.

&#x5728; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x548C;&#x4EE3;&#x9057;&#x4F20;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x67E5;&#x627E;&#x540C;&#x6E90;&#x76EE;&#x6807;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E0A;&#x7684;&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x4EA4;&#x6362;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D1;&#x751F;&#x65F6;&#x95F4;&#x523B;&#x5EA6;&#x5185;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x8981;&#x6C42;&#xFF0C;&#x5355;&#x94FE; DNA &#x91CD;&#x7EC4;&#x9176;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x5FC5;&#x987B;&#x901A;&#x8FC7;&#x5F62;&#x6210;&#x7A81;&#x89E6;&#x4E0E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; DNA &#x7247;&#x65AD;&#x641C;&#x7D22;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x5728;&#x641C;&#x7D22;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x662F;&#x65F6;&#x95F4;&#xFF0C;&#x8BA9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684; DNA &#x8FDB;&#x884C;&#x6BD4;&#x8F83;&#xFF0C;&#x5373;&#x7A81;&#x89E6;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x9996;&#x6B21;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x5355;&#x4E2A;&#x7A81;&#x89E6; RecA&#x3001; &#x539F;&#x6838;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9176;&#xFF0C;&#x7531;&#x7EC4;&#x6210;&#x548C;&#x8861;&#x91CF;&#x5176;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x957F;&#x5EA6;&#x548C;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x53C2;&#x4E0E;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E3B;&#x7BA1;&#x90E8;&#x95E8;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x51FA;&#x4EBA;&#x610F;&#x6599;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x662F;&#x5927;&#x7EA6; 10 s &#x957F;&#x65F6;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E3B;&#x7BA1;&#x90E8;&#x95E8;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x5F02;&#x6E90;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E3A;&#x90E8;&#x5206;&#x540C;&#x6E90;&#xFF0C;&#x4E00;&#x8D2F;&#x4E0E;&#x5408;&#x594F;&#x97F3;&#x54C1;&#x6D4B;&#x91CF;&#x957F;&#x5F97;&#x591A;&#x3002;&#x7A81;&#x89E6;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x5145;&#x5206;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x5728;&#x4EFB;&#x4E00;&#x957F;&#x5EA6;&#x8FC5;&#x901F;&#x589E;&#x52A0; 3&#39;-&#x6216; 5&#39; &#x7AEF;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x7684;&#x5355;&#x94FE; DNA &#x9AD8;&#x4E8E; 30 &#x57FA;&#x5730;&#x3002;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x5177;&#x6709;&#x8FD1;&#x540C;&#x6E90; Dna &#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x4FBF;&#x5229;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x641C;&#x7D22;&#x673A;&#x5236;&#x6765;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x5728;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x5185;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x3002;

&#x5F53;&#x573A;&#x6293;&#x83B7;&#xFF1A; &#x7A81;&#x89E6;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4EA7;&#x7269;&#x5BF9; DNA &#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x641C;&#x7D22;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x3002;

Homologous recombination plays pivotal roles in DNA repair and in the generation of genetic diversity. To locate homologous target sequences at which strand exchange can occur within a timescale that a cell's biology demands, a single-stranded DNA-recombinase complex must search among a large number of sequences on a genome by forming synapses with chromosomal segments of DNA. A key element in the search is the time it takes for the two sequences of DNA to be compared, i.e. the synapse lifetime. Here, we visualize for the first time fluorescently tagged individual synapses formed by RecA, a prokaryotic recombinase, and measure their lifetime as a function of synapse length and differences in sequence between the participating DNAs. Surprisingly, lifetimes can be approximately 10 s long when the DNAs are fully heterologous, and much longer for partial homology, consistently with ensemble FRET measurements. Synapse lifetime increases rapidly as the length of a region of full homology at either the 3'- or 5'-ends of the invading single-stranded DNA increases above 30 bases. A few mismatches can reduce dramatically the lifetime of synapses formed with nearly homologous DNAs. These results suggest the need for facilitated homology search mechanisms to locate homology successfully within the timescales observed in vivo.

Caught in the act: the lifetime of synaptic intermediates during the search for homology on DNA.

Recombinaison homologue joue un r&ocirc;le essentiel dans la r&eacute;paration de l&#39;ADN et la g&eacute;n&eacute;ration de la diversit&eacute; g&eacute;n&eacute;tique. Pour localiser la cible homologue des s&eacute;quences &agrave; quelle Bourse brin peuvent se produire dans un d&eacute;lai que les demandes de biologie d&#39;une cellule, un complexe de recombinase-ADN monocat&eacute;naire doit rechercher parmi un grand nombre de s&eacute;quences sur un g&eacute;nome en formant des synapses avec des segments d&#39;ADN chromosomiques. Un &eacute;l&eacute;ment cl&eacute; dans la recherche est le temps que n&eacute;cessaire pour les deux s&eacute;quences d&#39;ADN &agrave; comparer, c&#39;est-&agrave;-dire la dur&eacute;e de vie de synapse. Nous visualisons ici, pour la premi&egrave;re fois fluorescent &eacute;tiquet&eacute;s synapses individuelles forment par RecA, une recombinase procaryote et mesurent leur dur&eacute;e de vie en fonction de la longueur de la synapse et diff&eacute;rences dans la s&eacute;quence entre les ADN des participants. &Eacute;tonnamment, les dur&eacute;es de vie peuvent &ecirc;tre environ 10 s long lorsque l&#39;ADN sont enti&egrave;rement h&eacute;t&eacute;rologue et beaucoup plus de temps pour l&#39;homologie partielle, en coh&eacute;rence avec les mesures de frette ensemble. Dur&eacute;e de vie de Synapse augmente rapidement la longueur d&#39;une r&eacute;gion d&#39;homologie compl&egrave;te soit la 3&#39;-ou 5&#39;-extr&eacute;mit&eacute;s de l&#39;ADN monocat&eacute;naire augmente au dessus de 30 bases envahissant. Quelques incompatibilit&eacute;s peuvent r&eacute;duire consid&eacute;rablement la dur&eacute;e de vie des synapses form&eacute;es avec presque homologues DNAs. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent la n&eacute;cessit&eacute; de m&eacute;canismes de recherche d&#39;homologie facilit&eacute;e localiser une homologie avec succ&egrave;s dans les d&eacute;lais observ&eacute;es in vivo.

Pris en flagrant d&eacute;lit : la dur&eacute;e de vie des interm&eacute;diaires synaptiques au cours de la recherche d&#39;homologie ADN.

Homologe Rekombination spielt entscheidende Rollen in der DNA-Reparatur und in der Generation der genetischen Vielfalt. Homologe Ziel finden k&ouml;nnen-Sequenzen an das Strang-Exchange in einem Zeitrahmen auftreten, dass eine Zelle Biologie verlangt, ein einzeln-angeschwemmte DNA-Recombinase Komplex unter eine gro&szlig;e Anzahl von Sequenzen auf ein Genom suchen muss, durch die Bildung von Synapsen mit chromosomaler DNA-Segmente. Ein Schl&uuml;sselelement bei der Suche ist die ben&ouml;tigte Zeit f&uuml;r die beiden Sequenzen von DNA verglichen werden, d.h. die Synapse-Lebensdauer. Hier, visualisieren wir zum ersten Mal Leuchtstoff markierte einzelne Synapsen durch RecA, einer prokaryotischen Recombinase gebildet und ihre Lebensdauer als Funktion der Synapse L&auml;nge und Unterschiede in der Sequenz zwischen den teilnehmenden DNAs zu messen. &Uuml;berraschend Lebenszeiten k&ouml;nnen sein etwa 10 s lang, wenn die DNAs voll heterologe und viel l&auml;nger f&uuml;r partiellen Homologie, konsequent mit Ensemble FRET Messungen sind. Synapse Lebensdauer erh&ouml;ht sich schnell als die L&auml;nge einer Region voller Homologie entweder der 3&#39;-oder 5&#39;-Enden von den eindringenden einzelstr&auml;ngige DNA &uuml;ber 30 Basen erh&ouml;ht. Ein paar Unterschiede k&ouml;nnen die Lebensdauer der Synapsen gebildet mit fast homologe DNAs reduzieren. Diese Resultate schlagen die Notwendigkeit einer erleichterten Homologie Suchmechanismen, Homologie erfolgreich in dem Zeitrahmen beobachtet in-vivo zu finden.

Caught in the Act: die Lebensdauer der synaptischen Zwischenprodukte bei der Suche nach Homologie auf DNA.

Ricombinazione omologa interpreta ruoli cardine nella riparazione del DNA e nella generazione della diversit&agrave; genetica. Per individuare la destinazione omologhe sequenze in cui exchange strand possono verificarsi entro un lasso di tempo che esige biologia di una cella, un single-stranded DNA-recombinase complesso deve cercare tra un gran numero di sequenze in un genoma formando sinapsi con segmenti cromosomiche del DNA. Un elemento chiave nella ricerca &egrave; il tempo che necessario per le due sequenze di DNA da confrontare, cio&egrave; la durata di sinapsi. Qui, noi visualizzare per la prima volta fluorescente contrassegnati singole sinapsi formano da RecA, un procariote ricombinasi e misurano la loro vita in funzione della lunghezza di sinapsi e differenze nella sequenza tra il DNAs partecipanti. Sorprendentemente, la vite possono essere circa 10 s lunga quando il DNAs sono completamente eterologa e molto pi&ugrave; tempo per omologia parziale, coerentemente con le misurazioni di FRET ensemble. Durata della sinapsi aumenta rapidamente come la lunghezza di una regione di omologia pieno sia il 3&#39;-o 5&#39;-estremit&agrave; di invasori single-stranded DNA aumenta sopra 30 basi. Alcune incongruenze possono ridurre drasticamente la durata della sinapsi formate con DNAs quasi omologhe. Questi risultati suggeriscono la necessit&agrave; di meccanismi di ricerca di omologia agevolato individuare omologia con successo entro i tempi osservati in vivo.

Caught in the act: la durata di synaptic intermedi durante la ricerca di omologia sul DNA.

&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F8;&#x540C;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x691C;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x9396;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3067;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; &#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x5185;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x8981;&#x6C42;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;DNA &#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x4E00;&#x672C;&#x9396; DNA &#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0A;&#x306E;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x691C;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x691C;&#x7D22;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x304C; DNA &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x671F;&#x9593;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30B0;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306F;&#x539F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; RecA &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x4E00;&#x751F;&#x306E;&#x9593;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3068;&#x53C2;&#x52A0;&#x306E; Dna &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x76F8;&#x9055;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x6709;&#x52B9;&#x671F;&#x9593;&#x304C;&#x7D04; 10 &#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7570;&#x7A2E;&#x3068;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x9577;&#x3044;&#x30D5;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x306E; Dna &#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x9577;&#x3044; s&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5BFF;&#x547D;&#x304C;&#x98DB;&#x8E8D;&#x7684;&#x306B;&#x5897;&#x5927;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x76F8;&#x540C;&#x3067;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x9577;&#x3055; 3&#39;-&#x307E;&#x305F;&#x306F; 5&#39;-&#x4FB5;&#x5165;&#x306E;&#x4E00;&#x672C;&#x9396; DNA &#x304C;&#x5897;&#x52A0; 30 &#x62E0;&#x70B9;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x7AEF;&#x3092;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x307B;&#x307C;&#x76F8;&#x540C; Dna &#x3067;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x671F;&#x9593;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F8;&#x540C; in vivo &#x89B3;&#x5BDF;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x5185;&#x3092;&#x691C;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x5BB9;&#x6613;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x691C;&#x7D22;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x884C;&#x70BA;&#x306B;&#x5DFB;&#x304D;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x308B;: dna &#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x691C;&#x7D22;&#x4E2D;&#x306B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x671F;&#x9593;&#x3002;

&#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; DNA &#xC218;&#xB9AC;&#xC640; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC758; &#xC138;&#xB300; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC885; &#xB300;&#xC0C1; &#xCC3E;&#xC744; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB294; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB79C;&#xB4DC; exchange&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xC694;&#xAD6C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; DNA recombinase &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; DNA&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC640; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CE;&#xC740; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC904; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC80;&#xC0C9;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC694;&#xC18C;, &#xC989; &#xB0C5; &#xC218;&#xBA85; &#xBE44;&#xAD50; DNA&#xC758; &#xB450; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC78;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD99;&#xC77C; &#xD0DC;&#xADF8;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB0C5; RecA, prokaryotic recombinase&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC77C;&#xC0DD; &#xB0C5; &#xAE30;&#xAC04;&#xACFC; &#xCC38;&#xC5EC; DNAs &#xC21C;&#xC11C; &#xCC28;&#xC774;&#xC758; &#xD568;&#xC218;&#xB85C; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC218;&#xBA85; &#xC57D; 10 &#xC218; s&#xB294; Dnas&#xB294; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC559;&#xC0C1;&#xBE14; &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C; &#xBD80;&#xBD84; homology&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xAE34;. &#xB0C5; &#xC218;&#xBA85; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xCCB4; homology &#xAE38;&#xC774;&#xB85C; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; 3&#39;-&#xB610;&#xB294; 5&#39;-&#xB05D;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; DNA &#xC99D;&#xAC00; 30 &#xAE30;&#xC9C0; &#xC704;&#xC5D0; &#xCE68;&#xC785;. &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58; &#xB0C5; &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC885; Dnas&#xC640; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC218;&#xBA85;&#xC744; &#xD68D;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; timescales &#xAD00;&#xCC30; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; homology&#xB97C; &#xCC3E;&#xC73C;&#xB824;&#xACE0; &#xCD09;&#xC9C4;&#xB41C; homology &#xAC80;&#xC0C9; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD589;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD99;&#xC7A1;&#xB294;: homology DNA&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4;&#xC758; &#xC218;&#xBA85;.

