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Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent <em>In situ</em> Hybridization

Mammalian DNA replication initiates at multiple sites along chromosomes at different times during S phase, following a temporal replication program. The ...

Oregon Health & Science University

&#x7531;&#x4E00;&#x5957;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x9650;&#x5236;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8C03;&#x63A7;&#x86CB;&#x767D;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x63A7;&#x5236;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x6A2A;&#x7EB9;&#x808C;&#x8089;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE; MDM2 &#x6269;&#x589E;&#x5E72;&#x6270; MyoD &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x56E0;&#x6B64;&#x6291;&#x5236;&#x516C;&#x5F00;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316; &#xFF08;1&#xFF09;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; MDM2 &#x4E0E; Sp1 &#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x65B9;&#x5F0F;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x4F9D;&#x8D56; Sp1 &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x8BE5; pRb &#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x7F6E;&#x6362;&#x4ECE; Sp1 MDM2 &#x8FD8;&#x539F; Sp1 &#x6D3B;&#x52A8; (2)&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#xFF0C;&#x5F3A;&#x8FEB; Sp1 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FD8;&#x539F; MyoD &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x8FD8;&#x539F;&#x516C;&#x5F00;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; MDM2 &#x6269;&#x589E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; pRb &#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FD8;&#x539F; MyoD &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; MDM2 &#x6269;&#x589E;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; pRb &#x7684; MyoD &#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#x662F;&#x8FD9;&#x9879;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x524D;&#x63D0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;C-&#x7EC8;&#x7AEF;&#xFF0C;pRb MDM2 &#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x548C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x6062;&#x590D;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; MDM2 &#x6269;&#x589E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A; pRb &#x7684; C &#x7EC8;&#x7AEF; MDM2 &#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FC7;&#x65E9;&#x6210;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x671F;&#x95F4;&#x6B63;&#x5E38;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316; pRb MDM2 &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8C03;&#x8282; Sp1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

&#x7531; MDM2&#x3001; pRb &#x548C; Sp1 MyoD &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;

Muscle cell differentiation is controlled by a complex set of interactions between tissue restricted transcription factors, ubiquitously expressed transcription factors, and cell cycle regulatory proteins. We previously found that amplification of MDM2 in rhabdomyosarcoma cells interferes with MyoD activity and consequently inhibits overt muscle cell differentiation (1). Recently, we found that MDM2 interacts with Sp1 and inhibits Sp1-dependent transcription and that pRb can restore Sp1 activity by displacing MDM2 from Sp1 (2). In this report, we show that forced expression of Sp1 can restore MyoD activity and restore overt muscle cell differentiation in cells with amplified MDM2. Furthermore, we show that pRb can also restore MyoD activity and muscle cell differentiation in cells with amplified MDM2. Surprisingly, we found that the MyoD-interacting domain of pRb is dispensable for this activity. We show that the C-terminal, MDM2-interacting domain of pRb is both necessary and sufficient to restore muscle cell differentiation in cells with amplified MDM2. We also show that the C-terminal MDM2-interacting domain of pRb can promote premature differentiation of proliferating myoblast cells. Our data support a model in which the pRb-MDM2 interaction modulates Sp1 activity during normal muscle cell differentiation.

Regulation of MyoD activity and muscle cell differentiation by MDM2, pRb, and Sp1.

La diff&eacute;renciation des cellules musculaires est contr&ocirc;l&eacute;e par un ensemble complexe d&#39;interactions entre les facteurs de transcription de tissu restreint, facteurs de transcription exprim&eacute;e de fa&ccedil;on ubiquitaire et prot&eacute;ines de r&eacute;gulation du cycle cellulaire. Nous avons constat&eacute; pr&eacute;c&eacute;demment qu&#39;amplification de MDM2 dans les cellules de rhabdomyosarcome interf&egrave;re avec l&#39;activit&eacute; MyoD et par cons&eacute;quent inhibe la diff&eacute;renciation de la cellule musculaire manifeste (1). R&eacute;cemment, nous avons constat&eacute; que MDM2 interagit avec Sp1 et inhibe la transcription Sp1-d&eacute;pendante et ce pRb peut restaurer l&#39;activit&eacute; Sp1 en d&eacute;logeant MDM2 du Service Pack 1 (2). Nous montrons dans ce rapport, qui a forc&eacute; l&#39;expression du Sp1 peut restaurer l&#39;activit&eacute; MyoD et restaurer la diff&eacute;renciation des cellules musculaires manifeste dans les cellules avec MDM2 amplifi&eacute;. De plus, nous montrons que pRb peut &eacute;galement restaurer MyoD activit&eacute; et muscle diff&eacute;renciation cellulaire dans les cellules avec MDM2 amplifi&eacute;. &Eacute;tonnamment, nous avons constat&eacute; que le domaine MyoD-interaction de pRb est dispensable pour cette activit&eacute;. Les auteurs montrent que le C-terminal, interagissant avec MDM2 domaine de pRb est n&eacute;cessaire et suffisant pour restaurer la diff&eacute;renciation des cellules musculaires en cellules avec MDM2 amplifi&eacute;. Nous montrons &eacute;galement que le domaine C-terminal MDM2-interaction de pRb peut favoriser la diff&eacute;renciation pr&eacute;matur&eacute;e des cellules myoblastes en prolif&eacute;ration. Nos donn&eacute;es supportent un mod&egrave;le dans lequel l&#39;interaction de pRb-MDM2 module l&#39;activit&eacute; de Sp1 au cours de la diff&eacute;renciation des cellules musculaires normales.

R&egrave;glement de MyoD diff&eacute;renciation des cellules musculaires et activit&eacute; de MDM2, pRb et Sp1.

Zelldifferenzierung Muskel wird durch eine komplexe Reihe von Interaktionen zwischen Gewebe eingeschr&auml;nkt Transkriptionsfaktoren, ubiquit&auml;r exprimierten Transkriptionsfaktoren und Zellzyklus regulatorischen Proteine gesteuert. Vorher finden wir dass Verst&auml;rkung von MDM2 in Rhabdomyosarkom Zellen MyoD Aktivit&auml;t beeintr&auml;chtigt und folglich offenen Muskeln Zelldifferenzierung (1 hemmt). Vor kurzem, wir fanden, dass MDM2 interagiert mit Sp1 und Sp1-abh&auml;ngige Transkription hemmt und die pRb Sp1 Aktivit&auml;t verschiebt MDM2 von Sp1 wiederherstellen kann (2). In diesem Bericht zeigen wir gezwungen Ausdruck von Sp1 wiederherstellen MyoD Aktivit&auml;t und offenen Muskeln Zelldifferenzierung in Zellen mit verst&auml;rkten MDM2 wiederherstellen k&ouml;nnen. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass dieses pRb MyoD Aktivit&auml;t und Muskel Zelldifferenzierung in Zellen mit verst&auml;rkten MDM2 auch wiederherstellen kann. &Uuml;berraschenderweise fanden wir, dass die Domain MyoD-Interaktion, PRB entbehrlich f&uuml;r diese T&auml;tigkeit ist. Wir zeigen, dass der C-terminalen, MDM2-Interaktion Dom&auml;ne PRB ist notwendig und ausreicht, um Muskel-Zelldifferenzierung in Zellen mit verst&auml;rkten MDM2 wieder. Wir zeigen auch, dass die C-terminalen MDM2-Interaktion Dom&auml;ne PRB vorzeitige Differenzierung der proliferativen Myoblast Zellen f&ouml;rdern kann. Unsere Daten unterst&uuml;tzen ein Modell, in dem die Interaktion pRb-MDM2 Sp1 Aktivit&auml;t w&auml;hrend der normalen Muskel Zelldifferenzierung moduliert.

Regulierung der MyoD Aktivit&auml;t und Muskel Zelldifferenzierung von MDM2, pRb und Sp1.

Differenziazione delle cellule muscolari &egrave; controllato da un complesso insieme di interazioni tra proteine regolatrici del ciclo cellulare, fattori di trascrizione ubiquitously espresso e fattori di trascrizione tessuto limitato. Abbiamo trovato in precedenza che amplificazione di MDM2 in cellule di rabdomiosarcoma interferisce con l&#39;attivit&agrave; di MyoD e di conseguenza inibisce la differenziazione delle cellule muscolari palese (1). Recentemente, abbiamo scoperto che MDM2 interagisce con Sp1 e inibisce la trascrizione Sp1-dipendente e che pRb pu&ograve; ripristinare Sp1 attivit&agrave; spostando MDM2 da Sp1 (2). In questa relazione, mostriamo che ha costretto l&#39;espressione di Sp1 pu&ograve; ripristinare attivit&agrave; MyoD e ripristinare la differenziazione delle cellule muscolari palese nelle cellule con MDM2 amplificato. Inoltre, mostriamo che pRb pu&ograve; anche ripristinare MyoD attivit&agrave; muscolare e la differenziazione delle cellule in cellule con MDM2 amplificato. Sorprendentemente, abbiamo scoperto che il dominio di MyoD interagente di pRb &egrave; superfluo per questa attivit&agrave;. Ci mostrano che il C-terminale, dominio MDM2-interagendo di pRb &egrave; necessaria e sufficiente a ripristinare la differenziazione delle cellule muscolari in cellule con MDM2 amplificato. Ci mostrano anche che il dominio C-terminale MDM2-interazione di pRb pu&ograve; promuovere precoce differenziazione delle cellule in proliferazione myoblast. I nostri dati supportano un modello in cui l&#39;interazione pRb-MDM2 modula Sp1 attivit&agrave; durante la differenziazione delle cellule muscolari normali.

Regolamento di MyoD attivit&agrave; muscolare e la differenziazione delle cellule da MDM2, pRb e Sp1.

&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7D44;&#x7E54;&#x5236;&#x9650;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x904D;&#x5728;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x6A2A;&#x7D0B;&#x7B4B;&#x8089;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; MDM2 &#x306E;&#x5897;&#x5E45; MyoD &#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3042;&#x304B;&#x3089;&#x3055;&#x307E;&#x306A;&#x7B4B;&#x8089;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316; (1) &#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x6211;&#x3005; MDM2 Sp1 &#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x3001;Sp1 &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E; pRb Sp1 &#x6D3B;&#x52D5; MDM2 Sp1 &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x4F4D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FA9;&#x5143;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x767A;&#x898B; (2)&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Sp1 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5F37;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; MyoD &#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x3001;&#x3042;&#x304B;&#x3089;&#x3055;&#x307E;&#x306A;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5897;&#x5E45;&#x3055;&#x308C;&#x305F; MDM2 &#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E; [prb] &#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x5E45; MDM2 &#x3068; MyoD &#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3082;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;.&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;MyoD &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; pRb &#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; C &#x672B;&#x7AEF;&#x3092;&#x793A;&#x3059; MDM2 &#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; pRb &#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x5897;&#x5E45; MDM2 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F; pRb &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF; MDM2 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;.&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x306B; pRb MDM2 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C; Sp1 &#x6D3B;&#x6027;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

MDM2&#x3001;pRb&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Sp1 &#x306B;&#x3088;&#x308B; MyoD &#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3002;

&#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC81C;&#xD55C; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;, &#xD3B8; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; rhabdomyosarcoma &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; MDM2 &#xC99D;&#xD3ED; MyoD &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC10; &#xBCC4; &#xBC95; (1)&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xCD5C;&#xADFC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC; MDM2 &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; s p 1&#xC640; s p 1&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; pRb sp1&#xC5D0;&#xC11C; MDM2 &#xC5EC; Sp1 &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; (2). &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; s p 1&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xAC15;&#xC694; &#xD558;&#xB294; MyoD &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558; &#xACE0; &#xC99D;&#xD3ED;&#xB41C; MDM2 &#xC140;&#xC5D0; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; pRb &#xB610;&#xD55C; &#xC99D;&#xD3ED;&#xB41C; MDM2 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; MyoD &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Prb&#xC758; MyoD &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740; &#xD544;&#xC218;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xD45C;&#xC2DC; Prb&#xC758; MDM2 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740; &#xD544;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xC99D;&#xD3ED;&#xB41C; MDM2 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; Prb&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; MDM2 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; myoblast &#xC140;&#xC758; &#xC870;&#xAE30; &#xAC10; &#xBCC4; &#xBC95;&#xC744; &#xD64D;&#xBCF4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; pRb MDM2 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC911; Sp1 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

MDM2, pRb, &#xBC0F; s p 1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; MyoD &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xC758; &#xC870;&#xC808;.

Diferenciaci&oacute;n de la c&eacute;lula del m&uacute;sculo es controlada por una compleja serie de interacciones entre factores de transcripci&oacute;n tejido restringido, factores de transcripci&oacute;n ubicuo expresada y prote&iacute;nas reguladoras del ciclo celular. Anteriormente encontramos que la amplificaci&oacute;n de MDM2 en c&eacute;lulas del rabdomiosarcoma interfiere con la actividad de MyoD y por lo tanto inhibe la diferenciaci&oacute;n de la c&eacute;lula del m&uacute;sculo abierta (1). Recientemente, encontramos que interact&uacute;a con el Sp1 de MDM2 e inhibe la transcripci&oacute;n Sp1-dependiente y eso pRb puede restaurar la actividad de Sp1 por desplazar MDM2 de Sp1 (2). En este informe, mostramos que oblig&oacute; a expresi&oacute;n de Sp1 puede restaurar la actividad MyoD y restaurar la diferenciaci&oacute;n de la c&eacute;lula muscular abierta en c&eacute;lulas con MDM2 amplificado. Adem&aacute;s, mostramos que PRB tambi&eacute;n puede restaurar MyoD actividad y m&uacute;sculo diferenciaci&oacute;n en c&eacute;lulas con MDM2 amplificado. Sorprendentemente, encontramos que el dominio de interacci&oacute;n MyoD de pRb es prescindible para esta actividad. Demostramos que la terminal C, interacci&oacute;n MDM2 dominio de pRb es necesario y suficiente para restablecer la diferenciaci&oacute;n de la c&eacute;lula muscular en c&eacute;lulas con MDM2 amplificado. Tambi&eacute;n demostramos que el dominio c-terminal MDM2-interacci&oacute;n de pRb puede promover la diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas proliferantes de mioblastos. Nuestros datos apoyan un modelo en el que la interacci&oacute;n de pRb-MDM2 modula la actividad de Sp1 durante la diferenciaci&oacute;n de la c&eacute;lula del m&uacute;sculo normal.

Regulaci&oacute;n de la diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lula MyoD actividad y m&uacute;sculo MDM2, pRb y Sp1.

