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Chemoselective Modification of Viral Surfaces via Bioorthogonal Click Chemistry

The modification of virus particles has received a significant amount of attention for its tremendous potential for impacting gene therapy, oncolytic ...

Stony Brook University

&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7ED3;&#x5408;&#x82EF;&#x4E19;&#x6C28;&#x9178;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x901A;&#x7528;&#x7EC4;&#x3002;

Biosynthesis of proteins incorporating a versatile set of phenylalanine analogues.

Biosynth&egrave;se des prot&eacute;ines incorporant un ensemble polyvalent d&#39;analogues de la ph&eacute;nylalanine.

Biosynthese von Proteinen, die eine vielseitige Gruppe von Phenylalanin-Analoga einbinden.

Biosintesi delle proteine che incorporano una serie versatile di analoghi di fenilalanina.

&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x306E;&#x6C4E;&#x7528;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x3002;

&#xD398;&#xB2D0;&#xC54C;&#xB77C;&#xB2CC; analogues&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;.

Bios&iacute;ntesis de las prote&iacute;nas que incorpora un conjunto vers&aacute;til de an&aacute;logos de la fenilalanina.

Einbindung von nicht-nat&uuml;rliche Aminos&auml;uren in Proteine in-vivo erweitert den Bereich der Proteinsynthese und Design. p-Acetylphenylalanine wurde in Escherichia coli &uuml;ber eine rechnerisch gestaltete mutierte Form von der Phenylalanyl-tRNA Synthetase des Hosts rekombinante Dihydrofolate Reduktase (DHFR) eingemeindet. DHFR ausgestattet mit Keton-Funktionalit&auml;t kann mit Maleins&auml;urehydrazid Reagenzien unter milden Bedingungen eine Ligatur Chemoselectively sein.

Eine gestaltete Phenylalanyl-tRNA-Synthetase-Variante erm&ouml;glicht effiziente in-vivo-Einbeziehung der Aryl-Keton-Funktionalit&auml;t in Proteine.

Incorporazione di amminoacidi non naturali proteine in vivo si espande la portata della sintesi proteica e del design. p-Acetylphenylalanine venne incorporata nella ricombinante diidrofolato reduttasi (DHFR) in Escherichia coli tramite una forma mutante informaticamente progettata della phenylalanyl-tRNA sintetasi dell&#39;host. DHFR provvisto di funzionalit&agrave; di chetone pu&ograve; essere chemoselectively modo legati con reagenti idrazide maleica in condizioni blande.

Una variante di progettato phenylalanyl-tRNA sintetasi permette di incorporazione in vivo efficiente funzionalit&agrave; chetone arilici in proteine.

&#x5C06;&#x975E;&#x5929;&#x7136;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7EB3;&#x5165;&#x6269;&#x5927;&#x4E86;&#x8303;&#x56F4;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3002;p Acetylphenylalanine &#x88AB;&#x7EB3;&#x5165;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E8C;&#x6C22;&#x53F6;&#x9178;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176; (DHFR) &#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BA1;&#x7B97;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684; phenylalanyl-tRNA &#x5408;&#x6210;&#x9176;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x4E2D;&#x3002;DHFR &#x914D;&#x5907;&#x916E;&#x529F;&#x80FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7ED3;&#x624E;&#x4E0E;&#x4E01;&#x70EF;&#x4E8C;&#x9170;&#x80BC;&#x8BD5;&#x5242;&#x5728;&#x6E29;&#x548C;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684; chemoselectively&#x3002;

Variant &#x7C7B;&#x578B;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684; phenylalanyl tRNA &#x5408;&#x6210;&#x9176;&#x5141;&#x8BB8;&#x9AD8;&#x6548;&#x4F53;&#x5185;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x82B3;&#x57FA;&#x916E;&#x8FDB;&#x5165;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Incorporation of non-natural amino acids into proteins in vivo expands the scope of protein synthesis and design. p-Acetylphenylalanine was incorporated into recombinant dihydrofolate reductase (DHFR) in Escherichia coli via a computationally designed mutant form of the phenylalanyl-tRNA synthetase of the host. DHFR outfitted with ketone functionality can be chemoselectively ligated with hydrazide reagents under mild conditions.

A designed phenylalanyl-tRNA synthetase variant allows efficient in vivo incorporation of aryl ketone functionality into proteins.

L&#39;incorporation des acides amin&eacute;s non naturels dans des prot&eacute;ines in vivo &eacute;largit la port&eacute;e de la conception et la synth&egrave;se des prot&eacute;ines. p-Acetylphenylalanine a &eacute;t&eacute; incorpor&eacute; de recombinants dihydrofolate r&eacute;ductase (DHFR) chez Escherichia coli par une forme mutante con&ccedil;ue par le calcul de la ph&eacute;nylalanyl-tRNA synth&eacute;tase de l&#39;h&ocirc;te. DHFR &eacute;quip&eacute;e de la fonctionnalit&eacute; de c&eacute;tone peut &ecirc;tre chimios&eacute;lective ligatur&eacute; avec r&eacute;actifs hydrazide dans des conditions douces.

Une variante de synth&eacute;tase de ph&eacute;nylalanyl-tRNA con&ccedil;u permet efficace incorporation in vivo d&#39;aryle fonctionnalit&eacute; de c&eacute;tone dans les prot&eacute;ines.

&#x975E;&#x5929;&#x7136;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x3068;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x304C;&#x62E1;&#x5927;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;p Acetylphenylalanine &#x306F;&#x5927;&#x8178;&#x83CC; phenylalanyl tRNA &#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x8A2D;&#x8A08;&#x5909;&#x7570;&#x5F62;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x8449;&#x9178;&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20; &#xFF08;DHFR&#xFF09; &#x306B;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B1;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x8A2D;&#x5099;&#x304C;&#x6574;&#x3063;&#x3066; DHFR &#x30D2;&#x30C9;&#x30E9;&#x30B8;&#x30C9;&#x8A66;&#x85AC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x308B;&#x6E29;&#x548C;&#x306A;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x7D50;&#x7D2E; chemoselectively &#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A2D;&#x8A08; phenylalanyl tRNA &#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x30B1;&#x30C8;&#x30F3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A; in vivo &#x5B9A;&#x6B3E;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44; &#xCC9C;&#xC5F0; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; &#xACB0;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xD655;&#xC7A5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. p-Acetylphenylalanine &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; phenylalanyl-tRNA &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xACC4;&#xC0B0; &#xC124;&#xACC4; &#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; dihydrofolate reductase (DHFR)&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCF00; &#xD1A4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCF5; DHFR chemoselectively &#xC628;&#xD654;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; hydrazide &#xC2DC; &#xC57D;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD9C;&#xD608; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC124;&#xACC4; &#xB41C; phenylalanyl-tRNA &#xD569;&#xC131; &#xBCC0;&#xC885; aryl &#xCF00; &#xD1A4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xB9BD;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD55C;&#xB2E4;.

Incorporaci&oacute;n de amino&aacute;cidos no naturales en las prote&iacute;nas in vivo ampl&iacute;a el &aacute;mbito de dise&ntilde;o y s&iacute;ntesis de prote&iacute;nas. p-Acetylphenylalanine se incorpor&oacute; recombinante de la dihidrofolato reductasa (DHFR) en Escherichia coli mediante una forma mutante de c&oacute;mputo dise&ntilde;ada de la Fenilalanil-tRNA sintetasa del anfitri&oacute;n. DHFR equipado con funci&oacute;n cetona puede ligada con reactivos hidrazida condiciones suaves de chemoselectively.

Una variante de dise&ntilde;o Fenilalanil-tRNA sintetasa permite eficiente incorporaci&oacute;n in vivo de la funcionalidad de aril cetonas en prote&iacute;nas.

&#x7CD6;&#x7684;&#x60CA;&#x4EBA;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x5448;&#x73B0;&#x5176;&#x5206;&#x6790;&#x6781;&#x5176;&#x8270;&#x96BE;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x751F;&#x6D3B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x5DE5;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7CD6;&#x8D34;&#x6807;&#x7684;&#x63A2;&#x9488;&#x4E2D;&#x751F;&#x6D3B;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x6D53;&#x7F29;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x7CD6;&#x7F00;&#x5408;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x6280;&#x672F;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x4E0E;&#x5177;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x3001; &#x975E;&#x751F;&#x7269;&#x529F;&#x80FD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x53E0;&#x6C2E;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x53E0;&#x7CD6;&#x5582;&#x7ED9;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x96C6;&#x6210;&#x5230;&#x5404;&#x79CD;&#x7CD6;&#x7F00;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x7CD6;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x673A;&#x68B0;&#x3002;&#x53E0;&#x7CD6;&#x7136;&#x540E;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x6216;&#x8005;&#x4F53;&#x5916;&#x6216;&#x8005;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7279;&#x5B9A;&#x53E0;&#x6C2E;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x4E4B;&#x4E00;&#xFF1A; &#x6307;&#x6807;&#x7ED3;&#x624E;&#x6216;&#x5E94;&#x53D8;&#x664B;&#x5347; [3 + 2] &#x73AF;&#x52A0;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53CD;&#x5E94;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x5230;&#x6807;&#x8BB0;&#x7CD6;&#x6210;&#x50CF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x6216;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4F7F;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x6216;&#x7CD6;&#x7F00;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6D53;&#x7F29;&#x3002;&#x65E0;&#x521B;&#x6210;&#x50CF;&#x548C; glycoproteomic &#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x3002;

&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x548C; glycoproteomics &#x53E0;&#x7CD6;&#x4E0E;&#x7CD6;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;

The staggering complexity of glycans renders their analysis extraordinarily difficult, particularly in living systems. A recently developed technology, termed metabolic oligosaccharide engineering, enables glycan labeling with probes for visualization in cells and living animals, and enrichment of specific glycoconjugate types for proteomic analysis. This technology involves metabolic labeling of glycans with a specifically reactive, abiotic functional group, the azide. Azido sugars are fed to cells and integrated by the glycan biosynthetic machinery into various glycoconjugates. The azido sugars are then covalently tagged, either ex vivo or in vivo, using one of two azide-specific chemistries: the Staudinger ligation, or the strain-promoted [3+2] cycloaddition. These reactions can be used to tag glycans with imaging probes or epitope tags, thus enabling the visualization or enrichment of glycoconjugates. Applications to noninvasive imaging and glycoproteomic analyses are discussed.