Recombinaci&oacute;n hom&oacute;loga juega un papel fundamental en la reparaci&oacute;n del ADN y en la generaci&oacute;n de diversidad gen&eacute;tica. Para localizar el destino hom&oacute;logo secuencias en que cambio de filamento pueden ocurrir en un plazo que exige la biolog&iacute;a de la c&eacute;lula, un complejo de ADN-Recombinasa monocatenario debe buscar entre un gran n&uacute;mero de secuencias en un genoma mediante la formaci&oacute;n de sinapsis con segmentos cromos&oacute;micos del ADN. Un elemento clave en la b&uacute;squeda es el tiempo que tarda para las dos secuencias de ADN para comparar, es decir, la vida &uacute;til de la sinapsis. Aqu&iacute;, visualizamos por primera vez fluorescencia etiquetas sinapsis individuales forman por RecA, una Recombinasa procariota y medir su vida en funci&oacute;n de la longitud de la sinapsis y las diferencias en la secuencia entre los DNAs participantes. Sorprendentemente, la vida puede ser aproximadamente 10 s largo cuando los DNAs son completamente heter&oacute;loga y mucho m&aacute;s para la homolog&iacute;a parcial, consistentemente con las mediciones de traste de conjunto. Vida de sinapsis aumenta r&aacute;pidamente como la longitud de una regi&oacute;n de homolog&iacute;a completo en cualquiera los 3&#39;-5&#39; finales o de los invasores ADN monocatenario aumenta por encima de 30 bases. Algunos desajustes pueden reducir dram&aacute;ticamente la vida de sinapsis formada con casi hom&oacute;logos DNAs. Estos resultados sugieren la necesidad de mecanismos de b&uacute;squeda de homolog&iacute;a facilitado localizar homolog&iacute;a con &eacute;xito dentro de los plazos observados in vivo.

Sorprendido en el acto: la vida &uacute;til de productos intermedios sin&aacute;pticas durante la b&uacute;squeda de homolog&iacute;a de ADN.

&#x96EA;&#x86A4; (Hypogastrum &#x7EF4;&#x6C0F;&#xFF09; &#x4E0D;&#x53D7;&#x51BB;&#x7ED3;&#x5728;&#x96F6;&#x4E0B;&#x6E29;&#x5EA6;&#x7684;&#x5BCC;&#x542B;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D; (AFP)&#xFF0C;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x79CD;&#x5B50;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x5E76;&#x9632;&#x6B62;&#x5B83;&#x4EEC;&#x589E;&#x957F;&#x8F83;&#x5927;&#x3002;&#x6B64;&#x6CD5;&#x65B0;&#x793E;&#x662F;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; [&#x683C;&#x96F7;&#x5384;&#x59C6;&#x3001; L.A.&#x548C;&#x6234;&#x7EF4;&#x65AF;&#x3001; P.L.(2005 &#x5E74;) &#x79D1;&#x5B66; 310&#xFF0C;461] &#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x578B;&#x3002;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53; &#xFF08;15.7 kDa) &#x5C55;&#x54C1;&#x6570;&#x500D;&#x9AD8;&#x6D3B;&#x6027;&#x6BD4;&#x89C4;&#x6A21;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53; &#xFF08;6.5 kDa)&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5B83;&#x662F;&#x5927;&#x5927;&#x4E0D;&#x592A;&#x4E30;&#x5BCC;&#x3002;&#x8981;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x7840;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x51B3;&#x5FC3;&#x5927;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x5206;&#x6B67;&#x4E3B;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x578B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x65E2;&#x5305;&#x542B;&#x4E09;&#x80BD;&#x91CD;&#x590D;&#xFF0C;&#x5C06;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x6784;&#x5EFA;&#x4E09;&#x7EF4;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5C0F;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x516D;-&#x591A;&#x805A;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x87BA;&#x65CB;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x5927;&#x578B;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x56FE;&#x6848;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x5305;&#x542B;&#x7531;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x5305;&#x542B;&#x8FDE;&#x63A5;&#x7684; 13 &#x591A;&#x805A;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E8C;&#x3001; &#x87BA;&#x65CB;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5806;&#x79EF;&#x6210;&#x4E24;&#x5E73;&#x5F20;&#x9762;&#x5411; antiparallel &#x5230;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x3002;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E25;&#x683C;&#x662F;&#x4E24;&#x4EB2;&#x6027;&#x4E0E;&#x4EB2;&#x6C34;&#x8868;&#x9762;&#x4E00;&#x4FA7;&#x548C;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x758F;&#x6C34;&#x3001; &#x5047;&#x5B9A;&#x51B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x5927;&#x7EA6;&#x4E24;&#x500D;&#x9762;&#x79EF;&#x5C0F;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x63D0;&#x5230;&#x7684;&#x4F8B;&#x5B50;&#x662F;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7684;&#x89E3;&#x91CA;&#x662F;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x5927;&#x5047;&#x5B9A;&#x51B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6025;&#x6027;&#x5F1B;&#x7F13;&#x6027;&#x9EBB;&#x75F9;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5176;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x591A;&#x4E2A;&#x5E73;&#x9762;&#x7684;&#x51B0;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x57FA;&#x5E95;&#x7684;&#x5E73;&#x9762;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x53D1;&#x73B0;&#x652F;&#x6301;&#x4E86;&#x6CD5;&#x65B0;&#x793E;&#x591A;&#x52A8;&#x75C7;&#x4E0E;&#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x9996;&#x6B21;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4E0E;&#x4E91;&#x6749;&#x869C;&#x866B;&#x7532;&#x80CE;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x3002;

&#x96EA;&#x8DF3;&#x86A4;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5927;&#x578B;&#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x7684;&#x4F18;&#x8D8A;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

The snow flea (Hypogastrum harveyi) is protected from freezing at sub-zero temperatures by a glycine-rich antifreeze protein (AFP) that binds to seed ice crystals and prevents them from growing larger. This AFP is hyperactive and comprises two isoforms [Graham, L. A., and Davies, P. L. (2005) Science 310, 461]. The larger isoform (15.7 kDa) exhibits several-fold higher activity than the smaller isoform (6.5 kDa), although it is considerably less abundant. To establish the molecular basis for this difference in activity, we determined the sequence of the large isoform. The primary sequences of these two isoforms are surprisingly divergent. However, both contain tripeptide repeats and turn motifs that enabled us to build a three-dimensional model of the large isoform based upon the six-polyproline helix structure of the small isoform. Our model contains 13 polyproline type II helices connected by proline-containing loops stacked into two flat sheets oriented antiparallel to one another. The structure is strictly amphipathic, with a hydrophilic surface on one side and a hydrophobic, putative ice-binding surface on the other. The putative ice-binding site is approximately twice as large in area as that of the small isoform, providing an explanation for the difference in activity that is consistent with other examples noted. By tagging the recombinant AFP with green fluorescent protein, we observed its binding to multiple planes of ice, especially the basal plane. This finding supports the correlation between AFP hyperactivity and basal plane binding first observed with spruce budworm AFP.

Structural basis for the superior activity of the large isoform of snow flea antifreeze protein.

La pulga de la nieve (harveyi Hypogastrum) est&aacute; protegida contra congelaci&oacute;n a Sub-Zero temperaturas por una prote&iacute;na rica en glicina anticongelante (AFP) que se une a cristales de hielo de semilla y les impide crecer m&aacute;s grande. Esta AFP es hiperactivo y comprende dos isoformas [Graham, A. y Davies, P. L. (2005) ciencia 310, 461]. La isoforma m&aacute;s grande (15,7 kDa) exhibe un actividad m&aacute;s alta que la isoforma m&aacute;s peque&ntilde;a (6.5 kDa), aunque es considerablemente menos abundante. Para establecer la base molecular de esta diferencia en la actividad, se determin&oacute; la secuencia de la isoforma grande. Las secuencias principales de estas dos isoformas son sorprendentemente divergentes. Sin embargo, ambos contienen trip&eacute;ptido repeticiones y motivos que permitieron construir un modelo tridimensional de la isoforma grande basado en la estructura de h&eacute;lice de seis-poliprolina de la isoforma peque&ntilde;a. Nuestro modelo contiene 13 h&eacute;lices II de tipo poliprolina conectados por que contienen prolina lazos se apilan en antiparalelo orientado dos hojas planas a uno con el otro. La estructura es estrictamente anfip&aacute;ticos, con una superficie hidrof&iacute;lica, por un lado y una superficie de hielo-enlace hidrof&oacute;bica, supuesta en el otro. El sitio putativo de hielo-Uni&oacute;n es aproximadamente dos veces tan grande en &aacute;rea como la de la isoforma peque&ntilde;a, proporcionando una explicaci&oacute;n para la diferencia en actividad que es consistente con otros ejemplos se&ntilde;alados. Por etiquetar la recombinante AFP con la prote&iacute;na verde fluorescente, observamos su uni&oacute;n a varios planos de hielo, especialmente en el plano basal. Este hallazgo apoya la correlaci&oacute;n entre la AFP hiperactividad y vinculante del plano basal observ&oacute; por primera vez con la yema de abeto AFP.

Base estructural para la actividad superior de la isoforma grande de prote&iacute;na de anticongelante de pulgas de nieve.

La puce de neige (Hypogastrum harveyi) est prot&eacute;g&eacute;e contre le gel &agrave; Sub-Zero temp&eacute;ratures par une prot&eacute;ine riche en glycine antigel (AFP) qui se lie aux cristaux de glace de semences et les emp&ecirc;che de se d&eacute;velopper plus grand. Cette AFP est hyperactif et compose de deux isoformes [Graham, A. et Davies, P. L. (2005) Science 310, 461]. L&#39;isoforme plus grande (15,7 kDa) expose plusieurs activit&eacute; plus &eacute;lev&eacute;e que l&#39;isoforme plus petit (6,5 kDa), bien qu&#39;il est beaucoup moins abondant. Pour &eacute;tablir la base mol&eacute;culaire de cette diff&eacute;rence dans l&#39;activit&eacute;, nous avons d&eacute;termin&eacute; la s&eacute;quence de l&#39;isoforme grand. Les s&eacute;quences primaires de ces deux isoformes sont &eacute;tonnamment divergentes. Toutefois, contiennent des r&eacute;p&eacute;titions tripeptide et tourner les motifs qui nous a permis de construire un mod&egrave;le tridimensionnel de l&#39;isoforme grand bas&eacute;e sur la structure en h&eacute;lice polyproline-six de l&#39;isoforme petit. Notre mod&egrave;le contient 13 h&eacute;lices du polyproline II du type d&eacute;servi proline contenant Boucles empil&eacute;es dans antiparall&egrave;le orient&eacute; de deux plaques planes &agrave; l&#39;un de l&#39;autre. La structure est strictement amphipathique, avec une surface hydrophile sur un c&ocirc;t&eacute; et une surface de glace-liaison hydrophobe, putative de l&#39;autre. Le site de glace-liaison putatif est environ deux fois plus grand en superficie que celle de l&#39;isoforme petit, fournissant une explication de la diff&eacute;rence d&#39;activit&eacute; qui soit compatible avec d&#39;autres exemples de noter. En balisant le recombinant AFP avec la prot&eacute;ine fluorescente verte, nous avons observ&eacute; sa liaison &agrave; plans multiples de la glace, en particulier le plan de base. Ces r&eacute;sultats appuient la corr&eacute;lation entre l&#39;hyperactivit&eacute; de l&#39;AFP et liaison plan basal tout d&#39;abord observ&eacute; avec la tordeuse des bourgeons de l&#39;&eacute;pinette AFP.

Base structurelle de l&#39;activit&eacute; sup&eacute;rieure de l&#39;isoforme importante de prot&eacute;ine antigel de neige aux puces.

Der Schnee-floh (Hypogastrum Harveyi) ist gesch&uuml;tzt vor Frost am Sub-Zero Temperaturen durch ein Glycin-reiche Frostschutzmittel-Protein (AFP), das bindet an Saatgut Eiskristalle und verhindert, dass sie gr&ouml;&szlig;er wachsen. Diese AFP ist hyperaktiv und umfasst zwei Isoformen [Graham, L. A., und Davies, s. L. (2005) Wissenschaft 310, 461]. Die gr&ouml;&szlig;eren Isoform (15.7 kDa) Exponate siebenmal h&ouml;here Aktivit&auml;t als die kleineren Isoform (6,5 kDa), obgleich es erheblich weniger reichlich vorhanden ist. Um die molekulare Grundlage f&uuml;r diesen Unterschied in der Aktivit&auml;t herzustellen, haben wir die Reihenfolge der gro&szlig;en Isoform festgestellt. Die prim&auml;ren Sequenzen von diesen zwei Isoformen sind &uuml;berraschend unterschiedlich. Jedoch sowohl enthalten Sie Tripeptid Wiederholungen, und biegen Sie Motive, die uns erm&ouml;glicht ein dreidimensionales Modell der gro&szlig;en Isoform basierend auf die sechs-Polyproline-Helix-Struktur der kleinen Isoform zu bauen. Unser Modell enth&auml;lt 13 Polyproline Typ-II-Helices verbunden durch Prolin-haltigen Schleifen in zwei flache Platten orientierte Thyristoren aufeinander gestapelt. Die Struktur ist streng amphiphil, mit eine hydrophile Oberfl&auml;che auf der einen Seite und eine hydrophobe, vermeintliche Eis-Bindung-Oberfl&auml;che auf der anderen. Die vermeintliche Eis-Bindungsstelle ist etwa doppelt so gro&szlig; im Bereich wie bei der kleinen Isoform, bietet eine Erkl&auml;rung f&uuml;r den Unterschied in der Aktivit&auml;t, die konsistent mit anderen Beispielen vermerkt ist. Durch tagging der rekombinante AFP mit gr&uuml;n fluoreszierenden Proteins, beobachteten wir seine Bindung an mehrere Ebenen des Eises, besonders der basalen Ebene. Diese Erkenntnis unterst&uuml;tzt die Korrelation zwischen AFP Hyperaktivit&auml;t und basale Ebene verbindlich erstmals beobachtet mit Fichte fumiferana AFP.

