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Processing of Human Reduction Mammoplasty and Mastectomy Tissues for Cell Culture

Experimental  examination of normal human mammary epithelial cell (HMEC) behavior, and how  normal cells acquire abnormal properties, can be facilitated ...

Lawrence Berkeley National Laboratory

RASSF1A &#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236; CpG &#x5C9B;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x5931;&#x6D3B;&#x7ECF;&#x5E38;&#x5728;&#x764C;&#x75C7;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x6B64; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;RASSF1A &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x56DB;&#x4E2A; Sp1 &#x5730;&#x70B9;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x5E38;&#x5728;&#x764C;&#x75C7;&#x4E2D;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x3001; &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4FEE;&#x9970;&#x3001; Sp1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C; RASSF1A &#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x88AB;&#x5927;&#x5927;&#x538B;&#x5236; RASSF1A &#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x6B64;&#x5931;&#x6D3B;&#x662F;&#x4E0E;&#x8131;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x548C;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H3 &#x7684;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178; 9 trimethylation &#x548C; Sp1 RASSF1A &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5728;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5728;&#x514B;&#x670D;&#x4E86;&#x5E94;&#x6FC0;&#x76F8;&#x5173;&#x8870;&#x8001;&#x5C4F;&#x969C;&#x7684;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316; CpG &#x5C9B;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;&#x5F53; RASSF1A &#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x548C;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x53BB;&#x4E59;&#x9170;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x65F6;&#xFF0C;Sp1 &#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE; RASSF1A &#x518D;&#x6B21;&#x51FA;&#x73B0;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230; H3 &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x8131;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x548C; H3 &#x8D56;&#x6C28;&#x9178; 9 trimethylation &#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x56E0;&#x5931;&#x6D3B;&#x7684;&#x540C;&#x4E00;&#x65F6;&#x95F4;&#x7A97;&#x53E3;&#x4E2D;&#x4F1A;&#x51FA;&#x73B0;&#x548C;&#x524D;&#x9762; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x5931;&#x6D3B;&#x53EF;&#x80FD;&#x89E6;&#x53D1; RASSF1A &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684; de novo DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C;&#x6B64;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; CpG &#x5C9B;&#x706D;&#x6D3B;&#x3002;

&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x706D;&#x6D3B;&#x524D;&#x9762; de novo DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x671F;&#x95F4;&#x9010;&#x6B65;&#x540E;&#x751F;&#x6C89;&#x9ED8; RASSF1A &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;

Epigenetic inactivation of the RASSF1A tumor suppressor by CpG island methylation was frequently detected in cancer. However, the mechanisms of this aberrant DNA methylation are unknown. In the RASSF1A promoter, we characterized four Sp1 sites, which are frequently methylated in cancer. We examined the functional relationship between DNA methylation, histone modification, Sp1 binding, and RASSF1A expression in proliferating human mammary epithelial cells. With increasing passages, the transcription of RASSF1A was dramatically silenced. This inactivation was associated with deacetylation and lysine 9 trimethylation of histone H3 and an impaired binding of Sp1 at the RASSF1A promoter. In mammary epithelial cells that had overcome a stress-associated senescence barrier, a spreading of DNA methylation in the CpG island promoter was observed. When the RASSF1A-silenced cells were treated with inhibitors of DNA methyltransferase and histone deacetylase, binding of Sp1 and expression of RASSF1A reoccurred. In summary, we observed that histone H3 deacetylation and H3 lysine 9 trimethylation occur in the same time window as gene inactivation and precede DNA methylation. Our data suggest that in epithelial cells, histone inactivation may trigger de novo DNA methylation of the RASSF1A promoter and this system may serve as a model for CpG island inactivation of tumor suppressor genes.

Chromatin inactivation precedes de novo DNA methylation during the progressive epigenetic silencing of the RASSF1A promoter.

Inactivation &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique de la RASSF1A suppresseur de tumeur par m&eacute;thylation d&#39;&icirc;le de CpG a &eacute;t&eacute; fr&eacute;quemment d&eacute;tect&eacute;e dans le cancer. Cependant, les m&eacute;canismes de cette m&eacute;thylation aberrante de l&#39;ADN sont inconnus. Dans le promoteur RASSF1A, nous avons caract&eacute;ris&eacute; des quatre sites de Sp1, qui sont fr&eacute;quemment m&eacute;thyl&eacute;s dans le cancer. Nous avons examin&eacute; la relation fonctionnelle entre la m&eacute;thylation de l&#39;ADN, modification d&#39;histone, liaison Sp1 et RASSF1A expression dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines prolif&eacute;rantes. Avec l&#39;augmentation des passages, la transcription de RASSF1A a &eacute;t&eacute; consid&eacute;rablement r&eacute;duite au silence. Cette inactivation a &eacute;t&eacute; associ&eacute;e &agrave; la d&eacute;sac&eacute;tylation et trim&eacute;thylation de la lysine 9 de l&#39;histone H3 et une liaison avec facult&eacute;s affaiblies du Sp1 au promoteur RASSF1A. Dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires qui ont surmont&eacute; un obstacle de stress associ&eacute;s &agrave; la s&eacute;nescence, on observa un &eacute;talement de la m&eacute;thylation de l&#39;ADN dans le promoteur de l&#39;&icirc;le de CpG. Lorsque les cellules RASSF1A-taire ont &eacute;t&eacute; trait&eacute;s avec des inhibiteurs de l&#39;ADN m&eacute;thyltransf&eacute;rase et histone d&eacute;sac&eacute;tylase, liaison du Sp1 et l&#39;expression de RASSF1A se v&eacute;rifie. En r&eacute;sum&eacute;, nous avons observ&eacute; que la d&eacute;sac&eacute;tylation des histones H3 et H3 lysine 9 trim&eacute;thylation se produisent dans la m&ecirc;me fen&ecirc;tre de temps que l&#39;inactivation de g&egrave;nes et pr&eacute;c&eacute;dant la m&eacute;thylation de l&#39;ADN. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales, inactivation des histones peut-&ecirc;tre d&eacute;clencher la m&eacute;thylation de l&#39;ADN de novo du promoteur RASSF1A et ce syst&egrave;me peut servir de mod&egrave;le pour l&#39;inactivation de l&#39;&icirc;le de CpG de g&egrave;nes suppresseurs de tumeur.

Inactivation de la chromatine pr&eacute;c&egrave;de la m&eacute;thylation de l&#39;ADN de novo pendant le silen&ccedil;age &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique progressive du promoteur RASSF1A.

Epigenetischen Inaktivierung von der RASSF1A Tumorsuppressor von CpG-Insel-Methylierung wurde h&auml;ufig Krebs entdeckt. Die Mechanismen dieser abweichenden DNA-Methylierung sind jedoch unbekannt. In der RASSF1A-Promotor charakterisiert wir vier Sp1-Seiten, die h&auml;ufig in Krebs methyliert sind. Wir untersuchten die funktionale Beziehung zwischen DNA-Methylierung, Histon-&Auml;nderung, Sp1-Bindung und RASSF1A Ausdruck in proliferierenden menschlichen Milch-Epithelzellen. Mit zunehmender Passagen, wurde die Transkription von RASSF1A drastisch zum Schweigen gebracht. Diese Inaktivierung war Deacetylierung und Lysin 9 Trimethylation von Histon H3 und eine gest&ouml;rte Bindung von Sp1 an der RASSF1A-Projekttr&auml;ger zugeordnet. Mamma Epithelzellen, die Stress-assoziierter Seneszenz Barriere &uuml;berwunden hatte, wurde eine Ausbreitung der DNA-Methylierung in der CpG-Insel-Projekttr&auml;ger beobachtet. Wenn die RASSF1A zum Schweigen gebracht-Zellen mit DNA-Methyltransferase und Histon-Deacetylase-Inhibitoren behandelt wurden, reoccurred Bindung von Sp1 und Ausdruck des RASSF1A. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen beobachteten wir, dass Histon H3 Deacetylierung und H3 Lysin 9 Trimethylation im gleichen Zeitfenster als gen-Inaktivierung treten und DNA-Methylierung vorausgehen. Unsere Daten zeigen, dass die Epithelzellen, Histon-Inaktivierung de-Novo-DNA-Methylierung des Promotors RASSF1A ausl&ouml;sen kann, und dieses System kann als ein Modell f&uuml;r die CpG-Insel-Inaktivierung der Tumorsuppressorgene dienen.

Chromatin-Inaktivierung wird de-Novo-DNA-Methylierung w&auml;hrend der progressiven epigenetische silencing des Projekttr&auml;gers RASSF1A vorangestellt.

Inattivazione epigenetica del soppressore tumorale RASSF1A da metilazione isola CpG frequentemente &egrave; stato rilevato nel cancro. Tuttavia, i meccanismi di questa aberrante metilazione del DNA sono sconosciuti. Nel promotore RASSF1A, abbiamo caratterizzato quattro siti di Sp1, che frequentemente sono metilati in cancro. Abbiamo esaminato la relazione funzionale tra la metilazione del DNA, modifiche dell&#39;istone, l&#39;associazione di Sp1 e RASSF1A espressione in cellule epiteliali mammarie umane proliferanti. Con l&#39;aumento di passaggi, la trascrizione di RASSF1A &egrave; stato drasticamente messo a tacere. Questa inattivazione &egrave; stato associato con deacetilazione e lisina 9 trimethylation dell&#39;istone H3 e un&#39;associazione di ipovedenti di Sp1 presso il promotore di RASSF1A. Nelle cellule epiteliali mammarie che avevano superato una barriera di senescenza associati allo stress, &egrave; stata osservata una diffusione di metilazione del DNA nel promotore isola CpG. Quando le cellule tacere RASSF1A sono state trattate con inibitori delle DNA metiltransferasi e istone deacetylase, associazione di Sp1 e l&#39;espressione di RASSF1A nuovamente verificate. In sintesi, abbiamo osservato che deacetilazione istoni H3 e H3 lisina 9 trimethylation si verificano nella stessa finestra di tempo come inattivazione del gene e precedere la metilazione del DNA. I nostri dati suggeriscono che nelle cellule epiteliali, inattivazione dell&#39;istone possa innescare de novo metilazione del DNA del promotore RASSF1A e questo sistema pu&ograve; servire come modello per inattivazione isola CpG di geni oncosoppressori.

Inattivazione della cromatina precede de novo metilazione del DNA durante la progressiva silenziamento epigenetico del promotore RASSF1A.

CpG &#x30A2;&#x30A4;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B; RASSF1A &#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306F;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x764C;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E88;&#x5F8C;&#x3067;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x764C;&#x3067;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;4 &#x3064;&#x306E; Sp1 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DNA &#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3001;Sp1 &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;RASSF1A &#x5F0F;&#x3067;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x901A;&#x8DEF;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x3001;RASSF1A &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306B;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x3057;&#x308D;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3; H3 &#x306E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; 9 &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068; Sp1 &#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x306F;&#x4E88;&#x5F8C;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; CpG &#x30A2;&#x30A4;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;RASSF1A &#x6C88;&#x9ED9;&#x7D30;&#x80DE; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E; Sp1 &#x3068; RASSF1A &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x518D;&#x767A;&#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3; H3 &#x3068; H3 &#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; 9 &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x6642;&#x9593;&#x30A6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3066; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x5148;&#x884C;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x4E88;&#x5F8C;&#x306E; de novo DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;CpG &#x306E;&#x5CF6;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E88;&#x5F8C;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B7;&#x30D6;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; de novo DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x5148;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CpG &#xC12C; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; RASSF1A &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC555;&#xC758; epigenetic &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC554;&#xC5D0; &#xC790;&#xC8FC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xD0C8; &#xC120; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. RASSF1A &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC554;&#xC5D0; &#xAC20; &#xC790;&#xC8FC; 4 Sp1 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD2B9;&#xC9D5;. DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;, &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815;, Sp1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xACFC; RASSF1A &#xC2DD;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0;. &#xAD6C;&#xC808;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD568;&#xAED8; rassf1a&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE68;&#xBB35; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; deacetylation&#xC640; H3 &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4;&#xC758; lysine 9 trimethylation RASSF1A &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; s p 1&#xC758; &#xC7A5;&#xC560; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; &#xB178;&#xD654; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; CpG &#xC12C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0;&#xC758; &#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. RASSF1A &#xC785; &#xB9C9; &#xC74C; &#xC138;&#xD3EC; DNA&#xC640; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; methyltransferase deacetylase&#xC758; &#xC800; &#xD574;&#xC81C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD588;&#xB2E4;, s p 1&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xACFC; rassf1a&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; H3 deacetylation&#xC640; H3 lysine 9 trimethylation &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB85C; &#xAC19;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCC3D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC55E;&#xC5D0; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;, &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; RASSF1A &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xACE0;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;&#xAE30; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; CpG &#xC12C; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Chromatin &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC55E; &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; RASSF1A &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; epigenetic &#xCE68;&#xBB35; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;.

Inactivaci&oacute;n epigen&eacute;tica del supresor del tumor de RASSF1A por metilaci&oacute;n de Isla CpG fue detectada con frecuencia en el c&aacute;ncer. Sin embargo, los mecanismos de este aberrante metilaci&oacute;n de ADN son desconocidos. En el promotor de RASSF1A, caracterizamos cuatro sitios de Sp1, que con frecuencia est&aacute;n metilados en c&aacute;ncer. Examinamos la relaci&oacute;n funcional entre la metilaci&oacute;n del ADN, modificaci&oacute;n de histonas, Sp1 vinculante y la expresi&oacute;n de RASSF1A en c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas proliferaci&oacute;n. Con el aumento de pasajes, la transcripci&oacute;n de RASSF1A dram&aacute;ticamente fue silenciada. Esta inactivaci&oacute;n se asoci&oacute; con desacetilaci&oacute;n y lisina 9 trimetilaci&oacute;n de la histona H3 y un atascamiento deteriorado de Sp1 en el promotor de la RASSF1A. En c&eacute;lulas epiteliales mamarias que hab&iacute;an superado una barrera de senescencia asociada a estr&eacute;s, separarse de la metilaci&oacute;n del ADN en el promotor de Isla CpG se observ&oacute;. Cuando las c&eacute;lulas RASSF1A-silenciado fueron tratadas con inhibidores de la DNA metiltransferasa e Histona deacetilasa, atascamiento de Sp1 y expresi&oacute;n de RASSF1A de la ocurri&oacute; de nuevo. En Resumen, observamos que desacetilaci&oacute;n de histona H3 y H3 lisina 9 trimetilaci&oacute;n ocurren en la misma ventana de tiempo como la inactivaci&oacute;n del gen y preceden a la metilaci&oacute;n del ADN. Nuestros datos sugieren que en las c&eacute;lulas epiteliales, inactivaci&oacute;n de histona dispare la metilaci&oacute;n del ADN de novo del promotor RASSF1A y este sistema puede servir como un modelo para la inactivaci&oacute;n de Isla CpG de genes supresores de tumores.

Inactivaci&oacute;n de cromatina precede de novo metilaci&oacute;n del ADN durante el silenciamiento epigen&eacute;tico progresiva del promotor RASSF1A.

&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x51E0;&#x79CD;&#x6162;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x53EF;&#x80FD;&#x90E8;&#x5206;&#x6765;&#x81EA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x7EC6;&#x5FAE;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7D2F;&#x79EF;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x65E0;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5B8C;&#x6210;&#x540E;&#xFF0C;&#x5176;&#x53D1;&#x751F;&#x7387;&#x7684;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x53D8;&#x5316;&#x5F88;&#x96BE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x5728;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x65B0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x68C0;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x6BD4;&#x5E38;&#x89C4;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x7684;&#x63AA;&#x65BD;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027; Q-VD-&#x5149;&#x5E74; (QVD) &#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x6291;&#x5236;&#x5242; 3 &#x5929;&#x4FDD;&#x7559;&#x4E86;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x542F;&#x52A8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6682;&#x505C;&#x4E0A;&#x534A;&#x573A;&#x7531;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; c &#x7684;&#x5185;&#x5BB9;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5065;&#x5EB7;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x91CD;&#x65B0;&#x5206;&#x53D1;&#x5230;&#x6B7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7531;&#x653E;&#x7EBF;&#x83CC;&#x7D20; D &#x8BF1;&#x5BFC;&#x548C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x7D2F;&#x79EF;&#x672C;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x5230; 3 &#x5929;&#x65F6;&#x95F4;&#x95F4;&#x9694;&#x65F6;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5E38;&#x89C4;&#x68C0;&#x6D4B;&#x66F4;&#x52A0;&#x654F;&#x611F;&#x8FD9;&#x79CD;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; c &#x91CA;&#x653E; &#xFF08;&#x51DD;&#x805A;&#xFF09; &#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6B63;&#x5E38;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x5F88;&#x5C11;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7ECF; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x6B64;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x53CD;&#x5E94;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x5DE7;&#x5999;&#x5730;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x4F46;&#x660E;&#x663E;&#x5F53;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x548C;&#x76AE;&#x80A4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x5165;&#x5371;&#x673A;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x5728;&#x5371;&#x673A;&#x671F;&#x95F4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x975E;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;

&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; c &#x91CA;&#x653E;&#x662F;&#x4F4E;&#x7EA7;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x63AA;&#x65BD;&#x3002;

Age-associated loss of tissue function and several chronic diseases may derive in part from the cumulative effects of subtle changes in the level of apoptotic cell death. Because apoptosis is rapid and undetectable once complete, small changes in its incidence are difficult to detect, even in well-controlled cell cultures. We describe a new apoptosis assay that provides greater sensitivity than conventional assays because it measures the accumulation of apoptotic cells. Human and mouse fibroblasts and human mammary epithelial cells that initiated apoptosis were preserved for 3 days by inhibiting caspase activity using the chemical inhibitor Q-VD-OPH (QVD). Cells suspended in the process of apoptosis were scored by immunostaining for cytochrome c, which redistributed from mitochondria in healthy cells to the cytoplasm in dying cells. This caspase-independent cytochrome c release (CICR) assay was more sensitive than several conventional assays when apoptosis was induced by actinomycin D, and detected cumulative background levels of apoptosis over a 3-day interval. Using this assay, we show that normal fibroblasts undergo very little apoptosis upon X-irradiation, indicating dominance of the senescence response in this cell type. Further, apoptosis increased subtly but measurably when human mammary epithelial and skin fibroblast cells entered crisis, indicating that cell death during crisis is largely non-apoptotic.

Caspase-independent cytochrome c release is a sensitive measure of low-level apoptosis in cell culture models.

Li&eacute; &agrave; l&#39;&acirc;ge perte de fonction de tissus et de plusieurs maladies chroniques peut-&ecirc;tre d&eacute;river en partie les effets cumulatifs des changements subtils dans le niveau de la mort cellulaire par apoptose. Parce que l&#39;apoptose est rapide et ind&eacute;tectable, une fois termin&eacute;, son incidence les petits changements sont difficiles &agrave; d&eacute;tecter, m&ecirc;me dans des cultures cellulaires bien contr&ocirc;l&eacute;s. Nous d&eacute;crivons une nouvelle m&eacute;thode de dosage de l&#39;apoptose qui offre une plus grande sensibilit&eacute; que les tests classiques, car il mesure l&#39;accumulation de cellules apoptotiques. L&#39;homme et les fibroblastes de souris et les cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines qui a initi&eacute; l&#39;apoptose ont &eacute;t&eacute; conserv&eacute;es pendant 3 jours en inhibant l&#39;activit&eacute; de caspase utilisant l&#39;inhibiteur chimique Q-VD-OPH (QVD). Suspendu dans le processus de l&#39;apoptose des cellules ont &eacute;t&eacute; marqu&eacute;s par immunomarquage pour le cytochrome c, qui a redistribu&eacute; des mitochondries dans les cellules saines dans le cytoplasme de cellules mourantes. Cette analyse de lib&eacute;ration c (CICR) de caspase-ind&eacute;pendante du cytochrome est plus sensible que plusieurs essais conventionnels lorsque l&#39;apoptose a &eacute;t&eacute; induite par l&#39;actinomycine D et d&eacute;tect&eacute; un niveau cumulatif de l&#39;apoptose au cours d&#39;un intervalle de 3 jours. En utilisant ce test, nous montrons que les fibroblastes normaux apoptose tr&egrave;s peu sur l&#39;irradiation aux rayons x, indiquant la position dominante de la r&eacute;ponse de la s&eacute;nescence chez ce type de cellule. En outre, apoptose accrue subtilement mais mesurablement quand cellules fibroblastiques humaines de cutan&eacute;es et &eacute;pith&eacute;liales mammaires entr&eacute; dans le crise, indiquant que la mort cellulaire au cours de la crise est en grande partie non-apoptotique.