Metabolic labeling of glycans with azido sugars for visualization and glycoproteomics.

La complexit&eacute; ahurissante de glycanes rend leur analyse extraordinairement difficile, particuli&egrave;rement dans les syst&egrave;mes vivants. Une technologie r&eacute;cemment d&eacute;velopp&eacute;e, qualifi&eacute;e de g&eacute;nie m&eacute;tabolique oligosaccharide, permet de glycane &eacute;tiquetage avec des sondes pour la visualisation dans les cellules et les animaux vivants et d&#39;enrichissement des glycoconjugu&eacute;s sp&eacute;cifiques types pour l&#39;analyse prot&eacute;omique. Cette technologie consiste &agrave; marquage m&eacute;tabolique des glycanes avec un groupe fonctionnel particuli&egrave;rement r&eacute;actif et abiotique, l&#39;azoture. Sucres azido sont nourris aux cellules et int&eacute;gr&eacute;es par le m&eacute;canisme de biosynth&egrave;se glycane dans divers glycoconjugu&eacute;s. Les sucres azido sont ensuite par covalence tag, ex vivo ou in vivo, l&#39;un des deux chimies azoture sp&eacute;cifiques : la ligature de Staudinger, ou la cycloaddition [3 + 2]-favoris&eacute;. Ces r&eacute;actions peuvent servir &agrave; tag glycanes avec traceurs d&#39;imagerie ou &eacute;tiquettes d&#39;&eacute;pitope, permettant ainsi la visualisation ou l&#39;enrichissement des glycoconjugu&eacute;s. Nous discutons des applications &agrave; des analyses non invasives d&#39;imagerie et de glycoproteomic.

Marquage m&eacute;tabolique des glycanes azido sucres pour la visualisation et glycoproteomics.

Die erstaunliche Komplexit&auml;t der Glykane rendert ihre Analyse au&szlig;erordentlich schwierig, vor allem in lebenden Systemen. Eine neu entwickelte Technologie, bezeichnet metabolische Oligosaccharid-Technik, erm&ouml;glicht Glykan Kennzeichnung mit Sonden zur Visualisierung in Zellen und lebenden Tieren und Anreicherung bestimmter Glycoconjugate Typen f&uuml;r Proteomic Analysen. Diese Technologie beinhaltet metabolische Kennzeichnung von Glykane mit einer speziell reaktives, abiotische funktionellen Gruppe, die azid. Azido Zucker gef&uuml;ttert an Zellen und der biosynthetischen Glykan-Maschine in verschiedenen Glykokonjugate integriert. Der Azido-Zucker dann kovalent verkn&uuml;pft sind, entweder ex Vivo oder in-Vivo, mithilfe einer der beiden azid-spezifische Chemie: Staudinger-Verbindung oder der Stamm-gef&ouml;rdert [3 + 2]-Cycloaddition. Diese Reaktionen k&ouml;nnen zu Tag Glykane mit bildgebende Sonden oder Epitop-Tags, wodurch die Visualisierung oder Anreicherung von Glykokonjugate verwendet werden. Anwendungen, die nicht-invasive Bildgebung und Glycoproteomic Analysen werden diskutiert.

Metabolische Kennzeichnung von Glykane mit Azido Zucker zur Visualisierung und Glykoproteomics.

La sconcertante complessit&agrave; dei glicani rende loro analisi straordinariamente difficile, specialmente in sistemi viventi. Una tecnologia sviluppata di recente, definita ingegneria metabolica Oligosaccaride, consente glycan etichettatura con sonde per la visualizzazione in cellule e animali viventi e l&#39;arricchimento dei tipi di glicoconiugati specifici per Analisi proteomic. Questa tecnologia comporta metabolica etichettatura dei glicani con un gruppo funzionale specificamente reattivo, abiotico, l&#39;azoturo. Zuccheri di gruppi sono alimentati a celle e integrati dalle macchine in varie glycoconjugates biosintetico glycan. I zuccheri di gruppi quindi sono contrassegnati legame covalente, in vivo, utilizzando uno dei due processi chimici specifici azide o ex vivo: la legatura Staudinger, o la cicloaddizione [3++ 2] promosso dal ceppo. Queste reazioni possono essere utilizzato per tag glicani con sonde di imaging o epitopo, permettendo cos&igrave; la visualizzazione o l&#39;arricchimento di glycoconjugates. Applicazioni di analisi non invasive di imaging e glycoproteomic sono discussi.

Metabolica etichettatura dei glicani con gruppi di zuccheri per visualizzazione e glycoproteomics.

&#x7CD6;&#x9396;&#x306E;&#x9A5A;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x56F0;&#x96E3;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30EA;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x7CD6;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x5DE5;&#x5B66;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x7CD6;&#x9396;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x30BB;&#x30EB;&#x3068;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x7CD6;&#x8CEA;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3068;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x3051;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x3001;&#x975E;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30B8;&#x5316;&#x7CD6;&#x9396;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F34;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30B8;&#x30C9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x7CD6;&#x3092;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3055;&#x308C;&#x306B;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x8907;&#x5408;&#x7CD6;&#x8CEA;&#x7CD6;&#x9396;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x6A5F;&#x5668;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D71;&#x5408;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30B8;&#x30C9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x7CD6; [&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x3001;ex vivo &#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F; in vivo &#x30A2;&#x30B8;&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BF;&#x30B0;&#x3067;&#x3059;: &#x30B7;&#x30E5;&#x30BF;&#x30A6;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x7D50;&#x7D2E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x3092;&#x63A8;&#x9032; [3++ 2] &#x74B0;&#x5316;&#x4ED8;&#x52A0;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30BF;&#x30B0;&#x7CD6;&#x306B;&#x306F;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3084;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3084;&#x8907;&#x5408;&#x7CD6;&#x8CEA;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E; attribute-name &#x306E; epitope &#x306E;&#x672D;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30B0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6; &#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x3092;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3068;&#x30B0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9; &#x30A2;&#x30B8;&#x30C9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x7CD6;&#x3068;&#x7CD6;&#x9396;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;

Glycans&#xC758; &#xC5C4;&#xCCAD;&#xB09C; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131; &#xC0DD;&#xD65C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xD788; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xB80C;&#xB354;&#xB9C1;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2F9; &#xB300;&#xC0AC; &#xACF5;&#xD559; &#xB418; &#xB098; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; glycan &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC140; &#xBC0F; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xACFC; proteomic &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; glycoconjugate &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xB18D;&#xCD95;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xD2B9;&#xD788; &#xBC18;&#xC751;&#xC131;, abiotic &#xAE30;&#xB2A5; &#xADF8;&#xB8F9;&#xB294; &#xC544; &#xC9C0; &#xB4DC;&#xC640; glycans&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. Azido &#xC124;&#xD0D5; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xACF5;&#xAE09; &#xB418;&#xBA70; &#xD1B5;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; glycoconjugates glycan &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xAE30;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. Azido &#xC124;&#xD0D5;&#xC740; &#xB2E4;&#xC74C; &#x70AD; &#xD0DC;&#xADF8;, &#xBE44;&#xBCF4;, &#xB450; &#xC544; &#xC9C0; &#xB4DC; &#xAD00;&#xB828; &#xD654;&#xD559; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB610;&#xB294; ex vivo: Staudinger &#xACB0; &#xCC30; &#xB610;&#xB294; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xC2B9;&#xC9C4; [3 + 2] cycloaddition. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xB610;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xB610;&#xB294; glycoconjugates &#xB18D;&#xCD95; &#xC218; &#xC788;&#xAC8C; &#xD53C;&#xD1A0; &#xD504; &#xD0DC;&#xADF8; &#xD0DC;&#xADF8; glycans&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xBC0F; glycoproteomic &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; azido &#xC124;&#xD0D5; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xBC0F; glycoproteomics&#xC640; glycans&#xC758; &#xB77C;&#xBCA8;.

La asombrosa complejidad de glicanos hace su an&aacute;lisis extraordinariamente dif&iacute;cil, particularmente en sistemas vivos. Una tecnolog&iacute;a desarrollada recientemente, denominado ingenier&iacute;a metab&oacute;lica oligosac&aacute;rido, permite glicanos etiquetado con sondas para la visualizaci&oacute;n en las c&eacute;lulas animales vivos y enriquecimiento de tipos espec&iacute;ficos de glycoconjugate para an&aacute;lisis prote&oacute;mico. Esta tecnolog&iacute;a implica etiquetado metab&oacute;lico de glicanos con un grupo funcional espec&iacute;ficamente reactivo, abi&oacute;tico, la azida. Azido az&uacute;cares se alimenta a las c&eacute;lulas e integradas por la maquinaria biosint&eacute;tica de glicanos en varios glicoconjugados. Los az&uacute;cares azido est&aacute;n entonces covalente etiquetados, ex vivo o en vivo, usando uno de los dos qu&iacute;micos de azida espec&iacute;ficos: la ligadura de Staudinger, o la cicloadici&oacute;n [3 + 2] promovida por cepa. Estas reacciones pueden utilizarse para etiqueta glycans con im&aacute;genes de las sondas o epitopo etiquetas, permitiendo la visualizaci&oacute;n o el enriquecimiento de los glicoconjugados. Aplicaciones para el an&aacute;lisis no invasivos de la proyecci&oacute;n de imagen y glycoproteomic se discuten.

Etiquetado metab&oacute;lico de glicanos con az&uacute;cares de azido para visualizaci&oacute;n y glycoproteomics.