Strukturelle Grundlage f&uuml;r &uuml;berlegene Aktivit&auml;t der gro&szlig;en Isoform von Schnee floh Frostschutzmittel Protein.

La pulce di neve (Hypogastrum harveyi) &egrave; protetto da congelamento a Sub-Zero temperature da una proteina ricca di glicina antigelo (AFP) che si lega ai cristalli di ghiaccio di seme e impedisce loro di crescere pi&ugrave; grande. Questo AFP &egrave; iperattivo e comprende due isoforme [Graham, L. A. e Davies, P. L. (2005) scienza 310, 461]. L&#39;isoforma pi&ugrave; grande (15,7 kDa) esibisce several-fold attivit&agrave; superiore rispetto l&#39;isoforma pi&ugrave; piccolo (6,5 kDa), anche se &egrave; considerevolmente meno abbondante. Per stabilire la base molecolare per questa differenza di attivit&agrave;, abbiamo determinato la sequenza dell&#39;isoforma grande. Le sequenze primarie di queste due isoforme sono sorprendentemente divergenti. Tuttavia, sia contenere ripetizioni tripeptide e girare i motivi che ci hanno permesso di costruire un modello tridimensionale dell&#39;isoforma grande basata la struttura elica di polyproline sei dell&#39;isoforma piccolo. Il nostro modello contiene 13 eliche di polyproline II tipo collegati da prolina contenenti anelli impilati in antiparallelo orientato due fogli piani l&#39;uno a altro. La struttura &egrave; rigorosamente amphipathic, con una superficie idrofila su un lato e una superficie di ghiaccio-associazione idrofoba, putativa da altro. Putativo sito ice-associazione &egrave; circa due volte pi&ugrave; grande in zona come quella dell&#39;isoforma piccolo, fornendo una spiegazione per la differenza di attivit&agrave; che &egrave; coerente con altri esempi osservati. Contrassegnando il ricombinante AFP con proteina fluorescente verde, abbiamo osservato l&#39;associazione a pi&ugrave; piani di ghiaccio, specialmente il piano basale. Questa scoperta supporta la correlazione tra AFP iperattivit&agrave; e associazione piano basale osservata per la prima volta con spruce budworm AFP.

Base strutturale per la superiore attivit&agrave; dell&#39;isoforma grande di proteine antigelo di neve delle pulci.

&#x96EA;&#x30CE;&#x30DF; (Hypogastrum harveyi) &#x306F;&#x96F6;&#x4E0B;&#x306E;&#x51CD;&#x7D50;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6E29;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x7A2E;&#x5B50;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x6210;&#x9577;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x5BCC;&#x3093;&#x3060;&#x4E0D;&#x51CD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; &#xFF08;AFP&#xFF09; &#x3067;&#x3002;&#x3053;&#x306E; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x3060;&#x3057;&#x3001;[&#x30B0;&#x30E9;&#x30CF;&#x30E0;&#x3001;l. a. &#x30C7;&#x30A4;&#x30F4;&#x30A3;&#x30B9;&#x3001;p. l. &#xFF08;2005 &#x5E74;&#xFF09; &#x79D1;&#x5B66; 310&#x3001;461] &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x304C;&#x88C5;&#x5099;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; (15.7 kDa) &#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; (6.5 kDa) &#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x6570;&#x500D;&#x9AD8;&#x3044;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x76E4;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x578B;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x767A;&#x6563;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; 6 &#x30DD;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x305F;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; 3&#x6B21;&#x5143;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x56DE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; 13 &#x30DD;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; II &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x7A4D;&#x307F;&#x4E0A;&#x3052;&#x4E92;&#x3044;&#x306B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5E73;&#x3089;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x6307;&#x5411;&#x9006;&#x5E73;&#x884C;&#x306B;&#x3002;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B; 1 &#x3064;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306B;&#x89AA;&#x6C34;&#x6027;&#x8868;&#x9762;&#x3068;&#x3001;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6C37;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x5E73;&#x9762;&#x3001;&#x4ED6;&#x306B;&#x4E21;&#x89AA;&#x5A92;&#x6027;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6C37;&#x7D50;&#x5408;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x7D04; 2 &#x500D;&#x3068;&#x6307;&#x6458;&#x3057;&#x305F;&#x4ED6;&#x306E;&#x4F8B;&#x3068;&#x306E;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x5C0F;&#x578B;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x500D;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; AFP &#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x3051;&#x3068;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x6C37;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x9762;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306F; AFP &#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EB;&#x30FC;&#x30B9;&#x5BFE;&#x8C61; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x304C;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x96EA;&#x30CE;&#x30DF;&#x4E0D;&#x51CD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x57FA;&#x76E4;

&#xB208; &#xBCBC;&#xB8E9; (Hypogastrum harveyi) &#xC601;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xACB0; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF4;&#xD638; &#xC528;&#xC557; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xD070; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AFP)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC628;&#xB3C4;. &#xC774; AFP &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xBA70; &#xB450; isoforms [&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC5C4;, L. A. &#xB370;&#xC774;&#xBE44;&#xC2A4;, P. L. (2005) &#xACFC;&#xD559; 310, 461] &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD070; isoform (15.7 kDa) &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB35C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xAC83;&#xC740; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC791;&#xC740; isoform (6.5 kDa) &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBA87; &#xB192;&#xC740; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xCC28;&#xC774; &#xBD84;&#xC790; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC124;&#xC815;, &#xD070; isoform &#xC21C;&#xC11C; &#xACB0;&#xC815;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; isoforms&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB294; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B8; &#xC815;&#xB3C4;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBAA8;&#xB450; tripeptide &#xBC18;&#xBCF5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; &#xC791;&#xC740; isoform&#xC758; 6 polyproline &#xB098;&#xC120; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD070; isoform&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD95;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xB97C; &#xC124;&#xC815;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378; 13 polyproline &#xC720;&#xD615; II &#xD3EC;&#xD568; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB8E8;&#xD504; &#xC11C;&#xB85C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xD50C;&#xB7AB; &#xC2DC;&#xD2B8; &#xC9C0;&#xD5A5;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; antiparallel&#xC5D0; &#xC2A4;&#xD0DD;. &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; &#xD55C;&#xCABD;&#xC5D0; &#xCE5C;&#xC218;&#xC131; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xC18C;&#xC218; &#xC131;, &#xC0C1; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD45C;&#xBA74; amphipathic. &#xC0C1; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; &#xC57D; &#xB450; &#xBC88; &#xC5B8;&#xAE09; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC608;&#xC81C;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC740; isoform&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xD070;. &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; AFP&#xC5D0; &#xD0DC;&#xADF8;&#xB97C; &#xCD94;&#xAC00;, &#xC5BC;&#xC74C;, &#xD2B9;&#xD788; &#xAE30;&#xC800; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCC3E;&#xB294; AFP &#xACFC;&#xB2E4;&#xC640; &#xAC00;&#xBB38;&#xBE44;&#xB098;&#xBB34; budworm AFP&#xC640; &#xCC98;&#xC74C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xAE30;&#xC800; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB208; &#xBCBC;&#xB8E9; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD070; isoform&#xC758; &#xB6F0;&#xC5B4;&#xB09C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC0C1; &#xAE30;&#xCD08;.

&#x6709;&#x4EBA;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x517B;&#x8001;&#x91D1;&#xFF09; &#x505C;&#x6B62;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x751F;&#x957F;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5FC5;&#x987B;&#x5C06;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5730;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x51B0;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x5438;&#x9644;&#x7684;&#x517B;&#x8001;&#x91D1;&#x4E5F;&#x5E94;&#x963B;&#x6B62;&#x51B0;&#x878D;&#x5316;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x53EA;&#x4EE5;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8FC7;&#x70ED;&#x7684;&#x51B0;&#x5728;&#x6CD5;&#x65B0;&#x793E;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4E2D;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x8FC7;&#x70ED;&#x7684;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7A33;&#x5B9A;&#x5E73;&#x8861;&#x7194;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x5C0F;&#x65F6;&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x6700;&#x5927;&#x8FC7;&#x70ED;&#x662F; 0.44 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x3002;&#x5F53;&#x7194;&#x878D;&#x5F00;&#x59CB;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8FC7;&#x70ED;&#x7684;&#x5236;&#x5EA6;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x70B9;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x8FC5;&#x901F;&#x878D;&#x5316;&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#x3002;&#x8FD9;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x7194;&#x5316;&#x6E29;&#x5EA6;&#x662F;&#x4E3A;&#x52A8;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x76F8;&#x6BD4;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x4E0E;&#x6E29;&#x548C;&#x6297;&#x51BB;&#x6D3B;&#x6027;&#x66F4;&#x660E;&#x663E;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6240;&#x5C55;&#x51FA;&#x8FC7;&#x70ED;&#x7684; AFP &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x8FDC;&#x5C0F;&#x4E8E;&#x51B7;&#x51BB;&#x6E29;&#x5EA6;&#x7684;&#x6291;&#x90C1;&#x52A0;&#x5F3A;&#x7684;&#x7194;&#x5316;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3002;&#x672C;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x8868;&#x660E;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x5438;&#x9644;&#x51B0;&#x66F2;&#x9762;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x6B64;&#x5438;&#x6536;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51B0;&#x878D;&#x5316;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x51BB;&#x7ED3;&#x5BF9;&#x4FDD;&#x62A4;&#x3002;

&#x8FC7;&#x70ED;&#x7684;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x3002;

It has been argued that for antifreeze proteins (AFPs) to stop ice crystal growth, they must irreversibly bind to the ice surface. Surface-adsorbed AFPs should also prevent ice from melting, but to date this has been demonstrated only in a qualitative manner. Here we present the first quantitative measurements of superheating of ice in AFP solutions. Superheated ice crystals were stable for hours above their equilibrium melting point, and the maximum superheating obtained was 0.44 degrees C. When melting commenced in this superheated regime, rapid melting of the crystals from a point on the surface was observed. This increase in melting temperature was more appreciable for hyperactive AFPs compared to the AFPs with moderate antifreeze activity. For each of the AFP solutions that exhibited superheating, the enhancement of the melting temperature was far smaller than the depression of the freezing temperature. The present findings clearly show that AFPs adsorb to ice surfaces as part of their mechanism of action, and this absorption leads to protection of ice against melting as well as freezing.

Superheating of ice crystals in antifreeze protein solutions.

On a fait valoir que pour les prot&eacute;ines antigel (AFPs) pour arr&ecirc;ter la croissance de cristaux de glace, ils doivent lier irr&eacute;versiblement &agrave; la surface de la glace. AFPs adsorb&eacute;s &agrave; la surface devraient &eacute;galement emp&ecirc;cher la glace provenant de la fonte, mais &agrave; ce jour, cela a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute;e seulement d&#39;une fa&ccedil;on qualitative. Nous pr&eacute;sentons les premi&egrave;res mesures quantitatives de la surchauffe de la glace dans les solutions de l&#39;AFP. Cristaux de glace surchauff&eacute;e &eacute;taient stables pendant des heures au-dessus de leur point de fusion d&#39;&eacute;quilibre, et la surchauffe maximale obtenue 0,44 degr&eacute;s C. Lorsque la fusion a commenc&eacute; dans ce r&eacute;gime surchauff&eacute;, la fonte rapide des cristaux d&#39;un point sur la surface a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e. Cette augmentation de temp&eacute;rature de fusion est plus appr&eacute;ciable pour hyperactifs AFPs par rapport &agrave; l&#39;AFPs avec activit&eacute; mod&eacute;r&eacute;e d&#39;antigel. Pour chacune des solutions AFP qui pr&eacute;sentaient la surchauffe, le renforcement de la temp&eacute;rature de fusion &eacute;tait beaucoup plus petit que la d&eacute;pression de la temp&eacute;rature de cong&eacute;lation. Les pr&eacute;sents r&eacute;sultats montrent clairement que AFPs s&#39;adsorber aux surfaces de glace dans le cadre de leur m&eacute;canisme d&#39;action, et cette absorption conduit &agrave; la protection de glace contre la fusion ainsi que gel.

Surchauffe des cristaux de glace dans les solutions de prot&eacute;ines antigel.

Es ist argumentiert worden, dass f&uuml;r Frostschutzmittel Proteine (AFPs), Eis-Kristallwachstum zu stoppen, sie an der Eisoberfl&auml;che irreversibel binden m&uuml;ssen. Oberfl&auml;che adsorbierten AFPs sollten auch verhindern, dass Eis schmilzt, aber dies bisher nur in qualitativer Weise gezeigt. Hier pr&auml;sentieren wir die ersten quantitativen Messungen der Hei&szlig;dampf Ice in AFP-L&ouml;sungen. Hei&szlig;dampf Eiskristalle waren stundenlang &uuml;ber ihren Schmelzpunkt Gleichgewicht stabil, und die maximale Hei&szlig;dampf gewonnen war 0,44 &deg; C. Wenn in diesem Hei&szlig;dampf Regime begann zu schmelzen, war die rasche Abschmelzen der Kristalle von einem Punkt auf der Oberfl&auml;che beobachtet. Dieser Anstieg der Schmelztemperatur war mehr sp&uuml;rbaren f&uuml;r hyperaktive AFPs gegen&uuml;ber der AFPs mit moderaten Frostschutzmittel Aktivit&auml;t. F&uuml;r jede der AFP-L&ouml;sungen, die ausgestellt, Hei&szlig;dampf, war die Verst&auml;rkung der die Schmelztemperatur wesentlich kleiner als der Depression in die eisige Temperatur. Die vorliegenden Ergebnisse zeigen deutlich, dass AFPs adsorbieren um Fl&auml;chen als Teil ihrer Wirkungsweise von Eis und diese Resorption zum Schutz f&uuml;hrt gegen Schmelzen sowie Einfrieren Eis.

