ex-vivo-culturing-of-whole-developing-drosophila-brains

<em>Ex vivo</em> Culturing of Whole, Developing <em>Drosophila</em> Brains

We describe a method for ex vivo culturing of whole Drosophila brains. This can be used as a counterpoint to chronic genetic manipulations for ...

National Institute of Neurological Disorders and Stroke

National Institutes of Health, Bethesda, MD

La p&#xE9;rdida de cualquiera de las LGL o actividad de los genes mocoso en larvas de Drosophila causa de los tumores cerebrales neopl&#xE1;sicas. Los fragmentos de cerebro tumorales de cualquier mutante trasplantadas en adultos mayores de los ej&#xE9;rcitos-proliferan, y matar a sus anfitriones dentro de 2 semanas. Hemos desarrollado un ensayo in vivo para el potencial metast&#xE1;sico de las c&#xE9;lulas tumorales mediante la cuantificaci&#xF3;n de la formaci&#xF3;n de micromet&#xE1;stasis en los ovarioles de los ej&#xE9;rcitos de adultos despu&#xE9;s del trasplante y se determin&#xF3; que las propiedades espec&#xED;ficas de met&#xE1;stasis de las c&#xE9;lulas LGL y el palo de golf tumorales son diferentes. No se detectaron micromet&#xE1;stasis en el 15,8% de ovarioles de hembras silvestres de tipo de acogida de 12 d&#xED;as despu&#xE9;s del trasplante Lgl las c&#xE9;lulas tumorales en sus cavidades abdominales. Esta frecuencia se increment&#xF3; significativamente con el tiempo aumento de la proliferaci&#xF3;n. No se detectaron micromet&#xE1;stasis en el 15% de ovarioles de hembras silvestres de tipo de acogida de 10 d&#xED;as despu&#xE9;s del trasplante las c&#xE9;lulas tumorales palo de golf en sus cavidades abdominales. Por el contrario, esta frecuencia no ha cambiado significativamente con el tiempo aumento de la proliferaci&#xF3;n. Se encontr&#xF3; que casi todas las micromet&#xE1;stasis Lgl co-expresan el marcador de las c&#xE9;lulas neuronales, Elav, y el marcador de c&#xE9;lula glial, REPO. Estos marcadores no son co-expresados &#x200B;&#x200B;en las c&#xE9;lulas cerebrales normales ni en las c&#xE9;lulas cerebrales tumorales. Esto indica la expresi&#xF3;n desregulada gen en estas c&#xE9;lulas metast&#xE1;sicas. Por el contrario, la mayor parte del palo de golf micromet&#xE1;stasis expresado ni marcador. Mientras que las mutaciones, tanto en LGL y la mocosa causar tumores cerebrales neopl&#xE1;sicas, nuestros resultados revelan que las c&#xE9;lulas metast&#xE1;sicas que surgen de estos tumores tienen propiedades muy diferentes. Estos datos pueden tener implicaciones importantes para el tratamiento de la met&#xE1;stasis tumoral.

Drosophila met&#xE1;stasis de tumores cerebrales expresan marcadores de c&#xE9;lulas neuronales y gliales Tanto Tipo

&#x679C;&#x8747;&#x5E7C;&#x866B;&#x5C0F;&#x5B50;&#x6216; lgl &#x57FA;&#x56E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6076;&#x6027;&#x8111;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x7247;&#x6BB5;&#x4ECE;&#x79FB;&#x690D;&#x5230;&#x6210;&#x4EBA;&#x4E3B;&#x673A;&#x6216;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x5927;&#x8111;&#x7684; over-proliferate&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728; 2 &#x5468;&#x5185;&#x6740;&#x6B7B;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F53;&#x5185;&#x9176;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6F5C;&#x80FD;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x91CF;&#x5316;&#x540E;&#x79FB;&#x690D;&#x6210;&#x4EBA;&#x4E3B;&#x673A;&#x5185; ovarioles &#x5FAE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x786E;&#x5B9A;&#x5177;&#x4F53; lgl &#x548C;&#x5C0F;&#x5B50;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5C5E;&#x6027;&#x90FD;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC; 12 &#x5929;&#x540E; lgl &#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x5165;&#x5176;&#x8179;&#x8154; 15.8%&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4E3B;&#x673A;&#x5973;&#x6027;&#x4ECE; ovarioles &#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5FAE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9891;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x65F6;&#x95F4;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C0F;&#x5B50;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x5165;&#x5176;&#x8179;&#x8154;&#x540E;&#x7684; 10 &#x5929;&#x4E2D; 15%&#x7684;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4E3B;&#x673A;&#x5973;&#x6027; ovarioles &#x5FAE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x53CD;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9891;&#x7387;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x53D8;&#x5316;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709; lgl &#x5FAE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x90FD; co-express &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x3001; ELAV &#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x56DE;&#x8D2D;&#x3002;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x8111;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x5728;&#x8111;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E0D;&#x591A;&#x53D1;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7624;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x653E;&#x677E;&#x7BA1;&#x5236;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x53CD;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x5C0F;&#x5B50;&#x5FAE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8868;&#x793A;&#x65E2;&#x4E0D;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x867D;&#x7136; lgl &#x548C;&#x5C0F;&#x5B50;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x80BF;&#x7624;&#x8111;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x80BF;&#x7624;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x5F88;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x6CBB;&#x7597;&#x80BF;&#x7624;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3002;