Photoreactive &#x7EC6;&#x80DE;&#x80F6;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5E73;&#x7248;&#x5370;&#x5237;&#x9635;&#x5217;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3002;

Lithographic patterning of photoreactive cell-adhesive proteins.

Lithographique structuration des prot&eacute;ines de la cellule-adh&eacute;sif photor&eacute;actifs.

Lithographische Musterung Photoreaktive Zelle-adh&auml;siver Proteine.

Patterning litografica delle proteine delle cellule-adesivo fotoreattivi.

&#x5149;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x77F3;&#x7248;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;

Photoreactive &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC11D;&#xD310; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Litogr&aacute;fica patrones de prote&iacute;nas de c&eacute;lulas-adhesivo fotoreactivas.

Bioorthogonal &#x529F;&#x80FD;&#x5F15;&#x5165;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x6210;&#x4E3A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x52AA;&#x529B;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x919B;&#x7EC4;&#x7279;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5F15;&#x5165;&#x4F7F;&#x7528; formylglycine &#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x9176;&#x6240;&#x627F;&#x8BA4;&#x7684; 6 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5171;&#x8BC6;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x6B64;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x919B;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E0D;&#x5927;&#x4E8E; His(6) &#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BB8;&#x591A;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5F00;&#x53D1;&#x3002;

&#x5F15;&#x5165;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x5230;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x919B;&#x3002;

Methods for introducing bioorthogonal functionalities into proteins have become central to protein engineering efforts. Here we describe a method for the site-specific introduction of aldehyde groups into recombinant proteins using the 6-amino-acid consensus sequence recognized by the formylglycine-generating enzyme. This genetically encoded 'aldehyde tag' is no larger than a His(6) tag and can be exploited for numerous protein labeling applications.

Introducing genetically encoded aldehydes into proteins.

M&eacute;thodes pour introduire des fonctionnalit&eacute;s de bioorthogonal dans les prot&eacute;ines sont devenus centrales aux efforts g&eacute;nie prot&eacute;ique. Nous d&eacute;crivons ici une m&eacute;thode pour l&#39;introduction in site des groupes ald&eacute;hyde dans les prot&eacute;ines recombinantes &agrave; l&#39;aide de la s&eacute;quence 6 acide amin&eacute; reconnue par l&#39;enzyme formylglycine g&eacute;n&eacute;ratrices. Ce g&eacute;n&eacute;tiquement cod&eacute; &laquo; ald&eacute;hyde tag &raquo; est pas plus grand qu&#39;une balise His(6) et peuvent &ecirc;tre exploit&eacute;e pour nombreuses prot&eacute;ines des applications d&#39;&eacute;tiquetage.

Introduction g&eacute;n&eacute;tiquement encod&eacute; ald&eacute;hydes dans les prot&eacute;ines.

Methoden f&uuml;r die Einf&uuml;hrung von Bioorthogonal Funktionalit&auml;ten in Proteine sind Mittelpunkt Protein engineering Bem&uuml;hungen geworden. Hier beschreiben wir eine Methode f&uuml;r die standortspezifischen Einschleppung Aldehyd-Gruppen rekombinante Proteine mit die 6-amino-S&auml;ure Konsensus-Sequenz, die durch das Enzym Formylglycine schaffende erkannt. Diesem genetisch codierte &#39;Aldehyd Tag&#39; ist nicht gr&ouml;&szlig;er als ein His(6)-Tag und k&ouml;nnen f&uuml;r zahlreiche Protein Kennzeichnung Anwendungen ausgenutzt werden.

Einf&uuml;hrung genetisch codiert Aldehyde in Proteine.

Metodi per l&#39;introduzione di funzionalit&agrave; bioorthogonal in proteine sono diventati centrale agli sforzi di ingegneria proteica. Qui descriviamo un metodo per l&#39;introduzione site-specific di gruppi aldeide in proteine ricombinanti utilizzando la sequenza di consenso di acido 6-ammino riconosciuta dall&#39;enzima consiste-generazione. Questo geneticamente codificati &#39;aldeide tag&#39; &egrave; non pi&ugrave; grande di un tag His(6) e pu&ograve; essere sfruttata per le proteine numerose applicazioni di etichettatura.

Introduzione geneticamente codificati aldeidi in proteine.

Bioorthogonal &#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5DE5;&#x5B66;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053; formylglycine &#x751F;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9; 6 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x5316; &#39;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9; &#x30BF;&#x30B0;&#39; His(6) &#x30BF;&#x30B0;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x60AA;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; bioorthogonal &#xAE30;&#xB2A5; &#xC18C;&#xAC1C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xB178;&#xB825;&#xC744; &#xC911;&#xC559; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; formylglycine &#xC0DD;&#xC131; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xC2DD; 6-&#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC77C;&#xCE58; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#39;&#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC; &#xD0DC;&#xADF8;&#39; His(6) &#xD0DC;&#xADF8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD070; &#xC774;&#xBA70;, &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC545;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB3C4;&#xC785; &#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

M&eacute;todos para introducir funcionalidades de bioorthogonal en prote&iacute;nas se han convertido en fundamentales para los esfuerzos de ingenier&iacute;a de prote&iacute;nas. Aqu&iacute; se describe un m&eacute;todo para la introducci&oacute;n espec&iacute;fica de grupos aldeh&iacute;do en prote&iacute;nas recombinantes utilizando la secuencia de amino&aacute;cidos 6 consenso reconocida por la enzima formylglycine-generaci&oacute;n. Este gen&eacute;ticamente codificados &quot;etiqueta de aldeh&iacute;do&quot; es no m&aacute;s grande que una etiqueta de His(6) y pueden ser aprovechado para la prote&iacute;na numerosas aplicaciones de etiquetado.

Introducci&oacute;n gen&eacute;ticamente hab&iacute;a codificado aldeh&iacute;dos en prote&iacute;nas.

&#x4F7F;&#x7528;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8C03;&#x8282;&#x548C;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x751F;&#x7269;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x662F;&#x5316;&#x5B66;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x7CBE;&#x786E;&#x3001; &#x5171;&#x4EF7;&#x4FEE;&#x9970;&#x662F;&#x8FD9;&#x4E00;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6218;&#x7565;&#x51FA;&#x73B0;&#x4E86;&#x5141;&#x8BB8;&#x7279;&#x5B9A;&#x88C1;&#x7F1D;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EFB;&#x4E00;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x6216;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x672C;&#x6559;&#x7A0B;&#x7684;&#x5BA1;&#x67E5;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x7684;&#x6700;&#x65B0;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4FEE;&#x6539;: &#x51FB;&#x4E2D;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

The use of synthetic molecules to modulate and track biological events is a central component of chemical biology. As a result, the precise, covalent modification of biomolecules is a key goal for this field. Several strategies have emerged that allow specific tailoring of polypeptides through either endogenous residues or introduced functionality. This tutorial review discusses these recent advances in the context of in vitro and in vivo applications.

Chemoselective modification of proteins: hitting the target.

L&#39;utilisation de mol&eacute;cules synth&eacute;tiques de moduler et de suivre les &eacute;v&eacute;nements biologiques est un &eacute;l&eacute;ment central de la biologie chimique. En cons&eacute;quence, la modification pr&eacute;cise, covalente des biomol&eacute;cules est un objectif cl&eacute; de ce champ. Plusieurs strat&eacute;gies sont apparus qui permettent une adaptation sp&eacute;cifique de polypeptides &agrave; travers deux r&eacute;sidus endog&egrave;nes ou introduit des fonctionnalit&eacute;s. Cette revue tutoriel discute de ces avanc&eacute;es r&eacute;centes dans le cadre d&#39;applications in vitro et in vivo.

Chimios&eacute;lective modification des prot&eacute;ines : frapper la cible.

Die Verwendung von synthetischen Molek&uuml;len zu modulieren und biologischen Ereignisse zu verfolgen ist ein zentraler Bestandteil der chemischen Biologie. Infolgedessen ist die pr&auml;zise, kovalente Modifikation von Biomolek&uuml;len ein Hauptziel f&uuml;r dieses Feld. Verschiedene Strategien sind entstanden, die erlauben, spezielle Anpassung der Polypeptide durch entweder endogenen R&uuml;ckst&auml;nde oder Funktionalit&auml;t eingef&uuml;hrt. Dieses Lernprogramm &Uuml;berpr&uuml;fung werden diese j&uuml;ngsten Fortschritte im Zusammenhang mit in-vitro- und in-vivo Anwendungen erl&auml;utert.

Chemoselektive &Auml;nderung der Proteine: Treffen vorbei.

L&#39;uso di molecole sintetiche di modulare e tenere traccia degli eventi biologici &egrave; un componente centrale di biologia chimica. Di conseguenza, la modifica covalente, precisa delle biomolecole &egrave; un obiettivo chiave per questo campo. Diverse strategie sono emerse che permettono specifiche sartoria di polipeptidi attraverso o residui endogeni o introdotto funzionalit&agrave;. Questa tutorial recensione discute questi avanzamenti recenti nel contesto delle applicazioni in vitro e in vivo.

Chemoselective modificazione delle proteine: colpire il bersaglio.

&#x5909;&#x8ABF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x7DCF;&#x5408;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x5206;&#x91CE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x76EE;&#x6A19;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x6B8B;&#x57FA;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x4ED5;&#x7ACB;&#x3066;&#x8A31;&#x53EF;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x3092;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x4FEE;&#x98FE;: &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x6253;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBCC0;&#xC870; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xCD94;&#xC801; &#xD569;&#xC131; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD654;&#xD559; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xACB0;&#xACFC;, biomolecules &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C;, &#xACF5;&#xC720; &#xC218;&#xC815;&#xC774;&#xC774; &#xD544;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD575;&#xC2EC; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC804;&#xB7B5; &#xC911; &#xC0DD; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; polypeptides&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xB9DE;&#xAC8C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xB3C4;&#xC785; &#xD558;&#xB294; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC790;&#xC2B5;&#xC11C; &#xAC80;&#xD1A0;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Chemoselective &#xC218;&#xC815;: &#xD45C;&#xC801;&#xC744; &#xBA85; &#xC911;.