Hei&szlig;dampf von Eiskristallen in Frostschutzmittel Proteinl&ouml;sungen.

&Egrave; stato sostenuto che per le proteine antigelo (AFPs) per fermare la crescita del cristallo di ghiaccio, deve irreversibilmente legare alla superficie del ghiaccio. Superficie adsorbita AFPs dovrebbe anche impedire ghiaccio di fusione, ma per la data &egrave; stata dimostrata solo in maniera qualitativa. Qui vi presentiamo le prime misurazioni quantitative di surriscaldamento del ghiaccio nelle soluzioni di AFP. Cristalli di ghiaccio surriscaldato sono stati stabili per ore sopra il loro punto di fusione di equilibrio, e il surriscaldamento massimo ottenuto era 0,44 gradi C. Quando ha cominciato a questo regime surriscaldato di fusione, fusione rapida dei cristalli da un punto della superficie &egrave; stata osservata. Questo aumento della temperatura di fusione &egrave; stato pi&ugrave; sensibile per AFPs iperattivo rispetto alla AFPs con attivit&agrave; moderata antigelo. Per ognuna delle soluzioni AFP che esposto il surriscaldamento, l&#39;aumento della temperatura di fusione &egrave; stato molto pi&ugrave; piccolo di depressione della temperatura di congelamento. I risultati attuali dimostrano chiaramente che AFPs adsorbire per superfici di ghiaccio come parte del loro meccanismo d&#39;azione, e questo assorbimento porta a protezione del ghiaccio contro la fusione cos&igrave; come il congelamento.

Surriscaldamento dei cristalli di ghiaccio nelle soluzioni di proteine antigelo.

&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (AFPs) &#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x505C;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x6C37;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x306B;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x5438;&#x7740;&#x3057;&#x305F; AFPs &#x3082;&#x6EB6;&#x878D;&#x304B;&#x3089;&#x6C37;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x65E5;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3060;&#x3051;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6C37;&#x306E;&#x904E;&#x71B1;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x904E;&#x71B1;&#x306E;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x304C;&#x3001;&#x5E73;&#x8861;&#x878D;&#x70B9;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x6642;&#x9593;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x6700;&#x5927;&#x53D6;&#x5F97;&#x904E;&#x71B1; 0.44 &#x5EA6;&#x304F;&#x3089;&#x3044;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30B8;&#x30FC;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x904E;&#x71B1;&#x958B;&#x59CB;&#x6EB6;&#x3051;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x7D50;&#x6676;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x878D;&#x89E3;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6EB6;&#x878D;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A; AFPs &#x306E; AFPs &#x306B;&#x4E2D;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E0D;&#x51CD;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x9577;&#x6E6F;&#x3002;&#x904E;&#x71B1;&#x5C55;&#x793A; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3054;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x6EB6;&#x878D;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306E;&#x51CD;&#x7D50;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306E;&#x3046;&#x3064;&#x75C5;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B; AFPs&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6C37;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x5438;&#x7740;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x51CD;&#x7D50;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x6C37;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E0D;&#x51CD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x5185;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x904E;&#x71B1;&#x3002;

&#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xADF8; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AFPs) &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815; &#xC131;&#xC7A5; &#xC911;&#xC9C0;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; irreversibly &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5BC;&#xC74C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC7A5; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xD45C;&#xBA74; adsorbed AFPs &#xB610;&#xD55C; &#xC6A9; &#xD574;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD574;&#xC57C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xD604;&#xC7AC;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC9C8;&#xC801; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xC99D; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD604;&#xC7AC; afp &#xD1B5;&#xC2E0; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC758; superheating&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC591;&#xC801; &#xCE21;&#xC815;. &#xACFC;&#xC5F4;&#xB41C; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD3C9;&#xD615; &#xC735; &#xC810; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xC548;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC5BB;&#xC740; &#xCD5C;&#xB300; superheating&#xB294; 0.44&#xB3C4; c. &#xB54C; &#xACFC;&#xC5F4;&#xB41C;&#xC774; &#xC815;&#xAD8C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xC2DC;, &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8;&#xC758; &#xBE60;&#xB978; &#xC6A9; &#xD574; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6A9;&#xC735; &#xC628;&#xB3C4; &#xC788;&#xB294;&#xC774; &#xC99D;&#xAC00; &#xB354; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; Afps&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; Afps&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC01; superheating &#xC804;&#xC2DC; afp &#xD1B5;&#xC2E0; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6A9;&#xC735; &#xC628;&#xB3C4; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC740; &#xB3D9;&#xACB0; &#xC628;&#xB3C4; &#xC6B0;&#xC6B8;&#xC99D; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC791;&#xC740;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; AFPs adsorb &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC77C;&#xD658;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xBA74; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC0F;&#xC774; &#xD761;&#xC218; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB3D9;&#xACB0;&#xB85C; &#xC6A9; &#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC758; &#xBCF4;&#xD638;&#xB97C; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; superheating.

Se ha argumentado que las prote&iacute;nas de anticongelante (AFP) para detener el crecimiento de cristales de hielo, debe irreversiblemente atan a la superficie de hielo. Superficie-adsorbidos AFP tambi&eacute;n debe evitar el hielo de fusi&oacute;n, pero hasta la fecha esto se ha demostrado s&oacute;lo en forma cualitativa. Aqu&iacute; presentamos las primeras medidas cuantitativas de sobrecalentamiento de hielo en las soluciones de la AFP. Cristales de hielo sobrecalentado fueron estables durante horas por encima de su punto de fusi&oacute;n de equilibrio, y el sobrecalentamiento m&aacute;xima obtenida fue de 0,44 grados cent&iacute;grados. Al derretir comenz&oacute; en este r&eacute;gimen sobrecalentado, r&aacute;pida fusi&oacute;n de los cristales de un punto de la superficie se observ&oacute;. Este aumento en la temperatura de fusi&oacute;n fue m&aacute;s apreciable para AFP hiperactivo en comparaci&oacute;n a las AFPs con actividad moderada anticongelante. Cada una de las soluciones de AFP que exhibi&oacute; el sobrecalentamiento, la mejora de la temperatura de fusi&oacute;n fue mucho m&aacute;s peque&ntilde;a que la depresi&oacute;n de la temperatura de congelaci&oacute;n. Los actuales resultados muestran claramente que AFP por adsorci&oacute;n a las superficies de hielo como parte de su mecanismo de acci&oacute;n, y esta absorci&oacute;n conduce a protecci&oacute;n de hielo contra la fusi&oacute;n, as&iacute; como de congelaci&oacute;n.

Sobrecalentamiento de cristales de hielo en soluciones de prote&iacute;nas anticongelantes.

&#x5965;&#x65AF;&#x7279;&#x74E6;&#x5C14;&#x5FB7;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EF4;&#x5EA6;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x7C97;&#x5316;&#x57DF;&#x6240;&#x5360;&#x7528;&#x7684;&#x9762;&#x79EF;&#x5206;&#x6570; phi &#x6210;&#x719F;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x6307;&#x6570;&#x7684; theta(phi)&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x3002;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E01;&#x4E8C;&#x8148;&#x548C;&#x76D0;&#x6C34;&#xFF0C;&#x6DEC;&#x706B;&#x5230;&#x5176;&#x56FA;&#x6DB2;&#x4E24;&#x76F8;&#x5171;&#x5B58;&#x533A;&#xFF0C;theta(phi) &#x7684;&#x503C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x597D;&#x4E0E;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x4FE1;&#x670D;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x73B0;&#x666E;&#x904D;&#x6027;&#x7684;&#x5355;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x6307;&#x6570;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x3002;&#x4E3A;&#x5C0F; &phi;&#xFF0C;theta(phi) &#x5927;&#x7EA6; = 0.39phi&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5047;&#x5B9A;&#x6CA1;&#x6709;&#x6F14;&#x53D8;&#x57DF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6784;&#x6210;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x6307;&#x6570;&#x5728;&#x76F8;&#x53D8;&#x4E0E;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x547D;&#x4EE4;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;

&#x5728;&#x4E8C;&#x7EF4;&#x5965;&#x65AF;&#x7279;&#x74E6;&#x5C14;&#x5FB7;&#x719F;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x6307;&#x6570;&#x7684;&#x666E;&#x904D;&#x6027;&#x3002;

We measured persistence exponents theta(phi) of Ostwald ripening in two dimensions, as a function of the area fraction phi occupied by coarsening domains. The values of theta(phi) in two systems, succinonitrile and brine, quenched to their liquid-solid coexistence region, compare well with one another, providing compelling evidence for the universality of the one-parameter family of exponents. For small phi, theta(phi) approximately = 0.39phi, as predicted by a model that assumes no correlations between evolving domains. These constitute the first measurements of persistence exponents in the case of phase transitions with a conserved order parameter.

Universality of persistence exponents in two-dimensional Ostwald ripening.

Nous avons mesur&eacute; la persistance exposants theta(phi) d&#39;Ostwald maturation en deux dimensions, en fonction de la phi de fraction de zone occup&eacute;e par le grossissement des domaines. Les valeurs de theta(phi) dans les deux syst&egrave;mes, succinonitrile et saumure, tremp&eacute; &agrave; leur r&eacute;gion de coexistence liquide-solide, comparent bien avec un de l&#39;autre, fournir des preuves convaincantes d&#39;une universalit&eacute; de la famille d&#39;un param&egrave;tre d&#39;exposants. Pour la petite phi, theta(phi) = environ 0.39phi, tel que pr&eacute;dit par un mod&egrave;le qui n&#39;assume pas de corr&eacute;lations entre des domaines en constante &eacute;volution. Ceux-ci constituent les premi&egrave;res mesures des exposants de la persistance dans le cas des transitions de phase avec un param&egrave;tre d&#39;ordre conserv&eacute;.

Universalit&eacute; des exposants de la persistance &agrave; Ostwald bidimensionnelle de maturation.

Wir messen die Persistenz Exponenten theta(phi) von Ostwald, die Reifung in zwei Dimensionen, als Funktion der Bereich Bruchteil Phi von unp&auml;dagogisch Dom&auml;nen besetzt. Die Werte der theta(phi) in zwei Systeme, Succinonitrile und Salzlake, gestillt zu ihrer fl&uuml;ssigen und festen Koexistenz-Region, vergleichen Sie gut miteinander, die zwingende Beweise f&uuml;r die Universalit&auml;t der Einparameter-Familie von Exponenten. F&uuml;r kleine Phi theta(phi) = ca. 0.39phi, nach der ein Modell, das keine Korrelationen zwischen den sich entwickelnden Dom&auml;nen &uuml;bernimmt. Sie bilden die ersten Messungen der Persistenz Exponenten bei Phasen&uuml;berg&auml;ngen mit einem konservierten Reihenfolge-Parameter.

Universalit&auml;t der Persistenz-Exponenten in zweidimensionalen Ostwald-Reifung.

Abbiamo misurato la persistenza theta(phi) esponenti di maturazione in due dimensioni, come una funzione del phi frazione zona occupata dai domini coarsening di Ostwald. I valori di theta(phi) in due sistemi, succinonitrile e salamoia, temprati alla loro regione di coesistenza liquido-solido, confrontare bene uno con l&#39;altro, fornire prove convincenti per l&#39;universalit&agrave; della famiglia un parametro di esponenti. Per piccola phi, theta(phi) = circa 0.39phi, come predetto da un modello che non si assume nessuna correlazione tra domini in continua evoluzione. Questi costituiscono le prime misurazioni degli esponenti di persistenza nel caso di transizioni di fase con un parametro di ordine conservato.

Universalit&agrave; di esponenti di persistenza nella maturazione di Ostwald bidimensionale.

