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Molecular Imaging to Target Transplanted Muscle Progenitor Cells

Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a severe genetic neuromuscular disorder that affects 1 in 3,500 boys, and is characterized by progressive muscle ...

Lawson Health Research Institute

Nous avons &eacute;tudi&eacute; les effets de concentrations de glucose chroniquement &eacute;lev&eacute; sur la ligne de cellules alpha du pancr&eacute;as alphaTC1-6. Nous montrons que la s&eacute;cr&eacute;tion de glucagon basale et l&#39;expression g&eacute;nique proglucagon sont augment&eacute;es en r&eacute;ponse &agrave; des niveaux &eacute;lev&eacute;s de glucose. La mesure de la s&eacute;cr&eacute;tion stimul&eacute;e aigu&euml; du glucagon a &eacute;galement augment&eacute;e en r&eacute;ponse &agrave; forte concentration de glucose, comme c&#39;&eacute;tait la transcription des enzymes traitement prohormone PC1/PC2 et 3et. La s&eacute;cr&eacute;tion de GLP-1, un peptide d&eacute;riv&eacute; de proglucagon produit par clivage de proglucagon par PC1/3, a &eacute;galement augment&eacute;e en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;hyperglyc&eacute;mie. Expression de g&egrave;nes des exp&eacute;riences ont montr&eacute; qu&#39;un certain nombre de composants de la voie de s&eacute;cr&eacute;tion r&eacute;glement&eacute;e ont &eacute;t&eacute; r&eacute;gul&eacute;e &agrave; des concentrations de glucose &eacute;lev&eacute;, y compris traitement des enzymes et des prot&eacute;ines exocytotique. Immunobuvardage ont montr&eacute; que l&#39;expression des prot&eacute;ines SNARE exocytotique, ainsi que de PC1/3, chromogranine A et 7 b 2, &eacute;taient tous augment&eacute; apr&egrave;s une exposition chronique &agrave; des niveaux &eacute;lev&eacute;s de glucose. Immunocytochimie a montr&eacute; aucun changement dans l&#39;expression du glucagon de marqueurs d&#39;alpha-cellules matures et brn-4 et aucune induction du marqueur d&#39;alpha-cellules immatures pdx-1. Nous concluons que les concentrations de glucose chroniquement &eacute;lev&eacute; r&eacute;gulent la r&eacute;ponse s&eacute;cr&eacute;toire r&eacute;glement&eacute;e de l&#39;alpha-cellule.

D&eacute;pendance de glucose de la voie de s&eacute;cr&eacute;tion r&eacute;gul&eacute;e dans les cellules alphaTC1-6.

&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x957F;&#x671F;&#x5347;&#x9AD8;&#x7684;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5BF9;&#x80F0;&#x817A; &alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB; alphaTC1-6 &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x54CD;&#x5E94;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6C34;&#x5E73;&#x6269;&#x5927;&#x4E86;&#x57FA;&#x5E95;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C; proglucagon &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6B63;&#x5982;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x524D;&#x4F53;&#x52A0;&#x5DE5;&#x9176; PC1/3 &#x548C; PC2 &#x6025;&#x6027;&#x523A;&#x6FC0;&#x5206;&#x6CCC;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E5F;&#x5728;&#x589E;&#x52A0;&#x9AD8;&#x7CD6;&#x3001; &#x54CD;&#x5E94;&#x3002;GLP-1&#xFF0C;&#x7531;&#x4E73;&#x6C9F;&#x7684; proglucagon &#x7531; PC1/3&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; proglucagon &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E5F;&#x589E;&#x52A0;&#x9AD8;&#x7CD6;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x4E0A;&#x8C03;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x52A0;&#x5DE5;&#x9176;&#x548C;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7684;&#x7F51;&#x7F57;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; PC1/3&#xFF0C;&#x55DC;&#x94EC; A 7B2&#xFF0C;&#x662F;&#x548C;&#x6240;&#x6709;&#x540E;&#x957F;&#x671F;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6C34;&#x5E73;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x5728;&#x6210;&#x719F; &alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x548C; brn-4 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x7684; &alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0; pdx-1 &#x6CA1;&#x6709;&#x611F;&#x5E94;&#x663E;&#x793A;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x957F;&#x671F;&#x9AD8;&#x7684;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5411;&#x4E0A;-&#x8C03;&#x8282;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5206;&#x6CCC;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684; &alpha;-&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

AlphaTC1-6 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x3002;

We have investigated the effects of chronically elevated glucose concentrations on the pancreatic alpha-cell line alphaTC1-6. We show that basal glucagon secretion and proglucagon gene expression were increased in response to high glucose levels. The extent of acute stimulated secretion of glucagon was also increased in response to high glucose, as was the transcription of the prohormone processing enzymes PC1/3 and PC2. The secretion of GLP-1, a proglucagon-derived peptide produced by cleavage of proglucagon by PC1/3, was also increased in response to high glucose. Gene expression profiling experiments showed that a number of components of the regulated secretory pathway were up-regulated at high glucose concentrations, including processing enzymes and exocytotic proteins. Immunoblot analysis showed that the expression of the exocytotic SNARE proteins, as well as that of PC1/3, chromogranin A, and 7B2, were all increased after chronic exposure to high glucose levels. Immunocytochemistry showed no changes in the expression of the mature alpha-cell markers glucagon and brn-4 and no induction of the immature alpha-cell marker pdx-1. We conclude that chronically elevated glucose concentrations up-regulate the regulated secretory response of the alpha-cell.

Glucose dependence of the regulated secretory pathway in alphaTC1-6 cells.

Abbiamo studiato gli effetti delle concentrazioni di glucosio cronicamente elevati la linea alfa-cellule del pancreas alphaTC1-6. Mostriamo che la secrezione basale di glucagone ed espressione genica proglucagon erano aumentati in risposta agli alti livelli di glucosio. La misura di acuta stimolata secrezione di glucagone &egrave; stata aumentata anche in risposta al glucosio alto, come era la trascrizione degli enzimi Proormone elaborazione 3/PC1 e PC2. La secrezione di GLP-1, un peptide derivato da proglucagon prodotto dalla scissione del proglucagon da PC1/3, &egrave; stata anche aumentata in risposta al glucosio alto. Gene expression profiling esperimenti hanno mostrato che un certo numero di componenti della via secretiva regolamentata era up-regolato a concentrazioni di glucosio elevati, tra cui lavorazione di enzimi e proteine questo. Immunoblot analisi ha dimostrato che l&#39;espressione delle proteine SNARE questo, come pure che di PC1/3, Cromogranina A e 7B2, erano tutti aumentato dopo esposizione cronica ad alti livelli di glucosio. Immunocitochimica ha mostrato nessun cambiamento nell&#39;espressione il glucagone marcatori alfa-cellule mature e brn-4 e senza induzione di immaturi alfa-cella marcatore pdx-1. Concludiamo che concentrazioni di glucosio cronicamente elevati up-regolano la risposta secretoria regolamentata della alfa-cella.

Dipendenza di glucosio del percorso secretorio regolamentato in cellule alphaTC1-6.

&#x81B5;&#x81D3; &alpha; &#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; alphaTC1 6 &#x6162;&#x6027;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x57FA;&#x5E95;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x304A;&#x3088;&#x3073; proglucagon &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PC1 &#x3068; PC2 &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30C3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x523A;&#x6FC0;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306F;&#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x3082;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;GLP-1&#x3001;PC1/3 proglucagon &#x306E;&#x958B;&#x88C2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B; proglucagon &#x7531;&#x6765;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x306F;&#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3082;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6570;&#x3092; - &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30C3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x898F;&#x5236;&#x304C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E; SNARE &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30B0;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3; A &#x3068; 7B2&#x3001;PC1/3 &#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x3078;&#x306E;&#x6162;&#x6027;&#x9732;&#x51FA;&#x5F8C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5404;&#x7A2E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; &#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x306E; brn 4 &#x5F0F;&#x30A8;&#x30C7;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x306A;&#x3044;&#x672A;&#x719F;&#x306A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; pdx 1 &#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6162;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;-&alpha; &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x5FDC;&#x7B54;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF; alphaTC1 6 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCDCC; &#xC7A5;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; alphaTC1-6&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xC800; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4; &#xBD84; &#xBE44; &#xBC0F; proglucagon &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. P c 1/3 &#xBC0F; PC2 prohormone &#xCC98;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; &#xB418;&#xBA74;&#xC11C; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4;&#xC758; &#xAE09;&#xC131; &#xC790;&#xADF9;&#xB41C; &#xBD84; &#xBE44;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4; &#xB610;&#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. GLP-1, p c 1/3, proglucagon&#xC758; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; proglucagon&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xB3C4; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xBD84; &#xBE44; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xBD80;&#xD488; &#xC218; &#xCD5C;&#xB300;-&#xD1B5;&#xC81C; &#xB41C; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;, exocytotic &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xC18C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB4F1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. P c 1/3, chromogranin, &#xBC0F; 7B2, &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; Immunoblot &#xBD84;&#xC11D; exocytotic SNARE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB9CC;&#xC131; &#xB178;&#xCD9C; &#xD6C4; &#xC99D;&#xAC00;. Immunocytochemistry &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xC54C;&#xD30C; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DD; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4;, brn-4 &#xC2DD;&#xACFC; &#xBBF8; &#xC219; &#xC54C;&#xD30C; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DD; pdx-1&#xC758; &#xC544;&#xBB34; &#xC720;&#xB3C4; &#xC544;&#xBB34; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;-&#xADDC;&#xC81C; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84; &#xBE44; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xC751;&#xB2F5; &#xACB0;&#xB860; &#xC9C0;&#xC5C8;&#xB2E4;.