La utilizaci&oacute;n de mol&eacute;culas sint&eacute;ticas modular y seguimiento de fen&oacute;menos biol&oacute;gicos es un componente central de la Biolog&iacute;a qu&iacute;mica. Como resultado, la modificaci&oacute;n covalente, precisa de biomol&eacute;culas es un objetivo clave para este campo. Varias estrategias que permiten la adaptaci&oacute;n espec&iacute;fica de polip&eacute;ptidos a trav&eacute;s de cualquiera de los dos residuos end&oacute;genos o introducido funcionalidad surgieron. Esta revisi&oacute;n tutorial discute estos avances recientes en el contexto de aplicaciones in vitro e in vivo.

Estereoselectiva modificaci&oacute;n de prote&iacute;nas: alcanzar el objetivo.

&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#xFF1A; &#x75C5;&#x6BD2;&#x5916;&#x8863;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x5668;&#x6807;&#x7B7E;&#x3002;

Nanoparticles: designer labels for virus coats.

Nanoparticules : griffes pour manteaux de virus.

Nanopartikel: Designer-Labels f&uuml;r Virus-M&auml;ntel.

Nanoparticelle: progettazione etichette per cappotti di virus.

&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;: &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x3002;

&#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790;: &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCF54;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB514;&#xC790;&#xC774;&#xB108; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nanopart&iacute;culas: marcas para capas de virus.

&#x5728;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; bioconjugation &#x7684;&#x65B0;&#x524D;&#x6CBF;&#x3002;

New frontiers in protein bioconjugation.

Nouvelles fronti&egrave;res en prot&eacute;ine bioconjugaison.

Neue Grenzen bei der Protein-Bioconjugation.

Nuove frontiere della proteina bioconjugation.

&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5316;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30D5;&#x30ED;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; bioconjugation &#xB274; &#xD504;&#xB860;&#xD2F0;&#xC5B4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nuevas fronteras en la prote&iacute;na bioconjugation.

&#x6570;&#x4EE5;&#x767E;&#x8BA1;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x9006;&#x662F;&#x7CD6;&#x5316;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5; O &beta;-N-&#x4E59;&#x9170;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6; (O &#x5E38;&#x6CF0;) &#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x3001; &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5176;&#x5177;&#x6709;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x610F;&#x4E49;&#xFF0C;O &#x5E38;&#x6CF0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x4F7F;&#x5F97;&#x7814;&#x7A76;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F20;&#x7EDF;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#x5355;&#x72EC;&#x4E00;&#x9879;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x76F8;&#x58F0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684; N acetylgalactosamine &#x6253;&#x635E;&#x548C; O GlcNAcylation &#x901A;&#x8DEF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5229;&#x7528;&#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684; O GlcNAcylated &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; N-azidoacetylgalactosamine (GalNAz) &#x7531; UDP GalNAz &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x9176;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x5230; UDP-N-azidoacetylglucosamine (GlcNAz) &#x7684; epimerized &#x8F6C;&#x6362;&#x3002;O &#x5E38;&#x6CF0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x63A5;&#x53D7; UDP GlcNAz &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7CD6;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#xFF0C;&#x5C06;&#x8FFD;&#x52A0;&#x5230;&#x5176;&#x672C;&#x673A;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x53EF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7684;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x8D34;&#x6807;&#x4F7F;&#x7528;&#x53E0;&#x6C2E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5B66;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x4E0A;&#x7684; azidosugar&#x3002;&#x5728;&#x8BC1;&#x660E;&#x7684;&#x539F;&#x5219;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; bioorthogonal &#x5316;&#x5B66;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x4EE3;&#x8C22; GalNAz &#x6807;&#x7B7E;&#x6765;&#x4EB2;&#x548C;&#x51C0;&#x5316;&#x548C;&#x8BC6;&#x522B;&#x8BB8;&#x591A; O GlcNAcylated &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x672A;&#x6765;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#x3001; &#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x3001; &#x548C;&#x8FA8;&#x522B;&#x52A8;&#x6001; O &#x5E38;&#x6CF0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x84DD;&#x56FE;&#x3002;

&#x4EE3;&#x8C22;&#x76F8;&#x58F0;&#x5141;&#x8BB8;&#x6807;&#x7B7E;&#x94FE;&#x63A5; O &beta;-N-&#x4E59;&#x9170;&#x6C28;&#x57FA;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4FEE;&#x6539;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x901A;&#x8FC7; N acetylgalactosamine &#x6551;&#x52A9;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

Hundreds of mammalian nuclear and cytoplasmic proteins are reversibly glycosylated by O-linked Î²-N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) to regulate their function, localization, and stability. Despite its broad functional significance, the dynamic and posttranslational nature of O-GlcNAc signaling makes it challenging to study using traditional molecular and cell biological techniques alone. Here, we report that metabolic cross-talk between the N-acetylgalactosamine salvage and O-GlcNAcylation pathways can be exploited for the tagging and identification of O-GlcNAcylated proteins. We found that N-azidoacetylgalactosamine (GalNAz) is converted by endogenous mammalian biosynthetic enzymes to UDP-GalNAz and then epimerized to UDP-N-azidoacetylglucosamine (GlcNAz). O-GlcNAc transferase accepts UDP-GlcNAz as a nucleotide-sugar donor, appending an azidosugar onto its native substrates, which can then be detected by covalent labeling using azide-reactive chemical probes. In a proof-of-principle proteomics experiment, we used metabolic GalNAz labeling of human cells and a bioorthogonal chemical probe to affinity-purify and identify numerous O-GlcNAcylated proteins. Our work provides a blueprint for a wide variety of future chemical approaches to identify, visualize, and characterize dynamic O-GlcNAc signaling.

Metabolic cross-talk allows labeling of O-linked beta-N-acetylglucosamine-modified proteins via the N-acetylgalactosamine salvage pathway.

Des centaines de prot&eacute;ines nucl&eacute;aires et cytoplasmiques de mammif&egrave;res sont r&eacute;versiblement glycosyl&eacute;e par O-li&eacute;s &beta;-N-ac&eacute;tylglucosamine (GlcNAc-O) de r&eacute;glementer leur fonction, leur localisation et stabilit&eacute;. Malgr&eacute; sa grande importance fonctionnelle, la nature dynamique et post-traductionnelle de la signalisation d&#39;O-GlcNAc rend difficile d&#39;&eacute;tudier &agrave; l&#39;aide de la traditionnelles mol&eacute;culaires et cellulaires biologiques seules les techniques. Nous rapportons ici que l&#39;interf&eacute;rence m&eacute;tabolique entre la r&eacute;cup&eacute;ration de la N-ac&eacute;tylgalactosamine et O-GlcNAcylation voies peuvent &ecirc;tre exploit&eacute;es pour le marquage et l&#39;identification des prot&eacute;ines O-GlcNAcylated. Nous avons trouv&eacute; que la N-azidoacetylgalactosamine (GalNAz) est convertie par enzymes biosynth&eacute;tiques mammif&egrave;res endog&egrave;nes d&#39;UDP-GalNAz et alors &eacute;pim&eacute;ris&eacute; &agrave; UDP-N-azidoacetylglucosamine (GlcNAz). O-GlcNAc transf&eacute;rase accepte UDP-GlcNAz comme un donneur de nucl&eacute;otide-sucre, en ajoutant un azidosugar sur ses substrats natifs, qui peut alors &ecirc;tre d&eacute;tect&eacute; en utilisant &eacute;tiquetage covalent azoture-r&eacute;actif chimique des sondes. Dans une exp&eacute;rience de d&eacute;monstration des principes prot&eacute;omique, nous avons utilis&eacute; l&#39;&eacute;tiquetage GalNAz m&eacute;tabolique des cellules humaines et une sonde chimique bioorthogonal affinit&eacute;-purifier et d&#39;identifier de nombreuses prot&eacute;ines O-GlcNAcylated. Notre travail fournit un plan d&#39;action pour une grande vari&eacute;t&eacute; de futures approches chimiques &agrave; identifier, de visualiser et caract&eacute;riser la dynamique de signalisation O-GlcNAc.

Interf&eacute;rence m&eacute;tabolique permet d&#39;&eacute;tiquetage de O-li&eacute;s de prot&eacute;ines b&ecirc;ta-N-ac&eacute;tylglucosamine-modification via la voie de sauvetage N-ac&eacute;tylgalactosamine.

Hunderte von nuklearen und zytoplasmatischen S&auml;ugetierproteine sind umkehrbar HbA1c von O gebundene &beta;-N-Acetylglucosamin (O-GlcNAc), ihre Funktion, Lokalisierung und Stabilit&auml;t zu regulieren. Trotz seiner Breite funktionelle Bedeutung macht die dynamische und posttranslationale Natur O-GlcNAc signalisieren es schwierig, um mit traditionelle Molekulare und Zelle biologische Techniken allein zu studieren. Wir berichten hier, dass metabolische Nebensprechen zwischen N-Acetylgalactosamin Bergung und O-GlcNAcylation k&ouml;nnen Wege zur Kennzeichnung und Identifizierung von O-GlcNAcylated Proteinen ausgenutzt werden. Wir fanden, dass N-Azidoacetylgalactosamine (GalNAz) durch endogene S&auml;ugetier-biosynthetischen Enzyme zu UDP-GalNAz und dann spricht zu UDP-N-Azidoacetylglucosamine (GlcNAz) konvertiert wird. O-GlcNAc Transferase akzeptiert UDP-GlcNAz als Nukleotid-Zucker Spender, durch Anh&auml;ngen eines Azidosugar auf seine native Substrate, die dann mithilfe kovalente Kennzeichnung azid-reaktives entdeckt werden k&ouml;nnen, dass chemische Sonden. In einem Experiment Beweis-des-Prinzip Proteomics haben wir metabolische GalNAz Kennzeichnung menschlicher Zellen und chemischen Sonde Bioorthogonal Affinit&auml;t zu reinigen und zahlreiche O-GlcNAcylated-Proteine zu identifizieren. Unsere Arbeit stellt eine Blaupause f&uuml;r eine Vielzahl von zuk&uuml;nftigen chemische Ans&auml;tze zu identifizieren, zu visualisieren und zu charakterisieren, dynamische O-GlcNAc-Signalisierung.