&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x6307;&#x6570; theta(phi) &#x306E;&#x7C97;&#x5927;&#x5316;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5360;&#x9818;&#x5730;&#x57DF;&#x5206;&#x6570;&#x30D4;&#x30D4;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30AA;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EF;&#x30EB;&#x30C9;&#x6210;&#x9577; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5BF8;&#x6CD5;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B5;&#x30AF;&#x30B7;&#x30CE;&#x30CB; &#x30C8;&#x30EA;&#x30EB;&#x3001;&#x713C;&#x5165;&#x308C;&#x306E;&#x56FA;&#x6DB2;&#x5171;&#x5B58;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5869;&#x6C34;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067; theta(phi) &#x306E;&#x5024;&#x3092; 1 &#x3064;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092; 1 &#x3064;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x6307;&#x6570;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x6027;&#x306E;&#x8AAC;&#x5F97;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3088;&#x304F;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5CF6;&#x306E; theta(phi) &#x7D04; 0.39phi &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9032;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8CA0;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3092; =&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x6307;&#x6570;&#x76F8;&#x8EE2;&#x79FB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x9806;&#x5E8F;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

2&#x6B21;&#x5143;&#x30AA;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EF;&#x30EB;&#x30C9;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x6027;&#x6307;&#x6570;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x6027;

&#xC9C0; &#xC18D;&#xC131; &#xC9C0; &#xC218; theta(phi) &#xC624; &#xC2A4; &#xD2B8; &#xBC1C;&#xD2B8; coarsening &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC810;&#xB839; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBD84;&#xC218; &#xD53C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; 2 &#xCC28;&#xC6D0;, &#xC219;&#xC131;&#xC758; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;, succinonitrile &#xBC0F; &#xC18C;&#xAE08;&#xBB3C;, &#xC561;&#xCCB4;-&#xACE0;&#xCCB4; &#xACF5;&#xC874; &#xC601;&#xC5ED; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCE68;&#xBB35;&#xC5D0;&#xC11C; theta(phi)&#xC758; &#xAC12;&#xC744; &#xC9C0; &#xC218;&#xC5D0;&#xC758; &#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC11C;&#xB85C;&#xC640; &#xC798; &#xBE44;&#xAD50;. &#xC791;&#xC740; &#xD53C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; theta(phi) &#xC57D; = 0.39phi &#xC9C4;&#xD654; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xAC00;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC608;&#xCE21;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xC804;&#xC774; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC21C;&#xC11C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131; &#xC9C0; &#xC218;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xAD6C;&#xC131;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC624; &#xC2A4; &#xD2B8; &#xBC1C;&#xD2B8; &#xC219;&#xC131;&#xC5D0; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131; &#xC9C0; &#xC218;&#xC758; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC131;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Se evalu&oacute; la persistencia exponentes theta(phi) de Ostwald maduraci&oacute;n en dos dimensiones, en funci&oacute;n de la phi de la fracci&oacute;n de &aacute;rea ocupada por dominios antieducativo. Los valores de theta(phi) en dos sistemas, succinonitrile y salmuera, apagada a su regi&oacute;n de coexistencia l&iacute;quido-l&iacute;quido-s&oacute;lido, comparan bien uno con el otro, proporcionando evidencia convincente para la universalidad de la familia de un par&aacute;metro de exponentes. Para peque&ntilde;o phi, theta(phi) = aproximadamente 0.39phi, como un modelo que asume que no hay correlaciones entre dominios de evoluci&oacute;n. Estos constituyen las primeras medidas de exponentes de la persistencia en el caso de las transiciones de fase con un par&aacute;metro de orden conservado.

Universalidad de exponentes de la persistencia de Ostwald bidimensional de maduraci&oacute;n.

&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D; (AFP) &#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7684;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#xFF0C;&#x538B;&#x4F4E;&#x9C7C;&#x51DD;&#x56FA;&#x70B9;&#x4F4E;&#x4E8E;&#x51BB;&#x7ED3;&#x6D77;&#x6C34;&#x7684;&#x9C9C;&#x8840;&#x3002;&#x8FD9; 7 kDa &#x7403;&#x72B6;&#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;SP &#x548C; QAE&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x7684; 55%&#x3002;&#x7834;&#x574F;&#x6027;&#x7A81;&#x53D8;&#x51B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E0A;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x6CD5;&#x65B0;&#x793E;&#x6297;&#x51BB;&#x6D3B;&#x6027;&#x8F83;&#x4F4E;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6539;&#x53D8;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5C06;&#x9644;&#x52A0;&#x5230;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x548C;&#x4E9A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x901A;&#x8FC7;&#x68C0;&#x67E5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5355;&#x4E2A;&#x6676;&#x4F53;&#x51B0;&#x534A;&#x7403;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x7532;&#x80CE;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x51B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x5728; 150 &deg; &#x5230;&#x5BF9;&#x65B9;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x76F8;&#x90BB;&#xFF0C;&#x5730;&#x52BF;&#x5E73;&#x5766;&#xFF0C;&#x51B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x66F2;&#x9762;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E3B;&#x68F1;&#x955C;&#x5E73;&#x9762;&#x7684;&#x51B0; &#xFF1B;&#x53E6;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91D1;&#x5B57;&#x5854;&#x5F62;&#x7684;&#x5E73;&#x9762;&#x3002;&#x5728;&#x540E;&#x8005;&#x7684;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4F4D;&#x963B;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4F38;&#x957F;&#x7684;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x68F1;&#x955C;&#x5E73;&#x9762;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6210;&#x4E3A;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x3002;SP &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x81EA;&#x7136;&#x6709;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x51B0;&#x7684;&#x68F1;&#x955C;&#x5E73;&#x9762;&#x5927;&#x5927;&#x964D;&#x4F4E;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8BA9;&#x66F4;&#x591A;&#x7684; QAE &#x7684; SP &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;-&#x50CF;&#x51B0;&#x589E;&#x957F;&#x901F;&#x5EA6;&#x51CF;&#x6162;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x5B9A;&#x5176;&#x4ED6;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x6025;&#x6027;&#x5F1B;&#x7F13;&#x6027;&#x9EBB;&#x75F9;&#x8FD8;&#x5177;&#x6709;&#x590D;&#x5408;&#x51B0;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5B83;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x591A;&#x4E2A;&#x5E73;&#x9762;&#x7684;&#x51B0;&#x3002;

&#x590D;&#x5408;&#x8BF1;&#x53D8;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x663E;&#x793A;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D;&#x51B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;

By binding to the surface of ice crystals, type III antifreeze protein (AFP) can depress the freezing point of fish blood to below that of freezing seawater. This 7-kDa globular protein is encoded by a multigene family that produces two major isoforms, SP and QAE, which are 55% identical. Disruptive mutations on the ice-binding site of type III AFP lower antifreeze activity but can also change ice crystal morphology. By attaching green fluorescent protein to different mutants and isoforms and by examining the binding of these fusion proteins to single-crystal ice hemispheres, we show that type III AFP has a compound ice-binding site. There are two adjacent, flat, ice-binding surfaces at 150Â° to each other. One binds the primary prism plane of ice; the other, a pyramidal plane. Steric mutations on the latter surface cause elongation of the ice crystal as primary prism plane binding becomes dominant. SP isoforms naturally have a greatly reduced ability to bind the prism planes of ice. Mutations that make the SP isoforms more QAE-like slow down the rate of ice growth. On the basis of these observations we postulate that other types of AFP also have compound ice-binding sites that enable them to bind to multiple planes of ice.

Compound ice-binding site of an antifreeze protein revealed by mutagenesis and fluorescent tagging.

En se liant &agrave; la surface des cristaux de glace, type prot&eacute;ine antigel III (AFP) peut appuyer sur le point de cong&eacute;lation du poisson pour le sang inf&eacute;rieur &agrave; celui de la cong&eacute;lation de l&#39;eau de mer. Cette prot&eacute;ine globulaire 7 kDa est cod&eacute;e par une famille multig&eacute;nique qui produit deux isoformes majeurs, SP et QAE, qui sont identiques &agrave; 55 %. Des mutations perturbateurs sur le site de glace-liaison de type III AFP abaisser l&#39;activit&eacute; antigel, mais peuvent aussi changement de morphologie des cristaux glace. En attachant la prot&eacute;ine fluorescente verte &agrave; diff&eacute;rents mutants et les isoformes et en examinant la liaison de ces prot&eacute;ines de fusion d&#39;h&eacute;misph&egrave;res de monocristaux de glace, nous montrons que le type III AFP a un site compos&eacute; de glace-liaison. Il y a deux surfaces adjacentes, plats, glace-liaison &agrave; 150 &deg; les uns aux autres. On lie le plan primaire prisme de glace ; l&#39;autre, un plan pyramidal. St&eacute;riques mutations sur la surface de ce dernier cause allongement d&#39;un cristal de glace comme liaison avion prisme primaire devient dominante. SP isoformes ont naturellement une capacit&eacute; tr&egrave;s r&eacute;duite pour lier les plans de prisme de glace. Des mutations qui rendent les isoformes de SP plus QAE-que ralentir le taux de croissance de la glace. Sur la base de ces observations, nous postulons que les autres types de l&#39;AFP ont &eacute;galement compos&eacute;s sites de liaison de glace qui leur permettent de se lier &agrave; des plans multiples de la glace.

Compos&eacute; de glace-accepteur d&#39;une prot&eacute;ine antigel r&eacute;v&eacute;l&eacute;e par mutagen&egrave;se et marquage fluorescent.

Durch Bindung an die Oberfl&auml;che von Eiskristallen, Typ III Frostschutzmittel Protein (AFP) kann den Gefrierpunkt Fische dr&uuml;cken Blut bis unter dem Gefrierpunkt Meerwasser. Diese kugelige 7-kDa-Protein wird von einer multigene Familie kodiert, das produziert zwei gro&szlig;e Isoformen, SP und QAE, die 55 % identisch sind. Disruptive Mutationen auf die Eis-Bindungsstelle des Typs III AFP Frostschutzmittel Aktivit&auml;t senken k&ouml;nnen aber auch &Auml;nderung Eis Kristall Morphologie. Durch Anf&uuml;gen des gr&uuml;n fluoreszierenden Proteins zu verschiedenen Mutanten und Isoformen und untersuchen die Bindung des diese Schmelzverfahrensproteine zu Einzel-Kristall Eis Hemisph&auml;ren zeigen wir, dass Typ III AFP eine zusammengesetzte Eis-Bindungsstelle. Es gibt zwei angrenzende, flache, Eis-Bindung Oberfl&auml;chen bei 150 &deg; zueinander. Man bindet das prim&auml;re Prism-Flugzeug von Eis; andererseits ein pyramidaler Flugzeug. Sterische Mutationen auf der letzteren Oberfl&auml;che bewirken Dehnung der Eiskristall als prim&auml;re Prism Flugzeug Bindung dominant wird. SP haben Isoformen nat&uuml;rlich eine stark reduzierte F&auml;higkeit, die Prisma-Flugzeuge des Eises zu binden. Mutationen, die den SP-Isoformen weitere QAE machen-wie die Wachstumsrate Eis verlangsamen. Auf der Grundlage dieser Beobachtungen postulieren wir, dass andere Arten von AFP auch zusammengesetzte Eis-Bindungsstellen, die erm&ouml;glichen, auf mehrere Ebenen des Eises zu binden.

Zusammengesetzte Eis-Bindungsstelle eines Frostschutzmittel-Proteins durch Mutagenese und fluoreszierende tagging aufgedeckt.

Legandosi alla superficie dei cristalli di ghiaccio, III antigelo proteina (AFP) tipo pu&ograve; deprimere il punto di congelamento del pesce sangue a inferiore a quella di congelamento dell&#39;acqua di mare. Questa proteina globulare 7-kDa &egrave; codificata da una famiglia di multigene che produce due isoforme principali, SP e QAE, che sono identiche al 55%. Mutazioni dirompente sul sito ice-associazione di tipo III AFP abbassare antigelo attivit&agrave; ma possono anche cambiare ghiaccio cristallo morfologia. Collegando la proteina fluorescente verde a diversi mutanti e isoforme ed esaminando l&#39;associazione di queste proteine di fusione di emisferi del singolo-cristallo di ghiaccio, mostriamo che tipo III AFP ha un sito composto di ghiaccio-associazione. Ci sono due superfici adiacenti, piatte e ghiaccio-associazione a 150 &deg; a vicenda. Uno si lega l&#39;aereo primario prisma di ghiaccio; l&#39;altro, un aereo piramidale. Mutazioni sterica sulla superficie di quest&#39;ultima causa allungamento del cristallo di ghiaccio come associazione aereo primario prisma diventa dominante. SP isoforme hanno naturalmente una notevolmente ridotta capacit&agrave; di legare i piani del prisma di ghiaccio. Le mutazioni che rendono le isoforme SP pi&ugrave; QAE-come rallentare il tasso di crescita del ghiaccio. Sulla base di queste osservazioni abbiamo postulato che altri tipi di AFP hanno anche composti ghiaccio-associazione siti che consentano loro di associare a piani multipli di ghiaccio.

Composti di ghiaccio-associazione sito di una proteina di antigelo rivelata da mutagenesi e tagging fluorescente.

&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x8868;&#x9762;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x4E0D;&#x51CD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; &#xFF08;AFP&#xFF09; &#x306F;&#x9B5A;&#x306E;&#x51DD;&#x56FA;&#x70B9;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x306B;&#x8840;&#x6DB2;&#x3092;&#x6D77;&#x6C34;&#x306E;&#x51CD;&#x7D50;&#x306E;&#x4E0B;&#x3002;&#x3053;&#x306E; 7 kDa &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;SP &#x3068;&#x304B;&#x3089;&#x3001;55 &#xFF05; &#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x591A;&#x91CD;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x65CF;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6C37;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x7834;&#x58CA;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x578B; III AFP &#x306E;&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x4E0B;&#x3052;&#x3066;&#x3001;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3082;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x30A2;&#x30BF;&#x30C3;&#x30C1;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5358;&#x7D50;&#x6676;&#x6C37;&#x306E;&#x534A;&#x7403;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x306E; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x306F;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x6C37;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;150 &deg; &#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x6C37;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;1 &#x3064;&#x6C37;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x9762;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x30D4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x578B;&#x306E;&#x5E73;&#x9762;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x9762;&#x7D50;&#x5408;&#x304C;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x7ACB;&#x4F53;&#x5909;&#x7570;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SP &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x5F53;&#x7136;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x6C37;&#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x9762;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SP &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x304B;&#x3089;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;-&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x6C37;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x9045;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x4ED6;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x306B;&#x3082;&#x6C37;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x9762;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x6C37;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x3051;&#x4E0D;&#x51CD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6C37;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xD615;&#xC2DD; III &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AFP) &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC758; &#xB3D9;&#xACB0; &#xC9C0;&#xC810;&#xC744; &#xC6B0;&#xC6B8; &#xC218; &#xC5B4;&#xB294; &#xD574; &#xC218;&#xC758; &#xC544;&#xB798;&#xB97C; &#xD608;&#xC561;. 7-KDa &#xAD6C;&#xD615; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; SP&#xC640; QAE, 55% &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; isoforms multigene &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xD615; III AFP&#xC758; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD63C;&#xB780;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB0AE;&#xC740; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC5BC;&#xC74C; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xD615;&#xD0DC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xB2E4;&#xB978; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; isoforms&#xB97C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC18;&#xAD6C;&#xC774; &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD615;&#xC2DD; III AFP &#xBCF5;&#xD569; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC11C;&#xB85C; &#xAC8C; 150 &deg; &#xB450; &#xC778;&#xC811; &#xD3C9;&#xBA74;, &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD45C;&#xBA74; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xC5BC;&#xC74C;; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD504;&#xB9AC;&#xC998; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD53C;&#xB77C;&#xBBF8;&#xB4DC; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC785;&#xCCB4;&#xC801; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC8FC; &#xD504;&#xB9AC;&#xC998; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC9C0;&#xBC30; &#xB418;&#xBA74;&#xC11C; &#xC5BC;&#xC74C; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8;&#xC758; &#xC5F0;&#xC2E0; &#xC728; &#xBC1C;&#xC0DD;. SP isoforms&#xB294; &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC758; &#xD504;&#xB9AC;&#xC998; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; QAE SP isoforms &#xD558; &#xAC8C; &#xBCC0;&#xC774;-&#xC5BC;&#xC74C; &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB290;&#xB9AC;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xCC98;&#xB7FC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21;&#xC5D0; &#xADFC;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; AFP&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615; &#xB610;&#xD55C; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xD569; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; &#xACF5;&#xC900;.