&#x679C;&#x8747;&#x8111;&#x80BF;&#x7624;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8868;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;

Loss of either lgl or brat gene activity in Drosophila larvae causes neoplastic brain tumors. Fragments of tumorous brains from either mutant transplanted into adult hosts over-proliferate, and kill their hosts within 2 weeks. We developed an in vivo assay for the metastatic potential of tumor cells by quantifying micrometastasis formation within the ovarioles of adult hosts after transplantation and determined that specific metastatic properties of lgl and brat tumor cells are different. We detected micrometastases in 15.8% of ovarioles from wild type host females 12 days after transplanting lgl tumor cells into their abdominal cavities. This frequency increased significantly with increased proliferation time. We detected micrometastases in 15% of ovarioles from wild type host females 10 days after transplanting brat tumor cells into their abdominal cavities. By contrast, this frequency did not change significantly with increased proliferation time. We found that nearly all lgl micrometastases co-express the neuronal cell marker, ELAV, and the glial cell marker, REPO. These markers are not co-expressed in normal brain cells nor in tumorous brain cells. This indicates deregulated gene expression in these metastatic cells. By contrast, most of the brat micrometastases expressed neither marker. While mutations in both lgl and brat cause neoplastic brain tumors, our results reveal that metastatic cells arising from these tumors have quite different properties. These data may have important implications for the treatment of tumor metastasis.

Drosophila brain tumor metastases express both neuronal and glial cell type markers.

Perte de deux LGL ou l&#x26;#39;activit&#xE9; des g&#xE8;nes dans les larves de drosophile marmot provoque des tumeurs c&#xE9;r&#xE9;brales n&#xE9;oplasiques. Des fragments de cerveaux tumorales de mutant soit transplant&#xE9; dans des h&#xF4;tes adultes de plus de-prolif&#xE9;ration, et de tuer leurs h&#xF4;tes dans les 2 semaines. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un test in vivo pour le potentiel m&#xE9;tastatique des cellules tumorales en quantifiant la formation microm&#xE9;tastase dans les ovarioles d&#x26;#39;h&#xF4;tes adultes apr&#xE8;s la transplantation et a d&#xE9;termin&#xE9; que certaines propri&#xE9;t&#xE9;s m&#xE9;tastatiques de LGL et les cellules tumorales sont diff&#xE9;rentes gosse. Nous avons d&#xE9;tect&#xE9; microm&#xE9;tastases dans 15,8% des ovarioles de femelles sauvages d&#x26;#39;accueil de type 12 jours apr&#xE8;s le repiquage LGL cellules tumorales dans leurs cavit&#xE9;s abdominales. Cette fr&#xE9;quence augmente significativement avec le temps une prolif&#xE9;ration accrue. Nous avons d&#xE9;tect&#xE9; microm&#xE9;tastases dans 15% des ovarioles de femelles sauvages d&#x26;#39;accueil de type 10 jours apr&#xE8;s la transplantation de cellules tumorales gosse dans leurs cavit&#xE9;s abdominales. En revanche, cette fr&#xE9;quence n&#x26;#39;a pas chang&#xE9; de mani&#xE8;re significative avec le temps une prolif&#xE9;ration accrue. Nous avons constat&#xE9; que presque tous les microm&#xE9;tastases LGL co-expriment le marqueur des cellules neuronales, ELAV, et le marqueur de cellules gliales, REPO. Ces marqueurs ne sont pas co-exprim&#xE9; dans les cellules normales du cerveau, ni dans les cellules c&#xE9;r&#xE9;brales tumorales. Cela indique l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes d&#xE9;r&#xE9;gul&#xE9;e dans ces cellules m&#xE9;tastatiques. En revanche, la plupart du mioche microm&#xE9;tastases exprim&#xE9; ni marqueur. Alors que les mutations &#xE0; la fois dans LGL et morveux provoquer des tumeurs c&#xE9;r&#xE9;brales n&#xE9;oplasiques, nos r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent que les cellules m&#xE9;tastatiques d&#xE9;coulant de ces tumeurs pr&#xE9;sentent des propri&#xE9;t&#xE9;s tr&#xE8;s diff&#xE9;rentes. Ces donn&#xE9;es peuvent avoir des implications importantes pour le traitement des m&#xE9;tastases tumorales.

M&#xE9;tastases drosophile Brain Tumor exprimer &#xE0; la fois neuronales et gliales marqueurs de type cellulaire

Verlust des Lgl oder Brat Genaktivit&auml;t in Drosophila Larven f&uuml;hrt neoplastische Hirntumoren. Fragmente von tumorkranken Gehirnen von entweder Mutant transplantierte in Erwachsenen Gastgeber over-proliferate, und innerhalb von 2 Wochen ihre Wirte zu t&ouml;ten. Wir entwickelten ein in-vivo-Assay f&uuml;r die metastasierendem Potential der Tumorzellen durch Quantifizierung von Micrometastasis Bildung innerhalb der Ovarioles von Erwachsenen Hosts nach der Transplantation und festgestellt, dass bestimmte metastasierendem Eigenschaften des Lgl und Brat Tumorzellen unterscheiden. Wir erkannt Micrometastases in 15,8 % der Ovarioles von Wildtyp Host Frauen zw&ouml;lf Tage nach Topfen Lgl Tumorzellen in ihren Bauch Hohlr&auml;ume. Diese Frequenz deutlich erh&ouml;ht, mit der Verbreitung Zeit. Wir erkannt Micrometastases in 15 % der Ovarioles von Wildtyp Host Weibchen 10 Tage nach Topfen Brat Tumorzellen in ihren Bauch Hohlr&auml;ume. Im Gegensatz dazu diese Frequenz mit Verbreitung Zeit nicht wesentlich ver&auml;ndern. Wir fanden, dass fast alle Lgl Micrometastases der neuronalen Zelle Marker, ELAV und die Gliazelle Marker, REPO co-express. Diese Marker sind nicht co-expressed, im normalen Gehirnzellen noch im tumorkranken Gehirnzellen. Dies zeigt die deregulierten Genexpression in diesen metastasierenden Zellen. Die meisten der Brat-Micrometastases ausgedr&uuml;ckt hingegen weder Markierung. W&auml;hrend Mutationen im Lgl und Brat neoplastische Hirntumoren ausl&ouml;sen, zeigen unsere Ergebnisse, dass metastasierenden Zellen aus dieser Tumoren ganz unterschiedliche Eigenschaften haben. Diese Daten m&ouml;glicherweise wichtige Implikationen f&uuml;r die Behandlung der Metastasierung.

Taufliege Tumor Hirnmetastasen schnelles beide neuronale und Gliazellen Zelle Typ Markierungen.

Perdita di attivit&agrave; del gene o lgl o brat in larve di Drosophila provoca tumori cerebrali neoplastiche. Frammenti di cervello tumorale da entrambi mutante trapiantato in adulti ospita over-proliferate e uccidere i loro ospiti entro 2 settimane. Abbiamo sviluppato un test in vivo per il potenziale metastatico delle cellule tumorali da quantificare micrometastasi formazione entro il ovarioles di ospiti adulti dopo il trapianto e determinato che specifiche propriet&agrave; metastatico delle cellule tumorali lgl e monello sono diversi. Abbiamo rilevato micrometastases in 15,8% di ovarioles da femmine host wild type 12 giorni dopo il trapianto di cellule tumorali lgl nelle loro cavit&agrave; addominale. Questa frequenza &egrave; aumentato significativamente con tempo maggiore proliferazione. Abbiamo rilevato micrometastases in 15% di ovarioles da femmine host wild type 10 giorni dopo il trapianto di cellule tumorali brat nelle loro cavit&agrave; addominale. Al contrario, questa frequenza non cambia significativamente con il tempo maggiore proliferazione. Abbiamo scoperto che quasi tutti i micrometastases lgl co-express il marcatore delle cellule neuronali, ELAV e il marcatore delle cellule gliali, REPO. Questi marcatori non sono espressi nelle cellule cerebrali normali, n&eacute; in cellule tumorali cerebrali. Questo indica espressione genica deregolamentato in queste cellule metastatiche. Al contrario, la maggior parte dei micrometastases brat espressa n&eacute; marcatore. Mentre le mutazioni di entrambi lgl e brat causano tumori cerebrali neoplastiche, i nostri risultati rivelano che le cellule metastatiche derivanti da questi tumori hanno propriet&agrave; molto diverse. Questi dati possono avere importanti implicazioni per il trattamento delle metastasi del tumore.

Metastasi di tumore cerebrale della drosofila express entrambi marcatori di tipo delle cellule neuronali e gliali.

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Article	Year
Drosophila brain tumor metastases express both neuronal and glial cell type markers. Developmental biology\| PubMed ID: 17055475	2007
The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience\| PubMed ID: 21775591	2011
Disease models & mechanisms\| PubMed ID: 22228754	2012

Svetlana Trunova

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