Metabolische Nebensprechen erm&ouml;glicht die Kennzeichnung von O-chromosomale Beta-N-Acetylglucosamin ver&auml;nderten Proteine &uuml;ber die N-Acetylgalactosamin Salvage-Pathway.

Centinaia di proteine nucleari e citoplasmatiche dei mammiferi &egrave; reversibilmente glicosilata da legati O &beta;-N-acetilglucosamina (O-GlcNAc) per regolare la loro funzione, la localizzazione e la stabilit&agrave;. Nonostante la sua vasta importanza funzionale, la natura dinamica e post traduzionale di segnalazione O-GlcNAc lo rende impegnativo per studiare tecniche tradizionali molecolare e cellulare biologico da solo. Qui, segnaliamo quella metabolica cross-talk tra il salvataggio di N-acetilgalattosamina e O-GlcNAcylation percorsi possono essere sfruttate per il tagging e l&#39;identificazione di proteine O-GlcNAcylated. Abbiamo trovato che la N-azidoacetylgalactosamine (GalNAz) viene convertito da enzimi endogeni di biosintesi dei mammiferi a UDP-GalNAz e poi epimerized a UDP-N-azidoacetylglucosamine (GlcNAz). O-GlcNAc trasferasi accetta UDP-GlcNAz come un donatore di nucleotide-zucchero, aggiungendo un azidosugar su suoi substrati nativi, che pu&ograve; quindi essere rilevato utilizzando covalente etichettatura azoturo-reattivi chimici sonde. In un esperimento di proteomica prova di principio, abbiamo usato metabolica GalNAz contrassegno delle cellule umane e una sonda chimica bioorthogonal per affinit&agrave;-purificare e identificare numerose proteine O-GlcNAcylated. Il nostro lavoro fornisce un modello per un&#39;ampia variet&agrave; di approcci chimici futuri per identificare e visualizzare caratterizzano dinamico O-GlcNAc segnalazione.

Metabolica cross-talk permette di etichettatura della O-linked proteine beta-N-acetilglucosamina-modificato tramite il percorso di salvataggio di N-acetilgalattosamina.

&#x4F55;&#x767E;&#x3082;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x6838;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3; O &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF; &beta;-n-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3; &#xFF08;O-glcnac) &#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x610F;&#x7FA9;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A; O-glcnac &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x3068;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x306F;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x30FB;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6280;&#x6CD5;&#x3060;&#x3051;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x52C9;&#x5F37;&#x304C;&#x96E3;&#x3057;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF;&#x5831;&#x544A; n-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;, &#x30B5;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068; O GlcNAcylation &#x306E;&#x9593;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x3051;&#x3068; O GlcNAcylated &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3067;&#x60AA;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;N-azidoacetylgalactosamine (GalNAz) UDP GalNAz &#x306B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x3068; UDP-N-azidoacetylglucosamine (GlcNAz) &#x306B;&#x3057;&#x3001;epimerized &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;O-glcnac &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; UDP GlcNAz&#x3001;azidosugar&#x3001;&#x30B3;&#x30D0;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB; &#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30B8;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5316;&#x5B66;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x305D;&#x306E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x57FA;&#x6750;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x7CD6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x53D7;&#x3051;&#x5165;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x539F;&#x7406;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x4EE3;&#x8B1D; GalNAz &#x3072;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073; bioorthogonal &#x5316;&#x5B66;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x6D44;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x6570;&#x591A;&#x304F;&#x306E; O GlcNAcylated &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x8B58;&#x5225;&#x3001;&#x8996;&#x899A;&#x5316;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x52D5;&#x7684; O-glcnac &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9752;&#x5199;&#x771F;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EE3;&#x8B1D;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF; O &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; N &#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; n-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;, &#x30B5;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x3051;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD575;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC218;&#xBC31;&#xC740; &#xC5ED; O &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &beta;-N-acetylglucosamine (O GlcNAc) &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;, &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;, &#xBC0F; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2F9;&#xD654;. &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; O-GlcNAc &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; posttranslational &#xD2B9;&#xC131;&#xC740; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC790; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD63C;&#xC790; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC804;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0; &#xADF8; &#xB300;&#xC0AC; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xD1A0;&#xD06C; N acetylgalactosamine &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; O-GlcNAcylation &#xC0AC;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD0DC;&#xADF8;&#xB97C; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; O-GlcNAcylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC545;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; N-azidoacetylgalactosamine (GalNAz) UDP-GalNAz &#xD558; &#xC0DD; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; UDP-N-azidoacetylglucosamine (GlcNAz)&#xB97C; &#xB204;&#xB978; &#xB2E4;&#xC74C; epimerized&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xD658; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. O Glcnac&#xACFC; &#xB2E4;&#xC74C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xC720; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC544; &#xC9C0; &#xB4DC; &#xBC18;&#xC751; &#xD654;&#xD559; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xB294; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; azidosugar &#xCD94;&#xAC00; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC124;&#xD0D5; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; UDP GlcNAz &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6D0;&#xB9AC; &#xC99D;&#xBA85; proteomics &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; GalNAz &#xB77C;&#xBCA8; bioorthogonal &#xD654;&#xD559; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; O GlcNAcylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC791;&#xC5C5; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;, &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC801; O GlcNAc &#xC2E0;&#xD638; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xD654;&#xD559; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCCAD;&#xC0AC;&#xC9C4;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xD1A0;&#xD06C; N acetylgalactosamine &#xC778;&#xC591; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCA0;&#xD0C0; N acetylglucosamine &#xC218;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; O &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cientos de mam&iacute;feras prote&iacute;nas citoplasm&aacute;ticas y nucleares son reversible glucosilada por vinculados O &beta;-N-acetilglucosamina (O-GlcNAc) para regular su funci&oacute;n, localizaci&oacute;n y estabilidad. A pesar de su amplia significaci&oacute;n funcional, la naturaleza din&aacute;mica y postraduccional de se&ntilde;alizaci&oacute;n O-GlcNAc hace dif&iacute;cil para estudiar t&eacute;cnicas tradicionales molecular y celular biol&oacute;gico solamente. Aqu&iacute;, Divulgamos que metab&oacute;lica diafon&iacute;a entre la N-acetilgalactosamina salvamento y O-GlcNAcylation v&iacute;as pueden ser aprovechadas para el marcado e identificaci&oacute;n de prote&iacute;nas O-GlcNAcylated. Encontramos que el N-azidoacetylgalactosamine (GalNAz) se convierte por enzimas biosint&eacute;ticas mam&iacute;feras end&oacute;genas a UDP-GalNAz y luego epimerizado a UDP-N-azidoacetylglucosamine (GlcNAz). O-GlcNAc transferase acepta UDP-GlcNAz como un donante de nucle&oacute;tido-az&uacute;car, a&ntilde;adiendo un azidosugar sobre sus sustratos nativos, que luego puede ser detectado por covalente etiquetado con azida reactivos qu&iacute;micos sondas. En un experimento de prueba-de-principio prote&oacute;mica, utilizamos etiquetado de GalNAz metab&oacute;lica de las c&eacute;lulas humanas y una punta de prueba qu&iacute;mica de bioorthogonal para purificar de afinidad e identificar numerosas prote&iacute;nas O-GlcNAcylated. Nuestro trabajo ofrece un plan para una amplia variedad de enfoques futuros qu&iacute;micos para identificar, visualizar y caracterizar la din&aacute;mica O-GlcNAc se&ntilde;alizaci&oacute;n.

Diafon&iacute;a metab&oacute;lica permite etiquetado de vinculados O las prote&iacute;nas beta-N-acetilglucosamina-modificado v&iacute;a el camino de salvamento de N-acetilgalactosamina.

Oncolytic adenovirus (Ads) sono una terapia alternativa emergente per il cancro; Tuttavia, trial clinici non hanno ancora dimostrato sufficiente efficacia. Quando oncolytic annunci sono utilizzati in combinazione con taxoids un aumento sinergico sia citotossicit&agrave; e replicazione virale &egrave; osservato. Al fine di generare un adenovirus di oncolytic prossima generazione, virione erano fisicamente coniugato a un taxoid molto potente, SB-T-1214 e un motivo di targeting di folati. Coniugazione &egrave; stata attivata via metabolica incorporazione dei monosaccaridi non canonici (O GlcNAz) e amminoacidi (homopropargylglycine), che ha servito come siti per la modifica chemoselective.

Adenovirus mirati e armati oncolytic via chemoselective modifica.

Onkolytische Adenoviren (Ads) sind eine aufstrebende alternative Therapie f&uuml;r Krebs; jedoch klinische Studie haben noch keine nachgewiesenen ausreichende Wirksamkeit. Wird beobachtet, wenn Onkolytische Ads in Kombination mit Taxoids eine synergetische Erh&ouml;hung Zytotoxizit&auml;t und virale Replikation verwendet werden. Um eine n&auml;chste Generation Onkolytische Adenoviren erzeugen, Virion wurden physisch und ein hochwirksames Taxoid, SB-T-1214 und ein Motiv f&uuml;r Folat konjugiert. Konjugation aktiviert war &uuml;ber die metabolische Einbeziehung nicht-kanonische Monosaccharide (O-GlcNAz) und Aminos&auml;uren (Homopropargylglycine), die dienten als Standorte f&uuml;r chemoselektive &Auml;nderung.

Gezielte und bewaffneten Onkolytische Adenoviren &uuml;ber chemoselektive &Auml;nderung.

Ad&eacute;novirus oncolytiques (Ads) sont une th&eacute;rapie alternative &eacute;mergente du cancer ; Cependant, essai clinique n&#39;ont pas encore d&eacute;montr&eacute; une efficacit&eacute; suffisante. Quand oncolytiques annonces sont utilis&eacute;s en combinaison avec les taxo&iuml;des une augmentation synergique en cytotoxicit&eacute; et r&eacute;plication virale sont observ&eacute;. Afin de g&eacute;n&eacute;rer un ad&eacute;novirus d&#39;oncolytiques prochain g&eacute;n&eacute;ration, virion &eacute;taient physiquement conjugu&eacute; &agrave; un tr&egrave;s puissant taxo&iuml;des, SB-T-1214 et un acide folique ciblant le motif. Conjugaison a &eacute;t&eacute; activ&eacute;e via l&#39;incorporation m&eacute;tabolique des monosaccharides non canoniques (O-GlcNAz) et d&#39;acides amin&eacute;s (homopropargylglycine), qui a servi de sites de modification chimios&eacute;lectif.

Ad&eacute;novirus oncolytiques cibl&eacute;es et arm&eacute; par une modification chimios&eacute;lective.

&#x6EB6;&#x7624;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2; (Ads) &#x662F;&#x65B0;&#x5174;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7597;&#x6CD5;&#x6CBB;&#x7597;&#x764C;&#x75C7; &#xFF1B;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x6709;&#x5C1A;&#x672A;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x8DB3;&#x591F;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236; taxoids &#x534F;&#x540C;&#x589E;&#x52A0;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x6EB6;&#x7624;&#x5E7F;&#x544A;&#x65F6;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x751F;&#x6210;&#x4E0B;&#x4E00;&#x4EE3;&#x6EB6;&#x7624;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9897;&#x7C92;&#x88AB;&#x7269;&#x7406;&#x5171;&#x8F6D;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x70C8;&#x6027; taxoid&#x3001; SB-T-1214&#x5E74;&#x548C;&#x53F6;&#x9178;&#x9776;&#x5411;&#x6BCD;&#x9898;&#x3002;&#x542F;&#x7528;&#x4E86;&#x5171;&#x8F6D;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7EB3;&#x5165;&#x975E;&#x89C4;&#x8303;&#x5355;&#x7CD6; (O GlcNAz) &#x548C;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178; (homopropargylglycine)&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4FEE;&#x6539;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x548C;&#x6B66;&#x88C5;&#x7684;&#x6EB6;&#x7624;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3002;

Oncolytic adenoviruses (Ads) are an emerging alternative therapy for cancer; however, clinical trial have not yet demonstrated sufficient efficacy. When oncolytic Ads are used in combination with taxoids a synergistic increase in both cytotoxicity and viral replication is observed. In order to generate a next generation oncolytic adenovirus, virion were physically conjugated to a highly potent taxoid, SB-T-1214, and a folate targeting motif. Conjugation was enabled via the metabolic incorporation of non-canonical monosaccharides (O-GlcNAz) and amino acids (homopropargylglycine), which served as sites for chemoselective modification.

Targeted and armed oncolytic adenovirus via chemoselective modification.

&#x5897;&#x6B96;&#x578B;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (&#x5E83;&#x544A;) &#x306B;&#x65B0;&#x8208;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x7642;&#x6CD5;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x3060;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3002;&#x3068;&#x304D;&#x816B;&#x760D;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6027;&#x5E83;&#x544A; taxoids &#x76F8;&#x4E57;&#x7684;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3068;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6B21;&#x4E16;&#x4EE3;&#x5897;&#x6B96;&#x578B;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x5171;&#x5F79;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30BF;&#x30AD;&#x30BD;&#x30A4;&#x30C9;&#x3001;SB-T-1214&#x5E74;&#x3001;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x8449;&#x9178;&#x306B;&#x3002;&#x52D5;&#x8A5E;&#x304C;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x5316;&#x5B66;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x4FEE;&#x6B63;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x975E;&#x6B63;&#x898F;&#x5358;&#x7CD6;&#x985E; (O-GlcNAz&#xFF09;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178; &#xFF08;homopropargylglycine&#xFF09; &#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3002;

&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x3068;&#x6B66;&#x88C5;&#x5897;&#x6B96;&#x578B;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5316;&#x5B66;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3002;

Oncolytic adenoviruses (&#xAD11;&#xACE0;)&#xB294; &#xC554;;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB300;&#xCCB4; &#xC694;&#xBC95; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC784;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xB294; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xC544;&#xC9C1; &#xC99D;&#xBA85; &#xB418;&#xC9C0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xAD00;&#xCC30;&#xC740; oncolytic &#xAD11;&#xACE0; &#xB54C; taxoids &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0; &#xC99D;&#xAC00; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC74C; &#xC138;&#xB300; oncolytic &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560;&#xC9C0; virion &#xC721;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; taxoid, SB-T-1214, &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5FD; &#xC0B0;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC6A9; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xC815;&#xC2DD;&#xC774; &#xC544;&#xB2CC; monosaccharides (O GlcNAz)&#xACFC; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; (homopropargylglycine)&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xC124;&#xB9BD;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; chemoselective &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xC784;.

&#xD0C0;&#xAC9F;&#xACFC; &#xBB34;&#xC7A5; oncolytic &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; chemoselective &#xC218;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Adenovirus oncol&iacute;ticos (anuncios) son una terapia alternativa emergente para el c&aacute;ncer; sin embargo, ensayo cl&iacute;nico no han demostrado a&uacute;n suficiente eficacia. Se observa cuando oncol&iacute;ticos anuncios se utilizan en combinaci&oacute;n con taxoids un incremento sin&eacute;rgico en citotoxicidad y replicaci&oacute;n viral. Para generar un pr&oacute;ximo adenovirus oncol&iacute;ticos de generaci&oacute;n, viri&oacute;n fueron f&iacute;sicamente conjugado con un taxoides altamente potente, SB-T-1214 y un folato dirigidos a adorno. Verbal fue posible mediante la incorporaci&oacute;n metab&oacute;lica de monosac&aacute;ridos no can&oacute;nicos (O-GlcNAz) y amino&aacute;cidos (homopropargylglycine), que sirvi&oacute; como sitios para la modificaci&oacute;n de estereoselectiva.

Adenovirus oncol&iacute;ticos espec&iacute;ficas y armados mediante modificaci&oacute;n estereoselectiva.

&#x771F;&#x6B63;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x6267;&#x884C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5316;&#x5B66;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x56F0;&#x96BE;&#x5F80;&#x5F80;&#x611F;&#x5230;&#x96EA;&#x4E0A;&#x52A0;&#x971C;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x7F13;&#x89E3;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5E76;&#x53D1;&#x75C7;&#xFF0C;&#x76EE;&#x6807;&#x53EF;&#x4EE5;&#x662F;&quot;prelabeled&quot;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E0E;&#x975E;&#x81EA;&#x7136;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x8BBF;&#x95EE;&#x5177;&#x6709;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684; bioorthogonal &#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x4F53;&#x79EF;&#x5C0F;&#x3001; &#x5185;&#x5408;&#x6210;&#x9014;&#x5F84;&#x548C;&#x9AD8;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x83B7;&#x5F97;&#x5141;&#x8BB8;&#xFF0C;&#x53E0;&#x6C2E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4F18;&#x79C0; bioorthogonal &#x53E5;&#x67C4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x6B65;&#x6807;&#x8BB0;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6B63;&#x9010;&#x6E10;&#x6210;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x8981;&#x4FEE;&#x6539;&#x6CBB;&#x7597;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7AE0;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x91C7;&#x53D6;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6218;&#x7565;&#x8FC8;&#x51FA;&#x7684;&#x4E00;&#x6B65;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E94;&#x7528;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7ED3;&#x624E;&#x8981;&#x6539;&#x9020;&#x7684;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6D89;&#x53CA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6B63;&#x5728;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x7684;&#x4EBA;&#x6570;&#x4F17;&#x591A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x7B80;&#x6613;&#x3001; &#x7075;&#x6D3B;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x6539;&#x6027;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x4EE5;&#x63A8;&#x52A8;&#x4E0B;&#x4E00;&#x4EE3;&#x836F;&#x7269;&#x6CBB;&#x7597;&#x5B66;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x53E0;&#x6C2E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8868;&#x9762;&#x901A;&#x8FC7;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x534F;&#x8BAE;&#x57FA;&#x4E8E;&#x94DC;&#x8F85;&#x52A9;&quot;&#x5355;&#x51FB;&quot;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x6539;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5BF9;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x8BBF;&#x95EE;&#x800C;&#x53C8;&#x4E0D;&#x727A;&#x7272;&#x611F;&#x67D3;&#x529B;&#x3002;

&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6539;&#x6027;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x8F74;&#x627F;&#x4ECB;&#x7ECD;&quot;&#x53EF;&#x70B9;&#x51FB;&quot;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x548C;&#x7CD6;&#x7C7B;&#x3002;

The inherent difficulty of performing chemical modifications of proteins in a truly site-specific fashion is often compounded by the need to work within complex biological settings. In order to alleviate this complication, targets can be "prelabeled" metabolically with unnatural residues, which allow access to highly selective bioorthogonal reactions. Due to their small size, permissibility within biosynthetic pathways and access to reactions with high specificity, azides provide excellent bioorthogonal handles. This two-step labeling process is emerging as a highly effective means to modify therapeutic proteins. In this chapter, we take this strategy a step further and apply chemoselective ligation to remodel the surfaces of adenoviruses. Despite the large number of ongoing clinical trials involving these complex mammalian viruses, new methods for their facile, flexible surface modification are necessary to drive the development of next-generation therapeutics. Here we demonstrate the modification of azides on adenoviral surfaces via a straightforward chemoselective protocol based on copper-assisted "click" chemistry. This method provides access to a wide array of effector functionalities without sacrificing infectivity.

Chemoselective modification of viral proteins bearing metabolically introduced "clickable" amino acids and sugars.

La difficult&eacute; inh&eacute;rente d&#39;effectuer des modifications chimiques des prot&eacute;ines de fa&ccedil;on vraiment in site est souvent aggrav&eacute;e par la n&eacute;cessit&eacute; de travailler &agrave; l&#39;int&eacute;rieur des param&egrave;tres biologiques complexes. Afin d&#39;att&eacute;nuer cette complication, cibles peuvent &ecirc;tre &quot;pr&eacute;marqu&eacute;es&quot; m&eacute;taboliquement avec les r&eacute;sidus contre naturels, qui permettent l&#39;acc&egrave;s &agrave; des r&eacute;actions de bioorthogonal hautement s&eacute;lectif. En raison de leur petite taille, la lic&eacute;it&eacute; dans les voies de biosynth&egrave;se et acc&egrave;s aux r&eacute;actions avec grande sp&eacute;cificit&eacute;, azotures fournissent des handles bioorthogonal excellent. Ce processus de labellisation en deux &eacute;tapes s&#39;impose comme un moyen tr&egrave;s efficace pour modifier les prot&eacute;ines th&eacute;rapeutiques. Dans ce chapitre, nous prendre cette strat&eacute;gie un peu plus loin et s&#39;appliquent &agrave; la ligature chimios&eacute;lective pour remodeler les surfaces des ad&eacute;novirus. Malgr&eacute; le grand nombre d&#39;essais cliniques en cours impliquant ces virus complexes chez les mammif&egrave;res, nouvelles m&eacute;thodes pour leur modification facile et flexible de la surface sont n&eacute;cessaires pour conduire le d&eacute;veloppement de th&eacute;rapies de nouvelle g&eacute;n&eacute;ration. Nous d&eacute;montrons la modification des azotures sur surfaces ad&eacute;novirus via un protocole simple chimios&eacute;lective bas&eacute;e sur la chimie assist&eacute;e par cuivre &laquo; clic &raquo;. Cette m&eacute;thode permet d&#39;acc&eacute;der &agrave; un large &eacute;ventail de fonctions effectrices sans pour autant sacrifier l&#39;infectivit&eacute;.

Chimios&eacute;lective modification des prot&eacute;ines virales portant m&eacute;taboliquement introduit &laquo; cliquables &raquo; acides amin&eacute;s et des sucres.

Die inh&auml;rente Schwierigkeit durchf&uuml;hren chemische Modifikationen von Proteinen in einer wahrhaft standortspezifische Mode wird oft durch die Notwendigkeit, innerhalb der komplexen biologischen Einstellungen arbeiten verst&auml;rkt. Um diese Komplikation zu lindern, k&ouml;nnen Ziele &quot;metabolisch mit unnat&uuml;rlichen R&uuml;ckst&auml;nde, die Zugang zu hochselektive Bioorthogonal Reaktionen Aufklebern werden&quot;. Aufgrund ihrer geringen Gr&ouml;&szlig;e, Zul&auml;ssigkeit innerhalb biosynthetischen Bahnen und Zugang zu Reaktionen mit hoher Spezifit&auml;t bieten Azide ausgezeichnete Bioorthogonal Griffe. Das Kennzeichenrecht Schritten entsteht als hochwirksames Mittel, therapeutische Proteine zu &auml;ndern. In diesem Kapitel haben wir diese Strategie einen Schritt weiter und wenden chemoselektive Verbindung um die Oberfl&auml;chen von Adenoviren umgestalten. Trotz der gro&szlig;en Anzahl der laufenden klinischen Studien, die mit diesen komplexen S&auml;ugetier-Viren sind neue Methoden f&uuml;r ihre einfache, flexible Oberfl&#x102; &curren; chenbehandlung notwendig, die Entwicklung der n&auml;chsten Generation-Therapeutika zu fahren. Hier zeigen wir die &Auml;nderung der Azide adenoviral Oberfl&auml;chen &uuml;ber eine einfache chemoselektive-Protokoll basierend auf Kupfer-gest&uuml;tzte &quot;Klick&quot; Chemie. Diese Methode erm&ouml;glicht den Zugriff auf eine Vielzahl von Effektor-Funktionen ohne Einbu&szlig;en bei der Infektiosit&auml;t.

Chemoselektive &Auml;nderung der viralen Proteine mit metabolisch eingef&uuml;hrt &quot;anklickbar&quot; Aminos&auml;uren und Zucker.

La difficolt&agrave; intrinseca di eseguire modifiche chimiche delle proteine in modo veramente site specific &egrave; spesso aggravata dalla necessit&agrave; di lavorare all&#39;interno di impostazioni biologiche complesse. Al fine di alleviare questa complicazione, gli obiettivi possono essere &quot;prelabeled&quot; metabolicamente con residui di innaturale, che permettono l&#39;accesso a reazioni bioorthogonal altamente selettiva. A causa della loro piccola dimensione, ammissibilit&agrave; all&#39;interno di vie biosintetiche e accesso alle reazioni con alta specificit&agrave;, azoturi forniscono eccellente bioorthogonal maniglie. Questo processo di etichettatura in due fasi sta emergendo come un mezzo altamente efficacia per modificare le proteine terapeutiche. In questo capitolo, prendiamo questa strategia un passo ulteriore e applicare chemoselective legatura per rimodellare le superfici di adenovirus. Nonostante il gran numero di prove cliniche in corso in questi complessi virus dei mammiferi, nuovi metodi per la loro modificazione superficiale flessibile, facile sono necessari per guidare lo sviluppo di terapie di nuova generazione. Qui dimostriamo la modifica di azidi su superfici adenovirali tramite un protocollo semplice chemoselective basato sulla chimica del rame-assistita &quot;clic&quot;. Questo metodo fornisce l&#39;accesso a una vasta gamma di funzioni effettrici senza sacrificare l&#39;infettivit&agrave;.

Chemoselective modificazione delle proteine virali cuscinetto metabolicamente introdotto &quot;cliccabile&quot; aminoacidi e zuccheri.

&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306F;&#x672C;&#x5F53;&#x306B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x96E3;&#x6613;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x5185;&#x3067;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x5229;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5408;&#x4F75;&#x75C7;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&quot;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x9AD8;&#x9078;&#x629E;&#x7684; bioorthogonal &#x53CD;&#x5FDC;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x4E0D;&#x81EA;&#x7136;&#x306A;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3068; prelabeled &#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&quot;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3001;&#x5185;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x9AD8;&#x3044;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3068;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x5426;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D7;&#x30D5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30EC;&#x30F3;&#x512A;&#x308C;&#x305F; bioorthogonal &#x30CF;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E; 2 &#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x6CBB;&#x7642;&#x7528;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x624B;&#x6BB5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x4E00;&#x6B69;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x3092;&#x6539;&#x9020;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x7D50;&#x7D2E;&#x8853;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x9032;&#x884C;&#x4E2D;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x6570;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5B89;&#x6613;&#x306A;&#x67D4;&#x8EDF;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x6539;&#x8CEA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x6B21;&#x4E16;&#x4EE3;&#x6CBB;&#x7642;&#x85AC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D7;&#x30D5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30EC;&#x30F3;&#x9285;&#x30A2;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x300C;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x300D;&#x5316;&#x5B66;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x305F;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x5316;&#x5B66;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x7D4C;&#x7531;&#x306E;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x304C;&#x3001;&#x5E45;&#x5E83;&#x3044;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x300C;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AB;&#x30D6;&#x30EB;&#x3001;&#x300D;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x8EF8;&#x53D7;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

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&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; metabolically &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1;&#xC758; Chemoselective &#xC218;&#xC815; &quot;&#xD074;&#xB9AD; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C;&quot; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xB2F9; &#xBD84;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;.

La dificultad inherente de realizar modificaciones qu&iacute;micas de las prote&iacute;nas de una manera verdaderamente espec&iacute;fica a menudo se complica por la necesidad de trabajar dentro de los contextos biol&oacute;gicos complejos. Para paliar esta complicaci&oacute;n objetivos pueden ser &quot;prelabeled&quot; metab&oacute;licamente con residuos antinaturales, que permiten el acceso a las reacciones de bioorthogonal altamente selectivo. Debido a su tama&ntilde;o peque&ntilde;o, permisibilidad en v&iacute;as biosint&eacute;ticas y acceso a las reacciones con alta especificidad, azidas proporcionan excelente bioorthogonal asas. Este proceso de dos etapas de etiquetado se perfila como un medio muy eficaz para modificar prote&iacute;nas terap&eacute;uticas. En este cap&iacute;tulo, tomamos esta estrategia un paso m&aacute;s y aplicar ligadura estereoselectiva para remodelar las superficies de adenovirus. A pesar del gran n&uacute;mero de ensayos cl&iacute;nicos en curso que involucran estos virus mam&iacute;feros complejos, nuevos m&eacute;todos para su modificaci&oacute;n superficial f&aacute;cil, flexible son necesarios para impulsar el desarrollo de terapias de &uacute;ltima generaci&oacute;n. Aqu&iacute; demostramos la modificaci&oacute;n de azidas en superficies adenoviral mediante un protocolo sencillo estereoselectiva basado en qu&iacute;mica cobre-asistida &quot;clic&quot;. Este m&eacute;todo proporciona acceso a una amplia gama de funciones efectoras sin sacrificar la infectividad.

Estereoselectiva modificaci&oacute;n de prote&iacute;nas virales teniendo metab&oacute;licamente present&oacute; &quot;clickable&quot; amino&aacute;cidos y az&uacute;cares.