&#xC5BC;&#xC74C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; mutagenesis &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD615;&#xAD11;&#xC5D0; &#xD0DC;&#xADF8;&#xB97C; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xAC1C; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBCF5;&#xD569;.

Atando a la superficie de los cristales de hielo, tipo prote&iacute;na de anticongelante III (AFP) puede deprimir el punto de congelaci&oacute;n de pescado a la sangre por debajo de la de congelaci&oacute;n de agua de mar. Esta prote&iacute;na globular 7-kDa est&aacute; codificada por una familia multig&eacute;nica que produce dos isoformas principales, SP y QAE, que son 55% id&eacute;nticos. Mutaciones perjudiciales en el sitio de enlace de hielo de tipo III AFP bajar actividad anticongelante pero pueden tambi&eacute;n cambio hielo cristal morfolog&iacute;a. Uniendo la prote&iacute;na verde fluorescente y mutantes diferentes isoformas y examinando la Uni&oacute;n de estas prote&iacute;nas de fusi&oacute;n a hemisferios hielo Monocristal, mostramos que tipo III AFP tiene un sitio compuesto de hielo-obligatorio. Hay dos superficies adyacentes, planas, hielo-enlace a 150 &deg; entre s&iacute;. Uno une el plano principal prisma de hielo; el otro, un avi&oacute;n piramidal. Est&eacute;rica mutaciones en la superficie de este &uacute;ltima causa elongaci&oacute;n del cristal hielo como enlace de plano prisma primaria llega a ser dominante. SP isoformas naturalmente tienen una capacidad muy reducida para enlazar los planos de la prisma de hielo. Las mutaciones que hacen las isoformas SP m&aacute;s QAE-como disminuir la tasa de crecimiento de hielo. Sobre la base de estas observaciones postulamos que otros tipos de AFP tambi&eacute;n tienen sitios compuestos de hielo-Uni&oacute;n que permitan vincular a m&uacute;ltiples planos de hielo.

Compuesto de sitio de hielo-Uni&oacute;n de una prote&iacute;na anticongelante revelada por mutag&eacute;nesis y etiquetado fluorescente.

&#x9ED1;&#x9EA6;&#x8349;&#x751F;&#x4EA7;&#x51B0;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (LpIBP)&#xFF0C;&#x53EF;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x518D;&#x7ED3;&#x6676;&#x7684;&#x51B0;&#x5BB9;&#x5FCD;&#x51BB;&#x7ED3;&#x8FD9;&#x5E38;&#x5E74;&#x5E2E;&#x52A9;&#x3002;&#x51B0;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (IBPs) &#x4E5F;&#x7531;&#x51BB;&#x7ED3;&#x907F;&#x514D;&#x4EA7;&#x751F;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5236;&#x6B62;&#x51B0;&#x548C;&#x6709;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x79F0;&#x4E3A;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x517B;&#x8001;&#x91D1;&#xFF09; &#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x68C0;&#x67E5;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD; IBP &#x7C7B;&#x578B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x57FA;&#x7840;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89E3;&#x51B3;&#x4E86;&#x690D;&#x7269; IBP &#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;118 &#x6B8B;&#x7559; LpIBP &#x6298;&#x53E0;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x65B0;&#x578B;&#x5DE6;&#x624B; beta &#x7248;&#x8F8A;&#x4E0E;&#x516B; 14 &#x6216; 15 &#x6B8B;&#x7559;&#x7EBF;&#x5708;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6838;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5185;&#x90E8; Asn &#x68AF;&#x5B50;&#x3002;&#x51B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9; (IBS) &#x662F;&#x7531; &beta;-&#x5E73;&#x677F;&#x7684; beta &#x7248;&#x8F8A;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; LpIBP &#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x51B0;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x52A8;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x7684;&#x6807;&#x5FD7;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x548C;&#x5C0F;&#x5B66;&#x68F1;&#x955C;&#x5E73;&#x9762;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x5C11;&#x4E8E; 10%&#x7684;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x52A8;&#x517B;&#x8001;&#x91D1; convergently &#x8FDB;&#x5316;&#x7684; beta &#x7535;&#x78C1;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E;&#x8861;&#x91CF;&#x9632;&#x51BB;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; LpIBP&#x3002;&#x800C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x52A8;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x5BF9;&#x5176; IBS &#x6709;&#x4E24;&#x884C;&#x5BF9;&#x9F50;&#x82CF;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x91CF;&#xFF0C;LpIBP &#x4E2D;&#x7684;&#x7B49;&#x6548;&#x9635;&#x5217;&#x662F;&#x7531;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4FA7;&#x94FE;&#x6784;&#x8C61;&#x4E0E;&#x82CF;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; Ser &#x548C; Val &#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x8FDB;&#x884C;&#x586B;&#x5145;&#x3002;&#x66FF;&#x4EE3; Ser &#x6216;&#x4E3A;&#x82CF;&#x6C28;&#x9178;&#x4E0A;&#x52A8;&#x7532;&#x80CE;&#x86CB;&#x767D; IBS Val &#x7684;&#x9632;&#x51BB;&#x5242;&#x6D3B;&#x52A8;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;LpIBP &#x53EF;&#x80FD;&#x9010;&#x6E10; IBS &#x5177;&#x6709;&#x4F4E;&#x6297;&#x51BB;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x907F;&#x514D;&#x635F;&#x5BB3;&#x7684;&#x53D1;&#x751F;&#x65F6;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8D85;&#x8FC7;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x963B;&#x6B62;&#x51B0;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4FDD;&#x7559;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x51B0;&#x518D;&#x7ED3;&#x6676;&#x7684;&#x51B0;&#x5757;&#x8FC5;&#x901F;&#x589E;&#x957F;&#x3002;

&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8010;&#x51BB;&#x8349;&#x5DF2;&#x6298;&#x53E0;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x89C4;&#x5219;&#x7ED3;&#x6784;&#x5316;&#x51B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7248;&#x8F8A;&#x3002;

The grass Lolium perenne produces an ice-binding protein (LpIBP) that helps this perennial tolerate freezing by inhibiting the recrystallization of ice. Ice-binding proteins (IBPs) are also produced by freeze-avoiding organisms to halt the growth of ice and are better known as antifreeze proteins (AFPs). To examine the structural basis for the different roles of these two IBP types, we have solved the first crystal structure of a plant IBP. The 118-residue LpIBP folds as a novel left-handed beta-roll with eight 14- or 15-residue coils and is stabilized by a small hydrophobic core and two internal Asn ladders. The ice-binding site (IBS) is formed by a flat beta-sheet on one surface of the beta-roll. We show that LpIBP binds to both the basal and primary-prism planes of ice, which is the hallmark of hyperactive AFPs. However, the antifreeze activity of LpIBP is less than 10% of that measured for those hyperactive AFPs with convergently evolved beta-solenoid structures. Whereas these hyperactive AFPs have two rows of aligned Thr residues on their IBS, the equivalent arrays in LpIBP are populated by a mixture of Thr, Ser and Val with several side-chain conformations. Substitution of Ser or Val for Thr on the IBS of a hyperactive AFP reduced its antifreeze activity. LpIBP may have evolved an IBS that has low antifreeze activity to avoid damage from rapid ice growth that occurs when temperatures exceed the capacity of AFPs to block ice growth while retaining the ability to inhibit ice recrystallization.

Antifreeze protein from freeze-tolerant grass has a beta-roll fold with an irregularly structured ice-binding site.

L&#39;herbe Lolium perenne produit une prot&eacute;ine de liaison de glace (LpIBP) qui aide cette vivace supporte la cong&eacute;lation en inhibant la recristallisation de la glace. Prot&eacute;ines liant la glace (&eacute;quivalents) sont &eacute;galement produites en &eacute;vitant les gel organismes d&#39;arr&ecirc;ter la croissance de la glace et sont mieux connus comme prot&eacute;ines antigel (AFP). Pour examiner la base structurale pour les diff&eacute;rents r&ocirc;les de ces deux types de l&#39;IBP, nous avons r&eacute;solu la premi&egrave;re structure cristalline d&#39;une usine d&#39;IBP. Le LpIBP 118-r&eacute;sidu se plie comme un roman Gaucher b&ecirc;ta-rouleau avec huit bobines de 14 ou 15-r&eacute;sidus et est stabilis&eacute; par un petit noyau hydrophobe et deux &eacute;chelles de Asn internes. Le site de liaison de glace (IBS) est form&eacute; par un b&ecirc;ta-drap plat sur une surface de la b&ecirc;ta-roll. Nous montrons que les LpIBP se lie aux deux plans basales et primaire-prisme de glace, qui est la marque distinctive des Pag hyperactif. Toutefois, l&#39;activit&eacute; de l&#39;antigel de LpIBP est inf&eacute;rieur &agrave; 10 % de celle mesur&eacute;e pour les AFPs hyperactifs avec des structures de b&ecirc;ta-sol&eacute;no&iuml;de convergente &eacute;volu&eacute;e. Consid&eacute;rant que ces hyperactifs AFPs ont deux rang&eacute;es de r&eacute;sidus de Thr align&eacute;es sur leur IBS, les ensembles &eacute;quivalentes dans LpIBP sont remplis par un m&eacute;lange de Thr, Ser et Val avec plusieurs conformations de la cha&icirc;ne lat&eacute;rale. Substitution de Ser ou Val pour Thr sur l&#39;IBS d&#39;un hyperactif AFP r&eacute;duit son activit&eacute; d&#39;antigel. Une SCI qui a une activit&eacute; faible antigel pour &eacute;viter les dommages caus&eacute;s par la croissance rapide de glace qui se produit lorsque la temp&eacute;rature d&eacute;passe la capacit&eacute; des AFPs pour bloquer la croissance de la glace tout en conservant la capacit&eacute; d&#39;inhiber la recristallisation de glace pourraient avoir &eacute;volu&eacute; &agrave; LpIBP.

Prot&eacute;ine antigel de gel-tol&eacute;rant herbe a un b&ecirc;ta-rouleau plier avec un site de liaison de glace irr&eacute;guli&egrave;rement structur&eacute;.

&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D; (&#x517B;&#x8001;&#x91D1;) &#x6F14;&#x53D8;&#x4E2D;&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x5BD2;&#x51B7;&#x7684;&#x6C14;&#x5019;&#x4E2D;&#x751F;&#x5B58;&#x4E0B;&#x6765;&#x3002;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x4E0E;&#x51B0;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x4EA4;&#x4E92;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x6F5C;&#x5728;&#x5E94;&#x7528;&#x5728;&#x519C;&#x4E1A;&#x3001; &#x98DF;&#x54C1;&#x4FDD;&#x9C9C;&#x548C;&#x533B;&#x5B66;&#x3002;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x63A7;&#x5236;&#x5728;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; AFP &#x7C7B;&#x578B;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7279;&#x70B9;&#x7684;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x5F62;&#x72B6;&#x3002;&#x9002;&#x5EA6;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EC6;&#x957F;&#x7684; bipyramidal &#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x5F80;&#x5F80;&#x4E0E;&#x770B;&#x4F3C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x52A8;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x5236;&#x4F5C;&#x66F4;&#x591A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x5F62;&#x72B6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x88AB;&#x666E;&#x904D;&#x89C6;&#x4E3A;&#x589E;&#x957F;&#x5F62;&#x72B6;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x660E;&#x4EAE;&#x7684;&#x5149;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x89C2;&#x6D4B;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x5728;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x517B;&#x8001;&#x91D1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F;&#x878D;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x6700;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x7684;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x7684;&#x7279;&#x8272;&#x51B0;&#x5F62;&#x72B6;&#x662F;&#x878D;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D89;&#x53CA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x5BF9;&#x52A8;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x4E3A;&#x51B0;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x5BC6;&#x5207;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4EB2;&#x548C;&#x57FA;&#x5E95;&#x5E73;&#x9762;&#x4E0E;&#x591A;&#x52A8;&#x75C7;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#xFF0C;&#x51B0;&#x5851;&#x9020;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6700;&#x6E29;&#x548C;&#x3001; &#x6700;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x7684;&#x517B;&#x8001;&#x91D1;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x52A8;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x9274;&#x5B9A;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;

&#x51B0;&#x7684;&#x65B0;&#x89C1;&#x89E3;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x7194;&#x5316;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

Antifreeze proteins (AFPs) evolved in many organisms, allowing them to survive in cold climates by controlling ice crystal growth. The specific interactions of AFPs with ice determine their potential applications in agriculture, food preservation and medicine. AFPs control the shapes of ice crystals in a manner characteristic of the particular AFP type. Moderately active AFPs cause the formation of elongated bipyramidal crystals, often with seemingly defined facets, while hyperactive AFPs produce more varied crystal shapes. These different morphologies are generally considered to be growth shapes. In a series of bright light and fluorescent microscopy observations of ice crystals in solutions containing different AFPs, we show that crystal shaping also occurs during melting. In particular, the characteristic ice shapes observed in solutions of most hyperactive AFPs are formed during melting. We relate these findings to the affinities of the hyperactive AFPs for the basal plane of ice. Our results demonstrate the relation between basal plane affinity and hyperactivity and show a clear difference in the ice-shaping mechanisms of most moderate and hyperactive AFPs. This study provides key aspects associated with the identification of hyperactive AFPs.