AlphaTC1-6 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xBD84; &#xBE44; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos investigado los efectos de las concentraciones de glucosa cr&oacute;nicamente elevada sobre la l&iacute;nea de c&eacute;lulas alfa pancre&aacute;ticas alphaTC1-6. Mostramos que la secreci&oacute;n de glucag&oacute;n basal y expresi&oacute;n g&eacute;nica proglucagon aumentaron en respuesta a los niveles de glucosa alta. El grado de secreci&oacute;n estimulada aguda de glucag&oacute;n tambi&eacute;n aument&oacute; en respuesta a la glucosa alta, como era la transcripci&oacute;n de las enzimas prohormona procesamiento 3/CP1 y CP2. La secreci&oacute;n de GLP-1, un p&eacute;ptido derivado del proglucagon producido por ruptura de proglucagon PC1/3, tambi&eacute;n se increment&oacute; en respuesta a la glucosa alta. Expresi&oacute;n g&eacute;nica perfiles de experimentos demostr&oacute; que un n&uacute;mero de componentes de la v&iacute;a secretora regulado fueron para arriba-regulado en las concentraciones de glucosa alta, incluyendo enzimas y prote&iacute;nas exocit&oacute;ticas. An&aacute;lisis de Immunoblot demostr&oacute; la expresi&oacute;n de las prote&iacute;nas SNARE exocit&oacute;ticas, as&iacute; como que de PC1/3, cromogranina A y 7B2, eran todos aument&oacute; despu&eacute;s de la exposici&oacute;n cr&oacute;nica a los niveles de glucosa alta. Inmunocitoqu&iacute;mica no demostraron ning&uacute;n cambio en la expresi&oacute;n de la glucag&oacute;n marcadores de c&eacute;lulas alfa madura y brn-4 y no inducci&oacute;n del marcador de c&eacute;lulas alfa inmaduros pdx-1. Concluimos que las concentraciones de glucosa cr&oacute;nicamente elevada para arriba-regulan la respuesta secretora regulada de las c&eacute;lulas alfa.

Dependencia de la glucosa de la v&iacute;a secretora regulada en las c&eacute;lulas alphaTC1-6.

Coniughiamo la medicina nucleare con la biologia molecolare per stabilire un sensibile, quantitativo e Metodo TOMOGRAFICO con cui rilevare l&#39;espressione di gene in cellule di isole pancreatiche in vivo. Dual-isotopo SPECT pu&ograve; essere utilizzato per immagini contemporaneamente pi&ugrave; eventi molecolari, e coregistration di immagini SPECT e CT consente la visualizzazione dell&#39;espressione del gene reporter nel giusto contesto anatomico. Noi abbiamo progettato linee di cellule di isole pancreatiche per l&#39;imaging con SPECT/CT dopo trapianto sotto la capsula renale.

Imaging dell&#39;espressione genica in linee cellulari di isole pancreatiche dal vivo utilizzando dual-isotopo SPECT.

Nous sommes combinant m&eacute;decine nucl&eacute;aire avec la biologie mol&eacute;culaire pour &eacute;tablir un sensitif, quantitatif et tomographique m&eacute;thode permettant de d&eacute;tecter l&#39;expression des g&egrave;nes dans les cellules des &icirc;lots pancr&eacute;atiques in vivo. Deux isotopes SPECT peut &ecirc;tre utilis&eacute; pour l&#39;image des &eacute;v&eacute;nements mol&eacute;culaires multiples simultan&eacute;ment, et Co-inscription d&#39;images SPECT et CT permet la visualisation de l&#39;expression du g&egrave;ne rapporteur dans le contexte anatomique correcte. Nous avons con&ccedil;u des lign&eacute;es de cellules d&#39;&icirc;lots pancr&eacute;atiques d&#39;imagerie sur SPECT/CT apr&egrave;s transplantation sous la capsule r&eacute;nale.

Imagerie de l&#39;expression g&eacute;nique dans les lign&eacute;es de cellules des &icirc;lots pancr&eacute;atiques vivants &agrave; l&#39;aide de deux isotopes SPECT.

&#x6211;&#x4EEC;&#x6838;&#x533B;&#x5B66;&#x7ED3;&#x5408;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x654F;&#x611F;&#x3001; &#x5B9A;&#x91CF;&#x3001; &#x548C;&#x5C42;&#x6790;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7528;&#x6765;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x53CC;&#x6838;&#x7D20;&#x663E;&#x50CF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x591A;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#xFF0C;&#x56FE;&#x50CF;&#x548C; SPECT &#x548C; CT &#x56FE;&#x50CF;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x4F7F;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x89E3;&#x5256;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x80BE;&#x80F6;&#x56CA;&#x4E0B;&#x540E;&#x4E0E; SPECT/CT &#x6210;&#x50CF;&#x3002;

&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CC;&#x6838;&#x7D20;&#x663E;&#x50CF;&#x7684;&#x6D3B;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

We are combining nuclear medicine with molecular biology to establish a sensitive, quantitative, and tomographic method with which to detect gene expression in pancreatic islet cells in vivo. Dual-isotope SPECT can be used to image multiple molecular events simultaneously, and coregistration of SPECT and CT images enables visualization of reporter gene expression in the correct anatomic context. We have engineered pancreatic islet cell lines for imaging with SPECT/CT after transplantation under the kidney capsule.

Imaging of gene expression in live pancreatic islet cell lines using dual-isotope SPECT.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x5BC6;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x3001;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3078;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3068;&#x30C8;&#x30E2;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x6CD5;&#x306F;&#x81B5;&#x5CF6;&#x7D30;&#x80DE; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6838;&#x533B;&#x5B66;&#x3092;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x540C;&#x4F4D;&#x4F53; SPECT &#x8907;&#x6570;&#x5206;&#x5B50;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;SPECT &#x3068; CT &#x753B;&#x50CF;&#x9593;&#x306E;&#x30EC;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6B63;&#x3057;&#x3044;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x7684;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SPECT &#x3068; CT &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x814E;&#x88AB;&#x819C;&#x4E0B;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;&#x306B;&#x81B5;&#x5CF6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x540C;&#x4F4D;&#x4F53; SPECT &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;

&#xC124;&#xB9BD; &#xAD6C;&#xBD84;, &#xC591;&#xC801;, &#xBD84;&#xC790; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC12C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xCE35; &#xCD2C;&#xC601; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xD575; &#xC758;&#xD559;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;. &#xB4C0;&#xC5BC; &#xB3D9;&#xC704; &#xC6D0;&#xC18C; SPECT&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0;, &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC640; coregistration SPECT, CT &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xD574;&#xBD80;&#xD559; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xCEA1;&#xC290;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; SPECT/CT&#xC640; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC12C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xC124;&#xACC4; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB4C0;&#xC5BC; &#xB3D9;&#xC704; &#xC6D0;&#xC18C; SPECT&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC12C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Estamos combinando medicina nuclear y biolog&iacute;a molecular para establecer un sensible, cuantitativo, tomogr&aacute;fica m&eacute;todo con el cual detectar la expresi&oacute;n g&eacute;nica en c&eacute;lulas del islote pancre&aacute;tico in vivo. SPECT de doble is&oacute;topo puede utilizarse para varios eventos moleculares de la imagen simult&aacute;neamente, y coregistros de im&aacute;genes SPECT y CT permite la visualizaci&oacute;n de la expresi&oacute;n g&eacute;nica de reportero en el contexto anat&oacute;mico correcto. Hemos dise&ntilde;ado l&iacute;neas de c&eacute;lulas de islotes pancre&aacute;ticos para im&aacute;genes con SPECT/CT despu&eacute;s del trasplante bajo la c&aacute;psula renal.

Proyecci&oacute;n de imagen de la expresi&oacute;n g&eacute;nica en l&iacute;neas de c&eacute;lulas de islotes pancre&aacute;ticos vivo mediante SPECT de doble is&oacute;topo.

&#x5206;&#x5B50;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF; &#xFF08;MRI&#xFF09; &#x53EF;&#x80FD;&#x53D7;&#x76CA;&#x4E8E;&#x5C0F;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5176;&#x8D8B;&#x78C1;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x7531;&#x591A;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x819C;&#x62EC;&#x94C1;&#x751F;&#x7269;&#x77FF;&#x7269;&#x7684;&#x94C1;&#x78C1;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x5B8F;&#x5DE8;&#xFF0C;&#x5047;&#x5B9A;&#x94C1;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x5B8F;&#x5DE8;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x795E;&#x7ECF;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624; N2A &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x7279;&#x5F81;&#x53CA;&#x5176;&#x5BF9;&#x94C1;&#x52A0;&#x8F7D;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5B8F;&#x5DE8;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x5F3A;&#x666E;&#x9C81;&#x58EB;&#x84DD;&#x67D3;&#x8272;&#x548C;&#x94C1;&#x5143;&#x7D20;&#x5185;&#x5BB9;&#x7684; N2A &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x6539;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x5728;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x94C1;&#x8865;&#x5145;&#x5242;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6709;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4E3A;&#x94C1;&#x7EB3;&#x5165;&#x5B8F;&#x5DE8;&#x548C;&#x53D8;&#x5F62;&#xFF0C;MagAE137V&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x5B8F;&#x5DE8;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4EA7;&#x751F;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5EA6;&#x53EF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#x5728; 11 &#x7279;&#x65AF;&#x62C9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B64;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8868;&#x8FBE;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6A21;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x6E10;&#x53D8;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7684;&#x65B0;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x81EA;&#x65CB;&#x56DE;&#x6CE2;&#x56FE;&#x50CF;&#x6765;&#x533A;&#x5206;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x89C6;&#x91CE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B8F;&#x5DE8;&#x6D3B;&#x52A8;&#x54CD;&#x5E94;&#x8865;&#x94C1;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7531;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x505C;&#x7528;&#x9020;&#x5F71;&#x5242;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x5B8F;&#x5DE8;&#x662F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5229;&#x7528;&#x66F4;&#x5145;&#x5206;&#x4E0A;&#x7EA7;&#x51B3;&#x8BAE;&#x7684;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#x5728;&#x65E0;&#x521B;&#x533B;&#x7597;&#x6210;&#x50CF; MRI &#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x62A5;&#x544A;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;

&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x8D85;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x5B8F;&#x5DE8;&#xFF0C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5242;&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

Molecular imaging with magnetic resonance imaging (MRI) may benefit from the ferrimagnetic properties of magnetosomes, membrane-enclosed iron biominerals whose formation in magnetotactic bacteria is encoded by multiple genes. One such gene is MagA, a putative iron transporter. We have examined expression of MagA in mouse neuroblastoma N2A cells and characterized their response to iron loading and cellular imaging by MRI. MagA expression augmented both Prussian blue staining and the elemental iron content of N2A cells, without altering cell proliferation, in cultures grown in the presence of iron supplements. Despite evidence for iron incorporation in both MagA and a variant, MagAE137V, only MagA expression produced intracellular contrast detectable by MRI at 11 Tesla. We used this stable expression system to model a new sequence for cellular imaging with MRI, using the difference between gradient and spin echo images to distinguish cells from artifacts in the field of view. Our results show that MagA activity in mammalian cells responds to iron supplementation and functions as a contrast agent that can be deactivated by a single point mutation. We conclude that MagA is a candidate MRI reporter gene that can exploit more fully the superior resolution of MRI in noninvasive medical imaging.

Magnetic resonance imaging of cells overexpressing MagA, an endogenous contrast agent for live cell imaging.

Imagerie mol&eacute;culaire avec l&#39;imagerie par r&eacute;sonance magn&eacute;tique (IRM) peut-&ecirc;tre b&eacute;n&eacute;ficier des propri&eacute;t&eacute;s ferrimagn&eacute;tique de magn&eacute;tosomes, enveloppe membranaire fer biomin&eacute;raux dont la formation chez les bact&eacute;ries magn&eacute;totactiques est cod&eacute;e par des g&egrave;nes multiples. Un de ces g&egrave;nes est MagA, un transporteur de fer putatif. Nous avons examin&eacute; l&#39;expression de MagA dans les cellules de souris neuroblastomes N2A et caract&eacute;ris&eacute; leur r&eacute;ponse au chargement de fer et imagerie cellulaire par l&#39;IRM. MagA expression augment&eacute;e coloration bleu de Prusse et la teneur en fer &eacute;l&eacute;mentaire des cellules N2A, sans alt&eacute;rer la prolif&eacute;ration cellulaire, dans les cultures en pr&eacute;sence de suppl&eacute;ments de fer. Malgr&eacute; les preuves pour l&#39;incorporation de fer en MagA et une variante, MagAE137V, seulement MagA expression produit contraste intracellulaire d&eacute;tectable par l&#39;IRM &agrave; 11 Tesla. Nous avons utilis&eacute; ce syst&egrave;me d&#39;expression stable pour mod&eacute;liser une nouvelle s&eacute;quence d&#39;imagerie cellulaire sur MRI, en utilisant la diff&eacute;rence entre d&eacute;grad&eacute; et spin &eacute;cho images pour distinguer les cellules des artefacts dans le champ de vision. Nos r&eacute;sultats montrent que l&#39;activit&eacute; de MagA en cellules mammif&egrave;res r&eacute;pond &agrave; la suppl&eacute;mentation en fer et fonctionne comme un agent de contraste qui peut &ecirc;tre d&eacute;sactiv&eacute; par une mutation ponctuelle. Nous concluons que le MagA est un g&egrave;ne rapporteur candidat MRI qui peut exploiter pleinement la r&eacute;solution sup&eacute;rieure de l&#39;IRM en imagerie m&eacute;dicale non invasive.

R&eacute;sonance magn&eacute;tique des cellules surexprimant MagA, un agent de contraste endog&egrave;ne pour l&#39;imagerie de cellules vivantes.

Molecular imaging con risonanza magnetica (MRI) possono trarre beneficio dalle propriet&agrave; ferrimagnetici di magnetosomes, membrana-incluso ferro biominerals cui la formazione di batteri magnetotattici &egrave; codificata dai geni multipli. Un tale gene &egrave; MagA, un trasportatore di ferro putativo. Abbiamo esaminato l&#39;espressione della MagA in cellule N2A neuroblastoma di topo e caratterizzato la loro risposta al carico di ferro e l&#39;imaging cellulare da MRI. MagA espressione aumentata sia la colorazione blu di Prussia e il contenuto di ferro elementare delle cellule N2A, senza alterare la proliferazione cellulare, in colture coltivate in presenza di integratori di ferro. Nonostante la prova per l&#39;incorporazione del ferro nella MagA sia una variante, MagAE137V, solo MagA espressione prodotto intracellulare contrasto rilevabile da MRI a 11 Tesla. Abbiamo usato questo sistema di espressione stabile di modellare una nuova sequenza per cellulare imaging con risonanza magnetica, usando la differenza tra gradiente e spin echo immagini per distinguere le celle da artefatti nel campo visivo. I nostri risultati mostrano che la MagA attivit&agrave; in cellule di mammifero risponde alla supplementazione di ferro e funziona come un agente di contrasto pu&ograve; essere disattivato da una singola mutazione puntiforme. Possiamo concludere che la MagA &egrave; un gene reporter candidato MRI che pu&ograve; sfruttare pienamente la risoluzione superiore di MRI in medical imaging non invasivo.

Risonanza magnetica delle cellule con sovraesprimono relativa MagA, un agente di contrasto endogeno per imaging cellulare dal vivo.

&#x5206;&#x5B50;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x753B;&#x50CF; (MRI) &#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x78C1;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3; &#x30DE;&#x30B0;&#x30CD;&#x30C8;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x8D70;&#x78C1;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x3067;&#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x819C;&#x306B;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x9244; biominerals &#x306E;&#x6069;&#x6075;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; 1 &#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30DE;&#x30AC;&#x3001;&#x63A8;&#x5B9A;&#x9244;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30AC; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x795E;&#x7D4C;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30BF;&#x30E9;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x9244;&#x3092;&#x8CA0;&#x8377;&#x3057;&#x3066; MRI &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30AC;&#x5F0F;&#x30D7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A2;&#x30F3; &#x30D6;&#x30EB;&#x30FC;&#x67D3;&#x8272;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9244;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x306E;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x9244;&#x306E;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EA;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x304C;&#x62E1;&#x5F35;&#x73FE;&#x5B9F;&#x611F;&#x3002;&#x30DE;&#x30AC;&#x3068;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;MagAE137V&#x3001;&#x9244;&#x306E;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A; 11 &#x30C6;&#x30B9;&#x30E9;&#x306E; MRI &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x691C;&#x51FA;&#x30DE;&#x30AC;&#x5F0F;&#x306E;&#x307F;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3053;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x767A;&#x73FE;&#x7CFB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; mri &#x52FE;&#x914D;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3057;&#x3001;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x5185;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C6;&#x30E0;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30A8;&#x30B3;&#x30FC;&#x753B;&#x50CF;&#x56DE;&#x8EE2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x30DE;&#x30AC;&#x6D3B;&#x52D5;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9244;&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x3001;1 &#x3064;&#x306E;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x975E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x9020;&#x5F71;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30AC;&#x3088;&#x308A;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306E; MRI &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x533B;&#x7642;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x5019;&#x88DC; MRI &#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;.

&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306E;&#x30DE;&#x30AC;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x9020;&#x5F71;&#x5264;&#x306E;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x6295;&#x5C04;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3002;

&#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xC601;&#xC0C1; (MRI)&#xC640; &#xBD84;&#xC790; &#xC601;&#xC0C1; magnetosomes, magnetotactic &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xD638;&#xD654; &#xB9C9; &#xB3D9;&#xBD09; &#xCCA0; biominerals&#xC758; ferrimagnetic &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC19;&#xC740; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xB9C8;&#xAC00;, &#xC0C1; &#xC0C1;&#xC18D; &#xCCA0; &#xC6B4;&#xC1A1;&#xC5C5; &#xC790;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC2E0;&#xACBD; N2A &#xC140; &#xB9C8;&#xAC00;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xCCA0; &#xB85C;&#xB4DC; &#xBC0F; MRI&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xBC18;&#xC751; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xB9C8;&#xAC00; &#xC2DD; &#xCCA0; &#xBD84; &#xBCF4;&#xCDA9;&#xC81C;&#xC758; &#xBA74; &#xC804;&#xC5D0; &#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xD504;&#xB7EC;&#xC2DC;&#xC548; &#xBE14;&#xB8E8; &#xC5BC;&#xB8E9; &#xBC0F; N2A &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6D0;&#xC18C; &#xCCA0; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC15;. &#xB9C8;&#xAC00;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xC885;, MagAE137V, &#xCCA0; &#xAD00;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB9C8;&#xAC00; &#xC2DD;&#xB9CC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB300;&#xBE44; 11 &#xD14C;&#xC2AC;&#xB77C;&#xC5D0; MRI&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0;. &#xC774; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC2DD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC740; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xCC28;&#xC774; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; MRI&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2A4;&#xD540; &#xC5D0;&#xCF54; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xAE30;&#xC758; &#xD544;&#xB4DC;&#xC758; &#xC544;&#xD2F0;&#xD329;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB9C8;&#xAC00; &#xD65C;&#xB3D9; &#xCCA0; &#xBD84; &#xBCF4;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC810; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xB300;&#xBE44; &#xC694;&#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9C8;&#xAC00; &#xB354;&#xC6B1; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; &#xC758;&#xB8CC; &#xC601;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; MRI&#xC758; &#xB6F0;&#xC5B4;&#xB09C; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC545;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD6C4;&#xBCF4; MRI &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;.

&#xC140; &#xB9C8;&#xAC00;, &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB0B4; &#xC0DD; &#xB300;&#xBE44; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; overexpressing&#xC758; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xC601;&#xC0C1;.

Imagen molecular con la proyecci&oacute;n de imagen de resonancia magn&eacute;tica (MRI) puede beneficiarse de las propiedades de ferrimagnetic de magnetosomes, membrana-incluido hierro biominerales cuya formaci&oacute;n en magn&eacute;totactiques bacterias est&aacute; codificada por genes m&uacute;ltiples. Un tal gen es MagA, un transportador de hierro putativos. Hemos examinado la expresi&oacute;n de MagA en c&eacute;lulas de rat&oacute;n neuroblastoma N2A y caracteriza su respuesta a la carga de hierro y la proyecci&oacute;n de imagen celular por MRI. MagA expresi&oacute;n aumentada de coloraci&oacute;n azul prusiano y el contenido de hierro elemental de las c&eacute;lulas N2A, sin alterar la proliferaci&oacute;n celular, en las culturas que se cultiva en presencia de suplementos de hierro. A pesar de la evidencia para la incorporaci&oacute;n de hierro en la MagA y una variante, MagAE137V, s&oacute;lo MagA expresi&oacute;n hab&iacute;a producido intracelular contraste detectable por MRI en Tesla 11. Hemos utilizado este sistema de expresi&oacute;n estable para modelar una nueva secuencia de im&aacute;genes celulares con MRI, usando la diferencia entre el gradiente y girar im&aacute;genes del eco para distinguir c&eacute;lulas de artefactos en el campo de visi&oacute;n. Nuestros resultados muestran que la actividad de la MagA en c&eacute;lulas de mam&iacute;fero responde a la administraci&oacute;n de suplementos de hierro y funciona como un agente de contraste que puede desactivarse por una sola mutaci&oacute;n de punto. Concluimos que la MagA es un gen reportero de candidato MRI que puede explotar m&aacute;s plenamente la resoluci&oacute;n superior de MRI en imagen m&eacute;dica no invasiva.

Proyecci&oacute;n de imagen de resonancia magn&eacute;tica de c&eacute;lulas overexpressing MagA, un agente de contraste end&oacute;geno para la proyecci&oacute;n de imagen de c&eacute;lulas vivas.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x4EA7;&#x751F;&#x6B63;&#x7535;&#x5B50;&#x53D1;&#x5C04;&#x65AD;&#x5C42;&#x626B;&#x63CF; (PET) &#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;sr39tk&#xFF0C;&#x9F20;&#x6807;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x884C;&#x6211;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BA0;&#x7269;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7684;&#x63A8;&#x9500;&#x5458; (MIP-sr39tk)

&#x5B9E;&#x73B0; PET &#x663E;&#x50CF;&#x7684;&#x5B8C;&#x597D;&#x80F0;&#x817A; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x79EF;&#xFF1A; &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

We have generated transgenic mouse lines expressing the positron emission tomography (PET) reporter gene, sr39tk, under the control of the mouse insulin I promoter (MIP-sr39tk) to image endogenous islets using PET.

Towards PET imaging of intact pancreatic beta cell mass: a transgenic strategy.

Nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; des lign&eacute;es de souris transg&eacute;niques exprimant le g&egrave;ne rapporteur de tomographie par &eacute;mission de positrons (PET), sr39tk, sous le contr&ocirc;le de l&#39;insuline de souris j&#39;ai promoteur (MIP-sr39tk) aux &icirc;lots endog&egrave;ne d&#39;image &agrave; l&#39;aide de PET.

Vers l&#39;imagerie TEP de b&ecirc;ta pancr&eacute;atique intact cell mass : une strat&eacute;gie transg&eacute;nique.

Noi abbiamo generato linee mouse transgenici che esprimono il gene reporter tomografia ad emissione di positroni (PET), sr39tk, sotto il controllo dell&#39;insulina del mouse io promotore (MIP-sr39tk) di isolotti endogeno immagine mediante PET.

Verso imaging PET di beta del pancreas intatto cell mass: una strategia transgenica.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x967D;&#x96FB;&#x5B50;&#x653E;&#x5C04;&#x65AD;&#x5C64;&#x64AE;&#x5F71; &#xFF08;PET&#xFF09; &#x306E;&#x8A18;&#x8005;&#x3001;sr39tk &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7DDA;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x79C1;&#x306F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#xFF08;MIP-sr39tk&#xFF09; &#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x30DC;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x5CF6;&#x306B;

&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x81B5;&#x81D3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x306E; PET &#x753B;&#x50CF;&#x3078;&#x7D30;&#x80DE;&#x584A;: &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x6226;&#x7565;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; sr39tk &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xC758; &#xD1B5;&#xC81C; &#xC591;&#xC804;&#xC790; &#xBC29;&#xCD9C; &#xB2E8;&#xCE35; &#xCD2C;&#xC601; (PET) &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB77C;&#xC778; &#xC0DD;&#xC131; &#xB098; &#xC560;&#xC644; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xB0B4; &#xC0DD; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; (&#xBC09;-sr39tk)

&#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; &#xC560;&#xC644; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xD654;&#xC0C1; &#xC9C4; &#xCC30;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xB7C9; &#xC138;&#xD3EC;: &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC804;&#xB7B5;.

Hemos generado l&iacute;neas de rat&oacute;n transg&eacute;nico que expresa el gen reportero de tomograf&iacute;a por emisi&oacute;n de positrones (PET), sr39tk, bajo el control de la insulina de rat&oacute;n promotor (MIP-sr39tk) a islotes end&oacute;gena de la imagen con PET.

Hacia la proyecci&oacute;n de imagen de PET de celulas PANCREATICAS beta intacto masa celular: una estrategia de transg&eacute;nica.

Ghrelin is a 28-amino acid peptide hormone produced in the stomach. It binds to the growth hormone secretagogue receptor 1a (GHS-R1a), a class A G-protein-coupled receptor. In the present study, we describe the design, synthesis and characterization of a truncated, 18-amino acid analog of ghrelin conjugated to a fluorescent molecule, fluorocein isothiocyanate (FITC), through the addition of a lysine at its C terminus ([Dpr(octanoyl)(3), Lys(fluorescein)(19)]ghrelin(1-19)). Receptor binding affinity of this novel fluorescein-ghrelin(1-18) was similar to that of wild-type ghrelin and a synthetic GHS-R1a ligand, hexarelin. Live cell imaging in CHO/GHS-R1a cells demonstrated cell surface receptor labeling and internalization, and agonist activity of fluorescein-ghrelin(1-18) was confirmed by increased phosphorylation of ERK1/2. We also show that GHS-R1a protein is expressed primarily in the heart when compared to all other organs, suggesting high receptor density in the left ventricle. Finally, we demonstrate that fluorescein-ghrelin(1-18) binds specifically to heart tissue in situ, and its binding is displaced by both wt ghrelin and hexarelin. We have therefore developed a novel imaging probe, fluorescein-ghrelin(1-18), that can be used to image GHS-R1a in situ, for the purposes of investigating mechanisms of receptor trafficking or pharmacological agents that target GHS-R1a.

Design and characterization of a fluorescent ghrelin analog for imaging the growth hormone secretagogue receptor 1a.

&#x751F;&#x957F;&#x7D20;&#x662F;&#x5728;&#x80C3;&#x91CC;&#x4EA7;&#x751F; 28-&#x6C28;&#x57FA;&#x7532;&#x9178;&#x80BD;&#x6FC0;&#x7D20;&#x3002;&#x5B83;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x751F;&#x957F;&#x8377;&#x5C14;&#x8499;&#x4FC3;&#x6CCC;&#x53D7;&#x4F53; 1a (&#x5168;&#x7403;&#x7EDF;&#x4E00;&#x5236;&#x5EA6;-&#x7269;&#x4E1A;&#xFF09;&#xFF0C;&#x7C7B; A G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3001; &#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x8868;&#x5F81;&#x88AB;&#x622A;&#x65AD;&#xFF0C;18-&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x9178;&#x6A21;&#x62DF;&#x7684; ghrelin &#x5171;&#x8F6D;&#x8367;&#x5149;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;fluorocein &#x5F02;&#x786B;&#x6C30;&#x9178;&#x916F; &#xFF08;FITC&#xFF09;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6DFB;&#x52A0;&#x7684;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x5728;&#x5176; C &#x603B;&#x7AD9; ([Dpr(octanoyl)(3)&#xFF0C;Lys(fluorescein)(19)]ghrelin(1-19))&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#xFF0C;&#x5176;&#x5B9E;&#x662F; fluorescein-ghrelin(1-18) &#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; ghrelin &#x53CA;&#x5176;&#x5408;&#x6210;&#x7684; GHS &#x7269;&#x4E1A;&#x914D;&#x4F53;&#x3001; &#x6D77;&#x6C99;&#x745E;&#x6797;&#x3002;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D; CHO/&#x5168;&#x7403;&#x7EDF;&#x4E00;&#x5236;&#x5EA6;-&#x7269;&#x4E1A;&#x8BC1;&#x660E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x4F53;&#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x5185;&#x5316;&#x548C;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; fluorescein-ghrelin(1-18) &#x786E;&#x8BA4;&#x4E86;&#x589E;&#x52A0;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; ERK1/2&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A;&#x5168;&#x7403;&#x7EDF;&#x4E00;&#x5236;&#x5EA6;&#x7269;&#x4E1A;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E3B;&#x8981;&#x5728;&#x5FC3;&#x65F6;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x5176;&#x4ED6;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x9AD8;&#x53D7;&#x4F53;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7684;&#x5DE6;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; fluorescein-ghrelin(1-18) &#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x539F;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x5177;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x5176;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7531; wt ghrelin &#x548C;&#x6D77;&#x6C99;&#x745E;&#x6797;&#x6D41;&#x79BB;&#x5931;&#x6240;&#x8005;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x6210;&#x50CF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#xFF0C;fluorescein-ghrelin(1-18)&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x5411;&#x56FE;&#x50CF; GHS &#x7269;&#x4E1A;&#x539F;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x7EDF;&#x4E00;&#x7269;&#x4E1A;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x8D29;&#x5356;&#x6216;&#x836F;&#x7406;&#x4EE3;&#x7406;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x3002;

&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C;&#x6A21;&#x62DF;&#x6210;&#x50CF;&#x751F;&#x957F;&#x6FC0;&#x7D20;&#x4FC3;&#x6CCC;&#x53D7;&#x4F53; 1a &#x8367;&#x5149; ghrelin &#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

La ghr&eacute;line est une hormone peptidique acide amin&eacute; 28 produite dans l&#39;estomac. Il se lie &agrave; la 1 a r&eacute;cepteur s&eacute;cr&eacute;tagogue de l&#39;hormone de croissance (SGH-R1a), un r&eacute;cepteur coupl&eacute; aux prot&eacute;ines G de classe A. Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, nous d&eacute;crivons la conception, la synth&egrave;se et la caract&eacute;risation d&#39;un analogue acide tronqu&eacute;, 18-amin&eacute; de ghr&eacute;line conjugu&eacute; &agrave; une mol&eacute;cule fluorescente, fluorocein isothiocyanate (FITC), gr&acirc;ce &agrave; l&#39;ajout d&#39;une lysine &agrave; son extr&eacute;mit&eacute; C terminale ([Dpr(octanoyl)(3), Lys(fluorescein)(19)]ghrelin(1-19)). Affinit&eacute; de liaison du r&eacute;cepteur de ce roman fluorescein-ghrelin(1-18) &eacute;tait semblable &agrave; celle de la ghr&eacute;line sauvage et un ligand synth&eacute;tique de SGH-R1a, Heraxelin. Les cellules vivantes d&#39;imagerie dans les cellules CHO/SGH-R1a d&eacute;montr&eacute; cellule r&eacute;cepteurs superficiels &eacute;tiquetage et internalisation et agoniste activity of fluorescein-ghrelin(1-18) a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e par phosphorylation accrue de ERK1/2. Nous montrons &eacute;galement que le SGH-R1a prot&eacute;ine est exprim&eacute;e principalement dans le coeur par rapport &agrave; tous les autres organes, ce qui sugg&egrave;re la densit&eacute; des r&eacute;cepteurs haute dans le ventricule gauche. Finalement, nous d&eacute;montrons que fluorescein-ghrelin(1-18) se lie sp&eacute;cifiquement &agrave; des tissus cardiaques in situ, et sa liaison est d&eacute;plac&eacute;e par wt ghr&eacute;line et Heraxelin. Nous avons donc d&eacute;velopp&eacute; une nouvelle sonde d&#39;imagerie, fluorescein-ghrelin(1-18), qui permet &agrave; l&#39;image du SGH-R1a in situ, aux fins de l&#39;&eacute;tude des m&eacute;canismes des agents de trafic ou pharmacologiques de r&eacute;cepteurs qui ciblent les SGH-R1a.

Conception et caract&eacute;risation d&#39;un analogue d&#39;imagerie de la 1 a r&eacute;cepteur s&eacute;cr&eacute;tagogue de l&#39;hormone de croissance de la ghr&eacute;line fluorescente.

Grelina &egrave; un ormone peptidico 28-amino acido prodotto nello stomaco. Si lega per la 1a di recettore secretagogo dell&#39;ormone della crescita (GHS-R1a), un recettore del G-proteina-accoppiato di classe A. Nel presente studio, descriviamo la progettazione, sintesi e caratterizzazione di un analogico troncato, 18-amino acido di grelina coniugata con una molecola fluorescente, fluorocein isotiocianato (FITC), attraverso l&#39;aggiunta di una lisina al suo capolinea C ([Dpr(octanoyl)(3), Lys(fluorescein)(19)]ghrelin(1-19)). Affinit&agrave; di legame del recettore di questo romanzo fluorescein-ghrelin(1-18) era simile a quella del selvaggio-tipo grelina e un ligando sintetico di GHS-R1a, hexarelin. Live cell imaging nelle cellule CHO/GHS-R1a dimostrato recettore superficiale etichettatura e interiorizzazione e agonista attivit&agrave; delle cellule di fluorescein-ghrelin(1-18) &egrave; stata confermata dall&#39;aumentata della fosforilazione di ERK1/2. Ci mostra anche che GHS-R1a proteina &egrave; espressa principalmente nel cuore rispetto a tutti gli altri organi, suggerendo densit&agrave; di recettori ad alta nel ventricolo sinistro. Infine, ci dimostrano che fluorescein-ghrelin(1-18) si lega specificamente al tessuto cardiaco in situ, e sua associazione &egrave; spostata da wt grelina e hexarelin. Abbiamo quindi sviluppato una romanzo sonda imaging, fluorescein-ghrelin(1-18), che pu&ograve; essere utilizzato per immagine GHS-R1a in situ, per la finalit&agrave; di indagare i meccanismi di agenti farmacologici o traffico recettore GHS-R1a di destinazione.

Progettazione e caratterizzazione di un fluorescente grelina analogico per imaging la 1a di recettore secretagogo dell&#39;ormone della crescita.

&#x30B0;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x80C3;&#x3067;&#x7523;&#x751F;&#x3055;&#x308C;&#x308B; 28 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6210;&#x9577;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FC3;&#x9032;&#x7269;&#x8CEA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 1 a &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059; (GHS R1a&#xFF09;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; A &#x306E; G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x5408;&#x6210;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x5B50; fluorocein &#x82A5;&#x5B50; &#xFF08;FITC) &#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x305D;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF; ([Dpr(octanoyl)(3)&#x3001;Lys(fluorescein)(19)]ghrelin(1-19))&#x3002; &#x3067;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x3092;&#x6DFB;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x5171;&#x5F79;&#x30B0;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3001;18 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x9178;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E; fluorescein-ghrelin(1-18) &#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30B0;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5408;&#x6210; GHS R1a &#x914D;&#x4F4D;&#x5B50; hexarelin &#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x753A;/GHS-R1a &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x5185;&#x9762;&#x3001;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x6D3B;&#x6027; fluorescein-ghrelin(1-18) &#x306E; ERK1/2 &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F; GHS R1a &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x4E3B;&#x306B;&#x3001;&#x5FC3;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x9AD8;&#x3044;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306F;&#x5DE6;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x306E;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; fluorescein-ghrelin(1-18) &#x7279;&#x306B;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092; in situ &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x5408; wt &#x30B0;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068; hexarelin &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x305A;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3092;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3059;&#x308B; GHS R1a in situ GHS R1a &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3084;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; fluorescein-ghrelin(1-18) &#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A2D;&#x8A08;&#x3068;&#x7279;&#x5FB4;&#x86CD;&#x5149;&#x30B0;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FC3;&#x9032;&#x7269;&#x8CEA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 1 a &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x3002;

Ghrelin &#xBC43;&#xC18D;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xC0B0; 28 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC131; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xAC04;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 1a &#xBC14;&#xC778;&#xB529; (GHS R1a) &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; A G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC124;&#xACC4;, &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8; ([Dpr(octanoyl)(3), lys(fluorescein)(19)]ghrelin(1-19))&#xC5D0; &#xB9AC;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xD1B5;&#xD574; fluorocein isothiocyanate (FITC)&#xB97C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; ghrelin&#xC758; &#xC798;&#xB9B0;, 18 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xC124;&#xBA85;. &#xC774; &#xC18C;&#xC124; fluorescein-ghrelin(1-18)&#xC758; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; ghrelin &#xBC0F; &#xD569;&#xC131; GHS R1a &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;, hexarelin&#xC758; &#xC800;&#xAC83;&#xACFC; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC870;/GHS-R1a &#xC140; &#xC2DC;&#xC5F0; fluorescein-ghrelin(1-18)&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB77C;&#xBCA8;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC8FC; &#xC791;&#xB3D9; &#xADFC; &#xD65C;&#xB3D9; ERK1/2&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC; GHS R1a &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC2EC;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xC88C; &#xC2EC; &#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; fluorescein-ghrelin(1-18) &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; wt ghrelin&#xC640; hexarelin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xCE58; &#xB41C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;, fluorescein-ghrelin(1-18) &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; GHS r1a&#xB97C; &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; GHS r1a&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC778;&#xC2E0;&#xB9E4;&#xB9E4; &#xB610;&#xB294; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xBAA9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xBC0F; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC131;&#xC7A5; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xAC04;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 1a&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xD615;&#xAD11; ghrelin&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;.

Grelina es una hormona p&eacute;ptido de 28 amino&aacute;cidos producida en el est&oacute;mago. Se une a la 1a de receptor secretagogo de hormona de crecimiento (GHS-R1a), un receptor g-prote&iacute;na-juntados de clase A. En el presente estudio, se describen el dise&ntilde;o, s&iacute;ntesis y caracterizaci&oacute;n de un an&aacute;logo de &aacute;cido 18 amino&aacute;cido, truncado de grelina conjugado a una mol&eacute;cula fluorescente, fluorocein isotiocianato (FITC), mediante la adici&oacute;n de una lisina en su terminal C ([Dpr(octanoyl)(3), Lys(fluorescein)(19)]ghrelin(1-19)). Afinidad del receptor de esta novela fluorescein-ghrelin(1-18) fue similar a la de la grelina de tipo salvaje y un ligando sint&eacute;tico del GHS-R1a, hexarelin. C&eacute;lulas vivas en c&eacute;lulas CHO/GHS-R1a demostraron actividad de etiquetado y la internalizaci&oacute;n y el agonista de receptor de superficie celular de fluorescein-ghrelin(1-18) fue confirmada por mayor fosforilaci&oacute;n de ERK1/2. Tambi&eacute;n demostramos que la prote&iacute;na de GHS-R1a se expresa principalmente en el coraz&oacute;n en comparaci&oacute;n con todos los otros &oacute;rganos, sugiriendo la densidad de receptores alta en el ventr&iacute;culo izquierdo. Finalmente, demostramos que fluorescein-ghrelin(1-18) se une espec&iacute;ficamente al tejido card&iacute;aco in situ, y su uni&oacute;n es desplazado por wt ghrelina y hexarelin. Por lo tanto, hemos desarrollado una sonda im&aacute;genes novela, fluorescein-ghrelin(1-18), que puede utilizarse para imagen GHS-R1a in situ, a los efectos de investigar mecanismos de agentes de tr&aacute;fico o farmacol&oacute;gicas receptor dirigidos a GHS-R1a.

Dise&ntilde;o y caracterizaci&oacute;n de un an&aacute;logo de la hormona de crecimiento secretagogo receptor 1a de la proyecci&oacute;n de imagen de grelina fluorescente.

Proglucagon &egrave; espresso in cellule alfa del pancreas, cellule intestinali L e i neuroni del tronco encefalico. Tessuto-specifica elaborazione di proglucagon produce il glucagone ormoni peptidici in cella alfa e glucagone-simile-peptide-1 e -2 (GLP-1 e GLP-2) nelle cellule L. Sia il glucagone e GLP-1 sono secreti in risposta allo stato nutrizionale e sono fondamentali per la regolazione della glicemia. L&#39;ordinamento di proglucagon per i denso nucleo granuli secretori della via secretiva regolamentato &egrave; essenziale per l&#39;appropriata secrezione di glucagone e GLP-1. Abbiamo esaminato i ruoli di Carbossipeptidasi E (CPE), un recettore ordinamento Proormone, gli enzimi di elaborazione 3/PC1 e PC2, e ordinamento intrinseco putativi segnali nell&#39;ordinamento proglucagon. Co-ha nelle cellule Neuro2a che mancavano di CPE, 3/PC1 e PC2, proglucagon localizzato con il Golgi marcatore p115 come determinato da microscopia di immunofluorescenza quantitativa. Espressione di CPE, ma non di PC1/3 o PC2, enhanced proglucagon ordinamento a granuli. siRNA-mediata atterramento di CPE perturbato regolamentata la secrezione di glucagone pancreatico derivato alphaTC1-6 cellule, ma non di GLP-1 da cellule GLUTag derivato da cellule intestinali. Mutazione del sito di clivaggio PC K70R71, il sito bibasico R17R18 all&#39;interno di glucagone o alfa elica di glucagone, influenzata significativamente la localizzazione sottocellulare di proglucagon. Modellistica della proteina ha rivelato che alfa eliche corrispondente al glucagone, GLP-1 e GLP-2 sono disposti all&#39;interno di una struttura disordinata, suggerendo alcune flessibilit&agrave; nel meccanismo di ordinamento. Possiamo concludere che esistono molteplici meccanismi di ordinamento proglucagon del percorso secretorio regolamentati, tra cui un ruolo per CPE nelle cellule alfa del pancreas, clivaggio iniziale a K70R71, e l&#39;ordinamento pi&ugrave; segnali.

L&#39;ordinamento di Proglucagon a granuli secretori &egrave; mediata da CPE e segnali di ordinamento intrinseco.

Proglucagon &#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x80F0;&#x5C9B; &alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x80A0; L &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8111;&#x5E72;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; proglucagon &#x7684;&#x5904;&#x7406;&#x4EA7;&#x91CF;&#x591A;&#x80BD;&#x6FC0;&#x7D20;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x7684; alpha &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;-&#x50CF;-&#x591A;&#x80BD;-1 &#x548C;-2 (GLP-1 &#x548C; GLP-2) L &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x548C; GLP-1 &#x5206;&#x6CCC;&#x8425;&#x517B;&#x72B6;&#x6001;&#x3001; &#x54CD;&#x5E94;&#x548C;&#x5BF9;&#x8C03;&#x8282;&#x8840;&#x7CD6;&#x662F;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x3002;Proglucagon &#x5230;&#x81F4;&#x5BC6;&#x6838;&#x5FC3;&#x5206;&#x6CCC;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x8FDB;&#x884C;&#x6392;&#x5E8F;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C; GLP-1&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x89D2;&#x8272;&#x7684;&#x7FA7;&#x80BD;&#x9176; E (CPE)&#xFF0C;&#x524D;&#x4F53;&#x6392;&#x5E8F;&#x53D7;&#x4F53;&#x52A0;&#x5DE5;&#x9176; PC1/3 &#x548C; PC2&#xFF0C;&#x5E76;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x5185;&#x5728;&#x5206;&#x62E3;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684; proglucagon &#x6392;&#x5E8F;&#x3002;&#x5728;&#x7F3A;&#x4E4F; CPE&#x3001; PC1/3 &#x548C; PC2 &#x7684; Neuro2a &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;proglucagon &#x6B63;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x6807;&#x8BB0; p115 &#x7531;&#x5B9A;&#x91CF;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x6280;&#x672F;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684; CPE&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; PC1/3 &#x6216; PC2&#xFF0C;&#x589E;&#x5F3A;&#x5BF9;&#x9897;&#x7C92; proglucagon &#x6392;&#x5E8F;&#x3002;siRNA &#x4ECB;&#x5BFC;&#x51FB;&#x5012;&#x7684; CPE &#x4E2D;&#x65AD;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x80F0;&#x817A;-alphaTC1-6 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; GLP-1 &#x4ECE;&#x80A0;&#x9053;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027; GLUTag &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;PC &#x7684;&#x4E73;&#x6C9F;&#x7F51;&#x7AD9; K70R71&#x3001; &#x5185;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x3001; &#x4E8C;&#x76D0;&#x57FA;&#x7684; R17R18 &#x7AD9;&#x70B9;&#x6216;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x3001; &alpha; &#x87BA;&#x65CB;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x90FD;&#x5927;&#x5927;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD; proglucagon &#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6A21;&#x62DF;&#x663E;&#x793A;&#x5BF9;&#x5E94;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x7684;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x87BA;&#x65CB;&#x3001; GLP-1 &#x548C; GLP-2 &#x6309;&#x6392;&#x5217;&#x5728;&#x65E0;&#x5E8F;&#x7ED3;&#x6784;&#x5185;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x67D0;&#x79CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x6392;&#x5E8F;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7075;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x6392;&#x5E8F;&#x673A;&#x5236; proglucagon &#x7684;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E3A; CPE &#x5728;&#x80F0;&#x817A; &alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;K70R71&#xFF0C;&#x5728;&#x521D;&#x59CB;&#x4E73;&#x6C9F;&#x5230;&#x548C;&#x591A;&#x4E2A;&#x6392;&#x5E8F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

&#x6392;&#x5E8F;&#x7684; Proglucagon &#x5230;&#x5206;&#x6CCC;&#x9897;&#x7C92;&#x88AB;&#x4ECB;&#x5BFC; CPE &#x548C;&#x5185;&#x5728;&#x7684;&#x6392;&#x5E8F;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

Proglucagon is expressed in pancreatic alpha cells, intestinal L cells, and brainstem neurons. Tissue-specific processing of proglucagon yields the peptide hormones glucagon in the alpha cell and glucagon-like-peptide-1 and -2 (GLP-1 and GLP-2) in L cells. Both glucagon and GLP-1 are secreted in response to nutritional status, and are critical for regulating glycemia. The sorting of proglucagon to the dense-core secretory granules of the regulated secretory pathway is essential for the appropriate secretion of glucagon and GLP-1. We examined the roles of carboxypeptidase E (CPE), a prohormone sorting receptor, the processing enzymes PC1/3 and PC2, and putative intrinsic sorting signals in proglucagon sorting. In Neuro2a cells that lacked CPE, PC1/3 and PC2, proglucagon co-localized with the Golgi marker p115 as determined by quantitative immunofluorescence microscopy. Expression of CPE, but not of PC1/3 or PC2, enhanced proglucagon sorting to granules. siRNA-mediated knockdown of CPE disrupted regulated secretion of glucagon from pancreatic-derived alphaTC1-6 cells, but not of GLP-1 from intestinal cell-derived GLUTag cells. Mutation of the PC cleavage site K70R71, the dibasic R17R18 site within glucagon, or the alpha helix of glucagon, all significantly affected the subcellular localization of proglucagon. Protein modelling revealed that alpha helices corresponding to glucagon, GLP-1 and GLP-2 are arranged within a disordered structure, suggesting some flexibility in the sorting mechanism. We conclude that there are multiple mechanisms for sorting proglucagon to the regulated secretory pathway, including a role for CPE in pancreatic alpha cells, initial cleavage at K70R71, and multiple sorting signals.

The Sorting of Proglucagon to Secretory Granules is Mediated by CPE and Intrinsic Sorting Signals.

Proglucagon est exprim&eacute;e dans les cellules alpha du pancr&eacute;as, les cellules L intestinales et les neurones du tronc c&eacute;r&eacute;bral. Traitement de tissu-sp&eacute;cifique de proglucagon donne le glucagon d&#39;hormones peptidiques dans la cellule alpha et glucagon-like-peptide-1 et -2 (GLP-1 et GLP-2) dans les cellules de L. Glucagon et GLP-1 sont s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;&eacute;tat nutritionnel et sont essentiels pour la r&eacute;gulation de la glyc&eacute;mie. Le tri de proglucagon pour les granules de s&eacute;cr&eacute;tion de noyau dense de la voie de s&eacute;cr&eacute;tion r&eacute;gul&eacute;e est essentiel pour la s&eacute;cr&eacute;tion appropri&eacute;e du glucagon et de GLP-1. Nous avons examin&eacute; les r&ocirc;les de la carboxypeptidase E (CPE), un r&eacute;cepteur tri prohormone, les enzymes de transformation PC1/3 et PC2, et tri intrins&egrave;que putatif des signaux en tri proglucagon. Dans les cellules Neuro2a qui ne disposaient pas de CPE et PC1/3 PC2, proglucagon localis&eacute;e avec le Golgi marqueur p115 tel que d&eacute;termin&eacute; par microscopie quantitative par immunofluorescence. Expression du CPE, mais pas de PC1/3 ou PC2, enhanced proglucagon tri aux granules. induite par le siARN knockdown de CPE perturb&eacute; r&eacute;glement&eacute;e la s&eacute;cr&eacute;tion du glucagon pancr&eacute;atique d&eacute;riv&eacute;s alphaTC1-6 cellules, mais pas de GLP-1 &agrave; partir des cellules intestinales culture cellulaire GLUTag. Mutation du site de clivage PC K70R71, site R17R18 dibasique au glucagon ou l&#39;h&eacute;lice alpha du glucagon, tous significativement affect&eacute; la localisation subcellulaire de proglucagon. Mod&eacute;lisation de la prot&eacute;ine a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les h&eacute;lices alpha correspondant au glucagon, GLP-1 et GLP-2 sont dispos&eacute;s au sein d&#39;une structure d&eacute;sordonn&eacute;e, ce qui sugg&egrave;re une certaine souplesse dans le m&eacute;canisme de tri. Nous concluons qu&#39;il y a plusieurs m&eacute;canismes de tri proglucagon &agrave; la voie de s&eacute;cr&eacute;tion r&eacute;glement&eacute;e, y compris un r&ocirc;le pour le CPE dans les cellules alpha du pancr&eacute;as, clivage initial &agrave; K70R71, et tri de plusieurs signaux.

Le tri de Proglucagon &agrave; Granules de s&eacute;cr&eacute;tion est m&eacute;di&eacute;e par les CPE et les signaux intrins&egrave;ques de tri.

Proglucagon &#x81B5;&#x81D3; &alpha; &#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x8178;&#x7BA1;&#x306E; L &#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x8133;&#x5E79;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x51E6;&#x7406; proglucagon &#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x69D8;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; 1-2 &#xFF08;GLP-1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; GLP 2) L &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3; &#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073; GLP 1 &#x6804;&#x990A;&#x72B6;&#x614B;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x8840;&#x7CD6;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x82AF;&#x9846;&#x7C92;&#x3092; proglucagon &#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x5206;&#x6CCC;&#x3068;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20; GLP-1 &#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; E (CPE)&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;PC1 &#x3068; PC2 &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30C3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048; proglucagon &#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x3067;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CPE&#x3001;PC1/3&#x3001;PC2 &#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x305F; Neuro2a &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; p115 &#x3068; proglucagon co-localized&#x3002;&#x5F0F; CPE &#x306E; PC1/3 &#x307E;&#x305F;&#x306F; PC2&#x3001;proglucagon &#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5411;&#x4E0A;&#x3002;CPE &#x306E; siRNA &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x898F;&#x5236;&#x5206;&#x6CCC;&#x81B5;&#x7531;&#x6765; alphaTC1 6 &#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;GLP-1 &#x8178;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765; GLUTag &#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3002;PC &#x80F8;&#x306E;&#x8C37;&#x9593;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; K70R71&#x3001;R17R18 &#x306E;&#x4E8C;&#x5869;&#x57FA;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x5185;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x306E; &alpha; &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B; proglucagon &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &alpha; &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; GLP-1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; GLP 2 &#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x69CB;&#x9020;&#x5185;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x67D4;&#x8EDF;&#x6027;&#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x4E26;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x304C;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0; proglucagon &#x81B5;&#x81D3; &alpha; &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x88C2;&#x3092; K70R71&#x3001;CPE &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5206;&#x6CCC;&#x9846;&#x7C92;&#x306E; Proglucagon &#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048; CPE &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x5149;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Proglucagon &#xCDCC; &#xC7A5;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC7A5;&#xC758; L &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; brainstem &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C;&#xB2E4;. Proglucagon&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4; &#xAC19;&#xC740; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; 1-2 (GLP-1 &#xBC0F; GLP 2) L &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4; &#xBC0F; GLP-1 &#xC601;&#xC591; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44; &#xB418; &#xACE0; glycemia &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;. &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xBD84; &#xBE44; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xBC00;&#xB3C4; &#xD575;&#xC2EC; &#xBD84; &#xBE44;&#xACFC; &#xB9BD; proglucagon&#xC758; &#xC815;&#xB82C; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218; &#xBC0F; GLP-1&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; carboxypeptidase E (CPE), prohormone &#xC815;&#xB82C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 3 &#xBD84; p c 1&#xACFC; PC2, &#xCC98;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC640; proglucagon &#xC815;&#xB82C; &#xC2E0;&#xD638; putative &#xB0B4;&#xC7A5; &#xC815;&#xB82C;. CPE, p c 1/3 &#xBC0F; PC2 &#xBD80;&#xC871; Neuro2a &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; proglucagon co-localized &#xACE8; &#xC9C0; &#xB9C8;&#xCEE4; p115 &#xC591;&#xC801; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;&#xC640;. CPE, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; p c 1/3 &#xB610;&#xB294; PC2&#xC758; &#xC548; &#xC2DD;&#xACFC; &#xB9BD;&#xC5D0; proglucagon &#xC815;&#xB82C; &#xD5A5;&#xC0C1;. CPE&#xC758; siRNA &#xC911;&#xC7AC; &#xCD5C;&#xC800; GLP-1 &#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; GLUTag &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; alphaTC1 6 &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PC &#xBD84;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; K70R71, &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4;, &#xB0B4; &#xC5FC;&#xAE30; R17R18 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB610;&#xB294; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4;, &#xC54C;&#xD30C; &#xB098;&#xC120; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; proglucagon&#xC758; subcellular &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB450; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xACC4;&#xC2DC;&#xB294; &#xD574;&#xB2F9; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4; &#xD558;&#xB294; &#xC54C;&#xD30C; &#xB098;&#xC120; GLP-1 &#xBC0F; GLP 2&#xB294; &#xBC30;&#xC5F4; &#xBB34;&#xC9C8;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC870; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xB82C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xC735;&#xD1B5;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC815;&#xB82C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xCDCC; &#xC7A5;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC;, K70R71&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD08;&#xAE30; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; CPE&#xC5D0; &#xB300; &#xC77C; &#xBD84; &#xBE44; &#xACBD;&#xB85C;&#xB97C; proglucagon &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC815;&#xB82C; &#xACB0;&#xB860;.

&#xC815;&#xB82C;&#xC758; Proglucagon &#xBD84; &#xBE44;&#xACFC; &#xB9BD;&#xC5D0; CPE&#xB294; &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC815;&#xB82C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PROGLUCAGON se expresa en las c&eacute;lulas alfa pancre&aacute;ticas, las c&eacute;lulas intestinales de L y las neuronas de la m&eacute;dula oblonga. Procesamiento de tejidos espec&iacute;ficos de proglucagon rinde el glucag&oacute;n de hormonas pept&iacute;dicas en la c&eacute;lula alfa y glucag&oacute;n-like-peptide-1 y -2 (GLP-1 y GLP-2) en c&eacute;lulas de L. Glucag&oacute;n y GLP-1 son secretadas en respuesta al estado nutricional y son cr&iacute;ticos para la regulaci&oacute;n de la glucemia. La clasificaci&oacute;n de proglucagon a los gr&aacute;nulos secretores de la base densa de la v&iacute;a secretora regulado es esencial para la adecuada secreci&oacute;n de glucag&oacute;n y GLP-1. Examinamos los papeles de la carboxipeptidasa E (CPE), un receptor prohormona de la clasificaci&oacute;n, las enzimas del proceso 3/CP1 y CP2, y supuesta clasificaci&oacute;n intr&iacute;nseca se&ntilde;ales en clasificaci&oacute;n proglucagon. En las c&eacute;lulas Neuro2a que carec&iacute;an de CPE, 3/CP1 y CP2, proglucagon co-localized con el marcador de Golgi p115 seg&uacute;n lo determinado por microscopia de la inmunofluorescencia cuantitativa. Expresi&oacute;n de la CPE, pero no de PC1/3 o PC2, hab&iacute;a mejorado proglucagon clasificando a los gr&aacute;nulos. mediada por siRNA ca&iacute;da de CPE hab&iacute;a interrumpido regulada la secreci&oacute;n de glucag&oacute;n de c&eacute;lulas pancre&aacute;ticas derivadas de la alphaTC1-6, pero no de GLP-1 de c&eacute;lulas derivadas de c&eacute;lulas intestinales de GLUTag. El sitio de la hendidura de la PC K70R71, el sitio de R17R18 dib&aacute;sico dentro de glucag&oacute;n o la h&eacute;lice alfa de glucag&oacute;n, hab&iacute;a afectado todo significativamente la localizaci&oacute;n subcelular de proglucagon. Modelado de la prote&iacute;na revel&oacute; que alfa h&eacute;lices correspondiente al glucag&oacute;n, GLP-1 y GLP-2 se arreglan dentro de una estructura desordenada, lo que sugiere cierta flexibilidad en el mecanismo de clasificaci&oacute;n. Se concluye que existen m&uacute;ltiples mecanismos para ordenar proglucagon la v&iacute;a secretora regulada, incluyendo un papel para CPE en las c&eacute;lulas alfa pancre&aacute;ticas, escote inicial en K70R71, y ordenar m&uacute;ltiples se&ntilde;ales.

Article	Year
Glucose dependence of the regulated secretory pathway in alphaTC1-6 cells. Endocrinology\| PubMed ID: 15994347	2005
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Magnetic resonance imaging of cells overexpressing MagA, an endogenous contrast agent for live cell imaging. Molecular imaging\| PubMed ID: 19723470	2009
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Design and characterization of a fluorescent ghrelin analog for imaging the growth hormone secretagogue receptor 1a. Regulatory peptides\| PubMed ID: 21893106	2011
The Sorting of Proglucagon to Secretory Granules is Mediated by CPE and Intrinsic Sorting Signals. The Journal of endocrinology\| PubMed ID: 23418362	2013

Rebecca McGirr

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