&#x816B;&#x760D;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x529B;&#x611F;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x52A0;&#x901F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5DE5;&#x5B66;&#x3001;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x512A;&#x52E2;&#x306A;&#x65B9;&#x5F0F;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30B3;&#x30FC;&#x30D7;&#x5185;&#x3067;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x30DC;&#x30C8;&#x30EB;&#x30CD;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5B9A;&#x6B3E;&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x81EA;&#x7136;&#x306A;&#x30A2;&#x30B8;&#x30C9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x7802;&#x7CD6;&#x3001;O-GlcNAz &#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30A2;&#x30BF;&#x30C3;&#x30C1;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; affibodies Her2 &#x307E;&#x305F;&#x306F; EGF &#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x66F4;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9AD8;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3001;&#x9AD8;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x7C21;&#x5358;&#x3067;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x4E00;&#x822C;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x4E0A;&#x306E;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x3092; affords &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x6B21;&#x4E16;&#x4EE3;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x611F;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x5909;&#x66F4;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E; ErbB &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9776;&#x5411;&#x6EB6;&#x7624;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x589E;&#x52A0;&#x7597;&#x6548;&#x548C;&#x52A0;&#x901F;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x3001; &#x66F4;&#x6539;&#x77E2;&#x91CF;&#x53D6;&#x5411;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8303;&#x56F4;&#x6709;&#x9650;&#xFF0C;&#x5F80;&#x5F80;&#x8868;&#x793A;&#x5411;&#x91CF;&#x53D1;&#x5C55;&#x74F6;&#x9888;&#x3002;&#x975E;&#x81EA;&#x7136;&#x53E0;&#x7CD6;&#xFF0C;O GlcNAz&#xFF0C;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x5730;&#x70B9;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7EB3;&#x5165;&#x5141;&#x8BB8; affibodies &#x4E3A; Her2 &#x6216;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x9644;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x3001; &#x9AD8;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6539;&#x6027;&#x662F;&#x7B80;&#x5355;&#x548C;&#x5BB9;&#x6613;&#x53EF;&#x5F52;&#x7EB3;&#x3001; &#x6F14;&#x793A;&#x5BF9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x751F;&#x7406;&#x5F71;&#x54CD;&#x6700;&#x5C11;&#x548C;&#x4F7F;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x5347;&#x5E45;&#x3002;&#x5176;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#xFF0C;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5177;&#x6709;&#x5F88;&#x5927;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E0B;&#x4E00;&#x4EE3;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x7597;&#x6548;&#x3002;

&#x6539;&#x53D8;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x901A;&#x8FC7;&#x5355;&#x51FB;&#x4FEE;&#x6539; ErbB &#x7279;&#x5B9A;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x53D6;&#x5411;&#x3002;

Methods for targeting oncolytic viruses can increase efficacy and accelerate development. Genetic engineering, the predominant method for changing vector tropism, is limited in scope and often represents the bottleneck for vector development. Metabolic incorporation of an unnatural azido sugar, O-GlcNAz, at a specific site on the adenoviral surface allows chemoselective attachment of affibodies for Her2 or EGF receptors. Modification with these high-affinity, high-selectivity proteins is straightforward and readily generalizable, demonstrates minimal impact on virus physiology, and affords significant increases in gene delivery to cancer cells. As a result, this method has significant potential to increase the efficacy of next-generation viral vectors.

Altering Adenoviral Tropism via Click Modification with ErbB Specific Ligands.

M&eacute;thodes pour cibler les virus oncolytiques peuvent augmenter l&#39;efficacit&eacute; et acc&eacute;l&eacute;rer le d&eacute;veloppement. G&eacute;nie g&eacute;n&eacute;tique, la principale m&eacute;thode pour changer le vecteur tropisme, a une port&eacute;e limit&eacute;e et repr&eacute;sente souvent le goulot d&#39;&eacute;tranglement pour le vecteur de d&eacute;veloppement. Incorporation m&eacute;tabolique d&#39;un sucre artificiel azido, O-GlcNAz, dans un site sp&eacute;cifique sur la surface ad&eacute;noviraux permet &agrave; chimios&eacute;lective attachement d&#39;affibodies pour les r&eacute;cepteurs Her2 ou EGF. Modification avec ces prot&eacute;ines haute affinit&eacute;, haute s&eacute;lectivit&eacute; est simple et facilement g&eacute;n&eacute;ralisables, montre un impact minimal sur la physiologie des virus et conduit &agrave; une augmentation significative dans la livraison de g&egrave;ne aux cellules canc&eacute;reuses. Ainsi, cette m&eacute;thode a un potentiel important d&#39;augmenter l&#39;efficacit&eacute; de la g&eacute;n&eacute;ration des vecteurs viraux.

Modifier le tropisme ad&eacute;noviraux par une Modification de clic avec des Ligands sp&eacute;cifiques ErbB.

Methoden f&uuml;r targeting Onkolytische Viren k&ouml;nnen Wirksamkeit zu erh&ouml;hen und die Entwicklung zu beschleunigen. Gentechnik, die vorherrschende Methode f&uuml;r das &Auml;ndern von Vektor-Tropismus, ist begrenzt und oft den Engpass f&uuml;r Vektor-Entwicklung darstellt. Metabolischen Integration eine unnat&uuml;rliche Azido Zucker, O-GlcNAz, an einem bestimmten Standort adenoviral oberfl&auml;chlich erm&ouml;glicht chemoselektive Befestigung der Affibodies f&uuml;r Her2 oder EGF-Rezeptoren. Umbau mit dieser Proteine hoher Affinit&auml;t, hohe Selektivit&auml;t ist unkompliziert und leicht verallgemeinern, zeigt minimalen Auswirkungen auf die Virus-Physiologie und bietet betr&auml;chtliche Steigerungen der Gen-Lieferung zu Krebszellen. Daher hat diese Methode signifikante Potenzial zur Steigerung der Wirksamkeit von viralen Vektoren der n&auml;chsten Generation.

Adenoviral Tropismus per Click-Umbau mit ErbB-spezifische Liganden zu ver&auml;ndern.

Metodi per il targeting virus oncolytic possono aumentare l&#39;efficacia e accelerare lo sviluppo. Ingegneria genetica, il metodo predominante per cambiare vettore trofismo, &egrave; limitato e spesso rappresenta il collo di bottiglia per lo sviluppo del vettore. Metabolica incorporazione di un innaturale gruppi dello zucchero, O-GlcNAz, presso un sito specifico sulla superficie adenovirale permette chemoselective attacco di affibodies per i recettori Her2 o EGF. Modifica con queste proteine ad alta affinit&agrave;, alta selettivit&agrave; &egrave; semplice e facilmente generalizzabile, dimostra un impatto minimo sulla fisiologia del virus e garantisce un aumento significativo nella consegna del gene in cellule tumorali. Di conseguenza, questo metodo ha un potenziale significativo per aumentare l&#39;efficacia della nuova generazione di vettori virali.

Modifica adenovirale tropismo tramite clic modifica con ErbB specifici ligandi.

Oncolytic &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xAC00;&#xC18D;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804; &#xACF5;&#xD559; &#xBCA1;&#xD130; tropism&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xB294; &#xC8FC;&#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558; &#xACE0; &#xC885;&#xC885; &#xBCA1;&#xD130; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCD1;&#xBAA9; &#xD604;&#xC0C1;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD80;&#xC790;&#xC5F0; &#xC2A4;&#xB7EC;&#xC6B4; azido &#xC124;&#xD0D5;, O-GlcNAz adenoviral &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xC124;&#xB9BD; Her2 &#xB610;&#xB294; EGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; affibodies&#xC758; chemoselective &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;, &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xC815; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xBC1B;&#xC544;&#xB4E4;&#xC774;&#xAE30;&#xB294; &#xD558; &#xACE0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC694; &#xADF9;&#xC744; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00;. &#xADF8; &#xACB0;&#xACFC;,&#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC138;&#xB300; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xB192;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;.

ErbB &#xD2B9;&#xC815; Ligands&#xC640; &#xD074;&#xB9AD; &#xC218;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; Adenoviral Tropism&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

M&eacute;todos contra virus oncol&iacute;ticos pueden aumentar la eficacia y acelerar el desarrollo. Ingenier&iacute;a gen&eacute;tica, el m&eacute;todo predominante para el cambio de vector tropismo, es limitada en su alcance y a menudo representa el cuello de botella para el desarrollo del vector. Incorporaci&oacute;n metab&oacute;lico de un az&uacute;car azido antinatural, O-GlcNAz, en un sitio espec&iacute;fico en la superficie adenoviral permite estereoselectiva accesorio de affibodies para los receptores Her2 o EGF. Modificaci&oacute;n con estas prote&iacute;nas de alta afinidad, alta selectividad es sencilla y f&aacute;cilmente generalizables, demuestra un impacto m&iacute;nimo sobre la fisiolog&iacute;a de virus y produce un aumento significativo en la entrega de genes a las c&eacute;lulas cancerosas. Como resultado, este m&eacute;todo tiene gran potencial para aumentar la eficacia de la pr&oacute;xima generaci&oacute;n de vectores virales.

Article	Year
Biosynthesis of proteins incorporating a versatile set of phenylalanine analogues. Chembiochem : a European journal of chemical biology\| PubMed ID: 11921403	2002
A designed phenylalanyl-tRNA synthetase variant allows efficient in vivo incorporation of aryl ketone functionality into proteins. Journal of the American Chemical Society\| PubMed ID: 12010034	2002
Metabolic labeling of glycans with azido sugars for visualization and glycoproteomics. Methods in enzymology\| PubMed ID: 17116478	2006
Lithographic patterning of photoreactive cell-adhesive proteins. Journal of the American Chemical Society\| PubMed ID: 17397163	2007
Introducing genetically encoded aldehydes into proteins. Nature chemical biology\| PubMed ID: 17450134	2007
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Nanoparticles: designer labels for virus coats. Nature nanotechnology\| PubMed ID: 19119273	2009
New frontiers in protein bioconjugation. Current opinion in chemical biology\| PubMed ID: 21112236	2010
Metabolic cross-talk allows labeling of O-linked beta-N-acetylglucosamine-modified proteins via the N-acetylgalactosamine salvage pathway. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 21300897	2011
Targeted and armed oncolytic adenovirus via chemoselective modification. Bioorganic & medicinal chemistry letters\| PubMed ID: 21669527	2011
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Isaac S. Carrico

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