New insights into ice growth and melting modifications by antifreeze proteins.

Prot&eacute;ines antigel (AFP) a &eacute;volu&eacute; dans de nombreux organismes, ce qui leur permet de survivre dans des climats froids, en contr&ocirc;lant la croissance de cristaux de glace. Les interactions sp&eacute;cifiques des AFPs avec glace d&eacute;terminent leurs applications potentielles dans l&#39;agriculture, de la conservation des aliments et de m&eacute;decine. AFP contr&ocirc;le la forme des cristaux de glace dans une caract&eacute;ristique de la mani&egrave;re du type AFP particulier. AFPs mod&eacute;r&eacute;ment actifs provoquent la formation de cristaux de forme allong&eacute;e bipyramidale, souvent avec des facettes apparemment d&eacute;finies, tandis que AFPs hyperactifs produisent des formes plus vari&eacute;es de cristal. Ces diff&eacute;rentes morphologies sont consid&eacute;r&eacute;es &ecirc;tre des formes de croissance. Dans une s&eacute;rie d&#39;observations de la microscopie lumineux et fluorescent lumineux de cristaux de glace dans des solutions contenant diff&eacute;rentes AFPs, nous montrons que le cristal mise en forme se produit &eacute;galement au cours de la fusion. En particulier, les formes de glace caract&eacute;ristique observ&eacute;es dans des solutions d&#39;AFPs plus hyperactifs sont form&eacute;s durant la fusion. Nous relions ces conclusions pour les affinit&eacute;s des AFP hyperactif pour le plan de base de la glace. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent la relation entre l&#39;affinit&eacute; de plan basal et hyperactivit&eacute; et montrent une nette diff&eacute;rence dans les m&eacute;canismes de glace-fa&ccedil;onnage des AFPs plus mod&eacute;r&eacute;es et hyperactifs. Cette &eacute;tude fournit les principaux aspects li&eacute;s &agrave; l&#39;identification des AFPs hyperactifs.

Nouvelles perspectives sur la glace la croissance et la fusion des modifications par des prot&eacute;ines antigel.

Frostschutzmittel Proteine (AFPs) entwickelte sich in vielen Organismen, so dass sie in den kalten Klimata durch die Kontrolle der Eis-Kristallwachstum zu &uuml;berleben. Die spezifischen Wechselwirkungen von AFPs mit Eis bestimmen ihre Einsatzm&ouml;glichkeiten in Landwirtschaft, Lebensmittel-Konservierung und Medizin. AFPs steuern die Formen von Eiskristallen in einem charakteristischen Art und Weise des speziellen AFP. M&auml;&szlig;ig aktiv AFPs verursachen die Bildung von l&auml;nglichen bipyramidaler Kristalle, oft mit scheinbar definierten Facetten, w&auml;hrend hyperaktive AFPs vielf&auml;ltigere Kristall Formen produzieren. Diese verschiedenen Morphologien gelten im Allgemeinen als Wachstum Formen. In einer Reihe von hellen Licht und Fluoreszenz-Mikroskopie-Beobachtungen von Eiskristallen in L&ouml;sungen mit verschiedenen AFPs, wir zeigen, dass Kristall tritt Gestaltung auch w&auml;hrend schmelzen. Insbesondere sind die charakteristischen Eis-Formen beobachtet in L&ouml;sungen der meisten hyperaktiven AFPs w&auml;hrend schmelzen gebildet. Wir beziehen diese Erkenntnisse auf die Affinit&auml;ten des hyperaktiven AFPs f&uuml;r die basale Ebene des Eises. Unsere Ergebnisse zeigen das Verh&auml;ltnis zwischen basalen Ebene Affinit&auml;t und Hyperaktivit&auml;t und zeigen einen deutlichen Unterschied in der Eis-shaping Mechanismen der meisten gem&auml;&szlig;igten und hyperaktiven AFPs. Diese Studie liefert wichtige Aspekte, die die Identifizierung des hyperaktiven AFPs zugeordnet.

Neue Einblicke in Eis Wachstum und schmelzen Modifikationen durch Frostschutzmittel Proteine.

Proteine antigelo (AFPs) si &egrave; evoluta in molti organismi, permettendo loro di sopravvivere in climi freddi controllando la crescita del cristallo di ghiaccio. Le interazioni specifiche dell&#39;AFPs con ghiaccio determinano loro potenziali applicazioni in agricoltura, medicina e conservazione degli alimenti. AFPs controllare le forme dei cristalli di ghiaccio in un caratteristico modo del particolare tipo di AFP. AFPs moderatamente attivi causano la formazione di cristalli di bipiramide allungata, spesso con sfaccettature apparentemente definite, mentre iperattivo AFPs producono pi&ugrave; svariate forme di cristallo. Queste morfologie differenti sono generalmente considerate forme di crescita. In una serie di osservazioni di microscopia luminosa e fluorescente brillante dei cristalli di ghiaccio in soluzioni contenenti diversi AFPs, mostriamo che crystal modellatura avviene anche durante la fusione. In particolare, le forme di ghiaccio caratteristica osservate in soluzioni di pi&ugrave; iperattivo AFPs si formano durante la fusione. Ci rapportiamo questi risultati per l&#39;affinit&agrave; dell&#39;iperattivo AFPs per il piano basale del ghiaccio. I nostri risultati dimostrano la relazione tra piano basale affinit&agrave; e iperattivit&agrave; e mostrano una chiara differenza nei meccanismi di ghiaccio-modellatura di AFPs pi&ugrave; moderata e iperattivo. Questo studio fornisce aspetti chiave associati con l&#39;identificazione dell&#39;AFPs iperattivo.

New insights into ghiaccio crescita e fusione modifiche di proteine antigelo.

&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (AFPs) &#x5BD2;&#x51B7;&#x5730;&#x3067;&#x306F;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6C37;&#x3068; AFPs &#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x8FB2;&#x696D;&#x3001;&#x98DF;&#x54C1;&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3068;&#x533B;&#x5B66;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5FDC;&#x7528;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;AFPs &#x7279;&#x5B9A;&#x306E; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x578B;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7279;&#x6027;&#x5185;&#x306E;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x5F62;&#x72B6;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A; AFPs &#x3088;&#x308A;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7D50;&#x6676;&#x5F62;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3059;&#x9593;&#x3084;&#x3084;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A; AFPs &#x306F;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x4E00;&#x898B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x7D30;&#x9577;&#x3044;&#x30E2;&#x30EA;&#x30D6;&#x30C7;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x56F3;&#x5F62;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x5225; AFPs&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x306E;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x5149;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3082;&#x767A;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A; AFPs &#x306E;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;&#x6C37;&#x56F3;&#x5F62;&#x6EB6;&#x878D;&#x4E2D;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x5E95;&#x9762;&#x306E;&#x6C37;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A; AFPs &#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x3068;&#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3068;&#x6700;&#x3082;&#x9069;&#x5EA6;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A; AFPs &#x306E;&#x6C37;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x793A;&#x3059;.&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A; AFPs &#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x6C37;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x878D;&#x89E3;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63;&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x3002;

&#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AFPs) &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815; &#xC131;&#xC7A5; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD94;&#xC6B4; &#xAE30;&#xD6C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xD654;. &#xC5BC;&#xC74C;&#xACFC; Afps&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB18D;&#xC5C5;, &#xC2DD;&#xD488; &#xBCF4;&#xC874; &#xBC0F; &#xC758;&#xD559;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xACB0;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. AFPs &#xD2B9;&#xC815; AFP &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xAD50;&#xC801; &#xD65C;&#xC131; AFPs &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; AFPs &#xB354; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xACB0;&#xC815; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC885;&#xC885; &#xAC89;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xBA74;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xAE38;&#xCB49;&#xD55C; bipyramidal &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBB38;&#xBC95;&#xACFC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5; &#xBAA8;&#xC591; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; AFPs &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B;&#xACFC; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAD00;&#xCC30;&#xC758; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131;&#xB3C4; &#xC6A9; &#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xAC00;&#xC7A5; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; AFPs &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xD2B9;&#xC131; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBAA8;&#xC591; &#xB179;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD615;&#xC131; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xD3C9;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; Afps&#xC758; &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC131;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD00;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xAE30;&#xC800; &#xD3C9;&#xBA74; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xACFC;&#xB2E4; &#xAC04;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xC640; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC628;&#xAC74; &#xD558; &#xACE0; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; AFPs &#xC5BC;&#xC74C; &#xD615;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xBA85;&#xD655;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; AFPs &#xC2DD;&#xBCC4;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC8FC;&#xC694; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;.

&#xC5BC;&#xC74C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB179;&#xB294; &#xC218;&#xC815;.

Las prote&iacute;nas anticongelantes (AFPs) evolucionaron en muchos organismos, lo que les permite sobrevivir en climas fr&iacute;os, controlando el crecimiento de cristales de hielo. Las interacciones espec&iacute;ficas de AFP con hielo determinan sus posibles aplicaciones en la agricultura, la conservaci&oacute;n de los alimentos y la medicina. AFP controla las formas de cristales de hielo en una caracter&iacute;stica forma del tipo particular de la AFP. AFP moderadamente activa causa la formaci&oacute;n de cristales bipiramidales alargado, a menudo con facetas aparentemente definidas, mientras que AFP hiperactivo produce m&aacute;s variadas formas de cristal. Estos diferentes morfolog&iacute;as generalmente se consideran formas de crecimiento. En una serie de observaciones de microscop&iacute;a de luz y fluorescente brillante de cristales de hielo en soluciones que contengan diferentes AFPs, mostramos cristal que forma tambi&eacute;n ocurre durante la fusi&oacute;n. En particular, las formas de hielo caracter&iacute;stica observadas en soluciones de AFP m&aacute;s hiperactivo se forman durante la fusi&oacute;n. Relacionamos estos resultados a las afinidades de las AFPs hiperactivas para el plano basal de hielo. Nuestros resultados demuestran a la relaci&oacute;n entre la afinidad del plano basal e hiperactividad y muestran una clara diferencia en los mecanismos de formaci&oacute;n de hielo de AFP m&aacute;s moderada e hiperactivo. Este estudio proporciona una claves de aspectos relacionados con la identificaci&oacute;n de AFPs hiperactivos.

Nuevas perspectivas sobre hielo crecimiento y fusi&oacute;n modificaciones por las prote&iacute;nas anticongelantes.

&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x517B;&#x8001;&#x91D1;&#xFF09; &#x662F;&#x63A7;&#x5236;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x51B0;-&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x3002;&#x5B83;&#x4EEC;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BF9;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x8D2E;&#x5B58;&#x98DF;&#x7269;&#x548C;&#x4FDD;&#x62A4;&#x519C;&#x4F5C;&#x7269;&#x7684;&#x971C;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x6709;&#x4E89;&#x8BAE;&#x7684;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x6676;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x53EF;&#x9006;&#x6027;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x5BF9;&#x5176;&#x6D53;&#x5EA6;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x8868;&#x660E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x662F;&#x53EF;&#x9006;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x6E29;&#x5EA6;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#xFF0C;&#x90A3;&#x91CC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4EA4;&#x6362;&#x5468;&#x56F4;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x5A92;&#x4ECB;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x52A8;&#x9EC4;&#x7C89;&#x866B;&#x6CD5;&#x65B0;&#x793E;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x662F;&#x51E0;&#x4E4E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x8F6C;&#x548C;&#x8868;&#x9762;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x6291;&#x5236;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x751F;&#x957F;&#x751A;&#x81F3;&#x5728;&#x517B;&#x8001;&#x57FA;&#x91D1;&#x7BA1;&#x7406;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x7684;&#x8D2B;&#x5316;&#x7684;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x6392;&#x9664;&#x6025;&#x6027;&#x5F1B;&#x7F13;&#x6027;&#x9EBB;&#x75F9;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F9D;&#x6258;&#x7684;&#x672A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x7406;&#x8BBA;&#x3002;

&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x63ED;&#x793A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x51B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7684;&#x6297;&#x51BB;&#x86CB;&#x767D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62;&#x5176;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x589E;&#x957F;&#x3002;

Antifreeze proteins (AFPs) are a subset of ice-binding proteins that control ice crystal growth. They have potential for the cryopreservation of cells, tissues, and organs, as well as for production and storage of food and protection of crops from frost. However, the detailed mechanism of action of AFPs is still unclear. Specifically, there is controversy regarding reversibility of binding of AFPs to crystal surfaces. The experimentally observed dependence of activity of AFPs on their concentration in solution appears to indicate that the binding is reversible. Here, by a series of experiments in temperature-controlled microfluidic devices, where the medium surrounding ice crystals can be exchanged, we show that the binding of hyperactive Tenebrio molitor AFP to ice crystals is practically irreversible and that surface-bound AFPs are sufficient to inhibit ice crystal growth even in solutions depleted of AFPs. These findings rule out theories of AFP activity relying on the presence of unbound protein molecules.