Lib&eacute;ration du caspase-ind&eacute;pendante du cytochrome c est une mesure sensible d&#39;apoptose bas niveau des mod&egrave;les de culture de cellules.

Alters-assoziierte Verlust von Gewebe-Funktion und verschiedene chronische Krankheiten kann teilweise von der kumulativen Wirkungen der subtile Ver&auml;nderungen in der Ebene der Apoptotic Zellentod ableiten. Da Apoptose schnell und nachweisbar, wenn der Vorgang abgeschlossen ist, sind kleine &Auml;nderungen in die Inzidenz schwierig zu erkennen, selbst in gut kontrollierten Zellkulturen. Wir beschreiben eine neue Apoptose-Assay, der gr&ouml;&szlig;ere Sensitivit&auml;t als konventionelle Proben bietet, da er die Ansammlung von apoptotischen Zellen misst. Mensch und Maus-Fibroblasten und menschlichen Milch-Epithelzellen, die Apoptose initiiert wurden f&uuml;r 3 Tage erhalten, durch die Hemmung der Caspase-Aktivit&auml;t, die unter Verwendung der chemischen Hemmer Q-VD-OPH (QVD). Zellen, die in den Prozess der Apoptose ausgesetzt wurden von Paraffinschnitten erzielte f&uuml;r Cytochrom c, die von Mitochondrien in gesunden Zellen an Zytoplasma in den Sterbenden Zellen verteilt. Caspase-unabh&auml;ngige Cytochrom C Version (CICR) hervorrufen war empfindlicher als mehrere konventionelle Proben, als Apoptose von Actinomycin D induziert wurde und kumulative Hintergrundwerte von Apoptosis &uuml;ber einen 3-Tage-Intervall erkannt. Anhand dieser Probe zeigen wir, dass normale Fibroblasten sehr wenig Apoptose auf X-irradiation, unterziehen, die Dominanz der Seneszenz Antwort in dieser Zellentyp angibt. Dar&uuml;ber hinaus Apoptosis erh&ouml;ht subtil, aber messbar als menschliche Mamma epitheliale und Haut L929 eintrat Krise Zelltod w&auml;hrend der Krise weitgehend nicht apoptotische hinweist.

Caspase-unabh&auml;ngige Cytochrom C Version ist ein sensibler Ma&szlig; von Low-Level Apoptosis in Zelle Kultur Modelle.

Associate all&#39;et&agrave; perdita della funzione del tessuto e diverse malattie croniche potrebbe derivare in parte gli effetti cumulativi di sottili cambiamenti nel livello di morte cellulare apoptotica. Perch&eacute; l&#39;apoptosi &egrave; rapido e impercettibile una volta completo, piccoli cambiamenti nella sua incidenza sono difficili da rilevare, anche in colture cellulari ben controllati. Descriviamo un nuovo dosaggio di apoptosi che fornisce una maggiore sensibilit&agrave; rispetto ai dosaggi convenzionali perch&eacute; misura l&#39;accumulo delle cellule apoptotic. Umani e fibroblasti e cellule epiteliali mammarie umane che ha avviato l&#39;apoptosi sono state conservate per 3 giorni inibendo l&#39;attivit&agrave; di caspase utilizzando l&#39;inibitore chimico Q-VD-OPH (QVD). Le cellule sospese nel processo di apoptosi sono state segnate da immunocolorazione per il citocromo c, che ridistribuito da mitocondri nelle cellule sane nel citoplasma di cellule morenti. Questo dosaggio di caspase-indipendente citocromo c rilascio (CICR) era pi&ugrave; sensibile di diversi dosaggi convenzionali quando apoptosi &egrave; stata indotta da actinomicina D e rilevato livelli di fondo cumulativo di apoptosi in un intervallo di 3 giorni. Utilizzando questo dosaggio, mostriamo che fibroblasti normali apoptosi molto poco su di X-irradiation, che indica la posizione dominante della risposta senescenza in questo tipo di cella. Ulteriormente, il apoptosis aumentato sottilmente ma misurabile quando le cellule umane del fibroblasto epiteliali e pelle mammaria entrarono in crisi, che indica che la morte delle cellule durante la crisi &egrave; in gran parte non-apoptotic.

Versione del caspase-indipendente citocromo c &egrave; una misura sensibile di basso livello apoptosi in modelli di cultura cellulare.

&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6162;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5FAE;&#x5999;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x7D2F;&#x7A4D;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x304C;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x4E00;&#x5EA6;&#x306F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x7387;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x3082;&#x5BFE;&#x7167;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x304C;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; 3 &#x65E5;&#x9593;&#x5316;&#x5B66;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; Q VD OPH (QVD) &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x61F8;&#x514D;&#x75AB;&#x67D3;&#x8272;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x304B;&#x3089;&#x518D;&#x914D;&#x5E03;&#x6B7B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30B7;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0; c &#x306E;&#x30B4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CE;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; D &#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6642;&#x306B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x7D2F;&#x7A4D;&#x7684;&#x306A;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF; &#x30B0;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F; 3 &#x65E5;&#x9593;&#x9694;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3068;&#x3053;&#x306E;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30B7;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0; c &#x306E;&#x653E;&#x51FA; (&#x3068;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#xFF09; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x654F;&#x611F;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x6B63;&#x5E38;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B; x &#x7DDA;&#x3092;&#x7167;&#x5C04;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x8001;&#x5316;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3053;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3067;&#x306E;&#x512A;&#x4F4D;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5FAE;&#x5999;&#x306B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x8A08;&#x308A;&#x77E5;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x307B;&#x3069;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x76AE;&#x819A;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x5371;&#x6A5F;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E3B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x975E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x5371;&#x6A5F;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30B7;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0; c &#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB9CC;&#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC190;&#xC2E4; apoptotic &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xBB18;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xB204;&#xC801; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBD80; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Apoptosis &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC791;&#xC5C5;&#xC774; &#xC644;&#xB8CC; &#xB418; &#xBA74; &#xBC1C;&#xACAC;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC790;&#xC0AC;&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xB960;&#xC5D0; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; &#xAC10;&#xC9C0;, well-controlled &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xC5B4;&#xB835;&#xB2E4;. Apoptotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD070; &#xAC10;&#xB3C4; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; apoptosis &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xACFC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC8C;&#xC7AC; &#xBC0F; apoptosis&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791;&#xD55C; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xD654;&#xD559; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; Q VD OPH (QVD)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; caspase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; 3 &#xC77C; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCF4;&#xC874; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; apoptosis &#xACFC;&#xC815; &#xC911;&#xB2E8; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; c, &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FD;&#xC5B4;&#xAC00;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC7AC;&#xBC30;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; immunostaining&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB4DD;&#xC810; &#xD588;&#xB2E4;. Caspase &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; c &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; (CICR) &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC774; apoptosis &#xC545;&#xD2F0;&#xB178;&#xB9C8;&#xC774;&#xC2E0; D&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; 3 &#xC77C; &#xAC04;&#xACA9;&#xC73C;&#xB85C; apoptosis&#xC758; &#xB204;&#xC801; &#xBC30;&#xACBD; &#xB808;&#xBCA8; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB54C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C;. &#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC815;&#xC0C1; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; X-irradiation&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xC544;&#xC8FC; &#xC791;&#xC740; apoptosis &#xBC1B;&#xC744;&#xC774; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC9C0;&#xBC30;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xB610;&#xD55C;, apoptosis &#xBBF8;&#xBB18; &#xD558; &#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC7B4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC640; &#xD53C;&#xBD80; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC704;&#xAE30;, &#xC704;&#xAE30; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C; apoptotic &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC785;&#xB825;.

Caspase &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; c &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; apoptosis&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCC99;&#xB3C4; &#xC774;&#xB2E4;.

Asociado a la edad p&eacute;rdida de funci&oacute;n del tejido y varias enfermedades cr&oacute;nicas puede derivar en parte a los efectos acumulativos de cambios sutiles en el nivel de muerte celular apopt&oacute;tica. Porque la apoptosis es indetectable una vez completa y r&aacute;pida, peque&ntilde;os cambios en su incidencia son dif&iacute;ciles de detectar, incluso en cultivos celulares bien controlados. Describimos un nuevo ensayo de apoptosis que proporciona una mayor sensibilidad que ensayos convencionales porque mide la acumulaci&oacute;n de c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas. Humanos y fibroblastos de rat&oacute;n y c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas que inici&oacute; la apoptosis se conservaron durante 3 d&iacute;as al inhibir la actividad de la caspasa usando el inhibidor qu&iacute;mico Q-VD-OPH (QVD). Suspendido en el proceso de apoptosis de c&eacute;lulas fueron marcadas por la inmunotinci&oacute;n para citocromo c, que redistribuye de mitocondrias en las c&eacute;lulas sanas al citoplasma en las c&eacute;lulas moribundas. Este ensayo de caspasa-independiente del citocromo c liberaci&oacute;n (CICR) era m&aacute;s sensible que diversos estudios convencionales cuando apoptosis fue inducida por Actinomicina D y detecta los niveles de fondo acumulativo de la apoptosis en un intervalo de 3 d&iacute;as. Usando este an&aacute;lisis, demostramos que los fibroblastos normales experimentan apoptosis muy poco a X-irradiation, indicando el predominio de la respuesta de la senescencia en este tipo celular. Adem&aacute;s, apoptosis aument&oacute; sutilmente pero mensurable cuando las c&eacute;lulas fibroblastos epiteliales y piel mamario humano entraron en crisis, indicando que la muerte celular durante crisis es en gran parte no-apoptotic.

Caspase-independiente del citocromo c es una medida sensible de bajo nivel apoptosis en modelos de celulares de cultura.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HMEC) &#xCCB4; &#xC678; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD88;&#xBA78; &#xD558; &#xAC8C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; 1 &#xCC28; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xD589; &#xB450; well-characterized &#xC720;&#xC804;&#xACFC; &#xD6C4; &#xC131;&#xC801;&#xC778; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5;. &#xC720;&#xD55C; &#xC218;&#xBA85; HMEC &#xADF9;&#xBCF5; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; &#xB178;&#xD654; Rb &#xC911;&#xC7AC; &#xC7A5;&#xBCBD; (&#xC2A4;&#xD14C;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C;, telomere &#xAE38;&#xC774; &#xC885;&#xC18D;, &#xBC30;&#xB9AC;&#xC5B4; (agonescence &#xB610;&#xB294; &#xC704;&#xAE30;, p53 &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;). &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB178;&#xD654; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558;&#xB294; HMEC&#xB294; &#xBD88;&#xD6C4;&#xC758; &#xBA85;&#xC791;.

&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558; &#xACE0; &#xBD88;&#xD6C4;&#xC758; &#xBA85;&#xC791;&#xC774; &#xB420; transcriptional &#xBCC0;&#xD654; &#xC720;&#xBC29;&#xC554;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas (juego) superan dos barreras gen&eacute;ticas y epigen&eacute;ticas bien caracterizadas como que el progreso de c&eacute;lulas primarias a l&iacute;neas de celulares totalmente inmortalizadas in vitro. Duraci&oacute;n limitada puede superar una barrera de Rb-mediada la senescencia asociada a estr&eacute;s (estasis) y un estricto, dependiente de la longitud de los tel&oacute;meros, barrera (agonescence o crisis, dependiendo del estado de p53). PUEDE que han superado la segunda barrera de senescencia se inmortaliz&oacute;.

Cambios transcripcionales asociados con c&aacute;ncer de mama se presentan como c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas normales superar las barreras de la senescencia y ser inmortalizadas.

&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (HMEC) &#x514B;&#x670D;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x4EEC;&#x719F;&#x77E5;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x548C;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x5982;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x539F;&#x7535;&#x6C60;&#x8FDB;&#x5C55;&#x5230;&#x5B8C;&#x5168;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x6709;&#x9650;&#x5BFF;&#x547D; HMEC &#x514B;&#x670D; Rb &#x4ECB;&#x5BFC;&#x5E94;&#x6FC0;&#x76F8;&#x5173;&#x8870;&#x8001;&#x5C4F;&#x969C; (&#x7600;)&#xFF0C;&#x548C;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#xFF0C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#xFF0C;&#x5C4F;&#x969C; &#xFF08;agonescence &#x6216;&#x5371;&#x673A;&#xFF0C;&#x6839;&#x636E; p53 &#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#xFF09;&#x3002;&#x514B;&#x670D;&#x4E86;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x8870;&#x8001;&#x5C4F;&#x969C;&#x7684; HMEC &#x88AB;&#x6C38;&#x751F;&#x3002;

&#x4E0E;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x53D8;&#x5316;&#x53D1;&#x751F;&#x5982;&#x6B63;&#x5E38;&#x4EBA;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x5173;&#x5361;&#x548C;&#x53D8;&#x5F97;&#x6C38;&#x751F;&#x3002;

Human mammary epithelial cells (HMEC) overcome two well-characterized genetic and epigenetic barriers as they progress from primary cells to fully immortalized cell lines in vitro. Finite lifespan HMEC overcome an Rb-mediated stress-associated senescence barrier (stasis), and a stringent, telomere-length dependent, barrier (agonescence or crisis, depending on p53 status). HMEC that have overcome the second senescence barrier are immortalized.

Transcriptional changes associated with breast cancer occur as normal human mammary epithelial cells overcome senescence barriers and become immortalized.

Les cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines (CEMH) surmonter deux barri&egrave;res g&eacute;n&eacute;tiques et &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques bien caract&eacute;ris&eacute;s en passant les cellules primaires de lign&eacute;es cellulaires immortalis&eacute;es enti&egrave;rement in vitro. Dur&eacute;e de vie limit&eacute;e CEMH surmonter une barri&egrave;re Rb-mediated associ&eacute;es aux stress s&eacute;nescence (stase) et une stricte, d&eacute;pendant de la longueur des t&eacute;lom&egrave;res, barri&egrave;re (agonescence ou crise, selon le statut p53). CEMH qui ont surmont&eacute; la deuxi&egrave;me barri&egrave;re de s&eacute;nescence sont immortalis&eacute;es.

Transcriptional modifications li&eacute;es au cancer du sein se produisent lorsque les cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines normales et surmonter les obstacles de la s&eacute;nescence et devient immortalis&eacute;s.

Menschliche Milch-Epithelzellen (HMEC) zwei gut charakterisierten genetischen und epigenetischen Hindernisse &uuml;berwinden, wie sie die Fortschritte von Prim&auml;rzellen, vollst&auml;ndig aufgrund fortgesetzter Zellteilung in-vitro. Endliche Lebensdauer HMEC zu &uuml;berwinden, eine Rb-vermittelte Stress-assoziierter Seneszenz-Barriere (starre), und eine strenge, Telomer-L&auml;nge abh&auml;ngig, Barrier (Agonescence oder Krise, abh&auml;ngig von p53-Status). HMEC, die die zweite Seneszenz-Barriere &uuml;berwunden haben verewigt sind.

Transkriptionelle &Auml;nderungen im Zusammenhang mit Brustkrebs auftreten, wie normale menschliche Milch-Epithelzellen Seneszenz Hindernisse &uuml;berwinden und unsterblich geworden.

Cellule epiteliali mammarie umane (HMEC) superare due barriere genetiche ed epigenetiche ben caratterizzate come progrediscono da celle primarie di linee cellulari completamente immortalata in vitro. Durata finita HMEC superare una barriera di Rb-mediata senescenza associati allo stress (stasi) e una rigorosa, telomero-lunghezza dipendente, barriera (agonescence o crisi, a seconda dello stato di p53). HMEC che hanno superato la seconda barriera di senescenza sono immortalati.

Transcriptional cambiamenti associati con il cancro al seno si verificano come normali cellule epiteliali mammarie umane superare barriere di senescenza e diventano immortalate.

&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E; in vitro &#x306B;&#x9032;&#x6357;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (HMEC) 2 &#x3064;&#x306E;&#x3088;&#x304F;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6709;&#x9650;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D; HMEC &#x514B;&#x670D; Rb &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x95A2;&#x9023;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x969C;&#x58C1; &#xFF08;&#x505C;&#x6EDE;&#xFF09; &#x3068;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x3001;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2; &#xFF08;agonescence &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5371;&#x6A5F;&#x3001;p53 &#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#xFF09;&#x3002;2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; HMEC &#x3092;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6B63;&#x5E38;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3057;&#x3001;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x4E73;&#x764C;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EBA;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (HMEC) &#x4F1A;&#x9047;&#x5230;&#x4E24;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x65E0;&#x9650;&#x589E;&#x957F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x91CD;&#x5173;&#x5361;&#xFF0C;&#x6700;&#x521D;&#x88AB;&#x79F0;&#x4E3A;&#x9009;&#x62E9;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; p16(INK4A) &#x635F;&#x5931;&#x514B;&#x670D;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C; p16-&#xFF0C;p53 + post-selection HMEC &#x9047;&#x5230;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; agonescence&#xFF0C;&#x4F24;&#x52BF;&#x4E25;&#x91CD;&#x7F29;&#x77ED;&#x7AEF;&#x7C92;&#x548C;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7578;&#x53D8;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x662F;&#x51FA;&#x5E2D; agonescence&#xFF0C;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x4FDD;&#x7559;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A; p53 &#x529F;&#x80FD;&#x7684; post-selection HMEC &#x5E9F;&#x9664;&#x53EF;&#x706D;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x68C0;&#x67E5;&#x70B9;&#x548C;&#x5927;&#x591A;&#x662F;&#x53EF;&#x884C; agonescence &#x5C4F;&#x969C;&#x53D8;&#x4E3A;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x5371;&#x673A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x5C4F;&#x969C;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;p53 &#x5931;&#x6D3B;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD; HMEC &#x80FD;&#x591F;&#x514B;&#x670D;&#x7B2C;&#x4E00;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; agonescence &#x548C;&#x5371;&#x673A;&#x662F;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6269;&#x6563;&#x5C4F;&#x969C;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684; HMEC &#x8870;&#x8001;&#x969C;&#x788D;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x969C;&#x788D;&#x662F;&#x4ECB;&#x5BFC; Rb &#x548C;&#x4E3B;&#x8981;&#x6216;&#x5B8C;&#x5168;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x969C;&#x788D;&#x662F;&#x73B0;&#x5728;&#x88AB;&#x79F0;&#x4E3A;&#x7600;&#x3001; &#x5E94;&#x6FC0;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x969C;&#x788D; &#xFF08;agonescence &#x6216;&#x5371;&#x673A;&#xFF09; &#x7ED3;&#x679C;&#x4ECE;&#x6B63;&#x5728;&#x8FDB;&#x884C;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x4FB5;&#x8680;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5371;&#x91CD;&#x77ED;&#x7AEF;&#x7C92;&#x548C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x3002;

&#x4EBA;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D; p53 &#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x706D;&#x6D3B;&#x53D8;&#x6210;&#x5371;&#x673A;&#x4ECE; agonescence &#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x8870;&#x8001;&#x5C4F;&#x969C;&#x3002;

Cultured human mammary epithelial cells (HMEC) encounter two distinct barriers to indefinite growth. The first barrier, originally termed selection, can be overcome through loss of expression of the cyclin-dependent kinase inhibitor p16(INK4A). The resultant p16-, p53+ post-selection HMEC encounter a second barrier, termed agonescence, associated with critically shortened telomeres and widespread chromosomal aberrations. Although some cell death is present at agonescence, the majority of the population retains long-term viability. We now show that abrogation of p53 function in post-selection HMEC inactivates cell cycle checkpoints and changes the mostly viable agonescence barrier into a crisis-like barrier with massive cell death. In contrast, inactivation of p53 does not affect the ability of HMEC to overcome the first barrier. These data indicate that agonescence and crisis represent two different forms of a telomere-length dependent proliferation barrier. Altogether, our data suggest a modified model of HMEC senescence barriers. We propose that the first barrier is Rb-mediated and largely or completely independent of telomere length. This barrier is now being termed stasis, for stress-associated senescence. The second barrier (agonescence or crisis) results from ongoing telomere erosion leading to critically short telomeres and telomere dysfunction.

Inactivation of p53 function in cultured human mammary epithelial cells turns the telomere-length dependent senescence barrier from agonescence into crisis.

Les cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines (CEMH) rencontrent deux obstacles distincts &agrave; croissance ind&eacute;termin&eacute;e. La premi&egrave;re barri&egrave;re, initialement appel&eacute; s&eacute;lection, peut &ecirc;tre surmont&eacute;e par la perte d&#39;expression de la p16(INK4A) inhibiteur de kinase cycline-d&eacute;pendante. La p16-qui en r&eacute;sultent, p53 + post-s&eacute;lection CEMH rencontrer une deuxi&egrave;me barri&egrave;re, appel&eacute;e agonescence, associ&eacute;e aux t&eacute;lom&egrave;res raccourcis par la critique et les aberrations chromosomiques g&eacute;n&eacute;ralis&eacute;es. Bien que la mort de certaines cellules est pr&eacute;sente &agrave; agonescence, la majorit&eacute; de la population conserve la viabilit&eacute; &agrave; long terme. Maintenant, nous montrons que l&#39;abrogation de la fonction de p53 dans les CEMH post-s&eacute;lection inactive les points de contr&ocirc;le de cycle cellulaire et la barri&egrave;re agonescence viable pour la plupart transforme en une barri&egrave;re de crise-comme avec la mort massive de cellules. En revanche, l&#39;inactivation de p53 n&#39;affecte pas la capacit&eacute; de CEMH &agrave; surmonter la premi&egrave;re barri&egrave;re. Ces donn&eacute;es indiquent que l&#39;agonescence et la crise repr&eacute;sentent deux formes diff&eacute;rentes d&#39;une barri&egrave;re de prolif&eacute;ration d&eacute;pendant-la longueur des t&eacute;lom&egrave;res. Au total, nos donn&eacute;es sugg&egrave;rent un mod&egrave;le modifi&eacute; de barri&egrave;res de s&eacute;nescence CEMH. Nous proposons que la premi&egrave;re barri&egrave;re est induite par le Rb et largement ou totalement ind&eacute;pendante de la longueur des t&eacute;lom&egrave;res. Cette barri&egrave;re est maintenant &eacute;tant qualifi&eacute;e de stase, de stress associ&eacute;s &agrave; la s&eacute;nescence. La deuxi&egrave;me barri&egrave;re (agonescence ou crise) r&eacute;sulte de l&#39;&eacute;rosion des t&eacute;lom&egrave;res en cours menant aux t&eacute;lom&egrave;res critiquement courts et dysfonction des t&eacute;lom&egrave;res.

Inactivation de la fonction de p53 dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines cultiv&eacute;es transforme la barri&egrave;re la longueur des t&eacute;lom&egrave;res de s&eacute;nescence d&eacute;pendant d&#39;agonescence en crise.

Kultivierte menschliche Milch-Epithelzellen (HMEC) sto&szlig;en zwei unterschiedliche Hindernisse f&uuml;r unbestimmte Wachstum. Die erste Barriere, urspr&uuml;nglich genannt Auswahl, kann durch Verlust des Ausdrucks von der cyclin-abh&auml;ngige Kinase Inhibitor p16(INK4A) &uuml;berwunden werden. Die resultierende p16-, p53 + post-selection HMEC sto&szlig;en eine zweite Barriere, genannt Agonescence, kritisch verk&uuml;rzte Telomere und weit verbreitete Chromosomenaberrationen zugeordnet. Obwohl einige Zelltod bei Agonescence vorhanden ist, beh&auml;lt die Mehrheit der Bev&ouml;lkerung langfristige Lebensf&auml;higkeit. Wir zeigen nun, dass die Aufhebung der p53-Funktion in post-selection HMEC inaktiviert Zellzyklus Checkpoints und &auml;ndert die meist lebensf&auml;higen Agonescence-Barriere gegen eine krisen&auml;hnliche Barriere mit massiven Zelltod. Inaktivierung von p53 ber&uuml;hrt dagegen nicht die F&auml;higkeit der HMEC, die erste Barriere zu &uuml;berwinden. Diese Daten zeigen, dass Agonescence und Krise zwei verschiedene Formen der Telomer-L&auml;nge abh&auml;ngige Verbreitung Barriere darstellen. Insgesamt deuten unsere Daten eine ge&auml;nderte Modell HMEC Seneszenz Barrieren. Wir schlagen vor, dass die erste Barriere Rb-vermittelte und weitgehend oder vollst&auml;ndig unabh&auml;ngig von der L&auml;nge der Telomere ist. Diese Barriere ist nun starre, f&uuml;r Stress-assoziierter Altern genannt wird. Das zweite Hindernis (Agonescence oder Krise) Ergebnisse aus laufenden Telomer-Erosion zu kritisch kurze Telomere und Telomer-Dysfunktion f&uuml;hrt.

Inaktivierung von p53-Funktion in kultivierten menschlichen Milch-Epithelzellen, Krise die Telomer-L&auml;nge abh&auml;ngige Seneszenz Barriere aus Agonescence verwandelt.

Colture umane cellule epiteliali mammarie (HMEC) incontrano due distinte barriere alla crescita indefinita. La prima barriera, originariamente chiamato selezione, pu&ograve; essere superata attraverso la perdita di espressione di p16(INK4A) di inibitore della chinasi ciclina-dipendente. Il risultante p16-, p53 + post-selection HMEC incontrano una seconda barriera, definita agonescence, associati con telomeri criticamente accorciati e diffuse aberrazioni cromosomiche. Sebbene alcuni morte cellulare &egrave; presente alla agonescence, la maggior parte della popolazione conserva la redditivit&agrave; a lungo termine. Mostriamo ora che abrogazione della funzione di p53 in post-selection HMEC inattiva i checkpoint del ciclo cellulare e la barriera di agonescence per lo pi&ugrave; vitali si trasforma in una crisi-come barriera con morte cellulare massiccia. Al contrario, inattivazione di p53 non pregiudica la possibilit&agrave; di superare la prima barriera HMEC. Questi dati indicano che agonescence e crisi rappresentano due forme diverse di una barriera di proliferazione dipendente telomeri di lunghezza. Complessivamente, i nostri dati suggeriscono un modello modificato di barriere HMEC senescenza. Proponiamo che la prima barriera &egrave; in gran parte o completamente indipendente della lunghezza dei telomeri e Rb-mediata. Questa barriera &egrave; ora essere definita stasi, per senescenza associati allo stress. La seconda barriera (agonescence o crisi) deriva dall&#39;erosione telomeri in corso portando a telomeri criticamente breve e disfunzione telomeri.

Disattivazione della funzione di p53 nelle cellule epiteliali mammarie umane coltivate si trasforma la barriera di senescenza dipendente telomero-lunghezza da agonescence in crisi.

&#x57F9;&#x990A;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (HMEC) 2 &#x3064;&#x306E;&#x660E;&#x77AD;&#x306A;&#x969C;&#x58C1;&#x4E0D;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x906D;&#x9047;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; p16(INK4A) &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3082;&#x3068;&#x3082;&#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x3058;&#x308B; p16-&#x3001;p53 + &#x4E8B;&#x5F8C; HMEC &#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x77ED;&#x7E2E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x3068;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7570;&#x5E38;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B; agonescence &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x7B2C; 2 &#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B; agonescence &#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x5B58;&#x7D9A;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ECA;&#x306E;&#x4E8B;&#x5F8C; HMEC &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; p53 &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5EC3;&#x6B62;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5371;&#x6A5F;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x969C;&#x58C1;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A; agonescence &#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316; p53 &#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B; HMEC &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;agonescence &#x3068;&#x5371;&#x6A5F;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5897;&#x6B96;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F; HMEC &#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x304C; Rb &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x4E3B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.&#x3053;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x306F;&#x3001;&#x3046;&#x3063;&#x6EDE;&#x8001;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x4ECA;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7B2C; 2 &#x306E;&#x969C;&#x5BB3; &#xFF08;agonescence &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5371;&#x6A5F;&#xFF09; &#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x77ED;&#x3044;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x4FB5;&#x98DF;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; p53 &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x8001;&#x5316;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2; agonescence &#x304B;&#x3089;&#x5371;&#x6A5F;&#x306B;&#x5909;&#x308F;&#x308B;&#x3002;

&#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HMEC) &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xBB34;&#xAE30;&#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xF06C; &#xC885;&#xC18D; kinase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; p16(INK4A) &#xC2DD;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC6D0;&#xB798; &#xC120;&#xD0DD; &#xB418; &#xB098; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; p16-, p53 + post-selection HMEC &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC7A5;&#xBCBD;, agonescence, &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xCD95;&#xB41C; telomeres &#xBC0F; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xCC29;&#xC624; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418; &#xB098; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBD80; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC740; agonescence, &#xBE44;&#xB85D; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; post-selection HMEC&#xC5D0;&#xC11C; p53 &#xAE30;&#xB2A5; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810; &#xC0DD;&#xAE34;&#xB2E4; &#xACE0; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC704;&#xAE30; &#xAC19;&#xC740; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; agonescence &#xBC30;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, HMEC&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5;&#xD560; &#xC218; p53&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; agonescence&#xC640; &#xC704;&#xAE30; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xC885;&#xC18D; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC30;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB450;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; HMEC &#xB178;&#xD654; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC758; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xC548;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C;&#xC740; Rb &#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; telomere &#xAE38;&#xC774;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xB610;&#xB294; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC740; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2A4;&#xD14C;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBD88;&#xB9AC; &#xB418; &#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC7A5;&#xBCBD; (agonescence &#xB610;&#xB294; &#xC704;&#xAE30;) &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9E7;&#xC740; telomeres &#xBC0F; telomere &#xBD80;&#xC804; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; telomere &#xCE68;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB798;&#xD55C; &#xB2E4;.

&#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; p53 &#xAE30;&#xB2A5; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC704;&#xAE30;&#xB85C; agonescence&#xC5D0;&#xC11C; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xC885;&#xC18D; &#xB178;&#xD654; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC744; &#xC124;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas cultivadas (juego) encuentran dos distintas barreras al crecimiento indefinido. La primera barrera, originalmente denominado selecci&oacute;n, puede ser superada mediante la p&eacute;rdida de expresi&oacute;n de la p16(INK4A) de inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina. La resultante p16-, p53 + post-selection puede encontrar una segunda barrera, denominada agonescence, asociado con los tel&oacute;meros cr&iacute;ticamente acortados y las aberraciones cromos&oacute;micas generalizadas. Aunque algunos muerte celular est&aacute; presente en agonescence, la mayor&iacute;a de la poblaci&oacute;n mantiene la viabilidad a largo plazo. Ahora demostramos que la derogaci&oacute;n de la funci&oacute;n de p53 en post-selection puede inactiva puestos de control del ciclo celular y la barrera de agonescence sobre todo viable transforma en una barrera de la crisis-como con muerte celular masiva. En contraste, la inactivaci&oacute;n de p53 no afecta la capacidad de juego para superar la primera barrera. Estos datos indican que la agonescence y crisis representan dos formas diferentes de una barrera de proliferaci&oacute;n dependiente de la longitud de los tel&oacute;meros. En conjunto, nuestros datos sugieren un modelo modificado de barreras de senescencia de juego. Proponemos que la primera barrera es en gran parte o totalmente independiente de la longitud de los tel&oacute;meros y Rb-mediada. Esta barrera se ahora se denomina estasis de senescencia asociada a estr&eacute;s. La segunda barrera (agonescence o crisis) el resultado de la erosi&oacute;n continua tel&oacute;mero tel&oacute;meros cr&iacute;ticamente cortos y disfunci&oacute;n del tel&oacute;mero.

Inactivaci&oacute;n de la funci&oacute;n de p53 en c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas cultivadas convierte la barrera de senescencia dependiente de la longitud telom&eacute;rica de agonescence en crisis.

&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x65F6;&#x673A;&#x548C;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x8981;&#x5236;&#x5B9A;&#x671F;&#x95F4;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8868;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x6A21;&#x5F0F;&#x8F6C;&#x578B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (HMEC) &#x6587;&#x5316;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x3002;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E0D;&#x673D;&#x548C;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x517B;&#x6B96;&#x6709;&#x9650;&#x5BFF;&#x547D; HMEC &#x5FC5;&#x987B;&#x514B;&#x670D;&#x4E24;&#x4E2A;&#x622A;&#x7136;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x5C4F;&#x969C;&#x3001; &#x7600;&#xFF0C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; ngx6 &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x662F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x514B;&#x670D;&#x3002;HMEC &#x9003;&#x8131;&#x7600;&#x5E76;&#x7EE7;&#x7EED;&#x6269;&#x6563;&#x4E4B;&#x524D;&#x9047;&#x5230;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x66F4;&#x4E25;&#x683C;&#x6269;&#x6563;&#x5C4F;&#x969C;&#x3001; &#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7AEF;&#x7C92;&#x51CF;&#x5458;&#x6210;&#x4E3A; genomically &#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x83B7;&#x5F97;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7F55;&#x89C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x9003;&#x8131;&#x8FD9;&#x4E00;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x5F97;&#x9053;&#x6210;&#x4ED9;&#xFF0C;&#x548C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x53D1;&#x5C55;&#x6076;&#x6027;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684; HMEC &#x8F6C;&#x6362;&#x4ECE;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BFF;&#x547D;&#xFF0C;&#x6076;&#x53D8;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x5F02;&#x5E38; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x53D8;&#x5316;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x8F6C;&#x578B;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x6309;&#x90E8;&#x5C31;&#x73ED;&#x5730;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x6B65;&#x514B;&#x670D;&#x7600;&#xFF0C;&#x6070;&#x9022;&#x548C;&#x6570;&#x4EE5;&#x767E;&#x8BA1;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#xFF0C;&#x5177;&#x4F53;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5982;&#x4F55;&#x514B;&#x670D;&#x7600;&#x662F;&#x5F88;&#x5C11;&#x6709;&#x4EBA;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6B65;&#x6B63;&#x503C;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x548C;&#x6570;&#x4EE5;&#x767E;&#x8BA1;&#x7684;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x9014;&#x5F84;&#x65E0;&#x8BBA;&#x5176;&#x4ED6; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x8FD9;&#x4E9B; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x6539;&#x53D8;&#x5728;&#x6076;&#x6027;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4E5F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x627E;&#x5230;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5927;&#x578B;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x91CD;&#x6784;&#x7684;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6682;&#x65F6;&#x94FE;&#x63A5; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x514B;&#x670D;&#x969C;&#x788D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x6700;&#x65E9;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x95F4;&#x94F6;&#x884C;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x6807;&#x5FD7;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x76CA;&#x4E8E;&#x4E73;&#x623F;&#x764C;&#x7684;&#x98CE;&#x9669;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;

&#x9010;&#x6B65;&#x7684; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x53D8;&#x5316;&#x76F8;&#x8FDE;&#x9003;&#x907F;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x58C1;&#x5792;&#x548C;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x3002;

The timing and progression of DNA methylation changes during carcinogenesis are not completely understood. To develop a timeline of aberrant DNA methylation events during malignant transformation, we analyzed genome-wide DNA methylation patterns in an isogenic human mammary epithelial cell (HMEC) culture model of transformation. To acquire immortality and malignancy, the cultured finite lifespan HMEC must overcome two distinct proliferation barriers. The first barrier, stasis, is mediated by the retinoblastoma protein and can be overcome by loss of p16(INK4A) expression. HMEC that escape stasis and continue to proliferate become genomically unstable before encountering a second more stringent proliferation barrier, telomere dysfunction due to telomere attrition. Rare cells that acquire telomerase expression may escape this barrier, become immortal, and develop further malignant properties. Our analysis of HMEC transitioning from finite lifespan to malignantly transformed showed that aberrant DNA methylation changes occur in a stepwise fashion early in the transformation process. The first aberrant DNA methylation step coincides with overcoming stasis, and results in few to hundreds of changes, depending on how stasis was overcome. A second step coincides with immortalization and results in hundreds of additional DNA methylation changes regardless of the immortalization pathway. A majority of these DNA methylation changes are also found in malignant breast cancer cells. These results show that large-scale epigenetic remodeling occurs in the earliest steps of mammary carcinogenesis, temporally links DNA methylation changes and overcoming cellular proliferation barriers, and provides a bank of potential epigenetic biomarkers that may prove useful in breast cancer risk assessment.

Stepwise DNA methylation changes are linked to escape from defined proliferation barriers and mammary epithelial cell immortalization.

Le calendrier et la progression des changements de m&eacute;thylation de l&#39;ADN au cours de la canc&eacute;rogen&egrave;se ne sont pas compl&egrave;tement &eacute;lucid&eacute;es. Pour d&eacute;velopper une chronologie des &eacute;v&eacute;nements de m&eacute;thylation de l&#39;ADN aberrants au cours de la transformation maligne, nous avons analys&eacute; les profils de m&eacute;thylation de l&#39;ADN de g&eacute;nome dans un mod&egrave;le de culture isog&eacute;niques cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines (CEMH) de transformation. Pour acqu&eacute;rir l&#39;immortalit&eacute; et la malignit&eacute;, la dur&eacute;e de vie limit&eacute;e cultiv&eacute;e CEMH doit surmonter deux obstacles de prolif&eacute;ration distinctes. La premi&egrave;re barri&egrave;re, stase, est m&eacute;di&eacute;e par la prot&eacute;ine du r&eacute;tinoblastome et peuvent &ecirc;tre surmont&eacute;s par la perte d&#39;expression p16(INK4A). CEMH &eacute;chapper la stase et continuer &agrave; prolif&eacute;rer devenir g&eacute;nomiquement instable avant de rencontrer une deuxi&egrave;me barri&egrave;re de prolif&eacute;ration plus stricte, la dysfonction de t&eacute;lom&egrave;res en raison de l&#39;attrition des t&eacute;lom&egrave;res. Rares cellules qui acqui&egrave;rent l&#39;expression de la t&eacute;lom&eacute;rase peuvent &eacute;chapper &agrave; cette barri&egrave;re, devenir immortels et &eacute;laborer d&#39;autres propri&eacute;t&eacute;s malignes. Notre analyse des HMEC transition d&#39;une dur&eacute;e de vie limit&eacute;e &agrave; accusent transform&eacute; a montr&eacute; que les changements aberrants de m&eacute;thylation de l&#39;ADN se produisent de fa&ccedil;on progressive t&ocirc;t dans le processus de transformation. La premi&egrave;re &eacute;tape de la m&eacute;thylation de l&#39;ADN aberrante co&iuml;ncide avec surmontant la stase et entra&icirc;ne peu &agrave; des centaines de modifications, selon comment la stase a &eacute;t&eacute; surmont&eacute;. Une deuxi&egrave;me &eacute;tape co&iuml;ncide avec l&#39;immortalisation et se traduit par des centaines de modifications suppl&eacute;mentaires de m&eacute;thylation d&#39;ADN quelle que soit la voie d&#39;immortalisation. Une majorit&eacute; de ces changements de m&eacute;thylation de l&#39;ADN sont &eacute;galement trouv&eacute; dans les cellules canc&eacute;reuses mammaires malignes. Ces r&eacute;sultats montrent que le remodelage &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique &agrave; grande &eacute;chelle se produit dans les premi&egrave;res &eacute;tapes de la carcinogen&egrave;se mammaire, dans le temps les changements de m&eacute;thylation de l&#39;ADN liens et surmonter les obstacles de la prolif&eacute;ration cellulaire et fournit une banque de biomarqueurs &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques potentiels qui peuvent s&#39;av&eacute;rer utiles dans l&#39;&eacute;valuation de risque pour le cancer du sein.

Des changements de m&eacute;thylation de l&#39;ADN par &eacute;tapes sont li&eacute;es pour &eacute;chapper &agrave; la prolif&eacute;ration d&eacute;fini barri&egrave;res et immortalisation des cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires.

Der Zeitpunkt und die Progression der DNA-Methylierung &Auml;nderungen w&auml;hrend der Karzinogenese werden nicht v&ouml;llig verstanden. Um einen Zeitplan f&uuml;r die abweichenden DNA-Methylierungs-Veranstaltungen w&auml;hrend der malignen Transformation zu entwickeln, analysierten wir genomweiten DNA-Methylierungsmuster in einem isogene humane Milch-Epithelzellen (HMEC)-Kultur-Modell der Transformation. Um Unsterblichkeit und B&ouml;sartigkeit zu erlangen, muss die kultivierte endliche Lebensdauer HMEC zwei unterschiedliche Verbreitung Barrieren &uuml;berwinden. Die erste Barriere, die starre, ist durch das Retinoblastom-Protein vermittelt und durch den Verlust des p16(INK4A) Ausdrucks &uuml;berwunden werden k&ouml;nnen. HMEC, die starre zu entkommen und sich vermehren weiterhin instabil genomically vor der Begegnung mit einer zweiten strengere Verbreitung-Barriere, die Telomer-Dysfunktion aufgrund Telomer-Abrieb. Seltene Zellen, die Telomerase Ausdruck erwerben k&ouml;nnen diese Barriere zu entkommen, unsterblich zu werden und weitere b&ouml;sartige Eigenschaften entwickeln. Unsere Analyse der HMEC &Uuml;bergang von endlichen Lebensdauer b&ouml;sartig transformiert hat gezeigt, dass aberrante DNA Methylierung &Auml;nderungen schrittweise Weise fr&uuml;h im Transformationsprozess auftreten. Aberrant DNA Methylierung zun&auml;chst deckt sich mit der &Uuml;berwindung des Erstarrens und f&uuml;hrt nur wenige Hunderte von &Auml;nderungen, je nachdem, wie starre &uuml;berwunden wurde. In einem zweiter Schritt f&auml;llt mit Immortalization und Hunderte von zus&auml;tzlichen DNA-Methylierung &Auml;nderungen unabh&auml;ngig von der Immortalization Weg f&uuml;hrt. Eine Mehrheit dieser DNA-Methylierungs-&Auml;nderungen werden auch in b&ouml;sartigen Brustkrebs-Zellen gefunden. Diese Ergebnisse zeigen, dass gro&szlig; angelegte epigenetische Umbau tritt in den ersten Schritten der Milch-Karzinogenese, zeitlich Verkn&uuml;pfungen DNA Methylierung &Auml;nderungen und zellul&auml;re Vermehrung Sprachbarrieren &uuml;berwinden und bietet eine Bank potenzielle epigenetische Biomarker, die in der Brust-Krebs-Risikobewertung n&uuml;tzlich erweisen k&ouml;nnen.

Schrittweise Ver&auml;nderungen der DNA-Methylierung sind miteinander verkn&uuml;pft, um definierte Verbreitung Barrieren und Milch-Epithelzellen Immortalization zu entfliehen.

La tempistica e progressione di cambiamenti di metilazione del DNA durante la carcinogenesi non sono completamente chiari. Per sviluppare una sequenza temporale degli eventi di metilazione aberrante del DNA durante la trasformazione maligna, abbiamo analizzato il pattern di metilazione del DNA genome-wide in un modello di cultura isogeni cellule epiteliali mammarie umane (HMEC) della trasformazione. Per acquisire l&#39;immortalit&agrave; e la malignit&agrave;, la colta durata finita HMEC dovr&agrave; superare due barriere di proliferazione distinti. La prima barriera, stasi, &egrave; mediato dalla proteina retinoblastoma e pu&ograve; essere superato dalla perdita dell&#39;espressione p16(INK4A). HMEC che fuggire stasi e continuano a proliferare genomically instabile prima di incontrare una seconda barriera di proliferazione pi&ugrave; rigorosa, telomeri disfunzione a causa di attrito telomeri. Rare cellule che acquisiscono espressione della telomerasi possono sfuggire questa barriera, diventare immortale e sviluppare ulteriormente le propriet&agrave; maligne. La nostra analisi di HMEC transizione dalla vita finita a maligno trasformato ha dimostrato che cambiamenti di metilazione aberrante del DNA si verificano in modo graduale all&#39;inizio del processo di trasformazione. Il primo passo di metilazione del DNA aberrante coincide con il superamento di stasi e si traduce in poche centinaia di modifiche, a seconda di come &egrave; stato superare la stasi. Un secondo passo coincide con immortalization e si traduce in centinaia di ulteriori modifiche di metilazione del DNA indipendentemente dal percorso immortalization. La maggioranza di questi cambiamenti di metilazione del DNA si trovano anche nelle cellule di cancro al seno maligno. Questi risultati mostrano che il rimodellamento epigenetico su larga scala si verifica nei primi passi della carcinogenesi mammaria, temporaneamente le modifiche di metilazione del DNA link e superare le barriere di proliferazione cellulare e fornisce una banca di potenziali biomarcatori epigenetici che potrebbe rivelarsi utile nella valutazione del rischio cancro al seno.

Stepwise cambiamenti di metilazione del DNA sono collegati per sfuggire dalla proliferazione definiti barriere e immortalization delle cellule epiteliali mammarie.

&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x4E2D;&#x767A;&#x764C;&#x306B;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x7570;&#x5E38;&#x306A; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x60AA;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (HMEC) &#x6587;&#x5316;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5909;&#x63DB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x3068;&#x60AA;&#x6027;&#x5EA6;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x6709;&#x9650;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D; HMEC 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3057;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;, &#x5747;&#x8861;&#x72B6;&#x614B;, &#x7DB2;&#x819C;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;p16(INK4A) &#x5F0F;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3046;&#x3063;&#x6EDE;&#x3092;&#x8131;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x3057;&#x7D9A;&#x3051;&#x308B; HMEC genomically &#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306B;&#x306A;&#x308B; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x62E1;&#x6563;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;, &#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x9577;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x307E;&#x308C;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x30A8;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D7;&#x3001;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x60AA;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Malignantly &#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x6709;&#x9650;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x79FB;&#x884C; HMEC &#x306E;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x5E38;&#x306A; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3067;&#x3001;&#x5909;&#x63DB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7570;&#x5E38;&#x306A; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B69;&#x306F;&#x3001;&#x3046;&#x3063;&#x6EDE;&#x306E;&#x514B;&#x670D;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x3046;&#x3063;&#x6EDE;&#x304C;&#x514B;&#x670D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x6570;&#x767E;&#x306B;&#x5C11;&#x6570;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x304F;&#x8FFD;&#x52A0; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x4F55;&#x767E;&#x3082;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x60AA;&#x6027;&#x306E;&#x4E73;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x6539;&#x9020;&#x306F;&#x4E73;&#x817A;&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x3001;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x62E1;&#x6563;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x624B;&#x9806;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x4E73;&#x623F;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x8A3C;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x9280;&#x884C;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;.

&#x6BB5;&#x968E;&#x7684;&#x306A; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x62E1;&#x6563;&#x969C;&#x58C1;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8131;&#x51FA;&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xC554; &#xC911; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBCC0;&#xD654; &#xC9C4;&#xD589; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;. &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD0C8; &#xC120; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xD0C0;&#xC784; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; isogenic &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HMEC) &#xBB38;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC804;&#xCCB4; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD88;&#xBA78;&#xACFC; &#xC885;&#xC740; &#xC5BB;&#xC73C;&#xB824;&#xACE0; &#xACBD;&#xC791;&#xB41C; &#xC720;&#xD55C; &#xC218;&#xBA85; HMEC &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD655;&#xC0B0; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC7A5;&#xBCBD;, &#xD608; &#xD589;, retinoblastoma &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; p16(INK4A) &#xC2DD;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF9;&#xBCF5; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB354; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC30;&#xB9AC;&#xC5B4;, telomere &#xC778;&#xC6D0; &#xAC10;&#xC18C;&#xC728; &#xB54C;&#xBB38; telomere &#xBD80;&#xC804; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC804;&#xC5D0; &#xC2A4;&#xD14C;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD0C8;&#xCD9C; &#xD558; &#xACE0; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xACC4;&#xC18D; &#xD558;&#xB294; HMEC genomically &#xBD88;&#xC548;&#xC815;. Telomerase &#xC2DD;&#xC744; &#xD68D;&#xB4DD; &#xD558;&#xB294; &#xD76C;&#xADC0; &#xD55C; &#xC140;&#xC774;&#xC774; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xD0C8;&#xCD9C;, &#xBD88;&#xBA78;&#xC758; &#xACE0; &#xC545;&#xC131; &#xC18D;&#xC131; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Malignantly &#xBCC0;&#xD658; &#xC720;&#xD55C; &#xC218;&#xBA85;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xD658; &#xD558;&#xB294; HMEC&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xD0C8; &#xC120; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBCC0;&#xD654; stepwise &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD0C8; &#xC120; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD608; &#xD589;, &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xCE58;&#xC640; &#xBCC0;&#xD654;, &#xD608; &#xD589;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC218;&#xBC31; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4; immortalization &#xC77C;&#xCE58;&#xC640; &#xC218;&#xBC31; &#xAC1C;&#xC758; immortalization &#xD1B5;&#xB85C; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xCD94;&#xAC00; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBCC0;&#xD654; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB610;&#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBCC0;&#xD654; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xC545;&#xC131; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; epigenetic &#xAC1C;&#xC7A5; &#xC720; &#xBC29; &#xBC1C;&#xC554;, &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; &#xB9C1;&#xD06C; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBCC0;&#xD654; &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xD655;&#xC0B0; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xADF9;&#xBCF5;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC704;&#xD5D8; &#xD3C9;&#xAC00;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xAC8C; &#xC99D;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; epigenetic biomarkers&#xC758; &#xC740;&#xD589;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Stepwise DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBCC0;&#xD654; &#xC815;&#xC758; &#xD655;&#xC0B0; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xBC0F; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; immortalization&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0C8;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El momento y la progresi&oacute;n de los cambios de metilaci&oacute;n de ADN durante la carcinog&eacute;nesis no se entienden completamente. Para desarrollar un calendario de eventos de metilaci&oacute;n de ADN aberrantes durante la transformaci&oacute;n maligna, hemos analizado los patrones de metilaci&oacute;n de ADN gen&oacute;mico en un modelo de cultura de c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas isog&eacute;nicas (juego) de transformaci&oacute;n. Para adquirir la inmortalidad y la malignidad, la duraci&oacute;n limitada cultivada puede debe superar dos obst&aacute;culos de la proliferaci&oacute;n distintas. La primera barrera, estasis, es mediada por la prote&iacute;na del retinoblastoma y pueden ser superados por la p&eacute;rdida de expresi&oacute;n de la p16(INK4A). PUEDE que escapar por estasis y siguen proliferando volverse inestable gen&oacute;micamente antes de encontrar una segunda barrera de proliferaci&oacute;n m&aacute;s estricta, disfunci&oacute;n telom&eacute;rica debido al desgaste de los tel&oacute;meros. Las c&eacute;lulas raras que adquieren la expresi&oacute;n de la telomerasa pueden escapar esta barrera, convertirse en inmortales y desarrollar m&aacute;s propiedades malignas. Nuestro an&aacute;lisis del juego en transici&oacute;n de duraci&oacute;n limitada a malo transformado demostraron que cambios de metilaci&oacute;n de ADN aberrantes ocurren de manera gradual en el proceso de transformaci&oacute;n. El primer paso de metilaci&oacute;n de ADN aberrante coincide con estasis de superaci&oacute;n y da lugar a pocos cientos de cambios, dependiendo de c&oacute;mo fue superada por estasis. Un segundo paso coincide con la inmortalizaci&oacute;n y da lugar a cientos de otros cambios de metilaci&oacute;n de ADN independientemente de la v&iacute;a de inmortalizaci&oacute;n. Tambi&eacute;n se encuentran la mayor&iacute;a de estos cambios de metilaci&oacute;n del ADN en las c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de mama maligno. Estos resultados demuestran que la remodelaci&oacute;n epigen&eacute;tica a gran escala se produce en los primeros pasos de Carcinog&eacute;nesis mamaria, temporal cambios de metilaci&oacute;n de ADN de enlaces y superar las barreras de la proliferaci&oacute;n celular y proporciona un banco de potenciales biomarcadores epigen&eacute;ticas que pueden resultar &uacute;tiles en la evaluaci&oacute;n de riesgos de c&aacute;ncer de mama.

Paso a paso cambios de metilaci&oacute;n de ADN est&aacute;n vinculados para escapar de la proliferaci&oacute;n definidas barreras e inmortalizaci&oacute;n de c&eacute;lulas epiteliales mamarias.

&#x6B63;&#x5E38;&#x4EBA;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x4E2D;&#x7684;&#x666E;&#x904D;&#x663E;&#x793A;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x6F5C;&#x80FD;&#x7684;&#x5927;&#x7EA6;&#x6709; 10 &#x81F3; 40 &#x4EBA;&#x53E3;&#x5E76;&#x5408;&#x6570;&#x4E4B;&#x524D;&#x9047;&#x5230;&#x5E94;&#x6FC0;&#x76F8;&#x5173;&#x8870;&#x8001;&#x5C4F;&#x969C; (&#x7600;) &#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; p16 &#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; p21 &#x6C34;&#x5E73;&#x5347;&#x9AD8;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x7B80;&#x5355;&#x53D8;&#x5316;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6269;&#x5927;&#x589E;&#x6B96;&#x6F5C;&#x80FD;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (HMEC) &#x5F00;&#x59CB;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5C0F;&#x5B66;&#x6587;&#x5316;&#x5230; 50 60 &#x4EBA;&#x53E3;&#x5E76;&#x5408;&#x6570;&#x8DDF; p16 &#x9633;&#x6027;&#x3001; &#x8870;&#x8001;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176;&#x6297;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x7600;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F8;&#x6BD4;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x8870;&#x8001;&#x7684; post-selection HMEC&#xFF0C;&#x4E0E;&#x65E5;&#x76CA;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x8870;&#x8001; pre-stasis HMEC &#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#xFF0C;&#x5373;&#x5728;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#xFF0C;&#x514B;&#x670D;&#x4E86;&#x901A;&#x8FC7;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684; p16 &#x8868;&#x8FBE;&#x7600;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8868;&#x793A;&#x6807;&#x8BB0;&#x5173;&#x8054;&#x9C81;&#x7C73;&#x90A3; pre-stasis &#x4EBA;&#x53E3;&#x6240;&#x8F7D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x808C;&#x4E0A;&#x76AE; HMEC &#x8C31;&#x7CFB;&#x4F53;&#x5185;&#x4E0E;&#x57FA;&#x5E95;&#x6837;&#x8868;&#x578B;&#x7684; post-selection HMEC&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x8A8A;&#x672C;&#x53CA;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x76F8;&#x5173;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x3001; &#x5E73;&#x5747;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x7247;&#x6BB5;&#x957F;&#x5EA6;&#x591A;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x5DEE;&#x522B;&#x5728;&#x4E0E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x8870;&#x8001;&#x58C1;&#x5792;&#x7600; HMEC &#x4EBA;&#x53E3;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x8870;&#x8001;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x5230; HMEC &#x7600;&#x6BD4;&#x5728;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5176;&#x57FA;&#x56E0;&#x8A8A;&#x672C;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x662F;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E; HMEC &#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8870;&#x8001;&#x58C1;&#x5792;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x652F;&#x6301;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x57F9;&#x517B; HMEC &#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x5C4F;&#x969C;&#x3001; &#x7600;&#xFF0C;&#x662F;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x800C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x969C;&#x788D; &#xFF08;agonescence &#x6216;&#x5371;&#x673A;&#xFF09; &#x7ED3;&#x679C;&#x4ECE;&#x7AEF;&#x7C92;&#x78E8;&#x635F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x6301;&#x957F;&#x671F;&#x7A33;&#x5B9A; genomically &#x53CA;&#x591A;&#x5411;&#x5206;&#x5316; pre-stasis HMEC &#x4EBA;&#x53E3;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5927;&#x5927;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E0E;&#x6B63;&#x5E38; HMEC &#x5B9E;&#x9A8C;&#x3002;

&#x6B63;&#x5E38;&#x4EBA;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x957F;&#x671F;&#x57F9;&#x517B;&#x6240;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x7600;&#x4E0E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x81EA;&#x7136;&#x51CF;&#x5458;&#x8870;&#x8001;&#x969C;&#x788D;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x533A;&#x522B;&#x3002;

Normal human epithelial cells in culture have generally shown a limited proliferative potential of approximately 10 to 40 population doublings before encountering a stress-associated senescence barrier (stasis) associated with elevated levels of cyclin-dependent kinase inhibitors p16 and/or p21. We now show that simple changes in medium composition can expand the proliferative potential of human mammary epithelial cells (HMEC) initiated as primary cultures to 50 to 60 population doublings followed by p16-positive, senescence-associated beta-galactosidase-positive stasis. We compared the properties of growing and senescent pre-stasis HMEC with growing and senescent post-selection HMEC, that is, cells grown in a serum-free medium that overcame stasis via silencing of p16 expression and that display senescence associated with telomere dysfunction. Cultured pre-stasis populations contained cells expressing markers associated with luminal and myoepithelial HMEC lineages in vivo in contrast to the basal-like phenotype of the post-selection HMEC. Gene transcript and protein expression, DNA damage-associated markers, mean telomere restriction fragment length, and genomic stability differed significantly between HMEC populations at the stasis versus telomere dysfunction senescence barriers. Senescent isogenic fibroblasts showed greater similarity to HMEC at stasis than at telomere dysfunction, although their gene transcript profile was distinct from HMEC at both senescence barriers. These studies support our model of the senescence barriers encountered by cultured HMEC in which the first barrier, stasis, is retinoblastoma-mediated and independent of telomere length, whereas a second barrier (agonescence or crisis) results from telomere attrition leading to telomere dysfunction. Additionally, the ability to maintain long-term growth of genomically stable multilineage pre-stasis HMEC populations can greatly enhance experimentation with normal HMEC.

Molecular distinctions between stasis and telomere attrition senescence barriers shown by long-term culture of normal human mammary epithelial cells.

Cellules &eacute;pith&eacute;liales humaines normales en culture ont g&eacute;n&eacute;ralement montr&eacute; un potentiel prolif&eacute;ratif limit&eacute; d&#39;environ 10 &agrave; 40 doublements de population avant de rencontrer un obstacle de stress associ&eacute;s &agrave; la s&eacute;nescence (stase) associ&eacute;es &agrave; des niveaux &eacute;lev&eacute;s de p16 inhibiteurs de kinase cycline-d&eacute;pendante et/ou p21. Maintenant, nous montrons que les simples changements dans la composition du milieu peuvent &eacute;largir le potentiel prolif&eacute;ratif des humains cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires (CEMH) lanc&eacute; dans des cultures primaires de 50 &agrave; 60 doublements de population suivies par stase de b&ecirc;ta-galactosidase positives associ&eacute;es &agrave; la s&eacute;nescence, p16-positif. Nous avons compar&eacute; les propri&eacute;t&eacute;s du croissant et s&eacute;nescent CEMH pre-stasis avec croissant et s&eacute;nescent CEMH post-s&eacute;lection, c&#39;est-&agrave;-dire les cellules cultiv&eacute;es dans un milieu sans s&eacute;rum, qui a surmont&eacute; la stase via silencing de l&#39;expression de p16 et qui affichent la s&eacute;nescence associ&eacute;e &agrave; une dysfonction t&eacute;lom&egrave;re. Pre-stasis populations figure cellules expriment des marqueurs associ&eacute;s &agrave; luminale cultiv&eacute;es et myo&eacute;pith&eacute;liales CEMH lign&eacute;es in vivo par contraste avec le ph&eacute;notype basal-like de la CEMH post-s&eacute;lection. L&#39;expression des g&egrave;nes transcription et prot&eacute;ines, ADN marqueurs associ&eacute;s aux dommages, longueur de fragment de restriction t&eacute;lom&eacute;rique moyenne et stabilit&eacute; g&eacute;nomique diff&egrave;rent significativement entre les populations CEMH &agrave; la stase par rapport aux obstacles de s&eacute;nescence dysfonction t&eacute;lom&egrave;re. Les fibroblastes s&eacute;nescents isog&eacute;niques a montr&eacute; une plus grande similitude &agrave; CEMH &agrave; stase qu&#39;au dysfonctionnement du t&eacute;lom&egrave;re, bien que leur profil de transcription du g&egrave;ne se distinguait de CEMH &agrave; deux obstacles de la s&eacute;nescence. Ces &eacute;tudes confirment notre mod&egrave;le des barri&egrave;res s&eacute;nescence rencontr&eacute;es par CEMH cultiv&eacute;e dans lequel la premi&egrave;re barri&egrave;re, stase, est induite par le r&eacute;tinoblastome et ind&eacute;pendante de la longueur des t&eacute;lom&egrave;res, tandis qu&#39;une deuxi&egrave;me barri&egrave;re (agonescence ou crise) r&eacute;sulte de l&#39;attrition t&eacute;lom&egrave;re conduisant &agrave; un dysfonctionnement des t&eacute;lom&egrave;res. En outre, la capacit&eacute; de maintenir la croissance &agrave; long terme des populations de CEMH pre-stasis multilign&eacute;es g&eacute;nomiquement stables peut consid&eacute;rablement augmenter exp&eacute;rimentation avec CEMH normal.

Distinctions mol&eacute;culaires entre stase t&eacute;lom&egrave;re attrition s&eacute;nescence barri&egrave;res et illustr&eacute;s par des cultures &agrave; long terme des cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines normales.

Normale menschliche Epithelzellen in Kultur haben im Allgemeinen eine begrenzte proliferative Potential von etwa 10 bis 40 Bev&ouml;lkerung Verdoppelungen gezeigt vor der Begegnung mit Stress-assoziierter Seneszenz Barriere (starre) erh&ouml;hte Konzentrationen von cyclin-abh&auml;ngige Kinase Inhibitoren p16 und/oder p21 zugeordnet. Wir zeigen nun, dass einfache &Auml;nderungen in mittlerer Zusammensetzung das proliferative Potential des menschlichen Milch-Epithelzellen (HMEC) initiiert als Prim&auml;rkulturen um 50 bis 60 Bev&ouml;lkerung Verdoppelungen gefolgt von p16-positiven, der Seneszenz-assoziierte Beta-Galaktosidase-positivem starre erweitern k&ouml;nnen. Wir verglichen die Eigenschaften der wachsende und alternde pre-stasis HMEC mit wachsenden und alternde post-selection HMEC, d.h. Zellen, die in einem serumfreien Medium &uuml;berwand, die starre &uuml;ber Unterdr&uuml;ckender p16 Ausdrucks und Seneszenz zugeordnete Telomer-Dysfunktion anzeigen. Kultivierte pre-stasis Populationen enthaltenen Zellen Marker zugeordnet luminalen Ausdruck und Myoepithelial HMEC &Uuml;bertragungslinien in-vivo im Gegensatz zu den basal-&auml;hnlichen Ph&auml;notyp der post-selection HMEC. Genexpression Abschrift und Protein DNA Sch&auml;den-assoziierte Marker, mittlere Telomer Beschr&auml;nkung Fragment-L&auml;nge und genomischen Stabilit&auml;t Unterschied sich wesentlich, zwischen HMEC Populationen der starre gegen&uuml;ber Telomer Dysfunktion Seneszenz Barrieren. Alternde isogene Fibroblasten zeigten gr&ouml;&szlig;ere &Auml;hnlichkeit HMEC auf starre als bei Telomer-Dysfunktion, obwohl ihre gen-Abschrift-Profil von HMEC beide Hindernisse Seneszenz unterscheidbar war. Diese Studien unterst&uuml;tzen unser Modell der Seneszenz Hindernisse kultivierten HMEC in dem die erste Barriere, die starre, ist Retinoblastom-vermittelte und unabh&auml;ngig von der L&auml;nge der Telomere, w&auml;hrend eine zweite Barriere (Agonescence oder Krise) aus Telomer-Abrieb zu Telomer-Dysfunktion resultiert. Dar&uuml;ber hinaus kann die F&auml;higkeit, langfristiges Wachstum genomically stabile multiline&auml;rer pre-stasis HMEC Populationen erhalten Experimente mit normalen HMEC erheblich verbessern.

Molekulare Unterschiede zwischen Statik und Telomer Zerm&uuml;rbungskrieg Seneszenz Barrieren von Langzeitkultur von normalen menschlichen Milch-Epithelzellen gezeigt.

Normali cellule epiteliali umane in coltura hanno generalmente mostrato un limitato potenziale proliferativo di approssimativamente 10-40 accoppiamenti di popolazione prima di incontrare una barriera di senescenza associati allo stress (stasi) associati con elevati livelli di p16 inibitori di chinasi ciclina-dipendenti e/o p21. Mostriamo ora che semplici cambiamenti nella composizione medio possono espandere il potenziale proliferativo dei umane cellule epiteliali mammarie (HMEC) avviato come colture primarie di 50 a 60 accoppiamenti popolazione seguite da stasi di beta-galattosidasi-positivo p16-positivo, senescenza-associati. Abbiamo confrontato le propriet&agrave; della crescente e senescenti HMEC pre-stasis con crescente e senescenti HMEC post-selection, cio&egrave; cellule coltivate in un mezzo serum-free che ha superato la stasi via silenziamento dell&#39;espressione di p16 e che visualizzare senescenza associato a disfunzione telomeri. Celle di popolazioni pre-stasis contenute che esprimono marcatori associati a lume coltivate e mioepiteliali HMEC lignaggi in vivo in contrasto con il fenotipo basale-come della HMEC post-selection. Espressione della proteina e la trascrizione del gene, marcatori associati al danno del DNA, telomeri significa restrizione frammento lunghezza e stabilit&agrave; genomica differivano significativamente tra le popolazioni HMEC presso la stasi contro le barriere di senescenza disfunzione telomeri. Fibroblasti senescenti isogeni ha mostrato una maggiore somiglianza di HMEC a stasi rispetto alla disfunzione del telomero, anche se il loro profilo di trascrizione genica era distinta da HMEC presso entrambe le barriere di senescenza. Questi studi sostengono il nostro modello delle barriere senescenza incontrate da HMEC colta in cui la prima barriera, stasi, &egrave; mediata da retinoblastoma e indipendente della lunghezza dei telomeri, mentre una seconda barriera (agonescence o crisi) deriva dall&#39;attrito telomeri che portano alla disfunzione telomeri. Inoltre, la capacit&agrave; di mantenere la crescita a lungo termine delle popolazioni HMEC multilineare genomically stabile pre-stasis pu&ograve; migliorare notevolmente la sperimentazione con normale HMEC.

Molecolare distinzioni tra stasi telomeri logoramento senescenza barriere e mostrate dalla cultura a lungo termine delle cellule epiteliali mammarie umane normali.

&#x6B63;&#x5E38;&#x3072;&#x3068;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x6587;&#x5316;&#x306F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; p16 &#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F; p21 &#x306E;&#x6607;&#x683C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x8001;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x969C;&#x58C1; &#xFF08;&#x3046;&#x3063;&#x6EDE;) &#x306B;&#x906D;&#x9047;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x4EBA;&#x53E3; doublings &#x9650;&#x5B9A;&#x5897;&#x6B96;&#x80FD;&#x7D04; 10 &#xFF5E; 40 &#x3092;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x4ECA;&#x57F9;&#x5730;&#x7D44;&#x6210;&#x306E;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x3068;&#x3057;&#x3066; 50 &#xFF5E; 60 &#x4EBA;&#x53E3; doublings p16 &#x967D;&#x6027;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x95A2;&#x9023;&#x306E; &beta; &#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x967D;&#x6027;&#x3046;&#x3063;&#x8840;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x958B;&#x59CB;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (HMEC) &#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x80FD;&#x3092;&#x5C55;&#x958B;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7D4C;&#x7531; p16 &#x5F0F;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3046;&#x3063;&#x6EDE;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x7121;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x3067;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x305F;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x8001;&#x9F62;&#x306E; pre-stasis HMEC &#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x8001;&#x9F62;&#x306E;&#x4E8B;&#x5F8C; HMEC &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x57F9;&#x990A;&#x5185;&#x8154;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; pre-stasis &#x500B;&#x4F53;&#x7FA4;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4E0A;&#x76AE; HMEC &#x7CFB;&#x7D71;&#x306E; in vivo &#x4E8B;&#x5F8C;&#x306E; HMEC &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x57FA;&#x5E95;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3001;&#x5E73;&#x5747;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x58C1;&#x5BFE;&#x3046;&#x3063;&#x6EDE;&#x3067; HMEC &#x96C6;&#x56E3;&#x9593;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x8001;&#x9F62;&#x540C;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x305D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x58C1;&#x3067; HMEC &#x304B;&#x3089;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x985E;&#x4F3C;&#x5EA6; HMEC &#x306B;&#x3046;&#x3063;&#x6EDE;&#x3088;&#x308A;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x57F9;&#x990A; HMEC &#x3067;&#x906D;&#x9047;&#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;, &#x5747;&#x8861;&#x72B6;&#x614B;, &#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x9577;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304B;&#x3089; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2; &#xFF08;agonescence &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5371;&#x6A5F;&#xFF09; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x7DB2;&#x819C;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;genomically &#x5B89;&#x5B9A;&#x591A;&#x80FD; pre-stasis HMEC &#x500B;&#x4F53;&#x7FA4;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x901A;&#x5E38; HMEC &#x3068;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6B63;&#x5E38;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3046;&#x3063;&#x8840;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x6D88;&#x8017;&#x6226;&#x8001;&#x5316;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x533A;&#x5225;&#x3002;

&#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC57D; 10 ~ 40&#xC758; &#xD55C;&#xC815; &#xB41C; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xC778;&#xAD6C; doublings &#xF06C; &#xC885;&#xC18D; kinase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; p16 p21&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; &#xB178;&#xD654; &#xC7A5;&#xBCBD; (&#xC2A4;&#xD14C;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;) &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC911;&#xAC04; &#xAD6C;&#xC131;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HMEC) 50 ~ 60 &#xC778;&#xAD6C; doublings p16-&#xAE0D;&#xC815;, &#xB178;&#xD654; &#xAD00;&#xB828; &#xBCA0;&#xD0C0; galactosidase &#xC591;&#xC131; &#xD608; &#xD589; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBCF8; culture&#xB85C; &#xC2DC;&#xC791;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xB178;&#xD654; post-selection HMEC&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xB178;&#xD654; pre-stasis HMEC&#xC758; &#xC18D;&#xC131; &#xC989;, &#xC140; &#xC138;&#xB7FC; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xB294; p16 &#xC2DD;&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2A4;&#xD14C;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xB178;&#xD654; telomere &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5;. Pre-stasis &#xC778;&#xAD6C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DD; luminal &#xC5F0;&#xAD00; &#xD45C;&#xD604; &#xC591;&#xC2DD; &#xBC0F; myoepithelial HMEC lineages post-selection HMEC&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xD615; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC0AC;&#xBCF8; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xD604;, DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828; &#xB9C8;&#xCEE4;, &#xD3C9;&#xADE0; telomere &#xC81C;&#xD55C; &#xC870;&#xAC01; &#xAE38;&#xC774; &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131; telomere &#xBD80;&#xC804; &#xB178;&#xD654; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xB300; &#xD608; &#xD589;&#xC5D0;&#xC11C; HMEC &#xC778;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xC774; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2EC;&#xB790;&#xB2E4;. &#xB178;&#xD654; isogenic &#xAC8C;&#xC7AC; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC0AC;&#xBCF8;&#xC744; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC740; &#xBAA8;&#xB450; &#xB178;&#xD654; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC5D0;&#xC11C; HMEC&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC4;&#xAC1C; telomere &#xBD80;&#xC804;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC2A4;&#xD14C;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD070; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131; HMEC&#xB97C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; HMEC&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB178;&#xD654; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC7A5;&#xBCBD;, &#xD608; &#xD589;, telomere &#xC778;&#xC6D0; &#xAC10;&#xC18C;&#xC728; telomere &#xBD80;&#xC804; &#xC120;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC7A5;&#xBCBD; (agonescence &#xB610;&#xB294; &#xC704;&#xAE30;) &#xBC18;&#xBA74; retinoblastoma &#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; genomically multilineage pre-stasis HMEC &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; HMEC &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD608; &#xD589; &#xBC0F; telomere &#xC778;&#xC6D0; &#xAC10;&#xC18C;&#xC728; &#xB178;&#xD654; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xAD6C;&#xBD84;.

C&eacute;lulas epiteliales humanas normales en cultura han mostrado generalmente un potencial proliferativo limitado de aproximadamente de 10 a 40 doblajes de poblaci&oacute;n antes de encontrarse con una barrera de senescencia asociada a estr&eacute;s (estasis) asociado con niveles elevados de p16 de inhibidores de la quinasa dependiente de ciclina o p21. Mostramos ahora que simples cambios en la composici&oacute;n del medio pueden ampliar el potencial proliferativo de las c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas (juego) iniciadas como cultivos primarios a 50 a 60 doblajes de poblaci&oacute;n seguidos por estasis de beta-galactosidasa-positivo de p16 positiva, senescencia asociada. Comparamos las propiedades del juego pre-stasis creciente y senescente con creciente y senescente puede post-selection, es decir, las c&eacute;lulas cultivadas en un medio libre de suero que super&oacute; la estasis mediante silenciamiento de la expresi&oacute;n de p16 y mostrar que la senescencia asociada a la disfunci&oacute;n del tel&oacute;mero. Cultivan c&eacute;lulas pre-stasis poblaciones contenidas que expresaban marcadores asociados a luminal y mioepiteliales puede linajes en vivo en contraste con el fenotipo basales del juego post-selection. Genes de transcripci&oacute;n y prote&iacute;nas, ADN marcadores de da&ntilde;o asociado, longitud de fragmento de restricci&oacute;n telom&eacute;rica media y estabilidad gen&oacute;mica difieren significativamente entre las poblaciones de juego en la estasis frente a barreras de senescencia de disfunci&oacute;n telom&eacute;rica. Fibroblastos isog&eacute;nicas senescentes demostrados mayor similitud al juego en estasis que en disfunci&oacute;n telom&eacute;rica, aunque su perfil de la transcripci&oacute;n de genes era distinto de juego en ambas barreras de senescencia. Estos estudios apoyan nuestro modelo de las barreras de senescencia por cultivadas juego en el que la primera barrera, estasis, es mediada por retinoblastoma e independiente de la longitud de los tel&oacute;meros, mientras que una segunda barrera (agonescence o crisis) resulta del desgaste del tel&oacute;mero conduce a disfunci&oacute;n del tel&oacute;mero. Adem&aacute;s, la capacidad de mantener el crecimiento a largo plazo de poblaciones de juego pre-stasis del multilineage gen&oacute;micamente estables puede realzar grandemente la experimentaci&oacute;n con el juego normal.

Moleculares distinciones entre estasis y tel&oacute;meros barreras de senescencia de atrici&oacute;n demostradas por la cultura a largo plazo de c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas normales.

Die MicroRNA-200-Familie beteiligt sich die Aufrechterhaltung einer epithelialen Ph&auml;notyps und Verlust ihres Ausdrucks in epitheliale, mesenchymale Transition (EMT) f&uuml;hren kann. Dar&uuml;ber hinaus ist der Verlust des Ausdrucks von MiR-200 Familienmitglieder mit einer aggressiven Krebs-Ph&auml;notyp verbunden. Verordnung des MiR-200 Familie Ausdrucks in Normal und Krebs Zellen wird nicht vollst&auml;ndig verstanden.

Rolle f&uuml;r DNA-Methylierung in der Regulierung von MiR - 200 c und MiR-141-Ausdrucks in Normal und Krebs Zellen.

La famiglia di microRNA-200 partecipa al mantenimento di un fenotipo epiteliale e transizione epiteliale a mesenchimale (EMT) pu&ograve; causare perdita della sua espressione. Inoltre, la perdita di espressione di miR-200 membri della famiglia &egrave; legata a un fenotipo aggressivo cancro. Regolazione dell&#39;espressione in cellule normali e cancro familiare miR-200 non &egrave; pienamente compresa.

Ruolo di metilazione del DNA nel regolamento di miR-200C e miR-141 espressione in cellule normali e cancro.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna 200 &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6027;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x3078;&#x306E;&#x8EE2;&#x79FB; (EMT) &#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5F0F;&#x306E;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 200 &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3001;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x764C;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 200 &#x5BB6;&#x65CF;&#x767A;&#x73FE;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x304C;&#x3093;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 200 c &#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x304C;&#x3093;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 141 &#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

MicroRNA 200 &#xAC00;&#xC871; &#xC0C1;&#xD53C; &#xD615;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC2DD;&#xC758; &#xC0C1;&#xC2E4;&#xC744; &#xC5FD; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC804;&#xD658; (&#xC751;&#xAE09;) &#xADC0; &#xCC29;&#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xBBF8;&#xB974;-200 &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xACF5;&#xACA9;&#xC801;&#xC778; &#xC554; &#xD615;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xB974; 200 &#xAC00;&#xC871; &#xC2DD;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xB974;-200 c&#xC640; &#xBBF8;&#xB974; 141 &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

La familia de microARN-200 participa en el mantenimiento de un fenotipo epitelial y puede producir p&eacute;rdida de su expresi&oacute;n en transici&oacute;n epitelial a mesenquimal (EMT). Adem&aacute;s, la p&eacute;rdida de expresi&oacute;n de los miembros de la familia miR-200 est&aacute; vinculada a un fenotipo de c&aacute;ncer agresivo. Regulaci&oacute;n de la expresi&oacute;n familiar de miR-200 en c&eacute;lulas sanas y cancer&iacute;genas no se entiende completamente.

Funci&oacute;n de metilaci&oacute;n del ADN en la regulaci&oacute;n de la expresi&oacute;n de miR - 200 c y miR-141 en c&eacute;lulas sanas y cancer&iacute;genas.

MicroRNA 200 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x53C2;&#x52A0;&#x7EF4;&#x6301;&#x4E0A;&#x76AE;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x5176;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5411;&#x95F4;&#x8D28;&#x8F6C;&#x6362; (EMT)&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9; 200 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x88AB;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x4FB5;&#x7565;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9; 200 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x8868;&#x8FBE;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x4ECD;&#x672A;&#x5B8C;&#x5168;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;

DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x5728;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-200 c&#x3001; &#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9; 141 &#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The microRNA-200 family participates in the maintenance of an epithelial phenotype and loss of its expression can result in epithelial to mesenchymal transition (EMT). Furthermore, the loss of expression of miR-200 family members is linked to an aggressive cancer phenotype. Regulation of the miR-200 family expression in normal and cancer cells is not fully understood.

Role for DNA methylation in the regulation of miR-200c and miR-141 expression in normal and cancer cells.

La famille de micro-ARN-200 participe &agrave; l&#39;entretien d&#39;un ph&eacute;notype &eacute;pith&eacute;lial et transition &eacute;pith&eacute;liale &agrave; m&eacute;senchymateuses (EMT) peut entra&icirc;ner la perte de son expression. En outre, la perte d&#39;expression des membres de la famille miR-200 est li&eacute;e &agrave; un ph&eacute;notype de cancer agressif. R&eacute;gulation de l&#39;expression famille miR-200 dans les cellules normales et le cancer n&#39;est pas enti&egrave;rement comprise.

R&ocirc;le de la m&eacute;thylation de l&#39;ADN dans la r&eacute;gulation de l&#39;expression de miR - 200C et miR-141 dans les cellules normales et le cancer.

P16(INK4a) (p16) &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xB113;&#xC740; siRNA &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; SUFU &#xACE0;&#xC2B4;&#xB3C4;&#xCE58; (Hh) &#xACBD;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD30C;&#xC545; &#xD558; &#xACE0; &#xC815;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8; p16 &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC; mitogenesis &#xCD09;&#xC9C4; Hh &#xC2E0;&#xD638; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hh &#xBC18;&#xC751; GLI2 &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC870;&#xAC01; &#xC9C1;&#xC811; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; p16 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB178;&#xD654;&#xB294; &#xD575; gli2&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;. Hh &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xBCF8; cilium (PC)&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC788;&#xACE0; &#xC815;&#xAD50;&#xD55C; PC &#xB300;&#xB7C9; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC140;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC218; p16 &#xCD5C;&#xC800; &#xD45C;&#xD604;. P16 &#xC5B5;&#xC81C; PC &#xC885;&#xC18D;&#xC640;-&#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5; &#xBC0F; p16 &#xC808;&#xC81C; Hh &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC140;&#xC744; &#xB80C;&#xB354;&#xB9C1; &#xD558; &#xACE0; PC &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC9C1;&#xC811; &#xD0A4; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;&#xAE30; &#xC798; &#xBC1C;&#xB2EC; mitogenic &#xD1B5;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654;, &#xBC1C;&#xC554; Hh &#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; p16 &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;.

&#xAE30;&#xBCF8; cilium &#xC885;&#xC18D; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xACE0;&#xC2B4;&#xB3C4;&#xCE58; &#xC2E0;&#xD638; p16(ink4a)&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#x5728; p16(INK4a) (p16) &#x8C03;&#x5236;&#x5668; siRNA &#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC6;&#x522B; Hedgehog (Hh) &#x7684;&#x8DEF;&#x5F84;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x8150;&#x4E73;&#x548C;&#x6B63;&#x5F0F;&#x8868;&#x660E; Hh &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236; p16 &#x4FC3;&#x8FDB; mitogenesis&#x3002;Hh &#x54CD;&#x5E94; GLI2 &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x7247;&#x6BB5;&#x76F4;&#x63A5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x6291;&#x5236; p16 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x548C;&#x8870;&#x8001;&#x662F;&#x6838; GLI2 &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;Hh &#x7EC4;&#x4EF6;&#x90E8;&#x5206;&#x9A7B;&#x7559;&#x5728;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x7EA4;&#x6BDB; &#xFF08;PC&#xFF09; &#x548C;&#x5C0F;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x5927;&#x4F17;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x8BF4;&#x660E; PC &#x6709;&#x6700;&#x4F4E; p16 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;P16 &#x6291;&#x5236;&#x901A;&#x8FC7; PC &#x4F9D;&#x8D56;&#x548C;&#x4E24;&#x79CD;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x8DEF;&#x7EBF;&#xFF0C;&#x548C;&#x6D88;&#x878D; p16 &#x5448;&#x73B0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9; Hh &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0; PC &#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x76F4;&#x63A5;&#x94FE;&#x63A5;&#x4E0E;&#x5173;&#x952E;&#x6291;&#x764C;&#x65E2;&#x5B9A;&#x53D1;&#x5C55;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x590D;&#x5236;&#x8870;&#x8001;&#x3001; Hh &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x6F5C;&#x5728; p16 &#x5728;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;

&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x4F9D;&#x8D56;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x523A;&#x732C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6291;&#x5236; p16(INK4A)&#x3002;

In a genome-wide siRNA analysis of p16(INK4a) (p16) modulators, we identify the Hedgehog (Hh) pathway component SUFU and formally demonstrate that Hh signaling promotes mitogenesis by suppression of p16. A fragment of the Hh-responsive GLI2 transcription factor directly binds and inhibits the p16 promoter and senescence is associated with the loss of nuclear GLI2. Hh components partially reside in the primary cilium (PC), and the small fraction of cells in mass culture that elaborate a PC have the lowest expression of p16. Suppression of p16 is effected by both PC-dependent and -independent routes, and ablation of p16 renders cells insensitive to an Hh inhibitor and increases PC formation. These results directly link a well-established developmental mitogenic pathway with a key tumor suppressor and contribute to the molecular understanding of replicative senescence, Hh-mediated oncogenesis, and potentially the role of p16 in aging.

Primary cilium-dependent and -independent Hedgehog signaling inhibits p16(INK4A).

Dans une analyse de g&eacute;nome siRNA de modulateurs de p16(INK4a) (p16), nous identifier le composant de voie Hedgehog (Hh) SUFU et d&eacute;montrer formellement que la signalisation de Hh favorise la mitogen&egrave;se par la suppression de p16. Un fragment du facteur de transcription GLI2 Hh r&eacute;agissant directement lie et inhibe le promoteur p16 et s&eacute;nescence est associ&eacute;e &agrave; la perte de GLI2 nucl&eacute;aire. HH composants partiellement habitent le cil primaire (PC), et la petite fraction des cellules en culture de masse qu&#39;&eacute;laborer un PC ont la plus faible expression de p16. Suppression de p16 est effectu&eacute;e par voies fois PC d&eacute;pendants et ind&eacute;pendants, et ablation de p16 rend les cellules insensibles &agrave; un inhibiteur de l&#39;Hh et augmente la formation de PC. Ces r&eacute;sultats directement lier une voie mitog&egrave;ne perfectionnement bien &eacute;tablie avec un suppresseur de tumeur cl&eacute;s et contribuent &agrave; la compr&eacute;hension mol&eacute;culaire de la s&eacute;nescence r&eacute;plicative, Hh-mediated oncogen&egrave;se et potentiellement le r&ocirc;le de p16 au cours du vieillissement.

Primaires ind&eacute;pendantes et CIL-d&eacute;pendant h&eacute;risson signalisation inhibe p16(INK4A).

In einer genomweiten SiRNA-Analyse von p16(INK4a) (p16)-Modulatoren wir identifizieren die Igel (Hh) Stoffwechselweg Komponente SUFU und formell nachweisen, dass Hh signaling f&ouml;rdert die Mitogenesis durch Unterdr&uuml;ckung von p16. Eine Fragment des Transkriptionsfaktors Hh-responsive GLI2 direkt bindet und hemmt den p16-Projekttr&auml;ger und Seneszenz ist der Verlust des nuklearen GLI2 zugeordnet. HH-Komponenten befinden sich teilweise in die prim&auml;re Cilium (PC), und der kleine Bruchteil der Zellen in der Massenkultur, die einen PC zu erarbeiten haben den niedrigsten Ausdruck der p16. Unterdr&uuml;ckung von p16 erfolgt durch PC-abh&auml;ngige sowohl -unabh&auml;ngige Routen und Ablation der p16 rendert Zellen unempfindlich gegen einen Hh-Inhibitor und PC-Bildung erh&ouml;ht. Diese Ergebnisse direkt link einen etablierten Entwicklungsst&ouml;rungen mitogenen Weg mit wichtigen Tumorsuppressor und zum molekularen Verst&auml;ndnis der Zellalterung, Hh-vermittelte Onkogenese und potenziell die Rolle der p16 in Altern beitragen.

Prim&auml;re Zilie abh&auml;ngig und -unabh&auml;ngige Igel Signalisierung hemmt p16(INK4A).

In un&#39;analisi genome-wide siRNA di modulatori p16(INK4a) (p16), individuiamo il componente del pathway Hedgehog (Hh) SUFU e dimostrare formalmente che Hh segnalazione promuove endoteliali dalla soppressione della p16. Un frammento del fattore di trascrizione GLI2 Hh-sensibli a reagire direttamente si lega e inibisce il promotore p16 e senescenza &egrave; associata con la perdita di GLI2 nucleare. HH componenti risiedono parzialmente nel cilio primario (PC), e la piccola frazione di cellule in cultura di massa che elaborano un PC hanno la minima espressione di p16. Soppressione della p16 &egrave; effettuata da entrambi PC-dipendente - indipendente rotte ed e ablazione di p16 rende le cellule insensibili ad un inibitore di Hh e aumenta la formazione di PC. Questi risultati direttamente un percorso di mitogeni developmental consolidato con un soppressore tumorale chiave di collegamento e contribuiscono alla comprensione molecolare della senescenza replicativa, Hh-mediata oncogenesi e potenzialmente il ruolo di p16 nell&#39;invecchiamento.

Primaria cilio-dipendente e - indipendente Hedgehog signaling inibisce la p16(INK4A).

P16(INK4a) (p16) &#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5E83;&#x3044; siRNA &#x5206;&#x6790;&#x3001;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0; &#xFF08;Hh&#xFF09; &#x7D4C;&#x8DEF;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x5468;&#x5E03;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x6B63;&#x5F0F;&#x306B; Hh &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1; p16 &#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Hh &#x5FDC;&#x7B54; GLI2 &#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;p16 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3066;&#x8001;&#x5316;&#x304C;&#x6838; GLI2 &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Hh &#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x4E00;&#x6B21;&#x7E4A;&#x6BDB; &#xFF08;PC&#xFF09; &#x3067;&#x5B58;&#x5728; PC &#x624B;&#x306E;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x3054;&#x304F;&#x3057;&#x3066; p16 &#x306E;&#x6700;&#x5C0F;&#x5F0F;&#x3002;P16 &#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; PC-&#x4F9D;&#x5B58;&#x30FB;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; p16 &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F; Hh &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x920D;&#x611F;&#x306A;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;PC &#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x30AD;&#x30FC;&#x816B;&#x760D;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3067;&#x5B9A;&#x8A55;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x767A;&#x9054;&#x764C;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3057;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316; &#xFF08;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;Hh &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x767A;&#x764C;&#x3068;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684; p16 &#x306E;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E00;&#x6B21;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30FB;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x30CF;&#x30EA;&#x30CD;&#x30BA;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; p16(INK4A) &#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

En un an&aacute;lisis del genoma siRNA de moduladores de p16(INK4a) (p16), identificamos el componente de la v&iacute;a de Hedgehog (Hh) SUFU y demostrar formalmente que Hh se&ntilde;alizaci&oacute;n promueve la mitog&eacute;nesis por supresi&oacute;n de p16. Un fragmento del factor de transcripci&oacute;n GLI2 Hh responde directamente se une e inhibe el promotor de p16 y senescencia se asocia con la p&eacute;rdida de GLI2 nuclear. HH componentes parcialmente residen en el cilio primario (PC), y la peque&ntilde;a fracci&oacute;n de c&eacute;lulas en cultivo masivo que elaborar un PC tiene la menor expresi&oacute;n de p16. Supresi&oacute;n de p16 se efect&uacute;a por tanto dependiente de PC y - independiente, y la ablaci&oacute;n de p16 hace que las c&eacute;lulas insensibles a un inhibidor de la Hh y aumenta la formaci&oacute;n de PC. Estos resultados directamente vinculan una v&iacute;a mitog&eacute;nica desarrollo bien establecida con un supresor tumoral clave y contribuyan a la comprensi&oacute;n molecular de senescencia replicativa, oncog&eacute;nesis Hh-mediada y potencialmente el papel de p16 en envejecimiento.

Primaria dependientes de cilio y - independiente Hedgehog se&ntilde;alizaci&oacute;n inhibe la p16(INK4A).

&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x539F;&#x5219;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x764C;&#x75C7; &#xFF1B;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x7406;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x6B63;&#x5E38;&#x6210;&#x4EBA;&#x53CA;&#x591A;&#x5411;&#x5206;&#x5316;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5982;&#x53CC;&#x5C42;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3001; &#x5EFA;&#x7ACB;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x80DA;&#x80CE;&#x5B66;&#x548C;&#x5F02;&#x5E38;&#x6216;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x4E0E;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x81EA;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x597D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x5C40;&#x9650;&#x5230;&#x7ED3;&#x5408;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x81EA;&#x6211;&#x5B66;&#x4E60;&#x5F7C;&#x6B64;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5E03;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7B97;&#x6CD5;&#x7684;&#x5706;&#x67F1;&#x51E0;&#x4F55;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684; micropatterning &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6D53;&#x7F29;&#x6210;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x8C31;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x9C81;&#x7C73;&#x90A3;&#x6C60;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x808C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E3B;&#x8981;&#x7531;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x5DEE; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9; P-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x5177;&#x4F53;&#x8D21;&#x732E;&#x808C;&#x56FE;&#x5C42;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x4E2D;&#x65AD;&#x6216;&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8089;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x5F62;&#x6210;&#x6216;&#x8005;&#x9884;&#x9632;&#x6216;&#x9884;&#x5236;&#x53CC;&#x5C42;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x8FDE;&#x7EED;&#x91C7;&#x6837;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x5C40;&#x90E8;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x81EA;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x662F;&#x793E;&#x533A;&#x6B63;&#x5E38;&#x6210;&#x4EBA;&#x4EBA;&#x4F53;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x3001; &#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;

&#x81EA;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x662F;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x6CBF;&#x88AD;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;

Loss of organization is a principle feature of cancers; therefore it is important to understand how normal adult multilineage tissues, such as bilayered secretory epithelia, establish and maintain their architectures. The self-organization process that drives heterogeneous mixtures of cells to form organized tissues is well studied in embryology and with mammalian cell lines that were abnormal or engineered. Here we used a micropatterning approach that confined cells to a cylindrical geometry combined with an algorithm to quantify changes of cellular distribution over time to measure the ability of different cell types to self-organize relative to each other. Using normal human mammary epithelial cells enriched into pools of the two principal lineages, luminal and myoepithelial cells, we demonstrated that bilayered organization in mammary epithelium was driven mainly by lineage-specific differential E-cadherin expression, but that P-cadherin contributed specifically to organization of the myoepithelial layer. Disruption of the actomyosin network or of adherens junction proteins resulted in either prevention of bilayer formation or loss of preformed bilayers, consistent with continual sampling of the local microenvironment by cadherins. Together these data show that self-organization is an innate and reversible property of communities of normal adult human mammary epithelial cells.

Self-organization is a dynamic and lineage-intrinsic property of mammary epithelial cells.

Perte de l&#39;organisation est une fonctionnalit&eacute; de principe des cancers ; C&#39;est pourquoi il est important de comprendre comment normales tissus multilign&eacute;es adultes, tels que double &eacute;pith&eacute;liums s&eacute;cr&eacute;teurs, d&#39;&eacute;tablir et de maintenir leurs architectures. Le processus d&#39;auto-organisation qui anime les m&eacute;langes h&eacute;t&eacute;rog&egrave;nes de cellules pour former des tissus organis&eacute;s est bien &eacute;tudi&eacute; en embryologie et avec des lign&eacute;es cellulaires de mammif&egrave;res qui &eacute;taient anormaux ou machin&eacute;. Ici, nous avons utilis&eacute; une approche micropatterns qui limite les cellules &agrave; une g&eacute;om&eacute;trie cylindrique, combin&eacute; avec un algorithme pour quantifier les changements de distribution cellulaire au fil du temps afin de mesurer la capacit&eacute; des diff&eacute;rents types de cellules &agrave; organiser par rapport &agrave; l&#39;autre. Utilisation normales cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines enrichis dans les piscines des deux lign&eacute;es principales, luminales et cellules myo&eacute;pith&eacute;liales, nous avons d&eacute;montr&eacute; que double organisation dans l&#39;&eacute;pith&eacute;lium mammaire a &eacute;t&eacute; tir&eacute;e principalement par l&#39;expression diff&eacute;rentielle de E-cadh&eacute;rine lign&eacute;e sp&eacute;cifique, mais que P-cadh&eacute;rine ont contribu&eacute; plus particuli&egrave;rement &agrave; l&#39;organisation de la couche myo&eacute;pith&eacute;liales. Perturbation du r&eacute;seau actomyosine ou des prot&eacute;ines des jonctions adherens entra&icirc;n&eacute; soit pr&eacute;vention de formation bicouche ou perte de bicouches pr&eacute;form&eacute;s, compatibles avec &eacute;chantillonnage continu du microenvironnement local de cadh&eacute;rines. Ensemble, ces donn&eacute;es montrent que l&#39;auto-organisation est une propri&eacute;t&eacute; inn&eacute;e et r&eacute;versible des communaut&eacute;s de normales adultes cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines.

L&#39;auto-organisation est un &eacute;tablissement dynamique et lign&eacute;e intrins&egrave;que des cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires.

Verlust der Organisation ist ein Grundsatz-Feature von Krebserkrankungen; Daher ist es wichtig zu verstehen wie normale Erwachsene multiline&auml;rer Gewebe, z. B. bilayered sekretorischen Epithelien, einrichten und pflegen ihre Architekturen. Der Selbstorganisation-Prozess, der heterogene Mischungen von Zellen bilden organisierte Gewebe Laufwerke ist gut untersucht, Embryologie und mit S&auml;ugetier-Zellformen, die abnorme oder entwickelt wurden. Hier haben wir einen Micropatterning Ansatz, die Zellen in eine zylindrische Geometrie, kombiniert mit einem Algorithmus zur Quantifizierung von Ver&auml;nderungen der zellul&auml;re Verteilung im Laufe der Zeit die F&auml;higkeit verschiedener Zelltypen, relativ zueinander Umwelten zu messen beschr&auml;nkt. Mit normalen menschlichen Milch-Epithelzellen angereichert in Pools die zwei wichtigsten Linien, die in der luminalen und Myoepithelial Zellen, zeigten wir, dass bilayered Organisation in Mamma Epithel wurde haupts&auml;chlich durch Abstammung-spezifische differenzielle E-Cadherin Ausdruck getrieben, aber dieser P-Cadherin speziell zur Organisation der Myoepithelial Ebene beigetragen. Unterbrechung des Netzwerks Actomyosin oder Adherens Junction-Proteine f&uuml;hrte entweder Pr&auml;vention Bilayer-Formation oder Verlust der vorgeformten Doppelschichten, kontinuierliche Probenahme von den lokalen Mikroumgebung von Cadherine entsprechen. Zusammen zeigen diese Daten, dass Selbstorganisation eine angeborene und reversibel Eigentum der Gemeinschaften von normalen Erwachsenen menschlichen Milch-Epithelzellen.

Selbstorganisation ist eine dynamische und Herkunfts-intrinsische Eigenschaft des Milch-Epithelzellen.

Perdita dell&#39;organizzazione &egrave; una caratteristica del principio di tumori; quindi &egrave; importante capire come normali tessuti adulti multilineare, quali bilayered epiteli secretori, stabilire e mantenere le loro architetture. Il processo di auto-organizzazione che spinge miscugli eterogenei di cellule per formare tessuti organizzati &egrave; ben studiato in embriologia e con linee di cellule di mammifero che erano anormali o ingegnerizzati. Qui abbiamo utilizzato un approccio micropatterning che limita le cellule a una geometria cilindrica, combinato con un algoritmo per quantificare i cambiamenti della distribuzione cellulare nel tempo per misurare la capacit&agrave; di diversi tipi di cellule si auto-organizzano rispetto a altro. Utilizzando normali cellule epiteliali mammarie umane arricchite nelle piscine dei due lignaggi principali, luminal e cellule mioepiteliali, abbiamo dimostrato che bilayered organizzazione nell&#39;epitelio mammario &egrave; stata trainata principalmente dall&#39;espressione differenziale di E-caderina lineage-specifici, ma che P-caderina ha contribuito in modo specifico all&#39;organizzazione dello strato mioepiteliale. Rottura della rete actomiosina o delle proteine di giunzione adherens ha provocato o prevenzione della formazione di doppio strato o perdita del bilayer preformate, coerente con campionamento continuo del microambiente locale da caderine. Insieme, questi dati mostrano che l&#39;auto-organizzazione &egrave; una propriet&agrave; innata e reversibile delle Comunit&agrave; di normale adulte mammarie cellule epiteliali umane.

L&#39;auto-organizzazione &egrave; una propriet&agrave; dinamica e lignaggio intrinseca delle cellule epiteliali mammarie.

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&#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xC554;;&#xC758; &#xC6D0;&#xB9AC; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC774;&#xB2E4; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; bilayered &#xBD84; &#xC0C1;&#xD53C; &#xB4F1; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC815;&#xC0C1; &#xC131;&#xC778; multilineage &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC774;&#xD574;, &#xC124;&#xC815; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD559; &#xBC0F; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB610;&#xB294; &#xC870;&#xC791; &#xB41C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xC798; &#xC870;&#xC9C1; &#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xC790;&#xAE30; &#xC870;&#xC9C1;&#xD654; &#xACFC;&#xC815; &#xACF5;&#xBD80;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6D0;&#xD1B5;&#xD615; &#xD615;&#xC0C1;&#xC774; &#xC11C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xB300; &#xC790;&#xCCB4;&#xB97C; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xB530;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC815;&#xB7C9;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAC10; &#xAE08; micropatterning &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; bilayered &#xC870;&#xC9C1; &#xACC4;&#xBCF4; &#xAD00;&#xB828; &#xCC28;&#xB3D9; E cadherin &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBAB0; &#xC558;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xADF8; P cadherin myoepithelial &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; &#xAE30;&#xC5EC; &#xC2DC;&#xC5F0; luminal &#xB450; &#xC8FC; &#xACC4;&#xBCF4;&#xC758; &#xD480;&#xC73C;&#xB85C; &#xB18D;&#xCD95; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; myoepithelial &#xC140;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC911;&#xB2E8; actomyosin &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xB610;&#xB294; adherens &#xC811;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; bilayer &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC5B4;&#xB290; &#xC608;&#xBC29; &#xC774;&#xB098; &#xBBF8;&#xB9AC; &#xD615;&#xC131;&#xD55C; bilayers, cadherins&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB85C;&#xCEEC; microenvironment&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC0D8;&#xD50C;&#xB9C1;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xCD08;&#xB798; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC790;&#xAE30;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xD2F0;&#xC758; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xACE0; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

&#xC790;&#xAE30; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xD608;&#xD1B5; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xC18D;&#xC131;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

P&eacute;rdida de la organizaci&oacute;n es una caracter&iacute;stica de principio de c&aacute;nceres; por lo tanto, es importante entender c&oacute;mo normales tejidos del multilineage adultos, como epitelio secretor amfif&iacute;licas, establecer y mantener sus arquitecturas. El proceso de autoorganizaci&oacute;n que impulsa mezclas heterog&eacute;neas de c&eacute;lulas para formar tejidos organizados se ha estudiado bien en embriolog&iacute;a y con l&iacute;neas de c&eacute;lulas de mam&iacute;fero que eran anormales o ingenier&iacute;a. Aqu&iacute; utilizamos un enfoque micropatterning que limita las c&eacute;lulas a una geometr&iacute;a cil&iacute;ndrica, combinado con un algoritmo para cuantificar los cambios de distribuci&oacute;n celular con el tiempo para medir la capacidad de diferentes tipos celulares para auto-organizarse entre s&iacute;. Usando c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas normales enriquecidas en piscinas de los dos linajes principales, luminales y c&eacute;lulas mioepiteliales, demostramos que organizaci&oacute;n amfif&iacute;licas en epitelio mamario fue impulsado principalmente por la expresi&oacute;n diferencial de cadherina-linaje-espec&iacute;fica, pero eso P-cadherina contribuy&oacute; especialmente a la organizaci&oacute;n de la capa mioepitelial. Interrupci&oacute;n de la red de actomyosin o de prote&iacute;nas de Uni&oacute;n adherentes como resultado o prevenci&oacute;n de la formaci&oacute;n de la bicapa o p&eacute;rdida de bicapas preformadas, consistentes con muestreo continuo del microambiente local por caderinas. Juntos, estos datos demuestran que autoorganizaci&oacute;n es una propiedad innata y reversible de las comunidades de c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas adultas normales.

Autoorganizaci&oacute;n es una propiedad din&aacute;mica y linaje intr&iacute;nseca de c&eacute;lulas epiteliales mamarias.

&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; Mirna &#x91CD;&#x8981;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x4E3A;&#x67E5;&#x660E;&#x53D7;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5B9A; Mirna&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7C73;&#x5C14;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E09;&#x7B49;&#x57FA;&#x56E0;&#x6210;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (HMEC) &#x7684;&#x5168;&#x7403;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x7EA4;&#x7EF4; &#xFF08;&#x7F9F;&#x7532;&#x57FA;&#x7CE0;&#x919B;)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x901A;&#x5E38;&#x4EE3;&#x8868;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x63D0;&#x51FA;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7ED9;&#x5B9A;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x90FD;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x72EC;&#x7279;&#x7684; epigenotype &#x5185;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x7C73;&#x5C14;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x56FD;&#x5BB6;&#x8868;&#x660E;&#x5F3A; interindividual &#x7D22;&#x5F15;&#x5185;&#x7684;&#x7ED9;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E4E; 10%&#x7684;&#x8868;&#x793A;&#x7C73;&#x5C14;&#x8868;&#x660E;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x5176;&#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5B9A;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x7C73;&#x5C14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0; epigenetically &#x538B;&#x8FEB;&#x5728; nonexpressing &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316; (38%) &#x548C; H3K27me3 (58%)&#xFF0C;&#x4E0E;&#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x5C0F;&#x5957; Mirna (21%) &#x663E;&#x793A;&#x53CC;&#x540E;&#x751F;&#x9547;&#x538B; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C; H3K27me3 &#x5176;&#x521B;&#x529E;&#x4EBA;&#xFF0C;MIR10A &#x548C; MIR10B &#x7B49;&#x51FA;&#x5E2D;&#x3002;&#x4E2A;&#x522B;&#x7C73;&#x5C14;&#x7C73;&#x5C14;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x96C6;&#x7FA4;&#x53EF;&#x4EE5;&#x76F8;&#x540C;&#x6216;&#x4E92;&#x8865;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5982; MIR200 &#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#xFF0C;&#x548C; MIR205&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#xFF0C;&#x7531; H3K27me3 MIR200A/200B/429 &#x538B;&#x5236; MIR200C/141 &#x548C; MIR205 &#x7684; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C; H3K27me3 &#x6BCF;&#x4E2A;&#x663E;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x5DF2;&#x94FE;&#x63A5;&#x81EA;&#x653E;&#x677E;&#x7BA1;&#x5236;&#x7684; epigenetically &#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684; Mirna &#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BB8;&#x591A;&#x75BE;&#x75C5;&#x5982;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x636E;&#x9884;&#x6D4B;&#x59A5;&#x534F;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x63A7;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x63A7;&#x5236;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7C73;&#x5C14;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

&#x6B63;&#x5E38;&#x4EBA;&#x4E73;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684; Mirna &#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;

Epigenetic mechanisms are important regulators of cell type-specific genes, including miRNAs. In order to identify cell type-specific miRNAs regulated by epigenetic mechanisms, we undertook a global analysis of miRNA expression and epigenetic states in three isogenic pairs of human mammary epithelial cells (HMEC) and human mammary fibroblasts (HMF), which represent two differentiated cell types typically present within a given organ, each with a distinct phenotype and a distinct epigenotype. While miRNA expression and epigenetic states showed strong interindividual concordance within a given cell type, almost 10% of the expressed miRNA showed a cell type-specific pattern of expression that was linked to the epigenetic state of their promoter. The tissue-specific miRNA genes were epigenetically repressed in nonexpressing cells by DNA methylation (38%) and H3K27me3 (58%), with only a small set of miRNAs (21%) showing a dual epigenetic repression where both DNA methylation and H3K27me3 were present at their promoters, such as MIR10A and MIR10B. Individual miRNA clusters of closely related miRNA gene families can each display cell type-specific repression by the same or complementary epigenetic mechanisms, such as the MIR200 family, and MIR205, where fibroblasts repress MIR200C/141 by DNA methylation, MIR200A/200B/429 by H3K27me3, and MIR205 by both DNA methylation and H3K27me3. Since deregulation of many of the epigenetically regulated miRNAs that we identified have been linked to disease processes such as cancer, it is predicted that compromise of the epigenetic control mechanisms is important for this process. Overall, these results highlight the importance of epigenetic regulation in the control of normal cell type-specific miRNA expression.

Epigenetic regulation of normal human mammary cell type-specific miRNAs.

M&eacute;canismes &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques sont d&#39;importants r&eacute;gulateurs des g&egrave;nes de sp&eacute;cifiques au type de cellule, y compris les miARN. Afin d&#39;identifier la cellule sp&eacute;cifique au type miARN r&eacute;gul&eacute;e par des m&eacute;canismes &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques, nous avons entrepris une analyse globale de miRNA expression et &Eacute;tats &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques dans trois paires isog&eacute;niques de cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines (CEMH) et de fibroblastes humains mammaires (HMF), qui repr&eacute;sentent g&eacute;n&eacute;ralement les deux types de cellules diff&eacute;renci&eacute;es pr&eacute;sentent au sein d&#39;un organe donn&eacute;, chacun ayant un ph&eacute;notype distinct et un epigenotype distincte. Tandis que miRNA expression et &Eacute;tats &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques ont montr&eacute; la forte concordance entre les individus au sein d&#39;un type donn&eacute; de cellules, pr&egrave;s de 10 % de la miRNA exprim&eacute; a montr&eacute; un mod&egrave;le cellulaire de type sp&eacute;cifique d&#39;expression qui &eacute;tait li&eacute;e &agrave; l&#39;&eacute;tat &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique de leur promoteur. Les g&egrave;nes miRNA tissu-sp&eacute;cifiques ont &eacute;t&eacute; r&eacute;prim&eacute;es &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques dans des cellules par m&eacute;thylation de l&#39;ADN (38 %) et H3K27me3 (58 %), avec seulement un petit ensemble des miARN (21 %), montrant une r&eacute;pression &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique double o&ugrave; m&eacute;thylation de l&#39;ADN et H3K27me3 &eacute;taient tous deux pr&eacute;sents &agrave; leurs promoteurs, tels que MIR10A et MIR10B. Grappes de miRNA individuels de familles de g&egrave;nes miRNA &eacute;troitement apparent&eacute;es peuvent la r&eacute;pression sp&eacute;cifique au type de chaque affichage cellule par les m&ecirc;mes ou compl&eacute;mentaires m&eacute;canismes &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques, tels que la famille de MIR200 et MIR205, o&ugrave; les fibroblastes r&eacute;priment MIR200C/141 par m&eacute;thylation de l&#39;ADN, MIR200A/200 b/429 par H3K27me3 et MIR205 par m&eacute;thylation de l&#39;ADN et H3K27me3. Depuis la d&eacute;r&eacute;glementation de nombreux les miARN &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiquement r&eacute;glement&eacute;es que nous avons identifi&eacute;s ont &eacute;t&eacute; associ&eacute;es au processus des maladies comme le cancer, il est pr&eacute;vu que les compromis des m&eacute;canismes de contr&ocirc;le &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique est important pour ce processus. Dans l&#39;ensemble, ces r&eacute;sultats soulignent l&#39;importance de la r&eacute;gulation &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique dans la r&eacute;gulation de l&#39;expression de miRNA sp&eacute;cifiques &agrave; un type de cellules normales.

R&eacute;gulation &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique des miARN sp&eacute;cifique au type de cellules mammaires humaines normales.

Epigenetische Mechanismen sind wichtige Regulatoren der Zelle Typ-spezifische Gene, einschlie&szlig;lich MiRNAs. Um Zelle typspezifische MiRNAs reguliert durch epigenetische Mechanismen zu identifizieren, unternahmen wir eine globale Analyse der MiRNA-Ausdruck und epigenetische Staaten in drei isogene paar menschlichen Milch-Epithelzellen (HMEC) und menschliche mamm&auml;re Fibroblasten (HMF), die in der Regel zwei differenzierte Zelltypen darstellen pr&auml;sentieren innerhalb einer gegebenen Orgel, jeweils mit einem deutlichen Ph&auml;notyp und eine unterschiedliche Epigenotype. W&auml;hrend MiRNA Ausdruck und epigenetische Staaten starken interindividuellen Konkordanz innerhalb einer gegebenen Zelltyp zeigten, zeigte fast 10 % der exprimierten MiRNA eine typspezifische Zellmuster des Ausdrucks, die in den epigenetischen Zustand ihrer Promotor verkn&uuml;pft war. Die Gewebe-spezifischen MiRNA-Gene wurden epigenetically in nonexpressing Zellen unterdr&uuml;ckt, durch DNA-Methylierung (38 %) und H3K27me3 (58 %), mit nur einer kleinen Gruppe von MiRNAs (21 %) zeigten eine dual epigenetische Repression wo DNA-Methylierung und H3K27me3 bei ihren Tr&auml;gern, wie MIR10A und MIR10B. Individuelle MiRNA-Clustern der eng verwandten MiRNA gen Familien k&ouml;nnen jede Anzeige Zelle typspezifische Repression durch die gleichen oder erg&auml;nzenden epigenetischen Mechanismen, wie die MIR200 Familie und MIR205, wo Fibroblasten zu unterdr&uuml;cken, MIR200C/141 durch DNA-Methylierung, MIR200A/200 b/429 von H3K27me3 und MIR205 durch DNA-Methylierung und H3K27me3. Seit Deregulierung vieler der epigenetically geregelten MiRNAs, die wir identifiziert wurden verbunden zu Krankheitsprozesse wie Krebs, es wird prognostiziert, dass Kompromiss den epigenetischen Kontrollmechanismen f&uuml;r diesen Prozess wichtig ist. Insgesamt unterstreichen diese Ergebnisse die Bedeutung der epigenetischen Verordnung bei der Kontrolle der normalen Zelle typspezifische MiRNA Ausdruck.

Epigenetische Regulation der normalen menschlichen Zelle Mamma typspezifische MiRNAs.

Meccanismi epigenetici sono importanti regolatori dei geni di tipo specifico delle cellule, tra cui miRNAs. Al fine di identificare i miRNAs specifici del tipo cella regolati da meccanismi epigenetici, abbiamo intrapreso un&#39;analisi globale dell&#39;espressione di miRNA e stati epigenetici in tre coppie isogeni di cellule epiteliali mammarie umane (HMEC) e fibroblasti umani mammari (HMF), che rappresentano in genere due tipi di cellule differenziate presentano all&#39;interno di un determinato organo, ciascuno con un fenotipo distinto e un distinto epigenotype. Mentre l&#39;espressione di miRNA e stati epigenetici ha mostrato forte concordanza interindividuali all&#39;interno di un tipo di dato delle cellule, quasi il 10% dell&#39;espresso miRNA ha mostrato un cella modello specifico del tipo di espressione che era legato allo stato epigenetico del loro promotore. I geni tessuto-specifici miRNA epigeneticamente furono repressi nelle cellule nonexpressing di metilazione del DNA (38%) e H3K27me3 (58%), con solo un piccolo insieme di miRNAs (21%) mostrando una duplice repressione epigenetica dove sia la metilazione del DNA e H3K27me3 erano presenti alla loro promotori, come MIR10A e MIR10B. MiRNA singoli cluster di famiglie gene miRNA strettamente correlati possono ogni repressione di specifici del tipo di cella display dallo stessi o complementari epigenetici meccanismi, come la famiglia MIR200 e MIR205, dove i fibroblasti reprimono MIR200C/141 di metilazione del DNA, MIR200A/200B/429 da H3K27me3 e MIR205 di metilazione del DNA sia H3K27me3. Dal deregolamentazione di molti i miRNAs epigeneticamente regolamentato che abbiamo individuato sono state collegate ai processi di malattie come il cancro, &egrave; previsto che il compromesso dei meccanismi di controllo epigenetico &egrave; importante per questo processo. Nel complesso, questi risultati sottolineano l&#39;importanza della regolazione epigenetica nel controllo dell&#39;espressione di miRNA specifici del tipo di cellula normale.

Regolamento epigenetica della cellula mammaria umana normale miRNAs specifici del tipo.

&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;Mirna &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;MiRNA &#x5F0F;&#x3068; 3 &#x3064;&#x306E;&#x540C;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30DA;&#x30A2;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (HMEC) &#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x3046;&#x3051;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570; miRNAs &#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x3068;&#x901A;&#x5E38; 2 &#x533A;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE; (HMF) &#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5668;&#x5B98;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x308B; epigenotype &#x5185;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;MiRNA &#x5F0F;&#x3068;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x72B6;&#x614B;&#x578B;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;&#x5F37;&#x3044; 1&#x5869;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x898B;&#x305B;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x306E; miRNA &#x306E;&#x307B;&#x307C; 10 &#xFF05; &#x305D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F0F;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x578B;&#x56FA;&#x6709;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x7279;&#x7570; miRNA &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; epigenetically nonexpressing &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; &#xFF08;38 &#xFF05;&#xFF09; &#x3068; H3K27me3 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x93AE;&#x5727;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F; &#xFF08;58 &#xFF05;&#xFF09;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x4E00;&#x9023;&#x306E; miRNAs &#x306E; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068; H3K27me3 &#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;MIR10A &#x3084; MIR10B &#x306A;&#x3069;&#x3067;&#x3044;&#x305F;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB; &#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x5F3E;&#x5727;&#x3092;&#x8868;&#x793A; (21%) &#x306E;&#x307F;&#x3067;&#x3002;&#x500B;&#x3005; &#x306E; miRNA &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x88DC;&#x5B8C;&#x7684;&#x306A;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;MIR200 &#x5BB6;&#x65CF;&#x3068;&#x3069;&#x3053;&#x3067;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B; DNA &#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3001;MIR200A/200 b/429 H3K27me3 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; MIR200C/141 &#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3001;MIR205 &#x3084; MIR205 &#x306A;&#x3069;&#x306B;&#x3088;&#x308B; DNA &#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068; H3K27me3 &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x5404;&#x8868;&#x793A;&#x30BB;&#x30EB;&#x578B;&#x56FA;&#x6709;&#x6291;&#x5727;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x8B58;&#x5225; epigenetically &#x898F;&#x5236;&#x306E; Mirna &#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x7DE9;&#x548C;&#x4EE5;&#x6765;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x764C;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x59A5;&#x5354;&#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E; miRNA &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3072;&#x3068;&#x6B63;&#x5E38;&#x4E73;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570; miRNAs &#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5236;&#x5FA1;&#x3002;

Epigenetic &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, miRNAs &#xB4F1;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;. &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; miRNAs epigenetic &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC57D;&#xC18D; miRNA &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HMEC)&#xC758; 3 &#xAC1C;&#xC758; isogenic &#xC30D; epigenetic &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xAC8C;&#xC7AC; (HMF) &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140; &#xC885;&#xB958;&#xB97C; &#xB300;&#xD45C; &#xD558;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xBC0F; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; epigenotype &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB41C; &#xAE30;&#xAD00; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC2DC;. &#xBBF8;&#xB974; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; epigenetic &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC15;&#xD55C; interindividual &#xC6A9;&#xC5B4; &#xC0C9;&#xC778;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; Mirna&#xC758; &#xAC70;&#xC758; 10% &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; epigenetic &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC2DD;&#xC758; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; miRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; (38%)&#xC640; h3k27me3&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; epigenetically nonexpressing &#xC140;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC555; &#xD588;&#xB2E4; (58%), &#xC18C;&#xC218;&#xC758; miRNAs (21%) &#xB4C0;&#xC5BC; epigenetic &#xC5B5;&#xC555; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC640; H3K27me3 MIR10A, MIR10B &#xB4F1; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;. &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; miRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; miRNA &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB610;&#xB294; &#xBCF4;&#xC644; epigenetic &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;, MIR200 &#xAC00;&#xC871;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5B4;&#xB514; &#xAC8C;&#xC7AC; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;, MIR200A/200B/429 h3k27me3&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC758;&#xD574; MIR200C/141 &#xC5B5; &#xB204;&#xB974;&#xB2E4;, MIR205 &#xBC0F; MIR205 &#xAC19;&#xC740; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC640; h3k27me3&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC01; &#xB514;&#xC2A4;&#xD50C;&#xB808;&#xC774; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xC5B5;&#xC555;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC2DD;&#xBCC4; epigenetically &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; Mirnas&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC644;&#xD654; &#xC774;&#xD6C4; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC554; &#xB4F1; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; epigenetic &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xD0C0;&#xD611;&#xC740;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC804;&#xB9DD; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; miRNA &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; epigenetic &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; Mirnas&#xC758; epigenetic &#xADDC;&#xC81C;.

Mecanismos epigen&eacute;ticos son importantes reguladores de genes espec&iacute;ficos del tipo de c&eacute;lula, incluyendo miRNAs. Con el fin de identificar c&eacute;lulas espec&iacute;ficas del tipo miRNAs regulado por mecanismos epigen&eacute;ticos, realizamos un an&aacute;lisis global de la expresi&oacute;n de miRNA y Estados epigen&eacute;ticos en tres isog&eacute;nicas de c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas (juego) y fibroblastos humanos de mamarios (HMF), que representan dos tipos de c&eacute;lulas diferenciadas por lo general presentan dentro de un determinado &oacute;rgano, cada uno con un fenotipo distinto y un epigenotype distinta. Mientras miRNA expresi&oacute;n y epigen&eacute;ticos Estados mostraron concordancia interindividual fuerte dentro de un tipo determinado de la c&eacute;lula, casi el 10% de la miRNA expresa mostr&oacute; un patr&oacute;n de c&eacute;lulas espec&iacute;ficas del tipo de expresi&oacute;n que estaba relacionada con el estado epigen&eacute;tico de su promotor. Los genes espec&iacute;ficos de tejido miRNA epigen&eacute;ticamente fueron reprimidos en c&eacute;lulas nonexpressing por metilaci&oacute;n del ADN (38%) y H3K27me3 (58%), con s&oacute;lo un peque&ntilde;o conjunto de miRNAs (21%), mostrando una represi&oacute;n epigen&eacute;tica dual donde tanto la metilaci&oacute;n del ADN y H3K27me3 estuvieron presentes en sus promotores, como MIR10A y MIR10B. MiRNA individuales grupos de familias de genes estrechamente relacionados con miRNA pueden cada represi&oacute;n de pantalla celular tipo-espec&iacute;fica por los mismos o complementarios mecanismos epigen&eacute;ticos, como la familia MIR200 y MIR205, donde los fibroblastos reprimen MIR200C/141 por metilaci&oacute;n del ADN, MIR200A/200B/429 por H3K27me3 y MIR205 por la metilaci&oacute;n del ADN y H3K27me3. Desde la desregulaci&oacute;n de muchos de los miRNAs epigen&eacute;ticamente regulado que identificamos han sido vinculados a procesos de la enfermedad como el c&aacute;ncer, se predice que el compromiso de los mecanismos epigen&eacute;ticos control es importante para este proceso. En general, estos resultados destacan la importancia de la regulaci&oacute;n epigen&eacute;tica en el control de la expresi&oacute;n de miRNA espec&iacute;ficas del tipo de c&eacute;lula normal.

Regulaci&oacute;n epigen&eacute;tica de miRNAs espec&iacute;ficas del tipo de c&eacute;lulas mamarias humanas normales.

&#x8D85;&#x8FC7; 50 &#x5E74;&#x5E10;&#x6237;&#x7684;&#x65B0;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x764C;&#x75C7;&#x8BCA;&#x65AD;&#xFF0C;75%&#x7684;&#x5987;&#x5973;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x591A;&#x6570;&#x662F;&#x9C81;&#x7C73;&#x90A3;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x6982;&#x51B5;&#x548C;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x5185;&#x7684;&#x6539;&#x5EFA;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x60A3;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x98CE;&#x9669;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5374;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4E86;&#x89E3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x652F;&#x6301;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6B63;&#x5E38;&#x4EBA;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x5927;&#x96C6;&#x5408;&#x4ECE;&#x751F;&#x6210;&#x5987;&#x5973;&#x5E74;&#x9F84; 16 &#x81F3; 91 &#x5E74;&#xFF0C;&#x6765;&#x81EA;&#x57FA;&#x5C42;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x8001;&#x5316;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x6709;&#x9650;&#x5BFF;&#x547D;&#x57F9;&#x517B;&#x548C;&#x8BED;&#x4F53;&#x6587;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8001;&#x5316;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x808C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x8868;&#x8FBE;&#x89D2;&#x86CB;&#x767D; 14 &#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;-&alpha;6&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x8868;&#x793A;&#x5B8C;&#x5168;&#x662F;&#x5728; 30 &#x5C81;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x7684;&#x5987;&#x5973;&#x4E2D;&#x7684;&#x808C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x9C81;&#x7C73;&#x90A3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x9C81;&#x7C73;&#x90A3;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4ECE;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5E74;&#x9F84;&#x7684;&#x6269;&#x5F20;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5F15;&#x8D77;&#x4E86;&#x672A;&#x5B8C;&#x5168;&#x533A;&#x5206;&#x9C81;&#x7C73;&#x90A3;&#x6216;&#x808C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x53D8;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E73;&#x8861;&#x7684;&#x9C81;&#x7C73;&#x90A3;/&#x808C;&#x8C31;&#x7CFB;&#x548C;&#x591A;&#x80FD;&#x6210;&#x4F53;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x8D77;&#x589E;&#x52A0;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x8C31;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x56E0;&#x6B64;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x7840;&#x6765;&#x89E3;&#x91CA;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6613;&#x53D7;&#x968F;&#x7740;&#x5E74;&#x9F84;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x3002;

&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x6210;&#x4F53;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x57FA;&#x5E95;&#x5206;&#x5316;&#x504F;&#x5411;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

Women older than 50 years account for 75% of new breast cancer diagnoses, and the majority of these tumors are of a luminal subtype. Although age-associated changes, including endocrine profiles and alterations within the breast microenvironment, increase cancer risk, an understanding of the cellular and molecular mechanisms that underlies these observations is lacking. In this study, we generated a large collection of normal human mammary epithelial cell strains from women ages 16 to 91 years, derived from primary tissues, to investigate the molecular changes that occur in aging breast cells. We found that in finite lifespan cultured and uncultured epithelial cells, aging is associated with a reduction of myoepithelial cells and an increase in luminal cells that express keratin 14 and integrin-Î±6, a phenotype that is usually expressed exclusively in myoepithelial cells in women younger than 30 years. Changes to the luminal lineage resulted from age-dependent expansion of defective multipotent progenitors that gave rise to incompletely differentiated luminal or myoepithelial cells. The aging process therefore results in both a shift in the balance of luminal/myoepithelial lineages and to changes in the functional spectrum of multipotent progenitors, which together increase the potential for malignant transformation. Together, our findings provide a cellular basis to explain the observed vulnerability to breast cancer that increases with age.

Accumulation of multipotent progenitors with a basal differentiation bias during aging of human mammary epithelia.

Femmes plus vieux que compte 50 ans pour 75 % des nouveaux diagnostics de cancer du sein et la majorit&eacute; de ces tumeurs sont d&#39;un sous-type luminal. Bien que les changements li&eacute;s &agrave; l&#39;&acirc;ge, y compris les profils endocriniens et des alt&eacute;rations dans le microenvironnement de la poitrine, augmentent le risque de cancer, une compr&eacute;hension des m&eacute;canismes cellulaires et mol&eacute;culaires qui sous-tend ces observations fait d&eacute;faut. Dans cette &eacute;tude, nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; une grande collection de souches de cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires humaines normales de femmes &acirc;g&eacute;es de 16 &agrave; 91 ans, d&eacute;riv&eacute;es de tissus primaires, d&#39;enqu&ecirc;ter sur les changements mol&eacute;culaires qui se produisent dans les cellules du sein vieillissant. Nous avons constat&eacute; que dans la dur&eacute;e de vie limit&eacute;e des cellules &eacute;pith&eacute;liales cultiv&eacute;es et non cultiv&eacute;es, le vieillissement est associ&eacute;e &agrave; une r&eacute;duction des cellules myo&eacute;pith&eacute;liales et une augmentation des cellules luminales qui expriment la k&eacute;ratine 14 et integrin-&alpha;6, un ph&eacute;notype qui est habituellement exprim&eacute; exclusivement dans les cellules myo&eacute;pith&eacute;liales chez les femmes de moins de 30 ans. Modifications &agrave; la lign&eacute;e luminale ont d&eacute;coul&eacute; d&#39;expansion selon l&#39;&acirc;ge des prog&eacute;niteurs multipotentes d&eacute;fectueuses qui a donn&eacute; naissance &agrave; incompl&egrave;tement diff&eacute;renci&eacute;s luminale ou cellules myo&eacute;pith&eacute;liales. Le processus de vieillissement entra&icirc;ne donc les deux un changement dans l&#39;&eacute;quilibre des lign&eacute;es luminale/myo&eacute;pith&eacute;liales et aux changements dans le spectre fonctionnel de cellules souches multipotentes, qui ensemble augmenter le potentiel de transformation maligne. Ensemble, nos r&eacute;sultats fournissent une base cellulaire pour expliquer la vuln&eacute;rabilit&eacute; observ&eacute;e pour le cancer du sein qui augmente avec l&#39;&acirc;ge.

Accumulation des prog&eacute;niteurs multipotentes avec un biais de diff&eacute;renciation basale au cours du vieillissement de l&#39;&eacute;pith&eacute;lium mammaire humain.

Frauen &auml;lter als 50 Jahre f&uuml;r 75 % der neuen Brust-Krebs-Diagnosen und die Mehrheit dieser Tumoren sind der luminalen Subtyp. Obwohl Alter verbundenen &Auml;nderungen, einschlie&szlig;lich endokrine Profile und &Auml;nderungen innerhalb der Brust Mikromilieu, Krebsrisiko erh&ouml;hen, fehlt ein Verst&auml;ndnis der zellul&auml;ren und molekularen Mechanismen, das diese Beobachtungen zugrunde liegt. In dieser Studie erzielten wir eine gro&szlig;e Sammlung von normalen menschlichen Milch-Epithelzellen St&auml;mme von Frauen im Alter zwischen 16 bis 91 Jahre, abgeleitet von prim&auml;ren Gewebe, um die molekularen Ver&auml;nderungen zu untersuchen, die im Alterungsprozess Brustkrebs Zellen auftreten. Wir festgestellt, dass im endlichen Lebensdauer Epithelzellen der gebildeten und ungebildeten, Alterung mit einer Verringerung der Myoepithelial Zellen und eine Zunahme der luminalen Zellen, die express Keratin 14 und Integrin-&alpha;6, einem Ph&auml;notyp, der in der Regel ausschlie&szlig;lich in Myoepithelial Zellen bei Frauen j&uuml;nger als 30 Jahre ausgedr&uuml;ckt wird. &Auml;nderungen an der luminalen &Uuml;bertragungslinie resultierte aus altersbedingt Ausbau der defekten multipotenten Vorl&auml;uferzellen, die unvollst&auml;ndig unterschieden luminalen f&uuml;hrten oder Myoepithelial Zellen. Der Alterungsprozess f&uuml;hrt daher sowohl eine Verschiebung des Gleichgewichts der luminalen/Myoepithelial &Uuml;bertragungslinien und auf &Auml;nderungen im funktionalen Spektrum der multipotenten Vorl&auml;uferzellen, die gemeinsam das Potenzial f&uuml;r maligne Transformation erh&ouml;hen. Unsere Erkenntnisse bilden zusammen eine zellul&auml;re Grundlage, um die beobachtete Anf&auml;lligkeit f&uuml;r Brustkrebs zu erkl&auml;ren, die mit dem Alter zunimmt.

Anh&auml;ufung von multipotenten Vorl&auml;uferzellen mit der basalen Differenzierung Neigung w&auml;hrend der Alterung der menschlichen Brust Epithelien.

Le donne pi&ugrave; vecchio di conto 50 anni per il 75% delle nuove diagnosi di cancro al seno e la maggior parte di questi tumori sono di un sottotipo Luminale. Sebbene le modifiche associate all&#39;et&agrave;, compreso profili endocrini e alterazioni entro il microambiente del seno, aumentano il rischio di cancro, la comprensione dei meccanismi cellulari e molecolari che &egrave; alla base di queste osservazioni &egrave; carente. In questo studio, abbiamo generato una grande collezione di ceppi di cellule epiteliali mammarie umane normali dal Medioevo le donne 16 a 91 anni, derivate da tessuti primari, per indagare i cambiamenti molecolari che si verificano nelle cellule mammarie di invecchiamento. Abbiamo trovato che in durata finita cellule epiteliali colte e incolte, l&#39;invecchiamento &egrave; associato ad una riduzione delle cellule mioepiteliali e un aumento del lume delle cellule che esprimono la cheratina 14 e integrina-&alpha;6, un fenotipo che &egrave; solitamente espressa esclusivamente in cellule mioepiteliali in donne di et&agrave; inferiore ai 30 anni. Modifiche alla stirpe del lume provocato dall&#39;espansione di et&agrave;-dipendente di progenitori multipotenti difettosi che ha dato origine a differenziato in modo incompleto del lume o cellule mioepiteliali. Il processo di invecchiamento comporta quindi sia uno spostamento nell&#39;equilibrio dei lignaggi del lume/mioepiteliali e ai cambiamenti nello spettro funzionale dei progenitori multipotenti, che insieme aumentano il potenziale di trasformazione maligna. Insieme, i nostri risultati forniscono una base cellulare per spiegare la vulnerabilit&agrave; osservata per il cancro al seno che aumenta con l&#39;et&agrave;.

Accumulo di progenitori multipotenti con un bias di differenziazione basale durante l&#39;invecchiamento di epitelio mammario umano.

&#x5973;&#x6027; 50 &#x6B73;&#x30A2;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x53E4;&#x3044;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x4E73;&#x623F;&#x304C;&#x3093;&#x8A3A;&#x65AD;&#x306E; 75 &#xFF05; &#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x306E;&#x5185;&#x8154;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x4E73;&#x623F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x5185;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x764C;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30FB;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x304C;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5973;&#x6027;&#x5E74;&#x9F62; 16 &#x306B; 91 &#x5E74;&#x304B;&#x3089;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x6B63;&#x5E38;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x6211;&#x3005; &#x8001;&#x5316;&#x4E73;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6709;&#x9650;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x3067;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x3068;&#x7121;&#x7C8B;&#x306A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x7B4B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3; 14 &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x901A;&#x5E38;&#x5973;&#x6027; 30 &#x6B73;&#x672A;&#x6E80;&#x306E;&#x7B4B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3; &alpha;6 &#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9; luminal &#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x5185;&#x8154;&#x306E;&#x7CFB;&#x5217;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x304B;&#x3089;&#x5185;&#x8154;&#x306B;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x305F;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x7B4B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5E74;&#x9F62;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x4E21;&#x65B9;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8; luminal/&#x7B4B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x60AA;&#x6027;&#x8EE2;&#x5316;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x5E74;&#x9F62;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x4E73;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8106;&#x5F31;&#x6027;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x57FA;&#x790E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x57FA;&#x5E95;&#x5206;&#x5316;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3002;

&#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC9C4;&#xB2E8;&#xC758; 75%&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 50 &#xB144; &#xACC4;&#xC815; &#xC774;&#xC804;&#xC758; &#xC131;&#xACFC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC740; luminal &#xD558;&#xC704;&#xC758;. &#xBE44;&#xB85D; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBCC0;&#xACBD;, &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xBC0F; &#xC720; &#xBC29; microenvironment &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC554; &#xC704;&#xD5D8;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21;&#xC758; &#xAE30;&#xCD08;&#xAC00; &#xB418;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC774; &#xACE0; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB294; &#xBD80;&#xC871; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xD070; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xC5EC;&#xC790; &#xB098;&#xAC00; 16&#xC5D0; 91 &#xB144;, &#xB178;&#xD654; &#xC720; &#xBC29; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xD55C; &#xC218;&#xBA85;&#xC5D0; &#xB178;&#xD654; &#xAD50;&#xC591; &#xBC0F; &#xC694; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;, myoepithelial &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xAC01; &#xC9C8; 14 &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin-&alpha;6, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; 30 &#xC138; &#xBBF8;&#xB9CC;&#xC758; &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; myoepithelial &#xC140;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; luminal &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xBC1C;&#xACAC;. Luminal &#xD608;&#xD1B5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xBD88;&#xC644;&#xC804; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD84;&#xD654; luminal &#xC0C1;&#xC2B9; &#xD588;&#xB2E4; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; multipotent progenitors &#xB610;&#xB294; myoepithelial &#xC140;&#xC758; &#xC5F0;&#xB839;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB798; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB178;&#xD654; &#xACFC;&#xC815; luminal/myoepithelial &#xACC4;&#xBCF4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; multipotent progenitors&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xADE0;&#xD615;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB450; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB098; &#xC774;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; &#xCDE8;&#xC57D;&#xC810;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xADFC;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xB178;&#xD654; &#xC911; &#xAE30;&#xC800; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4; multipotent progenitors&#xC758; &#xCD95;&#xC801;.

Mujeres mayores de cuenta 50 a&ntilde;os 75% de los nuevos diagn&oacute;sticos de c&aacute;ncer de mama y la mayor&iacute;a de estos tumores son de un subtipo luminal. Aunque cambios asociados con la edad, incluyendo perfiles endocrinos y alteraciones en el microambiente de la mama, aumentan el riesgo de c&aacute;ncer, carece de una comprensi&oacute;n de los mecanismos celulares y moleculares que subyace a estas observaciones. En este estudio, hemos generado una gran colecci&oacute;n de cepas de c&eacute;lulas epiteliales mamarias humanas normales de mujeres 16 a 91 a&ntilde;os de edad, derivado de los tejidos primarios, para investigar los cambios moleculares que ocurren en el envejecimiento de las c&eacute;lulas de mama. Encontramos que en duraci&oacute;n limitada c&eacute;lulas epiteliales cultivadas y no cultivadas, envejecimiento se asocia con una reducci&oacute;n de las c&eacute;lulas mioepiteliales y un aumento en las c&eacute;lulas luminales que expresan queratina 14 y la integrina-&alpha;6, un fenotipo que normalmente se expresa exclusivamente en c&eacute;lulas mioepiteliales en mujeres menores de 30 a&ntilde;os. Cambios al linaje luminal resultaron de expansi&oacute;n depende de la edad de progenitores multipotentes defectuosos que dieron lugar distinguido incompleto luminal o c&eacute;lulas mioepiteliales. Por lo tanto, el proceso de envejecimiento resulta en ambos un cambio en el equilibrio de luminal/mioepiteliales linajes y a los cambios en el espectro funcional de los progenitores multipotentes, que juntos aumentan el potencial de malignizaci&oacute;n. En conjunto, nuestros resultados proporcionan una base celular para explicar la vulnerabilidad observada al c&aacute;ncer de mama aumenta con la edad.

Article	Year
Chromatin inactivation precedes de novo DNA methylation during the progressive epigenetic silencing of the RASSF1A promoter. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 15870267	2005
Caspase-independent cytochrome c release is a sensitive measure of low-level apoptosis in cell culture models. Aging cell\| PubMed ID: 16026336	2005
Transcriptional changes associated with breast cancer occur as normal human mammary epithelial cells overcome senescence barriers and become immortalized. Molecular cancer\| PubMed ID: 17233903	2007
Inactivation of p53 function in cultured human mammary epithelial cells turns the telomere-length dependent senescence barrier from agonescence into crisis. Cell cycle (Georgetown, Tex.)\| PubMed ID: 17671422	2007
Stepwise DNA methylation changes are linked to escape from defined proliferation barriers and mammary epithelial cell immortalization. Cancer research\| PubMed ID: 19509227	2009
Molecular distinctions between stasis and telomere attrition senescence barriers shown by long-term culture of normal human mammary epithelial cells. Cancer research\| PubMed ID: 19773443	2009
Role for DNA methylation in the regulation of miR-200c and miR-141 expression in normal and cancer cells. PloS one\| PubMed ID: 20084174	2010
Primary cilium-dependent and -independent Hedgehog signaling inhibits p16(INK4A). Molecular cell\| PubMed ID: 21095584	2010
Self-organization is a dynamic and lineage-intrinsic property of mammary epithelial cells. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 21300877	2011
Epigenetic regulation of normal human mammary cell type-specific miRNAs. Genome research\| PubMed ID: 21873453	2011
Accumulation of multipotent progenitors with a basal differentiation bias during aging of human mammary epithelia. Cancer research\| PubMed ID: 22552289	2012

James C. Garbe

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