&#x975E;&#x5E38;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x80DA;&#x80CE;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x76F8;&#x5173;&#x706D;&#x6D3B;&#x7684;&#x9F20;&#x6807; Aprt &#x6784;&#x9020;&#x4E86;&#x67D3;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x4EBA;&#x3002;&#x6784;&#x9020;&#x6C89;&#x9ED8;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7531;&#x8868;&#x793A;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x80DA;&#x80CE;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8981;&#x4E48;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x6216;&#x4E0E; DNA &#x53BB;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x4EE3;&#x7406; 5-&#x6C2E;&#x6742;-2&#39;-&#x8131;&#x6C27;&#x80DE;&#x82F7;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7247;&#x6BB5;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x5F97;&#x5230;&#x5F88;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E0A;&#x6E38;&#x622A;&#x65AD;&#x52A9;&#x5242;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; Sp1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x521D;&#x59CB;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684; Aprt &#x6784;&#x9020;&#x6709;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4F53;&#x73B0;&#x9AD8;&#x81EA;&#x53D1;&#x9006;&#x8F6C;&#x9891;&#x7387; (&#x7EA6; 10(-2))&#x3002;&#x7A33;&#x5B9A;&#x9759;&#x97F3;&#x578B;&#x7684;&#x81EA;&#x53D1;&#x9006;&#x8F6C;&#x9891;&#x7387; &lt; 10(-5) &#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x5E73;&#xFF0C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9006;&#x8F6C;&#x9891;&#x7387;&#x5927;&#x5927;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E26; 5-&#x6C2E;&#x6742;-2&#39;-&#x8131;&#x6C27;&#x80DE;&#x82F7;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x4E9A;&#x786B;&#x9178;&#x6C22;&#x94A0;&#x5E8F;&#x5217;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x4E0A;&#x8868;&#x793A;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x5141;&#x8BB8;&#x4F20;&#x64AD;&#x8D70;&#x5411;&#xFF0C;&#x6700;&#x7EC8;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x7684;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x53D1;&#x8D77;&#x8BE5; CpG &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;&#x7531; 5-&#x6C2E;&#x6742;-2&#39;-&#x8131;&#x6C27;&#x80DE;&#x82F7;&#x4E0E;&#x56DE;&#x590D;&#x7A81;&#x53D8;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x589E;&#x52A0;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7684; CpG &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x6A21;&#x5F0F;&#x88AB;&#x6742;&#x8272;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x6E10;&#x8FDB;&#x548C;&#x4E0D;&#x65AD;&#x6F14;&#x53D8;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x603B;&#x5171;&#x6709;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x9F20;&#x6807; Aprt &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6E10;&#x8FDB;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x6C89;&#x9ED8; Aprt &#x662F;&#x9F20;&#x6807;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6E10;&#x8FDB;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Mouse Aprt constructs that are highly susceptible to DNA methylation-associated inactivation in embryonal carcinoma cells were transfected into differentiated cells, where they were expressed. Construct silencing was induced by either whole-cell fusion of the expressing differentiated cells with embryonal carcinoma cells or by treatment of the differentiated cells with the DNA demethylating agent 5-aza-2'-deoxycytidine. Induction of silencing was enhanced significantly by the presence of a methylation center fragment positioned upstream of a truncated promoter comprised of two functional Sp1 binding sites. Initial silencing of the Aprt constructs was unstable, as evidenced by high spontaneous reversion frequencies ( approximately 10(-2)). Stably silenced subclones with spontaneous reversion frequencies of <10(-5) were isolated readily from the unstably silenced clones. These reversion frequencies were enhanced significantly by treatment of the cells with 5-aza-2'-deoxycytidine. A bisulfite sequence analysis demonstrated that CpG methylation initiated within the methylation center region on expressing alleles and that the induction of silencing allowed methylation to spread towards and eventually into the promoter region. Combined with the induction of revertants by 5-aza-2'-deoxycytidine, this result suggested that stabilization of silencing was due to an increased density of CpG methylation. All allelic methylation patterns were variegated, which is consistent with a gradual and evolving process. In total, our results demonstrate that silencing of mouse Aprt is a gradual process in the differentiated cells.

Silencing of mouse Aprt is a gradual process in differentiated cells.

Constructions de la Aprt de souris qui sont tr&egrave;s sensibles &agrave; l&#39;inactivation d&#39;associ&eacute;e &agrave; la m&eacute;thylation de l&#39;ADN dans les cellules de carcinome embryonnaire ont &eacute;t&eacute; transfect&eacute;es dans des cellules diff&eacute;renci&eacute;es, o&ugrave; elles ont &eacute;t&eacute; exprim&eacute;es. Construction silencieux a &eacute;t&eacute; induite par la fusion de deux cellules enti&egrave;res des cellules diff&eacute;renci&eacute;es exprimant avec des cellules de carcinome embryonnaire ou par traitement des cellules diff&eacute;renci&eacute;es avec l&#39;ADN demethylation agent 5-aza-2&#39;-deoxycytidine. Induction de faire taire a &eacute;t&eacute; sensiblement am&eacute;lior&eacute;e par la pr&eacute;sence d&#39;un fragment de centre de m&eacute;thylation positionn&eacute; en amont d&#39;un promoteur tronqu&eacute; compos&eacute; de deux sites de liaison Sp1 fonctionnels. Silence initial des constructions Aprt &eacute;tait instable, comme en t&eacute;moignent les fr&eacute;quences &eacute;lev&eacute;es de r&eacute;version spontan&eacute;e (environ 10(-2)). Stablement au silence sous-clones avec des fr&eacute;quences de r&eacute;version spontan&eacute;e &lt; 10 ont &eacute;t&eacute; isol&eacute;s facilement chez les clones INSTABLEMENT r&eacute;duits au silence. Ces fr&eacute;quences de retour ont &eacute;t&eacute; am&eacute;lior&eacute;es significativement par un traitement des cellules avec la 5-aza-2&#39;-deoxycytidine. Une analyse de la s&eacute;quence du bisulfite a d&eacute;montr&eacute; que la m&eacute;thylation CpG initi&eacute;e dans la r&eacute;gion Centre de m&eacute;thylation sur l&#39;expression des all&egrave;les et que l&#39;induction de mise sous silence a permis de m&eacute;thylation se propager vers et, &eacute;ventuellement, dans la r&eacute;gion du promoteur. Combin&eacute; avec l&#39;induction de r&eacute;vertants de la 5-aza-2&#39;-deoxycytidine, ce r&eacute;sultat sugg&egrave;re que stabilisation de faire taire est due &agrave; une densit&eacute; accrue de la m&eacute;thylation de la CpG. Tous les profils de m&eacute;thylation all&eacute;liques &eacute;taient vari&eacute;es, qui est conforme &agrave; une progressive processus et &eacute;volutif. Au total, nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent que le silence des souris Aprt est un processus graduel dans les cellules diff&eacute;renci&eacute;es.

Silence des souris Aprt est un processus graduel dans les cellules diff&eacute;renci&eacute;es.

Maus Aprt-Konstrukte, die sind sehr anf&auml;llig f&uuml;r DNA Methylierung-assoziierte Inaktivierung Embryonalkarzinom Zellen wurden in differenzierten Zellen, die transfected wo sie ausgedr&uuml;ckt wurden. Konstrukt zum Schweigen gebracht wurde, entweder ganze Zellfusion auszudr&uuml;cken differenzierte Zellen mit Embryonalkarzinom Zellen oder durch Behandlung der differenzierten Zellen mit der DNA-demethylating Agent 5-Aza-2&#39;-Deoxycytidine ausgel&ouml;st. Induktion von Unterdr&uuml;ckender wurde erheblich verbessert, durch das Vorhandensein einer Methylierung-Zentrum-Fragment positioniert oberhalb der abgeschnittene F&ouml;rderer besteht aus zwei funktionellen Sp1-Bindungsstellen. Anf&auml;ngliche Unterdr&uuml;ckender Aprt-Konstrukte war instabil, wie durch hohe spontane Umkehrung Frequenzen (etwa 10(-2)). Zum Schweigen stabil stehen mit spontanen R&uuml;ckfall Frequenzen &lt; 10(-5) wurden leicht aus labil zum Schweigen gebrachten Klonkrieger isoliert. Diese Umkehr-Frequenzen wurden ma&szlig;geblich durch die Behandlung der Zellen mit 5-Aza-2&#39;-Deoxycytidine verbessert. Ein Bisulfit-Sequenzanalyse zeigte, dass CpG Methylierung initiierte innerhalb der Methylierung-Zentrum-Region auf Ausdruck Allele und, dass die Induktion von Unterdr&uuml;ckender Methylierung in Richtung und schlie&szlig;lich in der Promotor-Region zu verbreiten darf. Dieses Ergebnis schlug mit der Induktion von Revertants kombiniert mit 5-Aza-2&#39;-Deoxycytidine, eine erh&ouml;hte Dichte der CpG Methylierung Stabilisierung der Unterdr&uuml;ckender zur&uuml;ckzuf&uuml;hren. Alle allelischen Methylierungsmuster waren gefleckt, die eine schrittweise und sich entwickelnder Prozess vereinbar ist. Insgesamt zeigen unsere Ergebnisse, dass Unterdr&uuml;ckender Maus Aprt schrittweise in den differenzierten Zellen.

Unterdr&uuml;ckender Aprt-Maus ist ein schrittweiser Prozess in differenzierte Zellen.

Mouse Aprt costrutti che sono altamente sensibili all&#39;inattivazione di associati di metilazione del DNA nelle cellule di carcinoma embrionale erano transfected nelle cellule differenziate, dove essi sono stati espressi. Costrutto di silenziamento &egrave; stata indotta da o cellule intere fusion delle cellule differenziate che esprimono con cellule di carcinoma embrionale o trattamento delle cellule differenziate con il DNA di demethylating agente 5-aza-2&#39;-deoxycytidine. Induzione del silenzio &egrave; stato migliorato in modo significativo dalla presenza di un frammento di metilazione centro posizionato a monte del promotore troncato composto di due siti di legame Sp1 funzionali. Silenziamento iniziale dei costrutti Aprt era instabile, come evidenziato dalle frequenze alte reversione spontanea (circa 10(-2)). Stabile a tacere subclones con frequenze di reversione spontanea di &lt; 10(-5) sono stati isolati prontamente da cloni instabile silenziati. Queste frequenze di reversione sono state rafforzate significativamente dal trattamento delle cellule con 5-aza-2&#39;-deoxycytidine. Un&#39;analisi di sequenza del bisolfuro ha dimostrato che la metilazione CpG avviata all&#39;interno della regione di centro di metilazione sul esprimere alleli e che l&#39;induzione del silenzio consentito metilazione a diffondersi verso e, infine, nella regione del promotore. Combinata con l&#39;induzione di rimborsare da 5-aza-2&#39;-deoxycytidine, questo risultato ha suggerito che la stabilizzazione del silenzio era a causa di una maggiore densit&agrave; di CpG metilazione. Tutti i pattern di metilazione alleliche sono stati variegati, che &egrave; coerente con un graduale processo di evoluzione. In totale, i nostri risultati dimostrano che il silenziamento del mouse Aprt &egrave; un processo graduale nelle cellule differenziate.

Silenziamento del mouse Aprt &egrave; un processo graduale in cellule differenziate.

&#x80CE;&#x5150;&#x6027;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Aprt &#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x306F;&#x3069;&#x3053;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x3092;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x8A98;&#x8D77;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x80CE;&#x5150;&#x6027;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x5168;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; demethylating DNA &#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3067; 5 &#x5B57; 2&#39;-&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B7;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306F;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A; Sp1 &#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x3092;&#x914D;&#x7F6E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x521D;&#x671F; Aprt &#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; hat-p-1b &#x306F;&#x9AD8;&#x3044;&#x81EA;&#x7136;&#x5FA9;&#x5143;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570; (&#x7D04; 10(-2))&#x3002; &#x5B89;&#x5B9A;&#x3001;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B5;&#x30D6;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x8FD4;&#x9084;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6C88;&#x9ED9; &lt; 10(-5) &#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6C88;&#x9ED9;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8FD4;&#x9084;&#x306E;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x306F; 5 &#x5B57; 2&#39; &#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B7;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x3002;&#x91CD;&#x4E9C;&#x786B;&#x9178;&#x5869;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x89E3;&#x6790;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x666E;&#x53CA;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x5730;&#x57DF;&#x5185;&#x958B;&#x59CB; CpG &#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5FA9;&#x5E30;&#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068; 5 &#x5B57; 2&#39; &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D50;&#x5408;-&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B7;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316; CpG &#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5897;&#x52A0;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x591A;&#x5F69;&#x306A;&#x6620;&#x50CF;&#x5F90;&#x3005; &#x3068;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5408;&#x8A08;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Aprt &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6F38;&#x9032;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Aprt &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x7DE9;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Aprt &#xAD6C;&#xBB38; embryonal &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xAD00;&#xB828; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD588;&#xB2E4; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; &#xD398; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAD6C;&#xBB38; &#xC785;&#xC744; embryonal &#xC554; &#xC885; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD45C;&#xD604; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xD4E8;&#xC804; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB610;&#xB294; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; 5-&#xC544; &#xC790;-2&#39;-deoxycytidine demethylating DNA&#xC640; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xC13C;&#xD130; &#xC870;&#xAC01;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB450; &#xAE30;&#xB2A5; Sp1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;. &#xCD08;&#xAE30; Aprt &#xAD6C;&#xBB38; &#xC785;&#xC744; &#xC544;&#xB2C8;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC548;&#xC815;, &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xADC0;&#xC120; &#xB192;&#xC740; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; (&#xC57D; 10(-2)) &#xC785;&#xC99D;. &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xADC0;&#xC120; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; subclones &lt; 10(-5) unstably &#xC785; &#xB9C9; &#xC74C;&#xB41C; &#xD074;&#xB860;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC27D;&#xAC8C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xADC0;&#xC120; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; 5-&#xC544; &#xC790;-2&#39;-deoxycytidine&#xC640; &#xC140;&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC15;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD669;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC11D; &#xB300;&#xB9BD; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xB3C4; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC640; &#xACB0;&#xAD6D; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xC601;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC0B0; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xC13C;&#xD130; &#xC601;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC791; &#xB41C; &#xADF8; CpG &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; 5-&#xC544; &#xC790;-2&#39;-deoxycytidine&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; revertants &#xC720;&#xB3C4; &#xACB0;&#xD569;, &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; CpG &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC810;&#xC9C4;&#xC801; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xD328;&#xD134;&#xC740; &#xC7A1; &#xC0C9;. &#xCD1D;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Aprt&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801; &#xACFC;&#xC815; &#xC784;&#xC744; &#xC785;&#xC99D;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Aprt&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801; &#xACFC;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;.

Rat&oacute;n Aprt construcciones que son altamente susceptibles a la inactivaci&oacute;n de asociados de metilaci&oacute;n de ADN en c&eacute;lulas de carcinoma embrionario fueron transfectadas en c&eacute;lulas diferenciadas, donde se expresaron. Silenciamiento de la construcci&oacute;n fue inducida por cualquier fusi&oacute;n de c&eacute;lulas completas de las c&eacute;lulas diferenciadas expresa con las c&eacute;lulas del carcinoma embrionario o por el tratamiento de las c&eacute;lulas diferenciadas con el ADN demethylating agente 5-aza-2&#39;-desoxicitidina. Inducci&oacute;n de silenciamiento mejor&oacute; significativamente por la presencia de un fragmento de metilaci&oacute;n centro situado aguas arriba de un promotor truncado compuesto de dos sitios de uni&oacute;n de Sp1 funcionales. Silenciamiento inicial de las construcciones de Aprt era inestable, seg&uacute;n lo evidenciado por las frecuencias altas de reversi&oacute;n espont&aacute;nea (aproximadamente 10(-2)). Estable silenciado subclones con frecuencias de reversi&oacute;n espont&aacute;nea de &lt; 10(-5) fueron aislados f&aacute;cilmente de los clones inestable silenciados. Estas frecuencias de reversi&oacute;n mejoraron significativamente por el tratamiento de las c&eacute;lulas con 5-aza-2&#39;-desoxicitidina. Un an&aacute;lisis de la secuencia de bisulfito demostr&oacute; metilaci&oacute;n CpG iniciada dentro de la regi&oacute;n centro de metilaci&oacute;n en la expresi&oacute;n de alelos y que la inducci&oacute;n de silenciamiento permiti&oacute; metilaci&oacute;n difundir hacia y finalmente en la regi&oacute;n del promotor. Combinado con la inducci&oacute;n de revertidas observado en presencia de 5-aza-2&#39;-desoxicitidina, este resultado sugiri&oacute; que la estabilizaci&oacute;n del silenciamiento fue debido a un aumento de la densidad de la metilaci&oacute;n CpG. Todos los patrones de metilaci&oacute;n al&eacute;lica fueron abigarrados, lo cual es consistente con una gradual y el proceso evolutivo. En total, nuestros resultados demuestran que el silenciamiento del rat&oacute;n Aprt es un proceso gradual en las c&eacute;lulas diferenciadas.

Silenciamiento del rat&oacute;n Aprt es un proceso gradual en las c&eacute;lulas diferenciadas.

&#x67D0;&#x4E9B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x6392;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x96C6;&#x7F29;&#x4E2D;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x65F6;&#x95F4;&#x663E;&#x793A;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x96C6;&#x7F29;&#x4E2D;&#x7684;&#x65F6;&#x6EDE;&#x53C2;&#x52A0;&#x9891;&#x7E41;&#x4E8C;&#x6B21;&#x91CD;&#x6392;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6EDE;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x96C6;&#x7F29;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x516C;&#x5F00;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x6216;&#x4E3B;&#x8840;&#x6DB2;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E2D;&#x6EDE;&#x51DD;&#x7ED3;&#xFF0C;&#x8868;&#x578B;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x548C;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x5728;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x51DD;&#x7ED3;&#x8868;&#x578B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5EF6;&#x8BEF;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5BF9;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E5F;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6301;&#x7EED;&#x957F;&#x8FBE; 2 &#x5E74;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x51DD;&#x7ED3;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x65F6;&#x6EDE;&#x3002;&#x5305;&#x542B;&#x5728;&#x590D;&#x5236;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x51DD;&#x7ED3;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7ECF;&#x5E38;&#x663E;&#x793A; hyperdiploid &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6838;&#x578B;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x96C6;&#x7F29;&#x4E2D;&#x7684;&#x62D6;&#x5EF6;&#x4E0E;&#x975E;&#x6574;&#x500D;&#x4F53;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x4E2A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684;&#x5B50;&#x96C6;&#x663E;&#x793A;&#x4E2D;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x96C6;&#x7F29;&#x4E2D;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x7279;&#x5B9A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x6392;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;/&#x5EF6;&#x8FDF;&#x5728;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x51DD;&#x7ED3;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x548C;&#x6B64;&#x8868;&#x578B;&#x53D1;&#x751F;&#x9891;&#x7E41;&#x53D7;&#x5230;&#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04;&#x7167;&#x5C04;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4E0E;&#x590D;&#x5236;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x548C;&#x51B7;&#x51DD;&#x9891;&#x7E41;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;

Certain chromosome rearrangements display a significant delay in replication timing that is associated with a delay in mitotic chromosome condensation. Chromosomes with delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation participate in frequent secondary rearrangements, indicating that cells with delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation display chromosomal instability. In this report, we show that exposing cell lines or primary blood lymphocytes to ionizing radiation results in chromosomes with the delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation phenotype, and that the delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation phenotype occurs predominantly on chromosome translocations. In addition, exposing mice to ionizing radiation also induces cells with delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation chromosomes that persist for as long as 2 years. Cells containing delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation chromosomes frequently display hyperdiploid karyotypes, indicating that delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation is associated with aneuploidy. Finally, using a chromosome engineering strategy, we show that only a subset of chromosome translocations displays delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation. Our results indicate that specific chromosome rearrangements result in the generation of the delay in replication timing/delay in mitotic chromosome condensation phenotype and that this phenotype occurs frequently in cells exposed to ionizing radiation both in vitro and in vivo.

Ionizing radiation induces frequent translocations with delayed replication and condensation.

Certains r&eacute;arrangements chromosomiques affichent un retard significatif dans la synchronisation de r&eacute;plication qui est associ&eacute;e &agrave; un retard dans la condensation des chromosomes mitotiques. Chromosomes avec retard dans le calendrier/d&eacute;lais de r&eacute;plication dans la condensation des chromosomes mitotiques participent &agrave; des r&eacute;arrangements fr&eacute;quents secondaires, ce qui indique que les cellules avec un retard dans le calendrier/d&eacute;lais de r&eacute;plication dans la condensation des chromosomes mitotiques affichent une instabilit&eacute; chromosomique. Dans ce rapport, nous montrons qu&#39;exposer des lign&eacute;es cellulaires ou des lymphocytes du sang primaire aux rayonnements ionisants provoque chromosomes avec du retard dans le calendrier/d&eacute;lais de r&eacute;plication dans le ph&eacute;notype de condensation des chromosomes mitotiques et que le retard dans le calendrier/d&eacute;lais de r&eacute;plication dans le ph&eacute;notype de condensation des chromosomes mitotiques se produit principalement sur les translocations chromosomiques. En outre, exposant des souris &agrave; des rayonnements ionisants induit &eacute;galement des cellules avec un retard dans le calendrier/d&eacute;lais de r&eacute;plication dans les chromosomes de condensation des chromosomes mitotiques qui persistent plus longtemps que 2 ans. Les cellules contenant le retard de r&eacute;plication calendrier/retard dans les chromosomes de condensation des chromosomes mitotiques fr&eacute;quemment affichage hyperdiplo&iuml;des caryotypes, indiquant que le retard dans le calendrier/d&eacute;lais de r&eacute;plication dans la condensation des chromosomes mitotiques est associ&eacute;e de l&#39;aneuplo&iuml;die. Enfin, &agrave; l&#39;aide d&#39;un chromosome strat&eacute;gie d&#39;ing&eacute;nierie, nous montrons que seul un sous-ensemble de translocations chromosomiques affiche retard dans calendrier/d&eacute;lais de r&eacute;plication dans la condensation des chromosomes mitotiques. Nos r&eacute;sultats indiquent que les r&eacute;arrangements chromosomiques sp&eacute;cifiques entra&icirc;ne la g&eacute;n&eacute;ration du retard dans le calendrier/d&eacute;lais de r&eacute;plication dans le ph&eacute;notype de condensation des chromosomes mitotiques et que ce ph&eacute;notype appara&icirc;t fr&eacute;quemment dans les cellules expos&eacute;es &agrave; des rayonnements ionisants in vitro et in vivo.

Rayonnement ionisant provoque des translocations fr&eacute;quentes avec le retard&eacute;e de r&eacute;plication et de la condensation.

Bestimmte Chromosomen-Rearrangements zeigen eine erhebliche Verz&ouml;gerung im Replikations-Timing, das eine Verz&ouml;gerung bei der mitotischen Chromosomenkondensation zugeordnet ist. Chromosomen mit Versp&auml;tung im Zeitplan/Replikationsverz&ouml;gerung in mitotische Chromosomenkondensation beteiligen sich an h&auml;ufigen sekund&auml;ren Umlagerungen, darauf hinweist, dass Zellen mit Versp&auml;tung im Zeitplan/Replikationsverz&ouml;gerung in mitotische Chromosomenkondensation chromosomale Instabilit&auml;t zeigen. In diesem Bericht zeigen wir, dass Zelllinien oder prim&auml;re Blut-Lymphozyten durch ionisierende Strahlung auszusetzen Chromosomen mit der Verz&ouml;gerung im Zeitplan/Replikationsverz&ouml;gerung in mitotische Chromosom Kondensation Ph&auml;notyp f&uuml;hrt und die Verz&ouml;gerung bei der Zeitmessung/Replikationsverz&ouml;gerung in mitotische Chromosom Kondensation Ph&auml;notyp &uuml;berwiegend auf Chromosomen-Translokationen auftritt. Dar&uuml;ber hinaus induziert die M&auml;use durch ionisierende Strahlung auszusetzen auch Zellen mit Versp&auml;tung im Zeitplan/Replikationsverz&ouml;gerung in mitotische Chromosom Kondensation Chromosomen, die bis zu 2 Jahre andauern. Zellen, die Verz&ouml;gerung bei der Replikation Timing/Verz&ouml;gerung bei mitotische Chromosom Kondensation Chromosomen h&auml;ufig Anzeige Hyperdiploid Karyotyp, darauf hinweist, dass die Verz&ouml;gerung bei der Zeitmessung/Replikationsverz&ouml;gerung in mitotische Chromosomenkondensation Aneuploidie zugeordnet ist. Schlie&szlig;lich zeigen mithilfe eines Chromosoms Ingenieurwesen Strategie, wir, dass nur eine Teilmenge der Chromosomen-Translokationen Verz&ouml;gerung im Zeitplan/Replikationsverz&ouml;gerung in mitotische Chromosomenkondensation zeigt. Unsere Ergebnisse zeigen, dass bestimmte Chromosomen-Rearrangements in der Generation der Verz&ouml;gerung im Zeitplan/Replikationsverz&ouml;gerung in mitotische Chromosom Kondensation Ph&auml;notyp f&uuml;hren und, dass dieser Ph&auml;notyp h&auml;ufig in Zellen, die ionisierende Strahlung in vitro und in vivo tritt.

Ionisierende Strahlung induziert h&auml;ufige Translokationen mit verz&ouml;gerte Replikation und Kondensation.

Alcune riorganizzazioni cromosomiche visualizzare un notevole ritardo nei tempi di replica che sono associato con un ritardo nella condensazione del cromosoma mitotico. Cromosomi con ritardo nella replica timing/ritardo nella condensazione del cromosoma mitotico partecipano alle frequenti riarrangiamenti secondarie, indicando che le cellule con ritardo nella replica timing/ritardo nella condensazione del cromosoma mitotico visualizzano instabilit&agrave; cromosomica. In questa relazione, mostriamo che esponendo le linee di cellule o linfociti primari sangue alle radiazioni ionizzanti risultati nei cromosomi con il ritardo nella replica timing/ritardo nel fenotipo di condensazione del cromosoma mitotico, e che il ritardo nella replica timing/ritardo nel fenotipo di condensazione del cromosoma mitotico si verifica principalmente su traslocazioni cromosomiche. Inoltre, anche esponendo i topi a radiazioni ionizzanti induce le cellule con un ritardo nei tempi/ritardo di replica nei cromosomi di condensazione del cromosoma mitotico che persistono per la durata di 2 anni. Celle contenenti il ritardo nella replica di temporizzazione/ritardo nei cromosomi di condensazione del cromosoma mitotico frequentemente display hyperdiploid cariotipi, indicando che il ritardo nella replica timing/ritardo nella condensazione del cromosoma mitotico &egrave; associato con aneuploidia. Infine, utilizzando un strategia di ingegneria di cromosoma, mostrano che solo un sottoinsieme di traslocazioni cromosomiche Visualizza ritardo nella replica timing/ritardo nella condensazione del cromosoma mitotico. I nostri risultati indicano che le riorganizzazioni cromosomiche specifiche risultano nella generazione del ritardo nella replica timing/ritardo nel fenotipo di condensazione del cromosoma mitotico e che questo fenotipo si verifica frequentemente in cellule esposte alle radiazioni ionizzanti sia in vitro che in vivo.

Radiazioni ionizzanti induce frequenti traslocazioni con ritardata di replica e condensazione.

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&#xC804;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xACB0;&#xB85C; &#xC790;&#xC8FC; translocations &#xC720;&#xB3C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Algunos los cambios del cromosoma mostrar&aacute;n un retraso significativo en el momento de la replicaci&oacute;n que se asocia a un retraso en la condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico. Cromosomas con retraso en el tiempo de replicaci&oacute;n/retraso en condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico participan en los cambios secundarios frecuentes, indicando que las c&eacute;lulas con retraso en el tiempo de replicaci&oacute;n/retraso en condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico Mostrar inestabilidad cromos&oacute;mica. En este informe, mostramos que exponer las l&iacute;neas celulares o los linfocitos de la sangre primario a la radiaci&oacute;n ionizante da lugar a los cromosomas con el retraso en la replicaci&oacute;n, sincronizaci&oacute;n retraso en fenotipo de condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico, y que el retraso en la replicaci&oacute;n, sincronizaci&oacute;n retraso en fenotipo de condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico se presenta predominantemente en Translocaciones cromos&oacute;micas. Adem&aacute;s, exposici&oacute;n de ratones a la radiaci&oacute;n ionizante induce tambi&eacute;n c&eacute;lulas con retraso en el tiempo de replicaci&oacute;n/retraso en cromosomas de condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico que persistir por hasta 2 a&ntilde;os. Las c&eacute;lulas que contienen el retraso en la replicaci&oacute;n del tiempo/retardo en cromosomas de condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico con frecuencia pantalla del hyperdiploid cariotipos, indicando que demora en replicaci&oacute;n sincronizaci&oacute;n/retraso en la condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico se asocia con aneuploid&iacute;a. Finalmente, utilizando un cromosoma estrategia de ingenier&iacute;a, mostramos que s&oacute;lo un subconjunto de Translocaciones cromos&oacute;micas muestra retraso en tiempo de replicaci&oacute;n/retraso en condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico. Nuestros resultados indican que los cambios espec&iacute;ficos del cromosoma como resultado la generaci&oacute;n de la demora en el tiempo de replicaci&oacute;n/retraso en fenotipo de condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico y que este fenotipo ocurre con frecuencia en las c&eacute;lulas expuestas a radiaciones ionizantes, tanto in vitro como in vivo.

Radiaci&oacute;n ionizante induce desplazamientos frecuentes con replicaci&oacute;n tard&iacute;a y condensaci&oacute;n.

&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x6D88;&#x878D;&#x7684; RNA &#x63A8;&#x7406; &#xFF08;RNAi&#xFF09; &#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x77ED;&#x5E72;&#x6270; RNA (siRNA) 21 &#x5230; 22 &#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x957F;&#xFF0C;&#x4E92;&#x8865;&#x7684; mRNA &#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x5230;&#x901A;&#x5F80;&#x7279;&#x5B9A;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4E3A;&#x7814;&#x7A76;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0E;&#x6F5C;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5411;&#x91CF;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x3001; &#x4E25;&#x5BC6;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x53D1;&#x5939; siRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53; (shRNA) &#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;ShRNA &#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x88AB;&#x8D4B;&#x4E88;&#x5185;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x4FEE;&#x6539; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; III &#x5B50;&#x5305;&#x542B; Tet &#x8FD0;&#x7B97;&#x7B26;&#x5143;&#x7D20;&#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8D77;&#x59CB;&#x70B9;&#x3002;&#x56DB;&#x73AF;&#x7D20;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;TetR&#xFF09;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6B21;&#x7684;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x9762;&#x524D;&#x88AB;&#x538B;&#x6291; shrna &#x771F;&#x6838;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x56DB;&#x73AF;&#x7D20;&#x5E9F;&#x9664; TetR &#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8; shRNA &#x8F6C;&#x5F55;&#xFF0C;&#x82E5;&#x8981;&#x7EE7;&#x7EED;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11; mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x63D0;&#x4F9B;&#x9488;&#x5BF9;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5171;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x7684; siRNA &#x5EFA;&#x7ACB;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5236;&#x5EA6;&#x7684;&#x529F;&#x6548;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x56DB;&#x73AF;&#x7D20;&#x6291;&#x5236; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#x4E0B;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x4E0D;&#x8D77;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2; shRNA &#x8F7D;&#x4F53;&#x80FD;&#x591F;&#x611F;&#x67D3;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x4F18;&#x70B9;&#x548C;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5141;&#x8BB8;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;

&#x57FA;&#x56E0;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x77ED;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E24;&#x4E2A;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3002;

Specific gene ablation by RNA inference (RNAi) involves the binding of short interfering RNA (siRNA), 21 to 22 nucleotides long, to complementary mRNA sequences, leading to sequence-specific posttranslational gene silencing, thus providing a powerful tool for studying gene function with potential therapeutic applications. Here we describe the development of a two-vector adenovirus system for efficient, tightly controlled hairpin siRNA expression (shRNA). Regulated expression of the shRNA is conferred within an adenoviral vector by a modified RNA polymerase III promoter containing a Tet operator element adjacent to the transcription start site. In the presence of the tetracycline repressor protein (TetR), encoded in a second adenovirus, shRNA expression is repressed. Addition of tetracycline abolishes TetR binding, allowing shRNA transcription to proceed, and leading to reduced mRNA and protein expression. Here we establish the efficacy of this system by delivering siRNA targeted against the transcriptional coactivator p300. Our results show tetracycline-mediated inhibition of p300 mRNA and protein accumulation in the presence of both viruses, but no effect in the absence of antibiotic. Regulated adenoviral shRNA vectors offer the advantages of being able to infect a wide array of replicating and nonreplicating cells and of allowing temporal control of gene silencing.

Gene disruption by regulated short interfering RNA expression, using a two-adenovirus system.

Ablation de g&egrave;nes sp&eacute;cifiques par inf&eacute;rence RNA (ARNi) implique la liaison des court ARN interf&eacute;rents (siARN), 21 &agrave; 22 nucl&eacute;otides de longs, &agrave; des s&eacute;quences d&#39;ARNm compl&eacute;mentaire, conduisant &agrave; des s&eacute;quences sp&eacute;cifiques post-traductionnelle g&egrave;ne silencieux, fournissant ainsi un outil puissant pour &eacute;tudier la fonction des g&egrave;nes avec des applications th&eacute;rapeutiques potentielles. Nous d&eacute;crivons ici le d&eacute;veloppement d&#39;un syst&egrave;me de deux vecteurs ad&eacute;novirus pour l&#39;expression de siARN efficace, &eacute;troitement contr&ocirc;l&eacute; en &eacute;pingle &agrave; cheveux (shARN). Expression r&eacute;gul&eacute;e de la shARN est conf&eacute;r&eacute;e au sein d&#39;un vecteur ad&eacute;noviral par un promoteur III polym&eacute;rase RNA modifi&eacute; contenant un &eacute;l&eacute;ment d&#39;op&eacute;rateur Tet adjacent au site d&#39;initiation de la transcription. En pr&eacute;sence de la prot&eacute;ine de r&eacute;presseur de t&eacute;tracycline (Tite), encod&eacute;e dans un deuxi&egrave;me ad&eacute;novirus, shRNA expression est r&eacute;prim&eacute;e. Ajout de la t&eacute;tracycline abolit le Tite contraignant, permettant la transcription shARN de proc&eacute;der et conduisant &agrave; la r&eacute;duction de l&#39;expression ARNm et de prot&eacute;ines. Ici, nous &eacute;tablissons l&#39;efficacit&eacute; de ce syst&egrave;me en livrant des siARN dirig&eacute; contre le p300 co-activateur transcriptionnel. Nos r&eacute;sultats montrent d&#39;inhibition de p300 accumulation d&#39;ARNm et de prot&eacute;ines en pr&eacute;sence de ces deux virus, mais aucun effet en l&#39;absence d&#39;antibiotique t&eacute;tracycline par. Vecteurs de shARN ad&eacute;noviraux r&eacute;glement&eacute;es offrent les avantages d&#39;&ecirc;tre capable d&#39;infecter un large &eacute;ventail de r&eacute;plication et SV de cellules et de permettre le contr&ocirc;le temporel de silen&ccedil;age g&eacute;nique.

Rupture de g&egrave;ne par courte interf&eacute;rente RNA expression r&eacute;gul&eacute;e, utilisant un syst&egrave;me de deux-ad&eacute;novirus.

Spezifisches gen Ablation durch RNA-Ableitung (RNAi) umfasst die Bindung des kurzen interfering RNA (SiRNA), 21 bis 22 Nukleotide lang, zu komplement&auml;ren mRNA-Sequenzen zur Sequenz-spezifische posttranslationale gen zum Schweigen brachte, wodurch ein leistungsf&auml;higes Werkzeug f&uuml;r das Studium der Genfunktion mit m&ouml;glichen therapeutischen Anwendungen. Hier beschreiben wir das Entwicklung eines zwei-Vektor Adenoviren f&uuml;r effiziente, streng kontrollierten Haarnadel SiRNA Ausdruck (ShRNA). Geregelten Ausdruck der ShRNA wird innerhalb einer adenoviral Vektor durch modifizierte RNA-Polymerase III F&ouml;rderer mit einem Tet-Operator-Element neben der Transkription-Start-Website &uuml;bertragen. In der Gegenwart das Tetracyclin Hemmer Protein (TetR), in einer zweiten Adenoviren codiert, ist ShRNA Ausdruck unterdr&uuml;ckt. Zusatz von Tetracyclin schafft TetR binden, so dass ShRNA Transkription fortgesetzt und f&uuml;hrt zu reduzierten mRNA und Protein-Ausdruck. Hier schaffen wir die Wirksamkeit dieses Systems durch die Bereitstellung von SiRNA gegen die transcriptional Coactivator p300 gerichtet. Unsere Ergebnisse zeigen Tetracyclin-vermittelte Hemmung der p300 mRNA und Protein Akkumulation in Anwesenheit beider Viren, aber in Ermangelung von Antibiotika wirkungslos. Geregelten adenoviral ShRNA Vektoren bieten die Vorteile des Seins in der Lage, eine breite Palette von replizieren zu infizieren und nonreplicating Zellen und zeitlichen Steuerung des gen-silencing zu erlauben.

Gen St&ouml;rung durch geregelten kurzen interferierender RNA Ausdruck mit einem zwei-Adenovirus-System.

Ablazione del gene specifico di inferenza RNA (RNAi) comporta l&#39;associazione di breve interferenza RNA (siRNA), 21-22 nucleotidi lunghi, alle sequenze di mRNA complementari, portando a sequenza-specifici post traduzionale gene silencing, fornendo cos&igrave; un potente strumento per lo studio della funzione del gene con potenziali applicazioni terapeutiche. Qui descriviamo lo sviluppo di un sistema di due-vector adenovirus per espressione di siRNA tornante efficiente, strettamente controllati (shRNA). Regolamentato espressione dei shRNA &egrave; conferito all&#39;interno di un vettore adenovirale da modificato RNA polimerasi III promotore contenente un elemento operatore Tet adiacente al sito di inizio trascrizione. In presenza della proteina repressore di tetraciclina (TetR), codificata in un secondo dell&#39;adenovirus, espressione di shRNA &egrave; represso. Aggiunta di tetraciclina abolisce TetR vincolante, consentendo di shRNA trascrizione di procedere e portando a ridotta espressione di mRNA e di proteine. Qui noi stabilire l&#39;efficacia di questo sistema consegnando siRNA mirato contro il p300 di transcriptional coactivator. I nostri risultati mostrano inibizione mediata da tetraciclina p300 accumulo di mRNA e proteine in presenza di entrambi i virus, ma nessun effetto in assenza di antibiotico. Regolamentato shRNA adenovirali vettori offrono i vantaggi di essere in grado di infettare una vasta gamma di replica e cellule nonreplicating e di permettere il controllo temporale del silenziamento genico.

Rottura del gene regolato da breve espressione di RNA interferenti, utilizzando un sistema di due-adenovirus.

&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; RNA &#x63A8;&#x8AD6; &#xFF08;RNAi&#xFF09; &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x56FA;&#x6709;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x77ED;&#x3044;&#x5E72;&#x6E09; RNA (siRNA) 21 &#x306B; 22 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x88DC;&#x5B8C;&#x306E; mRNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x9577;&#x3044;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x53B3;&#x3057;&#x304F;&#x7D71;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3; siRNA &#x767A;&#x73FE; &#xFF08;shRNA&#xFF09; &#x306E; 2 &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ShRNA &#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5185;&#x8EE2;&#x5199;&#x958B;&#x59CB;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x30C6;&#x30C8;&#x6F14;&#x7B97;&#x5B50;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5909;&#x66F4; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; III &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6388;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (TetR) &#x306F; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3067;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067; shRNA &#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5727;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3001;shRNA &#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x7D9A;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E; mRNA &#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B; TetR &#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8EE2;&#x5199;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; p300 &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6A19;&#x7684; siRNA &#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x963B;&#x5BB3; p300 &#x306E; mRNA &#x3084;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x52B9;&#x679C;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; shRNA &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066; nonreplicating &#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7834;&#x58CA;&#x306B;&#x3088;&#x308B; 2 &#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x77ED;&#x3044;&#x5E72;&#x6E09; RNA &#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x898F;&#x5236;&#x3002;

RNA &#xCD94;&#xB860; (RNAi)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xAC70; &#xC9E7;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA (siRNA) 21 ~ 22 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xAE34; &#xC0C1;&#xD638; &#xBCF4;&#xC644;&#xC801;&#xC778; mRNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; posttranslational &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xC751;&#xC6A9; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC774; &#xACE0;, &#xAE34;&#xBC00; &#xD558; &#xAC8C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xBA38;&#xB9AC; &#xD540; siRNA &#xC2DD; (shRNA) &#xB450; &#xBCA1;&#xD130; &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAE30;&#xC220;. Shrna&#xB294; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xD45C;&#xD604; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; III &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB179;&#xC74C; &#xC2DC;&#xC791; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; Tet &#xC5F0;&#xC0B0;&#xC790; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; adenoviral &#xBCA1;&#xD130; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218; &#xC5EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xD56D;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC9C8; &#xC9C4;&#xC555; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (TetR), &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; shRNA &#xC2DD; &#xC5B5;&#xC555; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD56D;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xC704;&#xBC18;&#xC740; TetR &#xBC14;&#xC778;&#xB529;, shRNA &#xC804;&#xC0AC; &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xACC4;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; &#xC120;&#xB3C4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; transcriptional coactivator p300&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; siRNA &#xC804;&#xB2EC; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB450; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC874;&#xC7AC; p300 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xD56D;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC9C8; &#xC911;&#xC7AC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC7A5;&#xC810;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; adenoviral shRNA &#xBCA1;&#xD130; &#xBC0F; nonreplicating &#xC140;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xC9E7;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA &#xC2DD; 2-&#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAD50;&#xB780; &#xD55C;&#xB2E4;.

Ablaci&oacute;n de gen espec&iacute;fico por inferencia de RNA (ARNi) consiste en la Uni&oacute;n de corto ARN interferente (siRNA), 21 a 22 nucle&oacute;tidos de largos, a secuencias complementarias de mRNA, llevando a la secuencia espec&iacute;fica gen posttranslational silenciamiento, proporcionando as&iacute; una herramienta poderosa para el estudio de funciones de los genes con potencial aplicaci&oacute;n terap&eacute;utica. Aqu&iacute; describimos el desarrollo de un sistema de dos-vector adenovirus para expresi&oacute;n de siRNA horquilla eficiente, estrictamente controlados (shRNA). La expresi&oacute;n regulada de la shRNA lo expide dentro de un vector adenoviral modificado RNA polimerasa III promotor que contiene un elemento de operador de Tet adyacente a la p&aacute;gina de inicio de transcripci&oacute;n. En presencia de la prote&iacute;na represora de tetraciclina (Tet), codificada en un segundo adenovirus, shRNA expresi&oacute;n se reprime. Adem&aacute;s de la tetraciclina suprime Tet vinculante, permitiendo la transcripci&oacute;n shRNA proceder y hacia la expresi&oacute;n de mRNA y prote&iacute;na reducida. Aqu&iacute; establecemos la eficacia de este sistema entregando siRNA dirigida contra el p300 coactivador transcripcional. Nuestros resultados muestran tetraciclina mediada por la inhibici&oacute;n de la acumulaci&oacute;n de mRNA y prote&iacute;na p300 en presencia de ambos virus, pero ning&uacute;n efecto en ausencia de antibi&oacute;ticos. Vectores de shRNA adenoviral regulado ofrecen las ventajas de ser capaces de infectar a una amplia gama de replicar y c&eacute;lulas nonreplicating y de permitir el control temporal de silenciamiento g&eacute;nico.

Interrupci&oacute;n de genes regulados por corta expresi&oacute;n de RNA interferente, utilizando un sistema de dos-adenovirus.

&#x636E;&#x62A5;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6210;&#x866B; 300 &#x7684;&#x7535;&#x529B;&#x7EBF;&#x6269;&#x89C4;&#x7BA1;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236; p53 &#x548C;&#x5176; ortholog p73&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E00;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#x6B64;&#x5171;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50;&#x8FD8;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86; p63 &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;300 &#x82AF;&#x7247;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; p63gamma&#xFF0C;&#x5E76;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; N &#x603B;&#x7AD9;&#x7684;&#x4F53;&#x5916; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x548C; p63gamma &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x3002;300 &#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5176; acetylase &#x7F3A;&#x9677;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; AT2&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; p63gamma &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC; p21 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x5BFC;&#x81F4; G1 &#x902E;&#x6355;&#x3002;&#x6210;&#x53CD;&#x6BD4;&#xFF0C;deltaN p63gamma &#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x4EE5;&#x53CA; p300AT2 p63gamma &#x6291;&#x5236; p21 &#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;300 &#x7684;&#x7535;&#x529B;&#x7EBF;&#x6269;&#x89C4;&#x7BA1; p63 &#x4F9D;&#x8D56;&#x8F6C;&#x5F55; p21&#x3002;

300 &#x82AF;&#x7247;&#x89C4;&#x8303; p63 &#x8F6C;&#x5F55;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

The transcriptional co-activator p300 has been reported to regulate the tumor suppressor p53 and its ortholog p73. Here we describe a study showing that this coactivator also regulates the transcriptional function of p63. p300 bound to the N-terminal domain of p63gamma, and p63gamma bound to the N terminus of p300 in vitro and in cells. p300, but not its acetylase-defective mutant AT2, stimulated p63gamma-dependent transcription and induction of p21 in cells, consequently leading to G1 arrest. Inversely, the deltaN-p63gamma isoform as well as p300AT2 inhibited the induction of p21 by p63gamma. These results suggest that p300 regulates p63-dependent transcription of p21.

p300 regulates p63 transcriptional activity.

&#x67D0;&#x4E9B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x6392;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04;&#xFF0C;&#x5C55;&#x793A;&#x5168;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x65F6;&#x95F4; (&#x5FB7;&#x745E;&#x8FBE;&#xFF09; &#x4E0E;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x51DD;&#x7ED3; (DMC) &#x5EF6;&#x8FDF;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6218;&#x7565;&#x4F7F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0E;&#x6B64;&#x5FB7;&#x745E;&#x8FBE;/DMC &#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5927;&#x7EA6; 10%&#x7684; inter-chromosomal &#x6613;&#x4F4D;&#x81F4;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4ECB;&#x5BFC; Cre &#x4F4D;&#x70B9;&#x4E13;&#x4E00;&#x6027;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6216;&#x975E;&#x540C;&#x6E90;&#x672B;&#x7AEF;&#x7684; DNA &#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x52A0;&#x5165;&#x6211;&#x7684; Sce1&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x5FB7;&#x745E;&#x8FBE;/DMC &#x6240;&#x81F4;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x67D0;&#x4E9B;&#x5E73;&#x8861;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684;&#x884D;&#x751F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E4B;&#x4E00;&#x663E;&#x793A;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x5FB7;&#x745E;&#x8FBE;/DMC &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6536;&#x8D2D;&#x6BDB;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x6392;&#x65F6;&#x4E0E;&#x5FB7;&#x745E;&#x8FBE;/DMC &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x76F8;&#x6BD4;&#x589E;&#x52A0;&#x901F;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5FB7;&#x745E;&#x8FBE;/DMC &#x8868;&#x578B;&#x4E0D;&#x662F;&#x968F;&#x673A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6613;&#x4F4D;&#x65AD;&#x70B9;&#x6216;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x540E;&#x751F;&#x5BF9;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x67D0;&#x4E9B;&#x884D;&#x751F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x65F6;&#x95F4;&#x5B89;&#x6392;&#x53D7;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x542F;&#x52A8;&#x548C;&#x5B8C;&#x6210;&#x6CBF;&#x6574;&#x4E2A;&#x957F;&#x5EA6;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; DNA &#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x987A;&#x5F0F;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04;&#x4E0E;&#x5FB7;&#x745E;&#x8FBE;/DMC &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x662F;&#x516C;&#x7528;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5FB7;&#x745E;&#x8FBE;/DMC &#x8868;&#x793A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x6301;&#x7EED;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

&#x5DE5;&#x7A0B;&#x4E0E;&#x590D;&#x5236;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6613;&#x4F4D;&#xFF1A; &#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x63A7;&#x5236;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x590D;&#x5236;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

Certain chromosome rearrangements, found in cancer cells or in cells exposed to ionizing radiation, exhibit a chromosome-wide delay in replication timing (DRT) that is associated with a delay in mitotic chromosome condensation (DMC). We have developed a chromosome engineering strategy that allows the generation of chromosomes with this DRT/DMC phenotype. We found that approximately 10% of inter-chromosomal translocations induced by two distinct mechanisms, site-specific recombination mediated by Cre or non-homologous end joining of DNA double-strand breaks induced by I-Sce1, result in DRT/DMC. Furthermore, on certain balanced translocations only one of the derivative chromosomes displays the phenotype. Finally, we show that the engineered DRT/DMC chromosomes acquire gross chromosomal rearrangements at an increased rate when compared with non-DRT/DMC chromosomes. These results indicate that the DRT/DMC phenotype is not the result of a stochastic process that could occur at any translocation breakpoint or as an epigenetic response to chromosome damage. Instead, our data indicate that the replication timing of certain derivative chromosomes is regulated by a cis-acting mechanism that delays both initiation and completion of DNA synthesis along the entire length of the chromosome. Because chromosomes with DRT/DMC are common in tumor cells and in cells exposed to ionizing radiation, we propose that DRT/DMC represents a common mechanism responsible for the genomic instability found in cancer cells and for the persistent chromosomal instability associated with cells exposed to ionizing radiation.

Engineering translocations with delayed replication: evidence for cis control of chromosome replication timing.

Certains r&eacute;arrangements chromosomiques, trouv&eacute;s dans les cellules canc&eacute;reuses dans les cellules expos&eacute;es &agrave; des rayonnements ionisants, pr&eacute;sentent un retard du chromosome &agrave; l&#39;&eacute;chelle dans la r&eacute;plication de synchronisation (DRT) qui est associ&eacute;e &agrave; un retard dans la condensation des chromosomes mitotiques (DMC). Nous avons d&eacute;velopp&eacute; une strat&eacute;gie d&#39;ing&eacute;nierie chromosomique qui permet la g&eacute;n&eacute;ration des chromosomes avec ce ph&eacute;notype DRT/DMC. Nous avons constat&eacute; qu&#39;environ 10 % de translocations inter-chromosomal induites par deux m&eacute;canismes distincts, recombinaison site-sp&eacute;cifique m&eacute;di&eacute;e par la Cre ou non homologue fin assemblage des cassures double brin de l&#39;ADN induite par je-Sce1, r&eacute;sultat en DRT/DMC. Par ailleurs, sur certaines translocations &eacute;quilibr&eacute;es, seulement un des chromosomes d&eacute;riv&eacute;s affiche le ph&eacute;notype. Enfin, nous montrons que les chromosomes DRT/DMC machin&eacute;s acqui&egrave;rent des r&eacute;arrangements chromosomiques bruts &agrave; un taux plus &eacute;lev&eacute; par rapport aux chromosomes non-DRT/DMC. Ces r&eacute;sultats indiquent que le ph&eacute;notype de la DRT/DMC n&#39;est pas le r&eacute;sultat d&#39;un processus stochastique qui pourraient se produire &agrave; n&#39;importe quel point de translocation ou comme une r&eacute;ponse &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique aux dommages chromosomiques. Au lieu de cela, nos donn&eacute;es indiquent que la synchronisation de la r&eacute;plication de certains chromosomes d&eacute;riv&eacute;s est r&eacute;gul&eacute;e par un m&eacute;canisme intramol&eacute;culaires qui retarde la fois ouverture et ach&egrave;vement de la synth&egrave;se de l&#39;ADN sur toute la longueur du chromosome. Parce que les chromosomes avec DRT/DMC sont communs dans les cellules tumorales et dans les cellules expos&eacute;es &agrave; des rayonnements ionisants, nous proposons que le DRT/DMC repr&eacute;sente un m&eacute;canisme commun responsable de l&#39;instabilit&eacute; g&eacute;nomique, trouv&eacute; dans les cellules canc&eacute;reuses et de l&#39;instabilit&eacute; chromosomique persistante associ&eacute;es &agrave; des cellules expos&eacute;es &agrave; des rayonnements ionisants.

Ing&eacute;nierie des translocations avec r&eacute;plication diff&eacute;r&eacute;e : evidence for control cis de synchronisation de la r&eacute;plication du chromosome.

Bestimmte Chromosomen-Rearrangements, in Krebszellen oder Zellen, die ionisierende Strahlung, weisen eine Chromosom-weite-Verz&ouml;gerung bei der Replikation Zeitmessung (DRT), die mit einer Verz&ouml;gerung in mitotische Chromosomenkondensation (DMC) ist. Wir haben eine Chromosom-engineering-Strategie entwickelt, die die Generation der Chromosomen mit diesem DRT/DMC-Ph&auml;notyp erlaubt. Wir fanden, dass etwa 10 % der inter-chromosomal Translokationen, die durch zwei verschiedene Mechanismen induziert, ortsspezifische Rekombination von Cre vermittelt oder nicht-homologe Ende f&uuml;gen von Br&uuml;chen der DNA-Doppel-Strang von ich-Sce1, Ergebnis in DRT/DMC induziert. Dar&uuml;ber hinaus zeigt nur eine von den derivativen Chromosomen auf bestimmte ausgewogene Umsiedlung der Ph&auml;notyp. Schlie&szlig;lich zeigen wir, dass die manipulierte DRT/DMC-Chromosomen grobe chromosomale Rearrangements mit einer erh&ouml;hten Rate im Vergleich zu nicht-DRT/DMC Chromosomen erwerben. Diese Ergebnisse zeigen, dass der DRT/DMC-Ph&auml;notyp ist nicht das Ergebnis eines stochastischen Prozesses, die an jedem Haltepunkt Translokation oder als epigenetische Antwort auf Chromosom Sch&auml;den auftreten k&ouml;nnten. Stattdessen zeigen unsere Daten, dass das Timing der Replikation bestimmter derivativer Chromosomen durch einen Cis-Schauspiel-Mechanismus geregelt ist, die verz&ouml;gert die Einleitung und Abschluss der DNA-Synthese &uuml;ber die gesamte L&auml;nge des Chromosoms. Da die Chromosomen mit DRT/DMC in Tumorzellen und in Zellen, die ionisierende Strahlungen ausgesetzt sind, schlagen wir DRT/DMC-dar-einen gemeinsamen Mechanismus verantwortlich f&uuml;r die genomische Instabilit&auml;t in Krebszellen gefunden und die andauernden chromosomale Instabilit&auml;t zugeordnete Zellen gegen&uuml;ber ionisierender Strahlung ausgesetzt.

Technische Umsiedlung mit verz&ouml;gerte Replikation: Beweise f&uuml;r Cis-Steuerelement Chromosom Replikation Timing.

Alcuni riarrangiamenti di cromosoma, trovati in cellule tumorali o cellule esposte alle radiazioni ionizzanti, presentano un ritardo di tutto il cromosoma in replica timing (DRT) che &egrave; associato con un ritardo nella condensazione del cromosoma mitotico (DMC). Abbiamo sviluppato una strategia di ingegneria cromosoma che permette la generazione dei cromosomi con questo fenotipo DRT/DMC. Abbiamo trovato che circa il 10% di traslocazioni inter-chromosomal indotte da due distinti meccanismi, site specific ricombinazione mediata da Cre o estremit&agrave; non omologhe unendo delle rotture del doppio filamento del DNA indotta da mi-Sce1, risultato in DRT/DMC. Inoltre, su alcune traslocazioni bilanciate solo uno dei cromosomi derivati Visualizza il fenotipo. Infine, ci mostra che i cromosomi DRT/DMC ingegnerizzati acquisiscano riarrangiamenti cromosomici lordi ad un tasso maggiore rispetto ai non-DRT/DMC cromosomi. Questi risultati indicano che il fenotipo DRT/DMC non &egrave; il risultato di un processo stocastico che potrebbe verificarsi in qualsiasi punto d&#39;interruzione traslocazione o come risposta epigenetico per danno cromosomico. Invece, i nostri dati indicano che i tempi di replica di determinati cromosomi derivati sono regolamentato da un meccanismo di cis-acting che ritarda l&#39;avvio e il completamento della sintesi del DNA lungo l&#39;intera lunghezza del cromosoma. Poich&eacute; i cromosomi con DRT/DMC sono comuni nelle cellule tumorali e nelle cellule esposte alle radiazioni ionizzanti, proponiamo che la DRT/DMC rappresenta un meccanismo comune responsabile per l&#39;instabilit&agrave; genomica trovati nelle cellule tumorali e per la persistente instabilit&agrave; cromosomica associata con cellule esposte alle radiazioni ionizzanti.

Ingegneria traslocazioni con replica ritardata: prove per cis controllo dei tempi di replica del cromosoma.

&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96FB;&#x96E2;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x306B;&#x9732;&#x51FA;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x305F;&#x7279;&#x5B9A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x8A98;&#x767A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C9;&#x9045;&#x5EF6;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x5C55;&#x793A; mitotic &#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x51DD;&#x7E2E; (DMC) &#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; &#xFF08;DRT&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x306E; DRT/DMC &#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x7D04; 10 &#xFF05; &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F; inter-chromosomal &#x8EE2;&#x5EA7;&#x304C;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; Cre &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x79C1;&#x306F;-Sce1&#x3001;&#x7D50;&#x679C; DRT/DMC &#x306E;&#x975E;&#x76F8;&#x540C;&#x672B;&#x7AEF;&#x7D50;&#x5408; DNA &#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x5747;&#x8861;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306B;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3060;&#x3051;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;, &#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x305F; DRT/DMC &#x67D3;&#x8272;&#x4F53; DRT/DMC &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x5897;&#x52A0;&#x7387;&#x3067;&#x7DCF;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DRT/DMC &#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x4EFB;&#x610F;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x78BA;&#x7387;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x767A;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066; DNA &#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x5B8C;&#x4E86;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x30B7;&#x30B9;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96FB;&#x96E2;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x306B;&#x9732;&#x51FA;&#x306B; DRT/DMC &#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x304C;&#x5171;&#x901A;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;DRT/DMC &#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x96FB;&#x96E2;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x9045;&#x5EF6;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x5DE5;&#x5B66;: &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8907;&#x88FD;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3002;

&#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB098; &#xC804;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xC804;&#xC2DC; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC804;&#xCCB4;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; (DRT) &#xC9C0;&#xC5F0; mitotic &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC751;&#xCD95; (DMC)&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C;. DRT/dmc&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC774; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xACF5;&#xD559; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; inter-chromosomal translocations &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xC758; &#xC57D; 10%, &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; Cre &#xC911;&#xC7AC; &#xB610;&#xB294; &#xB09C;-Sce1, DRT/DMC&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; DNA &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; &#xB098;&#xB204;&#xAE30;&#xC758; &#xBE44; &#xB3D9;&#xC885; &#xCD5C;&#xC885; &#xD569;&#xB958; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD2B9;&#xC815; &#xADE0;&#xD615;&#xB41C; translocations &#xD30C;&#xC0DD; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB9CC; phenotype &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC124;&#xACC4; DRT/DMC &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; DRT/DMC &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC99D;&#xAC00; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xCD1D; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xD655;&#xBCF4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; DRT/dmc&#xC758; phenotype &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC804; &#xC911;&#xB2E8;&#xC810; &#xB610;&#xB294; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; epigenetic &#xBC18;&#xC751;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD655;&#xB960; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xAC00; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC640; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xB530;&#xB77C; DNA &#xC885;&#xD569; &#xC900;&#xACF5; &#xC9C0;&#xC5F0; cis &#xD589;&#xB3D9; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. DRT/DMC&#xC640; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0; &#xC804;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC81C;&#xC548; DRT/dmc&#xC758; &#xC804;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC601;&#xAD6C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xB294; genomic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C0;&#xC5F0; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; translocations &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1;: &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC758; cis &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;.

Algunos los cambios del cromosoma, encontrados en las c&eacute;lulas cancerosas o en las c&eacute;lulas expuestas a la radiaci&oacute;n ionizante, exhiben un retraso de todo el cromosoma en replicaci&oacute;n sincronizaci&oacute;n (DRT) que se asocia a un retraso en la condensaci&oacute;n del cromosoma mit&oacute;tico (DMC). Hemos desarrollado una estrategia de ingenier&iacute;a del cromosoma que permite la generaci&oacute;n de los cromosomas con este fenotipo DRT/DMC. Se encontr&oacute; que aproximadamente el 10% de inter-cromos&oacute;mico desplazamientos inducidos por dos mecanismos distintos, recombinaci&oacute;n espec&iacute;fica mediada por Cre o no-hom&oacute;logas end joining de roturas de doble cadena de DNA inducida por-Sce1, resultado en DRT/DMC. Adem&aacute;s, en ciertas translocaciones equilibradas s&oacute;lo uno de los cromosomas derivados muestra el fenotipo. Finalmente, demostramos que los cromosomas DRT/DMC Ingenier&iacute;a adquirieran los cambios cromos&oacute;micos brutos a una tasa mayor en comparaci&oacute;n con los cromosomas no-DRT/DMC. Estos resultados indican que el fenotipo DRT/DMC no es el resultado de un proceso estoc&aacute;stico que podr&iacute;a ocurrir en cualquier punto de interrupci&oacute;n de desplazamiento o como respuesta a la lesi&oacute;n cromos&oacute;mica epigen&eacute;tica. En cambio, nuestros datos indican que el tiempo de replicaci&oacute;n de ciertos cromosomas derivados est&aacute; regulado por un mecanismo de acci&oacute;n cis que retrasa tanto de iniciaci&oacute;n y de terminaci&oacute;n de la s&iacute;ntesis de ADN a lo largo de toda la longitud del cromosoma. Porque los cromosomas con DRT/DMC son comunes en las c&eacute;lulas del tumor y en c&eacute;lulas expuestas a la radiaci&oacute;n ionizante, proponemos que DRT/DMC representa un mecanismo com&uacute;n responsable la inestabilidad gen&oacute;mica que se encuentra en las c&eacute;lulas de c&aacute;ncer y de la persistente inestabilidad cromos&oacute;mica asociada a las c&eacute;lulas expuestas a la radiaci&oacute;n ionizante.

Ingenier&iacute;a translocaciones con replicaci&oacute;n tard&iacute;a: evidencia para el control de la cis de sincronizaci&oacute;n de replicaci&oacute;n del cromosoma.

Die sehr &auml;hnliche Acetyltransferases, p300 und CREB-verbindliches Protein (CBP) sind Coactivators der Signal-responsive transcriptional Aktivierung. Dar&uuml;ber hinaus schl&auml;gt den letzten Beweis, dass p300/CBP auch direkt mit komplexen interagiert, die DNA-Replikation und Reparatur zu vermitteln. In diesem Bericht zeigen wir diesen Verlust der p300/CBP in S&auml;ugetierzellen f&uuml;hrt ein Mangel an der Verhaftung des Zellzyklus induziert durch festgeklemmten DNA-Replikation. Wir zeigen, dass komplexe mit p300/CBP und ATR in den S&auml;ugetier-Zellen erkannt werden k&ouml;nnen und das nachgeschaltete Kinase CHK1 nicht als Reaktion auf phosphoryliert werden DNA-Replikation in Zellen, die p300/CBP fehlen, ins Stocken geraten. Diese Beobachtungen erweitern die Rollen f&uuml;r die p300/CBP-Acetyltransferases geh&ouml;ren die Modulation von Chromatin-Struktur und Funktion w&auml;hrend DNA metabolische Veranstaltungen ebenso wie f&uuml;r Transkription.

P300/CREB-verbindliches Protein interagiert mit ATR und ist erforderlich f&uuml;r die DNA-Replikation-Pr&uuml;fpunkt.

L&#39;acetiltransferasi altamente correlati, p300 e CREB-binding protein (CBP) sono coactivators di attivazione trascrizionale segnale-sensibli a reagire. Inoltre, recenti evidenze suggeriscono che p300/CBP anche interagisce direttamente con i complessi che mediano la replicazione del DNA e riparazione. In questa relazione, mostriamo che la perdita di p300/CBP nei risultati di cellule di mammifero in un difetto nell&#39;arresto del ciclo cellulare indotta dalla replicazione del DNA in stallo. Dimostriamo che complessi contenenti p300/CBP e ATR possono essere rilevati in cellule di mammifero, e che la valle chinasi a che chk1 non riesce a essere fosforilati in risposta una fase di stallo la replicazione del DNA nelle cellule che mancano di p300/CBP. Queste osservazioni ampliano i ruoli per l&#39;acetiltransferasi p300/CBP includere la modulazione della funzione e della struttura della cromatina durante DNA metabolici eventi come pure per quanto riguarda la trascrizione.

P300/CREB-binding protein interagisce con ATR ed &egrave; richiesto per il checkpoint della replicazione del DNA.

&#x5171;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F5C;&#x51FA;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x4E59;&#x9170;&#x3001; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x548C; CREB &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (CBP)&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9; 300 &#x82AF;&#x7247;/CBP &#x8FD8;&#x76F4;&#x63A5;&#x4E0E;&#x8C03;&#x89E3; DNA &#x590D;&#x5236;&#x548C;&#x4FEE;&#x590D;&#x7684;&#x914D;&#x5408;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; 300 &#x82AF;&#x7247;/CBP &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x963B;&#x6EDE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x505C;&#x6EDE;&#x4E0D;&#x524D;&#x7684; DNA &#x590D;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x542B; 300 &#x82AF;&#x7247;/CBP &#x548C; ATR &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x548C; CHK1 &#x672A;&#x80FD;&#x54CD;&#x5E94;&#x53EF;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4E0B;&#x6E38;&#x6FC0;&#x9176;&#x505C;&#x6EDE;&#x5728;&#x7F3A;&#x4E4F; 300 &#x82AF;&#x7247;/CBP &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x6269;&#x5927; 300 &#x82AF;&#x7247;/CBP &#x4E59;&#x9170;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; DNA &#x4EE3;&#x8C22;&#x6D3B;&#x52A8;&#x671F;&#x95F4;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5173;&#x4E8E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

300 &#x82AF;&#x7247;/CREB &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E; ATR &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9700; DNA &#x590D;&#x5236;&#x68C0;&#x67E5;&#x70B9;&#x3002;

The highly related acetyltransferases, p300 and CREB-binding protein (CBP) are coactivators of signal-responsive transcriptional activation. In addition, recent evidence suggests that p300/CBP also interacts directly with complexes that mediate DNA replication and repair. In this report, we show that loss of p300/CBP in mammalian cells results in a defect in the cell cycle arrest induced by stalled DNA replication. We demonstrate that complexes containing p300/CBP and ATR can be detected in mammalian cells, and that the downstream kinase CHK1 fails to be phosphorylated in response to stalled DNA replication in cells that lack p300/CBP. These observations broaden the roles for the p300/CBP acetyltransferases to include the modulation of chromatin structure and function during DNA metabolic events as well as for transcription.

p300/CREB-binding protein interacts with ATR and is required for the DNA replication checkpoint.

Les ac&eacute;tyltransf&eacute;rases fortement connexe, le p300 et le CREB-binding protein (CBP) sont co-activateurs du signal favorisant l&#39;activation de la transcription. En outre, les donn&eacute;es r&eacute;centes sugg&egrave;rent que p300/CBP interagit aussi directement avec les complexes qui m&eacute;dient la r&eacute;plication de l&#39;ADN et de r&eacute;paration. Dans ce rapport, nous montrons que la perte du p300/CBP dans les r&eacute;sultats de cellules de mammif&egrave;res d&#39;un d&eacute;faut dans l&#39;arr&ecirc;t du cycle cellulaire induite par la r&eacute;plication de l&#39;ADN au point mort. Nous d&eacute;montrons que les complexes contenant p300/CBP et ATR peuvent &ecirc;tre d&eacute;tect&eacute;es dans les cellules de mammif&egrave;res, et que la kinase en aval que CHK1 ne parvient pas &agrave; &ecirc;tre phosphoryl&eacute;e in response to a d&eacute;croch&eacute; la r&eacute;plication de l&#39;ADN dans les cellules qui n&#39;ont pas p300/CBP. Ces observations &eacute;largissent les r&ocirc;les pour les ac&eacute;tyltransf&eacute;rases p300/CBP &agrave; inclure la modulation de la structure de la chromatine et la fonction au cours d&#39;&eacute;v&eacute;nements m&eacute;taboliques ADN ainsi que pour la transcription.

P300/CREB-binding protein interagit avec RTA et est requis pour le poste de contr&ocirc;le de r&eacute;plication de l&#39;ADN.

&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;, p300 &#x3068; CREB &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (CBP) &#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x305D;&#x306E; p300/CBP &#x306F;&#x307E;&#x305F; DNA &#x8907;&#x88FD;&#x30FB;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x932F;&#x4F53;&#x3068;&#x76F4;&#x63A5;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x306F;, p300/CBP &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x5931;&#x901F;&#x3057;&#x305F; DNA &#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x505C;&#x6B62;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x932F;&#x4F53; p300/CBP &#x304A;&#x3088;&#x3073; ATR &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3057;&#x3001;CHK1 &#x306B;&#x5FDC;&#x3048;&#x3066;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3059;&#x308B;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; p300/CBP &#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; DNA &#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x505C;&#x6B62;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x3057;&#x3066; DNA &#x4EE3;&#x8B1D;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x542B;&#x3081;&#x308B; p300/CBP &#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x5E83;&#x3052;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

p300/CREB &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068; ATR &#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x3001;DNA &#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xB9E4;&#xC6B0; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; acetyltransferases, p300 &#xBC0F; CREB &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (CBP)&#xC740; &#xC2E0;&#xD638; &#xC751;&#xB2F5; transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; coactivators. &#xB610;&#xD55C;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xC99D;&#xAC70; p300/CBP &#xB610;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC640; &#xC9C1;&#xC811; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E4;&#xC18D;&#xB41C; DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xAC80;&#xAC70;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; p300/CBP&#xC758; &#xADF8; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xC9C0; p300/CBP&#xC640; ATR &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB420; &#xC218; CHK1 &#xC2E4;&#xD328;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; phosphorylated &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB2C8; p300/CBP &#xBD80;&#xC871; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21;&#xC758; DNA &#xB300;&#xC0AC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC804;&#xC0AC; &#xB3D9;&#xC548; chromatin &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; p300/CBP acetyltransferases&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xD655;&#xB300;.

p300/CREB &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; ATR&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El Acetiltransferasas altamente relacionados, p300 y prote&iacute;na CREB (CBP) son la activaci&oacute;n de la se&ntilde;al sensible activaci&oacute;n transcripcional. Adem&aacute;s, la evidencia reciente sugiere que P300/CBP tambi&eacute;n interact&uacute;a directamente con complejos que median la replicaci&oacute;n del ADN y reparaci&oacute;n. En este informe, mostramos que la p&eacute;rdida de CBP/p300 en resultados de c&eacute;lulas de mam&iacute;fero en un defecto en la detenci&oacute;n del ciclo celular inducido por estancamiento replicaci&oacute;n del ADN. Demostramos que los complejos que contienen CBP/p300 y ATR pueden detectarse en c&eacute;lulas de mam&iacute;feros, y que la quinasa descendente a que CHK1 no ser fosforilada en respuesta estancado r&eacute;plica de la DNA en las c&eacute;lulas que carecen de CBP/p300. Estas observaciones ampl&iacute;an las funciones de la CBP/p300 Acetiltransferasas incluir la modulaci&oacute;n de la funci&oacute;n y estructura de la cromatina durante eventos metab&oacute;licos de ADN as&iacute; en cuanto a la transcripci&oacute;n.

prote&iacute;na P300/CREB interact&uacute;a con ATR y es requerida para el puesto de control de la replicaci&oacute;n de ADN.

&#x5728;&#x5957;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624; &#xFF08;MCL&#xFF09; &#x548C;&#x591A;&#x53D1;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7624; (MM) &#x67D0;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x8868;&#x8FBE;&#x88AB;&#x64A4;&#x9500;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x94FE; &#xFF08;&#x5BA4;&#x5185;&#x8FD0;&#x52A8;&#x573A;&#xFF09; &#x8F68;&#x8FF9;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8D1F;&#x8D23;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6253;&#x9776;&#x7528;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76;&#x957F;&#x9014;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5931;&#x53BB;&#x4E86;&#x5960;&#x57FA;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; &#xFF08;t(11;14))&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B; MCL &#x548C; MM &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728; nonrearranged &#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 (CCND1) &#x8F68;&#x8FF9;&#x6062;&#x590D;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C; hypomethylated &#x5230; hypermethylated&#x3002;&#x5960;&#x57FA;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x65B0;&#x5F15;&#x8D77;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x5728; unrearranged CCND1 &#x8F68;&#x8FF9;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B; transallelic &#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x548C;&#x4E3B; MCL &#x60A3;&#x8005;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;&#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x542B; CCCTC &#x7ED3;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50; (ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;) &#x548C; nucleophosmin (&#x6545;&#x5BAB;) &#x5728;&#x6838;&#x4EC1;&#x6253;&#x5305; CCND1 &#x57FA;&#x56E0;&#x4F4D;&#x70B9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x548C;&#x6545;&#x5BAB;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5728;&#x5BA4;&#x5185;&#x8FD0;&#x52A8;&#x573A; 3&#39; &#x76D1;&#x7BA1;&#x4E2D;&#x7684;&#x5143;&#x7D20;&#x53EA;&#x6709; t(11;14) MCL &#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6545;&#x5BAB;&#x77ED;&#x53D1;&#x5939; RNA &#x751F;&#x6210;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x589E;&#x957F;&#x902E;&#x6355;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x764C;&#x75C7;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E73;&#x5EF6;&#x548C; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x548C;&#x6545;&#x5BAB;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x5E73;&#x5EF6;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5960;&#x57FA;&#x5957;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x6848;&#x53D1;&#x73B0;&#x573A;&#x3002;

In mantle cell lymphoma (MCL) and some cases of multiple myeloma (MM), cyclin D1 expression is deregulated by chromosome translocations involving the immunoglobulin heavy chain (IgH) locus. To evaluate the mechanisms responsible, gene targeting was used to study long-distance gene regulation. Remarkably, these targeted cell lines lost the translocated chromosome (t(11;14)). In these MCL and MM cells, the nonrearranged cyclin D1 (CCND1) locus reverts from CpG hypomethylated to hypermethylated. Reintroduction of the translocated chromosome induced a loss of methylation at the unrearranged CCND1 locus, providing evidence of a transallelic regulatory effect. In these cell lines and primary MCL patient samples, the CCND1 loci are packaged in chromatin-containing CCCTC binding factor (CTCF) and nucleophosmin (NPM) at the nucleolus. We show that CTCF and NPM are bound at the IgH 3' regulatory elements only in the t(11;14) MCL cell lines. Furthermore, NPM short hairpin RNA produces a specific growth arrest in these cells. Our data demonstrate transvection in human cancer and suggest a functional role for CTCF and NPM.

Transvection mediated by the translocated cyclin D1 locus in mantle cell lymphoma.

Dans le lymphome du manteau (MCL) et quelques cas de my&eacute;lome multiple (MM), cycline D1 expression est d&eacute;r&eacute;glement&eacute;e par translocations chromosomiques impliquant le locus de la cha&icirc;ne lourde (des hommes ISFH) d&#39;immunoglobuline. Afin d&#39;&eacute;valuer les m&eacute;canismes responsables, ciblage g&eacute;n&eacute;tique a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour &eacute;tudier la r&eacute;gulation g&eacute;nique sur de longues distances. Fait remarquable, ces lign&eacute;es cellulaires cibl&eacute;s perdu chromosomes transloqu&eacute;s (t(11;14)). Lors de ces cellules MCL et MM la cycline D1 nonrearranged locus (CCND1) repasse du CpG hypom&eacute;thyl&eacute;s &agrave; fait. R&eacute;introduction des chromosomes transloqu&eacute;s induit une perte de m&eacute;thylation au locus CCND1 butylvinyle, mettant en &eacute;vidence un effet r&eacute;gulateur de transallelic. Dans ces lign&eacute;es cellulaires et les &eacute;chantillons de patients primaires de MCL, les locus CCND1 sont emball&eacute;s dans la chromatine contenant facteur de liaison CCCTC (FCCT) et nucleophosmin (NGP) dans le nucl&eacute;ole. Nous montrons que le FCCT et NGP sont li&eacute;s &agrave; l&#39;IgH 3&#39; &eacute;l&eacute;ments r&eacute;gulateurs que dans les lign&eacute;es de cellules t MCL. En outre, &eacute;pingle &agrave; cheveux court NGP RNA produit un arr&ecirc;t de croissance sp&eacute;cifiques dans ces cellules. Nos donn&eacute;es d&eacute;montrent la transvection dans le cancer humain et sugg&egrave;rent un r&ocirc;le fonctionnel pour FCCT et NPM.

Transvection m&eacute;di&eacute;e par le transloqu&eacute;s cyclin D1 locus lymphome &agrave; cellules du manteau.

In einigen F&auml;llen des multiplen Myeloms (MM) und Mantelzell-Lymphom (MCL) ist cyclin D1-Ausdruck von Chromosomen-Translokationen, die Einbeziehung der Immunglobulin-schwere Kette (IgH)-Locus dereguliert. Um die Mechanismen, die zu bewerten, wurde Gene targeting zur fern-Genregulation zu studieren. Bemerkenswert ist, verloren diese gezielte Zelllinien das entwichene Chromosom (t(11;14)). In diesen Zellen MCL und MM nonrearranged cyclin D1 (CCND1) Locus von CpG-Hypomethylated auf Hypermethylated zur&uuml;ckgesetzt. Wiedereinf&uuml;hrung des entwichene Chromosoms verursachte einen Verlust der Methylierung an der unrearranged CCND1-Locus, die regulatorische Wirkung Transallelic. In diesen Zelllinien und prim&auml;re MCL Patientenproben sind die CCND1-Loci in Chromatin-haltigen CCCTC Bindung Faktor (CTCF) und Nucleophosmin (NPM) bei der Nukleolus verpackt. Wir zeigen, dass CTCF und NPM auf der IgH 3&#39; regulatorische Elemente nur in der t(11;14) MCL-Zelllinien gebunden sind. NPM kurze Haarnadel RNA produziert dar&uuml;ber hinaus eine spezifische Wachstumanhalten in diesen Zellen. Unsere Daten zeigen, Hexenflug im menschlichen Krebs und weisen auf eine funktionale Rolle f&uuml;r CTCF und NPM.

Hexenflug von der entwichene cyclin D1-Locus in Mantelzell-Lymphom vermittelt.

In alcuni casi di mieloma multiplo (MM) e linfoma mantellare (MCL), cyclin D1 espressione &egrave; liberalizzato da traslocazioni cromosomiche che coinvolge il locus per le catene pesanti (IgH) immunoglobuline. Per valutare i meccanismi responsabili, gene targeting &egrave; stato utilizzato per studiare la regolazione genica a lunga percorrenza. Sorprendentemente, queste linee cellulari mirati perso la traslocazione cromosomica (t(11;14)). In queste cellule MCL e MM, il nonrearranged cyclin D1 (CCND1) locus Ripristina da CpG hypomethylated hypermethylated. Reintroduzione del cromosoma traslocato indotta da una perdita di metilazione presso il locus CCND1 unrearranged, fornendo la prova di un effetto normativo transallelic. In queste linee cellulari e i campioni primari MCL, i loci CCND1 sono confezionati in cromatina contenenti CCCTC binding factor (CTCF) e nucleophosmin (NPM) presso il nucleolo. Mostriamo che CTCF e NPM sono tenuti presso l&#39;IgH 3&#39; elementi regolatori solo nelle linee di cellule t(11;14) MCL. Inoltre, tornante breve NPM RNA produce un arresto di crescita specifici in queste cellule. I nostri dati dimostrano transvection nel cancro umano e suggeriscono un ruolo funzionale per CTCF e NPM.

Transvection mediata dalla traslocazione cyclin D1 locus nel linfoma mantellare.

&#x30DE;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B; &#xFF08;MCL&#xFF09; &#x3068;&#x591A;&#x767A;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x816B; &#xFF08;MM&#xFF09; &#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; D1 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x91CD;&#x9396; (IgH) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x81EA;&#x7531;&#x5316;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9577;&#x8DDD;&#x96E2;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x884C;&#x8EE2;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; (t(11;14))&#x3002; &#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Nonrearranged &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; D1 &#x3053;&#x308C;&#x3089; MCL &#x3057; MM &#x306E;&#x30BB;&#x30EB; (CCND1) &#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x306B;&#x623B;&#x308A;&#x307E;&#x3059; CpG hypomethylated &#x304B;&#x3089; hypermethylated &#x3078;&#x3002;&#x8EE2;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x518D;&#x5C0E;&#x5165;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; transallelic &#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B; unrearranged &#x306E; CCND1 &#x5EA7;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; MCL &#x60A3;&#x8005;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CCND1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080; CCCTC &#x7D50;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50; (CTCF) &#x3068;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x3067; &#xFF08;NPM&#xFF09; npm &#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306B;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CTCF &#x3068; NPM &#x306E; IgH 3&#39; &#x898F;&#x5236;&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x307F; t(11;14) MCL &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;NPM &#x77ED;&#x9396;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3;&#x578B; RNA &#x7279;&#x5B9A;&#x6210;&#x9577;&#x902E;&#x6355;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3072;&#x3068;&#x764C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; transvection &#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3057;&#x3001;CTCF NPM &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30DE;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EE2;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; D1 &#x5EA7;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; Transvection&#x3002;

&#xB9E8; &#xD2C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9BC;&#xD504; &#xC885; (MCL)&#xC640; &#xC5EC;&#xB7EC; myeloma (MM)&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB3C4;, cyclin D1 &#xC2DD; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; (IgH) &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; translocations&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xC644;&#xD654;. &#xCC45;&#xC784; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558; &#xC9C4;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7A5;&#xAC70;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC190;&#xC2E4; translocated &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; (t(11;14)). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; MCL &#xBC0F; MM &#xC140;, nonrearranged cyclin D1 (CCND1) &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; hypermethylated CpG hypomethylated&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC544;&#xAC11;&#xB2C8;&#xB2E4;. Translocated &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; reintroduction transallelic &#xADDC;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; unrearranged CCND1 &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC5D0; &#xBA54; &#xD2F8;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; MCL &#xD658;&#xC790; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; CCND1 loci chromatin &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; CCCTC &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC694;&#xC18C; (CTCF) &#xBC0F; nucleophosmin (NPM)&#xB294; &#xD575;&#xC18C;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xC5EC; CTCF &#xBC0F; &#xACE0;&#xAD81; &#xBC15;&#xBB3C;&#xC6D0; &#xACE0;&#xB4F1;&#xD559;&#xAD50; 3&#39; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; t(11;14) MCL &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xACE0;&#xAD81; &#xBC15;&#xBB3C;&#xC6D0; &#xC9E7;&#xC740; &#xD5E4;&#xC5B4;&#xD540; RNA &#xC0DD;&#xC131;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC131;&#xC7A5; &#xAC80;&#xAC70;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC554; transvection &#xACE0; CTCF NPM&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Transvection &#xB9E8; &#xD2C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9BC;&#xD504; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; translocated cyclin D1 &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;.

En el linfoma de c&eacute;lulas de la capa (MCL) y en algunos casos de mieloma m&uacute;ltiple (MM), la expresi&oacute;n de ciclina D1 es desregulado por Translocaciones cromos&oacute;micas que implican el locus de la cadena pesada (IgH) de inmunoglobulina. Para evaluar los mecanismos, gene targeting fue utilizado para estudiar la regulaci&oacute;n g&eacute;nica de larga distancia. Notablemente, estas l&iacute;neas celulares espec&iacute;ficas perdieron el cromosoma translocado (t(11;14)). En estas c&eacute;lulas MCL y MM, la ciclina D1 nonrearranged lugar geom&eacute;trico (CCND1) recuperar&aacute; de hypomethylated CpG hipermetilados. Reintroducci&oacute;n del cromosoma translocado inducida por una p&eacute;rdida de metilaci&oacute;n en el locus CCND1 unrearranged, proporcionando evidencia de un efecto regulador de la transallelic. En estas l&iacute;neas celulares y muestras de pacientes de MCL primarias, los loci CCND1 vienen en cromatina que contiene factor de Uni&oacute;n CCCTC (CTCF) y nucleophosmin (MNP) en el nucleolo. Mostramos que CTCF y MNP son limitados en los IgH 3&#39; elementos reguladores solamente en las l&iacute;neas de c&eacute;lulas t MCL. Por otra parte, short hairpin RNA de NPM produce una detenci&oacute;n de crecimiento espec&iacute;fico en estas c&eacute;lulas. Nuestros datos demuestran transvection en c&aacute;ncer humano y sugieren un papel funcional para CTCF y MNP.

Transvection mediada por el translocados locus de ciclina D1 en el linfoma de c&eacute;lulas del manto.

&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#xFF0C;&#x5728;&#x6CBF;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x542F;&#x52A8;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; DNA &#x590D;&#x5236;&#x540E;&#x65F6;&#x95F4;&#x590D;&#x5236;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x540C;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#x901A;&#x5E38;&#x590D;&#x5236;&#x540C;&#x6B65; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5355;&#x58F0;&#x9053; allelically &#x8868;&#x793A;&#x5982;&#x5370;&#x8FF9;&#x57FA;&#x56E0;&#x9057;&#x4F20;&#x57FA;&#x56E0;&#x3001; allelically &#x88AB;&#x6392;&#x9664;&#x5728;&#x5916;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BF9;&#x5973;&#x6027;&#x7684; X &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x590D;&#x5236;&#x4EE5;&#x5F02;&#x6B65;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6218;&#x7565;&#x786E;&#x5B9A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x663E;&#x6027;&#x9057;&#x4F20;&#x8F68;&#x8FF9;&#x63A7;&#x5236;&#x5728;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x6B64;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x5728;&#x79BB;&#x6563;&#x7684;&#x8F68;&#x8FF9;&#x5728; 6q16.1 Cre loxp &#x5E8F;&#x5217;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x91CD;&#x6392;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6574;&#x4E2A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x3002;&#x6B64;&#x8F68;&#x8FF9;&#x663E;&#x793A;&#x662F;&#x534F;&#x8C03;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x5355; allelically 6 &#x53F7;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5F02;&#x6B65;&#x590D;&#x5236;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x6B64;&#x8F68;&#x8FF9;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x900F;&#x9732;&#x5927;&#x57FA;&#x56E0;&#x975E;&#x7F16;&#x7801; RNA&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x88AB;&#x547D;&#x540D;&#x4E3A;&#x5F02;&#x6B65;&#x590D;&#x5236;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; 6&#xFF0C;ASAR6 &#x4E0A;&#x7684;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x663E;&#x6027;&#x9057;&#x4F20; RNA &#x5355;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6B64;&#x8F68;&#x8FF9;&#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x94FE;&#x63A5;&#x5355; allelically &#x8868;&#x8FBE;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4EE5;&#x524D;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6D89;&#x53CA;&#x516B;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x6392;&#x663E;&#x793A;&#x590D;&#x5236;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5305;&#x542B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x590D;&#x5236;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x4E0E;&#x65B0;&#x6BDB;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x6392;&#x7684;&#x53D1;&#x751F;&#x7387;&#x5DF2;&#x589E;&#x52A0; 30-80 &#x500D;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x89C2;&#x6D4B;&#x8868;&#x660E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5305;&#x542B;&#x79BB;&#x6563;&#x63A7;&#x5236;&#x6574;&#x4E2A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3001; &#x5355;&#x58F0;&#x9053;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x5168;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x987A;&#x5F0F;&#x5EA7;&#x4F4D;&#x3002;

&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x663E;&#x6027;&#x9057;&#x4F20;&#x8F68;&#x8FF9;&#x63A7;&#x5236;&#x5168;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x8BA1;&#x65F6;&#x548C;&#x5355;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Mammalian DNA replication initiates at multiple sites along chromosomes at different times, following a temporal replication program. Homologous alleles typically replicate synchronously; however, mono-allelically expressed genes such as imprinted genes, allelically excluded genes and genes on the female X chromosome replicate asynchronously. We have used a chromosome engineering strategy to identify a human autosomal locus that controls this replication timing program in cis. We show that Cre/loxP-mediated rearrangements at a discrete locus at 6q16.1 result in delayed replication of the entire chromosome. This locus displays asynchronous replication timing that is coordinated with other mono-allelically expressed genes on chromosome 6. Characterization of this locus revealed mono-allelic expression of a large intergenic non-coding RNA, which we have named asynchronous replication and autosomal RNA on chromosome 6, ASAR6. Finally, disruption of this locus results in the activation of the previously silent alleles of linked mono-allelically expressed genes. We previously found that chromosome rearrangements involving eight different autosomes display delayed replication timing, and that cells containing chromosomes with delayed replication timing have a 30-80-fold increase in the rate at which new gross chromosomal rearrangements occurred. Taken together, these observations indicate that human autosomes contain discrete cis-acting loci that control chromosome-wide replication timing, mono-allelic expression and the stability of entire chromosomes.

An autosomal locus that controls chromosome-wide replication timing and mono-allelic expression.

R&eacute;plication de l&#39;ADN chez les mammif&egrave;res initie &agrave; plusieurs endroits le long des chromosomes &agrave; des moments diff&eacute;rents, suivant un programme de r&eacute;plication temporelle. All&egrave;les homologues typiquement r&eacute;pliquent de mani&egrave;re synchrone ; Cependant, mono-allelically exprim&eacute;s g&egrave;nes g&egrave;nes tels qu&#39;imprim&eacute;s, les g&egrave;nes et les g&egrave;nes allelically exclus sur la r&eacute;plique f&eacute;minine chromosome X de fa&ccedil;on asynchrone. Nous avons utilis&eacute; une strat&eacute;gie d&#39;ing&eacute;nierie chromosomique pour identifier un locus autosomal humain qui contr&ocirc;le ce programme de synchronisation de r&eacute;plication en cis. Nous r&eacute;v&egrave;lent que Cre/loxP-n&eacute;goci&eacute;e des r&eacute;arrangements &agrave; un locus discr&egrave;te au 6q16.1 retard&eacute;e r&eacute;plication du chromosome entier. Ce locus affiche synchronisation de r&eacute;plication asynchrone qui est coordonn&eacute;e avec les autres g&egrave;nes sur le chromosome 6 mono-allelically. Caract&eacute;risation de ce locus a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une expression mono-all&eacute;lique d&#39;un grand interg&eacute;nique non-codantes ARN, que l&#39;on a appel&eacute; la r&eacute;plication asynchrone et autosomique RNA sur le chromosome 6, ASAR6. Enfin, perturbation de ce locus entra&icirc;ne l&#39;activation des all&egrave;les des g&egrave;nes li&eacute;s mono-allelically pr&eacute;c&eacute;demment silencieuses. Pr&eacute;c&eacute;demment, nous avons constat&eacute; que les r&eacute;arrangements chromosomiques impliquant huit diff&eacute;rents autosomes affichent calendrier de r&eacute;plication diff&eacute;r&eacute;e, et que les cellules contenant les chromosomes avec synchronisation de r&eacute;plication tardive ont une augmentation de 30 &agrave; 80 fois le taux auquel les nouveaux r&eacute;arrangements chromosomiques bruts s&#39;est produite. Pris ensemble, ces observations indiquent que les autosomes humains contiennent discr&egrave;tes locus intramol&eacute;culaires qui contr&ocirc;lent la synchronisation de la r&eacute;plication du chromosome &agrave; l&#39;&eacute;chelle, expression mono-all&eacute;lique et la stabilit&eacute; des chromosomes entiers.

Un locus autosomal qui contr&ocirc;le la synchronisation de la r&eacute;plication du chromosome &agrave; l&#39;&eacute;chelle et l&#39;expression mono-all&eacute;lique.

S&auml;ugetier-DNA-Replikation initiiert an mehreren Standorten entlang der Chromosomen zu unterschiedlichen Zeiten nach einem zeitlichen Replikations-Programm. Homologe Allele replizieren normalerweise synchron; jedoch &auml;u&szlig;erten Mono-allelically Gene wie bedruckte Gene, allelically ausgeschlossenen Gene und Gene auf weibliche x-Chromosom replizieren asynchron. Wir haben eine Chromosom-engineering-Strategie verwendet, eine menschliche autosomal Locus zu identifizieren, die diese Replikation-Timing-Programm in GUS steuert. Wir zeigen, dass Cre/LoxP-vermittelte Umlagerungen am eine diskrete Locus am 6q16.1 verz&ouml;gerte Replikation des gesamten Chromosoms f&uuml;hren. Dieser Locus zeigt asynchrone Replikation Zeitmessung, die mit den anderen Mono-allelically exprimierten Genen auf Chromosom 6 koordiniert werden. Charakterisierung dieses Locus offenbart Mono-Allele Ausdruck einer gro&szlig;en intergenetischer non-coding RNA, die wir, asynchrone Replikation und autosomal RNA auf Chromosom 6, ASAR6 genannt haben. Schlie&szlig;lich f&uuml;hrt die Aktivierung der zuvor leise Allele des verkn&uuml;pften Mono-allelically exprimierten Genen Unterbrechung dieses Locus. Vorher finden wir, dass Chromosome Rearrangements mit acht verschiedene Autosomen verz&ouml;gerte Replikation Zeitpunkt anzuzeigen, und Zellen, die Chromosomen mit verz&ouml;gerte Replikation Timing eine 30-80-fache Steigerung im Preis bei der neuen grobe chromosomale Rearrangements aufgetreten ist. Zusammen genommen, zufolge diese Beobachtungen menschliche Autosomen diskrete Cis wirkende Loci enthalten, die Chromosom-weite Replikation Timing, Mono-Allele Ausdruck und die Stabilit&auml;t der gesamten Chromosomen zu steuern.

Ein autosomal-Locus, die Chromosom-weite Replikation Timing und Mono-Allele Ausdruck steuert.

Avvia la replicazione del DNA dei mammiferi a pi&ugrave; siti lungo i cromosomi in tempi diversi, seguendo un programma temporale replica. Alleli omologhi in genere replicano in modo sincrono; Tuttavia, mono-allelically espresso geni, geni allelically esclusi e geni geni come improntate su replicare il cromosoma X femminile in modo asincrono. Abbiamo usato una strategia ingegneria cromosoma per identificare un locus autosomico umano che controlla questo programma temporizzazione replica in cis. Mostriamo che riarrangiamenti Cre/loxP-mediata in un locus discreto a 6q16.1 risultano ritardata replica l&#39;intero cromosoma. Questo locus Visualizza tempi di replica asincrona che sono coordinato con altri geni espressi mono-allelically sul cromosoma 6. Caratterizzazione di questo locus rivelato mono-allelic espressione di un grande intergenic non codificanti RNA, che abbiamo chiamato RNA autosomica sul cromosoma 6, ASAR6 e replica asincrona. Infine, perturbazione di questo locus provoca l&#39;attivazione degli alleli precedentemente silenziosi di geni collegati mono-allelically espressi. Abbiamo trovato in precedenza che riorganizzazioni cromosomiche che coinvolge otto autosomi diversi display timing ritardato replica, e che le celle che contengono i cromosomi con tempi di ritardo di replica hanno un aumento di 30-80 volte il tasso a cui si sono verificati nuovi riarrangiamenti cromosomici lordi. Prese insieme, queste osservazioni indicano che autosomi umani contengono discrete cis-acting loci che controllano tutto il cromosoma replica temporizzazione, espressione allelica mono e la stabilit&agrave; di interi cromosomi.

Un locus autosomico che controlla tutto il cromosoma replica temporizzazione e mono-allelic espressione.

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E; DNA &#x8907;&#x88FD;&#x958B;&#x59CB;&#x5225;&#x306E;&#x56DE;&#x3067;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x6642;&#x7A7A;&#x9593;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3092;&#x6B21;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x76F8;&#x540C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x540C;&#x671F;&#x7684;&#x306B;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C8;;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30E2;&#x30CE;&#x30E9;&#x30EB; allelically &#x3088;&#x3046;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;allelically &#x9664;&#x5916;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5973;&#x6027; X &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3067; cis &#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x512A;&#x6027;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5DE5;&#x5B66;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Cre/loxP &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8A9E;&#x9806;&#x63DB;&#x3048;&#x96E2;&#x6563;&#x5EA7; 6q16.1 &#x3067;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x4ED6;&#x30E2;&#x30CE;&#x30E9;&#x30EB; allelically &#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; 6 &#x4E0A;&#x3067;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30E2;&#x30CE;&#x30E9;&#x30EB; allelic &#x5F0F;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x512A;&#x6027;&#x306E; RNA &#x67D3;&#x8272;&#x4F53; 6&#x3001;ASAR6 &#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x540D;&#x524D;&#x3092;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; RNA &#x306E;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x4EE5;&#x524D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E2;&#x30CE;&#x30E9;&#x30EB; allelically &#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x4EE5;&#x524D; 8 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5EA7;&#x4F4D;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x8A98;&#x767A;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30A4;&#x9045;&#x5EF6;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x7DCF;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x7387;&#x3067; 30-80 &#x500D;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x30E2;&#x30CE;&#x30E9;&#x30EB; allelic &#x5F0F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5168;&#x4F53;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x5236;&#x5FA1;&#x96E2;&#x6563;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30E2;&#x30CE;&#x30E9;&#x30EB;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x512A;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x3002;

&#xD3EC;&#xC720;&#xB958; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xC791; &#xC2DC;&#xAC04; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC74C;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xAE30;&#xC801;; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB3D9;&#xC885; &#xB300;&#xB9BD; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBAA8;&#xB178; allelically &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xAC01; &#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, allelically &#xC81C;&#xC678; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xC5EC;&#xC131;&#xC758; X &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;. &#xC6B0;&#xB9AC; cis&#xC5D0;&#xC774; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; &#xC0C1; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xACF5;&#xD559; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 6q16.1&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; Cre/loxP &#xC911;&#xC7AC; &#xC804;&#xCCB4; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xB178; allelically &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 6&#xC5D0;&#xC640; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xC740; &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xB300;&#xD615; intergenic &#xBE44; &#xCF54;&#xB529; RNA, &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 6, ASAR6 &#xC0C1; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; RNA&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB77C;&#xB294; &#xBAA8;&#xB178; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB178; allelically &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xCE68;&#xBB35; &#xB300;&#xB9BD; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xAC00; &#xB85C;&#xCEE4;&#xC774; &#xC2A4;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; autosomes&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC140; &#xC0C8; &#xCD1D; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C; &#xC694;&#xAE08;&#xC5D0; 30-80-&#xBC30; &#xC99D;&#xAC00;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; autosomes &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC804;&#xCCB4;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;, &#xBAA8;&#xB178; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC804;&#xCCB4; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBCC4; cis &#xC5F0;&#xAE30; loci &#xD3EC;&#xD568;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC804;&#xCCB4;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB178; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;.

Replicaci&oacute;n de ADN mam&iacute;fera inicia en varios sitios a lo largo de los cromosomas en diferentes momentos, siguiendo un programa temporal de replicaci&oacute;n. Alelos hom&oacute;logos t&iacute;picamente replican s&iacute;ncrono; sin embargo, mono-allelically expresado genes impresos tales como genes, genes allelically excluidos y los genes en la repetici&oacute;n de cromosoma femenino asincr&oacute;nicamente. Hemos utilizado una estrategia de ingenier&iacute;a del cromosoma para identificar un locus autos&oacute;mico humano que controla este programa de sincronizaci&oacute;n de replicaci&oacute;n en cis. Mostramos que Cre/loxP-mediada por los cambios en un lugar discreto en 6q16.1 resultan en retrasada replicaci&oacute;n del cromosoma entero. Este lugar geom&eacute;trico muestra los tiempos de replicaci&oacute;n asincr&oacute;nica que se coordina con otros genes expresados mono-allelically en el cromosoma 6. La caracterizaci&oacute;n de este lugar geom&eacute;trico revel&oacute; mono-al&eacute;lica expresi&oacute;n de un gran interg&eacute;nico no codificantes ARN, que hemos nombrado replicaci&oacute;n asincr&oacute;nica y un autosoma RNA en el cromosoma 6, ASAR6. Finalmente, interrupci&oacute;n de este lugar geom&eacute;trico resulta en la activaci&oacute;n de los previamente silenciosos alelos de genes expresados mono-allelically enlazados. Previamente, encontramos que los cambios del cromosoma con ocho diferentes autosomas Mostrar tiempo de replicaci&oacute;n retrasada, y que las c&eacute;lulas que contienen los cromosomas con la sincronizaci&oacute;n de replicaci&oacute;n tard&iacute;a tienen un aumento de 30-80-doblez en la velocidad en que se produjeron nuevos cambios cromos&oacute;micos brutos. Tomados en conjunto, estas observaciones indican que los autosomas humanos contienen discretos lugares geom&eacute;tricos cis-acci&oacute;n que controlan el tiempo de replicaci&oacute;n de todo el cromosoma, expresi&oacute;n al&eacute;lica de mono y la estabilidad de los cromosomas completos.

Un locus autos&oacute;mico que controla el tiempo de replicaci&oacute;n de todo el cromosoma y expresi&oacute;n mono-al&eacute;lica.

Recent studies indicate that mammalian chromosomes contain discrete cis-acting loci that control replication timing, mitotic condensation, and stability of entire chromosomes. Disruption of the large non-coding RNA gene ASAR6 results in late replication, an under-condensed appearance during mitosis, and structural instability of human chromosome 6. Similarly, disruption of the mouse Xist gene in adult somatic cells results in a late replication and instability phenotype on the X chromosome. ASAR6 shares many characteristics with Xist, including random mono-allelic expression and asynchronous replication timing. Additional "chromosome engineering" studies indicate that certain chromosome rearrangements affecting many different chromosomes display this abnormal replication and instability phenotype. These observations suggest that all mammalian chromosomes contain "inactivation/stability centers" that control proper replication, condensation, and stability of individual chromosomes. Therefore, mammalian chromosomes contain four types of cis-acting elements, origins, telomeres, centromeres, and "inactivation/stability centers", all functioning to ensure proper replication, condensation, segregation, and stability of individual chromosomes.

Mammalian chromosomes contain cis-acting elements that control replication timing, mitotic condensation, and stability of entire chromosomes.

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Des &eacute;tudes r&eacute;centes indiquent que les chromosomes mammif&egrave;res contiennent discr&egrave;tes locus intramol&eacute;culaires qui contr&ocirc;lent la synchronisation de la r&eacute;plication, condensation mitotique et la stabilit&eacute; des chromosomes entiers. Perturbation du g&egrave;ne sur une ARN non codants en grande ASAR6 permet la reproduction tardive, une apparition sous condens&eacute;s au cours de la mitose et l&#39;instabilit&eacute; structurelle du chromosome humain 6. De m&ecirc;me, la perturbation du g&egrave;ne Xist souris dans les cellules somatiques adultes entra&icirc;ne un ph&eacute;notype fin de r&eacute;plication et de l&#39;instabilit&eacute; sur le chromosome X. ASAR6 pr&eacute;sente de nombreuses caract&eacute;ristiques avec Xist, y compris l&#39;expression mono-all&eacute;lique al&eacute;atoire et le calendrier de r&eacute;plication asynchrone. Autres &eacute;tudes de &laquo; l&#39;ing&eacute;nierie chromosomique &raquo; indiquent que certains r&eacute;arrangements chromosomiques touchant plusieurs chromosomes diff&eacute;rents ce ph&eacute;notype anormal de r&eacute;plication et d&#39;instabilit&eacute;. Ces observations sugg&egrave;rent que tous les chromosomes chez les mammif&egrave;res contiennent des &laquo; centres d&#39;inactivation/stabilit&eacute; &raquo; qui contr&ocirc;lent la r&eacute;plication correcte, condensation et stabilit&eacute; des chromosomes individuels. Par cons&eacute;quent, les chromosomes chez les mammif&egrave;res contiennent quatre types d&#39;&eacute;l&eacute;ments intramol&eacute;culaires, origines, t&eacute;lom&egrave;res, centrom&egrave;res et &laquo; centres d&#39;inactivation/stabilit&eacute; &raquo;, tout fonctionnement pour assurer la r&eacute;plication correcte, la condensation, s&eacute;gr&eacute;gation et stabilit&eacute; des chromosomes individuels.

Chromosomes chez les mammif&egrave;res contiennent des &eacute;l&eacute;ments intramol&eacute;culaires qui contr&ocirc;lent la synchronisation de la r&eacute;plication, condensation mitotique et la stabilit&eacute; des chromosomes entiers.

Neuere Studien zeigen, dass S&auml;ugetier-Chromosomen diskrete Cis wirkende Loci enthalten, die Replikation Timing, mitotische Kondensation und Stabilit&auml;t des gesamten Chromosomen zu steuern. Unterbrechung des das gro&szlig;e non-coding RNA gen ASAR6 f&uuml;hrt sp&auml;te Replikation unter komprimierte Auftritt w&auml;hrend der Mitose und strukturelle Instabilit&auml;t des menschlichen Chromosom 6. Ebenso f&uuml;hrt St&ouml;rung im Maus-Xist-gen in Erwachsenen K&ouml;rperzellen einen sp&auml;ten Replikation und Instabilit&auml;t Ph&auml;notyp des x-Chromosoms. ASAR6 teilt viele Merkmale mit Xist, einschlie&szlig;lich zuf&auml;llige Mono-Allele Ausdruck und asynchrone Replikation Timing. Zus&auml;tzliche &quot;Chromosom Engineering&quot; Studien zeigen, dass bestimmte Chromosomen-Rearrangements beeinflussen viele verschiedene Chromosomen dieser anormalen Replikation und Instabilit&auml;t Phenotyp anzuzeigen. Diese Beobachtungen legen nahe, dass alle S&auml;ugetier-Chromosomen enthalten &quot;Inaktivierung/Stabilit&auml;t Zentren&quot;, die Replikation, Kondensation und Stabilit&auml;t der einzelnen Chromosomen zu steuern. Deshalb enthalten die S&auml;ugetier-Chromosomen vier Arten von Cis wirkende Elemente, Herkunft, Telomere Zentromerzahl und &quot;Inaktivierung/Stabilit&auml;t-Zentren&quot;, alle funktionierenden Sicherstellung der ordnungsgem&auml;&szlig;en Replikation, Kondensation, Trennung und Stabilit&auml;t der einzelnen Chromosomen.

S&auml;ugetier-Chromosomen Cis wirkende Elemente enthalten, die Replikation Timing, mitotische Kondensation und Stabilit&auml;t des gesamten Chromosomen zu steuern.

Studi recenti indicano che i cromosomi dei mammiferi contengono discrete cis-acting loci che controllano la replicazione temporizzazione, condensazione mitotica e stabilit&agrave; di interi cromosomi. Interruzione del grande non codificanti RNA gene della ASAR6 si traduce in fine replica, un&#39;apparizione durante la mitosi e l&#39;instabilit&agrave; strutturale del cromosoma umano 6 sotto condensato. Allo stesso modo, interruzione del gene esistono mouse in cellule somatiche adulte provoca un fenotipo fine replica e instabilit&agrave; sul cromosoma X. ASAR6 condivide molte caratteristiche con esistono, compreso casuale espressione allelica mono e temporizzazione replica asincrona. Ulteriori studi &quot;ingegneria cromosoma&quot; indicano che alcuni riarrangiamenti di cromosoma che interessano molti differenti cromosomi visualizzano questo fenotipo anormale di replica e di instabilit&agrave;. Queste osservazioni suggeriscono che tutti i cromosomi dei mammiferi contengono &quot;centri di inattivazione/stabilit&agrave;&quot; che controllano la corretta replica, condensazione e stabilit&agrave; dei singoli cromosomi. Pertanto, i cromosomi dei mammiferi contengono quattro tipi di elementi cis-acting, origini, telomeri, centromeri e &quot;centri di inattivazione/stabilit&agrave;&quot;, tutto funzionante per garantire adeguata replica, condensazione, segregazione e stabilit&agrave; dei singoli cromosomi.

Cromosomi dei mammiferi contengono elementi cis-acting che controllano la replicazione temporizzazione, condensazione mitotica e stabilit&agrave; di interi cromosomi.

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&#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xACFC; mitotic &#xACB0;&#xB85C; &#xC804;&#xCCB4; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBCC4; cis &#xC5F0;&#xAE30; loci &#xD3EC;&#xD568;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD070; &#xBE44; &#xCF54;&#xB529; RNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; asar6&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; &#xB2A6;&#xC740; &#xBCF5;&#xC81C;, &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 6&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBD88;&#xC548; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC751;&#xCD95; &#xBAA8;&#xC591; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, &#xC7A5;&#xC560; &#xC131;&#xC778; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Xist &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; X &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xB2A6;&#xC740; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD615; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. ASAR6 Xist, &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xBAA8;&#xB178; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC;&#xC640; &#xB9CE;&#xC740; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xC720; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &quot;&#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xACF5;&#xD559;&quot; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;&#xC774; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD615;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xD3EC;&#xD568; &quot;&#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;/&#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xC13C;&#xD130;&quot; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC81C;, &#xACB0;&#xB85C;, &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 4 &#xC885;&#xB958;&#xC758; cis &#xC5F0;&#xAE30; &#xC694;&#xC18C;, &#xAE30;&#xC6D0;, telomeres, centromeres, &quot;&#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;/&#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xC13C;&#xD130;&quot; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC81C;, &#xACB0;&#xB85C;, &#xC778;&#xC885; &#xCC28;&#xBCC4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC7A5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD3EC;&#xD568;.

&#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xACFC; mitotic &#xACB0;&#xB85C; &#xC804;&#xCCB4; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; cis &#xD589;&#xB3D9; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Estudios recientes indican que los mam&iacute;feros cromosomas contienen discretos lugares geom&eacute;tricos cis-acci&oacute;n que controlan el tiempo de replicaci&oacute;n, condensaci&oacute;n mit&oacute;tico y la estabilidad de los cromosomas completos. Interrupci&oacute;n de la grande no codificante del gene del ARN ASAR6 resulta en replicaci&oacute;n tard&iacute;a, un aspecto bajo-condensado durante la mitosis y la inestabilidad estructural del cromosoma humano 6. Del mismo modo, alteraci&oacute;n del gen Xist rat&oacute;n en c&eacute;lulas som&aacute;ticas adultas da lugar a un fenotipo final de replicaci&oacute;n e inestabilidad en el cromosoma X. ASAR6 comparte muchas caracter&iacute;sticas con Xist, incluyendo la expresi&oacute;n al&eacute;lica de mono al azar y el tiempo de replicaci&oacute;n asincr&oacute;nica. Adicionales estudios de &quot;Ingenier&iacute;a de cromosoma&quot; indican que ciertos los cambios del cromosoma que afecta a muchos diversos cromosomas Mostrar este fenotipo anormal de replicaci&oacute;n e inestabilidad. Estas observaciones sugieren que todos los cromosomas del mam&iacute;feros contienen &quot;centros de inactivaci&oacute;n/estabilidad&quot; que controlan la replicaci&oacute;n adecuada, condensaci&oacute;n y estabilidad de los cromosomas individuales. Por lo tanto, los cromosomas mam&iacute;feros contienen cuatro tipos de elementos cis-actuar, or&iacute;genes, los tel&oacute;meros, centr&oacute;meros y &quot;centros de inactivaci&oacute;n/estabilidad&quot;, todo funcionando para asegurar la correcta replicaci&oacute;n, condensaci&oacute;n, segregaci&oacute;n y estabilidad de los cromosomas individuales.

Mam&iacute;feros cromosomas contienen elementos cis-acci&oacute;n que controlan el tiempo de replicaci&oacute;n, condensaci&oacute;n mit&oacute;tico y la estabilidad de los cromosomas completos.

Article	Year
Regulation of MyoD activity and muscle cell differentiation by MDM2, pRb, and Sp1. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 12702724	2003
Silencing of mouse Aprt is a gradual process in differentiated cells. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 12808089	2003
Ionizing radiation induces frequent translocations with delayed replication and condensation. Cancer research\| PubMed ID: 15548689	2004
Gene disruption by regulated short interfering RNA expression, using a two-adenovirus system. Human gene therapy\| PubMed ID: 15684704	2004
p300 regulates p63 transcriptional activity. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 15965232	2005
Engineering translocations with delayed replication: evidence for cis control of chromosome replication timing. Human molecular genetics\| PubMed ID: 16115817	2005
p300/CREB-binding protein interacts with ATR and is required for the DNA replication checkpoint. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 17272271	2007
Transvection mediated by the translocated cyclin D1 locus in mantle cell lymphoma. The Journal of experimental medicine\| PubMed ID: 18625744	2008
An autosomal locus that controls chromosome-wide replication timing and mono-allelic expression. Human molecular genetics\| PubMed ID: 21459774	2011
Mammalian chromosomes contain cis-acting elements that control replication timing, mitotic condensation, and stability of entire chromosomes. BioEssays : news and reviews in molecular, cellular and developmental biology\| PubMed ID: 22706734	2012

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