Microfluidic experiments reveal that antifreeze proteins bound to ice crystals suffice to prevent their growth.

Prot&eacute;ines antigel (AFP) sont un sous-ensemble des prot&eacute;ines liant la glace qui contr&ocirc;lent la croissance de cristaux de glace. Ils ont le potentiel pour la cryoconservation des cellules, tissus et organes, ainsi que pour la production et le stockage de nourriture et de la protection des cultures contre le gel. Toutefois, les modalit&eacute;s d&#39;action des Pag est encore incertaine. Plus pr&eacute;cis&eacute;ment, il y a controverse au sujet de la r&eacute;versibilit&eacute; de la liaison de l&#39;AFP &agrave; surfaces cristallines. La d&eacute;pendance observ&eacute;e exp&eacute;rimentalement de l&#39;activit&eacute; des Pag sur leur concentration dans la solution semble indiquer que la liaison est r&eacute;versible. Ici, par une s&eacute;rie d&#39;exp&eacute;riences dans des dispositifs microfluidiques &agrave; temp&eacute;rature contr&ocirc;l&eacute;e, o&ugrave; le milieu entourant les cristaux de glace peut &ecirc;tre &eacute;chang&eacute;, nous montrons que la liaison d&#39;hyperactif Tenebrio molitor AFP de cristaux de glace est pratiquement irr&eacute;versible et que surface-bondissent AFPs suffisent &agrave; inhiber la croissance de cristaux de glace m&ecirc;me dans des appauvri des Pag des solutions. Ces constatations excluent les th&eacute;ories de l&#39;activit&eacute; d&#39;AFP en s&#39;appuyant sur la pr&eacute;sence de mol&eacute;cules prot&eacute;iques non li&eacute;.

Des exp&eacute;riences de microfluidique r&eacute;v&egrave;lent que les prot&eacute;ines antigel li&eacute;es aux cristaux de glace suffisant pour emp&ecirc;cher leur croissance.

Frostschutzmittel Proteine (AFPs) sind eine Teilmenge der Eis-bindenen Proteine, die Eis-Kristallwachstum zu steuern. Sie haben Potenzial f&uuml;r die Kryokonservierung von Zellen, Geweben und Organen sowie f&uuml;r Produktion und Lagerung von Lebensmitteln und Schutz der Pflanzen vor Frost. Der genaue Wirkmechanismus von AFPs ist jedoch noch unklar. Insbesondere gibt es Kontroverse &uuml;ber Reversibilit&auml;t der Bindung des AFPs Kristall Oberfl&auml;chen. Die experimentell beobachtete Abh&auml;ngigkeit der Aktivit&auml;t des AFPs auf ihre Konzentration in der L&ouml;sung wird angezeigt, um anzugeben, dass die Bindung reversibel ist. Durch eine Reihe von Experimenten im temperaturgef&uuml;hrten Microfluidic Vorrichtungen, wo das Medium umgebenden Eiskristalle ausgetauscht werden k&ouml;nnen, zeigen wir hier, dass die Bindung des hyperaktiven Tenebrio Molitor AFP Eis Kristalle praktisch irreversibel ist und Oberfl&auml;che gebundene AFPs ausreichen, Eis Kristallwachstum auch in L&ouml;sungen AFPs ausgelaugt zu hemmen. Diese Ergebnisse ausschlie&szlig;en, Theorien der AFP-Aktivit&auml;t, die unter Berufung auf das Vorhandensein von ungebundenen Proteinmolek&uuml;le.

Mikrofluidische Experimente zeigen, dass Frostschutzmittel Proteine gebunden Kristalle Eis gen&uuml;gen, um ihr Wachstum zu verhindern.

Proteine antigelo (AFPs) sono un sottoinsieme di ghiaccio-binding proteins che controllano la crescita del cristallo di ghiaccio. Essi hanno il potenziale per la crioconservazione di cellule, tessuti e organi, nonch&eacute; per la produzione e conservazione degli alimenti e la protezione delle colture dal gelo. Tuttavia, il meccanismo dettagliato dell&#39;azione dell&#39;AFPs &egrave; ancora poco chiaro. In particolare, non c&#39;&egrave; polemica per quanto riguarda la reversibilit&agrave; dell&#39;associazione dell&#39;AFPs per piani in cristallo. La dipendenza sperimentalmente osservata dell&#39;attivit&agrave; dell&#39;AFPs sulla loro concentrazione in soluzione sembra indicare che l&#39;associazione &egrave; reversibile. Qui, da una serie di esperimenti in dispositivi microfluidici temperatura controllata, dove il medium che circondano i cristalli di ghiaccio pu&ograve; essere scambiato, ci mostrano che l&#39;associazione di iperattivo Tenebrio molitor AFP di cristalli di ghiaccio &egrave; praticamente irreversibile e che associato a superficie AFPs sono sufficienti per inibire la crescita del cristallo di ghiaccio anche in soluzioni impoverito dell&#39;AFPs. Questi risultati escludono le teorie di attivit&agrave; AFP basandosi sulla presenza di molecole proteiche non associato.

Microfluidica esperimenti rivelano che le proteine antigelo associate a cristalli di ghiaccio &egrave; sufficiente a prevenire la loro crescita.

&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (AFPs) &#x306F;&#x3001;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x6210;&#x9577;&#x5236;&#x5FA1;&#x6C37;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x751F;&#x7523;&#x3068;&#x98DF;&#x54C1;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x971C;&#x304B;&#x3089;&#x4F5C;&#x7269;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x3001;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;AFPs &#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x6676;&#x8868;&#x9762;&#x3068; AFPs &#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x8AD6;&#x4E89;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6D3B;&#x52D5; AFPs &#x306E;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x5A92;&#x4F53;&#x3092;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5236;&#x5FA1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A; Tenebrio &#x30E2;&#x30EA;&#x30BF;&#x30FC;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x306B; AFP &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x5143;&#x306B;&#x623B;&#x305B;&#x308B;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x8868;&#x9762;&#x7D50;&#x5408; AFPs &#x304C; AFPs &#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3082;&#x6C37;&#x7D50;&#x6676;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x975E;&#x9023;&#x7D50;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B; afp &#x901A;&#x4FE1;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x5B9F;&#x9A13;&#x4E0D;&#x51CD;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6C37;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AFPs) &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815; &#xC131;&#xC7A5; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC5BC;&#xC74C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC758; cryopreservation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC2DD;&#xD488;&#xC758; &#xC800;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xB18D;&#xC791;&#xBB3C; &#xC11C; &#xB9AC; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF4;&#xD638; &#xD574;&#xC57C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; AFPs &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xD45C;&#xBA74; Afps&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC758; &#xBC18;&#xC804; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xB17C;&#xB780;&#xC774;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30;&#xB41C; &#xD65C;&#xB3D9; Afps&#xC758; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC774; &#xB418;&#xB3CC;&#xB9B4; &#xC218; &#xC784;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB824;&#xBA74; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xBBF8;&#xC138; &#xC628;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC7A5;&#xCE58;, &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xB97C; &#xAD50;&#xD658;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5B4;&#xB514;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; Tenebrio molitor AFP &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB418;&#xB3CC;&#xB9B4; &#xC218; &#xACE0; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; AFPs &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; Afps&#xC758; &#xACE0;&#xAC08;&#xC5D0; &#xC5BC;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5B8;&#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; afp &#xD1B5;&#xC2E0; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC774;&#xB860;&#xC744; &#xBC30;&#xC81C;.

&#xBBF8;&#xC138; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACF5;&#xAC1C; &#xBD80;&#xB3D9; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xC5BC;&#xC74C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xB2E4;.

Las prote&iacute;nas anticongelantes (AFP) son un subconjunto de hielo prote&iacute;nas que controlan el crecimiento de cristales de hielo. Tienen potencial para la criopreservaci&oacute;n de c&eacute;lulas, tejidos y &oacute;rganos, as&iacute; como para la producci&oacute;n y almacenamiento de alimentos y protecci&oacute;n de cultivos de las heladas. Sin embargo, el mecanismo detallado de acci&oacute;n de AFP es todav&iacute;a incierto. Espec&iacute;ficamente, hay controversia con respecto a la reversibilidad de encuadernaci&oacute;n de AFP a las superficies de cristal. La dependencia observada experimentalmente de la actividad de la AFP en su concentraci&oacute;n en la soluci&oacute;n parece indicar que la Uni&oacute;n es reversible. Aqu&iacute;, por una serie de experimentos en dispositivos microflu&iacute;dicos temperatura controlada, donde el medio que rodea los cristales de hielo puede intercambiarse, demostramos que la Uni&oacute;n de hiperactivo Tenebrio molitor AFP a cristales de hielo es pr&aacute;cticamente irreversible y que AFP superficie determinada es suficiente para inhibir el crecimiento de cristales de hielo incluso en soluciones agotadas de AFP. Estos resultados descartan las teor&iacute;as de la actividad de la AFP bas&aacute;ndose en la presencia de mol&eacute;culas de prote&iacute;na independiente.

Microflu&iacute;dicos experimentos revelan que las prote&iacute;nas anticongelantes a cristales de hielo es suficiente para evitar su crecimiento.

The control over ice crystal growth, melting, and shaping is important in a variety of fields, including cell and food preservation and ice templating for the production of composite materials. Control over ice growth remains a challenge in industry, and the demand for new cryoprotectants is high. Naturally occurring cryoprotectants, such as antifreeze proteins (AFPs), present one solution for modulating ice crystal growth; however, the production of AFPs is expensive and inefficient. These obstacles can be overcome by identifying synthetic substitutes with similar AFP properties. Zirconium acetate (ZRA) was recently found to induce the formation of hexagonal cavities in materials prepared by ice templating. Here, we continue this line of study and examine the effects of ZRA and a related compound, zirconium acetate hydroxide (ZRAH), on ice growth, shaping, and recrystallization. We found that the growth rate of ice crystals was significantly reduced in the presence of ZRA and ZRAH, and that solutions containing these compounds display a small degree of thermal hysteresis, depending on the solution pH. The compounds were found to inhibit recrystallization in a manner similar to that observed in the presence of AFPs. The favorable properties of ZRA and ZRAH suggest tremendous potential utility in industrial applications.

Inhibition of ice growth and recrystallization by zirconium acetate and zirconium acetate hydroxide.

Microfluidic channels with embedded micro-electrodes are of growing use in devices that aim to electroporate single cells. In this article we present an analysis of pore evolution in a single cell passing by two planar electrodes that are separated by a nano-gap. The cell experiences an electric field that changes in time, as it goes over the electrodes in the channel. The nano-gap between the electrodes enhances the electric field's strength in the micro-channel, thus enabling the use of low potential difference between the electrodes. By computing the electric field on the surface of the cell we can calculate the pore density, as predicted by the model described by Krassowska and Filev (Biophys. J. 92(2):404-417, 2007). The simulation presented in this article is a useful tool for planning and executing experiments of single-cell electroporation in flow-through devices. We demonstrate how different parameters, such as cell size and the size of the gap between the electrodes, change the pore density and show how electroporation between micro-electrodes on the same plane is different from conventional electroporation between facing electrodes.

ArticleTotal : 2	Year
Publication title Cited by 65	2013
Publication title Cited by 47	2014

Article	Year
Sequence information can be obtained from single DNA molecules. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 12651960	2003
Fluorescence microscopy evidence for quasi-permanent attachment of antifreeze proteins to ice surfaces. Biophysical journal\| PubMed ID: 17325008	2007
Direct visualization of spruce budworm antifreeze protein interacting with ice crystals: basal plane affinity confers hyperactivity. Biophysical journal\| PubMed ID: 18339740	2008
Single-molecule DNA sequencing of a viral genome. Science (New York, N.Y.)\| PubMed ID: 18388294	2008
Caught in the act: the lifetime of synaptic intermediates during the search for homology on DNA. Nucleic acids research\| PubMed ID: 20044347	2010
Structural basis for the superior activity of the large isoform of snow flea antifreeze protein. Biochemistry\| PubMed ID: 20158269	2010
Superheating of ice crystals in antifreeze protein solutions. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 20215465	2010
Universality of persistence exponents in two-dimensional Ostwald ripening. Physical review letters\| PubMed ID: 20366113	2009
Compound ice-binding site of an antifreeze protein revealed by mutagenesis and fluorescent tagging. Biochemistry\| PubMed ID: 20853841	2010
Antifreeze protein from freeze-tolerant grass has a beta-roll fold with an irregularly structured ice-binding site. Journal of molecular biology\| PubMed ID: 22306740	2012
New insights into ice growth and melting modifications by antifreeze proteins. Journal of the Royal Society, Interface / the Royal Society\| PubMed ID: 22787007	2012
Microfluidic experiments reveal that antifreeze proteins bound to ice crystals suffice to prevent their growth. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 23300286	2013
Inhibition of ice growth and recrystallization by zirconium acetate and zirconium acetate hydroxide. PloS one\| PubMed ID: 23555701	2013
Model of pore formation in a single cell in a flow-through channel with micro-electrodes. Biomedical microdevices\| PubMed ID: 24150603	2013

Ido Braslavsky

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications